CZ290883B6

CZ290883B6 - Triazolopyridazinové deriváty, způsob jejich výroby a farmaceutický prostředek je obsahující

Info

Publication number: CZ290883B6
Application number: CZ20002691A
Authority: CZ
Inventors: William Robert Carling; Pineiro Jose Luis Castro; Ian James Collins; Alexander Richard Guiblin; Timothy Harrison; Andrew Madin; Kevin William Moore; Michael Geoffrey Neil Russell; Gayle Scott; Leslie Joseph Street
Original assignee: Merck Sharp And Dohme Limited
Priority date: 1998-01-21
Filing date: 1999-01-13
Publication date: 2002-11-13
Also published as: MXPA00007135A; NO20003730L; AU748737B2; GEP20032868B; CN1288465A; HRP20000492A2; NO20003730D0; JP2002501066A; BG104671A; EE200000430A; US6579875B1; AU2065799A; HUP0100575A3; EA002755B1; WO1999037644A1; EA200000783A1; NO315516B1; HUP0100575A2; CA2315763A1; NZ504870A

Abstract

Triazolopyridazinov deriv ty obecn ho vzorce I, v n m jednotliv symboly maj specifick² v²znam, jsou l tky, kter jsou selektivn mi ligandy receptor GABA.sub.A.n., s afinitou zvl t pro podjednotky alfa2 a/nebo alfa3 t chto receptor a je tedy mo no je pou t ve form farmaceutick ho prost°edku, k prevenci a/nebo l en ·zkostn²ch nebo k°e ov²ch stav .\

Description

Triazolopyridazinové deriváty, způsob jejich výroby a farmaceutický prostředek je obsahující

Oblast techniky

Vynález se tyká skupiny substituovaných triazolopyridazinových derivátů a jejich použití k léčebným účelům. Uvedené látky jsou ligandy pro receptory GABA_a a jsou proto vhodné zejména pro léčení mentálních poruch.

Dosavadní stav techniky

Receptory projeden z hlavních nervových přenašečů, kyseliny gamma-aminomáselné, GABA je možno rozdělit do dvou hlavních skupin. (1) receptory GABA_a, které náleží do skupiny ligandů iontových kanálů a (2) receptory GABA_b, které náleží do skupiny ligandů, schopných se vázat na receptory G-proteinu. První podjednotky cDNA pro jednotlivé sloučeniny ze skupiny GABA_abyly klonovány, po této době již byla klonována celá řada známých látek a bylo zjištěno, že jde o nejméně 6 podjednotek alfa, 4 podjednotky beta, 3 podjednotky gamma, 1 podjednotku delta, 1 podjednotku eta a 2 podjednotky ró.

Přestože již je známa celá řada poznatků o genech pro uvedenou skupinu látek, je zapotřebí ještě lépe porozumět těmto látkám, a to jak pokud jde o strukturu, tak pokud jde o jejich účinnost. Předpokládá se, že pro tvorbu plně funkčního receptorů GABA_a musí dojít ke spojení podjednotky alfa, podjednotky beta a podjednotky gamma. Pak je možno dosáhnout přechodné transfekce buněk uložením příslušné cDNA. Jak již bylo uvedeno, existují také podjednotky delta, eta a ró. Tyto jednotky se však vyskytují daleko méně často.

Při sledování velikosti receptorů elektronovým mikroskopem, je možno se domnívat, že stejně jako ostatní receptory ze skupiny iontových kanálů existují přírodní receptory GABA_a v pentamemí formě. Výběrem alespoň jedné podjednotky alfa, alespoň jedné podjednotky beta a alespoň jedné podjednotky gamma z celkového počtu 17 podjednotek těchto typů, je možno vytvořit více než 10 000 kombinací pentamemích podjednotek. Mimo to není při tomto výpočtu brán ohled na další permutace, které by mohly být možné v případě, že by uspořádání podjednotek kolem iontového kanálu nebylo nijak omezeno, takže by mohlo jít o 120 možných variant pro každý receptor, vytvořený z 5 odlišných podjednotek.

Sestavy podtypů receptorů, které již existují, zahrnují mimo jiné alfalbeta2gamma2, alfa2beta2/3gamma2, alfa3betagamma2/3, alfa2betagammal, alfa5beta3gamma2/3, alfaóbetagamma2alfa6betadelta a alfa4betadelta. Podtypy, které obsahují 1 podjednotku alfa, je možno nalézt ve většině oblastí mozku, tyto typy tvoří více než 40 % receptorů GABA_a u krys. Podtypy, které obsahují 2 podjednotky alfa 3 podjednotky alfa tvoří přibližně 25 až 17 % receptorů GABA_a u krys. Podtypy, které obsahují 5 podjednotek alfa jsou převážně v mozkové kůře a v hippocampu a pravděpodobně tvoří přibližně 4 % receptorů GABA_a u krys.

Charakteristickou vlastností všech známých receptorů GABA_a je přítomnost celé řady modulačních míst, jedním z těchto míst je místo pro vazbu benzodiazepinu ΒΖ. Místo pro vazbu ΒΖ je místo, při jehož vazbě dochází k účinnosti proti úzkostných látek, např. diazepamu a temazepamu. Před klonováním skupiny genů pro receptory GABA_a bylo místo pro vazbu benzodiazepinu děleno na dvě podskupiny ΒΖ1 a ΒΖ2 na základě studií s radioaktivně značenými ligandy. Bylo prokázáno, že podtyp BZ1 je farmakologicky ekvivalentní receptorů GABA_a, který obsahuje 1 podjednotku alfa v kombinaci s podjednotkou beta a 2 podjednotkami gamma. Jde o nejčastější typ podtypu receptorů GABA_a, který představuje téměř polovinu všech receptorů pro GABA_av mozku.

-1 CZ 290883 B6

Dvěma dalšími hlavními podskupinami jsou podtypy alfa2betagamma2 a alfa3betagamma2/3. Tyto dva typy tvoří společně dalších 35 % celkového množství receptorú GABA_a. Farmakologicky se tato kombinace jeví jako ekvivalentní podskupině BZ2 podle studií s radioaktivně značenými látkami, tato podskupina však může obsahovat také určité množství podtypu s obsahem 5 jednotek alfa. Fyziologická úloha těchto podskupin je až dosud nejasná, vzhledem k tomu, že až dosud nebyly nalezeny dostatečně selektivní agonistické nebo antagonistické látky.

Nyní se předpokládá, že sloučeniny, působící jako agonistické látky BZ na podjednotkách alfalbetagamma2, alfa2betagamma2 nebo alfa3betagamma2 budou mít žádoucí protiúzkostné vlastnosti. Sloučeniny, které jsou modulátory na benzodiazepinovém vazném místě receptorú GABA_a a působí jako BZ agonistické látky, budou dále uváděny jako agonistické látky pro receptory GABA_a. Agonistická látka pro alfal-selektivní receptor GABA_a alpidem a zolpidem se klinicky užívá jako hypnotická látka a předpokládá se, že dochází také k určitému uklidňujícímu účinku u známých protiúzkostných látek, které působí na vazném místě ΒΖ1 na receptorech, obsahujících 1 podjednotku alfal. Předpokládá se tedy, že agonistické látky pro receptory GABA_a, které se mohou dostat do interakce spíše s podjednotkou alfa2 a/nebo alfa3 než s podjednotku alfal budou účinnější, pokud jde o protiúzkostnou účinnost a současně nebudou mít uklidňující účinky . Látky, které jsou antagonisty na podjednotkách alfal, by tedy mohly být používány k potlačení uklidňujícího účinku nebo hypnotického účinku, vyvolaného na těchto podjednotkách agonistickými látkami pro receptory s podjednotkou alfal.

Sloučeniny podle vynálezu jsou selektivními ligandy pro receptory GAB_a a bude proto možno je použít k léčení a/nebo prevenci celé řady poruch centrálního nervového systému. Jde zejména o úzkostné stavy, jako panické poruchy s agorafobií nebo bez ní, o agorafobické poruchy bez historie panických poruch, a fóbie proti živočichům a jiné fóbie včetně sociálních fóbií, o obsesivní a kompulsivní poruchy, stres včetně posttraumatického a akutního stresu a zejména o generalizované úzkostné poruchy, neurózy, křeče, migrénu, depresivní nebo bipolámí poruchy, zejména opakující se depresivní poruchy, disthymické stavy, manické poruchy I a II acyklothymické poruchy, psychózy včetně schizofrenie, neurodegenerativní poruchy při nedokrevnosti mozku, hyperaktivitu s neschopností udržet pozornost a poruchy denního rytmu, zejména o posuny vnímání dne a noci.

Dalšími poruchami, které by bylo možno uvedenými látkami léčit, by mohly být bolestivé stavy, zvracené včetně akutního a opožděného zvracení, zejména zvracení po chemoterapeutických látkách nebo po ozáření a také po operativních zákrocích. Dále může jít o poruchy přijímání potravy včetně anorexia nervosa a bulimia nervosa, o premenstruální syndrom, svalové křeče nebo sklon k těmto křečím, např. u paraplegiků a o poruchy sluchu. Selektivní ligandy pro receptory GABAa mohou být účinné také jako premedikace před narkózou nebo při malých zákrocích, jako je endoskopie včetně endoskopie žaludku.

V patentových spisech DE 2741763 a US 4 260 755, 4 260 756 a 4 654 343 se popisují různé skupiny l,2,4-triazol/4,3-b/pirydazinových derivátů, které je možno použít jako protiúzkostné látky. Sloučeniny, popsané v DE 2741763 a US 4 260 755 a 4 654 343 obsahují fenylový zbytek v poloze 6 triazolopyridazinového kruhového systému.

Sloučeniny, které jsou popsány v US 4 260 756 obsahují heteroarylovou skupinu v poloze 6 nebo

8. Žádná z těchto publikací však nepopisuje l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazinové deriváty v nichž je substituent v poloze 6 připojen přes přímo vázaný atom kyslíku.

EP-A-0085840 a EP-A-0134946 popisují příbuzné skupiny l,2,4-triazolo/3,4-alfa/ftalazinových derivátů s protiúzkostným účinkem. V žádné z těchto publikací se však neuvádí ani nenavrhuje možnost nahradit benzoskupinu v triazoloftalazinovém kruhovém systému jinou funkční skupinou.

-2CZ 290883 B6

Podstata vynálezu

Vynález se týká skupiny triazolopyridazinových derivátů s žádoucími vaznými vlastnostmi na různých podtypech receptorů GABA_a. Tyto sloučeniny mají jako ligandy dobrou afinitu pro podjednotky alfa2 a/nebo alfa3 lidského receptorů GABA_A. Sloučeniny podle vynálezu se dostávají snáze do interakce s podjednotkami alfa2 a/nebo alfa3 než s podjednotkou alfal. Tyto látky tedy budou funkčně selektivní uvedeným způsobem.

Sloučeniny podle vynálezu jsou ligandy pro receptory GABA_a s vaznou afinitou Kj pro receptory podjednotek alfa2 a/nebo alfa3 řádu 100 nM, hodnoty však mohou být i nižší, typicky 50 nM a ideálně 10 nM nebo ještě nižší. Sloučeniny podle vynálezu tedy mohou mít nejméně dvojnásobnou, obvykle nejméně pětinásobnou a s výhodou nejméně desetinásobnou selektivní účinnost pro podjednotky alfa2 a/nebo alfa3 ve srovnání s podjednotkou alfal. Avšak sloučeniny, které nejsou selektivní při této vazné afinitě uvedeným způsobem, rovněž spadají do rozsahu vynálezu. Tyto sloučeniny mohou být funkčně selektivní pro podjednotky alfa2 a/nebo alfa 3 ve srovnání s podjednotkou alfal. Mimo to mají sloučeniny podle vynálezu další zajímavé farmakokinetické vlastnosti, zejména jsou biologicky dobře dostupné při perorálním podání.

Podstatu vynálezu tvoří triazolopyridazinové deriváty obecného vzorce I

O—CH,—R² (D kde

Z znamená trifluormethyl, 2-methylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 3-methylbutyl, 1-fluorbut3-enyl, cyklobutyl, 1-methylcyklobutyl, 1-fluorcyklobutyl, 3-fluorcyklobutyl, 3,3-difluorcyklobutyl, 3-hydroxycyklobutyl, 3-benzyloxycyklobutyl, 3-oxocyklobutyl, 1-methylcyklohexyl,

4,4-difluor-l-methylcyklohexyl, cyklopentyimethyl, 4-fluorcyklohex-3-enyl, 3-fluorfenyl, tetrahydrofur-2-yl, pyrrolidin-l-yl, 4-methyltetrahydropyran-4-yl nebo thien-2-yl

R¹ znamená atom vodíku nebo fluoru a

R² znamená methylisoxazolyl, methylpyrazolyl, methylimidazolyl, benzimidazolyl, nebo methyltriazolyl, za předpokladu, že v případě, že Z znamená 1-methylcyklobutyl, R¹ znamená atom vodíku a R²znamená l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl nebo 2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl, pak se atom fluoru nenachází v poloze 2 fenylového kruhu, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

Některé sloučenin podle vynálezu obecně spadají také do rozsahu současně projednávané mezinárodní patentové přihlášky, zveřejněné 5. února 1998 pod číslem WO 98/04559. Tyto látky obecného vzorce I však nejsou specificky uvedeny.

-3CZ 290883 B6

Součást podstaty vynálezu tvoří také sloučeniny svrchu uvedeného obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, v nichž Z znamená trifluormethyl, 2-methylpropyl, 2.2-dimethylpropyl, 3-methylbutyl, l-fluorbut-3-enyl, cyklobutyl, 1-methylcyklobutyl, 1-fluorcyklobutyl, 3-fluorcyklobutyl, 3-hydroxycyklobutyl, 3-benzyloxycyklobutyl, 1-methyl cyklohexyl, cyklopentylmethyl, pyrrolidin-l-yl nebo thien-2-yl, R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, za předpokladu, že v případě, že Z znamená 1-methylcyklobutyl, R¹ znamená atom vodíku a R²znamená l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl nebo 2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl, pak se atom fluoru nenachází v poloze 2 fenylového kruhu.

Součást podstaty vynálezu tvoří rovněž sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, v nichž Z znamená cyklobutyl, 1-methylcyklobutyl, 1-fluorcyklobutyl, 1-methylcyklohexyl, pyrrolidin-l-yl nebo thien-2-yl a R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, za předpokladu, že v případě, že Z znamená 1-methylcyklobutyl, R¹ znamená atom vodíku a R²znamená l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl nebo 2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl, pak se atom fluoru nenachází v poloze 2 fenylového kruhu.

Pro použití v lékařství padají v úvahu zejména farmaceuticky přijatelné soli sloučenin obecného vzorce I. Další soli však mohou být užitečné při výrobě sloučenin podle vynálezu nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí. Vhodnými farmaceuticky přijatelnými solemi sloučenin podle vynálezu mohou být adiční soli s kyselinami, které je možno vytvořit např. tak, že se roztok sloučeniny podle vynálezu smísí s roztokem farmaceuticky přijatelné kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, sírová, methansulfonová, fumarová, maleinová, jantarová, octová, benzoová, šťavelová, citrónová, vinná, uhličitá nebo fosforečná.

Ve sloučeninách obecného vzorce I je výhodným významem pro symbol Z cyklobutyl.

Substituent R² s výhodou představuje některou z dále uvedených kruhových struktur a až g:

ch₃ (a)

(d) *

\ ch₃ (e)

v nichž * znamená místo připojení kruhu ke zbývající části molekuly.

Zvláště výhodným významem pro symbol R² je svrchu uvedená kruhová struktura (g).

Tam, kde je to možné, obsahuje sloučenina obecného vzorce I s výhodou atom fluoru v poloze 2 fenylového kruhu.

-4CZ 290883 B6

Zvláštní podskupinu sloučenin podle vynálezu tvoří sloučeniny obecného vzorce IIA

a jejich farmaceuticky přijatelné soli, v nichž

R¹ má svrchu uvedený význam a

R³ znamená atom vodíku nebo fluoru.

Vhodným významem pro symbol R³ je zejména atom vodíku.

Zvláštní podskupiny sloučenin obecného vzorce IIA tvoří sloučeniny obecného vzorce IIB

a jejich farmaceuticky přijatelné soli, v nichž R¹ a R³ mají svrchu uvedený význam.

Jako specifické sloučeniny podle vynálezu je možno uvést následující látky:

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1-methyl-l H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(3-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l, 2,4-triazol-3-ylmethoxy )-1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(4-fluorfenyl)-6-(2-methyI-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

-5CZ 290883 B6

7-cyklobuty 1-3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy )-1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobuty 1-3-(3,5-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-7-(l-methylcyklobutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(3,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l, 2,4-triazol-3-ylmethoxy )-1,2,4—triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobuty 1-3-(2,3-d ifluorfenyl)-6-(2-methy 1-2H-1,2,4-triazol-3-y lmethoxy)-1,2,4—tri azolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2,6-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-1,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4—triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2,5-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-7-(l-methylcyklohexyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl}-7-( 1-methylcyklohexy 1)-6-( 1-methyl-l H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1.2.4- triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1-methyl-l H-pyrazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobuty l-3-(2-fluorfenyl)-6-(5-methylisoxazol-3-ylmethoxy >—1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1-methyl-l H-imidazol-2-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(4-methyl—4H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-thien-2-yl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(thien-2-yl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

6- ( 1 H-benzimidazol-2-ylmethoxy)-7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin

3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-6-( 1-methyl-l H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l ,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7- cyklobuty l-3-(2-fluorfeny 1)-6-( 1-methyl-l H-imidazoM—ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-( l-fluorocyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl}-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-pyrazol-3-ylmethoxy )-1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(2,2-dimethylpropyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(2-methylpropyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(3-methylbutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklopentylmethyl-3-(2-fluorenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-I,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(3-benzyloxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1.2.4— triazolo/4,3-b/pyridazin,

-6CZ 290883 B6

3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)- l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(l-fluorbut-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(3-fluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, 3-(2-fluorfenyl)-7-(4-methyltetrahydropyran-4-yl}-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(4-methy ltetrahydropyran-4-y 1)-6-( 1 -methyl-1 Η-1,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, 7-(4,4-<lifluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, 7-(4-fluor-l-methylcyklohex-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, 7-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1-methyl-l H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(3-oxocyklobutyl)-l,2,4-triazoIo/4,3-b/pyridazin, 7-(3,3-difluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7(3-oxocyklobuty 1)-1,2,4-tr iazolo/4,3-b/pyridazin, 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(tetrahydrofur-2-yl)-l,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin, 7-(3-fluorfenyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.

Uvedené látky je možno použít k léčení a/nebo prevenci úzkostných stavů ve volné formě nebo ve formě příslušných farmaceuticky přijatelných solí.

Tytéž látky je možno použít také k léčení a/nebo prevenci křečí, např. u nemocných, trpících epilepsií a příbuznými poruchami. Opět je možno podávat volnou látku nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.

Vazná afinita Ki pro sloučeniny podle vynálezu v případě podjednotky alfa3 lidského receptorů GABA_a se měří dále uvedeným způsobem. Hodnota této afinity pro sloučeniny podle vynálezu je v ideálních případech 10 nM nebo nižší, s výhodou 2 nM nebo nižší a zvláště 1 nM nebo nižší.

Sloučeniny podle vynálezu budou v ideálním případě vyvolávat nejméně 40%, s výhodou nejméně 50% a zvláště nejméně 60% potenciaci odpovědi GABA EC₂o po stabilní transfekci rekombinantních buněčných linií, u nichž dochází k expresi podjednotky alfa3 lidského receptorů GABA_a. Mimo to budou v ideálním případě sloučeniny podle vynálezu vyvolávat nejvýš 30%, s výhodou nejvýš 20% a zvláště nejvýše 10% potenciaci odpovědi GABA EC₂o po stabilní transfekci rekombinantních buněčných linií, u nichž dochází k expresi podjednotky alfal receptorů GABA_a lidského původu.

Potenciace odpovědi GABA EC₂o u buněk s expresí podjednotky alfa3 a podjednotky alfal lidského receptorů GABA_a, je možno snadno měřit postupy, které byly popsány v publikaci Wafford a další, Mol. Pharmacol, 1996, 50, 670-678 nebo analogickými postupy. Postup se provádí na kulturách eukaryotických buněk po stabilní transfekci, typicky jde o myší fibroblasty Ltk.

Sloučeniny podle vynálezu mají protiúzkostný účinek, jak je možno prokázat kladnou reakcí v příslušných zkouškách, zejména při zkoušce podle publikace Dawson a další, Psycho

-7CZ 290883 B6 pharmacology, 1995, 121, 109-117. Mimo to nemají sloučeniny podle vynálezu v podstatě žádný sedativní účinek, jak je možno prokázat příslušnými zkouškami na tuto citlivost podle publikace Bayley a další, J. Psychopharmacol., 1996, 10, 206-213.

Sloučeniny podle vynálezu mohou mít také protikřečový účinek. Tento účinek se prokazuje schopností potlačit křeče, vyvolané pentylentetrazolem u krys a myší způsobem podle publikace Bristow a další, J. Pharmacol. Exp. Ther., 1996, 279, 492-501.

Aby mohlo dojít k požadovanému účinku, musí se účinné látky dostat do mozkové tkáně, což znamená, že musí být schopné překročit tzv. mozkomíšní bariéru. S výhodou by měly být sloučeniny podle vynálezu účinné po perorálním podání.

Součást podstaty vynálezu tvoří také farmaceutický prostředek, který jako svou účinnou složku obsahuje jednu nebo větší počet sloučenin podle vynálezu spolu s farmaceutickým nosičem. S výhodou jde o lékové formy s obsahem jednotlivé dávky, jako tablety, pilulky, kapsle, prášky, granuláty, sterilní roztoky nebo suspenze pro parenterální podání, aerosolové prostředky s odměrnými ventily, kapky, ampule, čípky nebo prostředky pro injekční podání ve stříkačkách pro jedno použití. Prostředky mohou být určeny pro perorální, parenterální nebo rektální podání, pro podání do nosu nebo pod jazyk, inhalací nebo insuflací. Při výrobě pevných farmaceutických prostředků, např. tablet se postupuje tak, že se účinná složka smísí s farmaceutickým nosičem, který obsahuje běžné složky tablet, jako jsou kukuřičný škrob, laktóza, sacharóza, sorbitol, mastek, kyselina stearová, stearan hořečnatý, hydrogenfosforečnan vápenatý, nebo různé pryže a farmaceutická ředidla, jako je voda, vytvoří se homogenní směs sloučeniny podle vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelné soli s uvedenými pomocnými látkami. Pod tímto pojmem se rozumí, že účinná složka je rovnoměrně dispergována ve směsi, kterou je možno přímo dělit na podíly se stejnou účinností, jako tablety, pilulky nebo kapsle. Tyto lékové formy mohou obsahovat 0,1 až 500 mg účinné látky. Typická dávka se pohybuje v rozmezí 1 až 100 mg, např. 1, 2, 5, 10, 25, 50 nebo 100 mg účinné látky. Tablety nebo pilulky je možno povlékat nebo jinak upravovat k získání požadované lékové formy, popř. s prodlouženým uvolněním účinné látky. Tableta nebo pilulka může být tvořena vnitřní a vnější vrstvou, přičemž tyto vrstvy mohou být odděleny enterosolventním povlakem, který odolává působení žaludeční šťávy a dovoluje uvolnění účinné látky z vnitřní vrstvy až ve dvanáctníku. Jako enterosolventní povlak je možno použít řadu látek, např. polymemí kyseliny a směsi polymemích kyselin s různými dalšími materiály, jako je šelak, cetylalkohol nebo acetát celulózy.

Lékové formy, které jsou kapalné a mohou být určeny pro perorální nebo injekční podání, mohou být vodné roztoky, vhodně ochucené sirupy, suspenze ve vodě nebo v oleji a ochucené emulze v jedlých olejích, jako jsou olej z bavlníkových semen, sezamový olej, kokosový olej nebo arašídový olej, může také jít o elixíry a podobné prostředky. Vhodnými dispergačními a suspenzačními činidly pro toto použití mohou být syntetické a přírodní gumy, jako je tragakant, akácie, algináty, dextran, sodná sůl karboxymethylcelulózy, methylcelulóza, polyvinylpyrrolidon nebo želatina.

V případě léčení úzkostných stavů se vhodná dávka uvedených účinných látek pohybuje v rozmezí 0,01 až 250 mg/kg denně, s výhodou 0,05 až 10 mg/kg denně a zvláště 0,05 až 5 mg/kg denně. Sloučeniny je možno podávat 1 až 4krát denně.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno připravit tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III, v němž Z, R¹ a R² mají svrchu uvedený význam a L¹ znamená odštěpitelnou skupinu, se sloučeninou obecného vzorce IV, v němž R² má svrchu uvedený význam.

-8CZ 290883 B6

R² —CH₂—OH

(TV)

Odštěpitelnou skupinou L¹ je v typických případech atom halogenu, zvláště atom chloru.

Reakce snadno probíhá tak, že se reakční složky míchají ve vhodném rozpouštědle, jako

Ν,Ν-dimethylformamidu nebo tetrahydrofuranu v přítomnosti silné báze, jako hydridu sodíku, bis(trimethylsilyl)amidu lithia nebo bis(trimethylsilyl)amidu draslíku.

Meziprodukty obecného vzorce III je možno připravit tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce V s v podstatně ekvimolámím množstvím hydrazinového derivátu obecného

10 vzorce VI
	£	F.	0 jj
	í\| V		V^nHNH
z^x		£	β
	L’	R^l
	(V)	(VI)

kde Z, R¹ a L¹ mají svrchu uvedený význam a L² znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, po ukončení reakce je možno získanou směs sloučenin rozdělit na jednotlivé izomery obvyklým způsobem.

Odštěpitelnou skupinou L² je typicky atom halogenu, zvláště chloru. V meziproduktech obecného vzorce V mohou být odštěpitelné skupiny ve významu L¹ a L² stejné nebo odlišné, obvykle jsou stejné a běží o atomy chlóru.

Reakce mezi sloučeninami obecného vzorce V a VI snadno probíhá zahříváním reakčních složek v přítomnosti zdroje protonů, např. triethylaminhydrochloridu, obvykle za varu pod zpětným chladičem v inertním rozpouštědle, jak xylenu nebo 1,4-dioxanu.

Mezi produkty obecného vzorce III je možno připravit také tak, že se nechá reagovat 25 hydrazinový derivát obecného vzorce VII s aldehydovým derivátem obecného vzorce VIII.

-9CZ 290883 B6

(VII) ΟΠΗ) kde Z, R¹ a L¹ mají svrchu uvedený význam, s následnou cyklizací vytvořené Schiffovy báze, která je meziproduktem reakce.

Reakce mezi sloučeninami obecného vzorce VII a VIII dobře probíhá v kyselém prostředí, např. v přítomnosti anorganické kyseliny, jako kyseliny chlorovodíkové. Cyklizací výsledné Schiffovy báze je pak možno snadno uskutečnit působením chloridu železitého ve vhodném rozpouštědle, např. alkoholu, jako ethanolu při vyšší teplotě, typicky při teplotě v rozmezí 60 až 70 °C.

Meziprodukty obecného vzorce VII je možno připravit reakcí příslušné sloučeniny obecného vzorce V ve svrchu uvedeném významu s hydrazinhydrátem, typicky v 1,4-dioxanu při teplotě varu pod zpětným chladičem s následným případným rozdělením směsi izomerů obvyklým způsobem.

Meziprodukty obecného vzorce III je možno připravit také tak, že se nechá reagovat svrchu uvedený hydrazinový derivát obecného vzorce VII se sloučeninou obecného vzorce IX

(IX) kde R¹ má svrchu uvedený význam a Q znamená reaktivní karboxylátovou skupinu s následnou cyklizací získaného hydrazidového derivátu obecného vzorce X

(X)

- 10CZ 290883 B6 kde Z, R¹ a L¹ mají svrchu uvedený význam.

Vhodnými významy pro reaktivní karboxylátovou skupinu Q jsou estery, např. alky testery o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, anhydridy kyselin, např. směsné anhydridy s alkankyselinami o 1 až 4 atomech uhlíku, halogenidy kyseliny, např. chloridy a acylimidazoly. V jednom z výhodných provedení znamená skupina Q zbytek chloridu kyseliny.

Reakce mezi sloučeninami obecného vzorce VII a IX snadno probíhá v alkalickém prostředí, např. v přítomnosti triethylaminu, obvykle v inertním rozpouštědle, jako diethyletheru a typicky při teplotě přibližně 0 °C. Cyklizací výsledné sloučeniny obecného vzorce X je pak možno snadno uskutečnit působením l,2-dibrom-l,l,2,2-tetrachlorethanu a trifenylfosfmu v přítomnosti báze, jako triethylaminu, obvykle v inertním rozpouštědle, tvpicky při teplotě přibližně 0°C.

Reakce mezi sloučeninami obecného vzorce V a hydrazinhydrátem nebo sloučeninou vzorce VI obvykle dává vznik směsi izomemích produktů v závislosti na tom, zda atom dusíku hydrazinu nahradí odštěpitelnou skupinu L¹ nebo L². Kromě požadovaného produktu vzorce III tedy vzniká také izomemí sloučenina v níž je skupina Z vázána v poloze VIII. Obdobně vzniká také izomer sloučeniny VII. Z tohoto důvodu je obvykle zapotřebí rozdělit výslednou směs na jednotlivé izomery běžným způsobem, např. chromatografií.

Podle dalšího možného postupuje možno připravit sloučeniny obecného vzorce I tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XI nebo její tautomer, l,l,4-triazolo/4,3-b/pyridazin-6-on se sloučeninou obecného vzorce XII

	N-N
	íi V	η
	M ^L		R²—CH,—L^:
z	T OH	R¹
	<xi)		(XII),

kde Z, R¹ a R² mají svrchu uvedený význam a I? znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu.

Odštěpitelná skupina I? je obvykle atom halogenu, typicky atom chloru nebo bromu.

Reakce mezi sloučeninami obecných vzorců XI a XII dobře probíhá tak, že se reakční složky míchají ve vhodném rozpouštědle jako Ν,Ν-dimethylformamidu v přítomnosti silné báze, např. hydridu sodíku.

Meziprodukty obecného vzorce XI je možno připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce III ve svrchu uvedeném významu s hydroxidem alkalického kovu, např. hydroxidem sodným. Reakce dobře probíhá v inertním rozpouštědle, např. vodném 1,4-dioxanu. s výhodou při teplotě varu rozpouštědla pod zpětným chladičem.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno připravit také tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce Z-CO₂H se sloučeninou obecného vzorce XHI

-11 CZ 290883 B6

(XIII) , kde Z, R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, v přítomnosti dusičnanu stříbrného a persíranu amonného.

Reakce dobře probíhá ve vhodném rozpouštědle, jako ve vodě nebo vodném acetonitrilu, popř. v kyselém prostředí, např. v přítomnosti kyseliny sírové a při vyšší teplotě.

Meziprodukty obecného vzorce XIII odpovídají svrchu uvedeným sloučeninám obecného vzorce I, v nichž Z znamená atom vodíku a je možno je připravit analogickými způsoby, jaké byly svrchu uvedeny pro přípravu sloučenin obecného vzorce I.

Sloučeniny obecného vzorce I ve svrchu uvedeném významu je možno připravit také reakcí sloučenin obecného vzorce XIV se sloučeninami obecného vzorce XV

(XIV) (XV), kde Z, R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, M znamená skupinu -B(OH)₂ nebo -Sn(Alk)₃, kde Alk znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, typicky n-butyl a L⁴ znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, v přítomnosti katalyzátoru na bázi přechodného kovu.

Odštěpitelnou skupinou L⁴ může být atom halogenu, např. atom bromu.

Vhodným katalyzátorem na bázi přechodného kovu pro použití při této reakci mezi sloučeninami obecného vzorce XIV a XV může být dichlorbis(trifenylfosfm)-paladium(II) nebo tetrakis(trifenylfosfin)-paladium(O).

Reakce se s výhodou provádí v inertním rozpouštědle, jako Ν,Ν-dimethylformamidu, typicky při vyšší teplotě.

Meziprodukty obecného vzorce XIV je možno připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce IV ve svrchu uvedeném významu se sloučeninou obecného vzorce XVI

-12CZ 290883 B6

kde Z, L¹ a L⁴ mají svrchu uvedený význam, za podmínek, analogických podmínkám pro reakci mezi sloučeninami obecných vzorců ΙΠ a IV.

Podle dalšího možného provedení je možno připravit sloučeniny obecného vzorce I, v němž Z znamená 1-fluorcyklobutyl reakcí sloučeniny obecného vzorce XVII

(XVH) , kde R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, s fluoračním činidlem.

Obdobným způsobem je možno připravit sloučeniny obecného vzorce I, v němž Z znamená 3-fluorcyklobutyl nebo l-fluorbut-3-enyl nebo směs těchto látek, reakcí sloučeniny obecného vzorce XVIII

kde R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, s fluoračním činidlem. V případě získání směsi výsledných produktů je možno jednotlivé složky od sebe oddělit obvyklým způsobem, např. chromatografií.

- 13CZ 290883 B6

Obdobně je možno získat sloučeniny obecného vzorce I, v němž Z znamená 3,3-difluorcyklobutyl reakcí odpovídající sloučeniny, v niž Z znamená 3-oxocyklobutyl s fluoračním činidlem.

Vhodným fluoračním činidlem pro použití při svrchu uvedených reakcích je fluoriddiethylaminosíry, DAST, při jehož použití je možno reakci uskutečnit mícháním reakčních složek v inertním rozpouštědle, jako dichlormethanu, typicky při teplotě přibližně -78 °C.

Meziprodukty obecného vzorce XVII je možno připravit reakcí sloučenin obecného vzorce IV ve svrchu uvedeném významu se sloučeninou obecného vzorce XIX

(XIX) , kde R¹ a L¹ mají svrchu uvedený význam, za podmínek, analogických podmínkám, popsaným svrchu pro reakci mezi sloučeninami obecného vzorce ΠΙ a IV.

Meziprodukty obecného vzorce XIX je možno připravit reakcí cyklobutanonu se sloučeninou obecného vzorce XX

(XX), kde R¹ a L¹ mají svrchu uvedený význam a Alk znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, typicky methyl.

Reakce dobře probíhá tak, že se reakční složky zpracovávají působením zdroje fluoridu, např. katalytickým množstvím tetrabutylamoniumdifluortrifenylcínanu, obvykle v inertním rozpouštědle, jako tetrahydrofuranu.

Meziprodukty obecného vzorce XX odpovídají sloučeninám obecného vzorce III, v nichž Z znamená —Si(Alk)₃ a je proto možno je připravit postupy, analogickými postupům, popsaným svrchu pro výrobu odpovídajících sloučenin obecného vzorce III.

-14CZ 290883 B6

Sloučeniny svrchu uvedeného obecného vzorce XVIII, které odpovídají sloučeninám obecného vzorce I, v němž Z znamená 3-hydroxycyklobutyl, je možno připravit hydrogenolýzou sloučenin obecného vzorce XXI

(XXI) kde R¹ a R² mají svrchu uvedený význam.

Reakce se obvykle provádí hydrogenací tak, že se sloučenina obecného vzorce XXI uvede do styku s katalyzátorem hydrogenace v přítomnosti dárce vodíku. Vhodným hydrogenačním katalyzátorem je paladium na aktivním uhlí, s výhodou 10%paladium na aktivním uhlí. Vhodným donorem vodíku je mravenčan amonný, v případě jeho použití se reakce s výhodou provádí v kyselině mravenčí.

Sloučeniny obecného vzorce I ve svrchu uvedeném významu je možno připravit také tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XXII se sloučeninou obecného vzorce XXIII

(XXIII), kde Z, R¹ a R² mají svrchu uvedený význam, L⁵ znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu a E znamená skupinu -B(OH)₂ nebo zbytek organozinečnatého reakčního činidla, reakce se provádí v přítomnosti katalyzátoru na bázi přechodného kovu.

Odštěpitelnou skupinou ve významu L⁵ je obvykle atom halogenu, např. atom bromu nebo jodu.

V případě, že E znamená skupinu -B(OH)₂, je katalyzátorem na bázi přechodného kovu pro použití při reakci mezi sloučeninami obecných vzorců XXII a ΧΧΙΠ obvykle tetrakis(trifenylfosfín)paladium(O) a reakce se provádí při vyšší teplotě v přítomnosti fosforečnanu draselného a rozpouštědla, např. Ν,Ν-dimethylformamidu.

V případě, že E znamená zbytek organozinečnaného reakčního činidla je možno připravit meziprodukt obecného vzorce XXIII reakcí jodidu vzorce Z-I s práškovým zinkem, typicky v přítomnosti 1,2-dibromethanu a rozpouštědla, jako Ν,Ν-dimethylformamidu. V tomto případě je katalyzátorem na bázi přechodného kovu pro použití při reakci mezi sloučeninami obecného

- 15CZ 290883 B6 vzorce XXII a XXIII s výhodou tris(dibenzylidenaceton)dipaladium(0) a reakce se provádí v přítomnosti tri-2-furylfosfinu a rozpouštědla, jako N,N-dimethylformamidu.

Sloučeniny obecného vzorce XXI, které odpovídají sloučeninám obecného vzorce I, v němž Z znamená 3-benzyloxycyklobutyl, je podobně možno připravit reakcí sloučenin obecného vzorce XXII se sloučeninami obecného vzorce XXIV

(XXIV), kde E má svrchu uvedený význam, v přítomnosti katalyzátoru na bázi přechodného kovu za podmínek, analogických podmínkám, popsaným svrchu pro reakci mezi sloučeninami obecného vzorce XXII a XXIII.

Meziprodukty obecného vzorce XXII je možno připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce IV ve svrchu uvedeném významu se sloučeninou obecného vzorce XXV

(XXV) kde R^l, L¹ a L⁵ mají svrchu uvedený význam, za podmínek, analogických podmínkám, které byly svrchu popsány pro reakci mezi sloučeninami obecných vzorců ΠΙ a IV.

Meziprodukty obecného vzorce XXV, je možno připravit tak, že se na příslušným prekurzor obecného vzorce XX ve svrchu uvedeném významu působí zdrojem fluoridu, jako tetrabutylamoniumdifluortrifenylcínanem nebo trimethyldifluoridem tris(dimethylamino)síry v přítomnosti reakčního činidla, obsahujícího skupinu L⁵, jako je 1,2-dibromtetrafluorethan nebo 1,2-dijodethan.

Sloučeniny obecného vzorce I, v němž Z znamená trifluormethyl, je možno připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce XXII ve svrchu uvedeném významu s jodtrifluormethanem.

Reakce se provádí v přítomnosti práškové mědi, typicky v zatavené trubici při vyšší teplotě, např. přibližně 80 °C.

Meziprodukty obecného vzorce IV je možno připravit postupy, které byly uvedeny v EP-A-0421210 nebo analogickými postupy.

-16CZ 290883 B6

V případě, že výchozí látky obecných vzorců V, VI, VIII, IX, XII, XV, XVI a XXIV nejsou běžně dodávány, je možno je připravit pomocí postupů, které budou popsány v příkladové části nebo standardními známými postupy.

V průběhu svrchu uvedených syntetických postupů může být nezbytné a/nebo žádoucí chránit citlivé nebo reaktivní skupiny na některé z reakčních složek. Toho je možno dosáhnout použitím běžných ochranných skupin tak, jak jsou popsány v souhrnné publikaci Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J. F. W. McOmie, Plenům Press, 1973, a také T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991. Ochranné skupiny je možno odstranit v jakémkoliv následném stupni při použití obvyklých postupů.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady.

Sloučeniny podle vynálezu jsou účinnými inhibitory vazby /³H/-flumazenilu na benzodiazepinové vazné místo lidských receptorů GABA_a, obsahujících podjednotku alfa2 nebo alfa3, k jejíž stabilní expresi dochází v buňkách Ltk.

Reakční činidla

- Fyziologický roztok chloridu sodného s fosfátovým pufrem, PBS.

- Pufr k provedení zkoušek, obsahující 10 mM dihydrogenfosforečnanu draselného, 100 mM chloridu draselného při pH 7,4 a při teplotě místnosti,

- /³H/-flumazenil, 18 nM pro buňky alfalbeta3gamma2, 18 nM pro buňky alfa2beta3gamma2 a 10 nM pro buňky alfa3, beta3, gamma2 v pufru k provedení zkoušek.

- Flunitrazepam 100 mikroM v pufru k provedení zkoušek.

- Buňky, resuspendované ve zkušebním pufru (1 plotna na 10 ml).

Oddělení buněk

Buňky se oddělí od supematantu. Přidá se přibližně 20 ml PBS. Buňky se uloží do zkumavky pro odstředivku s objemem 50 ml. Postup se opakuje s dalšími 10 ml PBS, aby bylo zajištěno odstranění většiny buněk. Suspenze buněk se pak odstředí 20 minut při 3000 otáčkách za minutu a popř. se zmrazí. Odstředěné buňky se uvedou do suspenze v 10 ml pufru, na toto množství pufru se užijí buňky z jedné plotny 25 x 25 cm.

Provedení zkoušky

Zkoušku je možno uskutečnit na plotnách z 96 hlubokými vyhloubeními nebo ve zkumavkách. Při provedení ve zkumavkách obsahuje každá zkumavka následující složky:

- 300 mikrolitrů pufru pro provedení zkoušky,

- 50 mikrolitrů /³H/-flumazenilu, konečná koncentrace pro buňky alfalbeta3gamma2 je

1,8 nM, pro buňky alfa2beta3gamma2, je 1,8 nM a pro buňky alfa3beta3gamma2 je 1,0 nM.

- 50 mikrolitrů pufru nebo rozpouštědla jako nosného prostředí, např. 10 % DMSO v případě, že se sloučeniny rozpouštějí v celkovém množství 10 % DMSO, zkoumaná látka nebo flunitrazepam ke stanovení nespecifické vazby v konečné koncentraci 10 mikroM,

- 100 mikrolitrů buněk.

-17CZ 290883 B6

Zkušební vzorky se inkubují jednu hodinu při teplotě 40 °C, pak se materiál zfiltruje při použití přístroje Tomtec nebo Brandel a filtru GF/B, načež se materiál promývá 3krát 3 ml ledově chladného pufru pro provádění zkoušek. Filtry se vysuší a radioaktivita se prokazuje pomocí kapalinové scintilace. Předpokládané hodnoty pro úplnou vazbu jsou 3000 až 4000 dpm celkem a méně než 200 dpm v případě nespecifické vazby při použití kapalinové scintilace nebo 1500 až 2000 dpm celkem a méně než 200 dpm pro nespecifickou vazbu v případě, pevné scintilace při použití prostředku meltilex. Parametry vazby se stanoví nelineární analýzou regrese nejmenších čtverců, ze získaných hodnot je možno vypočítat inhibiční konstantu Kj pro každou zkoumanou látku.

Sloučeniny, které jsou uvedeny v následujících příkladech, byly podrobeny svrchu popsaných zkouškám. Všechny tyto látky mají hodnotu Ki pro náhradu /³H/-flumazenilu na podjednotkách alfa2 a/nebo alfa 3 lidského receptorů GBA_A velikosti 100 nM nebo nižší.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l ,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 3,6-dichlor-4-cyklobutylpyridazinu

K suspenzi, připravené nasuspendováním 50,0 g, (0,34 mol), 3,6-dichlorpyridazinu do 1,25 litru vody, bylo opatrně přidáno 53,60 ml, (1,00 mol), koncentrované kyseliny sírové, a ke vzniklé směsi bylo po vyhřátí na teplotu 70,0 °C, (vnitřní teplota), přidáno 35,30 ml, (0,37 mol), cyklobutankarboxylové kyseliny.

Poté byl reakční směsi přidán roztok, získaný rozpuštěním 11,40 g, (0,07 mol), dusičnanu stříbrného, ve 20,0 ml vody tak, že přidávání probíhalo během cca 1,0 minuty, přičemž se reakční směs mléčně zakalila. Poté byl ke směsi přidán roztok, získaný rozpuštěním 230,0 g, (1,00 mol), persíranu amonného, ve 0,63 litrech vody tak, že přidávání probíhalo během 20,0 až 30,0 minut. Při této operaci vnitřní teplota reakční směsi vystoupila na cca 85,0 °C, a vznikla lepivá sraženina.

Poté, co bylo přidávání výše zmíněného roztoku ukončeno, byla reakční směs míchána ještě dalších 5,0 minut, a poté byla ochlazena na teplotu místnosti.

Poté, co byla reakční směs nalita na led, a zalkalizována s koncentrovaným vodným amoniakem, přičemž bylo přidáváno ke směsi potřebné množství ledu tak, aby se teplota reakční směsi udržovala nižší než 10,0 °C.

Vodná reakční směs byla extrahována 3x s dichlormethanem, a po oddělení organické a vodné fáze byly spojené extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, zfiltrovány, a odpařeny.

Bylo získáno 55,70 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě látky olejovité konzistence, ve výtěžku 82,0 %.

- 18CZ 290883 B6 'H-NMR (CDCI3), (spektra nukleární magnetické rezonance), naznačují kontaminaci produktu s cca 5 %; 4,5-dicyklobutylové sloučeniny. Přesto byl takto získaný materiál použit v dalším Stupni b), bez jakéhokoliv dalšího čištění.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (360 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,79- 1,90, (1H, m), 2,00-2,09, (1H, m.), 2,18-2,30, (2H, m.), 2,33 - 2,40, (2H, m.), 3,63 - 3,72, (1H, m.), 7,95, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): (ES⁺) = elektronová ionizace m/e, 203, /MH/^4-, 205, /ΜΗΛ, 207, /MHT;

Stupeň b)

Příprava 6-chlor-7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Směs, připravená smícháním 3,00 g, (14,70 mmol); 3,6-dichlor-4-cyklobutylpyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), dále 3,00 g, (19,50 mmol), 2fluorbenzhydrazidu, a 3,00 g, (21,80 mmol), triethylaminu.hydrochloridu, ve 50,0 ml, p-xylenu, byla za stálého míchání zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem, v proudu dusíku, po dobu 20,0 hodin.

Poté, co byla vzniklá reakční směs ochlazena, byly těkavé složky za vakua odstraněny, a zbytek byl vytřepán mezi dichlormethan a vodu. Po oddělení vodné a organické fáze byla vodná vrstva zalkalizována pomocí pevného uhličitanu draselného, a v této fázi byl také odstraněn filtrací tmavě zbarvený, nerozpustný materiál, a vodná vrstva byla následně extrahována 2x s dichlormethanem.

Po oddělení organické a vodné fáze byly spojené extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, a po zfiltrování byly odpařeny. Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi ethylacetát: dichlormethan, (20,0 % až 30,0 %), jako elučního činidla.

Bylo získáno 2,20 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě slabě hnědě zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 49,0 %.

Analytické údaje v nadpisu uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,85 -2,08, (lH,m.), 2,08-2,30, (3H, m.), 2,38-2,64 (2H, m.), 3,62-3,84, (lH,m.), 7,19 - 7,46, (2H, m.), 7,46 - 7,67, (1H, m.), 7,80 - 7,96, (1H, m.), 7,99, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺):

m/e, 303,0, /ΜΗΛ, 305,0, /MHT;

-19CZ 290883 B6

Stupeň c)

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-inethyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,123 g, (1,09 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3yl)-methanolu, (získaného postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-421.210), ve 15,0 ml, Ν,Ν-dimethylformamidu, bylo přidáno 0,044 g, (1,10 mol ekv.), hydridu sodného, (ve formě 60% olejové disperze), a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti, po dobu 30,0 minut.

Poté byl ku směsi přidán roztok, získaný rozpuštěním 0,30 g, (0,99 mmol), 6-chlor-7-cyklobutyl-2-(2-fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), ve 15,0 ml, Ν,Ν-dimethylformamidu, a tato reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2,0 hodin.

Poté byla reakční směs naředěna se 100,0 ml, vody, a tato vodná forma směsi byla 4x extrahována vždy se 100,0 ml, dichlormethanu. Po oddělení vodných a organických fází byly spojené extrakty vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány a odpařeny.

Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografii na silikagelu, za použití směsi 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,294 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu, ve výtěžku 78,0 %.

'H-NMR, (250 MHz, CDClj):

delta, 1,82-2,00, (2H, m.), 2,00-2,26, (3H, m.), 2,26-2,48, (2H, m.), 3,53-3,70, (1H, m.), 3,84, (3H, s.), 5,47, (2H, s.), 7,22 - 7,42, (2H, m.), 7,50 - 7,64, (1H, m.), 7,76 - 7,96, (3H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 380,0, /MHZ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C19H18FN7O:

Vypočteno: C 60,15, H4,78, N 25,84, %

Nalezeno: C 60,21, H4,77, N 25,66,%

Příklad 2

Příprava 7-cykIobutyl-3-(2-fiuorfenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci předcházejícího Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-

1,2,4-triazol-3-yl)-methanolu, byl ve Stupnic) použit (l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl)methanol, připravený postupem, popsaným v Evropském patentu, (EP-A-421.210).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (360 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,74-1,87, (1H, m.), 1,94-2,08, (1H, m.), 2,14 - 2,34, (4H, m.), 3,50-3,64, (1H, m.),

3,87, (3H, s.), 5,30, (2H, s.), 7,41 - 7,51, (2H, m.), 7,62 - 7,70, (1H, m.), 7,96 - 8,03, (1H, m.), 8,14, (1H, s.), 8,50, (1H, s.).

-20CZ 290883 B6

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 380,0, /ΜΗΛ;

Příklad 3

Příprava 7-cyklobutyl-3-(3-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l ,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými v rámci Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo 2-fluorbenzhydrazidu, byl ve Stupni b), použit 3-fluorbenzhydrazid.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

‘H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,74-1,90, (1H, m.), 1,94 - 2,12, (1H, m.), 2,12-2,36, (4H, m.), 3,51 -3,69, (1H, m.),

3,93, (3H, s.), 5,70, (2H, s.), 7,36- 7,47, (1H, m.), 7,62 - 7,72, (1H, m.), 8,00, (1H, s.), 8,14 8,32, (3H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES'): m/z, 380,0, /ΜΗΛ;

Příklad 4

Příprava 7-cyklobutyl-3-(4-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l ,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo 2-fluorbenzhydrazidu, byl ve Stupni b), použit 4-fluorbenzhydrazid.

Analytické hodnocení v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

‘H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,98-2,12, (1H, m.), 2,18-2,32, (1H, m.), 2,32-2,55, (4H, m.), 3,72-3,90, (1H, m.), 4,17, (3H,s.), 5,90, (2H, s.), 7,62 - 7,76, (2H, m.), 8,27, (1H, s.), 8,40, (1H, s.), 8,64 -8,74, (2H,m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 380,0, /ΜΗΛ;

Příklad 5

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo 2-fluorbenzhydrazidu, byl ve Stupni b), použit 2,4-difluorbenzhydrazid.

-21 CZ 290883 B6

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,72-1,90, (1H, m.), 1,90-2,12, (1H, m.), 2,12 -2,36, (4H, m.), 3,50-3,68, (lH,m.), 3,82, (3H, s.), 5,50, (2H, s.), 7,30-7,42, (1H, m.), 7,52-7,64, (1H, m.), 7,83 - 8,12, (2H, m.), 8,20, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /ΜΗΛ;

Přiklad 6

Příprava 7-cyklobutyl-3-(3,5-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 3-chlor-4-cyklobutyl-6-hydrazinpyridazinu

Směs, připravená smícháním 10,00 g, (0,049 mol), 3,6-dichlor-4-cyklobutylpyridazinu, a 14,0 ml, (0,30 mol), hydrazin.hydrátu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem, ve 125,0 ml, dioxanu, po dobu 24,0 hodin.

Poté, co byla reakční směs ochlazena, byl žádaný izomer ze směsi krystalizován, a poté byl izolován filtrací.

Bylo získáno 4,80 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 49,0 %.

'H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,68 - 1,86, (1H, m.), 2,00-2,11, (3H, m.), 2,29-2,38, (2H, m.), 3,52 - 3,61, (1H, m.), 4,35, (2H, š.), 6,99, (1H, s.), 8,06, (1H, š.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 198, /ΜΗΛ, 200, /MHÚ;

Stupeň b)

Příprava N-(6-chlor-5-cyklobutylpyridazin-3-yl)-N'-(3,5-difluor-benzyliden)-hydrazinu

Směs, připravená smícháním 0,502 g, (2,53 mmol), 3-chlor-4-cyklobutyl-6-hydrazinpyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), a 285,0 ml, (2,78 mmol),

3,5-difluorbenzaldehydu, byla míchána s 10,0 ml, 0,2M roztoku kyseliny chlorovodíkové, po dobu 2,0 hodin.

Vzniklý produkt byl poté izolován filtrací, a vysušen. Bylo získáno 0,81 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 99,0 %.

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 323,0/ΜΗΛ; 325,0,/ΜΗΛ;

-22CZ 290883 B6

Stupeň c)

Příprava 6-chlor-7-cyklobutyl-3-(3,5-difluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,816 g, (2,53 mmol), N-(6-chlor-5-cyklobutylpyridazin-3-yl)-N'-(3,5-difluorbenzyliden)-hydrazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), ve 35,0 ml, ethanolu, byla přidána po kapkách směs, získaná smícháním 3,423 g, (12,66 mmol), chloridu železitého, v 15,0 ml, ethanolu, a vzniklá reakční směs byla zahřívána při teplotě 70,0 °C.

Po uplynutí 3,0 hodin byla reakční směs vytřepána mezi 250,0 ml, dichlormethanu, a 250,0 ml, solanky. Po oddělení organické a vodné fáze byla organická vrstva vysušena se síranem hořečnatým, zfiltrována, a odpařena. Vzniklá zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi ethylacetát: hexan, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,51 g, žádaného, v nadpise uvedeného pyridazinu, ve výtěžku 63,0 %.

‘H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,84 -2,08, (lH,m.), 2,08-2,36, (3H,m.), 2,42-2,68, (2H, m.), 3,65-3,87, (lH,m.), 6,88 - 7,06, (1H, m.), 8,01, (1H, s.), 8,04 - 8,21, (2H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (RS⁺): 321,0/ΜΗΛ, 323,0/ΜΗΛ;

Stupeň d)

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,099 g, (0,879 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3yl)-methanoiu, (získaného za použití postupů, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-421.210), ve 15,0 ml; Ν,Ν-dimethylformamidu, bylo přidáno 0,035 g, hydridu sodného, (ve formě 60% olejové disperze), (1,10 mol. ekviv.), a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti, po dobu 30,0 minut.

Poté byl ku reakční směsi přidán roztok, získaný rozpuštěním 0,256 g, (0,799 mmol),

6-chlor-7-cyklobutyl-3-(3,5-difluorfenyl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c), ve 15,0 ml, Ν,Ν-dimethylformamidu, a tato reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2,0 hodin.

Poté byla směs naředěna se 100,0 ml, vody, a tato vodná forma směsi byla extrahována 4x vždy se 100,0 ml, dichlormethanu. Po oddělení organické a vodné fáze, byly spojené organické extrakty vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány, a odpařeny.

Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 3% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,120 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu, ve výtěžku 38,0 %.

‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,86-2,02, (lH,m.), 2,08-2,25, (3H, m.), 2,32-2,46, (2H, m.), 3,56-3,70, (lH,m.), 4,01, (3H,s.), 5,64, (2H, s.), 6,92 -7,01, (lH,m.), 7,90, (1H, s.), 7,94, (1H, s.), 8,03 - 8,12, (2H, m.).

-23CZ 290883 B6

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /MH/⁴;

Příklad 7

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl)-7-( l-methylcyklobutyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň a), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo cyklobutankarboxylové kyseliny, byla ve Stupni a), použita 1-methylcyklobutankarboxylová kyselina, (viz odborný časopis Joumal of Organometallic Chemistry, 352, 263-272, /1988/, a dále analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 6, Stupně a), b), a c), a d), stím rozdílem, že místo 3,5-difluorbenzaldehydu, byl ve Stupni b), použit 2,4-difluorbenzaldehyd.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,52, (3H, s.), 1,78- 1,92, (1H, m.), 2,04-2,26, (3H, m.), 2,34-2,46, (2H, m.), 3,88, (3H, s.), 5,47, (2H, s.), 7,00 - 7,15, (2H, m.), 7,74, (1H, s.), 7,83 - 7,93, (2H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 412,0, /ΜΗΛ;

Příklad 8

Příprava 7-cyklobutyl-3-(3,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupeň a), a Příkladu 6, Stupně a),

b), c), a d), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo

3,5-difluorbenzaldehydu, byl ve Stupni b), použit 3,4-difluorbenzaldehyd.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,86-2,00, (1H, m.), 2,06-2,24, (3H, m.), 2,30-2,46, (2H,m.), 3,57 -3,70, (lH,m.), 4,00, (3H,s.), 5,62, (2H, s.), 7,32-7,40, (lH,m.), 7,90, (lH,s.), 7,96, (1H, s.), 8,20-8,80, (1H, m.), 8,32 - 8,40, (1H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /ΜΗΛ;

Příklad 9

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2,3-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupeň a), a Příkladu 6, Stupeň a),

3,5-difluorbenzaldehydu, byl ve Stupni b), použit 2,3-difluorbenzaldehyd.

-24CZ 290883 B6

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,86- 1,98, (1H, m.), 2,04 -2,24, (3H, m.), 2,30-2,44, (2H. m.), 3,58-3,70, (lH,m.), 3,90, (3H, s.), 5,50, (2H, s.), 7,26- 7,34, (1H, m.), 7,34-7,46, (1H. m.), 7,62 - 7,80, (1H, m.),

7,88, (1H, s.), 7,92, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /ΜΗΛ;

Příklad 10

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2,6-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l, 2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1.2.4- triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupeň a), a Příkladu 6, Stupně a), b), c), a d), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo

3,5-difluorbenzaldehydu, byl ve Stupni b), použit 2,6-difluorbenzaldehyd.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,86- 1,96, (lH,m.), 2,04 -2,24, (3H, m.), 2,30-2,42, (2H, m.), 3,56-3,68, (lH,m.), 3,84, (3H, s.), 4,52, (2H, s.), 7,08 - 7,16, (2H, m.), 7,55 - 7,60, (1H, m.), 7,88, (2H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /ΜΗΛ;

Příklad 11

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2,5-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1.2.4- triazol-/4,3-b/-pyridazinu

3,5-difluorbenzaldehydu, byl ve Stupni b), použit 2,5-difluorbenzaldehyd.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,86-1,98, (1H, m.), 2,04 -2,24, (3H, m.), 2,30-2,46, (2H, m.), 3,56-3,70, (lH,m.), 3,90, (3H, s.), 5,48, (2H, s.), 7,20 - 7,30, (2H,m.), 7,60-7,68, (lH,m.), 7,88, (1H, s.), 7,92, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /ΜΗΛ;

-25CZ 290883 B6

Příklad 12

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl}-7-( 1 -methylcyklohexyl)-6-(2-methyl-2H-1, 2,4—tri azo 1—3—v 1— methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 3,6-dichlor-4-( l-methylcyklohexyl)-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 10,00 g, (87,00 mmol), 3,6-dichlorpyridazinu, ve 250,0 ml, vody, bylo přidáno 10,70 ml, (0,20 mol), koncentrované kyseliny sírové, a vzniklá reakční směs byla zahřívána na teplotu 70,0 °C.

Poté, po přidání 9,67 g, (88,00 mmol), kyseliny 1-methylcyklohexankarboxylové, byl přidán během 1,0 minuty roztok, získaný rozpuštěním 2,30 g, (13,50 mmol), dusičnanu stříbrného, v 5,0 ml, vody, a následně, během 20,0 minut, byl přidán roztok, získaný rozpuštěním 45,60 g, (0,20 mol), persíranu amonného, ve 95,0 ml, vody.

Poté, po úplném dokončení výše popsané operace, byla reakční směs míchána dalších 5,0 minut, a poté byla ochlazena na teplotu místnosti. Poté, po ochlazení na teplotu 0 °C, pomocí lázně obsahující směs ledu a vody, byla reakční směs zalkalizována koncentrovaným vodným roztokem amoniaku, (vnitřní teplota byla nižší jak 10,0 °C), a vodná forma směsi byla extrahována 3x vždy se 350,0 ml dichlormethanu.

Po oddělení organické a vodné fáze, byly spojené organické extrakty promyty se 350,0 ml, solanky, a po vysušení se síranem hořečnatým, byly zfiltrovány a odpařeny.

Vzniklý zbytek byl chromatografován na silikagelu, za použití směsi 0,0 až 5% ethylacetátu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 5,93 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu.

‘H-NMR, (250 MHz, CDClj):

delta, 1,33- 1,74, (6H,m.), 1,43, (3H, s.), 1,80 -1,96, (2H, m.), 1,97-2,12, (2H, m.), 7,49, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 249,0/ΜΗ/ζ 245,/ΜΗΛ;

Stupeň b)

Příprava 6-chlor-3-(2,4-difluorfenyl}-7-( l-methylcyklohexyl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/pyridazinu

Směs, připravená smícháním 1,29 g, (5,27 mmol); 3,6-dichlor-4-(l-methylcyklohexyl)pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), dále 1,72 g, (10,00 mmol), hydrazidu kyseliny 2,4-difluorbenzoové, a 1,09 g, (7,90 mmol), triethylaminu.hydrochloridu, ve 5,0 ml, p-xylenu, byla míchána a zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 24,0 hodin.

Poté, co byla reakční směs ochlazena, byly těkavé složky za vakua odstraněny, a vzniklý zbytek byl vytřepán mezi 100,0 ml, dichlormethanu, a 100,0 ml, vody, a 100,0 ml, hydrogenuhličitanu sodného. Nerozpustné pevné složky byly ze směsi odstraněny filtrací.

-26CZ 290883 B6

Po oddělení vodné a organické fáze, byla vodná vrstva extrahována dále vždy 2x se 100,0 ml, dichlormethanu, a po oddělení organické a vodné fáze, byly spojené organické extrakty vysušeny se síranem hořečnatým, zfiltrovány, a odpařeny.

Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 0,0% až 25,0% ethylacetátu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,74 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu.

'H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,34 - 1,74, (6H, m.), 1,50, (3H, s.), 1,90-2,15, (4H, m.), 7,01-7,14. (2H, m.), 7,87 - 7,98, (1H, m.), 8,18, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES^-): m/e, 365,0,/MFT7, 363,0/ΜΗΛ;

Stupeň c)

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl)-7-( l-methylcyklohexyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 37,00 mg, (0,33 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3yl)-methanolu, (připraveného postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A421.210), v 5,0 ml, bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu, bylo za stálého míchání a při teplotě místnosti, přidáno v atmosféře dusíku, 13,00 mg, (0,33 mmol), hydridu sodného, ve formě 60% olejové disperze.

Poté, co byla vzniklá reakční směs míchána po dobu 30,0 minut, bylo kní přidáno 100,0 mg, (0,275 mmol), 6-chlor-3-(2,4-difluorfenyl)-7-(l-methylcyklohexyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/pyridazinu, získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), ve 3,00 ml, Ν,Ν-dimethylformamidu, a tato směs byla míchána po dobu dalších 60,0 minut.

Poté byla reakce zastavena přidáním 20,0 ml, vody, a reakční směs byla míchána po dobu dalších 60,0 minut. Vzniklá vysrážená pevná látka byla izolována filtrací, a poté, byla promyta s vodou.

Pevná látka byla rozpuštěna ve 20,0 ml, dichlormethanu, poté zfiltrována, a odpařena.

Vzniklý zbytek byl překrystalizován ze směsi ethylacetáthexan, a bylo získáno 38,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny.

Teplota tání: 196,0 °C;

‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,32, (3H,s.), 1,33-1,66, (6H,m.), 1,72-1,81, (2H,m.), 1,93 -2,03, (2H,m.), 3,87, (3H, s.), 5,50, (2H, s.), 7,00 - 7,14, (2H, m.), 7,83 - 7,90, (1H, m.), 7,91, (1H, s.), 8,00, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 440,0, /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny sumárního vzorce C22H₂₃F₂N7O:

Vypočteno: C 60,13, H 5,27, N 22,31,%

Nalezeno: C 59,74, H 5,23, N 22,10,%

-27CZ 290883 B6

Příklad 13

Příprava 3-/2,4-difluorfenyl)-7-(l-methylcyklohexyl)-6-(I-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 12, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit (l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl)-methanol, (připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-421.210).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 156,0 °C;

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 1,36, (3H, s.), 1,37-1,66, (6H,m.). 1,74- 1,84, (2H, m.), 1,99-2,10, (2H,m.), 3,93, (3H, s.), 5,44, (2H, s.), 6,99 - 7,11, (2H, m.), 7,96, (1H, s.). 7,97 - 8,03, (1H, m), 8,04, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES*): m/e, 440,0, /MH/*;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C22H23F2N7O:

Vypočteno: C 60,13, H 5,27,

Nalezeno: C 60,48, H 5,08,

N 22,31,%

N 22,39, %

Příklad 14

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-pyrazol-3-yl-methoxy)-l,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit (1-methyl-lH-pyrazol-3-yl)-methanol, připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-91.130).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 184,0 - 186,0 °C;

'H-NMR, (360 MHz, DMSO):

delta, 1,80, (1H, m.), 1,99, (1H, m.), 2,18, (4H, m.), 3,55, (1H, m.), 3,83, (3H, s.), 5,23, (2H, s.), 6,25, (1H, s.), 7,44 - 7,51, (2H, m.), 7,65, (2H, m.), 7,99, (1H, m.), 8,18, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES*): m/e, 379,0, /MH/*;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C20H19FN6O. 0,2 H₂O:

Vypočteno: C 62,88, H5,12, N 22,00,%

Nalezeno: C 62,81, H4,69, N 21,68,%

-28CZ 290883 B6

Příklad 15

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(5-methylisoxazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanol, byl jako výchozí materiál použit (5-methylisoxazol-3-yl)-methanol.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 150,0°C;

‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,92, (1H, m.), 2,16, (3H, m.), 2,40, (2H, m.), 2,44 (3H, s.), 3,63, (1H, m.), 5,36, (2H, s.), 6,01, (1H, s.), 7,25 - 7,36, (2H, m.), 7,55, (1H, m.), 7,82, (1H, s.), 7,89, (1H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES*): m/e, 380,0, /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C2oH₁₈FN₅0:

Vypočteno: C 63,32, H4,74, N 18,46,%

Nalezeno: C 62,99, H4,74, NI 8,09,%

Příklad 16

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-imidazol-2-yl-methoxy}-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit (l-methyl-lH-imidazol-l-yl)-methanol.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 173,0 °C;

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,89, (1H, m.), 1,10, (3H, m.), 2,32, (2H, m.), 3,61, (1H, m.), 3,65, (3H, s.), 5,40, (2H, s.),

6,94, (1H, s.), 7,06, (1H, s.), 7,26 - 7,36, (2H, m.), 7,55, (1H, m.), 7,82, (1H, s.), 7,92, (1H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES): m/e, 379,0, /ΜΗΛ;

-29CZ 290883 B6

Příklad 17

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(4-methyl-4H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy}-l ,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit jako výchozí materiál (4-methyl-4H-l,2,4-triazol-3-yl)-methanol.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 228,0 °C;

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,91, (1H, m.), 2,10, (3H, m.), 2,32, (2H, m.), 3,56, (1H, m.), 3,71, (3H, s.), 5,54, (2H, s.),

7,25 - 7,37, (2H, m.), 7,56, (1H, m.), 7,85, (1H, s.), 7,89, (1H, m.), 8,18, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES)⁺: m/e, 380,0, /ΜΗΓ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C^HuFNéO:

Vypočteno: C 60,15, H4,78, N 25,84,%

Nalezeno: C 59,70, H4,74, N 25,50, %

Příklad 18

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(thien-2-yl)- l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, 0,9 hydrátu

Stupeň a)

Příprava 4-brom-l ,2-dihydropyridazin-3,6-dionu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 100,0 g, (565,00 mmol), anhydridu kyseliny maleinové, (kys. maleinová - kyselina (7-butendiová), v 1,0 litru tetrahydrofuranu, a vychlazenému v chladicí lázni, obsahující směs ledu a vody, bylo přidáváno za stálého míchání, po kapkách, 28,0 ml, (576,00 mmol), hydrazinu hydrátu tak, aby vnitřní teplota reakční směsi nepřestoupila 10,0 °C.

Po úplném dokončení přidávání hydrazinu, byla reakční směs zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 18,0 hodin. Poté bylo rozpouštědlo ze směsi odstraněno odpařením, a vzniklý zbytek byl azeotropicky vysušen s toluenem. Poté byl zbytek mechanicky zpracován, promyt a vyjmut s diethyletherem.

Bylo získáno 83,0 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě oranžově zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 77,0 %.

’Η-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 7,68, (1H, š.s.),

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 193,0,/ΜΗΛ, 191,0/ΜΗΛ;

-30CZ 290883 B6

Získaný materiál byl použit v následujícím Stupni b), bez jakéhokoliv dalšího čištění.

Stupeň b)

Příprava 3,6-dichlor-4-(thien-2-yl)-pyridazinu

Směs, připravená smícháním 9,0 g, (47,0 mmol), 4-brom-l,2-dihydropyridazin-3,6-dionu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), dále 7,0 g, (55,00 mmol),

2-thiofenboronové kyseliny; 11,70 g, (110,0 mmol), uhličitanu sodného, a 5,0 g, tetrakis(trifenylfosfin)—palladia (0), ve 250,0 ml, Ν,Ν-dimethylformamidu, a 100,0 ml, vody, byla postupně odplyněna, propláchnuta dusíkem, a zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 18,0 hodin.

Poté bylo rozpouštědlo z reakční směsi odstraněno odpařením, a vzniklý zbytek byl azeotropicky zpracován s toluenem. Výsledná pevná látka byla naředěna se 20,0 ml, dichlormethanu, a se 70,0 ml, oxychloridu fosforečného, a tato směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 4,0 hodin.

Poté byla reakční směs ochlazena, a poté, co byla pomalu přidána do směsi ledu a vody, byla zalkalizována vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, a následně extrahována s dichlormethanem. Po oddělení organické a vodná fáze, byla organická vrstva vysušena se síranem sodným, zfiltrována a zahuštěna.

Po zpracování zbytku urychlenou chromatografií, za použití směsi 30% ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla, bylo získáno 1,18 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě oranžově zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 11,0 %.

‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 7,24, (1H, d.d., J = 5,0 a 4,0 Hz), 7,65 - 7,68, (2H, m.), 7,80, (1H, d.d., J = 4,0 a 1,0 Hz).

Hmotnostní spektrometrie, (ES*):

m/e, 231,0, /MHT, 233,%, /ΜΗΓ, 235,0, /ΜΗΛ;

Stupeň c)

Příprava 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-(thien-2-yl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Směs, připravená smícháním 0,50 g, (2,10 mmol), 3,6-dichlor-4-(thien-2-yl)-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), dále 0,66 g, (4,30 mmol), 2-fluorbenzhydrazidu, a 0,59 g, (4,30 mmol), triethylaminu.hydrochloridu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem, v atmosféře dusíku, po dobu 30,0 hodin.

Po ochlazení reakční směsi byly těkavé složky za vakua odstraněny, a vzniklý zbytek byl částečně přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 50% až 66% až 100,0%, ethylacetát : hexan, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,19 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 26,0 %.

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 331,0, /ΜΗ/ζ 333,0, /MHf;

-31 CZ 290883 B6

Získaný materiál byl použit v následujícím Stupni d), bez jakéhokoliv dalšího čištění.

Stupeň d)

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(thien-2-yl)- l,2.4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu. 0,9 hydrátu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,11 g, (1,00 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, (připravenému postupem, popsaným v Evropském patentu, (EP-A-421.210), ve 5,0 ml, N.N-dimethylformamidu, bylo přidáno 0,04 g, hydridu sodného, (1,0 mol ekviv.), ve formě 60% olejové disperze), a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 30,0 minut.

Po skončení výše popsané operace, bylo ku reakční směsi přidáno 0,19 g, (0,57 mmol),

6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-(thien-2-yl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c), a tato reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18,0 hodin. Poté byla reakční směs naředěna se 70,0 ml vody, a vzniklá sraženina byla izolována.

Výsledná pevná látka byla přečištěna povařením v ethylacetátu, a bylo izolováno 0,01 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 12,0 %.

'H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 3,83, (3H, s.), 5,64, (2H, s.), 7,24, (1H, d.d., J= 4,0 a 4,0 Hz), 7,44-7,55, (2H, m.), 7,66- 7,71, (1H, m.), 7,82, (1H, d., J = 5,0 Hz), 7,96 - 8,01, (3H, m.), 8,23, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 408,0, /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C^HuFNvOS. 0,9, (H₂O):

Vypočteno: C 53,87, H3,76, N 23,14, %

Nalezeno: C 53,81, H3,62, N 23,42,%

Teplota tání: 189,0 - 190,0 °C;

Příklad 19

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(thien-2-yl)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v předcházejícím Příkladě 18, Stupně a), b), c), a d), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo 2-fluorbenzhydrazidu, byl ve Stupni c), použit 2,4-difluorbenzhydrazid.

Bylo izolováno 0,01 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky.

Teplota tání: 209,0 - 212,0 °C;

-32CZ 290883 B6 ‘H-NMR, (360 MHz, CDCIj):

delta, 3,90, (3H, s.), 5,61, (2H, s.), 7,00 - 7,16, (3H, m.), 7,50, (1H, d., J = 6,0 Hz), 7,63, (1H, d., J = 4,0 Hz), 7,90 - 7,98, (2H, m.), 8,29, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 426,0, /ΜΗΛ;

Příklad 20

Příprava 6-( 1 H-benzimidazol-2-yl-methoxy)-7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl}-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2,4-difIuorfenyl}-6-/l-(2-trimethylsilanyl-ethoxymethyl)-ÍH-benzimidazol-2-yl-methoxy/-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že ve Stupni b), byl místo 2-fluorbenzhydrazidu použit 2,4-difluorbenzhydrazid, a ve Stupni c), byl místo (2-methyl-2H-l,2,4triazol-3-yiy-methanolu, použit /l-(2-trimethylsilanyl-ethoxymethyl)-l H-benzimidazol-2-yl/methanol, připravený postupem, popsaným v odborném časopise J. Org. Chem., 1891, /1986/.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

‘H-NMR, (250 MHz, CDCIj):

delta, 7,94, (3H, m.), 7,59, (1H, m.), 7,45, (2H, m.), 7,14, (2H, m.), 5,74, (2H, s.), 5,65, (2H, s.), 3,71, (1H, m.), 3,59, (2H, t.), 1,90 - 2,46, (6H, m.), 0,93, (2H, t.), 0,00, (9H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 563,0, /ΜΗΛ;

Stupeň b)

Příprava 6-( 1 H-benzimidazol-2-yl-methoxy)-7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Roztok, připravený rozpuštěním 187,0 mg, (0,333 mmol), 7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl)-6/l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-benzimidazol-2-yl-methoxy/-l,2,4-triazol-/4,3-b/pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), v 10,0 ml, 5M roztoku kyseliny chlorovodíkové, a 4,0 ml, ethanolu, byl zahříván při teplotě 80,0 °C, přes noc.

Poté, co byly ze vzniklé reakční směsi odstraněna za vakua zahuštěním rozpouštědla, byl ku zbytku přidán nasycený vodný roztok uhličitanu draselného, a tato směs byla naředěna s vodou. Po zfiltrování, byla zbývající pevná látka promyta s vodou, a poté s etherem, a nakonec byla vysušena.

Vzniklý zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií na silikagelu, za použití ethylacetátu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 60,0 mg, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 42,0 %.

-33CZ 290883 B6

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

‘H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 10,62, (1H, š.s.), 7,85, (2H, m.), 7,56, (1H, d., J = 1,60 Hz), 7,48, (1H, š.s.,), 7,32, (2H, m.), 7,00, (2H, m.), 5,65, (2H, s.), 3,54, (1H, m.), 2,24, (2H, m.), 2,01, (3H, m.), 1,80, (1H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 433,0, /ΜΗΛ;

Příklad 21

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(pynOlidin-lyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 4-brom-3,6-dichlorpyridazinu

Roztok, připravený rozpuštěním 10,0 g, (52,00 mmol), 4-brom-l,2-dihydropyridazinu-3,6-dionu, získaného postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 18, Stupeň a), ve 100,0 ml, oxychloridu fosforečného, byl za stálého míchání zahříván při teplotě 100,0 °C, v atmosféře dusíku, po dobu 16,0 hodin.

Poté, po ochlazení reakční směsi, byl přebytek oxychloridu fosforečného za vakua odstraněn, a vzniklý zbytek byl 2x zpracován azeotropicky s toluenem, a poté byl vyjmut do směsi dichlormethanu a vody. Vzniklá směs byla opatrně zalkalizována s pevným hydrogenuhličitanem sodným, a v případě potřeby, byla směs dále zředěna tak, aby vznikly dvě ostře ohraničené vrstvy.

Po oddělení organické a vodné fáze, byla vodná vrstva extrahována 3x s dichlormethanem. Spojené organické extrakty byly vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány, a odpařeny.

Zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 5,00 g, žádaného, v nadpise uvedeného pyridazinu, ve formě bezbarvé pevné látky, ve výtěžku 42,0 %, ‘H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 7,68, (š.s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 230,0, /ΜΗΛ, 228,0, /ΜΗΛ;

Stupeň b)

Příprava 3,6-dichlor-4-(pynOlidin-l-yl)-pyridazinu

Ku směsi, připravené ve formě roztoku a suspenze, smícháním 8,30 g, (36,0 mmol),

4-brom-3,6-dichlorpyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), a 13,80 g, (0,10 mol), uhličitanu draselného, ve 100,0 ml, vysušeného N,N-dimethylformamidu,

-34CZ 290883 B6 bylo přidáno za stálého míchání, v atmosféře dusíku, a při teplotě místnosti, 3,36 ml, (40,0 mmol), pyrrolidinu, a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 16,0 hodin, a poté ještě při teplotě 60,0 °C, po dobu 3,0 hodin.

Poté byla reakční směs nalita do 250,0 ml, vody, a tato vodná forma byla extrahována 3x s ethylacetátem. Spojené organické extrakty byly vysušeny se síranem hořečnatým, zfiltrovány, a odpařeny.

Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 0,5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 7,20 g, žádaného, v nadpise uvedeného pyridazinu, ve formě bezbarvé látky olejovité konzistence, ve výtěžku 92,0 %.

'H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 2,00 - 2,05, (4H, m.), 3,61 - 3,69, (4H, m.), 6,46, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES^-): 218,0, /MH/*, 220,0 /ΜΗΛ;

Stupeň c)

Příprava 3-chlor-6-hydrazin-4-(pyrrolidin-l-yl)-pyridazinu

Směs, připravená smícháním 7,20 g, (33,00 mmol), 3,6-dichlor-4-(pyrrolidin-l-yl)-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), a 9,96 g, (0,20 mol), hydrazinu.hydrátu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem ve 130,0 ml, dioxanu, po dobu 6,0 hodin.

Poté, kdy byla reakční směs ochlazena, vykrystalizoval ze směsi žádaný izomer, a byl poté izolován filtrací.

Bylo získáno 4,10 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu, ve výtěžku 58,0 %.

‘H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 1,79 - 1,84, (4H, m.), 3,25 - 3,40, (4H, m.), 4,12, (2H, š.), 6,09, (1H, s.), 7,47, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 214,0, /MHf, 216,0, /ΜΗ/*;

Stupeň d)

Příprava N-/6-chlor-5-(pyrrolidin-l-yl)-pyridazin-3-yl/-N'-(2,4-difluorbenzyliden)hydrazinu

Směs, připravená smícháním 1,06 g, (4,90 mmol), 3-chlor-6-hydrazin-4-(pyrrolidin-l-yl)pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c), a 437,0 ml, (4,90 mmol), 2,4-difluorbenzaldehydu, byla míchána ve 0,2M roztoku kyseliny chlorovodíkové (30,0 ml), po dobu 2,0 hodin.

Poté byl vysrážený imin isolován filtrací, a vysušen.

Bylo získáno 1,37 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve výtěžku 92,0 %.

-35CZ 290883 B6

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 338,0, /ΜΗΛ, 340,0, /ΜΗΛ;

Stupeň e)

Příprava 6-chlor-3-(2,4-difluorfenyl)-7-(py^olidin-l-yl}-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 1,06 g, (3,50 mmol), N-/6-chlor-5-(pynolidin-l-yl)pyridazin-3-yl/-N'-(2,4-difluorbenzyliden)-hydrazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně d), v 60,0 ml, ethanolu, byl přidán roztok, připravený rozpuštěním 4,74 g, (15,50 mmol), chloridu železitého ve 30,0 ml, ethanolu tak, že přidávání probíhalo po kapkách, a vzniklá reakční směs byla vyhřátá na teplotu 60,0 °C.

Po uplynutí 6,0 hodin, byla reakční směs vytřepána mezi 250,0 ml, dichlormethanu, a 250,0 ml, solanky, a po oddělení organické a vodné fáze byla organická vrstva vysušena se síranem hořečnatým, zfiltrována, a odpařena.

Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi ethylacetát: hexan, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,70 g, žádaného, v nadpise uvedeného pyridazinu, ve výtěžku 66,0 %.

'H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 2,02-2,08, (4H, m.), 3,53 -3,58, (4H, m.), 6,98-7,09, (2H, m.), 7,46-7,56, (lH,m.), 7,81 -7,92, (1H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 336,0, /ΜΗ/ζ 338,0, /ΜΗΛ;

Stupeň f)

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4—triazol-3-yl-methoxy)-7-(pyrrolidin-lyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 38,0 mg, (0,33 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3yl)-methanolu, (připraveného postupem, popsaným v Evropském patentu, (EP-A-421.210), ve 2,0 ml, vysušeného Ν,Ν-dimethylformamidu, bylo přidáno při teplotě místnosti 16,0 mg, (0,41 mmol), hydridu sodného, ve formě 60% olejové disperze.

Po uplynutí 1,0 hodiny, kdy reakční směs byla ponechána stát v klidu, bylo přidáno 102,0 mg, (0,30 mmol), 6-chlor-3-(2,4-difluorfenyl)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně e), a vzniklá reakční směs byla míchána po dobu 18,0 hodin.

Zbytek byl vytřepán mezi dichlormethan a vodu, a po oddělení vodné a organické fáze, byla vodná vrstva extrahována dále 2x vždy s 100,0 ml, dichlormethanu. Spojené organické extrakty, byly vysušeny se síranem sodným, zfiltrována, a odpařeny.

Zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 0,0 - 2,0% ethylacetátu v methanolu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 42,0 mg, žádaného, v nadpise uvedeného pyridazinu, ve výtěžku 30,0 %.

-36CZ 290883 B6 'H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,73 - 1,78, (4H, m.), 3,51 - 3,55, (4H, m.), 3,93, (3H, s.), 5,40, (2H, s.), 6,65, (1H, s.),

6,95 - 7,03, (2H, m.), 7,92 - 7,94, (1H, m.), 8,04, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 413,0, /ΜΗΛ;

Příklad 22

Příprava 3-(2,4-difluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(pyrrolidin-lyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 21, Stupeň f), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit (l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl)-methanol, (připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-421.210).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,95 - 2,00, (4H, m.), 3,46- 3,52, (4H, m.), 3,86, (3H, s.), 5,47, (2H, s.), 6,70, (1H, s.),

6,95 - 7,11, (2H, m.), 7,78 - 7,87, (1H, m.), 7,90, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES)⁺: 413,0, /ΜΗΛ;

Příklad 23

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-( 1-methyl-lH-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 21, Stupně d), e), a f), byla připravená žádaná, v nadpisu uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo 2,4-difluorbenzaldehydu, byl ve Stupni d), použit 2-fluorbenzaldehyd, a místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)-methanolu, byl ve Stupni f), použit (l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl)-methanol, (připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-421.210).

'H-NMR, (250 MHz, d₆-DMSO):

delta, 2,06-2,20, (4H, m.), 3,68-3,74, (4H,m.), 4,00, (3H, s.), 5,72, (2H, s.), 7,07, (1H, s.),

7,60 - 7,70, (2H, m.), 7,81 - 7,87, (1H, m.), 8,05 - 8,11, (1H, m.), 8,17, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): 395,0, /ΜΗΛ;

Příklad 24

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-imidazol-4-yl)-methoxy)-1,2,4—triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit (l-methyl-lH-imidazol-4-yl)-methanol.

-37CZ 290883 B6

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 176,0°C;

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 1,87, (1H, m.), 2,10, (3H, m.), 2,36, (2H, m.), 3,59, (1H, m.), 3,64, (3H, s.), 5,28, (2H, s.),

6,82, (1H, s.), 7,26 - 7,36, (2H, m.), 7,39, (1H, s.), 7,53, (1H, m.), 7,76, (1H, s.), 7,92, (1H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e 379,0, /ΜΗΛ;

Příklad 25

Příprava 7-(l-fluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl}-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,5-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 3-chlor-6-hydrazin-4-(trimethylsilyl)-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 9,67 g, (43,70 mmol), 3,6-dichlor-4-(trimethylsilyl)25 pyridazinu, (viz odborný časopis J. Heterocycl. Chem., 27, 1377, /1990/, autor Turek se sp.

připraveného postupem, popsaným v odborném časopise J. Heterocycl. Chem., 32, 1057, /1995/, autor Trécourt se sp.), ve l,0M roztoku hydrazinu, ve 131,0 ml, (131,0 mmol), tetrahydrofuranu, bylo přidáno 7,50 ml, (43,80 mmol), Ν,Ν-diisopropylethylaminu, a vzniklá reakční směs byla míchána za refluxu pod zpětným chladičem, v atmosféře dusíku, po dobu 68,0 hodin.

Poté, po ochlazení, byl ku směsi přidán silikagel, a rozpouštědlo bylo za vakua odpařeno. Vzniklý zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií na silikagelu, za použití směsi 5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla, a bylo získáno 6,34 g, žádaného

3-chlor-6-hydrazin-4-(trimethylsiiyl)-pyridazinu, ve formě žlutohnědě zbarvené pevné látky, 35 ve výtěžku 67,0%, a 1,24 g, 6-chlor-3-hydrazin-4-(trimethylsilyl)-pyridazinu, ve výtěžku 13,0%.

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 0,39, (9H, s.), 3,96, (2H, š.s.), 6,24, (1H, š.s.), 7,08, (1H, s.).

Stupeň b)

Příprava 3-chlor-6-/2-(2-fluorbenzoyl)-hydrazin/-4-(trimethylsilyl)-pyridazinu

Ku směsi, připravené smícháním 6,34 g, 29,30 mmol), 3-chlor-6-hydrazin-4-(trimethylsilyl)pyridazinu, (připraveného postupem, popsaným v rámci předcházejícího Stupně a); a 4,90 ml, (35,20 mmol), bezvodého triethylaminu, ve 100,0 ml, bezvodého diethyletheru, a vychlazené 50 v atmosféře dusíku na teplotu minus 4,0 °C, bylo přidáno za stálého míchání, po kapkách, během 13,0 minut, 3,50 ml, (29,40 mmol), fluorobenzoylchloridu, při čemž se teplota reakční směsi udržovala pod minus 5,0 °C.

Vzniklá hustá směs byla poté míchána v tepelném rozmezí 0,0 až 5,0 °C, po dobu 30,0 minut, 55 a poté byla smíchána s 1,0 ml, bezvodého methanolu. Poté byla směs naředěna se 100,0 ml,

-38CZ 290883 B6 hexanu, a zfiltrována. Izolovaná pevná látka byla promyta 2x vždy se 25,0 ml, diethyletheru, poté se 100,0 ml, vody, a následně byla rozpuštěna ve 300,0 ml, dichlormethanu, a 20,0 ml, methanolu, a po promytí roztoku se 100,0 ml, nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, byl vysušen se síranem sodným, a za vakua byl odpařen.

Bylo získáno 9,72 g, žádaného, v nadpise uvedeného produktu, ve formě slabě hnědé zbarvené pevné látky, ve výtěžku 98,0 %.

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 0,36, (9H, s.), 7,07, (1H, s.), 7,20, (1H, d.d., J= 11,70, a 8,20 Hz), 7,30, (1H, t., J = 7,60 Hz), 7,55, (1H, m.), 7,00, (1H, š.s.), 8,07, (1H, td„ J = 7,70 a 1,80 Hz), 9,19, (1H, š.s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺):

m/e, 339,0/341,0, /ΜΗΛ, 217,0/219,0,/M-COC₆H4F + 2ΗΛ,

Stupeň c)

Příprava 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-(trimethylsilyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku suspenzi, připravené nasuspendováním 9,72 g, (28,70 mmol), 3-chlor-6-/2-(2-fluorbenzoyl)-hydrazin/-4-(trimethylsilyl)-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), a 18,68g, (57,40 mmol), 1,2-dibromtetrachlorethanu, ve 170,0 ml, bezvodého acetonitrilu, a vychlazené v atmosféře dusíku na teplotu 1,0 °C, bylo přidáno po částech, za stálého míchání, a během 21,0 minut; 30,10 g; 115,0 mmol), pevné formy trifenylfosfinu, přičemž se teplota reakční směsi udržovala stále pod 5,0 °C.

Poté, co byla reakční směs míchána ještě při teplotě 2,0 °C, po dobu 10,0 minut, byl k ní přidán po kapkách, během 18,0 minut, bezvodý triethylamin, (32,0 ml, 230,0 mmol), přičemž teplota reakční směsi se udržovala nižší než 6,0 °C. Poté byla směs míchána při teplotě 0,0 až 3,0 °C, v atmosféře dusíku, po dobu 85,0 minut. Poté byla směs naředěna se 150,0 ml, dichlormethanu, a vytřepána se 200,0 ml, vody. Po oddělení organické a vodné fáze, byla organická vrstva vysušena se síranem sodným, a za vakua byla odpařena.

Výsledný zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií na silikagelu, za použití směsi 20,0 - 40% ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 7,67 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 83,0 %.

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 0,48, (9H, s.), 7,30, (1H, d.d., J = 10,10 a 8,80 Hz), 7,36, (1H, t.d., J = 7,60 a 1,10 Hz), 7,58, (1H, m.), 7,90, (1H, t.d., J = 7,30, a 1,80 Hz), 8,30, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 321,0/323,0/, /ΜΗΛ;

-39CZ 290883 B6

Stupeň d)

Příprava 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-( l-hydroxycyklobutyl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 1,04 g, (3,24 mmol), 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-(trimethylsilyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve 15,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu, bylo za stálého míchání, v atmosféře dusíku, nejprve přidáno 1,21 ml, (16,20 mmol), cyklobutanonu, a poté 0,410 g, pevné formy tetrabutylamonium-difluorfenylstannatu, (0,650 mmol).

Poté byla reakční baňka odvzdušněna, a vypláchnuta 4x s dusíkem, a směs v reakční baňce byla míchána při teplotě místnosti, po dobu 5,75 hodiny. Poté bylo k reakční směsi přidáno dalších 0,403 g, (0,639 mmol), tetrabutylamonium-difluorfenylstannatu, a tato směs byla míchána po dobu dalších 36,0 hodin. Poté byla směs vytřepána mezi 75,0 ml, dichlormethanu, a 75,0 ml, vody, a po oddělení organické a vodné fáze, byla vodná vrstva 2x extrahována vždy se 50,0 ml, dichlormethanu.

Spojené organické extrakty byly vysušeny se síranem sodným, a za vakua byly odpařeny. Vzniklý zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií na silikagelu, za použití 70,0 až 100 %, směsi ethylacetát: hexan, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,2634 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě krémově zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 26,0 %.

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,81, (1H, m.), 2,27, (1H, m.), 2,52, (2H, m.), 2,72, (2H, m.), 2,87, (1H, s.), 7,30, (1H, t., J = 9,30 Hz), 7,36, (1H, t., J = 7,50 Hz), 7,58, (1H, m.), 7,88, (1H, td., J = 7,30 a 1,80 Hz), 8,12, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 319,0/321,0, /MHf; 249.

Stupeň e)

Příprava 7-( l-hydroxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-{2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,2206 g, (1,95 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3yl)-methanolu, ve 6,0 ml, bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu, bylo přidáno v atmosféře dusíku, za stálého míchání, 77,70 mg; (1,94 mmol), hydridu sodného, ve formě 60% olejové disperze, a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 20,0 minut.

Poté, když byla reakční směs ochlazena v chladicí lázni obsahující směs ledu a vody, byl k ní přidán po kapkách, během 5,0 minut, roztok, získaný rozpuštěním 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7(l-hydroxycyklobutyl}-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně d), (0,2573 g; 0,807 mmol), v 5,0 ml, bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu, a výsledná reakční směs byla míchána v atmosféře dusíku po dobu 20,0 minut, a poté byla do směsi, připravené smícháním 50,0 ml, nasyceného vodného roztoku chloridu amonného; nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, (25,0 ml), a 75,0 ml, dichlormethanu, nalita.

Po oddělení vodné a organické fáze, byla vodná vrstva extrahována dále 2x vždy s 50,0 ml, dichlormethanu, a spojené organické extrakty byly vysušeny se síranem sodným, a poté byly za vakua odpařeny.

-40CZ 290883 B6

Výsledný zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií na silikagelu, za použití směsi 3,0 až 5% methanolu v dichlormethanu.

Bylo získáno 0,2793 g, žádaného 7-(l-hydroxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H- l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (obsahujícího přibližně 20%, (2methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)-methanolu, (výchozí materiál), ve formě bezbarvé, pevné látky.

‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,74, (1H, m.), 2,17, (1H, m.), 2,43, (2H, m.), 2,60, (2H, m.), 3,82, (3H, s.), 5,58, (2H, s.), 7,27, (lH,t., J= 9,60 Hz), 7,36, (1H, t., J= 7,50 Hz), 7,58, (lH,m.), 7,82, (lH,m.), 7,85, (1H, s.), 8,01, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁴’): m/e, 396,0,/MHZ, 114.

Stupeň e)i

Příprava 7-( l-fluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl)-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4—triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,2094 g, 7-(l-hydroxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-2,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně e), v 10,0 ml, bezvodého dichlormethanu, a vychlazeného v atmosféře dusíku na minus 78,0 °C, bylo přidáno po kapkách 77,0 ml, (0,582 mmol), diethylaminosulfurtrifluoridu (DAST), a vzniklá reakční směs byla míchána při teplotě nižší než minus 70,0 °C. Poté, po uplynutí 40,0 minut, a 70,0 minut bylo k reakční směsi přidáno vždy 77,0 ml, (0,582 mmol), diethylaminosulfurtrifluoridu, a po uplynutí 110,0 minut bylo přidáno 40,0 ml, (0,303 mmol), DAST, tak, že přidávání probíhalo vždy po kapkách.

Poté, co byla reakční směs míchána při teplotě nižší než minus 70,0 °C; po dalších 40,0 minut, byla vytřepána mezi 20,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a 40,0 ml; dichlormethanu. Po oddělení organické a vodná fáze byla vodná vrstva extrahována 2x vždy se 30,0 ml, dichlormethanu, a poté byly spojené organické extrakty vysušeny se síranem sodným, a za vakua byly odpařeny.

Výsledný zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií na silikagelu, za použití směsi 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,1249 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 52,0 %.

Teplota tání: 154,0 - 162,0 °C; (dichlormethan - ethylacetát - hexan), 'H-NMR, (400 MHz, DMSO-d₆):

delta, 1,60, (1H, m.), 1,96, (1H, m.), 2,51, (2H, m.), 2,86, (2H, m.), 3,78, (3H, s.), 5,55, (2H, s.), 7,46, (1H, t., J= 7,80 Hz), 7,50, (1H, t., J = 9,80 Hz), 7,70, (1H, m.), 7,93, (lH,m.), 7,94, (1H, s.), 8,59, (1H, d., J = 3,00 Hz).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0,/MHZ, 378,0,/M-HF+HZ,

-41 CZ 290883 B6

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C19H17F2N7O:

Vypočteno: C 57,43, H4,31,

Nalezeno: C 57,61, H4,18,

N 24,67, %

N 24,47, %

Příklad 26

Příprava 7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-pyrazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, byl použit (2-methyl-2H-pyrazol-2-yl)-methanol, (připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-91.130).

Analytické údaje žádané, v nadpise uvedené sloučeniny:

Teplota tání: 184,0 - 186,0 °C;

‘H-NMR, (360 MHz, DMSO):

delta, 1,80, (1H, m.), 1,99, (1H, m.), 2,21, (4H, m.), 3,57, (1H, m.), 3,80, (3H, s.), 5,39, (2H, s.),

6,29, (1H, s.), 7,37, (1H, s.), 7,48, (2H, s.), 7,64, (1H, m.), 7,96, (1H, m.), 8,18, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES): m/e, 379,0, /ΜΗΛ;

Příklad 27

Příprava 7-(2,2-dimethylpropyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 7-brom-6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-l, 2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku suspenzi, připravené nasuspendováním 3,17 g, (9,88 mmol), 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-(trimethylsilyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (připraveného postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 25, Stupeň c), a 6,00 ml, (50,0 mmol), 1,2-dibromtetrafluorethanu, ve 75,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu, bylo přidáno 6,80 g, (10,80 mmol), tetrabutylamonium-difluortrifenylstanatu, a vzniklá reakční směs byla míchána v atmosféře dusíku; při teplotě místnosti, po dobu 18,0 hodin. Poté byla reakční směs naředěna s dichlormethanem, (100,0 ml), zfiltrována a získaný filtrát byl zahuštěn.

Zbytek byl zpracován urychlenou sloupcovou chromatografií, na silikagelu, za použití směsi 50,0 až 100,0%, ethylacetát - hexan, jako elučního činidla, a bylo získáno 2,84 g, žádaného

7-brom-6-chlor-3-(2-fluorenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve formě bělavě zbarvené, pevné látky, a ve výtěžku 88,0 .

‘H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 7,31, (1H, d.d„ J= 10,0 a 10,0 Hz), 7,36, (1H, d.d.d., J= 8,80 a 1,0 Hz), 7,57- 7,63, (1H, m.), 7,87, (1H, d.d.d., J = 7,70 a 2,0 Hz), 8,49, (1H, s.).

-42CZ 290883 B6

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 327,0/329,0/331,0,/ΜΗΛ;

Stupeň b)

Příprava 7-brom-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy-l ,2,4-triazol/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,95 g, (8,40 mmol), (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl)methanolu, ve 30,0 ml, tetrahydrofuranu (bezvodého), byl přidán v atmosféře dusíku, při teplotě místnosti, a za stálého míchání, roztok, získaný rozpuštěním draselné sole bis(trimethylsilyl)amidu v toluenu, (16,80 ml, 0,5M roztok, 8,40 mmol).

Poté, co byla vzniklá suspenze ochlazena po 20,0 minutách na teplotu 0 °C, byla k ní přidána po kapkách suspenze, připravená nasuspendováním 2,28 g, (6,96 mmol), 7-brom-6-chlor-3-(2fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), do 100,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu. Vzniklý reakční směs byla poté míchána při teplotě 0 °C, po dobu 3,0 hodin, a poté byla nalita do 400,0 ml, směsi ledu a vody, a po naředění se 100,0 ml, nasyceného vodného roztoku chloridu amonného, byla extrahována 3x směsí dichlormethan : methanol, (9,0 : 1,0),), vždy se 100,0 ml.

Po oddělení organické a vodné fáze, byly organické extrakty vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány, a zahuštěny. Zbytek byl zpracován urychlenou chromatografií na sloupci se silikagelem, za použití směsi 3% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 1,45 g, žádaného 7-brom-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve formě žlutě zbarvené pevné látky, ve výtěžku 52 %, 'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 3,95, (3H, s.), 5,54, (2H, s.), 7,28, (1H, d.d., J = 10,0 a 10,0 Hz), 7,37, (1H, d.d.d., J = 8,80 a 1,0 Hz), 7,57 - 7,63, (1H, m.), 7,86, (1H, d.d.d., J = 8,80 a 2,0 Hz), 7,90, (1H, s.), 8,41, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 404,0/406,0/ /ΜΗΛ;

Stupeň c)

Ku suspenzi, připravené nasuspendováním 0,45 g, (7,00 mmol), kyselinou promytého zinkového prachu, do 3,0 ml, bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu, byl přidán v atmosféře dusíku, při teplotě 50,0 °C; a za stálého míchání 0,03 ml, (10,0 mol), 1,2-dibromethan, a po uplynutí 5,0 minut byl ku reakční směsi přidán 1,0 ml, (7,50 mmol), neopentyljodidu = 2,2-dimethylpropyljodid, a tato směs byla míchána po dobu 2,50 hodiny, za vzniku šedězeleně zbarvené, mléčně zakalené, kapaliny.

Ku směsi, připravené smícháním 0,35 g, (0,866 mmol), 7-brom-3-(2-fluorfenyl}-6-(2-methyl2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/~pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně b), dále 0,08 g, (40,0 mol %), tri-2-furylfosfinu; a 0,04 g, (5,0 mol %), tris(dibenzylidenaceton)-dipalladia (0); ve 2,0 ml, bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu, a míchané v atmosféře dusíku, při teplotě 50,0 °C, po dobu 15,0 minut, byl přidán

-43CZ 290883 B6 roztok organozinkového reagens, (pomocí injekční stříkačky'), připraveného operací, popsanou výše. Po uplynutí 1,50 hodiny, byla směs ochlazena, a poté byla nalita do 100,0 ml, vody, a extrahována 2x vždy se 50,0 ml dichlormethanu. Spojené extrakty byly vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány, a zahuštěny.

Zbytek byl zpracován urychlenou sloupcovou chromatografií, za použití směsi 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Získaná, hnědě zbarvená pevná látka byla překrystalizována ze směsi ethylacetát - diethylther, a bylo získáno 0,199 g, žádaného 7-(2,2-dimethylpropyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H- l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve formě béžové zbarvené látky, práškovitého charakteru, ve výtěžku 58,0 % ‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 0,96, (9H, s.), 2,61, (2H, s.), 3,83, (3H, s.), 5,47, (2H, s.), 7,28, (1H, d.d., J = 10,0 a 10,0 Hz), 7,36, (1H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 7,56 - 7,62, (1H, m.), 7,83, (1H, s.), 7,86, (1H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 7,90, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 396,0, /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C20H22FN7O. 0,4 H2O:

Vypočteno: C 59,66, H5,71, N 24,35,%

Nalezeno: C 59,66, H5,69, N 24,41,%

Příklad 28

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(2-methylpropyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 27, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedené sloučenina, stím rozdílem, že místo neopentyljodidu, byl použit l-jod-2methylpropan.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 134,0 - 136,0 °C; (ethylacetát);

‘H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 0,97 (6H, d., J = 7,0 Hz), 1,92 - 2,60, (1H, m.), 2,54, (2H, d„ J = 7,0 Hz), 3,84, (3H, s.), 5,49, (2H, s.), 7,25 - 7,30, (1H, m.), 7,36, (1H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 7,56 - 7,62, (1H, m.), 7,83, (1H, s.), 7,83 - 7,87, (1H, m.), 7,89, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 382,0, /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C19H20FN7O:

Vypočteno: C 59,83, H5,29, N 24,71,%

Nalezeno: C 59,66, H5,39, N 25,56,%

-44CZ 290883 B6

Příklad 29

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-methylbutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy}-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 27, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo neopentyljodidu, byl použit 1—jod—3— methylbutan.

Analytické údaje v nadpise uvedené žádané sloučeniny:

Teplota tání: 103,0 - 105,0 °C, (ethylacetát);

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 0,95, (6H,d„ J = 6,0Hz), 1,15-1,57, (2H, m.), 1,61 - 1,70, (1H, m.), 2,66, (2H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 3,85, (3H, s.), 5,50, (2H, s.), 7,24- 7,30, (1H, m.), 7,35, (lH,d.d., J = 7,0 a 7,0 Hz), 7,52 - 7,60, (1H, m.), 7,82 - 7,86, (1H, m.), 7,85, (1H, s.), 7,89, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 396,0, /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C20H22FN7O:

Vypočteno: C 60,75, H5,61,%

Nalezeno: C 60,56, H 5,61, %

Příklad 30

Příprava 7-cyklopentylmethyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methyl)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-jod-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy}-l,2,4-triazol/4,3-b/-pyridazinu

Ku suspenzi, připravené nasuspendováním 5,00 g, (18,00 mmol), tris(dimethylamino)sulfur(trimethylsilyl)-difluoridu, do 200,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu, byl přidán v atmosféře dusíku, při teplotě místnosti, pomocí přívodné trubičky roztok, získaný rozpuštěním 5,0 g, (15,60 mmol), 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-(trimethylsilyl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (připraveného postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 25, Stupeň c), a 14,0 g, (50,0 mmol),

1,2-dijodethanu, ve 150,0 ml bezvodého tetrahydrofuranu.

Po uplynutí 18,0 hodin byla reakční směs naředěna se 400,0 ml, dichlormethanu, a poté byla postupně promyta se 300,0 ml, vody, a se 200,0 ml, solanky. Organická vrstva byla poté vysušena se síranem sodným, zfiltrována, a zahuštěna.

Výsledný zbytek byl zpracován urychlenou sloupcovou chromatografií na silikagelu, za použití směsi 3% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 3,54 g, surového 6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-7-jod-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve formě temně hnědě zbarvené, pevné látky, který byl dále zpracován analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 27, Stupeň b), a bylo získáno 1,32 g, žádaného

-45CZ 290883 B6

3-(2-fluorfenyl)-7-jod-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/pyridazinu, ve formě žlutě zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 19,0 %, (vztaženo na 2 stupně).

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 3,97, (3H, s.), 5,51, (2H, s.), 7,28, (1H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 7,37, (lH,d.d., J= 8,0 a 8,0 Hz), 7,56 - 7,64, (1H, m.), 7,86, (1H, d.d.d., J = 7,70 a 1,0 Hz), 7,90, (1H, s.), 6,86, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 452,0, /MHZ;

Stupeň b)

Příprava 7-cyklopentylmethyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 27, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo neopentyljodidu byl použit cyklopentylmethyljodid, a místo 7-brom-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)- l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, byl použit 3-(2-fluorfenyl)-7-jod-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin.

Analytické údaje žádané, v nadpise uvedené sloučeniny:

Teplota tání: 135,0-137,0 °C;

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 1,18- 1,28, (2H, m.), 1,36 - 1,74, (4H, m.), 1,76- 1,86, (2H, m.), 2,16-2,28, (1H, m.), 2,66, (2H,d., J= 7,0 Hz), 3,84, (3H, s.), 5,49, (2H, s.), 7,25- 7,30, (1H, m.), 7,36, (lH,d.d., J = 7,0 a 7,0 Hz), 7,50 - 7,60, (1H, m.), 7,82 - 7,86, (2H, m.), 7,89, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 382,0, /MHZ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C21H22FN7O. 0,4 H₂O:

Vypočteno: C 60,83, H 5,54, %

Nalezeno: C 60,85, H 5,38, %

Příklad 31

Příprava 7-(3-benzyloxycyklobutyl}-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava cis-3-benzyloxy-l-hydroxycyklobutanu

Směs, připravená smícháním 0,92 g, (5,22 mmol), 3-benzyloxycyklobutan-l-onu, (viz odborný časopis Bull. Chem. Soc. Jpn. 57, 1637 -1642, /1984/, autor Ogura se sp.), a 0,20 g, (5,29 mmol), tetrahydroboritanu sodného, v 15,0 ml, ethanolu, byla míchána při teplotě místnosti, po dobu 3,50 hodiny.

-46CZ 290883 B6

Poté byla směs zfiltrována, promyta s ethanolem, a získaný filtrát byl zahuštěn. Po filtraci přes vrstvu oxidu křemičitého, za použití eluce s ethylacetátem, byl získán žádaný cis-3-benzyloxy1-hydroxycyklobutan, (0,854 g), ve formě bezbarvé látky olejovité konzistence, ve výtěžku 92,0 %.

*H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,75- 2,00, (2H,m.), 2,65-2,79, (2H,m.), 3,62, (lH,kn., J= 7,0 Hz), 3,90, (1H, široký k., J = 7,0 Hz), 4,41, (2H, s.), 7,23 - 7,47, (5H, m.).

Stupeň b)

Příprava cis-3-benzyloxy-l-methansulfonyloxycyklobutanu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,85 g, (4,77 mmol), cis-3-benzyloxy-l-hydroxycyklobutanu, (získaného v rámci Stupně a), popsaného výše), a 1,0 ml, (7,20 mmol), triethylaminu, ve 15,0 ml, vysušeného dichlormethanu, bylo přidáno po kapkách, za stálého míchání, v atmosféře dusíku, a při teplotě 0 °C, 0,44 ml, (5,70 mmol), methansulfonylchloridu, a vzniklá, bíle zbarvená suspenze, byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 1,50 hodiny.

Poté byla reakční směs nalita do 50,0 ml, vody, a byla extrahována 2x vždy se 30,0 ml, dichlormethanu. Po oddělení organické a vodné fáze, byly organické extrakty vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány a zahuštěny. Zbytek, ve formě látky olejovité konzistence, byl zfiltrován přes vrstvu silikagelu, za použití ethylacetátu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 1,27 g, žádaného cis-3-benzyloxy-l-methansulfonyloxycyklobutanu, ve formě žlutě zbarvené látky, olejovité konzistence, ve výtěžku 100,0%.

‘H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 2,26 - 2,39, (2H, m.), 2,77 - 2,91, (2H, m.), 2,97, (3H, s.), 3,74, (1H, kn., J = 7,0 Hz), 4,42, (2H, s.), 4,68, (1H, kn., J = 7,0 Hz), 7,26 - 7,42, (5H, m.).

Stupeň c)

Příprava trans-3-benzyloxy-l-jodcyklobutanu

Roztok, připravený rozpuštěním 1,25 g, (4,80 mmol), cis-3-benzyloxy-l-methansulfonyloxycyklobutanu, a 2,16 g, (14,40 mmol), jodidu sodného, ve 20,0 ml, vysušeného acetonu, byl zahříván za refluxu pod zpětným chladičem, v atmosféře dusíku, po dobu 3,50 dne.

Poté byla reakční směs ochlazena, a naředěna se 150,0 ml, diethyletheru, a vzniklá suspenze byla zfiltrována, a získaný filtrát byl zahuštěn. Výsledný zbytek byl zředěn s ethylacetátem, a zfiltrován přes vrstvu silikagelu, za použití ethylacetátu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 1,19 g, žádaného trans-3-benzyloxy-l-jodcyklobutanu, ve formě oranžově zbarvené látky, olejovité konzistence, ve výtěžku 86,0 %.

‘H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 2,54 -2,65, (2H, m.), 2,94-3,04, (2H,m.), 3,85-4,06, (2H,m.), 4,40, (2H, s.), 7,26-7,38, (5H, m.).

-47CZ 290883 B6

Stupeň d)

Příprava 7-(3-benzyloxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-74,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 27, Stupeň c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo neopentyljodidu, byl použit trans-3benzyloxy-l-jodcyklobutan, získaný v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c).

Tato sloučenina byla izolována preparativní chromatografií na tenké vrstvě za použití směsi 5% methanolu, v dichlormethanu, a poté další preparativní chromatografií na tenké vrstvě, za použití směsi 2% ethanolu v ethylacetátu, jako elučních činidel, a následným mechanickým zpracováním a vyjmutím s diethyletherem.

Byla získána směs trans-cis izomerů, (2,3 : 1,0).

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 2,00- 2,10, a 2,18 -2,26, (2H, m.), 2,28 -2,38, a 2,34-2,42, (2H, m.), 3,00- 3,10, a 3,68-3,78, (1H, m.), 3,80 a 3,81, (3H, s.), 4,02 -4,22, (1H, m.), 4,46 a 4,47, (2H, s.), 5,46 a 5,47, (2H, s.), 7,24 - 7,37, (7H, m.), 7,56 - 7,60, (1H, m.), 7,80 - 7,91, (3H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 486,0, /ΜΗΛ;

Příklad 32

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobuty l)-6-(2-methyl-2H-1,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Směs, připravená smícháním 0,04 g (0,082 mmol), 7-(3-benzyloxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, dále přebytek, 1,0 g amoniumformiátu; 1,0 ml, kyseliny mravenčí, a 0,10 g, 10% palladia na aktivním uhlí, byla míchána při teplotě 60,0 °C, v atmosféře dusíku, po dobu 18,0 hodin, a poté byla reakční směs ochlazen, a zahuštěna.

Výsledný zbytek byl naředěn s 20,0 ml, dichlormethanu, a promyt s 20,0 ml, solanky. Oddělená organická vrstva byla poté vysušena se síranem sodným, zfiltrována, a zahuštěna. Zbytek byl dále zpracován pomocí preparativní chromatografie na tenké vrstvě, za použití silikagelu, a směsi 10% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,016 g, 7-(3-benzyloxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve výtěžku 10,0%; a 0,009 g, 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol/4,3-b/-pyridazinu, ve výtěžku 28,0 %, ve formě bíle zbarvené, pevné látky, a směsi trans-cis izomerů, (3,0: 1,0).

'H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 2,08 - 2,18, 2,36 - 2,56, a 2,70 - 2,84, (4H, m.), 3,00 - 3,08 a 3,70 - 3,78, (1H, m), 3,82, (3H, s.), 4,36 - 4,40, a 4,44 - 4,58, (1H, m.), 5,47 (2H, s.), 7,24 - 7,32 (1H, m.), 7,43 - 7,40 (1H, m.), 7,54 - 7,60, (1H, m.), 7,82 - 7,96 (3H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES)⁺: m/e, 396,0, /MH/;

-48CZ 290883 B6

Příklady 33 a 34

Příprava 7-( l-fluorbut-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu a

7-(3-fluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,33 g (0,083 mmol), 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobutyl)-6-(2-methyl-2H-í,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-74,3-b/-pyridazinu, ve 3,0 ml, vysušeného dichlormethanu, bylo přidáno v atmosféře dusíku, za stálého míchání, a při teplotě minut 78,0 °C; po kapkách, 0,025 ml, (0,17 mmol), diethylaminosuifur-triíluoridu.

Po uplynutí 3,50 hodiny, bylo ku reakční směsi přidáno při teplotě minut 78,0 °C, dalších 0,025 ml, (0,17 mmol), diethylaminosulfur-trifluoridu, a tato směs byla míchána při teplotě minus 78,0 °C, po dobu 1,25 hodiny, a poté byla během 10,0 minut vytemperována na teplotu 0 °C, a smíchána se 2,0 ml methanolu.

Poté byla reakční směs naředěna se 20,0 ml, vody, a extrahována 2x vždy se 20,0 ml, dichlormethanu. Po oddělení organické a vodné fáze, byly organické extrakty vysušeny se síranem sodným, zfiltrovány, a zahuštěny.

Po zpracování zbytku preparativní chromatografií na tenké vrstvě, za použití silikagelu, a směsi 5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla, byly získány 2 produkty:

Méně polární materiál, tj. 0,0023 g, 7-(l-fluorbut-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H- l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve výtěžku 7,0 %.

'H-NMR, (400 MHz, CDC1₃):

delta, 2,59 - 2,87, (2H, m), 3,85, (3H, s.), 5,13, (1H, d., J = 18,0 Hz), 5,16 (1H, d., J = 10,0 Hz), 5,30 (2H, s.), 5,49 (1H, d., J = 13,0 Hz), 5,54, (1H, d„ J = 13,0 Hz), 5,64 - 5,85, (2H, m). 7,29 (1H, d.d.d., J = 8,80, 7,35 - 7,40, (1H, m.), 7,55 - 7,62 (1H, m.), 7,84, (1H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 7,80 (1H, s.), 8,15, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0, /ΜΗΛ;

Více polární materiál byl 7-(3-fluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin, (0,0014 g, výtěžek 4,0%), byl získán ve formě směsi trans-cis-izomerů, 1,0 : 1,0.

'H-NMR, (400 MHz, CDC1₃):

delta, 2,25 - 3,10, (4H, m.), 3,81, as 3,82, (3H, s.), 4,13 - 4,75 (1H, m.), 4,96 - 5,27 (1H, m.), 5,48 a 5,49, (2H, s.), 7,26 - 7,30 (1H, m.), 7,36, (1H, d.d.d., J = 8,80 a 1,0 Hz), 7,55 - 7,60, (lH,m.), 7,79- 7,91 (3H, m.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 398,0 /ΜΗΛ;

-49CZ 290883 B6

Příklad 35

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yI-methoxy)-7-trifluormethyl-

I, 2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Roztokem, připraveným rozpuštěním 0,10 g (0,025 mmol), 7-brom-3-(2-fluorfeny 1)-6-(2methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve 2,0 ml vysušeného Ν,Ν-dimethylformamidu, byly probublávány při teplotě místnosti 2,0 g (10,0 mmol), jodtrifluormethanu tak dlouho, až se požadované množství plynu rozpustilo.

Poté bylo ku reakční směsi přidáno 0,16 g (2,50 mmol), mědi ve formě prášku, a tato směs byla míchána v uzavřené trubici, při teplotě 80,0 °C, po dobu 18,0 hodin.

Poté byla reakční směs ochlazena, zředěna s 50,0 m, dichlormethanu, a zfiltrována. Získaný filtrát byl promyt s 50,0 ml; vody, a po vysušení se síranem sodným, a zfíltrování byl zahuštěn.

Zbytek byl zpracován preparativní chromatografií na tenké vrstvě, za použití směsi 3% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,061 g. žádaného 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy}-7-trifluormethyl-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve formě slabě žlutě zbarvené, pevné látky, ve výtěžku 6,0 %.

Teplota tání: 123,0 - 126,0 °C;

‘H-NMR, (360 Mhz, CDC1₃):

delta, 3,92, (3H, s.), 5,60, (2H, s.); 7,31, (1H, d.d., J = 8,0 a 8,0 Hz), 7,40, (1H, d.d., J = 8,0 ‘ a 8,0 Hz), 7,56 - 7,64, (1H, m.), 7,86 - 7,94, (2H, m.), 8,50, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 393, /ΜΗΛ;

Příklad 36

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(4-methyltetrahydropyranyl-4-yl)-6-(2-methyl-2H-l, 2,4-triazol3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 4-methyltetrahydropyran-4-karboxylové kyseliny

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 4,70 ml, (33,80 mmol), diisopropylaminu, ve 40,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu, bylo přidáno po kapkách, v atmosféře dusíku, za stálého míchání, a při teplotě nižší než 10,0 °C, během 10,0 minut, 21,10 ml, (33,80 mmol), 1,6M roztoku n-butylíithia, (v hexanech), a ku vzniklé reakční směsi byla přidána v atmosféře dusíku, a při teplotě nižší než 5,0 °C; kyselina tetrahydropyran-4-karboxylová, (viz odborný časopis

J. Am. Chem. Soc., 115, 8407,/1993/), ve 20,0 ml, bezvodého tetrahydrofuranu.

Poté, co byla reakční směs míchána při teplotě místnosti po dobu 1,0 hodiny, bylo k ní přidáno po kapkách, při teplotě nižší než 5,0 °C; 2,40 ml, (38,40 mmol), methyljodidu, a výsledná směs byla míchána při teplotě nižší než 5,0 °C, po dobu 30,0 minut. Poté byla směs vytemperována na teplotu místnosti, a byla míchána dále po dobu 3,5 dne.

-50CZ 290883 B6

Po odstranění rozpouštědla odpařením, byl zbytek rozpuštěn ve 100,0 ml, dichlormethanu, a ku vzniklému roztoku bylo přidáno 100,0 ml; dichlormethanu, a ku vzniklému roztoku bylo přidáno 100,0 ml; 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Po oddělení organické a vodné fáze, byla vodná vrstva extrahována 3x vždy se 100,0 ml, dichlormethanu, a spojené organické extrakty byly promyty postupně se 100,0 ml, vody, a se 100,0 ml, solanky, a po vysušení se síranem hořečnatým, byly odpařeny.

Bylo získáno 1,40 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, která byla použita bez jakéhokoliv dalšího čištění v dalším Stupni b).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

‘H-NMR, (250 MHz, CDClj):

delta, 1,00, (3H, s.), 1,47 - 1,58, (2H, m.), 2,06 - 2,11, (2H, m.), 3,49 - 3,60, (2H, m.), 3,78-3,86 (2H, m.).

Stupeň b)

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(4-methyltetrahydropyran-4-yl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo kyseliny cyklobutankarboxylové, byla ve Stupni a), použita kyselina 4-methyltetrahydropyran—4-karboxylová.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 191,0 °C;

‘H-NMR, (360 MHz, CDClj):

delta, 1,46, (3H, s.), 1,89 - 1,94, (2H, m.), 2,07 - 2,15, (2H, m.), 3,73 - 3,79, (7H, m.), 5,51 (2H, s.), 7,28 - 7,30, (1H, m.), 7,36, (1H, t.; J = 7,60 Hz), 7,57, (1H, m.), 7,84, (1H, m.), 7,88, (1H, s.), 7,95, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 424,0, /MH/*;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C21H22FN7O2:

Vypočteno: C 59,57, H 5,24, N 23,15,% Nalezeno: C 59,40, H5,ll, N 23,13,%

Příklad 37

Příprava 3-(2-fluorfenyl}-7-(4-methyltetrahydropyran-4-yl)-6-( 1-methyl-l H-l ,2,4-triazol3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo kyseliny cyklobutankarboxylové, byla ve Stupni a), použita kyselina 4-methyltetrahydropyran-4-karboxylová, (připravená postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 36, Stupeň a), a místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol

-51 CZ 290883 B6

3-yl)-methanolu, byl ve Stupni c), použit (l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl)-methanol, (připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu (EP-A-421.210).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 154,0 °C;

‘H-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,46, (3H, s.), 1,93 - 1,99, (2H, m.), 2,09 - 2,20, (2H, m), 3,77 - 3,80, (4H, m.), 3,93, (3H, s.), 5,44, (2H, s.), 7,23 - 7,37, (2H, m.), 7,49 - 7,58, (1H, m.), 7,91, (1H, s.), 7,97, (1H, m.), 8,04, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/s, 424,0 /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C21H22FN7O2:

Vypočteno: C 59,57, H 5,24, N 23,15,%

Nalezeno: C 59,26, H5,22, N 22,79,%

Příklady 38 a 39

Příprava 7-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol3-yl-methoxy)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu a

7-(4-fluor-l-methylcyklohex-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 3,6-dichlor-4-(l-methyl-4—oxocyklohexylj-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň a), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, stím rozdílem, že místo kyseliny cyklobutankarboxylové, byla použita kyselina l-methyl-4-oxocyklohexankarboxylová, (viz odborný časopis Aust. J. Chem., 23, 1005, /1970/).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

‘H-NMR, (360, MHz, CDC1₃):

delta, 1,63, (3H, s.), 2,23 -2,38, (4H, m.), 2,46 -2,55, (4H, m.), 7,51 (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 261,0, /MH/‘;

-52CZ 290883 B6

Stupeň b)

Příprava 3,6-dichlor-4-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-pyridazinu, a

3,6-dichlor-4-(4-fluor-1 -methy lcyklohex-3-enyl)-pyridazinu

Roztok, připravený rozpuštěním 1,20 ml, (9,13 mmol), diethylaminosulfur-trifluoridu, ve 60,0 ml, bezvodého dichlormethanu, v atmosféře dusíku, a vychlazený na teplotu minus 78,0 °C, byl přidán v atmosféře dusíku, a při teplotě minus 78,0 °C, ku roztoku, získanému rozpuštěním 1,08 g (4,15 mmol), 3,6-dichlor-4-(l-methyl-4-oxocyklohexyl)-pyridazinu, (připraveného postupem, popsaným výše v rámci předcházejícího Stupně a), a vzniklá reakční směs byla po pomalém vytemperování na teplotu místnosti, míchána po dobu 5,50 dne.

Poté byla reakční směs nalita do 250,0 ml, nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a 250,0 ml, ledu, a po oddělení organické a vodné části byla vodná vrstva extrahována 2x vždy se 50,0 ml, dichlormethanu.

Po oddělení organické a vodné fáze byly organické vrstvy spojeny a po promytí se 250,0 ml, solanky byly vysušeny se síranem hořečnatým, zfíltrovány, a odpařeny.

Výsledný surový produkt byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 0,0% až 20%, ethylacetátu a hexanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 0,82 g, směsi v nadpise uvedených sloučenin, v poměru 2,70 : 1,0, ve výtěžku 70,0 %

Analogické údaje v nadpise uvedených, žádaných sloučenin:

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,50, (2,20 H, s.), 1,54, (0,80 H, s.), 1,84 - 2,79, (7,30 H, m.), 5,20 - 5,29, (0,20 H, m.), 7,38, (0,20 H, s.), 7,46, (0,80 H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 282,0, /ΜΗΛ a m/e, 262, /ΜΗΛ;

Stupeň c)

Příprava 7-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol3-yl-methoxy)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, a

7-(4-fluor-l-methylcyklohex-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupně b), a c), byly připraveny žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, stím rozdílem, že místo 4,6-dichlor-4-cyklobutylpyridazinu, byla ve Stupni b), použita směs 3,6-dichlor-4-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)pyridazinu, a 3,6-dichlor-4-(4-fluor-l-methylcyklohex-3-enyl)-pyridazinu.

Zmíněné sloučeniny byly separovány pomocí vysokovýkonné kapalinové chromatografie.

Analytické údaje pro sloučeninu 7-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin:

Teplota tání: 135,0 °C;

-53CZ 290883 B6 ’Η-NMR, (250 MHz, CDC1₃):

delta, 1,42, (3H, s.), 1,82 - 2,08, (6H, m.), 2,16 - 2,34, (2H, m.), 3,78, (3H, s.), 5,53 (2H, s.),

7,25 - 7,40, (2H, m.), 7,58, (1H, m.), 7,84, (1H, m.), 7,89, (1H, s.), 8,02 (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 458,0 /ΜΗΛ;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C22H22F3N7O.0,5 EtOAc. 1,0 H₂O:

Vypočteno: C 55,48, H5,43, N 18,87,%

Nalezeno: C 55,36, H5,00, N 18,96,%

Analytické hodnocení pro sloučeninu 7-(4-fluor-l-methylcyklohex-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-

6-(2-methyl-2H-l,2,4~triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu:

Teplota tání: 175,0 °C;

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,41, (3H, s.), 1,76 - 1,98 (2H, m.), 2,18 - 2,58, (4H, m.), 3,78, (3H, s.), 5,21 - 5,26 (1H, m.), 5,53, (2H, s.), 7,26 - 7,38, (2H, m.), 7,54 - 7,59 (1H, m.), 7,84, (1H, m.), 7,89, (1H, s.),

7,95, (lH,s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 438,0, /MHZ;

Příklad 40

Příprava 7-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-flurofenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4-3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 38, Stupně a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo (2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3yl)-methanolu, byl ve Stupni c), použit (l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl)-methanol, (připravený postupem, popsaným v rámci Evropského patentu, (EP-A-421.210).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 193,0 °C;

’Η-NMR, (360 Mhz, CDC1₃):

delta, 1,43, (3H, s.), 1,88 - 2,12, (6H, m.), 2,26 - 2,39, (2H, m.). 3,92, (3H, s.), 5,45, (2H, s.), 7,24 - 7,35, (2H, m.), 7,51 - 7,56, (1H, m.), 7,94, (1H, m.), 7,97, (1H, s.), 8,04, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 458,0, /MH/‘;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce C22H22F3N7O:

Vypočteno: C 57,76, H4,85, N 21,43, % Nalezeno: C 57,84, H4,75, N 21,07,%

-54CZ 290883 B6

Příklad 41

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(3-oxocyklobutyl)-1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Stupeň a)

Příprava 7-(3-benzyloxycyklobutyl)-6-chlor-3-(2-fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickými postupy, popsanými výše v rámci Příkladu 1, Stupně a), a b), byla připravena žádaná v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo kyseliny cyklobutankarboxylové, byla použita kyselina 3-benzyloxycyklobutan-karboxylová, (viz odborný časopis Collect. Czech Chem. Commun, 47,2440, /1982/).

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

’Η-NMR, (360 MHz, CDC1₃), (cis- a trans- izomery přítomny v poměru 58,0 : 1,0):

delta, 2,06 - 2,51, (2H, m.), 2,63 - 2,91, (2H, m.), 3,13 - 3,25, (1H, m.), 3,81 - 4,25, (1H, m.), 4,50 (2H, s.), 7,28 - 7,36, (7H, m.), 7,54 - 7,61, (1H, m.), 7,88, (1H, m.), 7,97 a 8,03, (1H, 2s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 409,0, /MHÝ;

Stupeň b)

Příprava 7-(3-benzyloxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin-6-onu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,98 g, (2,40 mmol), 7-(3-benzylocyklobutyl)-6-chlor3-(2-fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně a), ve 30,0 ml, 1,4-dioxanu, a 8,0 ml vody, byly přidány 3,0 ml, (12,0 mmol), 4N roztoku hydroxidu sodného, a vzniklá reakční směs byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 18,0 hodin.

Rozpouštědlo bylo z reakční směsi odpařeno, a výsledný zbytek byl rozpuštěn v 50,0 ml, diethyletheru, a 50,0 ml, vody, a tato směs byla vytřepána. Po oddělení organické a vodné fáze byla vodná vrstva okyselena s 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové na pH 2,0, a vzniklá pevná látka byla zfiltrována, promyta s 50,0 ml, vody, a poté ještě s 50,0 ml, diethyletheru, a za vakua sušena při teplotě 100,0 °C, po dobu 18,0 hodin.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

’Η-NMR, (400 MHz, CDC1₃), (cis, a trans izomery přítomny v poměru 4,0 : 1,0);

delta, 1,95 - 2,03, (1,6OH, m.), 2,31 - 2,38, (0,40 H, m.), 2,50 - 2,56, (0,4H, m.), 2,68 - 2,76, (1,60, m.), 3,05 - 3,13, (1H, m.), 3,65 - 3,73, (0,20 H, m.), 4,06 - 4,15, (0,8OH, m.), 4,46, (2H, s.), 6,80 -6,87, (2H, m.), 7,22 - 7,37 (6H, m.), 7,55 - 7,61, (1H, m.), 7,63, (0,8 H), 7,68, (0,2 H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 391,0, /MHÚ;

-55CZ 290883 B6

Stupeň c)

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobutyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin-6-onu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,64 g, 1,64 mmol), 7-(3-benzyloxy-cyklobutyl)-3-(2fluorfenyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin-6-onu, (získaného v rámci předcházejícího, výše pospaného Stupně b), a 1,034 g, (16,40 mmol), formiátu amonného, ve 40,0 ml, methanolu, bylo přidáno 8,0 ml, kyseliny mravenčí, a vzniklá reakční směs byla propláchnuta dusíkem.

Poté bylo ku směsi přidáno 0,30 g; 10% palladia na aktivním uhlí, a výsledná reakční směs byla míchána v atmosféře dusíku, při teplotě 60,0 °C, po dobu 2,0 hodin. Poté byla směs ochlazena, zfiltrována, a za vakua byla zahuštěna.

Vzniklý zbytek byl přečištěn chromatografií na oxidu křemičitém, za použití směsi 0 - 10% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Byl získán žádaný, v nadpise uvedený produkt, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

’Η-NMR, (360 MHz, DMSO):

(cis- a trans izomery přítomny v poměru 5,5 : 1,0):

delta, 1,89 - 1,98, (1,70 H, m.), 2,21 - 2,29, (0,3H, m.), 2,40 - 2,48, (0,3 H, m.), 2,55 - 2,65, (1,70 H, m.), 2,88 - 3,00 (1H, m.), 4,06 - 4,14, (0,85 H, m.), 4,20 - 4,30, (0,15 H, m.), 7,38 - 7,47, (2H, m.). 7,60 - 7,65, (1H, m.), 7,80 - 7,85, (1H, m.), 7,97, (0,85 H, s.), 8,12, (0,15 H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES'): m/e, 301,0; /MHÚ;

Stupeň d)

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-oxocyklobutyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin-6-onu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,36 g, (1,20 mmol), 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobutyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin-6-onu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně c), v 50,0 ml, acetonu, byl přidáván po kapkách 8N roztok oxidu chromového tak dlouho, dokud nebyl dosažen přebytek, který se projevil přetrvávajícím červeným zbarvením.

Poté byla reakční směs míchána po dobu 2,0 hodin, a poté byl ku směsi přidáván isopropanol, dokud přetrvávalo modré zabarvení, a už se nevyskytoval žádný přebytek oxidu chromového. Po přidání 50,0 ml, vody ku směsi, byla vodná vrstva extrahována 4x vždy se 50,0 ml, ethylacetátu, a po oddělení organické a vodné fáze byly organické extrakty spojeny, promyty s 50,0 ml, solanky, a po vysušení se síranem hořečnatým byly zfiltrovány a zahuštěny.

-56CZ 290883 B6

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

'H-NMR, (360 Mhz, DMSO):

delta, 3,41, (2H, s.). 3,43, (2H, s.), 3,73 - 3,78, (1H, m.), 7,42 - 7,50, (2H, m.), 7,64 - 7,72, (1H, m.), 7,83 - 7,88 (1H, m.), 8,38, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 299,0, /ΜΗΛ;

Stupeň e)

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(3-oxocyklobutyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,23 g, (0,70 mmol), 3-(2-fluorfenyl)-7-(3-oxocyklobutyl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazin-6-onu, (získaného v rámci předcházejícího, výše popsaného Stupně d); v 5,0 ml, bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu, bylo přidáno za stálého míchání 62,0 mg, (1,54 mmol), hydridu sodného, ve formě 60% olejové disperze, a vzniklá reakční směs byla zahřívána v atmosféře dusíku, při teplotě 80,0 °C; po dobu 0,50 hodiny.

Poté, po ochlazení, bylo ku směsi přidáno 0,14 g, (0,85 mmol), 5-chlormethyl-l-methyl-lH-

1,2,4-triazolu, monohydrochloridu, připraveného postupem, popsaným v rámci Evropského patentu (EP-A-170.073), a tato reakční směs byla poté zahřívána v atmosféře dusíku, při teplotě 80,0 °C, po dobu 18,0 hodin. Poté, po ochlazení, byla směs zahuštěna, a výsledný zbytek byl přečištěn chromatografií na oxidu křemičitém, za použití směsi 0,0 až 5,0%, směsi methanol: dichlormethan, jako elučního činidla.

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 3,29 - 3,38 (2H, m.), 3,45 - 3,56 (2H, m.), 3,73 - 3,82, (4H, m.), 5,52, (2H, s.),

7,26 - 7,32, (1H, m.), 7,35 - 7,39, (1H, m.), 7,56 - 7,60, (1H, m.), 7,81 - 7,85, (1H, m.), 7,88, (lH,s.), 7,98, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 394,0, /ΜΗΛ;

Příklad 42

Příprava 7-(3,3-difluorcyklobutyl)-3-(2-fluorenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Ku roztoku, připravenému rozpuštěním 0,10 g (0,254 mmol), 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl2H-1,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-7-(3-oxocyklobutyl)-l ,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu, ve

14,0 ml, bezvodého dichlormethanu, v atmosféře dusíku, a vychlazenému na teplotu minus 78,0 °C, byl přidán roztok, získaný rozpuštěním 0,074 ml, (0,56 mmol), diethylaminosulfur-trífluoridu, v 6,0 ml, bezvodého dichlormethanu, v atmosféře dusíku, a vychlazenému na teplotu minus 78,0 °C, a vzniklá reakční směs byla pomalu vytemperována na teplotu místnosti, a poté byla míchána po dobu 4,0 dní.

V případě, že reakce kompletně neproběhla, bylo přidáno dalších 0,037 ml, (0,28 mmol), diethylaminosulfur-trifluoridu, při teplotě minut 78,0 °C.

-57CZ 290883 B6

V případě, že i po 2 dalších dnech zůstala v reakční směsi při teplotě místnosti výchozí materiál, bylo přidáno při teplotě minut 78,0 °C, dalších 0,074 ml, (0,56 mmol), diethylaminosulfur-trifluoridu, takže během lOdenního období, bylo ku reakční směsi přidáno celkem 5,50 ekvivalentů diethylaminosulfurtrifluoridu.

Reakční směs byla poté přidána ku směsi nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, a ledu, (25,0 ml), a po oddělení byla vodná vrstva extrahována 2x vždy se 25,0 ml, dichlormethanu. Po oddělení organické a vodné fáze byly organické fáze spojeny, promyty se 25,0 ml, solanky, vysušené se síranem hořečnatým, a po zfíltrování byly odpařeny.

Výsledný zbytek byl přečištěn chromatografií na silikagelu, za použití směsi 0,0 % až 5,0 %, methanol : dichlormethan, jako elučního činidla, a poté byl překrystalizován ze směsi ethylacetát/isohexan.

Byla získána žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, ve formě slabě oranžově zbarvené, pevné látky.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 178,0 °C;

'H-NMR, (400 MHz, CDC1₃):

delta 2,70 -2,78 (2H, m.), 3,00 - 3,07 (2H. m.), 3,47 - 3,50, (1H, m.), 3,80, (3H, s.), 5,50, (2H, s.), 7,25 - 7,30, (1H, m.), 7,34 - 7,38, (1H, m.), 7,56 - 7,59, (1H, m.), 7,80 - 7,85, (1H, m.),

7,89, (1H, s.), 7,90, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, /MH/⁴, 416,0;

Analytické hodnocení sloučeniny dle sumárního vzorce Ci9HieF₃N7O:

Vypočteno: C 54,94, H 3,88, N 23,60, %

Nalezeno: C 55,55, H3,99, N 23,37,%

Příklad 43

Příprava 3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l, 2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(tetrahydrofur-2yl)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Analogickým postupem, popsaným výše v rámci Příkladu 1, Stupeň a), b), a c), byla připravena žádaná, v nadpise uvedená sloučenina, s tím rozdílem, že místo kyseliny cyklobutankarboxylové, byla ve Stupni a), použita kyselina tetrahydro-2-furoová.

Analytické údaje v nadpise uvedené, žádané sloučeniny:

Teplota tání: 136,0 - 139,0 °C;

'H-NMR, (360 MHz, CDC1₃):

delta, 1,77, (1H, m.), 1,98, (2H, m.), 2,42 (1H, m.), 3,82, (3H, s.), 3,98, (1H, k., J = 7,10 a 15,40 Hz), 4,15, (lHm, m.), 5,01, (1H, t„ J = 6,30 Hz), 5,51, (2H, k., J = 13,10 a 22,00 Hz),

7,25 - 7,38, (2H, m.), 7,55, (1H, m.), 7,85, (1H, m.), 7,89, (1H, s.), 8,18, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 396,0, /ΜΗΛ;

-58CZ 290883 B6

Příklad 44

Příprava 7-(3-fluorfenyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-

1,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu

Směs, připravená smícháním 50,20 mg, (0,124 mmol), 7-brom-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl2H-l,2,4-triazol-3-yl-methoxy)-l,2,4-triazol-/4,3-b/-pyridazinu; dále 24,70 mg, (0,177 mmol), kyseliny 3-fluorbenzenboronové; 74,10 mg (0,339 mmol), fosforečnanu draselného, a 11,50 mg, (0,00995 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)-palladia (O); ve 3,0 ml, Ν,Νdimethylformamidu, byla za stálého míchání odplyněna odpařováním, a poté byla reakční baňka propláchnuta 4x s dusíkem, a reakční směs byla zahřívána v atmosféře dusíku, při teplotě 100,0 °C, po dobu 14,50 hodiny.

Poté byla reakční směs vytřepána mezi 20,0 ml, ethylacetátu, a 15,0 ml, solanky, a po oddělení byla vodná vrstva dále extrahována 2x vždy s 20,0 ml, ethylacetátu. Spojené organické extrakty byly poté za vakua odpařeny.

Výsledný zbytek byl přečištěn urychlenou chromatografií, na silikagelu, za použití směsi 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla.

Bylo získáno 18,10 g, žádané, v nadpise uvedené sloučeniny, ve formě bíle zbarvené, pevné látky.

Teplota tání: 204,0 - 206,0 °C; (dichlormethan - ethylacetát - hexan);

'H-NMR, (360 MHz, CDCI₃):

delta, 3,70, (3H, s.), 5,54, (2H, s.), 7,18, (1H, m.), 7,28 - 7,40, (4H, m.), 7,46, (1H, m.), 7,58, (1H, m.), 7,86, (1H, s.), 7,88, (1H, td., J = 7,50 a 1,80 Hz), 8,08, (1H, s.).

Hmotnostní spektrometrie, (ES⁺): m/e, 420,0, /ΜΗΛ;

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Triazolopyridazinové deriváty obecného vzorce I

-59CZ 290883 B6 kde

Z znamená trifluormethyl, 2-methylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 3-methylbutyl, 1-fluorobutyl-3-enyl, cyklobutyl, 1-methylcyklobutyl, 1-fhiorcyklobutyl, 3-fluorcyklobutyl, 3,3-difluorcyklobutyl, 3-hydroxycykloboutyI, 3-benzyloxycyklobutyl, 3-oxocyklobutyl, 1-methylcyklohexyl, 4,4-difluor-l-methylcyklohexyl, cyklopentylmethyl, 4-fluorcyklohex-3-enyl, 3-fluorfenyl, tetrahydrofur-2-yl, pyrrolidin-l-yl, 4-methyltetrahydropyran-4-yl nebo thien-2-yl

R¹ znamená atom vodíku nebo fluoru a

R² znamená methylisoxazolyl, methylpyrazolyl, methylimidazolyl, benzimidazolyl, nebo methyltriazolyl, za předpokladu, že v případě, že Z znamená 1-methylcyklobutyl, R¹ znamená atom vodíku a R²znamená l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-yl nebo 2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-yl, pak se atom fluoru nenachází v poloze 2 fenylového kruhu, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
2. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 1, obecného vzorce I kde Z znamená cyklobutyl.
3. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 1, obecného vzorce I nebo 2, kde R² znamená kruhovou strukturu (a), (b), (c), (d), (e), (í) nebo (g)

* * <^n-ch₃ ch₃ (a) (b)

L'ⁿ * N^N-CH, \=J ch₃ (c) (d)

* ch₃ (e) *

ch₃ kde * označuje místo připojení kruhu ke zbytku molekuly.
4. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 3, obecného vzorce I, kde R² znamená kruhovou strukturu (g).
5. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 1, obecného vzorce ΠΑ

-60CZ 290883 B6 kde R¹ má význam, uvedený v nároku 1 a

R³ znamená atom vodíku nebo fluoru, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
6. Triazolopyridazonové deriváty podle nároku 5, obecného vzorce ΠΒ kde R¹ má význam, uvedený v nároku 1 a

R³ má význam, uvedený v nároku 5, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
7. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 5 nebo 6, obecného vzorce IIA, IIB, v nichž R³ znamená atom vodíku.
8. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 1 ze skupiny:

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy )-1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

-61 CZ 290883 B6

7-cyklobutyl-3-(3-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(4-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l, 2,4-triazol-3-ylmethoxy )-1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(3,5-<lifluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-7-(l-methylcyklobutyl)-6-(2-methyI-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(3,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2,3-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2,6-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2,5-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-tríazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-7-(l-methylcyklohexyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfeny 1)-7-( 1 -methy lcyklohexyl)-6-( 1 -methyl-1 H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1-methyl-l H-pyrazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(5-methylisoxazol-3-ylmethoxy )-1,2,4-trioazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1 -methyl-1 H-imidazol-2-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(4-methyl-4H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(trien-2-yl)-l,2,4—triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(thien-2-yl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

6- ( 1 H-benzimidazol-2-ylmethoxy)-7-cyklobutyl-3-(2,4-difluorfenyl)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin

3-(2,4-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l,2,4triazolu/4,3-b/pyridazin,

3-(2,4-difluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l,2,4triazolo/4,3-b/pydridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(l-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(pyrrolidin-l-yl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7- cyklobuty l-3-(2-fluorfeny 1)-6-( 1 -methyl-1 H-imidazol-4-ylmethoxy) 1,2,4-triazolo/4,3-b/pydridazin,

7-( 1 -fluorocyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklobutyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-pyrazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pydridazin a farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

-62CZ 290883 B6
9. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 1 ze skupiny:

7-(2,2-dimethylpropyl)-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pydridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(2-methj lpropyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4-triazolo/4,3-b/pydridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(3-methyIbutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2I4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-cyklopenthylmethyl-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-1,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(3-benzyloxycyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(3-hydroxycyklobutyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-( l-fluorbut-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l ,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(3-fluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4triazolo/4,3-b/pydridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pydridazin, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
10. Triazolopyridazinové deriváty podle nároku 1 ze skupiny:

3-(2-fluorfenyl)-7-(4-methyltetrahydropyran-4-yl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-7-(4-methyltetrahydropyran-4-yl)-6-( 1-methyl-l H-l ,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(4,4-difluor-l-methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4—triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(4-fluor-l-ethylcyklohex-3-enyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-lH-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(4,4-difluor-l -methylcyklohexyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-( 1 -methyl-1 H-l ,2,4-triazol-3-y 1methoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl}-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(3-oxocyklobutyl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(3,3-difluorcyklobutyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7(3-oxocyklobutyl)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin,

3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-7-(tetrahydrofúr-2-yl)-l,2,4triazolo/4,3-b/pyridazin,

7-(3-fluorfenyl)-3-(2-fluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4-triazolo/4,3-b/pyridazin, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.
11. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje triazolopyridazinový derivát obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
12. Použití triazolopyridazinových derivátů obecného vzorce I podle nároků 1 až 10 pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení a/nebo prevenci úzkostných stavů.
13. Použití triazolopyridazinových derivátů obecného vzorce I podle nároků 1 až 10 pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení a/nebo prevenci křečových stavů.

-63CZ 290883 B6
14. Způsob výroby triazolopyridazinových derivátů obecného vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že se (A) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III se sloučeninou obecného vzorce IV

R² —CH,—OH (TV),

5 kde Z, R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1 a

L¹ znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, nebo se (B) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XI nebo její l,2,4-triazolo/4,3-b/pydridazin-6-

10 onový tautomer se sloučeninou obecného vzorce XII

_n-n Λ íí N |Í η 'A R²—-CH,L³ z T OH R¹ (XI), (XII),

kde Z, R¹ a R² mají význam uvedený v nároku 1 a

I? znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, nebo se (C) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce Z-CO₂H se sloučeninou obecného vzorce XIII (ΧΙΠ) , kde Z, R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1,

20 v přítomnosti dusičnanu stříbrného a persíranu amonného, nebo se

-64CZ 290883 B6 (D) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XIV se sloučeninou obecného vzorce XV (XIV) , (XV) , kde Z, R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1, M znamená skupinu -B(OH)₂ nebo -Sn(Alk)₃,

5 kde Alk znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku a L⁴ znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu, v přítomnosti katalyzátoru na bázi přechodného kovu, nebo se (E) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XVII (XVII) , kde R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1, s fluoračním činidlem, nebo se (F) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XVIII
15 kde R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1, s fluoračním činidlem, nebo se (G) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce I, v němž Z znamená 3-oxocyklobutyl s fluoračním činidlem, nebo se

-65CZ 290883 B6 (H) uskuteční hydrogenolýza sloučeniny obecného vzorce XXI (XXI), kde R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1, nebo se (I) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XXII se sloučeninou obecného vzorce ΧΧΙΠ (XXIII), kde Z, R¹ a R² mají význam, uvedený v nároku 1, L⁵ znamená vhodnou odštěpitelnou skupinu a E znamená skupinu a E znamená skupinu -B(OH)₂ nebo zbytek reakčního činidla na bázi organické sloučeniny cínu, v přítomnosti katalyzátoru na bázi přechodného kovu, nebo se (J) nechá reagovat sloučenina obecného vzorce XXII ve svrchu uvedeném významu sjodtrifluormethanem.

15. Triazolopyridazinový derivát podle nároku 1, kterým je 7-cyklobutyl-3-(2,6-difluorfenyl)6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-l,2,4—triazolo[4,3-b]pyridazin.
16. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje 7-cyklobutyl-3-(2,6-difluorfenyl)-6-(2-methyl-2H-l,2,4-triazol-3-ylmethoxy)-

1.2.4- triazolo[4,3-b]pyridazin spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
17. Použití 7-cyklobutyl-3-(2,6-difluorfenyl}-6-(2-methyl-2H-l ,2,4—triazol-3-ylmethoxy)-

1.2.4- triazolo[4,3-b]pyridazinu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení a/nebo prevenci úzkostných stavů.