DE112019002479T5 - Verfahren zur herstellung einer kollagen-laminin-matrix zur heilung von hautgeschwüren, verbrennungen und wunden beim menschen - Google Patents
Verfahren zur herstellung einer kollagen-laminin-matrix zur heilung von hautgeschwüren, verbrennungen und wunden beim menschen Download PDFInfo
- Publication number
- DE112019002479T5 DE112019002479T5 DE112019002479.5T DE112019002479T DE112019002479T5 DE 112019002479 T5 DE112019002479 T5 DE 112019002479T5 DE 112019002479 T DE112019002479 T DE 112019002479T DE 112019002479 T5 DE112019002479 T5 DE 112019002479T5
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- collagen
- skin
- burns
- laminin
- matrix
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 title claims description 13
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 title claims description 13
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 title claims description 12
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 29
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 29
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 claims abstract description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 5
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 claims description 4
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 claims description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 claims description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims 1
- -1 polyoxyethylene Polymers 0.000 claims 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 abstract description 4
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 abstract description 3
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 abstract description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract description 2
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 abstract description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 229920000307 polymer substrate Polymers 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 16
- 102000007547 Laminin Human genes 0.000 description 10
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 3
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 108010001781 Apligraf Proteins 0.000 description 2
- 241001417092 Macrouridae Species 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 235000009233 Stachytarpheta cayennensis Nutrition 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000006057 immunotolerant effect Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- BUHVIAUBTBOHAG-FOYDDCNASA-N (2r,3r,4s,5r)-2-[6-[[2-(3,5-dimethoxyphenyl)-2-(2-methylphenyl)ethyl]amino]purin-9-yl]-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound COC1=CC(OC)=CC(C(CNC=2C=3N=CN(C=3N=CN=2)[C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)C=2C(=CC=CC=2)C)=C1 BUHVIAUBTBOHAG-FOYDDCNASA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- 206010063560 Excessive granulation tissue Diseases 0.000 description 1
- 102000006835 Lamins Human genes 0.000 description 1
- 108010047294 Lamins Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000515 collagen sponge Substances 0.000 description 1
- 229940096422 collagen type i Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000000264 dermatotropic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000012407 engineering method Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003953 foreskin Anatomy 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 108010025899 gelatin film Proteins 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000001126 granulation tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000005053 lamin Anatomy 0.000 description 1
- 210000004393 laryngeal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000001044 red dye Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036560 skin regeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000019 skin ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/24—Collagen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/32—Bones; Osteocytes; Osteoblasts; Tendons; Tenocytes; Teeth; Odontoblasts; Cartilage; Chondrocytes; Synovial membrane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/35—Fat tissue; Adipocytes; Stromal cells; Connective tissues
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/36—Skin; Hair; Nails; Sebaceous glands; Cerumen; Epidermis; Epithelial cells; Keratinocytes; Langerhans cells; Ectodermal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/227—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
- A61L27/3687—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by the use of chemical agents in the treatment, e.g. specific enzymes, detergents, capping agents, crosslinkers, anticalcification agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
- A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
- A61L27/3813—Epithelial cells, e.g. keratinocytes, urothelial cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/60—Materials for use in artificial skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0625—Epidermal cells, skin cells; Cells of the oral mucosa
- C12N5/0629—Keratinocytes; Whole skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0697—Artificial constructs associating cells of different lineages, e.g. tissue equivalents
- C12N5/0698—Skin equivalents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/32—Materials or treatment for tissue regeneration for nerve reconstruction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/40—Preparation and treatment of biological tissue for implantation, e.g. decellularisation, cross-linking
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Die geltend gemachte Erfindung bezieht sich auf die medizinische Biotechnologie, insbesondere auf gewebetechnische Ansätze in der regenerativen Medizin. Das Verfahren beruht darauf, dass neben konservativen Behandlungsformen eine Substitutionstherapie von Hautschäden mit Hilfe von Polymermatrizen, die histotypisch den Körpergeweben ähnlich sind, biologisch aktive Wirkstoffe: Zellderivate - Kollagen und Laminin, die zur strukturellen Funktion des geschädigten Bereichs beitragen, bereitgestellt werden. Das biologisch abbaubare Kompositmaterial zur Wundheilung, das auf einer Kombination aus einem Polymersubstrat und einem Syntheseprodukt menschlicher Epithelzellen basiert und gleichzeitig frei von einer zellulären Komponente ist, zeichnet sich durch eine vergleichsweise einfache Herstellung und eine lange Haltbarkeit aus und ermöglicht die Vermeidung einer Hauttransplantation, z.B. bei tiefen und ausgedehnten Verbrennungen, Trophiegeschwüren usw.
Description
- Die Erfindung bezieht sich auf medizinische Biotechnologien, d.h. Zelltechnologien und Gewebetechnik (Tissue-Engineering)-Ansätze für Aufgaben der regenerativen Medizin. Die Methode besteht darin, dass neben konservativen Behandlungsmethoden die Substitutionstherapie von Hautschäden mit Hilfe von Polymermatrizen, die histotypisch den Körpergeweben ähnlich sind, mit biologisch aktiven Wirkstoffen: Zellderivate - Kollagen und Laminin, die zur strukturellen Funktion des geschädigten Bereichs beitragen, bereitgestellt werden.
- Der wichtigste und sich am schnellsten entwickelnde Bereich der modernen regenerativen Medizin ist die Anwendung der Zelltechnologie. Die Aufgabe der Zelltechnologien besteht in diesem Fall nicht nur darin, lebende Zellen in den Defektbereich zu transplantieren, sondern auch die Struktur und Funktion der Haut vollständig wiederherzustellen, regenerative Prozesse zu stimulieren und eine Mikroumgebung zur Realisierung des Potenzials der eigenen Gewebe und Zellen zu schaffen. Zur Lösung solcher Probleme werden Methoden des Tissue Engineering eingesetzt [8]. Das Tissue Engineering soll viele Probleme der regenerativen Medizin lösen, die sich mit der Verbesserung der menschlichen Lebenserwartung und Lebensqualität durch die Wiederherstellung verloren gegangener Strukturen und Funktionen von Organen und Geweben befasst. Die Anwendung neuer Materialien, die auf der Basis von Zelltechnologien geschaffen werden, kann ein vielversprechender Weg zur Behandlung und Wiederherstellung von Geweben sein [2, 3, 5, 6].
- Gegenwärtig werden Ansätze auf der Basis dermatotroper biomedizinischer Zellprodukte entwickelt, um lang anhaltende, nicht heilende Wunden (trophische Geschwüre, Verbrennungen) zu behandeln und ausgedehnte Hautareale wiederherzustellen oder vorübergehend zu verschließen. Die Anwendung von Zelltechnologien zur Stimulation der Geweberegeneration besteht in der Verwendung von Zellen verschiedener Typen, Biomatrixen und Tissue-Engineering-Konstruktionen in verschiedenen Varianten und Kombinationen.
- Es ist bekannt, wie ausgedehnte Verbrennungen mit epidermalen Autografts abgedeckt werden können. Wenn jedoch epidermale Beläge zur Behandlung verbrannter Patienten verwendet werden, gibt es Schwierigkeiten mit der Akzeptanz, im Falle allogener Transplantate mit der Immunogenität und Verfügbarkeit. Verschiedene andere Zelltypen - dermale Fibroblasten, mesenchymale Knochenmarkstammzellen, die durch pluripotente Stammzellen induziert werden - wurden erfolgreich in präklinischen und klinischen Studien eingesetzt. Dieser Therapieansatz erfordert jedoch in der Regel eine große Menge an Zellmaterial. Dies ist kein großes Problem bei der Behandlung kleiner Wunden, kann aber zu einem Problem bei der Behandlung umfangreicher Schäden werden [8].
- Es ist bekannt, dass Kollagengele, Schwämme, die durch natürliche und synthetische Polymere von Kollagensubstraten modifiziert sind, für die Hautregeneration von dermalen Komponenten wirksam eingesetzt werden können, aber die Regenerationsprozesse werden durch die geringe Stabilität und Biokompatibilität erschwert [9].
- Klinische Studien mit positiven Ergebnissen beim Verschluss relativ kleiner Wunden zeigen die Verwendung von epidermalen und dermalen Hautäquivalenten aus Rinderkollagen mit humanen neonatalen Fibroblasten (Apligraf), allogenen Vorhautfibroblasten von Neugeborenen auf einem synthetischen Substrat (Dermagraft), dreidimensionalen Kollagengelen mit Fibroblasten, jedoch gibt es bei diesen Variationen Schwierigkeiten mit Infektion, Immunogenität, Lagerung und Transport von Tissue-Engineering-Strukturen [8,10].
- Die angemeldete Vorgehensweise ist wie folgt. Das Kollagen des ersten Typs wird aus den Sehnen von Rattenschwänzen herausgelöst. Dies erfordert erwachsene Ratten der Wistar-Linie (oder Analoga) mit einem Gewicht ab 300 Gramm, die in Labor-Vivarien gehalten werden, die das Vorhandensein von Infektionen, Parasiten usw. ausschließen. Rattenschwänze können nach dem Einschläfern der Tiere mehrere Jahre lang bei -20°C unter Tiefkühlbedingungen gelagert werden. Vor der Kollagenextraktion werden die Schwänze mit Standard-Detergenzien gereinigt und vor der Kollagenextraktion 24 Stunden lang mit 70%igem Ethanol sterilisiert. Dann werden alle Handgriffe unter sterilen Bedingungen durchgeführt (in Laminarschränken der Biosicherheitsklasse 1 oder 2). Die Haut wird mit einem Skalpell und einer Pinzette vom Schwanz entfernt, der Schwanz wird in 2-3 cm große Stücke geschnitten. Die so erhaltenen Schwanzstücke werden erneut 15 Minuten lang in 70%igem Ethanol inkubiert. Dann werden die Sehnen mit einer Pinzette aus dem Schwanz herausgezogen, in dünne Fasern gespalten und in ein Gefäß mit einer sterilen Lösung aus 0,1%iger Eisessigsäure gelegt. Das Kollagen wird fast sofort in die Lösung extrahiert, die Lösung wird zähflüssig und verfärbt sich wie ein bläulich schillernder Dunst. Um die richtige Konzentration und Konsistenz der Lösung zu erhalten, sollten die Sehnen eines Schwanzes in 100-150 ml der Lösung aufgelöst werden. Dann wird die Lösung einen Monat lang bei +4°C inkubiert. Wenn möglich, sollte die Flasche mit der Lösung entnommen und der Grund aufgerührt werden. Das Ergebnis ist eine dicke viskose Flüssigkeit mit unlösbarem Grund am Boden. Die Kollagenlösung wird dann zentrifugiert (1 Stunde bei 1500g-4000 U/min mit einem Rotorradius von 10 cm, bei Raumtemperatur), um ungelöste Kollagenfasern auszufällen. Der Überstand wird in sterile Lagertanks gegossen. Die Konzentration der Lösung kann berechnet werden, indem der Wasseranteil im Trockenluftthermostat verdampft und der entstehende Restschlamm/Restgrund gewogen wird. Eine Kollagenlösung kann als akzeptabel angesehen werden, wenn die Kollagenkonzentration nicht unter 1 mg/ml liegt (üblicherweise ergeben sich 3-5 mg/ml).
- Für die Kollagenpolymerisation sollte die saure Lösung mit Essigsäure neutralisiert werden. Zu diesem Zweck wird Kollagenlösung in eine sterile Petrischale gegossen (Becherradius erforderlichenfalls - 3 cm, 6 cm oder 10 cm) und unter Rühren die entsprechende Menge 0,1M NaOH-Lösung zugegeben, um eine pH-Gesamtlösung ~ 7,0-7,2 zu erhalten. Die Acidität der Lösung kann leicht durch Zugabe eines Mittelkonzentrats M199, das phenolischen roten Farbstoff enthält, dessen Farbe je nach pH-Wert variiert, bestimmt werden. Die erforderliche Farbe der Lösung ist Scharlachrot. Durch Variation der Menge an Kollagenlösung ist es möglich, Matrizen unterschiedlicher Dicke herzustellen. Die Kollagenpolymerisation dauert 3-5 Minuten, daher sollten alle Verfahren schnell durchgeführt werden, vorzugsweise auf Eis. Nach Zugabe aller notwendigen Zutaten und Rühren wird die Petrischale mit Kollagengel für einige Stunden (am besten am Tag) in einen Inkubator bei +37°C gestellt.
- Am nächsten Tag werden die Zellen der NaCaT-Linie auf Kollagengel in einer Dichte von 10-40 Tausend Zellen pro cm2 ausplattiert. Bei den Zellen der NaCaT-Linie handelt es sich um immortalisierte menschliche Keratinozyten, die sich gut vermehren und in der wissenschaftlichen Forschung weit verbreitet sind. Die erforderliche Menge an Vollwachstums-Kulturmedium für NaCaT-Zellen wird von oben zugegeben und die Zusammensetzung weiter mehrere Tage lang inkubiert, bis eine dichte und superdichte Zellmonoschicht erreicht ist. Während dieser Zeit synthetisieren die NaCaT-Zellen die Lamininschicht der Basalmembran auf der Geloberfläche.
- Nachdem die erforderliche Zelldichte erreicht ist, wird die entstandene Matrix mit 4% Paraformaldehyd für 1 Tag bei +4°C fixiert. Auf diese Weise werden alle Proteine der Zusammensetzung zu einem unlöslichen Einzelkomplex vernetzt, und die Zellen werden inaktiviert. Nach der Fixierung wird das Transplantat mit einer sterilen Lösung aus Phosphat-Salz-Puffer (PBS) dreimal für 15 Minuten unter Schwenken auf dem Orbitalschüttler von Formaldehyd befreit. Dann erfolgt die Phase der Matrixdezellurisierung mit Hilfe von SDS und Triton X-100 Detergenslösung, über einen Tag bei +4°C. Während dieses Prozesses werden die Verbindungen zwischen Lipiden, Fetten und Proteinen zerstört, alle intrazellulären Komponenten werden freigesetzt und ausgewaschen, es kommt zum DNA- und RNA-Abbau der Zellen. Nach der Dezellurisierung wird das Transplantat mit einer sterilen Lösung aus Phosphat-Salz-Puffer (PBS) 6-mal für 1 Stunde unter Schwenken auf einem Orbitalschüttler von Detergenzien befreit. Der letzte Waschschritt wird tagsüber bei +4°C durchgeführt. Danach kann die Matrix einen Monat lang bei +4°C in PBS-Lösung oder zwei Jahre trocken bei -20°C im Gefrierfach gelagert werden.
- Die entstandene Matrix ist eine Eiweißzusammensetzung, die aus zwei Hauptkomponenten besteht - Kollagen des ersten Typs und Basalmembran-Laminin, die in einer vollständigen histotypischen Ähnlichkeit mit der Struktur der menschlichen Haut stehen. Das Kollagen bildet das Stroma des Transplantats, während das Laminin das Stroma in Form der Basalmembran bedeckt. Die Matrix ist steril, immunotolerant (da Kollagen ein sehr konservatives und immunotolerantes Protein ist und Laminin menschlichen Ursprungs ist) und enthält keine zellulären Bestandteile, was sie zu einem Medizinprodukt macht und das Registrierungsverfahren stark vereinfacht. Zur endgültigen Zusammensetzung der Matrix können verschiedene Zusätze (Antibiotika, Wachstumsfaktoren, Zytokine) hinzugefügt werden, was sie zu einem praktischen Basismodell mit großem Entwicklungspotenzial macht. Die NaSaT-Zelllinie kann gegen andere immortalisierte Epithelzelllinien ausgetauscht werden, die andere Laminin-Typen produzieren, wodurch die Matrix für die Behandlung anderer Epithel-Mesenchymdefekte (Harnleiter-Ureterie, Larynxepithel, Darmepithel usw.) verwendet werden kann.
- Durchgeführte in-vitro-Studien ermöglichten es mit Hilfe zellulärer Technologien und der Anwendung von Bipolymersubstraten, Daten über die Möglichkeit der Bildung einer stabilen gewebetechnischen histotypischen Zusammensetzung auf der Grundlage einer extrahierten und in Form eines Gelfilms vorliegenden Kollagenmatrix mit einer dezellulgierten Lamininoberfläche zu erhalten. Die immunhistochemische Fluoreszenzanalyse hat die Expression von Kompositproteinen identifiziert - Kollagen Typ I und Laminin sowie Pancytokeratin - ein Marker von Epithelzellen. Somit ist die vorgeschlagene Variante der dreidimensionalen Matrix eine Proteinzusammensetzung, die aus zwei Hauptkomponenten besteht - Kollagen des ersten Typs und Laminin der Basalmembran, die in voller histotypischer Ähnlichkeit mit der Struktur der menschlichen Haut sind. Die Familien der Kollagen- und Lamininproteine sind die beiden häufigsten Proteintypen in der menschlichen Haut. Kollagen ist die Grundlage der mesenchymalen Komponente der Hautdermis und sorgt für ihre mechanische Festigkeit und Elastizität. Laminin ist die Basis aller Basalmembranen von Organen, einschließlich der Basalmembran der Haut [1, 7].
- Die Ergebnisse der kontrollierten Studien über die Dynamik des Verlaufs des simulierten Wundprozesses über 21 Tage, die am Modell der Patchwork-Haut-Muskel-Wunde bei den Ratten der Wistar-Linie gewonnen wurden, deuten darauf hin, dass in Gruppen, die die Kollagen-Lamin-Matrix während 7, 14 Tagen verwendeten, die Dynamik der Reduktion der Wunddefektfläche beschleunigt wurde. Das Wachstum von Granulationsgewebe wurde von der Unterseite der Wunde aus beobachtet, und in den Bindegewebsneubildungen wurde eine Vaskularisierung beobachtet.
- Die gewonnenen Daten zur Wiederherstellung der Hautintegrität bezeugen, dass die geschaffene reparative Zusammensetzung eine hohe Effizienz der Wundheilung aufgrund des gezielten Wachstums des regenerierenden Gewebes unter Aufrechterhaltung der Vaskularisierungsprozesse aufweist. Das entwickelte biokompatible Kollagen-Laminin-Wundheilungsmaterial, das auf einer Kombination aus einem polymeren Substrat und einem Produkt der Synthese menschlicher Keratinozyten basiert und gleichzeitig frei von einer zellulären Komponente ist, ist gekennzeichnet durch eine vergleichsweise einfache Herstellung, eine lange Haltbarkeit, was es erlaubt, dieses für die Anwendung und Umsetzung zu empfehlen.
- Literatur
-
- 1. Alekseeva N.T. Morphologische Besonderheiten des Wundprozesses in der Haut bei regionalem Behandlungseinfluss. - Dissertation zur Erlangung des Doktortitels der medizinischen Wissenschaften - 2015. - Seite 327.
- 2. Grigoryan A.S., Kruglyakov P.V. Anwendung beim Gewebe-Engineering großer Gefäße von Transplantaten auf der Basis autogener mononuklearer Zellen des Knochenmarks // Zelltransplantation und Tissue Engineering. - 2009. - Band IV. - Nr. 3. - Seiten 37-41.
- 3. Kaporskaja A.N., Sinitsyna T.Yu., Azizov I.G. Herstellung von Biopolymer-Matrizen für die regenerative Geweberegeneration. - Aktuelle Fragen der biomedizinischen Technik. Materialsammlung der VI. Allrussischen wissenschaftlichen Konferenz für junge Wissenschaftler. - 2017. - Seite 39.
- 4. Überblick über den Biotechnologiemarkt in Russland und Bewertung seiner Entwicklungsperspektiven, analytische Überprüfung von der Firma „FrostandSullivan". - 2014. - Seite 69.
- 5. Panarin E.F., Nudga L.A., Petrova V.A., Bochik A.M. Hoffman I.V., Lebedeva M.F., Blinova M.I., Spichkina O.G., Yudintseva N.M., Pinaev G.P. Matrizen zur Kultivierung menschlicher Hautzellen auf der Basis natürlicher Polysaccharide - Chitin und Chitosan // Zelltransplantation und Gewebetechnik. - 2009. - Band IV. - Nr. 3 - Seiten 42-46.
- 6. Shapovalova E.Yu., Boiko T.A., Baranovsky Yu.G., Karakulkina O.A. Baranovsky A.G. Optimierung des Gerüstkollagentyps in biotechnologischen Konstruktionen zur Heilung von Hautgeschwüren unter Berücksichtigung der Hautembryogenese bei menschlichen Embryonen // Bulletin der Medizinischen Akademischen Wissenschaft des Urals - 2014. - Nr. 5 - Seiten 107-110.
- 7. Gould L.J. Topical Collagen-Based Biomaterals for Chronic Wounds: Rationale and Clinical Application. // Advances in wound care (New Rochelle). - 2016. - Volume 5. - No. 1. - Seiten 19-31.
- 8. Meleshina A.V., Bystrova A.S., Rogovaya O.S., Vorotelyak E.A., Vasiliev A.V., Zagaynova E.V. Tissue-engineered skin constructs and application of stem cells for creation of skin equivalents (review). //Sovremennye tehnologii v medicine. - 2017 - 9(1) - Seiten 198 - 218.
- 9. Still J., Glat P., Silverstein P., Griswold J., Mozingo D. The use of a collagen sponge/living cell composite material to treat donor sites in bum patients. //Burns. - 2003 - 29(8) - Seiten 837-841.
- 10. Waymack P., Duff R.G., Sabolinski M. The effect of a tissue engineered bilayered living skin analog, over meshed split-thickness autografts on the healing of excised bum wounds. The Apligraf Bum Study Group. // Burns. - 2000 - 26(7) - Seiten 609-619.
- ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG
- Diese Liste der vom Anmelder aufgeführten Dokumente wurde automatisiert erzeugt und ist ausschließlich zur besseren Information des Lesers aufgenommen. Die Liste ist nicht Bestandteil der deutschen Patent- bzw. Gebrauchsmusteranmeldung. Das DPMA übernimmt keinerlei Haftung für etwaige Fehler oder Auslassungen.
- Zitierte Nicht-Patentliteratur
-
- Grigoryan A.S., Kruglyakov P.V. Anwendung beim Gewebe-Engineering großer Gefäße von Transplantaten auf der Basis autogener mononuklearer Zellen des Knochenmarks // Zelltransplantation und Tissue Engineering. - 2009. - Band IV. - Nr. 3. - Seiten 37-41 [0014]
- Kaporskaja A.N., Sinitsyna T.Yu., Azizov I.G. Herstellung von Biopolymer-Matrizen für die regenerative Geweberegeneration. - Aktuelle Fragen der biomedizinischen Technik. Materialsammlung der VI. Allrussischen wissenschaftlichen Konferenz für junge Wissenschaftler. - 2017. - Seite 39 [0014]
- Überblick über den Biotechnologiemarkt in Russland und Bewertung seiner Entwicklungsperspektiven, analytische Überprüfung von der Firma „FrostandSullivan“. - 2014. - Seite 69 [0014]
- Panarin E.F., Nudga L.A., Petrova V.A., Bochik A.M. Hoffman I.V., Lebedeva M.F., Blinova M.I., Spichkina O.G., Yudintseva N.M., Pinaev G.P. Matrizen zur Kultivierung menschlicher Hautzellen auf der Basis natürlicher Polysaccharide - Chitin und Chitosan // Zelltransplantation und Gewebetechnik. - 2009. - Band IV. - Nr. 3 - Seiten 42-46 [0014]
- Shapovalova E.Yu., Boiko T.A., Baranovsky Yu.G., Karakulkina O.A. Baranovsky A.G. Optimierung des Gerüstkollagentyps in biotechnologischen Konstruktionen zur Heilung von Hautgeschwüren unter Berücksichtigung der Hautembryogenese bei menschlichen Embryonen // Bulletin der Medizinischen Akademischen Wissenschaft des Urals - 2014. - Nr. 5 - Seiten 107-110 [0014]
- Gould L.J. Topical Collagen-Based Biomaterals for Chronic Wounds: Rationale and Clinical Application. // Advances in wound care (New Rochelle). - 2016. - Volume 5. - No. 1. - Seiten 19-31 [0014]
- Meleshina A.V., Bystrova A.S., Rogovaya O.S., Vorotelyak E.A., Vasiliev A.V., Zagaynova E.V. Tissue-engineered skin constructs and application of stem cells for creation of skin equivalents (review). //Sovremennye tehnologii v medicine. - 2017 - 9(1) - Seiten 198 - 218 [0014]
- Still J., Glat P., Silverstein P., Griswold J., Mozingo D. The use of a collagen sponge/living cell composite material to treat donor sites in bum patients. //Burns. - 2003 - 29(8) - Seiten 837-841 [0014]
- Waymack P., Duff R.G., Sabolinski M. The effect of a tissue engineered bilayered living skin analog, over meshed split-thickness autografts on the healing of excised bum wounds. The Apligraf Bum Study Group. // Burns. - 2000 - 26(7) - Seiten 609-619 [0014]
Claims (1)
- Verfahren zur Herstellung einer Kollagen-Laminin-Matrix zur Heilung von Geschwüren, Verbrennungen und Wunden der menschlichen Haut, einschließlich der Gewinnung einer gewebetechnischen Wundkomposition durch Kombination von Techniken zur Extraktion von Kollagen aus Rattenschwanzsehnen, Bildung von Kollagenmatrizen, Kultivierung immortalisierter Keratinozyten der Haut der NaCaT-Linie auf einem Kollagensubstrat, dadurch gekennzeichnet, dass mit Hilfe einer Lösung der Detergenzien SDS (Natriumdodecylsulfat) und Triton-X-100 (Octylphenylpolyoxyethylen) eine Dezellurisierung (Entfernung von Zellen aus dem Endprodukt) des gebildeten Kollagenfilms unter Erhaltung von Laminin (dem Hauptprotein der Basalmembran), das von den Zellen der NaCaT-Linie synthetisiert wird, auf seiner Oberfläche erfolgt.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018117999A RU2736480C2 (ru) | 2018-05-15 | 2018-05-15 | Способ производства коллаген-ламининового матрикса для заживления язв, ожогов и ран кожи человека |
| RU2018117999 | 2018-05-15 | ||
| PCT/RU2019/050029 WO2019221639A1 (ru) | 2018-05-15 | 2019-03-20 | Способ производства коллаген-ламининового матрикса для заживления язв, ожогов и ран кожи человека |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE112019002479T5 true DE112019002479T5 (de) | 2021-03-04 |
| DE112019002479B4 DE112019002479B4 (de) | 2021-12-30 |
Family
ID=68540932
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE112019002479.5T Active DE112019002479B4 (de) | 2018-05-15 | 2019-03-20 | Verfahren zur herstellung einer kollagen-laminin-matrix zur heilung von hautgeschwüren, verbrennungen und wunden beim menschen |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210220518A1 (de) |
| CN (1) | CN112118860A (de) |
| DE (1) | DE112019002479B4 (de) |
| RU (1) | RU2736480C2 (de) |
| WO (1) | WO2019221639A1 (de) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4485096A (en) * | 1982-02-26 | 1984-11-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Tissue-equivalent and method for preparation thereof |
| ATE390152T1 (de) * | 2000-04-28 | 2008-04-15 | Baylor College Medicine | Dezellularisierte gefässprothesen |
| JP2004262861A (ja) * | 2003-03-03 | 2004-09-24 | Naris Cosmetics Co Ltd | 皮膚外用剤 |
| WO2008008253A2 (en) * | 2006-07-07 | 2008-01-17 | Surmodics, Inc. | Implantable medical articles having pro-healing coatings |
| KR101833895B1 (ko) * | 2016-01-29 | 2018-03-05 | 주식회사 바이오에프디엔씨 | 미코스포린―유사 아미노산을 함유한 창상 치유용 피부 외용제 조성물 및 그 제조방법 |
-
2018
- 2018-05-15 RU RU2018117999A patent/RU2736480C2/ru active
-
2019
- 2019-03-20 CN CN201980032852.XA patent/CN112118860A/zh active Pending
- 2019-03-20 WO PCT/RU2019/050029 patent/WO2019221639A1/ru active Application Filing
- 2019-03-20 DE DE112019002479.5T patent/DE112019002479B4/de active Active
- 2019-03-20 US US17/250,058 patent/US20210220518A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20210220518A1 (en) | 2021-07-22 |
| DE112019002479B4 (de) | 2021-12-30 |
| RU2018117999A (ru) | 2019-11-15 |
| RU2736480C2 (ru) | 2020-11-17 |
| RU2018117999A3 (de) | 2019-11-15 |
| WO2019221639A1 (ru) | 2019-11-21 |
| CN112118860A (zh) | 2020-12-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69634454T2 (de) | Zusammensetzungen und Verfahren mit Bezug auf eine auf natürliche Weise sekretierte Matrix | |
| EP1747264B1 (de) | Multizelluläre gewebe- und organkultursysteme | |
| DE69233558T2 (de) | Keratinozyt-abstammende Granulate zur Verwendung als wundheilendes Mittel | |
| DE69724275T2 (de) | Biopolymerschäume zur gewebeerneurung und -rekonstruktion | |
| US5665391A (en) | Cultured, full-thickness integument substitutes based on three-dimensional matrix membranes | |
| EP1290145B1 (de) | Dreidimensionales hautmodell | |
| WO2005001072A1 (de) | Isolierte adulte pluripotente stammzellen und verfahren zu deren isolierung und kultivierung | |
| KR100791502B1 (ko) | 바이러스 불활화된 무세포 인체 이식재 생산방법 | |
| KR20150127247A (ko) | 조직 이식편의 세포제거 방법 | |
| Sehic et al. | Pre-clinical cell-based therapy for limbal stem cell deficiency | |
| DE10026789B4 (de) | Knorpelersatz und Verfahren zu dessen Herstellung | |
| DE69913543T2 (de) | Dermales gerüst auf der grundlage eines neutralisierten chitosan-schwammes oder eines neutralsierten gemischten chitosan-kollagen-schwammes | |
| US20070269791A1 (en) | Method of Preparing Isolated Cell-Free Skin, Cell-Free Dermal Matrix, Method of Producing the Same and Composite Cultured Skin with The Use of the Cell-Free Dermal Matrix | |
| DE112008001609T5 (de) | Reparatur und Behandlung von Knochendefekten unter Verwendung von mittels einem Wirkstoff induzierten Zellen, der von hypertrophierungsfähigen Chondrozyten hergestellt wird, und eines Gerüsts | |
| DE102006026591B4 (de) | Verfahren zur Isolierung von Kollagen aus kollagenhaltigem Gewebe | |
| CN107683148B (zh) | 皮肤重建方法 | |
| KR20160140494A (ko) | 각막 탈세포화 세포외 기질을 함유하는 각막 유래 세포의 지지체 및 이를 포함하는 인공 각막 시트 | |
| DE112019002479B4 (de) | Verfahren zur herstellung einer kollagen-laminin-matrix zur heilung von hautgeschwüren, verbrennungen und wunden beim menschen | |
| JP3686068B2 (ja) | 皮膚の分離無細胞化方法、無細胞化真皮マトリックス及びその製造方法並びに無細胞化真皮マトリックスを用いた複合培養皮膚 | |
| Makarov et al. | Collagen fiber autofluorescence level in evaluating the biological properties of tissue grafts | |
| EP1843803A2 (de) | Transplantatkonstrukt mit terminal differenzierten gewebezellen zur rekonstruktion eines organs | |
| Li et al. | Human acellular amniotic membrane as skin substitute and biological scaffold: a review of its preparation, preclinical research, and clinical application | |
| DE10062623B4 (de) | Dreidimensionales Hautmodell | |
| DE19922078A1 (de) | Gewebekonstrukt für die Transplantationschirurgie | |
| BE1028040A1 (de) | Matrixabhängiger Gewebe-Engineering-Knochen mit Osteoklastenvorläufern und mesenchymalen Stammzellen als Keimzellen und Konstruktionsverfahren dafür |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R012 | Request for examination validly filed | ||
| R016 | Response to examination communication | ||
| R018 | Grant decision by examination section/examining division | ||
| R020 | Patent grant now final |