CZ303241B6 - Krystalické formy pyrimidinového nukleosidového derivátu - Google Patents

Abstract

Krystalické formy pyrimidinového nukleosidového derivátu vykazující výbornou protinádorovou aktivitu. Farmaceutický prostredek, výhodne protinádorový, obsahující tuto krystalickou formu jako aktivní složku. Použití této krystalické formy pri príprave zmíneného farmaceutického prostredku a zpusob prevence nebo lécení onemocnení (výhodne nádorového onemocnení) zahrnující podávání farmakologicky úcinného množství této krystalické formy teplomilnému živocichu (výhodne cloveku) vyžadujícímu tuto prevenci nebo lécbu.

Description

Vynález se týká krystalických forem pyrimídinového nukleosidového derivátu, které vykazují výbornou proti nádorovou aktivitu; dále farmaceutického prostředku (výhodně proti nádorového prostředku) obsahujícího tuto krystalickou formu jako aktivní složku; dále použití této krystalické formy při přípravě zmíněného farmaceutického prostředku; a dále způsobu prevence nebo léčení onemocnění (výhodně nádorového onemocnění), který zahrnuje podávání farmakologický účinného množství uvedené krystalické formy teplomilnému živočichu (výhodně člověku) vyžadujícímu tuto prevenci nebo léčbu.

Dosavadní stav techniky

Pyrimidinový nukleosidový derivát vzorce I (uváděný dále jako sloučenina l) byl uveřejněn v japonské patentové přihlášce JP 2 569 251. Sloučenina I vykazuje výbornou protinádorovou aktivitu a očekává se, že se začne používat jako prostředek při léčbě nebo prevenci nádorů. Aby bylo použití sloučeniny I jako léku praktičtější, je potřeba zajistit lepší stabilitu pri skladování, snadnější manipulaci s touto látkou a podobně.

Podstata vynálezu

Vynálezci tohoto vynálezu studovali stabilitu sloučeniny I a její další vlastnosti a byli úspěšní při získání krystalů sloučeniny I. Tyto krystaly vykazují výrazně lepší stabilitu pri skladování a lépe se s nimi manipuluje ve srovnání s práškovou sloučeninou I získanou v příkladu 1 uveřejněném v japonské patentové přihlášce JP2 569 251. Tyto krystaly vykazují výborný farmakokinetický profil, jako například absorpci pri orálním podávání a podobně, a jsou tedy prakticky užitečné jako léčiva.

Podle tohoto vynálezu je poskytnuta:

1) krystalická forma sloučeniny vzorce I,

2) krystalická forma uvedená v bodě 1), kde sloučenina vzorce I je hydrát,

- 1 CZ 303241 B6

3) krystalická forma uvedená v bodě 1) nebo 2), kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima pri mřížkových vzdálenostech 19,53.10“*°; 13,03.ΙΟ'¹⁰; 9,75.10“*°; 4,17.10 ”'°; 4,00.10'°; 3,82.10 '°; 3,68.10“'° a 3,41.10“'° m (19,53; 13,03; 9,75; 4,17; 4,00; 3,82; 3,68 a 3,41 A) určených difrakci rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10“*° m (λ = ! ,54 A)),

4) krystalická forma uvedená v bodě 1) nebo 2), kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 19,36.10“'°; 12,87.10“'°; 9,63.10“‘°; 4,70.10”'°; 4,64.10“'°; 4,28.10”'°; 4,10.10“'°; 3,92.10“¹⁰; 3,77.10“'° a 3,48.10“*° m (19,36; 12,87; 9,63; 4,70; 4,64; 4,28; 4,10; 3,92; 3,77 a 3,48 Á) určených difrakci rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10 ¹⁰ m (λ = 1,54 A)),

5) krystalická forma uvedená v bodě 1) nebo 2), kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima pri mřížkových vzdálenostech 19,62.10“*°; 13,06.10¹⁰; 9,82.10 *°; 4,72.10“'°; 4,63.10“*°; 4,56.10“'°; 4,15.10“*°; 3,98.10“*°; 3,93.10“'°; 3,82.10“'°; 3,45.10“*° a 3,40.10“*° m (19,62; 13,06; 9,82; 4,72; 4,63; 4,56; 4,15; 3,98; 3,93; 3,82; 3,45 a 3,40 A) určených difrakci rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10“*° m (λ = 1,54 A)),

6) krystalická forma uvedená v bodě 1) nebo 2), kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima pri mřížkových vzdálenostech 22,52.10“*°; 5,17.10“‘°; 4,60.10“'°; 4,28.10“'° a 3,87.10“'° m (22,52; 5,17; 4,60; 4,28 a 3,87 A) určených difrakci rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ - 1,54.10”'° m (λ = 1,54 A));

7) farmaceutický přípravek obsahující jako aktivní složku krystalickou formu uvedenou v kterémkoli z bodů 1) až 6),

8) farmaceutický přípravek uvedený v bodě 7) pro prevenci nebo léčbu nádorů,

9) použití krystalické formy uvedené v kterémkoli z bodů 1) až 6) pri přípravě farmaceutického přípravku,

10) použití podle bodu 9), kde farmaceutický přípravek je určen pro prevenci nebo léčbu nádorů,

11) způsob prevence nebo léčby onemocnění, který zahrnuje podáváni farmakologicky účinného množství krystalické formy uvedené v kterémkoli z bodů 1) až 6) teplomilnému živočichu vyžadujícímu tuto prevenci nebo léčbu,

12) způsob podle bodu 11), kde onemocnění je nádorové onemocnění,

13) způsob podle bodu 11) nebo 12), kde teplomilný živočich je člověk.

Krystalická forma sloučeniny I v předloženém vynálezu je pevná látka, která má pravidelně se opakující uspořádání atomů (nebo skupin atomů) v trojrozměrné struktuře. Tento krystal se liší od amorfní pevné látky, která toto pravidelné uspořádání atomů v trojrozměrné struktuře nemá.

Obecně lze různé krystalické formy jedné sloučeniny (polymorfie) získat v závislosti na použitých podmínkách krystalizace. Tyto různé krystalické formy pak mají odlišné trojrozměrné strukturu a také odlišné fyzikálně-chemické vlastnosti.

Předložený vynález zahrnuje jednotlivé krystalické formy a směsi dvou nebo více těchto krystalických forem.

Krystalické formy sloučeniny I například zahrnují:

• krystal, který má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 19,53.10”*°; 13,03.10“'°; 9,75.10“'°; 4,17.10“'°; 4,00.10“*°; 3,82.10’*°; 3,68.10“*° a 3,41.10“*° m (19,53; 13,03; 9,75; 4,17; 4,00; 3,82; 3,68 a 3,41 A) určených difrakci rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10“'° m (λ = 1,54 A)), kde hlavní difrakční maxima mají relativní difrakční intenzitu větší než 36 vztaženou

-2CZ 303241 B6 k relativní intenzitě 100, která má difrakční maximum při mřížkové vzdálenosti d = 9,75.10 '° m (d=9,75 A);

(Mřížkovou vzdálenost d lze vypočítat na základě rovnice 2dsin0 = ηλ (n = 1).) • krystal, který má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 19,36.10'°; 12.87.10'°; 9,63,10“¹⁰; 4,70.10'°; 4,64.10'°; 4,28.10“'°; 4,10.10'°; 3,92.10’'°; 3.77.10'° a 3,48.10“¹⁰ m (19,36; 12,87; 9,63; 4,70; 4,64; 4,28; 4,10; 3,92; 3,77 a 3,48 Á) určených difrakcí rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10'° m (λ - 1,54 A)), kde hlavní difrakční maxima mají relativní difrakční intenzitu větší než 53 vztaženou k relativní intenzitě 100, která má difrakční maximum při mřížkové vzdálenosti d - 3,92.10”¹⁰ m (d- 3,92 Á);

krystal, který má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 19,62.10 ^l°; 13.06.10’*°; 9,82.10'°; 4,72.10'°; 4,63.10*°; 4,56.10'°; 4,15.10'°; 3,98.10'°; 3,93.10'°; 3,82.10'°; 3,45.10'° a 3,40.10'° m (19,62; 13,06; 9,82; 4,72; 4,63; 4,56; 4,15; 3,98; 3,93; 3,82; 3,45 a 3,40 A) určených difrakcí rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10¹⁰ m (λ = 1,54 A)), kde hlavní difrakční maxima mají relativní difrakční intenzitu větší než 30 vztaženou k relativní intenzitě 100, která má difrakční maximum pri mřížkové vzdálenosti d = 4,56.10'° m (d = 4,56 A); a krystal, který má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 22,52.10 '°; 5.17.10'°; 4,60.10'°; 4,28.10'° a 3,87,10'° m (22,52; 5,17; 4,60; 4,28 a 3,87 A) určených difrakcí rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi (vlnová délka λ - 1,54.10'° m (λ - 1,54 A)), kde hlavní difrakční maxima mají relativní difrakční intenzitu větší než 36 vztaženou k relativní intenzitě 100, která má difrakční maximum pri mřížkové vzdálenosti d = 22,52.10'° m (d - 22,52 A).

Když se krystalické formy sloučeniny 1 ponechají v kontaktu s atmosférou nebojsou smíchány s vodou nebo rozpouštědlem, tak mohou tuto vodu nebo rozpouštědlo absorbovat za tvorby hydrátu nebo solvátu. Předložený vynález tyto hydráty a solváty zahrnuje.

Sloučenina I může být připravena podobným způsobem, kterýje popsaný v japonské patentové přihlášce JP 2 569 251.

Kiystalické formy sloučeniny I mohou být získány z přesyceného roztoku. Přesycený roztok může být připraven rozpuštěním sloučeniny I ve vhodném rozpouštědle, úpravou pH roztoku, zakoncentrováním roztoku, ochlazením roztoku, přídavkem rozpouštědla, ve kterém je sloučenina I nepatrně rozpustná, do roztoku sloučeniny I v rozpouštědle, ve kterém je sloučenina I snadno rozpustná, a podobně.

Suspenze krystalu sloučeniny I nebo amorfní pevné sloučeniny I ve vhodném rozpouštědle se převede do formy zahuštěné suspenze a poté se míchá za vzniku alternativního krystalu (rozpouštědlem vyvolaná transformace).

Kromě toho dochází k tvorbě krystalů spontánně v reakční nádobě, nebo může být tato krystalizace nastartována nebo urychlena naočkováním krystalem, mechanickou stimulací jako například ultrazvukem nebo škrabáním uvnitř reakční nádoby.

Teplota při krystalizací sloučeniny I nebo její farmakologický přijatelné soli je obvykle v rozmezí 0 až 60 °C, s výhodou v rozmezí 5 až 45 °C.

Získané krystaly mohou být izolovány pomocí metod filtrace, odstřeďování nebo dekantace. izolované krystaly mohou být promyty vhodným rozpouštědlem. Rozpouštědlo na promytí krystalů zahrnuje například vodu; alkohol jako např. ethanol, isopropylalkohol; keton jako např. aceton; ester jako např. methylformiat, ethylformiat, methyíacetat, ethylacetát; aromatický uhlovodík

- j CZ 303241 B6 jako např. toluen, xylen; nitril jako např. acetonitril; ether jako např. diethylether, tetrahydrofuran, nebo jejich směsi. S výhodou se používá methylacetat buď bezvodý nebo obsahující vodu.

Izolované krystaly mohou být sušeny pri teplotách 10 až 100 °C, s výhodou při teplotách 30 až

50 °C do konstantní hmotnosti sušených krystalů, a pokud je to nezbytné, tak sušení probíhá v přítomnosti sušidel jako např. silikagelu, chloridu vápenatého a za sníženého tlaku.

Vysušené krystaly mohou při relativní vlhkosti 20 až 90 % a teplotě 10 až 30 °C, s výhodou pri relativní vlhkosti 50 až 80 % a teplotě 20 až 30 °C absorbovat vodu do té míry, až je hmotnost ío těchto krystalů konstantní.

Takto získané krystaly mohou být dále přečištěny následnou rekrystalizací nebo technikou zahuštěné suspenze.

Rekrystalizace se provádí pomocí odborníkům známých technik jako například 1) ochlazovací metoda: sloučenina I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl se za horka rozpustí v rozpouštědle a výsledný roztok se ochladí, 2) koncentrační metoda: roztok sloučeniny I nebo její farmaceuticky přijatelné soli se zahustí, 3) srážecí metoda: rozpouštědlo, ve kterém je sloučenina I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nepatrně rozpustná, se přidá do roztoku sloučeniny l nebo její farma20 ceuticky přijatelné soli v rozpouštědle, ve kterém je sloučenina I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl snadno rozpustná.

Přečištění technikou zahuštěné suspenze zahrnuje izolaci krystalů, které se získají mícháním suspenze určité sloučeniny ve vhodném rozpouštědle.

Rozpouštědlo použité v přečištění sloučeniny Ϊ technikou zahuštěné suspenze zahrnuje například keton jako např. aceton, methylethylketon; ester jako např. methylacetat, ethylacetát; nitril jako např. acetonitril; halogenovaný uhlovodík jako např. dichlormethan, chloroform; aromatický uhlovodík jako např. toluen, xylen; alkohol jako např. ethanol, isopropylalkohol; ether jako např.

diethylether, tetrahydrofuran; amid jako např. N, V—dimethyl formamid; vodu; alifatický uhlovodík jako např. hexan; ether jako např. diisopropylether, diethylether, nebo další a jejich směsi. S výhodou se používá keton jako např. aceton, methylethylketon; ester jako např. methylformiat, ethylformiat, methylacetat, ethylacetát; nitril jako např. acetonitril; alkohol jako např. ethanol, isopropylalkohol, a tato rozpouštědla obsahující vodu; a výhodněji methylacetat buď bezvodý nebo obsahující vodu.

Krystaly získané rekrystalizací nebo technikou zahuštěné suspenze se také izolují podobnými technikami jako těmi popsanými výše.

Když se krystalické formy sloučeniny I použijí jako léčivo, s výhodou pro léčbu nebo prevenci nádorů, tak mohou být tyto krystalické formy podávány samotné nebo jako směsi zmíněné krystalické formy s vhodnou(ými) farmaceuticky přijatelnou(ými) pomocnou(ými) látkou(ami) a/nebo ředicí(mi) látkou(ami). Přípravky podle předloženého vynálezu mohou být v jednotkových dávkových formách pro orální nebo parenterální podávání jako například tablety, kapsle, granule, prášky, sirupy, injekce, masti, roztoky, suspenze, aerosoly, pastilky a podobně.

Tyto farmaceutické přípravky mohou být připraveny známým způsobem za použití přísad jako například pomocné látky, pojivá, látky usnadňující rozpadání, maziva, stabilizátory, látky upravující chuť, suspendační látky, ředidla a rozpouštědla.

Příklad pomocných látek zahrnuje derivát cukru jako například laktosu, sacharosu, glukosu, mannitol, nebo sorbitol; derivát škrobu jako například kukuřičný škrob, bramborový škrob, aškrob, dextrin, karboxymethylškrob; derivát celulózy jako například krystalická celulóza, málo substituovaná hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, karboxy methy lcelulóza, vápenatá sůl karboxymethylcelulózy, vnitřně zesítěná sodná sůl karboxymethylcelulózy; klovati-4CZ 303241 B6 na; dextran; pullulan; derivát křemičitanu jako například anhydrid lehké kyseliny křemičité (98% SiO₃); syntetický hiinitokřemičitan, hlinitokřemičitan hořečnatý; derivát fosforečnanu jako například fosforečnan vápenatý; derivát uhličitanu jako například uhličitan vápenatý; derivát síranu jako například síran vápenatý; a podobně.

Příklad pojivá zahrnuje pomocné látky popsané výše; želatinu; polyvinylpyrrolidon; macrogol; a podobně.

Příklad látky usnadňující rozpadání zahrnuje pomocné látky popsané výše, chemicky modifíkoto váný derivát škrobu nebo celulózy jako například sodná sůl kroskarmelózy, sodnou sůl karboxymethylškrobu, zesítěný polyvinylpyrrolidon a podobně.

Příklad maziva zahrnuje mastek; kyselinu stearovou; sůl kyseliny stearové jako například stearát vápenatý, stearát hořečnatý; koloidní oxid křemičitý; veegum; vosk jako například včelí vosk nebo tuk z vorvaně; kyselinu boritou; glykol; derivát karboxylové kyseliny jako například kyselina fumarová, kyselina adipová; sodná sůl karboxylové kyseliny jako například benzoat sodný; síran jako například síran sodný; leucin; laurylsulfat jako například laurylsulfat sodný nebo laurylsulfat hořečnatý; derivát kyseliny křemičité jako například anhydrid kyseliny křemičité, hydrát kyseliny křemičité; derivát škrobu popsaný výše jako pomocná látka; a podobně.

Příklad stabilizátoru zahrnuje derivát esteru kyseliny /?-hydroxybenzoové jako například methylparaben, propylparaben; alkohol jako například chlorbutanol, benzylalkohol, phenethylalkohol; benzalkonium chlorid; fenolový derivát jako například fenol, kresol; thimerosal; anhydrid kyseliny octové; kyselinu sorbovou; a další.

Příklad látky upravující chuť zahrnuje sladidla, okyselující činidla, aromatická činidla a podobně, která se běžně používají.

Příklad rozpouštědla zahrnuje vodu, ethanol, glycerin a podobně.

Dávka krystalické formy sloučeniny I bude záviset na takových faktorech jako příznak, tělesná hmotnost a věk pacienta. Vhodná dávka je od 0,1 mg (s výhodou 1 mg) do 100 mg (s výhodou 50 mg) na den. Krystalická forma sloučeniny vzorce I může být podávána buď jako jediná dávka nebo, pokud je požadováno, může být rozdělena do vhodných menších dávek podávaných jeden35 krát až několikrát denně v závislosti na příznacích pacienta.

Příklady provedení vynálezu -to Vynález je dále popsán příklady.

Testovací příklady a příklady přípravku

Příklad 1

Krystal B

a) Methyfacetat obsahující 2,5 % objemových vody (300 ml) byl přidán k 2'-kyano-2'-deoxy50 N⁴-paimitoyl-l-[3-D-arabinofuranosylcytosinu (30 g), což je sloučenina popsaná v příkladu (ld) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, a výsledná směs byla zahřáta na přibližně 55 °C, čímž byl získán čirý roztok. Roztok byl následně ochlazen na 5 °C rychlostí přibližně 0,5 °C za minutu. Během ochlazování začaly přibližně při 45 °C vypadávat krystaly ve tvaru destiček. Po 20-ti minutovém míchání při 5 °C byly krystaly zfiltrovány a promyty methy 1- 5 CZ 303241 B6 acetatem obsahujícím 2,5 % objemových vody (30 ml), Čímž byly získány požadované krystaly B (28,78 g, čistotu 97,9 %) ve výtěžku 96 %.

b) Methytacetat obsahující 1,9 % objemových vody (80 I) by přidán k 2'-kyano-2'-deoxy-N⁴palmitoyl-l-p-D-arabinofuranosylcytosinu (8,7 kg), což je sloučenina popsaná v příkladu 1 (ld) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, a výsledná směs byla míchána 1,5 hodiny při přibližně 23 °C. Krystaly byly zfiltrovány, promyty methylacetatem obsahujícím 1,9% objemových vody (20 1) a vysušeny, čímž byly získány požadované krystaly B (7,7 kg, čistota 97,3 %) ve výtěžku 90,1 %.

Příklad 2

Krystal C

a) Methylacetat obsahující 4 % objemová voda (600 ml) by přidán k 2'-kyano-2'-deoxy-N⁴palmitoyl-l-p-D-arabinofuranosylcytosinu (30 g), což je sloučenina popsaná v příkladu 1 (ld) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, a výsledná směs byla zahřáta na přibližně 50 °C, čímž byl získán čirý roztok. Roztok byl následně ochlazen na 40 °C rychlostí přibližně 0,5 °C za minutu a míchán. V průběhu míchání došlo nejprve k separaci krystalů B, které se potom pozvolna přeměnily na jehličkoví té krystaly. Po 60-ti minutovém míchání při °C byl roztok ochlazen na 25 °C rychlostí přibližně 0,5 °C za minutu. Po 60-ti minutovém míchání při 25 °C byly krystaly zfiltrovány a promyty methylacetatem obsahujícím 4 % objemová vody (30 ml), čímž byly získány požadované krystaly C (23,74 g, čistota 98,5 %) ve výtěžku 79,7 %.

b) Methylacetat obsahující 2,5 % objemových vody (600 ml) byl přidán k 2'-kyano-2'-deoxyN⁴-palmitoyl-l-|3-D-arabinofuranosylcytosinu (60 g), což je sloučenina popsaná v příkladu 1 (ld) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, a výsledná směs byla míchána 2 hodiny při přibližně 23 °C a potom ochlazena na 12 °C rychlostí přibližně 0,5 °C za minutu. Po 1 hodinovém míchání pri 12 °C byly krystaly zfiltrovány, promyty methylaceta30 tem obsahujícím 2,5 % objemových vody (180 ml) a vysušeny, čímž byly získány požadované krystaly C (55,1 g, čistota 94,5 %) ve výtěžku 89,6 %.

Příklad 3

Krystal C (I)

I) Vysušené krystaly C byly uchovány přibližně 20 minut pod atmosférou zvlhčenou na více než 45 % vlhkosti, čímž byly získány požadované krystaly C(I).

2) K vysušeným krystalům C byla přidána voda v množství, které odpovídá přibližně 33 % hmotnostním použitých krystalů, a výsledná směs byla hnětena 3 minuty, čímž byly získány požadované krystaly C(I).

Příklad 4

Krystal D

a) Bezvodý methylacetat (400 ml) byl přidán k 2'-kyano-2'-deoxy-N⁴-palmitoyl-l-[3-D50 arabinofuranosylcytosinu (10,0g), což je sloučenina popsaná v příkladu 1 (ld) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, a výsledná směs byla zahřáta na přibližně 60 °C, čímž byl získán čirý roztok. Roztok byl následně ochlazen na 25 °C rychlostí přibližně 0,5 °C za minutu. Během ochlazování začaly přibližně při 43 °C vypadávat krystaly. Po ochlazení na

-6CZ 303241 B6 °C byly vyloučené krystaly zfiltrovány, čímž byly získány požadované krystaly D (8,8 g, výtěžek 88,4 %).

b) Methylacetat (1500 ml) byl přidán k 2'-kyano-2'-deoxy-N⁴-palmitoyl-l-[3-D-arabinofuranosylcytosinu (50 g), což je sloučenina popsaná v příkladu 1 (Id) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, a výsledná směs byla zahřáta na přibližně 50 °C a míchána 1 hodinu při přibližně 50 °C. Roztok byl následně ochlazen na 40 °C rychlostí přibližně 0,5 °C za minutu a míchán. Po 30-ti minutovém míchání při 40 °C byly vyloučené krystaly zfiltrovány a vysušeny, čímž byly získány požadované krystaly D (37,0 g, čistota 99,2 %) ve výtěžku

74,2 %.

in

Testovací příklad 1, test stability

V testu stability byly krystaly B, C a D předloženého vynálezu připravené v příkladech 1, 2 a 4 v tomto pořadí a amorfní prášek (amorfní A) sloučeniny vzorce 1 popsaný v příkladu 1 (Id) japonské patentové přihlášky JP 2 569 251, použity jako reference. Tyto sloučeniny byly umístěny samostatně v uzavřených nádobách a skladovány 17 dní při teplotě 60 °C pod atmosférou dusíku, a složení těchto sloučenin bylo měřen 5., 10. a 17. den po začátku skladování.

Složení těchto sloučenin bylo kvantitativně stanoveno metodou vysokoúčinnou kapalinové chro20 matografie (HPLC), a podíl zbývajících sloučenin (%) byl vypočítán relativně k obsahu sloučeniny I stanoveném v každé testovací periodě založeném na počátečním obsahu (100%) stanoveném bezprostředně před uskladněním.

Pracovní podmínky HPLC byly následující:

kolona: L-kolona ODS (4,6 mm x 250 mm) (Chemicals Inspection and Testing Institute) mobilní fáze: acetonitril: voda: kyselina octová = 750 : 250 : 1 průtoková rychlost: 1,0 ml/min vlnová délka detektoru: 249 nm teplota kolony: 40 °C

Tabulka 1

Stabilita každé sloučeniny při 60 °C pod dusíkovou atmosférou (zbytkový podíl)

Sloučenina	Počet dní po zahájení testu stability
5 dní	10 dní	17 dní
Amorfní A	92,7 %	78,6 %	62,5 %
Krystal B připravený v příkladu 1	101,0%	100,3 %	100,4 %
Krystal C připravený v příkladu 2	101,0%	100,4%	100,1 %
Krystal D připravený v příkladu 4	99,9 %	98,3 %	98,4 %

Na základě výsledků shrnutých v Tabulce 1, byla stabilita amorfního prášku (amorfní A) sloučeniny I při 60 °C pod dusíkovou atmosférou extrémně nízká, a zbytkový podíl se zmenšil na

62,5 % po 17-ti denním skladování. Naproti tomu výsledy, kdy zbytkový podíl krystalů B a C připravených v příkladech 1 a 2 byl za stejných podmínek skladovaní 100 % a zbytkový podíl krystalu D připraveného v příkladu 4 byl 98,4 %, demonstrují, že stabilita krystalů předloženého vynálezu je extrémně vysoká.

-7CZ 303241 B6

Příklad přípravku 1, roztok 1

Roztok se připraví tak, že uvedený roztok obsahuje sloučeninu připravenou v příkladu 1 (10 % hmotnostních), benzalkoniumchlorid (0,04% hmotnostní), fenylethylalkohol (0,04 % hmotnostní) a čištěnou vodu (89,56 % hmotnostních).

Příklad přípravku 2, roztok 2 io Roztok se připraví tak, že uvedený roztok obsahuje sloučeninu připravenou v příkladu l (10% hmotnostních), benzalkoniumchlorid (0,04 % hmotnostní), propylenglykol (30 % hmotnostních) a čištěnou vodu (39,96 % hmotnostních).

Příklad přípravku 3, prášek

Prášek se připraví tak, že uvedený prášek obsahuje sloučeninu připravenou v příkladu 1 (40 % hmotnostních) a laktózu (60 % hmotnostních).

Příklad přípravku 4, aerosol

Aerosol se připraví tak, že uvedený aerosol obsahuje sloučeninu připravenou v příkladu 1 (10 % hmotnostních), lecitin (0,5 % hmotnostních), fulon 1 1 (34,5 % hmotnostních) a fulon 12(55 % hmotnostních).

Průmyslová využitelnost

5o Krystalické formy tohoto vynálezu mají výrazně lepší skladovací stabilitu a lépe se s nimi manipuluje než s amorfním práškem sloučeniny I. Uvedené krystalické formy vykazují výborné metabolické dispozice, jako například absorpci při orálním podávání a podobně, a jsou proto užitečné jako léky (s výhodou jako činidla pro léčbu nebo prevenci nádorů).

Stručný popis obrázků

Obrázek 1

Obrázek 1 je difrakční rentgenový profil krystalického produktu připraveného v příkladu 1, který se získá ozářením tohoto krystalického produktu Ka paprsky mědi (vlnová délka λ= 1,54.10¹⁰ m (λ = 1,54 A)).

Obrázek 2

Obrázek 2 je difrakční rentgenový profil krystalického produktu připraveného v příkladu 2, který se získá ozářením tohoto krystalického produktu Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10¹⁰ m (λ = 1,54 Á)).

Obrázek 3

Obrázek 3 je difrakční rentgenový profil krystalického produktu připraveného v příkladu 3, který se získá ozářením tohoto krystalického produktu Ka paprsky mědi (vlnová délka λ = 1,54.10“¹⁰ ιπ(λ= 1,54 A)).

-8CZ 303241 B6

Obrázek 4

Obrázek 4 je difrakční rentgenový profil krystalického produktu připraveného v příkladu 4, který 5 se získá ozářením tohoto krystalického produktu Ka paprsky mědi (vlnová délka λ= 1,54.10^-10 ιη(λ= 1,54 A)).

Vertikální osa difrakčního rentgenového profilu v těchto obrázcích označuje difrakční intenzitu v jednotkách počtů za sekundu (counts/second - eps) a horizontální osa označuje difrakční úhel io jako hodnotu 2Θ.

Claims (8)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Krystalická forma sloučeniny vzorce 1:

   kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech

   19,53.10 ‘°; 13,03.10~'°; 9,75.IO’¹⁰; 4,17.10’'°; 4,OO.1O’¹⁰; 3,82.10^_1°; 3,68.10“’° a 3,41.IO’¹⁰ m určených d i frakcí rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi s vlno25 vou délkou λ = 1,54.10¹⁰ m.
2. 2. Krystalická forma sloučeniny vzorce I:

   -9CZ 303241 B6 ,0 kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech

   19,36.10·'°; 12,87.10 '°; 9,63.10-'°; 4,70.10-'°; 4,64.10 '“; 4,28.10-'°; 4,10.10-'°; 3,92.10'“;
3. 3,77.10 a 3,48.10 m určených difrakcí rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi s vlnovou délkou λ = 1,54.10¹⁰ m.

   3 Krystalická forma sloučeniny vzorce I:

   O kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 19,62.10''°; 13,06.10“'°; 9,82.10“'°; 4,72.10’’°; 4,63.10“'°; 4,56.10“'°; 4J5.1O’¹⁰; 3,98.10 ^l°;

   3,93.10 ^l0; 3,82.10 ^l0; 3,45.10 ¹⁰ a 3,40.10“'° m určených difrakcí rentgenového záření práškovou metodou používající Ka paprsky mědi s vlnovou délkou λ = 1,54.10 ¹⁰ m.
4. 4. Krystalická forma sloučeniny vzorce I:

   -10CZ 303241 B6 ,0 kde tato krystalická forma má hlavní difrakční maxima při mřížkových vzdálenostech 22,52.10'¹⁰; 5,17.10^-10; 4,60.1O~¹⁰; 4,28.10¹⁰ a 3,87.10^-10 m určených difrakcí rentgenového záře5 ní práškovou metodou používající Ka paprsky mědi s vlnovou délkou λ = 1,54.10^-10 m.
5. 5. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že jako aktivní složku obsahuje krystalickou formu podle kteréhokoli z nároků 1 až 4.

   io
6. 6. Farmaceutický přípravek podle nároku 5, vyznačující se tím, že je určen pro prevenci nebo léčbu nádoru.
7. 7. Použití krystalické formy podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 pro přípravu farmaceutického přípravku pro prevenci nebo léčbu nádorů u teplomilného živočicha.
8. 8. Použití podle nároku 7, kde teplomilný živočich je člověk.