CZ307717B6

CZ307717B6 - 1-Alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid jako dezinfekční činidlo a dezinfekční kompozice, která jej obsahuje

Info

Publication number: CZ307717B6
Application number: CZ2018-386A
Authority: CZ
Inventors: Ondřej Soukup; Daniel Jun; Jan Marek; Dávid Maliňák
Original assignee: Fakultní nemocnice Hradec Králové
Priority date: 2018-08-01
Filing date: 2018-08-01
Publication date: 2019-03-13
Also published as: CZ2018386A3

Abstract

1-Alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid obecného vzorce I, kde R je C- Calkyl, Xje anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Brnebo I.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká látky typu amoniové soli l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium- halogenidu jako dezinfekčního činidla, dezinfekční kompozice, která tuto sůl obsahuje a jejich použití.

Dosavadní stav techniky

Odolnost vůči bakteriálním kmenům představuje v současné době jeden z největších problémů v oblasti dezinfekčních přípravků. Netýká se to jen odolnosti vůči antibiotikům, ale také obecně i odolnosti vůči běžně používaným dezinfekčním přípravkům. Mluví se o tzv. multi-rezistentních kmenech, které jsou odolné vůči oběma skupinám antimikrobiálních činidel. Tento trend je výsledkem dlouhodobého používání antibiotik a dezinfekčních přípravků, zvláště v nemocnicích, ve kterých jsou bakterie neustále vystaveny selekčnímu tlaku antibiotik a jsou schopné se stát vůči běžným dezinfekčním přípravkům rezistentními.

Odolnost vůči antimikrobiálním sloučeninám je buď primární, vyjádřená absencí (nebo nedostupností) cílové struktury pro dezinfekční přípravek, nebo sekundární, která se postupně vytvoří v původně citlivém kmeni. Příčinou nemocničních infekcí je celá řada bakterií a hub, přítomných v nemocničním prostředí. Pravděpodobnost jejich propuknutí se zvyšuje zvláště u pacientů s oslabeným imunitním systémem. Minimalizace rizika infekce může být dosaženo uplatňováním racionální metodiky pro podávání antibiotik a v případě dezinfekčních přípravků přísným dodržováním kompletních dezinfekčních programů. Klíčovým aspektem je pravidelné obměňování antibiotik a dezinfekčních přípravků, aby se zamezilo vystavování kmenů bakterií a hub jednomu produktu déle, než je kritická doba, po níž se riziko vzniku odolnosti zvyšuje.

Kvartémí amoniové sloučeniny mají široké použití. Používají se jako dezinfekční látky, tenzidy, změkčovače textilu nebo antistatická činidla. Benzalkoniové soli (A-alkyl, A-benzyl, N,Ndimethylamin, BAC) s délkou alkylového řetězce C10-C18 se mj. běžně používají v potravinářském průmyslu, protože chrání před kontaminací potravin, léků a jiných produktů různými mikroorganismy, včetně plísní. Prodlužují dobu trvanlivosti a zvyšují bezpečnost (Grillitsch, Gans a kol., 2006). Benzalkoniové soli s C12 řetězcem jsou obvykle velmi účinné proti plísním, s Cl4 řetězcem zase vůči Gram pozitivním bakteriím a s Cl6 řetězcem vůči Gram negativním bakteriím (Daoud, Dickinson a kol., 1983). V ČR je běžně používaný přípravek benzalkonium bromid (resp. směs benzalkoniových solí s různou délkou řetězce, Ajatin) pro dezinfekci kůže.

Další skupinou sloučenin, která je benzalkoniovým solím strukturně podobná, jsou sloučeniny obsahující heterocyklický kruh mající jako heteroatom dusík či více dusíků. V porovnání s benzalkoniovými solemi, nejsou tyto látky tak široce používány. Nicméně například cetylpyridinium je znám jako účinný dezinfekční a ochranný přípravek, a proto je součástí celé řady léčivých přípravků. Může vytvářet micely a má použití v celé řadě jiných odvětví, například se používá k odstraňování nečistot, v kombinaci s barvivém se používá k barvení textilií atd.

Syntéza či biologická účinnost sloučenin obsahující jiné heterocykly (např. chinolin, nebo isochinolin), jsou v literatuře také popsány. V literatuře byly popsány také substituované N,Nalkyl deriváty imidazolu (Kleyi PE a kol 2016).

- 1 CZ 307717 B6

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je nová kvartémí amoniová sůl, vyvinutá jako dezinfekční činidlo aplikovatelné vůči široké škále původců nemocničních bakteriálních a plísňových infekcí a zároveň omezující vznik rezistence vůči dezinfekčním přípravkům.

K tomuto účelu byla proto vyvinuta nová sloučenina typu kvartémí amoniové sole, jmenovitě 1alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid podle obecného vzorce I

(I) kde R je C12-C16 alkyl, X je anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Br nebo Γ, případně jiný vhodný anion, zajišťující dostatečnou rozpustnost pro potřeby aplikace. Kvartémí amoniové soli obecného vzorce I podle vynálezu jsou účinnými dezinfekčními činidly proti celé řadě mikroorganismů a virů, tedy Gram-negativním, Gram-pozitivním bakteriím obaleným virům nebo patogenním houbám, vybraným ze skupiny zahrnující Clostridium dificille, Candida parapsilosis sensu stricto, Rhodotorula mucilaginosa, Aureobasidium melanogenum, Aspergillus fumigatus, Aspergilus versicolor, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, s výhodou Staphylococcus aureus Methicilin rezistentní Staphylococcus aureus, Enterococcus spp., s výhodou Vankomycin rezistentní Enterococcus, Escherichia coli, Klebsiella spp. s výhodou Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase negativní, Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase pozitivní, Pseudomonas aeruginosa, s výhodou Pseudomonas aeruginosa, multirezistentní Yersinia bercovieri, Acinetobacter baumannii, Stenotrophomonas maltophilia nebo obalené viry, s výhodou varicella-zoster vir.

Kvartémí amoniové soli obecného vzorce I podle vynálezu mají výraznou virucidní aktivitu proti obaleným virům, s výhodou varicela-zoster viru.

Termín „obalený vir“ znamená označení viru, který kromě kapsidy má ještě další, lipoproteinový obal, odvozený od membrány hostitelské buňky, v níž se viros replikoval. Může jít o membránu jádra, organely nebo membránu cytoplasmatickou. Obalené viry jsou citlivé na ether a obecně jsou méně odolné k zevnímu prostředí. Obalený vir je vybrán ze skupiny obsahující herpesviry, ortomyxoviry, paramyxoviry, koronaviry.

Kvartémí amoniová sůl podle vynálezu, kde R je s výhodou C14 alkyl, s výhodou l-(2hydroxyethyl)-3-tetradecylimidazolium bromid vykazují srovnatelnou nebo lepší dezinfekční účinnost ve srovnání s běžně dostupnou a hojně používanou solí benzyldodecyldimethylamonium (BAC) bromidem. Nicméně významným rozdílem a výhodou od známých, komerčně dostupných dezinfekčních směsí užívaných v současnosti, je potvrzená účinnost proti varicella-zoster viru (VZV neboli lidský herpesvirus 3 (HHV-3)).

Dalším provedením podle vynálezu je dezinfekční kompozice obsahující kvartémí amoniové soli, jejíž podstatou je, že buď obsahuje l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid podle obecného vzorce I, s výhodou kvartémí sůl l-tetradecyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazoliumhalogenid, výhodněji l-tetradecyl-3-(2-hydroxy ethyl)imidazolium-bromid podle vynálezu, nebo jeho kombinaci s alespoň jednou kvartémí amoniovou solí vybranou ze skupiny zahrnující N

-2CZ 307717 B6 dodecyl-N-(2-hydroxyethyl)morfolinium-halogenid obecného vzorce II,

(Π), kde R je C12 alkyl a X je anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Br nebo Γ případně jiný vhodný anion, zajišťující dostatečnou rozpustnost pro potřeby aplikace;

a/nebo l-hexadecyl-2-methylpyridinium-halogenid obecného vzorce III,

( III ), kde R¹ je C16 alkyl a X - je anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Br nebo Γ, popřípadě jiný vhodný anion, zajišťující dostatečnou rozpustnost pro potřeby aplikace.

Koncentrace l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidu podle obecného vzorce I, s výhodou l-tetradecyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidu, výhodněji l-tetradecyl-3-(2hydroxyethyljimidazolium-bromidu v dezinfekční kompozici podle vynálezu je v rozsahu 0,001 % hmotn. až 1 % hmotn., s výhodou 0,01 % hmotn. až 0,1 % hmotn..

V případě, že dezinfekční kompozice podle vynálezu obsahuje l-alkyl-3-(2hydroxyethyljimidazolium-halogenid podle obecného vzorce I, s výhodou l-tetradecyl-3-(2hydroxyethyljimidazolium-halogenid, výhodněji 1 -tetradecyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazoliumbromid a dále alespoň jednu z kvartémích amoniových solí obecných vzorců II nebo III nebo jejich kombinaci je celková koncentrace kvartémích amoniových solí v rozsahu 0,001 % hmotn. až 1 % hmotn., s výhodou 0,01 % hmotn. až 0,1 % hmotn.

Hmotn. % kvartémích amoniových solí podle vynálezu jsou vztažena k celkové hmotnosti dezinfekční kompozice podle vynálezu.

Také dezinfekční kompozice podle vynálezu vykázaly dle provedených testů vysokou dezinfekční účinnost proti celé řadě mikroorganismů a virů, tedy Gram-negativním, Grampozitivním bakteriím, obaleným virům a vybraným patogenním plísním vybraným ze skupiny zahrnující Clostridium dificille, Candida parapsilosis sensu stricto, Rhodotorula mucilaginosa, Exophiala dermatitis, Aureobasidium melanogenum, Bifusaria dimerum, Aspergillus fumigatus, Aspergilus versicolor, Aspergilus niger, Candida krusei, Cryptococcus neoformans, Enterococcus spp., s výhodou Vankomycin rezistentní Enterococcus., Klebsiella pneumoniae, Penicilium chrysogenum, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, s výhodou Staphylococcus aureus Methicilin rezistentní Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella spp., s výhodou Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase negativní, Klebsiella Ext. Spectrum Blactamase pozitivní, Pseudomonas spp., s výhodou Pseudomonas aeruginosa multirezistentní, Yersinia bercovieri, Acinetobacter baumannii, Stenotrophomonas maltophilia nebo obalené viry, s výhodou varicella-zoster vir.

Kompozice také vykázala zvláště vysokou účinnost obaleným virům, s výhodou varicela-zoster viru.

Kompozice podle vynálezu jsou účinné proti vysoce odolným mikroorganismům jako jsou Asperigillus fumigatus či Clostridium dificille, které běžně způsobují nemocniční infekce. Dezinfekční účinnost připravených kompozic podle vynálezu byla lepší než standardně používaný benzalkonium bromid (Ajatin) obsahující benzalkoniové soli různé délky řetězce při stejné koncentraci (0,1 % hmotn.). Navíc, na rozdíl od benzalkonium bromidu (Ajatinu) byla pozorována účinnost proti obalenému varicella-zoster viru (VZV) ze skupiny herpesvirů a prokázala nižší lokální dráždivost na buňkách lidského epidermu. Základní skelet sloučeniny měl podstatný vliv na spektrum dezinfekční účinnosti. Široké spektrum aktivity vůči běžným nemocničním patogenům může být proto dosaženo kombinací sloučenin s odlišným základním skeletem.

Výhodný hmotnostní poměr mezi jednotlivými amoniovými solemi v přípravcích podle vynálezu je v rozsahu 1:4 až 4:1, s výhodou 1:2 až 2:1. První číslice v uvedených rozsazích udává hmotn. díl l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidu podle vynálezu, s výhodou l-tetradecyl-3(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidu, výhodněji 1 -tetradecyl-3-(2hydroxyethyl)imidazolium-bromidu obecného vzorce I a druhá číslice součet hmotn. dílů ostatních složek kompozice tedy N-dodecyl-N-(2-hydroxyethyl)morfolinium-halogenidu obecného vzorce II a l-hexadecyl-2-methylpyridinium-halogenidu obecného vzorce III, nebo hmotn. díly jednotlivých složek kompozice tedy N-dodecyl-N-(2-hydroxyethyl)morfoliniumhalogenidu obecného vzorce II nebo l-hexadecyl-2-methylpyridinium-halogenidu obecného vzorce III.

Vzniklý dezinfekční roztok může být na povrch nanášen např. rozprašovačem, ponořením nebo potřením vhodným materiálem, napuštěným směsí. Vhodná je např. aplikační forma roztoku, pěny nebo gelu. Pro tyto účely mohou být použity pro konkrétní formulaci kompozice podle vynálezu další pomocné látky. Pomocné látky jsou vybrány ze skupiny obsahující parfémy (zlepšení senzorických vlastností), gelotvomá a adhezivní činidla (zvýšení ulpívání na nehorizontálních površích modifikací Teologických vlastností), barvicí složky (kontrola rozsahu ošetřeného povrchu) nebo vhodná rozpouštědla (potenciace dezinfekční účinnosti, prodloužení nebo zkrácení doby zasychání, možnost zvýšení koncentrace účinných složek). Jako rozpouštědlo je možné použít vodu, alkoholy nebo jiná rozpouštědla, ve kterých jsou předmětné kvartémí amoniové soli lépe rozpustné než ve vodě. Takovéto kompozice je možné použít k dezinfekci skla, kovů nebo odolných plastů, jako je PVC apod.

Kompozice podle vynálezu vykázaly v testech silnou dezinfekční účinnost proti testovaným mikrobům ze skupiny gramnegativních a grampozitivních bakterií a patogenních hub, které jsou častým původcem nozokomiálních onemocnění. Dezinfekční účinnost byla testována na kvasinkách (Candida krusei, Cryptococcus neoformans') a gram-pozitivních (Methicillinresistentní Staphylococcus aureus (MRSA neboli Zlatý Staphylococcus), enterokoky) a gramnegativních (Klebsiellapneumoniae, Pseudomonas aeruginosa) bakteriích při koncentraci směsí 0,1 % hmotn. za expoziční čas 5 minut. Ve stejné koncentraci byly srovnatelně účinné s benzalkonium bromidem (Ajatinem), který byl zařazen v testu pro srovnání. Po uvedené expozici mikroba testované směsi resp. benzalkonium bromidu (Ajatinu) nebyl pozorován žádný nárůst bakterií.

Na rozdíl od této běžně užívanému benzalkonium bromidu (Ajatinu) vykázala dezinfekční kompozice podle vynálezu vysokou účinnost proti herpetickým virům (VZV) a sporulujícímu Clostridum dificille. Zatímco dezinfekční kompozice podle vynálezu snížila titr viru o cca 4 řády po 5 minutové expozici při koncentraci 0,01 % hmotn., v případě benzalkonium bromidu (Ajatinu) byl pokles pouze cca 2 řády. V případě zamýšleného použití vynálezu v koncentraci 0,1 % hmotn. lze očekávat ještě vyšší účinnost. Dále dezinfekční kompozice podle vynálezu prokázala vyšší účinnost proti sporulujícímu Clostridum dificille po 10 min expozici při koncentraci 0,1 % hmotn. oproti benzalkonium bromidu (Ajatinu), který byl v tomto exprimentu neúčinný. Účinnost proti Aspergillus fumigatus byl v případě benzalkonium bromidu (Ajatinu)

-4CZ 307717 B6 mírně lepší. Dezinfekční kompozice podle vynálezu, však redukovala výskyt této houby oproti kontrole při 5 minutové expozici a koncentraci 0,1 % hmotn.

Příklady uskutečnění vynálezu

Příklad 1

Příprava l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium bromidu

Schéma 1. Příprava l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidu (3).

l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidy 3 byly připraven reakcí l-(2hydroxyethyl)imidazolu 1 s 1-halogenalkanem (např. 1-bromdodekan, 1-bromtetradekan nebo 1bromhexadekan 2 v dimethylformamidu (DMF), dle reakčního schématu 1 výše. Reakční směs, l-(2-hydroxyethyl)imidazolu 1 a příslušné halogenalkany 2 v DMF, byla míchána po dobu 48 h za refluxu. Poté byla reakční směs zchlazena na laboratorní teplotu a rozpouštědlo bylo odpařeno na vakuové rotační odparce. Ze získaného odparku byl získán produkt krystalizací z ethylacetátu v podobě olej ovité kapaliny ve výtěžku asi 35 % (Tabulka 1).

Tabulka 1 Výtěžek l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenidy 3)

Sloučenina Alkyhtvý řetezec Výtěžek (%} Bod táni (^CC) a CtíHss 34

Výchozí sloučeniny byly zakoupeny od Sigma-Aldrich (CZ) v nejvyšší dostupné čistotě. Rozpoušedla, dimethylformamid a ethylacetát, byla koupena od Penta chemicals Co. Na tenkovrstvou chromatografii (TLC) byly použity hliníkové destičky potažené silikagelem Měrek silica gel 60 F254 analytical plates (mobilní fáze: methanol:voda=10:l). Jednotlivé sloučeniny byly na TLC detekovány pod ultrafialovým světlem o vlnové délce 254 nm. Teplota tání produktu nebyla měřena.

Příklad 2

Suroviny v množstvích, uvedených v tabulce 2 níže, byly rozpuštěny za laboratorní teploty v deionizované vodě za vzniku roztoku dezinfekční kompozice I. Uvedené jsou také možnosti využití jako dvousložkové kompozice.

Tabulka 2

surovina	Kompozice I Množství (mg)	i Množství (mg)	Množství (mg)
1-(2-hydroxyetliyl)-3tetradecylimidazolium bromid	] 50 33	50
NModecyl-N-(2-	33	I 50	-
hydroxyethyl)morfoliniumbromid
1-hexadecyl-2-methyIpyrídiníum-		-	50
bromid	33
Voda	100000	j 100000	10000

Příklad 3

Mikrobiologické testování l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium bromid

V tabulkách 3 až 5 je shrnuta antimikrobiální aktivita l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl) imidazolových solí s délkou alkylačního řetězce C12, C14 a C16. Z tabulky 3 níže je patrné, že všechny deriváty inhibovaly růst C. dificille. Zejména derivát C14 stojí za pozornost, protože jako jediný po 5 minutové expozici snížil titr VZV o 5 řádů, což výrazně předčilo komerčně dostupné benzalkoniové soli. Obdobně, derivát Cl4 se jevil jako nejúčinnější proti vláknitým houbám (viz tabulka 4), kvasinkám Gramm negativním a s výjimkou P. aeruginosa i Gramm pozitivním bakteriím. Ačkoliv účinnost nezajištovala širokospektré použití, právě vhodná kombinace s výše uvedenými látkami struktury obecných vzorců II a III zajistí širokospektrý účinek na všechny typy mikroorganismů. Účinek této směsi je uveden níže v příkladu 4, kde je porovnán s komerčně dostupným prostředkem.

Tabulka 3

		Test.		Tesů
		Koncentrace >	ΡΖΙ-ζ 5 mitt	KííxteentFíjce/
hvdvosyethyOšnMdazoiíuf»”	(8 min	hmotn,%	expozice.	hnnitn.%
haingenid	rx poz íe >0	dezinfekce	(dTCÍDStf)	d< z tni chce
{-dt>decyi-3-(2-
	-ř-	0,5	Llů	O.fH
hsuMníd
l-teiradecyi-3-(2-
hydro .tyeíítyOtmitiazošitmi·		OJ		0,01
bromid
J.-hoiadeeyT3~f2-
hydroxv s ihyOiímdaeo-iaííS -	ΙρύΑ	0,c5	0	0,00'S
bremid
Koolroia (90% etartnij	AT		1'	0
Stmírtdtt (wda)	1 H	_{: :} Jj

-6CZ 307717 B6

Kontrola (90% etanol) je nárůst C. difficile, kdy kultura byla vystavená pouze 90% etanolu po dobu 40 min a poté kultivována po dobu 24 hod. Kontrola (voda) kdy kultura byla vystavená pouze destilované vodě poté kultivována po dobu 24 hod. Vyhodnocení bylo semikvantitativní 5 dle škály představující míru nárůstu C. difficile na kultivační misce dle škály: negativní, ojediněle, +, ++, +++.

Tabulka 4

l-;dkyl-3-(2- hydřoxyethyl)imidazt>Ii«ffl- halogimd /MlC(pM)	C parapsiMs sensú slrícft>	Rltadotortda miietfagbiostí	Exapfiiala dermatítis	Aiii-eííhnsidiiim^; ^(fi^tsaría
melanogefíuftt	(limerum
1-dodecy 1-3-(2hy dro xy e t by l)im idazolimnbiOiníd	1000	300	-	300	-
1 -íctradecy 1-3-(2- hydroxyethyl)ímidazoliwmbromid	200	30	65	20	1000
1-hexadecy 1-3-(2hydroxyethyljimídazoliumbromid	300	100	30	55	100(1

Tabulka 4 (pokračování)

hydmyethyijimidszoii nu* /MICÍjiM)
í-d^deeyl-3-αhydrexyeíhýhiíHidazoliutti’ bromid	-	1000	• - >
1 -tet Fšde^LS“^’- bromid	300	300	-
l«Ji.exsde«yl3-(2>hydrexyeihyl)hitidazt>litiii^ bromid	300	200	UX»

Tabulka 5

r........... l-a!kyl-3-(2hydroxyet by í)im idazoiiumhafogenltf / MÍC (μΜ)	Staphylococcus aureus (C'1947)	'' ' / Ί Metlucilin rezistentní Slaphylococcu s aureus (C1923)	Vankamycin rezistentní Enterococcus	Eseíterickía ad i (A 1235)	Klebsiella i Ext. Speetriiin B~ lactamase i negativní · (€1950) i
l-dodecyi-3~(2liydroxyeífi yl)íiii ídazwiíu ajbrotnid	3,91	9,77	46,88 \| 31,25	62,5 ’ jí
í-teíríidecyl-J-(2- bydr»xyetbyf)iinidazc>liuin- 1 bromid	; ................ 0,98	2,93	11,72 15,63	15,63 \|
l-hcxadeeyl-3-(2- 1 bydroxyeihy!}ímidnzotium- i bromid j	0,74	1,47	3,91	i 3,91	1 7,81

Tabulka 5 (pokračování)

l-alkyT3‘(2~ hydrexy«thyl)imidazoli»mhalogenid /ΜΙΟ(μΜ)	Klebsiella Ext. Specírutn 11lítetainase pozitivní (CÍ934)	Psendontonas aeruginosa nniltírezist. (Á1245)	Yersinía bercavierí (CNCTC 6230)	Acinetobacter bauntanníi (J3474)	Stenotrapbomonas niallopbiliu (.13552/
1-dodecy 1-3-(2- hydroxyethyljimidazolhunbromid	125	1000	31,25	46,88	125
1 »tetrad ecy 1-3-(2bydroxyeíhyl)iniidazoliumbrotníd	31,25	500	7,81	7,81	15,63
l-hoadeey 1-3-(2- bydroxyelhyljimidawliumbromid	1 5.61	1000	1,95	3,91	7,81

Příklad 4

Mikrobiologické ověření účinnosti kompozice podle vynálezu a srovnání s komerčně dostupným přípravkem

Kompozice I připravené dle příkladu 2 výše vykázala v testech silnou dezinfekční účinnost proti testovaným mikrobům ze skupiny gramnegativních a grampozitivních bakterií a patogenních hub, které jsou častým původcem nozokomiálních onemocnění. Dezinfekční účinnost byla testována na kvasinkách (Candida krusei, Cryptococcus neoformans) a gram-pozitivních (Methicilin-rezistentní Staphylococcus aureus, Enterococcus sp) a gram-negativních (Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa) bakteriích při koncentraci směsí 0,1% za expoziční čas 5 minut. Ve stejné koncentraci byly srovnatelně účinné s benzalkonium bromidem (Ajatinem), který byl zařazen v testu pro srovnání. Po uvedené expozici mikroba testované směsi resp. benzalkonium bromidu (Ajatinu) nebyl pozorován žádný nárůst bakterií.

Na rozdíl od této běžně užívanému benzalkonium bromidu (Ajatinu) vykázala dezinfekční kompozice podle vynálezu vysokou účinnost proti herpetickým virům (VZV) a sporulujícímu

Clostridum dificille. Zatímco samotný derivát l-(2-hydroxyethyl)-3-tetradecylimidazolium bromid snížil titr viru o 5 řádů po 5 minutové expozici, dezinfekční kompozice podle vynálezu snížila titr viru o cca 4 řády, v případě standardního benzalkonium bromidu (Ajatinu) byl pokles pouze cca 2 řády, vše při koncentraci 0,01 % hmotn. V případě zamýšleného použití vynálezu v koncentraci 0,1 % hmotn. lze očekávat ještě vyšší účinnost. Dále dezinfekční kompozice podle vynálezu prokázala vyšší účinnost proti sporulujícímu Clostridum dificille po 10 min. expozici při koncentraci 0,1 % hmotn. oproti benzalkonium bromidu (Ajatinu), který byl v tomto exprimentu neúčinný. Účinnost proti Aspergillus fumigatus byl v případě benzalkonium bromidu (Ajatinu) mírně lepší. Dezinfekční kompozice podle vynálezu, však redukovala výskyt této houby oproti kontrole při 5 minutové expozici a koncentraci 0,1 % hmotn..

Dále byly dále provedeny testy kožní dráždivosti. Negativní výsledek kožní dráždivosti je nezbytnou podmínkou pro jejich praktické využití. Dezinfekční směsi byly hodnoceny ve dvou následných krocích, vyžadovaných platnou legislativou. Proběhlo testování dle OECD 439 provedení testu „In vitro skin irritation“ na kožním modelu lidské kůže Epiderm. Testuje se stupeň poškození rekonstruovaných epidermálním buněk po 60 min. expozici testované látky a následnému zhodnocení viability těchto buněk pomocí běžného MTT testu. Kompozice I podle příkladu 2 o koncentraci 0,1 % hmotn. neprokázala téměř žádnou kožní toxicitu, čímž vykázala lepší bezpečnost než komerčně dostupný standard benzalkonium bromidu (Ajatin) 0,1 % hmotn., který po 60 minutové expozici vedl k cca 50 % úmrtí kožních buněk v tomto modelu.

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. l-Alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid pro použití jako dezinfekční činidlo obecného vzorce I

OM

X' (I), kde R je C/2 - C/6 alkyl, X je anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Br nebo Γ, jako dezinfekční činidlo proti virům a mikroorganismům vybraným ze skupiny sestávající z Clostridium dificille, Candida parapsilosis sensu stricto, Rhodotorula mucilaginosa, Aureobasidium melanogenum, Aspergillus fumigatus, Aspergilus versicolor, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, s výhodou Staphylococcus aureus Methicilin rezistentní Staphylococcus aureus, Enterococcus spp., s výhodou Vankomycin rezistentní Enterococcus, Escherichia coli, Klebsiella spp. s výhodou Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase negativní, Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase pozitivní, Pseudomonas aeruginosa, s výhodou Pseudomonas aeruginosa multirezistentní, Yersinia bercovieri, Acinetobacter baumannii, Stenotrophomonas maltophilia nebo obalené viry, s výhodou varicella-zoster vir.

2. l-Alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid podle nároku 1, kterým je l-tetradecyl-3(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid, s výhodou l-tetradecyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-bromid.

3. Dezinfekční kompozice proti virům a mikroorganismům vybraným ze skupiny sestávající z

-9CZ 307717 B6

Clostridium dificille, Candida parapsilosis sensu stricto, Rhodotorula mucilaginosa, Aureobasidium melanogenum, Aspergillus fumigatus, Aspergilus versicolor, Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, s výhodou Staphylococcus aureus Methicilin rezistentní Staphylococcus aureus, Enterococcus spp., s výhodou Vankomycin rezistentní Enterococcus, Escherichia coli, Klebsiella spp. s výhodou Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase negativní, Klebsiella Ext. Spectrum B-lactamase pozitivní, Pseudomonas aeruginosa, s výhodou Pseudomonas aeruginosa multirezistentní, Yersinia bercovieri, Acinetobacter baumannii, Stenotrophomonas maltophilia nebo obalené viry, s výhodou varicella-zoster vir, vyznačující se tím, že obsahuje l-alkyl-3-(2-hydroxyethyl)imidazolium-halogenid podle kteréhokoliv z nároků 1 nebo 2.

4. Dezinfekční kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že koncentrace l-alkyl-3-(2hydroxyethyljimidazolium-halogenidu je v rozsahu 0,001 % hmotn. až 1 % hmotn., s výhodou 0,01 % hmotn. až 0,1 % hmotn.

5. Dezinfekční kompozice podle nároku 3 nebo nároku 4, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jednu kvartémí amoniovou sůl vybranou ze skupiny zahrnující N-dodecyl-N(2-hydroxyethyl)morfolinium-halogenid obecného vzorce II, (II), kde R je C/2 alkyl a X je anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Br nebo Γ.

a/nebo l-hexadecyl-2-methylpyridinium-halogenid obecného vzorce III, (III), kde R¹ je Ciě alkyl a X - je anion vybraný ze skupiny obsahující Cl, Br nebo Γ.

6. Dezinfekční kompozice podle nároku 5, vyznačující se tím, že hmotnostní poměr mezi amoniovými solemi je v rozsahu 1:4 až 4:1, s výhodou 1:2 až 2:1.

7. Dezinfekční kompozice podle nároku 5 nebo nároku 6, vyznačující se tím, že celková koncentrace kvartémích amoniových solí je v rozsahu 0,001 % hmotn. až 1 % hmotn., s výhodou 0,01 % hmotn. až 0,1 % hmotn.

8. Dezinfekční kompozice podle kteréhokoliv z nároků 3 až 7, vyznačující se tím, že dále zahrnuje alespoň jednu pomocnou látku vybranou ze skupiny obsahující parfémy, gelotvomá činidla, adhezivní činidla, barviva, nebo rozpouštědla.

9. Dezinfekční kompozice podle nároku 8, vyznačující se tím, že je ve formě roztoku, pěny nebo gelu.