CZ298613B6 - Vakcína pro kocky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kocicí leukémie - Google Patents

Vakcína pro kocky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kocicí leukémie Download PDF

Info

Publication number
CZ298613B6
CZ298613B6 CZ0015999A CZ15999A CZ298613B6 CZ 298613 B6 CZ298613 B6 CZ 298613B6 CZ 0015999 A CZ0015999 A CZ 0015999A CZ 15999 A CZ15999 A CZ 15999A CZ 298613 B6 CZ298613 B6 CZ 298613B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
vaccine
plasmid
promoter
seq
cat
Prior art date
Application number
CZ0015999A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ15999A3 (cs
Inventor
Audonnet@Jean-Christophe
Bouchardon@Annabelle
Baudu@Philippe
Riviere@Michel
Original Assignee
Merial
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merial filed Critical Merial
Publication of CZ15999A3 publication Critical patent/CZ15999A3/cs
Publication of CZ298613B6 publication Critical patent/CZ298613B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/13011—Gammaretrovirus, e.g. murine leukeamia virus
    • C12N2740/13022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/13011—Gammaretrovirus, e.g. murine leukeamia virus
    • C12N2740/13034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20211—Vesiculovirus, e.g. vesicular stomatitis Indiana virus
    • C12N2760/20222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20211—Vesiculovirus, e.g. vesicular stomatitis Indiana virus
    • C12N2760/20234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/16011—Caliciviridae
    • C12N2770/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Rešení poskytuje vakcínu pro kocky, která obsahuje plazmid exprimující in vivo jednu nebo nekolik nukleových kyselin kódujících env a/nebo gag/pol viru kocicí leukémie a vhodné pomocné látky. Dále poskytuje ockovací soupravu pro kocky, která obsahuje spolecne vakcínu podle vynálezu a další vakcínu pro kocky.

Description

(54) Název vynálezu:
Vakcína pro kočky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kočičí leukémie (57) Anotace:
Řešení poskytuje vakcínu pro kočky, která obsahuje plazmid exprimující in vivo jednu nebo několik nukleových kyselin kódujících env a/nebo gag/pol viru kočičí leukémie a vhodné pomocné látky. Dále poskytuje očkovací soupravu pro kočky, která obsahuje společně vakcínu podle vynálezu a další vakcínu pro kočky.
CZ 2986Í3 B6
Vakcína pro kočky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kočičí leukémie
Oblast techniky
Vynález se týká vakcíny umožňující vakcinaci koček proti virové kočičí leukémii. Vynález se dále týká soupravy pro takovou vakcinaci.
Dosavadní stav techniky
V minulosti byly již navrženy sdružené vakcíny proti různým virům koček.
Sdružené vakcíny byly dosud uskutečňovány tak, že se vycházelo z neaktivních nebo ze živých vakcín a případně ze směsi takových vakcín. Jejich příprava představuje problémy s kompatibilitou mezi vakcínami a se stabilitou. Ve skutečnosti je třeba zajistit kompatibilitu mezi různými složkami vakcín, aby neobsahovala různé použité antigeny a formulace, zejména v případě, kde se kombinují inaktivní vakcíny a vakcíny živé. Dále jsou zde problémy a konzervací takových složených vakcín a také problém jejich neškodnosti, zejména v přítomnosti adjuvans. Tyto vakcí20 ny jsou obecně dosti nákladné.
Přihlášky vynálezu WO-A-90 11092, WO-A-93 19183, WO-A-94 21797 a WO-A-95 20660 používají dříve vyvinuté techniky polynukleotidových vakcín. Je známo, že tyto vakcíny užívají plazmidové konstrukty pro expresi antigenu uloženého v plazmidu v buňkách hostitele. Byly navrženy všechny způsoby podávání (intraperitoneální, intravenózní, intramuskulámí, transkutánní, intradermální, mukózní atd.). Mohou být rovněž použity různé prostředky vakcinace, jako nanesení DNA na povrch částeček zlata a nastřelování tak, aby pronikly pokožkou zvířete (Tang a kol., Nátuře 356, 152-154, 1992) a injekční stříkačky na proud kapaliny umožňující proniknutí do pokožky, svalu, tukových tkání a tkání prsu (Furth a kol., Analytical Biochemistry, 205, 36530 3 68, 1992).
V polynukleotidových vakcínách se mohou užívat holé DNA nebo DNA vázané na liposomy nebo kationtové lipidy.
Cílem vynálezu bylo vytvořit formulace vícesložkové vakcíny umožňující zajištění vakcinace proti některým virovým chorobám koček.
Dalším cílem vynálezu je vytvořit takovou formulaci vakcíny sdružující různé složky zachovávající všechna požadovaná kritéria snášenlivosti mezi jejími složkami a jejich stability.
Dalším cílem vynálezu je vytvořit formulaci vakcíny umožňující sdružit různé složky v témže nosiči.
Dalším cílem vynálezu je vytvořit takovou vakcínu, jejíž výroba by byla jednoduchá a levná.
Dále se vynález týká způsobu vakcinace koček, který umožňuje významné zvýšení účinnosti vakcíny a je neškodný.
Podstata vynálezu
Předložený vynález poskytuje vakcínu určenou pro kočky, která obsahuje plazmid obsahující a exprimující in vivo jednu nebo několik nukleových kyselin kódujících env a/nebo gag/pol viru kočičí leukémie (FeLV) a vhodné pomocné látky.
-1 CZ 298613 B6
Výraz „složka“ použitý v této přihlášce vynálezu značí alespoň jeden antigen zajišťující ochranu proti určitému viru patogenu, přičemž složka může obsahovat jako podsložky jeden nebo několik genů přirozených nebo modifikovaných určitého patogenu.
Výraz „gen“ patogenního činidla značí nejen úplný gen, nýbrž také různé sekvence nukleotidů včetně fragmentů se zachovanou schopností indukce ochranné odpovědi. Pojem genu obsahuje sekvence nukleotidů ekvivalentní těm, které jsou přesně popsány v příkladech, to znamená různé sekvence, avšak kódující stejný protein. Zahrnuje také sekvence nukleotidů jiných kmenů daného patogenu, zajišťující zkříženou ochranu nebo specifickou ochranu kmene nebo skupin kmenu.
Zahrnuje ještě sekvence nukleotidů, které byly modifikovány pro usnadnění exprese in vivo hostitelským zvířetem, avšak kódující tentýž protein.
Různé složky jsou obsaženy ve vakcinační formulaci podle vynálezu v terapeuticky účinném množství.
Vakcína v provedení podle předloženého vynálezu obsahuje geny env a gag/pro viru leukémie koček ve stejném plazmidu nebo v různých plazmidech nebo samotný gen env.
Podle dalšího výhodného provedení předloženého vynálezu formulace vakcíny obsahuje oba geny env a gag/pro v různých plazmidech nebo v témže plazmidu nebo v jediném z těchto genů.
Podle dalšího výhodného provedení předloženého vynálezu formulace vakcíny obsahuje 10 ng až 1 mg, přednostně 100 ng až 500 pm a s výhodou 1 pg až 250 pg každého plazmidu.
Vynález dále poskytuje použití jednoho nebo několika výše zmíněných plazmidů pro výrobu vakcíny určené kvakcinaci koček primárně vakcinovaných první vakcínou zvolenou ze skupiny obsahující celou živou vakcínu, celou inaktivovanou vakcínu, podjednotkovou vakcínu, rekombinantní vakcínu, přičemž tato první vakcína představuje antigen nebo antigeny kódované plazmidem nebo plazmidy nebo antigeny zajišťující zkříženou ochranu.
Vynález dále poskytuje soupravu obsahující vakcínu pro kočky seskupující formulace vakcíny zvolenou ze skupiny obsahující celou živou vakcínu, celou inaktivovanou vakcínu, podjednotkovou vakcínu, rekombinantní vakcínu, přičemž první vakcína představuje antigen kódovaný polynukleotidovou vakcínou nebo antigen zajišťující zkříženou ochranu pro podávání druhé vakcíny v primární vakcinaci a pro revakcinaci a formulací vakcíny.
Vynález se dále týká vakcíny definované výše doplněné poznámkou oznamující, že tato formulace je použitelná pro vyvolání první vakcíny pro kočky zvolenou ze skupiny obsahující celou živou vakcínu, celou inaktivovanou vakcínu, podjednotkovou vakcínu, rekombinantní vakcínu, přičemž tato první vakcína představuje antigen kódovaný polynukleotidovou vakcínou nebo antigen zajišťující zkříženou ochranu.
Následující obrázky, sekvence a příklady slouží k ilustraci a lepšímu pochopení předloženého vynálezu. Jen část z nich bezprostředně dokládá předmět, pro který je požadována patentová ochrana. Odborník rozpozná, že ostatní mají funkci doplňkovou a ilustrační.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 Plazmid pVR1012 Obr. 2 Plazmid pPB 179 Obr. 3 Sekvence genu env FeLV-B Obr. 4 Plazmid pPB180
-2CZ 298613 B6
Obr. 5 Sekvence gag/pol viru FeLV-A kmene Glasgow-1
Obr. 6 Plazmid pPB181
Obr. 7 Plazmid pAB009
Obr. 8 Plazmid pAB053
Obr. 9 Plazmid pAB052
Obr. 10 Plazmid pAB056
Obr. 11 Plazmid pAB02S
Obr. 12 Plazmid pAB029
Obr. 13 Plazmid pABO 10
Obr. 14 Plazmid pAB030
Obr. 15 Plazmid pAB083
Obr. 16 Plazmid pAB041
Seznam sekvencí SEQ ID č.
SEQIDČ.l SEQ ID Č.2 SEQ ID Č.3 SEQ ID č.4 SEQ ID Č.5 SEQ ID č.6 SEQ ID Č.7 SEQ ID č.8 SEQ ID č.9 SEQ ID č. 10 SEQ IDč.ll SEQ IDč.12 SEQ IDč.13 SEQ IDč.14 SEQIDČ.l 5 SEQIDČ.l 6 SEQIDČ.l 7 SEQIDČ.l 8 SEQIDČ.l 9 SEQ ID č.20 SEQ ID č.21 SEQ ID Č.22 SEQ ID Č.23 SEQ ID č.24
Oligonukleotid PB247
Oligonukleotid PB249
Oligonukleotid PB281
Oligonukleotid PB282
Sekvence genu env viru FeLV-B
Oligonukleotid PB283
Oligonukleotid PB284
Sekvence genu gag/pol viru FeLV-A (Glasgow-1)
Oligonukleotid AB021
Oligonukleotid AB024
Oligonukleotid AB103
Oligonukleotid AB112
Oligonukleotid AB113
Oligonukleotid AB 104
Oligonukleotid AB 101
Oligonukleotid AB 102
Oligonukleotid AB106
Oligonukleotid AB 107
Oligonukleotid AB061
Oligonukleotid AB064
Oligonukleotid AB065
Oligonukleotid AB066
Oligonukleotid AB025
Oligonukleotid AB026
-3CZ 298613 B6
SEQ ID č.25 SEQ ID č.26 SEQ ID č.27 SEQ ID č.28 SEQ ID č.29 SEQ ID č.30
Oligonukleotid AB067 Oligonukleotid AB070 Oligonukleotid AB154 Oligonukleotid AB155 Oligonukleotid AB011 Oligonukleotid AB012
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: Kultivace viru
Viry se kultivují na vhodném buněčném systému až po dosažení cytopatického efektu. Buněčné systémy použitelné pro určitý virus jsou odborníkům dobře známé. Buňky citlivé na použitý virus, kultivované v minimálním esenciálním médiu podle Eagleho (médium „MEM“) nebo v jiném vhodném médiu jsou naočkovány vyšetřovaným virovým kmenem při multiplicitě infekce 1. Infikované buňky jsou potom inkubovány při 37 °C po dobu nutnou pro objevení úplného cytopatického efektu (průměrně za 36 hodin).
Příklad 2: Extrakce virové genomové DNA
Po kultivaci jsou supematanty a lyžované buňky sklizeny a celková virová suspenze se centrifu25 gují při 1000 g po dobu 10 minut a při teplotě +4 °C pro eliminaci buněčného odpadu. Virové částice jsou potom sklizeny ultracentrifugací při 400 000 g po dobu 1 hodiny a při teplotě +4 °C. Sediment je resuspendován v minimálním objemu pufru (Tris 10 mM, EDTA 1 mM). Tato koncentrovaná virová suspenze se zpracuje proteinázou K (konečných 100pg/ml) za přítomnosti dodecylsulfátu sodného (SDS) (0,5 x konečných) po dobu 2 hodin při teplotě 37 °C. Virová DNA se potom extrahuje směsí fenolu a chloroformu, potom se vysráží se 2 objemy absolutního ethanolu. Po stání přes noc při 20 °C se DNA centrifuguje při 10 000 g po dobu 15 minut při teplotě +4 °C. Sediment DNA se usuší, potom se rozpustí v minimálním objemu ultračisté sterilní vody. Potom může být DNA štěpena restrikčními enzymy.
Příklad 3: Izolace virové genomové RNA
RNA viry byly vyčištěny technikami dobře známými odborníkům. Virová genomová RNA každého viru byla potom izolována pomocí metody užívající „guanidiumthiokyanát/fenolchloro40 form“ popsané autorem P. Chomczynski aN. Sacchi (Anal. Biochem. 1987, 162, 156-159).
Příklad 4: Techniky molekulární biologie
Všechny konstrukce plazmidů byly realizovány použitím standardních technik molekulární biologie popsaných autory Sambrook a kol. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2. vydání. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York, 1989). Všechny restrikční fragmenty použité pro předložený vynález byly izolovány použitím soupravy „Geneclean“ (ΒΙΘ101 lne. LaJolla, CA).
-4CZ 298613 B6
Příklad 5: Technika RT-PCR
Specifické oligonukleotidy (obsahující na svých koncích restrikční místa pro usnadnění klonová5 ní namnožených fragmentů) byly syntetizovány tak, že úplné pokrývají kódující oblasti genů, které mají být amplifikovány (viz specifické příklady). Reakce reverzního přepisu (RT) a amplifikace v řetězové polymerázové reakci (PCR) byly provedeny standardní technikou (Sambrook J. a kol. 1989). Každá reakce RT-PCR byla provedena s dvojicí specifických amplimerů, přičemž jako matrice byla použita extrahovaná virová genomová RNA. Amplifikovaná komplementární
DNA byla extrahována směsí fenolu, chloroformu a isoamylalkoholu (25:24:1) než byla rozštěpena restrikčními enzymy.
Příklad 6: Plazmid pVR1012
Plazmid pVR1012 (obr. 1) byl získán od společnosti Vical lne. San Diego, CA, USA. Jeho konstrukci popsali autoři J. Hartikka a kol. (Human Gene Therapy, 1996,7, 1205-1217).
Příklad 7: Konstrukce plazmidu pPB179 (gen ENV viru FeLV-A)
Reakce RT-PCR technikou podle příkladu 5 byla provedena s genomovou RNA viru leukémie koček (FeLV-A) (kmen Glasgow-1) (N. Stewart a kol. J. Virol, 1986, 58, 825-834), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
PB247 (29 mer) (SEQ ID č. 1)
5'TTTGTCGACCATGGAAAGTCCAACGCACC 3'
PB249 (28 mer) (SEQ ID č. 2)
5'TTTGGATCCTCATGGTCGGTCCGGATCG 3’ pro amplifikací fragmentu 1943 bp obsahujícího gen kódující glykoprotein env viru FeLV-A (kmen Glasgow-1) ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR rozště30 pen Sáli a BamHI pro izolaci fragmentu Sall-BamHI o velikosti 1935 bp. Fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6) předtím rozštěpeného Sáli a BamHI, čímž byl získán plazmid pPB179 (6804 bp) (obr. 2).
Příklad 8: Konstrukce plazmidu pPB180 (gen ENV viru FeLV-B)
Reakce RT-PCR technikou podle příkladu 5 byla provedena a genomovou RNA viru leukémie koček (podtyp FeLV-B), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
PB281 (29 mer) (SEQ ID č. 3) ’ TTTGTCGACATGGAAGGTCCAACGCAOOO 3'
PB282 (32 mer) (SEQ ID č. 4) Λη 5'TTGGATCCTCATGGTCGGTCCGGATCATATTG 3' pro amplifikací fragmentu 2005 bp obsahujícího gen kódující glykoprotein env viru FeLV-B (obr. 3 a SEQ ID ě. 5) ve formě fragmentu Sáli a BamHI pro získání fragmentu SalI-BamHI o velikosti 1995 bp. Tento fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozště45 pěného Sáli a BamHI, čímž byl získán plazmid pPB180 (6863 bp) (obr. 4).
-5CZ 298613 B6
Příklad 9: Konstrukce plazmidu pPB181 (gen FeLV gag/pol)
Reakce RT-PCR technikou podle příkladu 5 byla provedena a genomovou RNA viru leukémie koček (podtyp FeLV-A) (kmen Glasgow-1), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
PB283 (33 mer) (SEQ ID č. 6)
5’TTGTCGACATGTCTGGAGCCTCTAGTGGGACAG 3'
PB284 (40 mer) (SEQ ID č. 7)
5'TTGGATCCTTATTTAATTACTGCAGTTCCAAGGAACTCTC 3' pro amplifikaci fragmentu 3049 bp obsahujícího sekvenci kódující protein gag a část 5' sekvence kódující protein pol viru FeLV-A (kmen Glasgow-1) (obr. 5 a SEQ ID č. 8) ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR rozštěpen Sáli a BamHI pro získání fragmentu Sall-BamHI 3039 bp. Fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6) předtím rozštěpeného Sáli a BamHI, čímž byl získán plazmid pPB181 (7908 bp) (obr. 6).
Příklad 10: Konstrukce plazmidu pAB009 (gen FPV VP2)
Reakce PCR byla provedena s genomovou DNA viru panleukopenie koček (kmen 193) (J. Nar20 tyn a kol. J. Gen. Virol. 1990, 71,2747-2752), připravenou technikou podle příkladu 2 a s těmito oligonukleotidy:
AB021 (34 mer) (SEQ ID č. 9)
5'TGCTCTAGAGCAATGAGTGATGGAGCAGTTCAAC 3’
AB024 (33 mer) (SEQ ID č. 10)
5'CGCGGATCCATTAATATAATTTTCTAGGTGCTA 3’ pro amplifikaci fragmentu 1776 bp obsahujícího gen kódující protein kapsidu VP2 FPV. Po vyčištění byl produkt PCR rozštěpen Xbal a BamHI pro získání fragmentu Xbal-BamHI o velikosti 1764 bp. Tento fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Xbal a BamHI, čímž byl získán plazmid pAB009 (6664 bp) (obr. 7).
Příklad 11: Konstrukce plazmidu pAB053 (gen FIPV S)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru peritonické infekce koček (PIF) (kmen 79-1146) (R. de Groot a kol. J. Gen. Virol. 1987, 68, 263935 2646), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB103 (38 mer) (SEQ ID č. 11)
5’ATAAGAATGCGGCCGCATGATTGTGCTCGTAACTTGCC 3’
AB112 (25 mer) (SEQ ID č. 12)
5'CGTACATGTGGAATTCCACTGGTTG 3’ po amplifikaci sekvence části 5' genu kódujícího glykoprotein S viru ve formě fragmentu NotlEcoRI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR 492 bp rozštěpen Notl a EcoRl pro uvolnění fragmentu
-6CZ 298613 B6
Notl-EcoRI o velikosti 467 bp (fragment A). Plazmid pJCA089 (přihláška vynálezu PCT/FR95/101128) byl rozštěpen EcoRI a Spěl pro uvolnění fragmentu 3378 bp obsahujícího střední část genu kódujícího modifikovaný glykoprotein S viru PIF (fragment B).
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru PIF (kmen 79-1146), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB113 (25 mer) (SEQ ID č. 13)
5’AGAGTTGCAACTAGTTCTGATTTTG 3’
AB104 (37 mer) (SEQ ID č. 14)
5'ATAAGAATGCGGCCGCTTAGTGGACATGCACTTTTTC 3' ío pro amplifikaci sekvence části 3' genu kódujícího glykoprotein S viru PIF ve formě fragmentu Spel-Notl. Po vyčištění byl produkt RT-PCR o velikosti 543 bp rozštěpen Spěl a Notl pro uvolnění fragmentu Spel-Notl o velikosti 519 bp (fragment C). Fragmenty A, B a C byly potom společně ligovány vektorem pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Notl pro získání plazmidu pAB053 (9282 bp), který obsahuje gen S modifikovaný v dobré orientaci vzhledem k promotoru (obr. 8).
Příklad 12: Konstrukce plazmidu pAB052 (gen FIPV M)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru peritoneální infekce koček (PIF) (kmen 79-1146) (H. Venneme a kol. Virology, 1191, 181, 327335), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB101 (37 mer) (SEQ ID č. 15) ' ACGCGTCGACCCACCATGAAGTACATTTTGCTAATAC 3 '
AB102 (36 mer) (SEQ ID č. 16)
5’CGCGGATCCTTACACCATATGTAATAATTTTTCATG 3’ pro přesnou izolaci genu kódujícího glykoprotein N viru PIF ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR o velikostí 812 bp rozštěpen Sáli a BamHI pro uvolnění fragmentu SalI-BamHI o velikosti 399 bp. Tento fragment byl potom ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Sáli a BamHI pro získání plazmidu pAB052 (5668 bp) (obr. 9).
Příklad 13: Konstrukce plazmidu pAB056 (gen FIPV N)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru perito35 neální infekce koček (PIF) (kmen 79-1146) (Vennema a kol. Virology, 181, 323-335), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB106 (35 mer) (SEQ ID č. 17)
5’ ACGCGTCGACGCCATGGCCACACAGGGACAACGCG 3’
AB107 (36 mer) (SEQ ID C. 18)
5’CGCGGATCCTTAGTTCGTAACCTCATCAATCATCTC 3’
-7CZ 298613 B6 pro přesnou izolaci genu kódujícího protein N viru PIF ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR o velikosti 1156 bp rozštěpen Sáli a BamHI pro uvolnění fragmentu SalI-BamHI o velikosti 799 byl potom ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Sáli a BamHI, čímž byl získán plazmid pAB056 (6011 bp) (obr. 10).
Příklad 14: Konstrukce plazmidu pAB028 (gen FHV gB)
Reakce PCR byla provedena s genomovou DNA herpesviru koček (FHV-1) (kmen C27) ío (S. Spetz a kol. Virology, 1993, 197, 125-136), připravenou technikou podle příkladu 2 a s těmito oligonukleotidy:
AB061 (36 mer) (SEQ ID č. 19)
5'AAAACTGCAGAATCATGTCCACTCGTGGCGATCTTG 3'
AB064 (40 mer) (SEQ ID č. 20) ’ ATAAGAATGCGGCCGCTTAGACAAGATTTGTTTCAGTATC 3 ' pro amplifikaci fragmentu 2856 bp obsahujícího gen kódující glykoprotein gB viru FHV-1 ve formě fragmentu Pstl-Notl. Po vyčištění byl produkt PCR rozštěpen Pstl a Notl pro získání fragmentu Pstl-Notl o velikosti 2823 bp. Tento fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Pstl a Notl, čímž byl získán plazmidu pAB028 (7720 bp) (obr. 11).
Příklad 15: Konstrukce plazmidu pAB029 (gen FHV gD)
Reakce PCR byla provedena s genomovou DNA herpesviru koček (FHV-1) (kmen C-27) (S. Spatz a kol. J. Gen. Virol. 1994, 75, 1235-1244), připravenou technikou podle příkladu 2 as těmito oligonukleotidy:
AB065 (36 mer) (SEQ ID č. 21)
5'AAAACTGCAGCCAAGATGACACGTCTACATTTTT 3’
AB066 (33 mer) (SEQ ID č. 22)
5’GGAAGATCTTTAAGGATGGTGAGTTGTATGTAT 3’ pro amplifikaci genu kódujícího glykoprotein gD viru FHV-1 ve formě fragmentu Pstl-BglII. 30 Po vyčištění byl produkt PCR 1147 rozštěpen Pstl a BglII pro izolaci fragmentu Pstl-BglII o velikosti 1129 bp. Fragment byl potom ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Pstl a BglII, čímž byl získán plazmid pAB029 (5982 bp) (obr. 12).
Příklad 16: Konstrukce plazmidu pABOlO (gen FCV C)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA kaliciviru koček (FCV) (kmen F9) (M. Carter a kol. Virology, 1192, 190, 443—448), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
-8CZ 298613 B6
ΆΒ025 (33 mer) SEQ ID č. 23)
5’ACGCGTCGACGCATGTGCTCAACCTGCGCTAAC 3·
AB026 (31 mer) (SEQ ID č. 24)
5’CGCGGATCCTCATAACTTAGTCATGGGACTC 3' pro izolaci genu kódujícího kapsidový protein viru FCV ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR 2042 bp rozštěpen Sáli a BamHI pro izolaci fragmentu Sall5 BamHI o velikosti 2029 bp. Fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Sáli a BamHI, čímž byl získán plazmid pABOlO (6892 bp) (obr. 13).
Příklad 17: Konstrukce plazmidu pAB030 (gen FIV env)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru imunodeficience koček (FIV) (kmen Petaluma) (R. Olmsted a kol. Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 1989, 86, 8088-8096), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB067 (36 mer) (SEQ ID č. 25) · AAAACTGCAGAAGGAATGGCAGAAGGATTTGCAGCC 3 '
AB070 (36 mer) (SEQ ID č. 26) 15 5'CGCGGATCCTCATTCCTCCCTTTTTCAGACATGCC 3' pro amplifikaci fragmentu 2592 bp obsahujícího gen kódující glykoprotein env viru FIV (kmen Petaluma) ve formě fragmentu Pstl-BamHI. Po vyčištění byl produkt RT-PCR rozštěpen Pstl a BamHI pro získání fragmentu Pstl-BamHI 2575 bp. Tento fragment byl ligován do vektoru pV1012 (příklad 6) předtím rozštěpeného Pstl a BamHI, čímž byl získán plazmid pAB030 (7436) (obr. 14).
Příklad 18: Konstrukce plazmidu pAB083 (gen FIV gag/pro)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru imunodeficience koček (FIV) (kmen Petaluma) (R. Olmsted a kol. Proč. Nati. Acad. Sci. USA. 1989, 86, 80888-8096), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB154 (32 mer) (SEQ ID č. 27)
5’ACGCGTCGACATGGGGAATGGACAGGGGCGAG 3'
AB155 (33 mer) (SEQ ID č. 28) 30 5’TGAAGATCTTCACTCATCCCCTTCAGGAAGAGC 3’ pro amplifikaci fragmentu 4638 bp obsahujícího gen kódující proteiny Gag a Pro viru FIV (kmen Petaluma) ve formě fragmentu Sáli—BglII. Po vyčištění byl produkt RT-PCR rozštěpen Sáli a BglII pro získání fragmentu Sáli—BglII o velikosti 4622 bp. Tento fragment byl ligován do vek35 toru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Sáli a BglII, čímž byl získán plazmid pAB083 (7436 bp) (obr. 15).
-9CZ 298613 B6
Příklad 19: Konstrukce plazmidu pAB041 (gen G viru vztekliny)
Reakce RT-PCR byla provedena technikou podle příkladu 5 a s genomovou RNA viru vztekliny (kmen ERA) (A. Anilionia a kol. Nátuře. 1981, 294, 275-278), připravenou technikou podle příkladu 3 a s těmito oligonukleotidy:
AB011 (33 mer) (SEQ ID č. 29)
5’AAAACTGCAGAGATGGTTCCTCAGGCTCTCCTG 3’
AB012 (34 mer) (SEQ ID č. 30)
5'AAAACTGCAGAGATGGTTCCTCAGGCTCTCCTG 3· ío pro amplifikaci fragmentu 1589 bp obsahujícího gen kódující glykoprotein G viru vztekliny. Po vyčištění byl produkt RT-PCR rozštěpen Pstl a BamHI pro získání fragmentu Pstl-BamHl o velikosti 1578 bp. Tento fragment byl ligován do vektoru pVR1012 (příklad 6), předtím rozštěpeného Pstl a BamHI, čímž byl získán plazmid pAB041 (6437 bp) (obr. 16).
Příklad 20: Příprava a čištění plazmidů
Pro přípravu plazmidů určených pro vakcinaci zvířat je možno použít všechny techniky umožňující získat suspenzi plazmidů vyčištěných převážně ve formě nadšroubovic. Tyto techniky jsou odborníkům dobře známé. Lze uvést zejména techniku alkalické lyže následovanou dvěma po sobě jdoucími ultracentrifugacemi na gradientu chloridu česného za přítomnosti etidiumbromidu, jak popisuje např. J. Sambrook a kol. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2. vydání. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York, 1989). Rovněž je možno odkázat na PCT přihlášky vynálezu WO 95/21250 a WO 96/02658, které popisují způsob průmyslové výro25 by plazmidů použitelných pro vakcinaci. Pro potřebu výroby vakcín (viz příklad 17), se vyčištěné plazmidy resuspendují tak, aby se získal roztok s vysokou koncentrací (>2 mg/ml) způsobilý ke skladování. Pro tento úhel se plazmidy resuspendují buď v ultračisté vodě, nebo v pufru TE (Tris-HCl 10 mM, EDTA 1 mM, pH 8,0).
Příklad 21: Průmyslová výroba sdružených vakcín
Různé plazmidy nutné pro průmyslovou výrobu sdružené vakcíny se smíchají při použití jejich koncentrovaných roztoků (příklad 16). Směsi jsou vytvořeny takovým způsobem, aby konečná koncentrace každého plazmidu odpovídala účinné dávce každého plazmidu. Roztoky použitelné pro nastavení konečné koncentrace vakcíny mohou být buď roztok 0,9% NaCl, nebo pufr PBS. Zvláštní formulace, jako liposomy a kationtové lipidy, mohou být také použity pro výrobu vakcín.
Příklad 22: Vakcinace koček
Kočky se vakcinují dávkami 10 pg, 50 pg nebo 250 pg pro jeden plazmid. Injekce se podávají intramuskulámím způsobem. V těchto případech se dávky vakcíny podávají v objemu 1 ml.
Injekce také mohou být podávány intradermálním způsobem. V takovém případě se dávky vakcíny podávají v celkovém objemu 1 ml podávaném v 10 dílcích dávkách po 0,1 ml nebo ve 20 dávkách po 0,05 ml. Intradermální podávání jsou prováděna po vyholení kůže (ze strany hrudníku) nebo na některé poměrně holé anatomické oblasti, například vnitřní strana stehna.
Je také možné použít injekční přístroj pro proud kapaliny (bez jehly) pro intradermální injekce.
-10CZ 298613 B6
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (11)

  1. 5 1. Vakcína pro kočky, vyznačující se tím, že obsahuje plazmid obsahující a exprimující in vivo jednu nebo několik nukleových kyselin kódujících env a/nebo gag/pol viru kočičí leukémie a vhodné pomocné látky.
  2. 2. Vakcína podle nároku 1, vyznačující se tím, že plazmid obsahuje a exprimuje ío in vivo nukleovou kyselinu kódující env.
  3. 3. Vakcína podle nároku 1, vyznačující se tím, že plazmid obsahuje a exprimuje in vivo nukleovou kyselinu kódující env a gag/pol.
    15
  4. 4. Vakcína podle nároku 1, vyznačující se tím, že plazmid obsahuje a exprimuje in vivo nukleovou kyselinu kódujících env, přičemž vakcína obsahuje ještě další plazmid obsahující a exprimující in vivo nukleovou kyselinu kódující gag/pol.
  5. 5. Vakcína podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že plazmid
    20 obsahuje promotor vybraný ze skupiny sestávající z: promotoru CMV-IE, časného SV40 promotoru, pozdního SV40 promotoru, LTR promotoru viru Rousova sarkomu a promotoru genu cytoskeletu.
  6. 6. Vakcína podle nároku 5, vyznačující se tím, že plazmid obsahuje promotor
    25 CMV-IE.
  7. 7. Vakcína podle nároku 5, vyznačující se tím, že promotor genu cytoskeletu je promotor desminu nebo promotor aktinu.
    30
  8. 8. Vakcína podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že obsahuje
    10 ng až 1 mg, výhodně 100 ng až 500 pg a výhodněji 1 pg až 250 pg každého plazmidu.
  9. 9. Použití jednoho nebo více plazmidů, které jsou popsány v kterémkoliv z nároků 1 až 7, pro výrobu vakcíny určené pro očkování kočky nejdříve očkované pomocí první vakcíny vybrané ze
    35 skupiny sestávající z živé úplné vakcíny, inaktivované úplné vakcíny, podjednotkové vakcíny a rekombinantní vakcíny, přičemž první vakcína má antigen či antigeny kódované plazmidem či plazmidy nebo antigen ěi antigeny poskytující zkříženou ochranu.
  10. 10. Očkovací souprava pro kočky, vyznačující se tím, že obsahuje společně vakcínu
    40 obsahující plazmid podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8 a další vakcínu pro kočky vybranou ze skupiny sestávající z živé úplné vakcíny, inaktivované úplné vakcíny, podjednotkové vakcíny a rekombinantní vakcíny, přičemž další vakcína má antigen kódovaný vakcínou obsahující plazmid nebo antigen poskytující zkříženou ochranu, a přičemž další vakcína je určena pro podání jako první dávka a vakcína obsahující plazmid jako posilovači dávka.
  11. 11. Použití jednoho nebo více plazmidů, které jsou popsány v kterémkoliv z nároků 1 až 7, pro výrobu vakcíny určené pro očkování kočky v kombinaci s inaktivovanou úplnou vakcínou, živou úplnou vakcínou, rekombinantní vakcínou nebo podjednotkovou vakcínou proti jiné nemoci koček.
    19 výkresů 55
    - 11 CZ 298613 B6
    Obr. 1
    - 12CZ 298613 B6
    Obr. 2
    - 13 CZ 298613 B6
CZ0015999A 1996-07-19 1997-07-15 Vakcína pro kocky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kocicí leukémie CZ298613B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609337A FR2751223B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique felin

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ15999A3 CZ15999A3 (cs) 1999-06-16
CZ298613B6 true CZ298613B6 (cs) 2007-11-21

Family

ID=9494449

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0015999A CZ298613B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-15 Vakcína pro kocky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kocicí leukémie
CZ20070505A CZ304126B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-15 Imunogenní kompozice obsahující nukleovou kyselinu kódující M protein viru infekcní peritonitidy kocek a vakcína a kombinovaný vakcinacní prípravek obsahující tuto imunogenní kompozici

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20070505A CZ304126B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-15 Imunogenní kompozice obsahující nukleovou kyselinu kódující M protein viru infekcní peritonitidy kocek a vakcína a kombinovaný vakcinacní prípravek obsahující tuto imunogenní kompozici

Country Status (16)

Country Link
US (2) US6348196B1 (cs)
EP (1) EP0934416B1 (cs)
JP (1) JP2001500112A (cs)
KR (1) KR100687509B1 (cs)
AR (1) AR007861A1 (cs)
AU (1) AU3699297A (cs)
BR (2) BR9715228B1 (cs)
CA (1) CA2261345C (cs)
CZ (2) CZ298613B6 (cs)
DE (1) DE69736185T2 (cs)
FR (1) FR2751223B1 (cs)
NZ (1) NZ333781A (cs)
PL (1) PL191551B1 (cs)
RU (1) RU2312676C2 (cs)
WO (1) WO1998003660A1 (cs)
ZA (1) ZA976286B (cs)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2223029A1 (en) 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
EP0863151A1 (en) * 1997-02-12 1998-09-09 Akzo Nobel N.V. "Canine parvovirus dna vaccines"
US6770282B1 (en) * 1998-10-23 2004-08-03 Heska Corporation Cationic lipid-mediated enhancement of nucleic acid immunization of cats
FR2794648B1 (fr) * 1999-06-10 2003-03-07 Merial Sas Vaccins adn pour animaux de compagnie et de sport
KR100768114B1 (ko) * 1999-06-10 2007-10-17 메리알 애완 동물 및 스포츠용 동물을 위한 ｄｎａ 백신
EP1074625A3 (en) * 1999-06-14 2002-01-02 Pfizer Products Inc. DNA vaccine against feline immunodeficiency virus
DE50010240D1 (de) * 1999-07-08 2005-06-09 Mologen Forschungs Entwicklung Impfstoff gegen infektionen mit lentiviren, wie dem felinen immunschwäche-virus der katze
FR2796396A1 (fr) * 1999-07-16 2001-01-19 Merial Sas Gene de calicivirus felin et vaccin recombine les incorporant
US6541458B1 (en) 1999-07-16 2003-04-01 Merial Feline calicivirus genes and vaccines in particular recombinant vaccines
FR2796397B1 (fr) * 1999-07-16 2006-09-01 Merial Sas Genes de calicivirus felin et vaccins notamment vaccins recombines
US7078388B2 (en) 2000-01-21 2006-07-18 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
FR2829498B1 (fr) * 2001-09-11 2003-11-28 Merial Sas Igf-1 comme adjuvant de vaccin felin, notamment contre les retrovirus felins
DE50304603D1 (de) * 2002-09-23 2006-09-21 Mologen Ag Impfstoff gegen infektionen mit onkoviren, wie dem felinen leukosevirus der katze
EP1606419A1 (en) 2003-03-18 2005-12-21 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
CA2545886A1 (en) 2003-11-13 2005-06-02 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of characterizing infectious bursal disease virus
US20050202484A1 (en) 2004-02-19 2005-09-15 The Governors Of The University Of Alberta Leptin promoter polymorphisms and uses thereof
ATE461710T1 (de) 2005-04-25 2010-04-15 Merial Ltd Nipah-virus-impfstoffe
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
EP3147296A1 (en) 2005-11-14 2017-03-29 Merial, Inc. Gene therapy for renal failure
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
UA100692C2 (ru) 2007-05-02 2013-01-25 Мериал Лимитед Днк-плазмиды, имеющие повышенную экспрессию и стабильность
CN102428099B (zh) 2009-04-03 2016-03-16 梅里亚有限公司 运载新城疫病毒的禽疫苗
MX344103B (es) 2010-08-31 2016-12-05 Merial Ltd Vacunas de virus herpes vectorizado con virus de enfermedad de newcastle.
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
EP2694677A2 (en) 2011-04-04 2014-02-12 Netherland Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
EP2694678A2 (en) 2011-04-04 2014-02-12 Netherland Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
WO2012145577A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Merial Limited Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
KR102007444B1 (ko) 2011-04-25 2019-08-06 어드밴스드 바이오사이언스 라보라토리즈, 인코포레이티드 절단형 hiv 피막 단백질(env), 이와 관련된 방법 및 조성물
CA2837375C (en) 2011-06-01 2019-07-16 Merial Limited Needle-free administration of prrsv vaccines
ES2626297T3 (es) 2011-08-12 2017-07-24 Merial, Inc. Preservación asistida por vacío de productos biológicos, en particular de vacunas
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
EP2968514A1 (en) 2013-03-12 2016-01-20 Merial, Inc. Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
MX2017005687A (es) 2014-11-03 2017-08-21 Merial Inc Metodos para usar formulaciones para vacuna con microagujas para elicitar en animales inmunidad protectora contra virus de la rabia.
RU2586504C1 (ru) * 2015-04-29 2016-06-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова" Набор синтетических олигонуклеотидных праймеров и способ его применения для индикации вирусов иммунодефицита и лейкемии кошек в клиническом материале методом мультиплексной полимеразной цепной реакции
EP3313864B1 (en) 2015-06-23 2021-07-28 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof
AU2016359838B2 (en) * 2015-11-24 2020-08-06 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Transient transfection method for retroviral production
EP3380604B1 (en) * 2015-11-24 2022-12-28 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Stable cell lines for retroviral production
CN112921122A (zh) * 2021-03-26 2021-06-08 广西大学 猫常见病毒多重pcr快速检测试剂盒及其引物组
CN112921123B (zh) * 2021-04-06 2022-11-04 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心） 快速检测猫杯状病毒的方法及检测用引物和试剂盒
CN115894716B (zh) * 2022-11-23 2024-02-09 华中农业大学 一种重组融合蛋白纳米颗粒及其制备方法
CN116121282B (zh) * 2023-01-10 2023-09-22 浙江大学 一种表达猫疱疹病毒蛋白的mRNA疫苗及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995020660A2 (en) * 1994-01-27 1995-08-03 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of dna transcription unit
WO1996006934A1 (fr) * 1994-08-29 1996-03-07 Rhone Merieux Vaccin de la peritonite infectieuse feline

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5631154A (en) * 1988-06-10 1997-05-20 Therion Biologics, Incorporated Self assembled, defective, non-self-propagating lentivirus particles
CA2020740A1 (en) * 1989-07-12 1991-01-13 Harry Vennema Antigenically active proteins/peptides, and feline infectious peritonitis virus (fipv)-vaccines
EP0484382B1 (en) * 1989-07-21 1995-03-08 The Upjohn Company Feline calicivirus capsid protein and nucleotide sequence
US5665362A (en) * 1990-09-25 1997-09-09 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Viral vaccines
JPH07504897A (ja) * 1992-02-18 1995-06-01 パーヘリオン　コーポレーション ネコ感染性腹膜炎ワクチンおよび調製方法
EP0662139A1 (en) * 1992-09-21 1995-07-12 Chiron Corporation Recombinant retroviral vector against felv and/or fiv
GB2316681B (en) * 1993-09-16 1998-04-15 Dimminaco Ag Sa Ltd Antigenically active proteins/polypeptides and coronavirus vaccines containing the same
US6348449B1 (en) * 1993-09-21 2002-02-19 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods of inducing mucosal immunity
TW377373B (en) * 1993-09-22 1999-12-21 Wyeth Corp Recombinant raccoon pox viruses and their use as an effective vaccine against feline infectious peritonitis virus disease
US5529780A (en) * 1994-03-30 1996-06-25 Virogenetics Corporation Nucleotide and amino acid sequences of canine herpesvirus gB and gC
ATE334216T1 (de) * 1994-04-29 2006-08-15 Pharmacia & Upjohn Co Llc Impstoff gegen felines immunodefizienz-virus

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995020660A2 (en) * 1994-01-27 1995-08-03 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of dna transcription unit
WO1996006934A1 (fr) * 1994-08-29 1996-03-07 Rhone Merieux Vaccin de la peritonite infectieuse feline

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Wardley, R.C. et al.: The use of feline herpesvirus and baculovirus as vaccine vectors for gag and env genes of feline leukemia virus. J. Gen. Virol., Vol. 73, 1811-1818, 1992 *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2261345A1 (en) 1998-01-29
DE69736185T2 (de) 2007-04-19
US7534559B2 (en) 2009-05-19
JP2001500112A (ja) 2001-01-09
PL331247A1 (en) 1999-07-05
CZ15999A3 (cs) 1999-06-16
US20030017172A1 (en) 2003-01-23
CA2261345C (en) 2010-09-14
EP0934416B1 (fr) 2006-06-21
AR007861A1 (es) 1999-11-24
BR9710497A (pt) 1999-08-17
BR9710497B1 (pt) 2011-04-05
NZ333781A (en) 2000-09-29
EP0934416A1 (fr) 1999-08-11
PL191551B1 (pl) 2006-06-30
FR2751223A1 (fr) 1998-01-23
ZA976286B (en) 1999-01-19
BR9715228B1 (pt) 2011-10-04
DE69736185D1 (de) 2006-08-03
CZ304126B6 (cs) 2013-11-06
US6348196B1 (en) 2002-02-19
KR100687509B1 (ko) 2007-10-12
AU3699297A (en) 1998-02-10
WO1998003660A1 (fr) 1998-01-29
FR2751223B1 (fr) 1998-12-04
KR20000065257A (ko) 2000-11-06
RU2312676C2 (ru) 2007-12-20
RU2002132832A (ru) 2005-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ298613B6 (cs) Vakcína pro kocky obsahující nukleové kyseliny kódující geny viru kocicí leukémie
RU2319504C2 (ru) Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты)
CA2660355C (en) Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse
AU735184B2 (en) Avian polynucleotide vaccine formula
US6376473B1 (en) Polynucleotide vaccine formula in particular against bovine respiratory pathology
EP0914440B1 (en) Nucleic acid vaccination for parvoviral infections
AU773266B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU2004205140B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
US7294338B2 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
AU2008203549A1 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU2004210602B2 (en) Avian polynucleotide vaccine formula
AU777623B2 (en) Avian polynucleotide vaccine formula
AU765539B2 (en) Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases
NZ506427A (en) A canidae vaccine comprising the rabies G gene under the control of the CMV-IE promoter
AU2007202367A1 (en) Avian polynucleotide vaccine formula

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20170715