DE19638745C2 - Monoklonale Antikörper gegen die extrazelluläre Domäne des menschlichen VEGF - Rezeptorproteins (KDR) - Google Patents

Monoklonale Antikörper gegen die extrazelluläre Domäne des menschlichen VEGF - Rezeptorproteins (KDR)

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Description

Die vorliegende Erfindung betrifft von Hybridomzellinien sezernierte monoklonale Antikörper, die gegen ein Epitop der extrazellulären Domänen 1-7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR (kinase insert domain containing receptor) gerichtet sind, die Verwendung des Verfahren zum Nachweis des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR aus Zellysaten oder Gewebeanalysaten und die Verwendung der Antikörper in analytischen Assays, in der Dignostik und als Trägermoleküle für therapeutische Stoffe.
Neue Gefäße entstehen als Kapillaren, die von bestehenden kleinen Gefäßen aussprießen. Dieser als Angiogenese bekannte Vorgang findet als Antwort auf bestimmte Signale statt (Alberts et al., Molekularbiologie der Zelle, Verlag Chemie, Weinheim).
Angiogenese ist ein Prozeß der sorgfältig durch die Interaktion des vaskular endothelialen Wachstumsfaktors (vascular endothelial growth factor) und seines entsprechenden hochaffinen KDR-Rezeptors an Endothelzellen kontrolliert wird. KDR wurde als transmembraner Tyrosinkinase-Rezeptor vom Subtyp 5 charakterisiert, der als Schlüsselregulator der vascularen Endothelzell-Entwicklung während der Embryogenese und der Zellregeneration dient (Cancer and Metastasis Reviews 15: 159-163, 1996).
Weiterhin führt die Disfunktion dieser normalerweise sorgfältig regulierten Liganden- Rezeptor Interaktion zu einem gestörten Angiogeneseprozeß, ein Merkmal vieler Krankheiten.
Als besonder wichtig hat sich herausgestellt, daß das Wachstum von Tumoren und deren Metastasen hochgradig angiogeneseabhängig ist.
Es ist bereits ein monoklonaler Antikörper mit einem begrenzten Reaktionsmuster bekannt. Dieser Antikörper ist gegen die extrazelluläre Domäne des Maus KDR- homologen flk-1 gerichtet und ist in der Lage, die VEGF-Stimulation eines chimären flk-1/fms-Rezeptors, der in transfizierten 3T3 Zellen exprimiert, zu neutralisieren (Rockwell et al., Molecular and Cellular Differentiation, 3 (1): 91-109, (1995)). Es ist ferner bekannt, dass der VEGF-Rezeptor Flt-1 biologische Aktivität vermittelt (Clauss et al., J. Biol. Chem., Vol. 271,30, 17629-17634, (1996). Beschrieben wird in dieser Publikation jedoch ein r-212 polyklonales Serum und kein polyklonaler Antikörper, wie in der vorliegende Anmeldung.
Monoklonale Antikörper, die für ein breites Spektrum analytischer Assays verwendet werden können und Verfahren zum Nachweis des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR aus Zellysaten und Gewebeanalysaten unter Verwendung dieser Antikörper sind bisher nicht bekannt.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, von Hybridomzellinien sezernierte monoklonale Antikörper bereitzustellen. Die erfindungsgemäßen monoklonalen Antikörper können für eine breites Spektrum analytischer Verfahren bzw. Assays, in der Diagnostik und als Trägermolekül für therapeutische Stoffe verwendet werden. Es werden nun monoklonale Antikörper bereitgestellt, die gegen ein Epitop das innerhalb der extrazellulären Domänen 1-7 des menschlichen VEGF- Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet sind.
Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung monoklonale Antikörper, die gegen ein Epitop das innerhalb der extrazellulären Domänen 6 und 7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet sind.
Versuchsgemäß werden diese monoklonalen Antikörper mit AM 2-7-9, AM 2-10-1, AM 5-1-2, AM 5-10-13 und AM 2-4-1 bezeichnet.
Diese Antikörper sind spezifisch gegen ein Epitop, das innerhalb der extrazellulären Domänen 6 und 7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet.
Die erfindungsgemäßen Antikörper zeigen eine hohe Selektivität in einem breiten Spektrum analytischer Verfahren bzw. Assays.
Die erfindungsgemäßen monoklonalen Antikörper haben den Vorteil, daß sie weder mit der ligandenbindenden Domäne interferieren noch KDR nach der Bindung aktivieren.
Die erfindungsgemäßen Antikörper sind auch wertvoll für diagnostische Zwecke.
So können die erfindungsgemäßen monoklonalen Antikörper verwendet werden für Westerblots, Immunpräzipitation, ELISA, FACS-Analyse und in der indirekten Immunfluoreszenz-Mikroskopie.
Eine weitere Verwendung der monoklonalen Antikörper ist in der Immunhistochemie möglich.
Ferner können die monoklonalen Antikörper zum Screenen nach kleinen agonistischen und antagonistischen Molekülen und zur Detektion mutanter Rezeptorsubtypen verwendet werden.
Die erfindungsgemäßen monoklonalen Antikörper können ferner in der Diagnostik zur Anwendung kommen, wobei diese in Kombination mit einer geeigneten kontrastgebenden Substanz gekoppelt werden können. Hierbei reagieren die Antikörper mit einem Epitop, das nicht innerhalb der Ligandenbindungsseite des KDR lokalisiert ist und deshalb in der Lage ist, mit allen KDR-Rezeptorpopulationen zu reagieren.
Eine bevorzugte kontrastgebende Substanz die an die Antikörper gekoppelt werden kann ist 99-M Technetium.
Die erfindungsgemäßen monoklonalen Antikörper können auch bei angiogenetisch abhängigen Phänotypen, wie Tumoren, deren Metastasen, rheumatoider Arthritis oder Psoriasis, oder sich daraus ergebender Krankheitssymptome, gekoppelt mit geeigneten toxischen Substanzen, zur Anwendung kommen.
Geeignete toxische Substanzen sind dem Fachmann hinreichend bekannt und sind z. B. in Byers & Baldwin, Immunology (1988), 65, 329-335 und in Blakey et al., Waldmann H. (ed): Monoclonal Antibody Therapy, Prog. Allergy, Basel, Karger, (1988), vol. 45, 50-90 beschrieben.
Die Erfindung betrifft ferner die Verwendung der mRNA, die für die schwere und die leichte Kette der erfindungsgemäßen Antikörper kodiert, zur Herstellung rekombinanter "single chain"-Antikörper.
Die Erfindung betrifft ferner die Verwendung der über die mRNA kodierten rekombinanten Antikörper für Westerblots, Immunpräzipitation, ELISA und FACS- Analyse, in der indirekten Immunfluoreszenz-Mikroskopie und Immunhistochemie und zum Screenen nach kleinen agonistischen und antagonistischen Molekülen und zur Detektion mutanter Rezeptorsubtypen.
Weiterhin betrifft die Erfindung die Verwendung eines Verfahren zum Nachweis des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR aus Zellysaten oder Gewebeanalysaten, das dadurch gekennzeichnet ist, daß
  • 1. die monoklonalen Antikörper, die gegen ein Epitop des innerhalb der extra­ zellulären Domänen 1-7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet sind, in gereinigter Form mit einer Konzentration von 1-10 µg/ml in Koppel-Puffer an ELISA-Platten als Fänger-Antikörper gekoppelt und anschließend überschüssige Bindungsstellen mit Blockierungs-Puffer blockiert werden,
  • 2. Zell- oder Gewebeanalysate in einem geeigneten Lysis-Puffer herstellt,
  • 3. die Platten vor Aufbringen der Lysate in Waschpuffer gewaschen werden,
  • 4. die Quantifizierung von zu bestimmendem KDR-Protein in der Probe durch rekombinantes KDR-Protein als Standardkurve erfolgt,
  • 5. die zu messenden Gewebe- und Zellysate anschließend in das Testsystem eingebracht werden,
  • 6. eine Inkubation bei Raumtemperatur für zwei Stunden erfolgt,
  • 7. anschließend die ELISA-Platten gewaschen werden,
  • 8. der Nachweis des "gefangenen" KDR mittels eines polyklonalen anti-KDR Antiserums erfolgt
und schließlich
  • 1. die Detektion mittels eines chromogenen, chemilumineszenten oder radioaktiven Stoffes erfolgt.
Die Verwendung des Verfahrens kann auch als Kinase-Test-Verfahren erfolgen, das den Tyrosin-phosphorylierten KDR nachweist.
Um eine Quantifizierung des verwendeten Test-Verfahrens zu ermöglichen, kann rekombinanter phosphorylierter KDR als Standardprotein eingesetzt werden.
Der Nachweis des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR aus Zellysaten oder Gewebeanalysaten kann über das Verfahren sowohl qualitativ als auch quantitativ erfolgen.
Das in Verfahrensstufe 8 verwendete polyklonale anti-KDR Antiserum kann z. B. polyklonales anti-phosphothyrosin Antiserum oder ein monoklonaler anti- Phosphotyrosin Antikörper sein.
Die in Verfahrensstufe 9 durchgeführte Detektion kann vorzugsweise mit Peroxidase markierten sekundären Antikörpern und geeigneten chromogenen oder chemilumineszenten Substraten durchgeführt werden.
Das verwendete Antiserum kann z. B. aus Ziege oder Kaninchen oder aus Schaf, Ratte oder Esel sein, entweder direkt als enzymmarkiertes Immunglobulin oder indirekt mittels enzymmarkierter anti-Ziege-, anti-Kaninchen-, anti-Schaf-, anti-Ratte- bzw. anti-Eselantikörper. Hierzu wird entweder Alkalische Phosphatase oder Peroxidase verwendet.
Die in Verfahrensstufe 1 verwendeten ELISA-Platten können Antikörper-beschich­ tet und blockiert sein.
Der in Verfahrensstufe 2 verwendete Lysis-Puffer enthält 1-5 mM divalente Ionen und 1-15% Glycerin.
Vorzugsweise enthält der Lysis-Puffer 1-2 mM divalente Ionen und 5-12% Glycerin.
Besonders bevorzugt ist ein Lysis-Puffer, der 1,5 mM divalente Ionen und 10% Glycerin enthält.
Ein bevorzugtes divalentes Ion ist z. B. Magnesium.
Für die im Verfahren verwendeten Wasch- und Verdünnungspuffer können alle dem Fachmann hierfür geläufigen Puffer verwendet werden.
Bevorzugte Waschpuffer sind die, die PBS mit 0,05% Detergenz und 0,1% Rinderserumalbumin enthalten.
Bevorzugte Verdünnungspuffer sind solche, die 1% Rinderserumalbumin enthalten.
Beschreibung der Abbildungen
Fig. 1 zeigt ein Gel mit dem spezifischen Reaktionsmuster am Beispiel des monoklonalen Antikörpers AM 2-10-1.
In der Abbildung bedeuten: Spur 1: Schweineaorta-Endothelzellen, 25 µg Gesamtzellysat
Spur 2: Schweineaorta-Endothelzellen, mit humanem KDR transfiziert, 25 µg Gesamtzellysat
Spur 3: CHO-Zellen, mit humanem KDR transfiziert, 25 µg Gesamtzellysat
Spur 4: CHO-Zellen, 25 µg Gesamtzellysat
Spur 5: Menschliche Nabelschnur-Endothelzellen, Passage 6,25 µg Gesamtzellysat
Spur 6: Mäuse Endothelzellen, 25 µg Gesamtzellysat,
Fig. 2 zeigt das Gel der Immunpräzipitation mit den monoklonalen Antikörpern AM 2- 10-1 und AM 2-7-9.
In der Abbildung bedeuten: Spur 1: 5 µg AM 2-7-9
Spur 2: 1 µg AM 2-7-9
Spur 3: 5 µg AM 2-10-1
Spur 4: 1 µg AM 2-10-1
Spur 5: Isotypkontrolle, 10 µg unspezifischer Antikörper der Subklasse IgG1
Fig. 3 zeigt das Epitop-Mapping.
In der Abbildung bedeuten: Spur 1: löslicher KDR, Domäne 1 und 2
Spur 2: löslicher KDR, Domäne 1 bis 3
Spur 3: löslicher KDR, Domäne 1 bis 5
Spur 4: löslicher KDR, Domäne 1 bis 7
Die nachfolgenden Ausführungsbeispiele beschreiben die Herstellung der erfindungsgemäßen monoklonalen Antikörper sowie deren Verwendung, ohne jedoch die Erfindung auf diese Beispiele einzuschränken.
1. Herstellung der monoklonalen Antikörper
Weibliche Balb/c Mäuse (sechs Wochen alt) wurden entweder mit löslichem Rezeptor (20 µg/ Injektion) in Freudschem Komplettadjuvans oder mit Baculovieren infizierten SF-9 Zellen (107 Zellen/Injektion in PBS), die das Vollängen humane KDR Rezeptorprotein exprimieren, hyperimmunisiert. Spezifische Antikörpertiter wurden unter Verwendung der extrazellulären KDR-Dömäne mittels ELISA ermittelt. Drei Tage nach der letzten Immunisierung wurde die Milz entfernt. Die Splenocyten wurden mit SP2O.Ag.14 Murinmyelom-Zellen gemäß bekannter Methoden fusioniert (Köhler und Millstein, Nature 256, 495, 1975). Die gebildeten Kolonien wurden mittels ELISA und Westernblot unter Verwendung der löslichen extrazellulären KDR-Domäne gescreent. Positive Kolonien wurden dreifach durch begrenzte Verdünnung kloniert, mit Protein A-Sepharose-Chromatographie gereinigt und weiter charakterisiert.
2. Verwendung in Westernblots
Komplette Zellysate wurden durch Lyse in einem geeigneten Lyse-Puffer, der die oben beschriebene Konzentration an divalenten Ionen und Glycerin enthält, hergestellt. Gleiche Mengen Protein wurden mittels Polyacrylamidgelelektrophorese unter nicht reduzierenden Bedingungen getrennt, auf Nitrozellulose transferiert und mit den monoklonalen Antikörpern AM 2-7-9 und AM 2-10-1 gemäß an sich bekannter Verfahren sondiert. Die Sichtbarmachung der immunreaktiven Banden wurde entweder mittels Chemilumineszenz oder enzymatisch unter Verwendung von mit Alkalischer Phosphatase markierten sekundären Antikörpern und entsprechenden chromogenen Substraten durchgeführt. In der Fig. 1 ist das Gel eines Westernblots wiedergegeben.
3. Verwendung bei der Immunpräzipitation
Immunpräzipitationen wurden unter Verwendung eines geeigneten Lyse-Puffers (50 mM Tris-HCl pH 7,4, 150 mM NaCl, 1% IGEPAL® CA-630, 10% (v/v) Glycerin, 1,5 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 5 mM EDTA, 50 mM NaF, 2 mM Na-ortho-Vanadat und Komplett-Protease-Inhibitoren gemäß bekannter Methoden durchgeführt. In der Fig. 2 ist das Gel der Immunpräzipitation abgebildet.
4. Verwendung in der Immunhistochemie
Zellen wurden auf sterilen Deckgläschen bis kurz vor Zusammenwachsen kultiviert und mit Formaldehyd (4% v/v PBS pro 4 g pro Liter Glukose) jeweils vor oder nach der Inkubation mit 20 µg/ml des entsprechenden Antikörpers in PBS fixiert. Die Immunreaktion wurde mit Alkalischer Phosphatase beschickten sekundären Antikörpern und Fast-Naphtolrot als chromogenes Substrat visualisiert.
5. Epitop-Mapping
Jeweils 2 µg rekombinanter löslicher KDR-Rezeptordomänen, die mit einem "myc­ tag" versehen sind, wurden durch SDS-PAGE (10%) aufgetrennt und auf Nitrozellulose transferiert. Anschließend wurden zwei identische Folien mit dem monoklonalen Antikörper AM 2-10-1 oder einem monoklonalen anti myc-Antikörper inkubiert. Immunkomplexe wurden durch alkalische Phosphatase markierte Sekundärantikörper sichtbar gemacht (s. Fig. 3).

Claims (20)

1. Monoklonale Antikörper, die gegen ein Epitop das innerhalb der extrazellulären Domänen 1-7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet sind.
2. Monoklonale Antikörper gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Antikörper gegen ein Epitop das innerhalb der extrazellulären Domänen 6 und 7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet sind.
3. Verwendung der monoklonalen Antikörper gemäß den Ansprüchen 1 und 2 für Westernblots, Immunpräzipitation, ELISA, FACS-Analyse und in der indirekten Immunfluoreszenz-Mikroskopie.
4. Verwendung der monoklonalen Antikörper gemäß den Ansprüchen 1 und 2 in der Immunhistochemie.
5. Verwendung der monoklonalen Antikörper gemäß den Ansprüchen 1 und 2 zum Screenen nach kleinen agonistischen und antagonistischen Molekülen und zur Detektion mutanter Rezeptorsubtypen.
6. Verwendung der monoklonalen Antikörper gemäß den Ansprüchen 1 und 2, in Kombination mit einer geeigneten kontrastgebenden Substanz, wobei die monoklonalen Antikörper an die kontrastgebende Substanz gekoppelt werden und so zur Anwendung kommen.
7. Verwendung gemäß Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die kontrastgebende Substanz, die an den Antikörper gekoppelt ist, 99 M Technetium ist.
8. Verwendung der monoklonalen Antikörper gemäß einem der Ansprüche 1 und 2, die mit geeigneten toxischen Substanzen gekoppelt sind, bei angiogenetisch abhängigen Phänotypen, die Tumoren, rheumatoide Arthritis oder Psoriasis sind.
9. Verwendung gemäß Anspruch 8 bei Metastasen.
10. Verwendung der mRNA, die für die schwere und die leichte Kette der erfindungsgemäßen Antikörper kodiert zur Herstellung rekombinanter "single chain"-Antikörper.
11. Verwendung der über die mRNA gemäß Anspruch 10 kodierten rekombinaten Antikörper für Westernblots, Immunpräzipitation, ELISA, FACS-Analyse, in der indirekten Immunfluoreszenz-Mikroskopie und in der Immunhistochemie.
12. Verwendung eines Verfahrens zum Nachweis des menschlichen VEGF- Rezeptors KDR aus Zellysaten oder Gewebeanalysaten, dadurch gekennzeichnet, daß
  • 1. die monoklonalen Antikörper, die gegen ein Epitop das innerhalb der extrazellulären Domänen 1-7 des menschlichen VEGF-Rezeptors KDR lokalisiert ist, gerichtet sind, in gereinigter Form mit einer Konzentration von 1-10 µg/ml in Koppel-Puffer an ELISA-Platten als Fänger-Antikörper gekoppelt und anschließend überschüssige Bindungsstellen mit Blockierungs-Puffer blockiert werden,
  • 2. Zell- oder Gewebeanalysate in einem geeigneten Lysis-Puffer herstellt,
  • 3. die Platten vor Aufbringen der Lysate in Waschpuffer gewaschen werden,
  • 4. die Quantifizierung von zu bestimmendem KDR-Protein in der Probe durch rekombinantes KDR-Protein als Standardkurve erfolgt,
  • 5. die zu messenden Gewebe- und Zellysate anschließend in das Testsystem eingebracht werden,
  • 6. eine Inkubation bei Raumtemperatur für zwei Stunden erfolgt,
  • 7. anschließend die ELISA-Platten gewaschen werden,
  • 8. der Nachweis des "gefangenen" KDR mittels eines polyklonalen anti-KDR Antiserums erfolgt
und schließlich
  • 1. die Detektion mittels eines chromogenen, chemilumineszenten oder radioaktiven Stoffes erfolgt.
13. Verwendung gemäß Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß die Verwendung des Verfahrens als Kinase-Test-Verfahren erfolgt, das den Tyrosin-phosphorylierten KDR nachweist.
14. Verwendung gemäß den Ansprüchen 12 und 13, dadurch gekennzeichnet, daß rekombinante phosphorylierte KDR als Standardprotein eingesetzt wird.
15. Verwendung gemäß den Ansprüchen 12 bis 14, dadurch gekennzeichnet, daß das unter Punkt 8 verwendete polyklonale anti-KDR-Antiserum polyklonales anti-phosphothyrosin Antiserum oder ein monoklonaler anti- Phosphotyrosin Antikörper ist.
16. Verwendung gemäß den Ansprüchen 12 bis 15, dadurch gekennzeichnet, die unter Punkt 9 zur Detektion verwendete Substanz ein mit Peroxi­ dase markierter sekundärer Antikörper mit geeigneten chromogenen oder chemilumineszenten Substraten ist.
17. Verwendung gemäß den Ansprüchen 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, daß der unter Punkt 2 verwendete Lysis-Puffer 1 bis 5 mM divalente Ionen und 1 bis 15% Glycerin enthält.
18. Verwendung gemäß den Ansprüchen 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, daß der unter Punkt 2 verwendete Lysis-Puffer 1 bis 2 mM divalente Ionen und 5 bis 12% Glycerin enthält.
19. Verwendung gemäß den Ansprüchen 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, daß der unter Punkt 2 verwendete Lysis-Puffer 1,5 mM divalente Ionen und 10% Glycerin enthält.
20. Verwendung gemäß den Ansprüchen 17 bis 19, dadurch gekennzeichnet, daß das divalente Ion Magnesium ist.
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IL12840697A IL128406A0 (en) 1996-09-11 1997-09-09 Monoclonal antibodies
JP10513245A JP2001501920A (ja) 1996-09-11 1997-09-09 ヒトｖｅｇｆ受容体タンパク質（ｋｄｒ）の細胞外ドメインに対するモノクローナル抗体
PL97332034A PL332034A1 (en) 1996-09-11 1997-09-09 Monoclonal antibodies against extracellular domain of human vegf (kdr) receptor
PCT/EP1997/004928 WO1998011223A1 (en) 1996-09-11 1997-09-09 Monoclonal antibodies against the extracellular domain of human vegf-receptor protein (kdr)
EP97944862A EP0925359A1 (de) 1996-09-11 1997-09-09 Monoklonale antikörper gegen die extrazelluläre domäne des humanen vegf-rezeptorproteins
US09/254,640 US6344339B1 (en) 1996-09-11 1997-09-09 Monoclonal antibodies against the extracellular domain of human VEGF-receptor protein (KDR)
CA002265927A CA2265927A1 (en) 1996-09-11 1997-09-09 Monoclonal antibodies against the extracellular domain of human vegf-receptor protein (kdr)
AU46222/97A AU730287B2 (en) 1996-09-11 1997-09-09 Monoclonal antibodies against the extracellular domain of human VEGF-receptor protein (KDR)
ZA9708204A ZA978204B (en) 1996-09-11 1997-09-11 Monoclonal antibodies against the extracellular domain of human VEGF-receptor protein (KDR)
NO991162A NO991162L (no) 1996-09-11 1999-03-10 Monoklonale antistoffer mot det ekstracellulµre domene av humant VEGF-reseptorprotein (KDR)

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Families Citing this family (94)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2299099A (en) * 1998-02-04 1999-08-23 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Antibodies against human vegf receptor kdr
DE19813774A1 (de) * 1998-03-27 1999-09-30 Max Planck Gesellschaft Parapockenvirus-kodierter vaskulärer Endothelzell Wachstumsfaktor (PPV-VEGF)
NO983911D0 (no) * 1998-08-26 1998-08-26 Norsk Hydro As Alginatkapsler til bruk ved behandling av hjernesvulst
SK5052001A3 (en) * 1998-11-06 2002-10-08 Knoll Gmbh Inhibition of the formation of vascular hyperpermeability
JP2002536968A (ja) * 1999-01-29 2002-11-05 イムクローン システムズ インコーポレイティド Ｋｄｒに特異的な抗体およびその使用
EP1130032A1 (de) * 2000-02-28 2001-09-05 Gesellschaft für biotechnologische Forschung mbH (GBF) Einzelkette-Antikörper die den menschlichen vaskulären endothelialen Wachstumsfaktorrezeptor-2 (VEGFR-2/KDR) erkennen
LT3143995T (lt) 2001-02-19 2019-01-25 Novartis Ag Rapamicino darinys, skirtas plaučių vėžio gydymui
PT1392313E (pt) 2001-05-16 2007-07-17 Novartis Ag Combinação que compreende n - ( 5- [ 4- ( metil-piperazinomrtil ) - benxoilamido ] - 2 -metilfenil ) - 4 -( 3 - piridil ) - 2 - pirimidina-amina e um agente quimioterapêutico
TWI315982B (en) 2001-07-19 2009-10-21 Novartis Ag Combinations comprising epothilones and pharmaceutical uses thereof
GB0124317D0 (en) * 2001-10-10 2001-11-28 Celltech R&D Ltd Biological products
GB0206215D0 (en) 2002-03-15 2002-05-01 Novartis Ag Organic compounds
PT1505959E (pt) 2002-05-16 2009-02-05 Novartis Ag Utilização de agentes de ligação do receptor edg em cancro
ES2375299T3 (es) * 2002-09-12 2012-02-28 Oncotherapy Science, Inc. Péptidos kdr y vacunas que los contienen.
US7250289B2 (en) * 2002-11-20 2007-07-31 Affymetrix, Inc. Methods of genetic analysis of mouse
BRPI0410439A (pt) 2003-05-19 2006-06-06 Irm Llc compostos e composições imunossupressoras
MY150088A (en) 2003-05-19 2013-11-29 Irm Llc Immunosuppressant compounds and compositions
GB0400122D0 (en) * 2004-01-06 2004-02-11 Badrilla Ltd Method of quantifying binding
GB0512324D0 (en) 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
WO2006055809A2 (en) 2004-11-18 2006-05-26 Imclone Systems Incorporated Antibodies against vascular endothelial growth factor receptor-1
US20060222595A1 (en) * 2005-03-31 2006-10-05 Priyabrata Mukherjee Nanoparticles for therapeutic and diagnostic applications
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
CA2623034A1 (en) 2005-09-27 2007-04-05 Novartis Ag Carboxyamine compounds and their use in the treatment of hdac dependent diseases
NZ568182A (en) 2005-11-21 2010-08-27 Novartis Ag Neuroendocrine tumor treatment using MTOR inhibitors
CN1987468B (zh) * 2005-12-23 2012-01-11 上海交通大学医学院附属仁济医院 血管内皮生长因子时间分辨荧光免疫分析方法及试剂盒
KR20080108517A (ko) 2006-04-05 2008-12-15 노파르티스 아게 암을 치료하기 위한 치료제의 조합물
WO2007128820A1 (en) 2006-05-09 2007-11-15 Novartis Ag Combination comprising an iron chelator and an anti-neoplastic agent and use thereof
GB0612721D0 (en) 2006-06-27 2006-08-09 Novartis Ag Organic compounds
KR20090073121A (ko) 2006-09-29 2009-07-02 노파르티스 아게 Ｐｉ3ｋ 지질 키나제 억제제로서의 피라졸로피리미딘
EP2450456A3 (de) 2006-11-02 2012-08-01 Yale University Beurteilung der Kompetenz von Eizellen
WO2008093246A2 (en) * 2007-02-02 2008-08-07 Vegenics Limited Vegf receptor antagonist for treating organ transplant alloimmunity and arteriosclerosis
CA2677651A1 (en) 2007-02-15 2008-08-21 Novartis Ag Combinations of therapeutic agents for treating cancer
TWI436775B (zh) 2007-08-24 2014-05-11 Oncotherapy Science Inc 以抗原胜肽合併化療藥劑治療胰臟癌
EA019033B1 (ru) 2008-03-26 2013-12-30 Новартис Аг Ингибиторы дезацетилазы в, основанные на гидроксамате
SG10201510586PA (en) 2008-06-30 2016-01-28 Mesoblast Inc Treatment of Eye Diseases And Excessive Neovascularization Using A Combined Therapy
US20110223241A1 (en) 2008-10-16 2011-09-15 Celator Pharmaceuticals, Inc. Combination methods and compositions
EP2350131B1 (de) * 2008-11-07 2017-06-07 Research Development Foundation Zusammensetzungen und methoden zur inhibierung der cripto/grp78-komplexbildung und signalvermittlung
KR20110112352A (ko) 2008-12-18 2011-10-12 노파르티스 아게 1-（4-｛ｌ-［（ｅ）-4-시클로헥실-3-트리플루오로메틸-벤질옥시이미노］-에틸｝-2-에틸-벤질）-아제티딘-3-카르복실산의 신규한 다형체 형태
KR20160064245A (ko) 2008-12-18 2016-06-07 노파르티스 아게 1-［4-［1-(4-시클로헥실-3-트리플루오로메틸-벤질옥시이미노)-에틸］-2-에틸-벤질］-아제티딘-3-카르복실산의 헤미푸마레이트 염
CA2747558A1 (en) 2008-12-18 2010-07-15 Novartis Ag New salts
JP2012516345A (ja) 2009-01-29 2012-07-19 ノバルティス アーゲー 星細胞腫治療用置換ベンゾイミダゾール
TW201109029A (en) 2009-06-11 2011-03-16 Oncotherapy Science Inc Vaccine therapy for choroidal neovascularization
SG176105A1 (en) 2009-06-26 2011-12-29 Novartis Ag 1, 3-disubstituted imidazolidin-2-one derivatives as inhibitors of cyp 17
US8389526B2 (en) 2009-08-07 2013-03-05 Novartis Ag 3-heteroarylmethyl-imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl derivatives
EA201200260A1 (ru) 2009-08-12 2012-09-28 Новартис Аг Гетероциклические гидразоны и их применение для лечения рака и воспаления
UA111579C2 (uk) 2009-08-17 2016-05-25 Інтеллікіне Ллк ГЕТЕРОЦИКЛІЧНІ ПОХІДНІ 2-АМІНОБЕНЗО[d]ОКСАЗОЛУ, ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ НА ЇХ ОСНОВІ ТА ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ ЗАХВОРЮВАННЯ, ПОВ'АНОГО З РІ3-КІНАЗОЮ
KR20120089463A (ko) 2009-08-20 2012-08-10 노파르티스 아게 헤테로시클릭 옥심 화합물
EA201200321A1 (ru) 2009-08-26 2012-09-28 Новартис Аг Тетразамещенные гетероарильные соединения и их применение в качестве модуляторов mdm2 и/или mdm4
WO2011029915A1 (en) 2009-09-10 2011-03-17 Novartis Ag Ether derivatives of bicyclic heteroaryls
MX2012005293A (es) 2009-11-04 2012-06-19 Novartis Ag Derivados de sulfonamida heterociclicos utiles como inhibidores de mek.
CN102712648A (zh) 2009-11-25 2012-10-03 诺瓦提斯公司 双环杂芳基的与苯稠合的6元含氧杂环衍生物
EA201200823A1 (ru) 2009-12-08 2013-02-28 Новартис Аг Гетероциклические производные сульфонамидов
CU24130B1 (es) 2009-12-22 2015-09-29 Novartis Ag Isoquinolinonas y quinazolinonas sustituidas
US8440693B2 (en) 2009-12-22 2013-05-14 Novartis Ag Substituted isoquinolinones and quinazolinones
CN102947275A (zh) 2010-06-17 2013-02-27 诺瓦提斯公司 哌啶基取代的1,3-二氢-苯并咪唑-2-亚基胺衍生物
JP2013528635A (ja) 2010-06-17 2013-07-11 ノバルティス アーゲー ビフェニル置換１，３−ジヒドロ−ベンゾイミダゾール−２−イリデンアミン誘導体
CN103108871B (zh) 2010-09-16 2014-09-10 诺华股份有限公司 17α-羟化酶/C17,20-裂合酶抑制剂
US20130324526A1 (en) 2011-02-10 2013-12-05 Novartis Ag [1,2,4] triazolo [4,3-b] pyridazine compounds as inhibitors of the c-met tyrosine kinase
EP2678016B1 (de) 2011-02-23 2016-08-10 Intellikine, LLC Heterocyclische verbindungen und ihre verwendung
EP2683722A1 (de) 2011-03-08 2014-01-15 Novartis AG Bicyclische fluorphenyl-heteroarylverbindungen
US9029399B2 (en) 2011-04-28 2015-05-12 Novartis Ag 17α-hydroxylase/C17,20-lyase inhibitors
JP2014517004A (ja) 2011-06-09 2014-07-17 ノバルティス アーゲー 複素環スルホンアミド誘導体
EP2721008B1 (de) 2011-06-20 2015-04-29 Novartis AG Hydroxy substituierte isochinolinone als p53 (mdm2 or mdm4) inhibitoren
WO2012175487A1 (en) 2011-06-20 2012-12-27 Novartis Ag Cyclohexyl isoquinolinone compounds
MX2014002289A (es) 2011-08-26 2015-03-20 Merrimack Pharmaceuticals Inc Anticuerpos fc especificos en tandem.
AU2012310168B2 (en) 2011-09-15 2015-07-16 Novartis Ag 6 - substituted 3 - (quinolin- 6 - ylthio) - [1,2,4] triazolo [4, 3 -a] pyradines as tyrosine kinase
EP2785717B1 (de) 2011-11-29 2016-01-13 Novartis AG Pyrazolopyrrolidinverbindungen
EP2794589A1 (de) 2011-12-23 2014-10-29 Novartis AG Verbindungen zur hemmung der interaktion von bcl2 mit bindungspartnern
JP2015503515A (ja) 2011-12-23 2015-02-02 ノバルティス アーゲー Ｂｃｌ２と結合相手の相互作用を阻害するための化合物および組成物
CN104136429A (zh) 2011-12-23 2014-11-05 诺华股份有限公司 用于抑制bcl2与结合配偶体相互作用的化合物
JP2015503519A (ja) 2011-12-23 2015-02-02 ノバルティス アーゲー Ｂｃｌ２と結合相手の相互作用を阻害するための化合物
EA201491264A1 (ru) 2011-12-23 2014-11-28 Новартис Аг Соединения для ингибирования взаимодействия bcl-2 с партнерами по связыванию
US8815926B2 (en) 2012-01-26 2014-08-26 Novartis Ag Substituted pyrrolo[3,4-D]imidazoles for the treatment of MDM2/4 mediated diseases
KR102115047B1 (ko) 2012-04-03 2020-05-26 노파르티스 아게 티로신 키나제 억제제들을 갖는 조합 제품 및 그의 용도
CN104321325B (zh) 2012-05-24 2016-11-16 诺华股份有限公司 吡咯并吡咯烷酮化合物
US9403827B2 (en) 2013-01-22 2016-08-02 Novartis Ag Substituted purinone compounds
EP2948453B1 (de) 2013-01-22 2017-08-02 Novartis AG Pyrazolo[3,4-d]pyrimidinonverbindungen als inhibitoren der p53/mdm2-interaktion
TW201444872A (zh) 2013-03-06 2014-12-01 Merrimack Pharmaceuticals Inc 抗Ｃ－ＭＥＴ串聯Ｆｃ雙特異性抗體
CN105246482A (zh) 2013-03-15 2016-01-13 因特利凯有限责任公司 激酶抑制剂的组合及其用途
WO2014155268A2 (en) 2013-03-25 2014-10-02 Novartis Ag Fgf-r tyrosine kinase activity inhibitors - use in diseases associated with lack of or reduced snf5 activity
EP2994758B1 (de) 2013-05-08 2017-12-20 Opthea Limited Biomarker für altersbedingte makuladegeneration (amd)
WO2015022663A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of mek
WO2015022664A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of mek
US9227969B2 (en) 2013-08-14 2016-01-05 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of MEK
TW201605450A (zh) 2013-12-03 2016-02-16 諾華公司 Ｍｄｍ２抑制劑與ＢＲＡＦ抑制劑之組合及其用途
WO2015191602A2 (en) * 2014-06-09 2015-12-17 Biomed Valley Discoveries, Inc. Combination therapies targeting tumor-associated stroma or tumor cells
WO2016016822A1 (en) 2014-07-31 2016-02-04 Novartis Ag Combination therapy
KR102506663B1 (ko) * 2014-09-28 2023-03-08 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 자극성 및 비자극성 골수성 세포의 조절
CA3012718A1 (en) 2016-02-08 2017-08-17 Vitrisa Therapeutics, Inc. Compositions with improved intravitreal half-life and uses thereof
US10543231B2 (en) 2017-05-19 2020-01-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
KR20200015921A (ko) * 2017-07-03 2020-02-13 재단법인 생물기술개발중심 항-vegfr 항체 및 이의 사용
US12023353B2 (en) 2017-10-18 2024-07-02 Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg-Speyer-Haus Methods and compounds for improved immune cell therapy
AU2018383709B2 (en) 2017-12-12 2025-09-11 Pionyr Immunotherapeutics, Inc. Anti-TREM2 antibodies and related methods
WO2019119486A1 (zh) 2017-12-21 2019-06-27 中国科学院合肥物质科学研究院 一类嘧啶类衍生物激酶抑制剂
EP4058465A1 (de) 2019-11-14 2022-09-21 Cohbar Inc. Cxcr4-antagonistenpeptide

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1173991C (zh) * 1992-11-13 2004-11-03 马克斯普朗克科学促进协会 作为血管内皮生长因子受体的f1k-1
US5840301A (en) * 1994-02-10 1998-11-24 Imclone Systems Incorporated Methods of use of chimerized, humanized, and single chain antibodies specific to VEGF receptors
US5861499A (en) * 1994-02-10 1999-01-19 Imclone Systems Incorporated Nucleic acid molecules encoding the variable or hypervariable region of a monoclonal antibody that binds to an extracellular domain

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J. Biol. Chem. 1936, 271 (30), S.17629-17634 *
Lexikon der Biologie, Herder Freiburg, Basel, Wien 1986, "monoklonale Antikörper" *

Also Published As

Publication number Publication date
DE19638745A1 (de) 1998-03-12
CA2265927A1 (en) 1998-03-19
EP0925359A1 (de) 1999-06-30
JP2001501920A (ja) 2001-02-13
AU4622297A (en) 1998-04-02
HUP9904052A2 (hu) 2000-03-28
PL332034A1 (en) 1999-08-16
NO991162D0 (no) 1999-03-10
AU730287B2 (en) 2001-03-01
HUP9904052A3 (en) 2002-01-28
IL128406A0 (en) 2000-01-31
US6344339B1 (en) 2002-02-05
ZA978204B (en) 1998-03-03
WO1998011223A1 (en) 1998-03-19
NO991162L (no) 1999-05-06

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