DE2547622C3 - Test-Set - Google Patents

Test-Set

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DE2547622C3
DE2547622C3 DE19752547622 DE2547622A DE2547622C3 DE 2547622 C3 DE2547622 C3 DE 2547622C3 DE 19752547622 DE19752547622 DE 19752547622 DE 2547622 A DE2547622 A DE 2547622A DE 2547622 C3 DE2547622 C3 DE 2547622C3
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agar
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liter
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Mohamed Dr. 6507 Ingelheim Abdou
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CH Boehringer Sohn AG and Co KG
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor

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Description

und einen Hnd-pll-Wert von 7,2 ± 0,1 aulweist, DNase-Ampholyt-Agar zusammengesetzt ist Tryptose 20.0 g
Desoxyrihonucleinsäurc 2,0 g
Natriumchlorid 5,0 g
N-Alkvl-Aminoerotonsäure 0,1 5 g
der aus Die HrIIiIdUHg betrifft ein fest-Set aus 8 selektiven Nährmedien zur Bestimmung der Krregergaltungen bei Entzündungen des Urogenitallrakts.
Fest-Sets zur Bestimmung von Mikroorganismen in verschiedenem llnlersuchungsmaterial sind bereits beschrieben worden, beispielsweise in der deutschen Offenlegungsschrift 24 08 167. Die dort angegebenen Kombinationen bestehen jedoch aus bekannten Nährmedien, deren Selektivität nicht ausreicht, um die gewünschte Bestimmung der Hrregcrgattungen /u ermöglichen.
Das erllnduiigsgemäße Test-Set vermeidet den Nachteil der unzureichenden Selektivität; es umfaß! folgende Nährmedien:
1. Lactose-Tergitol-P-Agar (modifiziert)
2. C'itrat-G-Agar (neu)
Anipholyt-Cadmiumsulläl-Glycerin-Agar (modifiziert)
4. I'henylalanin-Lithiumehlorid-G-Agar (neu)
5. DNase-Anipholyi-Agar (modillz.iert)
6. Mannit-Kochsalz-Thioeyanat-Agar (neu)
7. T. T. CrA/id-P-Agar (modifiziert)
8. Pepton-Leberhydrolysat-Tliiocyunat-Agar (neu)
Hei den mit »neu« gekennzeichneten Nährböden
handelt es sich um solche, die in gleicher oder ähnlicher/.usammcnsetzung bisher nicht beschrieben wurden. Als »modifiziert« wurden diejenigen Nährböden gekennzeichnet, die von bekannten Nährmedien durch Veränderung der Menge der Bestandteile und/oder Zugatie zusätzlicher Stoffe für den erfindungsgemäßen /weck abgewandelt wurden.
Mit dem erfindungsgemäßen Test-Set werden diejenigen Erregergattungen schnell und qualitativ sicher erfaßt, die für einen sehr hohen Prozentsatz von I lamwcgsinlektcn ursächlich sind (Iischerichia, Proteus, Klebsiella, Entcrohactcr, Pscudomonus, Serratia, Providencia, Citrobacter, Staphylococcus, Streptococcus, Candida). In Verbindung mit der Sensibilitätshcstimmung gemäß der deutschen Offcnlegungsschrift P 23 01 211 schafft das ertlndungsgemäße Test-Set die Grundlage für eine erfolgreiche Therapie.
Die Erfindung ist durch den Patentanspruch definiert.
Im folgenden werden Zusammensetzung, Zubereitung und Cliarakterislika der 8 Nährboden beschrieben.
Die sterilisierten Nährböden werden zweckmäßig in den Utiterteil steriler Tiefziehpackungen gefüllt, die einen gut schließenden Deckel besitzen. Der Unierteil besitzt 8 in zwei Viererreihen ungeordnete quadratische Vertiefungen von etwa 8- lOcnr Grundfläche und 1,5-1 cm Tiefe. In jede Vertiefung gibt man einige ml. am besten etwa 5 bis 6 ml, der obengenannten Nährböden. Die Packung wird dann mit dem Deckel verschlossen und in sterile Kunststofffolie eingesiegelt.
Die Bestandteile der Nährböden sind handelsübliche Produkte.
I. Lactose-Tergitol-P-Agar
Zusammensetzung 10,0 g
Lactose 5,0 g
Polypepton 3,0 g
Hefeextrakt 0,15 g
Nalriumheptadecylsulfat 0,1g
Pimaricin 0,025 g
Bromthymolblau 18,0 g
Agar-Agar 1 Liter
Au.ua dest.
Hnd-pM-Werl: 6,9 ±0,1
Zubereitung
36,18g der genannten Mischung, jedoch ohne Pimaricin, werden in 900 ml Aqua de*!, suspendiert, eingeweicht, mit Hilfe eines Magnetrührers gut durchgemischt und anschließend ca. 10-15 Minuten auf dem siedenden Wasserbad erhitzt. Die Suspension wird auf 50 C" abgekühlt und der pll-Wert gemessen (6,8 ±0,1). Danach wird der Nährboden 15 Minuten bei 12! C im Autoklav sterilisiert, yui' 55 C abgekühlt und mit K)OmI einer 0,1 %igen slerilfillrierten Pimaricinlösung versetzt, mit Hilfe eines Magnetrührers gut durchgemischt und zu 5,5-6,OmI in Tiefziehpackungen verteilt.
Charakterislika
Natriumhcpladccylsulfat in der angegebenen Konzentralion hemmt das Wachstum der gram-positiven Erreger, nämlich Staphylococcus und Streptococcus.
Pimaricin in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum von Candida und anderen liefen und Schimmelpilzen.
In Kombination mit Cilrat-G-Agar und Bewegliehkcitstest können die Gattungen Citrobacter, Hnterobacter, Kscheriehia und Klcbsiellu voneinander unterschieden werden.
Zubereitung
25,32g der genannten Mischung, jedoch ohne Pimaricin, werden in 900 ml Aqua dest. suspendiert, eingeweicht und mit Hilfe eines Magnelrührers gut durchgemischt und anschließend ca. 10-15 Minuten aul dem siedenden Wasserbad erhitzt. Die Suspension wird auf 50 C abgekühlt und der pH-Wert gemessen (7,3 ± 0,1). Danach wird der Nährboden 15 Minuten bei 121 C im Autoklav sterilisiert, auf 55 C abgekühlt und mit 100 ml einer 0,1 "/«igen Pimaricinlösung versetzt, mit Hilfe eines Magnetrührers gut durchgemischt und /u 5,5-6,0 mi in Tiefziehpackungen verteilt.
Charakteristika
Gullesalzmisehung in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum der gram-positiven Krreger, nämlich Staphylococcus und Streptococcus.
Pimaricin in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum von Candida und anderen Hefen und Schimmelpilzen. Glucose + Hefeextrakt in der genannten Konzentration verkürzen die W achslums-Lag-Phase, ermöglichen eine schnellere Citratspaltung und Ablesung innerhalb von 24 Stunden.
3. Ampholyt-Cadmiunisullat-Glycerin-Agar
Zusammensetzung
Proteose Pepton 20,0 g
Natriumchlorid 1,2 g
Dikaliumhydrogenphosphat 0,8 g
Kaliumnitrat 0,6 g
Calciumnitrat-ietrahydrat 0,4 g
Magnesiumsulfat-hcptahydrat 0,6 g
Cadmiumsulfat-octahydrat 0,005 g
Glycerin 8,0 ml
N-Alkyl-Aminocrotonsäure 0,75 g
Agar-Agar 15,0 g
Aqua dest. 1 Liter
lind-plt-Wert: 7,2 ±0,1
Zubereitung
0,75 g N-Alkyl-Aminocrotonsäure + 8 ml Glycerin -is werden in 1000 ml Aqua dest. mit Hilfe eines Magnetrührers gut suspendiert und dann mit 38,6 g der restlichen Nährbodenbestandteile versetzt und anschließend etwa 10-15 Minuten auf dem siedenden Wasserbad erhitzt. Die Suspension wird auf 50 C abgekühlt so und der pH-Wert gemessen (6,9 ±0,1). Danach wird der Nährboden 15 Minuten bei 121 C im Autoklav sterilisiert, auf 50 C abgekühlt und zu 5,5-6,0ml in Tiefziehpackungen verteilt.
2. Cilrat-G-Agar Zusammensetzung 4,0 g
Trinalriiimcitnit-dihydrat 1,0 g
Gallesalzmischung 0,1 g
Pimaricin 0,05 g
Glucose 0.25 g
llefecxtrakt 5,0 g
Natriumchlorid 0,02 μ
Phenolrol 15,0 g
Agar-Agar 1 Litei
Aqua dcsl.
tnd-Dll-Wcrt: 7.1 ±0.1
Charakteristika
N-Alkyl-Aminocrotonsäure und Cadmiumsulfat in den genannten Konzentrationen werden sowohl die gram-positiven als auch die meisten gram-negativen Bakterien sowie Candida und andere Hefen und Schimmelpilze hemmen. Unter den gram-negativen Bakterien, die auf diesem Nährboden wachsen können, ist nur Pscudomonas in der Lage, Pyoverdin (lluoreszicrendc Pigmente; zu bilden.
Die genannte Zusammensetzung des Nährbodens lördert die Pyoverdinbildung und ermöglicht den Nachweis von Pscudomonas aeruginosa innerhalb von 24 Stunden.
4. Phenylalanin-Lithiumchlorid-G-Agar
Zusammensetzung
Prateose Pepton 10,0 g
Heleextrakt 3,0 g
Natriumchlorid 5,0 g
Dinatriumhydrogenphosphal 5,6 g
Kaliumdihydrogenphosphat 0,2 g
L-Phenylalanin 2.0 g
Gallesalzmischung 1,0 g
Lithiumchlorid 3,0 g
I'imaricin H.! g
Agar-Agar 15.0 g
Aqua dest. 1 Liter
Lnd-pH-Wert: 7.2 ±0.1
Zubereitung
44,Xg der genannten Mischung, jedoch ohne I'imaricin, werden in 9(K) ml Agua dcst. mit Hilfe eine·. Magnctrührcrs gui suspendiert und etwa 10 15 Minuten auf dem siedenden Wasserbad crhil/t. Die Suspension wird auf 50 (abgekühlt und der pH-Wert gemessen (7,3 ±0.1). Danach wird der Nährboden 15 Minuten hei 121 ( im Autoklav sterilisierl.aul 55 (abgekühlt und mit HKi ml einer 0.1 "/!.igen stcrilliltriertcn Pimarieinlösung »ersetzt, mit Hilfe eines Magnetrührers gut durchgemischt und /u 5,5-ii.C ml Tiefzichpackungen verteil!.
('harakteristika
(iallesalzmischung in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum der gram-positiven Lrrcger.
Pimaricin in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum von Candida und anderen Hefen und Schimmelpilzen.
l.ithiumchlorid reduziert das Wachstum der meisten gram-ncgativcn Lnlcrobactcriacccn, außer l'rotcus und l'roviucncia.
Lediglich Proteus und Providcncia sind in der I.agc. Phenylalanin in Phenylnrcnztraubensäurc zu verwandeln. Nach Zusatz einiger Tropfen einer 10"'i.igcn Hiscn(III)-chlorid-Lösung tritt eine grüne Farbe in !■Erscheinung (Phenylalanindcsaminasc-Tcst).
5. DNasc-Ampholyt-Agar
Zusammensetzung 20,0 g
Tryptosc 2,0 g
Dcsoxyribonuclcinsäurc 5,0 g
Natriumchlorid 0,15 g
N-Alkylaminocrotonsäure 15,0 g
Agar-Agar 1 Liter
Aqua dest.
bei 121 C im AutokLn sterilisiert, aul'5(i (abgekühlt und /u 5.5"6.OmI in Tief/iehpackungen verteilt.
( harakteristika
N-Alkyminocrotonsäure in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum der gram-positiven Lrreger, aber auch das der Helen und Schimmelpilze.
Unter den F.rregern von llarnwegsinfektioneri, die aul diesem Nährboden wachsen können, ist lediglich Serratia in der Lage. DNase anzugreifen und die trübe Auslallung nach Zusatz von ln-Salzsäure hervorzurufen.
Fnd-pil-Wcrl: 7,3 ±0,1
Als Indikator können 0,05 g/Liter Methylgrün zugesetzt werden. Uci der Auswertung kann dann auf die Salzsäure-Zugabe verzichtet werden
Zubereitung
0,15 g N-Alkylaminocrotonsäure werden mit Hilfe eines Magnetrührers in 100(1 ml Aqua dest. gut suspendiert und dann mit 42 g tier restlichen Substanzen versetzt und anschließend etwa 10 15 Minuten auf dem siedenden Wasserbad erhitzt. Die Suspension wird auf 5(1 (' abgekühlt Li mi der pl I-Werl gemessen (7.(1 4 I). 11. Danach wird der Nährboden 15 Minute η (>. Mannil-Kochsal/-"! hiocyanat-Agar
Zusammensetzung
("aseinpcpton
1 !fischextrakt
D-Mannil
HcleeUrakl
Dikaliumhydmgcnphovphat
Liihiunichlorid
Natriumchlorid
Kaliumlhiocvanat
Phenolrot
Ag.ir-Ag.ir
Aqua dest
Lnd-pll-Wert: 7.2 ± 0.1
10.0 g
5.0 g
10,0 g
5.0 g
IfMJg
5.0 g
XOg
50,0 g
KMIg
0.02 g
15.0 g
1 Liter
Zubereitung
125.02 g des dehydrierten Nährbodens werden in 1000 ml Aqua dest. mit Hilfe eines Magnelrührers gut suspendiert und etwa Ki 15 Minuten aul dem siedenden Wasserbad erhitzt Die Suspension wird auf 50 (abgekühlt und derpll-Wert mittels einer l()%igen Natriumhydroxid-Lösung aul 7.4 eingestellt. Danach wird der Nährboden 15 Minuten hei 121 C im Autoklav sterilisiert, auf 50 C abgekühlt und zu 5.5 d.Oml in Ticlzichpaekungen verteilt
(harakteristika
Lithiumchlorid + Kaliumchlorid Kaliumthiocyanat in den genannten Konzentrationen hemmen das Wachstum der ganzen lieglcitllora, ohne negative liccinllussung des Staphylococcus-Wacbstums.
Die Mannil-positivcn Staphylokokken wachsen innerhalb von 24 Stunden. Der Mannilabbau zur Säure wird durch Umschlag des pH-Indikators (l'hcnolrol) angezeigt. Der Nährboden wird rötlichgelb bis gelb. Die Mannit-ncgativen Staphylokokken wachsen in kleineren Kolonien, und der Nährboden zeigt keinen Farbumschlag. Demnach ist eine primäre Differenzierung zwischen den Staphylokokken möglich. Die pathogene Spezies Staphylococcus aurcus ist Mannitposiliv, während die Biotypen der ineiMcn nicht pathogcnen Spezies Staphylococcus cpidcrmides und Staphylococcus saprophyticus Mannil-ncgaliv sind.
Der gebrauchsfertige, vorgegossene Nährboden ist. im (icgcnsatz zu bekannten Nährböden, frei von schnell verderblichen bzw. nur kurzfristig lagerlähigcn Substanzen.
7. I. I ( •Azid-r -Agar 20.0 g
Zusammensetzung X(I μ
I ryptose 2.Ou
I leleextrakl
(ilucose
Dinulriumhydrügcnphnsphul 4,0g
Natriumlhiosulfäl 0,3 g
«■-Liponsäure 0,(K)I g
Agar-Agar 15,0 g
Pi marie in 0,1g
2,3,5-Triphcnyltctra/oli urne h lurid 0.1g
Nalriumuzid 0,4 g
Aqua dest. 1 Liter
End-pH-Wcrt: 7,2 ±0,1
Zubereitung
46,3g der genannten Mischung, jedoch ohne Pimaricin, 2,3,5-Triphenylletrazoliumehlorid und Na-Iriumazid werden in 890 ml Aqua dest. suspendiert, eingeweicht und mit Hilfe eines Magnctrührcrs gut durchgemischt und anschließend etwa 10-15 Minuten auf dem siedenden Wasserbad erhitzt. Die Suspension wird auf 50 C abgekühlt und der pH-Wert auf 7,2 eingestellt. Anschließend wird das Medium 15 Minuten bei 121 C im Autoklav sterilisiert und auf 50 C abgekühlt. Danach werden folgende Lösungen (slerilfillricri) zugegeben: KKJmI einer 0,1 %igen Pimaricinlösung, 2,5 ml einer 4%igen 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid-Lösung und 10 ml einer 4%igen Natriumazidlösung. Alle Lösungen sollten höchstens 30 Minuten vor Beginn des Gießens angesetzt und lichtgeschützt aufbewahrt werden. Mit dem Magnetrührer wird gut durchgemischt und zu 5.5-6,OmI in die Tiefziehpackungen verteilt.
Charakterislika
Natriumthiosullat inaktiviert das wachstumshemmende Wasserstoffperoxid, da die Enterococccn keine Katalase zu seiner Spaltung besitzen.
a-Liponsäurc in dieser Konzentration dient als Wuchsstoff für Streptococcus faecium.
Pimaricin in der genannten Konzentration hemmt das Wachstum von Candida und anderen Hefen und Schimmelpilzen. 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid wird durch Streptococcus faecalis zu dem roten bis rotbraunen Farbstoff Formazan reduziert.
Natriumazid in der genannten Konzentration hemmt nur das Wachstum der gram-negativen Begleitflora und läßt die Enterococccn ungehindert wachsen.
8. Pepton-Leberhydrolysat-Thiocyanat-Agar
Zusammensetzung
Mykopepton B '5,0 g
Leberhydrolysat 1,0 g
Glucose 5.0 g
Hefeextrakt 3,0 g
Natriumchlorid 3,0 g
Magnesiumsuifal-heptahydrat 0,25 g
ManganUDchlorid-tetrahydrat 0,001 g
Natriumheptadecylsulfat (Tergitol 7) 0,05 g
Kaliumthiocyanat 20,0 g
Agar-Agar 20,0 g
Aqua desL 1 Liter
End-pH-Wert: 5,8 ±0,1
Zubereitung
67,3 g der genannten Mischung werden in 1 Liter Aqua dcst. suspendiert, eingeweicht und mit Hilfe eines Magnctrührers durchgemischt und anschließend ca. 10-15 Minuten auf dem siedenden Wasserbad erhitzt. Die Lösung wird auf 50 C abgekühlt und der pll-Wcrt auf 5.8 ± 0.1 eingestellt. Danach wird das Medium 15 Minuten bei 121 C im Autoklav sterilisiert, wieder auf 50 C abgekühlt und in die Tief > zichpackungcn zu 5,5-6.0 ml verteilt.
Charaktcristika
Mykopcplon B fördert hauptsächlich das Wachstum von Candida und anderen Hefestämmen. in Nalriumhcptadccylsullät unterdrückt in dieser Konzentration und bei diesem pl I-Wcrt das Wachstum aller gram-positiven Keime.
Kaliumlhiocyanat unterdrückt indergenannten Konzentration und bei diesem pH-Wert das Wachstum '5 aller gram-negativen Begleiikeime.
Anwendung des Tcst-Scts
Das kühl gelagerte Test-Set wird auf Raumtemperatur gebracht. Von Mittelstrahl-Morgenurin wird
ίο der pH-Wert gemessen. Auf jeden Nährboden wird eine Implöse voll der Urinprobe aufgetragen und ausgestrichen, bei Nährboden 5 wird die Probe nur in der Kammermitte strichförmig aufgetupft. Das Test-Set wird dann mit dem Deckel verschlossen und
2s 24 Stunden bei 37 C bebrütet.
Auswertung
Bei sichtbarem Wachstum auf Phenylalanin-l.ithiumchlorid-Agar wird der Agar mit 0,3 ml einer 10"/„igen liisen(lIl)-chlorid-Lösung überschwemmt.
Bei sichtbarem Wachstum auf DNasc-Ampholyt-Agar wird der Agar mit 0,3 ml einer In-Salzsäurc überschwemmt.
Zur Identifizierung der Erregergattungen sind fol-}s gcnde Kriterien für die einzelnen Gattungen ausschlaggebend:
Citrobacter
a) Im Lactose-Tergitol-P-Agar wird Lactose meistens nur langsam fermentiert; der Nährboden wird innerhalb von 24 Stunden blau bis blaugrün
b) Im Citrat-G-Agar wird Citrat angegriffen; der Agai wird hsmbcerrot.
Enterobacter
a) Im Lactose-Tergitol-P-Agar wird Lactose schnei fermentiert; der Agar wird gelbgrünlich; die Ko lonien sind groß und schleimig.
b) Im Citrat-G-Agar wird Citrat angegriffen; der Agai wird himbeerrot.
Escherichia
a) Im Lactose-Tergilol-P-Agar wird Lactose sehi schnell fermentiert; der Nährboden wird mandarinengelb; die Kolonien sind nicht schleimig
b) Im Citrat-G-Agar wird Citrat nicht angegriffen Hefeextrakl + Glucose (0,25 + 0,05 g/l) könner ein sehr schwaches Wachstum zulassen. Der Agai wird hellrosa bis orangenfarbig.
Klebsieila
a) Im Lactose-Tergitol-P-Agar wird Lactose wie vor Enterobacter schnell fermentiert; der Nährboder wird gclbgrünlich wie bei Entcrobaclcr odc: <* manchmal mandarinengelb wie bei Escherichia
die Kolonien sind groß und schleimig wie be Enterobacter. Im Gegensatz zu Enterobacter unc Kschcrichia ist Klcbsiclla nicht beweglich. Di<
Beweglichkeit ist daher /u prüfen, /. B. in hängenden Tropfen.
b) Im Citrat-Ci-Agar wird Citrat angegriffen; der Nährboden wird himbeerrot.
Pseudomonas
Der Ampholyt-Cadmiumsulfat-Glycerin-Agar wird grünlich bis gelb; fluoreszierende Pigmente (Pyoverdin) werden gebildet.
Proteus
Bei gutem Wachstum auf Phenylalanin-Lithiumchlorid-Agar und spätestens 3 Minuten nach Zugabe von ca. 0,3 ml einer Eisen(III)-chlorid-Lösung zeigt Proteus die typische grüne Verfärbung des Nährbodens.
Alle Arten der Gattung Proteus erzeugen das Enzym Urease, das den Harnstoff spaltet. Dadurch wird Ammoniak gebildet, welcher den pH-Wert nach der alkalischen Seite (8,2-9,0) verlagert. Daher ist der pH-Wert der Urinprobe zu messen.
Providencia
Bei gutem Wachstum auf Phenylalanin-Lithiumchlorid-Agar und spätestens 3 Minuten nach Zugabe von ca. 0,3 ml einer Eisen(lII)-chlorid-Lösung zeigt auch Providencia die gleiche typische Farbreaktion wie Proteus. Im Gegensatz zu Proteus wird der pH-Wert des Urins nur geringfügig verlagert.
Serralia
Serratia marcescens bildet auf DNase-Ampholyt-Agar oft rosa bis kirschrote Pigmente. Beim sichtbaren Wachstum auf DNase-Ampholyt-Agar und Zugabe von ca. 0,3 ml einer 1 η-Salzsäure bildet sich um das Wachstum innerhalb von einigen Minuten eine deutliche klare Zone, die von trüber Ausfällung umgeben ist. Serratia marcescens ist zu 96,7% DNasepositiv.
Serratia liquefaciens, die bei Harnwegsinfektionen lediglich eine untergeordnete Rolle spielt, ist zu 69,4% DNase-positiv. Weitere gram-negative Stäbchen, die bei llurnwegsinfektionen vorkommen, können /war auf diesem Nährboden wachsen, sind jedoch DNasenegativ.
Beim niethylgrünhaltigen Nährboden ist eine positive DNase-Reaktion dadurch /u erkennen, daß die grüne Farbe des Indikators - auch ohne HC I-Zugabe merklich verblaßt.
Staphylococcus
Im Mannit-Natriumchlorid-Kaliumthiocyanat-Agar wird Mannit von Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis Biotyp 4 und einigen Staphylococcus saprophyticus-Stämmen abgebaut. Es entsteht Säure, die einen Farbumschlag des pH-Indikators hervorruft. Der Nährboden wird rötlichgelh. Bei Verlängerung der Bebrütung auf 36 Stunden werden die Kolonien leuchtendgelb.
In verdächtigen Fällen empfiehlt es sich, den Koagulase-Schnelltest durchzuführen. Staphylococcus aureus ist im Gegensatz zu den anderen Staphylo- kokken Koagulase-positiv.
Streptococcus (Enterococcus)
Streptococcus faecalis der serologischen Gruppe D reduziert T. T. C. zu Formazan und wächst in roten bis rotbraunen, ganz !lachen und kleinen Kolonien mit Metallglanz auf dem T. T. C.-Azid-P-Agar.
Streptococcus faecium der serologischen Gruppe D - von der Unterart casseliflavus abgesehen - ist nicht in der Lage, T. T. C. zu Formazan zu reduzieren. Die Kolonien sind farblos, ganz flach und klein.
Es gibt Arten derGattungen Proteus und Serratia, die gelegentlich auf T. T. C.-Azid-P-Agar in einzelnen größeren, erhabenen und roten Kolonien ohne Metalles glänz wachsen. Diese sind im Gegensatz zu den vorgenannten Enterokokken beweglich. Deshalb empfiehlt es sich, in verdächtigen Fällen auf Beweglichkeit, z. B. in hängenden Tropfen, zu prüfen.
Candida
AufPepton-Leberhydrolysat-Kaliumthiocyanat-Agar wächst Candida in schmutzigweißen Kolonien.

Claims (1)

  1. Patentanspruch:
    Test-Set aus 8 selektiven Nährmedien zur Bestimmung der Erregergattungen bei Entzündungen des Urogenitaltrjkts, daüuiih gekennzeichnet, daß er als Nährmedien
    Lactose-Tergitol-P-Agar,
    Citrat-G-Agar,
    Ampholyt-Cadmiumsulfat-Glycerin-Agar. Phenylalanin-Lithiumchlorid-G-Agar, DNase-Ampholyt-Agar,
    Mannit-Kochsalz-Thioeyanat-Agar, T. T. C-Azid-P-Agar und
    Pepton-Leberhydrolysai-Thiocyanat-Agar enthält, wobei der
    Citrat-(i-.\gar pro Liter Wasser 4 g Trinalriumcitrat, I g Gallesalzgemisch, 0,1 g Piniaricin, 0,05 g Glucose, 0,25g lleleextrakt, 5g Natriumchlorid, 0,02g PhenoJrot und 15 g Agar-Agar, der Phenylalanin-Lithiumchlorid-G-Agar pro Liter Wasser 10g Proteose Pepton, 3g lleleextrakt, 5g Natriumchlorid, 6 g Dinatriumhydrogenphosphat, 0,2 g Kaliumdihydrogenphosphat, 2 g L-Phenylalanin, 1 g Gallesalzmischung, 3 g Lithiumchlorid, 0,1 g Piniaricin und 15 g Agar-Agar, der Mannit-Koch-salz-fhiocyanat-Agar pro Liter Wasser IOgC'aseinpcplon,5gFleischextrakt, lOgD-Mannit, 5g llefeextrakt, lOgNatriumpyruvai, 5 g Dikaliumhydrogenphosphat, 5 g Lithiumchlorid, 50 g Natriumchlorid, IO g Kaliumlhioeyanat, 0,02 g Phenolrot und 15 g Agar-Agar und der Pepton-Leberhydrolysat-Thiocyanal-Agar pro Liter Wasser 15 g Mykopepton, Ig Leberhydrolysat, 5g Glucose, 3g llefeextrakt, 3g Natriumchlorid, 0,25 g Magnesiumsulfal-hepUihydrat, 0,001 g Mangan(II)cliloridtetrahydrat, 0,05 g Natriumheptadecylsuilät, 20g Kaliiimthiocyanat und 20 g Agar-Agar enthält, der
    Lactose-Tergitol-P-Agar zusammengesetzt ist aus 40 Lactose 10,0 g
    Polypepton 5,0 g
    llefeextrakt 3,0 g
    Natriumheptadecylsulfat 0,15 g
    Piniaricin 0,1 g
    Bromthymolblau 0,025 g
    Agar-Agar 18,0 g und
    Aqua dest. I Liter
    und einen Hnd-pll-Wert von 6,9 ± 0,1 aufweist, der Ainpholyt-Cadmiumsullät-Cilycerin-Agar zusani- so mengesetzl ist aus
    Proleose Pepton 20,0 g
    Natriumchlorid 1,2 g
    Dikaliumhydrogenphosphat 0,8 g
    Kaliumnitrat 0,6 g ss
    Calciumnitrat-tetrahydrat 0,4 g
    Magnesiumsulfat-hepUihydrat 0,6 g
    Cailmiumsulläl-oetahydrat 0,005 g
    Glycerin 8,0 ml
    N-Aikyl-Aminocrotonsäure 0,75 g to
    Agar-Agar 15,0 guild
    Aqua dest. 1 Liter
    Agar-Agar I5,üg und
    Aqua desL 1 LiUT
    und einen End-pll-Wert von 7,3 ± 0,1 aufweist
    und der
    T. I". CrA/id-P-Agar zusammengesetzt ist aus
    Tryptose 20,0 g
    llefeexlrakt 5,0 g
    Glucose 2,0 g
    Dinatriumhydrogenphosphat 4,0 g
    Natriumthiosulfat 0,3 g
    «-Liponsäure 0,(X) I g
    Agar-Agar 15,0;',
    Pimaricin 0,1 g
    2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid 0,1 g
    Natriumazid 0,4 g und
    Aqua dest. I Liter
    und einen lind-pll-Wert von 7,2 ± 0,1 aufweist.
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