DE1900647A1

DE1900647A1 - Verfahren zur Herstellung von Erythronolid B.

Info

Publication number: DE1900647A1
Application number: DE19691900647
Authority: DE
Inventors: Dr Klaus Kieslich; Dr Karl Petzoldt
Original assignee: Schering AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1969-01-02
Filing date: 1969-01-02
Publication date: 1970-08-13

Description

Verfahren zur Herstellung von Erythronolid B Die Erfindung betrifft ein neues Verfahren zur Herstellung von Erythronolid B.
Erythronolid B ist von Bedeutung als Zwischenprodukt für die Herstellung von Antibiotica (U.S.Patent Nr. 3.366.647).
Erythronolid B besitzt weiter cholesterinspiegelsenkende Eigenschaften (U.S.Patent Nr. 5.127.515).
Es ist bekannt, daß das Erythronolid B, welches eine Vorstufe der Erythromycinbiosynthese darstellt (Antimicrob.Agents and Chemoth. 1965, 158), als Zwischen- bzw. Nebenprodukt bei der Erythromycinherstellung zu gewinnen ist. Dieses Verfahren (U.S.Patent Nr. 3.127.315) besitzt für die Herstellung von Erythronolid B Jedoch den Nachteil, daß seine Isolierung durch die notwendige Abtrennung von dem als Hauptprodukt anfallenden Erythromycin stark erschwert ist. Wegen der bekannten Säureempfindlichkeit des Erythromycins treten bei der Abtrennung des Erythronolids B durch Extraktion in sauren pH-Bereich unerwünschte Nebenprodukte auf, die die Reinigung des Erythronolids B erschweren. Eine Herstellung des Erythronolids B durch Abspaltung des Desosamin- und Cladinoserestes aus Erythromycin ist wegen der Empfindlichkeit der Lactonstruktur des Erythromycins gegenüber Hydrolysebedingungen nicht möglich (J.org.Chem. )2, 2324 (1967)).
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Erythronolid B auf einem einfacheren Weg herzustellen.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß man Streptomyces erythreus in an sich bekannter Weise, Jedoch unter Zusatz von 2 - 5 ffi n-Propanol, fermentiert und das Erythronolid B anschließend isoliert.
Die Fermentation kann in den üblichen und bekannten Nährmedien durchgerührt werden. Als Mikroorganismen eignet sich besonders der Stamm Streptomyces erythreus NRRL 2338. Es ist vorteilhaft, das n-Propanol nicht gleich in der ganzen Menge bei Reaktionsbeginn dem Nährmedium zuzugeben, sondern mit einem Zusatz von ca. 1 ffi n-Propanol zu beginnen und den Rest in kleinen Dosen oder langsam und kontinuierlich zuzusetzen bis der Gesamtgehalt an n-Propanol 2 - 5 ffi beträgt.
Besonders gut eignet sich ein Gehalt an n-Propanol von 3 - 4 %.
Aus der Fermentationsbrühe läßt sich das Erythronolid B nach Beendigung der Reaktion in einfacher Weise z.B. durch Extraktion mit einem mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmittel, vorzugsweise Methylisobutylketon, extrahieren. Nach Einengen und Abkühlen des Extraktes kristalliert das Erythronolid B in reiner Form aus.
Der Reaktionsverlauf ist völlig überraschend, da aus der U.S.-Patentschrift Nr. 2.808.363 bekannt ist, daß durch einen Zusatz von geringen Mengen an n-Propanol zu dem Reaktionsmedium gerade die Bildung des Erythromycins gefördert wird, welches in diesem Fall unerwünscht ist.
Die nachfolgende Tabelle gibt eine Ubersicht über das Verhältnis von gebildetem Erythronolid B zu Erythromycin bei Ansätzen, die analog Beispiel 1, aber mit unterschiedlichen n-Propanol-Mengen durchgeführt wurden.

1) % n-Propanol 0 1,5 3,0 4,0

2) gebildetes Erythromycin 80 mg 520 mg 40 mg 35 mg

3) gebildetes Erythronolid B 2,5 mg 7,5mg 470 mg 430 mg

4) Verhältnis 3) : 2) 0,031 0,014 11,8 12,5

Beispiel 1 20 1 eines Nährmediums enthaltend 1,7 % Maisstärke, 1,7 % SoJamehl, 1,12 % Cornsteep, 0,56 % NaCI und 0,36 % CaCO3 wurden mit dem Stamm Streptomyces erythreus NRRL 2338 beimpft.
Anschließend wurde die Kultur zusätzlich mit 200 g steril filtriertem n-Propanol versetzt und von nun an in 2-stündigem Abstand Jeweils weitere 8 ml n-Propanol zugegeben, wobei die Erythronolid B-Bildung dünnschichtchromatographisch verfolgt wurde. Nach 144 Stunden Fermentationszeit war eine Konzentration von 480 g Erythronolid B/ml Kulturbrühe erreicht; Erythromycin war praktisch nur in Spuren vorhanden.
Zur Ernte wurde die Kulturbrühe über CeliteR9iltriert und das Filtrat mit Methylisobutylketon extrahiert. Den Extrakt (24 1) dampfte man im Vakuum bis auf ein Volumen von 0,6 1 ein und stellte das Konzentrat kalt. Nach einigen Tagen waren 8,23 g Erythronolid 13 vom Schmelzpunkt 225 - 225 0C aus der Lösung auskristallisiert.

Claims

Patentansprüche

1) Verfahren zur Herstellung von Erythronlid B, dadurch gekennzeichnet, daß man Streptomyces erythreus in an sich bekannter Weise, Jedoch unter Zusatz von 2 - 5 ffi n-Propanol, fermentiert und das Erythronolid B anschließend isoliert.

2) Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Mikroorganismus Streptomyces erythreus NRRL 2338 verwendet.

3) Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das n-Propanol während des Reaktionsablaufes portionsweise oder langsam und kontinuierlich zusetzt.