DE4428152A1

DE4428152A1 - Neue Amido-chinoxalindione, ihrer Herstellung und Verwendung

Info

Publication number: DE4428152A1
Application number: DE4428152A
Authority: DE
Inventors: Wilfried Lubisch; Berthold Behl; Hans Peter Hofmann
Original assignee: BASF SE
Current assignee: BASF SE
Priority date: 1994-06-22
Filing date: 1994-08-09
Publication date: 1996-01-04
Also published as: HRP950339A2; WO1995035289A1; NO965553L; US5773439A; ZA955128B; IL114161A0; PL317967A1; CA2193732A1; CN1152918A; MX9700113A; SI9520076A; FI965172A; BR9508112A; EP0873321A1; FI965172A0; JPH10501801A; NO965553D0; HUT76472A; HU9603544D0; BG101114A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Amido-chinoxalindione, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung zur Bekämp fung von Krankheiten.

Die sogenannten exzitatorischen Aminosäuren insbesondere Gluta minsäure sind im Zentralnervensystem weit verbreitet. Die exzita torischen Aminosäure Glutaminsäure fungiert als Transmittersub stanz für Rezeptoren, von denen man verschiedene Subtypen kennt. Ein Subtyp wird z. B. nach dem spezifischen Agonisten N-Methyl-D- Aspartat NMDA-Rezeptor genannt. Dieser NMDA-Rezeptor weist ver schiedene Bindungsstellen für Agonisten bzw. Antagonisten auf. Die Aminosäure Glycin bindet ebenfalls am NMDA-Rezeptor und modu liert die Wirkung des natürlichen Agonisten Glutaminsäure. Anta gonisten an dieser Glycin-Bindungsstelle können danach antagoni stische Effekte am NMDA-Rezeptor zeigen und eine "Übererregung" dieses Rezeptors hemmen.

Zwei andere Subtypen der Glutamat-Rezeptoren stellen der AMPA- und der Kainat-Rezeptor dar, die jeweils nach den spezifischen Agonisten 2-Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid (AMPA) und kainic acid bezeichnet werden. Analog zum bereits ge nannten NMDA-Rezeptor könnten Antagonisten dieser Rezeptoren ebenfalls eine "Übererregung" hemmen.

Bei einer Reihe von neurodegenerativen Krankheiten oder psychi schen Störungen treten erhöhte Glutamat-Spiegel auf, die zu Zu ständen von Übererregungen oder toxischen Effekten im ZNS führen können.

Antagonisten gegen die Glutamat-Rezeptor-Subtypen können somit zur Behandlung dieser Krankheiten dienen. Glutamat-Antagonisten, dazu gehören insbesondere auch NMDA-Antagonisten bzw. deren Modulatoren (wie beispielsweise Glycin-Antagonisten) und die AMPA-Antagonisten, eignen sich daher zur therapeutischen Anwen dung als Mittel gegen neurodegenerative Krankheiten (Chorea Hun tington und Parkinsonsche Krankheiten), neurotoxische Störungen nach Hypoxie, Anoxie oder Ischämie, wie sie nach "Stroke" auftre ten, oder auch als Antiepileptika, Antidepressiva und Anxiolytika (vgl. Arzneim. Forschung 1990, 40, 511-514; TIPS, 1990, 11, 334-338 und Drugs of the Future 1989, 14 (11), 1059-1071).

Derivate des Chinoxalin-2,3(1H,4H)-dions II

wurden bereits in mehreren Veröffentlichungen wie EP 374.534 und EP 260.467 als Glutamat-Antagonisten beschrieben. Viele bekannte Derivate sind im heterocyclischen Chinoxalin-Fragment unsubsti tuiert (II, R¹, R² = Wasserstoff). Jedoch sind auch einige Derivate bekannt, bei denen R¹ in II einen Rest darstellt, der nicht Wasserstoff ist. So sind in EP 377.112 und EP 374.534 N-Hy droxychinoxaline (II; R¹ = OR⁴) beansprucht worden. In EP 315.959, DE 4.135.871, WO 91/13.878 und WO 92/07.847 sind Alkylreste als R¹ in II beschrieben, wobei die Alkylkette noch mit Säuren, Estern oder Amiden substituiert sein kann. Ebenfalls sind Alkylsäuren (= R¹) in J.R. Epperson et al. Bioorg. & Med. Chemistry Lett. 1993, 3(12), 2801-4 erwähnt. Die genannten Veröffentlichungen zeichnen sich aber dadurch aus, daß überwiegend Alkylester und Alkylsäuren dargestellt wurden. Dagegen sind in EP 315.259 ein Essigsäureamid (vgl. R¹) (Beispiel 24), in J.R. Epperson et al. (loc. cit.) ein Essigsäureanilid (Beispiel 16) und in EP 572.852 verschiedene Säureamide (vgl. Beispiel 56) aufgeführt.

Vom N-Aminochinoxalindion abgeleitete Derivate sind in der Literatur bislang wenige bekannt. Das 1-Aminochinoxalindion wurde von Shin, Sung-Chul et al., Taehan Hwahakhoe Chi 27(5), 382-4 (1983) [CA 100, 103276] und Rossi et al., Tetrahedron 24, 6395 (1268) beschrieben. Von Rossi et al. sind ebenfalls N-Imino-Chi noxalindione hergestellt worden. In WO 93/08.173 wurden N-Alkyl amino-chinoxaline als Glutamat-Antagonisten und in EP 358.148 durch Phthalimido-Reste substituierte N-Amidochinoxalindione als Pigmente beansprucht. Außer in der letztgenannten Anmeldung sind N-Amido-chinoxalindione bislang niemals beschrieben worden. Pyr rolylchinoxaline sind bisher nur in EP 572.852 erwähnt worden.

Es wurden nun neue N-Amidochinoxalindione mit neuartigen Wirkun gen gefunden.

Gegenstand der Erfindung sind neue Amidochinoxalindione der Formel I

worin
R¹ Wasserstoff oder C₁-C₄-Alkyl bedeutet
n 0 oder 1 ist,
m 0, 1, 2, 3 oder 4 ist,
R² Wasserstoff, verzweigtes oder geradliniges C₁-C₆-Alkyl oder Phenyl, welches mit maximal zwei der folgenden Resten substi tuiert sein kann: geradliniges oder verzweigtes C₁-C₄-Alkyl, OR⁶, NH₂, NO₂, NHCOR⁶, CN, CF₃, OCF₃, -CO₂R⁶, F, Cl, Br, J, -CO-R⁶ oder SO₂R⁶, worin R⁶ Wasserstoff, C₁-C₄-Alkyl, Phenyl oder Benzyl ist, bedeutet,
R³ Wasserstoff, Fluor, Chlor, Brom, Jod, C₁-C₄-Alkyl, OR⁷, -CO-R⁷, NH₂, NO₂, -NH-CO-R⁷, CF₃- CN oder

bedeutet, worin R⁷ Wasserstoff, C₁-C₄-Alkyl oder CF₃ ist und q die Zahl 0, 1 oder 2 ist und R⁸, H, C₁-C₄-Alkyl, Phenyl, Phenylsulfonyl, NO₂, CN, -COO(CH₂)_rR¹⁰, -CONH(CH₂)_rR¹⁰, -CO-R¹⁰, -CH=CHCONHR¹⁰, -CH₂=NR¹⁰R¹¹, -CH₂NH-CY-(CH₂)_rR¹¹, -CH=CH-COOR¹⁰, -CH=NOR¹⁰ -CH=NR¹⁰ -CH₂-NH-CY-Z-(CH₂)_rR¹¹, CH₂-NH-CO-CF₃,

ist, worin Y O oder N, Z O oder NH und R¹⁰ Wasserstoff, geradliniges oder verzweig tes C₁-C₄-Alkyl, Phenyl, Benzyl, Pyridyl oder Benzylhydryl, r 0, 1, 2, 3 oder 4 und R¹¹ Wasserstoff, geradliniges oder verzweigtes C₁-C₄-Alkyl, Phenyl,

be deuten, und R⁹ Wasserstoff oder C₁-C₄-Alkyl ist und die in R⁸, R¹⁰ und R¹¹ enthaltenen Benzolringe noch durch ein oder zwei NH₂, OCH₃, OCH₂CH₃, Cl, Br, OCF₃, F, CH₃, C₂H₅, NO₂, -COOR¹, -CONHR¹, -CH₂NHR¹, -CH₂NH-CO-CF₃, -CH₂NH-CO-CH₃, -NH-SO₂-CH₃, -NH-CO-CH₃, -NH-CO-CF₃ und
R⁴ und R⁵, die gleich oder verschieden sein können und Wasser stoff, C₁-C₄-Alkyl, C₁-C₄-Alkoxy, Trifluormethyl, Trifluor methoxy, Fluor, Chlor, Brom, Jod, Nitro und Cyano, sowie einen anellierten Benzolring, der seinerseits bis zu zwei der obigen für R⁴ bzw. R⁵ genannten Reste tragen kann, bedeuten und ihre tautomeren, isomeren und enantiomeren Formen sowie ihre physiologisch verträglichen Salze.

Die vorliegenden N-Amidochinoxalindione zeigen überraschend Vor teile gegenüber den bereits bekannten, oben erwähnten Chinoxalin dionen, insbesondere bessere Wirksamkeit. So ist die Substanz des erfindungsgemäßen Beispiels 29 (1-Amido-7-pyrrolylchinoxalindion) deutlich wirksamer als eines der nächst verwandten Derivate, näm lich 1-Carbamoyl-7-pyrrolylchinoxalindion (vgl. Beispiel 56 in EP 572.852). Das wird unterstützt durch die Feststellung von J.R. Epperson et al. (Biorg. & Med. Chemistry Lett. 1993, 3(12), 2801-4), daß ein 1-Carbamoylmethyl-chinoxalindion (Verbindung 16) unwirksam ist.

Die erfindungsgemäßen 1-Amido-chinoxalindione können auf ver schiedenen Wegen dargestellt werden.

Substituierte Aromaten III, in denen L eine Abgangsgruppe wie z. B. Halogene, OCH₃ oder OSO₂CF₃ darstellt, werden mit Hydrazinen IV in einer nukleophilen Substitution zu entsprechenden Hydrazino-aromaten V umgesetzt (Schema 1). Die Gruppe Z in IV steht für eine Amino-Schutzgruppe wie z. B. Trifluoracetyl, Acetyl, Boc und Benzoyl. Die Umsetzung zu V erfolgt in Lösungs mitteln, bevorzugt polaren Lösungsmitteln wie Alkoholen, Aceto nitril, Dimethylformamid und höheren Polyol-Derivaten, bei Tem peraturen von 25-150°C, bevorzugt bei 80-150°C, in Gegenwart einer Base, wie tert.-Amine und Kaliumkarbonat.

Schema 1

Das Derivat V ergibt mit aktivierten Oxalmonosäuren, wie z. B. Oxalsäuremonoethylesterchlorid, die Anilid-Derivate VI. Diese Amid-Bildung wird nach bekannten Verfahren in Lösungsmitteln wie Tetrahydrofuran, Methylenchlorid, Dimethylformamid oder Pyridin und Zugabe gegebenenfalls von Basen wie Triethylamin, Pyridin, Kaliumkarbonat oder wäßriger Natronlauge bei Temperaturen von 0-30°C durchgeführt. Die Reduktion des Nitro-anilids VI zum Chino xalindion VII wird entweder katalytisch oder chemisch erreicht. Die katalytische Reduktion erfolgt in polaren Lösungsmitteln, wie Dimethylformamid, Alkoholen oder Tetrahydrofuran, in Gegenwart katalytischer Mengen von Palladium/Kohle, Platin/Kohle oder ähn licher Katalysatoren bei Temperaturen von 25-100°C. Als Redukti onsmittel können Wasserstoff oder Wasserstoffträger, wie Ammoniumformiat oder Hydrazin, eingesetzt werden. Die chemische Reduktion gelingt mit Metallen wie Eisen und Zink oder Metall verbindungen wie Zinn-II-chlorid in polaren Lösungsmitteln wie Wasser oder Eisessig, gegebenenfalls unter Zugabe von Säuren wie Salzsäure oder Essigsäure, bei Temperaturen von 25-150°C, bevor zugt 60-120°C.

Die Abspaltung der Schutzgruppe Z in VII zum 1-Aminochinoxalin VIII erfolgt je nach Schutzgruppe nach bekannten Verfahren, die in Th. Green et al., "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley & Sons 1991, Kap. 7 aufgelistet sind.

Dieses Amino-Derivat VIII kann mit aktivierten Carbonsäure-Deri vaten X-CO-L′ zu den erfindungsgemäßen Amido-Derivaten Ia umge setzt werden, wobei L′ eine Abgangsgruppe darstellt, die zum Bei spiel Chlorid, Imidazol, X-CO-O- oder eine andere Gruppe sein kann, mit der die Säure X-CO-OH zur Reaktion aktivierbar ist und u. a. in R.C. Larock, "Comprehensive Organic Transformations", New York 1989, S. 972 ff. aufgelistet sind. Diese Kupplungen werden nach bekannten Verfahren ausgeführt, die z. B. im Houben-Weyl, "Methoden der organischen Chemie", Band E5, Kapitel V, aufgeführt sind.

Die Synthese zu 1-Amidochinoxalinen I kann analog Schema 1 auch mit Derivaten III, gemäß Schema 1, bei denen am Aromat noch ein Rest R³ gebunden ist, erfolgen. Das Chinoxalin VII (s. Schema 2) wird analog üblicher Verfahren, die z. B. im Houben-Weyl, "Metho den zur organischen Chemie", Bd. 10/1 aufgelistet sind, zu IX nitriert. Dabei arbeitet man mit Nitrierungsmitteln wie Kaliumnitrat oder Salpetersäure bei Tempe raturen von 0-100°C vorzugsweise in Gegenwart von Schwefelsäure oder Essigsäure.

Schema 2

Die Abspaltung der Schutzgruppe Z in IX zu Verbindungen X und die Einführung der Gruppe X-CO- zu den erfindungsgemäßen Verbindungen Ib erfolgt analog den Verfahren aus Schema 1 (s. oben).

Der Nitro-aromat IX kann analog den Reduktionsverfahren aus Schema 1 (Schritt VI → VII) zum Anilin X reduziert werden. Das Anilin X wird mit einer 1,4-Dicarbonyl-Verbindung wie

Bernsteindialdehyd-Derivaten oder anderen davon abgeleitete cyc lischen und acyclischen Acetalen zu Pyrrolen XI umgesetzt. Dabei arbeitet man nach üblichen Verfahren, die z. B. in C. Ferri, "Re aktionen der organischen Synthese", Thieme-Verlag, 1978, S. 708 f, aufgeführt sind, vorzugsweise aber in Eisessig bei Temperatu ren von 60-140°C oder in Toluol/Dimethylformamid-Gemischen unter Wasserauskreisung bei Rückflußtemperaturen. Die Entfernung der Schutzgruppe Z und die Einführung der Gruppe X-CO- in XI zu den erfindungsgemäßen Chinoxalindionen 1 erfolgt analog Schema 1 (VIII → Ib).

In den so hergestellten Produkten 1 kann die Substitution des in R⁷ beanspruchten Pyrrolyl-Ringes in geeigneter Weise verändert werden (Schema 3). So kann z. B. der Aldehyd durch reduktive Aminierung mit Aminen in die erfindungsgemäßen Verbindungen 1 überführt werden. Die reduktive Aminierung wird im allgemeinen bei Temperaturen von 5 bis 80°C, vorzugsweise 10 bis 30°C, in Ge genwart von Reduktionsmitteln wie Natriumcyanoborhydrid oder Was serstoff in Gegenwart von Hydrierkatalysatoren wie Pd/Kohle, Pt/Kohle oder Raney-Nickel, zweckmäßig in polaren organischen Lö sungsmitteln wie Alkoholen oder Dimethylformamid, durchgeführt.

Schema 3

Der Aldehyd Ic kann nach üblichen Verfahren, die z. B. in R.C. Larock, "Comprehensive Organic Transformations", 1989, VCH Publisher, S. 838 f., zur erfindungsgemäßen Carbonsäure Id oxi diert werden, bevorzugt wird die Oxidation mit Kaliumpermanganat in Lösungsmitteln wie Aceton bei Temperaturen von 25-80°C. Diese Carbonsäuren I werden durch Reaktion mit Aminen HNR¹R² in die Amide Ie überführt. Diese Kupplung geschieht nach bekannten Ver fahren, die z. B. im Houben-Weyl, "Methoden der organischen Che mie", Band E5, Kapitel V, aufgelistet sind.

Schema 4

Andererseits können so zugängliche Pyrrolylalkylamie If (s. Schema 4) mit Säuren R¹¹(CH₂)CO₂H, die in geeigneter Weise zu R¹¹(CH₂)COL′′ aktiviert werden, wobei L′′ für eine Abgangsgruppe wie Azid, Imidazol und andere, die in R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, New York 1989, S. 972 ff, aufgelistet sind, in die erfindungsgemäßen Amide I′′ überführt werden. Diese Kupplung geschieht nach bekannten Verfahren, die z. B. im Houben- Weyl "Methoden der organischen Chemie", Band E5, Kapitel V, auf gelistet sind.

Die Pyrrolylalkylamine können ebenfalls mit Isocyanaten zu den Harnstoffen Ih umgesetzt werden, wobei man anstelle der Iso cyanate auch Amine HNHR¹⁰ verwenden kann, die in bekannter Weise zuvor mit Phosgen oder analogen Verbindungen, wie Carbonyldi imidazol, umgesetzt werden. Diese und vergleichbare Verfahren sind beispielsweise in Houben-Weyl "Methoden der organischen Che mie", Band E4, S. 334 ff. beschrieben. Bei diesen Verfahren ar beitet man mit oder ohne Lösungsmittel, wobei dieses bevorzugt Dimethylformamid wäre, und bei Temperaturen von 25-150°C.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen stellen Antagonisten der exzi tatorischen Aminosäure Glutamat, insbesondere Antagonisten der Glycin-Bindungsstelle des NMDA-Rezeptors, des AMPA-Rezeptors und des Kainat-Rezeptors dar.

Die pharmakologische Wirksamkeit der Verbindungen I wurde an iso liertem Membranmaterial von Rattengroßhirnen untersucht. Hierzu wurde das Membranmaterial in Gegenwart der erfindungsgemäßen Verbindungen mit den radioaktiv markierten Substanzen ³H-2-Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolpropionsäure (³H-AMPA), [³H]-Glycin oder [³H)-Kainate behandelt, wobei sich diese an spe zifische Rezeptoren (AMPA-, NMDA- oder Kainate-Rezeptoren) bin den. Anschließend wurde durch Scintillationszählung die Radioak tivität der behandelten Membrane gemessen. Über die gebundene Ra dioaktivität ließen sich die Mengen an gebundener ³H-AMPA, [³H)-Glycin oder [³H)-Kainate bzw. jeweils die verdrängten Mengen dieser radioaktiv markierten Substanzen bestimmen. Die sich hier aus ergebende Dissoziationskonstante K_I (I = Inhibitor), welche ein Maß für die Verdrängungswirkung des erfindungsgemäßen Wirk stoffes ist, wurde durch iterative nichtlineare Regressionsana lyse mit dem Statistical Analysis System (SAS) an einem IBM-Rech ner, ähnlich dem Programm "Ligand" von P.J. Munson und D. Rodbard (Analytical Biochem. 107, 220 (1980), Ligand: Versatile Compute rized Approach for Charakterization of Ligand Binding Systems) ermittelt.

Folgende In-Vitro-Untersuchungen wurden durchgeführt:

1. Bindung von ³H-2-Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolpropion säure (³H-AMPA)

Für die Präparation des Membranmaterials wurden frisch ent nommene Rattengroßhirne zusammen mit dem 15fachen Volumen einer Pufferlösung A aus 30 mM (α,α,α-Tris-(hydroxymethyl)-me thylamin-Hydrochlorid (TRIS-HCl) und 0,5 mM Ethylendiamin tetraessigsäure (EDTA) - pH 7,4 - mittels eines Ultra-Tur rax®-Rührers homogenisiert. Die Suspension wurde 20 min bei 48 000 g zentrifugiert. Nach Abtrennung der überstehenden Flüssigkeit wurde das im Bodensatz enthaltene proteinhaltige Membranmaterial dreimal durch Suspendieren in der Puffer lösung A und anschließendes, jeweils 20minütiges Zentrifugie ren bei 48 000 g gewaschen. Danach wurde das Membranmaterial in einem 15fachen Volumen der Pufferlösung A suspendiert und 30 min bei 37°C inkubiert. Anschließend wurde das Protein material zweimal durch Zentrifugieren und Suspendieren gewa schen und bis zur Verwendung bei -70°C eingefroren.

Für den Bindungstest wurde das bei 37°C aufgetaute Protein material zweimal durch Zentrifugieren bei 48 000 g (20 min) und anschließendes Suspendieren in einer Pufferlösung B aus 50 mM TRIS-HCl, 0,1 M Kaliumthiocyanat und 2,5 mM Calcium chlorid - pH 7,1 - gewaschen. Anschließend wurden 0,25 mg Membranmaterial, 0,1 µCi ³H-AMPA (60 Ci/mmol) sowie Verbindung I in 1 ml Pufferlösung B gelöst und 60 min auf Eis inkubiert. Die inkubierte Lösung wurde über einen CF/B-Filter (Firma Whatman), der zuvor mindestens 2 Stunden mit einer 0,5%igen wäßrigen Lösung von Polyethylenimin behandelt worden war, filtriert. Anschließend wurde der Membranrückstand mit 5 ml kalter Pufferlösung B gewaschen, um gebundene und freie ³H-AMPA voneinander zu trennen. Nach Messung der Radioaktivi tät der gebundenen ³H-AMPA im Membranmaterial durch Scin tillationszählung wurde durch Auswertung der Verdrängungskur ven mittels Regressionsanalyse der K_I-Wert bestimmt.

Für 1-Benzamido-7-(1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion (Beispiel 29) und 1-Benzamido-6-triflu ormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion (Beispiel 1) wurden ein K_I-Wert von < 10 µM ermittelt und beide sind somit wirksamer als die Substanz des Beispiels 56 der EP 572.852 und die auf Seite 4 in Zeile 24 genannte Verbindung 16.

2. Bindung von [³H]-Glycin

Für die Präparation der Membranen für den ³H-Glycin-Bindungs assay wurde frisch entnommene Rattenhippocampi in 10fachem Volumen Präparationspuffer (50 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA) mit einem Potter-Homogenisator homogenisiert. Das Homogenat wurde 20 min bei 48 000 × g zentrifugiert. Der Überstand wurde ver worfen und die im Pellet erhaltenen Membranen durch Resuspen dieren und Zentrifugieren bei 48 000 × g (jeweils 20 min) 2× gewaschen. Die resuspendierten Membranen wurden in flüssigem Stickstoff eingefroren und bei 37°C wieder aufgetaut. Nach einem erneuten Waschschritt wurde die Membransuspension 15 min bei 37°C im Schüttelwasserbad inkubiert. Nach 4 wei teren Waschschritten (jeweils 20minütiges Zentrifugieren bei 48 000 × g und Resuspendieren in Präparationspuffer) wurden die Membranen bis zur weiteren Verwendung bei -70°C eingefro ren.

Die eingefrorenen Membranen wurden bei 37°C aufgetaut und 2× durch Zentrifugation bei 48 000 × g (20 min) und anschließen des Resuspendieren in Bindungspuffer (50 mM Tris-HCl pH 7,4; 10 mM MgCl₂) gewaschen. Ein Inkubationsansatz enthielt 0,25 mg Protein (Membranen), 25 nM ³H-Glycin (16 Ci/mMol) und die zu testenden Substanzen in insgesamt 0,5 ml Bindungspuffer. Die unspezifische Bindung wurde durch Zugabe von 1 mM Glycin bestimmt. Nach 60 min Inkubation bei 4°C wurde gebundener und freier Ligand durch Filtration über GF/B-Filter und anschlie ßendem Waschen mit ca. 5 ml eiskaltem Bindungspuffer voneinan der getrennt. Die auf den Filtern verbleibende Radioaktivität wird durch Flüssigkeitsscintillationszählung bestimmt. Aus den Verdrängungskurven wurden mit Hilfe eines iterativen nichtlinearen Anpassungsprogramms oder entsprechend der Glei chung von Cheng und Prusoff die Dissoziationskonstanten be rechnet.

3. Bindung von [³H]-Kainat

Für die Präparation der Membranen für den [³H]-Kainat-Bin dungsassay wurden frisch entnommene Großhirne von Ratten in Präparationspuffer (30 mM Tris-HCl pH 7,4, 0,5 mM EDTA) mit Hilfe eines Ultra-Turrax® in 15fachem Volumen homogenisiert. Das Homogenat wurde bei 48 000 × g 20 min zentrifugiert. Der Überstand wurde verworfen und die im Pellet enthaltenen Mem branen durch Resuspendieren in Präparationspuffer und Zentri fugieren bei 48 000 × g (jeweils 20 min) insgesamt 3× gewa schen. Nach dem dritten Waschschritt wurden die Membranen bei 37°C inkubiert. Anschließend wurden die Membranen 2× durch Zentrifugation und Resuspension gewaschen und bis zur wei teren Verwendung bei -70°C eingefroren.

Die eingefrorenen Membranen wurden bei 37°C aufgetaut, in Bindungspuffer (50 mM Tris-HCl pH 7,4) suspendiert und 20 min bei 48 000 × g zentrifugiert. Die sich im Pellet befindlichen Membranen wurden erneut in Bindungspuffer resuspendiert. Ein Inkubationsansatz enthielt 0,25 mg Protein (Membranen), 0,058 µCi (58 Ci/mmol) sowie die zu testenden Substanzen in insgesamt 1 ml Bindungspuffer. Die unspezifische Bindung wurde in Gegenwart von 0,1 mM Glutamat bestimmt. Nach er folgter 60minütiger Inkubation auf Eis wurde gebundener und freier Ligand durch Filtration über CF/B-Filter und an schließendes Waschen mit 5 ml eiskaltem Bindungspuffer von einander getrennt. Die CF/B-Filter waren zuvor für mindestens 2 h mit 0,5% Polyethylenimin behandelt worden. Die Auswer tung der Verdrängungskurven bzw. Berechnung der Dissoziati onskonstanten erfolgte durch ein nicht-lineares Anpassung sprogramm oder entsprechend der Gleichung von Cheng und Pru soff.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen I sind als Arzneimittel für die Human- und Veterinärmedizin geeignet und können zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung neurodegenera tiver Erkrankungen und neurotoxischer Störungen des zentralen Nervensystems sowie zur Herstellung von Antiepileptika, An xiolytika und Antidepressiva verwendet werden.

Die erfindungsgemäßen Arzneimittelzubereitungen enthalten ne ben den üblichen Arzneimittelhilfsstoffen eine therapeutisch wirksame Menge der Verbindungen I. Für die lokale äußere An wendung, z; B. in Puder und Salben, können die Wirkstoffe in den üblichen Konzentrationen enthalten sein. In der Regel sind die Wirkstoffe in einer Menge von 0,0001 bis 1 Gew.-%, vorzugsweise 0,001 bis 0,1 Gew.-%, enthalten.

Bei der inneren Anwendung werden die Präparationen in Einzel dosen verabreicht. In einer Einzeldosis werden pro kg Körper gewicht 0,1 bis 100 mg gegeben. Die Zubereitungen können täg lich in einer oder mehreren Dosierungen je nach Art und Schwere der Erkrankungen verabreicht werden.

Entsprechend der gewünschten Applikationsart enthalten die erfindungsgemäßen Arzneimittelzubereitungen neben dem Wirk stoff die üblichen Trägerstoffe und Verdünnungsmittel. Für die lokale äußere Anwendung können pharmazeutisch-technische Hilfsstoffe, wie Ethanol, Isopropanol, oxethyliertes Ricinusöl, oxethyliertes hydriertes Ricinusöl, Polyacryl säure, Polyethylenglykol, Polyethylenglykolstearat, ethoxy lierte Fettalkohole, Paraffinöl, Vaseline und Wollfett verwendet werden. Für die innere Anwendung eignen sich z. B. Milchzucker, Propylenglykol, Ethanol, Stärke, Talk und Poly vinylpyrrolidon.

Ferner können Antioxidationsmittel wie Tocopherol und butyliertes Hydroxyanisol sowie butyliertes Hydroxytoluol, geschmacksverbessernde Zusatzstoffe, Stabilisierungs-, Emul gier- und Gleitmittel enthalten sein.

Die neben dem Wirkstoff in der Zubereitung enthaltenen Stoffe sowie die bei der Herstellung der pharmazeutischen Zuberei tung verwendeten Stoffe sind toxikologisch unbedenklich und mit dem jeweiligen Wirkstoff verträglich. Die Herstellung der Arzneimittelzubereitungen erfolgt in üblicher Weise, z. B. durch Vermischen des Wirkstoffes mit den anderen üblichen Trägerstoffen und Verdünnungsmitteln.

Die Arzneimittelzubereitungen können in verschiedenen Ap plikationsweisen verabreicht werden, wie peroral, parenteral, subkutan, intraperitoneal und topisch. So sind Zubereitungs formen wie Tabletten, Emulsionen, Infusions- und Injektions lösungen, Pasten, Salben, Gele, Cremes, Lotionen, Puder und Sprays möglich.

Beispiele Beispiel 1 1-Benzamido-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion a) N′-(2-Nitro-4-trifluormethyl-phenyl)-benzylhydrazid

100 g (0,44 Mol) 4-Chlor-3-nitrobenzotrifluorid, 31 g (0,22 Mol) Kaliumcarbonat und 90 g (0,66 Mol) Benzhydrazid wurden in 450 ml Dimethylformamid/Wasser (8/1) für 3 h auf 110°C erwärmt. Danach wurde der Ansatz auf 5 l Eiswasser ge gossen. Der ausgefallene Niederschlag wurde abgesaugt, mit viel Wasser gewaschen und getrocknet. Man erhielt 133 g (93%) Produkt, Schmp. 200-201°C.
¹H-NMR (D₆DMSO): δ = 7,3 (1H); 7,5-7,7 (3H); 7,9 (1H); 8,0 (2H); 8,4 (1H); 9,9 (1H) und 11,0 (1H) ppm.

b) 1-Benzamido-6-trifluormethyl-chinoxalin-(2,3)-1H,4H-dion

130 g (0,43 Mol) des gemäß a) erhaltene Produktes und 110 ml (0,8 Mol) Triethylamin, gelöst in 1300 ml wasserfreiem Tetra hydrofuran, wurden bei 0°C 47 ml (0,44 Mol) Oxalsäuremono ethylesterchlorid, gelöst in 200 ml Tetrahydrofuran, zuge tropft. Nach 30 min wurde der Ansatz filtriert und das Fil trat im Vakuum eingeengt.

Der Rückstand (ca. 190 g) wurde in 2000 ml Eisessig aufgenom men und auf Rückfluß erwärmt. Dann gab man vorsichtig por tionsweise 90 g (1,6 Mol) Eisenpulver zu. Anschließend wurde heiß filtriert. Aus dem erkalteten Filtrat kristallisierte das Produkt, das abgesaugt und mit Wasser gewaschen wurde. Man erhielt 101 g (81%), Schmp. < 270°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 7,4-7,8 (6H); 8,1 (2H) und ca. 12,5 (breit) ppm.

Beispiel 2 7-Nitro-1-(3-nitrobenzamido)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

180 g (0,52 Mol) Substanz des Beispiels 1 wurden in 1000 ml kon zentrierter Schwefelsäure gelöst und bei 0°C portionsweise mit 104,2 g (1,04 Mol) Kaliumnitrat versetzt. Die Mischung wurde 1 h bei 0°C gerührt. Danach wurde der Ansatz auf Eis gegossen, der an fallende Niederschlag abgesaugt und aus Methanol um kristallisiert. Man erhielt 161 g (73%) Produkt, Schmp. 197-199°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 7,7 (1H); 7,9 (1H); 8,3 (1H); 8,45 (1H); 8,5 (1H); 8,9 (1H) und 12,5 (breit) ppm.

Beispiel 3 7-Nitro-1-trifluoracetamido-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion a) 1-Amino-7-nitro-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

64 g (0,15 Mol) Substanz des Beispiels 2 wurden in 275 ml 90 %ige Schwefelsäure gegeben und 3 h bei 80°C gehalten. Danach wurde das Reaktionsgemisch auf Eiswasser gegossen und die wäßrige Phase mit Essigester extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet und im Vakuum eingeengt. Man erhielt 32,3 g (77%) Produkt, Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,0 (2H); 7,6 (1H); 8,35 (1H) und 12,5 (breit) ppm.

b) 7-Nitro-1-trifluoracetamido-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3 (1H,4H)-dion

Zu 2,0 g (6,9 mMol) des gemäß a) erhaltenen Produktes in 50 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran wurde bei 0°C 1,1 ml (7,6 mMol) Trifluoressigsäureanhydrid, gelöst in 10 ml Tetra hydrofuran, getropft. Die Mischung wurde 16 h bei Raumtempe ratur gerührt. Anschließend wurde im Vakuum eingeengt. Man erhielt 2,3 g (89%) Produkt, Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 7,7 (1H); 8,2 (1H) und ca. 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 4 7-Amino-1-trifluoracetamido-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

2,1 g (5,4 mMol) Substanz des Beispiels 3 wurden in 300 ml Tetra hydrofuran/ Methanol (1/1) in Gegenwart von 0,5 g Palladium/Kohle (10%ig) hydriert. Danach wurde filtriert und das Filtrat im Va kuum eingeengt. Man erhielt 2,0 g (96%) Produkt, Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 4,5 (2H); 6,7 (1H); 7,1 (1H), ca. 8,9 (breit, 1H) und ca. 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 5 7-(2,5-Dimethyl-1-pyrrolyl)-1-(trifluoracetyl)-6-trifluormethyl- chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

14,0 g (39,3 mMol) Substanz des Beispiels 4 in 300 ml Eisessig wurden auf 80°C erhitzt. Anschließend wurden 4,5 g (39,3 mMol) 2,5-Hexandion zugegeben. Nach 20 min kühlte man ab und engt alles im Vakuum ein. Man erhielt 13,1 g (77%) Produkt.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 1,7 (6H); 5,8 (2H); 7,0 (1H); 7,6 (1H) und ca. 12,3 (breit) ppm.

Beispiel 6 7-(1-Pyrrolyl)-1-trifluoracetamido-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

13,0 g (36,5 mMol) Substanz des Beispiels 4 und 4,8 g (36,5 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran wurden analog Beispiel 6 umgesetzt. Man erhielt 11,9 g (81%) Produkt, Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,7 (2H), 6,9 (2H), 7,4 (1H); 7,6 (1H) und ca. 12,5 (breit) ppm.

Beispiel 7 1-Acetamido-7-(1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion a) 1-Amino-7-(1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

11 g (27,1 mMol) des Beispiels 6 wurden in 150 ml Ethanol ge löst und mit 17,1 g (54,2 mMol) Bariumhydroxid-octahydrat, gelöst in 200 ml Wasser, versetzt. Alles wurde bei Raumtempe ratur für 16 h gerührt. Danach wurde mit 2 M Salzsäure neutralisiert und anschließend die wäßrige Phase mit Essig ester extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet und im Vakuum eingeengt. Man erhielt 6,6 g (80%) Produkt.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,6 (2H); 6,9 (2H); 7,4 (1H); 7,65 (1H) und ca. 12,5 (breit) ppm.

b) 1-Acetamido-7-(1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

1,0 g (3,2 mMol) der gemäß a) erhaltenen Substanz und 0,4 ml (3,6 mMol) Essigsäureanhydrid wurden in 20 ml Eisessig 3 h unter Rückfluß gekocht. Danach wurde alles im Vakuum einge engt und chromatographisch (Fließmittel: Toluol/Aceton/Eises sig = 10/10/1) gereinigt. Man erhielt 0,83 g (74%) Produkt, Schmp. < 185°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,1 (3H), 6,2 (2H); 6,8 (2H); 7,2 (1H); 7,6 (1H); 11,1 (1H) und ca. 12,5 (breit) ppm.

Beispiel 8 1-Acetamido-7-(2,5-dimethyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion a) 1-Amino-7-(2,5-dimethyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

12,7 g (29,2 mMol) des Beispiels 5 wurden in 250 ml 0,5 M Salzsäure 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Danach wurde durch Zugabe von verdünnter Natronlauge neutralisiert und alles mit Essigester extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde chromato graphisch (Fließmittel: Toluol/Aceton/Eisessig = 10/10/1) ge reinigt. Man erhielt 7,2 g (74%) Produkt, das direkt weiter umgesetzt wurde.

b) 1-Acetamido-7-(2,5-dimethyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chi noxalin-2,3-(1H,4H)-dion

1,3 g (3,8 mMol) des gemäß a) erhaltenen Produktes und 0,4 ml (4,2 mMol) Essigsäureanhydrid wurden in 50 ml Eisessig 1 h unter Rückfluß gekocht. Danach wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Ether behandelt. Das Produkt wurde abge saugt. Man erhielt 1,4 g (96%). Schmp. < 150°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 1,8 (3H); 1,85 (3H); 2,1 (3H); 5,8 (2H); 7,2 (1H); 8,7 (1H), 11,1 (1H) und ca. 12,5 (breit) ppm.

Beispiel 9 1-Benzamido-7-nitro-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,0 g (6,7 mMol) des gemäß Beispiel 3a erhaltenen Produktes und 3,1 g (13,4 mMol) Benzolsäureanhydrid wurden 10 min auf 110°C er hitzt, wobei das Reaktionsgemisch durchkristallisierte. Nach dem Abkühlen wurde der Ansatz mit Ether behandelt und abgesaugt. Man erhielt 2,4 g (89%) Produkt, Schmp. 196-197°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 7,5-7,8 (4H); 8,0 (2H); 8,1 (1H); 12 (1H) und 12,8 (breit) ppm.

Beispiel 10 N-(7-Nitro-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion-1-yl)-N′- phenylharnstoff

2,3 g (7,9 mMol) des gemäß Beispiel 3a erhaltenen Produktes, 1,0 g (8,7 mMol) Phenylisocyanat und eine Spatelspitze 4-(N,N-Dime thylamino)pyridin wurden in 10 ml wasserfreiem Dimethylformamid 90 min auf 130°C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde der Ansatz zwi schen Essigester und Wasser verteilt, die organische Phase ge trocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde aus Methy lenchlorid/n-Pentan kristallisiert, wobei man 1,8 g (57%) Produkt erhielt, Schmp. < 240°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 7,0 (1H); 7,3 (2H); 7,4 (2H); 7,7 (1H); 8,2 (1H); 9,3 (breit, 1H); 9,5 (1H) und ca. 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 11 7-Amino-1-benzamido-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,2 g (5,6 mMol) Produkt des Beispiels 9 wurden in 200 ml Metha nol gelöst und nach Zugabe von 0,5 g Palladium/Kohle (10%) hy driert. Danach wurde filtriert und das Filtrat im Vakuum einge engt. Man erhielt 1,9 g (94%) Produkt, Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 5,6 (2H); 6,7 (1H); 7,3 (1H); 7,5-7,8 (3H); 8,0 (2H); 11,7 (1H) und ca. 12,2 (breit) ppm.

Beispiel 12 N-(7-Amino-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion-1-yl)-N′- phenylharnstoff

Zu 1,5 g (3,7 mMol) Substanz des Beispiels 10 in 50 ml Eisessig wurden bei ca. 120°C (Rückfluß) 1,2 g (22 mMol) Eisenpulver porti onsweise zugegeben. Danach wurde abgekühlt und der Niederschlag abgesaugt. Das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt und der resultierende Niederschlag mit Ether behandelt. Das so erhaltene Produkt wurde abgesaugt. Ausbeute erhielt 1,3 g (94%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 5,6 (2H); 6,95 (1H); 7,0 (1H); 7,1-7,5 (5H); 8,4 (1H); 8,8 (1H) und ca. 12,2 (breit) ppm.

Beispiel 13 1-Benzylamido-7-nitro-6-trifluormethyl-chinoxalin- 2,3-(1H,4H)-dion

3,0 g (10,3 mMol) Substanz des Beispiels 3a und 4,9 g (20,6 mMol) Phenylessigsäureanhydrid wurden analog Beispiel 9 umgesetzt. Man erhielt 3,6 g (86%) Produkt, Schmp.: 232-233°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 3,8 (2H); 7,1-7,5 (5H); 7,7 (1H); 7,9 (1H), 11,5 (1H) und 12,8 (1H) ppm.

Beispiel 14 7-Nitro-1-(o-tolylamido)-6-trifluormethyl-chinoxalin- 2,3-(1H,4H)-dion

4,9 g (20,6 mMol) o-Tolylessigsäureanhydrid und 3,0 g (10,3 mMol) Substanz des Beispiels 3a wurden analog Beispiel 9 umgesetzt. Man erhielt 4,1 g (97%) Produkt, Schmp. 253-254°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,4 (3H); 7,3-7,5 (3H); 7,6-7,8 (2H); 8,1 (1H), 11,8 (1H) und 12,9 (breit) ppm.

Beispiel 15 1-(4-Methoxybenzamido)-7-nitro-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3- (1H,4H)-dion

5,8 g (19,3 mMol) 4-Methoxybenzoesäureanhydrid und 2,8 g (9,7 mMol) Substanz des Beispiels 3a wurden analog Beispiel 9 umge setzt. Man erhielt 3,2 g (77%) Produkt, Schmp. < 240°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 3,9 (3H); 7,1 (2H); 7,7 (1H); 8,05 (2H); 8,1 (1H); 11,8 (breit) und ca. 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 16 7-Nitro-6-trifluormethyl-1-(4-trifluormethylbenzamido)-chin oxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,7 g (9,5 mMol) Substanz des Beispiels 3a und 3,8 g (9,5 mMol) p-Trifluorbenzoesäureanhydrid wurden analog Beispiel 9 umgesetzt. Man erhielt 3,9 g (91%) Produkt, Schmp. < 230°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 7,7 (1H); 8,0 (2H); 8,75 (3H); 12,2 (1H) und 12,9 (1H) ppm.

Beispiel 17 1-Benzamido-7-(3-formyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3(1H,4H)-dion

1,8 g (4,9 mMol) und 0,8 g (4,9 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydro furan-1-yl-carbaldehyd wurden in 40 ml Eisessig 30 min unter Rückfluß erwärmt. Danach wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand chromatographisch (Fließmittel: Toluol/Aceton/Eisessig = 40/40/1) gereinigt. Ausbeute: 2,0 g (91%), Schmp. < 210°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,6 (1H); 7,1 (1H); 7,5-7,75 (5H); 7,8 (1H); 8,0 (2H); 9,75 (1H); 11,8 (breit) und 12,8 (breit) ppm.

Beispiel 18 N-(7-(3-Formyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion-1-yl)-N′-phenylharnstoff

1,1 g (2,9 mMol) Substanz des Beispiels 12 und 0,46 g (2,9 mMol) 2,5-Dimethoxy-tetrahydrofuran-1-yl-carbaldehyd wurden analog Bei spiel 17 umgesetzt. Ausbeute: 1,05 g (81%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,6 (1H); 6,9-7,1 (2H); 7,3 (2H); 7,4 (2H); 7,6 (1H); 7,7 (1H); 7,8 (1H); 9,2 (breit); 9,4 (breit); 9,8 (1H) und ca. 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 19 1-Benzamido-7-(3-(4-benzylpiperazin-l-yl-me thyl)-pyrrol-1-yl)-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

1,3 g (2,9 mMol) des Produktes 17, 1,0 g (5,9 mMol) 4-Benzyl piperazin und 0,35 g (5,9 mMol) Eisessig wurden in Dimethylform amid/ Ethanol (1 : 1) gelöst und bei Raumtemperatur portionsweise mit 0,18 g (2,9 mMol) Natriumcyanoborhydrid versetzt. Nach 16 h Rühren wurde der Ansatz im Vakuum eingeengt und der Rückstand zwischen Essigester und wäßriger Natriumhydrogenkarbonat-Lösung verteilt. Die organische Phase wurde getrocknet und chromato graphisch (Fließmittel: Toluol/Methanol/Dimethylformamid/Eises sig = 10/7/1/1) gereinigt. Ausbeute: 0,83 g (47%); Schmp. 199-201°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,3-2,6 (8H); 3,4 (4H); 6,1 (1H); 6,75 (1H); 6,8 (1H); 7,2-7,4 (6H); 7,5 (2H); 7,6 (1H); 7,65 (1H); 8,0 (2H) und ca. 12 (breit) ppm.

Beispiel 20 1-Benzamido-7-(,3-(N-benzylaminomethyl)-pyrrol-1-yl)-6-trifluor methyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

1,3 g (2,9 mMol) Substanz des Beispiels 17 und 0,31 g (2,9 mMol) Benzylamin wurden analog Beispiel 19 umgesetzt. Ausbeute: 0,6 g (39%), Schmp. < 235°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO, CD₃COOD): δ = 3,4-3,6 (4H); 6,2 (1H); 6,75 (1H); 6,8 (1H); 7,2-7,4 (6H); 7,5 (2H); 7,6 (1H); 7,7 (1H); 8,0 (2H) und ca. 12 (breit) ppm.

Beispiel 21 7-Amino-1-benzylamido-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

3,4 g (8,3 mMol) Substanz des Beispiels 13 wurde analog Beispiel 12 mit 2,8 g (49,9 mMol) Eisenpulver reduziert. Ausbeute: 2,3 g (75%), Schmp. < 200°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 3,75 (2H); 5,6 (2H); 6,7 (1H); 7,2-7,5 (6H); ca. 11,3 (1H) und ca. 12 (breit) ppm.

Beispiel 22 7-Amino-1-(2-methylbenzamido)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

3,6 g (8,8 mMol) Substanz des Beispiels 14 wurden analog Beispiel 12 mit 3 g (53 mMol) Eisenpulver reduziert. Ausbeute: 2,9 g (88%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,5 (3H); 5,7 (2H); 6,9 (1H); 7,3 (1H); 7,3-7,6 (3H); 7,8 (1H); 11,5 (breit) und 12 (breit) ppm.

Beispiel 23 7-Amino-1-(4-methoxybenzamido)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

2,7 g (6,4 mMol) Substanz des Beispiels 15 wurden analog Beispiel 12 mit 2,1 g (38,2 mMol) Eisenpulver reduziert. Ausbeute: 2,3 g (92%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 3,9 (3H); 5,6 (2H); 6,8 (1H); 7,1 (2H); 7,25 (1H); 8,0 (2H); 11,5 (breit) und 12,0 (breit) ppm.

Beispiel 24 7-Amino-6-trifluormethyl-1-(4-trifluormethylbenzamido)-chin oxalin-2,3-(1H,4H)-dion

3,7 g (8,0 mMol) Substanz des Beispiels 16 wurden analog Beispiel 12 mit 2,7 g (48,0 mMol) Eisenpulver reduziert. Ausbeute: 2,7 g (80%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 5,6 (2H); 6,8 (1H); 7,3 (1H); 8,0 (2H); 8,25 (2H); 12,0 (1H) und 12,2 (1H) ppm.

Beispiel 25 1-Benzylamido-7-(3-formyl-pyrrol-1-yl)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion

2,1 g (5,6 mMol) Substanz des Beispiels 21 und 0,9 g (5,6 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran-3-ylcarbaldehyd wurden analog Bei spiel 17 umgesetzt. Ausbeute: 1,5 g (61%), Schmp. 212-214°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 3,7 (2H); 6,6 (1H); 7,0 (1H); 7,1-7,4 (6H); 7,6 (1H); 7,7 (1H); 9,8 (1H); 11,5 (breit) und 12,5 (breit) ppm.

Beispiel 26 7-(3-Formyl-1-pyrrolyl)-1-(2-methylbenzamido)-6-trifluormethyl- chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,7 g (7,1 mMol) Substanz des Beispiels 22 und 1,2 g (7,1 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran-1-yl-carbaldehyd wurden analog Bei spiel 17 umgesetzt. Ausbeute: 2,5 g (77%), Schmp. 188-190°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,4 (3H); 6,6 (1H); 7,1 (1H); 7,3-7,5 (3H); 7,6 81H); 7,7 (2H); 7,8 (1H); 9,8 (1H); ca. 11,5 (breit) und ca. 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 27 7-(3-Formyl-1-pyrrolyl)-1-(4-methoxybenzamido)-6-trifluormethyl- chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,1 g (5,3 mMol) Substanz des Beispiels 23 und 0,9 g (5,3 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran-1-yl-carbaldehyd wurden analog Bei spiel 17 umgesetzt. Ausbeute: 2,3 g (92%), Schmp. < 200°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 3,8 (3H); 6,6 (1H); 7,0-7,1 (3H); 7,6 (1H); 7,7 (1H); 7,8 (1H); 8,0 (2H); 9,7 (1H); 11,7 (breit) und 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 28 7-(3-Formyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-1-(4-trifluormethylbenz amido)-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,5 g (5,8 mMol) Substanz des Beispiels 24 und 0,93 g (5,8 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran-1-yl-carbaldehyd wurden analog Bei spiel 17 umgesetzt. Ausbeute: 2,6 g (89%), Schmp. < 230°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,6 (1H); 7,1 (1H); 7,6-7,9 (3H); 8,0 (2H); 8,3 (2H); 9,7 (1H) und ca. 12 (breit) und ca. 12,8 (breit) ppm.

Beispiel 29 1-Benzamido-7-(1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxalin- 2,3-(1H,4H)-dion

1,4 g (3,8 mMol) Substanz des Beispiels 11 und 0,51 g (38,4 mMol) 2,5-Dimethoxytetrahydrofuran wurden analog Beispiel 17 umgesetzt. Ausbeute: 1,1 g (70%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 6,2 (2H); 6,9 (2H); 7,3 (1H); 7,5-7,8 (4H); 8,0 (2H) und ca. 12 (breit) ppm.

Beispiel 30 1-Benzamido-7-(3-benzamidomethyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl- chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion a) N-(2,5-Dimethoxytetrahydrofuran-2-yl-methyl)-benzoesäureamid

10 g (62 mMol) 2-Aminomethyl-2,5-dimethoxy-tetrahydrofuran und 17 ml (123 mMol) Triethylamin wurden in 100 ml wasser freiem Tetrahydrofuran gelöst. Bei 0°C tropfte man 7,2 ml (62 mMol) Benzoylchlorid zu und rührte 1 h bei 0°C. Der Ansatz wurde filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt. Man er hielt 17 g Rohprodukt, das direkt weiter umgesetzt wurde.

b) 1-Benzamido-7-(3-benzamidomethyl-1-pyrrolyl)-6-trifluor methyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

1,5 g (4,1 mMol) des Produktes 11 und 1,2 g (4,5 mMol) des gemäß a) erhaltenen Produktes wurden 5 min in 70 ml Essig säure unter Rückfluß gekocht. Danach wurde im Vakuum einge engt und das resultierende Öl aus Tetrahydrofuran/Ether kri stallisiert. Ausbeute: 1,2 g (54%), Schmp. < 190°C (Zerset zung).
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 4,4 (2H); 6,2 (1H); 6,8 (2H); 7,3 (1H); 7,4-8,0 (11H); 8,8 (1H) und ca. 12 (breit) ppm.

Beispiel 31 1-Benzamido-7-(3-trifluoracetamidomethyl-1-pyrrolyl)-6-trifluor methyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion a) Herstellung von N-((2,5-Dimethoxy-tetrahydrofu ran-3-yl)-methyl)-trifluoressigsäureamid

50 g (0,31 Mol), 31,7 g (0,31 Mol) Triethylamin und etwas 4-(N,N-Dimethylamino)pyridin wurden in 300 ml wasserfreiem Ether gelöst und bei 0 bis 5°C tropfenweise mit 65,1 g (0,31 Mol) Trifluoressigsäureanhydrid, das in 100 ml wasser freiem Ether gelöst war, versetzt. Man rührte noch 1 h. Da nach wurde der Ansatz mit Wasser gewaschen, getrocknet und im Vakuum eingeengt. Man erhielt 70,5 g des verunreinigtes Produkt, das ohne weitere Reinigung weiter umgesetzt wurde.

b) 1-Benzamido-7-(3-trifluoracetamidomethyl-1-pyrrolyl)-6-tri flurmethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

3,0 g (8,2 mMol) Substanz des Beispiels 11 und 2,1 g (8,2 mMol) des gemäß a) erhaltenen Produktes wurden 10 min in 100 ml Eisessig unter Rückfluß gekocht. Danach wurde der An satz im Vakuum eingeengt und der Rückstand aus Ether/Petrole ther kristallisiert. Ausbeute: 4,0 g (91%), Schmp. 146-149°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 4,25 (2H); 6,2 (1H); 6,8 (2H); 7,3 (1H); 7,5-7,8 (4H); 8,0 (2H); 9,75 (1H); 11,8 (1H) und 12,7 (breit) ppm.

Beispiel 32 7-(3-Aminomethyl-1-pyrrolyl)-1-benzamido-6-trifluormethyl-chino xalin-2,3-(1H,4H)-dion

3,5 g (6,5 mMol) Substanz des Beispiels 31 wurden in 35 ml Tetra hydrofuran gelöst und mit 0,47 g (19,5 mMol) Lithiumhydroxid, ge löst in 50 ml Wasser, versetzt und die Mischung 1 h bei Raumtem peratur gerührt. Danach wurde das Tetrahydrofuran im Vakuum ent fernt und die resultierende wäßrige Phase mit 1 M Salzsäure neutralisiert. Der ausgefallene Niederschlag wurde abgesaugt. Ausbeute: 2,4 g (84%), Schmp. < 250°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 4,25 (2H); 6,2 (1H); 6,8 (2H); 7,3 (1H); 7,5-7,8 (4H); 8,0 (2H); 9,8 (1H); 11,8 (1H) und 12,8 (breit) ppm.

Beispiel 33 N-(1-(1-Benzamido-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-dion-7-yl)-pyrrol-3-yl)-methyl-N′-phenylharnstoff

1,1 g (2,5 mMol) Substanz des Beispiels 32, 0,33 g (2,7 mMol) Phenylisocyanat und eine Spatelspitze 4-(N,N-Dimethyla mino)-pyridin wurden in 25 ml Dimethylformamid 15 min auf 120°C erhitzt. Danach wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand aus Methylenchlorid/Ether kristallisiert. Ausbeute: 1,1 g (79%), Schmp. < 190°C (Zersetzung).
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 4,1 (2H); 6,2 (1H); 6,25 (1H); 6,7-6,9 (3H); 7,1-7,8 (9H); 8,0 (2H); 8,4 (1H) und ca. 12,2 (breit) ppm.

Beispiel 34 1-(2-Methylbenzamido)-7-(3-trifluoracetamidome thyl-1-pyrrolyl)-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

8 g (21,1 mMol) Substanz des Beispiels 22 und 6,5 g (25,3 mMol) Substanz des Beispiels 31a wurden in 200 ml Eisessig auf 110°C er wärmt. Nach 30 min gab man noch 3,3 g (12,6 mMol) Substanz des Beispiels 31a zu und erwärmte weitere 15 min. Danach wurde alles auf Eiswasser gegossen, der Niederschlag in Essigester gelöst, getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ether behandelt und abgesaugt. Ausbeute: 10,1 g (87%), Schmp. 240-243°C (Zersetzung).
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,4 (3H); 4,25 (2H); 6,1 (1H); 6,8 (2H); 7,2-7,7 (6H); 9,8 (1H) und ca. 11,6 (breit) ppm.

Beispiel 35 7-(3-Aminomethyl-1-pyrrolyl)-1-(2-methylbenzamido)-6-trifluor methyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

9,5 g (17,1 mMol) Substanz des Beispiels 34 wurden mit 1,2 g (50,1 mMol) Lithiumhydroxid analog Beispiel 32 hydrolysiert. Aus beute: 7,0 g (89%), Schmp. < 300°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,3 (3H); 3,9 (2H); ca. 5,5 (2H); 6,3 (1H); 6,8 (1H); 7,0 (1H) und 7,1-7,5 (6H) ppm.

Beispiel 36 N-(1-(1-(2-Methylbenzamido)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-7-yl)-pyrrol-3-yl)-methyl-N′-phenylharnstoff

1,5 g (3,3 mMol) Substanz des Beispiels 22 und 0,5 g (4,2 mMol) Phenylisocyanat wurden analog Beispiel 33 umgesetzt. Ausbeute: 1,1 g (58%), Schmp. 250-252°C (Zersetzung).
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,3 (3H); 4,2 (2H); 6,2 (1H); 6,3 (1H); 6,8 (2H); 7,1-7,5 (9H); 7,6 (2H); 8,4 (1H) und ca. 12 (breit) ppm.

Beispiel 37 N-(1-(1-(2-Methylbenzamido)-6-trifluormethyl-chinoxa lin-2,3-(1H,4H)-7-yl)-pyrrol-3-yl)-methyl-N′-pyridinium-4-yl- harnstoffacetat

0,45 g (4,8 mMol) 4-Aminopyridin und eine Spatelspitze 4-(N,N-Di methylamino)pyridin wurden in 100 ml wasserfreiem Dimethylform amid gelöst, mit 0,85 g (5,2 mMol) 1,1-Carbonyldiimidazol ver setzt und 30 min bei Raumtemperatur und anschließend weitere 30 min bei 50°C gerührt. Danach gab man 1,5 g (3,3 mMol) Substanz des Beispiels 22 zu und erwärmte 1,5 h auf 90°C. Nach dem Abkühlen wurde das Dimethylformamid im Vakuum entfernt und der Rückstand mit Wasser behandelt. Der Niederschlag wurde abgesaugt und chromatographisch (Fließmittel: Toluol/Aceton/ Methanol/Dimethyl formamid/Eisessig = 10/7/3/1/1) gereinigt. Ausbeute: 0,56 g (30%, Schmp. 252-253°C (Zersetzung).
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 1,9 (3H, Acetat); 2,4 (3H); 4,2 (2H); 6,2 (1H); 6,65 (1H); 6,85 (1H); 7,2 (1H); 7,3 (2H); 7,3-7,5 (3H); 7,6 (2H); 8,3 (2H); 9,0 (1H); und 12,0 (breit) ppm.

Beispiel 38 7-(3-(4-Benzylpiperazin-1-yl-methyl)-pyrrol-1-yl)-1-(2-methyl benzamido)-6-trifluormethyl-chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2 g (4,4 mMol) Substanz des Beispiels 26 und 1,6 g (9,1 mMol) 4-Benzylpiperazin wurden analog Beispiel 19 umgesetzt. Ausbeute: 1,7 g (63%), Schmp. 280-282°C.
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,4 (3H); 3,2-3,8 (10H); 4,2 (2H); 6,5 (1H); 7,0 (1H); 7,2 (1H); 7,25-7,9 (11H); 11,6 (1H); 12 (breit) und 12,8 (1H) ppm.

Beispiel 39 7-(3-Carboxy-1-pyrrolyl)-1-(2-methylbenzamido)-6-trifluormethyl- chinoxalin-2,3-(1H,4H)-dion

2,0 g (4,4 mMol) Substanz des Beispiels 26 und 0,7 g (2,6 mMol) 18-crown-6 wurden in 100 ml Aceton unter Rückfluß erhitzt. Dann wurden 1,2 g (4,5 mMol) Kaliumpermanganat vorsichtig in kleinen Portionen zugefügt und 30 min gekocht. Anschließend wurden 30 ml Wasser zugesetzt und nochmals 30 min unter Rückfluß erwärmt. Nach dem Abkühlen wurde filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde zwischen Essigester und wäßriger Natriumhy drogenkarbonat-Lösung verteilt. Die wäßrige Lösung wurde mit Salzsäure angesäuert und der Niederschlag abgesaugt. Ausbeute: 0,6 g (29%), Schmp. 305-306°C (Zersetzung).
¹H-NMR (D₆-DMSO): δ = 2,4 (3H); 6,6 (1H); 7,0 (1H); 7,3 (2H); 7,5 (3H); 7,7 (2H); 11,6 (1H); 12,0 (breit) und 12,7 (breit) ppm.

Claims

1. Amido-chinoxalindione der Formel I worin
R¹ Wasserstoff oder C₁-C₄-Alkyl bedeutet
n 0 oder 1 ist,
m 0, 1, 2, 3 oder 4 ist,
R² Wasserstoff, verzweigtes oder geradliniges C₁-C₆-Alkyl oder Phenyl, welches mit maximal zwei der folgenden Re sten substituiert sein kann: geradliniges oder verzweig tes C₁-C₄-Alkyl, OR⁶, NH₂, NO₂, NHCOR⁶, CN, CF₃, OCF₃, -CO₂R⁶, F, Cl, Br, J, -CO-R⁶ oder SO₂R⁶, worin R⁶ Wasserstoff, C₁-C₄-Alkyl, Phenyl oder Benzyl ist, be deutet,
R³ Wasserstoff, Fluor, Chlor, Brom, Jod, C₁-C₄-Alkyl, OR⁷, -CO-R⁷, NH₂, NO₂, -NH-CO-R⁷, CF₃, CN oder bedeutet, worin R⁷ Wasserstoff, C₁-C₄-Alkyl oder CF₃ ist und q die Zahl 0, 1 oder 2 ist und R⁸ H, C₁-C₄-Alkyl, Phenyl, Phenylsulfonyl, NO₂, CN, -COO(CH₂)_rR¹⁰, -CONH(CH₂)_rR¹⁰, -CO-R¹⁰, -CH=CHCONHR¹⁰, -CH₂-NR¹⁰R¹¹, -CH₂NH-CY-(CH₂)_rR¹¹, -CH=CH-COOR¹⁰, -CH=NOR¹⁰ -CH=NR¹⁰ -CH₂-NH-CY-Z-(CH₂)_rR¹¹, -CH₂-NH-CO-CF₃, ist, worin Y O oder N, Z oder NH und R¹ Wasserstoff, geradliniges oder ver zweigtes C₁-C₄-Alkyl, Phenyl, Benzyl, Pyridyl oder Ben zylhydryl, r 0, 1, 2, 3 oder 4 und R¹¹ Wasserstoff, ge radliniges oder verzweigtes C₁-C₄, Phenyl, bedeuten, und R⁹ Wasserstoff oder C₁-C₄-Alkyl ist und die in R⁸, R¹⁰ und R¹¹ enthaltenen Ben zolringe noch durch ein oder zwei der folgenden Reste substituiert sein können: NH₂ OCH₃, OCH₂CH₃, Cl, Br, OCF₃, F, CH₃, C₂H₅, NO₂, -COOR¹, -CONHR¹, -CH₂NHR¹, -CH₂NH- CO-CF₃, -CH₂NH-CO-CH₃, -NH-SO₂-CH₃, -NH-CO-CH₃ oder -NH-CO-CF₃ und
R⁴ und R⁵, die gleich oder verschieden sein können und Wasser stoff, C₁-C₄-Alkyl, C₁-C₄-Alkoxy, Trifluormethyl, Tri fluormethoxy, Fluor, Chlor, Brom, Jod, Nitro, Cyano oder einen anellierten Benzolring, der seinerseits bis zu zwei der obigen für R⁴ bzw. R⁵ genannten Reste tragen kann, bedeuten
und ihre tautomeren, isomeren und enantiomeren Formen sowie ihre physiologisch verträglichen Salze.

2. Amido-chinoxalindione der Formel I gemäß Anspruch 1 zur Ver wendung bei der Bekämpfung von Krankheiten.

3. Verwendung der Amido-chinoxalindione der Formel I gemäß An spruch 1 zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung neurodegenerativer Erkrankungen, neurotoxischer Störungen des zentralen Nervensystems, traumatischer Läsionen des Gehirns und des Rückenmarks, sowie von Epilepsie, Angstzuständen und Depressionen.

4. Arzneimittelzubereitungen zur peroralen, parenteralen und in traperitonealen Anwendung, enthaltend neben den üblichen Arzneimittelhilfsstoffen pro Einzeldosis 0,1 bis 100 mg/kg Körpergewicht mindestens eines Amido-chinoxalindions I gemäß Anspruch 1.

5. Arzneimittelzubereitungen zur intravenösen Anwendung, enthal tend neben den üblichen Arzneimittelhilfsstoffen 0,001 bis 10 Gew.-% mindestens eines Amido-chinoxalindions I gemäß An spruch 1.