DE2003019C

DE2003019C - L Leucyl L leucyl L valyl L phenylalaninol und dessen pharmako= logisch vertragliche Saureadditions= salze

Info

Publication number: DE2003019C
Application number: DE19702003019
Authority: DE
Inventors: Yuichi Toyonaka Kokubu Tatsuo Osaka Shigezane Keisuke Urawa shi Mizoguchi Tomishige Kita adachi gun Yamamura, (Japan)
Original assignee: Tanabe Seiyaku Co Ltd
Current assignee: Mitsubishi Tanabe Pharma Corp
Priority date: 1969-01-25
Filing date: 1970-01-23
Publication date: 1973-05-30

Description

IO Methyl-i.-leucyi-i.-leticyl-i.-valyli -phenylalanin (Hydrochloride

Alhyl-i.-leucyl-i .-leucyl-i.-valyli.-phenylalanin (Hydrochlorid)

Aihyl-i.-leucyl-i.-leucyl-i.-valyli.-t >rosin (Hydrochlorid)

Löslichkeit
in W a-.ser

ι ■ .,)
bei 25 C

ι -Leucyl-i -leucyl-i -valyi-i.-p'iienylalaninol (Hydrochlorid)

2.37
1.24
l.fö

7.42

Darüber hinaus sind die Phenylalaninolverbindungen stabiler und besitzen eine längere Wirkungsdauer im Vergleich zu den Tetrapeptidestern.

Die antihypertensive Wirkung der Phenylalaninolverbindungen der Erfindung wurde durch die Hemmaktivität auf Renin bestimmt. Die PhenyialaninolverbinJungen zeigten, wenn variierende Mengen hiervon in eine 0,5 ml aus einem gewöhnlichen Kaninchen hergestelltes Ren η-Substrat und 0.02 ml aus Kaninchenniere nach dei Methode von G ο 1 d b la t t und Haas hergestelltes Renin enthaltende Salzlösung (2,7 ml; pH - 5.0) 5 Minuten bei 37⁰C inkubiert wurden, gegenüber Renin die in Tabelle II aufgeführten Hemmwirkungen.

Tabelle U

Verbindung	Menge der inkubierten Verbindung (mg)	Hemm wirkung ("„)
i.-Leucyl-i.-leueyl-i.-valy;- i.-pehnylalaninol (Hydrochlorid)	0 0,25 0,5 1,0 2,0 5,0	0 33,8 37,9 51,5 67,6 90,5

45 B e i s ρ i e

(1) Zu einer Lösung von 2,3 g (60 mMol) Natriumborhydrid in 70 ml 50°/_oigem Äthanol wurde tropfenweise einer Lösunq von 3,34 g (6 mMol) Athyl-i -leucyli.-lcucyl-i.-valyl-i-phenylalaninathydrochlorid während 60 Minuten bei 8 bis 12°C tropfenweise zugegeben. Nach 3stündigem Rühren bei Zimmertemperatur wurde die Lösung mit 120 ml Äthanol vermocht und. weiterhin 4 Stunden gerührt. 10 ml Chlorwasser-

säure-Äthanollösung (4,9 mMol HCl/ml) wurden zu der Lösung gegeben. Die Lösung wurde unter verminet rtem Druck konzentriert. 100 ml Wasser wurden zu dem Rückstand gegeben. Die wäßrige Lösung wurde auf einen pH-Wert von 9 mittels Kaliumcarbonat gebracht und mit Chloroform extrahiert. Die Chloroformschicht wurde nit einer mit Natriumchlorid gesättigten wäßrigen Lösung gewaschen. Die Lösung w.:rde getrocknet und unter vermindertem Druck konzentriert.

Der so erhaltene Rückstand wurde mit Äther gewaschen, getrocknet und aus Äthanol umkristallisiert, wobei l,K3g i.-Leucyl-t.-leucyl-i.-valyl-i.-phenylalaninol erhalten wurden, l'p. 205 bis 206°C; färb-

lose Körnchen; Ausbeute 64,0°,₀: [\j?·⁵ -37,6 (C 1, Essigsäure).

(2)0,3 g(1,1 mMol) i.-Leucyl i.-leueyl-i -\alyl-i.-phenyialaninol wurden in 50 ml Äthanol aufgelöst. 0.5 ml Chlorwasserstoff-Äthanollösung (4,9 niMolHClml) wurden zu der Lösung _ö^gebcn. Nach dem StehenlasMLMi für 15 Minuten bei Zimmenemperatur wurde die Lösung unter vermindertem Druck eingeengt. Der no erhaltene Rückstand wurde mit Äther gewaschen, getrocknet und aus einer Mischung von Äthanol und Äther urnknstallisiert, wobei 0.44 g i.-Leucyl-i.-leucyl- !-valyl-i.-phenylala-inol-hydrochiorid erhalten wurden. Fp. - 239,5 bis 240,5"C; farblose Nadeln; Ausbeute 78.0°,V. IM?⁵ ■- 35,5 (C - 0,48; Essigsaure).

Analyse auf C„H₄₅N₄O,CI:
Re rech net:

C - 60,87: H - 8,84; N -=- 10,92; Cl 6,91: gefunden: so

C =- 60,46: H 8,78; N 10.76; Cl --= 7,24.

An weiteren physikalisch-chemischen Kenndaten v>urden für i.-Leuc\l-i.-lcucyl-i- valyl-i.-phenylalaninol (Verbindung A) und i.-leucyl-L-leucyl-L-valyl-L-phenylalan.inol-hsdrochlorid (Verbindung B) die Rf-Werte der Dünnschichtchromatographie (7,5 · 2,5 c/rr Silicagel G) gemessen.

Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 111 zusammengestellt;

Tabelle III

Lüsungsmittelsystem

(Rf) Verbindung A ! Verbindung H

CCI^-Äthylacetat-Methanol
(5:5: 2 Vol./Vol.)

CHC1₃-Methanol(4: 1.
Vol./Vol.)

C HCI₃-Essiesäure-Metha"iol
(95 : 3 : 10, Vol./Vol.) . . . .

0,54	0.54
0,79	0,94
0,45	0,10

Claims

Tabelle I

Patentanspruch:

! -Leucyl-i.-leucyl-i.-valyl-i -phenylalaninol und dessen ph.irmakologiseh verträglichen Säureadditionssal/e.

Die I-.rfindung betrifft i-Leucvi-i -leueyl-i.-valyl- ^-pheinl.iianinoi und dessen pharmakologisch verträglichen SäureadditionsKilze

Die gewünschten Phenylalaninolverbindungen werden durch Reduktion eines Esters \on i.-Leiicyl-L-leucyl-i -\alyl-i -phenylalaninin hergestellt. In erster Lime sind die niedriger molekularen Alkylester. z. B. Metlnl-. Äthyl-. Propylester. dafür geeignet. Die Ausgangs-Tetrapeptidester können nach einer üblichen Methode hergestellt werden (vgl. zum Beispiel japanische Patentschrift 2821 1967)/ Die Reduktion diener F^:.ster erfolgt in üblicher Weise. Im Fall der Wrwendung von Natnumborhvdrid wird vorzugsweise wäßriges Methanol oder wäßriges Äthanol als Lösungsmittel verwendet. Vorzugsweise werden etwa 5 bis 15 Niöl. insbesondere etwa 10 Mol Natriumborhydrid je Mol Ausgangs'.etrapeptidester eingesetzt. Die Reaktion kann im allgemeinen in einen-, breiten Temperaturbereich, λ B. von 10 bis 40'C durchgeführt werden.

Das so erhaltene t.-Leücy'-t -leucyl-L-valyl-i -phenylalaninol sann leicht in seine pharmakologisch ,erträglichen Säureadditionssalze e.itsprechend einer konventionellen Arbeitsweise überfuhrt werden. Bevorzugte Beispiele für ein solches SaI/ sind das Hydrochloric!, Hydrobromid. Nitrat, Sulfat, Succinat. Citrat.

Die Phenylalaninolverbindungen der F.rfindung h'nd :!s antihypertensive Mittel insbesondere zur Verhü lung von Nierep-Hypertension und als diagnostisches Hilfsmittel he: der Nieren-Hypertension brauchbar.

Insbesondere hemmen die Phenylalaninolvcrbindungen die enzymatische Wirkung von Renin (einem aus der Niere abgesondertem Enzym) auf Angiotensmogen, welches im Blutplasma vorkommt und ein Vorläufer von Angiotensin I ist (Angiotensin I wird durch ein Enzym in Angiotensin II, ein blutdruckerl'ohendes Mittel, umgewandelt). Die Ester von ι -I.euevl-i.-leucyl-i.-valyl-i -tyrosin (vgl. japanische Patentschrift 2821/1967) und die Tetrapeptidester, die als Ausgangsmaterial der Erfindung verwendet werden, hemmen zwar ebenfalls Renin. f:s wurde jedoch gefunden, daß die oben beanspruchten Phenylalaninolverbindungen vorteilhaftere Eigenschaften im Vergleich zu den Tetrapeptidestern besitzen. Beispiels weise zeichnen sich die Phenylalaninolverbinduncen durch eine verminderte Toxizität und erhöhte Löslichkeit in wäßrigem Lösungsmittel im Vergleich zu den Tetrapeptidestern aus, wobei die hemmende Wirkung der Phenylalaninolverbindungen gleich oder geringfügig schwächer als diejenige der Tetrapeptidester ist. Insofern sind die Phenylalaninolverbindungci zur parenteralen Anwendung geeigpeter. Die Löslichkeit der Phenylalaninolverbindungen ist in Tabelle I im Vergleich mit denjenigen der Tetrapeptidester vviedcr-Verhindungen