DE1792003C3 - Verfahren zur Abtrennung der nach der Fermentation zurückbleibenden Koh lenwasserstoffe und Mikroorganismenzellen aus einer Fermentationsflussigkeit - Google Patents
Verfahren zur Abtrennung der nach der Fermentation zurückbleibenden Koh lenwasserstoffe und Mikroorganismenzellen aus einer FermentationsflussigkeitInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Abtrennung der nach der Fermentation zurückbleibenden
Kohlenwasserstoffe und Mikroorganismenzellcn
aus einer Fermentationsflüssigkeit, die bei der Kultivierung eines Kohlenwasserstoffe assimilierenden
Mikroorganismus in einer einen Kohlenwasserstoff als Hauptkohlenstoffquelle enthaltenden Nährlösung
erhalten wurde.
In den letzten Jahren wurden verschiedene Verfahren zur Herstellung von Aminosäuren, organischen
Sauren, Antibiotika und anderen Verbindungen auf fermentativem Wege durch Kultivierung von
Kohlenwasserstoffe assimilierenden Mikroorganismen entwickelt, mit deren Hilfe es möglich ist, die
gewünschten Verbindungen in großtechnischem Maßstabe herzustellen. In solchen Verfahren, die
auch kontinuierlich durchgeführt werden, ist es natürlich erforderlich, auch die Abtrennung und
Reinigung der gewünschten, in der Fermentationsflüssigkeit angereicherten Produkte in großtechnischem
Maßstabe durchzuführen, was voraussetzt, daß die nach der Fermentation zurückbleibenden
Kohlenwasserstoffe und Mikroorganismenzcllen aus der Fermentationsflüssigkeit abgetrennt werden.
Bei solchen Verfahren ist es nun bekanntlich sehr schwierig, die in der Fermentationsflüssigkeit zurückbleibenden
Mikroorganismenzellen zusammen mit den Kohlenwasserstoffen durch Zentrifugieren oder
durch Filtrieren mit einem üblichen Filtermaterial abzutrennen, da die in der Fermentationsflüssigkeit
vorhandenen Zellkomponenten und die restlichen Kohlenwasserstoffe die zurückbleibenden Mikroorganismenzellcn
emulgieren, wodurch die Abtrennung durch Zentrifugieren oder Filtrieren beträchtlich
erschwert wird.
Alle Versuche, dieses Problem zufriedenstellend
zu lösen, blieben bisher erfolglos.
Aufgabe der Erfindung ist es daher, ein Verfahren anzugeben, mit dessen Hilfe es möglich ist, die nach
der Fermentation zurückbleibenden Kohlenwasserstoffe zusammen mit den Mikroorganismenzellen in
ίο einfacher Weise von der Fermentationsflüssigkeit
abzutrennen, das auch im Rahmen eines großtechnischen kontinuierlichen Fermentationsprozesses angewendet
werden kann.
Gegenstand ι' Erfindung ist nun ein Verfahren zur Abtrennung Jer nach der Fermentation zurückbleibenden
Kohlenwasserstoffe und Mikroorganisnienzellen
aus einer Fermentationsflüssigkeit, die bei der Kultivierung eines Kohlenwasserstoffe assimilierenden
Mikroorganismus in einer einen Kohlenwasserstoff als Hauptkohlenstoffquelle enthaltenden
Nährlösung erhalten wurde, das duich gekennzeichnet ist, daß die F.-rmentationsflüssigkeit in der Weise
in eine die Kohlenwasserstoffe und die Mikroorganismenzellen enthaltende obere Phase und eine
wäßrige untere Phase aufgetrennt wird, daß in den unteren Teil der Fermentationsflüssigkeit Wasser
oder ein vorher abgezogener Teil der Fermentationsflüssigkeit, das bzw. der unter Druck gelöste Luft
oder andere Gase enthält, eingeführt wird und daß nach der Phasentrennung durch die durch die Entspannung
entstehenden mikrofeinen Blasen die obere Kohlenwasserstoff-Mikroorganismenzellen-Phase abgezogen
und die wäßrige untere Phase gewonnen wird.
Alle Verfahrensschritte können kontinuierlich durchgeführt werden. Gemäß einer bevorzugten Ausgestaltung
werden die gemeinsam abgetrennten Kohlenwasserstoffe
und Mikroorganismen erneut in Wasser aufgeschlämmt und erneut dem vorstehend beschriebenen Verfahren unterworfen.
Mit Hilfe des vorstehend beschriebenen Verfahrens werden die Nachteile der bisher angewendeten
Verfahren ausgeschaltet. Denn es kann dadurch eine wirksame Abtrennung der nach der Fermentation
zurückbleibenden Kohlenwasserstoffe und Mikroorganismenzellen aus der Fermentationsflüssigkeit
erzielt werden, ohne daß für die Gewinnung der beiden Phasen rMe Verwendung einer Vorrichtung
zum Zentrifugieren und Filtrieren erforderlich ist.
Im einzelnen läuft das erfindungsgemäße Verfahren in der Weise ab, daß durch Einführung von unter
Druck gelöstes Gas enthaltendem Wasser oder eines dieses Gas enthaltenden, vorher abgezogenen Teils
der Fermentationsflüssigkeit — als Folge der herrsehenden Druckdifferenz — die gelösten Gase, insbesondere
Luft, in dem unteren Abschnitt des Behälters in Form mikrofeiner Bläschen freigesetzt werden
und aufsteigen. Die hierdurch in den oberen Teil der Fermentationsflüssigkeit geschwemmten
Kohlenwasserstoffe und Mikroorganismenzellen können mit Wasser erneut aufgeschlämmt und wiederum
auf die beschriebene Art und Weise behandelt werden, wodurch eine Abtrennung und Gewinnung der
Kohlenwasserstoffe und Mikroorganismenzellen aus der Fermentationsflüssigkeit bis zu etwa 99% oder
mehr erzielbar ist.
Bei der großtechnischen Anwendung des erfindungsgemäßen Verfahrens kann das flotierte Gemisch
aus Kohlenwasserstoffen und Mikroorganismenzellen aus dem oberen Teil der Fermentationsnüssigkeit
kontinuierlich abgezogen und der untere Teil in Form einer klaren Flüssigkeit kontinuierlich entfernt
werden, während kontinuierlich eine ausfermentierte Fermentationsflüssigkeit zugeführt und
kontinuitrlich mikrofeine Bläschen in der erfindungsgemäßen Weise erzeugt werden.
Das erfindungsgemäße Verfahren ist anwendbar zur Abtrennung von Mikroorganismenzellen zusammen
mit Kohlenwasserstoffen aus bekannten Fermentationsflüssigkeiten, die mit Kohlenwasseisiüm:
assimilierenden Mikroorganismen erhalten wurden. Beispiele für solche Mikroorganismen sind solche,
die zu den Genera Micrococcus. Pseudomonas, Achromobacterium, Arthrobacter, Bacillus, Corneybacterium
und '-lavobacterium gehören. Besonders gut geeignete Mikroorganismen sind Arthrobacter
paraffineus ATCC 21 167 und Arthrobacter roseoparaffineus
ATCC 15 584.
Die folgenden Beispiele sollen die Erfindung näher erläutern. Die darin angegebenen Prozentangahen
beziehen sich, wenn nichts anderes angegeben ist, auf das Gewicht.
Zu 100 1 einer 1600 g L-Glutaminsäure und 4,3" u
restliches η-Paraffin enthaltenden Fermentationsflüssigkeit, die durch Kultivierung des L-Glutaminsäure
bildenden Mikroorganismus Arthrobacter paraffineus ATCC 21 167 bei einem pH-Wert von
7,2 während 60 Stunden unter Verwendung von 10%> (V/V) η-Paraffin als einer Hauptkohlenstoffquelle
erhalten worden war, wurden 20 1 Wasser zugefügt, in dem unter einem Druck von 2 kg/cm2
Luft gelöst war. Das Wasser wurde in den unteren Abschnitt des Behälters eingespritzt. Danach trat
eine deutliche Auftrennung der Flüssigkeit in zwei Phasen ein, eine untere wäßrige Phase und eine aus
ii-Paraffin und Mikroorganismenzellen bestehende
obere Phase.
Die untere wäßrige Phase wurde vom unteren Abschnitt des Behälters abgezogen. Zu der ooeren
Phase wurden erneut 100 1 Wasser zugegeben, und es wurden 20 1 Wasser, das Luft unter einem Druck
vor. 2 kg/cm2 darin gelöst enthielt, in den unteren
Abschnitt des Behälters eingespritzt. Es erfolgte erneut eine Phasentrennung und die wäßrige untere
ίο Phase wurde abgetrennt. Die aus der wäßrigen Phase
gewonnene L-Glutaminsäure betrug 1585 g. Der Pro-7.entgehalt an gewonnener L-Glutaminsäure lag bei
etwa 99,10Zo und der Prozentgehalt an abgetrennten
Mikroorganismenzellen zusammen mit dem n-Paraffin lag bei 96.20Z0.
Um Zellen aus 20 1 einer 0,4 0O restliches Kerosin
enthaltenden Fermentationsflüssigkeit, die durch 4tägige Kultivierung von Arthrobacter roseoparaffineus
ATCC 15 584 bei 30 C unter Verwendung von 4,50Zo (V/V) Kerosin als Hauptkohlenstoffquelle
erhalten worden war, abzutrennen, wurden nach Beendigung der 'Fermentation zusätzlich 0.6 1 Kerosin
zu der Flüssigkeit unter Rühren zugesetzt. Dann wurden 5 I Wasser, in dem Luft gelöst war, zum
unteren Teil der Fermentationsflüssigkeit unter einem Druck von 1,5 kg/cm- zugefügt. Die Flüssigkeit
trennte sich beim Stehenlassen in zwei Phasen, eine transparente untere, wäßrige Phase und eine aus
Kerosin und Mikroorganismenzellen bestehende obere Phase. Nach dem Abziehen der transparenten
Phase aus dem unteren Abschnitt des Behälters wurden die Mikroorganismenzellen zusammen mit dem
Kerosin gewonnen. Die Prozem^ehalt an gewonnenen Mikroorganismenzellen lag bei 95 0Zo.
Es sei bemerkt, daß der Phasen-Trenneffekt durch die Anwesenheit eines Ageregiermittels u. dgl. in der
Fermentationsflüssigkeit noch gesteigert werden kann.
Claims (2)
1. Verfahren zur Abtrennung der nach der Fermentation zurückbleibenden Kohlenwasserstoffe
und Mikroorganismenzellen aus einer Fermentationsflüssigkeit, die bei der Kultivierung
eines Kohlenwasserstoffe assimilierenden Mikroorganismus in einer einen Kohlenwasserstoff als
HauptkohlenstolTquelle enthaltenden Nährlösung erhalten wurde, dadurch gekennzeichnet,
daß die Fermentationsflüssigkeit in der Weise in eine die Kohlenwasserstoffe und die
Mikroorganismenzellen enthaltende obere Phase und eine wäßrige untere Phase aufgetrennt wird,
daß in den unteren Teil der Fermentatior.sfiiissigkeit
Wasser oder ein vorher abgezogener Teil der Fermentationsflüssigkeit, das bzw. der
unter Druck gelöste Luft oder andere Gase enthält, eingeführt wird, und daß nach der
Phasentrennung durch die durch die Entspannung entstehenden mikrofeinen Blasen die obere
Kohlenwasserstoff-Mikroorganismenzellen - Phase abgezogen und die wäßrige untere Phase gewonnen
wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1. dadurch gekennzeichnet,
daß die zusammen abgetrennten Kohlenwasserstoffe und Mikroorganismen erneut
in Wasser aufgeschliimmt und erneut dem Verfahren gemäß Anspruch 1 unterworfen werden
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