DE60037186T2 - Einfaches kulturmedium und verfahren zu seiner herstellung - Google Patents

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Description

  • Technisches Gebiet
  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein einfaches Kulturmedium, dass z.B. zur Bestimmung, Identifizierung und zum Transport verschiedener Mikroorganismen brauchbar ist, insbesondere ein einfaches Kulturmedium, in dem ein darauf inokuliertes Testfluid sehr rasch diffundiert und eine Inokulation einer Probe sogar in einem geneigten Zustand, einem umgekehrten Zustand oder einem Schwerkraft-freien Zustand möglich ist.
  • Stand der Technik
  • Unter konventionellen Methoden zum Kultivieren verschiedener Mikroorganismen zu ihrer Bestimmung und Identifizierung werden im allgemeinen eine Streichplattenmethode, eine Gießplattenmethode, eine Methode mit flüssigem Medium usw. verwendet. Diese Methoden erfordern jedoch eine Sterilisation des Kulturmediums, der Vorrichtung usw. vor der Kultivierung von Mikroorganismen, und die Inokulation einer Testprobe in das Medium erfordert ein erfahrenes Arbeiten, wie z.B. Streichen oder Gießen. Wenn ein konventionelles Kulturmedium nach der Herstellung des Mediums oder nach einer hermetischen Verpackung des Mediums sterilisiert wird, ist die Aufrechterhaltung der Qualität und Leistungsfühigkeit des Mediums während seines Transports und seiner Lagerung schwierig, d.h., die Sterilisation des Mediums ergibt Schwierigkeiten.
  • Es wurden deshalb ausgedehnte Untersuchungen an einem einfachen Kulturmedium durchgeführt, die es ermöglichen, die Kultivierung leicht durchzuführen, und es wurden eine Vielzahl von Kulturvorrichtungen und Kulturmedien vorgeschlagen, einschließlich von (1) einer Kulturvorrichtung, in der eine Klebeschicht, eine Schicht aus in kaltem Wasser löslichem pulverförmigem Geliermittel, das Nährstoffe enthält, und ein Deckblatt hinter einander auf die obere Oberfläche eines wasserdichten Substrats laminiert werden (japanische offengelegte Patentanmeldung (kokai) Nr. 57-502200 ); (2) einer Kulturvorrichtung, in der eine Schicht aus einer Mischung aus einem in kaltem wasserlöslichem Geliermittel und eines Kulturmediums für Mikroorganismen und eine wasserabsorbierende Faserbahn hinter einander auf die Oberfläche einer wasserdichten flachen Platte laminiert werden (japanische offengelegte Patentanmeldung (kokai) Nr. 6-181741 ); und (3) eines einfachen Kulturmediums, in dem eine Mediumzusammensetzung, die einen Kleber, ein Geliermittel und einen Bakteriennährstoff enthält, durch eine wasserabsorbierende Faserbahn getragen wird, die einen mesh-Wert aufweist, der größer ist als die Teilchengröße des Geliermittels (japanische offengelegte Patentanmeldung (kokai) Nr. 9-19282 ).
  • Die Kulturvorrichtung nach (1) erfordert jedoch Verfahrensschritte, einschließlich einer sorgfältigen Applikation einer oberen Platte und Aufstreichen einer Testprobe über eine bestimmte Fläche mittels einer Streichmaschine, und diese Vorgänge müssen sorgfältig auf einer flachen Ebene, wie z.B. einem Tisch, durchgeführt werden; d.h., die Kulturvorrichtung beinhaltet das Problem eines umständlichen Inokulationsvorgangs. Die Kulturvorrichtung nach (2) beinhaltet Probleme im Hinblick auf die Herstellung, d.h., die Einfügung einer wasserabsorbierenden Faserbahn nach Beschichten der Mediumbestandteile ist mühsam, und die Beschichtungsfläche der Mediumbestandteile muss größer sein als die Fläche, die zur Bestimmung von Mikroorganismen erforderlich ist. Da die wasserabsorbierende Faserbahn nicht fixiert ist, ist außerdem während der Inokulation eine sorgfältige Verfahrensweise erforderlich, um keine Bewegung der Bahn zu verursachen. Das einfache Kulturmedium (3) weist insofern Probleme auf, weil das Medium stehen gelassen werden muss, bis ein Testfluid durch die Bahn permeiert und diffundiert, da das Testfluid in der Bahn langsam diffundiert, und dass, selbst wenn die wasserabsorbierende Bahn auf einer wasserdichten flachen Platte laminiert und fixiert ist, sich die Bahn sehr leicht von der Platte ablöst.
  • Eine Aufgabenstellung der vorliegenden Erfindung ist deshalb die Bereitstellung eines einfachen Kulturmediums, in dem ein darauf inokuliertes Testfluid sehr rasch diffundiert, das Medium eine wasserdichte flache Platte und eine wasserabsorbierende Bahn enthält, die sicher an der Platte haftet, was eine Inokulation in einem geneigten Zustand, einem umgekehrten Zustand oder einem Schwerkraft-freien Zustand genauso wie in einem ebenen Zustand ermöglicht, die Bestimmung und die Identifizierung von Mikroorganismen durch einen einfachen Vorgang ermöglicht, und den Transport, Sterilisation usw. des Mediums erleichtert.
  • Beschreibung der Erfindung
  • Die Erfinder der vorliegenden Anmeldung haben ausgedehnte Untersuchungen durchgeführt, um das vorstehend genannte einfache Kulturmedium (3) (japanische offengelegte Patentanmeldung (kokai) Nr. 9-19282 ) hinsichtlich der Steigerung der Diffusionsgeschwindigkeit eines Testfluids und einer betriebssicheren Fixierung der Bahn zu verbessern. Als Ergebnis haben die Erfinder der vorliegenden Anmeldung gefunden, dass im Vergleich zu dem Fall, bei dem ein Kleber in großer Menge eingebaut wird und eine mit einer Alkoholsuspension imprägnierte Bahn auf übliche Weise getrocknet wird, dann, wenn die Menge des Klebers in der Alkoholsuspension, die die Mediumzusammensetzung enthält, verringert wird, die wasserabsorbierende Bahn mit der Suspension ausreichend imprägniert wird, und die resultierende Bahn allmählich getrocknet wird, verursacht wird, die Bahn überraschenderweise auf einer wasserdichten flachen Platte sehr stark haftet, und dass dadurch ein einfaches Kulturmedium erhalten werden kann, in dem ein Testfluid mit einer sehr großen Geschwindigkeit diffundiert, d.h., das Testfluid diffundiert sofort, wenn es in das Medium inokuliert wird. Auf dieser Basis wurde die vorliegende Erfindung erzielt.
  • Die vorliegende Erfindung stellt somit ein Verfahren zur Herstellung eines einfachen Kulturmediums und ein einfaches Kulturmedium, das nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erhältlich ist, und wie durch die Ansprüche weiter definiert, bereit.
  • Beste Art zur Durchführung der Erfindung
  • Ein Kleber, der als Bestandteil (a) einer Mediumzusammensetzung dient, muss in Wasser und Alkohol löslich sein. Beispiele alr den Kleber umfassen Hydroxypropylcellulose, Polyvinylpyrrolidon und Polyethylenoxid. Von diesen ist Hydroxypropylcellulose besonders bevorzugt.
  • Ein Geliermittel, das als Bestandteil (b) dient, muss in Wasser löslich und in Alkohol unlöslich sein. Beispiele für das Geliermittel umfassen natürlich vorkommende Geliermittel, wie z.B. Xanthanlösung, Johannisbrotgummi, Guar Gum, Carrageen, und synthetische Geliermittel, wie z.B. Hydroxyethylcellulose. Von diesen ist Xanthanlösung besonders bevorzugt. Ein solches Geliermittel wird vorzugsweise in Form eines Pulvers mit einer mittleren Teilchengröße von 500 μm oder weniger, insbesondere von 0,5 bis 50 μm, verwendet. Als Bestandteil (c) wird ein für das Wachstum eines zu bestimmenden Mikroorganismus geeigneter Bakteriennährstoff ausgewählt. Wenn z.B. eine Vielzahl von Mikroorganismen wachsen gelassen wird, werden typische Nährmediumbestandteile verwendet, und wenn ein spezifischer Mikroorganismus selektiv wachsen gelassen wird, werden ausgewählte Mediumbestandteile verwendet.
  • Vorzugsweise enthält eine Zusammensetzung, die die Bestandteile (a), (b) und (c) enthält (nachstehend wird die Zusammensetzung als "Mediumzusammensetzung" bezeichnet) außerdem ein geeignetes Farbentwicklungsmittel zur Erleichterung der Beobachtung von Kolonien. Beispiele für das Farbentwicklungsmittel umfassen Farbstoffe, die Kolonien anfärben, wie z.B. Triphenyltetrazoliumchlorid, 3-(p-Iodphenyl)-2-(p-nitrophenyl)-5-phenyl-2H-tetrazoliumchlorid und 3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromid, Enzymsubstrate, wie z.B. 5-Brom-3-indolyl-β-D-galactosid, und pH-Indikatoren, wie z.B. Bromthymol-Blau und Neutral-Rot.
  • Beispiele für Alkohole zum Suspendieren der Mediumzusammensetzung umfassen C1-C5-Alkohole, wie z.B. Ethanol und 2-Propanol.
  • Die wasserabsorbierende Faserbahn, in der die vorstehend genannte Mediumzusammensetzung getragen werden soll, muss es ermöglichen, dass ein inokuliertes Testfluid leicht mittels einer Kapillarwirkung zum darauf erfolgenden Transport diffundiert wird, und weist eine Netzwerkstruktur auf, die zum Zurückhalten des in der Mediumzusammensetzung enthaltenen Geliermittels fähig ist. Dazu muss die wasserabsorbierende Faserbahn einen mesh-Wert aufweisen, der größer ist als die Teilchengröße des Geliermittels, und eine Dicke, die größer ist als die Teilchengröße. Die wasserabsorbierende Faserbahn weist z.B. eine mesh-Größe von 15 bis 100 mesh auf, insbesondere von 20 bis 50 mesh, und weist vorzugsweise eine Dicke von 10 bis 1.000 μm, insbesondere von 50 bis 600 μm, auf.
  • Beispiele für die wasserabsorbierende Faserbahn umfassen Faservliese aus synthetischen Fasern, wie z.B. Faservlies aus Rayon, und Faservliese aus natürlich auftretenden Fasern, wie z.B. Faservlies aus Baumwolle. Die Form der Bahn ist nicht besonders beschränkt, und die Bahn kann die Form eines Quadrats, eines Rechtecks oder eine runde Gestalt annehmen. Die Größe der Bahn ist nicht besonders beschränkt, aber die Längsgröße der Bahn beträgt vorzugsweise 1 bis 15 cm, wenn die Bahn zu einer einfachen Bestimmung von Mikroorganismen verwendet werden soll.
  • Eine wasserdichte flache Platte, an der die vorstehend genannte wasserabsorbierende Faserbahn anhaftet, kann aus irgendeinem wasserdichten Material ausgebildet sein, wie z.B. aus Kunststoff oder Glas, ist aber vorzugsweise aus einem transparenten Material ausgebildet, um die Beobachtung von der Außenseite her zu ermöglichen.
  • Das einfache Kulturmedium der vorliegenden Erfindung wird wie folgt hergestellt. Zuerst werden die Mediumbestandteile (a) bis (c) Alkohol zugegeben, um dadurch eine Alkoholsuspension herzustellen. In diesem Fall muss die Konzentration des Bestandteils (a) 0,01 bis 0,4 Gew.-% und besonders bevorzugt 0,01 bis 0,15 Gew.-% betragen. Wenn die Konzentration des Bestandteils (a) der Alkoholsuspension den obigen Bereich übersteigt, werden, weil die Bewegung der Mediumbestandteile der Suspension durch den Bestandteil (a) hoher Konzentration begrenzt wird, die Mediumbestandteile bloß in der Bahn getrocknet und verfestigt, was zu einer unzureichenden Adhäsion der Bahn auf der wasserdichten flachen Platte führt, sowie zu einer Verschlechterung der Wasserabsorptionsfähigkeit der Bahn. Die Konzentration des Bestandteils (b) in der Alkoholsuspension beträgt vorzugsweise 0,1 bis 20 Gew.-%, insbesondere 2 bis 6 Gew.-%, und die Konzentration des Bestandteils (c) in der Alkoholsuspension beträgt vorzugsweise 0,5 bis 20 Gew.-%, insbesondere 1 bis 5 Gew.-%.
  • Danach wird die auf der wasserdichten flachen Platte aufgelegte wasserabsorbierende Faserbahn mit der Alkoholsuspension mittels eines Verfahrens, wie z.B. Gießen, Sprühen oder Streichen, imprägniert. Vorzugsweise wird die Bahn mit der die Bestandteile in den vorstehend genannten Konzentrationen enthaltenden Alkoholsuspension in einer Menge von 0,5 bis 2 ml, bezogen auf 1 cm3 der Bahn, imprägniert. Danach wird der Alkohol durch Trocknen verdampft und entfernt, um dadurch zu veranlassen, dass die die Mediumbestandteile tragende wasserabsorbierende Faserbahn auf der wasserdichten flachen Platte anhaftet. Das Trocknen der Alkoholsuspension muss so durchgeführt werden, dass eine rasche Verdampfung des Alkohols unterdrückt wird. Im Hinblick auf die Mittel zum Trocknen der Alkoholsuspension, während eine rasche Verdampfung des Alkohols unterdrückt wird, besteht keine besondere Beschränkung. Zum Beispiel wird das Trocknen in einer Atmosphäre mit hohem Alkoholdampfdruck durchgeführt oder das Trocknen wird bei niederer Temperatur durchgeführt.
  • Wie vorstehend beschrieben, werden, wenn das Trocknen der Alkoholsuspension allmählich durchgeführt wird, die Mediumbestandteile der Suspension sorgfältig im Verlauf der Trocknung ausgefällt, und nach dem Trocknen haftet die wasserabsorbierende Bahn stark an der wasserdichten flachen Platte. Unter dessen werden in der Nachbarschaft der Oberfläche der wasserabsorbierenden Faserbahn Faserfilamente der Bahn getrocknet, während die hohe Wasserabsorptionsfähigkeit der Filamente aufrechterhalten wird, und dadurch wird, aufgrund der Kapillarwirkung von durch die Filamente und der wasserdichten flachen Platte ausgebildeten kubischen Hohlanteilen, die Diffusionsgeschwindigkeit des Testfluids hoch. Als Ergebnis des vorstehenden Phänomens kann das erfindungsgemäße Kulturmedium, in dem die Diffusionsgeschwindigkeit des Testfluids sehr hoch ist, und die Bahn auf der wasserdichten flachen Platte sehr fest haftet, hergestellt werden. Wenn die Alkoholsuspension sehr rasch getrocknet wird, wird die Adhäsion der wasserabsorbierenden Bahn auf der wasserdichten Platte unzulänglich, da die Mediumbestandteile der Suspension sich verfestigen, während sie unzulänglich ausgefällt werden, und die Diffusionsgeschwindigkeit eines Testfluids wird verringert.
  • Das einfache Kulturmedium wird vorzugsweise mit einer Folie bedeckt oder in einem Behälter aufbewahrt, um eine Kontamination und ein Trocknen des Mediums zu verhindern. Besonders bevorzugt wird eine Art, bei der der wasserdichte Behälter, der als wasserdichte flache Platte verwendet wird, mit den hinter einander auflaminierten wasserabsorbierenden Faserbahnen, auf denen die Mediumbestandteile getragen werden, vereinigt wird.
  • Das wie vorstehend hergestellte erfindungsgemäße einfache Kulturmedium wird vorzugsweise, z.B. mittels Ethylenoxidgas, γ-Strahlen oder Elektronenstrahlen sterilisiert. Bevorzugte Sterilisationsmethoden umfassen eine Methode, bei der das einfache Kulturmedium mit einem Verpackungsmaterial verpackt wird, das Gassperrschicht- und lichtabschirmende Eigenschaften aufweist, wie z.B. ein Aluminiumverpackungsmaterial, und danach wird das verpackte Medium mit z.B. γ-Strablen oder Elektronenstrahlen bestrahlt. Besonders bevorzugt wird zusammen mit dem einfachen Kulturmedium während des Verpackens ein Trocknungsmittel verpackt. Wenn das einfache Kulturmedium nach einer solchen Methode sterilisiert wird, ist ein Beobachten und Kontrollieren aller Medium-Herstellungsstufe, um einen antiseptischen Zustand aufrechtzuerhalten, nicht mehr erforderlich, und nach der Sterilisation kann eine Invasion von Mikroorganismen in das Medium und eine Veränderung des Mediums während der Zeit aufgrund von Licht und Feuchtigkeit verhindert werden.
  • Wenn die Bestimmung von Mikroorganismen unter Verwendung des erfindungsgemäßen einfachen Kulturmediums durchgeführt wird, wird ein Testfluid auf die Oberfläche des Mediums inokuliert. Nach der Inokulation diffundiert das Testfluid aufgrund der Kapillarwirkung von zwischen Maschen ausgebildeten kubischen Hohlanteilen leicht, gefolgt von einem Auftreten einer Quellung und Gelierung; im Testfluid enthaltene Mikroorganismen werden in dem resultierenden Gel eingefangen; eine freie Bewegung der Mikroorganismen wird unterdrückt; und durch die Kultivierung werden Kolonien gebildet. Durch Beobachtung der Oberfläche des Mediums können deshalb die so ausgebildeten Kolonien leicht festgestellt werden. Wenn eine Probe quantitativ im einfachen Kulturmedium inokuliert wird, kann die Zahl von in der Probe enthaltenen Bakterien leicht kalkuliert werden, indem man die nach dem Kultivieren der Probe gebildeten Kolonien zählt.
  • Die Inokulation eines Bakterienfluids in das einfache Kulturmedium wird üblicherweise nach einer Methode durchgeführt, nach der eine bestimmte Menge des Fluids in das Medium unter Verwendung von z.B. einer Pipette inokuliert wird; sie kann aber auch nach einer Methode durchgeführt werden, in der das Medium auf einen lebenden Organismus, eine große Menge an Wasser enthaltend, aufgepresst wird, oder eine Methode, in der das Medium in eine Probe eingetaucht wird. Nachdem das Testfluid in das einfache Kulturmedium inokuliert wurde, kann die Kultivierung im Medium durchgeführt werden, während das Medium stehen gelassen wird, oder während das Medium transportiert wird.
  • Beispiele
  • Die vorliegende Erfindung wird nun detaillierter durch Beispiele beschrieben, die nicht als die Erfindung darauf beschränkend anzusehen sind.
  • Beispiel 1
  • (1) Herstellung des Kulturmediums
  • Pepton (1,0 g), Hefeextrakt (0,5 g), Glucose (0,2 g), Xanthanlösung (3 g) und Tetrazoliumchlorid (0,002 g) wurden zu einer Ethanollösung (100 ml), die 0,01 bis 1 Gew.-% Hydroxypropylcellulose (HPC) enthielt, zugegeben, um dadurch eine Suspension herzustellen. Die so hergestellte Ethanolsuspension (1 ml) wurde in zwei Behälter (50 ϕmm) gegossen, von denen jeder eine wasserabsorbierende Faserbahn (50 ϕmm) enthielt, und die zwei Behälter wurden auf einander gestapelt und allmählich in einem geschlossen Raum über Nacht getrocknet. Danach wurde jeder der Behälter bedeckt, um dadurch ein erfindungsgemäßes einfaches Kulturmedium herzustellen. Das vorliegende einfache Kulturmedium und ein Trocknungsmittel wurden mit einem Aluminiumverpackungsmaterial hermetisch verpackt und dann durch Bestrahlung mit γ-Strahlen bei einer Oberflächendosis von 10 bis 20 kGy sterilisiert.
  • Da die wasserabsorbierende Bahn sicher auf dem Behälter im einfachen Kulturmedium fixiert war, konnte eine Inokulation des Mediums in einem geneigten Zustand oder in einem umgekehrten Zustand durchgeführt werden.
  • (2) Diffundierbarkeitstest
  • Gereinigtes Wasser (1 ml) wurde tropfenweise auf den Mittelteil der wasserabsorbierenden Bahn des erfindungsgemäßen einfachen Kulturmediums gegeben, und die Zeit, bis zu der das Wasser durch den Behälter diffundierte, wurde gemessen. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 angegeben. Tabelle 1 (Einheit: Sekunde)
    Position des Behälters während des Trocknens Konzentration an Hydroxypropylcellulose (Gew.-%)
    0,01 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5 1,0
    obere 2,12 2,98 4,37 5,68 9,35 11,14 13,12 16,99 65,97 43,2
    untere 3,21 4,89 7,34 5,65 11,20 10,41 16,48 16,30 42,26 44,72
  • Aus Tabelle 1 ist es ersichtlich, dass, wenn die HPC-Konzentration 0,4 Gew.-% oder weniger beträgt, das Medium eine gute Diffundierbarkeit zeigt, und insbesondere, wenn die HPC-Konzentration 0,15 Gew.-% oder weniger beträgt, das Medium eine hervorragende Diffundierbarkeit zeigt, d.h., das gereinigte Wasser diffundiert sehr rasch (innerhalb von 10 Sekunden) durch das Medium.
  • Beispiel 2
  • Ein auf eine zu Beispiel 1 ähnliche Weise hergestelltes Kulturmedium und ein Trocknungsmittel wurden hermetisch mit einem Aluminiumverpackungsmaterial verpackt und dann durch Bestrahlen mit Elektronenstrahlen oder Bestrahlen mit γ-Strahlen mit einer Oberflächendosis von 10 bis 20 kGy sterilisiert. Danach wurde der nachstehend beschriebene Test durchgeführt.
  • Escherichia coli wurde in Tryptosoya-Nährlösung (Produkt von Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) bei 35°C 24 Stunden lang kultiviert, und die E. coli-Kultur wurde stufenweise verdünnt (in jeder Stufe auf 1/10). Ein aliquoter Anteil (1 ml) jeder Verdünnung wurde auf dem erfindungsgemäßen Kulturmedium (durch Bestrahlen mit Elektronenstrahlen oder Bestrahlen mit γ-Strahlen sterilisiert) und in ein Standardverfahren-Agarkulturmedium (Produkt von Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) inokuliert und bei 35°C 48 Stunden lang kultiviert. Danach wurde die Zahl der Kolonien gezählt.
  • Aus den Ergebnissen der Tests, die fünfmal durchgeführt wurden, wurde eine durchschnittliche Kolonienzahl in jedem der Kulturmedien berechnet: 2,6 × 108 cfu/ml im erfindungsgemäßen durch Bestrahlen mit Elektronenstrahlen sterilisiertem Kulturmedium, 2,7 × 108 cfu/ml im erfindungsgemäßen durch Bestrahlen mit γ-Strahlen sterilisiertem Kulturmedium und 2,7 × 108 cfu/ml in dem Standardverfahren-Agarkulturmedium. Die Ergebnisse zeigen, dass die Kolonienzahl in allen Kulturmedium im wesentlichen gleich ist, und dass im Hinblick auf das Bakterienwachstum kein Unterschied zwischen den Kulturmedien besteht.
  • Beispiel 3
  • Pepton (1,0 g), Hefeextrakt (0,5 g), Glucose (0,2 g), Xanthanlösung (3 g) und Tetrazolium-chlorid (0,002 g) wurden zu einer Ethanollösung (100 ml), die 0,1 Gew.-% Hydroxypropylcellulose (HPC) enthielt, zugegeben, um dadurch eine Suspension herzustellen. Die so hergestellte Ethanolsuspension (1 ml) wurde in zwei Behälter (50 ϕmm) gegossen, von denen jeder eine wasserabsorbierende Faserbahn (50 ϕmm) enthielt, und die zwei Behälter wurden auf einander gestapelt und allmählich in einem geschlossen Raum getrocknet, während Alkoholdampf durch Luft ersetzt wurde. Danach wurde jeder der Behälter bedeckt, um dadurch ein erfindungsgemäßes Kulturmedium herzustellen. Das vorliegende einfache Kulturmedium und ein Trocknungsmittel wurden mit einem Aluminiumverpackungsmaterial hermetisch verpackt und dann durch Bestrahlung mit γ-Strahlen bei einer Oberflächendosis von 10 bis 20 kGy sterilisiert.
  • Da die wasserabsorbierende Bahn sicher auf dem Behälter im einfachen Kulturmedium fixiert war, konnte eine Inokulation des Mediums in einem geneigten Zustand oder in einem umgekehrten Zustand durchgeführt werden.
  • Gereinigtes Wasser (1 ml) wurde tropfenweise auf den Mittelteil der wasserabsorbierenden Bahn des erfindungsgemäßen Kulturmediums zugegeben, und die Zeit, bis zu der das Wasser durch den Behälter diffundierte, wurde gemessen. Die Zeit betrug 5,53 Sekunden; d.h., das Medium zeigte eine gute Diffundierbarkeit.
  • Industrielle Anwendbarkeit
  • Das einfache Kulturmedium der vorliegenden Erfindung ermöglicht eine sehr rasche (sofortige) Diffusion eines in das Medium inokulierten Testfluids. Zusätzlich kann die Inokulation in das Medium unabhängig von der Lage – geneigt oder umgekehrt – des Mediums oder sogar Schwerkraft-frei durchgeführt werden. Durch die Verwendung des Mediums kann deshalb ein mikrobieller Test rasch auf einfache Weise an jedem Ort durchgeführt werden, z.B. in einem Haus, im Freien oder im Raum.

Claims (8)

  1. Verfahren zur Herstellung eines einfachen Kulturmediums, umfassend: (i) Suspendieren in einem Alkohol (a) 0,01 bis 0,4 Gew.-% eines Klebers, der in Wasser und Alkohol löslich ist, (b) ein Geliermittel, das in Wasser löslich und in Alkohol unlöslich ist und (c) einen Bakteriennährstoff, um dadurch eine Alkoholsuspension herzustellen; (ii) Imprägnieren einer wasserabsorbierenden Faserbahn mit der Alkoholsuspension, wobei die wasserabsorbierende Faserbahn einen mesh-Wert aufweist, der größer ist als die Teilchengröße des Geliermittels, und auf einer wasserdichten flachen Platte aufliegt; (iii) Trocknen der resultierenden Bahn während eine rasche Verdampfung von Alkohol unterdrückt wird, um dadurch zu verursachen, dass die wasserabsorbierende Bahn auf der wasserdichten flachen Platte anhaftet.
  2. Verfahren nach Anspruch 1, worin der Bestandteil (a) ausgewählt ist unter Hydroxypropylcellulose, Polyvinylpyrrolidon und Polyethylenoxid.
  3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, worin der Bestandteil (b) ausgewählt ist unter Xanthanlösung, Johannisbrotgummi, Guar Gum, Carrageen und Hydroxyethylcellulose.
  4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, worin Bestandteil (b) ein Pulver ist, das eine mittlere Teilchengröße von 0,5 bis 50 μm aufweist.
  5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, worin eine die Bestandteile (a), (b) und (c) enthaltene Zusammensetzung außerdem ein Farbentwicklungsmittel enthält.
  6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, worin der Alkohol ein C1-C5-Alkohol ist.
  7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, worin die wasserabsorbierende Faserbahn eine Maschengröße von 15 bis 100 mesh und eine Dicke von 10 bis 1.000 μm aufweist.
  8. Einfaches Kulturmedium, erhältlich nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 7.
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