CZ297528B6 - Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro - Google Patents
Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro Download PDFInfo
- Publication number
- CZ297528B6 CZ297528B6 CZ20050369A CZ2005369A CZ297528B6 CZ 297528 B6 CZ297528 B6 CZ 297528B6 CZ 20050369 A CZ20050369 A CZ 20050369A CZ 2005369 A CZ2005369 A CZ 2005369A CZ 297528 B6 CZ297528 B6 CZ 297528B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- oocytes
- culture medium
- map kinase
- vitro
- jnk
- Prior art date
Links
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 84
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 239000012825 JNK inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 229940118135 JNK inhibitor Drugs 0.000 title claims abstract description 8
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 title claims abstract description 8
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 title claims abstract description 8
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 claims description 36
- 102000019145 JUN kinase activity proteins Human genes 0.000 claims description 31
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 claims description 30
- 229940122696 MAP kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 27
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 claims description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 9
- 230000035899 viability Effects 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 6
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 5
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 5
- 101000950669 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 9 Proteins 0.000 description 4
- 102100037809 Mitogen-activated protein kinase 9 Human genes 0.000 description 4
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 4
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 4
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 description 4
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 4
- 101001050288 Homo sapiens Transcription factor Jun Proteins 0.000 description 3
- 102100023132 Transcription factor Jun Human genes 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 3
- 230000007159 enucleation Effects 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 3
- ACPOUJIDANTYHO-UHFFFAOYSA-N anthra[1,9-cd]pyrazol-6(2H)-one Chemical compound C1=CC(C(=O)C=2C3=CC=CC=2)=C2C3=NNC2=C1 ACPOUJIDANTYHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000283903 Ovis aries Species 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000008175 fetal development Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešení se týká použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích ovocytů in vitro, kdy se odebrané savčí oocyty kultivují v podmínkách in vitro v kultivačním médiu s přídavkem specifického inhibitoru MAP kinázy JNK. Uchovávání odebraných savčích oocytů v podmínkách in vitro za současné inhibice MAP kinázy JNK zajišťuje zvýšenou životaschopnost oocytů a má velký význam při reprodukčních biotechnologiích u hospodářských zvířat i v asistované reprodukci v humánní medicíně.
Description
Oblast techniky
Vynález se týká použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti odebraných savčích oocytů uchovávaných pro reprodukci po delší dobu v podmínkách in vitro.
Dosavadní stav techniky
Je známo, že oocyty savců (samičí pohlavní buňky) mají po vyjmutí z těla samice omezenou životnost při následné kultivaci v podmínkách in vitro. Po dokončení zrání podléhají spontánně radě nežádoucích procesů, jež je znehodnocují pro další využití v reprodukčních biotechnologiích hospodářských zvířat (klonování, in vitro oplození, transgenoze) i v humánní medicíně (asistovaná reprodukce). Nej významnější z procesů, které ohrožují další životnost oocytů, je fragmentace oocytů, jež je projevem apoptózy, a lýza oocytů, jež je důsledkem jejich nekrózy. Proto jsou intenzívně hledána taková ošetření oocytů, která by těmto procesům zabránila. Možnosti potlačit apoptózu a nekrózu oocytů jsou zatím ale velmi omezeny a tím stále dochází k velkým ztrátám při používání současných reprodukčních technik.
Podstata vynálezu
Výše uvedené nedostatky odstraňuje použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se odebrané savčí oocyty kultivují v podmínkách in vitro v kultivačním médiu s přídavkem specifického inhibitoru MAP kinázy JNK.
Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro podle vynálezu se dále vyznačuje tím, že se odebrané dozrálé savčí oocyty in vitro kultivují před oplodněním v kultivačním médiu s obsahem inhibitoru MAP kinázy JNK po dobu nejméně 3 až 5 dnů, přičemž inhibitor MAP kinázy JNK je používán v koncentracích od 5 do 50 μΜ. Poté jsou oocyty opláchnuty kultivačním médiem, případně jsou přeneseny do čerstvě připraveného kultivačního média s inhibitorem na dobu alespoň 1 až 3 dnů.
Podstata použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro podle vynálezu dále spočívá v tom, že se odebrané savčí oocyty kultivují a zrají in vitro po dobu až 5 dnů s inhibitory MAP kinázy JNK, přičemž výhodná koncentrace inhibitoru MAP kinázy JNP v kultivačním médiu je 5 až 50 μΜ, načež se po případném opláchnutí kultivačním médiem oocyty již po 3 dnech přenesou do čerstvě připraveného kultivačního média s inhibitorem.
Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro se podle vynálezu konkrétně provádí tak, že se dozrálé savčí oocyty, nacházející se ve stádiu zrání metafáze II, zbaví kumulámích buněk opakovaným pipetováním úzkou skleněnou pipetou, potom se propláchnou v kultivačním médiu (např. médium M.199 obohacené o 10 % bovinního telecího Séra) a pak jsou přeneseny do kultivačního média s přídavkem molekul inhibujících MAP kinázu JNK (např. SAPK inhibitor I: H-Gly-Arg-Lys-LysArg-Agr-Gln-Arg-Arg-Arg-Pro-Pro-Arg-Pro-Lys-Arg-Pro-Thr-ThrLeu-Asn-Leu-Phe-Pro-GlnVal-Pro-Arg-Ser-GIn-Asp-Thr-NIL; SAPK inhibitor II:l,9-pyrazoloantron; SAPK inhibitor III: Ac-Tyr-Gly-Arg-LysLys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-gaba-Ile-Leu-Lys-Gln-Ser-Met-Thr-Leu
- 1 CZ 297528 B6
Asn-Leu-Ala-Asp-Pro-Val-Gly-Ser-Leu-Lys-Pro-His-Leu-Arg-Ala-Lys-Asn-NH2 nebo JNK inhibitor IV: (D)-H-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Pro-Pro-Arg-Pro-Lys-Arg-ProThr-Thr-Leu-Asn-Leu-Phe-Pro-Gln-Val-Pro-Arg-Ser-Gln-Asp-Thr-NH2) v koncentracích od 1 do 100 μΜ. V tomto médiu se odebrané oocyty kultivují až po dobu 3 dnů. Pro další kultivaci je výhodné, aby po 3 dnech kultivace byly oocyty opláchnuty v čerstvě připraveném médiu obohaceném o vybraný inhibitor MAP kinázy JNK a následně byly kultivovány opět v čerstvě připraveném médiu obohaceném o inhibitor MAP kinázy JNK. Po ukončení kultivace s cílem prodloužit životaschopnost oocytů in vitro jsou oocyty před dalším použitím propláchnuty v médiu bez inhibitoru a kultivovány běžně známým laboratorním postupem.
Původci vynálezu ověřili, že použitím inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média podle vynálezu jsou u oocytů kultivovaných po dlouhou dobu v podmínkách in vitro potlačeny procesy fragmentace a lýzy oocytů. Například při kultivaci oocytů v médiu s obsahem 30 μΜ 1,9 parazoloantronu po dobu tří dnů nedochází u oocytů prasete vůbec k fragmentaci ani lýze, zatímco při kultivaci dosavadním standardním způsobem dosahuje za stejnou dobu podíl fragmentovaných oocytů zhruba 25 % a podíl lyžovaných oocytů zhruba 10 %. Výsledkem kultivace oocytů v přítomnosti inhibitorů MAP kinázy JNK podle vynálezu je tedy eliminace nežádoucích procesů fragmentace a lýzy oocytů. Podíl oocytů, které si uchovávají prodlouženou životaschopnost použitím inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média podle vynálezu, je podstatně vyšší.
Při oplození oocytů in vitro hospodářských zvířat (ať již metodou kultivace oocytů se spermiemi nebo metodou mikroinjekce spermie do cytoplasmy oocytů) jsou získávány zralé oocyty buď odběrem z těla samice nebo po kultivaci v podmínkách in vitro. Pokud se ale z jakéhokoli důvodu nezdaří tyto oocyty okamžitě oplodnit (např. při zpoždění dodávky spermatu vybraného plemeníka, např. plemenného kance, býka, hřebce), odebrané oocyty rychle ztrácejí na své kvalitě, procházejí procesem stárnutí, což snižuje pravděpodobnost úspěšného oplození i úspěšného a zdravého vývoje zárodku. Následující nežádoucí škody v reprodukci savců jsou velké.
Rovněž při oplození oocytů člověka při léčbě neplodnosti metodami asistované reprodukce (ať již metodou kultivace oocytů se spermiemi nebo metodou mikroinjekce spermie do cytoplasmy oocytů) jsou získávány zralé oocyty buď odběrem z těla budoucí matky nebo jsou tyty oocyty získány po dozrání v podmínkách in vitro. Pokud se ale z jakéhokoli důvodu nezdaří tyto oocyty okamžitě oplodnit (např. při potížích s odběrem spermatu potenciálního otce), oocyty rychle ztrácejí na kvalitě, procházejí procesem stárnutí, což snižuje pravděpodobnost úspěšného oplození a tím i úspěšného a zdravého vývoje zárodku. Negativní následky jsou pak velmi citelné.
Z uvedeného jasně vyplývá, že použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení kultivace oocytů za současné inhibice MAP kinázy JNK podle vynálezu lze využít zejména při reprodukčních biotechnologiích u hospodářských zvířat (např. klonování, in vitro oplození. IVF, ICSI, transgenozi) i v asistované reprodukci v humánní medicíně, kdy při současném snižování porodnosti tato metoda zvláště nabývá na významu.
Při klonování savců obecně dochází ke vnášení jaderné dědičné informace somatické buňky do cytoplasmy oocytů, jež bylo vlastní jaderné dědičné informace zbaveno (bylo enukleováno). Kvalita použitého oocytů významně ovlivňuje úspěšnost celého postupu klonování. Při náročném postupu přenosu jsou oocyty připravené pro klonování uchovávány v podmínkách in vitro. Přitom v nich ale samovolně probíhají procesy stárnutí, které poškozují odebraný oocyt. Pro následný vývoj embrya klonu je nezbytná aktivace takto vzniklé buňky. Pro takové dočasné uchovávání oocytů před enukleací nebo i pro uchovávání enukleovaných oocytů před vlastním přenosem jádra somatické buňky lze s výhodou použít média obohaceného o inhibitory MAP kinázy JNK. Původci vynálezu bylo zjištěno, že takto použité oocyty nebo cytoplasty (oocyty zbavené enukleací jaderné dědičné informace) jsou opět kvalitnější a embrya klonů, která jsou z
-2 CZ 297528 B6 nich vytvořena přenosem jader somatických buněk, jsou životaschopnější, než při dosud používaných postupech. To má pro budoucí vývoj v této oblasti dalekosáhlé možnosti využití.
Následující příklady provedení použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média podle vynálezu pouze dokládají, aniž by ho jakkoliv omezovaly.
Příklady provedení
Příklad 1
Dozrálé prasecí oocyty (600 oocytů) ve stádiu metafáze II byly po dozrání v podmínkách in vitro kultivovány před oplozením v médiu obohaceném o 20 μΜ inhibitoru MAP kinázy JNK 1,9pyrazoloantron. V tomto kultivačním médiu byly kultivovány až do chvíle, kdy je vše připraveno k jejich oplození. Pak byly oocyty opláchnuty médiem bez inhibitoru a následně podrobeny obvyklým procedurám potřebným k oplození in vitro. Takto ošetřené oocyty měly vyšší kvalitu než oocyty, které by byly před oplozením kultivovány podle dosavadních postupů bez inhibitoru MAP kinázy JNK, a i vzniklá embrya byla životaschopnější. Úspěšnost reprodukce s oocyty kultivovanými podle vynálezu byla při opakovaných pokusech u selat v průměru 52 až 86 % (u reprodukce podle dosavadního způsobu zacházení s oocyty bývá cca 45 %).
Při ověřování použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média podle vynálezu na prodloužení životnosti odebraných oocytů in vitro u telat, hříbat, jehňat a kůzlat bylo původci vynálezu potvrzeno zvýšení životaschopnosti oocytů v průměru o 15 až 25 % oproti současně používaným způsobům reprodukce hospodářských zvířat.
Příklad 2
Dozrálé lidské oocyty (20 oocytů) ve stádiu metafáze II byly kultivovány před oplozením v médiu obohaceném o 20 μΜ inhibitoru MAP kinázy JNK 1,9-pyrazoloantron. V tomto kultivačním médiu byly kultivovány až do chvíle, kdy je vše připraveno k jejich oplození. Pak byly oocyty opláchnuty médiem bez inhibitoru a následně podrobeny obvyklým postupům potřebným k oplození in vitro. Takto ošetřené oocyty mají vyšší kvalitu a i vzniklá embrya jsou životaschopnější o cca 10 až 15 % než oocyty, které by byly před oplozením kultivovány bez inhibitoru MAP kinázy JNK.
Příklad 3
Dozrálé prasečí oocyty (50 oocytů) ve stádiu metafáze II byly po dozrání v podmínkách in vitro kultivovány v médiu obohaceném o 20 μΜ inhibitoru MAP kinázy JNK 1,9-pyrazoloantron. V tomto médiu byly drženy až do chvíle, kdy z nich byly enukleací připraveny cytoplasty pro následný přenos jader somatických buněk. Po přenosu jader do cytoplastů z takto ošetřených oocytů byl pozorován vývoj do stádia blastocyty v 20 % případů. Pokud byly oocyty nechány před přípravou cytoplastů stejně dlouhou dobu bez inhibitoru MAP kinázy JNK, jejich kvalita se zhoršila natolik, že je nebylo možné pro klonování použít v důsledku Vysoké náchylnosti k fragmentaci (zániku programovanou smrtí - apoptózou).
-3 CZ 297528 B6
Průmyslová využitelnost
Řešení se tyká prodlouženého uchovávání Savčích oocytů v podmínkách in vitro za současné inhibice MAP kinázy JNK, což má velký význam při reprodukčních biotechnologiích u hospodářských zvířat i v asistované reprodukci v humánní medicíně.
Vysvětlení zkratek použitých v textu:
| MAP JNK | mitogeny aktivovaná protein kináza c-Jun NH2 koncová kináza (c-Jun NH2 terminál kinase) |
| SAPK | synonymum k JNK, (stress-activated protein kinase) stresem aktivovaná protein kináza |
| MAP kináza JNK | c-Jun NH2 koncová kináza patřící do skupiny mitogeny aktivovaných protein mináž |
| IVF 1CSI | in vitro oplodnění (in vitro fertization) intracytoplazmatická injekce spermie (intracytoplasmic sperm injection) |
PATENTOVÉ NÁROKY
1. Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro, kdy se odebrané savčí oocyty kultivují v podmínkách in vitro v kultivačním médiu s přídavkem specifického inhibitoru MAP kinázy JNK.
Claims (3)
1. Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro, kdy se odebrané savčí oocyty kultivují v podmínkách in vitro v kultivačním médiu s přídavkem specifického inhibitoru MAP kinázy JNK.
2. Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média, podle nároku 1, kdy se odebrané dozrále savčí oocyty in vitro kultivují před oplodněním v kultivačním médiu s obsahem inhibitoru MAP kinázy JNK po dobu nejméně 3 až 5 dnů, přičemž koncentrace inhibitoru MAP kinázy JNK v kultivačním médiu je 5 až 50 μΜ, poté jsou oocyty opláchnuty kultivačním médiem, případně jsou přeneseny do čerstvě připraveného kultivačního média s inhibitorem na dobu alespoň 1 až 3 dnů.
3. Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média, podle nároku 1, kdy se odebrané savčí oocyty kultivují a zrají in vitro po dobu až 5 dnů s inhibitory MAP kinázy JNK, přičemž výhodná koncentrace inhibitoru MAP kinázy JNK v kultivačním médiu je 5 až 50 μΜ, poté se po případném opláchnutí kultivačním médiem oocyty již po 3 dnech přenesou do čerstvě připraveného kultivačního média s inhibitorem.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20050369A CZ2005369A3 (cs) | 2005-06-10 | 2005-06-10 | Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20050369A CZ2005369A3 (cs) | 2005-06-10 | 2005-06-10 | Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ297528B6 true CZ297528B6 (cs) | 2007-01-03 |
| CZ2005369A3 CZ2005369A3 (cs) | 2007-01-03 |
Family
ID=37684151
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20050369A CZ2005369A3 (cs) | 2005-06-10 | 2005-06-10 | Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ2005369A3 (cs) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ302912B6 (cs) * | 2009-08-10 | 2012-01-18 | Ceská zemedelská univerzita v Praze | Použití inhibitoru vápníkových kanálu typu L pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro |
| CZ302925B6 (cs) * | 2009-08-10 | 2012-01-18 | Výzkumný ústav živocišné výroby, v. v. i. | Použití aktivátoru draslíkových kanálu závislých na ATP pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001058448A1 (fr) * | 2000-02-09 | 2001-08-16 | Shionogi & Co., Ltd. | Inhibiteur d'apoptose |
| EP1506784A1 (en) * | 2003-07-25 | 2005-02-16 | University of Chicago | Identification of novel factors that block programmed cell death or apoptosis by targeting JNK |
-
2005
- 2005-06-10 CZ CZ20050369A patent/CZ2005369A3/cs not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001058448A1 (fr) * | 2000-02-09 | 2001-08-16 | Shionogi & Co., Ltd. | Inhibiteur d'apoptose |
| EP1506784A1 (en) * | 2003-07-25 | 2005-02-16 | University of Chicago | Identification of novel factors that block programmed cell death or apoptosis by targeting JNK |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Christoph, P. et al.: "c-Jun N-terminal Kinase Activation in Xenopus laevis Eggs and Embryos", J. Biol. Chem. 276(2), 1459-1465, 2001 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ302912B6 (cs) * | 2009-08-10 | 2012-01-18 | Ceská zemedelská univerzita v Praze | Použití inhibitoru vápníkových kanálu typu L pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro |
| CZ302925B6 (cs) * | 2009-08-10 | 2012-01-18 | Výzkumný ústav živocišné výroby, v. v. i. | Použití aktivátoru draslíkových kanálu závislých na ATP pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2005369A3 (cs) | 2007-01-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bavister et al. | Development of in vitro matured/in vitro fertilized bovine embryos into morulae and blastocysts in defined culture media | |
| RU2018109958A (ru) | Культуральная среда | |
| Lacham-Kaplan et al. | Fertilization of mouse oocytes using somatic cells as male germ cells | |
| CN112501114A (zh) | 提高牛体外受精效率的方法 | |
| US20080268419A1 (en) | Supplementation for Embryo and/or Cell Manipulation Media | |
| Pope | Thirty years of assisted reproductive technology in the domestic cat: A selected summary | |
| CZ299271B6 (cs) | Použití inhibitoru histon deacetylázy pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro | |
| CZ297528B6 (cs) | Použití inhibitoru MAP kinázy JNK pro přípravu kultivačního média na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro | |
| CZ2010579A3 (cs) | Kultivacní medium na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro a zpusob tohoto prodloužení | |
| CN110684720B (zh) | 一种以异种动物间的卵母细胞为介质获得雄原核的方法 | |
| CZ302925B6 (cs) | Použití aktivátoru draslíkových kanálu závislých na ATP pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro | |
| CZ302912B6 (cs) | Použití inhibitoru vápníkových kanálu typu L pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro | |
| CZ2007763A3 (cs) | Použití inhibitoru proteasomu pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro | |
| CZ299219B6 (cs) | Zpusob prodloužení životnosti savcích oocytu v podmínkách in vitro | |
| CZ21336U1 (cs) | Kultivační médium na prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro | |
| CZ2014230A3 (cs) | Kultivační médium pro prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro | |
| CZ26979U1 (cs) | Kultivační médium pro prodloužení životnosti savčích oocytů in vitro | |
| US10485584B2 (en) | Supplement for cultivation of mammalian embryos | |
| KR101169762B1 (ko) | 신규한 난모세포 매개된 유전자 이식 방법 및 그를 통한 형질전환 배아 생산방법 | |
| Krivokharchenko et al. | Fertilization and subsequent development of cattle oocytes after reduced incubation with spermatozoa | |
| Mohyuddin et al. | Recent advances in oocytes in-vitro maturation process in bovines. | |
| CZ307949B6 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem C | |
| NGUYEN | DEVELOPMENT OF EMBRYO BIOTECHNOLOGY AT VIETNAM ACADEMY FOR SCIENCES AND TECHNOLOGY | |
| CZ2018320A3 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem B | |
| CZ2018344A3 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem C |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20120610 |