CZ293392A3

CZ293392A3 - Leucotriene biosynthesis inhibitors

Info

Publication number: CZ293392A3
Application number: CS922933A
Authority: CZ
Inventors: Edward S Lazer; Julian Adams; Clara K Miao; Peter Farina
Original assignee: Boehringer Ingelheim Pharma
Priority date: 1991-09-24
Filing date: 1992-09-24
Publication date: 1993-12-15
Also published as: US5296486A; LV11181A; EP0535521A2; SG46381A1; EP0535521A3; AU2527492A; CA2078810A1; HUT64951A; US5552421A; IL103251A; NZ244429A; PL296038A1; HU213113B; FI924277L; LV11181B; FI924277A0; AU661034B2; KR930005992A; NO923695D0; NO923695L

Description

Oblast techniky

Vynález se týká inhibitorů biosyntézy leukotrienů ze skupiny benzoxazolovýcn, benzothiazolovýcn, oxazolpyridinových a thiazolpyridinových derivátů. Vynález se rovněž týká farmaceutických prostředků, které tyto látky obsahují.

Dosavadní stav techniky

Leukotrieny (LT) jsou účinná látky, podporující zánětlivou reakci, které jsou produkovány při metabolismu aracnidonové kyseliny. Tyto látky patrně hrají svou úlohu při různých zánětlivých onemocněních, jako jsou asthma, alergická rýma, rheumatoidní arthritis, zánětlivá onemocnění močového měchýře a lupenka. Z uvedeného důvodu je možno inhibici biosyntézy LT využívat při léčbě onemocnění, při nichž dochází k zánětům nebo k poruchám metabolismu kyseliny arachidonové.

3iosyntáza leukotrienů a jejich pathofysiologie jsou dobře dokumentovány. V řadě výzkumných prací se popisují snahy blokovat pathofyziologické účinky těchto látek buď blokováním jejich biosyntézy nebo blokováním jejich účinku na úrovni receptorů. Ve dvou souhrnných článcích z poslední doby, J. H. Musser a A. F. Kreft, J. Med. Chem., 1992,

35, 2501 a A. Shaw a R. 0. Krsll, J. Med. Chem., 1991, 34, 1235 se popisuje stav výzkumu v tomto oboru včetně výsledků klinických pokusů. Tyto výsledky, stejně jako další výsledky, shrnuté v uvedených článcích podporují názor, že činidla, schopná blokovat biosyntézu nebo účinnost leukotrienů bude možno použít k léčbě asthmatu a pravděpodobně i dalších svrchu uvedených onemocnění.

Podstata vynálezu

Vynález se týká inhibitorů biosyntézy leukotrienů ze skupiny substituovaných benzoxazolových, benzothiazolových, oxazolpyridinových a tniazolpyridinových derivátů obecného vzorce I

(I) kde

X znamená atom kyslíku nebo atom síry,

Y znamená atom uhlíku nebo atom dusíku,

Z znamená atom uhlíku nebo atom dusíku za předpokladu, že Y a Z neznamenají současně atomy dusíku, a Rg, stejné nebo různé, znamenají nezávisle na sobě atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, atom halogenu, trifluormethyl, nitrilovou skupinu, alkoxyskupinu o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -COgRy, kde R? znamená atom vodíku nebo al^kyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(O)NRgR^, kde Rg a R^ znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří společně s dusíkovým atomem morfolinový, pyrrolidinový nebo piperidinový kruh, dále nitroskupinu, skupinu !<de R^g a znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(O)R^g, kde znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu ^-S32^R12’ -HHSO₉R_1?, nebo -S□ ₂MRR, kde ^13 ^a ^14 znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku,

R^ znamená cyklohexyl nebo fenyl, popřípadě substiotuováný substituenty ze skupiny atom halogenu, trifluormethyl, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku a alkoxyskupina o 1 až 4 atomech uhlíku, dále skupinu SC^R^, NHC(3)R^₂, -NHSC^Ri?, ^-^2‘^13^14 ^n3Í3Q nitroskupinu, nebo může R-j znamenat 1-piperidinylový kruh, 2-, 3- nebo 4-oyridino vý kruh, morfolinový kruh, thiomorfolinový kruh, pyrrolidinový kruh, imidazolový kruh, popřípadě substituovaný na atomu dusíku alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech uhlíku, 2-tniazolový kruh nebo 2-methyl-4-thiazolový kruh nebo dialkylaminoskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku nebo alkyletherovou skupinu o 1 až 4 atomech uhlíku,

R^ znamená esterovou skupinu vzorce -CO^R^, kde R^ je alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, dále amidovou skupinu vzorce -C(Q)fiR^^R^g, kde R^^ a R^g znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří spolu s atomem dusíku morfolinový, piperidinový nebo pyrrolidinový kruh, dále fenylový kruh, popřípadě substituovaný atomem halogenu, alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech uhlíku nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku, 3-methyl-l,2,4-oxadiazol-5-ylový zbytek, 2-tnienyl, 3-thienyl, 2-, 3- nebo 4-pyridyl, 2-imidazolovou skupinu, popřípadě substituovanou na dusíkovém atomu methylovým zbytkem, 2-thiazol, popřípadě substituovaný v poloze 4 methylovým zbytkem, keton vzorce -C(0)R^₉, kde R^ znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo 1-methylimidazol-2-yl, dále ether vzorce -CH₂0R₂g, kde R_2g znamená alkyl α 1 až 3 atomech uhlíku, thioetner skupinu ~^CH2^SS20’ sulfon skupinu -CH2SQ?CH3, ^{arnin _CH}2^N(-^R2q\’ derivát aminu -CH2NHC(O)R₂₁, kdě R_2]_ znamená methyl nebo NHCHj, nebo -CH_?MHS0₂Me₂ nebo karbamát -CH₂QC(0)NHMe, ^a ^6 znamenají nezávisle na sobě atom vodíku nebo methyl a π znamená celá číslo 0, 1 nebo 2.

Uvedené sloučeniny se mohou nacházet v racemické formě nebo ve formě čistých nebo v podstatě čistých enanciomerů.

Ve výnodných sloučeninách se substituent R^ nachází v poloze 5 a znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo atom halogenu, Rj znamená cyklohexyl, R znamená atom vodíku a π - 1.

V S. Advani a J. Sam, J. Pharm. Sci., 57, str. 1695, 1963 se uvádějí čtyři sloučeniny se základní strukturou, obdobnou struktuře sloučenin obecného vzorce I. Uvádí se syntéza uvedených čtyř látek a uvádí se, že by mohlo jít o potenciální protinádorové látky, avšak není prokázána žádná biologická účinnost. V uvedených látkách znamenají symboly Y a Z atomy uhlíku, R^ znamená skupinu R^ a R₂ znamenají atomy vodíku a R^ znamená 4-C^H^OH, -C₆H₅, 4-imidazolyl nebo -CH₂SCH.j.

V DE 3 419 994 se popisují sloučeniny obecného vzorce I v němž Y a Z znamenají atomy uhlíku, X znamená atom kyslíku nebo síry, R^ a R? znamenají atom vodíku, atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupinu vždy o 1 až 4 atomech uhlíku, kyanoskupinu, nitroskupinu nebo trifluorrnethyl, R^ znamená skupinu -C(Q)QR^^, kde R.^ je atom vodíku, alkyl, alkenyl nebo alkinyl, skupinu -C(O)MR^gR^g, kde R^g a R^ znamenají atomy vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, fenyl nebo alkoxyskupinu nebo tvoří společně s atomem dusíku pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, dále kyanoskupinu nebo skupinu -C(S)ilH_?. Skupina, která je v uvedeném patentovém spisu označována symbolem Y je tvořena symbolem a uhlíkovým řetězcem tj. (CH₂)^ _z obecného vzorce I. Skupiny Y podle uvedeného patentového spisu jsou tedy alkyl s přímým nebe rozvětveným řetězcem o 1 až 3 atomech uhlíku s 1 až 3 atomy uhlíku mezi atomem dusíku a R^, nebo jde o skupiny, označené v uvedeném patentovém spisu symbolem Z, dále může jít o methylthioalkyl o 1 az 3 atomech uhlíku v alkylové části nebo o fenylalkyl.

Ve významu R^ se specificky neuvádí cyklohexyl nebo substituovaný fenyl. Ve významu nejsou uváděny zbytky ketonu, fenyl a heteroaromatické nebo heterocyklické kruhy, pro symboly Y nebo Z se rovněž neuvádí atom dusíku. Ve významu R,

O je uveden atom vodíku a alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku. Nejsou uvedeny výhodná sloučeniny podle vynálezu. Uvádí se, že uvedená látky je možno použít k ochraně kulturních plodin proti některým skupinám nebo typům herbicidů.

Sloučeniny podle vynálezu je možno získat pomocí postupů, které jsou v oboru známy a byly publikovány v literatuře. Se například možno je získat reakcí příslušně substituovaného 2-chlorbenzoxazolu, 2-chlorbenzothiazolu, 2-chloroxazolpyridinu nebo 2-chlorthiazolpyridinu s aminem, aminokyselinou nebo esterem aminokyseliny. Tento postup je blíže znázorněn v následujícím schématu A

Schéma A

Reakce podle reakčního schématu A se provádí v inertním rozpouštědle, například methylenchloridu, toluenu nebo dimethylsulf oxidu za přítomnosti bazického katalyzátoru, jako triethylaminu nebo íla0H. Volba rozpouštědla a katalyzátoru bude záviset na povaze reakčních složek a snadno ji provede každý odborník.

Pro syntézu sloučenin obecného vzorce I je taká možno použít modifikaci postupu, který byl v literatuře popsán pro výrobu 2-aminobenzothiazolových derivátu. Tato syntéza je schematicky znázorněna na následujícím schématu 3

Schéma 3

Postuo podle schématu 3 zahrnuje reakci příslušně substituovaného isothiokyanátu s aminem nebo esterem aminokyseliny ve vhodném inertním rozpouštědle, například etheru, s následnou cyklizací thiomočoviny, získaná jako meziprodukt působením sul fórylehlořidu nebo bromu v jiném inertním rozpouštědle například etheru nebo chlorbenzenu.

Schéma C

Syntézu podle schématu C je možno užít v případě těch sloučenin obecného vzorce I, v němž X znamená atom síry a Z znamená atom dusíku. Halogenaminopyridin ss převede na isothiokyanát, například reakcí s thiofosgsnem za přítomnosti baze, například uhličitanu sodného v inertním rozpouštědle. Působením aminu na isothiokyanát v inertním rozpouštědle se získá thiazolpyridin. Po zavedení některých dalších substituentů na 2-chlor-3-aminopyridinovém kruhu se po reakci s isothiokyanátem jako meziprodukt izoluje thiomočovina. V tomto případě je možno cyklizaci výsledného thiazolpyridinu uskutečnit zahříváním v inertním rozpouštědle za přítomnosti kyselého nebo bazického katalyzátoru, například v ethanolovém roztoku kyseliny chlorovodíkové nebo v dimethylformamidu, obsahujícím uhličitan draselný.

Isomsrní thiazolpyridinové deriváty je možno získat cyklizaci 3-halogen-2-thiomočovinou substituovaného pyridinu. Tato syntéza je schematicky popsána v následujícím schématu D.

Schéma D

Va schématu O se zahřívá v inertním rozpouštědle s bazický» katalyzátorem, například uhličitanem draselným v dimethylformamidu. 2-amino-3-halogenoyridin, užitý jako meziprodukt, je možno připravit například oromací 2-aminooyridinu, popřípadě substituovaného. Isotniokyanát je možno připravit způsobem podle schématu C.

Sloučeniny obecného vzorce I, v němž znamená skupinu kyselé povahy nebo esterovou skupinu je možno modifikovat za vzniku sloučenin obecného vzorce I, v němž R^ znamená zbytek amidu, methyloxadiazolu, ketonu, etneru nebo thioetheru. Provedení takové modifikace bude dále znázorněno v následujícím schématu E.

Schéma E

C0I co₂ ^h _^Di<if _> c(o)hr₇r₃

Metl THF °₂ ^h----C(0)CH₃ acetamidoxim CO_?Et -UaH, THF

CH.

C0₂ET 1. LiAlH

2. MeCl,Et₃H

3. HaXR ^CH2^XR20

S nebo 0

Všechny obecné postupy, znázorněné ve schématu E jsou v oboru známé a byly také popsány v chemické literatuře.

Pokud jde o stereochemii sloučenin, získanýc.n způsoby a scnematy, uvedenými svrchu, je možno v případě, že výchozí aminy, užité ve schématech I a II jsou enanciomerně čisté, získat jediný enanciomer výsledného produktu s konfigurací R nebo S na asymetrickém atomu unlíku. V případe, ž se užije jako výchozí látka racemický amin, to znamená směs forem R a S, získá se racemický výsledný produkt. Racemické sloučeniny je možno rozdělit na jednotlivé enanciomery známými postupy, například dělením pomocí diastereomerní soli, chromatografií na cnirálním sloupci a podobně. V průběhu přihlášky bude v případě označení enanciomerních aminokyselin užito označení 0 a L a pro racemické aminokyseliny označení DL.

Praktická provedení vynálezu bude osvětleno v následujících příkladech. Tyto příklady však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu. Jak bude odborníkům zřejmé, je možno postupy, která byly uvedeny svrchu, získat ještě další tyto sloučeniny, například látky, v nichž R^ znamená pyrrolidinamidovou skupinu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

OL-M-(benzothiazol-2-y1)fenylalaninhydrochlorid

11,3 g, 71,4 mmol fenylalaninu se oo částech přidá k suspenzi 5,7 g, 143 mmol hydroxidu sodného ve formě prášku v 50 ml dimethylsulfoxidu (DMSO) a směs se míchá pod dusíkem Pak se v průběhu 15 minut při teplotě místnosti přidá 11 g, 65 mmol 2-chlorbenzothiazolu. Reakční směs se míchá 4 hodiny na olejové lázni při teplotě 95 °C. Pak se reakční směs zchladí, vlije se do 200 ml směsi vody a ledové drti, načež se pH výsledné směsi upraví na hodnotu 1 až 2 přidáním IDU kyseliny chlorovodíkové.

Ke směsi se přidá další podíl ledu a směs se promíchá a zfiltruje. 3ílý pevný podíl se rozpustí v alkalickém roztoku, promíchá s celitem, zfiltruje, okyselí 2Π kyselinou chlorvodíkávou a znovu zfiltruje. Výsledná oevná látka se promyje vodou a ethanolem a usuší se. Tímto způsobem se ve výtěžku 30 % získá 6,47 g, 19,3 mmol pevného produktu s teplotou tání 250 až 251 °C.

Příklad 2

Ethylester OL-M-(benzothiazol-2-yl)fenylalaninu

Sloučenina č. 4, tabulka 1

3,32 g, 32,1 mmol thionylchloridu se po kapkách přidá ke 3,2 g, 10,7 mmol produktu z příkladu 1 v suspenzi ve 200 ml ethanolu. Reakční směs se zahřívá 4 hodiny na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se reakční smis odpaří, odparek se rozpustí v 75 ml ethylacetátu a roztok se extrahuje 2 x 50 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného, pak 50 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, vysuš a' se síranem sodným a odpaří. Získaný produkt se nechá překrystalovat z ethanolu, čímž se ve výtěžku 64 ¾ získá 2,25 g, 6,9 mmol produktu s teplotou tání 137 až 139°C.

Příklad 3

Ethylester OL-N-(6-isopropylbenzothiazol-2-yl)-4-chlorfenylalaninu Sloučenina č. 7, tabulka 1 g, 13,9 mmol hydrochloridu ethylesteru OL-4-chlorfenylalaninu se převede působením triethylaminu na volnou bázi. Roztok táto volné baze v 75 ml etheru se pak přidá k roztoku 4-isopropylfenylisothiokyanátu ve 150 ml etheru, zomlazenému v lázni s ledem a solí. Teplota se udržuje v prů bénu přidávání přibližné na 0 °C. Reakční směs se míchá 4,5 hodin, po této době je teplota reakční směsi 12 °C.

Pak se reakční směs zfiltruje, filtrát se odpaří a výsledný pěnovitý odparek se rozetře s petroletherem za současného chlazení v ledu. Tímto způsobem se ve výtěžku 30 °í získá 6,1 g, 15,1 mmol N-(4-isopropylfenyl)-M'-/2-(4-chlorfenyl)-l-(ethoxykarbonyl)ethyl/thiomočoviny s teplotou tání 73 až 75 °C.

g, 14,3 mmol tohoto meziproduktu se rozpustí ve 25 ml cnloroenzenu a roztok se zchladí v ledové lázni na 0 °C.

Pak se po kapkách přidá roztok 2,76 g, 20,4 mmol sulfurylcnloridu v 5 ml cnlorbenzenu. Směs se nechá stát 5,5 hodin, pak se odpaří, odparek se rozpustí ve 150 ml ethylacetátu, roztok se promyje nasyceným roztokem uhličitanu sodného a pak nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Produkt se nechá krystalizovat z ethanolu, čímž se ve výtěžku 63 % získá 4,07 g, 10,1 mmol produktu s teplotou tání 105 až 107 °C.

Příklad 4

2-(2-cyklohexyl-l-fenyl)ethylaminobenzoxazol

Sloučenina č. 51, tabulka 3

Směs 1,12 g, 7,3 mmol 2-chlorbenzoxazolu, 1,43 g, 7,3 mmol 2-cyklohexyl-l-fenylethylaminu a 0,33 g, 3,3 mmol triethylaminu ve 305 ml methylenchloridu se zahřívá 31 hodin na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se reakční směs zředí 50 ml methylenchloridu, extrahuje se 1 x 50 ml vody, x 50 ml IN kyseliny chlorovodíkové, 1 x 50 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, pak se vysuší síranem sodným a odoaří. Výsledný pevný podíl se nechá překrystalovat z ethanolu, čímž se ve výtěžku 60 % získá 1,4 g, 4,4 mmol produktu s teplotou tání 129 až 131 °C.

Příklad 5

L-2-/2-cyklohexyl-l-(3-methyl-l,2,4-oxadiazol-5-yl)ethyl/amino-5-methylbenzoxazol

Sloučenina č. 125, tabulka 6

0,47 g, 60¾ disperze hydridu sodíku v minerálním oleji (0,23 g, 11,3 mmol hydridu sodíku), 0,39 g, 5,3 mmol acetamidoximu, 1,43 g, 4,7 mmol methylesteru N-(5-methylbenzoxazol-2-yl)cyklohexylalaninu a několik molekulových sít se smísí ve 20 ml tetrahydrofuranu THF a směs se vaří 2 hodiny pod dusíkem pod zpětným chladičem. Pak se směs vlije do vody a extrahuje ethylacetátem. Extrakt se vysuší síranem sodným a odpaří. Produkt se čistí rychlou chromatografií na silikagelu při použití směsi methylenchloridu a methanolu v poměru 99 : 1. Po rozetření s petroletherem se získá 70 mg produktu jako bílá pevná látka s teplotou tání 113 až 119 °C.

Příklad 6

L-N-(5-methylbenzoxazol-2-yl)cyklohexylalanin-íl'-methylamid Sloučenian č. 144, tabulka 2

Roztok 1,03 g, 3,6 mmol L-N-(5-methylbenzoxazol-2-y1)cykloihexylalaninu v 15 ml methylenchloridu se zchladí v ledová lázni. Pak se po částech přidá 0,33 g, 5,4 mmol karbonyldiimidazolu. Po jedná hodině se nechá 45 minut reakční směs probublávat plynný methylamin. Pak se reakční směs zředí methylenchloridem, promyje se vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem sodným a odpaří. Produkt se čistí rychlou chromatografií na silikagelu při použití směsi methylenchloridu a methanolu v poměru 99 : 1. Po překrystalování z isopropanolu se získá 0,2 g výsledného produktu s teplotou tání 202 až 204 °C.

Příklad 7

3-/(6-isopropylbsnzothiazol-2-yl)amino/-4-fenylbutan-2-on Sloučenina č. 123, tabulka 7

Roztok 2 g, 5,9 mmol Π-(a-isopropylbenzothiazol-2-y1)fenylalaninu v 60 ml THF se zchladí v lázni s ledem a solí pod dusíkem na -5 °C. Pak se přidá injekční stříkačkou v průběhu 1 minuty 26 ml, 36,4 mmol roztoku 1,4 N MeLi v etheru. Po 2 hodinách se rychle přidá 10 ml 73 mmol chlortrimethylsilanu a reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti. Pak se reakce zastaví přidáním 1U kyseliny chlorovodíkové, produkt se extrahuje etherem, vysuší síranem sodným a odpaří. Produkt se čistí rychlou chromatografií na silikagelu, jako eluční činidlo se užije methylenchlorid.

Po překrystalování z ethanolu se ve výtěžku 33 % získá 0,75 g, 2,2 mmol produktu s teplotou tání 107 až 110 °C.

Příklad 3

2-/(2-cykloh2xyl-l-fenylethyl)amino/thiazol/5,4-b/pyridin Sloučenina č. 171, tabulka 11

Směs 1,23 g, 10 mmol 3-amino-2-chlorpyridinu, 2,1 g, mmol uhličitanu sodného a 1,33 g, 12 mmol thiofosgenu v 50 ml methylenchloridu se míchá pres noc při teplotě místnosti. Pak se reakční směs vlije do vody a extrahuje se methylenchloridem. Organická extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří na olej. Produkt se čistí chromatografií na silikagelu, jako eluční činidlo se užije petrolether, ve výtěžku 94 % se získá 1,6 g, 9,4 mmol thioisokyanátu.

0,516 g, 3,02 mmol tohoto thioisokyanátu se přidá ke směsi 0,66 g, 2,75 mmol 2-cyklohexy1-1-fenylethylaminhydrochloridu a 0,273 g, 2,75 mmol triethylaminu ve 25 ml THF. Reakční směs se zahřívá 2 hodiny na teplotu varu pod zpětným chladičem, pak se vlije do vody a směs se extrahuje etherem. Organická extrakty se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Po překrystalování odparku ze směsi methylenchloridu a petroletheru se získá ve výtěžku 67 % celkem 0,625 g 1,34 mmol produktu s teplotou tání 146 až 143 °C.

Příklad 9

2-/(2-cyklohexyl-l-(2-pyridyl)ethyl)amino/-6-methylthiazol-/4,5-b/pyridin

Sloučenina č. 146, tabulka 11

3,19 g bromu se po kapkách přidá při teplotě 0 °C k roztoku 2-amino-5-pikolinu v 75 ml methylenchloridu. Po přibližně 2 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs extrahuje nasyceným roztokem uhličitanu sodného a pak roztokem thiosíranu sodného. Vodné extrakty se spojí, promyjí se methy lenchloridem, organické extrakty sa spojí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem sodným a odpaří, čímž se získá 3,59 g surového materiálu. Tento produkt se čistí rychlou chromatografií na silikagelu, k eluci sa užije petrolether se zvyšujícím se množstvím methylenchloridu v rozmezí Cl až 40 čímž se získá 3,05 g 2-amino-3-brom-5-pikolinu s teplotou tání 63 až 70 °C.

K 2,34 g, 15 mmol svrchu získaného produktu v 50 ml methylenchloridu s obsahem 3,13 g, 30 mmol uhličitanu sodného sa přidá 2,07 g, 13 mmol thiofosgenu. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, pak se extrahuje vodou, vodná fáze se zpětně extrahuje methylenchloridem, organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem horečnatým a odpaří, čímž se získá isothiokyanát jako olejovitý materiál, který stáním krystalizuje. Získá ss 3,9 g produktu, jehož IR-spektrum má maximum při 2050 cm'¹.

K roztoku 1,0 g, 4,3 mmol tohoto isothiokyanátového derivátu a 1,04 g, 4,3 mmol 2-cyklohexyl-l-fenyletnylaminu v 50 ml bezvodého THF se přidá 433 mg, 4,3 mmol triethylnitrilu. Výsledná směs se zahřívá 2 hodiny na teplotu varu pod zpětným chladičem. Triethylaminnydrochlorid se odfiltruje a filtrát se odpaří, čímž se získá 1,6 g thiomočoviny, která stáním krystalizuje.

Směs 540 mg, 1,15 mmol této thiomočoviny a 317 mg,

2,3 mmol uhličitanu draselného v 10 ml OMF se zahřívá přes noc na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se reakční směs vlije do vody a směs se třikrát extrahuje etherem a jednou methylenchloridem. Organické extrakty se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného , vysuší síranem sodným a odpaří, čímž se získá 450 mg produktu. Po překrystalování ze směsi methylenchloridu, etheru a petroletheru se získá 210 mg produktu s teplotou tání 213 až 214 °C.

Innibice biosyntézy LTS^ v lidských pólymorfonukleárních leukocytech (PMN)

Innibice biosyntézy leukotrienu se měří tak, že se stanoví, zda a do jaké míry je zkoumaná látka schopna způsobit innibici produkce LT3^ z endogenní kyseliny arachidonové v leukocytech periferní krve u člověka.

Oo ploten pro tkáňové kultury se 48 vyhloubeními se uloží roztok zkoumané látky a pak se přidají lidská polymorfo18 nukleární leukocyty, izolované z periferní krve v hustotě 1,5 x 10 ⁶ buněk v jednom vyhloubení. Plotny se předběžně inkubují 15 minut při teplotě 23 °C zaprotřepávání. Pak se buňky stimulují jonoforem vápníku A23137 v konečné koncentraci 2,5 mikromolů dalších 10 minut. Reakce se ukončí přidáním roztoku EGTA do konečné koncentrace 10 mM. Pak se srnas odstředí 10 minut při 1500 ot/min. Supernatanty se skla dují při teplotě -70 °C. Množství LT3^ se stanoví zkouškou RIA při použití běžně dodávaného zkušebního balíčku. K výpočtu ΙΟ^θ byla užita nelineární analýza regrese.

V následující tabulce je uvedena inhibice biosyntézy LT3^ v procentech pro sloučeniny podle vynálezu v uvedených koncentracích, stanovená hodnoty IC^g jsou uvedeny v mikromolech.

Tabulka 1 - Estery

slouč. č.	0/L^a	^R1	P ^b	^R16	X	t.tání	ÍCjo/UH
1	DL	H	Pn4Cl	Et	S	olej	0,2
2	OL	H	Ph4F	Et	S	129-131	0,33
3	DL	H	Qh43r	Et	S	134-106	0,15
4	OL	H	Ph	Et	S	137-139	0,4
5	L	H	Ph403z	Et	S	olej	0,53
z O	L	6-IPr	Pn	Et	S	olej	0,25
7	DL	6-iPr	Ph4Cl	Et	S	105-107	0,33
3	L	6-iPr	Ph	Me	S	114-115	0,14
9	DL	6-0Me	Ph4Cl	Et	S	129-131	0,23
13	0	6-iPr	Ph	Me	S	115-116	0,65
11	DL	6-n3u	Ph4Cl	Et	s	113-114	0,17
12	L	6-Et	Ph	Et	s	102-104	0,24
13	L	H	Ph	t-but	r» □	50-52	0,73
14	L	5-Et	Ph	Et	s	olej	0,009
15	L	5-Et	Cyh	Et	s	olej	0,027
16	L	H	Cyh	Et	s	prysk.	0,006
17	L	H	Ph	Et	0	olej	0,15
13	D	H	Ph	Et	0	olej	1,5
19	L	5-iPr	Ph	Et	0	olej	0,00052
20	L	6-iPr	Ph	Et	0	olej	0,22
21	L	H	Cyh	Me	0	olej	0,0064
22	0	H	Cyh	Me	0	olej	0,10
23	L	5-iPr	Cyh	Me	0	olej	0,001
24	L	5-Me	Cyh	Me	0	olej	0,0017
25	L	5-Me	Cyh	t-3u	0	olej	2 0,3^d

Tabulka 1 - pokračování

slouč. č.	0/L^a	^R1	□ b 3	^R1S	X	t.táni	^IC50/
26	0	5-Me	Cyh	Ma	0	olej	0,016
27	OL	5-Oí-le	2MeTHz	Et	0	olej	·. 0,3^d
23	OL	5-01	2-Tllz	Et	0	olej	< 0,3^d
29	DL	5-01	2Me4THz	Et	0	olej	0,037
30	OL	5-iPr	3-Py	Et	0	olej	0,13
31	OL	5-iPr	4—Py	Et	0	olej	0,l^d
32	OL	5-OMe	3-Py	Et	0	Olej
33	OL	5-iPr	2Me4THz	Et	0	olej	<0,03^d

Tabulka IA - Estery

slouč. Čt	0/L	^R6	*5	'V	n	X	teplota tání	^IC50/
34	OL	H	H	CH₃	0	s	olej	1,4
35	OL	H	H	pu ~^d3	0	s	olej	0,63
36	OL	CH,	H	H	0	s	olsj	1,0
37	OL	H	H	H	1	3	69,5-72	0,52
33	OL	Γ»	ch₃	H	0	S	97-93	0,20
39	OL	H	ch₃	H	0	0	39-91,5	0,076

Vysvětlivky pro tabulky 1 a 1A:

a. OL=racsmická sloučenina. L nebo 0 znamená jeden z enanciomerů, který má na cnirálním atomu uhlíku stereochemii, analogickou odpovídající aminokyselině v konfiguraci L nebo 0.

b. Ph = fenyl, PhX = substituovaný fenyl, Cyh = cyklohexyl,

2- Tnz = 2-thiazolyl, 2Me4Thz = 2-methyl-4-thiazolyl,

3- Py = 3-pyridyl, 4-Py = 4-pyridyl

c. jeden z párů diasteromerů

d. vyšší než 53¾ inhibice při této koncentraci, hodnota nebyla dále charakterizována.

Tabulka 2 - Estery amidů

slouč. č.	D/L	^R1	«J³	^R17	R Y ,<ig ,\	teplota tání	^IC50/^uí'
43	L	H	Ph	H	H	S	94-96	3
41	OL	H	Ph	Me	Me	S	olej	3
4 2	OL	6-iPr	Ph	Et	H	S	161-163	3
43	L	H	Ph	Me	OMe	0	prysk.	Z.1^C
44	L	5-Me	Cyh	Me	H	0	202-204	0,072
45	L	5-Me	Cyh	Me	OMe	0	prysk.	0,03
46	L	5-Í-le	Cyh	b	b	0	prysk.	0,19

a. stejně jako vysvětlivka b) v tabulce 1.

b. R₁₇ a R₁₃ společně s atomem dusíku tvoří piperidinový kruh.

c. stejně jako vysvětlivka d) v tabulkách 1 a 1A.

Tabulka 3 - Bioisosstery - fenylester

47	DL	II	Ph
4a	¹¹L¹¹	H	Ph
49	0	H	Ph
50	OL	H	Ph
51	OL	H	Cyh
52	0	H	Cyh
53	ti It	H	Cyh
54	OL	5-iPr	Cyh
55	OL	H	Cyh
56	OL	H	Cyh
57	OL	H	Cyh
53	OL	H	Cyh
59	OL	5-1	Cyh
60	OL	5-
		íihso₂-ch₃	Cyh
61	DL	5-UHC(0)-
		CH₃	Cyh
62	DL	5-NHC(0)-
		MUCH,	Cyh

Ph	S	54-56	0,16
Ph	S	olej	0,032
Ph	S	olej	0,23
Ph	0	154-156	<i,o^d
Ph	0	129-131	0,0069
Ph	0	141-143	0,26
Ph	0	135,5-137	0,0036
Ph	0	119-122	0,0063
Ph4Cl	0	142-144	0,3
Pn40íle 0	63-67	0,55
Ph3Me	0	136-133	0,30
Ph2Cl	0	146-143	0,03
Ph	0	136-137	0,013
Ph	0	133-190	0,16
Ph	0	145-147	0,076
Ph	0	211-212	< 1,0''

Tabulka 3 - pokračování

slouč. č.	0/L³ R_x		%^b	X	teplota tání	^IC50/
63	OL 5-CQ₂H	Cy h	Ph	0	232-234	0,19
64	DL 5-C(0)íiH₂	Cyh	Ph	0	131-133	l,0^d
65	DL 5-C(0)NM3	₂ Cyh	Ph	0	194-196	0,17
66	OL 6-C0₉H	Cyh	Ph	s	271-272	0,22
67	OL 5-CM	Cyh	Ph	a	166-163	0,15
63	OL C	Cyh	Ph	0	154-156	<l,Q^d
69	DL CH₂0H	Cyh	Ph	0	137-139	< l,3^d
70	OL 5-tetra- zolyl	Cyh	Ph	0	133-191	0,16
71	OL H	Cyh	Ph4F	0	144-145	• 0,17
72	L 5-C1	NEt₉	Ph	0	242-244	0,35
73	L 5-iPr	NnPr₉	Ph	0	olej	<300^d
74	L 5-iPr	OEt	Ph	0	olej	0,11
75	L 5-iPr	0n3u	Ph	0	olej	0,055
76	L 5-t3u	morf.	Ph	0	197-199	<0,03^d
77	L 5-iPr	NRt₂	Ph	0	olej	<0,3^d
73	L 5-C1 thiomorf.	Ph	0	69-71	0,043

a. OL = racemická látka, L a 0 = označení L-isomeru, jehož účinnost je vyšší než účinnost isomeru D analogicky k esterům, kde L a 0 jsou známé.

b. stejně jako poznámka b) v tabulce 1, mimoto morph = N-morfolinyl a thiomorpn = U-thiomorfoliny1.

c. morfolinkarbonyl

d. stejně jako vysvětlivka d) v tabulce 1.

Tabulka 4 - Sioisoestery - pyridyl ester

slouč. č.	0/L	X	^R1	«i³	pyridyl isomer	teplota tání	IC_5g/uM
80	OL	0	H	Cyh	3	prysk.	0,055
31	DL	0	5-Me	Cyh	2 104-	105	0,0031
32	DL	0	5-Me	Cyh	3	150-151	0,024
33	DL	0	5-Me	Cyh	4	133-139	0,19
34	DL	0	6-íJO₂	Cyh	3	136-137,	5 0,035
35	OL	0	5-N0₂	Cyh	3	139-190	0,024
36	DL	0	5-C1	Cyh	3	136-137	0,023
37	(-)^X	0	5-Me	Cyh	2	□ l3j	0,0013
33	( + )^X	3	5-Me	Cyh	2	olej	0,045
39	(-)^X	0	5-Me	Cyh	3	150-151	0,016
90	( + )^X	0	5-Me	Cyh	3	150-151	<1,0
91	OL	0	5-C1	Cyh	2	132-134	0,002
92	DL	0	5-C0_?Me	Cyh	2	129-131	0,012
93	DL	0	5-C1	Ph4F	2	112-114	0,019
94	DL	0	5-iPr	Pn4F	2	56-53	0,012
95	DL	0	5-CF_}	Cyh	2	91-93	0,0012

Tabulka 4 - pokračování

slouč č.	. 0/L	X	^S1	9 ^a'<3	pyridyl isomer	teplota tání	IC_5g/uM
96	OL	5	5-C1	Ph4F	2	133-135	0,027
97	OL	S	5-C1	Cyh	2	129-132	0,004
93	OL	0	5-iPr	Ph4Cl	2	65-67	0,029
99	OL	0	5-CI	Ph4Cl	9	132-134	0,014
100	OL	0	5-iPr	Ph3Cl	2	51-52	0,005
101	OL	0	5-CQ₂Me	Ph4F	2	151-152	0,027
102	OL	s	5-C1	Cyh	2	129-132	0,004
103	OL	0	5-SO₂NMi	e_? Ph4F	2	173-179	0,050
104	OL	0	5-01	Ph4M0_?	2	72-74	0,03^b
105	DL	0	5-F	Ph3Cl	2	131-133	<0,03^b
106	OL	s	6-CF,	Ph4F	2	149-150	<l,O^b
107	OL	0	5-CF₃	Ph4F	2	105-107	0,003
103	OL	0	5-CF₃	Cyh	2	91-93	0,001
109	DL	0	5-F	Cyh	2	142-143	,5 0,002
110	DL	0	5-F	Pn4F	2	117-119	,5 0,021
111	OL	0	4,5-diF	Cyh	2	133-134	0,004
112	OL	0	5,6-diF	Cyh	2	131-133	0,001
113	OL	0	5,6-diF	Ph4F	2	143-144	,5 0,024
114	OL	0	5-QMe	Ph4F	2	111-113	0,011
115	OL	0	5-M0₉	Ph4F	2	174-175	<0,03^b
116	OL	0	5-iPr	2Me4Tnz	2	116-117	< 3»i^b
117	OL	0	5-C1	2Me4Thz	2	142-143	<0,l^b
113	(-)^X	0	5-C1	Ph4F	2	olej	0,01
119		0	5-C1	Ph4F	2	olej	0,32

χ (-) a (+) znamenají levotočivý a pravotočivý isomer.

enanciomery byly odděleny pomocí HPLC na slouoci Ciralcel OD, eluce hexanem, isopropanolem a diethylnitrilem v poměru 950 : 50 : 1.

a. stejná jako vysvětlivka b) v tabulce 1.

b. stejne jako vysvětlivka d) v tabulce 1.

Tabulka 5 - Oioisoestery - thiofen

120

D/L teplota tání °C ^IC50/^uM

OL

103 - 110

0,0062

Tabulka 6 - Bioisoestery - methyloxadiazol

slouč č.	D/L	3 p ³ *1 3	X	teplota tání °C	^IC50/^uM
121	OL	H Ph	S	122-124	1,3
122	L	H Ph	S	117-119	1,3
123	L	5-Et Ph	S	134-136	41,Q^b
124	L	H Cyh	S	147-149	0,12
125	L	5-Me Cyh	0	113-119,5	0,023
126	OL	5-iPr Ph4F	0	36	40,3^b
127	OL	5-iPr 2Me4Thz	0	45-43	4 l,0^b
a. st	e jnš jako	vysvětlivka b)	v	tabulce 1
b. st	ejnš jako	vysvětlivka d)	v	tabulce 1.

Tabulka 7 - Sioisoestery - ketony

slouč. č.	D/L	^S1	*3³
123	L	6-iPr	Ph
129	L	H	Ph
130	L	H	Ph
131	L	5-Me·	Cyh
132	L	5-i-le	Cyh

^R19	X	tsolota tání °C	^IC50/^!
ch₃	s	107-110	0,35
ch₃	0	olej	<1,0
Ph	0	pryskyř.	<0,3
Ph	0	pryskyř.	<1,0
b	0	pryskyř.	0,023

a. stejně jako vysvětlivka b) v tabulce 1

b. l-methyl-2-imidazolyl.

Tabulka 3 - Bioisoestery - různé acyklické estery

slouč. č.	0/L	^S1	p ^a ^R3	^R4	teplota tání	^IC50/
133	L	5-iPr	Ph	CH₂0Et	olej	0,016
134	L	5-iPr	Ph	CH₂0Pr	olej	0,22
135	L	5-C1	Pn	CH_?OEt	olej	0,029
136	DL	5-iPr	Ph4F	CH₂OMe	olej	< 0,03^b
137	OL	5-iPr	Ph4F	CH₂0Et	olej	40,03°
133	OL	5-iPr	Ph4F	CH₂ONPr	olej	'0,?
139	DL	5-iPr	Ph40Me	CH₂0Me	olej	<0,03^b
140	DL	5-iPr	3-Py	CH₂0Me	olej	<1,0°
141	DL	5-iPr	2Me4Thz	CH₂0Me	olej	í. o,3^b
142	L	5-iPr	Ph3Cl	C H _? S M e	olej	< 0,03^b
143	OL	5-iPr	3-Py	CH₂SMe	olej	< l,Q^b
144	OL	5-iPr	4-Py	CH₂SMe	olej
145	DL	5-iPr	2Me4Thz	CH₂SMe	olej	< 0,l^b
146	OL	5-iPr	Ph	CH₂S0₂Me	prysk.	<0,03^b
147	DL	5-iPr	3-Py	CH_?S0₂Me	33-39	/i,o^b
143	OL	5-iPr	4-Py	CH₂SO₉Me	73-31
149	OL	5,6-OiF	Ph4F	CH₂S0₂Me	179-131
150	L	5-iPr	Ph	CH₂FIMe₂	olej	< 0,3^b

Tabulka 8 - pokračování

slouč. č.	0/L	D □ ³ ^K1 3	*4	teplota tání	IC_5o/UM
151	L	5-iPr Ph	CH₂NHC(3)Me	prysk.	•a,i^&
152	L	5-iPr Ph	CH₂ilHSO₇NMe₂	prysk.	, 0,l^b
153	L	5-iPr Ph	CH₂’IHC (0) :III₂	prysk.	α, 3^b
154	L	5-iPr Ph	CH₂3C(0)NHMe	125-126	3,06 3
a. stejně jako	vysvětlivka	b) v tabulce 1
b. ste	jně jako	vysvětlivka	ď)* v tabulce 1.

Tabulka 9 - Sioisoestery - různé heterocyklické estery

slouč. č .	0/L	L		□ b ^R4	teplota tání	^T^53/
155	DL	5-01	Ph4F	2-imid	243-250	0,29
156	OL	5-iPr	Ph4F	2-imid	213-219	0,09
157	OL	5-iPr	2-Me4Thz	2-imid	153-155	l,0^C
153	DL	5-iPr	Ph3Cl	2-imid	210-213	0,03^C
159	DL	5-iPr	Ph3Cl	2-Thz	prysk.	0,l^C
160	DL	5-iPr	Pn3Cl	4fie2Thz	prysk.	0,03^C
161	OL	5-iPr	Ph	4-pyraz	206-210	0,l^C

a. stejně jako vysvětlivka b) v tabulce 1

b. 2-imid = 2-imldazoly1, 2-Thz = 2-thiazolyl, 4Me2Thz = = 4-methyl-2-thiazolyl, 4-pyraz = 4-pyrazolyl

c. stejně jako vysvětlivka d) v tabulce 1.

Tabulka 10- Oxazolooyriainy

-1JH

slouč. č.	D/L	X	Y	^S1	o ^{* 3}‘3	9 ³*4	teplota tání	IC_50/uí.\|
162	L	íl	c	H	Cyh	C0₂Me	147-149	0,21
163	DL	íl	c	H	Cyh	Ph	139-190,	5 0,073
164	DL	íl	c	5-Me	Cyh	Ph	199-200	0,023
165	OL	11	c	5- Me	Cyh	2-Py	134-136	0,026
166	(-)^X	íl	c	5-Me	Cyh	2-Py	63-75	0,015
167	(+)^X	II	c	5—tle	Cyh	2-Py	63-75	0,17
163	OL	íl	c	5—! Ie	Cyh	3-Ph	207-203	0,3
169	OL	íl	c	S- ile	Ph4F	2-Py	66-69	~0,3^b
170	OL	c	il	H	Cyh	Ph	133-134	0,021
171	DL	c	il	5-Me	Cyh	Ph	133-191	0,044

a. stejně jako poznámka b) v tab. 1, mimoto 2-Py = 2-pyridyl a —Py = 3-pyrldyl,

b. stejně jako vysvětlivka d) v tab.l x stejně jako x v tabulce 4.

Tabulka 11 - Thiazolopyridiny

slouč. č.	OL	X Y	^R1	O	^R3^b	teplota tání °C	^IC5Q/^U;
172	OL	C	il	H	Pii	Cyh	146-143	0,027
173	OL	c	ii	H	3-Py	Cyh	222-224³	0,17
174	DL	c	ti	H	2-Py	Cyh	176-173³	0,027
175	DL	c	M	5-Me-6-3r 2-Py	Cyh	215-217	0,009
176	DL	c	il	5-Me	2-Py	Cyh	109-113	0,01
177	OL	c	M	5-i-le	3-Py	Cyh	174-175,	5 0,11
173	DL	c	il	6-01	3-Py	Cyh	207-209	0,044
179	OL	c	N	6-C1	2-Py	Cyh	130-132	0,006
130	DL	n	ii	4-Ms	2-Py	Cyh	144-146	<1,O^G
131	OL	C	i'i	6-C1	3-Py	Cyh	207-209	0,044
132	OL	C	!J	6-C1	2-Py	Ph4F	151-153	0,113
133	OL	C	II	5-21	2-Py	Ph4F	146-149	0,230
134	OL	II	C	6-Me	2-Py	Cyh	214-216	0,031
135	OL	M	r* u	5-Me-ó-3r 2-Py	Cyh	209-210	0,0065
136	OL	i'J	c	5-i-le-6-3r 3-Py	Cyh	241-243,	5 0,021
137	OL	N	c	5-Me	2-Py	Cyh	167-171	0,013
133	OL	fl	c	6-21	2-Py	Cyh	193,5- 200,5	0,0039

Tabulka 11 - pokračování

slouč. č.	OL	X	Y	³1	^S4^b	³3⁰	teplota tání °C	ÍCjg/UM
139	DL	fl		Ó-Cl	2-Py	Ph4F	204-205	0,023
190	OL	c	'1	5-Me-6-3r 3-Py	Oyh	211-212	4 l,0^C
191	OL	N	C	6-Me	Ph	Cyh	213-214	<l,0^C
192	OL	N	c	6-Me	2-Py	Ph4F	134-135	<Q,3^C

a. hydrochlorid

b. jako v tabulce 1, 2-Py = 2-pyridyl, 3-Py = 3-pyridyl,

c. jako poznámka d) v tab. 1.

Tabulka 12 - Různá sloučeniny

slouč. č.	OL	^S1	Q 4	X	teplota tání °C	^IC50/
193	L	5-IPr	Ph^b	C	165^a	0,1
194	L	5-Me	Ph	c	150^a	0,23
195	L	5-iPr	2-Py	c	123	0,19
196	L	5-iPr	2-Py	0	135-137,5	<0,l^c

a. dihydrochlorid, široká rozmezí teploty tání (č. 143)

b. jako poznámka b) v tab. 1.

c. jako poznámka d) v tab. 1.

d. 2-Py = 2-pyridyl.

Tabulka 13 - Různá sloučeniny

slouč. č.	OL	^R1	□ ^a*3	teplota tání 0-,	^IC50/^uM
197	OL	5-C1	2-Py	130-103	0,22
193	OL	5-iPr	2-Py	150-151^b	0,12
199	OL	5-iPr	4-Py	145^b	<0,3^C
200	OL	5-iPr	3-Py	orysk.	< 0,3^C
a. 2-Py	= 2	-pyridyl,	4-Py	= 4-pYridyl, 3-Py	= 3-oyridyl

b. jde o tosylát

c. stejně jako vysvětlivka d) v tab. 1.

Tabulka 14 - Různé sloučeniny

R slouč. č. DL R^ teplota ICct/UM tání ⁵'^J/

201

202

L 5-iPr -CQ_?.Me C 143-146³ < l^b

DL 5-iPr d Ph3Cl 163,5-170 / 0,?

a. hydrochlorid

b. stejně jako poznámka d) v tabulce 1.

c. l-methylimidazol-4-yl

d. l-methylimidazol-2-yl.

Sronchokonstrikce u morčete, vyvolaná antigenem

Í4a tamto modelu se měří schopnost jednotlivých látek blokovat u bronchokonstrikce, vyvolané antigenem, leukotrienovou složku. Morčecí samci Hartley se aktivně sensibilizují ovalbuminem, pak se podá mepyramin a indometnacin k blokování metabolických složek hystaminu a cyklooxygenázy a nakonec zkoumaná látka ve formě aerosolu. Pak se morčatům podá inhalací vaječný albumin, to znamená antigen. Plicní funkce se měří oscilačním postupem podle publikace U. U. Wolyniec a další, Agents and Actions 1991, 34, 1/2, 73. Výsledky ss vyjádří v procentech inhibice bronchokonstrikce (odporu) u morčat po podání zkoumané látky ve srovnání s padáním placeba u kontrol.

Tabulka 15

sloučenina č.	dávka v /ug^x	tl	% inhibice
51	274	6	36
56	95	6	43
31	303	6	64
	23	4	64
	2,3	10	61
165	274	7	34
	23	6	64
	5,6	4	0
χ Týká se množství zkoumané látky,	vdechnutá morčetem.
Sloučeniny se	podávají v ethanolovém	roztoku, jako hnací
plyn je užit	freon, k podání se	užije	zařízení, rozprašují

cíno do dýchacích cest odměřenou dávku účinné látky. N počet zvířat v pokusu.

Uvolnění mediátoru u primátů po podání antigenu

Tento model dovoluje stanovit schopnost některých látek působit inhibici tvorby leukotrienu C₄ (LTCp v plicích aler gických opic (Synomolgus) po podání antibiotika. Zvířata se anestetizují, intubují a pak se oodá aerosolem extrakt z Ascaris suum. 0 20 minut později se provede výplach průdušek a plicních sklípků a kvantitativně radioimunologicky se stanoví LTC^. Zkoumané látky se podávají ve formě aerosolu 10 minut před podáním antigenu a jejich účinek se vyjádří v pro centech inhibice produkce LTC. ve srovnání s obdobnou hodno4 tou u kontrolních zvířat.

Tabulka 16 sloučenina dávka mg/rnl

U ¾ inhibice

51	0,3	5	40
	1,0	5	60
	3,0	5	63
37	0,01	5	3
	0,03	4	63
	0,10	5	61
	0,30	4	82
	1,0	6	39
	10,0	4	96
113	0,01	5	3
	0,03	4	32
	1,0	6	76

Zastupuje:

Claims

PATEflTOVE MAROKY

1. Inhibitory biosyntázy leukotrienů obecného vzorce I kde

X znamená atom kyslíku nebo atom síry,

Y znamená atom uhlíku nebo atom dusíku,

Z znamená atom uhlíku nebo atom dusíku za předpokladu, že Y a Z znamenají současně atomy dusíku,

R| a R^, stejná nebo různé, znamenají nezávisle na sobě atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, atom halogenu, trifluormethyl, nitrilovou skupinu, alkoxyskupinu o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -CC^Ry, kde Ry znamená atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(O)NRgR₉, kde Rg a R^ znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří společně s dusíkovým atomem morfolinový, pyrrolidinový nebo Diperidinový kruh, dále nitroskupinu, skupinu , kde R^g a R^ znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(0)R₁₂), kde R_1? znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -SC^R^, “UHCClDR-^, -iJHSO₂R₁₂, nebo -SO^IR^R^, kde R^-j a R^₄ znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, znamená cyklohexyl nebo fenyl, popřípadě substituovaný substituenty ze skupiny atom halogenu, trifluarmetnyl, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku a alkoxyskupina o 1 až 4 atomech uhlíku, dále skupinu S3₂R₁₂, -NHC(0)R₁₂, -HHS0₂R|₂, — 502^f 1^x314 nebo nitroskupinu, nebo může ř?₃ znamenat 1-piperidinylový kruh, 2-, 3- nebo 4-pyridino vý kruh, morfolinový kruh, thiomorfolinový kruh, pyrrolidinový kruh, imidazolcvý kruh, popřípadě substituovaný na atomu dusíku alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech uhlíku, 2-thiazolový kruh nebo 2-methyl-4-thiazolavý kruh nebo dialkylaminoskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku nebo alkyletherovou skupinu o 1 až 4 atomech uhlíku, znamená esterovou skupinu vzorce -C3₉R_1z., L 16 kde je alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, dále amidovou skupinu vzorce -C(0)NR^₇R^_g, kde R^ a R-^θ znamenají atam vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří spolu s atomem dusíku morfolinový, piperidinový nebo pyrrolidinový kruh, dále fenylový kruh, popřípadě substituovaný atomem halogenu, alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech uhlíku nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku, 3-msthyl-l,2,4-oxadiazol-5-ylový zbytek, 2-thienyl, 3-tnianyl, 2-, 3- nebo 4-pyridyl, 2-imidazolovou skupinu, popřípadě substituovanou neu-dusíkovém atomu methylovým zbytkem, 2-thiazol, popřípadě substituovaný v poloze 4 methylovým zbytkem, keton vzorce -C(O)R_lg, kde R_lg znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo 1-methylimidazol-2-yl, dále ester vzorce -CH_?0R₂g, kde R_2Q znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, thioether skupinu -CH₂SR₂₃, sulfon skupinu -CH₂S0₂CH₃, amin -CH₂il(R₂g)₂, derivát aminu -CH^JHCCCQR^, kde R^ znamená methyl nebo NHCH^ nebo -C'rl₂IIHS3_?Me₂ nebo karbamát -CH₂0C(3)HHMe

R^ a R^ znamenají nezávisle na sobě atom vodíku nebo methyl a znamená cele číslo 3, 1 nebo 2, v racemické formě, ve formě čistého nebo v podstatě čistého enanciomeru za předpokladu, že se současně nevyskytuje některá z následujících kombinací substituentů:

i) Y a Z znamenají atomy uhlíku, R^nebo R₂ znamenají atom vodíku, atom halogenu, alkyl nebo alkoxyl vždy o 1 až 4 atomech uhlíku, kyanoskupinu, nitroskupinu nebo trifluormethyl, R_g je nesubstituovaný fenyl a R^ znamená skupinu -C(O)OR^g, v níž R|^ js atom vodíku, alkyl, alkenyl nebo alkinyl, skupinu - C (0) tl (F? _{χ 3}-)(R₁₉Ό, v níž R_lg' a R_1?' znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, fenyl nebo alkoxyskupinu nebo tvoří s atomem dusíku pyrrolidinový, piperidinový nebo morfolinový kruh, kyanoskupinu nebo skupinu -C(S)HH_2> nebo ii) Y a Z znamenají atomy uhlíku, R^ znamená C(0)QCH₃,

R| a R₂ znamenají atomy vodíku a R^ znamená 4-hydroxyfenyl, nesubstituovaný fenyl nebo 4-imidazolovou skupinu.

2. Inhibitory syntézy leukotrienů obecného vzorce I podle nároku 1, v němž znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo atom halogenu, vždy v poloze 5, R_? znamená atom vodíku, R_g znamená cyklohexyl, R^ znamená 2-pyridyl nebo 3-pyridyl, R^ znamená atom vodíku, znamená atom vodíku,

X znamená atom kyslíku nebo atom síry a n = 1.

3. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1,

HH kde

Rj- znamená atom vodíku,

Rj znamená cyklohexyl a

R^ znamená fenyl.

4. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kde

X znamená atom kyslíku a

R| znamená 5-methyl.

5. Inhibitor podle nároku 4 ve formě svého L-enanciomeru

6. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1

H-jC

NH kde

R^ znamená cyklonexyl a

R^ znamená 2-pyridin.

7. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kde

R^ znamená isopropyl a

R^ znamená fenyl, ve formě L-enanciomeru.

3. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kda R₃ znamená cyklohexyl.

9. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kde znamená isopropyl, methyl, atom chloru nebo methoxy skupinu a °₃ znamená 4-fluorfenyl.

10. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kde

Pj znamená 4-fluorfenyl nebo cyklohexyl.

11. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kde

Rj znamená cyklohexyl.

12. Inhibitor obecného vzorce I podle nároku 1 kde

R, znamená cyklohexyl.

- 46 13. Farmaceutický prostředek pro inhibici syntézy leukotrienu, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1

O (I) kde

X znamená atom kyslíku nebo atom síry,

Y znamená atom uhlíku nebo atom dusíku,

Z znamená atom uhlíku nebo atom dusíku za předpokladu, že Y a Z znamenají současně atomy dusíku, a R^, stejné nebo různá, znamenají nezávisle na sobě atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, atom halogenu, trifluormethyl, nitrilovou skupinu, alkoxyskupinu o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -CC^R?, kde R? zna mená atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(0)URgR^, kde Rg a R? znamenají atom vodíku alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří společně s dusíkovým atomem morfolinový, pyrrolidinový nebo piperidinový kruh, dále nitroskupinu, skupinu kde R·^ a R·, ₁ znamenají atom vodíku

Ί1 nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(0)R₁₂, kde R^₂ znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -NHC(O)R.

-so₂r₁₂,

Ί2^:

-nhso₂r_12: nebo -S0₂UR^₃R^^, kde ^13 ^a ^14 ^znaíBenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku,

Rg znamená methyl, cyklohexyl nebo fenyl, popřípadě substituovaný substituenty ze skupiny atom halogenu, trifluormethyl, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku a alkoxyskupina o 1 až 4 atomech uhlíku, dále skupinu SC^R^g, -> 1HCC□)Fíg, -NHS3₉R₁₂, -SO^ílR^gR^, kde R_1?, Ra Rp₊ mají svrchu uvedený význam, nebo nitroskupinu, nebo muže Rg znamenat 1-pioeridinylový kruh, 2-, 3- nebo 4-pyridinový kruh, morfolinový kruh, thiomorfolinový kruh, pyrrolidinový kruh, imidazolový kruh, popřípadě substituovaný na atomu dusíku alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech uhlíku, 2-thiazolovy kruh nebo 2-methyl-4-thiazolový kruh nebo dialkylaminoskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku nebo alkyletherovou skupinu o 1 až 4 atomech uhlíku, znamená esterovou skupinu vzorce COgR^, kde R_ló ja alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, dále aminosou skupinu vzorce -C(a)NR^^R^g, kde R^^ a R^^ znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskuoinu nebo tvoří spolu s atomem dusíku morfolinový, piperidinový nebo pyrro lidinový kruh, dále fenylový kruh, oopříoadě substituovaný atomem halogenu, alkylovým zbytkem o 1 az 4 atomech uhlíku nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku, 3-methyl-l,2,4-oxadiazol-5-ylový zbytek, 2-tnieny1, 3-thienyl, 2-, 3- nebo 4-pyridyl, 4-piperazolyl, 2-imidazolovou skupinu, popřípadě substituovanou na dusíkovém'atomu methylovým zbytkem, 2-tniazol, popřípadě substituovaný v ooloze 4 methylovým zbytkem, keton vzorce -C(O)R kde znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo 1-metnylimidazol -2-yl, dálí ester vzorce -CHgQRgg, kde Rg^znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, tnioather skupinu -CHgSRgg, fon skupinu -CH_OSQ_OCHamin -CH₉il(Rgg)_?, suldrivát aminu

-CHgiJHC(0)R_?i, kde R_?^ znamená methyl nebo ílHCHg nebo -CHgiiHSQgMeg nebo karbamát -CUgGC(Q)UHMe, ^R5 ^{a R}6 znamenají nezávisle na sobě atom vodíku nebo methyl a n znamená celé číslo 0, 1 nebo 2, v racemické formě nebo ve formě čistého nebo v podstatě čistého enanciomeru, nebo ve formě soli teto látky, přijatelné z fyziologického hlediska, spolu s jedním nebo větším počtem nosičů, ředidel a/nebo pomocných látek, přijatelných z farmaceutického hlediska.

14. Použití inhibitorů leukotrienu obecného vzorce I, v němž jednotlivé symboly mají význam, uvedený v nároku 13, pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici syntézy leukotrienu.

15. Inhibitory biosyntézy leukotrienů obecného vzorce I podle nároku 1 kde

X znamená atom kyslíku, ·—4¾ a R₂ znamenají nezávisle na sobě atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, atom halogenu, trifluormethyl, nitrilovou skupinu, alkoxyskupinu o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -CC^R?, kde R? znamená atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinu -C(O)NRgRg, kde Rg a Rg znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří s atomem dusíku piperidinový kruh, dále nitroskupinu, skupinu ~^NR]_o^Rll*

- 49 kde a znamenají atom vodíku nebo alykl o 1 až

6 atomech uhlíku, skupinu -3(0) R '^{<d3 R} χ 2 3 ² a^yl o 1 až 6 atocn uhlíku, skupinu -SO^R·^, -Í1HC(O)R^₂, -;iHS0₂R_1? nebo -50₂íJí?, kde R^g a R^ znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku,

Rg znamená cyklohexyl nebo fenyl, popřípadě substituovaný, v němž substituenty se volí ze skupiny atom halogenu, trifluormethyl, alkyl nebo alkoxyl vždy o 1 až 4 atomech uhlíku, -S0₇R₁₂, NHC(0)R₁₂, -! 1 i I SO _? R _{χ ?} , -SO^IR-^R-^nebo il0₂, nebo může Rg znamenat 1-pioeridinylovou skupinu, pyridinovou, morfolinovou, pyrrolidinovou, piperidinovou nebo imidazolovou skupinu, popřípadě substituovanou na dusíkovém atomu alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech unlíku,

R^ znamená esterovou skupinu vzorce -CO^R^, kde R^ je alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku nebo amidovou skupinu obecného vzorce -C<□)MF?₇R_g,kde R^₇ a R_ig znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, methoxyskupinu nebo tvoří spolu s atomem dusíku morfolinový, piperidinový nebo pyrrolidinový kruh, dále fenyl, popřípadě substituovaný, v němž je substituentem atom halogenu nebo alkylová skupina nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 4 atomech uhlíku, dále 3-methy1-1,2,4-oxadiazol-5-yl, 2-thienyl, 3-thienyl, 2-, 3- nebo 4-pyridyl, 2-imidazolovou skupinu, popřípadě substituovanou v poloze 4 methylovým zbytkem, etherovou skupinu -CC^^O’ kde R₂g znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, dále thioetherovou skupinu -CH₂SR sulfonovou skupinu -CH₂S3₇CHg, zbytek aminu -3^₂il(R₉g)₂, derivát aminu -CH₂‘IHC(0)R₂|, kde R_?^ znamená methyl nebo skupinu HHCHg, dále skupinu -CUgHHSů^Me^ nebo karbamát vzorce -CH₂QC(0)NHMé, nebo keton 3(0)R^₇, kde R^ znamená alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo 1-methylimidazol-2-yl, ^R5 ^{a R}g znamenají nezávisle na sobě atom vodíku nebo methyl a n je celé číslo 0, 1 nebo 2, v racemické formě nebo ve formě čistého nebo v podstatě čistého enanciomeru za předpokladu, že se současně nevyskytují následující kombinace substituentů:

i) nebo R₂ znamená atom vodíku, atom halogenu, alkyl o 1 až 4 atomecn uhlíku, alkoxyskupina o 1 až 4 atomech uhlíku, kyanoskupina, nitroskupina nebo trifluormethy1,

R, je nesubstituovaný fenyl a R. znamená skuoinu -C(3)0R_lzkde je atom vodíku, alkyl, alkenyl nebo alkinyl, skupina -C(Q)N(R-^g-)(R^g'), kde R-^θ' a znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, fenyl nebo alkoxyskupinu nebo tvoří spolu s a torném dusíku pyrrolidinovou, piperidinovou nebo morfolinovou skupinu, kyanoskupinu nebo skupinu -C(S)NH₂, nebo ii) R^ znamená C(Q)OCHg, R^ a R₂ znamenají atomy vodíku a Rg znamená 4-hydroxyfeny1, nesubstituovaný fenyl nebo 4-imidazolovou skupinu.

16. Inhibitory obecného vzorce I podle nároku 15, v nichž

R, ^a ^2 ^znamenají alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, atom halogenu, trifluormethyl, alkoxyskupinu o 1 až 6 atomech uhlíku nebo skupinu -SC^NR^gR·^, v níž R^g a R^ znamenají atomy vodíku nebo alkylové zbytky o 1 až 6 atomech uhlíku,

Rg znamená cyklohexyl, fenyl, popřípadě substituovaný atomem halogenu, trifluormethylovou skupinou, alkoxyskupinou nebo alkylovým zbytkem vždy o 1 až 4 atomech uhlíku, 1-piperidinylovou skupinou nebo pyridinovou skupinou a ^R4 znamená fenyl, popřípadě substituovaný, v němž se substituenty volí ze skupiny atpm halogenu, alkyl nebo alkoxy51 skupina vždy o 1 až 4 atomech uhlíku, nebo 3-methyl-l,2,4-oxadiazol-5-yl, dále 2-thienyl, 2-, 3- nebo

4-pyridyl nebo l-methylimidazol-2-yl a n znamená celé číslo 1 nebo 2.

17. Farmaceutický prostředek, určený k léčení stavů, při nichž je nutno dosáhnout inhibice biosyntázy leukotrienů, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje inhibitory syntézy leukotrienů obecného vzorce I, v němž jednotlivé symboly mají význam, uvedený v nároku 15.

13. Použití inhibitorů biosyntézy leukotrienů obecného vzorce I, v němž jednotlivé symboly mají význam, uvedený v nároku 15, pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici syntézy leukotrienů.

19. Způsob výroby inhibitorů biosyntézy leukotrienů obecného vzorce I podle nároků 1 až 12, 15 a 16, vy z'n ačujícísetím,žese

A) uvede do reakce sloučenina obecného vzorce kde R. R_ Y, X a Z mají význam, uvedený v nároku 1, -L r Z / s aminem obecného vzorce v

;?₅, R^ a n mají význam, uvedený v nároku 1, v inertním rozpouštědle za přítomnosti bazického katalyzátoru,

3) při výrobě sloučeni obecného vzorce I, v němž X znamená atom sícy, Y?a Z znamenají atomy uhlíku a R, znamená atom

O vodíku se cyklizuje sloučenina obecného vzorce kde jednotlivé symboly mají význam, uvedený v nároku 1,

C) při výrobě sloučenin obecného vzorce I, v němž X znamená atom síry, Y znamená atom uhlíku, Z znamená atom dusíku a ostatní symboly mají význam, (uvedený ve kterémkoliv z nároků 1 až 12, 15 a 16 se uvede do reakce-sloučenina obecného vzorce kde Hal znamená atom halogenu a ostatní symboly mají svrchu uvedený význam, s aminem obecného vzorce nebo jeho reaktivním derivátem, v němž jednotlivá symboly mají svrchu uvedený význam,

D) při výrobě sloučenin obecného vzorce I, v němž X znamená atom síry, Y znamená atom dusíku, Z znamená atom uhlíku a ostatní symboly mají význam, uvedený v nároku 1 se cyk lizuje sloučenina obecného vzorce kde Hal znamená atom halogenu a ostatní symboly mají svrchu uvedený význam,

E) při výrobě sloučenin obecného vzorce I, v němž R^ znamená skupinu -CO₂R_1ó a X, Y, Z, R_p R_g, R^, R_5> Rg, R_ló a n mají význam, uvedený v nároku 1 nebo 15 se uvede do reakce kyselina obecného vzorce kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, s alkoholem obecného vzorce R..OH, kde R^g má svrchu uvedený význam, nebo s reaktivním derivátem tohoto alkoholu,

F) při výrobě sloučenin obecného vzorce I, v němž R^ znamená skupinu -C(Q)HR^yR^g a X, Y, Z, R^, R₂, Rp R^, Rg, Rp,

R^g a n mají význam, uvedený v nároku 1 nebo 15 se uvede do reakce kyselina obecného vzorce kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, s příslušně substituovaným aminem obecného vzorce ^NHR17^R13 kde Rp a R^g mají uvrchu uvedený význam,

G) při výrobě sloučenin obecného vzorce I, v němž R^ znamená -C(G)CH₃ a X, Y, Z, Rp Rp.R-j, Rp Rg, R_lg a n mají význam, uvedený v nároku 1 nebo 15 se uvede do reakce sloučenina obecného vzorce kde jednotlivá symboly mají svrchu uvedený význam, s methyllithiem,

H) při výrobě sloučenin obecněna vzorce I, v němž R^ znamená skupinu vzorce

CH a X, Y, Z, R , R 2 > 3» v nároku 1 nebo 15, se ho vzorce □ n 5’ ''6 uvede , a n mají význam, uvedený do reakce sloučenina obecné4 kde 'jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, s acetamidoximem,

I) při výrobě sloučenin obecného vzorce I, v němž R^ znamená skupinu -CH₂0R₂₀ nebo -CH_?SR₂g a X, Y, Z, Rp R_?, R^, R5, R^, R₂g ^{a n} význam, uvedený v nároku 1 nebo 15, se uvede do reakce sloučenina obecného vzorce kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce

HaOR_on nebo UaSR_onz u Zu kde má svrchu uvedený význam, s následnou izolací racamátu a/nebo některého z enanciomerú