DE2713906A1

DE2713906A1 - Arzneimittel insbesondere zur behandlung der schweineruhr

Info

Publication number: DE2713906A1
Application number: DE19772713906
Authority: DE
Inventors: Aldo Garzia; Robert Dee Williams
Original assignee: Istituto Chemioterapico Italiano SpA
Current assignee: Archimica SpA
Priority date: 1976-03-31
Filing date: 1977-03-29
Publication date: 1977-10-20
Also published as: PH14610A; JPS52128235A; GB1542549A; BE852982A; IE44807L; ES457383A1; NL7703551A; NZ183718A; IE44807B1; AU511916B2; AU2381377A

Description

Die Erfindung betrifft neue Mittel zur Bekämpfung der Schweineruhr, die als Wirkstoff bestimmte substituierte Chinoxaline enthalten.

Schweineruhr(auch bekannt als Vibrio-Dysenterie oder hämorrhagische Dysenterie) ist eine Krankheit der Eingeweide, die vor allem durch einen schleimig-blutigen Durchfall gekennzeichnet ist mit auf den Dickdarm beschränkten Schädigungen oder Verletzungen. Diese Krankheit tritt weltweit auf und ist auf dem Wege, eines der Hauptkrankkeitsprobleme von Schweinezüchtern zu werden.

Bis vor kurzem wurde angenommen, daß diese Krankheit in erster Linie von Vibrio coli hervorgerufen wird. Arbeiten aus jüngster Zeit legen jedoch nahe, daß eine Spirochäte, Treponema hyodysenteriae an dieser Krankheit Teil hat und in der Tat das ätiologische Primäragens sein kann.

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Üblicherweise beruhen derzeit Kontrollmessungen auf der ständigen Verfütterung von antibakteriellen Mitteln, wobei die Therapie auf der Anwendung höherer Dosen beruht. Solche Arzneimittel sind beispielsweise Furozolidon , Neomycin, Oxytetracyclin, Tylosin, Carbodox, Virginiamycin und Arsanilsäure. Leider geben sie fehlerhafte Ergebnisse, selbst wenn sie in abnorm hoher Dosis angewandt werden.

Es besteht daher weiterhin Bedarf nach neuen Arzneimitteln mit geringer Toxizität und hoher Wirksamkeit für die Bekämpfung von Schweinedysenterie.

Ziel der Erfindung ist daher die Bereitstellung eines Mittels zur Bekämpfung von Schweinedysenterie in Form eines substituierten Chinoxalins, das prophylaktisch oder therapeutisch verabfolgt wird und das selektiv auf die die Schweineruhr verursachenden Organismen wirkt ohne das Gleichgewicht der anderen Organismen im internen biologischen System der Schweine, beispielsweise der Darmflora zu beeinträchtigen.

Die gestellte Aufgabe wird mit Hilfe eines substituierten Chinoxalin-Dioxids (nachfolgend "C-Verbindung") gelöst, das der allgemeinen Formel

CH=CH

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1λ-49 109

entspricht, in der R Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen wie Methyl, Äthyl, Propyl, Butyl oder Pentyl ist. Diese Verbindungen eignen sich insbesondere zur prophylaktischen Behandlung bevor sich die Symtome von Dysenterie oder Ruhr entwickeln.

Die C-Verbindung (en) wird dem Schwein in wirksamer Menge für die Bekämpfung von Schweineruhr verabfolgt. Sie läßt sich vorteilhafterweise dem Schweinfutter zusetzen und zwar in einem Mengenverhältnis von allgemein etwa 25 bis 500 g Wirkstoff je Tonne Futter. Für die Prophylaxe, bei Fehlen von Krankheitssymtomen, werden vorzugsweise 100 bis 200 g Wirkstoff je Tonne Futter während eines Zeitraumes von 3 bis 21 Tagen angewandt. Ist jedoch die Krankheit ausgebrochen oder sind neue Schwine hinzugekommen, deren Vorgeschichte nicht bekannt ist, so empfiehlt sich ein Gewichtsverhältnis von 200 bis 500 g Wirkstoff je Tonne, bis die Gesundheit des gesamten Schweinbestandes sichergestellt ist. Allgemein wird die prophylaktische Behandlung fortgesetzt, bis die Tiere markt- bzw. schlachtreif sind. Die C-Verbindungen können auch dem Trinkwasser für Schweine zugesetzt werden und zwar in einer Menge von 25 bis 500 ppm bezogen auf die Wassermenge. Für prophylaktische Zwecke wird ein Zusatz von 25 bis 200 ppm und für therapeutische Zwecke ein Zusatz von 200 bis 500 ppm Wirkstoff empfohlen.

Besonders brauchbar sind folgende Verbindungen:

CO-1 2-/5-(2-Amino-4-pyrimidinyl)äthenyl7-chinoxalin-1,4-dioxid (bzw. 2-/2-(2-Amino-3-pyrimidinyl)äthenyl7-

chinoxalin-1,4-dioxid) und
CO-2 2-/2-(2-Amino-6-methyl-4-pyrimidinyl)äthenyl7-chinoxalin-1,4-dioxid (bzw. 2-/2-(2-Amino-3-methyl-5-pyrimidinyl)-

äthenyl7-chinoxalin-1,4-dioxid)

- 4 709842/0742

-.A-49 189

Zur Herstellung dieser Verbindungen werden, vorteilhafterweise in einem Molverhä^ltnis von etwa 1:1, Chinoxalin-di-N-oxid-2-carboxaldehyd-dimethylacetal und eine Verbindung der allgemeinen Formel

in der R die obige Bedeutung hat, miteinander umgesetzt.

Die Umsetzung wird vorteilhafterweise in Gegenwart eines starken Säure-Katalysators und eines Lösungsmittels, beispielsweise einer niederen Alkansäure wie Ameisensäure oder Essigsäure durchgeführt. Die Umsetzung erfolgt bei Temperaturen beispielsweise im Bereich von O bis 80 C oder darüber, vorzugsweise im Bereich von 25 bis 50⁰C oder darüber. Wenn die Reaktion beendet ist, beispielsweise nach 10 bis 24 Stunden, wird die gewünschte Verbindung vorteilhafterweise durch Kristallisieren aus Wasser isoliert.

Katalysatoren für die Durchführung dieser Umsetzung sind allgemein als starke Säuren bekannt und jede beliebige starke Säure kann verwendet werden» beispielsweise Salzsäure, Bromwasserst off säure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Arylsulfonsäuren wie Toluolsulfonsäure, Trichloressigsäure u.a.m. Diese Säuren werden allgemein in einem Verhältnis von etwa 0,5 bis 2 Mol Säure je Mol Chinoxalin-Ausgangsverbindung eingesetzt.

Die Ausgangsverbindung Chinoxalin-di-N-oxid-2-carboxyaldehyddimethylacetal ist bekannt. Sie/läßt sich entsprechend dem Verfahren von Haddadin et al., GB-PS 1 305 138, Beisp.XIII, auf das hiermit ausdrücklich Bezug genommen wird, herstellen.

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•|A-'v9 189

Die zweite Reaktionskomponente, nämlich die Pyridinverbindungen, sind ebenfalls bekannt. Sie sind handelsüblich und alle handelsüblichen Produkte können zur Anwendung kommen. Vorzugsweise sollen sie von guter Qualität und frei von schädlichem Material sein.

Die erfindungsgemäßen C-Verbindungen sind brauchbar zum Bekämpfen von Schweineruhr verursachenden Organismen, beispielsweise von Ruhr verursacht durch Vibrio und/oder Treponema Organismen. Die C-Verbindungen weisen eine geringe Toxizität auf und eignen sich für die orale Verabreichung bei der prophylaktischen oder therapeutischen Behandlung von Dysenterie.

Eine Schweinefutterration oder -zuteilungsmenge für orale Verabreichung von C-Verbindungen nach der Erfindung läßt sich auf einfache Weise durch inniges Vermischen einer C-Verbindung alleine oder in Form eines Vorgemisches mit einem üblichen Schweinefuttergemisch zu einem homogenen Produkt herstellen.

Futterrationen bzw. -Zuteilungsmengen im Sinne der Beschreibung sind das für die Schweine vorgesehene Futter. Vorzugsweise wird eine C-Verbindung gründlich hiermit vermischt und auf diese Weise gleichmäßig im gesamten Futter dispergiert. In Betracht kommt weiterhin ein Besprühen der täglichen Futtermenge in Form eines Pulvers oder von Pellets. Die Anwendung ist somit nicht auf eine bestimmte Art der Verabreichung beschränkt.

Die Erfindung wird nun mit Bezug auf die folgenden Beispiele näher erläutert.

Beispiel 1

In einem Reaktionsgefäß wurden 15 ml 99 %ige Ameisensäure, 1,15 g 96 #ige Schwefelsäure, 1,09 g (0,01 Mol) 2-Amino-4-methylpyrimidin und 2,36 g (0,01 Mol) Chinoxalin-di-N-oxid-2-carboxaldehyddimethylacetal vorgelegt. Das Gemisch wurde

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i?

auf 45 bis 5O⁰C erhitzt und 10 h bei dieser Temperatur gehalten. Darauf wurde' abgekühlt, mit 35 ml kaltem Wasser verdünnt und derpH-Wert mit Natriumbicarbonat auf etwa 5 eingestellt. Ein gelber kristalliner Niederschlag fiel aus, der abfiltriert und mit Wasser gewaschen wurde. Erhalten wurden 1,8 g (46 %) 2-/2-(2-Amino-4-pyrimidinyl)-äthenyl7-chinoxalin-1,4dioxid, Fp. 237 bis 239°C, nachfolgend CO-1 genannt.

Die Verbindung wurde in ihrer Wirksamkeit gegenüber 5 Stämmen von Vibrio cholerae getestet und zwar in einer Konzentration von 10, 30 und 100 /Ug/ml_o Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 1 zusammengefaßt.

Weitere Versuche wurden durchgeführt, umdiß Wirkung gegen Vibrio cholerae El Tor Ogawa 6 in Gegenwart von Abwasser zu testen. Die Abwasserproben wurden dem Kanalisationssystem von Modena/Italien entnommen und die Versuche nach Abzentrifugieren der Feststoffanteile mit der überstehenden Flüssigkeit durchgeführt. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 2 zusammengefaßt.

Tabellen 1 und 2:

- 7 709842/0742

Verbindung	Konzentration
	/Ug/ml
CO-1	100
	30
	10
CO-2	100
	30
	10

Tabelle 1 Wirkung auf verschiedene Stämme von Vibrio Cholerae

Classical Classical El Tor Ogawa El Tor Ogawa El Tor Inaba Inaba 35 Ogawa 41 6 8 4

\ - : kein Wachstum nach 48 h/37°C
ο

-J + : Wachstum gerade bemerkbar

¹^ + : deutliches Wachstum, aber geringer als in den nicht behandelten Kontrollproben

++ : Gleiches Wachstum wie in nicht behandelten Kontrollproben

Tabelle 2

49 189

Probe CO-1 ' Wirkung nach

"konzentration 24 h 48 h 5 Tagen

Kontrolle + Vibrion Abwasser

Abwasser + Vibrion

Abwasser + Vibrion 5

Abwasser + Vibrion 10

Abwasser + Vibrion 20

Abwasser +Vibrion 30

In einer Dosis von 10 /Ug/ml CO-1 wurde bereits das Wachstum von drei Stämmen unterbunden und bei einer Dosierung von 100 /Ug/ml war das Wachstum der beiden übrigen Stämme nur gerade noch bemerkbar.

Die Wirksamkeit von C0-1 wurde in vitro gegenüber Treponema hyodysenteriae in an sich bekannter Weise getestet. Die Mindesthemmkonzentration (niedrigste Konzentration der Verbindung in einer Verdünnungsreihe, mit der Wachstum verhindert wird) betrug 0,1 /Ug/mlο Die minimale bactericide Konzentration (niedrigste Konzentration der Verbindung, bei der keine lebensfähigen Treponema bei Verdünnung und bei Übertragung der Kultur aus dem Kulturmedium auf Blutagarplatten beobachtet wird) lag über 0,1 /Ug/ml, jedoch unter 1 /Ug/ml.

Die akute Toxizität der Verbindung wurde mit Hilfe verschiedener Verabreichungsmethoden bei vier Tierarten, nämlich Maus, Ratte, Meerschweinchen und Kaninchen bestimmt. In allen Versuchen erwies sich die Verbindung als wenig toxisch. Die Ergebnisse sind in den nachfolgenden Tabelle 3» 4, 5 und 6 wiedergegeben.

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1A-49 109 — ar _

Im Hinblick auf die günstigen Ergebnisse hinsichtlich der akuten Toxizität wurde die Verbindung zusätzlich oral in subakuter aber relativ hoher Dosis 15 Tage lang an Mäuse und Ratten verfüttert. Die Ergebnisse bezüglich Todesrate, Gewicht, Leber und Nieren sind in den folgenden Tabellen 7 und 8 zusammengefaßt,

Im Hinblick auf die hierbei erhaltenen günstigen Ergebnisse wurde weiterhin die chronische Toxizität bei weiblichen Mäusen untersucht. Diese Ergebnisse sind in Tabelle 9 zusammengefaßt. Eine letzte Versuchsreihe wurde über die teratogene Wirkung bei Mäusen und Ratten (männlich und weiblich) durchgeführt. Die Zahl der lebend geboreren Tiere war vergleichbar der Anzahl in Kontrollier suchen. In keiner der Gruppen wurden Mißbildungen beobachtet. Die Ergebnisse sind in Tabelle 10 zusammengefaßt.

	Dosis	Tabelle 3	6/6	1/12	7 Tagen
Akute	mg/kg	Toxizität von CO-1 bei Mäusen (weiblich)
	Mortalität»* nach			6/6
2000	1 Ta« 2 Tagen 4 Tagen	Ösophageale Verabreichung		6/6
1000	Endoperitoneale Verabreichung			6/12
500	6/6		0/18
250
	0/6
0*	1/12
4000	0/12
2000	0/12
1000

♦Mit Magensonde und lediglich Träger (Blindprobe) ♦♦Anzahl tote/behandelte Tiere

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- 10 -

T a b e 1 1

Akute Toxizltät von-C0-1 bei Ratten

a. 1 ..Versuchsreihe

Ge- Verabreichung
schlecht mg/kg

Mortalität in 21 Tagen Körpergewicht. g bei Beginn

(m±SEM) Termination

Statistische Signifikanz (°)

M	ösophageal	4000	0/4
M	ösophageal	0(x)	.1/4
F	ösophageal	4000	0/4
F	ö-s.ophageal	0(x)	1/4
-J ^M	e ndoperitoneal	500	1/4
O ^M	endoperitoneal	0(x)	0/4
CO F	endoperitoneal	500	2/4
co F	e ndoperitoneal	0(x)	0/4

234,5+13,8 233,7+3,7 201,2+4,2 189,2+3,9 234,0+6,2 230,0+5,7 206,2+8,7 207,5+4,3

288,7+13,8

331,0+0,5

238,2+12,1

230,0+10,5

314.3+10,3

324,0+8,7

286,0-272,0

253,5+7,7

t 0,05

0,05

to

'0,05

t 0,05 ^

(xT

nur Träger verabreicht (Blindversuch)

Student^Ts t test

2.Versuchsreihe

Verabreichung

schlecht

mg/kg Mortalität
in 7 Tagen

Körpergewicht

(+ SE)

Termination

M ösophageal

F ösophageal

M intraperitoneal

F intraperitoneal

4000

500

500 0/4
0/4
2/4
0/4

222,5+6,2 252,0+16,6 226,2+6,8 232,5+5,9

231,7+15.7 25 3 _t 5+12'1 225,0-212 218,2+7,0

Kumulative Ergebnisse .nhnp des Geschlechts

Verabreichung

.Mortalität in 7 Taeren

ösophageal
ösophageal
i ntraperitoneal
intraperitoneal

0(x)
4000

0(x)
500

0/S 0/16 0/3 4/16

(x) nur Träger verabreicht fBlindversuch)

1Λ-49 - Yr-

Tabelle 5

Akute Toxizität von CO-1 bei Meerschweinchen ösophageale Verabreichung

Dosierung	Mortalität in 21 Tagen
mg/kg	(Tote/Behandelte)
500	0/4
1000	1/4
2000	5/6
4000	6/6
Oix)	0/13

(x)nur Träger verabreicht (Kontrolle)

Tabelle 6

Akute	Toxizltät von	CO-1 bei Kaninchen	Körpergewicht g bei Beginn	(m+SE) Termination
	ösophageale Verabreichung	2250-2150	2180-2140
Dosierung mg/kg	Mortalität in 7 Tagen	2037+104,3	1922,5+71,5
2000	0/2*	2135+75	2262+215
1000	0/4	2000-2100	165Π-1550
0(x)	0/4
500	0/2

(xTnur Träg-r verabreicht (Kontrolle) * 2 tote Tiere von 7 behandelten in 4 Tagen

7 0 9 8 U 2 I OJ k 2

- 12 -

Tägliche Dosis

Tabelle Subakute Toxizität von cO-1 bei

mg. CO-I _mittel_S Magensonde während 15 Tagen

Orale Behandlung	Mortalität	% Änderung des Körpergewichts (m+SE)	Gew.-Verhältnis von frischem Organ, zu Kpmererewlcht	1 1	Nieren
Träger „,, CO-I, 500 mg Ag/Tag- ο	0/10 0/10	20_f4+4,2 -8,1+3,9	Leber

a.Mortalität und Körpergewicht

Tägl.Dosis: 1 g/kg/Tag während 15 Tagen

Orale Behandlung

Mortalität % Änderung des Körpergewichts

Träger (H₂O)

CO-I in H₂O, 1 g/kg/Tag

Träger (Traganth) (x)
CO-I Traganth

0/12 2/12

0/12 3/12 24,54+0,64 18,5+0,75

25,04+1,18 16,27+1,31

b. SGOT und SGPT (24 h nach letzter Dosis)

Orale Behandlung

Einheiten/ml

SGOT SGPT

Träger :
Wasser

Traganth

CO-I in Wasser

CO-I in Traganth

■cn

116	4
119	CTl
124	9
132	10

- 1A-49 1β9

T a b e J. 1 e 8 _
Subakute Toxlzltät von CO-I bei weiblichen Ratten

Dosis : 2 g/kg/Tag CO-I mittels Magensonde währen! 21 Tage 2713906

Orale" "" ' ~~ Mortalität Körpergewicht (m+SE) Behandlung g bei Beginn Termination

Träger 2/6(x) 200_f0+4_fl 233_f2+5_fl

CO-I, 2 g/kg/Tag 1/6(x) 204_fl+2_f0 210,6+9,6

(x)Tod verursacht durch Fehler bei der Ösophagus-incannalutation (Ernährung). Diese Diagnose wurde post-mortem bestätigt.

Dosis:2 g/kg/Tag CO-I mittels Magensonde während

21 Tage

Orale (m+SE)

Behandlung Lunge Leber Nieren

Träger

0,85+0,06 3,45+0.07 0.95+0.04 (3 Tiere ) ~ "

CO-I

l_r07±0_f09 NS 4,54+0_f10 NS(x) l_f04+03 NS (5 Tiere >

(x) Tod verursacht durch Fehler bei der Ösophagus-incannäiutation (Ernährung). Diese Diagnose wurde post-mortem bestätigt.

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'_IA__U9 ₁₈₉

T a b e 1 1 35

Chronische Toxizität bei weiblichen Mäusen Tägliche Behandlung mittels Magensonde während 18 Wochen (4,5 Monate) 2713906

α. Mortalität und Körpergewicht

3/10	28	,2+1	,9	33,	0+1,	1
2/10	30	,4 + 0	,5	30,	0+0,	7
0/10	27	,3+0	26,	7+0,	7

Orale Behandlung Mortalität Körpergewicht in g (_m+SE) bei Beginn Termination

Träger

CO-I, 500 mg/kg/Tag

CO-I, 250 mg/kg/Tag

b. Urin-Ausscheidung (Urinmenge ausgeschieden von 6 Tiren in 6 h

Orale Behandlung Urinmenge (ml)

Kontrollen 6 CO-I, 500 mg/kg/Tag 7 CO-I, 250 mg/kg/Tag GjJi

c. Blut-Glucose. Mittelwert für 6 Tiere. Blutproben wurden 24 h nach der letzten Dosis entnommen

Orale Behandlung - Blut-Glucose

Kontrollen l_r14 CO-I, 500 mg/kg/Tag l_r06 CO-I, 250 mg/kg/Tag 1,10

d. SGPT u-icl SGOT. Mittelwerte für 6 Tiere, Blutproben wurden 24 nach der letzten Dosis entnommen.

Oral e Behandlung Einheiten -/ml

, SGOT SGPT

Kontrollen 125 5

CO-I, 500 mg/kg/Tag 159 ~ 6

CO-I, 250 mg/kg/Tag llj] 5_

SGPT = Serum-Gentamie-Brenztraubensäure-Transaminase SGOT = Serum-Gentamie-Oxaa.esslgaäur.ejTransaminase '

- 15 ORIGINAL INSPECTED

O (O OO

Tabelle 9 (Forts.)--

Chronische Toxin tat bei w««iKH _Chen

e. Frischgewicht von. Organen

Orale' Behandlung Gew.-Verhältnis von frischem
Organ zu Körper " .

Nieren. Hpr7.. T «her

(m+SE, 4 Tiere) e

Kontrollen 0,938+0,044

CO-I, 500 mg/kg/Tag 1,07+0,04 CO-I, 250 mg/kg/Tag 0,87+0,08 0,481+0,055
0,47+0,02

0,60+0,08

4,57+0,15 0,674+0,044 4,66+0_r91 1,011+0,110 4,57+0,25 0,731+0,035

Tabelle 10

Teratogene Untersuchung -

Orale Behandlung

trächtige/ behandelte

Tiere

lebende Föten je Wurf

Körpergewicht

(m+SE) ^öer ,^Fo'
ten/ g

Föten fliit Mißbildungen

CO-I, 250 mg/kg/Tag Kontrollen

3/10(x) 9/10

10,3±0_r6 9,0+0_f9

1,42+0,05 1,46+0,07

0 0

(x)Eventuell Zufallsergebnis: Untersuchung sollte wiederholt werden, um festzustellen, ob CO-1 tatsächlich Schwangerschaft verhindert.

b. Ratte: Versuchsbedingungen wie bei a)

Orale Behandlung

trächtige/ behandelte Tiere

lebende Föten Je Wurf

Körpergewicht

(m+SE) ^{der FÖ}-(m+SE) ten/ g

Föten mit. Mißbildungen

CO-I, 250
Kontrollen

7/10 6/10

10,8+0,86 11,3+1,12

7,08+0,19 6_r82+0,40

0 0

WMg

— T7 ~

Beispiel 2

Verbindung CO-1 wurde mit Schweinefutter im Verhältnis 200 g/t vermischt und an Schweine verfüttert, die in einem Bereich gehalten wurden, in dem zuvor Schweineruhr ausgebrochen war. Die

Tiere dieser Herde blieben während der gesamten Verweildauer in diesem Bereich frei von Krankheitesyratomen. Eine zweite Herde wurde in einem gleichartigen Bereich gehalten, in dem zuvor Schweineruhr ausgebrochen war. Die Tiere wurden mit den gleichen Rationen wie die Tiere der ersten Herde gefüttert, jedoch ohne Verbindung CO-1 oder ein anderes Arzneimittel. Bei vielen Tieren dieser Herde traten Krankheitssymtome auf. Darauf wurde CO-1 mit dem Schweinefutter im Verhältnis 400 g/t vermischt und verfüttert. Die Verbreitung der Krankheit wurde unterbunden und die befallenen Tiere zeigten nach einer gewissen Zeit keinerlei Symtome mehr.

Beispiel 5

In einem Reaktionsbehälter wurde eine Lösung aus 1,15 g 96 %iger Schwefelsäure in 25 ml Essigsäure, 1,23 g (0,01 Mol) 2-Amino-4,6-dimethylpyrimidin und 1,9 g (0,01 Mol) 2-Formylchinoxalin-di-N-oxid vorgelegt.Das Gemisch wurde 16 h auf 40⁰C erhitzt, darauf abgekühlt, mit Wasser verdünnt und mit Natriumbicarbonatlösung bis zu pH-Wert 5 versetzt. Der erhaltene gelbe kristalline Niederschlag wurde abfiltriert und gewaschen; Ausbeute 2,1 g (71 %) 2-/2-(2-Amino-6-methyl-4-pyrimidinyl)-äthenyl7~chinoxalin-1,4 dioxid bzw. 2-/2-(Amino-3-methyl-5-pyrimidinyl)-äthenyl7-chinoxalin-1,4-dioxid, nachfolgend CO-2 bezeichnet. Die Verbindung schmolz bei 240°C unter Zersetzung.

Die Wirksamkeit dieser Verbindung wurde gegenüber den gleichen fünf Stämmen von Vibrio cholerae wie in Beispiel 1 getestet. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 aufgeführt. Nach 48 h wurde bei drei Organismen jeglicher Wuchs mit einer Dosis von 10 /Ug/ml CO-2 unterbunden und bei zwei weiteren Organismen trat bei einer Dosis von 100 /tig/ml nur gerade bemerkbarer Wuchs ein.

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Verbindung CO-2 wurde weiter wie in Beispiel 1 beschrieben gegenüber Treponema hyodysenteriae getestet. Die Mindesthemmkonzentration betrug etwa 0,1 /ug/ml und die minimale bactericide Konzentration weniger als 1,0 /Ug/ml.

Dann wurde in gleicher Weise wie in Beispiel 1 für CO-t beschrieben die Toxizität der Verbindung CO-2 getestet. Es wurden vergleichbare Ergebnisse erhalten, die zeigten, daß die Verbindung für prophylaktische oder therapeutische Behandlung von Schweineruhr geeignet ist.

Beispiel U

Verbindung CO-2 wurde mit Schweinefutter im Verhältnis 200 g/t vermischt und an Schweine verfüttert, welche in einem Bereich gehalten wurden, in dem zuvor Schweineruhr ausgebrochen war. Die Tiere dieser Herde blieben während ihrer gesamten Verweilzeit frei von Krankheitssymtomen. Eine zweite Herde unter gleichartigen Bedingungen gehalten, erhielt Futter ohne Zusatz von CO-2 oder einem anderen Arzneimittel. Zahlreiche Tiere dieser Herde entwickelten Symtome von Dysenterie. Darauf wurde dem Futter C0-2 zugesetzt in einer Menge von 400 g/t. Die Ausbreitung der Krankheit wurde gestoppt und die krankgefallenen Tiere wurden frei von Symtomen.

Beispiel 5

Schweinefutter enthält üblicherweise 12 bis 18 Gew.-% Protein. Nachfolgend werden in Tabelle 11 Beispiele für die Zusammensetzung der Futter für Ferkelaufzucht, Jungviehhaltung und Fütterung der Tiere bis zur Schlachtreife gegeben.

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Tabelle 11

- 19 -

	kg)¹	1A-43 189	13906	Spurenelementen-Vorgemisch	4,536	kg	bis Schlacht	»44
94	,38	27		CCCSpurenelementen-Mineral	0,600	kg	reife _Λ (59-100 kg)¹	,68
Tabelle	,12		Futter für Jung	Zinkoxid		kg	770	,36
	,08		vieh _Λ (34-59 kg)			kg	116	,81
	,44	735,38			kg	6	,18
i 11	,54	147,10		kg	6	,27
# Ferkelaufzucht	,54	8,17		kg	3	,27
(13,5-34	»27	7,72		kg	2
Maisschrot Nr. 2 667,		3,63		kg	2
SBOM, 44 % 201,		3,63		kg
Dicalciumphosphat 9₍		2,27		kg
Kalkmehl 10,
Jodiertes Salz 4,			kg
ρ Vitamin-Vorgemisch 4,		1,000	kg
Spurenelementen-Gemisch 2,		0,020
Körpergewicht je Tier		0,300
Vitamin-Vorgemisch		0,150
Vitamin A (30 000 IE/g)	0,200
Vitamin D₃(200 000 IE/g)	4,600
BY-24 (Riboflavin)	3,600
Ca-Pantothenat, 45 %	5-Vit.-E) 2,270
Niacin, 98 %
Cholin 25	0,001
Proferm 20 (Vit. B₁₂)	Maisschrot 33,129
Perma E (20 000 IE/454 j	gesamt 45,360
Biotin

5,136 kg Maisschrot 17,544 kg

Gesamt 22,680 kg

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Zu 1 t obigem Futter für Jungvieh wurden 200 g Verbindung CO-2 gegeben, indem die 200 g CO-2 zunächst mit 2,27 kg Futter gemischt und dieses 'Vorgemisch anschließend mit gleichen oder größeren Futteranteilen "verdünnt" wurde, bis die Verbindung CO-2 gleichmäßig in der gesamten Futtermenge verteilt war.

In gleicher Weise wurden die Futtermischungen für die Ferkelaufzucht und für die Schweinefütterung bis zur Schlachtreife mit Verbindung CO-2 versetzt.

Beispiel 6

Die Verbindung CO-2 wurde mit Vorteil auch über das Trinkwasser an die Schweine verfüttert. Allgemein betrug die Zusatzmenge 25 bis 500 ppm bezogen auf das Wassergewicht, beispielsweise etwa 25 bis 200 ppm für die Prophylaxe und 200 bis 500 ppm für die Therapie.

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S ι

Claims

Patentansprüche

'I^ Arzneimittel insbesondere für veterinärmedizinische Zwecke enthaltend als Wirkstoff eine Verbindung der allgemeinen Formel

CH=CH

für
in der R Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe steht.
2. Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß R in der angegebenen Formel des Wirkstoffes für die Methylgruppe steht.
3. Verwendung von Verbindungen der allgemeinen Formel

NH.

CH=CH

709842/0742

ORIGINAL INSPECTED

ΙΛ-^9 181 - 2 -

in der R für Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe steht, als Arzneimittel bei der Behandlung von Schweineruhr.

709842/0742