CZ296517B6 - Makromonomery na bázi polyethylenglykolu, chemicky inertní polymery pripravené z techto makromonomeru a pouzití techto polymeru pro organické syntézya enzymatické reakce - Google Patents
Makromonomery na bázi polyethylenglykolu, chemicky inertní polymery pripravené z techto makromonomeru a pouzití techto polymeru pro organické syntézya enzymatické reakce Download PDFInfo
- Publication number
- CZ296517B6 CZ296517B6 CZ20011037A CZ20011037A CZ296517B6 CZ 296517 B6 CZ296517 B6 CZ 296517B6 CZ 20011037 A CZ20011037 A CZ 20011037A CZ 20011037 A CZ20011037 A CZ 20011037A CZ 296517 B6 CZ296517 B6 CZ 296517B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- polymer
- aryl
- resin
- alkyl
- macromonomer
- Prior art date
Links
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 title claims abstract description 64
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 title claims abstract description 43
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title claims description 11
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 title claims description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 27
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 25
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 25
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 23
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 90
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 90
- -1 chloro, bromo, iodo, toluenesulfonyloxy Chemical group 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 12
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 11
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 claims description 10
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 7
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 6
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 5
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 4
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 claims description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 238000010557 suspension polymerization reaction Methods 0.000 claims description 4
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 238000010526 radical polymerization reaction Methods 0.000 claims description 3
- NLQMSBJFLQPLIJ-UHFFFAOYSA-N (3-methyloxetan-3-yl)methanol Chemical compound OCC1(C)COC1 NLQMSBJFLQPLIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000011951 cationic catalyst Substances 0.000 claims description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims 1
- HHPVRVUAHANVFL-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-3-[2-[2-(3-methyloxetan-3-yl)ethoxy]ethyl]oxetane Chemical group C1OCC1(C)CCOCCC1(C)COC1 HHPVRVUAHANVFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- MLCSTPFHRGUHIT-UHFFFAOYSA-N C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)CCCC(=O)C=C Chemical compound C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)CCCC(=O)C=C MLCSTPFHRGUHIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 claims 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 1
- DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N Phenylpropanol Chemical compound CCC(O)C1=CC=CC=C1 DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical group [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 claims 1
- 150000004703 alkoxides Chemical class 0.000 claims 1
- 125000001118 alkylidene group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003968 arylidene group Chemical group [H]C(c)=* 0.000 claims 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims 1
- 239000012039 electrophile Substances 0.000 claims 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 claims 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 claims 1
- 229950009195 phenylpropanol Drugs 0.000 claims 1
- 150000003109 potassium Chemical class 0.000 claims 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 claims 1
- 150000003385 sodium Chemical class 0.000 claims 1
- 238000010996 solid-state NMR spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical group OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 abstract description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 abstract 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 109
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 108
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 41
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 15
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000001906 matrix-assisted laser desorption--ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 10
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 9
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 8
- AHHWIHXENZJRFG-UHFFFAOYSA-N oxetane Chemical compound C1COC1 AHHWIHXENZJRFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 229920002535 Polyethylene Glycol 1500 Polymers 0.000 description 7
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 6
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 5
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 5
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 5
- NDKDFTQNXLHCGO-UHFFFAOYSA-N 2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 NDKDFTQNXLHCGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SFYDWLYPIXHPML-UHFFFAOYSA-N 3-nitro-1-(2,4,6-trimethylphenyl)sulfonyl-1,2,4-triazole Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)N1N=C([N+]([O-])=O)N=C1 SFYDWLYPIXHPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- VUYXVWGKCKTUMF-UHFFFAOYSA-N tetratriacontaethylene glycol monomethyl ether Chemical compound COCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO VUYXVWGKCKTUMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 3
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 238000006053 organic reaction Methods 0.000 description 3
- 125000006544 oxetanylalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- JZTKZVJMSCONAK-INIZCTEOSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 JZTKZVJMSCONAK-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=CC=C1 SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 2
- CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N 0.000 description 2
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RRAGVEWGNDPGTH-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-3-[3-[(3-methyloxetan-3-yl)methoxy]but-2-en-2-yloxymethyl]oxetane Chemical compound CC1(COC1)COC(=C(C)OCC1(COC1)C)C RRAGVEWGNDPGTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DJPIFLWJMKNULD-UHFFFAOYSA-N 5-chloropent-1-en-3-ylbenzene Chemical compound ClCCC(C=C)C1=CC=CC=C1 DJPIFLWJMKNULD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OZAIFHULBGXAKX-VAWYXSNFSA-N AIBN Substances N#CC(C)(C)\N=N\C(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 2
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 description 2
- KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine Chemical compound CN(C)CCN(C)C KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 2
- FYJKEHKQUPSJDH-UHFFFAOYSA-N [dimethyl-(trimethylsilylamino)silyl]methane;potassium Chemical compound [K].C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FYJKEHKQUPSJDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 2
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N boron trifluoride Chemical compound FB(F)F WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N bromo(trimethyl)silane Chemical compound C[Si](C)(C)Br IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 238000007824 enzymatic assay Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisilazane Chemical compound C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 2
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 150000002921 oxetanes Chemical class 0.000 description 2
- 125000003566 oxetanyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- NHKJPPKXDNZFBJ-UHFFFAOYSA-N phenyllithium Chemical compound [Li]C1=CC=CC=C1 NHKJPPKXDNZFBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- XMVJITFPVVRMHC-UHFFFAOYSA-N roxarsone Chemical group OC1=CC=C([As](O)(O)=O)C=C1[N+]([O-])=O XMVJITFPVVRMHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBWXMLUKXRLLOR-UHFFFAOYSA-N (3-methyloxetan-2-yl)methanol Chemical compound CC1COC1CO FBWXMLUKXRLLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dichloroethane Chemical compound CC(Cl)Cl SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWBTXZPDTSKZJU-UHFFFAOYSA-N 3-[dimethyl(trimethylsilyloxy)silyl]propyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCC[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C NWBTXZPDTSKZJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSEUTNUOSSFCBO-UHFFFAOYSA-N 5-(3-phenylpent-4-enoxy)pent-1-en-3-ylbenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=C)CCOCCC(C=C)C1=CC=CC=C1 QSEUTNUOSSFCBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n,2-n-diethylpyrimidine-2,4-diamine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(N)=CC(Cl)=N1 XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZYASLTYCYTYKFC-UHFFFAOYSA-N 9-methylidenefluorene Chemical compound C1=CC=C2C(=C)C3=CC=CC=C3C2=C1 ZYASLTYCYTYKFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HAHFLCWVYBLDQV-UHFFFAOYSA-N 9h-fluoren-9-ylmethyl 2,5-dioxopyrrolidine-3-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)C1CC(=O)NC1=O HAHFLCWVYBLDQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910015900 BF3 Inorganic materials 0.000 description 1
- ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N Bipyridyl Chemical group N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1 ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEESUMVUTRKGDY-UHFFFAOYSA-N CC(C(C)OC(COC(C)=O)C1OC(C)=O)C1OC(C)=O Chemical compound CC(C(C)OC(COC(C)=O)C1OC(C)=O)C1OC(C)=O ZEESUMVUTRKGDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 0 COC(C1O)OC(*O)C(*)C1O Chemical compound COC(C1O)OC(*O)C(*)C1O 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 238000005004 MAS NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007239 Wittig reaction Methods 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000003926 acrylamides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 125000005228 aryl sulfonate group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 150000001649 bromium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229940045348 brown mixture Drugs 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000012539 chromatography resin Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- LSXWFXONGKSEMY-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl peroxide Chemical compound CC(C)(C)OOC(C)(C)C LSXWFXONGKSEMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- SBZXBUIDTXKZTM-UHFFFAOYSA-N diglyme Chemical compound COCCOCCOC SBZXBUIDTXKZTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000000816 ethylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052735 hafnium Inorganic materials 0.000 description 1
- VBJZVLUMGGDVMO-UHFFFAOYSA-N hafnium atom Chemical compound [Hf] VBJZVLUMGGDVMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- WIWXVPHATMUPGK-UHFFFAOYSA-N hexadecyl 3-(trimethylazaniumyl)propyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOP([O-])(=O)OCCC[N+](C)(C)C WIWXVPHATMUPGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004678 hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Chemical group 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011968 lewis acid catalyst Substances 0.000 description 1
- 229910000103 lithium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 150000002734 metacrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- VHRYZQNGTZXDNX-UHFFFAOYSA-N methacryloyl chloride Chemical compound CC(=C)C(Cl)=O VHRYZQNGTZXDNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- JNMIXMFEVJHFNY-UHFFFAOYSA-M methyl(triphenyl)phosphanium;iodide Chemical compound [I-].C=1C=CC=CC=1[P+](C=1C=CC=CC=1)(C)C1=CC=CC=C1 JNMIXMFEVJHFNY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- CMWYAOXYQATXSI-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylformamide;piperidine Chemical compound CN(C)C=O.C1CCNCC1 CMWYAOXYQATXSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCHKEJKUUXXBSM-UHFFFAOYSA-N n-benzyl-2-(3-formylindol-1-yl)acetamide Chemical compound C12=CC=CC=C2C(C=O)=CN1CC(=O)NCC1=CC=CC=C1 RCHKEJKUUXXBSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001400 nonyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000001451 organic peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002952 polymeric resin Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- NTTOTNSKUYCDAV-UHFFFAOYSA-N potassium hydride Chemical compound [KH] NTTOTNSKUYCDAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000105 potassium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002133 sample digestion Methods 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 229910052715 tantalum Inorganic materials 0.000 description 1
- GUVRBAGPIYLISA-UHFFFAOYSA-N tantalum atom Chemical compound [Ta] GUVRBAGPIYLISA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001425 triazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N triethyl orthoformate Chemical compound CCOC(OCC)OCC GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N triethyl phosphonoacetate Chemical compound CCOC(=O)CP(=O)(OCC)OCC GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSRZQMIRAZTJOY-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl iodide Substances C[Si](C)(C)I CSRZQMIRAZTJOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N yttrium atom Chemical compound [Y] VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/04—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers only
- C08G65/22—Cyclic ethers having at least one atom other than carbon and hydrogen outside the ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F283/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers provided for in subclass C08G
- C08F283/06—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers provided for in subclass C08G on to polyethers, polyoxymethylenes or polyacetals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F290/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups
- C08F290/02—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups on to polymers modified by introduction of unsaturated end groups
- C08F290/06—Polymers provided for in subclass C08G
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F290/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups
- C08F290/02—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups on to polymers modified by introduction of unsaturated end groups
- C08F290/06—Polymers provided for in subclass C08G
- C08F290/062—Polyethers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polyethers (AREA)
- Macromonomer-Based Addition Polymer (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Epoxy Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Polymerisation Methods In General (AREA)
Abstract
Makromonomery obsahující ethylenglykolové opakující se jednotky, chemicky inertní polymery pripravené z techto monomeru a pouzití takových polymeru pri biochemických testech provádených v pevné fázi.Makromonomer polyethylenglykolu má 6 az 300 opakujících se jednotek a alespon jeden konec zakoncenýetherovou skupinou obecného vzorce I, ve kterém mznamená celé císlo od 0 do 10, a znamená celé císlo od 1 do 4 a R znamená atom vodíku, nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu; nebo etherovou skupinou obecného vzorce II, ve kterém m znamená celé císlo od 0 do 10 a R znamená atom vodíkunebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
Description
Meldal Morten, Frederiksberg, DK Buchardt Jens, Copenhagen K., DK Rademann Jorg, Copenhagen, DK (74) Zástupce:
Dr. Karel Čermák, Národní třída 32, Praha 1, 11000 (54) Název vynálezu:
Makromonomery na bázi polyethylenglykolů, chemicky inertní polymery připravené z těchto makromonomerů a použití těchto polymerů pro organické syntézy a enzymatické reakce (57) Anotace:
Makromonomery obsahující ethylenglykolové opakující se jednotky, chemicky inertní polymery připravené z těchto monomerů a použití takových polymerů při biochemických testech prováděných v pevné fázi. Makromonomer polyethylenglykolů má 6 až 300 opakujících se jednotek a alespoň jeden konec zakončený etherovou skupinou obecného vzorce I, ve kterém m znamená celé číslo od 0 do 10, a znamená celé číslo od 1 do 4 a R znamená atom vodíku, nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu; nebo etherovou skupinou obecného vzorce II, ve kterém m znamená celé číslo od 0 do 10 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
Makromonomery na bázi polyethylenglykolů, chemicky inertní polymery připravené z těchto makromonomerů a použití těchto polymerů pro organické syntézy a enzymatické reakce
Oblast techniky
Vynález se týká makromonomerů obsahujících ethylenglykolové opakující se jednotky, chemicky inertních polymerů připravených z těchto makromonomerů a použití těchto polymerů při biochemických testech prováděných v pevné fázi.
Dosavadní stav techniky
Použití polyethylenglykolů zakončeného akrylamidem při přípravě zesíťovaných polymerů je popsáno v mezinárodní patentové přihlášce WO 93/16118 a UK 9609911.4. Tyto polymery jsou použitelné zejména jako pevné nosiče pro syntézu peptidů, oligonukleotidů nebo oligosacharidů nebo jako substráty pro imobilizaci proteinů nebo jako chromatografícké pryskyřice. Zcela bobtnají ve vodě a lze je použít pro enzymatické testy prováděné v pevné fázi. Kromě toho, že lze takto vyrobené polymery použít jako nosiče pro polypeptidovou syntézu, lze eliminací nestabilních vazeb v základním řetězci polymemí matrice a náhradou těchto vazeb chemicky nestabilnějšími vazbami uzpůsobit tyto polymery tak, že mohou být rovněž použity jako nosiče pro provádění širokého spektra organických reakcí.
Zatímco všechny doposud popsané pryskyřice na bázi polyethylenglykolů jsou při drsných a běžně používaných reakčních podmínkách jakými je například prostředí anhydridu kyseliny octové a Lewisovy kyseliny, thionylchloridu, butyllithia nebo kaliumhexamethyldisilazanu, poměrně nestabilní, měl by být polymer, který obsahuje kromě vazeb CH a CC pouze stabilní primární etherové vazby, za těchto podmínek zcela stabilní.
Na základě výše uvedených požadavků byla vyvinuta řada makromonomerů exetanem nebo vinylfenylpropyletherem zakončených polyethylenglykolů a polypropylenglykolů, ze kterých lze připravit zesíťované pryskyřice, ve kterých jsou nestabilní vazby dříve popsaných polymerů na bázi polyethylenglykolů nahrazeny stabilními etherovými vazbami za současného zachování optimální vyváženosti hydrofílně hydrofobního charakteru.
Podstata vynálezu
Vynález se týká makromonomerů typu A který má strukturu
ve kterém ň znamená reální číslo od 6 do 300 a ft rovněž znamená průměrnou hodnotu n a ve kterém X a Y každý nezávisle znamená skupinu obecného vzorce
ve kterém m znamená celé číslo od 0 do 10 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, nebo ve kterém X znamená -OH a Y znamená skupinu obecného vzorce:
Z ve kterém m znamená 0 až 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo aiylalkylovou skupinu, nebo ve kterém X a Y každý nezávisle znamená skupinu obecného vzorce
O
Z ve kterém m znamená 1 až 10 a R znamená atom vodíku, alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, nebo ve kterém X znamená -OH a Y znamená skupinu obecného vzorce
O
Z ve kterém m znamená 1 až 10 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, aiylovou nebo arylalkylovou skupinu.
Vynález se rovněž týká makromonomeru typu B, který má strukturu:
ve kterém R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu a fí znamená reálné číslo od 6 do 300, jak je definováno výše, a ve kterém X, Y a Z každý nezávisle znamená -OH nebo skupinu obecného vzorce
ve kterém m znamená celé číslo od 0 do 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, za předpokladu, že alespoň jeden z X, Y a Z znamená skupinu obecného vzorce
-2CZ 296517 B6 ve kterém m znamená celé číslo od 0 do 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, nebo ve kterém X, Y a Z každý nezávisle znamená-OH nebo skupinu obecného vzorce ve kterém m znamená celé číslo od 1 do 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, za předpokladu, že alespoň jeden z X, Y a Z znamená skupinu obecného vzorce ve kterém m znamená celé číslo od 1 do 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
Výraz „alkylová skupina“ označuje v tomto kontextu alifatický zbytek s 1 až 10 atomy uhlíku, kterým je např. methylová skupina, ethylová skupina, propylová skupina, izopropylová skupina, butylová skupina, izobutylová skupina, sefcbutylová skupina, íerc.butylová skupina, pentylová skupina, hexylová skupina, heptylová skupina, oktylová skupina, nonylová skupina nebo decylová skupina. Výraz „arylalkylová skupina“ označuje arylovou skupinu navázanou na alkylenový řetězec s 1 až 5 atomy uhlíku, jakým je např. methylenová skupina, ethylenová skupina nebo propylenová skupina, přičemž arylovou skupinou může být monocyklickánebo dicyklická aromatická skupina typu, který zahrnuje normální karbocyklické aromatické typy jakými jsou např. fenylová skupina, naftylová skupina a bifenylová skupina, a stejně tak heterocyklické typy, jakými jsou pyridylová skupina, bipyridylová skupina, imidazolylová skupina, triazolylová skupina, pyrrolylová skupina, bipyrrolylová skupina, thiazolylová skupina a oxazolylová skupina.
Dolní index „a“ použitý u substituentu R označuje, kolikrát je R celkem přítomen ve fenylovém kruhu, přičemž každý substituent R lze zvolit nezávisle na ostatních substituentech R.
Dolní index „fí“ má výše definovaný význam, tj. znamená reálné číslo od 6 do 300 a označuje průměrný počet ethylenoxyskupin, které jsou přítomny vmakromonomeru.
Makromonomery podle vynálezu lze běžně připravit uvedením vhodného polyethylenglykolového derivátu alkalického kovu, jakým je např. lithium, vodík, draslík nebo cesium, výhodně sodík, do reakce s vhodným halogenem substituovaným, např. bromem, chlorem nebo jódem substituovaným, nebo arylsulfonátem substituovaným, např. tosylem substituovaným, vinylenylalkylovým nebo oxetanylalkylovým derivátem, které poskytne odpovídající polyethylenlykol zakončený vinylfenylalkylovou skupinou nebo oxetanylalkylovou skupinou.
Polyethylenglykol může být „hvězdicového“ typu, který se připraví z makromonomeru obsahujícího 5 nebo 6 větší vybíhajících z aromatického nebo alifatického atomu uhlíku, jenž je substituován polyethylenglykolovými řetězci, nebo „T“ typu, ve kterém má makromonomer 3 větve vybíhající z terciálního nebo kvartémího atomu uhlíku.
Polyethylenglykolový derivát alkalického kovu, kde alkalickým kovem je lithium, sodík, draslík nebo cesium, lze připravit reakcí alkalického kovu, např. sodíku, draslíku, lithia, nebo hydridu
-3CZ 296517 B6 alkalického kovu, např. hydridu sodného, hydridu draselného, hydridu lithného, nebo záměnou s alkylovou solí nebo alkoxy solí nebo solí jiného alkalického kovu, např. butyllithia, KOtBu, Cs2CO3, KHMDS.
Makromonomery zakončené vinylfenylalkylovou skupinou lze polymerovat za použití radikálového iniciátoru, jakým je anorganický nebo organický peroxid, např. persíran amonný, í-butylperoxid, kyselina metachlorperbenzová nebo AIBN, za vzniku zesíťované pryskyřice. Podobně lze makromonomery zakončené oxetanylalkylovou skupino polymerovat za použití kationtového katalyzátoru, jakým je např. Et2O:BF3, TMSOTf, TfOH, TMSBr, TMSI, TiCl4 nebo ZnBr2, nebo soli nebo halogenidy hafnia, yttria, tantalu a železa, za vzniku zesíťované pryskyřice.
Vynález se dále týká zesíťovaného polymeru vytvořeného blokovou polymerací produktů reakce mezi polyethylenglykolovými deriváty obsahujícími 1 nebo 2 atomy alkalického kovu s vinylfenylalkylovým derivátem obecného vzorce
ve kterém Z znamená atom chloru, atom bromu, atom jodu, toluensulfonyloxyskupinu, CH3SO3 nebo CF3SO3, a znamená celé číslo od 1 do 4, m znamená celé číslo od 0 do 10 a R znamená alkylolovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
Syntézu sloučeniny, která spadá do této třídy, lze provádět například následujícím způsobem.
ÍMg(1.5eq.),
Br(CH2)2Br (0.04 eq.),
I2 (malé zrno) THF
Cl -----►
Br(CH2)3Cl (2 eq.) UCuCU (0.01 eq.) THF ofc
Λ
------>-
H
NaH, 2x1.5 eqv
THF, 50° C Jn PEGl500
-4CZ 296517 B6
Vynález se rovněž týká zesíťovaného polymeru připraveného blokovou polymerací produktů, které se získají uvedením polyethylenglykolového derivátu s 1 nebo 2 atomy alkalického kovu do reakce s oxetanovým nebo oxetanylalkylovým derivátem obecného vzorce:
z^?o ve kterém Z znamená atom chloru, atom bromu, atom jodu, toluensulfonyloxyskupinu, CH3SO3 nebo CF3SO3, m znamená celé číslo od 1 do 10 a R znamená alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
Cleny této skupiny sloučenin lze připravit následujícím způsobem:
Oxetanem derivované polymery lze připravit v suspenzní (perlové) formě nebo rozpuštěním oxetanylovaného makromonomerů v určitém množství rozpouštědla (např. acetonitrilu) a suspendováním této směsy v silikonovém oleji v přítomnosti povrchově aktivního činidla, kterým je zpravidla polymer získaný radikálovou polymerací monomethyletheru methakryloxypropyl15 pentamethyldisiloxanu a methakryloyl-PEG-350. Bezprostředně před suspendací v oleji se za nízké teploty přidá Lewisova kyselina, kterou je fluorid boritý.
Polymer lze modifikovat dočasným síťovacím činidlem, které se později selektivně odštěpí a poskytne tak polymer s množství dalšího růstu. Této modifikace lze zpravidla dosáhnout zabudo20 váním bis(3-methyl-3-oxetanylmethoxy)-2-butenu a později se dvojná vazba rozštěpí ozonolytickou nebo rutheniem katalyzovanou metatetickou reakcí za použití přebytku ethylenu.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 Schematicky znázorňuje reakce, které jsou součástí přípravy vinylfenylalkyletherem zakončeným polyethylenglykolových makromonomerů a oxetanem zakončeným polyethylenglykolmakromonomerů.
Obr. 2 Znázorňuje zesíťovanou pryskyřici získanou polymerací vinylfenylalkyletherem zakončeného polyethylenglykolů.
Obr. 3 Znázorňuje pryskyřici získanou polymerací oxetanem zakončeného polyethylenglykolů.
Obr. 4 Znázorňuje gelové 13C NMR spektrum zesíťovaného polymeru z obr. 2 derivovaného pomocí Fmoc-Gly.
Obr. 5 Znázorňuje „a magie angle spinning solid phase“ 'H NMR spektrum záření zvoleného při 3,67 ppm tak, aby potlačilo PEG signál zesíťovaného polymeru z obr. 2 po acylaci pomocí 40 Fmoc-Gly. Rozlišená spektra a podobné výsledky se získaly i pro pryskyřici z obr. 3.
Obr. 6 Znázorňuje gelové 13C NMR spektrum zesíťovaného polymeru z obr. 3.
Obr. 7 Znázorňuje organické reakce, které lze úspěšně provádět na pryskyřici připravené polyme45 raci makromonomerů derivovaných 3-methyloxetan-3-ylmethylovou skupinou.
-5CZ 296517 B6
Obr. 8 Znázorňuje enzymatický test v pevné fázi, při kterém se fluorescenci zhášecí substrát navázaný na pryskyřici, připravenou z vinylfenylpropyl-PEG makromonomerů, odštěpí od polymemí sítě jednohodinovou Calbergovou migrací. Stejné výsledky se získaly i při použití SPOCC polymeru.
Obr. 9 znázorňuje perličkovou SPOCC pryskyřici získanou polymerací v silikonovém oleji.
Následující příklady mají pouze ilustrativní charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen přiloženými patentovými nároky.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
3- Methyl-3-(4-toluensulfonoxymethyl)oxetan
4— Toluensulfonylchlorid (20 g, 105 mmol) se rozpustil v dichlormethanu (50 ml) a pyridinu (50 ml). Za chlazení v ledové lázni se do tohoto roztoku po kapkách přidal 3-hydroxymethyl-3methyloxetan (100 mmol, 9,9 ml). Reakční směs se ohřívala přes noc na pokojovou teplotu. Potom se naředila dichlormethanem (100 ml) a extrahoval vodou. Organická fáze se vysušila síranem hořečnatým, přefiltrovala a odpařováním zbavila rozpouštědel. Zbytky se několikrát odpařovaly společně s toluenem, čímž se zbavily zbytkového pyridinu, a s chloroformem, čímž se odstranil toluen. Získaný surový produkt měl dostatečnou čistotu pro další použití. Tímto způsobem se získalo 22 g bílé krystalické pevné látky (92% výtěžek). TLC: Rf (petrolether/ethylacetát 1:1) 0,56. Výsledky spektroskopické analýzy odpovídaly údajům uvedeným v literatuře (Dále J.; Fredriksen S.B. Act. Chem. Scand. B Í992,46, 217-277).
Příklad 2
Bis-oxytanylovanýpolyethylenglykol (bis(3-methyl-3-oxetanylmethoxy)-PEG)
Polyethylenglykol (-A00 nebo -1500; 10 mmol) se opatrně vysušil společným odpařováním vody s toluenem. Potom se rozpustil v toluenu a dimethylformamidu (15 ml každého). Zamícháním se při pokojové teplotě přidal kaliumhexamethyldisilazan(dále je KHMDS) (22 mmol) a po 15 minutách se na vodní lázni (50 °C) a rotační odparce odpařila rozpouštědla společně s HMDS. Zbývající draslíkem substituovaný PEG se opět rozpustil v dimethylformamidu (15 ml). Při pokojové teplotě se po částech přidal tosylovaný oxetanový derivát (24 mmol) a reakční směs se 12 hodin ohřívala na 75 °C. Po ochlazení na pokojovou teplotu se přidala voda (2 ml) a směs se 15 min míchala ve snaze zcela hydrolyzovat nezreagované alkylační činidlo. Rozpouštědla se odstranila za sníženého tlaku při 40 °C. Zbývající suspenze se resuspendovala v dichlormethanu a přefiltrovala přes vrstvu křemeliny (Cellita) (2 cm křemeliny na skleněném filtru, která byla zvlhčena organickým rozpouštědlem a slisovaná) a na závěr odpařila do sucha. Tímto způsobem se získalo 90 % sloučeniny 2a. NMR acetylovaného produktu naznačila více než 95% alkylaci PEG-hydroxyskupin oxetanovými kruhy.
Při použití nižšího přebytku alkylačních činidel 3(15 mmol a 18 mmol) se procento oxetanylové skupiny snížilo (66 %, 80 %).
Příklad 3
Acetylace směsí mono- a bis-oxytanylovaného PEG
-6CZ 296517 B6
Reakční směs z příkladu 2 (10 g) se rozpustila v pyridinu (20 ml). Do roztoku se přidal anhydrid kyseliny octové (10 ml) a reakční směs se míchala 24 hodin při pokojové teplotě. Rozpouštědla se odstranila za sníženého tlaku a stupeň acetylace se kvantifikoval *H NMR.
Příklad 4
SPOCC-pryskyřice připravená polymerací oxetanylovaného PEG
Postup A: oxetanylovaný PEG-1500 nebo -400 (1 mmol až 20 mmol), který se připravil způsobem popsaným v příkladu 2, nebo acetylovaný derivát z příkladu 3 se rozpustil pod argonem v ekvivalentním objemu dichlormethanu, ochladil na -20 °C a míchal pomocí magnetického míchadla. Přidal se BF3OEt2 (0,15 až 0,3 ekviv.). Ohřívání se provádělo postupně z cílem stanovit teplotu, při které probíhá polymerace (-10 °C, 2 h; 0 °C, 2 h; 4°C, 2 h). na závěr viskozita roztoku vzrostla a magnetické míchání se zastavilo (teplota lepení). Teplota lepení se dosáhla potom, co se roztok udržoval 30 min. při 4 °C. Polymer se skladoval při této teplotě (2 dny) a další den při pokojové teplotě. Pro účely zpracování se polymer nařezal na kousky, které se nechaly zbobtnat (dichlormethan, 2 h) a potom granulovaly přes kovové síto (velikost póru 1 mm) za použití tlouku, granulovaná pryskyřice se opatrně propláchla (dichlormethan, tetrahydrofuran, dimethylformamid, voda, dimethylformamid, tetrabydrofuran, dichlormethan) a vysušila ve vakuu. Potom se určila koncentrace pryskyřice a stupeň zbobtnání v různých rozpouštědlech. Kapacita polymerů pro hydroxylovou skupinu, která dosahovala 0,6, se určila esterifíkací fluorenylmethyloxykarbonyl (Fmoc)-Gly za použití MSNT metody (Tetrahedron Letters 1988, 29, 5871-5874) a měřením UV-absorbance aduktu dibenzofulvenu a piperidinu připraveného ošetřením odváženého vzorku polymeru 20% piperidin/DMF.
Stupeň zbobtnání polymemího produktu se stanovil vstřikovací metodou (Azanneau F.I., a kol., Peptide Sci., 1995, 1, 31-44). Stupeň zbobtnání polymeru dosahoval 11 ml/g v dimethylformamidu; 12 ml/g v dichlormethanu a 14 ml/g ve vodě.
Příklad 5
SPOCC-pryskyřice připravená polymerací oxetanylovaného PEG
Postup B: Oxetanylovaný PEG-1500 z příkladu 3 se rozpustil v dichlormethanu (1 ml/g monomeru) a ochladil na 0 °C. BF3OEt2 se přidal jako katalyzátor na bázi Lewisovy kyseliny (0,4 ekviv.). Získaná směs se ohřála na pokojovou teplotu a po 10 minutách dosáhla teploty lepení, jak naznačila zvýšená viskozita, která způsobila zastavením magnetického míchadla. Po ukončení míchání se reakční směs ohřívala 2 dny na 60 °C. Po ochlazení na pokojovou teplotu se pryskyřice zpracovala postupem popsaným v rámci postupu A.
Příklad 6
SPOCC-pryskyřice připravená polymerací oxetanylovaného PEG
Postup C: oxetanylovaný PEG-400 z příkladu 2 se rozpustil v diethylenglykoldimethyletheru (1 ml/g monomeru) a míchal při pokojové teplotě. Pozvolna se přidal BF3OEt2 a míchání se zastavilo po 1 minutě. Reakční směs se 2 dny ohřívala na 70 °C. Po ochlazení na pokojovou teplotu se pryskyřice zpracovala způsobem popsaným v rámci postupu A. Koncentrace pryskyřice a stupeň zbobtnání pro pryskyřice připravené v příkladech 4 až 6 jsou shrnuty v tabulce 1. Z uvedených výsledků je zcela zřejmé, že nejlepší polymerace byla dosažena u acetylovaných makromonomerů.
-7CZ 296517 B6
Tabulka 1
| Délka PEG | oxetan (%) | -OR | protokol | koncentrace | zbobtnání: | ||
| h2o | DMF | CH2C12 | |||||
| 400 | > 95 | -H | A | 0,6 | |||
| 400 | > 95 | -Ac | B | 0,4 | 2,6 | 2,3 | 3,3 |
| 400 | 70 | -Ac | B | 1,2 | |||
| 1500 | > 95 | -H | A | 0,4 | 43 | 37 | 54 |
| 1500 | > 95 | -Ac | C | 0, 3 | 10 | 8 | 13,5 |
Příklad 7
Bis-vinylfenylpropyl-polyethylenglykol (1500):
Bezvodý (Harris J. M., J. Macromol. Sci., Rev. Macromol. Chem. Phys., 1985; C25:325-373) PEG1500 (12,4 g) se rozpustil pod argonem při 50 °C v tetrahydrofuranu (25 ml) a do tohoto roztoku se přidal hydrid sodný (497 mg, 60% roztok v oleji, 1,5 ekviv.). Po pěti minutách se v průběhu 15 minut přidal vinylfenylpropylchlorid (2,2 ml, 1,5 ekviv.). Přidáním hydridu sodného a vinylfenylpropylchloridu (1,5 ekviv.) se po 3 hodinách zopakovalo a po 6 hodinách se opět přidal hydrid sodný (1,5 ekviv.). Hnědá směs se míchala dalších 16 hodin, zahustila, rozpustil ve vodě (75 ml), neutralizovala, doplnila 125 ml vody a získaný roztok se propláchnul lehkou ropnou frakcí (50 ml). Zahuštění vodné fáze a následné odpařováním společně s toluenem (3x35 ml) poskytlo hnědý neprůhledný zbytek, který se rozpustil v dichlormethanu (150 ml) a vysušil pomocí síranu hořečnatého (35 g). Filtrace přes Celíte a zahuštění do sucha poskytly 13,1 g světle hnědé pevné látky (94% výtěžek), která byla jak naznačila ’H NMR analýza, čistá.
Příklad 8
Polymerace bis-vinylfenylpropyl-polyethylenglykolu (1500):
Pryskyřice se zPEG(1500) substituovaného vinylfenylpropylovou skupinou (12,6 g), který se syntetizoval způsobem popsaným v příkladu 7, připravila v suspendované formě inverzní suspenzní polymerací. Polymerace se prováděla již popsaným způsobem 2,5 h při 70 °C a za použití (NHOAOg (148 mg, 0,07 ekviv.), tetramethylethylendiaminu (443 pl, 0,32 ekviv.), sorbitanmonolaurátu (133 mg). (Auzanneau F. I.; Meldal M. a Bock K., J. Pept. Sci., 1995, 1,31-44). V polymeračním reaktoru se smísilo 120 g tetrachlormethanu a 80 g n-heptanu a reaktoru se 20 min. promýval dusíkem a ohříval na 70 °C. Roztok produktu z příkladu 7 (12,6 g) ve 30 g vody se společně s 0,148 g K2S2O8 propláchnul dusíkem, nalil do organické fáze a míchal při frekvenci otáčení 650 min1. Po 2 min. se přidal tetramethylethylendiamin (443 pl, 0,32 ekviv.). Polymerace se nechala probíhat 5 hodin při 70 °C a po jejím ukončení se reakční směs přefiltrovala, suspenzní částice se propláchly methanolem a vysušily za vakua. Suché částice měly průměr 70 pm až 400 pm. Výtěžek činil 65 %.
Příklad 9
Polymerace bis-vinylfenylpropyl-polyethylenglykolu( 1500):
Alternativně se pryskyřice připravily blokovou polymerací ve vodě, která probíhala 24 hodin za použití (NH4)2S2O8 (0,06 ekviv.) a tetramethylendioaminu (0,25 ekviv.). Takto připravená pryskyřice se granulovala, přesila přes síto, propláchla a lyofilizovala. Výtěžek činil 71 %. Obsah
-8CZ 296517 B6 pryskyřice a stupeň zbobtnání se stanovily způsobem popsaným v příkladu 4. Obsah pryskyřice dosahoval 0,22 mmol/g a stupeň zbobtnání 4 ml/g pro DMF, 4 ml/g pro H2O a 6 ml/g pro CH2C12.
Příklad 10
Makromonomery podle vynálezu lze ve snaze upravit vlastnosti finálního polymeru kopolymerovat s dalšími monomery. Produkty z příkladu 7 lze kopolymerovat s celou řadou monomerů, které lze polymerovat radikálovou polymeraci s mezi které lze zařadit např. styren, divinylbenzen, methakryláty, akryláty a akrylamidy. Nicméně komonomery pro makromonomemí produkty z příkladu 7 se omezují pouze na monomery obsahující oxetan.
Příklad 11
Lze očekávat, že jak makropolymery připravené polymeraci makromonomerů z příkladů 2 a 3, tak makropolymery připravené polymeraci produktu zpříkladu 7 jsou chemicky stabilní a inertní, ale že mají různé fyzikální vlastnosti. Za silně bazických nebo silně kyselých podmínek jsou oba typy pryskyřic zcela stabilní. Nicméně pokud jde o stupeň zbobtnání, mají pro různá rozpouštědla různé preference. Na rozdíl od dříve uváděných pryskyřic na bázi PEG jsou pryskyřice podle vynálezu dlouhodobě stabilní v thionylchloridu, 6N roztoku kyseliny chlorovodíkové, TMS-Br, TMS-OTf a Ac2O, koncentrované hydroxidu draselném, KHDMS/CH2C12 a 3mM roztoku butyllithia.
Hlavními výhodami polymerů získaných z makromonomerů podle vynálezu je nedostatek funkčních skupin, např. amidových skupin, v hlavním řetězci polymerů, vysoká kapacita, optimální hydrofilně-hydrofobní vyváženost a vysoká mechanická a zejména chemická stabilita. Cena polymerů je nízká vzhledem k tomu, že je lze snadno připravit z dostupných a laciných polyethylenglykolů, které jsou slučitelné s životním prostředím. Hydroxylové skupiny těchto polymerů lze snadno nahradit funkčními skupinami bez toho, že by došlo k ovlivnění hlavního řetězce polymerů. Polymemí pryskyřice mají otevřenou strukturu, která umožňuje enzymem pronikat ve vodném prostředí do polymemí sítě. Kromě toho, že jsou velmi vhodné pro syntézy jsou rovněž vhodné pro provádění enzymatických testů, které se provádějí v pevné fázi a za použití fluorescenčních substrátů nebo za použití kombinace fluorescenčních substrátů a inhibitorů, které se váží na polymer. Struktura polymerů poskytuje vynikající tokové vlastnosti a za organických reakčních podmínek usnadňuje přístup reakčního činidla nebo rozpouštědla.
Modifikace funkčních skupin je ilustrována v následujících příkladech, ve kteiých jsou hydroxylové skupiny převáděny na bromidy nebo aminoskupiny.
Příklad 12
Brom-SPOCC-pryskyřice
Pryskyřice zpříkladu 4 (1 g, 0,6 mmol) se suspendovala vdichlormethanu (10ml). Přidal se trifenylfosfin (787 mg, 5 ekviv.) a imidazol (204 mg, 5 ekviv.). Po úplném rozpouštění se směs ochladila ve vodní lázni na 10 °C a po kapkách se přidal brom (155 1, 5 ekviv.). Potom se vodní lázeň odstavila a směs se míchala přes noc při pokojové teplotě. Pryskyřice se přefiltrovala propláchla dimethylformamidem, vodou, dimethylformamidem, tetrahydrofuranem a dichlormethanem. Elementární analýza ukázala, že pryskyřice obsahovala 0,86mmol/g bromu.
Příklad 13
Amino-SPOCC-pryskyřice
-9CZ 296517 B6
Pryskyřice z příkladu 4 (1 g, 0,6 mmol) se suspendovala v roztoku azidu sodného vDMSO (390 mmol, 10 ekviv., 10 ml). Směs se 18 hodin ohřívala na 60 °C. Pryskyřice se přefiltrovala a propláchla přebytkem dimethylformamidu, vody a opět dimethylformamidu. K redukci se použil 1,4-dithiothreitol (DTT) v kombinaci s l,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-enem (DBU) (10 ml 0,5M roztoku DTT v DMF, které obsahovaly 0,1 M DBU). Pryskyřice se přefiltrovala a propláchla dimethylformamidem, tetrahydrofuranem a dichlormethanem. Koncentrace pryskyřice se stanovila spektrofotometrickým měřením Fmoc-štěpení po tom, co se vzorek pryskyřice funkcionalizoval Fmoc-sukcinimidem (10 ekviv., 4h). Naměřená koncentrace dosahovala 0,44 mmol/g.
Použitelnost polymerů získaných z makromonomerů podle vynálezu pro organické syntézy a současnou slučitelnost s vodným prostředím ilustrují následující příklady.
Příklad 14 p-[(Z-Seryl-Z-fenylalanyl-L/-leucyl-glycylamido)-2,4-dimethoxybenzyljfenoxyacetylamidoSPOCC-pryskyřice
SPOCC-pryskyřice (210 mg, 0,1 mmol) se funkcionalizovala Rink-vazebním činidlem chráněným Fmoc-ochrannou skupinou. Vazebné činidlo (208 mg, 0,4 ekviv.) se společně s TBTU (122 mg, 0,38 mmol) a N-ethylmorfolynem (NEM) (83 1, 0,5 mmol) rozpustilo v DMF (3 ml) do získaného roztoku se po 10 min. přidala v průběhu 3 hodin pryskyřice. Po propláchnutí DMF (5x) se odštěpila Fmoc-skupin (20% roztok piperidinu v DMF, 2 a 16 min.). Amin zbavený ochranné skupiny se acyloval Fmoc-aminokyselinami (3 ekviv. Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Phe-OH a Fmoc-Ser-OH), které se aktivovaly TBTU (93 mg, 0,29 mmol) a NEM (661, 0,4 mmol) způsobem popsaným pro vazebné činidlo. Po konečném odstranění Fmoc-ochranné skupiny se produkt odštěpil ze vzorku pryskyřice (2 mg, 95% TFA, 2h) a analyzoval pomocí HPLC a MALDI-MS. Retenční doba (r.t.) = 24,0 min.. MALDI-MS: (vypočteno pro M=C20H31N5O5) nalezeno (MH+, MNa+, MK+): 422 m/z, 444 m/z a 460 m/z. Finální koncentrace byla 0,36 mmol/g.
Příklad 15 p-[(V-Oxalyl-L-fenylalanyl-Z,-leucyl-glycylamido)-2,4-dimethoxybenzyl]fenoxyacetylamidoSPOCC-pryskyřice
Na SPOCC-pryskyřici z příkladu 14 (200 mg, 0,072 mmol) se 3 hodiny působilo vodným roztokem jodistanu sodného (92 mg, 6 ekviv.) v fosfátu sodném jako pufru (2,5 ml 50mmol roztoku dihydrogenfosforečnanu sodného, pH 7), čímž se získal roztok s pH hodnotou 5. Pryskyřice se odfiltrovala, opláchla vodou, dimethylformamidem, tetrahydrofuranem a dichlormethanem a analyzovala. HPLC: r.t. = 25,6 min; MALDI-MS: vypočteno (M=CioH26N405): 390,44; nalezeno (MNa+, MH2ONa+): 413,3,431,4 m/z.
Příklad 16
Reakce aldehyd-pryskyřice s fenyllithiem.
Na SPOCC-pryskyřici z příkladu 15 (30 mg, 0,011 mmol) se působilo roztokem fenyllithia (7 ekviv. v 1 ml tetrahydrofuranu, 10 min. při 0 °C a následně 1,5 h při pokojové teplotě. Analýza reakční směsi ukázala, že se jedná o směs několika produktů s retenční dobou HPLC 24 až 37 minut. Produkty, které mají retenční dobu 24 až 27 minut jsou výchozím materiálem. Produkty s retenční dobou 31 až 37 minut jsou dimery výchozího materiálu. MALDI-MC: vypočteno (2xM): 780,88; nalezeno: ((2xM)Na+): 804 m/z. Nebyly pozorovány žádné vedlejší reakce, na kterých by se podílela samotná pryskyřice.
-10CZ 296517 B6
Příklad 17 />-[(V-akryl-£-fenylalanyl-Z-leucyl-glycylamido)-2,4-dimethoxybenzyljfenoxyacetylamidoSPOCC
Methyltrifenylfosfoniumjodid (69 mg, 0,171 mmol) se suspendoval v tetrahydrofuranu (2 ml) a ochladil na -50 °C. Přidalo se butyllithium (0,154 mmol). Sůl se rozpustila a zabarvení roztoku získalo sytý žlutooranžový odstín. Po 20 minutách se roztok ohřál na -10 °C. Do míchaného roztoku se pod dusíkem přidala pryskyřice z příkladu 15 (96 mg, 0,034 mmol) a reakce se nechala probíhat 2 hodiny. Preparativní štěpení produktu (95% TFA, 2 h) poskytlo směs 2-hydroxypropionylové a 3-hydroxypropionylové sloučeniny, které se separovaly hydratací akrylamidového produktu Wittigovy reakce.
Příklad 18
V-(4-Karboxyl-but-2-rran5-enoyl)-(Z)-leucyl-glycyl-SPOCC-pryskyřice
Na lyofílizovanou pryskyřici z příkladu 15 (90 mg, 0,041 mmol) se působilo 2 hodiny toluenem (1 ml) a triethylorthoformiátem (0,5 ml) a reakční směs se propláchla bezvodým toluenem (6x). Triethylfosfonoacetát (41 1, 5 ekviv.) se rozpustil v toluenu (1 ml). Při teplotě 0 °C se přidalo butyllithium (4,5ekviv). Po 10 minutách se roztok přidal do pryskyřice a nechal reagovat 90 min. při pokojové teplotě. Po propláchnutí (dimethylformamid, tetrahydrofuran, dichlormethan) a sušením se získala pryskyřice analyzovala pomocí „MAS-solid phase“ NMR v CDCI3. Provedlo se štěpení analytického vzorku a HPLC-analýza. Jedna část pryskyřice (45 mg) se odštěpila a izolovala preparativní HPLC, která poskytla titulní produkt. (5,2 mg, 64% výtěžek); r.t. = 28,0 min.; Ή NMR (250 MHz, D4-MeOD): = 0,87-0,98 (m, 12 H, Leu-Me), 1,6-1,75 (m, 6 H, Leu), 3,8-4,8 (2d, 2 H, 2J = 17,8 Hz, gly-), 4,4-4,5 (m, 2 H, Leu), 6,68-7,06 (2d, 2 H,
15,5 Hz, olefínové protony); 13C NMR (60 MHz, D4-MeOD): 131,9, 137,3 (olefinové uhlíky); ES-MS: vypočteno (M=Ci8H29N3O7): 399,20, nalezeno: 400,2 m/z.
Použitelnost polymerů pro syntézu peptidů a glykopeptidů ilustrují následující příklady.
Příklad 19 A-(9-Fluorenyl-metoxykarbonyl)-Z,-alanyl-£-seryl-L-Fenylalanyl-£-leucyl-glycyl-SPOCCpryskyřice.
SPOCC-400 (326 mg, 0,58 mmol/g, 0,19 mmol) z příkladu 4 se 2x uvedl do reakce s roztokem Fmoc-Gly-OH (339 mg, 3 ekviv.), MSNT (338 mg, 3 ekviv.) a N-methylimidazolu (Melm) (68 1, 2,25 ekviv.) v dichlormethanu (4 ml), přičemž reakce v obou případech trvala 45 min.. Po odstranění Fmoc-skupiny (20% piperidin v DMF, 2 až 16 min.) se glycinylový zbytek prodloužil o 4 Fmoc-aminokyseliny (3 ekviv. Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Ser-OH a FmocAla-OH), která se aktivovala pomocí TBTU (2,9 ekviv., 177 mg) a NEM (4 ekviv., 1271). Všechny acylační reakce se prováděly 15 minut míchání reakčních složek v DMF (4 ml). Reakce na pryskyřici trvala 3 hodiny a po jejím ukončení následovalo navázání Fmoc-ochranné skupiny. Po konečném odstranění Fmoc-skupiny se pryskyřice analyzovala pomocí HPHC a MALDIMS.
Příklad 20 2V-(9-Fluorenyl-methoxykarbonyl)-£-alanyl-0-(2,3,4,6-tetra-C>-acetyl-Z)z-galaktopyranosyl)-L-seryl-L-fenylalanyl-L-Leucyl-glycyl-SPOCC-pryskyřice.
Pryskyřice z příkladu 19 (100 mg, 0,04 mmol) se přes noc lyofilizovala ve „speed vac“ z bezvodého toluenu (3 ml). Tetra-O-acetyl-ZYgalaktopyranosyltnchloracetimidát (0,12 mmol, 3 ekviv.) se rozpustil v dichlormethanu (1,5 ml) a přidal do piyskyřice. Pod argonem se přidal trimethyl-11 sylyltrifluormethansulfonát (TMSOTf) (120 ml 1M roztoku v dichlormethanu) a reakce se nechala probíhat 1 hodinu. Pryskyřice se potom odfiltrovala, propláchla dichlormethanem, tetrahydrofuranem, dimethylform-amidem, tetrahydrofuranem a dichlormethanem a vysušila ve vakuu. Glykosylační postup se zopakoval. Po odštěpení NaOMe v methanolu (0,02 M, 2 h) se provedla HPLC a MALDI-MS analýza. Bylo dosaženo úplné glykosylace.
HPLC: r.t.. = 20,1 min.; MALDI-MS: vypočteno pro M=C29H45N5Oi2: 655,7 Da, nalezeno (MNa+): 656 m/z.
Příklad 21 Z-Alanyl-O-(Z>-galaktopyranosyl)-Z,-seryl-Z,-fenylalanyl-Z-leucyl-glycinhydrazid
Na pryskyřici z příkladu 20 (2 mg, 0,035 mmol) se 2 hodiny působilo 20% vodným roztokem hydrazinu. HPLC: r.t.= 22,0 min; MALDI-MS vypočteno M=C29H47N70ii: 669,7 Da; nalezeno (MNa+): 694 m/z.
Použitelnost pryskyřic pro enzymatické reakce ilustrují následující příklady
Příklad 22 Z-Alanyl-(3-nitro)-Z-tyrosynyl-L-glycyl-Z-prolinyl-Z-leucyl-glycyl-Z-leucyl-£-tyrosynylalanyl-arginyl-fA^-aminobenzoylj-Z-lysinyl-glycyl-glycyl-SPOCC-pryskyřice
SPOCC-1500 z příkladu 3 (65 mg, 0,027 mmol) se 2x v průběhu 45 minut zpracovala roztokem Fmoc-Gly-OH (41 mg, 5 ekviv.), MSNT (40 mg, 5 ekviv.) Melm. (8 1, 3,75 ekviv.) v dichlormethanu (4 ml). Pryskyřice se odfiltrovala a propláchla dichlormethan a dimethylformamidem. Fmoc-skupina se odštěpila (20% roztok piperidinu v dimethylformamidu 2 a 16 min) a pryskyřice se opět propláchla dimethylformamidem. Zcela chráněný nonapeptid sekvence FmocA(NO2)YGPLGL(‘Bu)YA(Pmc)R(Boc-Abz)KG-OH (45 mg, 3 ekviv.) se rozpustil v dimethylformamidu (4 ml) společně s TBTU (6,8 mg, 2,9 ekviv.) a NEM (3,7 1, 4 ekviv.). Po 15 minutách se tento roztok přidal do pryskyřice a reakce se nechala probíhat 3 hodiny. Pryskyřice se propláchla přebytkem dimethylformamidu a 2x ošetřila 95% roztokem TFA (10 min., 2,5 h) čímž se odstranily ochranné skupiny vedlejších řetězců. Potom se pryskyřice propláchla 95% roztokem kyseliny octové (4x 5 min.), 5% roztokem triethylaminu v dimethylformamidu (3x 2 min.), dimethylformamidem (2x 2 min.), tetrahydrofuranem a dichlormethanem a potom se vysušila ve vakuu. Během 2 hodin pryskyřice společně s 1M roztokem hydroxidu sodného odštěpila peptid pro analytické účely. HPLC: r.t. = 32,0 min.; MALDI-MS vypočteno pro M=C6gH99Ni9Ol9=1486,7 Da, nalezeno (MH+, MNa+-H2O)=1487 m/z, 1493 m/Z.
Příklad 23
Enzymatické štěpení dekapeptidu navázaného na SPOCC-pryskyřici z příkladu 22
I.Subtilisin: Na pryskyřici (2 mg) se působilo roztokem subtilisinu (ΙΟ'7 M) ve fosfátovém pufru pH 7 (50mmol NaH2PO4 vH2O). Po 15 min. byla při použití UV-záření pozorována silná fluorescence. Po 3 hodinách se pryskyřice propláchla (vodou, dimethylformamidem, tetrahydrofuranem, dichlormethanem) a vysušila. Na jednu část pryskyřice ošetřené enzymem (1 mg) se působilo hydridem sodným (501 0,lM roztoku 2 h) a produkt se analyzoval HPLC a následně hmotovou spektrometrií. Druhá část pryskyřice (1 mg) se podrobila Edmanově degradaci. HPLC naznačila úplné rozštěpení výchozího peptidu, který se použil jako substrát. HPLC: r.t. = 22,0 min.; MALDI-MS: vypočteno pro M=(C26H42Nio07)=606,7 Da, nalezeno: 617,6 m/z. Edmanova degradace (3 cykly): A, Abz-; R-;K-12CZ 296517 B6
Π. Matrice- metalloproteáza-9: Na pryskyřici (2 mg) se po dobu 24 hodin působilo roztokem MMP-9 (100 nM a 275 mM) v pufřu pH 7,72 (pufr 17, získaný od CCBR, Ballerup). Ani v jednom zobou případů nebyla pozorována významnější fluorescence. Štěpení a HPLC-analýza, které se prováděly způsobem popsaným v předchozím odstavci poskytly výlučně výchozí peptid, který se použil jako substrát.
Příklad 24 Z-Alanyl(3-nitro)-Z-tyrosinyl-Z.-glycyl-Z-prolinyl-£-leucylglycyl-Z-leucyl-Z,-tyrosinylalanyl-artmyl-íMU-aminobenzoylj-L-lysmyl-glycyl-glycyl-POEPSS-pryskyřice
Pryskyřice získaná z příkladu 8 z mono- a bis-vinylfenylpropyl-PEG(1500) (0,1 g, 0,02 mmol) se umístila do ručního injekčního syntetizéru napojeného na vakuum a esterifikovala pomocí Fmoc-Gly-OH za použití MSNT postupu. (Tetraherdron Letters 1988, 29, 5871-5874). Fmoc-skupina se odstranila 20% roztokem piperidinu v dimethylformamidu a chráněný substrát Fmoc-AY(NO2)GPLGLY(tBu)R(Pmc)K(Boc-Abz)G-OH (45 mg, 1 ekviv.) se navázal na pryskyřici za použití in šitu aktivací pomocí TBTU (1 ekviv.) a NEM (1 ekviv.). Pryskyřice se propláchla dimethylformamidem a dichlormethanem, vysušila a dvouhodinovým působením 95% vodným roztokem TFA a zbavila ochranných skupin. Získaná pryskyřice se propláchla dichlormethanem a vysušila. Obsah aminokyselin se určil kvantitativní aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou Edmanovy degradace. Výsledky analýzy ukázaly očekávanou sekvenci i očekávané množství. Pro analytické účely se peptid během 2 hodin odštěpil z pryskyřice pomocí 0,lM roztoku hydroxidu sodného. HPLC: r.t. - 32,0 min.; MALDI-MS: vypočteno pro M=C68H99Ni9OI9: 1486,7 Da, nalezeno (MH+, MNa-H2O): 1487 m/z.
Příklad 25
Enzymatické štěpení dekapeptidu navázaného na POEPS3-pryskyřici z příkladu 24
Pryskyřice z příkladu 24 (10 mg) se suspendovala ve vodném roztoku 50mM bicinového pufřu (0,2mM chloridu vápenatého, pH 8,5,100 μΐ) ve stejném pufřu. Reakce se visuálně sledovala pod fluorescenčním mikroskopem (ex 320 nm; em 420 až 500 nm) a reakce se ukončila během 60 min. Edmanova sekvenční analýza zbytkového peptidu na pryskyřici ukázala, že došlo k úplnému rozštěpení. Získaný výsledek potvrdilo štěpení pomocí 0,lM roztoku hydroxidu sodného a HPLC analýza.
Podobný experiment s mnohem delším MNP9 vykázal pouze malé štěpení na povrchu pryskyřice a naznačil tak důležitost správné volby délky polyethylenglykolu pro přípravu pryskyřice, která musí odpovídat velikosti analyzovaného enzymu. Štěpení pomocí 0,lM roztoku hydroxidu sodného a HPLC analýza, které se prováděly stejně jako v příkladu 23 ukázaly výlučně neodštěpený peptid.
Příklad 26
Syntéza křemíkového polymemího povrchového činidla a methakryloyl PEG 350 monomethyletheru
Do roztoku PEG 350 monomethyletheru (2,0 g, 5,7 mmol) a triethylaminu (1,7 ml, 12,2 mmol) se při teplotě 0°C zamíchání a vyloučení vlhkosti po kapkách přidal methakryloylchlorid (0,67 ml, 5,9 mmol). Reakční směs se míchala 5 hodin, načež se přefiltrovala a odpařováním ve vakuu zbavila rozpouštědla. Výsledný bíložlutý olej se použil bez dalšího zpracování.
Methakryloxypropylpentamethyldisiloxan (4,0 ml, 13,1 mmol) a methakryloyl PEG 350monomethylether se rozpustily vodplyněném chloroformu (10 ml). Přidalo se AIBN (60 mg, 0,37 mmol), reakční nádoba se uzavřela a roztok se 48 hodin polymeroval při teplotě 60 °C. Roz
-13CZ 296517 B6 pouštědlo se odstranilo odpařováním ve vakuu. Finální polymer, který se získal ve formě žluté pasty, se sušil za hlubokého vakua a použil bez dalšího zpracování.
Příklad 27
Suspenzní polymerace polymeru odvozeného od oxetanu prováděná postupem A (SPOCC-pryskyřice)
Povrchově aktivní činidlo (25 mg/g makromonomeru) se rozpustilo v dichlorethanu (0,38 ml/g makromonomeru) a pod argonem smísilo s makromonomerem (4 g). Získaný homogenní roztok se ochladil v ledové lázni a do takto ochlazeného roztoku se za míchání a vyloučení vlhkosti přidal BF3EOt2 (0,1 ml/g makromonomeru). Po 2 minutách se směs při pokojové teplotě a při rychlosti míchání 150 min’1 přidala do silikonového oleje (20 ml/g makromonomeru). Po dobu 2 hodin se směs udržovala při pokojové teplotě načež se teplota zvýšila na 60 °C a polymerace se nechala probíhat přes noc bez míchání. Výsledné polymemí částice se filtrovaly na fritě. Perličky se propláchly dichlormethanem, dimethylformamidem, methanolem a vodou. Potom se ošetřily 6M roztokem kyseliny chlorovodíkové (2 hodiny při pokojové teplotě) a propláchly přebytkem vody, methanolu, dimethylformamidu a dichlormethanu. Perličky se vysušily a roztřídily podle velikostí. Distribuce perliček (měřeno v methanolu X > 1000 pm : X > 500 pm: X > 300 pm: X < 300 pm (3 : 20 : 5 : 1). Celkový výtěžek suspenzních částic: 2,9 g, 73% výtěžek.
Příklad 28
Suspenzní polymerace polymeru odvozeného od oxetanu prováděná postupem B (SPOCCpryskyřice připravená adicí 3-methyloxetanylmethanolu)
Povrchově aktivní činidlo (25 mg/g makromonomeru) se rozpustilo v dichlormethanu (0,38 ml/g makromonomeru) a pod argonem smísilo s makromonomerem (připraveným z PEG 1500, 2,3 g) a 3-methyl-3-oxetanmethanoem (27 pl až 100 pl). Získaný homogenní roztok se ochladil v ledové lázni a do takto ochlazeného roztoku se za míchání a vyloučení vlhkosti přidal BF3OEt2 (0,1 ml/g makromonomeru). Po 45 s se směs při pokojové teplotě a při rychlosti míchání 200 min'1 přidala do silikonového oleje (20 ml/g makromonomeru). Po dobu 2 hodin se směs udržovala při pokojové teplotě načež se teplota zvýšila na 60 °C a polymerace se nechala probíhat přes noc bez míchání. Výsledné polymemí perličky se filtrovaly na fritě. Perličky se propláchly dichlormethanem, dimethylformamidem, metha-nolem a vodou. Potom se ošetřily 6M roztokem kyseliny chlorovodíkové (2 hodiny při pokojové teplotě) a propláchly přebytkem vody, methanolu, dimethylformamidu a dichlormethanolu. Perličky se vysušily a roztřídily podle velikostí. Distribuce perliček (měřeno v methanolu X > 1000 pm : X > 500 pm ; X > 300 pm : X < 300 pm (6 : 17:7:0). Celkový výtěžek perliček: 1,7 g, 74% výtěžek:
Příklad 29
Bis(3-methyl-3-oxetanylmethoxy)-2-buten l,4-Trans-but-2-endiol (11 mmol) se rozpustil v toluenu a dimethylformamidu (každý 15 ml). Za míchání se při pokojové teplot přidal kalimhexamethyldisilazan (KHMDS) (22 mmol) a po 15 min. se rozpouštědla odstranila společně s HMDS na rotační odparce při teplotě vodní lázně 50 °C. Zbývající alkohol substituovaný draslíkem se opět rozpustil v dimethylformamidu (15 ml). Při pokojové teplotě se po částech přidal mesylovaný oxetanový derivát (24 mmol) a reakční směs se 12 hodin ohřívala na 75 °C. Po ochlazení na pokojovou teplotu se přidala voda (2 ml) a směs se 15 minut míchala s cílem zcela hydrolyzovat nezreagované alkylační činidlo. Rozpouštědla se odstranila za sníženého tlaku při teplotě 40 °C. Zbytky se rozpustily v dichlormethanu a extrahovaly vodou. Organická fáze se vysušila a odpařila. Tímto způsobem se získalo 90 % titulní sloučeniny. NMR analýza produktu potvrdila, že alkylace byla kvantitativní.
- 14CZ 296517 B6
Příklad 30
SPOCC-prykyřice získaný polymerací oxetanylovaného PEG a krátkého dočasného síťovacího činidla.
Oxetanylovaný PEG-1500 (1 až 220 mmol), který se připravil v příkladu 2, a síťovací činidlo připravené v příkladu 29 (5 až 50 % mol) se rozpustily pod argonem ve shodném objemu dichlormethanu, získaný roztok se ochladil na -20 °C a míchal pomocí magnetického míchadla. Přidal se BF3OEt2 (0,15 až 0,5 ekviv.) a roztok se míchal při teplotě -10 °C načež se nechal ohřát na pokojovou teplotu, při které vznikl polymer. Po 2 hodinách se teplota zvýšila na 60 °C a při této teplotě se reakční směs udržovala přes noc. Polymer se nařezal na kousky, které se nechaly zbobtnat (dichlormethan, 2 h) a následně pomocí tlouku granulovaly přes kovové síto velikost póru (1 mm), granulovaná pryskyřice se opatrně propláchla (dichlormethanem, tetrahydrofuran, dimethylformamid, voda, dimethylformamid, tetrahydrofuran, dichlormethan) a vysušila ve vakuu. Koncentrace se porovnala s koncentrací polymeru, který se připravil v příkladu 4. Stupeň zbobtnání polymemího produktu byl podstatně nižší než stupeň zbobtnání polymeru popsaného v příkladu 4 (s ohledem na množství přidaného síťovacího činidla).
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (31)
1. Makromonomer obecného vzorce:
ve kterém fí znamená reálné číslo od 6 do 300 a ve kterém X a Y každý nezávisle znamená skupinu obecného vzorce ve kterém m znamená 1 až 10 a R znamená atom vodíku, alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, nebo ve kterém X znamená -OH a Y znamená skupinu obecného vzorce:
ve kterém m znamená 1 až 10 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu,
- 15CZ 296517 B6 ve kterém R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu s ň znamená reálné číslo od 6 do 300, jak je definováno výše, a ve kterém X, Y a Z každý nezávisle znamená -OH nebo skupinu obecného vzorce ve kterém m znamená celé číslo od 0 do 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu, za předpokladu, že alespoň jeden z X, Y a Z znamená skupinu obecného vzorce ve kterém m znamená celé číslo od 1 do 10, a má výše definovaný význam a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
3. Makromonomer podle nároku 1, který je zakončen 3-methyloxetan-3-ylethyleterovou skupinou a má obecný vzorec
Ονε kterém ň=6 až 300 a R a m mají významy definované vnároku 1.
4. Makromonomer podle nároku 3, který se acetyloval nebo u kterého se jiným způsobem dočasně chránily volné hydroxylové skupiny.
5. Způsob přípravy makromonomerů podle nároku 1, vyznačený tím, že zahrnuje uvedení polyethylenglykolového derivátu alkalického kovu, který má 6 až 300 opakujících se jednotek do reaktoru s halogenovanou sloučeninou obecného vzorce:
ve kterém Z znamená atom chloru, atom bromu, atom jodu, toluensulfonyloxyskupinu nebo CF3SO3 a m znamená celé číslo od 1 do 10 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
-16CZ 296517 B6
6. Způsob přípravy makromonomeru podle nároku 2, vyznačený tím, že zahrnuje uvedení polyethylenglykolového derivátu alkalického kovu obecného vzorce:
HaHs ve kterém R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu a fi znamená 6 až 300, do reakce s halogenovanou sloučeninou obecného vzorce: z^?o ve kterém Z znamená atom chlor, atom bromu, atom jodu, toluensulfonyloxyskupinu nebo CF3SO3 a m znamená 1 až 10 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo aiylalkylovou skupinu.
7. Způsob podle nároku 5 nebo 6, vyznačený tím, že derivátem alkalického kovu je derivát sodíku.
8. Způsob podle nároku 5 nebo 6, vyznačený tím, že derivátem alkalického kovu je derivát draslíku.
9. Zesíťovaný polymer připravený polymerací makromonomeru podle nároku 1.
10. Zesíťovaný polymer podle nároku 9, ve kterém má makromonomer strukturu nárokovanou v nároku 3, jeho polymerace je iniciována kationtovým katalyzátorem a strukturu polymeru lze ve kterém ň=6 až 300 a R znamená atom vodíku nebo alkylovou, arylovou nebo arylalkylovou skupinu.
11. Zesíťovaný polymer podle nároku 9, při jehož přípravě se použije makromonomer, který má strukturu definovanou v nároku 4 a získá se polymemí struktura s per-O-acetylovanou nebo
- 17CZ 296517 B6 jiným způsobem dočasně chráněnou hydroxylovou skupinou, která odpovídá hydroxylované struktuře podle nároku 10.
12. Zesíťovaný polymer připravený blokovou polymerací makromonomeru podle nároku 2.
13. Suspenzní pryskyřice podle nároku 10 nebo 11 připravená polymerací kapiček v silikonovém oleji.
14. Suspenzní pryskyřice podle nároku 10 nebo 11 připravená rozprašovací polymerací v horkém inertním plynu.
15. Použití polymerů připravených podle nároku 9 jako nosičů pro organickou syntézu.
16. Použití polymerů připravených podle nároku 9 jako nosičů pro enzymatické reakce v pevné fázi.
17. Použití polymerů připravených podle nároku 9 jako nosičů syntézy peptidů, DNA, RNA a oligosacharidů.
18. Použití polymerů připravených podle nároku 9 jako nosičů pro peptidovou, proteinovou, DNA- nebo RNA-ligaci.
19. Použití polymerů připravených podle nároku 9 pro chromatografické separace.
20. Použití polymerů připravených podle nároku 9 pro afinitní purifikaci.
21. Použití polymerů připravených podle nároku 9 pro imobilizaci proteinů.
22. Použití polymerů připravených podle nároku 16, při kterém enzym reaguje se substrátem nebo inhibitorem navázaným na nosiči.
23. Použití polymerů připravených podle nároku 9, při kterém dochází k uvolnění účinné látky navázané na pevném nosiči.
24. Použití podle nároku 23, při kterém je uvolnění zprostředkováno enzymem.
25. Použití polymeru podle nároku 9 pro NMR-spektroskopii prováděnou v pevné fázi. .
26. Použití polymerů připravených podle nároku 9 pro kombinatorickou chemii.
27. Suspenzní polymer podle nároku 9 připravený suspenzní polymerací v silikonovém oleji.
28. Suspenzní polymer podle nároku 27, ve kterém jsou suspenzní částice stabilizovány povrchově aktivním činidlem.
29. Suspenzní polymer podle nároku 28, ve kterém je povrchově aktivním činidlem povrchově aktivní činidlo získané radikálovou polymerací směsi akryloylovaného PEG-OMe a akryloylpropylpentamethyldisiloxanu.
30. Polymer podle nároku 9 s adicí krátkého dočasného síťovacího činidla, které lze později selektivně odštěpit a dosáhnout tak rozšíření pryskyřice.
- 18CZ 296517 B6
31. Polymer podle nároku 30, ve kterém má krátké síťovací činidlo strukturu t
ve kterém R znamená alkyliden, aryliden, silan, siloxynthioether nebo etherový můstek, 5 který je schopen selektivního chemického štěpení.
32. Makromonomer podle nároků 1 až 4 připravený způsobem podle nároku 5 nebo 6, ale s inverzí elektrofilu a nukleofílu, při kterém se připraví tosylát nebo triflát nebo halogenid PEG a ten se uvede do reakce s kovovým alkoxidem 3-methyloxetan-3-ylmethanolem nebo vinyl-
10 fenylpropanolem.
9 výkresů
- 19CZ 296517 B6
Obr. 1
HO
KN(SiMe3)2
O'
O.
O Jc +
-20CZ 296517 B6
Obr. 2
-21 CZ 296517 B6
Obr. 3
-22CZ 296517 B6
Obr. 4
-23 CL 296517 B6
Obr. 5
-24CZ 296517 B6
Obr. 6
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DKPA199801224 | 1998-09-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20011037A3 CZ20011037A3 (cs) | 2001-08-15 |
| CZ296517B6 true CZ296517B6 (cs) | 2006-04-12 |
Family
ID=8102386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20011037A CZ296517B6 (cs) | 1998-09-28 | 1999-09-28 | Makromonomery na bázi polyethylenglykolu, chemicky inertní polymery pripravené z techto makromonomeru a pouzití techto polymeru pro organické syntézya enzymatické reakce |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7064179B1 (cs) |
| EP (1) | EP1137690B2 (cs) |
| JP (1) | JP2002525405A (cs) |
| AT (1) | ATE282057T1 (cs) |
| AU (1) | AU766181B2 (cs) |
| CA (1) | CA2345332A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ296517B6 (cs) |
| DE (1) | DE69921850T3 (cs) |
| ES (1) | ES2232176T5 (cs) |
| HU (1) | HUP0103572A3 (cs) |
| IL (1) | IL141849A0 (cs) |
| NO (1) | NO20011554L (cs) |
| NZ (1) | NZ511315A (cs) |
| WO (1) | WO2000018823A2 (cs) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7235297B2 (en) | 2000-11-20 | 2007-06-26 | Matrix Innovation Inc. | Amphiphile solid support for peptide synthesis, bioorganic and organic chemistry |
| CA2501165A1 (en) * | 2001-10-12 | 2003-04-17 | Carlsberg A/S | Matrix for solid-phase organic synthesis |
| US6953862B2 (en) * | 2003-05-06 | 2005-10-11 | National Starch And Chemical Investment Holding Corporation | Oxetane compounds containing styrenic functionality |
| WO2004113389A2 (en) * | 2003-06-26 | 2004-12-29 | Versamatrix A/S | High capacity poly(alkylene)glycol based amino polymers |
| CN1856483A (zh) | 2003-08-04 | 2006-11-01 | 马特利克斯创新公司 | 基于新颖聚醚的单体和高度交联的两亲性树脂 |
| JP2008510861A (ja) * | 2004-08-27 | 2008-04-10 | ヴァーサマトリックス・アクティーゼルスカブ | ポリエーテルポリマーマトリックス |
| DE602006003029D1 (de) * | 2005-08-23 | 2008-11-20 | Fujifilm Corp | Härtbare Tinte enthaltend modifiziertes Oxetan |
| JP5101062B2 (ja) * | 2005-09-26 | 2012-12-19 | 富士フイルム株式会社 | インクジェット記録用インク組成物、インクジェット記録方法、印刷物、平版印刷版の製造方法、及び平版印刷版 |
| DE102006049381A1 (de) * | 2006-10-19 | 2008-04-24 | Süd-Chemie AG | Amphiphile Pfropfpolymere |
| KR101523799B1 (ko) * | 2007-10-24 | 2015-05-28 | 스미또모 세이까 가부시키가이샤 | 흡수성 수지의 제조 방법 및 그것에 의해 얻어지는 흡수성 수지 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1037136B (de) † | 1954-12-27 | 1958-08-21 | Bayer Ag | Verfahren zur Herstellung von polymeren Trimethylenoxydderivaten |
| DE1911328A1 (de) * | 1969-03-06 | 1970-10-01 | Bayer Ag | Monocarbonsaeureester von Polyaetheralkoholen |
| JPH0613604B2 (ja) | 1985-03-22 | 1994-02-23 | 鐘淵化学工業株式会社 | 分子末端に不飽和基を含有するポリアルキレンオキシドの製造法 |
| US5338770A (en) * | 1988-06-08 | 1994-08-16 | Cardiopulmonics, Inc. | Gas permeable thrombo-resistant coatings and methods of manufacture |
| JP2558165B2 (ja) | 1989-08-31 | 1996-11-27 | 鐘淵化学工業株式会社 | 不飽和末端基を有する高分子量ポリアルキレンオキシドの製造方法 |
| CA2129442C (en) * | 1992-02-13 | 2003-05-27 | Morten P. Meldal | Polyethylene or polypropylene glycol containing polymer |
| US5463084A (en) * | 1992-02-18 | 1995-10-31 | Rensselaer Polytechnic Institute | Photocurable silicone oxetanes |
| US5573934A (en) * | 1992-04-20 | 1996-11-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Gels for encapsulation of biological materials |
| JP2686894B2 (ja) * | 1993-05-07 | 1997-12-08 | 三洋化成工業株式会社 | ポリエーテルポリオールのエーテル化物の製法 |
| JP3364915B2 (ja) * | 1995-02-15 | 2003-01-08 | 東亞合成株式会社 | 紙被覆用活性エネルギー線硬化型組成物 |
| JP3345826B2 (ja) | 1996-05-09 | 2002-11-18 | 一則 片岡 | グラフトポリマーおよびその前駆体 |
| JP3765896B2 (ja) * | 1996-12-13 | 2006-04-12 | Ｊｓｒ株式会社 | 光学的立体造形用光硬化性樹脂組成物 |
| IL136680A0 (en) | 1997-12-12 | 2001-06-14 | Macromed Inc | Heterofunctionalized star-shaped poly(ethylene glycols) for protein modification |
-
1999
- 1999-09-28 HU HU0103572A patent/HUP0103572A3/hu unknown
- 1999-09-28 NZ NZ511315A patent/NZ511315A/en unknown
- 1999-09-28 WO PCT/DK1999/000508 patent/WO2000018823A2/en active IP Right Grant
- 1999-09-28 EP EP99945955A patent/EP1137690B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-28 IL IL14184999A patent/IL141849A0/xx unknown
- 1999-09-28 US US09/787,881 patent/US7064179B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-28 DE DE69921850T patent/DE69921850T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-28 JP JP2000572278A patent/JP2002525405A/ja not_active Withdrawn
- 1999-09-28 AU AU58498/99A patent/AU766181B2/en not_active Ceased
- 1999-09-28 CZ CZ20011037A patent/CZ296517B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-09-28 ES ES99945955T patent/ES2232176T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-28 CA CA002345332A patent/CA2345332A1/en not_active Abandoned
- 1999-09-28 AT AT99945955T patent/ATE282057T1/de not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-03-27 NO NO20011554A patent/NO20011554L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1137690B2 (en) | 2007-01-24 |
| HU0103572D0 (en) | 2001-10-28 |
| CA2345332A1 (en) | 2000-04-06 |
| AU766181B2 (en) | 2003-10-09 |
| EP1137690B1 (en) | 2004-11-10 |
| ATE282057T1 (de) | 2004-11-15 |
| HUP0103572A3 (en) | 2003-05-28 |
| HUP0103572A2 (hu) | 2002-01-28 |
| WO2000018823A2 (en) | 2000-04-06 |
| DE69921850T3 (de) | 2007-08-02 |
| EP1137690A2 (en) | 2001-10-04 |
| IL141849A0 (en) | 2002-03-10 |
| ES2232176T5 (es) | 2007-09-16 |
| ES2232176T3 (es) | 2005-05-16 |
| WO2000018823A3 (en) | 2000-08-17 |
| NZ511315A (en) | 2003-09-26 |
| NO20011554D0 (no) | 2001-03-27 |
| DE69921850D1 (de) | 2004-12-16 |
| CZ20011037A3 (cs) | 2001-08-15 |
| JP2002525405A (ja) | 2002-08-13 |
| AU5849899A (en) | 2000-04-17 |
| DE69921850T2 (de) | 2005-10-27 |
| US7064179B1 (en) | 2006-06-20 |
| NO20011554L (no) | 2001-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3122460B2 (ja) | 固相用途のためのポリエチレングリコール誘導体 | |
| US5352756A (en) | Poly(ethylene or propylene glycol)-containing polymer | |
| Renil et al. | POEPOP and POEPS: Inert polyethylene glycol crosslinked polymeric supports for solid synthesis | |
| ES2352204T3 (es) | Método de síntesis peptídica en fase sólida. | |
| FI70234B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av aminofunktionaliserade akrylkopolymerer | |
| KR20050085745A (ko) | 올리고뉴클레오티드의 제조방법 | |
| CZ296517B6 (cs) | Makromonomery na bázi polyethylenglykolu, chemicky inertní polymery pripravené z techto makromonomeru a pouzití techto polymeru pro organické syntézya enzymatické reakce | |
| JP5048193B2 (ja) | 固相合成法及び試薬 | |
| US5545698A (en) | Polyethylene glycol derivatives for solid-phase applications | |
| US20030144467A1 (en) | Matrix solid-phase organic synthesis | |
| US5587443A (en) | Polymerizable emulsifiers and reactive groups and polymers of emulsifiers and other monomers | |
| KR20060015512A (ko) | 신규 기능성 펩티드 핵산 및 그 제법 | |
| EP1509555B1 (en) | Polyvinyl ethers | |
| WO2011007133A2 (en) | Polymer modified macromolecules | |
| Siyad et al. | Synthetic evaluation of disulphide-bonded sarafotoxin on a poly (oxy ether) grafted dendrimeric poly (alkyl amine) support for polymer assisted organic synthesis | |
| JP2021108572A (ja) | 核酸固相合成用基材及びその製造方法 | |
| WO2004113389A2 (en) | High capacity poly(alkylene)glycol based amino polymers | |
| Martens | Amine-thiolactone-ene conjugation: from polymer modification to sequence-controlled polymers | |
| CN117897392A (zh) | 水性固相肽合成 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20070928 |