PL191551B1 - Kompozycje immunogenne, plazmidy, zastosowania plazmidów, zestawy oraz szczepionki - Google Patents

Kompozycje immunogenne, plazmidy, zastosowania plazmidów, zestawy oraz szczepionki

Info

Publication number
PL191551B1
PL191551B1 PL331247A PL33124797A PL191551B1 PL 191551 B1 PL191551 B1 PL 191551B1 PL 331247 A PL331247 A PL 331247A PL 33124797 A PL33124797 A PL 33124797A PL 191551 B1 PL191551 B1 PL 191551B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
vaccine
feline
plasmid
nucleic acid
immunogenic composition
Prior art date
Application number
PL331247A
Other languages
English (en)
Other versions
PL331247A1 (en
Inventor
Jean-Christophe Audonnet
Annabelle Bouchardon
Philippe Baudu
Michel Riviere
Original Assignee
Merial Sas
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merial Sas filed Critical Merial Sas
Publication of PL331247A1 publication Critical patent/PL331247A1/xx
Publication of PL191551B1 publication Critical patent/PL191551B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/13011—Gammaretrovirus, e.g. murine leukeamia virus
    • C12N2740/13022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/13011—Gammaretrovirus, e.g. murine leukeamia virus
    • C12N2740/13034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20211—Vesiculovirus, e.g. vesicular stomatitis Indiana virus
    • C12N2760/20222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20211—Vesiculovirus, e.g. vesicular stomatitis Indiana virus
    • C12N2760/20234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/16011—Caliciviridae
    • C12N2770/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

1. Kompozycja immunogenna do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicz- nej przeciwko wirusowi zaka znego zapalenia otrzewnej, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyra za in vivo w kocich komórkach gospodarza cz asteczk e kwasu nukleinowego, która zawiera sekwencj e koduj ac a bia lko M wirusa zaka znego zapalenia otrzewnej. 2. Kompozycja immunogenna wed lug zastrz. 1, znamienna tym, ze dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie po laczony z cz asteczk a kwasu nukleinowego. 3. Kompozycja immunogenna wed lug zastrz. 1, znamienna tym, ze dalej obejmuje pe ln a zyw a szczepionk e przeciwko kociemu patogenowi, lub pe ln a inaktywowan a szczepionk e przeciwko kocie- mu patogenowi, lub rekombinowan a szczepionk e przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostko- w a szczepionk e przeciwko kociemu patogenowi. PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są kompozycje immunogenne, plazmidy, zastosowania plazmidów, zestawy oraz szczepionki.
Kompozycje immunogenne pozwalają na szczepienie kotów przeciwko znacznej liczbie chorób.
W przeszłoś ci proponowano już skojarzone szczepionki przeciwko pewnym wirusom atakującym psy.
Jak dotąd szczepionki skojarzone przygotowywano ze szczepionek inaktywowanych albo szczepionek żywych, i ewentualnie ich mieszanin szczepionek. Ich rozwój napotyka na problemy związane ze zgodnością między wartościowościami i ze stabilnością szczepionek. Istnieje rzeczywista potrzeba zapewnienia zgodności między oboma różnymi wartościowościami szczepionki, czy to z powodu zastosowania róż nych antygenów, czy to z powodu samych kompozycji, szczególnie w przypadku gdzie połączone są szczepionki inaktywowane i szczepionki żywe. Istnieje również problem zabezpieczenia takiej kombinacji szczepionek i ich bezpieczeństwa szczególnie w obecności adiuwantu. Takie szczepionki są na ogół dosyć drogie.
W zgłoszeniach patentowych WO-A-90 11092, WO-A-93 19183, WO-A-94 21797 i WO-A-95 20660 doniesiono o stosowaniu ostatnio opracowanych technik szczepionek polinukleotydowych. Wiadomo, że szczepionki te wykorzystują plazmid zdolny do wyrażania w komórkach gospodarza antygenu włączonego do plazmidu. Proponowano wszystkie drogi podawania (dootrzewnową, dożylną, domięśniową, przezskórną, śródskórną, śluzówkową i podobne). Do szczepień stosowane są różne środki, takie jak DNA osadzone na powierzchni cząstek złota, które są wystrzeliwane tak, że penetrują przez skórę zwierzęcia (Tang i in., Nature 356, 152-154, 1992) i wtryskiwacze do wstrzyknięć strumienia płynu, które powodują, że jest możliwa jednoczesna transfekcja skóry, tkanek mięśniowych, tkanek tłuszczowych i tkanek gruczołu sutkowego (Furth i in., Analytical Biochemistry, 205, 365-368, 1992). W szczepionkach polinukleotydowych mogą również być stosowane zarówno nagie DNA jak i kompozycje DNA, na przykład wewnątrz kationowych lipidów albo liposomów.
Celem wynalazku jest dostarczenie kompozycji immunogennej, która przez szczepienie umożliwi ochronę przeciwko wielu kocim patogennym wirusom. Taka immunogenna kompozycja szczepionki zawiera różne wartościowości oraz spełnia wszystkie wymagane kryteria wzajemnej zgodności i stabilności wartościowości. Taka kompozycja szczepionki umożliwi połączenie różnych wartościowości w tym samym nośniku, jest łatwa w użyciu i niedroga.
Kompozycja immunogenna umożliwia szczepienie kotów, które prowadzi do uzyskania ochrony, w tym ochrony multiwalentnej, z wysokim poziomem skuteczności i długim czasem trwania, jak również zapewni bezpieczeństwo. Przedmiotem niniejszego wynalazku jest kompozycja immunogenna do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicznej przeciwko wirusowi zakaźnego zapalenia otrzewnej, która obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w kocich komórkach gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która zawiera sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej.
Korzystnie kompozycja immunogenna według wynalazku dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką kwasu nukleinowego.
W innym korzystnym wykonaniu kompozycja immunogenna według wynalazku obejmuje pełn ą żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
Kompozycje szczepionki dla kotów, mogą obejmować przynajmniej trzy wartościowości szczepionki polinukleotydowej, z których każda zawiera plazmid integrujący gen o wartościowości jednego kociego patogenu i wyraża go in vivo w komórce gospodarza. Przykładowo wartościowości te mogą być wybrane z grupy obejmującej wirusa białaczki kociej (FeLV), wirusa panleukopenii (FPV), wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej (FIPV), wirusa nieżytów górnych dróg oddechowych (FHV), wirusa zapalenia kielichów nerkowych (FCV), kociego wirusa niedoboru odporności (FIV) i możliwie wirusa wścieklizny (rhabdowirus), plazmidy zawierające dla każdej wartościowości jeden lub więcej genów wybranych z grupy składającej się z env i gag/pol dla kociej białaczki, VP2 dla panleukopenii, zmodyfikowanego S (albo S*) i M dla zakaźnego zapalenia otrzewnej, gB i gD dla nieżytów górnych dróg oddechowych, kapsydu dla zapalenia kielichów nerkowych, env i gag/pro dla kociego niedoboru odporności i G dla wścieklizny.
PL 191 551 B1
Wartościowość w kontekście niniejszego wynalazku należy rozumieć jako przynajmniej jeden antygen zapewniający ochronę przeciwko wirusowi jako rozważanemu patogenowi, i jest możliwe, że wartościowość zawiera, jako podwartościowości, jeden lub więcej zmodyfikowanych lub naturalnych genów z jednego lub więcej szczepów rozważanego patogenu.
Gen czynnika patogennego należy rozumieć nie tylko jako gen kompletny, lecz również jako różnorodne sekwencje nukleotydowe, w tym fragmenty zachowujące zdolność do wywołania odpowiedzi odpornościowej. Wyrażenie, że geny obejmują sekwencje nukleotydowe równoważne z tymi opisanymi szczegółowo w przykładach, dotyczy sekwencji różniących się, lecz kodujących to samo białko. Oznacza to również sekwencje nukleotydowe innych szczepów rozważanego patogenu, które zapewniają ochronę krzyżową albo ochronę charakterystyczną dla danego szczepu albo grupy szczepu. Oznacza również sekwencje nukleotydowe, które zostały zmodyfikowane w celu ułatwienia ekspresji in vivo w zwierzęciu będącym gospodarzem, lecz ciągle kodują to samo białko.
Wzór szczepionki obejmuje wartościowości dla panleukopenii, nieżytów górnych dróg oddechowych i zapalenia kielichów nerkowych.
Możliwe jest dodanie wartościowości dla kociej białaczki, kociego wirusa niedoboru odporności i/lub zakaźnego zapalenia otrzewnej.
W odniesieniu do wartoś ciowoś ci dla nież ytów górnych dróg oddechowych wskazane jest zastosowanie dwóch genów kodujących gB i gD, w różnych plazmidach lub w jednym i tym samym plazmidzie, albo zastosowanie jednego z tych genów.
W przypadku wartościowości dla wirusa białaczki kociej wskazane jest zastosowanie dwóch genów env i gag/pol zintegrowanych w dwu różnych plazmidach albo w jednym i tym samym, albo zastosowanie jedynie genu env.
W przypadku wartościowoś ci dla wirusa kociego niedoboru odporności wskazane jest zastosowanie dwóch genów env i gag/pro w różnych plazmidach albo w jednym i tym samym, albo zastosowanie jednego z tych genów albo zastosowanie genu FeLV-A env i genów FeLV-A i FeLV-A env.
Możliwe jest wykorzystanie dla wartościowości dla wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej dwóch genów M i zmodyfikowanego S razem w dwu różnych plazmidach albo w jednym i tym samym, albo któregokolwiek z tych genów. S zostanie zmodyfikowany w celu inaktywacji większości epitopów torujących, korzystnie tak jak patencie PCT/FR95/01128.
W kompozycjach immunogennych wskazane jest stosowanie nagich plazmidów po prostu w noś niku do szczepionki, którym zazwyczaj bę dzie sól fizjologiczna (0,9% NaCl), woda destylowana, bufor TE i podobne. Mogą w ten sposób oczywiście być wykorzystane wszystkie formy szczepionki polinukleotydowej wcześniej opisane w stanie techniki.
Każdy plazmid zawiera promotor zdolny do zapewnienia ekspresji włączonego genu, pod jego kontrolą w komórkach gospodarza. Zazwyczaj będzie to silny promotor eukariotyczny, a zwłaszcza wczesny promotor CMV-IE wirusa cytomegalii pochodzenia ludzkiego lub mysiego, albo ewentualnie o innym pochodzeniu np. od szczurów, ś wiń albo od ś winek morskich.
Bardziej ogólnie, promotor może być zarówno pochodzenia wirusowego jak i komórkowego. Jako promotor wirusowy można wymienić wczesny i późny promotor wirusa SV40 albo promotor LTR wirusa mięsaka Rous'a. Możliwy jest również promotor wirusa, z którego pochodzi gen, na przykład własny promotor genu.
Jako promotor komórkowy należy wymienić promotor genu cytoszkieletu, taki jak na przykład promotor desminy (Bolmont i in., Journal of Submicroscopic Cytology and pathology, 1990, 22, 117-122; i Zhenlin i in., Gene, 1989, 78, 243-254), albo alternatywnie promotor aktyny.
Gdy kilka genów znajduje się w tym samym plazmidzie, mogą być one obecne w tej samej jednostce transkrypcyjnej lub w dwóch różnych jednostkach.
Kombinację różnych wartościowości szczepionki można uzyskać przez zmieszanie plazmidów polinukleotydowych wyrażających antygen(y) każdej wartościowości, lecz antygeny kilku wartościowości mogą być również wyrażane w tym samym plazmidzie.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie plazmidu według wynalazku do wytwarzania kompozycji immunogennej według wynalazku przeznaczonej do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie plazmidu według wynalazku do wytwarzania kompozycji immunogennej według wynalazku, przeznaczonej do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów, którym najpierw podawana jest kompozycja immunogenna wybrana z grupy
PL 191 551 B1 składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej, i szczepionki rekombinowanej, a następnie kompozycja immunogenna według wynalazku.
W zakres wynalazku wchodzi również zastosowanie plazmidu według wynalazku, do wytwarzania kompozycji immunogennej według wynalazku, do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów, którym kompozycję immunogenna według wynalazku podaje się dwa do sześ ciu tygodni po podaniu kotu kompozycji immunogennej wybranej z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej, i rekombinowanej szczepionki.
Wynalazek ponadto dotyczy zastosowania plazmidu według wynalazku, do wytwarzania kompozycji immunogennej według wynalazku, do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów, przez podanie kotu kompozycji immunogennej według wynalazku w kombinacji z pełną żywą szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub szczepionką rekombinowaną przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionką przeciwko kociemu patogenowi.
Warte odnotowania jest, że szczepionka polinukleotydowa posiada potencjalne działanie dawki przypominającej, co powoduje spotęgowanie odpowiedzi immunologicznej i nabycie długotrwałej odporności.
Ogólnie, szczepionka służąca do pierwszego szczepienia może być wybrana ze szczepionek różnych producentów szczepionek weterynaryjnych dostępnych na rynku.
Przedmiotem wynalazku jest również zestaw obejmujący (i) kompozycję immunogenną według wynalazku, i (ii) kocią szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej i szczepionki rekombinowanej. Do zestawu może być dołączona instrukcja tłumacząca zastosowanie tej kompozycji.
Taki zestaw do szczepień łączący razem szczepionkę służącą do pierwszego szczepienia i dawkę przypominając ą..
W zakres wynalazku wchodzi również plazmid zawierający i wyrażający in vivo w kociej komórce gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która ma sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest szczepionka do indukowania odpowiedzi immunologicznej w kocim gospodarzu przeciwko wirusowi zakaźnego zapalenia otrzewnej, która obejmuje plazmid zawierający i wyrażający in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która posiada sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej. Korzystne jest, gdy szczepionka dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką kwasu nukleinowego.
W korzystnym wykonaniu szczepionka według wynalazku dalej obejmuje pełną żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
W zakres wynalazku wchodzi również zastosowanie plazmidu okreś lonego w wynalazku zawierającego i wyrażającego in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która posiada sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej, korzystnie obejmującego wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką kwasu nukleinowego do wytwarzania szczepionki wywołującej odpowiedź immunologiczną u kota.
Wynalazek dotyczy również zastosowania plazmidu określonego powyżej do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do wywoływania odpowiedzi immunologicznej u kota, któremu uprzednio podano szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej i szczepionki rekombinowanej.
Zastosowanie plazmidu określonego powyżej do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do wywoływania odpowiedzi immunologicznej u kota, któremu dwa do sześciu tygodni wcześniej podano szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej i szczepionki rekombinowanej, jest również objęte zakresem wynalazku.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie plazmidu określonego powyżej do wytwarzania szczepionki według wynalazku przeznaczonej do wywoływania odpowiedzi immunologicznej u kota, która podawana jest kotu w połączeniu z pełną żywą szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionką.
PL 191 551 B1
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja immunogenna do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicznej przeciwko kociemu wirusowi niedoboru odporności, która obejmuje co najmniej jeden plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białko env kociego wirusa niedoboru odporności, lub białko gag, lub białko pro, lub białka gag i pro, lub białka env i gag i pro. Korzystnie kompozycja immunogenna obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka env i gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności. Korzystniej kompozycja immunogenna według wynalazku obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego posiadającą sekwencję kodującą białko env kociego wirusa niedoboru odporności, i drugi plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/i kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
W kolejnym korzystnym wykonaniu kompozycji immunogennej według wynalazku plazmid dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z co najmniej jedną cząsteczką kwasu nukleinowego.
W jeszcze innym korzystnym wykonaniu wynalazku kompozycja immunogenna według wynalazku dalej obejmuje pełną żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
Wynalazek dotyczy również zestawu, który obejmuje (i) kompozycję immunogenną określoną powyżej, i (ii) kocią szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej i szczepionki rekombinowanej.
Zakresem wynalazku jest również objęty plazmid zawierający i wyrażający in vivo w kociej komórce gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która ma sekwencję/e kodującą/e białko env kociego wirusa niedoboru odporności, lub białko gag, lub białko pro, lub białka gag i pro, lub białka env i gag i pro, korzystnie plazmid zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka env i gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
W korzystnym wykonaniu plazmid wedł ug wynalazku zawiera i wyraż a in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego posiadającą sekwencję kodującą białko env kociego wirusa niedoboru odporności.
W kolejnym korzystnym wykonaniu wynalazku plazmid zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
Wynalazek również dotyczy zastosowania plazmidu zawierającego i wyrażającego in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą /e sekwencję/e kodującą/e białko env kociego wirusa niedoboru odporności, lub białko gag, lub białko pro, lub białka gag i pro, lub biał ka env i gag i pro do wytwarzania szczepionki do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicznej przeciwko kociemu wirusowi niedoboru odporności.
W korzystnym wykonaniu zastosowania według wynalazku plazmid zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą /e sekwencję/e kodującą/e białka env i gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
W innym korzystnym wykonaniu zastosowania wedł ug wynalazku plazmid zawiera i wyraż a in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego posiadającą sekwencję kodującą białko env kociego wirusa niedoboru odporności, i drugi plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza czą steczkę /i kwasu nukleinowego posiadają c ą /e sekwencję /e kodującą/e białka gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
W następnym korzystnym wykonaniu zastosowania według wynalazku plazmid dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką/cząsteczkami kwasu nukleinowego.
Kolejne korzystne wykonanie zastosowania według wynalazku charakteryzuje się tym, że szczepionka dalej obejmuje pełną żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
PL 191 551 B1
Wynalazek umożliwia szczepienie kotów obejmujące podawanie skutecznej kompozycji immunogennej opisanej powyżej, które to dotyczy podawania jednej lub więcej dawek kompozycji szczepionki, kolejno w krótkich odstępach czasu i/lub kolejno w długich odstępach czasu.
Kompozycje immunogenne według wynalazku mogą być podawane według opisanego schematu szczepienia, jak i innymi sposobami podawania opisanymi we wcześniejszym stanie techniki dla szczepionek polinukleotydowych albo znanymi technikami podawania.
Przykładowo zwierzęciu podawana jest skuteczna dawka szczepionki tradycyjnej, szczególnie inaktywowanej, żywej, atenuowanej albo rekombinowanej albo alternatywnie szczepionki podjednostkowej, zapewniającej pierwsze szczepienie i podawana jest po czasie korzystnie od 2 do 6 tygodni kompozycja immunogenna według wynalazku.
Wydajność prezentowania antygenów układowi odpornościowemu różni się zależnie od tkanki. Zwłaszcza błony śluzowe układu oddechowego służą jako bariera przeciwko wnikaniu patogenów i są związane z tkankami limfatycznymi wspomagającymi miejscową odporność. Podawanie szczepionki przez kontakt z błonami śluzowymi, zwłaszcza błoną śluzową policzka i błoną śluzową gardła i błoną śluzową okolicy oskrzeli jest szczególnie wskazane dla szczepień przeciwko chorobom układu oddechowego i pokarmowego.
Możliwe jest podawanie szczepionki przez błony śluzowe szczególnie z zastosowaniem nebulizacji albo rozpylacza albo wody pitnej. W związku z tym możliwe jest podawanie tą drogą kompozycji immunogennej według wynalazku. Sposób przygotowania kompozycji immunogennych, to znaczy przygotowania wartościowości i ich mieszanin, wynika jasno z opisu wynalazku.
Wynalazek dalej zostanie opisany bardziej szczegółowo przez wykonania wynalazku podane w odniesieniu do towarzyszą cych rysunków.
Lista figur
Figura nr 1: Plazmid pVR1012
Figura nr 2: Plazmid pPB179
Figura nr 3: Sekwencja genu env FeLV-B
Figura nr 4: Plazmid pPB180
Figura nr 5: Sekwencja genu gag/pol wirusa FeLV-A (szczep Glasgow 1)
Figura nr 6: Plazmid pPB181
Figura nr 7: Plazmid pAB009
Figura nr 8 : Plazmid pAB053
Figura nr 9: Plazmid pAB052
Figura nr 10: Plazmid pAB056
Figura nr 11: Plazmid pAB028
Figura nr 12: Plazmid pAB029
Figura nr 13: Plazmid pAB010
Figura nr 14: Plazmid pAB030
Figura nr 15: Plazmid pAB083
Figura nr 16: Plazmid pAB041
Lista sekwencji
Id. Sekw. nr :
Id. Sekw. nr 1: oligonukleotyd PB247
Id. Sekw. nr 2: oligonukleotyd PB249
Id. Sekw. nr 3: oligonukleotyd PB281
Id. Sekw. nr 4: oligonukleotyd PB282
Id. Sekw. nr 5: sekwencja genu env wirusa FeLV-B
Id. Sekw. nr 6: oligonukleotyd PB283
Id. Sekw. nr 7: oligonukleotyd PB284
Id. Sekw. nr 8: Sekwencja genu gag/pol wirusa FeLV-A (szczep Glasgow 1)
Id. Sekw. nr 9: oligonukleotyd AB021
Id. Sekw. nr 10: oligonukleotyd AB024
Id. Sekw. nr 11: oligonukleotyd AB103
Id. Sekw. nr 12: oligonukleotyd AB112
Id. Sekw. nr 13: oligonukleotyd AB113
Id. Sekw. nr 14: oligonukleotyd AB104
Id. Sekw. nr 15: oligonukleotyd AB101
PL 191 551 B1
Id. Sekw. nr 16: oligonukleotyd AB102
Id. Sekw. nr 17: oligonukleotyd AB106
Id. Sekw. nr 18: oligonukleotyd AB107
Id. Sekw. nr 19: oligonukleotyd AB061
Id. Sekw. nr 20: oligonukleotyd AB064
Id. Sekw. nr 21: oligonukleotyd AB065
Id. Sekw. nr 22: oligonukleotyd AB066
Id. Sekw. nr 23: oligonukleotyd AB025
Id. Sekw. nr 24: oligonukleotyd AB026
Id. Sekw. nr 25: oligonukleotyd AB067
Id. Sekw. nr 26: oligonukleotyd AB070
Id. Sekw. nr 27: oligonukleotyd AB154
Id. Sekw. nr 28: oligonukleotyd AB155
Id. Sekw. nr 29: oligonukleotyd AB011
Id. Sekw. nr 30: oligonukleotyd AB012
Przykłady
P r z y k ł a d 1
Hodowla wirusa
Wirusy hoduje się w odpowiednim układzie komórkowym, do uzyskania efektu cytopatycznego. Układy komórkowe do zastosowania dla każdego z wirusów są znane specjalistom. Pokrótce, komórki wrażliwe na wirusa, które hoduje się w minimalnej niezbędnej pożywce Eagle'a (MEM) albo innej odpowiedniej pożywce, zakaża się badanym szczepem wirusa stosując wielokrotność zakażenia równą 1. Zakażone komórki inkubuje się w 37°C przez czas niezbędny do wystąpienia całkowitego efektu cytopatycznego (średnio 36 godzin).
P r z y k ł a d 2
Ekstrakcja wirusowych DNA
Po hodowli, nadsącz i rozłożone komórki zbiera się i całą zawiesinę wirusa wiruje się przy 1000 g przez 10 minut w 4°C w celu usunięcia resztek komórkowych. Cząstki wirusa zbiera się przez ultrawirowanie przy 400000 g przez godzinę w 4°C. Osad pobiera się w minimalnej objętości buforu (10 mM
Tris, 1 mM EDTA). Tę zatężoną zawiesinę wirusa traktuje się proteinazą K (100 μg/ml objętości końcowej) w obecności soli sodowej siarczanu dodecylu (SDS) (0,5%) przez 2 godziny w 37°C. Wirusowy DNA ekstrahuje się mieszaniną fenol/chloroform i precypituje 2 objętościami absolutnego etanolu. Po pozostawieniu przez noc w -20°C, DNA wiruje się przy 10000 g przez 15 minut w 4°C. Osad DNA suszy się i pobiera w minimalnej objętości sterylnej, ultraczystej wody. Następnie można go trawić enzymami restrykcyjnymi.
P r z y k ł a d 3
Izolacja wirusowych genomowych RNA
Wirusy RNA oczyszczono według technik znanych specjalistom. Następnie, genomowy wirusowy RNA każdego z wirusów izolowano stosując technikę ekstrakcji „rodanek guanidyny/fenolchloroform” opisaną przez Chomczynski i Sacchi (Anal. Biochem., 1987, 162:156-159).
P r z y k ł a d 4
Techniki biologii molekularnej
Wszystkie konstrukcje plazmidów przeprowadzono stosując standardowe techniki biologii molekularnej, opisane przez Sambrook i in., (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, wyd. 2, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989). Wszystkie fragmenty restrykcyjne zastosowane w wynalazku wyizolowano stosując zestaw „Geneclean” (BIO 101 Inc., La Jolla, CA).
P r z y k ł a d 5
Technika RT-PCR
Swoiste oligonukleotydy (obejmujące miejsca restrykcyjne na końcach 5' w celu ułatwienia klonowania amplifikowanych fragmentów) syntetyzowano w taki sposób, że pokrywały w całości regiony kodujące genów, które miały być amplifikowane (patrz, konkretne przykłady). Reakcję odwrotnej transkrypcji (RT) i reakcję łańcuchową polimerazy (PCR) przeprowadzono technikami standardowymi (Sambrook i in., 1989). Każdą z reakcji RT-PCR przeprowadzono z parą swoistych starterów amplifikacji z ekstrahowanym genomowym wirusowym RNA jako matrycą. Amplifikowany komplementarny DNA ekstrahowano mieszaniną fenol/chloroform/alkohol izoamylowy (25:24:1), po czym trawiono enzymami restrykcyjnymi.
PL 191 551 B1
P r z y k ł a d 6
Plazmid pVR1012
Plazmid pVR1012 (Figura 1) otrzymano z Vical Inc., San Diego, CA, USA. Jego konstrukcję opisano w Hartikka i in. (Human Gene Therapy, 1996, 7:1205-1217).
P r z y k ł a d 7
Konstruowanie plazmidu pPB179 (gen env wirusa FeLV-A)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociej białaczki (FeLV-A) (szczep Glasgow-1) (Stewart i in., J. Virol. 1986, 58, 825-834) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
PB247 (29-mer) (Id. Sekw. nr 1)
5' TTTGTCGACCATGGAAAGTCCAACGCACC3'
PB247 (28-mer) (Id. Sekw. nr 2)
5'TTTGGATCCTCATGGTCGGTCCGGATCG3' w taki sposób, że amplifikowano fragment wielkości 1947 bp, zawierający gen kodujący glikoproteinę Env z wirusa FeLV-A (szczep Glasgow-1) w postaci fragmentu Sall-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR trawiono SalI i BamHI w celu otrzymania fragmentu Sall-BamHI wielkości 1935 bp.
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio SalI i BamHI, otrzymując plazmid pPB179 (6804 bp) (Figura 2).
P r z y k ł a d 8
Konstruowanie plazmidu pPB180 (gen env wirusa FeLV-B)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociej białaczki (podtyp FeLV-B) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
PB281 (29-mer) (Id. Sekw. nr 3)
5'TTTGTCGACATGGAAGGTCCAACGCACCC3'
PB282 (32-mer) (Id. Sekw. nr 4)
5'TTGGATCCTCATGGTCGGTCCGGATCATATTG3' w taki sposób, że amplifikowano fragment wielkości 2005 bp, zawierający gen kodujący glikoproteinę Env z wirusa FeLV-B (Fig. 3 i Id. Sekw. nr 5) w postaci fragmentu SalI BamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR trawiono SalI i BamHI w celu otrzymania fragmentu Sall-BamHI wielkości 1995 bp.
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio SalI i BamHI, otrzymując plazmid pPB180 (6863 bp) (Figura 4).
P r z y k ł a d 9
Konstruowanie plazmidu pPB180 (gen gag/pol wirusa FeLV)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociej białaczki (podtyp FeLV-A) (szczep Glasgow-1) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
PB281 (33-mer) (Id. Sekw. nr 6)
5'TTGTCGACATGTCTGGAGCCTCTAGTGGGACAG3'
PB282 (42-mer) (Id. Sekw. nr 7)
5'TTGGATCCTTATTTAATTACTGCAGTTCCAAGGAACTCTC3' w taki sposób, ż e amplifikowano fragment wielkoś ci 3049 bp, zawierają cy gen kodują cy biał ko
Gag i część 5' sekwencji kodującej białko Pol z wirusa FeLV-A (szczep Glasgow-1) (Fig. 5 i Id. Sekw. nr 8) w postaci fragmentu Sall-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR trawiono Sall i BamHI w celu otrzymania fragmentu Sall-BamHI wielko ś ci 3039 bp.
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Sall i BamHI, otrzymując plazmid pPB181 (7908 bp) (Figura 6) .
P r z y k ł a d 10
Konstruowanie plazmidu pAB009 (gen VP2 FPV)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA wirusa kociej panleukopenii (szczep 193) (Martyn i in., J. Gen. Virol. 1990, 71:2747-2753) wytworzonym techniką według Przykładu 2 z następującymi oligonukleotydami:
AB021 (34-mer) (Id. Sekw. nr 9)
5'TGCTCTAGAGCAATGAGTGATGGAAGCAGTTCAAC3'
AB024 (33-mer) (Id. Sekw. nr 10)
5'CGCGGATCCATTAATATAATTTTCTAGGTGCTA3'
PL 191 551 B1 w taki sposób, ż e amplifikowano fragment wielkoś ci 1776 bp, zawierają cy gen kodują cy biał ko kapsydu VP2 FP2. Po oczyszczeniu, produkt PCR trawiono Xbal i BamHI w celu otrzymania fragmentu XbaI-BamHI wielkości 1764 bp.
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Xbal i BamHI, otrzymując plazmid pAB009 (6664 bp) (Figura 7).
P r z y k ł a d 11
Konstruowanie plazmidu pAB053 (gen FIPV S*)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego zakaźnego zapalenia otrzewnej (FIP) (szczep 79-1146) (de Groot i in., J. Gen Virol. 1987, 68: 2639-2646) przygotowanym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB103 (38-mer) (Id. Sekw. nr 11)
5'ATAAGAATGCGGCCGCATGATTGTGCTCGTAACTTGCC3'
AB112 (25-mer) (Id. Sekw. nr 12)
5'CGTACATGTGGAATTCCACTGGTTG3' w taki sposób, ż e amplifikowano sekwencję 5' genu kodują cego glikoproteinę S wirusa w postaci fragmentu Notl-EcoRI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR trawiono Notl i EcoRI w celu otrzymania fragmentu NotI-EcoRI wielkości 467 bp (Fragment A).
Plazmid pJCA089 (zgłoszenie patentowe PCT/FR95/01128) trawiono EcoRI i Spel w celu uwolnienia fragmentu 3378 bp zawierającego centralną część genu kodującego modyfikowaną glikoproteinę S wirusa FIP (Fragment B).
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego zakaźnego zapalenia otrzewnej (FIP) (szczep 79-1146) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB113 (25-mer) (Id. Sekw. nr 13)
5'AGAGTTGCAACTAGTTCTGATTTTG3'
AB104 (37-mer) (Id. Sekw. nr 14)
5'ATAAGAATGCGGCCGCTTAGTGGACATGCACTTTTTC3' w taki sposób, ż e amplifikowano sekwencję 3' genu kodują cego glikoproteinę S wirusa w postaci fragmentu Spel-Notl. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR 543 bp trawiono Spel i Notl w celu otrzymania fragmentu Spel-Notl wielkości 519 bp (Fragment C).
Fragmenty A, B i C poddano ligacji ze sobą w wektorze pVR1012 (Przykład 6), trawiony uprzednio Notl, otrzymując plazmid pAB053 (9282 bp), który zawierał gen S w prawidłowej orientacji względem promotora (Figura 8).
P r z y k ł a d 12
Konstruowanie plazmidu pAB052 (gen M FIPV)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego zakaźnego zapalenia otrzewnej (FIP) (szczep 79-1146)(H. Vennema i in., Virology, 1991, 181.327-335) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB101 (37-mer) (Id. Sekw. nr 15)
5'ACGCGTCGACCCACCATGAAGTACATTTTGCTAATAC3'
AB102 (36-mer) (Id. Sekw. nr 16)
5'CGCGGATCCTTACACCATATGTAATAATTTTTCATG3' w taki sposób, że izolowano gen kodujący glikoproteinę M wirusa FIP w postaci fragmentu Sall-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR o wielkości 812 bp trawiono Sall i BamHI w celu otrzymania fragmentu Sall-BamHI wielkości 799 bp. Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Sall i BamHI, otrzymując plazmid pAB052 (5668 bp) (Figura 9).
P r z y k ł a d 13
Konstruowanie plazmidu pAB056 (gen N FIPV)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego zakaźnego zapalenia otrzewnej (FIP) (szczep 79-1146) (H. Vennema i in., Virology, 1991, 181. 327-335) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB106 (35-mer) (Id. Sekw. nr 17)
5'ACGCGTCGACGCCATGGCCACACAGGGACAACGCG3'
AB107 (36-mer) (Id. Sekw. nr 18)
5' CGCGGATCCTTAGTTCGTAACCTCATCAATCATCTC3'
PL 191 551 B1 w taki sposób, ż e izolowano gen kodujący białko N wirusa FIP w postaci fragmentu Sall-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR o wielkości 1156 bp trawiono Sall i BamHI w celu otrzymania fragmentu Sall-BamHI wielkości 1143 bp. Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Sall i BamHI, otrzymując plazmid pAB056 (6011 bp) (Figura 10).
P r z y k ł a d 14
Konstruowanie plazmidu pAB028 (gen gB FHV)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA kociego wirusa herpes (FHV-1)(szczep C27) (S.Spatz i in., Virology 1993, 197. 125-36) wytworzonym techniką według Przykładu 2 z następującymi oligonukleotydami:
AB061 (36-mer) (Id. Sekw. nr 19)
5'AAAACTGCAGAATCATGTCCACTCGTGGCGATCTTG3'
AB064 (40-mer) (Id. Sekw. nr 20)
5'ATAAGAATGCGGCCGCTTAGACAAGATTTGTTTCAGTATC3' w taki sposób, że amplifikowano fragment wielkości 2856 bp, zawierający gen kodujący glikoproteinę gB wirusa FHV-1 w postaci fragmentu Pstl-Notl. Po oczyszczeniu, produkt PCR trawiono Pstl i Notl w celu otrzymania fragmentu Pstl-Notl wielkości 2823 bp.
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Pstl i Notl, otrzymując plazmid pAB028 (7720 bp) (Figura 11).
P r z y k ł a d 15
Konstruowanie plazmidu pAB029 (gen gD FHV)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA kociego wirusa herpes (FHV-1) (szczep C27) (S.Spatz i in., Virology 1993, 197. 125-36) wytworzonym techniką według Przykładu 2 z następującymi oligonukleotydami:
AB065 (36-mer) (Id. Sekw. nr 21)
5'AAAACTGCAGCCAATGATGACACGTCTACATTTTT3'
AB066 (33-mer) (Id. Sekw. nr 22)
5'GGAAGATCTTTAAGGATGGTGAGTTGTATGTAT3' w taki sposób, ż e amplifikowano gen kodujący glikoproteinę gD wirusa FHV-1 w postaci fragmentu Pstl-BgIII. Po oczyszczeniu, produkt PCR o wielkości 1147 bp trawiono Pstl i Bglll w celu izolowania fragmentu Pstl-BgIII wielkości 1129 bp. Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Pstl i Bglll, otrzymując plazmid pAB029 (5982 bp) (Figura 12).
P r z y k ł a d 16
Konstruowanie plazmidu pAB010 (gen C FCV)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego zapalenia kielichów nerkowych (FCV) (szczep F9) (M. Carter i in., Virology, 1992, 190. 443-448) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB025 (33-mer) (Id. Sekw. nr 23)
5'ACGCGTCGACGCATGTGCTCAACCTGCGCTAAC3'
AB026 (31-mer) (Id. Sekw. nr 24)
5'CGCGGATCCTCATAACTTAGTCATGGGACTC 3' w taki sposób, ż e izolowano gen kodują cy biał ko kapsydu wirusa FCV w postaci fragmentu SallBamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR o wielkości 2024 bp trawiono Sall i BamHI w celu otrzymania fragmentu Sall-BamHI wielkości 2029 bp. Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Sall i BamHI, otrzymując plazmid pAB010 (6892 bp) (Figura 13).
P r z y k ł a d 17
Konstruowanie plazmidu pAB030 (gen env FIV)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego niedoboru odporności (FIV) (szczep Petaluma) (R. Olmsted i in., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. 86. 8088-8096) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB067 (36-mer) (Id. Sekw. nr 25)
5'AAAACTGCAGAAGGAATGGCAGAAGGATTTGCAGCC3
AB070 (36-mer) (Id. Sekw. nr 26)
5'CGCGGATCCTCATTCCTCCTCTTTTTCCAGACATGCC3' w taki sposób, że amplifikowano fragment wielkości 2592 bp, zawierający gen kodujący glikoproteinę env wirusa FIV (szczep Petaluma) w postaci fragmentu Pstl-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt PCR trawiono Pstl i BamHI w celu otrzymania fragmentu Pstl-BamHI wielkości 2575 bp.
PL 191 551 B1
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio Pstl i Notl, otrzymują c plazmid pAB030 (7436 bp) (Figura 14).
P r z y k ł a d 18
Konstruowanie plazmidu pAB083 (gen gag/pro FIV)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa kociego niedoboru odporności (FIV) (szczep Petaluma) (R. Olmsted i in., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. 86. 8088-8096) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB154 (32-mer) (Id. Sekw. nr 27)
5'ACGCGTCGACATGGGGAATGGACAGGGGCGAG3'
AB155 (33-mer) (Id. Sekw. nr 28)
5'TGAAGATCTTCACTCATCCCCTTCAGGAAGAGC3' w taki sposób, ż e amplifikowano fragment wielkoś ci 4635 bp, zawierają cy gen kodują cy biał ka
Gag i Pro wirusa FIV (szczep Petaluma) w postaci fragmentu Sall-BgIII. Po oczyszczeniu, produkt PCR trawiono Sall i Bglll w celu otrzymania fragmentu Sall-BgIII wielkości 4622 bp.
Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykład 6), trawionym uprzednio SalI i Bglll, otrzymują c plazmid pAB083 (7436 bp) (Figura 15).
P r z y k ł a d 19
Konstruowanie plazmidu pAB041 (gen G wirusa wścieklizny)
Reakcję RT-PCR techniką według Przykładu 5 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa wścieklizny (szczep ERA) ( A. Anilionis i in., Nature 1981, 294, 275-278) wytworzonym techniką według Przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB011 (33-mer) (Id. Sekw. nr 29)
5'AAAACTGCAGAGATGGTTCCTCAGGCTCTCCTG3'
AB012 (34-mer) (Id. Sekw. nr 30)
5'CGCGGATCCTCACAGTCTGGTCTCACCCCCACTC3' w taki sposób, ż e amplifikowano fragment wielkoś ci 1589 bp, zawierają cy gen kodują cy glikoproteinę G wirusa wścieklizny. Po oczyszczeniu, produkt PCR trawiono Pstl i BamHI w celu otrzymania fragmentu Pstl-BamHI wielkości 1578 B. pertussis. Fragment ten poddano ligacji z wektorem pVR1012 (Przykł ad 6), trawionym uprzednio Pstl i BamHI, otrzymują c plazmid pAB041 (6437 bp) (Figura 16).
P r z y k ł a d 20
Wytwarzanie i oczyszczanie plazmidów
Do wytwarzania plazmidów przeznaczonych do szczepienia zwierząt, można zastosować dowolną technikę, która umożliwia otrzymanie zawiesiny oczyszczonych plazmidów, głównie w postaci super-skręconej. Techniki te znane są specjalistom. W szczególności można wymienić technikę lizy alkalicznej, a następnie dwa kolejne ultrawirowania na gradiencie chlorku cezu, w obecności bromku etydyny, jak to opisano w Sambrook i in., (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, wyd. 2, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989). Można również powołać zgłoszenie patentowe PCT WO 95/21250 i PCT WO 96/02658 opisujące metodę wytwarzania, na skalę przemysłową, plazmidów, które można zastosować do szczepienia.
W celu wytwarzania szczepionek (patrz, Przykł ad 17) oczyszczone plazmidy zawiesza się w celu otrzymania zawiesin o wysokim stężeniu (> 2 mg/ml), które s ą moż liwe do przechowywania. W tym celu, plazmidy zawiesza się w ultraczystej wodzie albo w buforze TE (10 mM Tris; 1 mM EDTA, pH 8,0).
P r z y k ł a d 21
Wytwarzanie szczepionek skojarzonych
Różne plazmidy konieczne do wytwarzania szczepionek skojarzonych miesza się wychodząc z ich stężonych roztworów (Przykład 16). Mieszaniny wytwarza się w taki sposób, że stężenie końcowe każdego z plazmidów odpowiada skutecznej dawce każdego z nich. Roztwory, które można zastosować do ustalenia stężenia końcowego szczepionki mogą być roztworami 0,9% NaCl albo buforem PBS.
Szczególnie formulacje takie jak liposomy lub kationowe lipidy można również wykorzystać w przygotowaniu szczepionek.
P r z y k ł a d 22
Szczepienie kotów
Koty szczepiono dawkami 10 μg, 50 μg albo 250 μg na plazmid.
PL 191 551 B1
Wstrzykiwanie przeprowadzono przy użyciu igły drogą domięśniową. W tym przypadku, dawkę szczepionki podawano w objętości 1 ml.
Wstrzyknięcia przeprowadzano również igłą, drogą śródskórną. W tym przypadku, dawkę szczepionki podawano w objętości całkowitej 1 ml, podawanej w 10 punktów po 0,1 ml albo 20 punktów po 0,05 ml. Podawanie śródskórne przeprowadzano po ogoleniu skóry (powierzchnia boczna klatki piersiowej) albo na poziomie względnie bezwłosych regionów anatomicznych, np. na wewnętrznej powierzchni ud.
W celu wstrzykiwania ś ródskórnego można również zastosować aparat do wstrzykiwania pod ciśnieniem (bezigłowy).

Claims (31)

1. Kompozycja immunogenna do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicznej przeciwko wirusowi zakaźnego zapalenia otrzewnej, znamienna tym, że obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w kocich komórkach gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która zawiera sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej.
2. Kompozycja immunogenna wedł ug zastrz. 1, znamienna tym, ż e dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką kwasu nukleinowego.
3. Kompozycja immunogenna według zastrz. 1, znamienna tym, że dalej obejmuje pełn ą żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
4. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 1 i 2 do wytwarzania kompozycji immunogennej określonej w zastrz. 1, 2 i 3 przeznaczonej do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów.
5. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 1 i 2 do wytwarzania kompozycji immunogennej określonej w zastrz. 1, 2 i 3, przeznaczonej do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów, którym najpierw podawana jest kompozycja immunogenna wybrana z grupy składają cej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej, i szczepionki rekombinowanej, a następnie kompozycja immunogenna określona w zastrz. 1, 2 lub 3.
6. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 1 i 2, do wytwarzania kompozycji immunogennej określonej w zastrz. 1, 2 i 3, do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów, którym kompozycję immunogenną określoną w zastrz. 1, 2 lub 3 podaje się dwa do sześciu tygodni po podaniu kotu kompozycji immunogennej wybranej z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej, i rekombinowanej szczepionki.
7. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 1 i 2, do wytwarzania kompozycji immunogennej określonej w zastrz. 1, 2 i 3, do indukowania odpowiedzi immunologicznej u kotów, przez podanie kotu kompozycji immunogennej określonej w dowolnym zastrz. 1, 2 lub 3 w kombinacji z pełną żywą szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub szczepionką rekombinowaną przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionką przeciwko kociemu patogenowi.
8. Zestaw, znamienny tym, ż e obejmuje (i) kompozycję immunogenną określoną w zastrz. 1, i (ii) kocią szczepionkę wybraną z grupy skł adają cej się z peł nej ż ywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej i szczepionki rekombinowanej.
9. Plazmid zawieraj ą cy i wyraż ają cy in vivo w kociej komórce gospodarza czą steczkę kwasu nukleinowego, która ma sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej.
10. Szczepionka do indukowania odpowiedzi immunologicznej w kocim gospodarzu przeciwko wirusowi zakaźnego zapalenia otrzewnej, znamienna tym, że obejmuje plazmid zawierający i wyrażający in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która posiada sekwencję kodującą białko M wirusa zakaźnego zapalenia otrzewnej.
11. Szczepionka według zastrz. 10, znamienna tym, że dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką kwasu nukleinowego.
12. Szczepionka według zastrz. 10, znamienna tym, że dalej obejmuje pełną żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogePL 191 551 B1 nowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
13. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 10 i 11 do wytwarzania szczepionki wywołującej odpowiedź immunologiczną u kota.
14. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 10 i 11 do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do wywoływania odpowiedzi immunologicznej u kota, któremu uprzednio podano szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej, i szczepionki rekombinowanej.
15. Zastosowanie plazmidu określonego w zastrz. 10 i 11 do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do wywoływania odpowiedzi immunologicznej u kota, któremu dwa do sześciu tygodni wcześniej podano szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej, i szczepionki rekombinowanej.
16. Zastosowanie plazmidu określonego w dowolnym zastrz. 10 i 11 do wytwarzania szczepionki określonej w dowolnym zastrz. 11, 12 lub 13 przeznaczonej do wywoływania odpowiedzi immunologicznej u kota, która podawana jest kotu w połączeniu z pełną żywą szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionką przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionką.
17. Kompozycja immunogenna do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicznej przeciwko kociemu wirusowi niedoboru odporności, znamienna tym, że obejmuje co najmniej jeden plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białko env kociego wirusa niedoboru odporności, lub białko gag, lub białko pro, lub białka gag i pro, lub białka env i gag i pro.
18. Kompozycja immunogenna według zastrz. 17, znamienna tym, że obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka env i gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności
19. Kompozycja immunogenna według zastrz. 17, znamienna tym, że obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego posiadającą sekwencję kodującą białko env kociego wirusa niedoboru odporności, i drugi plazmid, który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/i kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodujacą/e białka gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
20. Kompozycja immunogenna według zastrz. 17, znamienna tym, że plazmid dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z co najmniej jedną cząsteczką kwasu nukleinowego.
21. Kompozycja immunogenna według zastrz. 17, znamienna tym, dalej obejmuje pełną żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
22. Zestaw, znamienny tym, że obejmuje (i) kompozycję immunogenną określoną w zastrz. 17, i (ii) kocią szczepionkę wybraną z grupy składającej się z pełnej żywej szczepionki, pełnej inaktywowanej szczepionki, szczepionki podjednostkowej i szczepionki rekombinowanej.
23. Plazmid zawierający i wyrażający in vivo w kociej komórce gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego, która ma sekwencję/e kodującą/e białko env kociego wirusa niedoboru odporności, lub białko gag, lub białko pro, lub białka gag i pro, lub białka env i gag i pro.
24. Plazmid według zastrz. 23, znamienny tym, że zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka env i gag i pro kociego wirusa niedoboru odporno ś ci.
25. Plazmid według zastrz. 23, znamienny tym, że zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego posiadającą sekwencję kodującą białko env kociego wirusa niedoboru odporności.
26. Plazmid według zastrz. 23, znamienny tym, że zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka gag i pro kociego wirusa niedoboru odpornoś ci.
27. Zastosowanie plazmidu zawierającego i wyrażającego in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białko env kociego wirusa niedoboru odporności, lub białko gag, lub białko pro, lub białka gag i pro, lub białka env i gag
PL 191 551 B1 i pro do wytwarzania szczepionki do indukowania w kocim gospodarzu odpowiedzi immunologicznej przeciwko kociemu wirusowi niedoboru odporności.
28. Zastosowanie według zastrz. 27, znamienne tym, że plazmid zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę/ki kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka env i gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
29. Zastosowanie według zastrz. 27, znamienne tym, że plazmid zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza cząsteczkę kwasu nukleinowego posiadają cą sekwencję kodującą białko env kociego wirusa niedoboru odporności, i drugi plazmid który zawiera i wyraża in vivo w komórce kociego gospodarza czą steczkę/i kwasu nukleinowego posiadającą/e sekwencję/e kodującą/e białka gag i pro kociego wirusa niedoboru odporności.
30. Zastosowanie według zastrz. 27, znamienne tym, że plazmid dalej obejmuje wczesny promotor cytomegalowirusa (CMV-IE) funkcjonalnie połączony z cząsteczką/cząsteczkami kwasu nukleinowego.
31. Zastosowanie według zastrz. 27, znamienne tym, że szczepionka dalej obejmuje pełną żywą szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub pełną inaktywowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub rekombinowaną szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi, lub podjednostkową szczepionkę przeciwko kociemu patogenowi.
PL331247A 1996-07-19 1997-07-15 Kompozycje immunogenne, plazmidy, zastosowania plazmidów, zestawy oraz szczepionki PL191551B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609337A FR2751223B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique felin
PCT/FR1997/001315 WO1998003660A1 (fr) 1996-07-19 1997-07-15 Formule de vaccin polynucleotidique felin

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL331247A1 PL331247A1 (en) 1999-07-05
PL191551B1 true PL191551B1 (pl) 2006-06-30

Family

ID=9494449

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL331247A PL191551B1 (pl) 1996-07-19 1997-07-15 Kompozycje immunogenne, plazmidy, zastosowania plazmidów, zestawy oraz szczepionki

Country Status (16)

Country Link
US (2) US6348196B1 (pl)
EP (1) EP0934416B1 (pl)
JP (1) JP2001500112A (pl)
KR (1) KR100687509B1 (pl)
AR (1) AR007861A1 (pl)
AU (1) AU3699297A (pl)
BR (2) BR9710497B1 (pl)
CA (1) CA2261345C (pl)
CZ (2) CZ298613B6 (pl)
DE (1) DE69736185T2 (pl)
FR (1) FR2751223B1 (pl)
NZ (1) NZ333781A (pl)
PL (1) PL191551B1 (pl)
RU (1) RU2312676C2 (pl)
WO (1) WO1998003660A1 (pl)
ZA (1) ZA976286B (pl)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0863151A1 (en) * 1997-02-12 1998-09-09 Akzo Nobel N.V. "Canine parvovirus dna vaccines"
CA2223029A1 (en) 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
US6770282B1 (en) 1998-10-23 2004-08-03 Heska Corporation Cationic lipid-mediated enhancement of nucleic acid immunization of cats
KR100768114B1 (ko) * 1999-06-10 2007-10-17 메리알 애완 동물 및 스포츠용 동물을 위한 ｄｎａ 백신
FR2794648B1 (fr) * 1999-06-10 2003-03-07 Merial Sas Vaccins adn pour animaux de compagnie et de sport
EP1074625A3 (en) * 1999-06-14 2002-01-02 Pfizer Products Inc. DNA vaccine against feline immunodeficiency virus
AU6683400A (en) * 1999-07-08 2001-01-30 Mologen Forschungs-, Entwicklungs- Und Vertriebs Gmbh Vaccine against lentiviral infections, such as the feline immune deficiency virus of the cat
US6541458B1 (en) 1999-07-16 2003-04-01 Merial Feline calicivirus genes and vaccines in particular recombinant vaccines
FR2796396A1 (fr) * 1999-07-16 2001-01-19 Merial Sas Gene de calicivirus felin et vaccin recombine les incorporant
FR2796397B1 (fr) * 1999-07-16 2006-09-01 Merial Sas Genes de calicivirus felin et vaccins notamment vaccins recombines
US7078388B2 (en) 2000-01-21 2006-07-18 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
FR2829498B1 (fr) * 2001-09-11 2003-11-28 Merial Sas Igf-1 comme adjuvant de vaccin felin, notamment contre les retrovirus felins
ATE335507T1 (de) * 2002-09-23 2006-09-15 Mologen Ag Impfstoff gegen infektionen mit onkoviren, wie dem felinen leukosevirus der katze
EP2390352A1 (en) 2003-03-18 2011-11-30 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
EP1689858B1 (en) 2003-11-13 2013-05-15 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of characterizing infectious bursal disease virus
US20050202484A1 (en) 2004-02-19 2005-09-15 The Governors Of The University Of Alberta Leptin promoter polymorphisms and uses thereof
CN101208104B (zh) 2005-04-25 2012-10-31 梅瑞尔有限公司 Nipah病毒疫苗
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
WO2007056614A1 (en) 2005-11-14 2007-05-18 Merial Limited Gene therapy for renal failure
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
JP2010525812A (ja) 2007-05-02 2010-07-29 メリアル リミテッド 発現及び安定性が改善されたｄｎａプラスミド
EP2998315B2 (en) 2009-04-03 2021-11-03 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Newcastle disease virus vectored avian vaccines
PL2611460T3 (pl) 2010-08-31 2017-02-28 Merial, Inc. Szczepionki przeciw herpeswirusom przenoszone z pomocą wirusa choroby newcastle
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
US20140287931A1 (en) 2011-04-04 2014-09-25 Stichting Het Nederlands Kanker Instituut - Antoni Van Leeuwenhoek Ziekenhuis Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
AU2012240240A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
US9216213B2 (en) 2011-04-20 2015-12-22 Merial, Inc. Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
CA2834288A1 (en) 2011-04-25 2012-11-01 Advanced Bioscience Laboratories, Inc. Truncated hiv envelope proteins (env), methods and compositions related thereto
ES2674439T3 (es) 2011-06-01 2018-06-29 Merial, Inc. Administración sin aguja de vacunas contra el VSRRP
DK2741740T3 (en) 2011-08-12 2017-06-06 Merial Inc VACUUM-SUPPORTED CONSERVATION OF BIOLOGICAL PRODUCTS, IN PARTICULAR OF VACCINES
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
EP2968514A1 (en) 2013-03-12 2016-01-20 Merial, Inc. Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
US10010499B2 (en) 2014-11-03 2018-07-03 Merial Inc. Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus
RU2586504C1 (ru) * 2015-04-29 2016-06-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова" Набор синтетических олигонуклеотидных праймеров и способ его применения для индикации вирусов иммунодефицита и лейкемии кошек в клиническом материале методом мультиплексной полимеразной цепной реакции
CA2990643C (en) 2015-06-23 2023-10-17 Merial, Inc. Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof
FR3044017B1 (fr) * 2015-11-24 2019-05-03 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Procede de transfection transitoire pour la production retrovirale
RU2752498C2 (ru) * 2015-11-24 2021-07-28 Глэксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед Стабильные клеточные линии для продуцирования ретровирусов
CN112921122A (zh) * 2021-03-26 2021-06-08 广西大学 猫常见病毒多重pcr快速检测试剂盒及其引物组
CN112921123B (zh) * 2021-04-06 2022-11-04 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心） 快速检测猫杯状病毒的方法及检测用引物和试剂盒
CN115894716B (zh) * 2022-11-23 2024-02-09 华中农业大学 一种重组融合蛋白纳米颗粒及其制备方法
CN116121282B (zh) * 2023-01-10 2023-09-22 浙江大学 一种表达猫疱疹病毒蛋白的mRNA疫苗及其制备方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5631154A (en) * 1988-06-10 1997-05-20 Therion Biologics, Incorporated Self assembled, defective, non-self-propagating lentivirus particles
CA2020740A1 (en) * 1989-07-12 1991-01-13 Harry Vennema Antigenically active proteins/peptides, and feline infectious peritonitis virus (fipv)-vaccines
WO1991001332A1 (en) * 1989-07-21 1991-02-07 The Upjohn Company Feline calicivirus capsid protein and nucleotide sequence
US5665362A (en) * 1990-09-25 1997-09-09 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Viral vaccines
JPH07504897A (ja) * 1992-02-18 1995-06-01 パーヘリオン　コーポレーション ネコ感染性腹膜炎ワクチンおよび調製方法
AU5138293A (en) * 1992-09-21 1994-04-12 Chiron Viagene, Inc. Recombinant retroviral vector against felv and/or fiv
GB2282601B (en) * 1993-09-16 1998-04-15 Solvay Antigenically-active proteins/polypeptides and coronavirus vaccines containing the same
US6348449B1 (en) * 1993-09-21 2002-02-19 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods of inducing mucosal immunity
TW377373B (en) * 1993-09-22 1999-12-21 Wyeth Corp Recombinant raccoon pox viruses and their use as an effective vaccine against feline infectious peritonitis virus disease
DE69536091D1 (de) * 1994-01-27 2010-09-09 Univ Massachusetts Medical Immunisierung durch Impfung von DNS Transkriptionseinheit
US5529780A (en) * 1994-03-30 1996-06-25 Virogenetics Corporation Nucleotide and amino acid sequences of canine herpesvirus gB and gC
US5833993A (en) * 1994-04-29 1998-11-10 Pharmacia & Upjohn Company Feline immunodeficiency virus vaccine
FR2724385B1 (fr) * 1994-08-29 1996-12-13 Rhone Merieux Vaccin de la peritonite infectieuse feline.

Also Published As

Publication number Publication date
FR2751223A1 (fr) 1998-01-23
US6348196B1 (en) 2002-02-19
EP0934416B1 (fr) 2006-06-21
AR007861A1 (es) 1999-11-24
JP2001500112A (ja) 2001-01-09
DE69736185D1 (de) 2006-08-03
BR9715228B1 (pt) 2011-10-04
KR100687509B1 (ko) 2007-10-12
US7534559B2 (en) 2009-05-19
EP0934416A1 (fr) 1999-08-11
DE69736185T2 (de) 2007-04-19
CZ15999A3 (cs) 1999-06-16
RU2002132832A (ru) 2005-01-20
CA2261345C (en) 2010-09-14
ZA976286B (en) 1999-01-19
AU3699297A (en) 1998-02-10
KR20000065257A (ko) 2000-11-06
PL331247A1 (en) 1999-07-05
WO1998003660A1 (fr) 1998-01-29
NZ333781A (en) 2000-09-29
BR9710497A (pt) 1999-08-17
RU2312676C2 (ru) 2007-12-20
CZ304126B6 (cs) 2013-11-06
CA2261345A1 (en) 1998-01-29
FR2751223B1 (fr) 1998-12-04
BR9710497B1 (pt) 2011-04-05
CZ298613B6 (cs) 2007-11-21
US20030017172A1 (en) 2003-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL191551B1 (pl) Kompozycje immunogenne, plazmidy, zastosowania plazmidów, zestawy oraz szczepionki
US6228846B1 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies
CA2660355C (en) Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse
US6376473B1 (en) Polynucleotide vaccine formula in particular against bovine respiratory pathology
ES2232876T3 (es) Formula de vacuna polinucleotidica aviar.
US7163926B1 (en) Adjuvant-containing vaccines
US7294338B2 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
AU2004205140B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU773266B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU2008203549A1 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU765539B2 (en) Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases
AU2004210602B2 (en) Avian polynucleotide vaccine formula
NZ506427A (en) A canidae vaccine comprising the rabies G gene under the control of the CMV-IE promoter
AU4614101A (en) Avian polynucleotide vaccine formula