DE2514275A1 - Verfahren zur herstellung von n- (polysaccharidyl)-stickstoffheterocyclen, insbesondere von pyrimidin- oder purinbasen - Google Patents

Verfahren zur herstellung von n- (polysaccharidyl)-stickstoffheterocyclen, insbesondere von pyrimidin- oder purinbasen

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DE2514275A1
DE2514275A1 DE19752514275 DE2514275A DE2514275A1 DE 2514275 A1 DE2514275 A1 DE 2514275A1 DE 19752514275 DE19752514275 DE 19752514275 DE 2514275 A DE2514275 A DE 2514275A DE 2514275 A1 DE2514275 A1 DE 2514275A1
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    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
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    • C08B15/00—Preparation of other cellulose derivatives or modified cellulose, e.g. complexes
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    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
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Description

SCHERING AG
Si
Gewerbliche·- Rechtssd.utz
Berlin, den 27. März I975
Verfahren zur Herstellung von N-(Pclvsaccharidyl)-Stickstoffheterocyclen, insbesondere von Pyrimidin-
oder Purinbasen
25H275
Für die Trennung komplexer Gemische aus Nucleinsäuren, Enzymen oder anderen Biopolymeren sind Verfahren, wie Gelfiltration, Ionenaustauscherchromatographie und Affinitätschromatographie bekannt. Während mit den beiden ersten Verfahren nur eine grobe Klassierung - Trennung nach Molekülgröße bzw. Molekülladung - möglich ist, kann mit Hilfe der Affinitätschromatographie eine Komponente selektiv abgetrennt oder isoliert werden.
Voraussetzung dafür ist, daß die Komponente bestimmte Eigenschaften besitzt, und daß das Sorbents einen für diese Komponente spezifischen Liganden enthält. Dieser Ligand soll nach Möglichkeit mit dem Sorbens kovalent verbunden sein, da bei ionischer oder adsorptiver Bindung Ausbluten erfolgen kann. Für die Trennung von Nucleinsäuren bietet sich als spezifisches Selektionsprinzip die Basenpaarung an. In der Literatur wird die Darstellung von Sorbentien für die Trennung von Nucleinsäuren beschrieben, die auf dem Prinzip der Basenpaarung beruhen /j. Chromatogr. 82, J>K9 (1975); Nucleic Acids . Res, 1, 1587 (1974)7.
6 0 9842/0 817
Vorstand: Or. Christian Brunn ■ Hans-Jürgen Hamann · Dr.H/Mnz Hannso PosUmschrlit: SCHERING AG · D-1 Berlin 65· Fostfacti 65 0311
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Stellv.: Dr. Herbert Asmis Berliner CommorcbanKAG, Berlin, ^rito-Nr. 108700GCO1 BcriK'eifrah! 'OZ 40üK
Vorsitzender des Aufsiehtsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppan Berliner DiscoiUo-Bank AG, Gerlin, Konto-Nr. 241/5003, BankleitzLhl i'"0 "OC Wi
SiU der Gesellschaft: Bariin und Bergkamen Berliner Handels-Gasgllschaft — Frrnkfurior BariK —, Berlin,
Handelsregister: AG Charlolienburg93HRB283 u. AG Kamen HRBOnei Konto-Nr. ,4-362, Bankleitzehl IM20200
SCHERING AG
Gewerblicher Rechtsschutz
Als Trägermaterial werden beispielsweise Polysaccharide oder Polyamide und als Liganden Purin-, Fyrimidin- und auch Polynucleotide, die mit dem Träger kovalent verbunden sind, verwendet.
Die beschriebenen Verfahren laufen über mehrere Stufen. Zunächst wird das Trägermaterial aktiviert, um mit dem Liganden eine Bindung eingehen zu können. Daran schließt sich die Desaktivierung der nicht umgesetzten aktiven Zentren an.
Zwischen den einzelnen Stufen liegen aufwendige und zeitraubende Waschvorgänge, so daß es wünschenswert ist, ein Verfahren zu finden, das in einem Reaktionsschritt den Träger mit dem Liganden kovalent verbindet und ohne die aufwendigen Waschvorgänge auskommt.
Es wurde nun gefunden, daß sich Silylderivate von Purin- und Pyrimidinbasen sowie von diesen abgeleitete Verbindungen leicht und in guten Ausbeuten mit geschützten, vorzugsweise peracylierten Polysacchariden zu den N-Glycosylderivaten umsetzen, wenn man die Umsetzung in Gegenwart eines Friedel-Crafts-Katalysators oder eines Trialkylsilylesters, vorzugsweise Trimethylsily!esters einer Mineralsäure oder einer starken organischen Säure,vornimmt.
Die Erfindung betrifft somit ein Verfahren gemäß Patentanmeldung P 1 919 207*8 zur Herstellung von Nucleosiden
6 0 9 8 4 2/0817
Vorstand: Dr. Christian Brunn · Hans-Jürgen Hamann ■ Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERIMG AG - D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
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α DE IV 2iS0
SCHERING AG
rt jj ·· Gewerblicher Rechtsschutz
der allgemeinen Formel I . .. .
R-N-(C=C)-(C)-R I,
1I Ί I m ri n 2
Z R,R^ X
worin Z einen freien oder geschützten Polysaccharid- rest, . .
X die Atome 0 oder S m die Zahlen 0 oder 1 -
η die Zahlen 0 oder 1 .
R1 und R2 gemeinsam einen gesättigten oder ungesättigten, gegebenenfalls substituierten zweiwertigen organischen ' Rest, der ein oder zwei Stickstoffatome enthalten kann, und
tL und R1^ jeder für sich Wass erst off, einen Alkyl-, Alkoxycarbonyl- oder Alkylaminocarbonylrest, eine Carboxyl-
.oder Nitrilgruppe oder gemeinsam die zweiwertigen Reste
6 0 98 42/08 17 ' ~ 4 -
Verstand: Dr. Christian Bruhn - Kans-Jürgen Hamann - Dr. Holnz Hannse Postansdirlft: COHERING AG · <M Berlin 65 · ^stfach 650311 Karl OHo Millolslepschoid ■ Dr. Ccrhard Raap6 · Dr. Horst WiUeI Postscheck-Konto: Berlin-West 11 /5-101, aanWtitBhl 1C310010 Stnllv.: Dr. Herbei Asmis Berliner Contnorzbank AG. ^orlin. "onto-Nr. 10ό 70^o On. fcj>nk!eia--.W 1^J05''1 VoieltzenderdcsAu'slchis.ats: Dr. nduard ν.Sdw&rtzkoppon ■ Berliner Disconto-li.'.-.kAG. Sprlin. Konio-Nr.f.,./50(Λ. naiiKloi!/.arinoO.->j(/". Sitz dor Ges-jlIichaC: Pctün und Corg'omon Berliner Hsnd^ls-GOjOlUii-.dt. — FranMurtoi B?"k —, Baiiln,
- -- ·-■■»"·>···· ■· «^t-~ MDnr«ii ifnnin-Hr.-M-3C2. fja-ikloi^alil 10J2J2P0 ......
SCHERING AG
Gewerblicher Rechtsschutz
die in üblicher Weise substituiert und/oder hydriert sein können, bedeuten,
dadurch gekennzeichnet, daß man ein 1-0-Acyl-, 1-0-Alkyl-
•Ι ι
bzw. 1-Halogenderivat eines geschützten Polysaccharides mit einer Verbindung der allgemeinen Formeln II bzw. III
1n)n-B2 II R3R4 X-Y
bzw.
R1-N-(C=C)-R2 III,
I Il
Y R3R4
worin R1, Rg, R,, R4, X, m und η die gleiche Bedeutung wie in Formel I haben, Y einen Alkyl- oder Trialkylsilylrest, vorzugsweise den Trimethylsilylrest, bedeutet, in Gegenwart eines Friedel-Crafts-Katalysators oder eines Trialkylsilylesters, vorzugsweise Trimethylsilylesters einer Mineralsäure oder einer starken organischen Säure zur N-substituierten Verbindung gemäß Formel I umsetzt und gegebenenfalls Schutzgruppen in an sich bekannter Weise abspaltet.
Bei R1 und R2 als beliebigen zweiwertigen Rest handelt es sich insbesondere um gesättigte oder ungesättigte niedere Alkylengruppen, vorzugsweise mit 1-4 Kohlenstoffatomen, .wie
- 5 -609842/0817
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SCHERING AG
_ p. _ Gewerblicher Rechtsschutz
beispielsweise Methylen, Äthylen-, Propylen oder Tetramethylenreste, die gegebenenfalls durch ein oder zwei Heteroatome, vorzugsweise Stickstoff und/oder Sauerstoff unterbrochen sein können.
Die zweiwertigen Reste aus der Definition für R1 und R2 sowie für R-, und R^ können beispielsweise folgende Substituenten enthalten:
Niedere Alkyl-, niedere Alkenyl-, Aryl-, Aralkyl—, Trifluormethyl-, Acyl-, Hydroxy-, Alkoxy-, Acyloxy-, Carboxyl-, Oxo-, Carboxamido-, Alkoxycarbonyl-, Dialkylaminocarbonyl-, Amino-, Nitrogruppen, Nitriloxogruppen oder Halogenatome.
Ausgangsprodukte sind silylierte organische Basen, in denen R1 und R2 ringverknüpft sind und insbesondere in der Weise, daß die heterocyclischen Basen fünf oder sechs Atome, davon ein bis drei Stickstoffatome, im Ring enthalten.
Die silylierten organischen Basen gemäß den Formeln II und III leiten sich somit bevorzugt von folgenden heterocyclischen Basen ab:
üracil, Cytosin, 6-Azauracil, 2-Thio-6-azauracil, Thymin, Adenin, Guanin, Lumazin, Imidazol, Pyrazin, Thiazol, Triazol, die gegebenenfalls durch einen oder mehrere der oben für R1 und R2 sowie R, und R1, genannten Reste substituiert sein können.
6 0 9 8 4 2/0817 o«Q*nal inspected
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U DE IV ?6ä»
SCHERING AG
Gewerblicher Rechtssdtutz
Unter dem gemeinsamen zweiwertigen Rest R1 und R2, der gesättigt oder ungesättigt sein kann, sind insbesondere folgende Reste zu verstehen:
X NH2 χ
U I Il
C - NH - , -C=N-C-,
5 5 , -N = C , -C = C-,
-CH = N - , - CH = N - , - 0 - CO - . (wenn η = ] - . oder - NH - CO - CH = N -,
Rc ■ * Rr-,. ,5 - |5
-N = C -N = C-- oder -N = C-N = CH- (wenn η = C
wobei X die obenangegebene Bedeutung hat und R^ und R Wasserstoff, einen Alkyl-, Alkoxycarbonyl- oder Alkyl aminocarbonylrest bedeuten.
. B0 984 2/Q817
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Im Rahmen der vorliegenden Erfindung werden unter dem Begriff Polysaccharide solche verstanden, die bereits reduzierende Endgruppen besitzen oder bei denen unter den Reaktionsbedingungen durch Spaltung glycosidischer Bindungen welche entstehen. Unter Polysacchariden versteht man Zucker, die mindestens .10 - 12 Monosaccharide enthalten, wie z. B. Cellulose, Stärke, Inulin, Agarose, Dextrine und Polypentosane. Bevorzugt werden Cellulose, Stärke und Agarose. Zweckmäßigerweise v/erden alle freien Hydroxygruppen der Zucker geschützt. Als Zuckerschutzgruppen eignen sich die in der Zuckerchemie geläufigen Schutzgruppen, wie z. B. die Acetyl-, Propionyl-, Benzoyl-, p-Chlorbenzoyl-, p-Toluyl- und Benzylgruppe.
Als Friedel-Crafts-Katalysatoren eignen sich für die Reaktion insbesondere solche, die in den für die Reaktion verwendeten Lösungsmitteln löslich sind, wie z. B. SnCl2^, TiCl2^, ZnCl2, BF -Ätherat.
Werden als Katalysatoren Trialkylsilylester, vorzugsweise Trimethylsilylester von Mineralsäuren oder starken organischen Säuren, verwendet, dann leiten sich diese vorzugsweise von Sauerstoffsäuren her. Bevorzugt geeignet sind insbesondere alle leicht zugänglichen Mono- oder Polytrimethylsilylester, die dem Fachmann beispielsweise aus der Literatur /U. Wannagat und W. Liehr, Angew. Chemie 69, 783 (1957); H.C, Marsmann und H.G. Horn, Z. Naturforschung B 27/4448 (1972Yl bekannt sind.
60 9842/08 17
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- ο- " Patentabteilung
Sind die Trialkylsilylester Ester von Mineralsäuren* kommen als Mineralsäuren HpSOw oder HClO2, inirage. Einen bevorzugten Katalysator stellt TrimethylsiIyI-perchlorat dar. Leiten sich die Trialkylsilylester von organischen Säuren ab, ist beispielsweise Trifluormethansulfonat bevorzugt geeignet.
Geeignete Lösungsmittel für die Reaktion sind z. B. Methylenchlorid, Äthylenchlorid, Chloroform, Dioxan, Tetrahydrofuran, Acetonitril, Dimethylformamid, Benzol, Toluol, Schwefelkohlenstoff, Chlorbenzol oder Mischungen derselben.
Die Umsetzung kann bei Raumtemperatur oder bei höheren oder tieferen Temperaturen, vorzugsweise bei 0 - l60° C, durchgeführt werden.
Die Reaktionsteilnehmer werden in etwa äquimolarer Menge in die Reaktion eingesetzt. Sollen nichtreduzierende Zucker eingesetzt werden, dann muß die Katalysatormenge erhöht werden, da ein Teil des Katalysators für die Spalv tung der
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Sit* der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Berliner Handels-Gesellscha.t - Frankfurter Bank -, Berlin,
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Gewerblicher Rechtsschutz
glycosidischen Bindungen zur Bildung reduzierender Endgruppen benötigt wird.
Wird eine Verbindung der allgemeinen Formel II bzw. III und Katalysator im Überschuß bezogen auf das Polysaccharid eingesetzt, dann nimmt die Anzahl der Monosaccharideinheiten in dem mit der Stickstoffverbindung verknüpften Polysaccharid durch Spaltung ab, d. h., man kann durch Wahl der Reaktionsbedingungen die Größe des eingeführten Polysaccharidrestes in dem zu bildenden Produkt gemäß Formel I beeinflussen.
Falls die für die Umsetzung gemäß den allgemeinen Formeln II oder III benötigten Verbindungen Gruppen enthalten, die durch den Katalysator unter Bedingungen, bei denen Spaltung der glycosidischen Bindung erfolgt, angegriffen werden, kann die Spaltung des Polysaccharides zu kleineren Einheiten bzw. zur Bildung reduzierender Endgruppen in einem vorgeschalteten Schritt so erfolgen, daß bei der Spaltung zweckmäßigerweise reaktive 1-0-Acyl-, 1-0-Alkyl- oder 1-Halogen-Verbindungen des geschützten Polysaccharides entstehen. Die erfindungsgemäße Umsetzung kann dann z. B. mit 1-Halogenverbindungen in Gegenwart kleinstmöglicher Katalysatormengen und unter mildesten Bedingungen (0° C) durchgeführt werden.
- 10 -
B 0 9 8 A 7 I 0 8 1 7
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SCHERING AG
Gewerblicher Rechtsschutz
-ίο- 25U275
Zur Herstellung von Verbindungen d,er allgemeinen Formel I mit freien Hydroxylgruppen lassen sich Schutzgruppen in an sich bekannter Weise, z. B. durch alkoholische Lösungen von Ammoniak oder Alkoholaten oder wäßriges oder alkoholisches Alkali sowie im Falle der Benzyläther durch Reduktion oder Hydrierung entfernen.
In den erfindungegemäßen Nucleosiden ist der freie oder geschützte Polysaccharidrest mit dem Stickstoffatom vorzugsweise ß-glycosidisch verknüpft.
Die erhaltenen Produkte werden durch Behandeln mit Wasser und Äthanol von löslichen niedermolekularen Produkten befreit, was in Verbindung mit dem Abspalten der Schutzgruppen erfolgen kann.
Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellten, mit Polysacchariden verknüpften Heterocyclen zeigten überraschend gute Eigenschaften als Sorbentien für die Trennung von Nucleosid- und Nucleotidgemischen, sowohl was Trennungsvermb'gen als auch zeitlichen Aufwand betrifft.
Darüber hinaus besitzen sie wertvolle biologische Eigenschaften, wie z. B. eine das Immunsystem stimulierende Wirkung.
Als Endprodukte kommen beispielsweise in Frage:
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Vorstand: Dr. Christian Bruhn -Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannso Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Karl Otto Mittelstenscheid · Ur. Gerhard Raspo · Dr. Horst Witze! Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101. Bankleitzahi 10010010 Stellv.: Dr. Herbert Asmis Berliner Commerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 108 7006 00, Bankleitzahl 1C0 400 Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwarükoppen Berliner Disconto-BankAG, Berlin, Konto-Nr.241/5008, Banideitzatil 1GÜ700 0U Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Berliner Handsls-Goselischaft — Frankfurter Bank —, Berlin, Handelsregister: AG Charlottenburg 93 HRB283 υ. AG Kamen HRB0061 Konto-Nr. 14-362, Bankleitzahl 100?.0200
- II -
SCHERING AG 25 U27 δ
Patentabteilung ** *
.""*■· ί A
Άι «ΓΚ^ -TTl i ■.·?■· ^
0 X
Z entspricht der Definition in der allgemeinen Formel I.
Für R7 kommen die Substituenten Wasserstoff, niederes Alkyl, niederes Alkenyl, Aryl und Aralkyl in Betracht, für niederes Alkyl vorzugsweise Reste mit 1-6 C-Atomen, für niederes
Alkenyl vorzugsweise Reste mit 5.-6 C-Atomen, wie z. B.
'-.: Der Gehalt an Monosacchariden ergibt sich aus statistischen Verteilungen.
Die Anzahl der in dem mit dem Heterocyclus N-glycosidisch verbundenen Polysaccharid durchschnittlich enthaltenen Monosaccharid
■ einheiten läßt sich durch Bestimmung des Stickstoffgehaltes mit Hilfe der Verbrennungsanalyse ermitteln.
Es ergibt sich z. B. für m - 12 -
ORIGINAL INSPECTED * 609842/08 1.7
SCHERSNG AG
« IP — Patentabteilung
25U275
Cytosin?verknüpft mit einem Polysaccharid, das 25-Glucoseeinheiten enthält,
C 44.41 H 6.17 N 1.01 ,
für Uracil,verknüpft mit einem Polysaccharid, das 70-Glucoseeinheiten enthält
C 44.43 H 6.19 N 0.24 .
Die Erfindung betrifft somit auch Nucleoside der allgemeinen Formel I
R1-N-(C=C)n^(C)n-R2 τ Z R3R4 X
worin Z einen freien oder geschützten Polysaccharidrest,
X die Atome 0 oder S
m die Zahlen 0 oder 1
η die Zahlen 0 oder 1
R1 und Rg gemeinsam einen gesättigten oder ungesättigten, gegebenenfalls substituierten zweiwertigen orga-
609842/0817 -12a-
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SCHERING AG
Cewerfaliche. Rechtsschutz
~ 25Η275
nischen Rest, der ein oder zwei Stickstoffatome enthalten kann und
und R1^ jeder für sich V/asserstoff, einen Alkyl-, AIkoxycarbonyl- oder Alkylaminocarbonylrest, eine Carboxyl-, Nitrilgruppe oder gemeinsam die zweiwertigen Reste
die in üblicher V/eise substituiert und/oder hy driert sein können, bedeuten.
- 13 -
609842/0817
Vorstand: Dr. Christian Bruhn -Hans-Jürgen Hamann -Dr. Heinz Hannsa Karl Otto Miltelslonbcheid - Dr. Gerhard Haspe - Dr. Horst WiUeI Stellv.: Dr. Herbert Asmis
Vcsitzender desAufsicb.ls.rats: Dr. Eduard V. Schxyartzkoppon Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen
Handelsregister: AG CharloHonburg 93 HRB283 u. AG Kamen HRB 0061 Postanschrift: SCrIERINGAG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Posl-stheck-Kontc: Etolin-Wost 11 75-101. Bankleitzahl 10010010 Bar liner Commntzbank AG, berlin, Konto-Nr. 108 7006 00. Bankloitzahl 100 403 M Bjrliner Disconto-ßank AG, [Berlin, ^onlo-Nr. 241/6008, Bankleitzahl 100/üOOO Berliner Handfils-Gescll BCliaP — Fiankfurtc Bank —, Berlin, Kunlo-Nr. 14-302, BankieiUi.hl 10D20200
RJ DE tv JM20
SCHERING AG
w«*erblicher Rechtsschutz
•Λ. 25Η275
Beispiel 1:
In 5OO ml abs. 1,2-DichIoräthan wurden 10 g Triacetylcellulose suspendiert· Nach Zugabe von I5 mMol 2f4-0,N-Bis(trime1;hylsilyl)-4-amino-2-hydroxypyriraidin in 20 ml abs. Acetonitril sowie einer Lösung von 8 g (60 inMol) AlCl in 200 ml abs. Acetonitril wurde über Nacht am Rückfluß gekocht. Nach dem Erkalten wurde mit 2 ltr Methylenchlorid verdünnt und mit gesättigter NaHCO^-Lösung gewaschen. Die organische .Lösung wurde über Kieselgur filtriert, das mit Methylenchlorid nachgewaschen vurde. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Na^SO. ) und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Kodestillation mit Methanol von Resten 1,2-Dichloräthan befreit, in 25Ο ml CH OH/NU suspendiert und über Nacht bei 0 C gerührt. Es bildete sich ein lockeres Pulver, das über eine Fritte abgesaugt und mit heißem Methanol, feuchtem Methanol und lasser gewaschen wurde. Nach Trocknen im Vakuum bei $0 wurden 4.27 g "eines gelblichen Pulvers erhalten. . Stickstoffgehalt: 0,59 #
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 44 Monosacchariden.
C268H445N5°221 (7245,53; N: 0,58 %)
609842/0817 ..,
Vorstand: Dr. Christian Bruhn - Hans-Jürgen Hamann ■ Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311
Karl Otto Mittelslenscheid ■ Dr. Gerhard Haspe · Dr. Horst YViUaI Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101, Bankleitzahl 10010010
Stollv.: Di. Herbert Asmis Berliner Cornmerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 108700600. Bankleitz.ihl 100 400
Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Scfiwartzkoppen Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleitzahl 100 700
Sitz dar Gesellschaft: Berlin und Borgkamen Berliner Handels-GcsGllschail - Frankfurter Bank —, Berlin,
Handelsrefliwiei. AG Cliarlotlenburg a3 HRB 283 u. AG Kamen HRB 0051 Konlo-Nr. 14-362, Bankloitzahl 100 2ü2 00
SCHERING AG
_ -j_. Gewerblicher Rechtsschutz
"^S- 25H27&
Beispiel 2:
Zu einer Suspension von 5 g Triacetylcellulose in 400 ml 1,2-Dichloräthan wurden 500 raraol Ο,Ν-Bis(trimethylsilyl)-4-amino-2-hydroxypyrimidin sowie 10 ml (85.5 mmol) SnCl^ in 100 ml 1,2 Dichloräthan gegeben. Es wurde zum Sieden erhitzt, wobei sich ein Teil der Triacetylcellulose löste. Vollständige Lösung wurde erst nach Zugabe von J>Q ml Acetonitril erreicht. Nach 3 Stunden Kochen am Rückfluß wurden weitere 30 mmol Silylverbindung und weitere 4 ml (34.2 mmol) SnCl1^ zugegeben. Das Verfahren wurde wieder- ■ holt· Die Reaktion wurde nach insgesamt 24 Stunden abgebrochen. Es wurde wie in Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet. Nach Methanolyse, Auswasehen und Trocknen blieben 1,6 g eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 0,71 %
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von J56 Monosacchariden.
i N:
- 15 -
609842/0817
Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hsns-JOrgen Hamann · Or. Heinz Hannso Postanschrift: SCHERING AQ ■ D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Karl Otto Mittelstenscheld · Dr. Gerhard Raspi · Dr. Horst Witze! Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-101, Bankleitzahl 10010010 Stellv.: Dr. Herbert Asmis ·' Berliner Commerzbank AG, Serlln. Konto-Nr. 108 700600, Bankleitzahl 100 «0 Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v.Sdiwartzkoppen Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleitzahl 100 70000 Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Berliner Handels-Gesellschaft - Frankfurter Bank—, Berlin, HandHlsrenister: AG Charlotienüurg S3HR3283 u. AG Kamen HRB0061 . Konto-Nr. 14-36?, Bankleitzahl 10020200
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Gewerblicher Rechtsschutz
25U275
Beispiel 3*
a) Acetylierende Spaltung der Triacetylcellulose 40 g Triacetylcellulose wurden in einer Mischung aus 400 ml Essigsäure und 200 ml Acetanhydrid gelöst.
Nach Zugabe von 20 ml conz. H_SO. in $G ml Acetanhydrid wurde 1 Tag bei Raum temp, gerührt. Dann wurde in 5 ltr Eiswasser gegossen und mit Na_C0 auf pH 4-5 gebracht.
Der Niederschlag wurde nach Stehen über Nacht abgesaugt mit Vasser gewaschen und 2 χ mit heißem Methanol ausge- sogen. Der unlösliche Anteil wurde im Vakuum bei $0 C
getrocknet. - .
Ausbeute: 36.7 g
b) Umsetzung zum Cytosin-Derivat
6 g des unter 3a) erhaltenen Produktes wurden in 5OO ml 1,2-Dichloräthan bei 60°C gelöst. Nach Zugabe von 20 mraol Ο,Ν-Bis(trimethylsilyl)-4-amino-2-hydroxypyrimidin in 40 ml Acetonitril sowie 4.2 ml (35»9 mmol) SnCl^ in 40 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 h am Rückfluß erhitzt. Es entstand eine klare gelbe Lösung, die wie unter Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet wurde. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 2.5 g eines lockeren Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: Ο.73 $
6 0 984270817 ■ .„,
-Ib-
Vorstand: Dr. Christian Brohn - Hsns-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Karl Otto Mittolstenschoid - Or. Gerhard Raspo - Dr. Horst Wilzel Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-101. Bankleitzahl 10010010 Stfcliv.: Dr. Herbert Asmls Berliner Commerzbank AG, Berlin. Konto-Nr. 100 7000 00, Bankleltzahl 100 400 Vorsitzender des Aufslchlsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppert Berliner Disconto-BankAG. Dorlin, Konio-Nr. 241/6008, BankleiUahl 100700 Sitz der Gesellschalt: Berlin und Bergkamon Berliner Handels-Gesollschaft — Frankfurier Bank —, Boriln, Wanrln!trnniulor ■ Λ« rjinrjollonhiirn Cl HHFl MI li IR Knmon HHH ITO) Kor>l«-Mr ΛΑ-VO RanklnilTnhl 10(191)? nn
SCHERINGAQ
Gewerblicher Rechtsschutz
25U275
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 35 Mono sacchariden.
C2l4H355N3°176 (5786,22; N: 0,73 SO-
Beispiel ki ..' . '* .
6 g des unter 3a) erhaltenen Produktes wurden in 5OO ml 112-Dichloräthan bei 60 C gelöst. Nach. Zugabe von 24 mmol 2f4-Bis(trimetb.ylsilyloxy)-pyrimidin und 4,2 ml (35·9 nimol) SnCl2^ in 100 ml 1,2-Dichloräthan vurde 2 h am Rückfluß gekocht. Nach dem Abkühlen vurde vie unter Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet. Nach Methanolyse", Auswaschen und TiOCknen blieben 2,02 g eines lockeren Pulvers zurück. · . Stickstoffgehalt: O,47#" ' ' /
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 36 Monosacchariden. ·-.· -.·-... · ·. ' .^22ΟΗ36ΛΟ182 (59^9,35) Nt 0
• . " Ζ · ; · ORIGINAL INSPECTED
- 17 -
609842/0817
Vorstand: Dr.ChrlsIian Bruhn · Hans-Jürgon Hamann · Dr.Helnz Hannso Postanschrilt: SCHERING AQ · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
Karl Ott" MiltelslenscJieid · Dr. Gerhard Haspo · Dr. Horst Witze! Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-1Ot, Bankleitzahl 10010010
SIeIIv.: Hr. Herbert Asmis Berliner Commerzbank AG. Corlin, Konto-Nr. 108 700G (W. Br.nkleitzahl 100 403 C1O
Vorsitzender des Aulsichlsrals: Dr. Eduard v. Sdiwa.lzkoppen Berliner Disconlo-Elank AG, Hßrlin, Konlo-Nr. 241/sOOa, BanKleiUahl 100 700
Sitz dor Gesoilschaft: Berlin und Borgkamen Borllner Handels-Gosollschntt - Ftnnkfurtor Bank —, Borün,
Handelsreaistor: AG Charlottonburo S3 HRB 283 u. AG Kamen HRB 0061 Konto-Nr. 14-3G2. Bankleilzahl 100 2u2 00
r3 Pt IV
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Gewerblicher Rechtsschutz
Beispiel 5t
6 g des unter 3a) erhaltenen Produktes wurden in 590 ml 1,2-Dichloräthan bei 60 gelöst; Nach Zugabe von 20 mmol 6-(Benzoyl)-trimethylsilylaraino-9-trimethylsilyl-purin und k,2 ml (35,9 mmol) SnCl^ in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2,5 k am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufge~arbeitet.
Der Rückstand wurde in I50 ml Methanol suspendiert, mit 50 ml 1 N NaOCHL-Lösung versetzt und 2 h am Rückfluß gekocht. Die abgekühlte Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert und über eine Fritte abgesaugt. Nach dem Auswaschen und Trocknen blieben ^j ^ g eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 1,31 %
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von J2 Monosacehariden.
(5325,81; N: 1
609842/081 7
Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hans-JOrgon Hamann · Dr. Heini. Hannso Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
Karl Otto Mittolslenschoid · Dr. Gorharü Imäpa · Dr. Horst Witzol Postschock-Konto: Borlin-Wcst 11 ?r>-101, Gankleitzahl 10010010
SIbIIv. : Dr. Herben Asmis Berliner Commerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 103 7006 00, Rankloltzahl 10C140C100
Vorsitzender des Aufslditsrats: Dr. Eduard v. Schv/artzkoppen Berliner Disconto-DankAG, lierlin, Konto-Nr. 241/5000, Daiikleitzahl 100 700
Sitz der Gosellschafl: Berlin und Ecrgkamen Berliner I iande^i-riesellsciiafl — Frankfurter Bank —, Berlin,
Handolsroaister: AG Charlnttciibura S3 HRB 2B3 u. AG Knmom HRB nnr>1 Konto-Nr. 14-3f.?. Uarikleit/ahl mn w\7 M
SCHERING AG
„ lg»* «. Gewerblicher Rechtsschutz
25H275
Beispiel 6i Umsetzung zum Cytosin-Derivat:
6 g des unter J5a) erhaltenen Produktes wurden in 5OO ml 1,2-Diehloräthan bei 60° C gelöst. Nach Zugabe von 20 mmol Ο,Ν-Bis(trimethylsilyl)-^-amino^-hydroxy-pyrimidin in 40 ml Acetonitril wurde mit 25 mmol Trimethylsilylperchlorat in 80 ml Benzol versetzt und die Lösung wurde 2 Stunden am Rückfluß erhitzt. Dann wurde das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen. Der Rückstand wurde in 25Q ml ΝΗ,/Οϋ,ΟΗ suspendiert und über Nacht gerührt. Es bildete sich ein lockeres Pulver, das abgesaugt, mit Methanol, feuchtem Methanol und Wasser gewaschen wurde. Nach dem Trocknen im Vakuum bei 50° C wurden j5, l6 g Produkt erhalten.
Stickstoffgehalt: 0,69 %
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 57 Monosacchariden.
c226H575N3°l86 (6ll0,5U N: 0,69 ^)
- 19 -
609842/0817
Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hanns« Postanschritt: SCHERING AQ ■ D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Karl Otto Mittelstenscheld · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst WiUeI Posischeck-Konto: Berlin-West 117C-101. Bankleltzahi 10010010 Stellv.: Dr. Herbort Asmis .· Berliner Commerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 108 7006 00, Bankleltzahl 100 400 Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppen Berliner Dlsconto-Bank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleltzahl 100 700 OD Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Berliner Handols-Gesellschaft - Frankfurter Bank —, Berlin, Handelsregister: AG Charlottenburg 93 HRB 283 U. AG Kamen HRB COGI Konto-Nr. 14-362, Barikleitzahl 100 202 00
U DE IV 26S3Q
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Gewerblicher Rechtsschutz Beispiel f;
a) Acetylierende Spaltung der Triäcetvlcellulose:
30 g Triäcetylcellulose wurden in 400 ml Eisessig heiß gelöst und nach dem Abkühlen mit einer Lösung von 30 ml Konz. H^SO^ in 3OO ml Acetanhydrid unter Kühlen mit Eiswasser versetzt. Die Lösung wurde 60 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann wurde die Reaktionsmischung in 5 1 Eiswasser gegossen und mit Na„CO„ auf einen pH-Vert von 4-5 gebracht. Der Niederschlag wurde nach StJahen über Nacht abgesaugt, mit heißem Wasser gevaschen und 3 1^aI mit heißem Methanol ausgezogen. Der unlösliche Anteil wurde im Vakuum bei 50 getrocknet. Ausbeute: 25,2 g
b) Umsetzung zum Cytosin-Derivat:
6 g des unter a) erhaltenen Produktes wurden in 5OO ml 112-Dichloräthan bei 60 gelöst. Nach Zugabe von 20 mmol 0,N-Bis(trimethylsilyl)-4-amino-2-hydroxypyrimidin in 40 ml Acetonitril sowie 6,5 ml (55,6 mmol) SnCl^ in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 h am Rückfluß erhitzt. Es entstand eine klare Lösung, die,wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet wurde. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 3»32 g eines lockeren Pulvers zurück. Stickstoffgehalt: 0,915ε
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 28 Monosacchariden.
N: 0,90 JO . ■
609842/0817
- 20 -
Vorstand: Dr. Christian Bruhn - Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AQ · D-1 Berlin C5 · Postfach 650311
Karl Otto Mittelstenschoid - Dr. Gerhard Raspo - Dr. Horst WIUeI Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-101. Bankleitzahl 10010010
Stellv.: Dr. Herbort Asmls Berllnor CommorzbonkAG. Borlln, Konto-Nr.103 7006 00, Bankleltzahl 100 40000
Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Criuard v. Schwarfzkoppon Berliner Disconto-Barik AG, Berlin, Konlo-Nr. 241/5008. üankleilzahl 100 700
Sitz dor Gesellschaft: Barlln und Bergkamen Borllr.er Handols-Gosellpüiaft - Frankfurter Bank —, Berlin,
Haniiclsrpnister: AG Rtiarlnttenbura 93 HHB ?ÜS ». AG Kamen HUB 0061 Konlo-Nr. 14-3G2. Bankleilzahl 100 20200
SCHERiNGAG
Gewerblicher Rechtsschutz Beispiel 8;
6 g des unter 3a) erhaltenen Produktes wurden in 500 ml 1,2-Diehloräthan bei 60° gelöst. Nach Zugabe von 2k mmol 6-(2-Methyl-but-2-en-4-yl)-trimethylsilylamino-9-trimethylsilyl-purin und 4,2 ml (35-9 mmol) SnCl^ in iOO ml 1,2-Dichloräthan wurde 2,5 h am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde, wie unter Beipsiel i beschrieben,
aufgearbeitet. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 33 g eines lockeren Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 1,26 %
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 33 Monosaechariden.
c208H343N5°i65 (555**075 N: 1,26 %)
- 21 -B09842/0817
Vorstand: Dr.Christian Bruhn · Hans-Jürqen Hamann · Dr.Helnz Hannsa Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
Karl Otto Mittelslenscheid · Dr. Gerhard Raspö - Dr. Horst Witzel Postscheck-Konto: Berlin-West 1170 101, Bankleitzahl 10010010
StClIv-: Dr. Herbert Asmis Dorllnor Comm';r7bankAG, Berlin, i:oiito-Nr.1087n03 00. Dankleitzahl 10040000
VorcHzendor dus AufüldUsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppon Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Konio-Nr. 241ΛΛ08, fianklüilzalil 100 700
Sitz der Gesellschaft: Berlin und Berqkamen Borlinor H.-incitila-Goseüscliatt — Frankfurter Bank —. Berlin,
·■ ■-·· ■ ■ -.«/■· /^.1.-1-....,U..— r.iül,niül., Ars K-~.,.~ UDCI.» Ifnr.ln.Klr 1.1-l.VJ H'.f,H«ilr:ihl 1Γ.ΙΙ ?n? («I
SCHERING AG
Gewerblicher Rechtsschutz
J2A. 25U275
Beispiel 9* ·
6 g Stärketriacetat, dargestellt nach. J.E. Hodge (Methods in Carbohydrate Chemistry, Vol. IV, Academic Press, New York and London^ 19-6*0 wurden in 500 ml 1,2-Dichloräthan gelöst.
Nach Zugabe von 20 mmol O,N-Bis(trimethylsilyl)-4-amino-2-hydroxypyrimidin in kO ml Acetonitril sowie '"6,5 ml {55>6 mmol) SnCIr in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 Stunden am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde,wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Die Schutzgruppen am Zucker wurden durch Methanolyse mit CH OH/NU, entfernt. Der methanolunlösliche Rückstand wurde abgesaugt, mit Methanol gewaschen und getrocknet.
Ausbeute: 2,8g .
Stickstoffgehalt: 0,679ε "-....'
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 38 Monosacchariden. .
C232H385N3°191 (6272,66; N:
609842/0817 -22-
ifSif n?i«:»?·« 9h,rl5tiaP ^uh" · Hans-JDrgon Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
Stellv Dr h" b TIf " P " Dr"HOrSl WiUel POStSCl10Ck-KoHtO: Borlln-W«*l 11 75-101. Banklellzahl 10010010
u^tciiV« λ s a < iiüf . r r-_. j r.^ Berliner Commonbank AG. Berlin, Konlo-Nr. 108 70Π3 00. Bankleitzahl 100 4OB
vcrsitzonaer des Aufsichtsrats: Df. Eduard v. Schwartzkoppen Berliner Discon!o-Bank AG, üorlin, Konto-Nr. 2Ί1/δϋΟ·3, ßankieilzahl 100 7üO ü0
, „ . , in Berliner t iandols-GosellscIisft — Fiankfurlor Bank-, Berlin,
SCHERINGAG
Gewerblicher Rechtsschutz Beispiel 10?
6 g Acetylierte Agarose, dargestellt nach J.N. BeMiller (Methods in Carbohydrate Chemistry, Volume V, Academic Press, New York and London, 1965)» "wurden in 500 ml 1,2-Dichloräthan gelöst. Nach Zugabe von 20 mraol O,N-Bis (trimethylsilyl)-A— amino-2-hydroxypyrimidin in ho ml Acetonitril sowie 6,5 ml (55»6 mmol) SnCl^ in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 Stunden am Rückfluß erhitzt.
Nach dem Abkühlen wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Die Schutzgruppen am Zucker wurden durch Methanolyse mit CH_OH/NH_ entfernt. Der methanolianlösuche Rückstand wurde abgesaugt, mit Methanol gewaschen und getrocknet.
Ausbeute: 2,6 g
Stickstoffgehalt: 0,59$
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 44 Monosaeehariden.
(7245,53; N: 0,58 %)
609842/0817
Vorstand: Dr. Christian Bruhn ■ Hans-Jürgon Hamann ■ Dr. Heinz Hannse Pootanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311
Karl OUo Miltelslenscheld . Dr. Gerhard Haspe -Dr. Horst Witzel Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-101, Bankleitzahl 10010010
Stellv.: Dr. Herbort Asmls Berliner Commorzbank AG, Berlin, KoMo-Nr. 108 700S ÖO.-Bankloltzahl 100 400
Vorsitzender dos Aufsichtsrats: Dr. Eduord v. Schwartzkoppen Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Kcnlo-Nr.241/5003, Bankloitzahl 10070000
Sitz der Gesellschaft: Berlin und Borfjkamon ■ Berliner Hanuelr.-Gocollsthaft - Frankfurter Bank —, Berlin,
HdlsrßC'islcr: AG Cliarloltonburü ω ΗΠΒ283 U. AG Kamen HRB0051 Konlo-Nr. 14-3S2, tianklo'UBhi 10020203
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Gewerblicher Rechtsschutz Beispiel 11:
Zu einer Suspension von 2,5 g Triacetylcellulose in 150 ml 1, 2-Di chi ο rä than wurden 6 mraol O,N-Bis(trimethylsilyl)-4-amino-2-hydroxy-pyrimidin und 2 g (15 mmol) AlCl.., gelöst in 50 ml Acetonitril, gegeben. Es wurde am Rückfluß erhitzt, wobei Lösung erfolgte. Nach Kochen über Nacht wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 1,27 g eines lockeren Pulvers zurück. Stickstoffgehalt: 0,269ε
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 1Ο1 Monosacchariden. [
C61OH1O15N3°5O6 (16 487,851 Hi 0,26*)
609842/0817
-24 -
Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hans-Jürgen Hamann ■ Dr. Heinz Hannen Postanschrift: SCHERING AG - D-1 Berlin C5 · Postfach 65 0311 Karl Otto Mitlolstenscheid · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst Witzel Postscheck-Konto: Borlin-VVost 11 75-101, Bankloitzahl 10010010 StcUv.: Dr. Herbert Asml3 Berliner Commerzbank AG. Berlin, Konlo-Nr. 108 700B 00, Bankleitzahl 100 400 Vorsitzender das Aufsichtsrats: Dr. Eduard V. Sdiwartzkoppen Berliner Disconto-Uank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleilzahl 100 700 Sitz dor Gesellschaft: Berlin und Berflkamen Berliner HamJ<:ls-Gosel!scliaft — Frankfurter Bank —, Berlin, Handelsregister: AG Charloltonburg93HrU3 2a3 u. AG Kumon HRB0OD1 Konlo-Nr. 14-3&2. Uankloitt.ali! 1002020a
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tiewerblicher Rechtsschutz
Beispiel 12:
Zu einer Suspension von 6 g Triacetylcellulose in 500 ml 1,2-Dichloräthan wurden 20 mmol 2,4-Bis(trimethylsilyloxy)pyrimidin und 4,2 ml SnCl^ in 100 ml Acetonitril gegeben. Es wurde am Rückfluß erhitzt, wobei Lösung erfolgte. Nach Kochen über Nacht wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 3,13 g eines lockeren Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 0,17#
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 99 Monosacchariden. . ■
55! N: 0,179ε)
- 25 -609842/0817
Vorstand: Dr. Christian Bruhn - Hans-Jüraen Kamann · Dr.Holnz Hannso Postanschrift: SCHERING AG - D-1 Berlin C5 · Postfach 650311
Karl Otto MillcIMonschetd - Dr. Gerhard Raspo · Dr. Horst WiUoI Postscheck-Konto: Bcrlin-VVeat 1175-101. Bankloltzahl 10010010
Stollv.: Dr. Herbert Asmis Berliner Commerzbank AG. Berlin, Konlo-Nr. 100 VOOG 00. Bankjoitzahl 100-!0OfJO
VorslUoncIor des Autslchtsrats: Or. Cduard v. Schwartzkoppen Etorlinor Disconto-Bank AG. Berlin, Konto· Nr. 241Λ008. Bankloitzahl IUO 700
Sitz der Cr:scill*diaft: Berlin und Bertikarnon Berliner Handols-Gesollichaft — Frankfurter Bank —, Berlin,
Handolsre-iKter: AG Charloltenbury Ui HRB 283 u.AG Kamen HRB006t Konto-Nr. 14-363, Bankloilzatil 100 2ΰ200
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Beispiel 13*
Zu einer Suspension von 6 g Triacetylcellulose in 5OO nil 1,2-Dichloräthan wurden 20 mmol 6-(Octanoyl)-trimethylsilylamino-9-trimethylsilylpurin und 4,2 ml (35i9 mmol) SnCl^ in 100 ml Acetonitril gegeben. Es wurde am Rückfluß erhitzt, wobei Lösung erfolgte. Dann wurde über Nacht gekocht und wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. . · Der Rückstand wurde in I50 ml Methanol suspendiert, mit 50 ml 1N NaOCH -Lösung versetzt und 2 Stunden am Rückfluß gekocht. Die abgekühlte Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert und über eine Fritte abgesaugt. Nach dem Auswaschen und Trocknen blieben 3,2 g eines Pulvers zurück*· Stickstoffgehalt: 0,44$
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 98 Monosacchariden.
ί,44; N: 0,
- 26 -609842/0817
Vorstand: Dr. Christian Brunn ■ Hans-JDrgen Hamann · Dr. Helnr Hannse Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311
Karl Otto Mittelslcnscheid · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst WiUoI Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101. Bankleitzahl 10010010
otellv.: Dr. Herbert Asmis . Berliner Comtnorzbank AG, Uerlin, Konto-Nr. 103 700G 00. Banklellzahl 100 «0
Versitzender des Aufsiclitsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppen Berlltier Disconto-Bank AG, üerlin, Konto-Nt.2-11/5003. Bankleitzahl 10070!)00
SHz der Gesellschaft: Berlin und Betgkamen Berliner Handuls-GesKÜr.dinfl — frankfurter Bank -, Berlin,
Handelsregister: AG Charlottenburg S3 HfIB 283 u. AG Kamen HRB 0061 Konto-Nr 14-362, Banklciizahl 10020200
Beispiel i4: Gewerblicher Rechtsschutz
Zu einer Lösung von 6 g des unter Beispiel £a erhaltenen Produktes in 5OO Ml 1,2-Dichloräthan -wurden 20 mmol 2,6,9-0,N-Tris(trimethylsilyl)2-acetamido-6-hydroxy-purin sowie 6,5 ml (55»6 mmol) SnCIr in 100 ml 1,2-Dichloräthan gegeben. Dann wurde 2 Stunden am Rückfluß erhitzt und gemäß Beispiel 1 aufgearbeitet.
Der Rückstand wurde in I50 ml Methanol suspendiert, mit 50 ml 1 N NaOCH -Lösung versetzt und 2 Stunden am Rückfluß gekocht. Die abgekühlte Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert und über eineeFritte abgesaugt. Nach dem Auswaschen und Trocknen blieben 3,1 g eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 1,34#
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 3I Monosacchariden
C191H315N5°156 (5177,66, N; 1,35%)
609842/0817
Vorstand: Dr. Christisn Druhn · Hans-Jörgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 ■ Postfach 650311
Karl Otto Mitlolslonscheld · Dr. Gerhard Raspe .· Dr. Horst Witzel Postschock-Konto: Borlin-West 11 75-101. Bankleltzahl 10010010
Stollv.: Dr. Herbert Asmls ' Berliner Commerzbank AG. Berlin. Konto-Nr. 108 7006Op. Bankleltzahl 100XOO
Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppen Berliner Disconto-Bank AG. Berlin, Korito-Nr. 241/5008, EwnkloiUahl 10070000
Sitz der Gesellschaft: Berlin und Borgkamen Berliner Hi.ndols-Gesollschatt - Frankfurter Bank —, Berl'n,
Handelsregister: AG Charlottonburp, 93 HHB 233 U. AG Kamen HRB 0061 · Konto-Nr. 14-3CÜ. Ilankloitzahl 100 2U?. 00
Beispiel 15:
Gewerblicher
25U275
Zu einer Suspension von 6 g Triacetylcellulose in 500 ml 1,2-Dichloräthan wurden 20 mmol 2,6,9-Tris (trimethylsilyl)-2-acetamido-6--hydroxy-purin sowie 6,5 ml [55,6 mmol) SnCl2, in 100 ml 1,2-Dichloräthan gegeben. Dann wurde 2 Stunden am Rückfluß erhitzt und gemäß Beispiel 1 aufgearbeitet· . Der Rückstand wurde in 15Ο ml Methanol suspendiert, mit 50 ml 1 N NaOCH -Lösung versetzt und 2 Stunden am Rückfluß gekocht. Die abgekühlte Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert und über eine Fritte abgesaugt. Nach dem Auswaschen und Trocknen blieben *3fO S eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 0,kyfa
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 98 Monosacchariden
C593H985N5°491 (i6# o4i»44j Ni
- 28 -609842/08 17
Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannae Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311 Karl Otto Mittolstenscheid · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst Witzel Postschock-Konto: Berlin-West 1175-101. Bankleitzahl 10010010 Stollv.: Dr. Herbert Asmls Berliner Commorzbank AG. Berlin, Konlo-Nr. 108 7006 00. Bankleitzahl 100 400 OO Vorsitzender des Aufslchtsrals: Dr. Eduard V. Sdiwartzkoppon Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Konlo-Hr. 2Ί1/5003, Bankloitzahl 100 700 Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Berliner Handels-Gosollschaft — Frankfurter Bank —, Berlin, Handelsregister: AG Cliarlottonburg 93 HRB 283 U. AG Kamen HRB 00G1 Konto-Nr. 14-362, Banklciilzahl 100 202 00
SCHERINGAG
Gewerblicher Rechtsschutz
Beispiel l6: 2514275
Acetylierende Spaltung von Triacetylcellulase. - Zu jeweils 30 g Triacetylcellulose in 3OO ml Essigsäure wurden unter Rühren und Kühlen mit Leitungswasser je 33O ml eines eiskalten Gemisches aus 3OO ml Acetanhydrid und 30 ml konz. H SOr gegeben. Nach Ablauf der vorgegebenen Zeit wurde die Reaktion durch Eingießen in 5 1 Eiswasser beendet. Durch Zugabe von Na_CO wurde ein pH-Wert von 4-5 eingestellt. Nach Stehen über Nacht wurde der Niederschlag abgesaugt, mit Wasser gewaschen und mit kaltem Methanol ausgezogen.
Der methanolunlöslieh.e.^Teil wurde im Vakuum bei 50 getrocknet. .
a.) Der Ansatz wurde nach 71 Stunden aufgearbeitet· Ausbeute: 18,5 g
b) Der Ansatz wurde nach 76 Stunden aufgearbeitet. Ausbeute: 14,8 g
c) Der Ansatz wurde nach 84 Stunden aufgearbeitet. Ausbeute: 9»5 S
.- 29 -609842/08 17
Vorstand: Dr. Christian Bruhn - Hans-Jürgen Hamann - Dr. Heinz Hannso Posfanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311 Karl Otto Mitletslenschoid · Dr. Gerhard Ra3pe · Dr. Horst WlUeI Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-101. Bankloltzahl 10010010 Sfellv.: Dr. Herbert Asmis Berliner Commerzbank AG. Berlin. Konto-Nr. 108 700ö 00, Bankleltzahl 100 400 Vorsitzender des Auf slditnrrits: Dr. Eduard V.Schwarlzkoppon Berliner Disconto-Bank AG. Beilin, Konto-Nr. 241/5003, Bankloltzahl 10070000 Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Berliner Hnrufcls-Gcsollschail — Frankfurter Bank —, Berlin, Handolsreoistor: AG Crmrlolti.-iibiirgi»HRB?83 u.AG Kamen HRB00C1 Konto-Nr. 14-M>2. üankloilzahl 1U0 20200
up it/ o/«n
25U275 „ . . . 17 SCHERING AG
Beispiel 1?: . „.,.·.„,.
- Gewerblicher Rechtsschutz
6 g des unter Beispiel i6c' ) hergestellten Produktes wurden in 500 ml 1,2-Dichloräthan gelöst. Nach Zugabe von 20 mmol 0,N-Bis(trimethylsilyl)-4-amino-2-hydroxypyrimidin in hO ml Acetonitril sowie 4,2 ml (35,9 mmol) SnCl^ in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 h am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 3,2 g eines lockeren Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 2,22 #
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 11 Monosac chariden.
C70H115N3O56 (189^,71; N: 2,2236)
- 30 609842/081 7
Vorstand: Dr. Christian Bruhn -1 ians-Jörgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AQ · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
Karl OUo Mitlelstcnscheid - Dr. Gerhard Raspe · Dr. Korst Wilzel Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101. Bankloltzahl 10010010
SIoIIv.: Dr. Herbert Asmiä Berliner Commerzbank AG. Berlin, Konlo-Nr. 108 70OBO0. BankleiUahl 100 4.30
Vorsitzender dos Autslchtsrats: Dr. Eduard v. Schwarlzkoppon Berliner Oisconto-fSank AG, üerlln, Konlo-Nr. 241/5003, Batikloltzahl 100 700
SiIz dor Gesollschalt: Korlin und Borgkamon Berllnor Handols-Gpsollschait - Frankfurter Bank -, Berlin,
Handelsregister: AG Charlottenburg 93 HUB203 u.AG Kamen HRB 0001 Konlo-Nr. 1<I-3C2, UaiiKloiUahl 1002UZOO
E3 DE IV
SCHERING AG
Gewerblicher Rechtsschutz
25U275
Beispiel 18: - >?.
6 g des unter Beispiel i6c ) hergestellten Produktes wurden in 5OO ml 1,2-Dichloräthan gelöst. Nach Zugabe von Zh mraol 2,4-Bis(trimethylsilyloxy)-pyrimidin und k,2 ml (35,9 mmol) SnCIr in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 h am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde wie unter
Beispiel 1 beschrieben aufgearbeitet. Nach Methanolyse, Auswaschen und Trocknen blieben 3»1 β eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 1,^7 #
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 11 Monosacchariden.
(1895,70} N: 1,
60 9 842/0817 -
Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311
Karl Otto Mittclstenscheid · Dr. Gorl.ard Raspo · Dr. Horst Wltzol Postscheck-Konto: Berlin-West 11 «i-101. Bankleltzahl 10010010
St»llv.: Dr. Herbert Asmls .■ Berliner Commerzbank AG, Berlin. Konto-Ni. 108700600, Bankleltzahl 10040000
Vorsllzonder des A'iislchlsrats: Dr. Eduard v.Schwartekoppon Berliner Disconto-liankAG, Berlin, Konto-Mr.241/5003; Bnnkleitzahl 100 70000
Sitz der Gesellschaft r Kerlin und Bertjkainen Berliner HandoH-Gesollcrfiaft — Frankfurter Bank —, Berlin,
Handelsregister: AG Charlottenl)urg!i3HRB2S3 U. AG Kamen HRB 1)061 . Konto-Nr. 14-3G^, tii-nklailzatil 10020200
SCHERING AG
Co-.verblicher Rechtsschuts
Beispiel 19:
6 g des unter Beispiel i6c ) hergestellten Produktes wurden in 500 ml 1,2-Dichloräthan gelöst. Nach Zugabe von 20 mmol 6-(Octanoyl)-trimethylsilylamino-9-trimethylsilylpurin und 4,2 ml (35,9 mmol) SnCl^ in 100 ml 1,2-Dichloräthan vurde 2 h am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Der Rückstand vurde in I50 ml Methanol suspendiert, mit 50 ml 1 N NaOCH-LiJsung versetzt und 2 Stunden am Rückfluß gekocht. Die abgekühlte Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert und über eine Fritte abgesaugt. Nach dem Auswaschen und Trocknen blieben 3»1 eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 3,659ε
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 11 Monosacchariden;
C71H115N5O55 (1918,74; N: 3,659ε)
609842/0817 -32'-
Vorstand: Dr. Christian Brutin · Hans-Jürgen Ilamann · Dr. Heinz Hannso Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 650311 Karl Otto Miltelstonscheld · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst Wltzel Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101, Dankloltzahl 10010010 Stellv.: Dr. Herbert Asmls Borllner Commerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 100 700G 00, Bankleltzahl 100 400 Vorsitzender des Aufsichtsrals: Dr. Eduard v. Schwartzkoppen Berliner Disconlo-Dank AG. berlin, Konto-Nr. 241/M08, Bankleitzahl 100 700 Sitz dor Gesellschaft: Berlin und Bergkamon Borllner Ilandols-Gosollschalt - Frankfurter Bank —, Berlin, Handelsregister: AG Charlottenburg 93 HRD 283 U. AG Kamen HRD 0061 Konlo-Nr. 14-3S2, Dankleitzahl 100 202 00
SCHERING AG
Ga-.verblidier Rechtsschutz
Beispiel 20:
6 g des unter Beispiel i6c ) hergestellten Produktes wurden in 5^0 ml 1,2-Dichloräthan gelöst. Nach Zugabe von 20 mmol 2,6,9-Tris(trimethylsilyl)-2-acetamido-6-hydroxypurin sowie 6,5 ml (55t& mmol) SnCl. in 100 ml 1,2-Dichloräthan wurde 2 h am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde, wie unter Beispiel 1 beschrieben, aufgearbeitet. Der Rückstand wurde in I50 ml Methanol suspendiert, mit 50 ml 1 N NaOCH,.-Lösung versetzt und 2 h am Rückfluß gekocht. Die abgekühlte Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert und über eine Fritte abgesaugt. Nach dem Auswaschen und Trocknen blieben 2 9g eines Pulvers zurück.
Stickstoffgehalt: 3,6156
Entspricht einer durchschnittlichen Anzahl von 11 Monosacchariden.
C71H115N5O55 (1934,74,· N: 3,629ε)
609842/0817
Vorsland: Dr. Cliristlan Brutin ·! lans-Jürgon Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG ■ D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Karl Otto Miltelslonschoid ■ Dr. Gerhard Raspe · Pr. Horst Witzel Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-1Oi1 Bankleitzahl 10010010 Stollv.: Dr. Herbert Asmls · Berliner Coininorzbank AG, Berlin. Konto-Nr. 100 7000 00, Dankleiizahl 100 400 Vorsitzender des Aufsichterats: Dr. Eduard v. Schwarlzkoppen Borlinor Disconto-Bank AQ1 Berlin, Konlo-Nr. 241/5003, Baiikleilzahl 100 700 Sitz d<;r Cr-sollr.chaft: Berlin und Borgkamen Berliner Handcls-Gesollschaft — Frankfurter Bank —, Berlin, Handülf,reiiistcr: AG CharlotlLiiburQ S3 HRB 2ß3 u. AG Kamon HRB 0061 Konlo-Nr. 14-3S2, BankloiUahl 100 20? 00
251427b
SCHERING AG
Gewerblicher Rechtsschutz Beispiel 21
Trennung eines Gemisches aus Cytidin+Guanosin
Eine Mischung aus Cytidin (5A Mol) und Guano sin (i A Mol) in 0,001 η Trispuff er. pH = 7.5, wurde auf eine
Säule (1 χ 2,5 cm) aus 1-[4-6^(D-I £· 4-D-glucopyranosyl) . -
ß-D-glucopyranosyl]-4-amino-1,2-dihydropyrimidine-2-on (Stickstoffgehalt 0.7355) gegeben. Das Cytidin wurde mit dem Puffer eluiert, während das Guanosin quantitativ zurückgehalten wurde. Das Guano sin ließ sich mit dem .Puffer 0,1 η an NaCl eluieren·.
OfHCHNAL INSPECTED
609842/08 17
Vorsland: Dr. Christfan Brunn · I !ans-Jürgsn Hamann · Dr. Heinz Hannse Karl Otto Miltelstonscheid · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst Witesl
Stellv.: Dr. Herbert Asmis
VorsiUendor des Aufsichlsrats: Dr. Eduard v. Schwarlzkoppon Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen
Handelsregister: AG Charlottentiurg 93 HRQ 283 u. AG Kamen HRB 0051
Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postlacil 05 0311 Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101, Bankloltrahl 10010010 Berliner Commnrzbank AG. Berlin, Konto-Nr.103 7006 00, Bankloltznhl 100 400 CO
Berliner Disconto-BankAG, Berlin, Konto-Nr. 241/500». Uankloitzahl 100 700 00 Berliner ilandcIs-Gcsellschaft — Frankfurter Bank -, Berlin, Konto-Nr. 14-3G2, Bankleiizahl 1C0 202 00
RJ Di; IV 545M

Claims (1)

  1. SCHERING AG
    Patentabteilung
    25H275
    Patentansprüche
    Nucleoside der allgemeinen Formel I
    R1-N-(C=C)1n-(C)n-R2 I , IMl!
    3 4
    worin Z einen freien oder geschützten Polysaccharidrest,
    X die Atome 0 oder S
    m die Zahlen 0 oder 1
    η die Zahlen 0 oder 1
    R1 und R2 gemeinsam einen gesättigten oder ungesättigten, gegebenenfalls substituierten zweiwertigen organischen Rest, der ein oder zwei Stickstoffatome enthalten kann und
    R^ und R2^ Jeder für sich Wasserstoff, einen Alkyl-, Alkoxycarbonyl- oder Alkylaminocarbonylrest, eine Carboxyl-, Nitrilgruppe oder gemeinsam die zweiwertigen Reste
    - 55 609842/0817
    Vorstand: Hans-Jür9en Hamann - Karl OtIo Mittelstenscheid Postanschritt: SCHERINQ AG ■ D-1 Berlin 65 · Postfach 65 Oi 11
    Vr. Gerhard Raspo · Dr. Horst Wilzel Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101, Bankleitzahl 10010010
    Stellv.: Dr Christian Brunn - Dr. Heinz Hannse Berliner Commerzb?nk AG. Berlin. Konto-Nr. 108 7006 00. Bankieitzahl IM «0
    Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppen Berliner Disconto-Bank AG, tiorlin, Konto-Nr. 241/500R. Baiikleiizah! 1U0 70G
    Sitz der Gesellschati: Berlin und Bergkamen Berliner Handels-Gesellschaft - Frankfurter Bank -, Berlin,
    Handelsregister. AG Ctrarlottenburg 93 HRB 283 u. AG Kamen HRB 0061 Konto-Nr. 14-362, Bankleitzahl 100 202 00
    SCHERING AG
    Patentabteilung
    25U275
    2)
    η η η .
    die in üblicher Weise substituiert und/oder hydriert sein können, bedeuten.
    Verfahren zur Herstellung von Nucleosiden der allgemeinen Formel I, dadurch gekennzeichnet, daß man ein 1-O-Acyl-, 1-O-Alkyl- bzw. 1-Halogenderivat eines geschützten Polysaccharides mit einer Verbindung der allgemeinen Formel II oder III
    oder
    II
    III
    worin R1, Rg, R , R^, X, m und η die obenangegebene Bedeutung haben, Y einen Alkyl- oder Trialkylsilylrest, vorzugsweise den Trimethylsilylrest, bedeutet
    in Gegenwart eines Friedel-Crafts-Katalysators oder 609842/0817
    Vorstand: Hans-Jürgen Hamann · Karl Otto Mittelstenscheid
    Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst Witzel Stollv.: Dr. Christian Brunn ■ Dr. Heinz Hannse
    Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwarlzkoppen Sitz der Gesellschaft: Berlin und Bergkamen Handelsregister: AG Charlottenburg 93 HRB283 U. AG Kamen HRB 0061
    Postanschrift: SCHERING AG · D-1 Berlin 65 · Postfach 65 03 11 Postscheck-Konto: Berlin-West 11 75-101. Banklejtzahl 10010010 Berliner Commerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 108 7006 00, Bankleitzahl 100 400
    Berliner Disoonto-Bank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleitzahl 100700 Berliner HancOls-Gosellschait — Frankfurter Bank —, Berlin, Konto-Nr. 14-362, Dankleilzahl 100 202 no
    SCHERING AG
    Gewerblicher Rechtsschutz
    eines Trialkylsilylesters, vorzugsweise Trimethylsilylesters einer Mineralsäure oder einer starken organischen Säure zur N-substituierten Verbindung gemäß Formel I umsetzt und gegebenenfalls Schutzgruppen in an sich bekannter Weise abspaltet·
    3) N -/Xl-H)-ß-D-Glucopyranosyl£-cytosin mit η im Bereich von 11 - 100.
    N -/X1—5-4) -fi-D-GlucopyranosylZ-uracil mit η im Bereich
    von 11 - 100.
    5) n"-/(1-£ 4)-ß-D-Glucopyranosyl7-adenin mit η im Bereich von 11 - 100.
    6) N9-/"(l->|r)-ß-D-Glucopyranosyl7-6-(2-methyl-2-buten-4-yl)-adenin mit η im Bereich von 33.
    7) N -/(l->4)-a-D-Glucopyranosyl7-cytosin mit η im Bereich
    von 38.
    8) N -/GalaktopyranosylT-cytosin mit η im Bereich von 44.
    9) Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man als Katalysator (CHj3SiO-ClO3 oder (CH3J3SiOSO2CF3 verwendet.
    10) Verwendung von Verbindungen gemäß der Ansprüche 1 und 3-8 als Sorbentien für die Affinitätschromatographie.
    - 37 609842/0817
    Verstand: Dr. Christian Bruhn - Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Postanschrift: SCHERING AG ■ D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311
    Karl Otto Mittelstenscheid · Dr. Gerhard Raspe · Dr. Horst Witzel Postscheck-Konto: Berlin-West 1175-101, Bankleltzahl 10010010
    Stellv.: Dr. Herbert Asmis Berliner Commerzbank AG, Berlin, Konto-Nr. 108 7006 00, Bankleitzahl 100 400 Oo
    Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwarlzkoppen Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleitzahl 10U 700
    Sitz der Gesellschaft: Berlin und Dergkamen Berliner Handels-Gesellschaft — Frankfurter Bank —, Berlin,
    Handt':.r; v.ttr: AG Ch=rlottenburg93HRB283 U. AG Kamen HR30061 Konto-Nr. 14-3G2, Bankleitzahl 10020200
    SCHERING AG
    Gewerblicher Rechtsschutz
    2.5H275
    11) Arzneimittel auf Basis der Verbindungen gemäß der Ansprüche 1 und 3-8.
    609842/08 1 7
    Vorstand: Dr. Christian Bruhn · Hans-Jürgen Hamann · Dr. Heinz Hannse Karl Otto Mltteistenscheid - Dr. Gerhard Raspo · Dr. Horst Witzel SIeIIv.: Dr. Herbert Asmis
    Vorsitzender des Aufsichtsrats: Dr. Eduard v. Schwartzkoppen Sitz dor Gesollschaft: Berlin und Bergkamen Handelsregister: AG Charlottenburg 93 HRB 283 u. AG Kamen HRB 0061 Postanschrift: SCHERING AG ■ D-1 Berlin 65 · Postfach 65 0311 Postscheck-Konlo: Berlin-West 11 75-101, BanHeitzahl 1001ÜQTG Berliner CommerzbankAG, Berlin, Konto-Nr. 108 7006 00, Dankleitzahl 100400 00
    Berliner Disconto-Bank AG, Berlin, Konto-Nr. 241/5008, Bankleitzahl 100 700 00 Berliner Handels-Gerel'.schafi — Frankfurter Bank —, Berlin, Konto-Nr. 14-3ö2, Bankier! zahMOO 20200
    Κ DE IV 2SiM
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