DE2260189A1

DE2260189A1 - Injizierbare aminosaeurepraeparate

Info

Publication number: DE2260189A1
Application number: DE2260189A
Authority: DE
Inventors: Hossein Ghadimi
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1971-12-09
Filing date: 1972-12-08
Publication date: 1973-06-20
Also published as: FR2162655A1; CA989308A; FR2162655B1; GB1399888A; DE2260189C2; US3832465A; JPS4862917A

Description

betreffend
In.jizierbare Aminosäurepräparate

Die Erfindung betrifft neue und wertvolle pharmazeutische Zubereitungen und besonders pharmazeutische Zubereitungen, die Aminosäuren enthalten und intravenös verabreicht werden können, um den anabolen Bedarf des Körpers an Aminosäuren zu decken.

Die intravenöse Verabreichung von Nährstoffen hat eine lange Geschichte. Die erste erfolgreiche Injektion von Glucose wurde im Jahre 1896 durchgeführt und seitdem ist die parenteralθ Verabreichung von Glucose zu einem Houtineverfahren geworden,-das bei vielen Indikationen angewandt wird. Ähnlich werden jetzt Elektrolyten, Mineralstoffe und Vitamine routinemäßig intravenös verabreicht. Es ist kaum möglich, eine Station irgendeines Krankenhauses zu betreten ohne zu sehen, daß Glucose oder Elektrolyten intravenös an ein© Anzahl von Patisnten verabreicht werden.

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Im Gegensatz dazu ist die intravenöse Verabreichung von Proteinen oder Aminosäuren noch bestensfalls eine Seltenheit, trotz der Tatsache, daß die erste Aminosäure vor über 150 Jahren entdeckt wurde. Obwohl der menschliche Proteinbedarf seit mehr als einem Jahrhundert untersucht wird und. Proteinhydrolysate, die zur intravenösen Verabreichung geeignet sind, seit mehr als 30 Jahren zur Verfugung stehen, blieb die tatsächliche Anwendbarkeit derartiger Lösungen außerordentlich begrenzt.

Es gibt eine Anzahl von Gründen, warum die durch Verabreichung von Glucose, Vitaminen und Elektrolyten erzielten Fortschritte auf dem Gebiet der intravenösen Proteinzufuhr nicht erreicht werden konnten. Glucose ist eine einzelne Substanz mit einer verhältnismäßig einfachen metabolischen Funktion. Der Bedarf an Glucose kann leicht duroh Berechnungen und einfache Untersuchungen von Urin und Blut überwacht werden. Protein besteht andererseits aus einer Serie einzelner Aminosäuren, die verschiedenen metabolischen Zwecken dienen und untereinander auf komplizierte Weise in V/ochs el wirkung 3tehen. Die quantitative Bestimmung von Aminosäuren/^Körperflüssigkeiten wird erst in jüngster Zeit angewandt und ist noch nicht einfach anwendbar. Außerdem erfordert die Interpretation derartiger Bestimmungen die Kenntnisse eines Fachmanns. Bei Zuständen äußerst starken Proteinmangels (dire protein starvation) - wie bei Kwashiorkor 4cönnendie freien Aminosäuren des Blutes, wenn sie nach den besten quantitativen Verfahren bestimmt werden, individuell innerhalb normaler

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Grenzen/und zeigen so kein Anzeichen von Froteinniangel.

Die Aminosäurelösungen für intravenöse Nahrungaverabreichung (künstliche Ernährung), die zur Zeit verfügbar sind, beruhen auf der Analogie mit dem oralen Bedarf unter experimentellen Bedingungen. Sie sind Hydrolysate natürlich vorkommender Proteins und enthalten Verunreinigungen, von denen die meisten unerwünscht sind und einige gefährlich für das Wohlbefinden dos Patienten. Die beiden acn häufigsten verwendeten Produkte sind Fibrinhydroly-

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sate und Gaseinh.ydrolysate« Kürzlich wurden zwei Aminosäuregemische für die versuchsweise Anwendung bei Menschen eingeführt, von denen das eine dem Aminosäuregehalt (amino aoid pattern) von Fibrin entspricht und das andere entsprechend der Amino säur ezusainmensetzungdes Proteins des Eies zubereitet ist_o

Diese Produkte entsprechen jedoch in keiner Weise den enormen Möglichkeiten, die durch die technischen, chirurgischen und medizinischen !Fortschritte in der Praxis und Wissenschaft der parenteralen Ernährung, wie dem Pionierwerkjron Dudrick eröffnet worden sind. Dudrick und seine Mitarbeiter führten hyperosmolare Lösungen direkt in die zentralen Yen®n ein und zeigten, daß eine vollständige parenterale Ernährung möglich war» Neben Proteinhydrolysat enthielten die von Dudrick verwendeten Lösungen 10 bis 25$ Glucose_s Elektrolyten, Vitamine und andere Nährstoffe.

Alle zur Zeit verfügbaren Aminosäurelösungen besitzen ernste Kachteile. Sie sind Notbehelfe (products of expediency), die in Analogie zu der oralen Ernährung hergestellt worden sind. Sie berücksichtigen die entscheidende Tatsache nicht, daß bei der intravenösen Ernährung die Leber umgangen wird und daß folglich bei Patienten, die intravenös Nährstoffe erhalten, die wirksamen Überwachungs- und Schutzfunktionen der Leber fehlen.

Dieser Punkt muß etwas näher erläutert werden. Nährstoffe, d'ie von "den Gedärmen absorbiert werden, werden durch die Pfortadern direkt in die Leber gefühlt Die Leber wirkt dabei als ijberwachungsorgan des Körpers mit einer großen metallischen Kraftreserve. Sie. stellt daher ein wirksames Kontrollorgan dar, um verhältnismäßig konstante Aminosäurekonzentrationen für den posthepatischen Kreislauf zur Verfügung zu steilem Die verschiedenen Körpergewebe sind im normalen Leben dem von dor Leber gelieferten Amino säure. Λ ausgesetzt. Bei der intravenösen Ernährung ist die Eintrittsteile der Nährstoffe einschließlich

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der Aminosäuren jedoch häufig die große Hohlvene (vena cava) oder _{ ein Katheter in das rechte Atrium. Die an diesem Verteilungspunkt, .nämlich dem Herzen, in den Blutstrom gelangenden Aminosäuren kommen ohne Unterscheidung an alle Stellen des Körpers. Ein Teil von ihnen und nur ein Teil von ihnen erreicht die Leber bei jedem Zyklus des Blutkreislaufs. Wenn die Injektion der Aminosäuren auf einmal erfolgen würde, würde die Klärung und Gleichgewicht seinst ellung voraussichtlich innerhalb von ungefähr ^:/2 Stunde erreicht sein. Der Infusionsstrom ist jedoch kontinuierlich und erstreckt aich über 24 Stunden oder sogar Tage, Wochen oder

entsiienenae '

manchmal Monate. Das/gestörte Verteilungsmuster bleibt solange erhalten, wie die Infusion der Aminosäuren stattfindet. Wahrscheinlich wird diese Situation durch einen analogen Farbstofftest näher erläutert. Bromsulfalein (BSP) ist ein Farbstoff, der von den Leberzellen sehr wirksam aufgenommen wird. Wenn es in die Pfortadern einer gesunden Person in üblichen Dosen injiziert wird, kann es in den periphären Adern nicht mehr nachgewiesen werden. Da die Pfortader, jedoch für Injektionen nicht leioht zugänglioh ist, wird der Farbstoff für einen Leberfunktionatest in eine periphäre Ader injiziert. Bei gesunden Personen erfordert die vollständige Clearance des Farbstoffs aus dem Leberkreislauf mehr als 40 min. So muß, da die Leber nahezu jeden Aminosäureanteil, der bei der Verdauung und Absorption natürlich vorkommender Proteine entsteht, verarbeitet, der Bedarf aller anderen Gewebe an Aminosäuren sowie die Rolle der Leber im Aminosäuremetabolismu3 berücksichtigt werden, wenn die Leber umgangen wird. Das war bei den bisher verfügbaren Aminosäurepräparaten zur intravenösen Ernährung nicht der Fall.

Zweitens werden die zur Zeit zur Verfügung stehenden Amino-

säuregemisahe analog mit Glucose zubereitet und angewandt. Während eine m'ißige Hyperglykfimie nicht zu weiteren Komplikationen außer Glycosuria führt, können ständig erhöhte AminoSäuregehalte im Blut zu einem geistigen Zurückbleiben führen. Diese

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potentielle Gefahr sollte berücksichtigt werden, wenn eine derartige Behandlung im frühen Lebensalter und über längere Zeiträume hinweg durchgeführt wird. Me in dem Artikel "Diagnosis of Inborn Errors of Metabolism" veröffentlicht in Amer.J.Dis.Child., Bd. 114, S. 433 (1967), in "Aminoacidopathies and Mental Retardation" Howard University (Seminar), und in "The Genetic Metabolic and Developmental Aspects of Mental Retardation" .(im Druck) gezeigt wird, führen über 5O?6 angeborener Fehler im Aminosäuremetabolismus zu einem geistigen Zurückbleiben. Bei nahezu allen Aminosäureanomalien (Ajnino-azidopathieti) ist ein hoher Aminosäurespiegel im Blut eine ständig biochemische Anomalie. Eine frühzeitige Korrektur dieser Anomalie bei der Phenylketonurie führt zur Vermeidung des geistigen Zurückbleibens. Eine Beurteilung des Zurückbleibens im frühen Lebensalter ist nahezu unmöglich und Langzeitbeobachtungen von Patienten, die im frühen Kindesalter künstlich ernährt worden sind, stehen noch nicht zur Verfügung. Die Erfahrungen deuten jedoch darauf hin, daß eine deutliche Zunahme des Aminosäurespiegeis im Blut über die üblichen normalen Grenzen bei der parenteralen Ernährung" auftritt, wenn Proteinhydrolysate in üblichen Dosen angewandt werden. Die Zunahmen sind nicht von der gleichen Größe wie diejenige, die mit Phenylalanin bei Phenylketonuria beobachtet wird. Andererseits ist es noch nicht genau bekannt, welcher Gehalt an freien Aminosäuren im Blut als toxisch angesehen werden muß. Die Schwere des Problems wird deutlich, wenn man bedenkt, daß "toxische Wirkung" eine Langzeitwirkung auf das wachsende Gehirn und damit eine subnormale Hirnfunktion oder sogar ein schweres geistiges Zurückbleiben verursaoht, die therapeutisch nicht mehr geändert werden können zu dem Zeitpunkt, zu dem die Langzeitwirkung mit Hilfe üblicher Verfahren erkannt werden kann.

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Ein anderer sohwerer Nachteil der zur Zeit verfügbaren Aminoaäurepräparate rührt von der Tatsache her, daß aie nioht den biochemisch bestimmten Nähratoffkriterien entsprechen, sondern daß aie Abbau-bzw. Spaltprodukte bestimmter willkürlich gewählter früherer Modelle (z.B. Eiprotein) aind.

Im Handel erhältliche Aminoaäurelösungen besitzen häufig einen zusätzlichen Nachteil, nämlich eine quantitative Ungenauigkeit. Die Analyse derartiger Lösungen mit Hilfe quantitativer Verfahren zeigt in einigen Fällen eine über 1OOi$ige Abweichung in Beziehung auf den angegebenen Gehalt an bestimmten Aininaoäuren.

Mögliohe sohwere Gefahren liegen in der Ammoniakverunreinigung der handelsüblichen Aminosäurepräparatβ und besonders in Fibrin- und Caseinhydrolysaten. Eine derartige Ammoniakverunreinigung führt zu Hyperammonumie, einem pathologisch hohen Gehalt von Ammoniak im Blut von Patienten, die künstlich ernährt werden, verbunden mit einer anomalen Leberfunktion und einer Neigung von Neugeborenen zur Entwicklung einer lebenabedrohenden Aoidosis.

Der von S.E. Silvia und P.V. Paragaa ("J.Lab.Clin.Med." Bd. 78 (1971), Nr. 6, S. 918-930) geprägte Ausdruck lebensgefährliches . Hyperalimentations Syndrom bezieht sich wahrscheinlich auf die schädliche Wirkung eines hohen Ammoniakgehaltes in Aminosäurelöaungen.

Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung, neue und wertvolle Aminosäurepräparate zur intravenösen Ernährung durch Injektion direkt in die großen Gefäße oder in die periphären Adern zu entwickeln, die die Nachteile der bisher bekannten und angewandten Aminosäurepräparate nicht besitzt. Die erfindungsgemäßen Präparate aollenbesonders geeignet/zur längeren Verabreiohung an Neugeborene, Frühgeborene und kleine Kinder und 80 zusammengesetzt, daß sie dem großen anabolischen Bedarf der Neugeborenen entsprechen und noch den enzymatiachen Unzuläng-

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lichkeiten entsprechen, die für diese spezielle Altersgruppe typisch sind. Die erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate sind besonders geeignet für ©ine längere intravenöse Ernährung, wobei . sie dem Bedarf von Kindern und Erwachsenen entsprechen. Sie können auch über kurze Zeit für intravenöse Ernährung verabreicht werden, tun essentielle Aminosäuren in mäßigen Mengen zuzuführen, die dem Bedarf des Körpers entsprechen und den katabolisehen Weg durch die Leber überflüssig machen»

Im Prinzip beruhen die erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate auf der Tatsache, daß intravenös-verabreichte Lösungen an der Leber vorbeigehen. Folglich vermeiden derartige Lösungen im Gegensatz zu oral aufgenommenem Protein den katabolischen Haupt-

fpathway!

weg/aurch dieses Organ. Daher sind die erfindungsgemäßen Aminosäurederivate so zusammengesetzt, daß ihre Verabreichung zu keiner Änderung des Verteilungsmusters der .'freien Aminosäuren im periphären Blut führt· Außerdem berücksichtigen die erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate im Gegensatz zu den bekannten Produkten den großen Unterschied in den Erfordernissen Neugeborener gegenüber älteren Patienten«

Obwohl der Körper Aminosäurepräparate vertragen kann, die

nicht die idealen Anteile an Aminosäuren enthalten, ist es keine

(pathways) Frage, daß die anabolischen Leitungen darunter leiden und auf lange Dauer die Ergebnisse der Verabreichung derartiger Präparate bei weitem nicht erwünscht sind.

Da Überernährung (Hyperalimentation) im allgemeinen als lebenserhaltende Maßnahme über eine verhältnismäßig lange Zeit angewandt wird, wird es deutlich, daß nichts außer idealen Lösungen für dieses Verfahren geeignet ist. Als Zeichen der Angemessenlieit von Aminosäurepräparaten zeigt die Analyse der Blut amino säuren leicht das Ergebnis der Störung,, die im Körper > durch Lösungen verursacht wird, die nicht dem Bedarf des Körpersentsprechen.

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So beruht die Zusammensetzung des AminoSäurepräparates für Neugeborene, Frühgeborene und kleine Kinder, das im folgenden als Präparat GF-1 bezeichnet wird, auf den folgenden Feststellungen:

Die intravenöse Verabreichung von Methionin (einer essentiellen Aminosäure) selbst in Kengen, die wesentlich unterhalb des "minimalen oralen Bedarfs" liegen, führt zu Methioninspiegeln im Blut, die das Normale um so viel wie das Zehnfache übersteigen. Gleichzeitig fand sich kein Cystein im Blut. Die Erklärung dieser Feststellungen liegt in der Tatsache, daß kleine Kinder einen Mangel an dem Enzym Cystathionase besitzen und daher nioht imstande sind, Methionin in Cystein umzuwandeln. So wird für Neugeborene Cystein zu einer essentiellen Aminosäure. Daher stellt das Aminosäurepräparat für Neugeborene, Frühgeborene und kleine Kinder verhältnismäßig kleine Mengen Methionin zur Verfügung (10 mg/kg Körpergewicht, verglichen mit 65 mg/kg Körpergewicht, die den minimalen Bedarf darstellen). Diese Menge ist erlaubt, um die Reifung (Bildung) des Enzyms auszulösen. Der Ausgleich des Bedarfs an schwefelhaltigen Aminosäuren wird in Form von Cystein erreicht.

Im Gegensatz zu Methionin wurde beobachtet, daß die Infusion verzweigtkettiger Atninsäuren (Leucin, Isoleuoin, Valin) in wesentlich höheren Mengen alo den minimalen oder sogar "sicheren" Erfordernissen(das Doppelte des Minimums) nicht zu unangemessen; erhöhten Aminosäuregehalten im Plasma führte. So wurde deutlich, daß der metabolische Hauptweg von Leucin, Isoleucin und Valin außerhalb der Leber liegt. Da diese drei Substanzen direkt oder indirekt die Haupt reakt ionsteilne lime r bei der Froteinaynthese sind, wurde die Proteinernährung wesentlich vereinfacht durch Verwendung dieser Substanzen als Hauptquellen für Aminosäuren in solchen Aminosäurepräparaten.

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Daß der Körper verzweigtkettige Aminosäuren sehr gut verwerten kann, ist ebenso bedeutsam für die Herstellung des Aminosäurepräparats, das für eine kurzzeitige intravenöse Amino säur e ernährung geeignet ist und das im folgenden als G-F-3 bezeichnet wird.

Da die Hauptmenge der stickstoffhaltigen Substanzen in dem Präparat durch die drei verzweigten Aminosäuren Leucin, Isoleucin ¹ und Valin geliefert wird, liegt die Osmolarität unterhalb von 500 Milliosmol pro Liter und das Präparat kann sicher über periphäre Adern verabreicht werden. Die erfolgreiche Verabreichung wesentlicher Konzentrationen an Aminosäuren mit Hilfe üblicher intravenöser Verfahren anstelle der tiefen ^Jenerikatheterisierung stellt einen großen Durchbruch dar* v/enn in den einen Arm Glucose und in den anderen Arm Aminosäuren injiziert werden, kann eine nahözu vollständige Ernährung durch ein verhältnismäßig einfaches Verfahren erreicht werden»

Vorzugsweise machen die verzweigten Aminosäuren Leucin, Isoleucin und Valin ungefähr 42 bis ungefähr 68/i der ges'amten Aminosäuren in den erfindungsgemäßen Präparaten aus* Die besten Ergebnisse werden erzielt» wenn das Verhältnis von Leucin zu Isoleucin zu Valin ungefähr 1:1:1 und ungefähr 2:1:1 beträgt.

Bezüglich Histidin und Lysin stimmen die erfindungsgeniäßen Präparate mit der fortschrittlichsten Erkenntnis bezüglich des Haushalts(economy) 4ieser Substanzen überein.

Vorzugsweise beträgt die Menge an Lysin in den Präparaten un&efyhr 2,8 bis ungefähr 10,6$ und die Menge an Histidin O bis ungefähr 5/S, bezogen auf den Gesawtaminosäuregehalt in den erfindungsgemäßen Mitteln. Dabei sind die höheren .Mengen an Lysin in Präparaten von der Art GJ?-3 vorhanden, während kein Histidin in solchen Prttyaraten erforderlich ist.

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Ähnliche Erfahrungen mit dem Glutaminmetabolismus führten zu der drastisoh verminderten Verwendung von Glutaminsäure und Asparginsäure in den erfindungsgemäßen Präparaten.

Vorzugsweise beträgt die Menge an Glutaminsäure sowie Asparginsäure in den Präparaten 0 bis ungefähr 1,5$, bezogen auf den Gesamtgehalt an Aminosäuren in den erfindungagemäßen Kitteln.

Bas Aminosäurepräparat, das dazu bestimmt ist, den Bedarf von Kindern und Erwachsenen zu deoken und das im folgenden als Präparat GF-2 bezeichnet wird, basiert auch auf . Überlegungen und Näherungen,wief oben für die Aminosäurepräparat© GF-1 und GF-3 angegeben sind sowie auf Informationen, die durch jahrelange Verabreichung belastender Dosen Aminosäuren und Messung der Plasmarealction naoh der Verabreichung dieser Dosen gewonnen worden sind.

Um die Kenntnisse, die auf Erfahrungen und anderen Faktoren beruhen, zusammenzufassen, ergeben die folgenden Vereinfachungen eine Leitlinie für die Zubereitung der erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate. Danaoh können Aminosäuren in drei Gruppen eingeteilt werden, was die Aufnahme und die Holle der Leber betrifft.

Gruppe 1: Glutamin, Glutaminsäure und Asparaginsäure, die auf einem Minimum gehalten werden, wenn die Präparate intravenös verabreicht werden.

Gruppe 2: Verzweigtkettige Aminosäuren (Leuoin, Isoleuoin, Valin). Die Leber soheint im Haushalt dieser drei Substanzen eine geringerere Holle zu spielen. Der metabolisohe Hauptweg für diese drei Aminosäuren liegt daher hinter der Leber. Daher können sie intravenös reichlich verabreicht werden.

Gruppe 3: Die restlichen AminoaHuren, nMmlich Methionin,. Cystein, Lysin, Threonin, Glycin, Serin, Histidin, Phenylalanin, Tyrosin, Arginin, Alanin, Prolin und Tryptophan, besitzen ihren

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metabolisehen Hauptweg in der Leber«

Allgemein stellen die folgenden klinischen Erfahrungen nicht nur eine Leitlinie zur Zubereitung und Bestimmung der Mengen der Aminosäuren in den drei wichtigsten Aminosäurepräparaten der vorliegenden Erfindung dar, sondern stellen auch die Sicherheit der Verabreichung sowie die günstigen klinischen Wirkungen sicher.

A. Die Infusion mit einer konstanten Geschwindigkeit wird durch die Anwendung der Holder-Pumpe erreicht.

B. Nach einer Stabilisierungszeit von mindestens 24 Stunden wird die Infusionsgeschwindigkeit erhöht. Eine stufenweise Erhöhung der Geschwindigkeit wird bei einigen Patienten bis zu einem Äquivalent von 6 g Protein innerhalb von 24 Stunden erreicht.

G. , Blutproben werden entnommen vor der intravenösen Ernährung_f nach der Stabilisierung mit bekannten Mengen an Aminosäuren und nach Beendigung der intravenösen Ernährung. Alle Proben werden in einer Versuchsreihe analysiert, umfassend die Bestimmung von Elektrolyten, Blutharnstoff - Stickstoff, Osmolarität, Ammoniak und freien Aminosäuren im Plasma sowie einen Leberfunktionstest. Es werden auch Urinproben gesammelt für die meisten Zeiten und Proben untersucht auf Kreatinin, Harnstoffstickstoff, Elektrolyten, Osmolarität, freie Aminosäuren usw. Die gesammelten Daten sowie ihre Beziehung zu dem klinischen Zustand des Patienten werden wiederholt und intensiv studiert. Der Gehalt des Blutes an jeder Aminosäure in Beziehung auf die intravenöse Zufuhr wird verglichen mit den für die orale Aufnahme verfügbaren Daten sowie der Holle der Leber im Metabolismus dieser speziellen Amino säure.

Die erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate stellen die genaue Menge an einzelnen Aminosäuren zur Verfugung und sind genau an den Bedarf des Körpers in verschiedenen Lebensabschnitt en angepaßt. Sie verwenden die aussagekräftige "Angabe

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mg Aminosäure oder ml Lösung pro kg Körpergewicht im Gegensatz ?,u der Nomenklatur Protein pro kg Körpergewicht pro Tag, wie sie in der Literatur verwendet wird.

Kurz gesagt, unterscheiden sich die Aminosöurepräparate der vorliegenden Erfindung von den üblicherweise verwendeten Lösungen nicht nur aus theoretischen Gründen, sondern auch in praktischen Gesichtspunkten.

Allgemein sind die Aminosäurezubereitungen für Neugeborene, Frühgeborene und kleine Kinder, d.h. die Präparate vom GP-1-iyp, so zusammengesetzt und werden 80 verabreicht, wie aua Tabelle hervorgeht.

Die Aminosäurepräparate für Kinder und Erwachsene, d.h. die Präparate vom GF-2-Typ, sind so:zusammengesetzt und werden 30 verabreicht, wie aus Tabelle 2 hervorgeht .JD ie Aminosäurepräparate, die für kurzzeitige intravenöse Aminosäurezufuhr bestimmt sind, d.h. die Präparate vom GF-3-Typ, sind zusammengesetzt wie aus Tabelle 3 hervorgeht.

Für eine langzeitige vollständige parenterale Ernährung werden Aminosaurepräparate mit einer höheren Konzentration an Tyrosin verwendet. Geeignete Beispiele für derartige Präparate mit zusätzlichem Tyrosin sind in Tabelle 7 angegeben. 3ei diesen Zubereitungen wird Tyrosin als freie Base verwendet, zusammen mit einer Tyrosinverbindung, wie Tyrosinaraid oder einem Dipeptid, wie Glycyltyrosin, Tyrosylglycin, Tyrosylisoleucin, Alanyltyrosin, Leucyltyrosin und ähnlichem. Diese Tyrosinverbindungen liefern dem Körper einen Vorrat an Tyrosinverbindung, die al3 freies Tyrosin nach der Spaltung der Verbindungen verfügbar ist. Diese Ausführungsform der vorliegenden Erfindung verringert die Möglichkeit einer vorübergehenden Tyrosinäraie aufgrund der Verzögerung bei der katabolineben Leitung des Tyrosine.

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Um den Grand für die Zurverfügungstellung einer Tyrosinverbindung in den erfindungsgemäßen Aminosäurepräparaten zu zeigen, ist die bekannte metabolische Leitung von Phenylalanin/ Tyrosin in Tabelle 9 angegeben. Der anabolische Weg der Hydroxylierung von Tyrosin zu Dopa und die weitere Umwandlung zu Adrenalin, Noradrenalin, Polymerisation von Dopa zu Melanin und Kombination von Tyrosin mit Jod zur Bildung von Mono- und Dijodtyrosin erfordert sehr geringe Mengen Tyrosin. Vom Standpunkt des Tyrosinhaushalts im Körper geht der metabolische Hauptweg der Substanz über eine weitere. Oxydation der Kette zu . Dihydroxyphenylbrenztraubensäure. Diese Substanz geht über zahlreiche Reaktionen schließlich in Kohlendioxid und Wasser über. Das in der ersten und zweiten Stufe dieses katabolischen Wegs wirksame Enzym ist sehr "launisch". Oft ist bei einer leichten parenchymatösen Lebererkrankung der erste anomale Befund ein erhöhter Tyrosingehalt im Blut. Ähnlich wurde bei Neugeborenen, besonders bei Frühgeborenen, der Mangel (Unreife) an diesem Enzym sichergestellt. Daher tritt bei einer stark proteinhaltigen Ernährung im frühen Neugeborenenalter eine vorübergehende Tyrosinäaiie auf. Da der katabolische Hauptweg von Tyrosin in der Leber liegt, sollte.Tyrosin in reiner Form in kleinen Mengen verabreicht werden, so daß eine vorübergehende TyrosinÖmie vermieden werden kann. Andererseits ist bei einer lang andauernden parenteralen Ernährung die Zurverfügungstellung einer Quelle für extra Tyrosin günstig, so daß der anabolisohe Weg von Dopa usw. nicht unterbrochen (compromised) wird.

Die in den Präparaten verwendeten Aminosäuren besitzen die natürliche L-Konfiguration und sind vorzugsweise handelsübliche, im wesentlichen reine kristalline Aminosäuren. Proteinhydrolysate die eine Aminosäurezusammönsetzung ergeben, die so modifiziert werden kann, daß sie den oben gemachten Angaben für die erfindungsgemäßen Präparate entspricht, können auch verwendet werden, vorausgesetzt, daß sie frei sind von Ammoniak, bisher

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nicht identifizierten Peptiden und anderen unerwünaohten Verunreinigungen.

Die Aminosäuren werden in sterilem destillierten Wasser gelöst. Um Cyateinhydrochlorid in Lösung zu konservieren, ist es günatig, eine angemeasene Menge Ratriumbiaulfit oder irgendein verträgliches Konservierungsmittel zuzusetzen.

Die Lösung ist vorzugsweise leicht alkalisch. Wenn gewünscht, kann eie leicht duroh Zugabe einer nicht toxischen organischen Verbindung, wie Essigsäure oder Zitronensäure, auf den pH-Wert des Blutes (7,39) eingestellt werden. Ein© derartige Einstellung iat im allgemeinen jedoch nicht erforderlich, da die Löaungen üblicherweise mit Glucoselösungen vermiaoht werden und daa entstehende Gemisch auf der sauren Seite liegt. (Gluooselöaungen besitzen einen pH-Wert von 4 bia 5, der pH-Wert von 10biger Glucose iat 4,89)· Handelsübliche Aminosäuregemisohe sind sauer. Die Verwendung dieser handelsüblichen Präparate führt daher zu einem wesentlich höheren Gehalt an titrierbarer Säure als die erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen.

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert.

Beispiel 1

Aminosäurepräparat für das Neugeborenen- Und frühe Kindesalter.

Daa Präparat enthält die in Tabelle 4 angegebene Menge an reinen kristallinen Aminosäuren in der L-Konfiguration. Die dritte Spalte dieser Tabelle gibt die ungefähre Menge Aminosäure in mg/kg Körpergewicht an, wenn eine mittlere Dosis von 25 oni /kg Amino ο*; urelö3iing verabreicht wird. Je 100 cm dieses Aininosäurepriiparats, das als GJ.^|l-1 bezeichnet wlnd-v entoprechen ungefähr 7,6 g Protein und liefern ungefähr 30/Kalorien. 20 cm /kg bin 60 om /kg Körpergewicht täglich verabreicht entsprechen ungefähr 1,6 bis 4,0 g Protoin/kg Körpergewicht täglich. Die

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Verabreichung von 25 cnr/kg Körpergewicht liefert ausreichend Aminosäuren, um den anaboliachen Umsatz von Neugeborenen aufrecht zu erhalten. Für Frühgeborene mit weniger als 1000 g Geburtsgewicht beträgt die empfohlene Dosis 10 cm /kg Körpergewicht am ersten Tag. Diese Dosis kann auf. 28 oder 30 oar/kg Körpergewicht innerhalb einer Woche erhöht werden. Im allgemeinen kann die Dosis je nach dem Grad der Mangelernährung und dem klinischen Zustand des Patienten eingestellt werden. Wenn höhere Dosen angewandt werden, ist es günstig, die Aminosäuren im Plasma zu überwachen durch quantitative Bestimmung der freien Aminosäuren. Geeignete analytische Verfahren umfassen die Anwendung des Aminosäureanalysators entsprechend den Modifikationen von Piez et al in "Analyt. Biochenu" Bd. 1, S. 187 (1960) des Verfahrens, das ursprünglich beschrieben wurde, von Spackman et al in "Analyt. Chem." 3d. 30. S. 1190 (1958).

Die Aminosäuren werden in destilliertem V/asser gelöst, zu dem 60 mg/100 cm Kaliummet ab isul fit zugegeben werden können. Die Osmolarität der Lösung beträgt ungefähr 650 Killiosmol/l.

Beispiel 2

Aminosäurepräparat für Kinder und Erwachsene.·

Das Präparat enthält die in Tabelle ,5 angegebene Menge an reinen kristallinen Aminosäuren in L-Konfiguration. Die dritte Spalte dieser Tabelle gibt die ungefähre Menge Aminosäure in mg/Tag für Erwachsene mit 70 kg Körpergewicht an, wenn eine mittlere Dosis von 500 cm /Tag der Aminosäurelösung verabreicht wird. Je 1000 cm dieses Aminosäurepräparats, das als GF-2 bezeichnet wird, entsprechen ungefähr 69 Fp gg<?t ei η und ungefähr 10g Stickstoff und liefern ungefähr 275/Kalorien. Die Dosis für Erwachsene beträgt 500 bis 1000 cm.v^ag und ^für Kinder für je 4,54 kg Körpergewicht 200 cnr bis zu 40 kg Körpergewicht. Die Dosis kann natürlich je nach dem klinischen Zustand erhöht werden.

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Die Aminosäuren werden in destilliertem Wasser gelöst, dam

600 mg/1000 cm Katriumbisulfit zugegeben werden können. Die

(558) Osmol'arität der Lösung beträgt ungefähr 550 Milliosmol/1. 3eispiel 3

Aminosäurelösung für kurzzeitige intravenöse Ernährung.

Das Präparat enthält die in Tabelle 6 angegebenen Mengen an reinen kristallinen Aminosäuren in !-Konfiguration. Wie oben gesagt, ist die als Aminosäurepräparat GF-3 bezeichnete Lösung zur kurzzeitigen intravenösen Zufuhr von Aminosäuren geeignet, um essentielle Aminosäuren in mäßigen Mengen zu verabreichen, um den Bedarf des Körpers zu decken und den katabolischen Weg durch die Leber zu vermeiden. Die Osmolarität der Lösung beträgt 371 Millioemol/l. Die Lösung kann daher durch periphäre Adern verabreicht werden. Jeder Liter enthält das Äquivalent zu 51,5 g Protein, 7,2 g Stickstoff und liefert 206 Kalorien. Die Verabreichung von 2 1 Lösung liefert im wesentlichen den Körperbedarf eines Erwachsenen an Aminosäuren ohne zu einer Störung der Aminosäuren im Plasma zu führen.

Die Aminosäuren werden in destilliertem Wasser gelöst, zu dem 600 mg/1 OCO cm Katriumbisulfit zugegeben werden können.

Die GF-3-Lösung wird intravenös verabreicht, z.B. durch langsame intravenöse Injektion mit einer Geschwindigkeit von ungefähr 1 1 in ungefähr 24 h (für Erwachsene).

Beispiel 4

Modifiziertes AruinoSäurepräparat für daa Neugeborenen- und frühe Kindesalter.

Das Fräparat enthält die in Tabelle 7 angegebenen Mengen an reinen kristallinen Aminosäuren in L-Konfi^uration in der mit GF-Ia bezeichneten Spalte. Das Fräparat unterscheidet sieb von

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demjenigen des Beispiels 1 dadurch, daß es einen höheren Tyrosin gehalt in Form von Tyrosin und einem Tyrosindipeptid mit einer anderen Aminosäure, vorzugsweise mit Glycin, Isoleucin, Alanin oder Leucin, besitzt.-

Das Präparat GF-Ia wird nach dem Verfahren des Beispiels 1 hergestellt.

Beispiel 5

Modifiziertes Aminosäurepräparat für Kinder und Brwachsene.

Das Präparat enthält die in Tabelle 7 in der mit GF-2a bezeichneten Spalte angegebenen Mengen an reinen kristallinen Aminosäuren in L-Konfiguration. Das Präparat unterscheidet sich von demjenigen des Beispiels 2 dadurch, daß es einen höheren Gehalt an Tyrosin in Form von Tyrosin und einem Tyrosindipeptid mit einer anderen Aminosäure, vorzugsweise mit Glycin, Isoleucin, Alanin oder Leucin, enthält.

Das Präparat GF-2a wird entsprechend dem Beispiel 2 hergestellt, .

Beispiel 6

Modifizierte Aminosäurelösung für die kurzzeitige intravenöse Ernährung.

Das Präparat enthält die in Tabelle 7 in der mit GF-3a bezeichneten Spalte angegebenen Mengen an reinen kristallinen Aminosäuren in der L-Konfiguration. Das Präparat unterscheidet sich von demjenigen des Beispiels 3 dadurch, daß es einen höheren Tyrosingehalt in Form von Tyrosin und einem Tyrosindipeptid mit einer anderen Aminosäure, vorzugsweise mit Glycin, Isoleucin, Alanin oder Leucin, enthält.

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Das Präparat GF-3a wird entsprechend dem in Beispiel 3 "beschriebenen Verfahren hergestellt.

Die Tabelle 8 zeigt den Unterschied der erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate und einiger der bekannten und verwendeten Aminosäurepräparate. Diese Tabelle zeigt deutlioh a) den verringerten M3thioningehalt, b) das Vorhandensein von Cystein, ο) den erhöhten Gehalt der verzweigtkettigen Aminosäuren Leucin, Isoleucin und Valin und in Kombination damit d) daa Vorhandensein von Tyrosin, um nur die deutlichsten Unterschied© zu erwähnen.

•χ

Die Aminosäuren sind in mg/100 cm angegeben.

Präparat a der Tabelle 8 ist ein Fibrinhydrolysat, Präparat b ist ein enzymatisches Caseinhydrolysat, das Polypeptide enthält,

Präparat c ist ein Gemisch von Aminosäuren entsprechendden Aminosäuren des Proteins vom Ei, und

Präparat d ist ein Caseinhydrolysat mit zusätzlichen Mengen an Methionin, Tryptophan und Phenylalanin.

Im Gegensatz zu allen oder den meisten der zur Zeit bekannten Gemisoheeinschließlich der in Tabelle 8 angegebenen sind die erfindungsgemäßen Präparate besonders durch die folgenden iäigenT-eohaften gekennzeichnet.

1. Sie sind frei von Ammoniak.

2. Ba besteht nioht die Möglichkeit, daß sie Verunreinigungen, wie bisher nicht identifizierte peptide, enthalten, die in bekannten Zubereitungen in einer Menge vorhanden sind, die bis zu 30;£ des Gesamtstickstoffs ausmacht.

3. Sie entsprechen den Erfordernissen verschiedener Körpergewebe.

4. Sie führen nicM zu einer unerwünschten Zunahme der Konzentration von Aminosäuren im Blut, d.h. zu li.yperaminoacidHmie.

5. Duroh ihre Verabreichung wird die Funktion dar Leber im Aminoaäuremetabolismus teilweise vorweggenommen. Zum Beispiel bildet

309826/1134

- 19 - 1A-42 334

die Leber Cystein aus Methionin. Keine der handelsüblichen Lösungen enthält Cystein. In den erfindungsgemäßen Präparaten werden wesentliche Mengen Cystein auf Kosten von Methionin zugeführt.

6. Die verzweigtkettigen Aminosäuren (Leucin, Isoleucin und Valin) sind Vorstufen für viele nicht essentielle Aminosäuren. Es zeigte sich, daß ihr metabolischer Weg hinter der Leber liegt. Daher werden sie in den erfindungsgemäßen Mitteln reichlich verabreicht, während ihre Konzentration in handelsüblichen Lösungen gering ist.

7. Die erfindungsgemäßen Präparate sind an den Bedarf des Körpers in verschiedenen Altersstufen angepaßt; so berücksichtigt das;. Präparat GF-1 für Neugeborene z.B. alle bekannten enzymatisehen Unzulänglichkeiten dieses Alters.

8. Das Präparat für eine kurzzeitige Ernährung GF-3 besitzt eine niedrige Osmolarität und erlaubt daher die Injektion in die periphären Adern für die Aminosäureverabreichung. Das erleichtert die intravenöse Aminosäuretherapie wesentlich.

9· Die erfindungsgemäßen Präparate werden hergestellt aus natürlich vorkommenden Aminosäuren der L-Konfiguration, während die auf dem Markt befindlichen Lösungen von Aminosäuren mit L-Konfiguration Proteinhydrolyseprodukte sind, mit Ausnahme von einer, die jedoch ebenfalls als eine Lösung bezeichnet wird, die "chemisch und pharmakologisch Proteinhydrolysaten verwandt ist"»

Obwohl die erfindungsgemäßen Präparate aus Aminosäuren der L-Konfiguration hergestellt werden, sind die D-Isomeren und DL-Formen nicht ausgeschlossen, vorausgesetzt, daß sie biologisch wertvoll sind. So umfaßt der Ausdruck ¹¹L-Amino säure:¹·, wie er in der Beschreibung und in den Beispielen gebraucht wird, gegebenenfalls auch D- und DL-Formen.

Die Aminosäuren können natürlich auch in den erfindungsgemäßen Präparaten in Form ihrer Säureadditionssalae in. äquimolaren Mengen

309826/11 3-4"

- 20 - 1A-42 334

vorliegen, z.B. als Tyrosinhydrochlorid. Ihre physiologisch, vorträglichen Metallsalze und "besonders ihre Alkaliealze können natürlich ebenfalls verwendet werden.

Die Aminosäurepräparate der vorliegenden Erfindung können in ihrem Aminosäuregehalt selbatverstandlieh sohwanken, vorausgesetzt, daß sie Cystein und mindestens 4O^ an den verzweigtkettigen Aminosäuren Leuoin, Isoleucin und Valin, bereohnet auf den Geeamtaminosäurgehalt des Präparats, enthalten, wobei diese verzweigtkettigen Aminosäuren vorzugsweise in einem Verhältnis von ungefähr 1:1:1 bis ungefähr 2:1:1 vorliegen..

Lysin sollte in einer Menge von ungefähr 2,5 bis ungefähr 11$, bezogen auf die Gesamtmenge der Aminosäuren in dem Präparat, vorhanden sein.

Histidin, Glutaminsäure und Asparginsäure können vollständig, entfallen und der Histidingehalt der Präparate sollte vorzugsweise nicht über 5/° und der Glutaminsäuregehalt vorzugsweise nicht über 1,57« und der Asparginsäuregehalt vorzugsweise nicht über 1,5$ hinausgehen.

Arginin ist in verhältnismäßig hohen Mengen erforderlich, vorzugsweise in Mengen von ungefähr 3,5 bis ungefähr 13,5;»·

Die Menge an Tyrosin sollte verhältnismäßig niedrig sein und vorzugsweise ungefähr 0,5 bis ungefähr 4,0/S betraten. Wie oben gesagt, kann Tyrosin ersetzt werden durch ein Dipeptid von Tyrosin mit einer anderen Aminosäure, vorzugsweise durch die Dipeptide.Glycyltyrosin, Tyrosylisoleucin, Alanyltyrosin oder Leucyltyrosin. Natürlich können andere Dipeptide ähnlicher Struktur ebenfalls verwendet werden, ijmlich kann Tyrosinaraid anstelle von Tyrosin verwendet werden.

- 21 - 1A-42 334

Wie oben gesagt, liegt der pH-Wert der .erfindungsgemäßen Präparate vorzugsweise auf der alkalischen Seite. Die nicht eingestellten pH-Werte der. Präparate der Beispiele 1 "bis 3, die in den Tabellen 4, 5 und 6 angegeben sind, betragen 8,0, 8,2 bzw. 7,5. Biese charakteristischen pH-Werte stehen ebenfalls im Gegensatz zu den sauren pH-Werten der handelsüblichen Aminosäurelösungen. Der pH-Wert der Gaseinhydrolysate beträgt 5,37 "and derjenige von Aminosäuregemischen entsprechend einem Protein beträgt 6,12. Der titrierbare Säuregehalt dieser beiden Lösungen ist 40,88 bzw.24^ 2 (J.CK. Chan et al., Journ.Ain.Med.Ass., 3d.220 (Mai 22, 1972), S. 1119). Der saure pH-Wert der Lösung stellt ein Problem dar, besonders wenn die Lösungen an Neugeborene verabreicht werden. Häufig tritt Acidosis auf. Acidosis wiederum verstärkt das Atemnotsyndrom, das die Hauptursache für den Tod von frühgeborenen Kindern ist. Der alkalische pH-Wert der erfindungsgemäßen Lösungen, der sich von seibat einstellt, ist ein Vorteil, der nicht unterschätzt werden sollte. Die Lösungen werden im allgemeinen vor der intravenösen Verabreichung mit 5 bis 25$ Gluooselösung vermischt. Dadurch ist der pH-Wert der entstehenden Lösung im allgemeinen sehr nahe bei dem pH-Wert des Blutes (7,39).

Selbstverständlich kann bei den erfindungsgemäßen Präparaten die eine oder andere nicht essentielle Aminosäure, mit Ausnahme von Cystein und Tyrosin, weggelassen werden. Ob eine und gegebenenfalls welche der nicht essentiellen Aminosäuren weggelassen wird, , kann leicht bestimmt werden durch Analyse dee Plasmas des periphären Blutes auf den Aminosäuregehalt. Ein Präparat, das den Gehalt an freien Aminosäuren in solchem Plasma nach intravenöser Verabreichung des Präparates nicht wesentlich ändert, kann für die intravenöse Ernährung verwendet werden.

* Respiratory distress syndrome

30 982Β/ΊΊ34

- 22 - 1A-42 334

Analytische Verfahren zur Bestimmung des Aminoaäuregehaltc in Blutproben sind beschrieben z.B. von W.J. Conway in "Microdiffusion Analysis and Volumetrio error" S* 121, Verlag Lookwood, London, 1947; von K.A. Piez und L.A. Morria (mit Hilfe eines automatischen Aminosüureanaliaators) in *Anal. Bioohem." Bd. 1, S. 187 (1966). Informationen über den Gehalt an freien Aminosäuren im Baama und die normale Verteilung; "bzw. den Gehalt an Aminosäuren sind in einer Anzahl von Handbüchern enthalten, z.B. in "The Metabolie Basis of Inherited Disease" (in einzelnen Kapiteln für jede Aminosäure), herausgegeben von J.B. Stanbury» J.B. ./yngaarden und D.S. Fredrickson, 3. Ausgabe, Verlag McGraw-Hill; in "Amino aoid Metabolism and Genetic Variation", herausgegeben von V/.I. Nyhan, Verlag KoGraw-Hill, S.384, sowie in Veröffentlichungen, z.B. von P.B. Hamilton (duroh Ionenaustauachchromatographie) in "Anal. Chem." Bd. 35, S. 2055 (1963); von J.C. Diokinson, H. Rosenblum und P.B. Hamilton in "Pediatrioe" Bd. 36, 3. 2 (1965); von B.3. Lindblad und A. Baldesten (mit einem automatischen Aminoeäureanalieator Bookman 120 B) "Aota Paediat. Soand." Bd. 50, S. 37 (1967) und Bd. 58, S. 252 (1969); und andere*

Wie oben gesagt, ist ein wesentliches Kennzeichen der erfindungsgemäßen Präparate, daß sie frei sind von Ammoniak und auch von Polypeptiden und anderen als tyrosinhaltigen Dipeptiden.

Der injizierbare wässrige Träger zur Herstellung der erfindungsgemäßen Aminosäurepräparate ist vorzugsweise ateriles Wasser. 5 bis 10;;> Dextroselösungen, wie sie zur intravenösen Ernährung verwendet werden, isotonioche Salzlösung und/oder eine wässrige Lösung, enthaltend Kalium, Magnesium und/oder Calcitunoalze und/oder erforderliohe Vitamine können ebenfalls mit verwendet werden.

3098 28/1134

- 23 Tabelle 1

- Aminosäure . Verabreichte Menge

(mg/kg) Körpergewicht

Methionin 10-40

Cystein 60-100

Lysin 75-200

Threonin 60-100

Glycin 80-150

Serin 80-150

Leucin 300-600

Isoleucin - 200-600

Valin 200-600

Histidin 50-200

Phenylalanin 50-150

Tyrosin 10-100

Glutaminsäure 0-60

Asparginsäure 0-60

Arginin 100-4-00

Alanin 100-300

Prolin 50-100

Tryptophan 10-40

Ornithin 0-100

Gesamt 1435-4050

- -24 -

3 (J 9 81 B /1 1 3 4

Aminosäure

- 24 Tabelle 2

Verabreichte Menge an Erwachsene mit einem Körpergewicht von 70 kg (/)

Methionin Cystein Lysin Threonin Glycin Serin Leucin Isoleucin Valin Histidin Phenylalanin Tyrosin Glutaminsäure Asparginsäure Arginin Alanin Prolin Tryptophan Ornithin 600-300- 700-500- 500-500-

4000-4000- 4000-600- 600-250-

0-

1000-500- 500· 200·

Ο

Ι

800

■1500

•1500

•2000

•10

■10

-10

■2500

■1000

-500

-2000

-3000

-800

-500

Gesamt 18750-53800

- 25 -

309Θ26/1134

Aminosäure

- 25 -

Tabelle 3

Menge in mg/1000 cm

Hethionin Cystein Lysin Threonin νLeucin Isoleucin Valin Phenylalanin Tyrosin Arginin Tryptophan 2000-4000 3OOO-5OOO 5000-10000 3OOO-5OOO

10000-25000 10000-25000 10000-25000 2000-3000 500-3000 2000-4000 200-800

Gesamt 47700 - 109800

- 26 -

309826/1144

	- 26 -	mg Ag Körpergev/icht
	Tabelle 4	bei Verabreichung von
Aminosäure	mg/100 cm⁵	&D cm /-KiJ
		15
		⁸5
Methionin	60	120
Cystein	340	60
lysin	480	100
Threonin	240	100
Glycin	400	400
Serin	400	200
Leucin	1600	200
Isoleucin	800	50
Valin	800	100
Histidin	200	12,5
Phenylalanin	400	12,5
Tyrosin	50	12,5
Glutaminsäure	50	250
Aeparginaäure	50	100
Arginin	1000	50
Alanin	400	30
Prolin	200	0
Tryptophan	120
Ornithin	0

Gesamt

7590

1897,5

- 27 -

3Ü982S/1134

22601.85.

Aminosäure

- 27 Tabelle mg/100 cm mg/Tag "bei Erwachsenen mit einem Körpergewicht von 70 kg

Methionin	1600
Cystein	800
Lysin	2400
Threonin	3000
Glycin	3000
Serin	3000
Leucin	12000
Isoleucin	10000
Valin	10000
Histidin	3000
Phenylalanin	5000
Tyrosin	500
Glutaminsäure	400
Asparginsäure	0
Arginin	8000
Alanin	3000
Prolin	2000
Tryptophan	1200
Ornithin	0

800 400 1200 1500 1500 1500 6000 5000 5000 1500

2500' 250 200 0

4000 1500 1.000 600

Gesamt

68900 34450

- 28 -

309826/1134

	- 28 -
	Tabelle 6
Aminosäure	mg/1000 cm⁵
Methionin	2000
Cystein	3000
Lysin	5000
Threonin	3000
Leucin	10000
Isoleucin	10000
Valin	10000
Phenylalanin	4500
Tyrosin	500
Arginin	3000
Tryptophan	500

Gesamt 51500

309825/1134

2280183

- 29 Tabelle 7 Aminosäure-Präparat nit zusätzlichen

-	Histidin	Tyrosin	GP-2a	00 cm Lösung
	Glycin		40	GF-3a
Aminosäure	Serin	Ungefähre Menge in mg/1	-
Glutaminsäure	Arginin	GlP-Ia	300	—
Aspar ginsäure	Prolin	50	1200	-
Alanin	Gesamt	50	1000	1000 .
Leucin	400	1000	1000
Isoleucin	1600	160	1000 '
Valin	800	80	¹ 200
Methionin	800	240	300
Cystein	60 -	300	500
Lysin	340	120	300
Threonin	480	500	50
Tryptophan	240		450 .
Phenylalanin	120	100-400
Tyrosin + Tyrosyl-	400	300	100-400
glycin /^A		300	—
100-400	300	—
200	800 ^X	—
400	200	300
400	6940-7240	-
1000		5200-5500
200
7640-7940

/ Anstelle von Tyrosyl-glycin, kann ein anderes niedermolekulares Dipeptid von Tyrosin wie Glycyl-tyrosin, Tyrosyl-isoleucin, Alanyltyrosin, Leucyl-tyrosin oder ein ähnliches verwendet werden

. - 30 -

30982S/1134

	Tabelle	GP-1	GF-2	8	a	Präparat	d
		60	160		100	b c	220
Aminosäure	340	30	GF-3	-	320 450	-
Methionin	480	240	200	400	_ _	350
Cystein	240	300	300	232	700 770	180
Lysin	400	300	500	208	380 340	-
Threonin	400	300	300	_	- 1790	—
Glycin	1600	1200	-	636	- 500	415
Serin	800	1000	-	218	820 770	240
leucin	800	1000	1000	163	500 590	300
Isoleucin	200	300	1000	116	600 560	120
Valin	400	500	1000	100	- 240	230
Histidin	50	50	-	110	400 480	-
Phenylalanin	50	40	450	-	- _.	—
Tyrosin	50	-	50	30	_ _
Glutaminsäure	1000	800	—	290	-	150
Asparginsäure	400	300	-	-	- 310	-
Arginin	200	200	300	—	- 600	—
Alanin	120	120	-	_	- 950	50
Prolin		—		80 130
Tryptophan	50

Die Mengen Aminosäuren der benannten Präparate entsprechen den vom Hersteller angegebenen Kengen. Außerdem enthalten alle benannten Präparate unmäßig große Mengen Ammoniak.

- 31 -

309826/1134

Tabelle

co er co co

Phenyllactat

Phenylalanin

Phenylpyruvat

GEWEBEPROTEIN 'NAHRUNGSPROTEIN

PHENYLKETONURIE

Hydroxyphenyl pyruvat

TYROSINOSIS 4

-ι-

Phenylacetat

Phenylacetylglutamin

Homogentisat

ALKAPTONURIE-

Malylaceto • acetat

Fumarylaceto acetat

Pumarat-Acetoacetat

3,4Dihydoxyphenylalanin' (DOPA)

ADRENALIN 'NORADRENALIN

^ .. «ALBINISMUS

MELANIN

3-Monoj'od-" 3,5-DiJOd- 3,3,3^f-Trityrosin tyrosin jodtilyronin

STRUMATÖSER 'KRETINISMUS

3,5,3',5'-

Tetrajod-

thyrpnin

(Thyroxin)

Claims

Patentansprüche

1. Injizierbare Aminosäure-Präparate, umfassend einen injizierbaren wässrigen Träger, in dem die Aminosäuren gelöst sind, dadurch ge kennzeichnet , daß sie mindestens 40%,bezogen auf den Gesamtaninosäuregehalt, verzweigt-kettige Aminosäuren Leucin, Isoleucin und Valin enthalten und frei sind von Ammoniak und keine anderen Polypeptide enthalten als Tyrosin-dipeptide.

2. Präparate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß das Verhältnis der verzweigt-kettigen Aminosäuren Leucin zu Isoleucin,zu Valin ungefähr 1:1:1 bis ungefähr 2:1:1 beträgt.

3· Präparate nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie Lysin in einer TTenge von ungefähr ?,5 bis ungefähr 11/5,bezogen auf die Gesamtmenge der Amino saurer? ,en thai ten.

4· Präparate nach Anspruch 1 bis 3» dadurch g e k e η η ζ ei c h η e t , daß sie Histidin in einer Menge O bis ungefähr 5?'>, bezogen auf die Gesamtmenge der Aminosäuren, enthalten.

5. Präjv-r^te nach Anspruch 1 bis 4, dadurch ;r e k e η η ζ ei c h not, daß sie Glutaminsäure und Aüpnr/rins^:i.ure jeweils in einer Menge von O bis ungefähr 1,5';«» bezogen aiu die ('r:3.-iut);ien.';e der Aminosäure!^ ontnnIten.

uiü8 ιb/113 4

2280188

-«sr-33

6. Präparate nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß sie Arginin in einer Menge von ungefähr 3,5 bis ungefähr 13,5 % bezogen auf die Gesamtmenge der .Aminosäuren enthalten.

7. Präparate nach Anspruch 1 bis 6, dadurch g e k e η η ~ zeichnet, daß sie Tyrosin in einer Menge von ungefähr 0,5 bis 4 % bezogen auf die Gesamtmenge der Aminosäuren enthalten.

8. Präparate naeh Anspruch 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß ein Teil der Tyrosins in Form einer Verbindung wie Tyrosinamid und/oder einem Dipeptid aus Tyrosin und einer anderen Aminosäure vorliegt,,

9· Präparate nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das Dipeptid aus Tyrosin und einer anderen Aminosäure Glycyltyrosin, Tyrosylisoleucin, Alanyltyrosin und/oder Leucyltyrosin ist.

10. Präparate nach Anspruch 1 bis 9, dadurch g e k e η η zeichne.t, daß die Aminosäuren L-Aminosäuren sind.

11. ' Präparate nach Anspruch 1 bis 10,- dadurch g e kennze ichnet , daß die Gesamtmenge der Aminosäuren in dem Präparat ungefähr 4 bis ungefähr 10 % beträgt, entsprechend ungefähr 4 bis ungefähr 10 g Protein pro 100 cm?

12. ,Präparate nach Anspruch 1 bis 11, dadurch gekennzeichnet, daß sie einen schwach alkalischen pH-Wert besitzen.

6295

3 U y 8 2 S / 1 1 3 4