DE1617475A1 - Pharmakologisch wirksame Substanz aus Ravensara aromatica und Verfahren zu ihrer Gewinnung - Google Patents

Description

FARBWERKE HOECHST AG.

-... . Frankfurt (M)-HWut

Anlage 1

zur Patentanmeldung Fw 30. Mai 1967

- 5409 ^Dr· Ts/Li

Pharmakologisch wirksame Substanz aus Ravensara .aromatica und Verfahren zu ihrer Gewinnung

d_er vorliegenden JErfindung ist eine pharmakologiech' hochwirksame Substanz mit stärker und lang anhaltender bltdrucksenkendejr Wirkung aus Ravensara aromatica. Ravensara aromatica.ist eine zur Familie der Lauraceen ' gehörende Pflanze, die auf Madaga*kar vorkoiiunt und auch* ^: * unter der Bezeichnung Lauru« «roniatica und Agathöphyllu» rftvcnsarn bekannt ist. '

D.ie Substanz bildet kleine farblose Nadeln (aus Alkohol), die bei 23O°C unter Zersetzung schmelzen. Sie beeteht au· Kohlenstoff*, ÜABaeratoff, Saueretoff und Sticketoff{ di· quantitative Analyse liefert folgende Wertef V ·

C: 62,9 62,5

N: k,0 4,2

Die Biaasenspektroioetrische MolekulargewichtsbestiBuaung ergab ein Molgewicht von etwa 355* Die Substanz zeigt eine

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Drehung von /j/^7 2o ~ +172° (in Äthanol) und besitzt UV-Maxima bei 270 πιμ (Ig^₁ = 4,622) und 3OO m|i (lg£₂ = 4,249) (in Methanol). Das IR-Spektrum (in KBr) "-eigt Maxiina bei folgenden Wellenlängen (in μ ):

2,85 (27); 3,12 (24); 3,32 (27); 3.3? (29)ϊ 3,4l (26); 3,52 (37); 6,,2β (19); 6,03 (8); 7,02 (S); 7,4O (b'i) ; 7,79 (27);. 8,19 (6); 8,50 (23); 8,73 (4θ); 9,01 (16); 9,61 (18); 10,02 (15); 10,35 (32); 10,55 (32); 10,81 (45); 11,0 (56); 12,38 (29); 13,2O (54).

(Die Durchlässigkeit in % ist jeweils in. Klammern hinzugefügt,

Bei der DünnschichtChromatographie an Kieselgel "G" %eigt die Substanz im System Essiapster/Butanon/Aiiieisensäure/Wasser 5.OiIsI einen R^-Wert von 0,36. Sie läßt sich im Chrornatograram mit Dragendorff—Reagenz als orangeroter Fleck sichtbar machen,.

Die Substanz is,t leicht löslich in niederen Alkoholen wie Methanol, Äthanol,_;Propanol und Propylenglykol sowie in Wssser, dagegen wenig löslich in Iveißeia ΟΙιΙογοΓοππ und heißem Aceton und unlöslich in Petroläther, Benzol, Tetrachlorkohlenstoff, Äther, Tetrahydrofuran und Dioxan. Mit Silbernitrat, Bleiacetat, Reineckesalz, Phosphor^ , wolframsäure und Phosphormolybdänsäure liefert sie grau- bis braungefärbte Niederschläge.

Die erfindungsgamäß erhaltene JSuijstanz zeichnet sich durch eine starke und langanhaltende blutdrucksenkende Wirkung aus. So wird bereits mit 0,5 mg/kg i-v. der Blutdruck am Hund für ca. 25 Min. um 50 mm gesenkt. Mit 1,5 mg/kg i.V. wird eine■Blutdrucksenkung von 75 ran» bewirkt, die nach 30 Min. noch nicht ausgeglichen ist» Die Herzfrequenz wird vorübergehend geringfügig gesenkt. Atmung und EKG werden nicht beeinflußt.

BAD ORiQfNAL

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Man isoliert die Substanz aus der Rinde von Ravesiisära aromatica, die zweckmäßigerweise vorher getrocknet und zerkleinert wird. Zur Extraktion verwendet man niedere Alkohole, vorzugsweise Methanol oder Äthanol. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels hinterbleibt ein Sirup, der zur Entfernung anderer hochwirksamer öliger Substanzen einer Destillation im Hochvakuum unterworfen wird. Der feste Destillationsrückstatd kann zur Reinigung an einer Säule, beispielsweise an Äluminiumöxyd oder Siücagel Chromatograph!ert werden. Als Elutionsmittel verwendet man organische Lösungsmittel, die je nach ihrer Elutions- , -_; """ fähigkeit 2 - 3Ό% eines niederen Alkohols, vorzugsweise Methanol oder Äthanol enthalten. Geeignete Lösungsmittel sind beispielsweise Benzol, Chloroform, Methylenchlörid, ' üi-isopropyliithei-, Sssigester, Dioxan und Tetrahydrofuran. Das jeweilige !Mischungsverhältnis zwischen dem organischen .Lösungsmittel und dem Alkohol läßt sich durch Vorversuche ermitteln. Bewährt haben sich z.B. Lösungsniittelgemisehe wie Chloroform/Methanol 90:10 und Benzol/Methanol 80:20. Die Viricsubstanz kristallisiert aus dem Eluat in schwach gefärbten

Nadeln aus, die durch Umkristallisation aus Äthanol

gereinigt werden können. -

Es ist zweckmäßig, die Rinde vor der Extraktion des Wirkstoffes von lipoidlöslichen Anteilen zu befreien, beispielsweise durch Extraktio« mit Petroläther oder Tetrachlorkohlenstoff . Hau kann auch vor der eigentlichen Extraktion mit Alkohole», die oben erwähnten wirksamen Öle durch Extraktion mit Chloroform entfernen. Diese Extraktion sollte vorteilhaft bei Raumtemperatur vorgenommen werden, da die erfindungsgemäße Substanz vie oben erwähnt in heißem Chloroform teilweise löslich ist· Nach der Chloroformextraktion wird die Rinde dann mit Alkohol extrahiert und der Extrakt

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wie beschrieben aufgearbeitet.
Beispiele

1. 465 g Rinde von Ravensara aromatica wurden im Soxhlet-Apparat zunächst mit Petroläther, dann mit Methanol erschöpfend extrahiert. Der Methanolextrakt wurde eingedampft, wobei ein sirupöser brauner Rückstand hinterblieb (29 g)· Durch Destillation bei 70° Badtemperatur und 1 Torr wurden ölige Substanzen abdestilliert. Der feste Rückstand der Destillation (19 g) wurde auf 10 g Aluminiumoxyd (Woelm neutral, Aktivitätsstufe I) aufgezogen und an 300 g Aluminiumoxyd chromatographiert. Unerwünschte Begleitstoffe wurden mit Chloroform eluiert. Die Wirkfraktion ließ sich mit Chloroform, das 10 % Methanol enthüt, ablösen und kristallisierte aus dem Eluat in schwach gefärbten Nadeln. Durch Umkristallisieren aus Äthanol wurde sie in Form färb- und geruchloser Nadeln erhalten. Ausbeute: 7" mg.

2. 529 S Rinde wurden mit 2 1 Chloroform bei Raumtemperatur 1 Stunde gerührt. Dann wurde abfiltriert und der Vorgarj noch zweimal wiederholt. Danach wurde die Rinde im Soxhlet mit Äthanol (96 ?6ig) extrahiert. Der beim Eindampfen trocken anfallende Rückstand (25 g) wurde auf 15 g Silicagel (Merck, Korn größe 0,2 - 0,5 mm) aufgezogen und an 500 g Silicogel chromatographiert. Mit Benzol wurden die Begleitstoffe eluiert. Mit Benzol/20 % Methanol wurde die Wirkfraktion eluiert und aus Äthanol kristallisiert. Ausbeute: 99 mg.

3. 32 kg gemahlene Rinde wurden mit Methanol im Großextraktor extrahiert. Die Lösung wurde im Vakuum auf 5 1 konzentriert. Das Konzentrat wurde mit je 3 1 Petroläther (35 - 65⁰) dreimal durchgeführt. Die Schichten wurden getrennt, die Petrolätherschicht wurde verworfen. Die Methanolphase wurde eingeengt, und die Öle wurden wie unter 1. beschrieben abdestilliert. Der Rückstand (197 g) wurde auf 250 g Aluminiumoxyd (Woelm neutral

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Aktivitätsstufe I) aufgezogen und wie unter 1. beschrieben an 5,5 kg Aluminiumoxyd chromatographxert. Die Ausbeute

an Wirksubstanz betrug nach dem Umkristallisieren aus Äthanol

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Claims (2)

PATENTANSPRÜCHE: / 1 β 1 7 Δ 7 S

1) Pharmakologisch wirksame Substanz, gekennzeichet durch folgende Daten:

a) Schmelzpunkt 23O°C (unter Zersetzung);

b) quantitative Zusammensetzung:

C: etwa 62,7 %
II: etwa 6,5 Ϊ»
N: etwa 4,1 %
Rest 0

c) Molekulargewicht.: ca 355

d) optische Drehung: £mJ%q = ^{+ 172 (ln Athanol)}

e) UV-Spektrum: Maxima bei 27O mμ

(logf = 4.622) und 300 αφ. (log£ = 4.249) (in Methanol)

f) IR-Spektrum(in KBr) Maxima bei

2,85 (27)i 3.12 (24)i 3,32 (27)? 3.38 (29)i 3.4l (26); 3,53 (37>; .<U*8-(19>1 -6,88 (8); 7.Ο2 (0) ι 7,40 (24); 7,79 (27); 8,19 (6); 8,5O (23*; 8,73 (4o); 9,01 (l6); 9,61 (l8)i 10,02 (15); io_f35 (32)i 1O,55 (32)} tO,8l 11,0 (56)l 12,38 <29)? 13,2p (5*).

(Die Durchlässigkeit in % ist jeweils in Klammern hinzugefügt.

2. Verfahron zur Govriimung eine;- pliarhiakolo^ifcch i<rix~ks Substanz, dadurch gekennzeichnet, daß man Rinde von Ravensara aromatica gegebenefalls nach Entfernung lipoidlöslicher Anteile mit Petroläther oder Tetrachlorkohlenstoff, mit niederen Alkoholen, vorzugsweise Methanol oder Äthanol extrahiert, den Extrakt einonjjt, gegebenenfalls voi-haiwlene Begleitsubstanzen durch Destillation abtrennt und den festen Rückstand chromatographisch reinigt.

3« Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man die öligen Begleitsubstanzen vor der Alkoholextraktion durch Extraktion mit Chloroform entfernt*

109812/1570 ÖAD QRigi_Nal