DE3410436A1 - Verfahren zum sterilisieren eines durch bakterien verunreinigten enzyms - Google Patents
Verfahren zum sterilisieren eines durch bakterien verunreinigten enzymsInfo
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Description
Anmelder : SNOW BRAND MILK PRODUCTS CO. LTD,
1-1, Naebo-cho 6-chome, Higashi-ku, Sapporo, Hokkaido, Japan
Verfahren zum Sterilisieren eines durch Bakterien verunreinigten Enzyms.
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Sterilisieren
eines Enzyms, das während der Lagerung oder durch wiederholte Verwendung des Enzyms durch Bakterien verunreinigt
worden ist.
Es gibt viele Fälle, in denen ein Enzym durch Bakterien während der Lagerung des Enzyms oder durch wiederholte
Verwendung des Enzyms verunreinigt wird. Beispielsweise verunreinigen Bakterien während der Verwendung eines in
einer wässrigen Lösung gelösten Enzyms diese Lösung/oder
Bakterien haften während der wiederholten Verwendung eines
sogenannten festgelegten oder fixierten Enzyms an dem fixierten Enzym, wodurch eine Herabsetzung der enzymatischen
Aktivität bewirkt wird.
Insbesondere in dem Fall des fixierten Enzyms, bei dem das
Substrat des Enzyms eine Zusammensetzung von Bestandteilen aufweist, die das Wachstum von Bakterien begünstigt, und
in dem Fall, wenn die Behandlungsbedingungen bei der Verwendung eines fixierten Enzyms in Bezug auf die Umgebung
das Wachstum der Bakterien begünstigen, wird die Verunreinigung des Enzyms durch Bakterien beträchtlich.
Darüber hinaus wird bei dem fixierten Enzym, das durch Bakterien
verunreinigt worden ist, nicht nur die Verringerung der enzymatischen Aktivität sondern auch die Verschlechterung
der Qualität des Substrats oder Trägers, auf den das Enzym aufgebracht worden ist, ganz merklich.
Zur Zeit werden z.B. lactose-hydrolysierte Molkesirupe und lactose-hydrolysierte Milch industriell . unter Verwendung
einer fixierten oder unbeweglich gemachten Lactase
hergestellt. Die fixierte Lactase wird hergestellt, indem Lactase, die Lactose in tierischer Milch zu Glucose und
Galactose hydrolysiert, in chemische Bindung mit einem wasserunlöslichen Träger, z.B. Chitin und Harz, gebracht
wird oder indem Lactase.in Zellulosetriacetat, Polyacrylamidgel
usw. eingefangen wird.
Bei der Verwendung einer derartigen fixierten Lactase wird
die fixierte Lactase jedoch im allgemeinen kontinuierlich und wiederholt unter den Bedingungen, daß sie in einen
Reaktor gepackt wird, verwendet. Und zwar ist die Art der Verwendung der fixierten Lactase von der chargenweisen
Verwendung freier Lactase verschieden. Demzufolge ist bei der Behandlung der Milch, selbst wenn sterilisierte Milch
verwendet wird und der Reaktor und die mechanischen Einrichtungen,
mit denen die sterilisierte Milch in Kontakt gebracht wird, sterilisierend behandelt werden, das Wachsen
und Fortpflanzen von Mikroorganismen während der wiederholten Verwendung des in den Reaktor gepackten fixierten
Enzyms unvermeidbar, und als Folge der erhöhten Anzahl verunreinigender Bakterien wird die Qualität der oben
beschriebenen Produkte verschlechtert. Es wird deshalb unvermeidbar, die Anzahl der wiederholten Verwendungen der
fixierten Lactase zu beschränken, was zu Kostennachteilen führt.
In Anbetracht der beschriebenen Tatsachen sind verschiedene Behandlungsmöglichkeiten für den Fall der Verwendung
eines Enzyms oder eines fixierten Enzyms erfunden worden, und das Ausgangsmaterial wird beispielsweise unter Bedingungen,
die so aseptisch wie möglich sind, oder unter Bedingungen, die für die Fortpflanzung der Mikroorganismen
ungeeignet sind, z.B. bei einer tiefen Temperatur unterhalb 1O°C oder bei einer hohen Temperatur von 60 bis 70°C,
behandelt.
Hierbei gibt es jedoch Probleme beim Arbeiten und bei den
Produktionskosten, um das enzymatische Reaktionssystem unter aseptischen Bedingungen zu halten, und weiterhin ist
die enzymatische Reaktion in einem niedrigen Temperaturbereich nicht wirksam und praktisch durchführbar. Andererseits
ist in einem hohen Temperaturbereich die Verringerung der enzymatischen Aktivität unvermeidbar, ausgenommen
für spezielle Enzyme wie wärmebeständige Enzyme, z.B. Glucose-Isomerase, und die fixierten Enzyme derselben.
Weiterhin wurde als ein Mittel zum Durchführen der Sterilisierung des durch Bakterien verunreinigten Enzyms oder des
Substrat- oder Trägersystems, auf dem das verunreinigte Enzym reagiert, oder zum Durchführen der Entfernung von
Bakterien davon, ohne daß die enzymatische Aktivität verringert wird oder das Enzym entaktiviert wird, Sterilisierung
durch ein bakterizides (keimtötendes) Mittel oder Entfernung von Bakterien durch ein Membranfilter in Betracht
gezogen, wobei jedoch die Anwendung des bakteriziden Mittels bei der Verwendung von Enzymen auf dem Gebiet
von Nahrungsmitteln begrenzt ist, und es ist ein Nachteil, daß die Entfernung von Bakterien durch ein Membranfilter
schwierig auf das Substratsystem anzuwenden ist, z.B. auf Milchprotein, das kolloidale Substanzen enthält,
wobei nur solche Substratsysteme mit einer einfachen Zusammensetzung ausgenommen sind, die niedermolekulare
Bestandteile umfassen.
Wie vorstehend ausgeführt wurde, ist bisher kein praktisch
durchführbares Verfahren zur wirksamen Sterilisierung des durch Bakterien verunreinigten Enzyms gefunden worden.
Die Erfinder der vorliegenden Erfindung haben gefunden, daß durch Eintauchen des mit Bakterien verunreinigten
Enzyme in einen mehrwertigen Alkohol das Enzym in wirksamer
Weise sterilisiert werden kann, ohne daß eine wesentliche Verringerung seiner enzymatischen Aktivität oder das
Inaktivwerden desselben bewirkt wird, und sie haben die vorliegende Erfindung fertiggestellt.
Hauptaufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, ein Verfahren
zum wirksamen Sterilisieren eines durch Bakterien verunreinigten Enzyms zu schaffen, bei dem keine wesentliche
Verringerung der enzymatischen Aktivität des Enzyms oder sein Inaktivwerden eintritt.
Weitere Aufgaben und Gegenstände der vorliegenden Erfindung ergeben sich aus der folgenden Beschreibung.
Das kennzeichnende Merkmal der vorliegenden Erfindung liegt in einer Behandlung des Eintauchens des Enzyms» das durch
Bakterien verunreinigt worden ist, in einen mehrwertigen Alkohol, um dadurch das Enzym zu sterilisieren.
In der Beschreibung wird auch auf Zeichnungen Bezug genommen.
In den Zeichnungen zeigen
Figur 1 für den Fall, daß ein durch Bakterien verunreinigtes Enzym in eine wässrige Lösung von Glycerol
eingetaucht wird, den Einfluß der Konzentration des darin enthaltenen Glycerols, der Temperatur
und der Zeit des Eintauchens jeweils auf die Verringerung der Anzahl von Bakterien auf bzw. in
dem verunreinigten Enzym und
Figur 2 für den Fall, daß die durch Bakterien verunreinigte fixierte Lactase in eine wässrige Lösung von Glycerol
eingetaucht wird, den Einfluß der Zeit des Eintauchens auf die Anzahl der Bakterien auf bzw.
in der fixierten Lactase und die enzymatische Aktivität der fixierten Lactase.
Das gemäß der vorliegenden Erfindung behandelte Enzym ist ein Enzym in einem flüssigen Zustand, ein Enzym in einem
pulverförmigen Zustand oder ein fixiertes Enzym und umfaßt
solche Enzyme, die während ihrer Verwendung, ihrer Lagerung oder dergleichen durch Bakterien verunreinigt worden sind.
Der "mehrwertige Alkohol", der bei der vorliegenden Erfin-
dung zum Sterilisieren des durch Bakterien verunreinigten Enzyms verwendet wird, ist ein Alkohol mit 2 bis 3 Hydroxylgruppen
innerhalb seines Moleküls, und er umfaßt Glycerol, Äthylenglycol, Propylenglycol, 1,3-Butandiol, 1,4-Butandiol,
2,3-Butandiol, 1,5-Pentandiol, 1,6-Hexandiol, 1,2-Butandiol,
1,2,4-Butantriol, 1,2,6-Hexantriol und dergleichen.
Gemäß dem Verfahren der vorliegenden Erfindung wird das .
durch Bakterien verunreinigte Enzym in einen der oben angegebenen mehrwertigen Alkohole oder eine Mischung aus
zwei oder mehr derselben eingetaucht, und es ist zu bevorzugen, dae verunreinigte Enzym in eine wässrige Lösung
mit einem Gehalt von mehr als 30 Gew.-% eines mehrwertigen Alkohols oder eine wässrige Lösung mit einem Gehalt
von mehr als 30 Gew.-% der Mischung aus zwei oder mehr derselben
einzutauchen. Das Eintauchen wird vorzugsweise 3 Stunden bis 5 Tage lang bei einer Temperatur von üblicherweise
20 bis 40°C durchgeführt.
Da beim Eintauchen die Sterilisierungswirkung bei einer
Temperatur unterhalb 20°C verringert wird und andererseits die enzymatische Aktivität bei einer Temperatur oberhalb
40°C beeinträchtigt wird, ist es notwendig, sich um die Eintauchtemperatur sorgfältig zu kümmern, aber im Falle
der Sterilisierung eines wärmestabilen Enzyms kann eine höhere Temperatur beim Eintauchen verwendet werden.
Aber selbst in dem oben angegebenen Temperaturbereich wird bei Anwendung einer höheren Temperatur eine höhere Sterilisierungswirkung
nach einer kürzeren Zeit des Eintauchens erhalten, z.B. nach einigen Stunden. Und bei der gleichen
Temperatur kann, je höher die Konzentration des mehrwertigen Alkohols ist und je länger die Eintauchzeit ist, eine
umso stärker verbesserte Sterilisierungswirkung erhalten
werden.
Figur 1 zeigt die Testergebnisse für die Beziehung zwischen der Anzahl von Bakterien und der Konzentration von
Glycerol, der Temperatur und der Zeit des Eintauchens für
den Fall, daß fixierte Lactase als zu behandelndes Enzym verwendet wurde und daß sie in eine wässrige Lösung von
Glycerol eingetaucht wurde. Und zwar wurde bei dem Test Wachstumskultur der Bakterien, die das fixierte Enzym
verunreinigen, jeweils zu den einzelnen wässrigen Lösungen
von Glycerol mit verschiedenen Konzentrationen mit 1/8 χ 10 Zellen/ml der Lösung hinzugegeben, und die Änderung
der Bakterienzahl wurde beobachtet, während die Lösung auf 35°C bzw. 25°C gehalten wurde, wobei die Anzahl
der Bakterien durch das Membran-Filter-Verfahren bestimmt
wurde. Als Vergleich wurden die Impfkulturen (Inocula) jeweils in einer Phosphat-Pufferlösung anstatt
in der wässrigen Glycerollösung verwendet.
Aus Figur 1 ist klar ersichtlich, daß in den Fällen, in denen die Konzentration von Glycerol konstant war, die
Verringerung der Bakterienzahl früher in der Impfkultur mit der höheren Temperatur des Eintauchens auftrat, und
andererseits daß in den Fällen, in denen die Temperatur konstant war, eine merkliche Verringerung der Bakterienzahl
nach einer kürzeren Zeit des Eintauchens bei der höheren Konzentration von Glycerol auftrat. Zum Vergleich
dazu wurde in der Pufferlösung keine wesentliche Verringerung der Bakterienzählwerte beobachtet.
Figur 2 zeigt die Testergebnisse, die den Einfluß der Zeit des Eintauchens auf die Bakterienzahl und die enzymatische
Aktivität für den Fall betreffen, daß die fixierte Lactase, die durch Bakterien verunreinigt war (mit
3,0 χ 10 Zellen/g der fixierten Lactase) , in eine wässrige 60 Gew.-% Lösung von Glycerol für 1 bis 3 Tage eingetaucht
wurde, wobei eine Impfkultur in einer Pufferlösung
als Vergleich verwendet wurde.
Wie aus Figur 2 ersichtlich ist, wurde eine zeitabhängige Verringerung der Bakterienzahl in der wässrigen Lösung
von Glycerol beobachtet, aber andererseits wurde solch eine wesentliche zeitabhängige Verringerung nicht für die
enzymatische Aktivität beobachtet.
Hieraus ist somit ersichtlich, daß selbst das stark durch Bakterien verunreinigte fixierte Enzym in wirkungsvoller
Weise nach dem Verfahren der vorliegenden Erfindung sterilisiert werden kann, ohne daß seine enzymatische Aktivität
verschlechtert wird, indem das verunreinigte fixierte Enzym in den oben näher beschriebenen mehrwertigen
Alkohol eingetaucht wird. .
Es wird bemerkt, daß die beschriebene Sterilisierungswirkung des mehrwertigen Alkohols nicht ganz klar ist, aber
die hohe osmotische Wirkung des mehrwertigen Alkohols auf die Bakterienzellen kann dafür verantwortlich sein. In
diesem Zusammenhang sei bemerkt, daß als Substanzen, die bekanntermaßen solche osmotische Wirkung auf die Bakterienzellen zeigen, z.B. Dimethylsulfoxid (DMSO), Glucose,
Sucrose, Sorbitol und dergleichen erwähnt werden können, und unter ihnen gibt es einige, die die Sterilisierungswirkung
ausüben, wie z.B. OMSO, aber DMSO besitzt die Nachteile, daß es ungünstige Wirkung auf die enzymatische
Aktivität ausübt und einen widerlichen Geruch dem Enzym selbst gibt, und bei Glucose, Sucrose und Sorbitol wird
nur eine niedrige Sterilisierungswirkung festgestellt.
In diesem Zusammenhang zeigt Tabelle 1 die Testergebnisse für das Eintauchen fixierter Lactase, die durch Bakterien
verunreinigt war, in die jeweiligen wässrigen Lösungen von
_ ΑΛ
mehrwertigen Alkoholen gemäß der vorliegenden Erfindung und die oben beschriebenen Substanzen. Der Test wurde
folgendermaßen durchgeführt:
Testverfahren:
Fixierte Lactase, die durch Bakterien verunreinigt worden
war, wurde jeweils in eine der wässrigen Lösungen aus den entsprechenden Substanzen, die in Tabelle 1 angegeben sind,
bei 1,3 χ 10 Zellen/ml der Lösung für 1 bis 2 Tage eingetaucht,
und die zeitabhängige Wirkung der Substanz auf die Verringerung der Bakterienzahl und auf die enzymatische
Aktivität wurden bestimmt. Zusätzlich wurde die Konzentration von Propylenglycol, Äthylenglycol und DMSO
so eingestellt, daß ihre Lösung den osmotischen Druck entsprechend demjenigen der wässrigen 60 Gew.-% Lösung von
Glycerol, nämlich 6780 mOsm/1, aufwies.
Da es schwierig war, die Konzentration von Sorbitol und Glucose einzustellen, um den osmotischen Druck entsprechend
demjenigen der wässrigen 60 Gew.-% Lösung von Glycerol zu erhalten, war die Konzentration von Sorbitol 70 Gew.-%
und von Glucose 50 Gew.-%.
Substanz Konzentration Osmotischer Anzahl der Bakterien Wirkung auf die
(Gew.-%) Druck von (pro ml) nach enzymatxsche Ak-100
Gew.% 1 Tag 2 Tagen tivität
| Glycerol | 60 | 11300 | 3 χ 10u | 29 | 000 |
| Propylen- glycol |
52,3 | 12900 | 1 000 | < | 100 |
| Äthylen- glycol |
40 | 16800 | 8 900 | < | ; 100 |
| Sorbitol | 70 | 6000 | 3,8 χ 108 | 1,2 | x 10 |
| Glucose | 50 | 6200 | 3,5 χ 108 | 5,2 | χ 10 |
| DMSO | 49,3 | 13600 | 1 000 | 100 |
Anmerkung: - bezeichnet keinen Einfluß
+ bezeichnet Beeinflussungen
+ bezeichnet Beeinflussungen
- vr - Λ%
Aus Tabelle 1 ist ersichtlich, das Sorbitol und Glucose nicht nur keinerlei wesentliche Sterilisierungswirkung
auf die durch Bakterien verunreinigte fixierte Lactase ausübten, sondern auch die Aktivität der Lactase selbst
angriffen, und im Gegensatz dazu wurde eine merkliche Sterilisierungswirkung
auf die fixierte Lactase, die in den mehrwertigen Alkohol gemäß der vorliegenden Erfindung
eingetaucht worden war, ohne jegliche Beeinflussung der
Aktivität der Lactase gefunden. In diesem Zusammenhang sei folgendes bemerkt:im Hinblick auf die Tatsache, daß bei
dem vorliegenden Test Lactasen verwendet wurden, die leicht entaktiviert werden können, obgleich die Stabilität einer
Lactase von dem Ursprung abhängt, von dem sie abgeleitet worden ist, ergibt sich daraus die Überlegenheit des erfindungsgemäßen
Verfahrens zum Sterilisieren des Enzyms ganz deutlich.
Das Verfahren zum Sterilisieren eines durch Bakterien verunreinigten
Enzyms gemäß der vorliegenden Erfindung wurde vorstehend unter Verwendung von Lactase als einem Beispiel
für das Enzym erklärt, und da die gleiche Sterilisierungswirkung auf andere Enzyme feststellbar ist, kann
festgestellt werden, daß die vorliegende Erfindung einen wesentlichen Beitrag für die enzymverwendende Industrie
im allgemeinen liefert.
Die vorliegende Erfindung wird nun noch konkreter durch Bezugnahme auf die nicht einschränkend angegebenen folgenden
Beispiele erläutert.
In 100 ml einer wässrigen 60 Gew.-% Lösung von Glycerol
(mit Qualität für Lebensmittelzusatzstoff) wurden 10 g einer
34Ί0Λ36
pulverförmigen Lactase, die mit Bakterien bei 1,2 χ Io
Bakterienzellen/g der pulverförmigen Lactase schwer verunreinigt war, eingetaucht, und nach dem Eintauchen über
3 Tage bei 25°C wurden die Zählwerte für lebensfähige Bakterien bestimmt und gefunden, daß sie kleiner als 100/g
der Eintauchflüssigkeit waren. Die Aktivität der Lactase zu der Zeit des Eintauchens betrug 4150 Einheiten/ml
(U/ml) der Eintauchflüssigkeit, und die Aktivität der Lactase nach 3 Tagen des Eintauchens betrug 4120 Einheir
ten/ml (U/ml) der Eintauchflüssigkeit.
Durch Zugabe von 20 g der Glycerollösung, in die die verunreinigte
Lactase auf diese Weise eingetaucht worden war, in 10 Liter einer vorher sterilisierten entrahmten Milch
wurden während der Reaktion bei 10°C über 18 Stunden 80% lactosehydrolysierte Milch erhalten.
In eine Säule mit 7 cm Durchmesser und 35 cm Länge wurde
1 Liter der in Zellulosetriacetat eingefangenen fixierten Lactase gepackt, und eine 10% entrahmte Milch wurde
kontinuierlich in einer nach oben gerichteten Strömung bei einer Reaktionstemperatur von 7°C und mit einer Volumengeschwindigkeit
(S.V. von englisch: space velocity) von 1 hindurchgeleitet. Die Vermehrung von Bakterien begann
mit dem Zeitablauf und eine Adhäsion von Milchprotein und eine Ansammlung von verunreinigenden Bakterien auf
der fixierten Lactase wurden beobachtet. Zu der Zeit, als die anhaftende Menge Milchprotein 17 Mikrogramm pro mg der
fixierten Lactase wurde und die Anzahl der Bakterien 1,4 χ 10 /g der fixierten Lactase wurde, wurde die fixierte
Lactase von der Säule zu einem Waschtank übergeführt,
und nach ihrem Waschen mit einer Phosphatpufferlösung mit
pH 7,0, wodurch die Milchfeststoffe ausreichend von ihr entfernt worden waren, und nachdem die Feuchtigkeit der
fixierten Lactase entfernt worden war, wurde die fixierte Lactase zu einem vorher sterilisierten Gefäß mit TO
Litern Kapazität übergeführt. Nach Zugabe von 10 Litern einer wässrigen 60 Gew.-% Lösung von Glycerol, die IO Minuten
bei 85°C sterilisiert und auf 25°C abgekühlt worden war, in das Gefäß und leichtem Rühren der Mischung wurde
die Mischung 2 Tage lang bei 25°C unter festem Verschluß zur Verhinderung der Verunreinigung durch Bakterien stehen
gelassen.
Bei dem beschriebenen Betrieb wurde die Anzahl von Bakte-
2 rien, die auf der fixierten Lactase haftete, auf 2 χ 10 /g
der fixierten Lactase verringert. Nach Aufsammeln der so behandelten fixierten Lactase von der Lösung von Glycerol,
Waschen derselben mit einer Phosphatpufferlösung und Entfernen der Feuchtigkeit von der fixierten Lactase, um
dadurch auch Glycerol von ihr zu entfernen, wurde die so behandelte fixierte Lactase wieder in die Säule gepackt,
und das Hindurchleiten der entrahmten Milch durch die Säule hindurch wurde begonnen. Die katalytische Aktivität der
so sterilisierten fixierten Lactase betrug 95o Einheiten/g (ü/g), so daß die enzymatische Aktivität fast die gleiche
wie die vor der Sterilisierung durch Glycerol, nämlich 960 Einheiten/g (ü/g) der fixierten Lactase, war.
5 Liter einer fixierten Lactase, die durch kovalente Bindungen an ein Harz gebunden war, wurden in eine Säule mit
12 cm Durchmesser und 60 cm Länge gegeben, und 10 % entrahmte Milch wurden kontinuierlich durch die Säule in nach
.::..::. L- ..■ V 3410Α36
-Uf -^ fr
unten gerichteter Strömung bei einer Reaktionstemperatur
von 40 C und einer Volumengeschwindigkeit (S.V.) von 10 hindurchgeleitet. Die Anzahl der Bakterien in der fixierten
Lactase wuchs mit der Zeit der Verarbeitung.
Zu der Zeit, als die Zahl der Bakterien 3,8 χ 10 pro Gramm
der fixierten Lactase erreichte, wurde das Hindurchleiten
der Lösung von entrahmter Milch abgestoppt, und nach dem guten Waschen der Säule mit im Ultrafilter filtrierten
Wasser, um die Feststoffbestandteile der Milch so weit wie möglich zu entfernen, wurde die fixierte Lactase von
der Säule entfernt, dehydratisiert und in ein vorher sterilisiertes Gefäß mit 60 Litern Kapazität gegeben. 50 Liter
einer wässrigen 80 Gew.-% Lösung von Propylenglycol, die 10 Minuten bei 85°C sterilisiert und auf 35°C abgekühlt
worden war, wurden zu der fixierten Lactase hinzugegeben, und die Mischung wurde leicht gerührt.
Dann wurde die fixierte Lactase fest in dem Gefäß zur Verhinderung
der Verunreinigung durch Bakterien verschlossen und 1 Tag in einem Raum gelassen, der auf 35°C gehalten
wurde. Durch das vorstehend beschriebene Vorgehen wurde die Anzahl der Bakterien, die an der fixierten Lactase
hafteten, ai
verringert.
verringert.
2
hafteten, auf 4,0 χ 10 pro Gramm der fixierten Lactase
hafteten, auf 4,0 χ 10 pro Gramm der fixierten Lactase
Nach dem so aseptisch wie möglich durchgeführten Aufsammeln der so behandelten fixierten Lactase von Propylenglycollösung
wurde sie in die gleiche Säule gepackt, und nach dem Hindurchleiten von filtriertem Wasser durch die
Säule, um das verbliebene Propylenglycol zu entfernen, wurde das Hindurchleiten der entrahmten Milch wieder aufgenommen.
Die Aktivität der so behandelten fixierten Lactase betrug 1200 Einheiten/g (U/g), was fast keine Änderung
der Aktivität gegenüber der Aktivität vor dem Sterilisieren von 1230 Einheiteh/g (U/g) der fixierten Lactase zeigte.
Claims (4)
- Anmelder : SNOW BRAND MILK PRODUCTS CO. LTD.1-1, Naebo-cho 6-chome, Higashi-ku, Sapporo, Hokkaido, JapanPatentansprüche
- 2.
- 3.Verfahren zum Sterilisieren eines durch Bakterien verunreinigten Enzyms , dadurch gekennzeichnet , daß es den Verfahrensschritt des Eintauchens dieses Enzyms in eine Art von oder eine Mischung von zwei oder mehr als zwei Arten mehrwertigem Alkohol umfaßt.Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß das Eintauchen in eine wässrige Lösung von dem mehrwertigen Alkohol mit einer Konzentration von wenigstens 30 Gew.-% geschieht.Verfahren nach Anspruch 1 oder 2 , dadurch gekennzeichnet, daß das Eintauchen 3 Stunden bis 5 Tage bei einer Temperatur von 20 bis 40°C durchgeführt wird.3.4 km 3 6
- 4. Verfahren nach Anspruch 1 ,. dadurchgekennzeichnet , daß dasEnzym ein festgelegtes oder fixiertes Enzym ist.
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