DE1645976A1 - Verfahren zur Herstellung von Adenosin und 2',3'-O-Isopropylidenadenosin - Google Patents

Description

PATINTANMXLTE DR. LOTTERHOS - DR.-ING. LOTTERHOS 1645976 FRANKFURT (MAIN)

ANNASTRASSE 19 FERNSPRECHER. (OiIl) 555061 TELEGRAMME. LOMOSAPATENT LANDESZENTRALBANK 4/951 DRESDNER BANK FFM., Nr. 5247« POSTSCHECK-KONTOfFM-Ue?

τ/κ

FRANKFURT (MAIN), 3.JiUQi 1967 Aginomoto GLoO₁ Ine· No·7, 1-chome, Takara««cho_t Ohuo-ku, Tokyo, Japan.

Verfahren zur Herstellung von Adnnosin und propylidenadenosin -

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Synthese von Adenosin und 2^l,3^f«*0~Isopropylidenadenosin aus den neuen Verbindungen 5-Amino-^W©arl»amoyl-1-(2 *, 3 ·', 5 ·«tri-0·«··"^ ß-«D«7ibofuranosy23lmidazol) »M? 5«Amino--*ecarbajioyl»1·' (2 ·, 3 ^l<^*isopropyliden-5**^)*»cetyl-.ß^D-.ribofuranosyl)«· imidazol· '

Adenosin und 2"_l3^l-0-»Isopropylidenadenosin werden seit kurzem in der Medizin angewandt (vgl« französisch· Patentschrift 153 M).

Es wurde gefunden, dass Adenosin und 2^I1 _I3^I-O~lsopropyliden« adenosin in einer Folge von Reaktionen gebildet werden kanten, die die Synthese von 5-Amino-il^^yano-1w( acetyl-ß-D-ribofuranosylO-Imidaaol oder

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imidazol umfasst, die dann in Adenosin bzw. 2·,3*-0-Isopror pylidenadenosin übergeführt werden.

Es wurde gefunden," dass 5-Amino-4-carbamoyl-1-(2^l,5^l,5^f-f>ri-0-. acetyl-ß-D-ribofuranosyl)-imidazol bzw· 5-^»ino«4-carbanioyl~ 1-(2· ,3 ^l-0-isopropyliden-5>i-0-acetyl-ß-D-ribofuranosyl)-.imidazol bei der Reaktion mit einem Dehydratisierungsmittel, wie einem Säurechlorid, in Gegenwart einer organischen Base 5-Amino-4-cyano-1-»(2' ,3' ,5'-tri-O-acetyl-ß-r-ribofuranosyl)-imidazol bzw« 5-AmInO-AwCyBnO-1»(2^l,3^l-0«isopropyliden-5^l*^)ⁱ-acetylw ß-D-ribofurano8yl)-imidazol in hoher iaisbeute liefert·

Das gemäss Erfindung verwendete Ausgangsmaterial oarfeanioyl-1-(2 · ,3 *r$ '-tri-CMicetyl-ß-D-ribofuranosyl)-imidazol lässt sich einfach durch Acetylieren von ^-Amino-^-carbamoyl-1«-ß-D»ribofuranoaylimidazol alt Essigsäureanhydrid herstellen) das 5-Amino-4-carbaaoyl«»1-C2*»3^l-Q*-isopropyliden-5»-0»acetyl·» ß-D-ribofuranosyl)-imidazol durch analoge Acetylierung von ' 4-carbamoyl-1*.(2* ,3 ^f-pO«»isopropyliden-ß-D-riböfuranosyl)-imidazol (vgl. britische Patentschrift 1 065 018)·

Beispiele für organische Basen, die im Verfahren gemäss Erfindung als Katalysatoren benutzt werden können, umfassen

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tert.Amine mit 3 niederen aliphatischen Gruppen, wie Trimethylamin, Triäthylamin oder Tri-n-butylamin, heterocyclische Amine, wie I^jrridln, Lutidin, Heolin oder Collidine Sowie stark basische Ionenaustauscherharze· Die organischen Basen werden in grösserer als äqulmolarer Menge pro Mol gelöste Substanz (substrate) eingesetzt·

Die gemäss Erfindung benutzten Dehydratisierungsmittel umfassen Säurechlorid·, wie p^Toluolsulfonylchlorid, Methansulfonyl« chlorid, Acetylchlorid, Bensoylchlorid, Thionylchlorid oder Carbobenzoxychlorid, sowie Biosphorhalogenlde, wie Riosphoroxychlorid, Riosphortrichlorid oder Phosphorpentachlorid· Di· Dehydratisierünpsmittel werden in einer Menge angewandt» die etwa 3 Mol, vorzugsweise 1 V2 Mol pro Mol gelöste Substanz (substrate) äquimolar ist·

Als zusätzliches Dehydratisierungsmittel kann zur Begünstigung der Reaktion auch 2,2-Diäthexypropan oder Orthoformiat vorhanden sein·

Das Verfahren der Erfindung lässt sich leicht in Abwesenheit von Lösungsmitteln durchfuhren, obgleich Lösungsmittel, wie Chloroform« 1,1,1 -.Trichloräthan, 1,1,2-Trichloräthan, Trime thylphosphat oder Triäthylphesphat - falls notwendig - auch anwesend sein können». Die Reaktion verläuft bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von -10 und +50·0, «·Β_# bei HauÄtemp*ratur· Druck 1st nicht notwendig· Die Zeit bis zur Beendigung der Reaktion nimmt etwa 30 Minuten bis .

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10 Stunden in Anspruch,«- Sie hängt von der Menge der ge·-· lösten Substanzen (substrates), der Art des Katalysators und der Reaktionstemperatur ab·

Zur Gewinnung von
ß-D*«>Γibofurall08yl)-imidazol und 5-^fflino-4«cyano-1.»(2», 3 ·-()■·- isopropyliden-5*-0*ⁱⁱacetyl-ß«D».ribofuranosyl)-iimidazol wird die Reaktionsmischung in Eiswasser gegossen, um unumgesetztes Dehydratisierungsmittel zu zersetzen, danach das Endprodukt mit einem in Wasser unlöslichen Losungsmittel, Jedoch mit Lösungemermögen für das Endprodukt, wie Chloroform, extrahiert und schliesslich das Endprodukt durch Entfernen des lösungsmittel β isoliert· Das rohe Endprodukt kann durch Behandlung

iimit geeigneten Lösungsmitteln ,wie Methanol, Äthanol oder·

Chloroform, gereinigt werden·

Sie Papierchromatographie des isolierten Produktes ergab immer nur einen einzigen FIeCk₉ die Anwesenheit eines weiteren Nebenproduktes konnte nicht festgestellt werden«.

Es wurde weiterhin gefunden, dass 5-Amino-^*-cyano-»1«*(2^t ,3* »5*··

1«*(2 ⁱ,3 '-Ot-isopropyliden-i? '-O-acetyl-ß-D-ribofuranosyl)«.

Ortho-

Imidazol bei der Reaktion mit Formamid oder -fiormiat und Ammoniak Adenosin >bzw«2·_t3^l«0«l8opropylidenadenoein in höher Ausbeute liefern· In den Verfahren gemäsa Erfindung können ausser 5-*miho-4«cyano-1.-(2· ,3· »5 '-

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ribofuranosyi)—imidazol und 5-*Aiaino-«4-«cyano-1< >#(2 · iso.propyliden*5^l^"^C8tyl-ßWD-»ri"bofuranosyl)-»imidazol auch

und

cyano-»1-(2 *, 3 ^l~0~isopropyliden~ß«*D-»ribofuranosyl )«imidazoIL

al
als Aüsgangsmateri-verwendet werden· 5~Amino--4«»cyanow1-ß*»-

D-ribofuranosylimidazol lässt sich, durch Hydrolyse von

1»»(2 * _t3 %5^r~triU)^cetyl~ß~IWribaf uranoeyl)-

imidazol mit Ammoniak herstellen₈

Güsopropyliden-ß-D-rit)ofuranosyl)«imida!8ol durch Umsetxen von 5-Amino·^—carbamoyl-1«»C2 *, 3 ^f'-0«-»i3opropyliden-ß-D-ribo«· furanosyl)-«imidazol mit einem Dehydratisierungsmittel in Gegenwart eines Amins, wie in den niter oben angegebenen Reaktionen· Es kann auch aus 5-Amino««4-cyano-1-»(2^t _s3···©*» isopropyliden-5^|ie»0«>acetyl-ß«*D*-ribofuranosyl)«eimidasOl durch. Hydrolyse mit Ammoniak gewonnen werden* '

Formamid wird in einer Menge von 5 bis 30 MbI pro Mol ge·· löste Substanz (substrate) eingesetzt und die Reaktion, unter !Erhitzen ζ »Be unter Rückfluss in einem verschlossenen Rohr durchgeführt« Die Reaktionstemperatur liegt beim Siede» punkt dta Reaktionesyetems oder innerhalb eines Bereichs von 90 und 250*0, vorzugsweise von 100-und 180*0« Die bis xur Beendigung der Reaktion erforderliche Zeit belauft sich auf 30 Minuten bis 5 Stunden» ·

Das im Verfahren gemäss Erfindung verwendete c-Vormiat um«- fasst dit niederen Alkyl» st er der o-imeisensäure * wie v;«yaei»»n-

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Qrthosäuremethylester, «äthylester oder -propylester. Das -formiat wird in einer Menge von 1,2 bis 5 Mol bei 5-Amino~4i*cyano·* 1-(a^l,3",5^l«tri-^acetyl-ß-D-.ribofuranoeyl)«imidazol oder 5-JLmino-4-cyano»1«(2^f ,3 *'»0«»lsopropyliden~5 »'-CWaoetyl-ß-D-ribofurano8yl)«#imidazol, von 2,4- bis 10 Mol bei 5-Ämino-A-* cyano-1«*(2 *,3 ^l«A*E8opropyliden-P—D-»ribofuranosjl)i-imidazol Und von 4^8 his 15 Mol bei 5-Amino-4<M:yano-1«™§-D-ribofiirano·· sylimidazol angewandt«

Ammoniak wird in einer Menge von 2 bis 1o Mol pro Mol ' 5-Amino-^·-cyano-1-.ß-D-ribofuraiioaylimidazol oder deren Derivaten eingesetzt·

Im Verfahren gemäss Erfindung können

Orthoribofuranosylimidazol und deren Derivate mit .a-formiat und

Ortho-Anmoniak in einem Mischsyetem oder zunächst mit ü-formiat

xu 4-Cyano-^-alkoxymethylenaminoiaiidazolribofuranosid umgek ' setzt wnd das !Furanosid gegebenenfalls nach Isolierung mit

zur Reaktion gebracht werden«

Di« Reaktion wird beim Siedepunkt des Reaktionssystems oder bei einer Temperatur im Bereich von 90 bis 25O*C, Vorzugs«·

Orthoweise von 10© bis 180·C, durchgeführt· Werden u-formiat und Aioioniak getrennt zur Reaktion gebracht, wird die Aminie« rungsreaktion vorzugsweise unter milderen Bedingungen durchgeführt als die vorangehend· Reaktion, beispielsweise indem

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man Ü^e Reaktionsmischung einige Stunden bei Raumtemperatur rührt· Obgleich die Anwesenheit von Lösungsmitteln nicht unbedingt notwendig ist, wendet man das Ammoniak bei der praktischen Verfahrensführung in Form eines mit Ammoniak gesät*· bigten niederen Alkohols an·

Werden gemäss Erfindung 5~Amino-ⁱ+~cyano-1«-ß~D-ribofurano8id-.

imidazo! oder ^-Amino^-pcyanö-i-CS¹ „5* _l5^l<-tri-o«acetyl-»ß«wIW

Orthoribofuranosyl)-imidazQl mit -forraiat und Ammoniak umgesetzt ι ei'hält man als Endprodukt Adenosin; und bei Verwendung von S-^Amino-^-cyanoH-CS¹ ,J'^O-isopropyliden-ß-D-ribofuranosyO-imidazol oder 5-Amino-A«»cyaÄo-1«*(2^l _t3^r-0-Isopropyliden-5^l-0-acet;;yl-ß-IUribofuranosyl)-imide2;ol ist das Endprodukt H*^¹-O-Isopropylidenac-enosin·

Ortho-Zur Icolierung des Endproduktes wird das vmumgesetzte -focmiat aus der Roaktionsmischung abgedampf ζ% ... ■ Der erhaltene Rückstand kann aus einem geeigneten Lösungsmittel, wie Wasser oder wässrigem Alkohol, umkristallisiert werden».

Das Verfahren der Erfindung ermöglicht somit, Adenosin, sowie

2* ,5^t-0~Isopropylidenadenosini₉ das nur unter beträchtlich hohen Kosten als Reagens zugänglich ist, und dessen verschiedene pharmazeutische Wirkungen «or kursem festgestellt worden sind j in einer Folge von einfachen Eeaktionen aus dem billig erhältlichen 5-^Amino-²^^arbamoylwi-ß-Deccibofuranosyliaidai!ol in industriellem Maßst&fe herzustellen·

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«8*

Die Herstellung gewisser Ausgangsmaterialien, die im Verfahren gemäss Erfindung benutzt werden, ist weiter unten der Einfachheit halber beschrieben, jedoch ihre Herstellung als Teil des Verfahrens gemäss Erfindung wird nicht beanspruchte ⁼

Herstellung von 5"Amip,o«B#«>oagbaiaoyl«-1-»(2 '»3**5 '-tri-o-acetylf*«*D«»ribofuranosyl )~inidazol

10,5 g 5~Amino»^4«carbamoyl~1«ß«D-ribofuranösyl-imidazol gab man zu einer Mischung von 14-,7 g Essigsäureanhydrid und 21,9 g Triäthylamin und rührte die Mischung 4 Stunden bei 50*0· Sodann konzentrierte man die Reaktionsmischung unter vermindertem Druck, versetzte den erhaltenen Rück« stand mit 80 ecm Benzol« zentrifugierte die ausgefallenen Kristalle ab und kristallisierte sie aus einer Lösung am·* mittelmischung von Essigeeter und Benzol um (1*1 Vol/Vol)· Man erhielt 15*3 g reine Kristalle· Smp* 63⁹G* Ausbeute 81 %«

Bei der Elementaranalyse der Kristalle wurden folgende Werte erhalten»

gefunden 46,64 5,25 14,61

berechnet für Q₁₅H₂₀O₉N₄ 46,87 5»25 14,58

Beiä Papierchrmoatogramm der Kristalle mit einem System aus einer Lösüxtgeaittelmischung von n-Butanol, Essigsäure und Wasser (4*1x1 Vol/V©l)wuaa<i nur ein einziger fleck von Bf 0,64 beetimmt»

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Ü¥-Al3sorptioiisspektrea. der Kristalle zeigten -A₄ wax 247 (S) und 270 ϋΐμ bei pH 1 und A. max 2?o Βμ bei pH.13©*

"Das Herat der Kristalle hatte einen Schmelzpunkt von 146 las 147°G. Bei der Elementaranalyse des Ficrats wurden folgende Werte erhalten*

• ο (Jt) .&.(*)"■ mm

gefunden 40,02 4,35 15*37

berechnet für G₂₁H₂₃O₁₅Ii₉ 39_S9# 3,99 15,53

• ^H2°

Experiment 2

Herstellung von 5-iünino^^arbamo;yX~1~(2* _t3^y~0-»isopropylide2i,-»· 5' -O-acetyl-B-D^ribofuranosyl )^

29,8 g
Eine Btsohuiig von/5<-Aadno^*4arbamoyl*1<H»C2 ^?, 3 ^i:««0»isopropyliden«· ß-D-aribofuranösyl)«»imidaz©I_t 13>3 g Essigsäureanliydrid, 19,8 g TrinWbutylamin und 50 ecm Chloroform wurde 4- Stunden bei 50⁰G' gerührt, die erhaltene Reaktionsmischung unter ver· mindertem Druck eingedampft und der erhalten© Sirup in der in Experiment 1 beschriebenen Weise gereinigt* Man erhielt einen gereinigten Sirup von 5-Ämino-4-«i«arbamoyl-i^e(2^t _f3^l«0--isopropyliden-5*-0«^cetyl^^-ribofuranosyl)*9-iiiiidaaol* Das reine kristalline Pierat des 5-A^no-^^arbamoyl«^4«»(2^|: _t3·'·· O-isopropyliden-5 ^fl-0~fi.cetyl««g*«D»ribof uranösyl)WimidaaoIe hatte eineft Schmelzpunkt von 168 bie 169⁰0^^ejNur ein einziger B¹Ieck von Rf 0,83 wurde bei einem Papierchromatogramm des Sirups von; 5-toino-4^arbam©yl«"1«»(2^1:, "QHBicetyi-0*-D-ribofuran6syl)«timidazol ermitteli?«

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Die W^beorptionsepektren des Sirups zeigten λ»max 247 (S) und 27o m]L bei pH!1 und. λ. max 2?o wy, bei .."pH. 13«

Experiment p

4,ο g 5^Amino«4—carbamoyl-^l-^2¹,3*«»O«-isopropyliden.-ß-D« rihofuranosyl)«.imidazol wurde in 50 ecm lyridin gelöst, 2,13 g p-Soluolsulfonylcnlorid unter Kühlen zügefügi und die Mischung 7 $age stehen gelassen. Danach behandelte man die Reaktionsmischuni.g in derselben Weise wie in Experiment Man erhielt 2,o g reines kristallines 5-Amino-4«cyano-»1«» (2V3••0-.isopropyliden*-ß-D<-ribofuranoßyl)-»imidazol als farblose Nadeln· &ηρ_β 177*0 CZersetzung)«.

Bei der Elementaranalyse der Kristalle wurden folgende Werte erhalten»

gefunden 51 ,oo 6,23 19»69

berechnet für OjgH^Q^ $Λ ,42 5,75 19,99

Me UY-AbsorptionispeSiren der Kristalle zeigten -Xmax

X" '■'-'.- » , _, . _r max 246 mμ in Athanollösung

und 248 mn in o,1 tt

ml

Das IHi^LbsorptionsSpektrum zeigt« vmax 2215 «m , die der zugerechnet wird _fr

Der Hf-Wert des Papier ehr omatograusma betrug 0,80 in einem Lösungsmittel d·β n-ButanoleyetemSe

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Beispiel 1

Ie.il A Herstellunp; von 5-

g-D-ribofuranosyl)-imidag öl

1912 g 5-Amino-4*KiarlJamoyl-1«»C2 * »3 *
ribofuranosyi)-imidazol wurden in 14© ecm Chloroform gelöst, 25,5 g Trläthylamin zugesetzt, die erhaltene Mischung unter Kühlen alt Eis gerührt, ihr dafcach innerhalb von 3 Stunden eine Lösungsmischung von 7,18 g Phosphoroxychlorid und 4^ ecm Chlorofora zugetropft, die erhaltene Reaktionaraischung weitere 1 V2 Stunden gerührt und danach in 5o cca Siswasser gegossen· Pie erhaltene Chloroformschicht wurde

jait
je zweimal mit 5o ecm Wasser, 25o ecm o,o1 η HCl und mit 25 com Wasser gewaschen· Danach trocknete man die Chlroform— schicht mit wasserfreiem Dinatriumsulfat und dampfte das Chloroform ab· Man erhielt 12,9 g 5-Amino-4-cyano-1-»(2^t,3^l«f5^l«. tri-O-acetyl-ß-D-ucibofuranosylimidazol als farblosen Sirup in 71%iger Ausbeute· Der Sirup wurde durch Kolonnenchromatographie an Tonerde mit Essigester als Lösungsmittel gereinigt« Die Elementaranalyse des gereinigten Sirups ergab folgende Werte:

σ (%) η (%) κ■'■(%)

gefunden 48,91 4,73 151⁴Ml-

berechnet auf O₁₅H₁QO^N₄ 49,18 4,95 15i3o

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Das 5·^

furanosyl)—imldazol hatte folgende Eigenschaften«

1) farbloser Sirup

2) Ef ■ o₉89 im oben angegebenen Lösungsmittel

m 242 Εμ "₌ . ' ~

⁵« 248

Tail ρ

Herstellung von 5-Amino«^-*yajio-1-ß-D-ribofuranoeylimidazol

6,5 g 5-Amino-4-cyano-1-(2^|i,3^f,5^l-tri-O-acetyl-ß-D-ribo— furanosyl )-imlda2ol wurden in einer Mischung von 15 ©om konz· Ammoniakwasser und 15 ecm Methanol gelöst, die erh*l« tene Reaktionsmischung unter vermindertem Druck eingeengt und der erhaltene Rückstand von Wasser gereinigt· Man erhielt 3,92 g (91»6 %) reines kristallines 5-Amino-4-eyano~ 1-ß-D-ribofuranosyliaidazol· Smp* 207_t5 bis 208·0·

Beispiel 2

w Biν in Experiment 2 erhaltene rohe Sirup von 5-Amino-4· carbamoyl-1«·(2 *Ί3 ⁱ-0«"isopropyliden-5 ••-O'Micetyl—ß—D—ribo·» furanosylimidarol wurde in 200 ecm Chloroform gelöst, mit 40,5 g Triethylamin versetzt, der erhaltenen Mischung unter Kühlen innerhalb von 3 Stunden eine Mischung von 15,3 S Phosphoroxychlorid und 85 ecm Chloroform zugetropft, die erhaltene Reaktionsmischung weitere 2M2 Stunden gerührt, danach mit 100 ecm Wasser versetzt und genügend geschüttelt« Die Chloroformschicht wurde je zweimal mit 5o ecm Wasser

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wasserfreiem
gewaschen, mit i Dinatriumsulf&t getrocknet und das Chloroform abgedampfte Den Rückstand versetzte man mit 3o com Benzol, wobei man einen Kristallnieder·* schlag erhielt» den man aus Essigester umkristallisierte« Man erhielt 20,9 S (65 ^) meines kristallines 5-Αππ.ηο-Λ~· cyano-1-(2' ,3 ^l-O-»Isopropyiiden-5*«O-a0etyl-ß«D*-ribofurano·* syl)-imidazol« Smp« 138,5 «

Bei der Elementaranalyse der Eristalle .wurden folgende Werte e rhalten '*

O (JS) H m ί.(«

gefunden 52*19 5*55 17*^6

berechnet für C₁₄H₁₈O₅If^ 52,17 5,63 17*32

Beispiel 3
1,92 g

ribofuranosyl)imidazoi löste man in S com I^rridin, fügte unter Kühlen 1,4-3 g p-Ioluolsulfonylchlorid «τι, rührte die Mischung danach 10 Stunden bei 5Q*G* goss sie dann «i* auf 50 OGitt Eiswasser und extrahierte das Eüdprödufct mit 30 cc» Chloroform aus der wässrigen Lösung. Das iJir-^Bsprjp·* ti ons Spektrum der Chloroformschicht sowie einiFleek auf einem Bapierohromatogrämm der Sehichtij das mit einem mittelsystem von n-Butanol entwiakelt wurde» stimmten mitr denen dais in Beispiel 1 erhaltenen 5^Amiiio^»^55aao—'t«»C2i^ tri-O-aoetyl-ß-D^ribofuranoeylimidazols völlig übereta,». Messung der UY-Absorptlonsbande ergal?, dass das 5-Aminp«!4# eyana.-1«*(2^f ,3 · ,5^f-tri^^aeetyl-ß'-D-.ribofuranQSyl^^)*-imida¥öl in 67%iger Ausbeute gelsildet wolden war*

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Beispiel 4 -

5-iÄJfiino-4«- carbamoyl-1 - (2 .·, J»-0~i sopropyliden-5 * -O--ace tyl— ß-D-ribofuranosylimidazol wurde aus 2,98 g des in Experiment 2 hergesieLlten 5-Amino^-carhamoyl~1-(2 V^'^O-isopropyliden-ß-B-ribofuranosjjrl^imidazols hergestellt, das in 2o ecm Tri-n-butylamin gelöst und innerhalt von Jo Minuten unter Euhlem mit o»785 g Acetylchlorid tropfenweise versetzt wurde» Die erhaltene Reaktionsiaischung gossAaii auf 50 com Eiswasser» wusch die erhaltene Chlor of ormschiclxt zweimal mit je 20 ecm Wasser« dampfte nach dem Trocknen über wasserfreiem Dinatriumsulfat das Chloroform ab und kristallisierte die erhaltenen Rückstände zweimal aus Essigester um· Man erhielt 1_fo9 g (54 %} reines kristallines5-4ünino-4-ecyano-1*(2 * ₁5 '-0-IeOPrOPyIIdBn^ ^f -O-ace tyl-ß-D-ribofuranosyl)-imidazol· Smpv der Kristall· 138 - 139^αΟβ

Beispiel 5 "■■. ■■ ^ -- ..;"--■ '".". — -

Man gab 30 ecm mit gasförmigem Ammoniak gesättigtes Äthanol zu einer Mischung von 1,4 g 5-Anino-4«eyatt©'-.1*.(2'_t3^f«-0«· isopropyliden-ß-D-riböfuraaosyl)—imidazol und 8,2 ecm Qs»tho-Ajaeisensäureäthylester, hielt die Mischung 6 Stunden ia

- .--■""■-"■ - ' - ■. .. ■ η einem verschlossenen Rohr auf 150°C und dampfte das Äthanol aus der Reaktionsmischung ab· Der erhaltene schwarze Rück« stand wurde in 50 ecm Wasser gelöst, um ihn unter Erhitzen zu extrahiere»)-Niederschläge wurden Äbfiltriert und *e» die erhaltene Mutterlaugeι auf■ "etwe Io ccm eingeengt_t wobei

rohes kristallines 2^f|5^l-0~Isopropylidenadenosiia ausfiele· Die rohen Kristalle behandelte man mit Aktivkohle, wonach

reine
man 1,o3 g (69 %) .Kristalle als farblose Nadeln erhielt»

Smp· 217 - 218^eC

Der Mischechmelepuiikt dieser Kristalle mit 2 % 5*-O-Ieo«- propylidenadenisittj das von authentischem Ädsnosin dursh Umsetzung mit Aceton erhalten worden war, zeigte keine Erniedrigung· Weitere Eigenschaften₉ wie Hf-Werte, UT- und IR-^Absorptionsspektren stimmten völlig mit denen des 2%3*~ O-Isopropylidenadenosins überein, das weiter oben getrennt hergestellt worden war·

Beispiel β

Eine Mischung von 4,48 g 5-Aa&no-4«^yano-1—(2¹ _t3⁸i«0«iso-

Orthopropyliden-ß-D-ribofuranosyl)-iEiidazol und 20 ecm t -.ameisen-

säureäthylester wurden auf einem Olhad von 150·G 3 Stunden

Ortho-

unter Rückfluss "erhitzt. Nicht umgesetzter -ameisensäure··

ΕΨ ■ .
äthylester wurde ao/&ampft_f wobei man einen ßirup erhielt,

den man in 40 ecm Äthanol lösb·«. Danach leitete man in die

Athanollösung gasförmiges Ammoniak bis zur Sättigung, unter Kühlen mit Wasser ein und hielt die Mischung 3 Stunden bei Raumtemperatur· ~ _ .

Das Äthanol dampfte man aus der Reaktionsmischung ab, lö*e d&n erhaltenen farblosen Sirup in einer Mischling von 1o ecm Methanol und 1o ecm Wasser, rührte die Lösung 3 Stunden bei

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3 bei Raumtemperatur, stellte den pH-Wert der Lösung auf pH 1o -11 mit 4 η NaOH-Lösung ein und rührte weiter, bis farblose Kristalle ausfielen· Nach 1 Stunde Rühren betrug -der erhaltene Niederschlag 5,73 g und sein Schmelzpunkt 212 - 216,5*0· Nach Konzentrieren der Mutterlauge erhiilt man 0,84- g einer weiteren Kristallfällung mit einem Schmelzpunkt von 218 - 219*0« Ausbeute der % und 2· Kristallfällung des 2*,3⁹w0«lB0ppopylidenadenoslnsi 93 %. Diese Kristalle kristallisierte man aus Wasser um. Schmelzpunkt der erhaltenen reinen Kristalle:218 «219*0· Die Kristalle stimmten in ihren Eigenschaften völlig mit denen des nach Beispiel 5 hergestellten 2^t _f3^>M0*l8opropylidenadenosins hinsichtlich des Mischechmelepunktee, der Rf-Werte sowie der UV- und IR^Lbsorptionsepektren überein·

Beispiel 7

Ein· Mischung von 2,8o g ^-Amino-^-cyano-i-CS'j^'-O-isopropyliden-B-D-*ribofuranosyl)~imidai:ol und 1o ecm Orthoameiseneäuremethylester hielt man M- Stunden bei 16o*C in einem geschlossenen Rohr, dampfte unumgesetzten Orthoameisensäuremethylester ab, setzte den Rückstand in der in Beispiel .6"beschrie-' benen Weise mit Ammoniak um, wobei man 2,73 g (Ö8,6 %) rohes kristallines 2¹,i'-O-Isopropylidenadenosin erhielt· Smp# 215 - 216*0 ·

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Beispiel 8

Eine Mischung von 2,80 g 5-Amino-4-«cyano-«1-(2^l _l5ⁱ-0~iso-

Orthopropyliden-ß-D—ribofuranosyl)~imidazol und 1o ecm .-ameisen-

säureäthylester erhitzte man ä V2 Stunden unter Rückflus*,

Ortho-

dampfte nicht umgesetzten >-$meisensäureäthyle8ter unter vermindertem Druck ab, löste den erhaltenen Rest in 5 ecm Methanol} gab 5 ecm konz» Ammoniak hinzu und rührte die Mischung, wobei eine exotherme Reaktion stattfand· Sie Reaktionsmischung liess man 3 Stunden bei Raumtemperatur stehen und engte sie zur Kristallisation (neutralize) ein«. Es wurde angenommen) dass es sich bei den Kristallen, die rundherum im Kolben ausgefallen waren, um ^•^•«•©••IaQpropyliden^'^iäthoxymethyladenosin handelt·« Daa Konzentrat und die Kristalle löste man in einer Mischung vom 5 ecm Methanol und 2 ecm Wasser, stellte den pH*-Wert der Lösung mit 6n HGl auf 3 ein und rührte die Lösung 15 Minuten· Danach stellte man den pH-Wert der Lösung mit 4n HaQH. auf 10-11 ein und rührte die Lösung 30 Minuten, wobei, farblos· Kri·» stalle ausfielen· Nach 30 Minuten Rühren erhielt man 2,76 g (89,6 %) farbloses kristallines 2^I,3"-O«isopropylidenad*nosin· Smp, 215 - 216*0· Die rohen Kristalle hatten nach Umkristallisatlon aus Methanol einen Smp· von 217 « 218*0U

Beispiel. ,9

Eine Mischung von 2,8 g 5-Amino-4*oyane-1«(2· ,3^r-O-i8o*»- propyliden-ß-D-ribefuranoByD-iaidaiol und 5 cob FormamlA hielt mail 3 Stunden in einem geschlossenen Rohr auf 16ο°<3»

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-18- Ί645976

Papierohromatographie ergab, dass sich in der Reaktionär, mischung 2¹,3'-0-»Isopropylidenadenosin gebildet hatte» Das nicht umgesetzte Formamid destillierte man unter vermindertem Druck aus der Reaktionsmischung ab· Aus dem dabei erhaltenen Rückstand erhielt man nach Umkristallisation aus Wasser 1,42 g (46,2 #) reines kristallines 2 V,3 M)-Isopropylidenadenosin· Smp». 217 - 218·0_#

Beispiel 1o

Eine Mischung von 48o mg fj-Amino^-cyano-i-ß-Duribofuranosyl· imidazojnmd 2o mg -Aineisensäureäthylester erhitzte man: 6 Stunden unter Rückfluss, engte die Reaktionsmischung unter vermindestem Brück zu einem Sirup ein, den man mit 2o ecm Äthanol, das mit Ammoniak gesättigt war, versetzt·« Di· Mischung Hess man über Nacht stehen, engte sie dann ein und löste den erhaltenen Rückstand in 3 ecm 5o%igem wässrigem Methanol· Die Lösung rührte man bei Raumtemperatur 30 Minuten bei pH 3, um die Diäthoxymethylgruppen aus den 2· ,3 ^l f? '-Stellungen abzuspalten, und stellte den pH*»Wert der erhaltenen Lösung auf 8,ο ein, wobei man einen kristallinen Niederschlag erhielt, der nach Umkristallisation aus

und
Wasser/ 24—stündigem Trocknen über Phosphorpentoxyd bei ver— minder tem Druck 3o4 mg reines kristallines Adenosin /gab» Auebeut· 57 %· Smp. 233 - 234·G₀

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Beispiel 11 Eine Mischung von 5-Amino-4«Hsyano«.1-(2^l|3^l-0-isopropyliden-

Ortho-5«-0-acetyl-P-D-ribofuranosyl)«imidazol und 10-ecm o-Ameisen·» säureäthylester erhitzte man 1 Stunde unter Rückfluss» engte die erhaltene Reaktionsmischung innerhalb einer Stund· an der Atmosphäre auf 4 ecm ein und destillierte den rest-

Ortho-Iichen Hsi^eisensäureäthylester unter vermindertem Druck ab« Den erhaltenen Sirup löste man in einer Lösungsmittelmischung von 2 ecm Methanol und 2 com kon««Ammoniak und Hess die Mischung über Nacht stehen· Die ausgefallenen Kristalle ergaben nach Umkristall!sätion aus Methanol 1,24 g (81 % Ausbeute) reines kristallines 2¹ _t3*-O-.Ieopropylidenad«noßin. Smp» 218 ·.

Beispiel 12 Eine Mischung von 18,7 g 5-ABino-4-cyano-1«»(2^lt3S5ⁱ'-triw0-«

Orthoacetyl-ß-D-ribofuranosjpL ) -imidaeöl und f5# ccm . -Amei sensäur·-

I«

äthylester erhitzte man 1 Stunde auf einem Ölbad auf 135··Ί

Ortho-

dampfte nicht uag**etstern -ameisensäureäthyleeter unter ver·

mindertem Druck ab, fügte des Rückstand 2o ecm Äthanol »u, das mit Ammoniak gesättigt war« und erhittt· die Mischung 2 Stunden im geschlossenen Rohr auf 80⁰C* Die nach dem Ab«, kühlen erhaltenen ausgefallenen Kristall· kristallisiert· man zweimal aus Wasser um und trocknete sie bei verminderte« Druck über Biosphorpentoxyd* Man erhielt 9,4 g reines kristall lines Adenosln· Ausbeute! fo %+

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Claims (1)

1. Pa t e nt an spruch · ■

   Verfahren zur Herstellung Von Adenosin bzw. 2¹, projiyliienadenosin,

   dadurch gekennzeichnet, dass 5-A.niino-4-—carbamoyl—1«·(2* ,$' ,5¹ — tri-O-aaetyl-ß-D-ri'bofuranösyl^imidazol bzw· 5-Amino-A-carb— araoyl-i-^ * ,5 '-»O-isopropyliden-5 '-O-acetyl-ß-B-ribofuranosyl)· iraidazol mit einem Dehydratisierungsinittel in Gegenwart einer organischen Base zu 5-Afflino-4~cyano-1-(2^l, J¹15*— t p~D-»ribofuranpsyl)— imidazol bzw· 5-Άιη1ηο·Ά—cyano—1·(2· , isopropyliden^5^fi-0-^cetyl—ß-»D—ribofuranosyl)*»imidazol umgesetzt und die erhaltenen Verbindungen gegebenenfalls nach Hydrolyse zu 5-Air.inq~4—cyano-ti^pl-D-ribofuranosyliraidazöl bzw. 5-Amino-4«cyanp-.1— (2¹,3'«O-isopropylidenimidazol mit Formamid oder niederem Alkylorthoformiat und Ammoniak umgesetzt wftrden»

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