DE2759860C2

DE2759860C2 -

Info

Publication number: DE2759860C2
Application number: DE19772759860
Authority: DE
Inventors: Gert 6237 Liederbach De Schlueter; Wilhelm 6000 Frankfurt De Schuster
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 1977-03-05
Filing date: 1977-03-05
Publication date: 1987-11-19

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur wissenschaftlichen, analytischen und diagnostischen Untersuchung von Proben, wie Gewebeproben oder Einzelzellen, sowie einen Träger zur Durchführung dieses Verfahrens.

Aus der DE-OS 21 41 129 ist ein Verfahren zum Schneiden von dünnen Präparatscheiben mit Hilfe eines Mikrotoms bekannt, bei dem die geschnittenen Scheiben auf einem Band kleben, das nach Aufbringen des Präparats auf den Objektträger aufgelöst wird. Dadurch können empfindliche, dünne Gewebeschnitte ohne Beschädigung zum Untersuchungsort transportiert werden. Die Gewebeschnitte liegen jedoch lediglich auf dem Band und müssen sofort untersucht werden.

Der vorliegenden Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zu entwickeln, mit dem wissenschaftliche, analytische oder diagnostische Untersuchungen schnell, einfach und verläßlich durchgeführt werden können. Dabei sollte auch eine haltbare Aufbewahrung von Proben für eine spätere Untersuchung ermöglicht sein.

Es hat sich nun gezeigt, daß sich diese Aufgabe in technisch fortschrittlicher Weise lösen läßt, wenn die Proben in gleichmäßiger Verteilung in den Träger eingebaut werden und wenn der Träger unmittelbar vor der Untersuchung aufgelöst wird. Der vorzugsweise in Form eines Films oder einer Folie ausgebildete Träger besteht aus einem löslichen Kunststoff, in den die Proben oder die Einzelzellen in möglichst homogener Verteilung eingebaut sind.

Erfindungsgemäß kann z. B. ein entnommenes Zellmaterial zu einem beliebig späteren Zeitpunkt untersucht werden. Hierzu wird eine z. B. mit entsprechenden Farbstoffen versehene Folie einseitig mit Wasser angelöst, mit der Fläche, an der sich die zu entnehmenden Zellen befinden, kontaktiert und wieder abgezogen. Hierauf befinden sich die Zellen an der Klebfläche der Folie und können durch kurzes Eintauchen in einer Fixierflüssigkeit, z. B. Äthanol, welches die Folie nicht auflöst, fixiert werden. Anschließend wird die Folie mit der klebenden Fläche auf einen Objektträger aufgebracht, wodurch alle fixierten Zellen zwischen Folie und Objektträger eingeschlossen sind. Der Objektträger mit den Zellen kann nunmehr verschickt, gelagert oder anderweitig aufbewahrt und zu einem späteren Zeitpunkt nach Auflösen der Folie in Wasser untersucht werden. Anstelle des kontaktierten Objektträgers kann auch eine zweite lösliche Folie für das Einschließen der Zellen verwendet werden. In diesem Fall kann es zu späteren Untersuchungen zweckmäßig sein, das gesamte Kunststoffmaterial aufzulösen und die Zellen durch Zentrifugieren von der Lösung zu trennen.

Träger, in denen die Zellen eingeschlossen sind, können gleichzeitig die zur Durchführung von Untersuchungen erforderlichen Reagenzien, z. B. Farbstoffe, enthalten.

Durch die Erfindung ist auch die Möglichkeit gegeben, z. B. in Lehrkursen einer größeren Gruppe von Teilnehmern (z. B. Fachgebiete der Medizin und Biologie, auch in Schulen) jeweils Zellen desselben Ausgangsmaterials in ausreichender und repräsentativer Menge zur Verfügung zu stellen. An diesem gut erhaltenen Material ist es möglich, den anatomischen und zellulären Organaufbau zu studieren sowie auch pathologische Veränderungen nach feinmorphologischen Merkmalen erkennen zu lernen. Außerdem lassen sich an Zellmaterialien aus diesem Verfahren Färbetechniken erlernen und erproben.

Der erfindungsgemäße lösliche Kunststoffträger besteht vorzugsweise aus Polyvinylalkohol oder Polyvinylpyrrolidon. Besonders geeignet ist ein Vinylpyrrolidonpolymerisat mit einem Molekulargewicht von ca. 40 000 bis ca. 700 000, das aus Vinylpyrrolidon-Vinylacetat-Mischpolymerisaten mit unterschiedlichen Vinylacetatanteilen und aus einem teilverseiften niederpolymeren Polyvinylalkohol hergestellt wird.

Zum Lösen des Kunststoffträgers sind Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemische geeignet, welche gegenüber den zu untersuchenden Materialien keine schädlichen Wirkungen entfalten und die durchzuführende Reaktion nicht beeinflussen. Vorzugsweise wird ein Träger verwendet, der in Wasser löslich ist. Andere geeignete Lösungsmittel sowie ihre Mischungen mit Wasser, z. B. Alkohol/ Wasser- bzw. Aceton/Wasser-Gemische, können ebenfalls eingesetzt werden. Die Mischungsverhältnisse der Lösungsmittelkomponenten können dem jeweiligen Löslichkeitsgrad des verwendeten Kunststoffs bzw. der Art der durchzuführenden Reaktion angepaßt werden.

Die erfindungsgemäßen Kunststoffträger werden dadurch hergestellt, daß die Probematerialien, z. B. Zellen, in die Kunststofflösung eingebracht werden. Aus dieser Kunststofflösung wird anschließend eine Folie oder ein Formkörper gebildet. Filme oder Folien von z. B. 0,1 mm Dicke können durch Aufrakeln der entsprechenden Polymerisatlösungen auf eine Unterlage, z. B. Glas oder Polyäthylenfolie, erhalten werden. Dadurch sind die Proben mit Kunststoff umhüllt und haltbar eingeschlossen. Der Kunststoffträger kann auch in anderen, für die Aufbewahrung oder Dosierung geeigneter Formen, z. B. Perlen oder Kugeln, vorliegen.

Die Art und Menge der Materialien sowie deren Verteilungsgrad im später entstehenden Kunststoffkörper bzw. Kunststoffolie können vorher durch entsprechende Dosierung und Homogenisierung in der Lösung exakt vorbestimmt und den späteren Erfordernissen angepaßt werden.

Das nachfolgende Beispiel erläutert die vorliegende Erfindung.

Beispiel

Zellmaterial eines Vaginalabstrichs, welches über Alkohol (50%) suspendiert wurde, wird wie folgt mit den Bestandteilen des Kunststoffträgers vermischt:

7,2 g alkoholische Zellsuspension (Äthanol) auf 100 Gew.-Teilen Mischung aus
30 Gew.-Teilen Polyvinylalkohol
12 Gew.-Teilen Glycerin p.A.
58 Gew.-Teilen Aqua dest.

Aus dieser Mischung wird eine Folie in der Dicke von 0,1 mm hergestellt. Ein Foliensegment in der Größe von 160 × 200 mm enthält auf der Fläche verteilt eine Anzahl von ca. 3 × 10⁶ Zellen.

Claims

1. Verfahren zur wissenschaftlichen, analytischen oder diagnostischen Untersuchung von Proben, wie Gewebeproben oder Einzelzellen, dadurch gekennzeichnet, daß die Proben in gleichmäßiger Verteilung in den Träger eingebaut werden und daß der Träger zum Zwecke der Untersuchung unmittelbar vor der Untersuchung aufgelöst wird.

2. Träger zur Durchführung des Verfahrens nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß dieser aus einem löslichen Kunststoff besteht, in den die Proben oder Einzelzellen eingebaut sind.

3. Träger nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Zellen in homogener Verteilung in dem Kunststoff eingebaut sind.