DE113781T1 - Genetische transformation in prokaryotischem organismus. - Google Patents

Genetische transformation in prokaryotischem organismus.

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DE113781T1
DE113781T1 DE198383902654T DE83902654T DE113781T1 DE 113781 T1 DE113781 T1 DE 113781T1 DE 198383902654 T DE198383902654 T DE 198383902654T DE 83902654 T DE83902654 T DE 83902654T DE 113781 T1 DE113781 T1 DE 113781T1
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DE
Germany
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dna
microorganism
cyanobacterium
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homologous
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DE198383902654T
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English (en)
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A. Aladar Szalay
G. K. John Ithaca Ny 14850 Williams
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Boyce Thompson Institute For Plant Research Inc Ithaca Ny Us
Original Assignee
Boyce Thompson Institute For Plant Research Inc Ithaca Ny Us
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Publication date
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression

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Claims (24)

"""'/ ΟΊ 13731 Europäische Patentanmeldung Nr. 8390265^.9 2105 Anmelder: BOYCE THOMPSON INSTITUTE FOR PLANT RESEARCH, INC. ANSPRÜCHE:
1. ■ Prokaryotischer' Mikroorganismus, der mindestens einen stabilen Fremd-DNA-Bestandteil enthält,welcher kovalent direkt an chromosomale DNA gebunden ist, wobei in dem genannten Mikroorganismus und dessen Nachkommen im wesentlichen keine genetische Umordnung einbezüglich der genannten Fremd-DNA stattfindet.
2. Mikroorganismus nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß es sich um einen zur Photosynthese fähigen Mikroorganismus handelt. 20
3· Mikroorganismus nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet , daß es sich um ein Cyanobakteriurn handelt.
1J- Mikroorganismus nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet , daß es sich um ein Cyanobakterium handelt, das exogene DNA aufnimmt.
5. Mikroorganismus nach Anspruch 4, dadurch g e kennzeichnet, daß er ausgewählt wird aus einer Gruppe, die Gloeocapsa alpicola, Agmenellum quadruplicatum und Anacystis nidulans enthält.
6. Mikroorganismus nach Anspruch ^, dadurch g e -
kennzeichnet, daß es sich um einen Anacystis nidulans handelt.
7- Eine reine Kultur eines Mikroorganismus gemäß mindestens einem der Ansprüche 1, 2 oder 3-
8. Verfahren zum Herstellen eines Mikroorganismus,
der mindestens einen stabilen, chromosomalen Fremd-DNA-Bestandteil—enthält, wobei
a) ein DNA-Insertions-Vehikel zur Verfugung gestellt wird, das einen ersten und einen zweiten DNA-Bestandteil enthält, der jeweils homolog zu Bestandteilen eines Chromosoms in dem.genannten Mikroorganismus ist und die genannte homologe DNA in dem genannten ersten und zweiten DNA-Bestandteil im Verhältnis zueinander in derselben Weise angeordnet ist, wie die genannten homologen, chromosomalen DNA-Bestandteile im genannten Mikroorganismus und das genannte DNA-Insertions-Vehikel einen dritten DNA-Bestandteil aufweist, der DNA enthält, die für den genannten Mikroorganismus fremd ist und zwischen dem genannten ersten und zweiten. DNA-Bestandteil angeordnet und
ίυ an diese kovalent gebunden ist; und
b) das genannte DNA-Insertions-Vehikel innerhalb der Zellmembran des genannten Mikroorganismus inseriert wird, um den Einbau des genetischen Materials der
genannten Fremd-DNA in das chromosomale Genom des 25
genannten Mikroorganismus zu bewirken.
9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet , daß das genannte Insertions-Vehikel
ringförmig ist und sich nicht autonom in dem genannten 30
Mikroorganismus repliziert.
10. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet , daß der genannte erste, zweite und
dritte DNA-Bestandteil in dem genannten Insertions-35
Vehikel in einem ersten DNA-Segment angeordnet ist und ein zweites DNA-Segment, das DNA enthält, die nicht
homolog zu dem genannten Mikroorganismus ist, kovalent an die Enden des genannten ersten DNA-Segments gebunden ist, um einen Ring zu bilden.
11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet , daß das genannte zweite DNA-Segment in dem genannten, ringförmigen Vehikel ein Replikon enthält, das in einem vom genannten Mikroorganismus verschiedenen Mikroorganismus funktionsfähig ist.
12. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 8, 9, 10 oder 11, dadurch gekennzeichnet , daß es sich bei dem genannten Mikroorganismus um ein Cyanobakterium handelt.
13- Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet , daß der genannte Mikroorganismus ausgewählt wird aus einer Gruppe, die Gloeocapsa alpicola, Agmenellum quadruplicatum und Anacystis nidulans enthält.
14. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei dem genannten Mikroorganismus um Anacystis nidulans handelt.
15. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch ge kennzeichnet , daß es sich bei dem genannten Mikro-
■ Organismus um ein Cyanobakterium handelt und das genannte Replikon in einem Bakterium funktionsfähig ist.
16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet , daß es sich bei dem genannten Cyanobakterium um Anacystis nidulans und bei dem genannten Bakterium um E.coli handelt.
17. Ein ringförmiges DNA-Insertions-Vehikel, das
enthält:
a) ein erstes DNA-Segment, das einen ersten und einen zweiten DNA-Bestandteil aufweist, der jeweils DNA enthält, die homolog zu angrenzenden Bestandteilen eines Chromosoms in einem Mikroorganismus ist und der genannte erste und zweite Bestandteil im Verhältnis zueinander in derselben Weise angeordnet sind, wie die genannten homologen, chromosomalen DNA-Bestandteile im genannten Mikroorganismus; sowie weiterhin einen dritten DNA-Bestandteil aufweist, der DNA enthält, die für den genannten Mikroorganismus fremd ist und die einen selektierbaren Phänotyp exprimiert, der zwischen dem genannten ersten und zweiten DNA-Bestandteil angeordnet und an diese kovalent gebunden ist; und des weiteren eine einzelne Restriktionserkennungsstelle für ein spezielles Restriktionsenzym an einer Stelle, die für den zwischen dem genannten ersten und zweiten DNA-Bestandteil liegenden exprimierbaren Phänotyp nicht wesentlich ist, vorhanden ist; und
b) ein zweites DNA-Segment, das einen DNA-Bestandteil enthält, der zu der chromosomalen DNA im genannten Mikroorganismus nicht homolog ist.
18. Insertions-Vehikel nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, daß das genannte zweite DNA-Segment Replikons enthält, die nur in einem vom genannten Mikroorganismus verschiedenen Organismus funktionsfähig sind.
19. Insertions-Vehikel nach Anspruch 18, dadurch gekennzeichnet , daß der genannte erste und zweite DNA-Bestandteil im genannten ersten DNA-Segment von einem einzelnen Stück einer chromosomalen
DNA stammt.
35
20. Insertions-Vehikel nach Anspruch 18 oder 19, dadurch gekennzeichnet ,·daß es sich bei dem genannten Mikroorganismus um ein Cyanobakterium handelt.
21. Insertions-Vehikel nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet , daß'das Cyanobakterium ausgewählt wird aus einer Gruppe, die AnaGystis nidulana, Gloeocapsa alpicola und Agmenellum quadruplicatum ent-
.....
halt.
22. Insertions-Vehikel nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet , daß es sich bei dem genannten Cyanobakterium um Anacystis nidulans handelt. J
23- Insertions-Vehikel nach Anspruch 18 oder 19, dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei dem genannten Mikroorganismus um ein Cyanobakteriura handelt und das genannte Replikon in einem Bakterium funktionsfähig ist.
24. Insertions-Vehikel nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet , daß es sich bei dem genannten Cyanobakterium um Anacystis nidulans und beim zo genannten Bakterium um E.coli handelt.
DE198383902654T 1982-07-09 1983-07-06 Genetische transformation in prokaryotischem organismus. Pending DE113781T1 (de)

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Application Number Priority Date Filing Date Title
US39659582A 1982-07-09 1982-07-09
PCT/US1983/001026 WO1984000381A1 (en) 1982-07-09 1983-07-06 Genetic engineering in procaryotic organism

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Publication Number Publication Date
DE113781T1 true DE113781T1 (de) 1985-06-20

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ID=23567885

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Application Number Title Priority Date Filing Date
DE198383902654T Pending DE113781T1 (de) 1982-07-09 1983-07-06 Genetische transformation in prokaryotischem organismus.

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EP (1) EP0113781A4 (de)
JP (1) JPS59501195A (de)
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DE (1) DE113781T1 (de)
WO (1) WO1984000381A1 (de)

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CA1214737A (en) 1986-12-02
WO1984000381A1 (en) 1984-02-02
EP0113781A1 (de) 1984-07-25
JPS59501195A (ja) 1984-07-12
EP0113781A4 (de) 1986-05-14

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