DE4412177C1

DE4412177C1 - Hemmer von Apoptose

Info

Publication number: DE4412177C1
Application number: DE19944412177
Authority: DE
Inventors: Peter Prof Dr Krammer; Klaus-Mich Dr Debatin; Michael Westendorp; Rainer Dr Frank; Jens Dr Dhein; Henning Walczak; Eckart Knipping; Kirstin Dr Stricker
Original assignee: Deutsches Krebsforschungszentrum DKFZ
Current assignee: Deutsches Krebsforschungszentrum DKFZ
Priority date: 1994-04-08
Filing date: 1994-04-08
Publication date: 1995-11-02
Anticipated expiration: 2014-04-09

Description

Die Erfindung betrifft Verbindungen, die sich zur Hemmung von Apoptose eignen, sowie Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung.

Apoptose ist die Bezeichnung für programmierten Zelltod. Dieser findet sich, z. B. bei der Organentwicklung und Metamorphose, der Gewebeatrophie und Tumorre gression. Apoptose ist mit einer Kondensation des Cytoplasmas, einem Verlust von Plasmamembranvilli, einer Segmentation des Kerns und extensivem Abbau chro mosomaler DNA verbunden (vgl. Oehm, A. et al., The Journal of Biological Chemi stry, Band 267, Nr. 15 (1992), Seiten 10709-10715).

In Zellen, die für Apoptose positiv sind, findet sich oftmals ein mit APO-1 bezeich netes Zell-Oberflächenprotein. Dieses Glycoprotein wird der Tumornekrosefaktor- /Nervenwachstumsfaktor-Rezeptor-Familie zugerechnet. Durch Crosslinking von APO-1 über einen anti-APO-1-Antikörper wird Apoptose bei den genannten Zellen induziert (vgl. Oehm, A. et al., supra). Gleiches scheint auch durch Bindung eines mit APO-1-Ligand bezeichneten löslichen oder Membran-gebundenen Proteins an APO-1 bewirkt zu werden (vgl. Suda, T. und Nagata, S., J. Exp. Med., The Rocke feller University Press, Band 179 (1994), Seiten 873-879).

Über die Hemmung von Apoptose ist dagegen nichts bekannt. Dies wäre aber umso notwendiger, da jüngste Arbeiten des Anmelders zeigen, daß Apoptose auch bei verschiedenen Erkrankungen, wie AIDS und Autoimmunerkrankungen, auftritt. Bei AlDS scheint Apoptose für die starke Abnahme der CD4-T Zellen verantwort lich zu sein.

Der vorliegenden Erfindung liegt somit die Aufgabe zugrunde, ein Mittel bereitzu stellen, mit dem Apoptose gehemmt werden kann.

Erfindungsgemäß wird dies durch eine Verbindung erreicht, die mindestens eine extrazelluläre APO-1-Domäne und einen Träger aufweist, wobei die Domäne(n) und der Träger in einem Individuum nicht als fremd angesehen werden.

Der Ausdruck "Träger" umfaßt jegliche Verbindung, an die ein oder mehrere extrazelluläre APO-1 Domänen gebunden sein können.

In bevorzugter Ausführungsform ist der Träger ein Protein, z. B. Serumalbumin, Hämoglobin, Fribinogen, Kollagen oder ein Fc-Teil eines Antikörpers, wobei letzte rer bevorzugt ist. In ganz bevorzugter Ausführungsform ist die erfindungsgemäße Verbindung ein Fusionsprotein.

Eine erfindungsgemäße Verbindung kann allein oder in Kombination mit einer oder allen Komponenten verwendet werden, von:

a) eine APO-1 hemmende Verbindung,
b) eine weitere den APO-1-Ligand hemmende bzw. abfangende Verbindung und
c) eine den intrazellulären APO-1-Signalweg hemmende Verbindung, wobei die Komponente(n) in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird (wer den).

Der Ausdruck "APO-1 hemmende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung von APO-1 geeignete Verbindung. Vorzugsweise ist dies ein blockierender, nicht cytotoxischer anti-APO-1-Antikörper oder ein anti-APO-1-Antikörper ohne Fc-Teil, z. B. ein F(ab)-, F(ab)₂- oder F_v-Fragment eines anti-APO-1-Antikörpers. Die Her stellung eines solchen Fragments erfolgt in üblicher Weise, wobei der Fachmann z. B. von dem in Oehm et al., supra beschriebenen anti-APO-1-Antikörper oder von dem in Dhein, J. et al., The Journal of Immunology, Band 149, Nr. 10, (1992), Seiten 3166-3173 beschriebenen anti-APO-1-F(ab)₂-Fragment ausgeht. Letzteres kann auch direkt eingesetzt werden.

Das Fehlen des Fc-Teils in vorstehendem Antikörper verhindert das Crosslinking von gebundenem APO-1 und somit die Induktion von Apoptose. Überraschender weise wird APO-1 durch einen solchen Antikörper gehemmt.

Als weitere bevorzugte "APO-1 hemmende Verbindung" ist ein APO-1-Ligand- Analogon zu nennen. Ein solches bindet nach wie vor an APO-1, induziert jedoch nicht mehr den intrazellulären APO-1-Signalweg. Die Herstellung eines solchen Analogons erfolgt in üblicher Weise, wobei der Fachmann z. B. von dem in Suda, T. und Nagata, S., supra beschriebenen APO-1-Ligand ausgeht.

Der Ausdruck "APO-1-Ligand hemmende bzw. abfangende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung bzw. zum Abfangen des APO-1-Ligand geeignete Verbin dung. Vorzugsweise ist dies eine der folgenden Verbindungen:

- ein anti-APO-1-Ligand-Antikörper,
- ein APO-1,
- eine extrazelluläre APO-1-Domäne,
- eine Verbindung mit mindestens einer extrazellulären APO-1-Domäne und einem Träger,
- ein eine APO-1-Ligand-Bindungsstelle aufweisendes Peptid und
- eine Verbindung mit mindestens einem eine APO-1-Ligand-Bindungs stelle aufweisenden Peptid und einem Träger.

Die Herstellung einer solchen Verbindung erfolgt in üblicher Weise. Der Fachmann wird zur Herstellung eines anti-APO-1-Ligand-Antikörpers z. B. von dem in Suda, T. und Nagata, S., supra beschriebenen APO-1-Ligand ausgehen. Er wird darauf achten, daß der Fc-Teil des Antikörpers in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird. Verfahren, die dies ermöglichen, sind ihm bekannt. Ferner wird der Fachmann hinsichtlich der Herstellung von APO-1 bzw. einer extrazellulären APO-1-Domäne z. B. von dem in der EP-92 107 060.3 beschriebenen APO-1 bzw. seiner extrazellulären Domäne ausgehen. Desweiteren wird er zur Herstellung eines eine APO-1-Ligand-Bindungsstelle aufweisenden Peptids z. B. die Kombination aus vorstehendem APO-1-Ligand und vorstehendem APO-1 bzw. seiner extrazellulären Domäne nutzen.

Die Herstellung einer Verbindung mit mindestens einer extrazellulären APO-1- Domäne und einem Träger wird nachstehend beispielhaft beschrieben. In analoger Weise kann eine Verbindung mit mindestens einem eine APO-1-Ligand-Bindungs stelle aufweisenden Peptid und einem Träger hergestellt werden.

Der Ausdruck "eine den intrazellulären APO-1-Signalweg hemmende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung des intrazellulären APO-1-Signalwegs geeignete Verbindung.

Eine erfindungsgemäße Verbindung eignet sich besonders zur Hemmung von Apoptose bei einer mit einer HIV-Infektion assoziierten Erkrankung. Die erfindungsgemäße Verbindung kann hierzu allein oder in Kombination mit einer oder allen Komponenten verwendet werden, von:

a) eine APO-1 hemmende Verbindung,
b) eine weitere den APO-1-Ligand hemmende bzw. abfangende Verbindung,
c) eine den intrazellulären APO-1- Signalweg hemmende Verbindung,
d) eine den TAT-Rezeptor hemmende Verbindung,
e) eine TAT hemmende bzw. abfangende Verbindung,
f) eine den intrazellulären TAT-Rezeptor-Signalweg hemmende Verbindung,
g) eine den CD4-Rezeptor hemmende Verbindung,
h) eine gp 120 hemmende bzw. abfangende Verbindung und
i) eine den intrazellulären CD4-Rezeptor-Signalweg hemmende Verbindung, wobei die Komponente(n) in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird(werden).

Der Ausdruck "eine den TAT-Rezeptor hemmende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung des TAT-Rezeptors geeignete Verbindung. Vorzugsweise ist dies ein anti-TAT-Rezeptor-Antikörper. Die Herstellung eines solchen erfolgt in üblicher Weise. Der Fachmann wird darauf achten, daß der Fc-Teil des Antikörpers in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird. Verfahren, die dies ermöglichen, sind dem Fachmann bekannt.

Als weitere bevorzugte "den TAT-Rezeptor hemmende Verbindung" ist ein TAT- Analogon zu nennen. Ein solches bindet nach wie vor an den TAT-Rezeptor, induziert jedoch nicht mehr den intrazellulären TAT-Rezeptor-Signalweg. Die Herstellung eines solchen Analogons erfolgt in üblicher Weise, wobei der Fach mann z. B. von dem in Arya, S., K., et al., Science, Band 229 (1985), Seiten 69- 73 beschriebenen TAT ausgeht.

Der Ausdruck "eine TAT-hemmende bzw. abfangende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung bzw. zum Abfangen von TAT geeignete Verbindung. Vorzugsweise ist dies eine der folgenden Verbindungen:

- ein anti-TAT-Antikörper,
- ein TAT-Rezeptor,
- eine extrazelluläre TAT-Rezeptor-Domäne,
- eine Verbindung mit mindestens einer extrazellulären TAT-Rezeptor- Domäne und einem Träger,
- ein eine TAT-Bindungsstelle aufweisendes Peptid,
- eine Verbindung mit mindestens einem eine TAT-Bindungsstelle aufweisenden Peptid und einem Träger,
- eine TAT-Bindungsstelle auf Nukleinsäurebasis und
- eine transdominante TAT-Mutante.

Die Herstellung einer solchen Verbindung erfolgt in üblicher Weise. Der Fachmann wird zur Herstellung eines anti-TAT-Antikörpers z. B. von dem in Arya, S., K. et al., supra beschriebenen TAT ausgehen. Er wird darauf achten, daß der Fc-Teil des Antikörpers in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird. Verfahren, die das ermöglichen, sind ihm bekannt. Ferner wird er hinsichtlich einer TAT-Bindungs stelle auf Nukleinsäurebasis z. B. von der in Feng, S. und Holland, E., C., Nature, Band 334 (1988), Seiten 165-167 beschriebenen TAT-LTR-Sequenz ausgehen.

Desweiteren wird der Fachmann bezüglich einer transdominanten TAT-Mutante z. B. von der in Echetebu, C., O. und Rice, A., P., J. Acquir. Immune Def. Syn drome, Band 6, (1993), Seiten 550-557 beschriebenen Mutante ausgehen.

Der Ausdruck "eine den intrazellulären TAT-Rezeptor-Signalweg hemmende Ver bindung" umfaßt jegliche zur Hemmung des intrazellulären TAT-Rezeptor-Signal wegs geeignete Verbindung.

Der Ausdruck "eine den CD4-Rezeptor hemmende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung des CD4-Rezeptors geeignete Verbindung. Vorzugsweise ist dies ein anti-CD4-Rezeptor-Antikörper. Die Herstellung eines solchen erfolgt in üblicher Weise, wobei der Fachmann z. B. von dem in Capon, D., J. und Ward, R., H., R., Annu. Rev. Immunol. 9, (1991), Seiten 649-678, beschriebenen CD4-Rezeptor ausgeht. Der Fachmann wird darauf achten, daß der Fc-Teil des Antikörpers in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird. Verfahren, die das ermöglichen, sind dem Fachmann bekannt.

Als weitere bevorzugte "den CD4-Rezeptor hemmende Verbindung" ist ein gp 120- Analogon zu nennen. Ein solches bindet nach wie vor an den CD4-Rezeptor, induziert jedoch nicht mehr den intrazellulären CD4-Rezeptor-Signalweg. Die Her stellung eines solchen Analogons erfolgt in üblicher Weise, wobei der Fachmann z. B. von dem in Capon, D., J. und Ward, R., H., R., supra beschriebenen gp 120 ausgeht.

Der Ausdruck "eine gp 120 hemmende bzw. abfangende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung bzw. Abfangung von gp 120 geeignete Verbindung. Vor zugsweise ist dies eine der folgenden Verbindungen:

- ein anti-gp 120-Antikörper,
- ein CD4-Rezeptor,
- eine extrazelluläre CD4-Rezeptor-Domäne,
- eine Verbindung mit mindestens einer extrazellulären CD4-Rezeptor- Domäne und einem Träger,
- ein eine gp 120-Bindungsstelle aufweisendes Peptid und
- eine Verbindung mit mindestens einem eine gp 120-Bindungsstelle aufweisenden Peptid und einem Träger.

Die Herstellung einer solchen Verbindung erfolgt in üblicher Weise. Der Fachmann wird zur Herstellung eines anti-gp 120-Antikörpers z. B. von dem in Capon, D.J. und Ward, R., H., R., supra beschriebenen gp 120 ausgehen. Er wird darauf achten, daß der Fc-Teil des Antikörpers in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird. Verfahren, die das ermöglichen, sind ihm bekannt. Ferner wird der Fachmann hinsichtlich der Herstellung eines CD4-Rezeptors bzw. einer extrazel lulären CD4-Rezeptor-Domäne z. B. von dem in Capon, D., J. und Ward, R., H., R., supra beschriebenen CD4-Rezeptor bzw. seiner extrazellulären Domäne ausgehen.

Desweiteren wird er zur Herstellung eines eine gp 120-Bindungsstelle aufweisen den Peptids z. B. die Kombination aus vorstehendem gp 120 und vorstehendem CD4-Rezeptor bzw. seiner extrazellulären Domäne nutzen.

Die Herstellung einer Verbindung mit mindestens einer extrazellulären CD4-Rezep tor-Domäne bzw. einem mindestens eine gp 120-Bindungsstelle aufweisenden Peptid und einem Träger kann in analoger Weise erfolgen, wie nachstehend für eine Verbindung mit mindestens einer extrazellulären APO-1-Domäne und einem Träger beschrieben.

Der Ausdruck "eine den intrazellulären CD4-Rezeptor-Signalweg hemmende Verbindung" umfaßt jegliche zur Hemmung des intrazellulären CD4-Rezeptor- Signalwegs geeignete Verbindung.

Eine erfindungsgemäße Verbindung kann in üblicher Weise hergestellt werden. Im Falle eines Fusionsproteins erweist sich das folgende Herstellungsverfahren als günstig:

a) Amplifikation einer DNA durch übliche PCR-Technik, wobei die DNA für mindestens eine extrazelluläre APO-1-Domäne und eine am 3′- Ende dieser angebrachte Bindungsregion codiert,
b) Amplifikation einer DNA durch übliche PCR-Technik, wobei die DNA für einen Protein-Träger und eine am 5′-Ende des Protein-Trägers angebrachte Bindungsregion codiert,
c) Vereinigung der amplifizierten DNAs von (a) und (b) und weitere gemeinsame Amplifikation dieser durch übliche PCR-Technik, wobei ein dem 5′-Ende der DNA der APO-1-Domäne entsprechender Primer und ein dem 3′-Ende der DNA des Protein-Trägers entsprechender Primer verwendet werden, wodurch ein amplifiziertes, beide DNAs in Fusion enthaltendes DNA-Fragment erhalten wird, und
d) Insertion des DNA-Fragments von (c) in einen Expressionsvektor und Expression des DNA-Fragments in üblicher Weise.

In bevorzugter Ausführungsform ist die Bindungsregion von (a) und (b) eine Antikörper-Hinge-Region oder ein Teil davon. Ferner kann sie auch eine Thrombin spaltstelle sein.

In vorstehendem Herstellungsverfahren werden verschiedene DNAs durch übliche PCR-Technik amplifiziert. Als DNA, die für mindestens eine extrazelluläre APO-1- Domäne codiert, wird der Fachmann z. B. die in der EP-92 107 060.3, supra beschriebene DNA als Basis verwenden. Dieser wird er am 3′Ende eine für eine Bindungsregion codierende DNA anfügen. Im Falle einer für eine Hinge-Region eines humanen Antikörpers oder einen Teil davon codierenden DNA wird der Fachmann z. B. auf die in Dübel, S., et al., Methods in Molecular and Cellular Biology, Band 3 (1992), Seiten 47-52 beschriebene DNA zurückgreifen. Hinsicht lich der für den Protein-Träger, z. B. Fc-Teil eines humanen Antikörpers, codieren den DNA wird der Fachmann z. B. ebenso auf die in Dübel, S. et al., supra be schriebene DNA zurückgreifen.

Die Expression des amplifizierten DNA-Fragments erfolgt in üblichen Vektoren, wie pCDN83, pCEV4 und pCDM8 zur Expression in tierischen Zellen, pGEMEX und pUC zur Expression in E. coli., sowie pY100 und YCpAD1 zur Expression in Hefe.

Als tierische Zellen eignen sich insbesondere L-, COS- und CHO-Zellen, während als prokaryotische Mikroorganismen insbesondere E. coli-Stämme und als Hefezel len besonders solche von Saccharomyces und Bichia pastoris zu nennen sind.

Die vorliegende Erfindung eröffnet einen neuen Weg, Erkrankungen zu therapieren, bei denen Apoptose spezieller Zellen eine wichtige Rolle spielt. Insbesondere für die Therapie von AlDS stellt die vorliegende Erfindung einen Durchbruch dar.

Die nachstehenden Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1 Herstellung eines Fusionsproteins, in dem eine extrazelluläre APO-1-Domäne über eine Antikörner-Hinge-Region an einen Fc- Teil eines humanen Antikörpers fusioniert ist

Zur Herstellung vorstehenden Fusionsproteins wurden eine eine extrazelluläre APO- 1-Domäne codierende cDNA (vgl. Oehm, A. et al., supra) und eine einen Fc-Teil eines humanen Antikörpers codierende cDNA (vgl. Dübel, S. et al., supra) einer üblichen PCR-Amplifikation unterzogen.

Als Primer für die cDNA der extrazellulären APO-1-Domäne wurden verwendet:
5′ GCG AAG CTT GCC ACC ATG GTG GGC ATC TGG ACC CTC 3′, wodurch eine Hind III-Stelle upstream einer vollständigen das Initiator-Methionin umgebenden Kozak-Consensus-Region eingeführt wird, und 5, GAC ACA ACA TTT GCG CTC GTT AGA TCT GGA TCC TTC 3′, der für das 3′-Ende der extrazellulären APO-1- Domäne und die ersten 18 bp der Hinge-Region codiert.

Als Primer für die cDNA des Fc-Teils wurden verwendet:
5′ GAG CGC AAA TGT TGT GTC GAG TGC 3′, der für die ersten 18 bp der Hinge Region und das 5′-Ende des Fc-Teils codiert, und 5, ATT AAG CAT TCT AGA TCA TTT ACC CGG AGA CAG GGA 3′, der für das 3′-Ende des Fc-Teils codiert und eine Xbal-Stelle downstream des Stopcodons einführt.

Die erhaltenen PCR-Produkte wurden in einem "Iow melting point"-Agarosegel aufgetrennt und die Gelstückchen, die DNA-Moleküle richtiger Größe enthielten, wurden vereinigt. Mit einer Probe davon wurde eine weitere PCR-Amplifikation durchgeführt. Als Primer wurden jene vorstehenden verwendet, die dem 5′- Ende der extrazellulären APO-1-Domäne bzw. dem 3′-Ende des Fc-Teils entspra chen. Damit war es möglich, die extrazelluläre APO-1-Domäne über die gemeinsa me Hinge-Region an den Fc-Teil zu fusieren. Es wurde ein "Fusions"-DNA-Frag ment erhalten.

Dieses Fragment wurde mit HindIII und Xbal gespalten, über ein Agarosegel gerei nigt und in dem Vektor pCDM8 kloniert. Die Sequenz des Inserts von pCDM8 wurde durch Dideoxynukleotid-Sequenzierung bestimmt.

Beispiel 2 Hemmung von Apoptose bei Apoptose-positiven Zellen

SKW 6.4 Zellen (vgl. Oehm, A. et al., supra) sind Apoptose-sensitiv, d. h. bei ihnen kann Apoptose induziert werden, z. B. durch Bindung eines anti-APO-1-Antikörpers.

SKW 6.4 Zellen wurden 24 h mit einem anti-APO-1-Antikörper in Gegenwart verschiedener Mengen des Fusionsproteins von Beispiel 1 (hu APO-1-Ig) bzw. von anti-APO-1-F(ab)₂ (vgl. vorstehend) inkubiert. Die Hemmung der Apoptose wurde bestimmt (vgl. Figur). Es zeigte sich, daß das Fusionsprotein von Beispiel 1 und anti-APO-1-F(ab)₂ eine starke Apoptose-Hemmungs-Wirkung aufweisen. Diese ist bei dem Fusionsprotein besonders stark.

Claims

1. Verbindung mit mindestens einer extrazellulären APO-1-Domäne und einem Träger, dadurch gekennzeichnet, daß die Domäne(n) und der Träger in einem Individuum nicht als fremd angesehen werden.

2. Verbindung nach Anspruchs dadurch gekennzeichnet, daß der Träger ein Protein ist.

3. Verbindung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Protein ein Fc-Teil eines Antikörpers ist.

4. Verbindung nach einem der Ansprüche 2-3, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung ein Fusionsprotein ist.

5. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 4, umfassend die folgenden Verfahrensschritte:

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Bindungs region von (a) und (b) eine Antikörper-Hinge-Region oder ein Teil davon ist.

7. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4 zur Herstel lung eines Arzneimittels zur Hemmung von Apoptose.

8. Verwendung nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß ferner zur Herstellung des Arzneimittels eine bis alle Komponenten verwendet werden, von:

a) eine APO-1-hemmende Verbindung
b) eine weitere den APO-1 Ligand hemmende bzw. abfangende Ver bindung, und
c) eine den intrazellulären APO-1-Signalweg hemmende Verbindung, wobei die Komponente(n) in einem Individuum nicht als fremd ange sehen wird (werden).

9. Verwendung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Kom ponente (a) umfaßt:

- einen blockierenden, nicht-cytotoxischen anti-APO-1-Antikörper,
- einen anti-APO-1-Antikörper ohne Fc-Teil und
- ein APO-1-Ligand-Analogon und

die Komponente (b) umfaßt:

- einen anti-APO-1-Ligand-Antikörper,
- ein APO-1,
- eine extrazelluläre APO-1-Domäne,
- ein eine APO-1-Ligand-Bindungsstelle aufweisendes Peptid und
- eine Verbindung mit mindestens einem eine APO-1-Ligand-Bindungs stelle aufweisenden Peptid und einem Träger.

10. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4 zur Herstel lung eines Arzneimittels zur Hemmung von Apoptose bei einer mit einer HIV-Infektion assoziierten Erkrankung.

11. Verwendung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß ferner zur Herstellung des Arzneimittels eine bis alle Komponenten verwendet werden, von:

a) eine APO-1 hemmende Verbindung,
b) eine weitere den APO-1-Ligand hemmende bzw. abfangende Verbin dung,
c) eine den intrazellulären APO-1-Signalweg hemmende Verbindung,
d) eine den TAT-Rezeptor hemmende Verbindung,
e) eine TAT-hemmende bzw. abfangende Verbindung,
f) eine den intrazellulären TAT-Rezeptor-Signalweg hemmende Ver bindung,
g) eine den CD4-Rezeptor hemmende Verbindung,
h) eine gp 120 hemmende bzw. abfangende Verbindung und
i) eine den intrazellulären CD4-Rezeptor-Signalweg hemmende Ver bindung, wobei die Komponente(n) in einem Individuum nicht als fremd angesehen wird(werden).

12. Verwendung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die Komponente (a) umfaßt:

- einen blockierenden, nicht-cytotoxischen anti-APO-1-Antikörper,
- einen anti-APO-1-Antikörper ohne Fc-Teil und
- ein APO-1-Ligand-Analogon,

die Komponente (b) umfaßt

- einen anti-APO-1-Ligand-Antikörper,
- ein APO-1,
- eine extrazelluläre APO-1-Domäne,
- ein eine APO-1-Ligand-Bindungsstelle aufweisendes Peptid und
- eine Verbindung mit mindestens einem eine APO-1-Ligand-Bindungs stelle aufweisenden Peptid und einem Träger,

die Komponente (d) umfaßt

- einen anti-TAT-Rezeptor-Antikörper und
- ein TAT-Analogon,

die Komponente (e) umfaßt:

- einen anti-TAT-Antikörper,
- einen TAT-Rezeptor,
- eine extrazelluläre TAT-Rezeptor-Domäne,
- eine Verbindung mit mindestens einer extrazellulären TAT-Rezeptor- Domäne und einem Träger,
- ein eine TAT-Bindungsstelle aufweisendes Peptid,
- eine Verbindung mit mindestens einem eine TAT-Bindungsstelle aufweisenden Peptid und einem Träger,
- eine TAT-Bindungsstelle auf Nukleinsäurebasis und
- eine transdominante TAT-Mutante,

die Komponente (g) umfaßt:

- einen anti-CD4-Rezeptor-Antikörper und
- ein gp 120-Analogon und

die Komponente (h) umfaßt:

- einen anti-gp 120-Antikörper,
- einen CD4-Rezeptor,
- eine extrazelluläre CD4-Rezeptor-Domäne,
- eine Verbindung mit mindestens einer extrazellulären CD4-Rezeptor- Domäne und einem Träger,
- ein eine gp 120-Bindungsstelle aufweisendes Peptid und
- eine Verbindung mit mindestens einem eine gp 120-Bindungsstelle aufweisenden Peptid.