DE2433993C3 - 1-Amidino-3-phenylharnstoffe, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende therapeutische Zubereitungen - Google Patents

Description

in der Ri ein Chloratom und R₂ ein Chlor- oder Fluoratom ist, und deren nicht-toxische Säureanlagen'ngssalze.

2. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man

2(.

a) ein Anilin der allgemeinen Formel

NH,

in der Ri und R, die angegebene Bedeutung haben, mit Phosgen behandelt und das gebildete

Isocyanat der allgemeinen Formel

NCO

in einem polaren Lösungsmittel mit Guanidin umsetzt, oder
b) ein Biguanid der allgemeinen Forme!

NH

NH

NH-C — NH-C-NH₂

in der Ri und R? die angegebene Bedeutung haben, bei erhöhter Temperatur mit einer Säure hydrolysiert

und gegebenenfalls erhaltene Säureanlagerungssalze mit Basen in die freie Base oder erhaltene Basen mit Säuren in Säureanlagerungssalze umwandelt.

3. Therapeutische Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, daß sie als Wirkstoffe eine oder mehrere Verbindungen nach Anspruch 1 enthält.

Die erfindungsgemäßen l-Amidino-3-phenylharnstoffe stellen neue Verbindungen mit bisher unbekanntem Wirkungsmechanisnius dar. Sie haben antisekretorische Wirkung und hemmen die Motilität des Magen-Darm-Traktes, ohne wie das bekannte Antidiarrhoicuni Diphenoxylat zu Gewöhnung oder Sucht zu führen. Während die Antidiarrhoewirkung von Diphenoxylat durch Naloxon (17-Alkyl-4,5oc-epoxy-3,14-dihydroxy-morphinan-6-on), einem bekannten Blocker für Morphin-Rezeptoren gehemmt wird, trifft dies nicht für die erfindungsgemäßen Verbindungen zu. Sie haben auch nicht die unerwünschten Nebenwirkungen der zur Behandlung von Magen-Darm Erkrankungen, insbesondere Magengeschwüren angewandten sekretionsheinmenden Anticholinergica, wie Atropin, das häufig in Kombination mit Diphenoxylat zur Anwendung kommt. Diese Nebenwirkungen, wie Sehstörungen aufgrund von Pupillenerweiterung, Harnverhaltung, erhöhte Pulsfrequenz und damit Sauerstoffverarmung im Herzen, machen die Anticholinergica bei der Behandlung von Patienten mit einem Glaukom und Prostatahypertrophie kontraindiziert und bei der Behandlung von Patienten mit Coronarsklerose gefahrlich, nachdem die unerwünschten Nebenwirkungen bereits in Dosen auftreten, die für die angestrebte therapeutische Wirkung notwendig sind. Die erfindungsgemäßen Verbindungen ermöglichen die sichere Behandlung von Diarrhöe und einer erhöhten Magensäuresekretion ohne unerwünschte Nebenwirkungen, was vor allem dann von Bedeutung ist, wenn die Anwendung der bekannten Mittel aus den vorstehend angegebenen Gründen kontraindiziert ist. Sie stellen somit eine echte Bereicherung der Therapie dar.

Die gleichen therapeutischen Eigenschaften wie die freien Basen haben die nicht-toxischen Säureanlagerungssalze der l-Amidino-3-phenylharnstoffe bei besonders guten Löslichkeitseigenschaften, die Vorteile bei der therapeutischen Anwendung bringen.

Geeignete Säure für die Sal/bildung sind anorganische Säuren, wie Salzsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure und Phosphorsäure oder organische Säuren, wie Methansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Essigsäure, Propionsäure, Maleinsäure, Bernsteinsäure, Glykolsäurc, Milchsäure, Salicylsäure, Benzoesäure, Nikotinsäure, Phthalsäure,Stearinsäure,Ölsäure und Abietinsäure.

Die Herstellung der l-Amidino-3-phenylharnstoffe erfolgt dadurch, daß man in an sich bekannter Weise aus einem entsprechenden Anilin und Phosgen ein Phenylisocyanat herstellt, dessen Umsetzung mit Guanidin den erwünschten l-Amidino-3-phenylharnstoff ergibt. Die Reaktion wird in einem polaren Lösungsmittel, wie Alkohol oder Tetrahydrofuran durchgeführt. Man Kann auch das Phenylisocyanat im Rcaktionsmedium hersteilen und dieses mit durch Hydrolyse von Guanidincarbonat gebildetem Guanidin umsetzen. Diese Reaktionen verlaufen wie folgt:

NH NH

Il Il

(NH₂CNH₂),-H₂CO₃ + KOH —> NH₂CNH₂

Man kann die i-Amidino-3-phenylharnstoffe auch durch Hydrolyse der entsprechenden Biguanide herstellen. Diese Hydrolyse wird vorzugsweise mit Salzsäure bewirkt, wobei die Reaktionszeit und die Reaktionstemperatur vom eingesetzten Biguanid und der Konzentration der Säure abhängen. Im allgemeinen sind hohe Temperaturen und lange Reaktionszeiten in Anwesenheit von stärker konzentrierten Säuren nicht notwendig.

NH

NH

NH-C-NH-C-NH₂

10% HCl

0 NH

NH-C-NH-C-NH₂

Die als Ausgangsstoffe verwendeten Aniline sind bekannt oder können in bekannter Weise, z. B. durch Chlorierung von Acetanilid oder Anilin hergestellt werden.

Die Fluorverbindung erhält man dadurch, daß man eine entsprechende Aminoverbindung zum Diazoniumfluorborat diazotiert, das dann thermisch zur Fluorverbindung zersetzt wird. Chloratome kann man auch durch Diazotierung und anschließende Sandmeyer-Reaktion einführen.

Auch das als Ausgangsstoff verwendete Biguanid ist entweder bekannt oder kann in an sich bekannter Weise hergestellt werden. Zum Beispiel kann man Cyanoguanid mit einem entsprechenden Anilin in Gegenwart äquimolarer Mengen einer Mineralsäure zum entsprechenden Phenylbiguanid kondensieren, wie nachstehend dargestellt ist.

K,

-K

NH₂ HX

N NH

III I!

C — NH-C —NH,

NIl

NH

NH-C-NH-C-NH₂ ■ HX

O NH

Il Il

NH-C-NH-C-NH₂

Die Wirkungsweise der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde mit den folgenden Testverfahren ermittelt.

Test A
Rizinusöl-Test

R,

y> Dieser Test miöi unmittelbar die Wirkung der untersuchten Verbindui gen gegen Diarrhöe bei Mäusen. Männliche Swiss-Webster Mäuse mit einem Körpergewicht von 25 bis 20 g, die vor der Untersuchung nach Belieben Futter und Wasser aufnehmen konnten, wurden in Gruppen von je 10 Tieren eingeteilt. Die zu untersuchenden Verbindungen wurden oral als Suspension in einer 0,5%igen Methylcellulose-Lösung an die Tiere der einzelnen Gruppen verabfolgt, die Kontrollgruppe ausgenommen, die nur den Träger

in erhielt.

Eine Stunde nach der Verabfolgung der Testverbindungen wurden an jedes Tier oral 0,3 ecm Rizinusöl verabreicht. Dann wurden die Tiere einzeln in Käfige gesetzt. Der von jenem Tier innerhalb von 3 Stunden

i> ausgeschiedene Kot wurde auf einem Papier unter dem Käfig gesammelt und untersucht. Die erhaltenen Ergebnisse sind als ED50 der untersuchten Verbindungen zur Verhinderung von Diarrhöe ausgedrückt.

Test B
Magenentleerungstest

Dieser Test ermittelt die Fähigkeit der untersuchten Verbindungen die Entleerung des Magens bei Ratten zu verhindern und wurde nach dem Verfahren von D. A. Brodie in Gastroenterology Bd. 50, S. 45 (1966) durchgeführt.

Die zu untersuchenden Verbindungen wurden oral an

;o eine Gruppe von Ratten verabfolgt. Eine Stunde später erhielten die Tiere über ein Dosierröhrchen 30 Ampertit Pellets mit einem Durchmesser von 1 mm. 4 Stunden nach der Verabreichung wurden die Tiere gelötei. Dann wurde der Mageninhalt der Tiere untersucht und die Anzahl der im Magen verbliebenen Pellets gezählt und mit der Anzahl der im Magen verbliebenen Pellets von Tieren verglichen, denen nur de ■ Träger verabreicht worden war.

Die Ergebnisse sind als Prozentsatz der Hemmung

bo der MagenentleeriinL' ausgedrückt, d. h. als prozentuale Verringerung der Pellets, die im Vergleich zu den Kontrollieren aus dem Magen entfernt wurden.

Test C
Bewegung von A-Kohle

Dieser Test zeigt an, in wieweit die Geschwindigkeit der Passage von Α-Kohle durch den Verdauungstrakt

von Mäusen unter der Einwirkung der untersuchten Verbindungen verringert wird. Er ist von Macht und Barba-Gose in journal American Pharmacological Association, Sd. 20, S.558 -564(1931 /beschrieben.

Männliche Swiss-Websler-Ratten mit einem Körpergewicht von 20 — 25 g, die eine Woche in einem Whyne Lab Chair gehalten worden waren, wurden willkürlich in Gruppen zu je 5 Tieren eingeteilt. Vor der Verabreichung der Testverbindungen erhielten sie einen Tag lang keine Nahrung aber beliebig Wasser. Die Testverbindungen wurden entweder in destilliertem Wasser gelöst oder in O,5°/oiger Methylcellulose-Lösung suspendiert. Die verabreichten Dosen sind in mg/kg Körpergewicht angegeben. Die Verabreichung erfolgte oral. Eine Kontrollgruppe erhielt nur den Träger.

Eine Stunde nach der Verabfolgung wurden den Tieren oral 10 ml/kg Körpergewicht einer !0%igen Suspension von Α-Kohle USP in Methylcfüjlose (5 g/50 ml Methylcellulose) verabreicht 30 Minuten später wurden die Tiere durch Genickschlag getötet und inre Eingeweide vom Pförtnerschließmuskel bis zum Blinddarm entfernt und längs auf feuchtes Papier gelegt. Die Länge der entfernien Eingeweide und der von der Α-Kohle zurückgelegte Weg wurden gemessen.

Die prozentuale Hemmung durch die untersuchten Verbindungen wurde wie folgt errechnet:

(zurückgelegter Weg bei den Kontrolltieren) - (zurückgelegter Weg bei den Versuchstieren) zurückgelegter Weg bei den Kontrolltieren.

Test D
Ermittlung der antisekretorischen Wirkung

Es wurde das Verfahren von H. Shay, S. A. Komarow, S. S. Fels. D. Meranze, M. Gruenstein und H. Siplet in Gastroenterology, Bd. 5, S. 43 (1945) angewandt.

Männliche Sprauge-Dawley Ratten erhielten 24 Stunden vor der Verabreichung der Testverbindungen keine Nahrung. Eine Stunde nach der Verabfolgung wurden die Tiere anaesthetisiert und durch einen Baucheinschnitt wurde eine Pförtnerligatur hergestellt. Dann wurde der Einschnitt verschlossen. 4 Stunden nach dem operativen Eingriff wurden die Tiere durch Genickschlag getötet. Ihre Mägen wurden entfernt und der Mageninhalt wurde jeweils auf Volumen, titrierbare Säure (Konzentration) und die Gesamtsäure untersucht.

Die erhaltenen Ergebnisse sind für jeden dieser 3 Parameter als prozentuale Hemmung der Magensekretion angegeben.

Test E

Anticholinergische Wirkung

Isoliertes Meerschweinchen-ileum wurde mit einer Probe der zu untersuchenden Verbindung behandelt.

2(i Dann wurde das Ileum mit Acetylcholin behandelt, beobachtet und jegliche Kontraktion aufgezeichnet.

Ergebnisse

1. Anticholinergica hemmen die durch Acetylcholin hervorgerufenen Kontraktionen (A) aber nicht die durch andere Substanzen verursachten Kontraktionen, wie von BaCb. die direkt auf die Muskeln wirken (B).

2. Eine Substanz, die sowohl Kontraktionen der Art A als auch solche der Art 3 verhindert, ist kein Anticholinergicum, sondern wirkt zur Verhinderung der Kontraktionen direkt auf die Muskeln. Sie stellt daher ein Spasmolytikum aber kein Anticholinergicum dar.

3. Eine Substanz, die weder Kontraktionen der Art A noch solche der Art B hemmt, ist kein Spasmolyticum und auch kein Anticholinergicum.

Die erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengestellt.

Tabelle

Verbindung	LD50,	Wirkung gegenüber Diarrhöe	Test B	I	0,125 54	Teste	%	Test D	% Hemmung	Test E
	Maus		Magnetentleerung		0,25 60	A-Kohli	Hem			Anti-choliner-
	mg/kg	Test A	bei Ratten	20 25		mung		Ge- VoIu- Konz.	gische Wirkung
				0,25 48				samt- men	am Meer-
			Dosis %				Anti-sekretorische Wirkung	säure	schweinchen-
			mg/kg Hem		; Bewe-		bei Ratten	94	Ileum
		Rizinusöl	mung		gung bei Mäusen			87
		ED50		20	Dosis	89 82 51
		mg/kg	Dosis	28	mg/kg
		bei Mäusen	mg/kg				nein
							nein
I	40						ja
II	48	2		0,5
Atropin	750			2
Diphen-		11		32
oxylat			20
	4

I = l-Amidino-3-(2,6-dichlorphenyl)-hamstofT-hydrochlorid. [I = l-Amidino-3-(2-chlor-6-fluorphenyl)-harnstolT-hydrochlorid.

Die folgenden Beispiele erläutern das erfindungsgemäße Verfahren.

Beispiel 1

0,1 Mol 2,6-Dichlor-anilin in 300 ml wasserfreiem Benzol wurde mit 325 ml einer 12%igen Lösung von Phosgen in Benzol (0,395 Mol) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde zwei Stunden unter Rückfluß erhitzt. Dann wurde das Benzol zur gleichzeitigen Entfernung überschüssigen Phosgens abgezogen; der verbleibende Rückstand wurde durch Destillation gereinigt. Das gebildete 2,6-Dichlor-phenyüsocyanat wurde in 50 ml Tetrahydrofuran gelöst und tropfenweise zu einer heterogenen Mischung von 1,2 g Kaliumhydroxid und 18 g Guanidincarbonat in 250 ml Tetrahydrofuran gegeben. Die Mischung wurde 8 Stunden gerührt, dann mit 35 ml konzentrierter Salzsäure und anschließend mit 40 ml konzentrierter Natriumhydroxidlösung versetzt, worauf man in einem kalten Wasserbad kühlte. Dann wurde das Gemisch in 1500 ml Wasser gegeben und das Tetrahydrofuran unter vermindertem Druck entfernt. Die Mischung wurde mit Äther extrahiert, der Ätherextrakt getrocknet und zur Trockne eingeengt. Man erhielt 1-Amidino-3-(2.6-dichlor-phenyl)-harnstoff.

Das Hydrochlorid wurde dadurch hergestellt, daß man die freie Base in Methanol löste und methanolische Salzsäurelösung zu dieser Lösung gab. Dann wurde eingeengt, Äther zugegeben und das ausgefällte 1 -Amidino-3-(2,6-dichlor-phenyl)-harnstoffhydrochlorid abfiltriert; F= 178- 179°C.

Beispiel 2

19 g l-(2-Chlor-6-fluor-phenyl)-biguanid wurden zu 200 ml 10%iger Salzsäure gegeben. Die Mischung wurde 3 Stunden unter Rückfluß erhitzt, die Reaktionsmischung dann heiß filtriert und gekühlt. Nach dem Abfiltrieren des ausgefallenen l-Amidino-3-(2-chlor-6-fluor-phenyl)-harnstoff-hydrochlorids wurde dieses aus Isopropanol/Wasserumkristallisieri; F= 184- 185°C.

Die freie Base erhält man, wenn man das Salz in 200 ml Wasser löst und bis zur alkalischen Reaktion mit 10%iger Natriumhydroxidlösung versetzt. Dann wird mit Chloroform extrahiert, der Extrakt getrocknet und zur Trockne eingeengt, worauf man den 1-Amidino-3-(2-chlor-6-fluor-phenyl)-harnstoff erhält.

Claims (1)

Patentansprüche:

1. l-Amidino-3-phenyl-harnstoffe der allgemeinen Formel

NH- C — NH- C — NH,

Il Il

° ^NH