CZ300489B6 - Farmaceutický prostredek obsahující konjugát žlucové kyseliny nebo soli žlucové kyseliny s mastnou kyselinou pro lécbu syndromu ztucnelých jater - Google Patents

Farmaceutický prostredek obsahující konjugát žlucové kyseliny nebo soli žlucové kyseliny s mastnou kyselinou pro lécbu syndromu ztucnelých jater Download PDF

Info

Publication number
CZ300489B6
CZ300489B6 CZ20032710A CZ20032710A CZ300489B6 CZ 300489 B6 CZ300489 B6 CZ 300489B6 CZ 20032710 A CZ20032710 A CZ 20032710A CZ 20032710 A CZ20032710 A CZ 20032710A CZ 300489 B6 CZ300489 B6 CZ 300489B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
acid
bile
fatty
salt
animals
Prior art date
Application number
CZ20032710A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20032710A3 (cs
Inventor
Gilat@Tuvia
Original Assignee
Galmed International Limited
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Galmed International Limited filed Critical Galmed International Limited
Publication of CZ20032710A3 publication Critical patent/CZ20032710A3/cs
Publication of CZ300489B6 publication Critical patent/CZ300489B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/543—Lipids, e.g. triglycerides; Polyamines, e.g. spermine or spermidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/554—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being a steroid plant sterol, glycyrrhetic acid, enoxolone or bile acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0055—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of at least three carbon atoms which may or may not be branched, e.g. cholane or cholestane derivatives, optionally cyclised, e.g. 17-beta-phenyl or 17-beta-furyl derivatives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Rešení se týká použití konjugátu žlucových kyselin nebo soli žlucové kyseliny s mastnou kyselinou (BAFAC) majícího obecný vzorec II, ve kterém G je zbytek žlucové kyseliny nebo soli žlucové kyseliny, který je poprípade konjugován na pozici 24 s vhodnou aminokyselinou, W znamená jeden nebo dva zbytky mastných kyselin, které mají 14 až 22 atomu uhlíku, a X znamená vhodný vazebný clen nebo prímou C=C vazbu mezi uvedeným zbytkem žlucové kyseliny nebo soli žlucové kyseliny a mastnou kyselinou ci mastnými kyselinami, pro výrobu farmaceutického prostredku pro lécbu syndromu ztucnelých jater.

Description

Farmaceutický prostředek obsahující konjugát žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny s mastnou kyselinou pro léčbu syndromu ztučnělých jater
Oblast techniky
Tento vynález se týká nových použití určitých konjugátu žlučových kyselin nebo solí žlučových kyselin s mastnými kyselinami pro léčbu syndromu ztučnělých jater.
Dosavadní stav techniky
Podle izraelského patentu 123 988 jsou známy konjugáty žlučových kyselin nebo žlučových solí s mastnými kyselinami [BAFAC II] obecného vzorce II
W-X-G (II), v němž G je zbytek žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny, který je-li třeba, je konjugován na pozici 24 s vhodnou aminokyselinou, W znamená jeden nebo dva zbytky mastných kyselin, které mají 6 až 26 uhlíkových atomů a X znamená NH vazbu mezi uvedeným zbytkem žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny.
Z uvedeného patentového spisuje známé použití sloučenin obecného vzorce II a farmaceutických prostředkuje obsahujících pro rozpouštění cholesterolových žlučových kamenů v žluči, prevenci vzniku nebo léčení těchto žlučových kamenů a omezení nebo prevenci arteriosklerózy. Jsou též známé způsoby léčení těchto chorob.
Podstata vynálezu
Nyní bylo překvapivě nalezeno, že tyto konjugáty BAFAC II a farmaceutické prostředky, které je obsahují, v nichž W znamená jeden nebo dva zbytky mastné kyseliny, které mají 14 až 22 uhlíkových atomů a X znamená vhodný vazebný člen nebo přímou C-C vazbu mezi uvedeným zbytkem žlučové kyseliny nebo zbytkem soli žlučové kyseliny a mastnou kyselinou, mají další použití, zvláště pak pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení tzv. ztučnělých jater.
Uvedené BAFAC 11 a farmaceutické prostředky, které je obsahují, mohou být také použity pro léčení shora uvedené choroby.
lato vazba by měla být pevná vazba, a to taková, která není podstatně štěpitelná střevními a/nebo bakteriálními enzymy během procesu absorpce. Esterová vazba není tedy vhodná, protože je snadno štěpitelná. Vazba zastupuje zejména NH, ale může zastupovat i jiné vhodné vazebné členy, např. S, P, O-ether atd.
l ato vazba může být v alfa nebo beta konfiguraci a může být připojená v různých pozicích v molekule žlučové kyseliny, přičemž je dávána přednost pozicím 3, 6, 7, 12 a 24.
Dále jsou uvedeny choroby, kterých se to týká, historie jejich léčení a nové použití pro léčení těchto chorob.
Léčení ztučnělých jater
Ztučnění jater je dnes jedním z nejběžnějších onemocnění jater. Je způsobeno rozsáhlým ukládáním tuku v játrech. Histologicky se projevuje různým množstvím mikro a/nebo makro měchýřko- 1 CZ 300489 B6 vitých tukových kapiček vjatemí tkáni. Ztučnění jater může být způsobeno léky, drogami, chemikáliemi, chorobami, bakteriemi atd., ale hlavním důvodem je nadměrný příjem potravy vedoucí k obezitě (především v oblasti trupu).
Vlivem zvyšování převahy nadváhy v blahobytné společnosti, stoupá rozšíření ztučnění jater. Ztučnění jater se může vyvinout ve steatohepatitis (neinfekční hepatitida způsobená nadměrným vývinem tukové tkáně v játrech), cirhózu provázenou chorobností a úmrtností.
Nej lepší léčbou pro ztučnění jater způsobené nadměrnou výživou je trvalé snížení hmotnosti. Jak je však známo, toho je jen zřídka dosaženo. Nyní bylo zjištěno, že BACAF II mohou snížit nebo zabránit ztučnění jater. To bylo prokázáno v průběhu pokračování nadměrného příjmu potravy u několika živočišných druhů.
Snížení koncentrace cholesterolu v krví
Hyperglykémie velmi škodí zdraví. Je rozhodujícím faktorem několika závažných chorobných procesů jako je ischemická choroba srdeční, infarkt myokardu, periferní vaskulámí choroba, možné nebezpečí mrtvice atd. Snížení koncentrace cholesterolu v krvi je prospěšné nebo preventivní u některých uvedených chorob. Současná medicinální léčba hypercholesterolemie je zamě20 řena na snížení endogenní syntézy cholesterolu v játrech. Z toho důvodu používané statiny inhibují enzym HMG Co A reduktasu. Nicméně hlavní část tělesného cholesterolu pochází z cholesterolu přijatého výživou. Dietní zákazy jsou, bohužel, jak je známo, neefektivní. K vazbě žlučových kyselin (produktů katabolizmu cholesterolu) ajejich vyloučení do střevního traktu vedoucího k jejich fekální exkreci mohou být též použity iontoměničové pryskyřice. Mají určitý vliv na krevní cholesterol, ale též významné vedlejší účinky, které omezují jejich použití.
Nyní bylo prokázáno, že BACAF II snižují výživou zaviněnou hypercholesterolemii u několika druhů zvířat, dokonce i když zvířata pokračují v konzumaci diety s vysokým obsahem cholesterolu a tuků.
Léčení hyperglykémie a diabetů
Diabetes mellitus je poruchou metabolizmu uhlovodíků (glukózy). Schematicky je rozdělován na typ 1, diabetes závislý na inzulínu (IDDM - insuline dependent diabetes mellitus), charakterizo35 váný nedostatkem inzulínu a typ 2, nezávislý na inzulínu (NIDDM - not insulin dependent diabetes mellitus), charakteristický hlavně inzulínovou rezistencí. NIDDM je často spojen s obezitou a/nebo ztučněním jater. Existují ještě další důvody hyperglykemie. Léčení diabetů mellitus zahrnuje dietu, inzulínové injekce a/nebo ústní podávání hypoglykemických léčiv. Cílem léčby je normalizace hladiny krevního cukru. Diabetes, zvláště pak nedostatečně kontrolovaná diabetes, vede k těžkým komplikacím.
Nyní bylo zjištěno, že konjugáty BAFAC II snižují a normalizují hladiny krevní glukosy u modelových zvířat obou typů diabetů (IDDM a NIDDM).
Předložený vynález bude tento vynález popsán s odkazem na příklady a obrázky, aniž by jimi byl jakkoli limitován.
V uvedených příkladech byla používána „běžná dieta“ následujícího složení:
Uhlovodíky 50%, proteiny 21 %, tuky 4 % s minerály, vlákninou a vitaminovými doplňky (připravenými fy Koffolk, Petlach Tiqwa, Izrael).
-2CZ 300489 B6
Přehled obrázků na výkresech
Obrázky 1 A, IB a ÍC ukazují postní koncentrace krevní glukózy u hlodavců při různých dietních režimech s a bez BAFAC II (150 mg/kg/den), tj.:
obrázek 1A pro krysy (4 t) obrázek 1B pro křečky (3 t) obrázek ÍC pro myši (16 d) a
obrázek 2 ukazuje poměr lipid/protein v játrech inbredních myší linie C57J/L krmených dietou s vysokým obsahem tuku +/- BAFAC II (150 mg/kg/den) po dobu pěti týdnů.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
1. Samci křečků
Bylo použiti zlatí syrští křečci (Anilab, Rehovot, Izrael) stáří 4 až 6 týdnů, o hmotnosti 90 až 110 g. Byli krmeni lithogenní dietou (dieta vedoucí k tvorbě žlučových kamenů) (č. 1), která se skládala zjejich běžné diety doplněné o cholesterol (1 %), kyselinu palmitovou (1,2 %), kukuřičný olej (2 %; upravený podle Ayyad et al., Lipids, 1992;27: 993-998) (jedná se o hmotnostní %) po dobu 10 týdnů. Polovině zvířat byla navíc podána kyselina 3β—arachidylamido-7a,12adihydroxy-5|3-cholan-24-ová v dávce 150 mg/kg/den suspendovaná ve fyziologickém roztoku intragastrickým způsobem podání. Kontrolním zvířatům byly podobně podávány stejné objemy fyziologického roztoku. Po deseti týdnech byla zvířata anestezována a byla jim odebrána krev ze srdce za účelem analýzy. Byla odebrána játra a ostatní orgány. Hladiny krevního cholesterolu byly určeny pomocí autoanalyzátoru.
2. Myši
Bylo použiti samci inbredních myší C57J/L (Jackson Lab., Maine, USA) stáří 4 až 6 týdnů o hmotnosti 20 až 25 g. Byla jim podávána jejich běžná dieta doplněná o mléčný tuk 15 %, cholesterol 1 %, kyselinu cholovou 0,5 %, kukuřičný olej (2 %; upravený podle Khanuja et al., Proč. Natnl. Acad. Sci. USA 1995;92:7729-33) (jedná se o hmotnostní %) po dobu 4 až 8 týdnů. (Lithogenní dieta #2). Polovině zvířat ze skupiny byla intragastricky (žaludeční sondou) podávána 3β—arachidylamido—7α, 12 a—d i hydroxy-5 β—cholan—24-ová kyselina v dávce 150 mg/kg/den suspendovaná ve fyziologickém roztoku. Druhé polovině byl podobně podáván stejný objem fyziologického roztoku. Po 4 až 8 týdnech byla zvířata anestezována a byla jim odebrána krev ze srdce za účelem analýzy. Byla odebrána játra a ostatní orgány. Hladiny cholesterolu v séru byly stanoveny pomocí autoanalyzátoru.
Další skupině samců inbredních myší C57 J/L (Jackson Laboratoriem, Maine, USA) 4 až 6 týdnů starých, o hmotnosti 20 až 25 g byla podávána lithogenní dieta (č. 2) po dobu 8 týdnů a pak běžná dieta po dobu dalších 8 týdnů. Během 8 týdnů této běžné diety byla části zvířat podávána kyselina 3P-arachidylamido-7a,12a-dihydroxy—5|3-cholan-24-ová intragastrickým způsobem podávání při dávce 150 mg/kg/den. Po 16 týdnech byla zvířata anestezována byla jim odebrána srdeční krev pro analýzu. Byla jim odebrána játra a ostatní orgány. Hladiny sérového cholesterolu byly stanoveny výše uvedeným způsobem.
-3 CZ 300489 B6
Třetí skupině zvířat byla podávána 16 týdnů běžná dieta a pak byla analyzována stejným způsobem.
Počet zvířat v každé skupině a výsledky jsou uvedeny v následující tabulce 1:
Tabulka 1: Sérový cholesterol (mg %) testovaných zvířat (střední hodnota + směrodatná odchylka)
Zvířata dieta Trvání (týdny) n pouze běžná dieta n běžná dieta +BAFAC II
myši,inbred. C5 J/L lithogenní 2 4 5 270 (21,7) 5 143 (19,8)
6 6 274 (4,1) 7 125 (10,8)
ϊ» 5» 8 5 264 (5,8) 5 139 (0,7)
Křečci (zlatí syrští) lithogenní 1 10 5 257 (32,7) 5 202 (59,6)
myši5inbred. C57J/L lithogtenní 2, pak běžná 8 } 16 8 6 101 (10,1) 7 65 (6,8)
pouze běžná 16 4 81 (5,5)
n - počet zvířat
Hodnoty uvedené v tabulce 1 ukazují, že konjugáty BAFAC II význačně snižují hladiny krevního 15 cholesterolu u početné skupiny myší a křečků.
Příklad 2
Histologický způsob stanovení
Přítomnost syndromu ztučnění jater byla vyhodnocena patologem neobeznámeným se způsobem ošetření, za použití nařezaných kódovaných tenkých plátků metodou slepého pokusu.
Systém řezů byl následující:
- neztučnělá játra
- minimální ztučnění jater
- střední ztučnění jater
3 - značné ztučnění jater
- těžké ztučnění jater <5 % povrchu jater napadeno 5 až <25 % povrchu jater 25 až 50 % povrchu jater je napadeno > 50 % povrchu jater je napadeno
-4CZ 300489 B6
1. Křečci
Byli použiti zlatí syrští křečci (Sílán, Rehovet, Izrael), stáří 4 až 6 týdnů o hmotnosti 90 až 110 g.
Byli krmeni lithogenní dietou (č. 1). Polovině zvířat byla podávána kyselina 3p-aracidylamido7a,12a-dihydroxy-5p-cholan-24-ová v dávce 150 mg/kg/den. Směs byla podávána suspendovaná ve fyziologickém roztoku intragastrickým způsobem podávání. Kontrolní skupině zvířat byl stejným způsobem podáván pouze fyziologický roztok. Po 10 týdnech byla zvířata anestezována a použita pro analýzu. Játra a ostatní orgány byly odebrány a umístěny do formalinu za účelem io histologického vyšetření.
2. Myši
Byli použiti samci inbredních myší C57 (Jackson Lab., Maine, USA), stáří 4 až 6 týdnů o hmot15 nosti 20 až 25 g. Byli krmeni tzv. westernovou dietou (Georgie et. al. Circulation 2000, 102:1822-27) obsahující 1,5 g/kg cholesterolu a 42 % tuku, 43 % uhlovodíků a 15 % proteinů (jako % z celkové kalorické hodnoty). Polovině zvířat bylo navíc podáváno intragastrickým způsobem 150 mg/kg/den kyseliny 3p-arachidylamido-7a, 12a dihydroxy-5p choIan-24-ové suspendované ve fyziologickém roztoku. Druhé polovině pokusných zvířat byl podáván pouze fyziologický roztok. Po 4 týdnech byla zvířata anestezována a použita pro analýzu. Byla odebrána játra a ostatní orgány a umístěna do formalinu za účelem histologického vyšetření.
Počet zvířat v každé skupině a histologické výsledky jsou uvedeny v následující tabulce 2:
Tabulka 2: Výsledky testu ztučnělých jater u zvířat:
Zvířata Dieta Trvání (týdny) n kontrola (výsledek) 0 1 2 3 4 průměr n +BAFAC (výsledek) 0 1 2 3 4 prům
křečci (zlatí syrští) lithogenní 1 10 7 7 4a 7 6 1 0,28
myši,inbred. C57 J/L westernová 4 10 136 1,5b 14 12 1 1 0,35
n - počet zvířat a - mikrovezikulámí tuk b - směs (mikro a makrovezikulární) tuk
Údaje v tabulce 2 ukazují, že konjugáty BAFAC II snižují a/nebo zabraňují ztučnění jater.
Příklad 3
Byl sledován vliv konjugátů BAFAC II na postní koncentrace glukózy v krvi u tří živočišných 40 druhů: křečků, krys a myší. Zvířata byla chována při běžné dietě nebo při dietě s vysokým obsahem tuku (jak je upřesněno dále). V každé skupině polovina zvířat přijímala denní dávku
BAFAC II (150 mg/kg) dispergovanou v 0,5 ml fyziologického roztoku při krmení. Druhá polovina dostávala podobným způsobem při krmení pouze stejný objem fyziologického roztoku. Všechna zvířata byla chována při 12hodinovém cyklu střídání dne a noci při 22 °C po celou dobu trvání pokusu. Zvířata měla přístup k vodě podle chuti.
-5CZ 300489 B6
1. Křečci
Samci zlatých syrských křečků
Samci zlatého syrského křečka, stáří 4 týdny (90 až 100 g) byli krmení dietou cílenou na ztučnění jater obsahující cholesterol (1,0%), kyselinu palmitovou (1,2 %) máslo (6 %), sádlo (10 %) a kukuřičný olej (2,0 %) přidávané v hmotnostních procentech k jejich běžné dietě. Krevní glukóza byla měřena po usmrcení ve stavu půstu po 3 týdnech pokusu. Bylo zde 5 kontrolních a 5 testovaných zvířat.
2. Krysy
Samci wistarských krys, stáří 4 týdny (100 až 120 g) byli krmeni běžnou smíšenou dietou (žrádlem) nebo dietou s vysokým obsahem tuku obohacenou o sádlo (10 %), cholesterol (2,5%) a kyselinu cholovou (0,5 %), přičemž hodnoty jsou uvedeny v hmotnostních %. Krev a vzorky orgánů byly získány po jejich usmrcení (ve stavu hladovění) po 4 týdnech pokusu. Polovině zvířat v každé skupině bylo podáváno 150 mg/kg BAFAC II; druhá polovina dostávala stejný objem fyziologického roztoku. V kontrolních a testovaných skupinách byla po 7 krysách při normální dietě a 6 krysám v každé skupině byla podávána dieta s vysokým obsahem tuku.
U křečků a krys chovaných na dietě s vysokým obsahem tuku se vyvinula ztučněná játra (potvrzeno chemickým měřením jatemího tuku), vysoká postní koncentrace krevní glukózy a představované modely NIDDM - na inzulínu nezávislá diabetes mellitus.
3. Myši
Samci myší ICR, stáří 4 týdny (průměrná hmotnost 20 g) byli krmeni obvyklou dietou. První den pokusu jim bylo injekčně vpraveno intraperitoneálně do břišní dutiny 200 mg/kg streptozotocinu. (To vyvolalo poškození buněk ostrůvků pankreatu a simulovalo 1DDM - na inzulínu závislá diabetes mellitus). Postní koncentrace krevní glukózy byla získána ze zvířat usmrcených po 16 dnech pokusu. V pokusu byly 3 skupiny po 7 zvířatech v každé skupině. Kontrolní - pouze běžná dieta, zvířata ošetřená Streptozotocinem (Stz), kterým byl podáván intragastricky pouze fyziologický roztok a zvířata ošetřená streptozotocinem, kterým bylo podáváno intragastricky 150mg/kg/den BAFAC II. Při všech těchto studiích hyperglykémie byl použit konjugát BAFAC ΪΪ, který byl konjugátem kyseliny arachidonové a kyseliny cholové (na pozici 3) za použití amidové vazby (C-20 BAFAC ll, Aramchol).
Výsledky těchto tří studií ukazují obrázky 1 A, 1B a 1C. (RD - regular diet, tj. běžná dieta; FLD Fáty Liver Diet, tj. dieta s vysokým obsahem tuku, Stz - Streptozocin.)
Z obrázků je zřejmé, že doplnění diety BAFAC II značně snižuje koncentraci postní glukózy v krvi testovaných zvířat. Krevní glukóza se snížila jak u zvířat se ztučnělými játry (křečci a krysy) - představujících NIDDM, tak i u myší ošetřených Streptozocinem - představujících IDDM. Konjugáty BAFAC II neměly vliv na krevní glukózu krys při běžné dietě (bez hyperglykémie nebo ztučnění jater).
Příklad 4
Byly použity samci inbredních myší C57 J/L, stáří 4 týdny o průměrné hmotnosti 20 g (Jackson Lab. Maine, USA). Byli krmeni 5 týdnů lithogenní dietou s vysokým obsahem tuku zahrnující cholesterol (1,0 %), kyselinu cholovou (0,5 %), sádlo (10,0 %), máslo (6,0 %), kyselinu palmitovou (1,2 %) a kukuřičný olej (2,0 %) přidávaných v hmotnostních procentech k jejich normální dietě. Kromě toho byl zvířatům denně podáván intragastricky k jejich normální dietě buď konju-6CZ 300489 B6 gát BAFAC 11 (150 mg/kg) suspendovaný ve fyziologickém roztoku, nebo pouze stejný objem fyziologického roztoku. Konjugáty BAFAC II byly konjugáty kyseliny cholové (v poloze 3) buď s kyselinou palmitovou (C-l 6), nebo arachidonovou (C—20) nebo behenovou (C-22) za použití amidové vazby. Kontrolní zvířata (n=5) dostala fyziologický roztok, testovaná zvířata dostala buď C-l6 konjugát (n=5), C-20 konjugát (n=5), nebo C-22 konjugát (n_3). Po 5 týdnech a následném půstu přes noc byla zvířata anestezována za použití ketaminu, byla jim odebrána játra a poté byla předávkováním ketaminu usmrcena. Pak byly 0,5 gramové vzorky jater homogenizovány v 5 ml pufrovaného fyziologického roztoku. Z homogenátu byly extrahovány jatemí lipidy metodou podle Folcha za použití smési: chloroform : methanol (2:1, obj/obj.). Pak bylo ío extrahováno 0,5 ml homogenátu v 5 ml Folchova roztoku. Po odpaření rozpouštědla byly lipidy zváženy a několikrát znovu rozpuštěny a odpařeny až do konstantní hmotnosti. Proteiny byly kvantitativně určeny vjiném podílu homogenátu metodou podle Bradforda (Bradford Μ. M.,
Annal. Biochem. 1976, 72:248).
Byl vypočten poměr (mg/mg) lipidů a proteinů. Výsledky pro každou skupinu jsou uvedeny jako střední hodnoty (+ směrodatná odchylka).
Vypočtené hodnoty skupin byly:
Kontroly 7,9+/-2,32; C-16 BAFAC II 2,25+/-1,20; C-20 BAFAC II 1,44+/-1,18 a C-22 BAFAC II 3,00+/-1,08. Tyto výsledky jsou uvedeny na obrázku 2.
Údaje ukazují, že nárokované účinky se projevují u několika konjugátů, z nichž některé jsou téměř tak silné jako konjugát C-20 použitý v pokusech 1, 2, a 3.

Claims (4)

1. Použití konjugátu žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny s mastnou kyselinou (BAFAC) majícího obecný vzorec II
35 W-X-G (II), ve kterém G je zbytek žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny, který je popřípadě konjugován na pozici 24 s vhodnou aminokyselinou, W znamená jeden nebo dva zbytky mastných kyselin, které mají 14 až 22 atomů uhlíku, a X znamená vhodný vazebný člen nebo přímou C-C
40 vazbu mezi uvedeným zbytkem žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny a mastnou kyselinou či mastnými kyselinami, pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčbu syndromu ztučnělých jater.
2. Použití podle nároku 1, kde vazebným členem ve sloučenině obecného lije NH.
3. Použití podle kteréhokoli z nároků 1 a 2, kde mastná kyselina ve sloučenině obecného vzorce lije vybrána mezi behenylovou kyselinou, arachidylovou kyselinou a stearovou kyselinou.
4. Použití podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, kde sloučeninou obecného vzorce lije kyselina 350 J3-arachidylamido-7—α, 12a-dihydroxy-5 β—cholan-24—ová.
CZ20032710A 2001-04-17 2002-04-15 Farmaceutický prostredek obsahující konjugát žlucové kyseliny nebo soli žlucové kyseliny s mastnou kyselinou pro lécbu syndromu ztucnelých jater CZ300489B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IL142650A IL142650A (en) 1998-04-08 2001-04-17 Use of bile acid conjugates or bile salts and fatty acids or fatty acids in the preparation of pharmaceuticals for lowering cholesterol, for the treatment of fatty liver and for the treatment of hyperglycemia and diabetes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20032710A3 CZ20032710A3 (cs) 2004-04-14
CZ300489B6 true CZ300489B6 (cs) 2009-06-03

Family

ID=11075322

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2008296A CZ309042B6 (cs) 2001-04-17 2002-04-15 Použití konjugátu žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny s mastnou kyselinou nebo farmaceutického prostředku jej obsahujícího pro snížení cholesterolu a léčbu hyperglykémie a diabetu
CZ20032710A CZ300489B6 (cs) 2001-04-17 2002-04-15 Farmaceutický prostredek obsahující konjugát žlucové kyseliny nebo soli žlucové kyseliny s mastnou kyselinou pro lécbu syndromu ztucnelých jater

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2008296A CZ309042B6 (cs) 2001-04-17 2002-04-15 Použití konjugátu žlučové kyseliny nebo soli žlučové kyseliny s mastnou kyselinou nebo farmaceutického prostředku jej obsahujícího pro snížení cholesterolu a léčbu hyperglykémie a diabetu

Country Status (24)

Country Link
US (2) US7501403B2 (cs)
EP (2) EP1379254B1 (cs)
JP (1) JP4324706B2 (cs)
KR (1) KR100883080B1 (cs)
CN (1) CN1259918C (cs)
AT (2) ATE365044T1 (cs)
AU (2) AU2002307771B2 (cs)
BR (1) BR0208924A (cs)
CA (2) CA2703688C (cs)
CY (1) CY1106853T1 (cs)
CZ (2) CZ309042B6 (cs)
DE (2) DE60232559D1 (cs)
DK (2) DK1379254T3 (cs)
EA (1) EA007565B1 (cs)
ES (2) ES2328966T3 (cs)
HU (1) HU230548B1 (cs)
IL (1) IL142650A (cs)
MX (1) MXPA03009553A (cs)
NO (2) NO333910B1 (cs)
NZ (1) NZ528868A (cs)
PL (2) PL211438B1 (cs)
PT (2) PT1790346E (cs)
UA (1) UA78699C2 (cs)
WO (1) WO2002083147A1 (cs)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL142650A (en) 1998-04-08 2007-06-03 Galmed Int Ltd Use of bile acid conjugates or bile salts and fatty acids or fatty acids in the preparation of pharmaceuticals for lowering cholesterol, for the treatment of fatty liver and for the treatment of hyperglycemia and diabetes
US8975246B2 (en) 2001-04-17 2015-03-10 Galmed Research And Development Ltd. Bile acid or bile salt fatty acid conjugates
SI2182954T1 (sl) * 2007-07-25 2019-04-30 Medizinische Universitat Graz Uporaba nor-žolčnih kislin pri zdravljenju arterioskleroze
RS56054B1 (sr) * 2009-01-12 2017-09-29 Biokier Inc Smeša i metod za lečenje dijabetesa
US9006288B2 (en) 2009-01-12 2015-04-14 Biokier, Inc. Composition and method for treatment of diabetes
US9314444B2 (en) 2009-01-12 2016-04-19 Biokier, Inc. Composition and method for treatment of NASH
US20120157419A1 (en) 2009-02-02 2012-06-21 Tuvia Gilat Methods and compositions for treating alzheimer's disease
US20120202890A1 (en) 2011-02-08 2012-08-09 Nian Wu Polymer-carbohydrate-lipid conjugates
EP2844257A4 (en) * 2012-05-01 2016-06-01 Catabasis Pharmaceuticals Inc Fatty Acid Conjugates from Statin and FXR Agonists; COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
CN103571617A (zh) * 2012-07-26 2014-02-12 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 改进的动物油脂加工工艺
EP2925786B1 (en) 2012-11-29 2018-10-03 ST Pharm Co., Ltd. Bile acid oligomer conjugate for novel vesicular transport and use thereof
IL227890A0 (en) * 2013-08-08 2014-01-30 Galderm Therapeutics Ltd Antiaging compounds containing bile acid and fatty acid conjugates
WO2016199137A1 (en) * 2015-06-10 2016-12-15 Galmed Research And Development Ltd. Low dose compositions of aramchol salts
US11571431B2 (en) 2013-12-04 2023-02-07 Galmed Research And Development Ltd Aramchol salts
DK3077047T3 (da) * 2013-12-04 2019-07-15 Galmed Res & Development Ltd Aramcholsalte
WO2015186126A1 (en) * 2014-06-01 2015-12-10 Galmed Research And Development Ltd. Fatty acid bile acid conjugates for treatment of lipodystrophy
IL243707A0 (en) 2016-01-20 2016-05-01 Galmed Res And Dev Ltd Treatment to regulate the microbiota in the intestine
US11197870B2 (en) 2016-11-10 2021-12-14 Galmed Research And Development Ltd Treatment for hepatic fibrosis
CN116687850A (zh) 2022-02-24 2023-09-05 甘莱制药有限公司 包含环状膦酸酯化合物的药物组合物及其制备方法与用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3856953A (en) * 1973-05-15 1974-12-24 Intellectual Property Dev Corp Method of treating fatty liver
WO1999052932A1 (en) * 1998-04-08 1999-10-21 Galmed International Ltd. Fatty acid derivatives of bile acids and bile acid derivatives

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3859437A (en) * 1972-06-02 1975-01-07 Intellectual Property Dev Corp Reducing cholesterol levels
IT1167479B (it) * 1981-07-24 1987-05-13 Carlo Scolastico Derivati dell'acido chenodesossicolico
IT1167478B (it) * 1981-07-24 1987-05-13 Carlo Scolastico Derivati dell'acido ursodesossicolico
JPS6164701A (ja) * 1984-09-06 1986-04-03 Meito Sangyo Kk カチオン化デキストラン誘導体とポリウロン酸の高分子電解質錯体及びその利用
DE3930696A1 (de) * 1989-09-14 1991-03-28 Hoechst Ag Gallensaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung als arzneimittel
US5278320A (en) * 1992-09-11 1994-01-11 Merck & Co., Inc. Cholesterol lowering compounds produced by directed biosynthesis
DE4432708A1 (de) * 1994-09-14 1996-03-21 Hoechst Ag Modifizierte Gallensäuren, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
US20030153541A1 (en) * 1997-10-31 2003-08-14 Robert Dudley Novel anticholesterol compositions and method for using same
KR20010031501A (ko) * 1997-10-31 2001-04-16 추후제출 5-알파 환원효소 활성을 조절하는 방법 및 조성물
IL142650A (en) 1998-04-08 2007-06-03 Galmed Int Ltd Use of bile acid conjugates or bile salts and fatty acids or fatty acids in the preparation of pharmaceuticals for lowering cholesterol, for the treatment of fatty liver and for the treatment of hyperglycemia and diabetes
US6620821B2 (en) * 2000-06-15 2003-09-16 Bristol-Myers Squibb Company HMG-CoA reductase inhibitors and method
JP2006306800A (ja) * 2005-04-28 2006-11-09 Kirin Brewery Co Ltd ファルネソイドｘ受容体活性化剤

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3856953A (en) * 1973-05-15 1974-12-24 Intellectual Property Dev Corp Method of treating fatty liver
WO1999052932A1 (en) * 1998-04-08 1999-10-21 Galmed International Ltd. Fatty acid derivatives of bile acids and bile acid derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
UA78699C2 (en) 2007-04-25
PL366585A1 (en) 2005-02-07
EP1379254B1 (en) 2007-06-20
EA200301017A1 (ru) 2005-04-28
DK1379254T3 (da) 2007-10-15
KR20030092063A (ko) 2003-12-03
JP2004525962A (ja) 2004-08-26
CY1106853T1 (el) 2012-05-23
DE60220775D1 (de) 2007-08-02
US7501403B2 (en) 2009-03-10
CA2444266C (en) 2010-07-27
NO20131219L (no) 2003-11-28
EP1790346A2 (en) 2007-05-30
EA007565B1 (ru) 2006-12-29
MXPA03009553A (es) 2004-05-24
DE60220775T2 (de) 2008-03-06
CN1259918C (zh) 2006-06-21
CA2444266A1 (en) 2002-10-24
ES2289137T3 (es) 2008-02-01
KR100883080B1 (ko) 2009-02-10
CA2703688C (en) 2012-07-31
IL142650A0 (en) 2002-03-10
PL205057B1 (pl) 2010-03-31
AU2002307771B2 (en) 2006-10-19
IL142650A (en) 2007-06-03
PL211438B1 (pl) 2012-05-31
JP4324706B2 (ja) 2009-09-02
AU2007200191B2 (en) 2008-09-04
NO20034609L (no) 2003-11-28
EP1379254A1 (en) 2004-01-14
AU2007200191A1 (en) 2007-02-08
HUP0400801A3 (en) 2012-09-28
ATE432705T1 (de) 2009-06-15
CZ309042B6 (cs) 2021-12-22
CA2703688A1 (en) 2002-10-24
CZ2008296A3 (cs) 2004-04-14
ES2328966T3 (es) 2009-11-19
NO20034609D0 (no) 2003-10-15
US20090149537A1 (en) 2009-06-11
EP1790346A3 (en) 2007-08-22
NO335087B1 (no) 2014-09-08
HU230548B1 (hu) 2016-11-28
BR0208924A (pt) 2004-04-20
HUP0400801A2 (hu) 2004-08-30
DK1790346T3 (da) 2009-10-12
US8110564B2 (en) 2012-02-07
PT1790346E (pt) 2009-09-04
ATE365044T1 (de) 2007-07-15
WO2002083147A1 (en) 2002-10-24
NZ528868A (en) 2005-09-30
PT1379254E (pt) 2007-07-10
CN1529603A (zh) 2004-09-15
US20040121993A1 (en) 2004-06-24
CZ20032710A3 (cs) 2004-04-14
DE60232559D1 (de) 2009-07-16
EP1790346B1 (en) 2009-06-03
NO333910B1 (no) 2013-10-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8110564B2 (en) Bile acid or bile salt fatty acid conjugates
AU2002307771A1 (en) Use of bile acid or bile salt fatty acid conjugates
RU2165431C2 (ru) Способ выделения композиции фитостеролов, композиции, терапевтический продукт
US8975246B2 (en) Bile acid or bile salt fatty acid conjugates
US9884066B2 (en) Bile acid-basic amino acid conjugates and uses thereof
JP4958339B2 (ja) 脂質代謝改善剤
Hedemann et al. Distinct difference in absorption pattern in pigs of betaine provided as a supplement or present naturally in cereal dietary fiber
AU2008249537A1 (en) Use of bile acid or bile salt fatty acid conjugates
JP3179090B2 (ja) カルシウム吸収促進剤
MINAMINO et al. Undernutrition due to a low-protein diet affects iron, zinc, and copper metabolism
Leveille et al. Effect of dietary lithocholic acid on liver size of the chick
US6531462B2 (en) Medicament for treating obesity and improving lipid metabolism
WO2008013455A1 (en) Means and methods for preventing elevated blood glucose levels in humans with animal antibodies produced in milk
JP2023553438A (ja) 少なくとも１つのグリシン若しくはその誘導体及び／又は少なくとも１つのｎ－アセチルシステイン若しくはその誘導体と、少なくとも１つのチモール及び／又はカルバクロールと、を使用する組成物及び方法
JP2017533176A (ja) ジヒドロコレステロールの使用

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20220415