DE2630110C2 - Vorrichtung zur Keimzahlermittlung - Google Patents

Description

Kalbshirninfusion (aus 150—300 g)	1Or 20 g
20 Rinderherzinfusion (aus 200—400 g)	4-8 g
Fleischpepton	10-2Og
Glucose	1.5-3 g
N-Acetyl-L-Cystein	2-4 g
Hefeextrakt	2-6 g
25 D-Sorbit	4-7,5 g
p-Nitrophenyl-propantriol	7,5-15 mg
CaQ2	7,5-15 mg
FeSO4 · 7 H2O	1,0-3 mg
MgSO4 · 7 H2O	0,6-Ug
30 MnCI2 · 4 H2O	40—75 mg
NaCl	3-6 g
Na2CO3	0.8-1.6 g
Na2HPO4	L5-3g
p-Aminobenzoesäure	40-75 mg
35 Lecithin	03-Ug
Thymin	7,5-15 mg
Polyoxiäthylensorbitanmonooleat	2^-lOmI

Zur Verfestigung des Mediums dient eine ausreichende Menge Agar-Agar (15—30 g pro Liter). Gewünschtenfalls werden noch ein oder mehrere Farbstoffe zugesetzt, z. B. 40—80 mg Bromkresolpurpur.
End-pH-Werl:7,2±0,l.

Die Bestandteile werden eingewogen und in 1 Liter

4$ destilliertem oder vollentsalztem Wasser suspendiert und nach dem Weichen bis zur völligen Lösung des

Agar-Agar gekocht Die Lösung wird auf ca. 60° C

abgekühlt Falls nötig, wird der pH-Wert durch Zugabe von 1 n-Natronlauge korrigiert Anschließend wird 15

Minuten bei 121 "C sterilisiert. II. Laktose-Dextrose-Tergitol-Agar (LDTA)

Zusammensetzung	Pfo Liter
55 , ■	Wasser
Pepton aus Casein	'"" ' 12-18 g
Pepton aus Fleisch	4~8g
Lactose	8—12g
60 Glucose	0,8-1,6 g
Hefeextrakt	2-4 g
Natriumheptadeeylsulfat	0,08-0,16 g

Zur Verfestigung des Mediums dient Agar-Agar ^h'' (15—30 g pro Liter). Gewünschtenfalls werden ein oder mehrere Farbstoffe zugesetzt, zweckmäßig beispielsweise 40—80 mg Neutralrot und 0,8—1,2 mg Kristallviolett. Der End-oH-Wert soll 7,2 ±0.1 betragen. Die

Bestandteile werden in 1 Liter destilliertem oder vollentsalstem Wasser suspendiert, nach dem Weichen bis zur völligen Lösung des Agar-Agar gekocht Die Mischung wird auf ca, 60^pC abgekühlt, das pH wird nötigenfalls durch Zugabe von 1 η-Natronlauge korrigiert Man sterilisiert 15 Minuten bei 121⁰C,

Die Träger, im allgemeinen Glas- oder Kunststoffplättchen, wie Objektträger, werden auf einer Seite mit AHA, auf der anderen Seite mit LDTA beschichtet. Nachdem die Untersuchungsprobe aufgebracht ist, wird bebrötet (bei Prüfung auf pathogene bzw, saprophytäre Darm- bzw, Hautflora 16—24 Stunden bei 36—WC), Die BebrQtungstemperatur, -bedingungen (z, B, unter CO₂ oder Stickstoff) und -dauer variieren je nach dem zu ermittelnden JCeimspektrum,

Claims (1)

1. 26 30Π0

   Patentanspruch;

   Vorrichtung zur Keimz&hlermittJung, bestehend aus einem flachen Träger, der auf den beiden Hauptflächen mit je einem Nlhrmedium beschichtet ist, dadurch gekennzeichnet, daß das eine Nährmedium pro Liter Wasser 10—20 g Kalbshirninfusion, 4—8 g Rinderherzrofusjon, 10—20 g Fleischpepton, 1,5—3 g Glucose, 2—4 g N-Acetyl-L-Cystein, 2—6 g Hefeextrakt, 4—7,5 g D-Sorbit. 7,5—15 mg p-Nitrophenyl-propantrioI, 74—15 mg CaCl₂, 1,0-3 rag FeSO₄ -7 H₂O, 0,6—Ug MgSO₄ - 7 H₂O, 40-75 mg MnQ₂ · 4 H₂O, 3-6 g NaCL 0.8-1.6 g Na₂CO₃, 1,5-3 g Na₂HPO₄, 40—75 mg p-Aminobenzoesäure, 0,3—Ug Lecithin, 7,5—15 mgThymra, 2£—10 ml Polyoxyäthylensorbitanmonooleat, eine zur Verfestigung ausreichende Menge Agar-Agar enthält und daß das andere Nährmedium pro Liter Wasser 12—18 g Pepton aus Casein, 4—8 g Pepton aus Fleisch, 8—12 g Lactose, 03—1.6 g Glucose, 2—4 g Hefeextrakt, 0,08—0,16 g Natriumheptadecylsulfat und eine zur Verfestigung ausreichende Menge Agar-Agar enthält

   der Kejmzafllermittlung verhindert, das beispielsweise TM einem vorzeitigen Abbruch der chemotherapeutischen Behandlung Anlaß geben könnte, Rückfälle der Patienten können dadurch verhindert werden,
   Ähnliches gilt for das zweite Nährmedium, das jedoch nur for gramnegative Keime bestimmt ist

   Auch auf den* Hygiene-Sektor, z, B, Keimzahlbestimmungen in Gewässern, Milch und Milchprodukten sowie Fleischwaren können angeschlagene bzw. geschädigte Mikroorganismen mit Hilfe der neuen Nährböden genauer erfaßt werden.

   Die neuen Nährmedien werden wie folgt erhalten:

   Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung zur Keimzahlermittlung; sie besteht aus einem flachen Träger, der auf den beiden Hauptflächen mit je einem neuen Nährmedium beschichtet ist.

   Vorrichtungen dieser Art sind seit langem im Gebrauch. Solche Vorrichtungen werden bisher zur Ermittlung des Keimgehaltes in Untersuchungsproben, z. B. in Urin, verwendet

   Die bisher üblichen Vorrichtungen bestehen aus einem Objektträger, bei dem die eine Seite mit CLED. oder Nähragar, die andere Seite mit MacConkey-Agar oder Eosin-Methylenblau-Lactose-Saccanose-Agar beschichtet ist Die eine Seite dient als Nährboden für alle Keimarten, die andere nur für gramnegative Bakterien.

   Der Nachteil der bekannten Vorrichtung liegt darin, daß sie kein zutreffendes Bild von der Keimzahl liefert, wenn in der Untersuchungsprobe Hemmstoff- bzw. Antibiotika- oder sonstige Chemotherapeutika-Rückstände enthalten sind. Diese Rückstände können die Keime schädigen oder bakteriostatisch beeinflussen. Die üblicherweise verwendeten Nährböden sind dann nicht in der Lage, ein ausreichendes Wachstum der Keime zu ermöglichen bzw. die geschädigten Keime zu beleben. C.LE.D. bietet anspruchsvollen Keimen keine ausreichende Wachstumsbasis, ebenso MacConkey-Agar. Auf Nähragar wächst der — insbesondere bei Harnwegsinfektionen — zweitwichligste Erreger Proteus, der auch als Lebensmittel-Kontaminant häufig vorkommt, unkontrolliert (schwärmt); dadurch wird es unmöglich, die Keimzahl zu bestimmen.

   Die erfindungsgemäße Vorrichtung vermeidet die erwähnten Nachteile. Der Träger, am besten ein Objektträger, wird mit zwei neuen Nähfmedien beschichtet. Mit dem einen wird — durch eine zweckmäßige neue Kombination der Bestandteile in geeigneten Mengenverhältnissen — auch bei anspruchsvollen Keimen ein schnelles und üppiges Wachstum erreicht. Geschädigte Keime werden belebt.
   Auf diese Weise wird ein falsches negatives Ergebnis

   L Anti-Hemmstoff-Agar (AHA)

   Zusammensetzung

   Pro Liter
   Wasser