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TECHNISCHES
GEBIET
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Die
vorliegende Erfindung betrifft ein Mittel zur Unterdrückung von
Entzündungen,
das zur Prävention, Verzögerung,
Verbesserung oder Behandlung entzündlicher Erkrankungen oder
Schäden
und Erkrankungen der Haut nützlich
ist, die durch Entzündungen
verursacht werden.
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TECHNISCHER
HINTERGRUND
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Im
Hinblick auf einen Faktor der von Entzündungen der Haut verursacht,
gibt es infektiöse
Substanzen, wie beispielsweise Bakterien und Viren, antigene Substanzen,
die zu allergischen Reaktionen führen,
einen stimulierenden Faktor, der eine Gewebeschädigung induziert sowie ultraviolette
Strahlung, welche Hautkrebs verursacht oder die Hautalterung fördert. Aufgrund
dieser Ursachen wird die Haut auf verschiedene Weise beschädigt, und
die Unterdrückung
einer überschießenden Entzündungsreaktion
führt zur
Reduzierung der Hautschädigung.
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In
den vergangenen Jahren sind Studien, die die Wirkungsmechanismen
der Entzündung
der Haut betreffen, vorangeschritten, und hinsichtlich der Ursachen
dafür ist
die Beteilung entzündlicher
Cytokine, wie beispielsweise IL-1α und
TNFα oder
eines die extrazelluläre
Matrix degradierenden Enzyms, wie beispielsweise Collagenase, aufgeklärt worden.
Die Expression von Cytokinen und Enzymen, die die extrazelluläre Matrix
degradieren, wird selbst auf genetischem Niveau durch Transkriptions-Kontrollfaktoren,
wie beispielsweise NF-κB
und AP-1, kontrolliert. Es ist beispielsweise berichtet worden,
dass in dem, in dem Fall ultraviolette Strahlen, die im Sonnenlicht
enthalten sind, die Haut angreifen, NF-κF und AP-1 in Hautzellen aktiviert
werden, und dieses eine Ursache der Förderung der Hautalterung ist
(z.B. Nicht-Patentdokument 1). Entsprechend ist zu erwarten, dass
Hauterkrankungen, die durch zahlreiche Faktoren verursacht werden,
gelindert werden, wenn solche entzündliche Faktoren unterdrückt werden
können.
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Bezüglich einer
Substanz, die die entzündlichen
Faktoren unterdrückt,
welche die Hautschädigung verursachen,
ist von zahlreichen Substanzen berichtet worden. Es ist z.B. gezeigt
worden, dass eine antioxidative Substanz, wie beispielsweise N-Acetyl-L-cystein
die Aktivierung von NF-κB
und AP-1 in epidermalen Zellen unterdrückt (z.B. Nicht-Patentdokument
2, Nicht-Patentdokument 3). Dessen wirksame Konzentration beträgt jedoch
10 mM bis 30 mM und deswegen gibt es das Problem einer unreichenden
Wirkung und der hohen Toxizität
gegenüber
Zellen. Neben N-Acetyl-L-cystein, wurde von der Aktivierung von
AP-1 und der Unterdrückung
der Expression von Enzymen, die die extrazelluläre Matrix degradieren, mittels
Retinolsäure
berichtet (z.B. Nicht-Patentdokument 4). Retinolsäure hat
jedoch Nebenwirkungen, wie beispielsweise Reizungen und Hautablösungen,
und ihre Verwendung ist beschränkt.
Im Hinblick auf die Unterdrückung
der Hautschädigung
durch ultraviolette Strahlen, sind Zinksalze von Aminosäuren und
Zinksalze von Fettsäuren
dafür bekannt
gewesen, dass sie diese aufgrund der Induktion von Metallothionin
unterdrücken,
welches eine endogene antioxidative Substanz der Haut ist (z.B.
Patentdokumente 1 und 2). Diese Verbindungen sind aber in Wasser
und öligen
Substanzen kaum löslich,
so dass sie als kosmetische Inhaltsstoffe und Mittel für die externe Anwendung
auf der Haut schwer verwendbar sind, wodurch ihre Wirkung ungenügend wird.
Zusätzlich
hat es keinen Bericht darüber
gegeben, dass diese Substanzen die Aktivierung des Gentranskriptionsfaktors,
wie beispielsweise AP-1, unterdrücken,
welches ein bedeutender Faktor für
die Entzündung
aufgrund ultravioletter Strahlung ist. Im Hinblick auf Zinkähnliche
Substanzen, wurde von Zinkoxid berichtet, dass es Windelausschlag
unterdrückt
(z.B. Nicht-Patentdokument 5), aber diese Verbindung ist ebenfalls
in Wasser und in öligen Substanzen
kaum löslich,
wodurch es als kosmetischer Inhaltsstoff und Mittel für die externe
Anwendung auf der Haut schwer zu verwenden ist, und zusätzlich ist
seine Wirkung unzureichend. Andererseits wurde von einem wasserlöslichen
Zinksalz, wie beispielsweise Zinkacetat, berichtet, dass dieses
die Möglichkeit
der Prävention
von Arteriosklerose in Folge einer Unterdrückung der AP-1-Aktivität besitzt,
welche bei Inkubation hämo-endothelialer
Zellen unter einer Bedingungen ansteigt, in denen Zink fehlt, (Nicht-Patentdokument
6), obwohl es nicht dafür
bekannt gewesen ist, die Hautentzündungen zu unterdrücken.
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- [Patentdokument 1] WO 00/44341
- [Patentdokument 2] WO 93/14748
- [Nicht-Patentdokument 1] Nature, Band 379 S. 335 bis 339, 1996
- [Nicht-Patentdokument 2] Free Rad. Biol. Med., Bd. 26, S. 174
bis 183, 1999
- [Nicht-Patentdokument 3] FEBS Letters, Bd. 384, S. 92 bis 96,
1996
- [Nicht-Patentdokument 4] Nature, Bd. 379, S. 335 bis 339, 1996
- [Nicht-Patentdokument 5] Eur. Acad. Dermatol. Veneol., (Suppl.
1), S. 5 bis 11, 2001
- [Nicht-Patentdokument 6] J. Am. Clloge Nutrt., 16(5), S. 411
bis 417 (1997)
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OFFENBARUNG
DER ERFINDUNG
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PROBLEME, WELCHE DIE ERFINDUNG
LÖSEN SOLL
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Auf
Grundlage des oben erwähnten
Stands der Technik liegt ein Ziel der vorliegenden Erfindung darin ein
Mittel zur Unterdrückung
von Entzündungen
bereitzustellen, wobei der die Entzündung unterdrückende Bestandteil
aufgrund der Unterdrückung
der Aktivierung eines Gentranskriptionsfaktors von Enzymen, welche
die extrazelluläre
Matrix abbauen, die entzündliche
Störung
verhindert, verbessert oder behandelt, der wirksame Inhaltsstoff
ist.
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Mittel zur
Lösung
der Aufgabe
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In
der Absicht, das oben erwähnte
Ziel zu erreichen, haben die vorstelligen Erfinder umfassende Studien
durchgeführt
und herausgefunden, dass ein wasserlösliches Zinksalz, wie beispielsweise
Zinkpyrrolidoncarboxylat die Aktivierung eines Gentranskriptionsfaktors
für Enzyme
unterdrückt,
die die extrazelluläre
Matrix abbauen, wodurch die vorliegende Erfindung erfüllt worden
ist.
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Das
bedeutet, dass die vorliegende Erfindung ein Mittel zur Unterdrückung von
Entzündungen
oder, vorzugsweise ein Mittel zur Unterdrückung von Hautentzündungen
betrifft, welches dadurch gekennzeichnet ist, dass es ein Zinksalz
der Pyrrolidoncarbonsäure
(PCA) als wirksamen Inhaltsstoff enthält, und die folgenden Bestandteile
einschließt.
- (1) Ein Mittel zur Unterdrückung von Entzündungen,
das dadurch gekennzeichnet ist, dass es Zinkpyrrolidoncarboxylat
enthält.
- (2) Ein Mittel zur Unterdrückung
von Hautentzündungen,
das dadurch, dass es Zinkpyrrolidoncarboxylat enthält, gekennzeichnet
ist.
- (3) Das Mittel zur Unterdrückung
der Entzündung
der Haut gemäß (2), wobei
Zinkpyrrolidoncarboxylat eines aus einer L-Verbindung und einer
DL-Verbindung ist.
- (4) Ein Mittel zur Vorbeugung oder Behandlung einer entzündlichen
Hauterkrankung, welches dadurch gekennzeichnet ist, dass es das
Mittel zur Unterdrückung
von Hautentzündungen,
wie in (2) oder (3) erwähnt, enthält.
- (5) Das Mittel zur Prävention
oder Behandlung gemäß (4), wobei
die entzündliche
Hauterkrankung eine Erkrankung ist, die durch ultraviolette Strahlung
ausgelöst
wird.
- (6) Ein Verfahren zum Verhindern, Verzögern, Verbessern oder Behandeln
einer Hautveränderung
durch Alterung, welche durch ultraviolette Strahlung gefördert wird,
oder eine Hautveränderung,
die für
die Schönheit
der Haut ungünstig
ist, wobei das Verfahren dadurch gekennzeichnet ist, dass man auf
die Haut Kosmetika oder Mittel zur externen Anwendung auf der Haut
aufträgt,
die einen oder zwei oder mehr Arten an Bestandteilen enthalten,
die aus dem Mittel zur Unterdrückung
der Entzündung
gemäß einem
aus (1) bis (3) ausgewählt
sind.
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VORTEILE DER
ERFINDUNG
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Gemäß der vorliegenden
Erfindung wurde ein Mittel zur Unterdrückung von Entzündungen
erhalten, das Vorteilhafterweise in der Lage ist, in Kosmetika und
anderem verwendet zu werden.
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BEVORZUGTE
AUSFÜHRUNGSFORMEN
ZUR DURCHFÜHRUNG
DER ERFINDUNG
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Nachfolgend
werden die Details der vorliegenden Erfindung erwähnt.
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Zuerstn
werden spezifische Beispiele der Erfindung, die die vorliegende
Erfindung betrifft, dargestellt werden. Bezüglich des Zinkpyrrolidoncarboxylats
(nachfolgend als "PCA-Zinksalz" bezeichnet), welches
in der vorliegenden Erfindung verwendet wird, ist es möglich, dieses
als L-PCA-Zinksalz und DL-PCA-Zinksalz
zu verwenden. Jedes davon kann alleine oder in einer Mischung verwendet
werden, und wenn eine DL-Verbindung verwendet wird, gibt es keine
besondere Beschränkung
für das
Verhältnis
des D-Restes zum L-Rest. Wenn das erfindungsgemäße PCA-Zinksalz als wirksamer
Inhaltsstoff als Kosmetika oder Mittel zur externen Applikation
auf die Haut zur Prävention
und Verbesserung von entzündlichen
Hauterkrankungen und entzündlichen
Hautschäden
formuliert wird, kann die Menge dieser Verbindung 0,01 % bis 10
Gew.% oder bevorzugterweise 0,1 % bis 5 Gew.% betragen. Wenn der
Mengenbestandteil weniger als 0,01 Gew.% beträgt, wird die Fähigkeit
zur Unterdrückung
der Entzündung
nicht gut erreicht; wenn er hingegen mehr als 10 % beträgt, gibt es
ein Problem bei der Verwendbarkeit, beispielsweise dadurch, dass
eine Empfindlichkeit (squeaking touch) der Haut verursacht wird,
weswegen beide Fälle
nicht bevorzugt sind. Wenn PCA-Zinksalz mit einem Mittel zur externen
Applikation auf die Haut formuliert wird, ist es möglich andere
Inhaltsstoffe als die oben erwähnten und
für gewöhnlich in
Kosmetika oder in einem Mittel zur externen Applikation auf der
Haut verwendet werden, in einer solchen Menge hinzuzufügen, dass
sie nicht den Vorteil der vorliegenden Erfindung hemmen.
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Im
Hinblick auf Inhaltsstoffe, die für gewöhnlich für Kosmetika oder Mittel zur
externen Applikation auf die Haut verwendet werden, können beispielhaft
Antioxidationsmittel, antientzündliche
Mittel, Ultraviolett-Absorptionsmittel, Bleichmittel, Zellaktivatoren,
Befeuchtungsmittel, Metallchelierende Mittel, ölige Materialien, Tenside,
Lösungsmittel,
makromolekulare Substanzen, pulvrige Substanzen, Farbstoffe, Parfüms, Beschleunigungsmittel
für die
perkutane Absorption sowie Steroidhormone angegeben werden.
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Es
gibt keine besondere Beschränkung
der Dosierungsform der Kosmetika oder des Mittels zur externen Applikation
auf der Haut, welche das oben erwähnten PCA-Zinksalz enthalten,
sondern jede Form, beispielsweise eine Lösung, eine Paste, ein Gel,
ein Feststoff oder ein Pulver kann genommen werden. Kosmetika oder
Mittel für
die externe Applikation auf der Haut gemäß der vorliegenden Erfindung
können
ebenfalls in Form eines Öls,
einer Lotion, einer Creme, einer milchigen Lotion, eines Gels, eines
Shampoos, einer Haarspülung,
eines Haar-Conditioners, einer Glasur, einer Grundierung, eines
Lippenstiftes, eines Gesichtspuders, einer Packung, Salbe, Tablette,
Injektion, Körnchen,
Kapseln, Parfüm,
Pulver, Eau de Cologne, Zahnpaste, Seife, Airosol und Reinigungsschaum,
wie auch als Mittel zur Prävention
und Verbesserung der Hautalterung, Mittel zur Verbesserung und Prävention
von Hautentzündungen,
Badesalz, Haartonikum, Schönheitslotion
für die
Haut, vorbeugendes Mittel gegen Sonnenbrand, vorbeugendes oder verbesserndes
Mittel gegen Hypersensitivität
gegenüber
Sonnenlicht, wie beispielsweise Xeroderma pigmentosum und einer
durch die Sonne verursachten Nesselsucht, präventives und verbesserndes
Mittel für
Lichtallergie und vorbeugendes und verbesserndes Mittel für die optische
Immunsupprimierung oder vorbeugendes und verbesserndes Mittel für Hautsprödigkeit,
das durch eine äußere Wunde,
Risse, Risse, etc. verursacht wird, Desinfektionsmittel, antibakterielles
Mittel, Insektizid, Ausrottungsmittel für Schadinsekten, keratolytische
Mittel, Mittel gegen Abbschälen
der Epidermis, präventives
und verbesserndes Mittel gegen Pickel sowie präventives und verbesserndes Mittel
bei zahlreichen Hauterkrankungen, beispielsweise Keratosen, Xeroderma,
Ichthyose und Psoriasis vorliegen.
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Es
ist ebenfalls möglich,
dass andere gewöhnliche
Bestandteile in Kosmetika oder Mittel zur externen Applikation auf
der Haut zu der Kosmetik oder dem Mittel für die externe Applikation auf
der Haut zugegeben werden, die den oben erwähnten Bestandteil PCA-Zinksalz
in einer solchen Menge enthalten, dass diese Zugabe nicht den Vorteil
der vorliegenden Erfindung stört.
Beispiele weiterer gewöhnlicher
Bestandteile in Kosmetika oder Mittel zur externen Applikation auf
die Haut sind Antiseptika, Bleichungs-verhindernde Mittel, Puffer,
Medikamente gegen Pickel, präventive
Mittel gegen Schuppen und Jucken, Mittel gegen Schweiß/Deodorantien,
Medikamente für
thermische Verletzungen, Mittel gegen Milben und Läuse, Keratin- Weichmacher, Medikamente
gegen Xeroderma, antivirale Mittel, Hormone, Vitamine, Aminosäuren/Peptide,
astringierende Mittel, Erfrischungs-/Stimulierungsmittel, Bestandteile,
die von Tieren oder Pflanzen stammen, antibiotische Substanzen,
Antipilzsubstanzen und Haartonikum.
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Die
vorliegende Erfindung wird nun genauer mittels der folgenden Beispiele
dargestellt (Synthese-, Test- und Formulierungsbeispiele), obwohl
die vorliegende Erfindung nicht auf diese Beispiele beschränkt ist. Übrigens,
wird in diesen Beispielen die Formulierungsmenge im Hinblick auf
Gew.% angegeben.
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BEISPIEL 1: SYNTHESEBEISPIEL;
SYNTHESE EINES ZINKSALZ DER PCA UND SYNTHESE VON VERGLEICHSSUBSTANZEN
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DL-PCA-Zinksalz
wurde gemäß einem
Verfahren synthetisiert, das in einem Patent erwähnt ist (japanische Patent-Offenlegungsschrift
Nr. 03/168,240), indem DL-PCA-Säure
mit Zinkoxid in Wasser bei 100°C
für 2 Stunden
reagieren lassen wurde und bei Raumtemperatur für 5 Stunden gerührt wurde,
und dann wurden die abgetrennten Kristalle filtriert. L-PCA-Zinksalz wurde wie
folgt synthetisiert. In einem Autoklaven wurde eine wässrige Natrium-L-glutamat-monohydratlösung (61,1
g) für
2 Stunden auf 180°C
erwärmt,
um eine 50-gew.%ige, wässrige
Natriumpyrrolidoncarboxylatlösung
zu erhalten. Zu 100,0 g (0,33 mol, pH 7,7, optische Reinheit 84
%, L/D-Verhältnis=92/8)
der 50-gew.%igen wässrigen
Natriumpyrrolidoncarboxylatlösung,
wurde 2,7 g Salpetersäure
(Reinheit 60 Gew.%) hinzugegeben, um auf den pH-Wert von 5,2 einzustellen.
Die wässrige
Lösung,
in der 47,6 g (0,17 mol) an Zinksulfat-7-hydrat in 34,2 g Wasser
gelöst
wurden, wurde zu der wässrigen
Natriumpyrrolidoncarboxylatlösung
(pH 4,1) hinzugegeben. Diese wurden für 30 Minuten bei Raumtemperatur
(pH 3,7) gerührt,
um einen Kristall zu erhalten, und dann filtriert. Der erhaltene
Kristall wurde mit Wasser (21,9 g) gewaschen um 32,0 g (0,09 mol,
Ausbeute 55 %) an Zinkpyrrolidoncarboxylatdihydrat zu erhalten.
Die optische Reinheit betrug 99,8 % (L/D-Verhältnis 99,9/0,1). Als Glycin-Zinksalz, welches
als Vergleichssubstanz verwendet wurde, wurde ein kommerziell erhältliches
(Tokyo Kasei) verwendet. Zinklaurat wurde durch das folgende Verfahren
synthetisiert. Es wurden 250 mg (1,25 mmol) Laurylsäure in 10
ml Ethylalkohol gelöst,
und in der Zwischenzeit wurde eine 1%ige Zinkacetatlösung in
Ethanol (Wako Pure Chemicals) hergestellt. Das 1%ige Zinkacetat
(15,1 ml; 0,69 mmol Zinkacetat; 0,55 Äquivalente zur Laurylsäure) wurden zu
10 ml der oben hergestellten ethanolischen Lösung der Laurylsäure hinzugegeben
und das erhaltene Präzipitat
wurde filtriert. Das erhaltene Präzipitat wurde mit Wasser, Ethanol
und Aceton gewaschen und in Vakuum getrocknet, um 200 mg Zinklaurat
zu ergeben.
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TESTBEISPIEL 1: WIRKUNG
DES PCA-ZINKSALZES AUF DIE AP-1- AKTIVIERUNG
DURCH ULTRAVIOLETTE STRAHLUNG
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Zu
humanen Hautfibroblasten, die in einer Inkubationsplatte Konfluenz
erreichten, wurde eine Testverbindung in einer solchen Konzentration
gegeben, dass sie diese Fibrolasten nicht schädigte, eine Inkubation wurde
für 18
Stunden durchgeführt,
und die Inkubationsflüssigkeit
wurde durch Phenolrot-freies Medium substituiert. Die Fibroblasten
wurden unter Verwendung eines Dermaray M-DMR-80 (hergestellt von
Toshiba Iryoyohin) mit ultravioletten Strahlen (UVA: 20 J/cm2) bestrahlt. Nach 4 bis 5 Stunden wurden
die Fibroblasten gewonnen, und Nucleoprotein wurde hieraus unter
Verwendung einer konventionellen Methode extrahiert. Das erhaltene
Nucleoprotein wurde einem Gel-Shiftassay
oder ELISA-Assay (TransAM Kit, ACTIVE MOTIF) unterworfen, um aktiviertes
AP-1 nachzuweisen. Wenn der Gelshiftassay angewendet wurde, wurde
ein Radioaktivitätswert
der AP-1-Bande unter Verwendung eines Bio-imaging Analyzer BAS 2000
(hergestellt von Fuji Photo Film) gemessen, um AP-1 zu quantifizieren.
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Das
Ausmaß der
Unterdrückung
der AP-1-Aktivierung durch die Testverbindung wurde nach der folgenden
Formel berechnet. Ausmaß der Unterdrückung der
AP-1-Aktivierung (%) = {1 – (A1 – A3)/(A2 – A3)} × 100
- A1:
- Radioaktivitätswert der
AP-1-Bande, wenn die Testverbindung zugegeben wurde
- A2:
- Radioaktivitätswert der
AP-1-Bande, wenn keine Testverbindung zugegeben wurde
- A3:
- Radioaktivitätswert der
AP-1-Bande, wenn keine Testverbindung hinzugegeben wurde, und keine
ultraviolette Strahlung ausgeübt
wurde
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Ein
ELISA-Test wurde in Übereinstimmung
mit der Anleitung des verwendeten Kits durchgeführt, und die Aktivierung von
AP-1 wurde durch die Bestimmung der Quantität der Menge and c-Jun oder
c-Fos erhalten.
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Das
Ausmaß der
Unterdrückung
der AP-1 (c-Jun oder c-Fos)-Aktivierung
durch eine Testverbindung wurde gemäß der folgenden Formel berechnet. Ausmaß der
Unterdrückung
der AP-1-Aktivierung (%) = {1 – (B1 – B3)/(B2 – B3)} × 100
- B1:
- 450 nm-Absorption,
wenn eine Testverbindung hinzugegeben wurde (je Nucleoprotein)
- B2:
- 450 nm-Absorption,
wenn keine Testverbindung hinzugegeben wurde (per Nucleoprotein)
- B3:
- 450 nm-Absorption,
wenn keine Testverbindung hinzugegeben wurde und keine ultraviolette
Strahlung ausgeübt
wurde (per Nucleoprotein)
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Die
Ergebnisse der erfindungsgemäßen Testverbindung
und der Vergleichsverbindung werden in der folgenden Tabelle 1–3 gezeigt.
DL-PCA-Zinksalz und L-PCA-Zinksalz, die Testsubstanzen sind, zeigten
ein hohes Ausmaß an
Unterdrückung,
verglichen mit dem Zinksalz einer Fettsäure, beispielsweise Laurylsäure (z.B. WO
00/44341) und dem Zinksalz einer Aminosäure, beispielsweise Glycin
(z.B. WO 93/14748), die aufgrund der Induktion von Metallothionin
in der Haut dafür
bekannt sind, dass sie eine präventive
Wirkung gegen ultraviolette Strahlen haben. Ein derartiges Ergebnis
zeigt, dass die erfindungsgemäße Verbindung
eine stark unterdrückende
Wirkung gegen die Entzündung
aufweist. Eine solche Wirkung ist nicht bei dem bekannten Aminosäurezink
erreichbar, die dafür
bekannt gewesen sind, dass sie für
die Haut eine protektive Wirkung gegen ultraviolette Strahlung haben.
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Die
Formulierungsbeispiele 1 bis 13 zahlreicher Präparationen werden folgend gezeigt.
Diese Präparate
wurden gemäß einem
konventionellen Verfahren hergestellt. Die Formulierungsmengen werden
in Gew.% angegeben.
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GEWERBLICHE
ANWENDBARKEIT
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Die
vorliegende Erfindung ist im kosmetischen Bereich anwendbar.
