CN115820423A - 一种波斯枝藻及其培养方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种波斯枝藻及培养方法和其应用，所述波斯枝藻于2022年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45084，是首个在我国分纯的波斯枝藻株系。本发明的波斯枝藻生长快、生物量高，并且能够适应较宽泛的温度、盐浓度和不同培养基，因此有利于进行商业化的大规模生产。本发明的波斯枝藻具有很高的蛋白含量，因此，具有作为高蛋白食品添加剂和饲料添加剂的潜力。此外，本发明的藻株富含多种高附加值产物，包括甘油葡糖苷、藻蓝蛋白以及α‑亚麻酸和/或亚油酸等多不饱和脂肪酸，因此，该藻株还可用于生产这些高附加值产物。
Description
技术领域
本发明涉及应用微藻领域，更特别地，涉及一种高产甘油葡糖苷、多不饱和脂肪酸并高产蛋白质及藻蓝蛋白的波斯枝藻及其培养方法和应用。
背景技术
甘油葡糖苷(Glucosylglycerol,简称GG)是一类由甘油和葡萄糖通过糖苷键结合形成的化合物，是具备高经济价值的化妆品原料，并且在保健、医疗等方面具有极高的市场前景，但只有少数蓝藻可以天然合成甘油葡糖苷。通常是耐盐能力中等的蓝藻在盐胁迫条件下合成甘油葡糖苷以抵抗外界环境的胁迫，维持胞内外渗透压平衡。
α-亚麻酸(α-linolenic acid，ALA)是全顺式9,12,15-十八碳三烯酸，属于ω-3系列多不饱和脂肪酸，属于人体必需脂肪酸，进入细胞后通过碳链的延长及进一步的脱饱和，最终可以形成对维持动物机体发育和心血管健康等方面具有重要作用的多不饱和脂肪酸衍生物二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoicacid,DHA)。以天然合成ALA的藻类替代鱼油具有较深远的保健品市场应用潜力，在饲料中添加富含ALA的成分也可以满足动物饲料和鱼类养殖的需求。
藻蓝蛋白是存在于蓝细菌等藻类中的一种少见的天然营养素，其应用广泛：(1)天然食用色素:可作为食品着色剂。(2)医药保健食品：增强免疫力。(3)化妆品领域：独特的蓝色色素来源。(4)荧光染料：更为灵敏的生物细胞探测剂。(5)农业：抗菌杀毒，提高光合作用效率。然而多数蓝细菌的藻蓝蛋白含量并不高，据报道，目前藻蓝蛋白含量最高的是螺旋藻，其藻蓝蛋白含量在20％左右，其次为念珠藻，其余蓝细菌的藻蓝蛋白含量均低于10％。
蓝细菌是地球上最古老的光合原核微生物，可进行植物型产氧光合作用，广泛分布于各种水体、土壤甚至岩石表面。由于具有生长快、能自养的特点，可作为生产高附加值产品的优良“细胞工厂”。因此，如果能够用蓝藻来合成甘油葡糖苷和ALA，可降低甘油葡糖苷和ALA的生产成本。
但是，目前分离获得的具有甘油葡糖苷和ALA合成能力的蓝细菌资源相对匮乏。
发明内容
发明人从野外采集藻样，经培养分离，获得一株生长快速并且具有较宽范的温度适应性、盐浓度适应性和培养基适应性的蓝细菌藻株，该藻株具有很高的蛋白含量，并且高产甘油葡糖苷、藻蓝蛋白和多不饱和脂肪酸等高值化学品。该藻株在光镜下形态为多个细胞串成单列细胞丝状体，呈深蓝绿色，没有细胞核，丝状体细胞纤长，宽1-2μm、长5-8μm，细胞长度为宽度的2-5倍，顶端细胞呈圆柱形，包含3个16S rDNA序列。根据其形态特征和16SrRNA序列分析，将其归为波斯枝藻属，命名为波斯枝藻NK2-33，拉丁学名为Persinemasp.NK2-33，是中国境内首次发现的Persinema株系。
基于以上发现，本发明提供了一种波斯枝藻(Persinema sp.)，所述波斯枝藻于2022年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNO.45084。
本发明还提供了上述波斯枝藻在生产甘油葡糖苷中的应用。
本发明还提供了上述波斯枝藻在生产藻蓝蛋白中的应用。
本发明还提供了上述波斯枝藻在生产多不饱和脂肪酸中的应用。
在一个具体实施方案中，所述多不饱和脂肪酸为α-亚麻酸和/或亚油酸。
本发明还提供了上述波斯枝藻在制备高蛋白食品添加剂或饲料添加剂中的应用。
本发明还提供了一种培养上述波斯枝藻的方法，包括将所述波斯枝藻接种于培养基中进行光合培养的步骤。
在一个具体实施方案中，培养温度为15±2℃至38±2℃。
在一个具体实施方案中，所述培养基为BG11培养基、Zarrouk培养基或海水培养基，所述培养基中外加了0-0.6M的氯化钠。
在一个具体实施方案中，培养环境中通入了含有3％-100％的CO2的气体。
本发明的波斯枝藻生长快速，获得的生物量高，并且能够适应较宽泛的温度、盐浓度和不同培养基，该藻株还适用于开放式培养，在跑道池中的生长速度也大于螺旋藻，因此有利于进行商业化的大规模生产。本发明的波斯枝藻具有很高的蛋白含量，因此，具有作为高蛋白食品添加剂和饲料添加剂的潜力。此外，本发明的藻株富含多种高附加值产物，包括甘油葡糖苷、藻蓝蛋白以及ALA和LA等多不饱和脂肪酸，因此，该藻株还可用于生产这些高附加值产物。
微生物保藏
本发明所述的藻株从中国青海省天然盐湖的生物垫中分离获得，经16S rRNA基因测序和形态学鉴定，该藻株属于蓝藻门波斯枝藻科波斯枝藻属。2022年2月24日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45084，命名为波斯枝藻NK2-33，拉丁学名为Persinema sp.NK2-33。
附图说明
图1为Persinema sp.NK2-33的光学显微镜照片。
图2为Persinema sp.NK2-33的3个16S rDNA序列的聚类分析结果。
图3为Persinema sp.NK2-33在不同温度下培养的生长曲线。
图4为Persinema sp.NK2-33单个环境因子改变条件下的生长情况统计图。其中，A为在加有不同浓度的氯化钠的BG11培养基中培养7天后的OD730统计图；B为在不同光强下的生长曲线；C为在不同pH下培养7天后的OD730统计图；D为分别在BG11培养基和Zarrouk培养基中的生长曲线。
图5为Persinema sp.NK2-33在外加营养元素(+)和不外加营养元素(-)的海水培养基中培养1周和3周后的培养物照片。
图6为Persinema sp.NK2-33在不同培养条件下的生长曲线。
图7为不同培养条件下在板式培养基中的生长曲线，其中PBR1为普通培养，PBR2为在第2天加0.6M NaCl盐胁迫。
图8为Persinema sp.NK2-33在柱式光反应器中培养9天后的生物量统计图。
图9为Persinema sp.NK2-33在跑道池中的培养情况。其中A为在跑道池中培养7天的生长曲线；B为在跑道池中进行半连续培养72天的过程中前12天的生长曲线；C为在跑道池中通3％CO2半连续培养的生长曲线。
图10为Persinema sp.NK2-33藻细胞中的成分统计图。
图11为不同培养批次(1、2、3)的藻蓝蛋白含量统计图。
图12为Persinema sp.NK2-33的甘油葡糖苷含量统计图。
图13为Persinema sp.NK2-33的脂肪酸含量统计图。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
1、Persinema sp.NK2-33的获得
发明人从野外采集藻样，经培养分离，得到一株能够高产甘油葡糖苷的蓝细菌藻株。其形态为多个细胞串成单列细胞丝状体，呈深蓝绿色，没有细胞核，丝状体细胞纤长，宽1-2μm、长5-8μm，细胞长度为宽度的2-5倍，顶端细胞呈圆柱形，呈现典型的Persinema形态(图1)。“Persinema”是因发现地命名的新属，Persia指中东古波斯、现在的伊朗，nema指“线”，与Scytonema sp.伪枝藻后缀相同，故本文将其中文名称命名为“波斯枝藻”。
经测序，发现其基因组大小为3.93Mb，含有一个质粒。基因组GC含量61.17％，质粒GC含量59.77％。基因组中，含有三个16S rDNA，基因序列如SEQ ID NO:1-3所示，其中，SEQID NO:1位于质粒上，SEQ ID NO:2和3位于基因组上。将序列在NCBI数据库中进行比对，其中的Persinema或Kelisinema亲缘关系最近(图2)，但其形态学特征显示其并不具备Kelisinema特有的颤藻顶端细胞特征，并且细胞宽度与长度特征均与Kelisinema不符合。
结合16S rRNA基因序列分析和形态学分析结果，与波斯枝藻属(Persinema)的藻株相似度较高，故命名为波斯枝藻NK2-33，拉丁学名为Persinema sp.NK2-33，是首个在我国分纯的波斯枝藻株系。
该微藻已于2022年2月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45084，命名为波斯枝藻NK2-33，拉丁学名为Persinema sp.NK2-33。
2、Persinema sp.NK2-33的培养及优化
2.1温度适应性
将Persinema sp.NK2-33接种于15±2℃、30±2℃和38±2℃进行培养，在此过程中，每天定时定量测定藻液在730nm波长下的吸光度(OD730)，作生长曲线，以此指标来检测菌株的生长情况，在测定过程中，如果菌株生长出现细胞聚集呈丝状，形成沉淀等，在测定吸光度时，应对藻液进行研磨，使藻细胞混合均匀再进行取样，确保取样的准确性。接种条件和培养条件如下：
15±2℃：取大约2mL的藻种接种至含有20mL Zarrouk培养基的无菌三角瓶中，培养温度为15±2℃，转速为150rpm，光照强度为20～50μmol photons m-2s-1。定时取样测定OD730，培养12天。
30±2℃：采用100mL柱式光反应器于不同温度下(30±2℃)培养该藻株(采用Zarrouk培养基，其余培养条件参照该反应器常规参数，通空气培养，光强提高到150μmolphotons m-2s-1，对每株藻种设置三个平行，调节通气的速率保持一致)。
38±2℃：采用100mL柱式光反应器于38±2℃高温下培养该藻株(采用Zarrouk培养基，其余培养条件参照该反应器常规参数，通空气培养，光强150μmol photons m-2s-1，对每株藻种设置三个平行，调节通气的速率保持一致)。
结果如图3所示，Persinema sp.NK2-33在15±2℃生长均良好，在培养的6天后进入对数期，培养12天后OD730达到1.5左右，虽生长缓慢但生长期仍在继续(图3A)；在30±2℃生长最优，柱式光生物反应器通空气培养1天后即进入对数期，于第4天达到平台期，OD730达到4左右，平台期一直维持到第7天以后(图3B)；在38±2℃生长良好，在培养的0.5天后进入对数期，培养3-4天后OD730达到2-3左右，38℃较早进入平台期和衰减期，但在培养第七天后OD730仍能维持在1左右(图3C)。
以上实验说明，Persinema sp.NK2-33在15±2℃至38±2℃下都能够良好生长，低温耐受性和高温耐受性都较强，最适生长温度为30±2℃。
2.2盐适应性
为快速检测其盐适应性，将Persinema sp.NK2-33接种于装有BG11(添加了不同浓度的NaCl)的12孔细胞培养板中，于30℃下静置培养，光强20～50μmol photons m-2s-1培养7天后测定OD730，结果如图4A所示，0.1M和0.3M的氯化钠及均抑制Persinema sp.NK2-33的生长，0.6M严重抑制藻细胞生长，0.9M甚至导致藻细胞死亡。由此可见，Persinema sp.NK2-33能够在0-0.6M的氯化钠的BG11培养基中生长，但是较高的盐浓度会使藻细胞的生长受到抑制。
2.3光强适应性
以上部分实施例中，Persinema sp.NK2-33可以适应弱光进行培养，为评测其光强适应性，将该藻接种于装有100mL BG11培养基的玻璃柱式光反应器中，于30℃下进行通空气培养，光强分别调节为100、200、300、600μmol photons m-2s-1培养7天后测定OD730。结果如图4B所示，NK2-33可以适应600μmol photons m-2s-1以下的光强范围并且在100～300μmol photons m-2s-1光强下的生长较为接近，于培养第四天OD730可达2以上；随着光强增强至～600μmol photons m-2s-1，呈现微弱的生长抑制，于培养第四天OD730均可达1.5以上。这说明NK2-33具有较宽的光强适应范围。
2.4pH适应性
为快速检测其pH适应范围，将Persinema sp.NK2-33接种于装有调节至不同pH值的BG11培养基的12孔细胞培养板中，于30℃下静置培养，光强20～50μmol photons m-2s-1培养7天后测定OD730，结果如图4C所示，以上结果表明NK2-33在pH 4.0-pH 12.0之间均可以生长，具有较宽的pH适应范围。
2.5培养基适应性(Zarrouk和BG11对比)
为比较在不同培养基中的生长速度，将Persinema sp.NK2-33接种于分别装有BG11和Zarrouk培养基的三角摇瓶中，于30℃下摇床培养，转速150rpm，光强20～50μmolphotons m-2s-1，每日测定OD730，培养7天。结果如图4D所示，NK2-33在BG11和Zarrouk培养基中生长均可达7以上，可以适应不同培养基条件，并且生长差异不大，具有较强的培养基适应能力。
2.6海水培养
本申请采用青岛崂山附近水域海水为培养基对Persinema sp.NK2-33进行培养，实验按照常规蓝细菌培养参数进行，培养温度为30℃，一组采用不加任何元素的天然海水，另一组采用补加N、P、K和维生素B12的天然海水进行培养(添加了NaNO3 3g/L、K2HPO4 1.1mM、维生素B12 22.2nM、以及枸橼酸铁铵15μM)。结果如图5所示，NK2-33在不添加营养元素的天然海水中无法良好生长，仅可以保持微弱的细胞存活。但是该藻株可以在添加营养元素的海水中生长，生物量较高，并且培养持续3周后NK2-33生长状态仍然较好。
以上结果进一步表明，Persinema sp.NK2-33作为一株来自盐湖的天然耐盐蓝细菌，其耐盐性使其可以适应海水的盐度，并且在添加富营养盐的情况下还具有海水培养的潜力，将为其产业化前景提供一个亮点。
2.7培养优化进一步提高生物量
根据上述实验已确定Persinema sp.NK2-33的最适培养温度为30±2℃，在此基础上进行以下三种条件培养以确定优化的培养条件：
A.BG11三角瓶通气培养提高生物量
藻种首先在20-30μmol photons m-2s-1的光照摇床中进行种子液培养3～5天，藻种可生长至最高OD730值在2～3左右，将一定量的藻液接种定容至共含有200mL BG11培养基的250mL三角瓶中，调整藻液接种后的OD730值为0.05，于30±2℃进行光照通空气培养(培养基采用BG11培养基，其余培养条件参照该反应器常规参数，光强为100μmol photons m-2s-1)，对每株藻种设置三个平行重复样，调节通气的速率保持一致。
B.Zarrouk培养基在柱式反应器通气培养进一步提高生物量
采用100mL柱式光生物反应器于不同温度下(30±2℃)培养该藻株(培养基采用Zarrouk培养基，其余培养条件参照该反应器常规参数，通空气培养，光强提高到150μmolphotons m-2s-1，对每株藻种设置三个平行，调节通气的速率保持一致)。
C.Zarrouk培养基在柱式反应器补加CO2培养进一步提高生物量
采用250mL柱式光生物反应器培养该藻株(其余培养条件参照该反应器常规参数，温度30℃，补加1-5％CO2通气培养，光强进一步提高到200μmol photons m-2s-1，对每株藻种设置三个平行，调节通气的速率保持一致)。
以上三种培养条件得到的生长曲线如图6所示：
A.三角瓶振荡培养结果显示，Persinema sp.NK2-33在30℃的温度下生长均良好，在培养的1天后进入对数期，培养9天后OD730达到4.2左右。说明Persinema sp.NK2-33在离子浓度较低的BG11培养基中生长良好，其生长优于普通的蓝细菌，并且通气培养下的OD730均远高于振荡培养。
B.Persinema sp.NK2-33在30±2℃温度下均生长良好，在培养的1天后进入对数期，培养4天后OD730即可达到4左右，比在BG11中所需时间缩短一半，随后进入生长平台期。
C.200μmol photons m-2s-1光强下的生长状态与前述实验结果类似，藻株1天即进入对数期，至第3-4天OD730约为5，但不再进入平台期，生长期继续延长，至培养9天后OD730约为10，通CO2后生物量得到进一步的提高。这表明，采用Zarrouk培养基补加CO2培养Persinema sp.NK2-33可以进一步优化生长。
以上结果显示，Persinema sp.NK2-33生长速度快，生物量高，能在BG11培养基、Zarrouk培养基、海水培养基等多种培养基中生长，具有十分宽泛的培养基适应区间。
Persinema sp.NK2-33具有宽泛的温度适应性，在15℃左右的低温到38℃左右的高温下都能够良好生长，最适生长温度为30℃左右。Persinema sp.NK2-33还具有较高的盐浓度适应性，在BG11中加入0.6M氯化钠的条件下，仍然能够生长。
此外，在培养基中补碳(通入CO2气体)，可大幅提高Persinema sp.NK2-33的生长速度和最终生物量。
3.Persinema sp.NK2-33的放大规模培养
3.1板式光反应器中光照培养
Persinema sp.NK2-33经过多级种子液培养约2-3天左右，藻种生长至一定浓度，将一定量的藻液接种定容至共含有10L Zarrouk培养基的10L板式光反应器中，调整藻液的接种后的OD730值为0.1～0.2，进行光照通气培养。结果如图7所示，NK2-33成功实现板式培养。培养4天后，取50mL Persinema sp.NK2-33培养物进行过滤干燥，测定藻细胞的干重。
在不加盐和加盐后均能够快速生长，在Zarrouk中培养4天后最高OD730达6左右(PBR1)，生物量较高，在培养基加盐后最高OD730达4左右(PBR2)。
3.2柱式光反应器培养
在30℃下，于柱式光反应器培养，采用Zarrouk培养并补加CO2碳源(通3％的CO2)，培养9天后，Persinema sp.NK2-33培养物取50mL进行过滤干燥，测定藻细胞的干重。结果如图8所示，NK2-33在柱式光反应器中的生物量可达5.74g/L，进行盐胁迫可达到3.99g/L。生物量与同等培养条件下螺旋藻的生物量相近似，远高于其他模式蓝细菌。
3.3跑道池培养通气半连续培养
Persinema sp.NK2-33在10L板式光反应器内培养约2-3天左右，藻种生长至一定浓度后，作为种子液接种定容至共含有Zarrouk培养基的200L跑道池中，调整藻液的接种后的OD730值为0.1-0.5之间，进行光照搅拌培养，所通气体为3％或100％的二氧化碳。
如图9所示，微藻于第7天OD730可达1.2-1.4(图9A)，于培养第七天，Zarrouk培养基培养的生物量可达6.3-6.9g/(m2·d)(池深0.2m)，并且Persinema sp.NK2-33成功实现72天的半连续培养(图9B)。在跑道池中补加二氧化碳后，将OD730值提高至1.8左右(图9C)，生物量还可得到进一步提高。
开放式跑道池理论生物质产量可达40g/(m2·d)，即每年14600t/km2，但实际生产中开放式跑道池的微藻产量远低于该值，目前国外的螺旋藻工厂均为开放、跑道式培养池，单位面积产量7-10g/(m2·d)，也就是说NK2-33在跑道池培养时的生物质产量极具优势。以上实验说明，Persinema sp.NK2-33无论是在封闭式的光反应器中放大培养，还是在开放式的跑道池中放大培养，都能快速生长，具有很高的产量，并且可通过批次培养或半连续培养的模式进行生物工程培养，具有较高的工业化应用潜力。
4、Persinema sp NK2-33的细胞营养组分
将Persinema sp.NK2-33培养3-5天后，离心收集藻细胞，冷冻干燥后，分别采用氯仿-甲醇法抽提、甲酯化处理并结合GC-MS测定、凯氏定氮法、苯酚-硫酸法测定其中的总脂、总蛋白和总碳水化合物(糖类)含量。结果如图10所示，藻细胞中，蛋白含量占细胞干重的63％，碳水化合物含量15％，脂类占比4％。
可见该藻株不仅具有较快的生长速度和较高的生物量，同时还具备较高的蛋白含量，可用于作为高蛋白食品添加剂和饲料添加剂。
5.Persinema sp.NK2-33生产藻蓝蛋白
藻蓝蛋白是存在于蓝细菌等藻类中的一种少见的天然营养素。藻蓝蛋白的应用很广泛，但多数蓝细菌的藻蓝蛋白含量并不高。本实施例将培养的Persinema sp.NK2-33藻细胞收集后，进行冷冻真空干燥，得到藻粉。依据行标方法对不同批次的Persinema sp.NK2-33进行藻蓝蛋白含量测定。用磷酸盐缓冲液溶解冷冻干燥后的藻粉，经过超声波破碎后，置于低温冰箱中冷冻，融解，使色素蛋白析出，取分离后的提取液用分光光度计测定。整个操作过程须注意避光，分光光度测定应在15min内完成。结果如图11所示，不同培养批次(1、2、3)的藻蓝蛋白含量在25-34％之间。据报道，藻蓝蛋白含量最高的是螺旋藻和念珠藻，其报道最高含量在20％左右，其余蓝细菌的藻蓝蛋白含量均低于10％(Markou G,Nerantzis E，2013)。因此本实施例中所述藻株的藻蓝蛋白含量远高于普通的蓝细菌的藻蓝蛋白含量(通常低于10％)。因此，该藻株具有非常高的藻蓝蛋白含量，在生产纯化藻蓝蛋白方面具有应用价值。
6.Persinema sp.NK2-33生产甘油葡糖苷
将Persinema sp.NK2-33接种于装有Zarrouk(添加了不同浓度的NaCl)的250mL柱式光反应器中，于30℃下通气培养，光强150-300μmol photons m-2s-1培养9天后测定甘油葡糖苷含量，在11.99min处发现甘油葡糖苷离子峰；其甘油葡糖苷离子峰图及甘油葡糖苷含量如图12所示，NK2-33在不添加NaCl的Zarrouk培养基中可合成甘油葡糖苷，胞内胞外甘油葡糖苷总量是260mg/L，在添加NaCl后甘油葡糖苷产量为510mg/L，以上结果显示，NK2-33在不加盐和加盐的培养基中均能够积累甘油葡糖苷。单位体积内，螺旋藻在Zarrouk培养基甘油葡糖苷合成总量亦在500mg/L左右，这说明Persinema sp.NK2-33的甘油葡糖苷产量与螺旋藻相当，具有较强的产业化潜力。
7.Persinema sp.NK2-33生产多不饱和脂肪酸
将培养获得的NK2-33藻细胞收集并冻干获得藻粉后，对细胞组分进行总脂抽提并进行甲酯化处理后，依据GC-MS方法对其中的脂肪酸组分和含量进行解析。
结果如图13所示，NK2-33的总脂的脂肪酸主要由十四酸(C14:0)，十六酸(C16:0)，顺9-十六碳一烯酸(C16:1,9Z)，顺11-十六碳一烯酸(C16:1,11Z)，十八酸(C18:0)，少量油酸，较高含量的亚油酸(LA)和α-亚麻酸(ALA)等多种脂肪酸组分。其中ALA含量达10mg/g干重，LA含量达7.7mg/g，分别占总脂含量的18.1％和23.4％，并且ALA的含量占细胞总干重的1％左右，其占比与螺旋藻的GLA(γ-亚麻酸)含量相同，在未经改造的天然菌株中含量较高。所不同的是，螺旋藻产GLA，而NK2-33所产ALA的营养价值更高。
以上结果显示，Persinema sp.NK2-33具有十分丰富的多不饱和脂肪酸，是生产优质多不饱和脂肪酸ALA的优良宿主，产品具有很高的营养价值。该藻株可用于生产动物饲料的添加剂以满足动物生长对α-亚麻酸等营养的需求，也可以用作工业化制备α-亚麻酸的原料。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种波斯枝藻(Persinema sp.)，所述波斯枝藻于2022年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45084。
2.权利要求1所述的波斯枝藻在生产甘油葡糖苷中的应用。
3.权利要求1所述的波斯枝藻在生产藻蓝蛋白中的应用。
4.权利要求1所述的波斯枝藻在生产多不饱和脂肪酸中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述多不饱和脂肪酸为α-亚麻酸和/或亚油酸。
6.权利要求1所述的波斯枝藻在制备高蛋白食品添加剂或饲料添加剂中的应用。
7.一种培养权利要求1所述的波斯枝藻的方法，其特征在于，包括将所述波斯枝藻接种于培养基中进行光合培养的步骤。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，培养温度为15±2℃至38±2℃。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述培养基BG11培养基、Zarrouk培养基或海水培养基，所述培养基中外加了0-0.6M的氯化钠。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，培养环境中通入了含有3％-100％的CO2的气体。
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| CN202211045959.8A Pending CN115820423A (zh) | 2022-08-30 | 2022-08-30 | 一种波斯枝藻及其培养方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115820423A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111876350A (zh) * | 2020-07-22 | 2020-11-03 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种高产碳水化合物的纤细鞘丝藻及其应用 |
| CN111996135A (zh) * | 2020-07-22 | 2020-11-27 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种高温耐受型高产碳水化合物的热泉蓝细菌及其应用 |
| CN112143669A (zh) * | 2020-09-08 | 2020-12-29 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一株蓝菌藻及其培养方法和应用 |
-
2022
- 2022-08-30 CN CN202211045959.8A patent/CN115820423A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111876350A (zh) * | 2020-07-22 | 2020-11-03 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种高产碳水化合物的纤细鞘丝藻及其应用 |
| CN111996135A (zh) * | 2020-07-22 | 2020-11-27 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种高温耐受型高产碳水化合物的热泉蓝细菌及其应用 |
| CN112143669A (zh) * | 2020-09-08 | 2020-12-29 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一株蓝菌藻及其培养方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| INGA KÖHLER: "How are oxygen budgets influenced by dissolved iron and growth of oxygenic phototrophs in an iron-rich spring system? Initial results from the Espan Spring in Fürth, Germany", BIOGEOSCIENCES, 22 March 2021 (2021-03-22), pages 1 - 22 * |
| 刘欣昱: "甘油葡萄糖苷的吸附分离方法研究", 青岛农业大学学报（自然科学版）, vol. 32, no. 4, 31 December 2015 (2015-12-31), pages 289 - 293 * |
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