DE10117615A1 - Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen - Google Patents

Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen

Info

Publication number
DE10117615A1
DE10117615A1 DE2001117615 DE10117615A DE10117615A1 DE 10117615 A1 DE10117615 A1 DE 10117615A1 DE 2001117615 DE2001117615 DE 2001117615 DE 10117615 A DE10117615 A DE 10117615A DE 10117615 A1 DE10117615 A1 DE 10117615A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
stem cells
derivatives
nucleobases
nucleosides
methyluracil
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE2001117615
Other languages
English (en)
Inventor
Peter Langen
Iduna Fichtner
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Max Delbrueck Centrum fuer Molekulare in der Helmholtz Gemeinschaft
Original Assignee
Max Delbrueck Centrum fuer Molekulare in der Helmholtz Gemeinschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Max Delbrueck Centrum fuer Molekulare in der Helmholtz Gemeinschaft filed Critical Max Delbrueck Centrum fuer Molekulare in der Helmholtz Gemeinschaft
Priority to DE2001117615 priority Critical patent/DE10117615A1/de
Priority to PCT/DE2002/001239 priority patent/WO2002081664A2/de
Priority to AU2002311077A priority patent/AU2002311077A1/en
Publication of DE10117615A1 publication Critical patent/DE10117615A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/06—Anti-neoplasic drugs, anti-retroviral drugs, e.g. azacytidine, cyclophosphamide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen aus humanem Gewebe ex vivo oder in vivo unter Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten, insbesondere von 6-Methyluracil sowie Kombinationspräparaten von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten und Cytostatika.

Description

Die Erfindung betrifft die Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten, insbesondere von 6-Methyluracil zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen sowie Kombinationspräparate von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten und Cytostatika, insbesondere ein Kombinationspräparat, das mindestens ein Cytostatikum und 6-Methyluracil enthält.
In der letzten Zeit hat sich der Einsatz von Stammzellen als Möglichkeit erwiesen, um z. B. durch Krankheit, Unfälle, genetische Ursachen bedingte Zerstörungen von Geweben und Organen des menschlichen Körpers zu restaurieren. Während der Einsatz sogenannter "totipotenter" embryonaler Stammzellen auf ethische Probleme stößt, könnten geeignete Stammzellen aus adulten Organismen unbegrenzt eingesetzt werden.
Im Gegensatz zu der bisherigen Annahme, dass nur embryonale Stammzellen eine unlimitierte Regenerationsfähigkeit besitzen, hat man in letzter Zeit gefunden, dass sich auch aus adulten Geweben oder Organismen Stammzellen gewinnen lassen, die nicht nur auf die Regeneration eines einzelnen Gewebes begrenzt sind, sondern zur Regeneration unterschiedlicher Gewebe (multipotent) geeignet sind. So konnte nachgewiesen werden, dass z. B. Knochenmark, von dem bisher angenommen wurde, dass es nicht nur Stammzellen für die ständiger Regeneration bedürftigen Blutzellen enthält, sondern auch solche für Leber, neuronales Gewebe und neuronale Zellen enthält.
Die Gewinnung einer möglichst großen Zahl spezieller adulter Stammzellen stellt daher ein wesentliches Ziel dar. Es wurde gefunden, dass die hier genannten Substanzen (Formel I) für die Erreichung dieses Ziels eingesetzt werden können.
Formel I
in der
R1 = OH oder NH2,
R2 = H oder Alkyl,
R3 = H, Alkyl oder COOH und
R4 = H oder gegebenenfalls substituiertes Desoxyribosyl, -ribosyl oder -arabinosyl
bedeuten
(6-Methyluracil R1 = OH, R2 = H, R3 = Methyl, R4 = H)
Die Wirkung dieser Präparate, insbesondere 6-Methyluracil, kann bei geeigneten Geweben, wie Knochenmark, entweder ex vivo oder in vivo, bei 6-Methyluracil durch orale Applikation, erzielt werden.
Zur ex vivo Behandlung werden Gewebe, bevorzugt Knochenmark in Suspension mit einer 0,1 mM Lösung der genannten Verbindungen für eine Stunde bei 37 Grad C behandelt. Danach kann diese Verbindung beseitigt werden (oder in der Lösung belassen werden) und entweder zur Expansion des Stammzell-Pools in eine geeignete Zell-Kultur gegeben werden oder zurück in vivo appliziert werden.
Geeignete der genannten Verbindungen können auch direkt in vivo appliziert werden. Eine besonders dafür geeignete Verbindung ist 6-Methyluracil. 6-Methyluracil ist oral anwendbar, billig und Nebenwirkungen wurden bisher weder nach eigenen Versuchen beobachtet noch in der Literatur beschrieben. Seine Anwendung in Kombination mit Cytostatika ist nach den bisher vorliegenden Befunden ein wichtiger Beitrag zur Optimierung der Krebs-Chemotherapie.
Die bevorzugten Dosierungen für 6-Methyluracil liegen erfindungsgemäß bei 150 bis 600 mg/kg.Tag, wobei sich gezeigt hat, daß eine Dosis von 300 mg/kg.Tag deutlich besser wirkt als die Hälfte, während eine weitere Verdoppelung 600 mg/kg.Tag zu keinen eindeutigen Verbesserungen führt.
Daher wird besonders bevorzugt eine Dosis von 300 mg/kg.Tag 6-Methyluracil appliziert. 6- Methyluracil wird dabei vorzugsweise oral angewendet, wobei es auch einem Getränk beigemischt werden kann.
Gegenstand der Erfindung ist auch ein Kombinationspräparat, das mindestens ein Cytostatikum und ein Nucleosid, eine Nucleobase oder deren Derivate der allgemeinen Formel I vorzugsweise in getrennten und gegebenenfalls in unterschiedlichen Darreichungsformen, enthält.
In einer bevorzugten Ausführungsvariante enthält das Kombinationspräparat Carboplatin mit gegebenenfalls an sich üblichen Hilfs-, Träger- und Zusatzstoffen und 6-Methyluracil ebenfalls mit gegebenenfalls an sich üblichen Hilfs-, Träger- und Zusatzstoffen.
Anschließend wird die Erfindung an Hand von Abb. 1 näher erläutert.
Im Tierversuch hat sich eine Vorbehandlung der Tiere mit Cytostatika, z. B. Cyclophosphamid, als vorteilhaft erwiesen, da dadurch die Bildung der Stammzellen- Wachstumsfaktoren angeregt wird. Als wichtig hat sich dabei die zeitliche Reihenfolge der Gabe von 6-Methyluracil und Cytostatikum erwiesen. 6-Methyluracil kann frühestens zusammen mit dem Cytostatikum gegeben werden, besser einen Tag später. Wird es früher gegeben, so fördert es die Bildung der Wachstumsfaktoren für die Stammzellen und somit deren Proliferation schon zu einer Zeit, in der das Cytostatikum noch wirksam ist und so die Stammzellen, weil proliferierend, abtötet.
Der schützende Effekt einer zum richtigen Zeitpunkt gegebenen 6-Methyluracilgabe und der schädigende einer zu frühen Applikation kann im Tierversuch an Hand der Letalität des eingesetzten Cytostatikums leicht nachgewiesen werden.
Durch die Behandlung mit den genannten Verbindungen können Stammzellen-Mengen nach den jeweils beschriebenen Methoden gewonnen werden.
CFU-GM ist die Stammzelle aus der Granulozyten und Macrophagen entstehen. CFF-GM entsteht aus einer weiteren (uns noch unbekannten) "primitiven" Stammzelle und es ist diese Stammzelle, deren Bildung durch G-MU gefördert wird. Aus der Abb. 1 geht auch hervor, dass nach vorhergehender Cytostatika-Behandlung mehr von diesen Stammzellen erhältlich sind, als normal vorhanden (z. B. ~3000 in (a) gegenüber 60000 mit Cytostatika + 6-MU (b)). Allerdings sind mit Cytostatika allein schon 40000 erhalten.
Ein solches Überschießen bei Regenerations-Prozessen ist bekannt.
Legende zu Abb. 1
Einfluß von MU im Trinkwasser (a, b, und c: 150 mg/kg/d, d: 300 mg/kg/d) auf die Zahl der CFU-GM/Femur männlich C57B1-Mäuse in Abhängigkeit von der i. p. applizierten Endoxandosis (U-Test von Wilcox, Mann und Whitney: * = P < 0.05, ** = P < 0.005; mit 6-MU: ∎ ; Kontrollen: ; Prozentwerte geben den relativen MU- Effekt im Vergleich zu den Kontrollen an)

Claims (3)

1. Verfahren zur Gewinnung von adulten Stammzellen, dadurch gekennzeichnet, dass humane Gewebe, bevorzugt Knochenmark, ex vivo oder in vivo mit Verbindungen der Formel I behandelt werden und die gebildeten Stammzellen anschließend in an sich üblicher Weise abgetrennt werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine Vorbehandlung mit Cytostatikum, bevorzugt Cyclophosphamid erfolgt.
3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass als Verbindung der Formel I 6-Methyluracil eingesetzt wird.
DE2001117615 2001-04-07 2001-04-07 Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen Withdrawn DE10117615A1 (de)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2001117615 DE10117615A1 (de) 2001-04-07 2001-04-07 Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen
PCT/DE2002/001239 WO2002081664A2 (de) 2001-04-07 2002-04-05 Verwendung von nucleosiden, nucleobasen und deren derivaten zur verbesserten gewinnung von adulten stammzellen
AU2002311077A AU2002311077A1 (en) 2001-04-07 2002-04-05 Use of nucleosides, nucleobases and derivatives thereof for improved production of adult stem cells

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2001117615 DE10117615A1 (de) 2001-04-07 2001-04-07 Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE10117615A1 true DE10117615A1 (de) 2002-10-10

Family

ID=7680917

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2001117615 Withdrawn DE10117615A1 (de) 2001-04-07 2001-04-07 Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen

Country Status (3)

Country Link
AU (1) AU2002311077A1 (de)
DE (1) DE10117615A1 (de)
WO (1) WO2002081664A2 (de)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1329932C (en) * 1987-10-28 1994-05-31 Reid Von Borstel Acyl deoxyribonucleoside derivatives and uses thereof
DE4123520A1 (de) * 1991-07-16 1993-01-21 Inst Molekularbiologie Ak Mittel zur regeneration des blutbildes durch foerderung der leukozytenproliferation
DE19652418A1 (de) * 1996-12-09 1998-06-10 Max Delbrueck Centrum Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zum Herabsetzen toxischer Nebenwirkungen von Cytostatika
DE19842578A1 (de) * 1998-09-17 2000-03-23 Max Delbrueck Centrum Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zum Herabsetzen thrombocytopenischer Nebenwirkungen von Cytostatika

Also Published As

Publication number Publication date
WO2002081664A2 (de) 2002-10-17
WO2002081664A3 (de) 2002-12-27
AU2002311077A1 (en) 2002-10-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2934069C2 (de)
DE69125714T2 (de) Zusammensetzung für die behandlung des humanen prostata adenokarzinom
DE3611194A1 (de) Cancerostatisches mittel
DE102005008310A1 (de) Verwendung von CDKII Inhibitoren zur Fertilitätskontrolle
DE3885933T2 (de) Zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen mit antiamnesischer Wirkung geeignete Pteridine.
DE69914084T2 (de) Phenylacetylglutamin, phenylacetylisoglutamin, und/oder phenylacetat zur behandlung von neoplastischen erkrankungen
DE68906345T2 (de) Antimalariazusammenstellungen, gebrauchmachend von Quinidin, Artemisinin und ihren Derivaten.
DE3607381A1 (de) Verwendung von diphenylhydantoin und seinen derivaten zur behandlung von immunerkrankungen
DE2713103C2 (de) 1-Nitro-9-dialkylaminisoalkylaminakridine, ihre Salze und Verfahren zu ihrer Herstellung
DE69111974T2 (de) Verwendung von Lithium zur Behandlung oder Prophylaxe von Molluscum contagiusum.
DE2900203A1 (de) Krebshemmendes und krebsmetastasen verhinderndes arzneimittel
DE69121551T2 (de) Antineoplastisch wirkender und den antineoplastischen effekt verstärkender wirkstoff
DE69814089T2 (de) Verwendung von einem draflazin analog zur schmerzbehandlung
DE69127285T2 (de) Verwendung von verbindungen zur behandlung von altersbedingtem gedächtnisschwund und anderen kognitiven störungen
DE10117615A1 (de) Verwendung von Nucleosiden, Nucleobasen und deren Derivaten zur verbesserten Gewinnung von adulten Stammzellen
DE3424997C2 (de)
DE69331005T2 (de) Verbindung zur biologischen stimulation und korrektur des phenotyps eines organismus und verfahren für ihre herstellung
EP0028660A1 (de) Xanthinoxydasehemmer und Verwendung von Benztriazinderivaten
DE60115237T2 (de) Praziquantel zusammensetzungen zur behandlung von krankheiten verursacht durch kokzidien
DE3240650C2 (de)
DE60116478T2 (de) Verwendung von cdp-cholin zur prophylaxe der cerebralen ischämie
DE3883696T2 (de) Anti-Krebs-Mittel und Reagenz zur Gewinnung von Revertanten.
DE4442257A1 (de) Sparsomycin
DE60012183T2 (de) Verwendung einer makrolid-verbindung zur herstellung eines medikaments zur behandlung von gehirnschäden aufgrund von ischämie oder blutungen
DE69722025T2 (de) Verfahren zur unterbrechung der desoxyribonukleotidtriphosphat-biosynthese

Legal Events

Date Code Title Description
8139 Disposal/non-payment of the annual fee