DD249154A3 - Testmittel zur bestimmung von substanzen in koerperfluessigkeiten - Google Patents
Testmittel zur bestimmung von substanzen in koerperfluessigkeiten Download PDFInfo
- Publication number
- DD249154A3 DD249154A3 DD27498485A DD27498485A DD249154A3 DD 249154 A3 DD249154 A3 DD 249154A3 DD 27498485 A DD27498485 A DD 27498485A DD 27498485 A DD27498485 A DD 27498485A DD 249154 A3 DD249154 A3 DD 249154A3
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- test agents
- test
- body fluids
- substances
- sulfites
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft die Verbesserung der Lagerstabilitaet von Testmitteln zur Bestimmung von Substanzen in Koerperfluessigkeiten. Die Erfindung hat das Ziel, zur Vermeidung oekonomischer Verluste die Lagerfaehigkeit von Testmitteln zu verbessern, ohne dabei gleichzeitig die Indikatorreaktion wesentlich zu beeintraechtigen. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Testmittel mit verringerter Autoxydation herzustellen. Erfindungsgemaess wird die Aufgabe geloest, indem den Testmitteln ein oder mehrere Sulfite oder ein Gemisch aus Hydroxylamin und einem oder mehreren Sulfiten zugesetzt wird, denn es wurde ueberraschend gefunden, dass durch diese Zusaetze die Autoxydation ohne wesentliche Beeintraechtigung der Indikatorreaktion unterdrueckt werden kann. Unter Ausnutzung des erfindungsgemaessen Effektes koennen Testmittel mit verbesserter Lagerfaehigkeit hergestellt werden. Diese Testmittel koennen beispielsweise in der medizinischen Diagnostik und in der Therapiekontrolle zur Bestimmung von Substanzen in Koerperfluessigkeiten eingesetzt werden.
Description
Die Erfindung betrifft die Verbesserung der Lagerstabilität von Testmitteln, in denen autoxydable Indikatorsysteme verwendet werden, zur Bestimmung von Substanzen in Körperflüssigkeiten. Sie sollen bevorzugt in der medizinischen Diagnostik und in der Therapiekontrolle eingesetzt werden.
Bei den bisher bekannten Testmitteln, die zur Bestimmung von Substanzen in Körperflüssigkeiten eine Öxydase/Peroxydase-Reaktion verwenden (z. B. Testmittel zum Nachweis von Glucose, Harnsäure, Aminosäuren, Triglyzeriden, Cholesterin,, Pyruvat u.a.), werden häufig zum Nachweis des intermediär entstehenden Wasserstoffperoxyds substituierte Benzidine (DE-OS 2460903) oder substituierte p-Phenylendiamine in Verbindung mit einem Farbkuppler eingesetzt.
Nachteilig an derartigen Indikatorsystemen ist ihre hohe Empfindlichkeit gegen Licht, Luftsauerstoff und Feuchtigkeit. Besonders die substituierten p-Phenylendiamine werden vor allem bei höheren pH-Werten, die beispielsweise für eine schnelle Farbkupplung bzw. für bestimmte enzymatische Reaktionen angewendet werden, in steigendem Maße angegriffen. Deshalb läuft bereits während der Lagerung der Testmittel die Indikatorreaktion ohne Einwirkung des Probengutes teilweise ab, wodurch diese Testmitte! nur eine begrenzte Zeit verwendbar sind.
Es ist aus der Photochemie bekannt, daß Lösungen von substituierten Phenylendiaminen durch Zusatz von beispielsweise Hydroxylamin und Natriumsulfit gegen den Angriff durch Luftsauerstoff stabilisiert werden können (DRP 743262; Meyer, K., Brune,W.:Z.wiss. Photogfaphie46 [1951], 169). Dabei muß allerdings eine z.T. beträchtliche Störung der Farbreaktion während des Entwicklungsvorganges in Kauf genommen werden.
Es ist weiterhin bekannt, daß Wasserstofferoxid sowohl Hydroxylamin als auch Alkalisulfite sehr schnell oxydiert (Gmelins Handbuch der anorganischen Chemie, Verlag Chemie, Berlin 1936,23,572; Gmelins Handbuch der anorganischen Chemie, Verlag Chemie, Weinheim 1960,9,514f.), was den Einsatz dieser Substanzen zur Stabilisierung eines Systems mit dessen Hilfe Wasserstoffperoxid nachgewiesen werden soll, als unmöglich erscheinen läßt.
Die Erfindung hat das Ziel, zur Vermeidung ökonomischer Verluste die Lagerfähigkeit von Testmitteln, in denen autoxydable Indikatorsysteme verwendet werden, zu verbessern, ohne dabei gleichzeitig die Indikatorreaktion wesentlich zu beeinträchtigen.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Testmittel mit verringerter Autoxydation und damit verbesserter Lagerstabilität herzustellen.
Die Testmittel können entweder auf der Basis von mit den Reagenzien imprägnierten Matrizen oder auf der Basis von Filmen, die die Reagenzien enthalten, beruhen. Sie werden vor der Verwendung in handliche und damit materialsparende Formate (z.B.
Teststreifen) geschnitten.
Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß den Testmitteln auf der Basis der Oxydase/Peroxydase-Reaktion und mit autoxydablen Indikatorsystemen ein oder mehrere Sulfite oder ein Gemisch aus Hydroxylamin und einem oder mehreren Sulfite zugesetzt werden, denn es wurde überraschend gefunden, daß durch diese Zusätze die Autoxydation ohne wesentliche Beeinträchtigung der Indikatorreaktion unterdrückt werden kann (s. Tabelle 1, Testmittel Nr. 2,3,4, .5,7,8,9,10 sowie Zusammenstellung in Beispiel 3), wodurch sich die Lagerfähigkeit der Testmittel ohne Empfindlichkeitsverlust wesentlich verbessert (s. Tabelle 1). Diese Nichtbeeinträchtigung der Indikatorreaktion durch die erfindungsgemäßen, stabilisierenden Zusätze ist aus zwei Gründen besonders wichtig. Einerseits kann in diesem Falle der im Verlauf der Lagerung auftretende Abbau der stabilisierenden Zusätze nicht zu einem Anstieg der Empfindlichkeit, d. h. zu falsch positiven Werten führen. Andererseits kann bei einer ungestörten Indikatorreaktion die Wasseraufnahme von Testmitteln auf Filmbasis minimal gehalten werden, was sich bekanntlich bei Verwendung von Vollblut als Untersuchungsmaterial vorteilhaft auf die Hämatokritabhängigkeit der Testergebnisse auswirkt.
Tabelle 1: Einfluß der Mengen an stabilisierenden Zusätzen auf die Autoxydation und die Farbausbeute verschiedener Testmittel (außer der Menge an eingesetzter Oxydase und der Antioxydanskonzentration gleiche Rezepturen und Eigenschaften bei Nr. 1 bis 5 bzw. Nr.6 bis 10)
Testmittel zum Glucosenachweis, pH 7,2...7,4
Nr. Na2O3/Hydroxylamin (jeweils
in Mol-% bezogen auf substituiertes p-Phenylendiamin)
1 | 0 |
2 | 10 |
3 | 50 |
4 | 100 |
5 | 200 |
relativer Leerwertanstieg inner-
halbeines Jahres bei kühler
und trockener Lagerung (in %,
bezogen auf unstabilisierten
Film)
! ΊθΟ
Testmittel zum Harnsäurenachweis, pH 8,0...8,2
Nr. Na2SO3 (in Mol-% bezogen auf
substituiertes p-Phenylendiamin)
6 | 0 |
7 | 10 |
8 | 50 |
9 | 100 |
10 | 200 |
relativer Leerwertanstieg innerhalb eines Jahres bei kühler undtrockener Lagerungen %, bezogen auf unstabilisierten
Film) __
TÖO
75 :
47
40
34
Farbausbeute (in %, bezogen auf unstabilisierten Film, Verwendung von Vollblut, 30 mmol/l Glucose)
100 97 98 89 , 69
Farbausbeute (in %, bezogen auf unstabilisierten Film, Verwendung von Vollblut, 500ju.mol/l Harnsäure)
100 98 98 92 75
Die Eignung dieser Zusätze zur Vermeidung von Autoxydation war nicht vorauszusehen, da neben der Autöxydationsschutzwirkung auch die hohe Reaktivität dieser Verbindungen gegenüber Wasserstoff peroxyd, welches in den Testmitteln mit Oxydase/Peroxydase-Reaktion intermediär entsteht und quantitativ nachgewiesen werden soll, allgemein bekannt ist (Gmelins Handbuch der anorganischen Chemie, Verlag Chemie, Berlin 1936,23,572; Gmelin's Handbuch der anorganischen Chemie, Verlag Chemie, Weinheim 1960,3,514f.). Zweckmäßigerweise werden die Zusätze im stöchiometrischen Verhältnis zum Entwickler eingesetzt, ohne daß die erzielte Wirkung auf diese Konzentration beschränkt ist. Unter Verwendung der erfindungsgemäßen Zusätze können Testmittel mit verbesserter Lagerstabilität hergesteift werden.
Im folgenden soll anhand von Ausführungsbeispielen die Erfindung näher erläutert werden.
Testfilme zum Glucosenachweis
Es werden 5 Testfilme mit folgender Zusammensetzung hergestellt:
Gelatine
HS'-Sulfo^'-phenoxyphenyll-S-fcarboxyheptadecyl-amidopyrrazolon-io)] 4-(N,N-ö-Sulfobuty!-butylammonium)-ani!inium-sulfat Glucoseoxydase :Peroxydase
6g
368 mg 360 mg 15000U 1500U
sowie neben den üblichen Hilfsstoffen wie Netzmittel, Weichmacher und Härter je Begußlösung folgende Mengen an stabilisierenden Zusätzen:
Hydroxylamin-[mg] | Na2SO3 -7 H2O [mg] |
sulfat | |
O | 0 |
7,5 | 23 |
37 | 116 |
74 | 232 |
148 | 464 |
FiIm-Nr.
Die Mischungen werden auf pH 7,3...7,4 eingestellt und auf transparente Zelluloseacetatfolien, welche mit einer Haftschicht versehen sind, aufgetragen und getrocknet. Anschließend werden die Testfilme zweckmäßigerweise in Streifen geschnitten. Die Testfilme haben hinsichtlich ihrer Lagerstabilität sowie Farbausbeute die in Tab. 1 zusammengestellten Eigenschaften.
Testfilme zum Harnsäurenachweis
Es werden 5 Testfilme mit folgender Zusammensetzung hergestellt:
Gelatine i-tS'-Sulfo^'-phenoxyphenylJ-S-tcarboxyheptadecyl-amidopyrrazolon-io)] 4-(N,N-8-Sulfobutyl-butylammonium)-anilinium-sulfat Uricase Peroxydase
Na-Boratpuffer(SÖRENSEN-CLARK)
25 g 230 mg 150 mg
75 U 5000U
75 ml
Sowie neben den üblichen Hilfsstoffen wie Netzmittel, Weichmacher und Härter je Begußlösung folgende Mengen an Natriumsulfit:
FiIm-Nr. | Na2SO3-7 H2O [mg] |
6 | 0 |
7 | 10 |
8 | 48 |
9 | 96 |
10 | 192 |
Die Mischungen werden auf pH 8,0... 8,2 eingestellt und auf transparente Zelluloseacetatfolien, welche mit einer Haftschicht versehen sind, aufgetragen und getrocknet. Anschließend werden die Testfilme zweckmäßigerweise in Streifen geschnitten. Die Testfilme haben hinsichtlich ihrer Lagerstabilität sowie Farbausbeute die in Tab. 1 zusammengestellten Eigenschaften. Die obigen Beispiele stellen keine Einschränkung der erfindungsgemäßen Lösungdar. Siesollen deren Allgemeingültigkeit für verschiedene enzymatische Reaktionen und Reaktionen bei verschiedenen pH-Werten demonstrieren.
Testmittel zum Glucosenachweis: -
Es werden 5 Testfilme mit folgender Zusammensetzung hergestellt:
Gelatine .
1-[3'Sulfo-4'-phenoxyphenyl]-3-[carboxyheptadecylamidopyrrazolon-(5)] 4-(N,N-8-Sulfobutyl-butylammonium)-amilinium-sulfat Glucoseoxydase Peroxydase
6g
368 mg 360 mg 15000U 1500U
sowie neben den üblichen Hilfsstoffen wie Netzmittel, Weichmacher und Härter je Begußlösung folgende Mengen an stabilisierenden Zusätzen:
FiIm-Nr.
11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
Hydroxylaminsulfat[mg]
7,5 37 74 148
(NH4I2SO3 | K2SO3-2 H2O |
[mg] | [mg] |
0 | 0 |
10,5 | 0 |
53 | 0 |
107 | 0 |
214 | 0 |
0 | 18 |
0 | 89 |
0 | 179 |
0 | 357 |
10,5 | 0 |
53 | 0 |
107 | 0 |
214 | 0 |
Die Mischungen werden auf pH 7,3...7,4 eingestellt und auf transparente Zelluloseacetatfolien, welche mit einer Haftschicht versehen sind, aufgetragen und getrocknet. Anschließend werden die Testmittel zweckmäßigerweise in Streifen geschnitten.
Die Testmittel haben hinsichtlich ihrer Lagerstabilität sowie Farbausbeute die in der folgenden Zusammenstellung ausgewiesenen Eigenschaften.
Zusammenstellung der Eigenschaften der Testmittel
FiIm-Nr. | relativer Leerwertanstieg innerhalb eines Jahres | Farbausbeute (in %, bezogen auf den unstabili |
bei kühler und trockener Lagerung (in %, bezogen | sierten Film, Verwendung von Vollblut, | |
auf den unstabilisierten Film) | 30 mmol/l Glucose) | |
11 | 100 | 100 |
12 | 76 | 99 |
13 | 47 | 93 |
14 | 41 | 90 |
15 | 37 | 71 |
16 | 80 | 97 |
17 | 46 | 95 |
18 | 42 | 89 |
19 | 33 | 66 |
20 | 71 | 98 |
21 | 39 | 93 |
22 | 36 | 88 |
23 | 25 | 62 |
Claims (3)
1. Testmittel zur Bestimmung von Substanzen in Körperflüssigkeiten auf der Basis des Oxydase/ Peroxydase-Systems und unter Verwendung von aromatischen Diaminen bzw. Benzidinen als Farbentwickler und einem Farbkuppler bzw. Farbfixiermittel bei pH-Werten von >5, dadurch gekennzeichnet, daß in den Testmitteln ein oder mehrere Alkali- bzw. Ammoniumsulfite oder ein Gemisch aus Hydroxylamin und einen oder mehreren Alkali- bzw. Ammoniumsulfiten enthalten sind.
2. Testmittel nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß das oder die Alkali- bzw. Ammoniumsulfite in einer Gesamtkonzentration von 2 bis 10OOMol-% Sulfit, vorzugsweise 50 bis 200Mol-% Sulfit, bezogen auf den Farbentwickler, enthalten sind.
3. Testmittef nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß Hydroxylamin in einer Konzentration von 0 bis 1000 Mol-%, vorzugsweise 50 bis 200 Mol-%, bezogen auf den Farbentwickler, enthalten ist.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DD27498485A DD249154A3 (de) | 1985-04-09 | 1985-04-09 | Testmittel zur bestimmung von substanzen in koerperfluessigkeiten |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DD27498485A DD249154A3 (de) | 1985-04-09 | 1985-04-09 | Testmittel zur bestimmung von substanzen in koerperfluessigkeiten |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DD249154A3 true DD249154A3 (de) | 1987-09-02 |
Family
ID=5566719
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DD27498485A DD249154A3 (de) | 1985-04-09 | 1985-04-09 | Testmittel zur bestimmung von substanzen in koerperfluessigkeiten |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DD (1) | DD249154A3 (de) |
-
1985
- 1985-04-09 DD DD27498485A patent/DD249154A3/de not_active IP Right Cessation
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0037056B1 (de) | Verfahren und diagnostische Mittel zum Nachweis von Redox-Reaktionen | |
EP0068356B1 (de) | Mittel und Verfahren zum Nachweis von Wasserstoffperoxid oder Peroxidasen | |
DE2838675C3 (de) | Testmittel zum Nachweis von Ketonen bei alkalischem pH-Wert | |
EP0054689B1 (de) | Stabilisierte Zubereitung von Tetrazoliumsalzen | |
EP0224813B1 (de) | Mittel zur Bestimmung von Peroxidase-Aktivität mit Stabilisator, Verfahren zur Herstellung und seine Verwendung | |
DE2943423C2 (de) | ||
EP0071730A1 (de) | Stabilisiertes Reagenz zum Nachweis von Wasserstoffperoxid | |
DE1918106C3 (de) | Verfahren zur Herstellung eines photographischen Farbentwicklers | |
DE2653537C3 (de) | Verfahren und Mittel zur Bestimmung von Hydroperoxiden | |
DE3125667C2 (de) | Verfahren und Mittel zum Nachweis von Wasserstoffperoxid | |
DE2919545A1 (de) | Neue l-leucyl-4-hydroxyanilid-derivate, verfahren zu deren herstellung, sowie verwendung derselben | |
DE2615958A1 (de) | Stabilisierte coenzymloesung | |
DD249154A3 (de) | Testmittel zur bestimmung von substanzen in koerperfluessigkeiten | |
EP0043550B1 (de) | Mittel zum Nachweis peroxidatisch wirksamer Substanzen und Verwendung von Polyvinylmethylacylamid in einem solchen | |
DE2803955C3 (de) | Prüfmittel zur Bestimmung einer peroxidativ wirkenden Substanz in einer Probe | |
DE4321807C2 (de) | Verfahren zur quantitativen Bestimmung von 1,5-Anhydroglucitol und Testpack | |
DE2110416C3 (de) | 4,4'Diaminodiphenylderivate und ihre Verwendung als Chromogene in diagnostischen Zubereitungen | |
EP0121944B1 (de) | Verfahren zur enzymatischen Bestimmung von Sulfit | |
CH643883A5 (de) | Zusammensetzung fuer die bestimmung von harnsaeure. | |
EP0025889A1 (de) | Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Bilirubin in Körperflüssigkeiten und Verwendung eines dafür geeigneten Reagenzes | |
DE3301470C2 (de) | ||
DE4103220A1 (de) | Verfahren zur stabilisierung von 1-methylhydantoinase, verwendung einer stabilisierten 1-methylhydantoinase zur bestimmung eines analyten, entsprechendes bestimmungsverfahren sowie hierfuer geeignete mittel | |
DE3539772C2 (de) | ||
DD211874A5 (de) | Verbesserter proben-teststreifen und testverfahren fuer okkultes blut | |
DE3238339A1 (de) | Chromogenes mittel zur kolorimetrischen bestimmung von peroxiden |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
ENJ | Ceased due to non-payment of renewal fee |