DE2817144C2 - Verfahren zur Herstellung von nicht immunogenen biologisch aktiven Eiweißhydrolysepräparaten - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von nicht immunogenen biologisch aktiven EiweißhydrolysepräparatenInfo
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Description
20
Es sind verschiedene Verfahren zur Gewinnung von ■·*>
Eiwcißhydrolysaten bekannt. Derartige aus den JP-PS 748 und 10 543 und der SU-PS 3 50 452 bekannte
Verfahren führen zu stark unterschiedlichen Endprodukten, die, wenn sie nicht durch äußere biologische
Zusätze ergänzt werden, infolge ihrer unvollständigen '·"> Zusammensetzung in quantitativer als auch qualitativer
Hinsicht bezüglich sowohl der Aminosäuren, als auch der Hochpwlymerverbindiingen. als auch der mineralischen
Bestandteile nur als Präparate von begrenzten Anwendungsmöglichkeiten bezeichnet werden können, on
Diis ist in erster Linie R)IgC tier drastischen
Bedingungen, unter denen die hydrolytisch*.· Zersetzung
der Eiweißstoffe durchgeführt wird, wodurch Hydrolysate erhalten werden, die nicht die für eine Verwendung
;ils Krniihruiigs- und Blutersatzmittel erforderlichen »"■
} iiiensehaften aufweisen, so daß sie nicht /um Vorrat
der Mittel gehören, die andeis als über den Verdaiiungskiiriiil
verabreicht werden können.
Gemäß der SU-PS 3 50 452 werden Eiweißstoffe in Form von zerkleinertem Fleisch mit einem I,Stachen
Wasservolumen versetzt und während 2 Stunden im Autoklaven bei 3930K. extrahiert Das erhaltene
Gemisch wird auf einer Filiernutsche abfiltriert und die erhaltene Fleischbrühe abgekühlt, entfettet und in
einem Verdampfer unter Vakuum bei 303 bis 313° K. auf
30% Trockenmassegehalt eingedampft Der feste Rückstand wird mit 0,1 NaOH behandelt und vahrend 1
Stunde gemischt Dann wird die alkalische Eiweißlösung abfiltriert, das Fett abgeschieden und der restliche feste
Anteil mit I kg Aktivkohle und 30 Liter konzentrierter Salzsäure mit einem spezifischen Gewicht von l,l<r
behandelt Die Hydrolyse wird während 6 Stunden bei 373°K durchgeführt wonach der Wasserüberschuß bei
333° K während 4 Stunden bis zu einem Flüssigkeitsvolumen von 120 Liter abgedampft wird, wonach die
Hydrolyse während 4 Stunden unter einem Druck von 2 atü weitergeführt wird. Die gesamte Masse wird auf
einer Filternutsche abfiltriert. wonach das Hydrolysat in
einer Kolonne mit Austauschharzen EDE-IOP verteilt wird und der pH-Wert auf 43 eingestellt wird. Zur
Klärung des Hydrolysats wird Aktivkohle zugegeben und das Gemisch auf einer Nutsche abfiltriert Das
Hydrolysat wird mit saurem Natriumcarbonat und Eiweißalkalilösung neutralisiert Ein so zubereitetes
Hydrolysat wird in einem Vakuumverdampfer bei 333°K zu einem Trockenmassengehalt von 25%
verdampft, wonach es mit der früher gewonnenen Fleischbrühe gemischt und in einem Zerstäubungstrockner
bei 363° K bis 368° K zu einem Trockenmassegehalt von 95% entwässert wird.
Ferner ist in der DD-PS I 17 980 ein Verfahren zum Hydrolysieren von Proteinen beschrieben, bei dem die
enzymatische Hydrolyse bezüglich des Hydrolysegrades unkontrolliert bis zum Ende verläuft, wonach durch
Zugabe von HjPO4 ein pH-Wert von 7 eingestellt wird,
um das in der verwendeten Reaktionsmischung stets vorhandene Ca(OH)2 als Calciumohosphat auszufällen,
das leicht abfiltriert werden kann und außerdem noch als Filterhilfe dient. Als biostaissch« Mittel ist ein
Zusatz von Chloroform oder Toluol vorgesehen. Das nach der Filtration und weiterer Reinigung erhaltene
Produkt kann als Zusatz ir Lebensmitteln (zur oralen Verwendung) oder in Futtermitteln verwendet werden.
Ein gemäß der DD-PS 1 17 980 erhaltenes Präparat kann nicht als Blutersatzmittel oder als Infusionslösung
verwendet werden, da schon allein die Anwesenheit von Phosphorsäure im Endprodukt /u Störungen im
Stoffwechsel des behandelten Organismus führen kann. Da keine Lehre hinsichtlich des Abstoppens der
Hydrolyse gegeben wird, ist die für derartige Verwendungen erforderliche Zusammensetzung des Hydrolysats
aufgrund der Lehre der DD-PS I 17 980 planmäßig nicht zu erreichen.
In der DE-PS 9 46 061 ist ein Verfahren beschrieben,
das ebenfalls die enzymatische Hydrolyse von Eiweißstoffen beschreibt, wobei es allerdings das Wesen des
beschriebenen Verfahrens ist. daß Antibiotika zugesetzt werden (Penicillin, Streptomycin). Die Hydrolyse wird
bis /11 einem konstanten pH-Wert geführt, was 7ii einem
Hydrolysat führen soll, das einen Gehalt .in Gesamtstickstoff
von 12 bis 14"'" und ί bis η··λ>
Aminstickstnff aufweist, das also recht weit hvdrolysicrt wurde. Nach
beendeter Hydrolyse wird das Hydrolysat gekocht.
Auch dieses Verfahren kann nicht /u einem Produkt
mit den für eine Verwendung als Blutersatzmittel und auch .ils Infusionslösung erforderlichen Eigenschaften
führen, ζ, B. allein schon wegen des denaturierend
wirkenden Kochens, und es wird auch keinerlei Hinweis gegeben, daß und auf welchem Wege ein Produkt für
eine derartige Verwendung erhalten werden kann.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, unter Beseitigung der den bekannten Verfahren anhaftenden
Nachteile ein Verfahren anzugeben, nach dem auf schonende Weise nicht itTKnunogene, biologisch aktive
Eiweißhydrolysepräparate neuer Art gewonnen werden können, die die für eine Verwendung als Blutersatzpräparai
oder als Ernährungspräparat erforderlichen Eigenschaften aufweisen.
Diese Aufgabe wird durch ein Verfahren gemäß Anspruch 1 gelöst. Das orfindungsgemäße Verfahren,
das die Nachteile der bisherigen Degradationsverfahren von Eiweißstoffen beseitigt, besteht darin, daß die
Eiweißstoffe einer geregelten enzymatischen Degradation unterzogen werden. Der Rohstoff in Form von
tierischen Eiweißstoffen, d. h. von Eiweißisolaten und -konzentraten mit einem Trockenmassegehalt in den
Grenzen von 10 bis 90%, üblicherweise von 10 bis 40%,
wird der Einwirkung von proteolytischen Enzymen wie Pepsin, Trypsin, Papain in Konzentrationen der
Größenordnung von 0,5 bis 4 Gew/Vol.% in Form von Lösungen unterzogen. Das Gemisch wird üblicherweise
bei 308 bis 32 Γ Κ unter ständigem Mischen und stetiger
Kontrolle des für die Wirkung des angewandten Enzyms und/oder Enzyme optimalen pH-Wertes
inkubiert. Die Gemische mit alkalischem pH werden mit Chloroform und/oder Toluol konserviert, weiche in
einer Menge von I bis 9% zugegeben werden.
Die Hydrolyse wird unterbrochen, wenn im Hydrolysat 15 bis 100 mg/ml Gesamtstickstoff vorliegen und der
Gehalt an freien Aminosäuren 0,5 bis 4 Gew/Vol.% beträgt, wonach das Hydrolysat in Abhängigkeit von
dem Eiweißgehalt in einem Temperaturbereich von 265° K bis 249° K einige Male tiefgefroren und wieder
aufgetaut wird, wonach es auf den pH-Wert 7 mit NaOH oder HCI je nach dem pH-Wert des Mediums
neutralisiert wird. Dann wird das Chloroform und/oder Toluol in einem Vakuumverdampfer bei 3130K
verdampft, dann abgeschleudert und/oder auf den Nutschen abfiltriert, wonach durch Bakterienfilter
abfiltriert wird, wenn das Produkt als nicht immunogenes Blutersatzmittel verwendet wird, oder das gewonnene
Hydrolysat wird nach bekannten Verfahren, z. B. in einem Zerstäubungstrockner zu einem Trockenmassegehalt
von 90 bis 994% entwässert, und das gewonnene Präparat dient als nicht immunogenes biologisch aktives
Eiweißpräparat, welches den Tagesbedarf an tierischem Eiweiß des erwachsenen Menschen unabhängig vom
Verabreichiingsweg ausgleichen kann. Es weist einen salzigen Geschmack auf und ist geruchlos und farblos,
ähnlich wie »Kosmonautendiät«, wird restlos aus dem Speisekanal aufgenommen und ist außerdem ein v>
Emulgator und ein natürliches Schaumbildungsmittel.
Nachstehend wird das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung von nicht immunogenen, biologisch
aktiven Eiwe-ißhydrolysepräparaten anhand von Ausführungsbeispielen
näher erläutert.
/;; ϊθ g !ieriseliLi:. ;iuf. Fischen und/oder Mccresorganismen
isolierten. 30"'o liiwcis 111 tier Trockenmasse
enthaltenden Liw eißes wurden 230 ml einer ().5pro/enti-1!(.1Ii
Losung von Pop1 in in IICI-Wasser zugegeben. Hin
pH-Wert der Lösung gleich 2 wurde mittels I ti IICI
eingeteilt D; is Cieniisili wurde unter siandig?m
Mischen bei einer konstanten Temperatur von 31Γ Κ
bei einem pH der Lösung von 2 gehalten. Die Hydrolyse wurde unterbrochen, als in der Lösung festgesteüi
wurden: 1 Gew/Vol.% von freien Aminosäuren und 42 mgGesamtsiickstoff in 1 ml der Lösung.
Nachdem die enzymatische Hydrolyse des Eiweißiso lais beendet war, wurde das gewonnene Präparat
zweimal bei 263° K tiefgefroren, wonach es zur Ausfällung der Enzymeiweiße entfrostet wurde, welche
dann durch Schleudern bei 10 000 U/min abgeschieden und dann auf einer Nutsche abfiltriert wurden. Das
Hydrolysat wurde mit 1 η NaOH auf einen pH-Wert 7 neutralisiert und durch Bakterienfilter abfiltriert. Es
kann als Blutersatzmittel verwendet werden.
Zu 50 g von tierischem, aus Fischen und/oder Meeresorganismen isoliertem, 21,5% Eiweiß in der
Trockenmasse enthaltendem Eiweiß wurden 250 ml einer 1 prc/.entigen Lösung von Pepsin in HCI-Wasser
zugegeben. Der pH-Wert des GemUthes von 2 wurde
mit 1 η NaOH eingestellt, wonach das Gemisch unter ständigem Mischen bis zu dem Moment bei 313" K
inkubiert wurde, bei dem der Gehalt an Gesamfstickstoff im Hydrolysat in der Größenordnung von
50 mg/n! lag und 1,5 g freie Aminosäuren festgestellt
wurden. Die Hydrolyse wurde dann unterbrochen. Die Gesamtmischung wurde nach Neutralisierung mit 1 η
NaOH auf einen pH 7 zweimal bei 252° K tiefgefroren und wieder entfrostet, wonach die ausgeschiedenen
Eiweiße durch Abfiltrieren auf einer Nutsche entfernt wurden. Danach wurde in einem Vakuumtrockner bei
313° K so lange entwässert, bis der Trockenmassegehalt 99%" betrug. Das biologisch hochwertige Ernährungspräparat wurde in dichtgeschlossene Einzelverpackungen
verpackt.
Zu 50 g von tierischem, aus Fischen unii/oder
Meeresorganismen isoliertem, 25% Eiweiß in der Trockenmasse enthaltendem Eiweiß wurden 200 ml
einer lprozentigen wäßrigen Lösung von Trypsin mit einem pH von 8,2 zugegeben, wonach das Gemisch mit
9 ml chemisch reinem Toluol und 1 ml chemisch reinem Chloroform versetzt wurde. Die Hydrolyse wurde bei
313° K unter ständigem Mischen und bei einem konstanten pH-Wert von 8,2 durchgeführt. Die Hydrolyse
wurde nach der Gewinnung eines Gehaltes an Gesamtstickstoff im Hydrolysat in der Größenordnung
von 40 mg/ml und von 1,5 Gew./Vol.% von freien Aminosäuren unterbrochen. Nachdem die Hydrolyse
beendet war, wurden Toluol und Chloroform in einem Vakuumtrockner bei 353° K verdampft und das
gewot.iiene Produkt mit 1 η HCI auf einen pH-Wert von
7 neutralisiert. Dann wurde auf Nutschen abfiltriert und anschließend wieder durch Bakterienfilter tikrieri. Das
Hydrolysat wurde in einem Vakuumtrockner bei 313° K zur Gewinnung eines Trockenmassegehalts von 99%
entwässert und in dichte Einzelverpackungen verpackt.
Dem Ansiiu gemäß Beispiel 2 wurden n.acli dein
Abschluß der Hydrolyse und nach der Neutralisation mit I η NaOH b0 ml Hydrolysat mit darin suspendiertem
anhw'"olysierlem unlöslichem LiweiK entnr ιτ.,.κ'η.
Dieser Suspension wurden 30 ml einer "ipm/entigen
wiißrigen Losung \on lr\psin und danach ϊ ml
ehemisch reines Toluol /iipegehcn. Das
< icmisch wurde
nach Einstellung des pH-Werts iiiif K,2 bei !1H K unter
ständigem Mischen und konstantem pH bis /u dem
Moment inkubierl. bei ilen-, in der Losung (vt mg/ml
(lesamistickstoff und 4 Gew./Vol.-1Vo freie Aminosäuren
festgestellt wurden. Das Gemisch wurde zweimal bei '< 261 K tiefgefroren und mittels I η HCI auf einen pH
von 7 eingestellt. Nach dom Abdampfen des Toluols bei
Jl) K in einem Vakuumtrockner wurde das Hydrolysat
am' einen pi I von 7 neutralisiert und durch Nutschen und
dann durch Bakterienfilter filtriert und dann in einem m
Zerstäubungstrockner bei JfiJ' K zur Cicwinnung eines
Trockenmas'-egehalis von 1I1V1M eingedampft.
20.4 g des flüssigen, wie im lieispiel I gewonnenen
Pepsinhydrolysats werden in einem Mixer bei 8000 U/min geschlagen. Ls wurde ein dauerhafter
Schaum mit einem I laltbarkoiiskoeffi/ienten nach l.me -'"
0.1 5 und einem Schaumfaktor von 1.28 gewonnen.
Die entwässerten oder mim en Hydrolysale gemäß
den Beispielen I bis 3 in einer physiologischen NaCI-l.ösM'ij; wurden intrabauehfellig Mäusen der
Gattung BaIbC in Mengen von 0.5 ml (j,Sri mg vies
Gesamtstickstoffs). 1.5 ml (8.5 mg des Gesamtstick- i"
stoffs) und 2.0 ml (11,4 mg des Gesamtsticksioffs)
verabreich:. Die Kontrollgruppe bekam 2 ml physiologische
NaCI-Lösung. N,ich 48 Stunden der Beobachtung wurde festgestellt, daß die Präparate dieser Dosis
(0.57 g/kg Korpergewicht) nicht toxisch sind. Die i-'>
Wiederholung ties Versuchs mit höheren Dosen führte zu dem Lrgebnis. daß die Präparate in einer Dosis von
900 mg/kg Körpergewicht nicht toxisch sind. Die Pyrogcnität der Hydrolysate wurde gemäß den
Anforderungen der F:irniakopea Polska Ml. 1454, S. 751
an Kaninchen gekreuzter Kassen mit einem Körpergewicht von i ki: bestimmt. In keinem Fall überschritt die
Temperaturerhöhung nach 3 Stunden der Beobachtung nach der I η je kl ion des Hvdrolvsats 0.5 "C.
45
Die Prüfungen der Immunogenität der Hydrolysate der Beispiele I und 2 wurden an zwei Tiergruppen von
je 20 Tieren, gestützt auf zwei zweimal wiederholte ίο
Versuche durchgeführt.
1. Intrakutane Reaktion als Ausdruck der verzögerten Allergie.
55
Die Vers.uc.he wurden an Meerschweinchen durchgeführt.
Die Kontrollgruppe bestand aus Tieren, die mit Viehalbumin allergisch gemacht wurden. Die Tiere
wurden mit Hilfe der immunologischen Standardtechnik unter Anwendung des vollen Freund-Adjuvants (0.1 ml
des zu prüfenden Hydrolysats + 0.1 ml des Adjuvants) allergisch gemacht. Nach 14 Tagen wurden 0.1 ml des
Hydrolysats intrakutan nach vorherigem Ausrasieren der Haut auf dem Rücken der Tiere verabreicht.
2. Anaphylaklischor Schock als Ausdruck i\cv I riihallergie.
Die Versuche wurden an Meerschweinchen durchgeführt.
Die Tiere wurden /weimal mn einem in O.Siprozcntigein NaCI-gelösten Antigen allergisch
gemacht. Der Schock wurde durch lntraheiVeinfiihnin^
des Antigens bewirkt. Die Koiurollgriippe bestand .ms
Tieren, die mit zweimal in zweitägigen Abständen in
einer Dosis von je 2 mg gereichtem Viehalbumin allergisch gemacht wurden. Der Schock wurde nach 10
Tagen durch Inf.ihorzinjekiion von 4 mg des Viehalbumin1,
bewirkt. I · .e Hydrolysaldoscn waren identisch. Der Versuch wurde wiederholt, nulem die I icro 50 mg
(Ls Serums und des Hydrolysis ,ils Initialdosis
bekamen. Der anaphytaktische Schock wurde aufgrund
der Messung des pH-Wertes des Blutes, dem Parti.il druck des COj (pC'Oj) und des Oj (pO;) auf einem
Mikro.istrup (Mikroastnii) ABC-I Radiometer. Kopenhagen)
beurteilt. Die durchgeführten Prüfungen ergaben, daß die gewonnenen Hydrolysate keine iinmunogetieη
Eigenschaften aufweisen, keine verzögerten Aller gien hervorrufen und keine anaphylaktischen Schocks
bei den Versuchstieren bewirken. Keines der immunisierten Tiere ist gestorben, während die Schocks in der
Kontrollgruppe, die mit Albumin immunisiert wurde, in
l00'"r. der Fälle aufgetreten ist.
Gegenstand waren hämodynamischc und volumetrische
Versuche nach Verabreichung der Hydrolysate der Beispiele 1 und 2 an gesimovn Kaninchen und an
Kaninchen im Zustand eines anämischen Schocks. Die Versuche wurden an Kaninchen beider Geschlechter
einer Mischrasse mit einem Körpergewicht von 3 bis 4 kg durchgeführt. Die Tiere wurden mit Standarddiät
ernährt. Nach Durchführung der Kanalaufsauganalgesie mit einer Iprozentigen l.idokainlösung wurden Arterio-
und Venoscktionen durchgeführt und auf diesem Wege Polyäthylenkatheter in die äußere rechte Halsader
zwecks Messung des Aderdruckes ((JCZ). in die Schlegelader zwecks Durchführung des Aderlasses und
zur Sicherung des Aderweges und in die rechte .Schlegelpulsader zwecks Messung ties Pulsaderdruckes
(RR) eingeführt.
Es wurde auch eine Tracheotomie durchgeführt und auf diesem Wege die volumetrischcn Lungenmessungen
durchgeführt. Mit dem Wright-Volumeter wurde das Atniungsvolumen (TV). die Minutenventilation (MV)
und Atmungshäufigkeit (f) gemessen. F.s wurde auch ein
Katheter in die Harnblase eingeführt, um die S indendiurese
zu bestimmen. Mittels Beinnadelelektroden wurde ein Elektrokardiograph Simplicard angeschlossen.
Die Vorschubgeschwindigkeit betrug 50 mm/s. Der anämische Schock wurde durch Entziehung von 30%
des Volumens des Zirkulationsblutes des Kaninchens, d.h. ungefähr von 110ml des Blutes während 30
Minuten erreicht. Das Hydrolysat wurde durch Tropfeninfusion in die Schlegelader mit einer Geschwindigkeit
von 30 bis 40 Tropfen/Minute eingeführt. Die Prüfungen wurden vor der Verabreichung der Hydrolysate und in
Abständen von einigen Minuten während der Verabreichung der Hydrolysate durchgeführt. Die Ergebnisse
der Prüfungen sind in Tabelle I zusammengestellt.
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r -tr ι/·,
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χ: >.
— -.Λ
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60
65
UJ
VSie ,ms den Angaben in Tabelle I hervorgeht.
noniHii die geprüften Hydrolysate den Blutdruck, die
I ler/,irlvit und die volumetrische!! Kennwerte der
l.iipgen in der Früliperiode des Schocks bei aüi\
geprüften Tieren.
Die auf einen Trockenmassegehalt von 98% entwässerten
I Ivdrolysate wurden im Institut für Kernforschung in Swierk mit radioaktivem Chrom markiert. Die
markierten I Ivdrolysate wurden Ratten der Wislar-Rasse in einer Dosis von IO mg verabreicht, was
9x 10"CMIVm entspricht. Die Bestimmung der Ab sorption der Hydrolysate und seiner Umwandlung im
Organismus wurden nach 24 Stunden. 5 Tagen. 11 Tagen und 45 lagen nach der Verabreichung durchgeführt. Die
Radioaktivität wurde im Vollblut, im Blutplasma, in den
Blutkörperchen, im I ler/. in den Nieren, der Leber, der
Milz und im Harn nach 24 Stunden gemessen. Die Aktivität wurde im Kastcnscinlillationszählcr der Firma
IX KO-I lekironics bestimmt. Die Ergebnisse der Messungen uirclen als Impulszahlen (1 ml der Probe/
100 s) ausgedrückt, und dann auf das ganze Organ oder
im Falle νr»n Muskeln und vom Darm auf 5 g des
Ciewebcs umgerechnet. Die gewonnenen Ergebnisse sind in F i g. I dargestellt.
Wie aus der Figur zu ersehen ist. unterliegen die Hydrolysale nach oraler Verabreichung an Ratten der
Absorption und langsamen Umwandlungen in den Organen, was ein Beweis seines hohen biologischen
Wertes ist. Fs wurd: bewiesen, daß in den ersten 24
Stunden der Beobachtung ungefähr 23% der Markierung im Harn ausgeschieden, nach Il Tagen der
Beobachtung hingegen 45ni> der Markierung in der
Leber der geprüften Ratten enthalten sind. In den restlichen Organen wurde eine bis zu 45 Tagen
dauernde geringe Radioaktivität festgestellt, was ein Hinweis darauf ist. daß das gewonnene Hydrolysat
verhältnismäßig langsamen Umwandlungen unterliegt. Gemäß den bisherigen Prüfungen der biologischen
Eigenschafteil der nach dem erfindungsgemäßen Verfahren gewonnenen Hydrolysate kann festgestellt
werden, daß die gewonnenen Hydrolysate
1. keine immiinogenen Eigenschaften im Verlauf
einer langfristigen Intraadereinführung bei Versuchstieren aufweisen und keinen anaphylaktischen
Schock bei Meerschweinchen bewirken.
2. nicht toxisch sind und den Versuchstieren während einer langen Zeitperiode in die Adern verabreicht
werden können,
3. in die Organe und Gewebe eingebaut werden und vorteilhafte Wirkung bei experimentell erzeugten
anämischen Schock und Anämie nach starkem Blutverlust aufweisen.
Hierzu 1 Blatt Zeichnungen 230 264/249
Claims (4)
1. Verfahren zur Herstellung von nicht immunogenen,
biologisch aktiven Eiweißhjdrolysepräparaten durch enzymatische Hydrolyse von unlöslichen
tierischen Eiweißstoffen, wobei die enzymatische Hydrolyse unter bekannten Bedingungen durch
Einwirkung von proteolytischen Enzymen in Konzentrationen von 0,1 bis 10% unter Einhaltung eines
konstanten, für die Wirkung des eingesetzten Enzyms oder Enzymgemisches optimalen pH-Wertes
und bei Temperaturen im Bereich von 308—32 Γ K unter Zugabe von 1 bis 9% Chloroform
und/oder Toluol zu Gemischen mit alkalischem pH-Wert durchgeführt wird, und wobei die erhaltenen
Hydrolysate gegebenenfalls durch Entkeimungsfilter filtriert und/oder mittels bekannter
Verfahren bis auf einen Trockenmassegehalt son 85 bis 993% kontrolliert entwässert werden, dadurch
gekennzeichnet, dnP die Hydrolyse des ständig gerührten Gemischs dann unterbrochen
wird, wenn im Hydrolysat 15 bis 100 mg/ml Gesamtstickstoff sowie ein Gehalt an freien
Aminosäuren von 03 bis 4 Gew7Vol.-% vorliegen, wonach das erhaltene Hydrolysat einige Male im
Temperaturbereich von 2650K bis 249° K tiefgefroren und wieder aufgetaut wird, danach je nach dem
pH-Wert des Hydrolysats mit NaOH oder HCI auf den pH-Wert von 7 neutralisiert wird und danach
nach dem Vodampfen des Chloroforms und/oder Toluols bei 313° K. abgeschleudert und/oder auf
Nutschen-filtriert wird.
2. Verwendung der nach dem Verfahren gemäß Anspruch 1 hergestellten EiwcÜhydrolysepräparate
als nicht immunogene Blutersalzmittel.
3. Verwendung der nach dem Verfahren gemäß Anspruch I hergestellten Eiweißhydrolysepräparate
als auf beliebigem Wege verabreichbare Nährmittel zur Deckung des Tagesbedarfs eines erwachsenen
Menschen an tierischem Eiweiß.
4. Verwendung der nach dem Verfahren gemäß Anspruch I hergestellten Eiweißhydrolysepräparate
als Emulgatoren und/oder natürliche Schaumbildungsmittel.
i>
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