DD213947A1 - Verfahren zur kultivierung von bakterien der species pasteurella multocida - Google Patents
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Abstract
Das Verfahren zur Kultivierung von Bakterien der Species Pasteurella multocida" bezieht sich auf das Anwendungsgebiet der Herstellung von Impfstoffen. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Kultivierungsverfahren zu beschreiben, das ohne erhoehten Material- und Energieeinsatz eine verbesserte Impfstoffproduktion erlaubt. Das Wesen der Erfindung besteht darin, dass die Kultivierung zur Biomasseproduktion von P. multocida bei erniedrigten Kultivierungstemperaturen, zwischen 25 und 30 Grad C, am besten bei 27 Grad C, erfogt. Die Erfindung kann in der Grossproduktion von Pasteurella-multocida-Vakzine Anwendung finden.
Description
Titel der Erfindung
Verfahren zur Kultivierung von Bakterien der Species Pasteurella multocida
Anwendungsgebiet der Erfindung
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Kultivierung von Bakterien der Species Pasteurella multocida. Die Vermehrung dieser Mikroorganismen, die als Erreger von Krankheiten eine Holle spielen, ist für die Herstellung von Impfstoffen bedeutsam.
Charakteristik der bekannten technischen Lösungen
Die Massenkultivierung für diese Zwecke geschieht in bekannter Weise bei 370C in flüssigen Nährmedien unterschiedlicher Zusammensetzung - in chemisch definierten, teilweise definierten bzw. komplexen Medien mit mehr oder weniger hohen Anteilen Undefiniert zusammengesetzter natürlicher Bestandteile, z* B. Pepton, Trypton, Hefe-Extrakt, Serum, Pleischwasser u.a.
Die Biomasseproduktion ist je nach der Art der eingesetzten Nährlösungen ,und Kultivierungsbedingungen unterschiedlich hoch. Zur Massenkultivierung für die ImpfStoffproduktion eingesetzte Medien sind aufgrund ökonomischer Betrachtungen oft nicht geeignet, so daß die in Laboransätzen erreichten Ausbeuten dort kaum erreicht werden. Die Erfindung bezweckt deshalb, bei gleichem Materialeinsatz durch Veränderung der Kultivierungsbedingungen die Biomasseproduktion zu erhöhen.
Darlegung des Wesens der Erfindung
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Kultivierungsverfahren zu beschreiben, das ohne erhöhten Material- und Energieeinsatz eine verbesserte Impfstoffproduktion erlaubt.
Erfindungsgemäß wird diese Aufgabe dadurch gelöst, daß Stämme von Pasteurella multocida durch Erniedrigung der Bebrütungstemperatur kultiviert werden, wobei die Ausbeuten an Biomasse ohne zusätzlichen Materialeinsatz bei der Herstellung der Hährlösungen stark erhöht v/erden. Statt der bisher üblichen 37°C werden Temperaturen zwischen 25 und 3o C eingesetzt, wobei sich als praktikable Größe 270C erweist. Damit wird bei gleichem Nährstoffangebot unter Temperaturerniedrigung um 1o C (also gleichzeitiger Einsparung von Energie) eine Ausbeutesteigerung von 1o - oo % erreicht.
Ausführungsbeispiele
1.Am Beispiel von P. multocida 383 aus der Stammsammlung des Instituts für bakterielle Tierseuchenforschung Jena soll die Abhängigkeit der Biomasse-Ausbeuten von der Kultivierung stemperatur gezeigt werden (als Maß für die produziete Biomasse dient die bei 650 lim gemessen=Extinktion am Photometer, E^1- )j
Temperatur ( C) | Ausbeute (E |
2o. | 0,41 |
• 22 | 0,46 |
24 | o,52 |
26 | o,59 |
27 | o,62 |
28 | o,62 |
3o | o,57 |
32 | o,56 |
37 | o,49 |
Die Zahl der Lebendkeime ist bei erniedrigter Temperatur ebenfalls erhöht (P. multocida 383; 370C: 5 χ 1o9/ml, 270C:
7 x 1o /ml). Bei Kultivierung im Bakterienferment er werden gleichfalls analoge Ausbeuteerhöhungen beobachtet: 370C;
Err- = o,6; 6 χ Ιο"1 Lebendkeime/ml; 270C: E/-r-_ = o,75; coo -ι 030
2 χ 1o Lebendkeime/ml.
Die vorgenannten Ergebnisse wurden mit einem chemisch definiertem Uährmedium (Rezept n9o6") folgender Zusammensetzung bei der Kultivierung erreicht (Angaben in g/l Aqua dest., pH 7,S - S):
12 H2O 32,3
1'36
HaCl ^ 1,19
MgSo1 . 7 H2O ο,25
Glucose 6
L-Arginin » HCl ο,2
L-Asparaginsäure 1,6
L-Cystin o,12
L-Glutaminsäure ο, 15
DL-Serin ο,2
(oder L-Serin o,1)
L-Isoleucin 0,065
L-Leucin 0,065
L-Phenylalanin 0,085
L-Tyrosin o,o9
Ca-Pantothenat o,oo2
Mcotinsäureamid 0,00 5
Thiamin . HCl o5oo1
Orotsäure ' o,o15
Eisen-III-citrat o5oo1
Die starke Ausbeuteerhöhung bei 270C ist jedoch nicht auf ein bestimmtes !Tährmedium bei der Durchführung des Kultivierungsverfahrens beschränkt, wie die Versuche mit verschiedenen Medien beweisen. Auf 6 unterschiedlichen ITährmedien, die sowohl chemisch definierten, teildefinierten als auch komplexen Charakter hatten, wurden stets bei 270C höhere Biomasseausbeuten erreicht (P. multocida 383):
(270C)
0,60 o,77 o,9o 0,64 0,60 0,60
wsiehe Seite 4
Medium | 8o3S | (komplex) | TP ( J7 ώ65ο °7 |
Rezept | 8o3 | (teildefiniert) | o,55 |
808 | (teildefiniert) | o,73 | |
9o2 | .(definiert) | 0,80 | |
9o6 | (definiert) | o,5o | |
9o9 | (definiert) | o,52 | |
o,51 | |||
die Nährmedienzusammensetzung ist v/ie folgt (g/l): 8o3: Na2HPO. . 12 H2O 32,3
24 1,36
MgSO4 . 7 H2O o,25
Glucose 6
L-Arginin . HCl . o,1
L-Asparaginsäure 1,6
L-Cystin ο,οβ
!-Glutaminsäure o,o75
DL-Serin o,1
(oder L-Serin o,o5)
Ca-Pantothenat o,oo2
Nicotinsäureamid ο,005
Thiamin . HCl o,oo1
Orotsäure o,o15
Hefe-Extrakt 5
8o3S: 8o3 mit 1o % Pferdeserum oder Kälberserum·
808: Na2HPO4 . 12 H2O 32,3
KH2PO4 1,36
MgSO4 .7H2O o,25
Glucose 6
L-Asparaginsäure 1,6
Fumarsäure 5,8
Hefe-Extrakt 5
9o2: Rezept 9o6 (siehe im Text weiter vorn) ohne Pe-Ill-citrat
9o9: Rezept 9o6 (siehe im Text weiter vorn) ohne Pe-Ill-citrat, ohne Tyrosin
2. Mit 11 repräsentativen P.-multocida-Stämmen unterschiedlicher Typen aus der Stammsammlung des Instituts für bakterielle Tierseuchenforschung Jena (383, 383 ts, 6417, 35), dem Institut "Pasteur" 3ukarest (B 85o), dem Central Public Health Laboratory, London (ICTC 1o322, 1o324, 1o326, 1o2o4, 1o3o2) und dein National Institute of Animal Health, Tokyo (VA 3j Bunia II) wurde das Verfahren in der beschriebenen Weise bei 270C durchgeführt und ebenfalls in allen Fällen eine Ausbeutesteigerung erreicht:
Stamm S^r- (3-7 C; Ξ,-.- (^ 7 C)
383 o,46 o,59
383 ts · o,39 o,47
VA 3 o,45 o,5o
6417 o,34 0,46
B 35o 0,46 o,5o
35 o,54 o,58
Bunia II 0,48 o,52
I0324 o,5o 0,60
1o2o4 o,57 o,62
I0326 o,5o o,54
1o3o2 o,47 0,61
Claims (2)
- Erfindungsanspruch1. Verfahren zur Kultivierung von Bakterien der Species. Pasteurella multocida, dadurch gekennzeichnet, daß die Vermehrung zur Biomasseproduktion bei erniedrigten Kultivierungstemperaturen im Bereich von 25 bis 3o°C erfolgt*
- 2. Verfahren nach Punkt 1.,dadurch gekennzeichnet, daß die Kultivierung bei 270G erfolgt.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DD24857583A DD213947A1 (de) | 1983-03-08 | 1983-03-08 | Verfahren zur kultivierung von bakterien der species pasteurella multocida |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DD24857583A DD213947A1 (de) | 1983-03-08 | 1983-03-08 | Verfahren zur kultivierung von bakterien der species pasteurella multocida |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DD213947A1 true DD213947A1 (de) | 1984-09-26 |
Family
ID=5545449
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DD24857583A DD213947A1 (de) | 1983-03-08 | 1983-03-08 | Verfahren zur kultivierung von bakterien der species pasteurella multocida |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DD (1) | DD213947A1 (de) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5587166A (en) * | 1987-03-24 | 1996-12-24 | British Technology Group Limited | Vaccine against Pasteurella |
-
1983
- 1983-03-08 DD DD24857583A patent/DD213947A1/de not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5587166A (en) * | 1987-03-24 | 1996-12-24 | British Technology Group Limited | Vaccine against Pasteurella |
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