DE1417576A1 - Verfahren zur Herstellung von Codehydrogenase I (Diphosphopyridinnucleotid) von hoher Reinheit aus Hefe - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von Codehydrogenase I (Diphosphopyridinnucleotid) von hoher Reinheit aus HefeInfo
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- DE1417576A1 DE1417576A1 DE19611417576 DE1417576A DE1417576A1 DE 1417576 A1 DE1417576 A1 DE 1417576A1 DE 19611417576 DE19611417576 DE 19611417576 DE 1417576 A DE1417576 A DE 1417576A DE 1417576 A1 DE1417576 A1 DE 1417576A1
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
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- C12P19/30—Nucleotides
- C12P19/36—Dinucleotides, e.g. nicotineamide-adenine dinucleotide phosphate
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
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Description
Neue Unterlagen (αλ.7§ι
909811/1004
BAD ORIGINAL
Patentanwalt ma
21. Oktober 1967 P.3908
S 74- 300 IVa/6a
Vergleichsversuche.
1. Herstellung des Ausgangsmaterials.
4· kg frisch ausgepresste Backhefe wurde zerbröckelt
und in 4 1 Wasser bei 90 bis 95 °G 15 Minuten unter
mechanischem Rühren suspendiert. Die Suspension wurde rasch abgekühlt und mit 0,8 kg "Super-Cel" (ein Filterhilfsmittel,
welches Diatomeenerde mit einer durchschnittlichen Teilchengröße von 8 bis 1C)/L, hergestellt und vertrieben von der
Firma Johns-Manville Corp., enthält; Handelsname des
Materials "Hyflo Super-Gel", welches üblicherweise als
"Super-Cel" abgekürzt wird) gemischt und dann durch einen
Büchnertrichter abgesaugt. Der im Trichter verbliebene Rückstand wurde in 1 1 Wasser erneut suspendiert und wieder
filtriert. Die vereinigten Filtrate (eine gelbe klare Lösung, etwa 6 1) wurden in zwei Portionen von je 2,5 1
geteilt. Diese Portionen wurden als Ausgangsmaterial für die Vergleichsversuche zwischen dem erfindungsgemäßen Verfahren
und dem Verfahren nach der USA-Patentschrift 2 828 302 verwendet.
2. Durchführung der Vergleichsversuche.
Die Versuche wurden für das erfindungsgemäße Verfahren und dasjenige nach der USA-Patentschrift 2 828 302 in
ähnlicher Weise durchgeführt. Die Zeit, welche für jede
909811/100A _ 2 _
141757
Stufe des Verfahrens benötigt wurde, wurde aufgezeichnet.
5« Ergebnisse.
Die Ergebnxsse sind der folgenden Tabelle zu entnehmen.
90981 1/1004
U17576
erforderlich· ZaIt
Haxitype
atulaagroSe
pH
Durcbflo*-
geechnindlgkelt
Hochporösea aohvaeh basisches Anionenauatatlscnerbarz
J50 «1
5,2 χ 50
2.5 1
nicht eingestellt (pH 6-7)
0,018
2 VStunda
Auftreten ro* H* in dar durcbflossenen Lösung
Meungsxnge 2,3 1
0,120
Haxitjp·
Harxvoliuaafl
SiulangrBSa
Z^aung
I^aungaawnga
PH
OurckfluS-ga«h«indigkait
Duollt« c-10 (100-200 Maachan)
HochporBaaa atark aauraa
Kationanauatauacherharz
H*
500 al
3,2 I 10
dia durch Λ-2 durchga-IltmM Losung
2,5 1
aingaatallt nit HCl auf 2,5
2 l/Stunda
••Kbu ait 0,1 η XH4Cl vo» pH 2,5 500 ml
Waachan »it 0,5 η KH4Cl vom pH 2,5 500 ml
nuiarta LSaung xur mktionierung 0,05 η CH-COONH4
pH *,5 1,5 1
Surchfluigaachwindlgkalt daa Iluata 600 nl/Stunde
Koniantriarta Fraktion von DFN
in dar alulertan löaung 250 ml
1,5 Stunden
0,5 Stunden
1,5 Stunden
5 Stunden
| USA-Patent Xo. 2 828 302 | (erforderlich· z«lt |
Sowex 1x8 (100-200 Haachen)
Stark baaiache« Anionan- auBtAuacherharz Cl" 350 »1 3,2 x 50 2,5 1 eingestallt mit XiOH auf pH 7 - 8 0,018 2 l/Stunde |
1,5 et«a4aa> |
|
Adsorption am Harz
Haachen mit H2O 600 ml Waschen mit O1OJn HCl 500 ml Konzentrierte LSsung von OFH . . . 150 ml χ 540^1/26Om,! 0,085 Hinzufügen von kaltem Aceton . . . Auuchaldoag 1,2 1 Aceton Zentrifugieren |
1,5 Sto«4M
7 «taetfea OMr macht |
||
|
Oowex 1x8 (200-400 Haachen)
Stark basiachea Anionenauatauacherhars »ormiat" 200 ml 2,5 x «0 die getrocknete Substanz zu einer Lcaung gelöst 2,0 1 eingestellt mit NaOH auf pH 7 - 8 400 ml/Stunde |
5 Staates | ||
| 0,1 η Ameisensäure 0,1 η Natriumformiat Ί,οι 200 ml/Stunde 100 ml 0,56 |
5 Stunden | ||
909811/100A
Unterlagen (Art. l § 1 Abs. 2 Nr-1 Satz S des Änderungsges. v. 4. ?
Claims (1)
- Patentanspruch :Verfahren zur Gewinnung von Codehydrogenase I mit hoher Reinheit aus Hefe, wobei ein Heißwasser-Hefeextrakt filtriert und einer Ionenaustauscherbehandlung unterworfen und aus dem von der Ionenaustauscherbehandlung gewonnenen Eluat die Codehydrogenase I mittels organischer Lösungsmittel ausgefällt wird, dadurch gekennzeichnet, daß man den filtrierten Heißwasser-Hefeextrakt durch eine Duolite A-2- oder A-7-Säule in der Salzform hindurchleitet, die am Säulenauslauf austretende Codehydrogenase I enthaltende Lösung auf einen pH-Wert von etwa 2—3 ansäuert, durch eine Duolite C-25- oder C-10-Säule in der Wasserstofform hindurchleitet, die Säule mit einem Puffer von pH 2-3 wäscht und anschließend die adsorbierte Codehydrogenase I aus dieser Säule mit einem Puffer von pH 4-7 eluiert.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2760160 | 1960-06-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE1417576A1 true DE1417576A1 (de) | 1969-03-13 |
Family
ID=12225429
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE19611417576 Pending DE1417576A1 (de) | 1960-06-13 | 1961-06-12 | Verfahren zur Herstellung von Codehydrogenase I (Diphosphopyridinnucleotid) von hoher Reinheit aus Hefe |
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| Country | Link |
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| DE (1) | DE1417576A1 (de) |
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| US3015655A (en) * | 1955-07-18 | 1962-01-02 | John B Stark | Separation of nitrogenous organic compounds |
-
1961
- 1961-05-30 GB GB19435/61A patent/GB937327A/en not_active Expired
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- 1961-06-12 DE DE19611417576 patent/DE1417576A1/de active Pending
Also Published As
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|---|---|
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|---|---|---|---|
| SH | Request for examination between 03.10.1968 and 22.04.1971 |