CZ290002B6

CZ290002B6 - Antimikrobiální karbapenemové deriváty, způsob výroby a farmaceutický prostředek

Info

Publication number: CZ290002B6
Application number: CZ1993393A
Authority: CZ
Inventors: Isao Kawamoto; Rokuro Endo; Masao Miyauchi; Katsuhiko Watanabe; Hiroshi Yasuda; Satoahi Ohya; Katsuya Ishikawa; Yukio Utsui
Original assignee: Sankyo Company Limited
Priority date: 1992-03-11
Filing date: 1993-03-10
Publication date: 2002-05-15
Also published as: CA2091486A1; FI103046B; EP0560613B1; ES2125945T3; DE69322188D1; IL105020A; FI931079L; EP0560613A1; IL105020A0; KR100258225B1; RU2097383C1; DK0560613T3; CN1037180C; HU218676B; CN1079472A; CZ39393A3; TW249803B; FI103046B1; HU9300677D0; DE69322188T2

Abstract

Antimikrobi ln karbapenemov deriv ty obecn ho vzorce I, v n m jednotliv obecn symboly maj specifick² v²znam, je mo no vzhledem k jejich · innosti pou t pro l en mikrobi ln ch infekc .\

Description

Antimikrobiální karbapenemové deriváty, způsoby výroby a farmaceutický prostředek

Oblast vynálezu

Vynález popisuje sérii nových karbapenemových derivátů, které mají výtečné antimikrobiální účinky a které působením jejich zvýšené resistence na inaktivaci dehydropeptidázou I mají zlepšenou hodnotu v terapii a profylaxi infekčních nemocí. Vynález také popisuje způsoby výroby těchto sloučenin, stejně jako na přípravky, které je obsahují.

Dosavadní stav techniky

Karbapenemové sloučeniny jsou dobře známou sérií sloučenin, příbuzných penicilinům, které byly užívány nebo navrhovány pro použití jako antibiotika. Mají společnou základní strukturu, která může být vyjádřena vzorcem A

V tomto vzorci je označeno číslování těch poloh, které jsou důležité pro karbapenemové sloučeniny, s užitím číslovacího schématu běžně užívaného v oboru a jak je užit v nomenklatuře sloučenin podle tohoto vynálezu. V souhlase s doporučením Intemational Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC), Commision on Nomenclature of Organic Chemistry, jsou sloučeniny pojmenovány systematicky s použitím svrchu uvedené karbapenemové struktury jako základního názvu.

Ta karbapenemová antibiotika, která nemají žádný substituent na poloze 1, jsou potenciálně velmi užitečnou sérií sloučenin, majících mimořádně účinnou antibakteriální aktivitu. Bohužel však jsou chemicky nestabilní a nadto jsou in vivo citlivé na dehydropeptidázu I. Hydropeptidáza I je enzym, který hydrolyzuje beta-laktamový kruh v karbapenemových antibiotikách a který existuje v savčích tkáních například v kůře ledvin. Je odpovědný za extensivní metabolisaci mnoha jinak hodnotných beta-laktamových antibiotik u živočichů včetně lidí, a tak značně redukuje jejich hodnotu. Přes tyto nevýhody, tato antibiotika nalézají vzrůstající užití v léčení bakteriálních infekcí.

Metabolismus antibiotik in vivo může být demonstrován nízkým vylučováním samotné sloučeniny (a naopak jejích metabolických produktů) v moči, jak demonstrováno u thienamycinu /H. Kropp a další, Antimicrob. Agents, Chemother., 22, 62 (1982) a S. R. Norrby a další, ibidem., 23, 300 (1983)/.

Ačkoliv bylo nalezeno, že karbapenemové sloučeniny mající substituent na poloze 1, běžně 1methylovou skupinu, nemají vnímavost k dehydropeptidáze I in vivo, mnoha z dosud objevených sloučenin tohoto typu postrádá dostatečný účinek. Je proto považováno za vysoce žádoucí najít karbapenemová antibiotika, která kombinují dobrý účinek thienamycinu s resistencí k dehydropeptidáze I in vivo.

Nyní jsou známé mnohé karbapenemové sloučeniny, některé jsou například popsány v Evropských patentových spisech EP 126 587, 333 175, 442 497, 443 883, 508 682 a 518 558.

- 1 CZ 290002 B6

Evropský patentový spis EP 333 175 popisuje sloučeniny, ve kterých thio-pyrrolidinylová skupina a její substituent na uhlíkovém atomu kruhu, jsou spojeny alkylenovou skupinou, a tak se liší od sloučenin podle tohoto vynálezu v tom, že zde není žádná vazebná karbonylová skupina. Na druhé straně sloučeniny popsané v evropském patentovém spisu EP 126 587 jsou karboxylové thio-pyrrolidinylové beta-laktamové sloučeniny. Avšak má se za to, že nejbližším předchozím stavem sloučeninám podle tohoto vynálezu jsou látky, popsané v evropských patentových spisech EP 508 682 a 518 558, z nichž oba byly publikovány po prioritních datech zde uvedených. Tyto sloučeniny vykázaly podstatně lepší účinky než ostatní sloučeniny dříve popsané v oboru.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří antimikrobiální karbapenemové deriváty obecného vzorce I

kde

R¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

R² znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do atomů uhlíku,

R³ znamená atom vodíku nebo negativní náboj,

Q znamená skupinu vzorce Q-VII nebo Q-VIII:

_R23 ve kterých

R²⁰, R²¹ a R²² jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, nebo

R²⁰ a R²¹ nebo R²⁰ a R²² spolu znamená skupinu vzorce (CH₂)_S - (W)^ - (CHíX-, kde s je 0, 1,2 nebo 3, t je 0, 1,2 nebo 3, W znamená atom kyslíku nebo síry a w' je 0 nebo 1,

- 2 CZ 290002 B6

R²³ a R²⁴ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, n³ je 1,2 nebo 3,

R²⁵ znamená atom vodíku,

R²⁶ znamená atom vodíku, n⁴ je 0, 1 nebo 2,

P² j^e 0 a jejich farmaceuticky přijatelné soli a estery.

Vynález se rovněž vztahuje na farmaceutické prostředky obsahující farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo pomocnou látku ve směsi s účinným množstvím antibiotik, ve které antibiotikum je vybráno ze sloučenin vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelných solí a esterů.

Tyto prostředky je možno použít pro léčení nebo profylaxi bakteriálních infekcí u savců, včetně lidí tak, že se zmíněným savcům podá účinné množství antibiotika, kde toto antibiotikum je vybráno ze sloučenin vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů.

Vynález se rovněž vztahuje na způsoby výroby těchto sloučenin, které jsou detailněji dále popsány.

Ve sloučeninách podle vynálezu, kde R , R , R nebo R znamená alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, může jít o skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem majícím od 1 do 6, výhodně od 1 do 4 atomů uhlíku a příklady zahrnují methylové, ethylové, propylové, izopropylové, butylové, izobutylové, sek.butylové, terc.butylové, pentylové, izopentylové, neopentylové, 2-methylbutylové, 1-ethylpropylové, 4-methylpentylové, 3-methylpentylové, 2methylpentylové, 1-methylpentylové, 3,3-dimethylbutylové, 2,2-dimethylbutylové, 1,1— dimethylbutylové, 1,2-dimethylbutylové, 1,3-dimethylbutylové, 2,3-dimethylbutylové, 2-ethylbutylové, hexylové a izohexylové skupiny. Z těchto se dává přednost methylovým, ethylovým, propylovým, izopropylovým, butylovým, izobutylovým, sek.-butylovým a terc.butylovým skupinám a nejvíce se dává přednost methylovým a ethylovým skupinám.

Kde R² znamená alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, může jít o skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem majícím od 1 do 6 atomů uhlíku, výhodně od 1 do 4 atomů uhlíku, a příklady zahrnují methylové, ethylové, propylové, izopropylové, butylové, izobutylové, sekbutylové, terc.butylové, pentylové, izopentylové, neopentylové, 2-methylbutylové, 1-ethylpropylové, 4-methylpentylové, 3-methylpentylové, 2-methylpentylové, 1-methylpentylové, 3,3-dimethylbutylové, 2,2-dimethylbutylové, 1,1-dimethylbutylové, 1,2-dimethylbutylové, 1,3dimethylbutylové, 2,3-dimethylbutylové, 2-ethylbutylové, hexylové a izohexylové skupiny. Z těch se dává přednost těm alkylovým skupinám, které mají od 1 do 3 atomů uhlíku, výhodně methylovým, ethylovým a propylovým skupinám a nejvýhodněji methylovým skupinám.

Obecně ve sloučeninách podle vynálezu R¹ může znamenat atom vodíku nebo methylovou skupinu, výhodně může znamenat methylovou skupinu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou vytvářet soli. Příklady takových solí zahrnují: soli s alkalickými kovy, jako sodík, draslík nebo lithium, soli kovů alkalických zemin, jako baryum nebo vápník, soli s jinými kovy, jako hořčík nebo hliník, amonné soli, soli organických bází, jako soli s triethylaminem, diizopropylaminem, cyklohexylaminem nebo dicyklohexylaminem, a solí s bazickými aminokyselinami, jako lysin nebo arginin. Také tam, kde sloučenina podle vynálezu

- 3 CZ 290002 B6 obsahuje bazickou skupinu ve své molekule, může sloučenina tvořit adiční sole s kyselinami. Příklady takových adičních solí s kyselinami zahrnují: soli s anorganickými kyselinami, zejména halogenovodíkovými kyselinami, jako kyselina fluorovodíková, bromovodíková, jodovodíková, nebo chlorovodíková, kyselina dusičná, kyselina uhličitá, kyselina sírová nebo kyselina fosforečná, soli s nižšími alkylsulfonovými kyselinami, jako kyselina methansulfonové, trifluormethansulfonová nebo ethansulfonová, soli s arylsulfonovými kyselinami, jako kyselina benzensulfonová nebo kyselina p-toluensulfonová, soli s organickými karboxylovými kyselinami jako kyselina octová, fumarová, vinná, šťavelová, maleinová, jablečná, jantarová, benzoová, mandlová, askorbová, mléčná, glukonová nebo citrónová, a soli s aminokyselinami, jako kyselina glutamová nebo asparagová.

Sloučeniny podle vynálezu nezbytně obsahují nejméně jeden a možná několik asymetrických atomů uhlíku ve své molekule, a mohou tak vytvářet optické izomery. Ačkoliv jsou všechny takové sloučeniny vyjádřeny zde jediným molekulárním vzorcem, vynález se vztahuje jak na jednotlivé, izolované izomery a směsi, včetně jejich racemátů. Kde jsou užity stereospecifické syntetizační techniky nebo jsou užity opticky aktivní sloučeniny jako výchozí materiály, jednotlivé izomery se mohou vyrobit přímo nebo se mohou získat běžnými oddělovacími postupy. Izomeiy výhodně zahrnují sloučeniny, ve kteiých R¹ znamená methylovou skupinu a poloha 1 má konfiguraci R, sloučeniny ve kterých polohy 5 a 6 mají konfiguraci (5S, 6S), která je stejnou konfigurací jako konfigurace thienamycinu, a alfa-poloha mající hydroxyskupinu substituentu z polohy 6 má R-konfiguraci.

Ze sloučenin podle vynálezu jsou výhodnou třídou sloučenin, takové sloučeniny vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli a estery, ve kterých:

R¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

R² znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 3 atomů uhlíku,

R³ znamená atom vodíku nebo negativní náboj a

Q znamená skupinu vzorce

Q-VII nebo Q-VIII, definované svrchu, kde:

R²⁰, R²¹ a R²² jsou nezávisle voleny ze skupiny sestávající z atomů vodíku a nesubstituovaných alkylových skupin majících od 1 do 3 atomů uhlíku, nebo

R²⁰ a R²¹ nebo R²⁰ a R²² spolu znamená skupinu vzorce ~(CH₂)_S - (W)_w-- (CH₂)_t-, kde sje 1 nebo 2, t je 1 nebo 2, W znamená atom kyslíku nebo síry a w' je 0 nebo 1, za předpokladu, že (s + w' +1) je 2,3 nebo 4,

R²³ a R²⁴ jsou nezávisle voleny ze skupiny tvořené atomy vodíku a nesubstituovanými alkylovými skupinami majícími od 1 do 3 atomů uhlíku, n⁴ je 0,1 nebo 2,

P² je 0Součást podstaty vynálezu tvoří také způsob výroby antimikrobiálních karbapenemových derivátů obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů podle nároků 1 až 10, postup spočívá vtom, že se uvede do reakce karbapenemová sloučenina obecného vzorce Π

- 4 CZ 290002 B6

(Π) ve kterém R¹ má význam definovaný v nároku 1, R^L znamená sulfonyloxy- nebo fosforyloxyskupinu nebo skupinu vzorce -S(O)R^L1, R^L1 znamená Ci-Ce alkylovou skupinu, s přímým nebo rozvětveným řetězcem, Ci-C₆ halogenalkylovou skupinu, v níž je alkylová skupina ve svrchu uvedeném významu substituována atomem halogenu ze skupiny atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, Ci-Ce alkanoylamino Ci-C₆ alkyl s alkylovou i alkanoylovou částí s přímým nebo rozvětveným řetězcem, C2-C₆ alkenoylamino Ci-Cé alkyl, aiyl ze skupiny fenyl a naftyl, popřípadě substituovaný 1 až 3 substituenty, které mohou být stejné nebo různé a volí se ze skupiny atom fluoru, chloru, bromu, methyl, ethyl, propyl, izopropyl methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, izopropoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, izopropoxyskupina, methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl, terc.butoxykarbonyl, nitroskupina, karbamoyl, monoalkylkarbamoyl s alkylovou částí ze skupiny methyl, ethyl a propyl, dialkylkarbamoyl s alkylovými částmi ze skupiny methyl, ethyl a propyl, hydroxyskupina a kyanoskupina, nebo aromatickou heterocyklickou skupinu ze skupiny pyridyl a pyrimidyl, popřípadě substituované 1 až 3 substituenty, které mohou být stejné nebo různé a volí se ze skupiny atom fluoru, chloru nebo bromu, methyl, ethyl, propyl a izopropyl a

R^3p znamená karboxy-ochrannou skupinu, s pyrrolidinovým derivátem vzorce ΙΠ

kde

R^2p znamená jakoukoli skupinu nebo atomy, reprezentované R² uvedeném výše nebo jakoukoli takovou skupinu nebo atom, které byly chráněny, a znamená jakékoli skupiny nebo atomy ve významu Q uvedeném výše, které byly chráněny nebo jakoukoli takovou skupinu, ve které kvartémí atom dusíku je nahrazen odpovídajícím termálním atomem dusíku, a kde skupina Q¹¹ obsahuje kvartémí atom dusíku, sloučenina je doprovázena aniontem pro vyrovnání náboje, a je-li to třeba odstraní se jakékoliv ochranné skupiny, a popřípadě se vytvoří soli nebo estery produktu.

Specifické příklady sloučenin podle vynálezu jsou znázorněny ve vzorcích 1-1 a 1-2. V těchto vzorcích, Q má význam definovaný v tabulkách 1 až 13, tabulky 1 až 6 se vztahují ke vzorci 1-1 a tabulky 7 až 13 se vztahují ke vzorci 1-2. V každém z příkladů uvedených v tabulkách 1 až 6, každá ze skupiny R¹ a R² může být atom vodíku nebo methylová skupina, to je každá ze znázorněných voleb znamená čtyři možnosti:

- 5 CZ 290002 B6

a) R¹ = vodík, R² = vodík,

b) R¹ = methyl, R² = vodík,

c) R¹ = vodík, R² = methyl,

d) R¹ = methyl, R² = methyl.

- 6 CZ 290002 B6

Tabulka 1 sloučenina Q č.

sloučenina č.

l-l

1-7

1-2

1-4

—N X CH₃ _zch₃

Ί zCHj

CON 'H _eA-CONH₂ \—CONHj

X CHj

1-8

•N X CH₃

OCONHj

1-9

1-10 l-ll

•N H

- 7 CZ 290002 B6

Tabulka 1 - pokračování sloučenina Q

č.

sloučenina · *

c.

1-13

CONHj

CHj

1-14

1-18

1-24

Ή

- 8 CZ 290002 B6

Tabulka 1 - pokračování sloučenina

č.

sloučenina Q č.

Conh₂

>,ch₃

L ^xCH₃

1-32

^-N^oh

X\e,CH₃

V ^N ^x—conh₂ —N

Άκ

- 9 CZ 290002 B6

Tabulka 1 - pokračování sloučenina Q

č.

sloučenina Q w ·

c.

I

1-43

1-44

1-45

1-46

1-47

1-48

- 10CZ 290002 B6

Tabulka 1 - pokračování

- 11 CZ 290002 B6

Tabulka 2 η< <ι>

nina Q sloučenina č*

2-5

2-1

2-2

2-3

2-4

^sch₃

2-6

- 12CZ 290002 B6

Tabulka 2 - pokračování sloučenina Q

č.

sloučenina č.

2-18 —N >

Μ./^Λ

N CONH, |\Z

C₂H₅

·/

N

I NH;

- 13CZ 290002 B6

Tabulka 2 - pokračování sloučenina Q v

C.

sloučenina Q č*

I CH₃ch₃

NHj |'CH, ch₃

- 14CZ 290002 B6

Tabulka 2 - pokračování sloučenina Q

č.

sloučenina v

c.

2-43

2-44

2-45

2-46

2-47

2-48

- 15CZ 290002 B6

Tabulka 2 - pokračování sloučenina

č.

sloučenina v

c.

CONH₂

OCHj

H₃C

ch₃

2-58

H₃C

-16CZ 290002 B6

Tabulka 3

-17CZ 290002 B6

Tabulka 3 - pokračování

-18CZ 290002 B6

Tabulka 3 - pokračování

-19CZ 290002 B6

Tabulka 3 - pokračování

-20CZ 290002 B6

Tabulka 4 sloučenina Q wc.

-21 CZ 290002 B6

Tabulka 5

-22CZ 290002 B6

Tabulka 6

-23CZ 290002 B6

Tabulka 7 slou+_Rl ceni+ na č

7-1

7-2

7-3

7-5

Het

7-8

1-9

7-10

7-11

7-12

7-13

7-14

-24CZ 290002 B6

Tabulka 7 - pokračování sjL. č.

Het

7-15

7-16

7-17

7-18

7-19

7-20

ch₃

Oi₃

ΟΪ3

CHj

-25CZ 290002 B6

Tabulka 7 - pokračování

sl. č.	R^l	Het	sl. δ.	R¹ Het
7-27	H	«Η	7-33	Οϊ₃
7-28	H	Z X-co-._nA/\ nh	7-34	ch₃	CHj
7-29	H	CH,	735	ch₃	OOOH Z»/
7-30	H		7-36	®3	η^λ
		CHj			'-'’Ώ Ϊ / H
7J1	H	V--A-	7-37	H
7-32	ch₃	O-®-*/—\ »· 1 -Λ-NHj CHj	7-38	H
				t '-O / H

-26CZ 290002 B6

Tabulka 7 - pokračování

Het

sl. č.	R^l	Het	sl. č. .	R¹
7-39	H	N 1 H	-νΛ/Λ n N---'

7-40	H		“νΛ/Λ n H^Z
741	CHj	b-».	v—/

-27CZ 290002 B6

Tabulka 8 sl. č.

Het sl.

v

c.

Hit

8-1

8-2

8-5

8-7

8-8

8-9

8-10

HX^NH

-28CZ 290002 B6

Tabulka 8 - pokračování

Het sl.

v

c.

Het

8-12

8-13

8-14 ch₃

8-15 ch₃

8-16

8-17

8-18

8-19

8-21

-29CZ 290002 B6

Tabulka 8 - pokračování

Het

8-25 CHj

8-26 OHj

sl. č.

-30CZ 290002 B6

Tabulka 8 - pokračování

-31 CZ 290002 B6

Tabulka 9 sl. č.

Het

«χ'^ΝΗ

I

HyT^NH

I NHz sl. č.9-6

9-7

9-í

9-9

9-10

-32CZ 290002 B6

Tabulka 9 - pokračování sl. č.

Het

9-11 H

9-12 H

9-13 H

9-14 H

NHj

9-18 H

I

NHj

I NHj

-33CZ 290002 B6

10-1

10-2

10-3

104

10-5

10-6

10-7

10-3

10-9

10-10

10-11

10-12

-34CZ 290002 B6

Tabulka 10 - pokračování

-35CZ 290002 B6

Tabulka 11

sl* č.	R*	Het		R¹
11-1		'^\-co-n^)^nh₂ ‘1 H	11-8	ch₃
n-2	ch₃	)—CO——NHCH; A	11-9	ch₃
11-3	ch₃	^3__C0_/W*’ N NZ ^SCH₃ H	Π-ΙΟ	ch₃
11-4	ch₃	co-nQ>—NHC^H, 1 H	11-11	ch₃
11-5	ch₃	oo-n0^nA/^F H	11-12	ch₃
11-6	CHj	^n^~^CO_n0^>— H	11-13	ch₃
11-7	ch₃	ΟΟΝΉ, H	11-14	ch₃

Het

I H

-36CZ 290002 B6

Tabulka 11 - pokračování

Het

11-15

11-16

11-17

11-18

11-19

11-20

11-21

11-22

11-23

11-24

11-25

11-26

11-27

CHjF

-37CZ 290002 B6

Tabulka 11 - pokračování si.

c.

Het

11-37

11-32

11-33

11-39

11-34

11-35

11-36

11-38

-38CZ 290002 B6

Tabulka 11 - pokračování sl.

S.

Het sl. č.

Het

11-40 H

1141 H

1142 H

H43 H

1144

CHjF

1145· H

1146

1147

1148

1149

CH₃

-39CZ 290002 B6

Tabulka 11 - pokračování

sl. č.	R¹	Het	sl. č.	R¹	Het
11-51	ch₃	\ F¹ CO-N^S--1/ ^SH	11-56	CHj	\λ X Γ ί >—00— ti >—ti' *NH T A H
11-52	CHj	p-\ J § Ύ ? l	11-57	CHj	\ ch₂oh A
1143	0¾	\ NH s^‘^a>_N0>^/Xf	11-58	CHj	X CHzOH CHj —CO——tť *NH
		1 η hAh			H
11-54	ch₃	A Η NH
11-55	CHi	K A

-40CZ 290002 B6

Tabulka 12

-41 CZ 290002 B6

Tabulka 12 - pokračování

-42CZ 290002 B6

Tabulka 12 - pokračování

-43 CZ 290002 B6

Tabulka 12 - pokračování

Het

-44CZ 290002 B6

Tabulka 13

-45CZ 290002 B6

Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou následující látky:

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2~/2-(3-trimethylamoniumpynOlidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxyIát,

2-/2-( l,l-dimethyl-3-pyrrolidinioaminokarbonyl)pyrrolidin-4—ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

2-/2-/3-(karbamoylmethyldimethylammonio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin—4-ylthio/-6(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

2-/2-/3-/(2-hydroxyethyl)dimethylammonio/pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

2-/2-/3-/N-(2-fluorethyl)-N,N-dÍmethylammonio/pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin—4ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-/4-(3-methylimidazolio)piperidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-/3-(3-methylnnidazolio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, kyselina 2-/2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-(lhydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(4-amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(4-amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-(lhydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)pynOlidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-acetimidoylaminoazetidin-1 -ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-( 1-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-formimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová,

6-( l-hydroxyethyl)-l-methyI-2-/2-/3-(4-methyl-l, 1,2,4-triazolio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-( l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-/3-(4-methyl-l, 1,2,4-triazolio)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

-46CZ 290002 B6

6-(l-hydroxyethyI)-l-methyl-2-/2-(3-trimethylammonioazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-/3-(3-methyl-l-imidazolio)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

2-/2-/3-/3-(2-fluorethyl)-l-imidazolio/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-(lhydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

2-/2-/3-/(2-fluorethyl)dimethylammonio/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-(lhydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, kyselina 2-/2-(3-acetimidoylammoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4—ylthio/-6)-l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Nej výhodněj šími sloučeninami j sou:

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-(3-trimethylammoniopyrrolidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin4-ylthio/-l-karbapen-2-en-3-karboxylát,

2-/2-/3-(karbamoylmethyldimethylammonio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6(l-hydroxyethyl-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

2-/2-/3-/N-(2-fluorethyl)-N,N-dimethylammonio/pynOlidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidm-4ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-(l-hydroxyethyl}-l-methyl-2-/2-/3-(3-methylimidazolio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4—ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, kyselina 2-/2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-(lhydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(4-amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin—4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina/2-(4-amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4—ylthio/-6-(lhydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidm-4-ylthio/-6-)l-hydroxyethyl)-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-acetamidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová, kyselina 2-/2-(3-formimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová,

-47CZ 290002 B6 kyselina 2-/2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová,

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-/3-(4-methyl-l,l,2,4-triazolio)pynOlidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-(3-trimethylammonioazetidin-l-ylkarbonyl)pynOlidin-4— ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát,

6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-2-/2-/3-(3-methyl-l-imidazolio)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Sloučeniny podle vynálezu je možno připravit různými známými postupy pro výrobu sloučenin tohoto typu. Je například možno postupovat tak, že se uvede do reakce karbapenemový derivát

kde

R¹ má svrchu uvedený význam,

R^l znamená sulfonyloxyskupinu, fosforyloxyskupinu nebo skupinu obecného vzorce -S(O)R^L1, v níž R^lI znamená alkyl, halogenalkyl, alkanoylaminoalkyl, alkenoylaminoalkyl, aryl nebo aromatickou heterocyklickou skupinu a r3_P znamená ochrannou skupinu na karboxylové skupině, s pyrrolidinovým derivátem obecného vzorce ΙΠ

kde

R^2p znamená kteroukoliv ze skupin nebo atomů ve významu R² nebo jakoukoliv tuto skupinu nebo atom s navázanou ochrannou skupinou a

-48CZ 290002 B6

Q^p znamená jakoukoliv ze skupin nebo atomů ve významu Q nebo jakoukoliv takovou skupinu nebo atom s navázanou ochrannou skupinou nebo jakoukoliv z uvedených skupin, v níž je kvartémí atom dusíku nahrazen odpovídajícím terciárním atomem dusíku, přičemž v případě, že skupina Q^p obsahuje kvartémí atom dusíku, je sloučenina 5 spojena s aniontem opačného náboje, a v případě potřeby se převede nekvartémizovaný atom dusíku na odpovídající kvartémizovaný atom dusíku ve skupině obecného vzorce Q-I, Q-Π, Q-IV, Q-V nebo Q-VI nebo ve skupině ve významu Z, a v případě potřeby se ze sloučeniny odstraní jakékoliv ochranné skupiny, a popřípadě se získaný produkt převede na některou ze svých solí nebo na ester.

Probíhaj ící reakce j sou podrobněj i znázorněny v následuj ících reakčních schématech A a B

Reakční schéma A:

-49CZ 290002 B6

Reakční schéma B:

Ve vzorcích ve svrchu uvedených reakčních schématech mají symboly R¹, R², R³, R^2p, R^3p, Q^p a Q svrchu uvedený význam.

R^L1 znamená alkyl, například methyl, ethyl, propyl nebo izopropyl, halogenalkylovou skupinu, například fluormethyl, chlormethyl, fluorethyl, chlorethyl, fluorpropyl, difluormethyl, difluorethyl, dichlorethyl, trifluormethyl nebo trifluorethyl,

2-acetamidoethylovou skupinu,

2-acetamidovinylovou skupinu, arylovou skupinu, popřípadě substituovanou, například fenylovou nebo naftylovou skupinu, která je nesubstituovaná nebo může být substituována jedním až třemi stejnými nebo různými substituenty, například ze skupiny atom fluoru, chloru, bromu, methyl, ethyl, propyl, izopropyl, methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, izopropoxyskupina, methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl, terc.butoxykarbonyl, nitroskupina, karbamoyl, mono- a disubstituovaný alkylkarbamoyl, v němž alkylovou skupinou je například methyl, ethyl nebo propyl, dále hydroxyskupinu nebo kyanoskupinu, nebo

-50CZ 290002 B6 aromatickou heterocyklickou skupinu, popřípadě substituovanou, například pyridyl a pyrimidyl, přičemž tyto skupiny jsou nesubstituované nebo mohou být substituovány jedním až třemi substituenty, které mohou být stejné nebo různé, například ze skupiny atom fluoru, chloru, bromu, methyl, ethyl, propyl a izopropyl.

R^L2 znamená alkansulfonylovou skupinu, například methansulfonylovou, trifluormethansulfonylovou, ethansulfonylovou, propansulfonylovou, izopropansulfonylovou nebo butansulfonylovou skupinu, arylsulfonylovou skupinu, například fenylsulfonylovou, tolylsulfonylovou, například ptolylsulfonylovou skupinu nebo 1- nebo 2-naftylsulfonylovou skupinu, dialkylfosforylovou skupinu, například dimethylfosforylovou, diethylfosforylovou, dipropylfosfoiylovou, diizopropylfosforylovou, dibutylfosforylovou nebo dipentylfosforylovou skupinu, nebo diarylfosforylovou skupinu, například difenylfosforylovou nebo ditolylfosforylovou skupinu.

Q⁺ znamená kteroukoliv ze skupin, uvedených ve významu Q a obsahující kvartémí atom dusíku.

X znamená anion, například atom chloru, atom bromu, atom jodu, monomethylsulfátovou skupinu, sulfátovou skupinu, methansulfonyloxyskupinu, toluensulfonyloxyskupinu, trifluormethansulfonyloxyskupinu nebo fluorsulfonyloxyskupinu.

V případě, že některý ze symbolů Q^p nebo R^3p obsahuje ochrannou skupinu, je tuto skupinu možno volit z celé řady skupin, které jsou v oboru běžně známé a obvykle užívané pro ochranu hydroxylových skupin, iminoskupin, aminoskupin nebo karboxylových skupin. Tyto skupiny jsou podrobně popsány v řadě souborných publikací, například v publikaci T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley a Son. Příkladem těchto skupin mohou být například p-nitrobenzyloxykarbonylová skupina a p-nitrobenzylová skupina.

Jak již bylo svrchu uvedeno, R^3p znamená ochrannou skupinu na karboxylové skupině, jako alkylovou skupinu, například methyl, ethyl nebo terc.butyl, dále aralkylovou skupinu, například benzylovou, difenylmethylovou, 4-nitrobenzylovou nebo 2-nitrobenzylovou skupinu, alkenylovou skupinu, například allylovou, 2-chlorallylovou nebo 2-methylallylovou skupinu, halogenalkylovou skupinu, například 2,2,2-trichlorethylovou, 2,2-dibromethylovou nebo 2,2,2tribromethylovou skupinu, nebo 2-trimethylsilylethylovou skupinu.

Ve stupni AI reakčního schématu A se převádí karbapenamová sloučenina obecného vzorce IV na karbapenemovou sloučeninu obecného vzorce Ha reakcí s aktivní sulfonylovou nebo fosforylovou sloučeninou, obsahující skupinu, odpovídající skupině R^L2, například anhydrid alkansulfonové kyseliny nebo arylsulfonové kyseliny, dialkylfosforylhalogenid nebo diarylfosforylhalogenid.

Reakce se obvykle a s výhodou provádí v přítomnosti báze. Neexistuje žádné zvláštní omezení, pokud jde o povahu použité báze za předpokladu, že tato báze nemá žádný nepříznivý účinek na další Části molekuly, zejména na beta-laktamový kruh, výhodné příklady zahrnují organické báze, například triethylamin, diizopropylethylamin a 4—dimethylaminopyridin.

Příkladem sulfonylových nebo fosforylových sloučenin, které je při této reakci možno použít, zahrnují anhydridy alkansulfonových kyselin, například anhydrid kyseliny methansulfonové, anhydrid kyseliny trifluormethansulfonové nebo kyseliny ethansulfonové, anhydridy arylsulfonových kyselin, například kyseliny benzensulfonové nebo p-toluensulfonové, dále dialkylfosforylhalogenidy, například dimethylfosforylchlorid a diethylfosforylchlorid a také diarylfosforylhalogenidy, například difenylfosforylchlorid nebo difenylfosforylbromid. Z těchto

-51CZ 290002 B6 reakčních činidel jsou zvláště výhodnými látkami pro toto použití anhydrid kyseliny ptoluensulfonové a difenylfosforylchlorid.

Reakce se obvykle a s výhodou provádí v přítomnosti rozpouštědla. Neexistuje žádné zvláštní 5 omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá žádný nepříznivý účinek na průběh reakce nebo na reakční složky a že je může alespoň do určité míry rozpouštět. Jako příklady vhodných rozpouštědel je možno uvést halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid, 1,2-dichlorethan a chloroform, dále nitrily, například acetonitril a také amidy, například dimethylformamid a dimethylacetamid.

Reakce může dobře probíhat v širokém teplotním rozmezí a přesná reakční teplota není pro průběh postupu kritická. Obvykle je možno reakci snadno provádět při poměrně nízké teplotě, například -20 až 40 °C, aby bylo možno potlačit vznik jakýchkoliv vedlejších reakcí. Doba, jíž je zapotřebí pro uskutečnění reakce se rovněž může pohybovat v širokém rozmezí v závislosti na 15 celé řadě faktorů, zejména na reakční teplotě a na povaze reakčních složek a použitého rozpouštědla. Avšak za předpokladu, že se reakce provádí za výhodných podmínek, tak jak byly svrchu uvedeny, je doba 10 minut až 5 hodin obvykle dostatečná pro ukončení reakce.

Sloučeniny obecného vzorce Ua, získané tímto způsobem se neizolují obvyklou cestou, avšak ve 20 stupni A2 se reakční směs bez izolace produktu uvede do reakce smerkaptanem obecného vzorce Dia v přítomnosti báze, čímž se získá sloučenina obecného vzorce V. Tento výsledný produkt je pak v případě potřeby možno ve stupni A5 zbavit ochranných skupin, čímž se odstraní ochranné skupiny ve významu symbolů R^3p nebo Q^p, čímž se získá požadovaný výsledný produkt obecného vzorce I.

Pokud jde o použitou bázi v reakčním stupni A, neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy této báze za předpokladu, že báze nemá žádné nepříznivé účinky na ostatní části molekuly, zejména na beta-laktamový kruh. Jako výhodné příklady těchto bází je možno uvést organické báze, například triethylamin nebo diizopropylethylamin a anorganické báze, například 30 uhličitan draselný nebo uhličitan sodný. Reakce může probíhat ve velmi širokém teplotním rozmezí, přesná reakční teplota není pro průběh způsobu podle vynálezu kritická. Reakce obvykle dobře probíhá při teplotě v rozmezí -20 °C až teplota místnosti. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se rovněž může pohybovat v širokém rozmezí v závislosti na celé řadě faktorů, zejména na reakční teplotě a na povaze reakčních složek a použitého rozpouštědla. 35 Avšak za předpokladu, že se reakce provádí za svrchu uvedených výhodných podmínek, je k jejímu končení obvykle dostatečná doba 30 minut až 5 dnů.

Po ukončení reakce je možno požadovanou výslednou látku obecného vzorce V z reakční směsi izolovat jakýmkoliv běžným způsobem. Je například možno postupovat tak, že se z reakční směsi 40 oddestiluje rozpouštědlo, čímž se získá požadovaná výsledná látka. V případě nekvartémích sloučenin je možno postupovat také tak, že se odstraní rozpouštědlo, s výhodou odpařením a vzniklý odparek se extrahuje organickým rozpouštědlem a extrakt se promyje vodou a vysuší, načež se rozpouštědlo odpaří. Takto získaný výsledný produkt je v případě potřeby možno dále čistit některým zběžných postupů, například při krystalování, opakovaným srážením nebo 45 různými chromatografíckými postupy, zvláště chromatografií na sloupci. V případě potřeby je pak produkt možno čistit také tak, že se reakční směs přímo opakovaně sráží k získání tohoto produktu. Jiný možný způsob spočívá v tom, že z takto získané sloučeniny obecného vzorce V je možno odstranit ve stupni A5 ochrannou skupinu bez izolace tohoto produktu.

V případě potřeby je ve stupni A5 možno sloučeninu obecného vzorce V, získanou ve stupni A2 převést na derivát karboxylové kyseliny obecného vzorce I tak, že se odstraní ochranná skupina R^3p na karboxylové skupině některým zběžných postupů. Povaha reakce, která bude užita pro odstranění ochranné skupiny bude samozřejmě záviset na povaze této ochranné skupiny, jak je v oboru běžně známo. Například v případě, že ochranná skupina může být 55 odstraněna redukcí, tak jak tomu je například v případě halogenalkylových skupin, aralkylových

-52CZ 290002 B6 skupin, a benzhydrylové skupiny, je možno uvést sloučeninu obecného vzorce V do reakce s redukčním činidlem. Příkladem výhodných redukčních činidel, která lze při této reakci použít mohou být zinek a kyselina octová v případě, že ochrannou skupinou na karboxylové skupině je halogenalkylová skupina, například 2,2-dibromethylová nebo 2,2,2-trichlorethylová skupina.

V případě, že touto ochrannou skupinu je aralkylová skupina, například benzylová nebo 4nitrobenzylová skupina nebo benzhydrylová skupina, je jako redukční činidlo možno užít simík alkalického kovu, například simík sodný nebo simík draselný nebo také vodík v přítomnosti katalyzátoru redukce, například paladia na aktivním uhlí. Redukce se obvykle a s výhodou provádí v přítomnosti rozpouštědla. Neexistuje žádné zvláštní omezení, pokud jde o povahu použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá žádný nepříznivý účinek na průběh reakce nebo na použité reakční složky a že tyto složky může alespoň do určité míry rozpouštět. Jako příklady vhodných rozpouštědel je možno uvést alkoholy, například methanol nebo ethanol, ethery, například tetrahydrofuran nebo dioxan, nasycené alifatické kyseliny, například kyselinu octovou a dále směsi kteréhokoliv tohoto organického rozpouštědla nebo většího počtu těchto rozpouštědel s vodou. Reakce může probíhat v širokém teplotním rozmezí, přičemž přesná reakční teplota není pro průběh způsobu podle vynálezu kritická. Reakce obvykle velmi dobře probíhá při teplotě v rozmezí 0 °C až teplota místnosti. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se rovněž může pohybovat v širokém rozmezí v závislosti na celé řadě faktorů, zejména na reakční a na povaze reakčních činidel a použitého rozpouštědla. Avšak za předpokladu, že se reakce provádí za výhodných podmínek, tak jak byly svrchu uvedeny, bude pro ukončení reakce obvykle dostatečná doba 5 minut až 12 hodin.

V případě, že symbol Q^p a/nebo R^2p obsahuje ochrannou skupinu na hydroxylové skupině, iminoskupině, aminoskupině nebo na karboxylové skupině, například p-nitrobenzyloxykarbonylovou skupinu nebo p-nitrobenzylovou skupinu, je možno tuto skupinu odstranit současně s odstraněním svrchu uvedené ochranné skupiny na karboxylové skupině v případě, že R^3p znamená p-nitrobenzylovou skupinu.

Po ukončení reakce je možno požadovaný výsledný produkt z reakční směsi izolovat některým zběžných postupů. Je například možno postupovat tak, že se nerozpustný podíl, který se z reakční směsi vysráží, odfiltruje a pak se rozpouštědlo odstraní oddestilováním. Takto získaný výsledný produkt je pak v případě potřeby možno dále čistit některým z běžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením nebo různými chromatografickými postupy, zvláště chromatografíí na sloupci.

V případě, že Q znamená jednu ze skupin, které obsahují kvartémí atom dusíku, je možno takové sloučeniny připravit z merkaptanu obecného vzorce Ula, v němž Q^p znamená odpovídající terciární atom dusíku. V tomto případě se ve stupni A2 uvede sloučenina obecného vzorce Ha do reakce s tímto merkaptanem obecného vzorce Ula za vzniku sloučeniny obecného vzorce V. Tato látka se pak převádí na odpovídající kvartémí amoniovou sloučeninu v následujícím stupni A3 a pak se v případě potřeby ve stupni A4 odstraní ochranné skupiny, čímž se získá požadovaný výsledný produkt obecného vzorce I.

Kvartémizaci ve stupni A3 je možno provést při použití známých postupů, například tak, že se sloučenina obecného vzorce V uvede do reakce se sloučeninou obecného vzorce RX, v němž R znamená alkylovou skupinu, popřípadě substituovanou, může jít o některou ze skupin, které byly uvedeny svrchu u skupin, vázaných na kvartémí atom dusíku ve skupinách ve významu Q nebo Z. X znamená atom halogenu, například atom chloru, bromu nebo jodu, monomethylsulfátovou skupinu, sulfátovou skupinu nebo sulfonyloxyskupinu, například methansulfonyloxyskupinu, toluensulfonyloxyskupinu, trifluormethansulfonyloxyskupinu nebo fluorsulfonyloxyskupinu. Při reakci, při níž se převádí atom dusíku na kvartémí atom, je možno sloučeniny obecného vzorce V a RX uvést do reakce bez použití rozpouštědla nebo v rozpouštědle. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy tohoto rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá žádný nepříznivý vliv na průběh reakce nebo na použité reakční složky a že tyto složky může alespoň do určité míry rozpouštět. Jako příklady vhodných

-53 CZ 290002 B6 rozpouštědel je možno uvést halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid, 1,2dichlorethan nebo chloroform, nitrily, například acetonitril, dále ethery, například tetrahydrofuranu, estery, například ethylacetát a amidy, například dimethylformamid nebo dimethylacetamid. Reakce může probíhat ve velmi širokém teplotním rozmezí, přičemž přesná reakční teplota není pro průběh způsobu podle vynálezu kritická. Obvykle tato reakce velmi dobře probíhá při teplotách v rozmezí -20 až 100 °C.

Po ukončení reakce je možno požadovaný výsledný produkt obecného vzorce VI z reakční směsi izolovat běžnými postupy. Je například možno postupovat tak, že se rozpouštědlo reakční směsi jednoduchým způsobem odpaří. Získaný produkt je možno v případě potřeby dále čistit běžnými postupy, například překrystalováním, opakovaným srážením nebo různými chromatografíckými postupy, zvláště chromatografií na sloupci. Požadovaný výsledný produkt je také možno čistit tak, že se produkt z reakční směsi sráží. V případě potřeby je možno ze sloučeniny obecného vzorce VI ve stupni A4 odstranit ochrannou skupinu na karboxylové skupině bez izolace této sloučeniny, což je možno uskutečnit obdobným způsobem, který byl popsán svrchu při popisu reakčního stupně A5.

Karboxylovou skupinu v takto získané výsledné sloučenině je možno převést na esterovou skupinu, zvláště na takovou skupinu, která za fyziologických podmínek podléhá hydrolýze, a to běžným způsobem. V případě, že R³ je esterová skupina, podléhající hydrolýze za fyziologických podmínek, například alkanoyloxyalkylová skupina, jako pivaloyloxymethylová nebo acetoxymethylová skupina, alkoxykarbonyloxyalkylová skupina, například l-(ethoxykarbonyloxy)ethylová skupina nebo l-(izopropoxykarbonyloxy)ethylová skupina nebo ftalidylová, indanylová, methoxymethylová skupina nebo 2-oxo-5-methyl-l,3-dioxolen-4-ylmethylová skupina, není zapotřebí sloučeninu obecného vzorce I zbavovat ochranných skupin a je možno ji přímo užít pro podávání nemocným vzhledem k tomu, že taková sloučenina bude v organismu za fyziologických podmínek hydrolyzována.

Sloučeninu obecného vzorce V je možno připravit také ze sloučeniny obecného vzorce lib, jak je znázorněna v reakčním schématu B. Sloučeninu obecného vzorce lib je možno vyrobit způsobem, popsaným ve zveřejněné japonské patentové přihlášce Sho-62-30781 (Kokai). Reakce sloučeniny obecného vzorce lib s merkaptanem obecného vzorce lila v přítomnosti báze za vzniku sloučeniny obecného vzorce V je možno obvykle a s výhodou provádět v inertním rozpouštědle. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá žádný nepříznivý účinek na průběh reakce nebo na použité reakční složky a že je může alespoň do určité míry rozpouštět. Jako příklady vhodných rozpouštědel je možno uvést tetrahydrofuran, acetonitril, dimethylformamid, dimethylsulfoxid, vodu a směsi kterýchkoliv dvou nebo většího počtu těchto rozpouštědel. Neexistuje také žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použité báze za předpokladu, že tato báze neovlivní ostatní části molekuly, zvláště beta-laktamový kruh. Příkladem vhodných bází mohou být organická báze, například diizopropylethylamin, triethylamin, N-methylpiperidin nebo 4-dimethylaminopyridin a anorganické báze, například uhličitan draselný nebo hydrogenuhličitan sodný. Reakci je možno provádět ve velmi širokém teplotním rozmezí, přičemž přesná reakční teplota není pro průběh způsobu podle vynálezu kritická. Obvykle reakce dobře probíhá při poměrně nízkých teplotách, při nichž nedochází ke vzniku vedlejších reakcí, obvykle se reakce provádí při teplotě -20 až 40 °C. Doba, jíž; je zapotřebí pro ukončení reakce se rovněž může pohybovat v širokém rozmezí v závislosti na celé řadě faktorů, zvláště na reakční teplotě a na povaze použitých reakčních složek a použitého rozpouštědla. Avšak za předpokladu, že se reakce provádí za výhodných podmínek, tak jak byly svrchu uvedeny, bude obvykle dostatečná reakční doba 5 minut až 5 dnů.

Po ukončení reakce je možno požadovanou sloučeninu obecného vzorce V z reakční směsi izolovat běžnými postupy, například tak, jak bylo uvedeno u reakčního schématu A. Takto izolovaný výsledný produkt je pak možno dále zpracovávat ve stupních B2 a B3 nebo ve stupni B4, tyto stupně odpovídají stupňům A3 a A4 a stupni A5 v reakčním schématu A.

-54CZ 290002 B6

Kteroukoliv ze sloučenin, připravených svrchu uvedeným způsobem je možno převést na sůl a/nebo esterifíkovat běžným způsobem, známým v oboru.

Sloučeniny podle vynálezu mají velmi dobrou antibakteriální účinnost při širokém spektru tohoto účinku a mají schopnost působit inhibici enzymu beta-laktamázy na rozdíl od většiny sloučenin thienamycinového typu, které se v organismu savců metabolizují. Mimoto jsou deriváty podle vynálezu velmi stálé proti působení dehydropeptidázy I, o níž je známo, že katalyzuje inaktivaci sloučenin thienamycinového typu. U derivátů podle vynálezu je možno prokázat silnou antibakteriální účinnost proti široké skále patogenních bakterií včetně gram-positivních bakterií, jako jsou Staphylococcus aureus, a Enterococcus faecalis, gram-negativních bakterií, jako jsou Escherichia coli, čeleď Shigella, Streptococcus pneumaniae, čeledi Próteus, Serratia, Enterobacter a Pseudomonas a také anaerobních bakterií, jako je například Bacteroides fragilis.

Antibakteriální účinnost byla stanovena ředěním na agarových plotnách, byly stanoveny minimální inhibiční koncentrace sloučenin podle vynálezu proti řadě běžných patogenních bakterií, tyto údaje jsou shrnuty v následující tabulce 14. V této tabulce jsou sloučeniny podle vynálezu označeny číslem příkladu, v němž je uveden způsob jejich výroby.

Použité mikroorganismy jsou identifikovány následujícím způsobem:

A: Staphylococcus aureus 209P,

B: Escherichia coli NIHJ,

C: Pseudomonas aeruginosa 1001.

Tabulka 14

sloučenina z př. č.	A	mikroorganismus B	C
11	0,02	0,02	0,2
12	<0,01	<0,01	0,1
35	<0,01	<0,01	0,1
36	<0,01	^0,01	0,1
43	<0,01	^0,01	0,1
imipenem	<0,01	0,05	3,1

Tyto výsledky prokazují, že účinnost sloučeniny podle vynálezu je obecně vyšší než účinnost imipenemu. Mimoto jsou však tyto látky na rozdíl od imipenemu odolné proti účinku enzymů dehydropeptidázy I a beta-laktamázy.

Deriváty kyseliny karbapenem-3-karboxylové podle vynálezu jsou tedy vhodné pro použití k léčení a profylaxi infekcí, způsobených uvedenými patogenními bakteriemi. Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat v jakékoliv běžné formě, léková forma bude záviset na léčeném onemocnění, na věku, na stavu nemocného a na řadě dalších faktorů, tak jak je v oboru obecně známo. Například v případě perorálního podání je sloučeniny podle vynálezu možno zpracovat na tablety, kapsle, granuláty, prášky nebo sirupy. V případě parenterálního podání je možno účinné látky zpracovat například na injekční přípravky, které jsou vhodné pro nitrožilní nebo nitrosvalové podání.

Dávka účinné látky se rovněž může pohybovat v širokém rozmezí v závislosti na věku a tělesné hmotnosti nemocného, příznacích onemocnění a na stavu nemocného a také na způsobu podání. V případě dospělého člověka se předpokládá denní dávka v rozmezí 100 až 3000 mg, přičemž

-55CZ 290002 B6 tuto dávku je možno podat najednou nebo rozděleně v dílčích dávkách, podávaných ve stanovených časových intervalech.

Příprava klíčových sloučenin podle vynálezu je uvedena dále v příkladech, příprava výchozích materiálů v následujících přípravách. Všechny zde užité velikosti jsou ve standardní Tylderově stupnici.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (1R,5 S ,6S)—6—/(1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3 S)-3-trimethylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

CH_d©Z ³IN - CH\

CH₃

1(1) (2S,4S)-2-/(3 S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidm

924 mg kyseliny (2S,4S)-4-{4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové byly rozpuštěny v 10 ml suchého tetrahydrofuranu a výsledný roztok byl ochlazen na -20 °C. Po přidání 209 mg triethylaminu a poté 250 mg pivaloylchloridu byla směs při stejné teplotě míchána 5 minut. Po této době byla do reakce přidána směs 651 mg (3S)—3— dimethylaminopyrrolidintrifluoracetátu, 560 mg diizopropylethylaminu a 7 ml suchého acetonitrilu, směs byla pozvolna zahřáta a poté 1 hodinu míchána při 0 °C. Po přefiltrování reakční směsi bylo rozpouštědlo odstraněno odpařením při sníženém tlaku. Výsledný odparek byl zředěn ethylacetátem. Takto zředěný roztok byl promyt nejdříve vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, nakonec byl vysušen bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku byl výsledný zbytek čištěn chromatografií na sloupci silikagelu za užití směsi acetonitrilu a methanolu v poměru 3 : 1 jako eluentu, čímž bylo získáno 884 mg žádané sloučeniny ve formě prášku.

Infračervené absorpční spektrum (KBr) cm^-1:

1710,1654,1512, 1345, 1109, 857, 738.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxidu, 270 MHz): ppm:

1,49 - 3,31 (15H, multiplet), 3,35 - 3,57 (2H, multiplet), 3,71 - 4,00 (6H, multiplet), 4,44 - 4,56 (1H, multiplet), 5,00-5,21 (2H, multiplet), 6,88 (2H, dublet, J = 8,79 Hz), 7,27 (2H, dublet, J = 8,31 Hz), 7,51 - 7,61 (2H, multiplet), 8,19 - 8,26 (2H, multiplet).

(2) (2S,4S)-2-/(3 S)-3-dimethylamino-l -pyrrolidinylkarbonyl/-4-merkapto-1 -{4-nitro· benzyloxykarbonyl)pyrrolidintrifluormethansulfonát

-56CZ 290002 B6

845 mg (2S,4S)-2-/(3 S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 1 výše, bylo uvedeno do suspenze v 1,7 ml anisolu, do této suspenze bylo v průběhu chlazení v ledové lázni přidáno 8,5 ml kyseliny trifluoroctové a 0,28 ml kyseliny trifluormethansulfonové a potom byla směs při teplotě místnosti míchána 1 hodinu. Cyklus zahrnují odstranění rozpouštědla odpařením za nižšího tlaku, promytí, odparku hexanem z důvodu odstranění anisolu, přidání diethyletheru do směsi, chlazené směsi na -78 °C ke ztužení produktu a rozdrcení produktu s následnou dekantací byl několikrát opakován, čímž bylo získáno 1,44 g žádaného produktu v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr) cm'¹:

1705, 1656, 1523, 1348, 857.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂0,270 MHz) ppm:

1,70 - 4,10 (18H, multiplet), 4,47 - 4,66 (1H, multiplet), 5,04 - 5,27 (2H, multiplet), 7,51 - 7,65 (2H, multiplet).

(3) 4-nitrobenzyl (1 R,5 S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3 S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

544 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenamkarboxylátu byly rozpuštěny v 5,4 ml suchého acetonitrilu. Do výsledného roztoku byly v ledové lázni po kapkách přidány 424 mg difenylfosforylchloridu a 204 mg diizopropylethylaminu a směs byla potom míchána při téže teplotě jednu hodinu. Poté byl v ledové lázni po kapkách přidán roztok 582 mg diizopropylethylaminu a 1,10 g (2S,4S)-2-/(3S)-3-dimethylamino-lpyrrolidinylkarbonyl/-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidintrifluormethansulfonátu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni (2) výše, ve 4 ml suchého acetonitrilu a pak byla směs 6 hodin míchána při stejné teplotě. Po této době bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku a výsledný odparek byl po rozpuštění v methylenchloridu promyt vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, opět vodou a nakonec nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vodné promývací frakce byly extrahovány methylenchloridem a organická fáze byla spojena s methylenchloridovým extraktem. Výsledná směs byla vysušena bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku byl zbytek čištěn chromatografií na sloupci silikagelu za užití směsi methylenchloridu a methanolu v poměru 14 : 1 eluentu, čímž bylo získáno 814 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr) u_max cm'¹:

1773,1711,1650,1607,1522,1346, 854,738.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,15 (3H, dublet, J = 3,42 Hz), 1,18 (3H, dublet, J = 3,90 Hz), 2,09 (2H, dublet, J = 8,3 Hz), 2,17 (1H, singlet), 2,49-2,51 (1H, multiplet), 2,70-3,93 (16H, multiplet), 3,95-4,08 (1H, multiplet), 4,11- 4,20 (1H, multiplet), 4,23-4,29 (1H, multiplet), 4,55-4,66 (1H, multiplet), 5,06-5,75 (4H, multiplet), 7,53-7,74 (4H, multiplet), 8,21-8,25 (4H, multiplet).

1(4) (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-trimethylamoniopyrrolidin-l-ylkarbonyl/pynOlidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

771 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-6-/(lR)-l-hydroxyethy!/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného ve stupni 3 výše, byl rozpuštěn v 8 ml suchého acetonitrilu a po přidání 182 mg methyltrifluormethansulfonátu za chlazení v ledové lázni byla směs jednu hodinu míchána při téže teplotě. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku byl

-57CZ 290002 B6 získaný práškový produkt rozpuštěn ve směsi 7 ml tetrahydrofuranu a 3 ml vody a potom byla tato směs jednu hodinu hydrogenována při teplotě místnosti za přítomnosti katalyzátoru, 10 % paladia na uhlíku. Po této době byl katalyzátor odfiltrován a tetrahydrofuran oddestilován za nižšího tlaku, vodná fáze byla promyta diethyletherem a zkoncentrována odpařením za nižšího tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografii na iontoměničích [Dowex 1-X4, 0,295 0,147 mm (50 až 100 mesh) Ci FORM, Dow Chemical] za užití vody jako eluentu. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly odděleny a zmrazením usušeny, čímž bylo získáno 460 mg surového produktu v podobě prášku.

Celý tento surový produkt byl aplikován na kolonu (Cosmosil 75 Cig-prep, vyrobilo Nacalai, „Cosmosil“ je značka) a eluován vodou. Frakce dosahující žádanou sloučeninu byly spojeny, zkoncentrovány odpařením za nižšího tlaku a lyofilizovány, čímž bylo získáno 182 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) t>_max cm^-1:

1756,1656,1599,1479, 1373.

NMR-spektrum (270 MHz, D₂O, inertní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný) ppm:

1,21 (3H, dublet, J = 6,83 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 1,95 - 2,10 (1H, multiplet), 2,40 -

2.65 (2H, multiplet), 3,00 -3,15 (1H, multiplet), 3,21 (6H, singlet), 3,23 (3H, singlet), 3,37 (1H, dublet dubletu, J = 7,32 a 9,28 Hz), 4,20 - 4,30 (2H, multiplet), 3,40 - 4,20 (9H, multiplet),

4.65 - 4,75 (1H, multiplet).

Příklad 2 (1 R,5S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-trimethylamoniopyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochloridu

2( 1) (2S,4S)-2-/(3R)-3-dnnethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-4—(4—methoxybenzylthio)—1—(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

2,60 g kyseliny (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidmkarboxylové bylo rozpuštěno ve 20 ml suchého tetrahydrofuranu a výsledný roztok byl ochlazen na -20 °C. Po přidání nejdříve 590 mg triethylaminu a potom 704 mg pivaloylchloridu byla výsledná směs 5 minut míchána při téže teplotě. Potom byly do směsi v tomto pořadí přidány 2,00 g (3R)-3-dimethylaminopynOlidintrifluoracetátu, 788 mg diizopropylethylaminu a 20 ml suchého acetonitrilu, směs byla pozvolna zahřáta a poté míchána při 0 °C po jednu hodinu. Po přefiltrování reakční směsi bylo rozpouštědlo odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl zředěn ethylacetátem a takto zředěný roztok byl promyt nejdříve vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vše bylo vysušeno bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku

-58CZ 290002 B6 byl zbytek čištěn chromatografii na sloupci silikagelu při eluci směsí acetonitrilu a methanolu v poměru 3:1, čímž bylo získáno 2,56 g žádané sloučeniny v podobě prášku.

NMR-spektrum (KBr) cm^-1:

1710,1655, 1512, 1344, 1110, 857, 738.

NMR-spektrum hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,28 - 3,31 (15H, multiplet), 3,40 - 3,63 (2H, multiplet), 3,72 - 3,92 (6H, multiplet), 4,36 - 4,53 (1H, multiplet), 4,95-5,22 (2H, multiplet), 6,88 (2H, dublet, J= 8,79 Hz), 7,27 (2H, dublet, J = 8,31 Hz), 7,51 - 7,61 (2H, multiplet), 8,18 - 8,26 (2H, multiplet).

2(2) (2S,4S)-2-/(3R)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-4-merkapto-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidintrifluormethansulfonát

2,56 g (2S,4S)-2-/(3R)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)-l(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 1 výše, bylo uvedeno do suspenze v 5,1 ml anisolu. Do výsledné suspenze bylo v ledové lázni přidáno 25,5 ml kyseliny trifluoroctové a 0,83 ml kyseliny trifluormethansulfonové. Směs byla potom 3 hodin míchána při teplotě místnosti. Po této době bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku, do zbytku byl přidán 1,2-dichlorethan a přebytečná kyselina byla odstraněna azeotropickou destilací. Zbytek byl dekantován za užití hexanu a poté rozmělněn s diethyletherem, směs byla potom dekantována a vysušena odpařením za nižšího tlaku za zisku

3,65 g žádaného produktu v podobě prášku.

2(3) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-dimethylamino-l-pyrrolidmylkarbonyl/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

1,71 g 4—nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenem-3karboxylátu bylo rozpuštěno v 17 ml suchého acetonitrilu. Do tohoto roztoku bylo za chlazení v ledové lázni po kapkách přidáno 1,34 mg difenylfosforylchloridu a 646 mg diizopropylethylaminu a poté byla směs jednu hodinu míchána při téže teplotě. Po této době byl do směsi přidán po kapkách roztok 1,84 g diizopropylethylaminu a 3,65 g (2S,4S)-2-/(3R)-3-dimethylamino-lpyrrolidinylkarbonyl/—4-merkapto-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinylkarbonyl/-4merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidintrifluormethansulfonátu, připraveného podle stupně 2) výše, ve 35 ml suchého acetonitrilu, načež byla směs míchána při stejné teplotě 7 hodin. Po uplynutí této doby bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku a zbytek rozpuštěn v methylenchloridu. Výsledný roztok byl promyt nejdříve vodou, potom vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, opět vodou a nakonec nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vodné promývací frakce byly extrahovány methylenchloridem, organická fáze byla spojena s extraktem a vysušena bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla destilací při nižším tlaku byl zbytek čištěn chromatografii na koloně silikagelu za užití methylenchloridu a methanolu v poměru 12 : 1 jako eluentu, čímž bylo získáno 2,60 g žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr) cm'¹:

1773, 1712,1652, 1608,1523, 1346, 855, 738.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,14 (3H, dublet, J= 3,91 Hz), 1,18 (3H, dublet, J= 4,39 Hz), 2,07 (2H, singlet), 2,16 (2H, dublet, J= 4,88 Hz), 2,49-2,51 (1H, multiplet), 2,7 -4,2 (16H, multiplet), 3,9-4,2 (16H, multiplet), 3,9- 4,0 (1H, multiplet), 4,2- 4,3 (1H, multiplet), 4,4- 4,6 (1H, multiplet), 5,0 - 5,5 (4H, multiplet), 7,5 - 7,8 (4H, multiplet), 8,2 - 8,3 (4H, multiplet).

-59CZ 290002 B6

2(4) (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-trimethylamoniumpyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyiTolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3karboxyláthydrochlorid

1,30 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinkarbonyl/6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pynOlidin-4-ylthio/-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 3) výše, bylo rozpuštěno ve 13 ml suchého acetonitrilu. V ledové lázni bylo k roztoku přidáno 307 mg methyltrifluormethansulfonátu a tato směs byla poté při stejné teplotě míchána jednu hodinu.

io Prášek získaný odpařením rozpouštědla za nižšího tlaku byl rozpuštěn ve směsi 12 ml tetrahydrofuranu a 5 ml vody. Vzniklá směs byla potom 1,5 hodiny hydrogenována při teplotě místnosti za přítomnosti katalyzátoru - 3 g 10% paladia na uhlí. Po této době byl katalyzátor odfiltrován a tetrahydrofuran oddestilován při nižším tlaku. Vodná fáze byla promyta diethyletherem a zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Odparek byl podroben chromatografií na iontoměničích [Dowex 1-X4, 0,295 až 0,147 mm (50 až 100 mesh), Cj FORM, Dow Chemical] za užití vody jako eluentu. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly odděleny a zmrazením vysušeny, čímž byl získán surový produkt v podobě prášku. Tento surový produkt byl aplikován na kolonu (Cosmosil 75 Cig-prep, Nacalai) a eluován vodou. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly spojeny, zkoncentrovány odpařením za nižšího tlaku a zmrazením vysušeny, čímž byly získány 173 mg požadované sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) cm¹:

1758,1656,1600,1479,1374.

NMR-spektrum (270 MHz, D₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný) ppm:

1,21 (3H, dublet, J = 7,32 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 1,95 - 2,10 (1H, multiplet), 2,45 -

2,60 (2H, multiplet), 3,05-3,25 (1H, multiplet), 3,20 (6H, singlet), 3,21 (3H,singlet), 3,38 (1H, dublet dubletu, J = 7,32 a 9,27 Hz), 3,45 - 3,55 (2H, multiplet), 3,60 - 4,20 (9H, multiplet), 30 4,20 - 4,35 (2H, multiplet), 4,63 - 4,72 (1H, multiplet).

Příklad 3 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S}-2-/(3S)-l,l-dimethyl-2-pyrrolidinioaminokarbonyl/pyrrolidin-4y lthio/—6—/(1R)-1 -hydroxyethy 1/-1 -methyl-1 -karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

3(1) (2S,4S)-4-(4-methoxyben2ylthio)-2-/(3 S)-l-methyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyll-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

Po rozpuštění 7,99 g kyseliny (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové v 80 ml suchého acetonitrilu bylo do tohoto roztoku přidáno 45 3,05 g Ν,Ν'-karbodiimidazolu a tato směs byla 2 hodiny míchána při teplotě místnosti. Po této

-60CZ 290002 B6 době reakční směs ochlazena na 0 °C a byl do ní přidán roztok 3,34 g (3S)-3-amino-lterc.butoxykarbonylpyrrolidinu ve 30 ml suchého acetonitrilu. Směs byla poté míchána 20 minut při téže teplotě, 1,4 hodiny při teplotě místnosti a 45 minut při 32 °C. Po této době byla reakční směs zkoncentrována odpařením při nižším tlaku, zředěna 200 ml ethylacetátu, a potom promyta dvakrát vodou a dvakrát nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Po vysušení organické fáze bezvodým síranem hořečnatým bylo rozpouštědlo oddestilováno při nižším tlaku. Zbytek rekrystalizoval z diethyletheru za zisku 9,11 g prášku.

1,00 g takto získaného prášku byl potom smíchán s lOml ethylacetátu a rozpuštěn zahříváním. Po přidání 2,5 ml 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v ethylacetátu byla směs 30 minut zahřívána na teplotu varu pod zpětným chladičem. Poté bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku, do zbytku byl přidán ethylacetát a znovu rozpouštědlo bylo odstraněno destilací při nižším tlaku, aby byla odstraněna i kyselina. Po snížení výsledného zbytku s diethyletherem byla směs dekantována. Oddestilováním rozpouštědla při nižším tlaku bylo získáno 630 mg hygroskopického prášku.

2,5 g takto získaného prášku bylo smícháno s 25 ml dioxanu. Při 10 °C byly do směsi přidány 2,00 ml 5N vodného roztoku hydroxidu sodného a 0,47 ml dimethylsulfátu, poté byla směs míchána při téže teplotě 50 minut a při teplotě místnosti 40 minut. Po této době bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku a zbytek byl zředěn ethylacetátem. Výsledná organická fáze byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Po extrakci vodné fáze ethylacetátem byly organické fáze spojeny a vysušeny bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací při nižším tlaku a získaný zbytek byl podroben chromatografíi na koloně silikagelu s využitím vzestupné eluční metody, jako eluent byla užita směs ethylacetátu a methanolu v poměru od 1 : 1 do 1 : 5. Tak bylo získáno 850 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum cm^-1:

1713, 1648, 1523, 1346, 1244, 1030, 850, 738.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm.

1,87-3,71 (16H, multiplet), 3,79 (3H, singlet), 4,15-4,50 (2H, multiplet), 5,10-5,30 (2H, multiplet), 6,82 -6,87 (2H, multiplet), 7,19- 7,23 (2H, multiplet), 7,49 (2H, dublet, J = 8,79 Hz), 8,22 (2H, dublet, J = 8,30 Hz).

3(2) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-l-methyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/-1 -(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

834 mg (2S,4S)-4-(4—methoxybenzylthio)-2-/(3S)-l-methyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/-l(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného podle stupně 1) výše, byly uvedeny d suspenze v 1,7 ml anisolu. Do této suspenze bylo v ledové lázni přidáno 8,6 ml kyseliny trifluoroctové a 0,28 ml kyseliny trifluormethansulfonové a poté byla výsledná směs míchána jednu hodinu při teplotě místnosti. Po této době bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku, do zbytku byl přidán 1,2-dichlorethan a kyselina byla odstraněna azeotropickou destilací. Výsledný zbytek byl dekantován s hexanem a poté rozetřena s diethyletherem. Směs byla potom dekantována usušena odpařením při nižším tlaku za získání soli v podobě prášku.

Po rozpuštění 572 g 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-lkarbapenam-3-karboxylátu v 5,7 ml suchého acetonitrilu bylo do výsledného roztoku v ledové lázni po kapkách přidáno 445 mg difenylfosforylchloridu a 214 mg diizopropylethylaminu. Poté byla směs míchána při téže teplotě po jednu hodinu. Po uplynutí této doby byl do výsledné směsi v ledové lázni po kapkách přidán roztok 613 mg diizopropylethylaminu a veškeré soli získané v předešlém stupni v 6,1 ml suchého acetonitrilu a tato směs byla potom při téže teplotě míchána 6 hodin. Po oddestilování rozpouštědla při nižším tlaku byl zbytek rozpuštěn v ethylacetátu. Výsledný roztok byl promyt vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, opět vodou a

-61 CZ 290002 B6 nakonec nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vodné promývací frakce byly spojeny a extrahovány ethylacetátem, všechny organické fáze, včetně tohoto extraktu, byly spojeny a vysušeny bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla destilací za nižšího tlaku byl výsledný zbytek čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za užití směsi methylenchloridu a methanolu v poměru 6 : 1 jako eluentu, čímž bylo získáno 566 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr) u_max cm^-1:

1775, 1712,1670, 1606,1522, 1346, 852, 737.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O, 270 MHz) ppm:

1,15 (3H, dublet, J = 1,47 Hz), 1,17 (3H, dublet, J = 2,44 Hz), 1,39 - 3,35 (12H, multiplet), 3,29 (1H, dublet dubletů, J = 2,44 a 6,35 Hz), 3,54 - 3,66 (1H, multiplet), 3,79 - 4,32 (6H, multiplet), 5,09 - 5,48 (4H, multiplet), 7,57 - 7,74 (4H, multiplet), 8,19 - 8,25 (4H, multiplet).

3(3) (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3 S)—1, l-dimethyl-3-pyrrolidinioaminokarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR>-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

522 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-l-methyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrroIidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 2) výše, byly rozpuštěny v 5 ml suchého acetonitrilu a v ledové lázni byly do tohoto roztoku přidány 132 mg methyltrifluormethansulfonátu. Při téže teplotě byla tato směs míchána 30 minut. Práškový produkt získaný odpařením rozpouštědla byl po rozpuštění ve směsi 14 ml tetrahydrofuranu a 7 ml vody při teplotě místnosti jednu hodinu hydrogenován v atmosféře vodíku a v přítomnosti katalyzátoru - 1,2 g 10% paladia na uhlí. Po této době byl katalyzátor odfiltrován a tetrahydrofuran oddestilován při nižším tlaku. Vodná fáze byla poté promyta diethyletherem, zkoncentrována odpařením za nižšího tlaku a podrobena chromatografii na iontoměniči [Dowex 1-X4, 0,295-0,147 mm (50 - 100 mesh), Ci FORM, Dow Chemical] za užití vody jako eluentu. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly odděleny a zmrazením vysušeny za získání surového produktu v podobě prášku.

Tento surový produkt byl aplikován na kolonu (Cosmil 75 Cig-prep, Nacalai) a eluován vodou. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly spojeny, zkoncentrovány a zmrazením vysušeny za získání 187 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) o_max cm^-1:

1758, 1683,1595, 1562, 1452,1384.

1,21 (3H, dublet, J = 7,32 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 2,10 - 2,20 (1H, multiplet), 2,25 2,40 (1H, multiplet), 2,70 - 2,85 (1H, multiplet), 2,85 - 3,00 (1H, multiplet), 3,24 (3H, singlet),

3,28 (3H, singlet), 3,35 (1H, dublet dubletů, J= 7,33 a 9,28 Hz), 3,40-4,10 (9H, multiplet),

4,20 - 4,30 (2H, multiplet), 4,48 (1H, dublet dubletů, J = 5,86 a 9,28 Hz).

Příklad 4 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-l,l-dimethyl-3-pyrrolidinioaminokarbonyl/pyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

-62CZ 290002 B6

4( 1) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/(3R)-l-methyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidm

8,00 g kyseliny (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové bylo rozpuštěno v 80ml suchého acetonitrilu a po přidání 3,05g N,Nkarbodiimidazolu byla směs míchána při teplotě místnosti 2 hodiny. Po této době byla reakční směs ochlazena na 0 °C a byl k ní přidán roztok 3,67 g (3R)-3-amino-lterc.butoxykarbonylpyrrolidinu v 7 ml suchého acetonitrilu. Směs byla ochlazena na 0°C a byl k ní přidán roztok 3,67 g (3R)-3-amino-l-terc.butoxykarbonylpyrrolidinu v 7 ml suchého acetonitrilu. Směs byla poté míchána při téže teplotě 10 minut a při teplotě místnosti 2 hodiny. Pak byla reakční směs zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Odparek byl po zředění 200 ml ethylacetátu promyt dvakrát 100 ml vody a jednou 100 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Organická fáze byla vysušena bezvodým síranem hořečnatým, rozpouštědlo bylo odstraněno destilací při nižším tlaku a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu při eluci ethylacetátem a cyklohexanem v poměru 3:1, čímž bylo získáno 9,26 g bílého prášku.

4,80 g tohoto prášku bylo rozpuštěno ve 45 ml ethylacetátu a do výsledného roztoku bylo přidáno 15,6 ml 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v ethylacetátu. Po 30 minutovém zahřívání směsi na teplotu varu pod zpětným chladičem bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku. Do zbytku byl přidán ethylacetát a rozpouštědlo bylo oddestilováno, aby byla odstraněna kyselina. Takto získaný zbytek byl smísen s diethyletherem a směs byla dekantována. Po odstranění rozpouštědla destilací při nižším tlaku bylo získáno 4,47 g bílého prášku.

1,98 g tohoto prášku bylo mícháno s 20 ml dioxanu, k této směsi bylo při 10 °C přidáno 1,58 ml 5N vodného roztoku hydroxidu sodného a 0,41 ml dimethylsulfátu, načež byla směs při stejné teplotě míchána 30 minut. Po oddestilování rozpouštědla při nižším tlaku byl zbytek zředěn ethylacetátem a výsledná organická fáze byla promyta nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vodné promývací frakce byly extrahovány ethylacetátem. Organická fáze byla spojena s výsledným extraktem a směs byla vysušena bezvodým síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla destilací při nižším tlaku byl zbytek chromatografováno na koloně silikagelu při eluci ethylacetátem a methanolem v poměru 1 : 5, čímž bylo získáno 550 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

4(2) 4-nitrobenzyl(lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-lmethyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/-1 -(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidm-4ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

550 mg(2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/(3R)-l-methyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného podle stupně 1) výše, bylo uvedeno do suspenze 1,1 ml anisolu. Do výsledné suspenze bylo v ledové lázni přidáno 5,5 ml kyseliny trifluoroctové a 0,18 ml kyseliny trifluormethansulfonové a směs byla při teplotě místnosti míchána 1 hodinu. Pak bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku, do zbytku byl

-63CZ 290002 B6 přidán 1,2-dichlorethan a kyselina byla odstraněna azeotropickou destilací. Zbytek byl dekantován s hexanem a pak rozetřen s diethyletherem. Směs byla potom slita a usušena odpařením při nižším tlaku za získání soli v podobě prášku.

377 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam3-karboxylátu bylo rozpuštěno ve 3,7 ml suchého acetonitrilu. V ledové lázni byly k výslednému roztoku po kapkách přidány 293 mg difenylfosforylchloridu a 141 mg diizopropylethylaminu a pak byla směs míchána při téže teplotě jednu hodinu. Po této době byl ke směsi v ledové lázni po kapkách přidán roztok 403 mg diizopropylethylaminu a veškeré soli získané v předchozím stupni ve 4 ml suchého acetonitrilu. Výsledná směs byla při téže teplotě 1 hodinu míchána a potom přes noc stála v lednici. Po této době byla směs 1,5 hodiny míchána při teplotě místnosti a rozpouštědlo bylo odstraněno destilací při nižším tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v 10 ml methylenchloridu a pak byla směs promyta nejdříve vodou, pak vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, opět vodou a nakonec nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vodné promývací frakce byly vysušeny bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo bylo oddestilováno při nižším tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za užití směsi ethylacetátu, methylenchloridu a methanolu v poměru 3:1:3 jako eluentu, čímž bylo získáno 230 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr) u_max cm^-1:

1775,1712,1670,1617,1522,1345, 853,738.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O, 270 MHz) ppm:

1,15 (3H, dublet, J = 1,15 Hz), 1,17 (3H, dublet, J = 1,95 Hz), 1,47 - 1,56 (1H, multiplet), 1,72 1,75 (1H, multiplet), 1,98 -3,39 (17H, multiplet), 3,54- 3,62 (1H, multiplet), 3,84- 4,34 (6H, multiplet), 5,08 - 5,49 (4H, multiplet), 7,57- 7,74 (4H, multiplet), 8,19- 8,25 (4H, multiplet).

4(3) (R,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-l,l-dimethyl-3-pyrrolidiniokarbonyl/pyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

230 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-lmethyl-3-pyrrolidinylaminokarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl/pyrrolidin-^l-ylthio/-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle popisu ve stupni 2) výše, bylo rozpuštěno ve 2 ml suchého acetonitrilu. V ledové lázni bylo k roztoku přidáno 55,3 mg methyltrifluormethansulfonátu a směs byla potom při téže teplotě míchána 30 minut. Práškový produkt získaný odpařením rozpouštědla byl rozpuštěn ve směsi 7 ml tetrahydrofuranu a 3 ml vody a tato směs byla poté půl hodiny hydrogenována při teplotě místnosti v atmosféře vodíku a v přítomnosti 0,6 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru. Katalyzátor byl odfiltrován a tetrahydrofuran oddestilován při nižším tlaku. Vodný zbytek byl promyt diethyletherem, zkoncentrován odpařením při nižším tlaku a podroben chromatografii na iontoměničích [Dowex 1-X4, 0,2950,147 mm (50 až lOOmesh), Ci RORM, Dow Chemical] při eluci vodou. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu, byly odděleny a zmrazením vysušeny za získání surového produktu v podobě prášku.

Tento surový produkt byl aplikován na kolonu (Cosmosil 75Cig-prep., Natalai) a eluován vodou. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly spojeny, zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku a zmrazením vysušeny, čímž byly získány 42 mg výsledné sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) u_max cm^-1:

1758, 1683, 1593, 1559, 1458, 1386.

NMR-spektrum (270 MHz, D₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný)ppm:

-64CZ 290002 B6

1,20 (3H, dublet, J = 6,83 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 2,11 - 2,35 (2H, multiplet), 2,71 3,02 (2H, multiplet), 3,20 (3H, singlet), 3,27 (3H, singlet), 3,34 (1H, dublet dubletů, J = 7,33 a

9,28 Hz), 3,45-4,09 (9H, multiplet), 4,21 -4,27 (2H, multiplet), 4,51 (1H, dublet dubletů, J =

6,84 a 9,28 Hz).

Příklad 5 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(2S,4S)-2-karbamoyl-4-trimethylammoniopyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin—4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

866 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam3-karboxylátu bylo rozpuštěno v 8 ml suchého acetonitrilu a k výslednému roztoku bylo v ledové lázni po kapkách přidáno 520 μΐ difenylfosforylchloridu a 437 μΐ diizopropylethylaminu. Směs byla 45 minut míchána při téže teplotě. Potom byl ke směsi v ledové lázni po kapkách přidán roztok 895 μΐ diizopropylethylaminu a 1,62 g (2S,4S)-2-/(2S,4S)-2-karbamoyl-4-dimethylaminopyrrolidin-l-ylkarbonyl/-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pynOlidintrifluor.. .methansulfonátu v 7 ml suchého acetonitrilu. Výsledná směs byla 30 minut míchána při téže teplotě a potom přes noc stála v ledové lázni. Směs byla zpracována stejně jako je popsáno v příkladu 1(2), a byla chromatografována na koloně silikagelu. Frakce získané vzestupnou eluční metodou s užitím ethylacetátu a methanolu v rozmezí poměrů 80 : 20 až 70 : 30 jako eluentu, byly spojeny a zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku, čímž byl získán 521 mg 4nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(2S,4S)-2-karbamoyl-4-dimethylaminopyrrolidin-ly lkarbony 1/-1 -(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-y lthio/—6—/(1R)- 1-hydroxyethy 1/-1 methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu v podobě světle hnědého prášku. 505 mg této sloučeniny bylo rozpuštěno v 6 ml suchého acetonitrilu. V ledové lázni byl k výslednému roztoku po kapkách přidán 81 μΐ meťhylfluorsulfonátu a směs byla při téže teplotě míchána 1 hodinu. Po této době bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku a výsledný surový produkt byl hydrogenován, zpracován a vyčištěn tak, jak je popsáno v příkladu 1(4), čímž byl získán 161 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) o_max cm'¹:

1754,1668,1600, 1436,1382, 1288, 1264, 1225.

UV-spektrum (H₂O) nm: 298,0.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂0,270 MHz) ppm:

1,04 (3H, dublet, J = 6,84 Hz), 1,15 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 2,05 - 2,17 (1H, multiplet), 2,47 2,65 (3H, multiplet), 2,96 - 3,19 (2H, multiplet), 3,07 (9H, singlet), 3,52 - 3,78 (4H, multiplet),

3,84 - 4,07 (3H, multiplet), 4,21 - 4,34 (1H, multiplet), 4,40 - 4,56 (2H, multiplet).

-65CZ 290002 B6

Příklad 6 (1 R,5 S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3 S)-3-(karbamoylmethyldimethylamonio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

1,00 g 4-nitrobenžyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-dimethylaniino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin—4—ylthio/—1— karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného tak, jak je popsáno v příkladu 1(3), byl rozpuštěn v 10 ml suchého acetonitrilu a po přidání 1,21 g 2-jodacetamidu do výsledného roztoku byla směs míchána při 70 °C 1,5 hodiny. Pak bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku a zbytek byl promyt dekantací s diethyletherem a vysušen odpařením při nižším tlaku, čímž bylo získáno 1,28 g prášku. Všechna tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 12 ml tetrahydrofuranu a 12 ml vody a do roztoku byl přidán katalyzátor, 1,00 g 10% paladia na uhlíku. Směs byla pak 2 hodiny hydrogenována při teplotě místnosti. Po této době byla reakční směs zpracována, vyčištěna a zmražením vysušena tak, jak je popsáno v příkladu 1(4) za získání 155 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) cm’¹:

1758, 1695, 1656, 1600, 1469,1375, 1286,1226, 1182.

UV-spektrum (H₂O), u_max cm'¹: 296,9

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,14 (3H, dublet, J = 6,84 Hz), 1,15 (3H, dublet, J = 6,34 Hz), 1,52 - 1,74 (IH, multiplet), 2,18 2,94 (4H, multiplet), 3,19 (IH, dublet dubletů, J = 6,35 a 2,44 Hz), 3,25 (3H, singlet), 3,26 (3H, singlet), 3,25 - 4,25 (15H, multiplet), 4,44 - 4,63 (IH, multiplet), 5,08 (IH, široký singlet).

Příklad 7 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-/(2-hydroxyethyl)dimethylammonio/pyrrolidm-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyeťhyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

HC1

-66CZ 290002 B6

1,68 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle postupu v příkladu 1(3), bylo rozpuštěno ve 12 ml suchého acetonitrilu a po přidání 1,68 g 2-jodethanolu do výsledného roztoku byla směs 6,5 hodiny míchána při teplotě od 70 do 75 °C. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací při nižším tlaku a zbytek byl promyt dekantací s diethyletherem a vysušen odpařením při nižším tlaku za získání 1,66 g práškového produktu. Veškerá tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 15 ml tetrahydrofuranu a 15 ml vody a po přidání 1,20 g katalyzátoru - 10% paladia na uhlí byla směs 2 hodiny hydrogenována při teplotě místnosti. Po této době byla reakční směs zpracována, vyčištěna a zmrazením vysušena stejným způsobem jako v příkladu 1(4), čímž bylo získáno 250 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) Umax cm’¹:

1758, 1656, 1599,1469, 1374, 1286, 1258, 1227, 1148.

UV-spektrum (H₂O), u_max nm: 296,2.

NMR-spektrum (270 MHz, D₂O, interní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný) ppm:

1,21 (3H, dublet, J = 6,84 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,34 Hz), 1,96-2,13 (1H, multiplet), 2,30 2,64 (2H, multiplet), 2,94-3,16 (1H, multiplet), 3,22 a 3,25 (spolu 6H, dva singlety), 3,253,70 (6H, multiplet), 3,72 - 4,84 (11H, multiplet).

Příklad 8 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-/N-(N,N-dimethylkarbamoylmethyl)-NJSr-dimethylammoniopyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

HCl

500 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyV-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin—4ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle příkladu 1(3), bylo rozpuštěno v 5 ml suchého acetonitrilu a po přidání 700 mg 2-jod-N,N-dimethylacetamidu do výsledného roztoku byla směs 4 hodiny míchána při 80 °C. Pak bylo rozpouštědlo odstraněno destilací při nižším tlaku a zbytek byl promyt diethyletherem a vysušen odpařením při nižším tlaku za získání 670 mg práškového produktu. Veškerá sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 10 ml tetrahydrofuranu a 8 ml vody a do výsledného roztoku byly přidány 2,0 g katalyzátoru, 10 % palladia na uhlí. Směs pak byla dvě hodiny hydrogenována při teplotě od 28 do 30 °C. Po této době byla směs zpracována, vyčištěna a zmrazením vysušena stejně jako v příkladu 1(4), čímž byly získány 82 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) u_max cm':

1759,1657,1603, 1461, 1370,1147.

-67CZ 290002 B6

1,21 (3H, dublet, J = 6,8 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,4 Hz), 1,98 - 2,07 (1H, multiplet), 2,49 -

2,56 (2H, multiplet), 2,97 (3H, singlet), 3,03 (3H, singlet), 2,95- 3,13 (1H, multiplet), 3,37 (6H, singlet), 3,31 - 3,51 (3H, multiplet), 3,54 - 3,66 (1H, multiplet), 3,75 - 3,89 (2H, multiplet), 3,92 - 3,97 (2H, multiplet), 4,02-4,17 (1H, multiplet), 4,20-4,29 (2H, multiplet), 4,47 (2H, singlet), 4,69 - 4,81 (1H, multiplet), 4,86 - 4,98 (1H, multiplet).

Příklad 9 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-/N-(2-fluorethyl)-N,N-dimethylammonio/pyrrolidin-lylkarbonyl/pyrrolidin—4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxyláthydrochlorid

501 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinylkarbonyl/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle příkladu 1(3), byl rozpuštěn ve 3 ml suchého acetonitrilu. Po přidání 495 mg jodidu sodného a 419 mg l-brom-2-fluorethanu byla směs zahřívána na teplotu varu pod zpětným chladičem po 13 hodin. Pak byla směs přefiltrována a rozpouštědlo bylo z filtrátu odstraněno destilací při nižším tlaku za získání 631 mg práškového produktu. Veškerá tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 10 ml vody a tento výsledný roztok byl 1,5 hodiny hydrogenován při teplotě místnosti za přítomnosti katalyzátoru - 1,2 g 10% paladia na uhlí. Reakční směs byla potom zpracována, vyčištěna a zmrazením vysušena stejně, jako je uvedeno v příkladu 1(4), čímž bylo získáno 36,0 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr) cm^-1:

1758,1656,1599,1470,1375.

UV-spektrum (H2O), u_m„ nm: 296,8.

1,22 (3H, dublet, J = 7,26 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,59 Hz), 1,97 - 2,10 (1H, multiplet), 2,40 2,65 (2H, multiplet), 3,00-3,15 (1H, multiplet), 3,26 (4H, singlet), 3,28 (2H, singlet), 3,305,20 (17H, multiplet).

Příklad 10 (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/4-(3methylimidazolio)piperidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3karboxyláthydrochlorid

-68CZ 290002 B6

HCI

10(1) (2S,4S)-2-/4-(imidazol-l-yl)piperidin-l-yl-karbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)-l(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

1520 mg kyseliny (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové bylo rozpuštěno v 15 ml suchého acetonitrilu a po přidání 660 mg N,Ν'karbony ldiimidazolu do výsledného roztoku byla směs míchána při teplotě místnosti po 30 minut. Pak byl do směsi přidán roztok 538 mg 4-(imidazol-l-yl)piperidinu v 5 ml suchého acetonitrilu a výsledný roztok byl míchán nejdříve 30 minut při teplotě místnosti a pak 7 hodin při 40 °C. Reakční směs byla zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Odparek byl rozpuštěn v ethylacetátu a promyt nejdříve vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom vodou a nakonec vodným roztokem chloridu sodného. Směs byla potom vysušena bezvodým síranem sodným. Po odstranění rozpouštědla destilací při nižším tlaku byl zbytek chromatografován na koloně silikagelu s využitím reverzní fáze (Cosmosil 75C_IS-PREP, 200 ml, Nacalai Kagaku) a eluován směsmi acetonitrilu a vody v rozmezí objemových poměrů od 50 : 50 do 55 : 45. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly odděleny a zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku za získání 1450 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr) cm^-1:

1709, 1655,1609,1512, 1345,1246, 1110.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCb) ppm:

1,70-1,95 (2H, multiplet), 2,05-2,23 (3H, multiplet), 2,40-2,55 (1H, multiplet), 2,60-2,85 (1H, multiplet), 3,03 - 3,43 (3H, multiplet), 3,73 (3H, singlet), 3,77 - 4,25 (5H, multiplet), 4,59 -

4,84 (2H, multiplet), 5,02-5,35 (2H, multiplet), 6,85 (2H, dublet, J =8,8 Hz), 6,96 (1H, singlet), 7,07 a 7,09 (spolu 1H, dvojí singlet), 7,23 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,47 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,56 (1H, singlet), 8,23 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

10(2) (2S,4S)-2-/4-imidazol-l-yl)piperidin-l-ylkarbonyl/-4-merkaptopyrrolidin

1,44 g (2S,4S)-2-/4-(imidazol-l-yl)piperidin-l-ylkarbonyl/-4-(4—methoxybenzylthio)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno ve směsi 1,5 ml anisolu a 7,5 ml kyseliny trifluoroctové a k výslednému roztoku bylo v ledové lázni přidáno 350 mikrolitrů kyseliny trifluormethansulfonové. Výsledná směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti, 30 minut při 35 °C a potom byla zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Odparek byl čtyřikrát promyt diethyletherem za získání bezbarvého prášku. Všechen tento prášek byl uveden do suspenze v ethylacetátu a tato suspenze byla zalkalizována přidáním vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátová fáze byla separována, promyta vodným roztokem chloridu sodného a dehydratována bezvodým síranem sodným. Po oddestilování rozpouštědla při nižším tlaku bylo získáno 1150 mg žádané sloučeniny ve formě bezbarvého prášku. IR-spektrum (KBr), u_raax cm^-1:

1705,1652, 1523,1442,1347,1268, 1170,1035.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

-69CZ 290002 B6

1,55 - 1,85 (3H, multiplet), 2,00 - 2,11 (2H, multiplet), 2,63 - 2,89 (2H, multiplet), 3,05 - 3,30 (4H, multiplet), 3,92 -4,15 (2H, multiplet), 4,25-4,59 (2H, multiplet), 4,71-4,92 (1H, multiplet), 5,03 - 5,27 (2H, multiplet), 6,92 - 8,28 (7H, multiplet).

10(3) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/4-(imidazol-l-yl)piperidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4—ylthio/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylát

910 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam3-karboxylátu bylo rozpuštěno v 10 ml suchého acetonitrilu, v ledové lázni bylo do výsledného roztoku po kapkách přidáno 560 mikrolitrů difenylfosforylchloridu a 470 mikrolitrů diizopropylethylaminu a směs byla při téže teplotě míchána 30 minut. Potom byl po kapkách přidán roztok 1140 mg (2S,4S)-2-/4-(imidazol-l-yl)piperidin-l-ylkarbonyl/-4-merkaptopyrrolidinu, připraveného podle stupně 2) výše, v 10 ml acetonitrilu a 435 mikrolitrů diizopropylethylaminu. Směs byla 2 hodiny míchána v ledové lázni a přes noc stála při 4 °C. Po této době byla reakční směs zředěna ekvivalentním množstvím vody a bylo do ní přidáno 800 mg hydrogenuhličitanu sodného. Pak byla směs chromatografována na koloně silikagelu s využitím reverzní fáze (Cosmosil 75Cis-PREP, 200 ml, Nacalai) a eluována acetonitrilem a vodou v poměru 1:1. Požadované frakce byly odděleny a zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku, čímž bylo získáno 1,40 g žádané sloučeniny v podobě prášku.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,12- 1,20 (6H, multiplet), 1,58- 1,90 (3H, multiplet), 1,91 -2,06 (2H, multiplet), 2,62-2,79 (1H, multiplet), 2,80- 2,97 (1H, multiplet), 3,06-3,37 (4H, multiplet), 3,55-3,70 (1H, multiplet), 3,71 - 3,93 (1H, multiplet), 3,94-4,56 (5H, multiplet), 4,74-4,97 (1H, multiplet), 5,04 - 5,49 (5H, multiplet), 6,81 - 8,28 (11H, multiplet).

IR-spektrum (KBr) o_max cm^-1:

1773,1710,1656, 1522,1346, 1208.

10(4) (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/4-(3-methylimidazolio)piperidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3karboxyláthydrochlorid

1000 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/4-(imidazol-lyl)piperidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidm-4-ylthio/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle popisu ve stupni 3) výše, bylo rozpuštěno v 10 ml suchého acetonitrilu. Do výsledného roztoku bylo v ledové lázni po kapkách přidáno 150 mikrolitrů methyltrifluormethansulfonátu a směs byla pak při téže teplotě míchána 10 minut a při teplotě místnosti 30 minut. Reakční směs byla zkoncentrována destilací při nižším tlaku a výsledný zbytek (1213 mg) byl rozpuštěn ve směsi 20 ml tetrahydrofuranu a 15 ml vody. Po přidání 1,3 g katalyzátoru, 10% paladia na uhlí do tohoto roztoku, byla vzniklá směs energicky míchána 1,7 hodiny při teplotě od 28 do 30 °C v atmosféře plynného vodíku. Potom byl katalyzátor odfiltrován a filtrát byl promyt diethyletherem (3 x 100 ml). Vodná fáze byla zkoncentrována odpařením při nižším tlaku, chromatografována na koloně iontoměniče (Dowex 1-X4, Model-Cl, 30 ml) a eluována vodou. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku, podrobeny chromatografíí na koloně s využitím reverzní fáze silikagelu (Cosmosil 75 C_t8-PREP, 50 ml) a eluovány vodou. Aktivní frakce byly odděleny a zmrazením vysušeny, čímž bylo získáno 260 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 297.

-70CZ 290002 B6

1,22 (3H, dublet, J = 7,3 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,0 Hz), 1,88 - 2,09 (3H, multiplet), 2,28 -

2,43 (2H, multiplet), 2,96- 3,16 (2H, multiplet), 3,33 -3,55 (4H, multiplet), 3,73 -3,84 (1H, multiplet), 3,90 (3H, singlet), 3,91 - 4,12 (2H, multiplet), 4,20 - 4,31 (2H, multiplet), 4,55 4,73 (2H, multiplet), 4,83 - 4,93 (1H, multiplet), 7,47 (1H, singlet), 7,57 - 7,60 (1H, multiplet),

8,85 (1H, dublet, J = 7,9 Hz).

IR-spektrum (KBr) u_max cm^-1:

1758, 1652, 1599, 1374, 1271, 1233, 1166.

Příklad 11 (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-(3-methylimidazolio)pynOlidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

11(1) (2S,4S)-2-/(3R)-3-(imidazol-l-yl)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidm

K přípravě této sloučeniny bylo použito stejného postupu jako v příkladu 10(1), ovšem s využitím 2500 mg kyseliny (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)2-pyrrolidinkarboxylové a 805 mg (3R)-3-(imidazol-l-yl)pynOlidinu, čímž bylo získáno 2540 mg žádané sloučeniny.

IR-spektrum (KBr) o_max cm^-1:

1708, 1656, 1609,1512,1438, 1404,1345,1246, 1173, 1110.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,88-2,05 (1H, multiplet), 2,15 -2,31 (1H, multiplet), 2,36-2,57 (2H, multiplet), 3,02-3,18 (1H, multiplet), 3,31 - 3,40 (1H, multiplet), 3,49 - 3,63 (1H, multiplet), 3,73 a 3,74 (spolu 2H, dva singlety), 3,78 a 3,79 (spolu 3H, dva singlety), 3,80-4,08 (3H, multiplet), 4,26-4,48 (2H, multiplet), 4,71 - 4,89 (1H, multiplet), 4,26 -4,48 (2H, multiplet), 4,71 - 4,89 (1H, multiplet), 5,00-5,34 (2H, multiplet), 6,76-7,60 (9H, multiplet), 8,15-8,27 (2H, multiplet).

11(2) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-(imidazolyl-l-yl)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4—ylthio/— l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

2,5 g (2S,4S)-2-/(3R)-3-(imidazol-l-yl)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 1) výše, reagovalo a bylo zpracováno stejným způsobem jako v příkladu 10(2) a 10(3), čímž bylo získáno 2,31 g žádané sloučeniny v podobě prášku.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

-71 CZ 290002 B6

1,25 - 1,39 (6H, multiplet), 2,00 - 2,80 (4H, multiplet), 3,25 - 4,96 (13H, multiplet), 5,05 - 5,53 (4H, multiplet), 6,82 - 8,29 (11H, multiplet).

11(3) (lR,5S,6S)-6-/( lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3 S)-3-(3-methylimidazolio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

1,2 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-(imidazolyl-lyl)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného tak, jak je popsáno ve stupni 2) výše, reagovalo a bylo zpracováno stejně jako v příkladu 10(4), čímž bylo získáno 340 mg žádané sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

1,19 - 1,31 (6H, multiplet), 1,82-2,07 (1H, multiplet), 2,40-2,58 (1H, multiplet), 2,60-2,80 (1H, multiplet), 2,92 (1H,multiplet), 3,32-3,51 (3H, multiplet), 3,71 -4,31 (11H, multiplet), 3,60 - 3,75 (1H,multiplet), 5,17 - 5,27 (1H, multiplet), 7,50 a 7,54 (spolu 1H, dva singlety), 7,60 (1H, singlet), 8,90 a 8,92 (spolu 1H, dva singlety).

UV-spektrum (H2O), λ™, nm: 297.

Příklad 12 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)pynOlidin-4-ylthio/-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

12(1) 4—nitrobenzyl (1R,5 S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/4—(4nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

Do roztoku 471 mg 4—nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-lkarbapenam-3-karboxylátu v 5 ml suchého acetonitrilu bylo v ledové lázni po kapkách přidáno 290 mikrolitrů chloridu kyseliny difenylfosforečné a 244 mikrolitrů diizopropylethylaminu a výsledná směs byla při této teplotě míchána jednu hodinu. Po této době byl do směsi v ledové lázni po kapkách přidán roztok 910 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidintrifluormethansulfonátu, připraveného tak, jak je popsáno v přípravě 1, v 7 ml suchého acetonitrilu a 500 mikrolitrů diizopropylethylaminu a výsledná směs přes noc stála při téže teplotě. Po této době byla reakční směs zkoncentrována odpařením při nižším tlaku a odparek byl po zředění ethylacetátem promyt vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nakonec vodným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátová vrstva byla dehydratována bezvodým síranem sodným a zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Zbytek byl chromatografován na koloně silikagelu (silikagel 60 (Art. 9385), Měrek, 150 ml) a eluováno směsí ethylacetátu a acetonitrilu v poměru 8 : 2, 7 : 3 a

-72CZ 290002 B6 : 4 v tomto pořadí. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly odděleny a zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku, čímž byl získán 691 mg žádané sloučeniny v podobě amorfního prášku.

IR-spektrum (KBr), cm^-1.

1773, 1710, 1652, 1607, 1552, 1441, 1347.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O, 270 MHz) ppm:

1,12 - 1,21 (6H, multiplet), 1,62 - 1,78 (1H, multiplet), 2,77 - 2,93 (1H, multiplet), 3,11 - 4,30 (15H, multiplet), 4,79 a 4,88 (spolu 1H, dva triplety, J= 7,8 Hz), 5,07-5,49 (6H, multiplet), 7,52 - 7,73 (6H, multiplet), 8,19 - 8,25 (6H, multiplet).

12(2) Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-amidinopiperazm-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxyIová

680 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/2S,4S/-2-/4-(4nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle stupně 1) výše, bylo rozpuštěno ve 40 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 1 : 1 a do výsledného roztoku byl přidán katalyzátor - 950 mg 10% paladia na uhlíku. Směs byla potom jednu hodinu hydrogenována v atmosféře vodíku při 28 °C. Po této době byl katalyzátor odfiltrován a filtrát byl promyt diethyletherem. Vodná vrstva byla zkoncentrována do 10 ml odpařením při nižším tlaku. Výsledný roztok byl chromatografován na reverzní fázi silikagelu (Cosmosil 75Ci8-prep, Nacalai, Tesque, 30 ml) a eluován směsi acetonitrilu a vody v poměru 0 : 100, 2 : 98 a 6 :94 v tomto pořadí. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly odděleny, zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku a zmrazením vysušeny, čímž bylo získáno 211 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299

IR-spektrum (KBr), u_max cm“¹: 1754, 1649, 1605,1450,1389, 1251.

NMR-spektrum (270 MHz, F₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný) ppm:

1,22 (3H, dublet, J = 7,3 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,4 Hz), 1,64 (1H, zdvojený dublet dubletů, J = 13,7, 6,8 a 5,4 Hz), 2,74 (1H, dublet tripletů, J= 13,7 a 8,8 Hz), 3,07 (1H, dublet dubletů, J= 12,2 a 3,4 Hz), 3,17 (1H, dublet dubletů, J= 12,2 a 5,4 Hz), 3,34 -3,47 (2H, multiplet), 3,54-3,90 (9H, multiplet), 4,13 (1H, dublet dubletů, J= 8,8 a 6,8 Hz), 4,19-4,13 (2H, multiplet).

NMR-spektrum (¹³C, D₂O, externí standard: tetramethylsilan) ppm:

16,0, 20,2, 35,5, 41,3, 42,6, 42,8, 43,5, 44,2, 44,7, 53,9, 56,0, 57,4, 58,4, 65,2, 132,0, 140,9, 156,6,167,8, 172,5, 176,4.

Příklad 13

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

-73CZ 290002 B6

NH

ΝΉ,

13(1) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-7(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/l-karbapen-2-em-3-karboxylát

1600 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného tak, jak je popsáno v přípravě 32, bylo rozpuštěno v 16 ml suchého acetonitrilu a k výslednému roztoku byl v ledové lázni po kapkách přidán roztok 1120 mg (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného tak, jak je popsáno v přípravě 2, v 11 ml suchého acetonitrilu a 430 mikrolitrů diizopropylethylaminu. Výsledná směs byla přes noc míchána při téže teplotě a pak byla zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Odparek byl po zředění diethylacetátem promyt nejdříve vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom vodou a nakonec vodným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátová vrstva byla vysušena bezvodým síranem sodným a zkoncentrována odpařením při nižším tlaku. Odparek byl chromatografován na reverzní fázi silikagelu (Cosmosil 75Cir-prep, Nacalai Tesque, 300 ml) a eluován acetonitrilem a vodou v poměru 1 : 1. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly odděleny a zkoncentrovány odpařením při nižším tlaku, čímž bylo získáno 1520 mg žádané sloučeniny v podobě prášku.

IR-spektrum (KBr), Omax cm^-1:

1771,1708, 1648,1606, 1544, 1521,1448,1347.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,10-1,20 (6H, multiplet), 1,58-1,69 (1H, multiplet), 2,24 (3H, singlet), 2,60-2,80 (2H, multiplet), 2,95-3,02 (1H, multiplet), 3,20-3,88 (12H, multiplet), 3,90-4,05 (1H, multiplet), 4,21 (1H, dublet dubletů, J = 9,3 a 2,4 Hz), 5,05 (1H, dublet, J = 5,4 Hz), 5,13 (2H, singlet), 5,29 (2H, dublet, J= 13,7 Hz), 5,45 (2H, dublet, J= 13,7 Hz), 7,59 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,73 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,90 - 8,20 (2H, pásmo), 8,21 (2H, dublet, J = 8,8 Hz),

8,23 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

13(2) (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidm-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová kyselina

1500 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-1 -ylkarbonyl/pyrrolidin-4—ylthio/- 1-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného podle stupně 1) výše, bylo rozpuštěno v 75 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 1:1 a do výsledného roztoku bylo přidáno 2400 mg katalyzátoru - 10% paladia na uhlí. Směs byla jednu hodinu hydrogenována v atmosféře vodíku při 28 °C. Katalyzátor byl potom odfiltrován a filtrát byl promyt diethyletherem a zkoncentrován na 20 ml odpařením při nižším tlaku. Roztok byl potom chromatografován na reverzní fázi silikagelu (Cosmosil 75 Cis-prep, Nacalai Tesque, 100 ml), a eluován směsmi acetonitrilu a vody v poměru 0 : 100, 2 : 98, 4 : 96, 6 : 94 a 8 : 92 v tomto pořadí. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu byly odděleny, zkoncentrovány na 3 ml odpařením při nižším tlaku a ochlazeny za

-74CZ 290002 B6 precipitace bezbarvých jehličkovitých krystalů. Krystaly byly odfiltrovány a usušeny, čímž bylo získáno 435 mg žádané sloučeniny, ve formě krystalů tajících při 218 - 220 °C s dekompozicí.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298

IR-spektrum (KBr), u_max cm“¹:

1755,1652,1606,1449,1386,1246.

1,20 (3H, dublet, J = 6,8 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,3 Hz), 1,66 (1H, zdvojený dublet dubletů, J = 13,7, 8,8 a 5,4 Hz), 2,28 (3H, singlet), 2,74-2,87 (2H, multiplet), 3,09 (1H, dublet dubletů, J = 10,8 a 1,5 Hz), 3,30 - 3,90 (12H, multiplet), 4,16 - 4,31 (2H, multiplet).

Spektrum nukleární magnetické resonance (¹³C, D₂O, externí standard: tetramethylsilan) ppm:

Příklad 14

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)pyrrolidm-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

OH

CH₃

K přípravě této sloučeniny bylo použito stejného postupu jako v příkladu 13, ale s tím rozdílem, že výchozími látkami byly 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)homopiperazin-4-ylkarbonyl/pyrrolidin, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 3, ve vzájemných poměrech obdobných příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

IR-spektrum (KBr), cm'¹:

1754,1608,1580,1456,1387,1262.

NMR-spektrum (*H, 270 MHz, D₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný) ppm:

1,21 (3H, dublet, J = 7,2 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,3 Hz), 1,46 - 1,54 (1H, multiplet), 1,84 -

1,96 (2H, multiplet), 2,70- 2,80 (1H, multiplet), 3,08 (1H, dublet dubletů, J = 12,4 a 3,3 Hz),

3,14 (1H, dublet dubletů, J= 12,4 a 5,4 Hz), 3,37- 3,45 (2H, multiplet), 3,52-3,95 (9H, multiplet), 4,04 - 4,14 (1H, multiplet), 4,29 - 4,29 (2H, multiplet).

-75CZ 290002 B6

Příklad 15

Kyselina (1 R,5S,6S)-2-/(2S,4A)-2-(4-ainidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidm-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

K přípravě této kyseliny bylo užito postupu z příkladu 13 stím rozdílem, že výchozími látkami byly 4—nitrobenzyl (1 R,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/( lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylát, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4merkapto-l-methyl-2-/4—(4—nitrobenzyloxykarbonylamidino)homopiperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 4, ve vzájemných poměrech obdobných příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298

IF-spektrum (KBr), cm^-1:

1755,1650, 1607,1455, 1385, 1258.

1,20 (3H, dublet, J = 7,2 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,3 Hz), 1,60 (1H, dvojitý dublet dubletu, J = 13,5, 9,0 a 5,5 Hz), 1,80 - 1,95 (2H, multiplet), 2,24 a 2,25 (spolu 3H, dva singlety), 2,74-2,87 (2H, multiplet), 3,09 (1H, dublet, J= 9,0 Hz), 3,33- 3,95 (12H, multiplet), 4,19 (1H, dublet dubletu, J = 9,0 a 2,4 Hz), 4,22 - 4,28 (1H, multiplet).

Příklad 16

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-guanidinopiperidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4—ylthio/5-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

NHfc

NH

K přípravě této sloučeniny bylo použito obdobného postupu jako v příkladu 13, ale výchozími látkami byly 4-nitrobenzyl (lR,5R,-6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidino)piperidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 5, ve stejných vzájemných poměrech jako v příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

-76CZ 290002 B6

Příklad 17

Kyselina /lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(4-guanidinopiperidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolÍdin4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

K přípravě této látky bylo použito stejného postupu jako v příkladu 13, ale výchozími sloučeninami byly 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(dÍfenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, připravený tak, jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidino)piperidin-lylkarbonyl/pyrrolidin, připravený podle přípravy 6, ve vzájemných poměrech podobných těm, které byly užity v příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298.

Příklad 18

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-guanidinopynOlidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

K přípravě této kyseliny bylo použito stejného postupu jako v příkladu 13 s tím rozdílem, že výchozími látkami byly 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, připravený podle přípravy 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-3-(4—nitrobenzyloxykarbonylguanidino)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin, připravený podle přípravy 7, ve vzájemných poměrech obdobných těm, které byly užity v příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

-TJPříklad 19

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-guanidinopyrrolidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

K přípravě této kyseliny bylo použito postupu z příkladu 13, ale výchozími látkami byly 4nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, připravený podle přípravy 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2/(3S)-3-(4-nitrobenzyIoxykarbonylguanidmo)pynOlidin-l-ylkarbonyl/pynOlidin, připravený podle přípravy 8, ve vzájemných poměrech obdobných těm, které byly užity v příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O) nm: 298.

Příklad 20

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-guanidinoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin—4-ylthio/-6/(ÍR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

K přípravě této sloučeniny bylo použito stejného postupu jako v příkladu 13, ale výchozími látkami byly 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát, připravený podle přípravy 32, a (2S,4S)-4-merkaptol-(4-mtrobenzyloxykarbonyl)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidmo)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin, připravený podle přípravy 9, ve vzájemných poměrech obdobných těm, které byly užity v příkladu 13, čímž byla získána žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

Příklad 21

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-guanidinoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin—4— ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

-78CZ 290002 B6

Postup obdobný postupu popsanému v příkladu 13 byl opakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/3(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidino)azetidin-l-ylkarbonyl/-pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 10, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v příkladu 10, čímž se získá žádaná sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298.

Příklad 22

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(2-guanidinoethylkarbamoyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6“/(lR)l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4—merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/2-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidino)ethylkarbamoyl/pyrrolidin, připraveného jak je popsáno v přípravě 11, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), λ^χ nm: 299.

Příklad 23

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(2-guanidinoethylkarbamoyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

-79CZ 290002 B6

Postup podobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32 a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/2-(4nitrobenzyloxykarbonylguanidino)ethylkarbamoyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 12, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298.

Příklad 24

Kyselina (1 R,5S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/4-(methylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Opakuje se postup, podobný postupu z příkladu 13, avšak jako výchozí látky se užijí 4nitrobenzyl-( 1 R,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylát, připravený podle přípravy 32 a (2S,4S)-4-merkapto-2-/4methyM-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin, připravený způsobem podle přípravy 13, v relativních poměrech, užitých v tomto příkladu, čímž se získá výsledný produkt.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

Příklad 25

Kyselina (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl-2-/4-(methylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/4-(methyl-4nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného jak je

-80CZ 290002 B6 popsáno v přípravě 14, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), X_max nm: 298.

Příklad 26

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(3R)-3-guanidinopynOlidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup podobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3R)-3-(4—nitrobenzyloxykarbonylguanidino)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 13, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), X_max nm: 299.

Příklad 27

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-3-guanidinopyrrolidin-l-ylkarbonyl/-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S}-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/(3R)-3-(4nitrobenzyloxykarbonylguanidino)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 16, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298.

-81 CZ 290002 B6

Příklad 28

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-4-amidino-3-methylpiperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2,4S)-4—merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)2-/(3R)-4-(4—nitrobenzyloxykarbonylamidino)-3-methylpiperazin-l-ylkarbonyl/-pyrrolidin, připravený jak je popsáno v přípravě 17, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

Příklad 29

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3R)-4-amidino-3-methylpiperazin-l-ylkarbonyl/-lmethylpyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/(3R)-4-(4nitrobenzyloxykarbonylamidino)-3-methylpiperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin, připravený jak je popsáno v přípravě 18, a jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), λη,« nm: 298.

Příklad 30

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/l-amidinopiperidin-4-ylkarbamoyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

-82CZ 290002 B6

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperidin-4-ylkarbamoyVpyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 19, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

Příklad 31

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-l-amidinopynOlidin-3-ylkarbamoyl/pyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4—nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)pyrrolidin-3-ylkarbamoyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 20, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), nm: 299.

Příklad 32

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/l-amidinoazetidin-3-ylkarbamoyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

-83CZ 290002 B6

Postup obdobný postupu v příkladu 13 byl zopakován za použití 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)azetidin-3-ylkarbamoyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 21, jako výchozích látek, v relativním poměru obdobném použitému poměru v daném příkladu, čímž se získá titulní sloučenina.

UV-spektrum (H₂O), λ,^ nm: 299.

Příklad 33

Hydrochlorid kyseliny (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4ylthio/-5-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylové

33(1) 4-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

167 mikrolitrů difenylfosforečnanu a 140 mikrolitrů diizopropylethylaminu bylo po kapkách současně přidáno, za chlazení ledem k roztoku 278 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam-3-karboxylátu ve 4 ml suchého acetonitrilu, výsledná směs byla míchána 1 hodinu při stejné teplotě. Na konci této doby byl roztok 430 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připravený jak je popsáno v přípravě 22, ve 4 ml suchého acetonitrilu a 134 mikrolitrů diizopropylethylaminu byly po kapkách současně přidány ke směsi za chlazení ledem. Výsledná směs byla míchána při stejné teplotě dvě hodiny, pak byla ponechána přes noc za chlazení ledem. Pak byla reakční směs zředěna ethylacetátem a myta vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Vrstva ethylacetátu byla vysušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografií na sloupci silikagelu a frakce získané elucí 98 :2 objemovou směsí ethylacetátu a methanolu byly slity a zkoncentrovány odpařením za sníženého tlaku, čímž bylo získáno 224 mg titulní sloučeniny, ve formě prášku.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1772,1713,1659,1608, 1522, 1453, 1403, 1347.

-84CZ 290002 B6

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O,270 MHz) ppm:

1,06-1,27 (6H, multiplet), 1,66-1,89 (IH, multiplet), 2,64-2,85 (IH, multiplet), 3,08-3,37 (2H, multiplet), 3,41-4,59 (11H, multiplet), 5,07-5,52 (6H, multiplet), 7,51-7,78 (6H, multiplet), 8,23 (6H, dublet, J = 8,79 Hz).

33(2) Hydroxid kyseliny (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/( 1 R)-l -hydroxyethyl/-l -methyl-1 -karbapen-2-em-3-karboxylové

216 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidin- l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno v 10 ml 3 : 2 objemové směsi tetrahydrofuranu a vody. 250 mg 10% paladia na uhlíku katalyzátoru a 239 mikrolitru IN vodné kyseliny chlorovodíkové bylo pak přidáno k výslednému roztoku, pak byla směs hydrogenována při teplotě místnosti 1,5 hodiny ve vodíkové atmosféře. Na konci této doby, byl katalyzátor odstraněn filtrací a filtrát byl promyt diethyletherem. Vodná fáze byla zkoncentrována odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografii na sloupci (Cosmosil 75 Cu, Nacalai Tesque, 18 ml). Z filtrací získaných elucí vodou, byla ta, která obsahovala titulní sloučeninu, koncentrována odpařováním za sníženého tlaku a lyofilizována, čímž se získá 46 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 297.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1756,1661,1596,1486,1462,1391,1287,1180.

1,21 (3H, dublet, J = 7,32 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 1,95 - 2,12 (IH, multiplet), 2,90 3,05 (IH, multiplet), 3,29-3,51 (3H, multiplet), 3,72- 3,83 (IH, multiplet), 3,97- 4,10 (IH, multiplet), 4,13-4,86 (8H, multiplet).

Příklad 34

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-acetimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

34(1) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3-/N(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-N-acetimidoylamino/azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

0,35 ml chloridu kyseliny difenylfosforečná a 0,29 ml diizopropylethylaminu bylo současně po kapkách přidáno k roztoku 0,55 g 4-4iitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-lmethyl-2-oxo-l-karbapenam-3-karboxylátu v 10 ml suchého acetonitrilu, za chlazení ledem, výsledná směs byla míchána 50 minut při stejné teplotě. Na konci této doby roztok 0,28 g (2S,4S)-4-merkapto-2-/3-/N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-N-acetimidoylammo/azetidin-lylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připravený jak je popsáno v přípravě 23,

-85CZ 290002 B6 v 10 ml suchého acetonitrilu a 0,24 ml diizopropylethylaminu bylo současně po kapkách přidáno ke směsi za chlazení ledem. Výsledná směs byla pak míchána při stejné teplotě 2 hodiny a pak při teplotě místnosti jednu hodinu. Na konci této doby, byla reakční směs koncentrována odpařením za sníženého tlaku a výsledný odparek byl zředěn ethylacetátem a promyt vodou a vodným roztokem chloridu sodného v tomto pořadí. Vrstva ethylacetátu byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografíi na sloupci (silikonový gel 60 9385, Měrek, 200 ml), čímž bylo získáno 0,77 g titulní sloučeniny ve formě amorfního prášku z frakce získané elucí s 95 : 5 objemovou směsí ethylacetátu a methanolu.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1773, 1709,1607, 1549,1522, 1448, 1346, 1225.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3) ppm:

1.27 a 1,28 (dohromady 3H, dva dublety, J= 7,33 Hz), 1,36 (3H, dublet, J= 6,35 Hz), 1,47 -

2.28 (3H, multiplet), 2,19 a 2,22 (dohromady 3H, dva singlety), 2,50-2,83 (1H, multiplet), 3,26 - 3,52 (3H, multiplet), 3,59 - 3,78 (1H, multiplet), 3,70 - 4,84 (9H, multiplet), 5,06 - 5,51 (6H, multiplet), 7,48 - 7,66 (6H, multiplet), 8,19 - 8,23 (6H, multiplet).

34(2) Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-acetimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin—4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxylová

0,77 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-7(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/3-/N-(4nitrobenzyloxykarbonyl)-N-acetimidoylamino/azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno v 15 ml 2 : 1 objemové směsi tetrahydrofúranu a vody. 0,77 g 10% paladia na aktivním uhlí (katalyzátoru) bylo pak přidáno k výslednému roztoku, pak byla směs hydrogenována 2 hodiny při teplotě místnosti pod vodíkovou atmosférou. Na konci této doby byl katalyzátor odstraněn filtrací a filtrát byl promyt diethyletherem. Vodná vrstva byla zkoncentrována odpařováním za sníženého tlaku a výsledný odparek byl podroben chromatografíi na sloupci v reverzní fázi (Cosmosil 75C_tr-prep., Nacalai Tesque, 100 ml). Frakce obsahující titulní sloučeninu získaná elucí se 4% obj. vodným acetonitrilem, byla koncentrována odpařováním za sníženého tlaku a sušena lyofilizací, čímž bylo získáno 0,13 g titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 300.

IR-spektrum (KBr), o_max cm^-1:

1755, 1633,1591,1463,1389,1286,1262.

1,22 (3H, dublet, J = 6,84 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 1,64 - 1,74 (1H, multiplet), 2,25 2,35 (3H, multiplet), 2,58-2,70 (1H, multiplet), 2,98-3,04 (1H, multiplet), 3,20 (1H, dvojitý dublet dubletů, J = 12,21, 5,86 a 2,44 Hz), 3,34 - 3,45 (1H, multiplet), 3,44 (1H, dublet dubletů, J= 6,35 a 2,44 Hz), 3,73-3,88 (2H, multiplet), 4,03-4,10 (1H, multiplet), 4,19-4,37 (3H, multiplet), 4,41 - 4,90 (3H, multiplet).

Příklad 35

Kyselina (IR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-formÍmidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4— ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

-86CZ 290002 B6

Postup je podobný tomu, který byl popsán v příkladu 34, ale bylo použito 0,12 g 4-nitrobenzyl(lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam-3-karboxylátu a 0,17 g (2S,4S)-4-merkapto-2-/3-(N—4-nitrobenzyloxykarbonylformimidoylamino)azetidin-lylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidmu, připraveného jak je popsáno v přípravě 24, čímž bylo získáno 19 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 301.

IR-spektrum (KBr), cm'¹:

1754,1654,1592,1463,1388,1319,1289,1262.

NMR-spektrum (270 MHz, D₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylpropionát sodný) ppm:

1,22 (3H, dublet, J = 7,22 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,33 Hz), 1,66 - 1,76 (1H, multiplet), 2,61 2,75 (1H, multiplet), 3,01- 3,13 (1H, multiplet), 3,20 -3,30 (1H, multiplet), 3,35-3,48 (2H, multiplet), 3,76- 3,98 (2H, multiplet), 4,04-4,13 (1H, multiplet), 4,20 -4,56 (4H, multiplet), 4,61 - 4,88 (2H, multiplet), 7,87 a 7,88 (1H, dva singlety).

Příklad 36

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4y Ithio/—6—/(1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapem-2-em-3-karboxylová

36( 1) 4-nitrobenzyl (1 R,5S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl-

2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin—4—ylthio/—l— karbapen-2-em-3-karboxylát

Roztok 0,42 g (2S,4S)-4—merkapto-l-methyl-2-/3-(4—nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin1-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 25, v 10 ml suchého acetonitrilu a 0,18 ml diizopropylethylaminu byl současně po kapkách přidán k roztoku 0,70 g 4nitrobenzyl (1 R,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, ve 14 ml suchého acetonitrilu, za chlazení ledem a výsledná směs byla ponechána dva dny při stejné teplotě. Na konci této doby byla reakční směs koncentrována odpařováním za sníženého tlaku a odparek byl zředěn ethylacetátem a promyt v tomto pořadí vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Vrstva ethylacetátu byla sušena bezvodým síranem hořečnatým a pak koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografii na sloupci silikagelu

-87CZ 290002 B6 (60 9385, Měrek, 100 ml), aby vzniklo 0,25 g produktu ve formě amorfního prášku, z frakcí získaných elucí s 95 : 5 objemovou směsí acetonitrilu a methanolu.

IR-spektrum (KBr), Umax cm'¹:

1771, 1723,1641, 1608,1522, 1455, 1347.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃ + D₂O) ppm:

1,27 a 1,28 (dohromady 3H, dva dublety, J= 7,33 a 6,84 Hz), 1,36 (3H, dublet, J = 5,86 Hz), 1,85-2,04 (1H, multiplet), 2,33- 2,37 (3H, dva singlety), 2,67- 2,80 (2H, multiplet), 3,03 -3,39 (4H, multiplet), 3,65-3,73 (1H, multiplet), 3,90-3,95 (1H, multiplet), 4,10-4,83 (6H, multiplet), 5,09-5,52 (4H, multiplet), 7,47-7,67 (4H, multiplet), 8,15-8,26 (4H, multiplet).

36(2) Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

0,25 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl-2/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno v 5,5 ml 6 : 5 objemové směsi tetrahydrofuranu a vody, a 0,25 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru bylo přidáno k výsledné směsi. Směs byla hydrogenována 90 minut při teplotě místnosti pod vodíkovou atmosférou. Na konci této doby byl katalyzátor odstraněn filtrací a filtrát byl promyt diethyletherem. Vodná vrstva byla pak koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografií na sloupci v reverzní fázi (Cosmosil 75 Cig-prep., Nacalai Tesque, 25 ml). Z filtrací získaných elucí s 5% vodným acetonitrilem, byla frakce obsahující titulní sloučeninu koncentrována odpařením za sníženého tlaku a sušena lyofilizací, čímž bylo získáno 0,05 g titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 301.

IR-spektrum (KBr), Omax cm“’:

1755,1641, 1598, 1462, 1386,1284,1255.

1.21 (3H, dublet, J = 7,33 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 1,75 - 1,85 (1H, multiplet), 2,46 a 2,47 (dohromady 3H, dva singlety), 2,79- 2,89 (1H, multiplet), 2,97-3,07 (1H, multiplet),

3.22 - 3,53 (4H, multiplet), 3,90 - 4,06 (2H, multiplet), 4,13 - 4,29 (4H, multiplet), 4,35 - 4,44 (1H, multiplet), 4,54 - 4,84 (1H, multiplet).

Příklad 37

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-acetimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-yithio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová h₃

-88CZ 290002 B6

7( 1) 4-nitrobenzyl-( 1R,5 S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl-

2-/3-/N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-N-acetimidoylamino/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

Roztok 435 mg (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/3-/N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-N-acetimidoylamino/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 26, ve ml suchého acetonitrilu a 174mikrolitrech diizopropylethylaminu bylo po kapkách současně přidáno k roztoku 595 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připravenému jak je popsáno v přípravě 32, v 10 ml suchého acetonitrilu, za chlazení ledem. Výsledná směs byla ponechána reagovat 20 minut při stejné teplotě. Pak byla ponechána při teplotě místnosti 3 hodiny a pak přes noc v lednici. Na konci této doby byla reakční směs zředěna ethylacetátem a postupně promyta vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátová vrstva byla sušena bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl podroben chromatografii na sloupci silikagelu a frakce získané elucí s 2 : 2 : 1 objemovou směsí methylenchloridu, ethylacetátu a methanolu byly spojeny a koncentrovány odpařením za sníženého tlaku, čímž bylo získáno 464 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1771, 1690,1607,1549,1521,1455, 1378, 1346.

NMR-spektrum (270 MHz, DMSO-d₆ + D₂O) ppm:

1,16 (6H, dublet, J= 6,83 Hz), 1,59- 1,74 (1H, multiplet), 2,11 (3H, singlet), 2,29 (3H, široký singlet), 2,54 -3,19 (3H, multiplet), 3,27 (1H, dublet dubletu, J = 6,35 a 2,44 Hz), 3,32-4,27 (8H, multiplet), 4,42-4,60 (2H, multiplet), 5,11- 5,49 (4H, multiplet), 7,60 a 7,61 (dohromady 2H, dva dublety, J= 8,79 Hz), 7,70 a 7,72 (dohromady 2H, dva dublety, J = 8,79 Hz), 8,16 - 8,28 (4H, multiplet).

7(2) Kyselina (1 R,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-acetimidoyIaminoazetidm-l-ylkarbonyl)-lmethylpyrrolidin-4—ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxylová

453 mg 4-nitrobenzyl-(lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-methyl2-/3-/N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl/-N-acetimidoylamino/azetidin-l-ylkarbonyl/-pyrrolidin4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno ve 21 ml 2 : 1 objemové směsi tetrahydrofuranu a vody a 500 mg 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru, pak bylo přidáno k výslednému roztoku. Směs byla hydrogenována 1,5 hodiny při teplotě místnosti pod vodíkovou atmosférou. Katalyzátor byl odstraněn filtrací a filtrát byl promyt diethyletherem. Vodná vrstva byla koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl podroben chromatografii na sloupci v reverzní fázi (Cosmosil 75 Cig-prep., Nacalai Tesque, 40 ml). Z frakcí získaných elucí 8 % objemovým množstvím vodným acetonitrilem, byla frakce obsahující titulní sloučeninu koncentrována odpařením za sníženého tlaku a sušena lyofilizací, čímž bylo získáno 166 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 301.

IR-spektrum (KBr), u_max cm¹:

1757,1633, 1592,1462,1386,1335, 1284,1256.

1,21 (3H, dublet, J = 6,83 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,35 Hz), 1,64 - 1,78 (1H, multiplet), 2,27 (3H, singlet), 2,29 (3H, singlet), 2,63-2,85 (2H, multiplet), 3,01 - 3,21 (2H, multiplet), 3,273,46 (2H, multiplet), 3,75 - 3,88 (1H, multiplet), 4,00- 4,10 (1H, multiplet), 4,15 - 4,96 (6H, multiplet).

-89CZ 290002 B6

Příklad 38

Kyselina (lR,5R,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-formimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-methylpyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylové

Byl zopakován stejný postup jako je popsáno v příkladu 37, ale bylo užito 0,35 g 4-nitrobenzyl(lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a 0,22 g (2S,4S)-4—merkapto-1methyl-2-/3-/N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-N-fomiimidoylamino/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 27, čímž se získá 17 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 302.

Příklad 39 (1 R,5S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-(4-methyl-l-l ,2,4triazolio)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/-pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2em-3-karboxylát hydrochlorid

39(1) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-(4— nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3R)-3-(l-l,2,4-triazolyl)-l-pyrrolidinylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

486 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam-

3-karboxylátu bylo rozpuštěno v 5 ml suchého acetonitrilu. 379 mg difenylfosforylchloridu a 182 mg diizopropylethylaminu bylo po kapkách za chlazení ledem přidáno k výsledné směsi. Směs byla míchána jednu hodinu při stejné teplotě. Na konci této doby byl roztok 173 mg diizopropylethylenaminu a 690 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-/(3S)-3-(l-l,2,4-triazolyl)-lpyrrolidinylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 28, ve 4 ml suchého acetonitrilu přidán po kapkách za chlazení ledem k výsledné směsi a směs byla míchána 6 hodin při stejné teplotě. Rozpouštědlo bylo pak odstraněno destilací za sníženého tlaku a výsledný zbytek byl rozpuštěn ethylacetátem. Výsledný roztok byl promyt vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, znovu vodou a nakonec nasyceným

-90CZ 290002 B6 vodným roztokem chloridu sodného. Vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem a byla spojena spromývací tekutinou a sušena bezvodým síranem horečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografii na sloupci silikagelu za použití 5 : 1 objemové směsi ethylacetátu a methanolu jako eluentu, čímž bylo získáno 744 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1772, 1709, 1655, 1607,1522, 1346, 854, 738.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O) ppm:

1,50 - 1,80 (1H, multiplet), 2,20 - 2,50 (2H, multiplet), 2,70 - 2,95 (2H, multiplet), 3,10 - 3,40 (12H, multiplet), 4,45- 4,75 (1H, multiplet), 5,00-5,50 (4H, multiplet), 7,45-7,78 (4H, multiplet), 7,80-8,00 (1H, multiplet), 8,15 -8,28 (4H, multiplet), 8,50- 8,60 (1H, multiplet).

39(2) (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/(3S)-3-(4-methyl-l- l,2,4-triazolio)-pyrrolidin-l-yIkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3karboxylát hydrochlorid

528 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3 S>—3—(1-1,2,4-triazolyl)-l-pyrrolidinylkarbonyl/pyrrolidin-4ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno v 6 ml suchého acetonitrilu a 121 mg methyltrifluoromethansulfonátu bylo přidáno k výslednému roztoku za chlazení ledem, pak byla směs míchána 30 minut při stejné teplotě. Práškový produkt získaný odpařením rozpouštědla byl rozpuštěn ve směsi 7 ml tetrahydrofuranu a 5 ml vody, a pak byla směs hydrogenována 1 hodinu při teplotě místnosti za přítomnosti 1 g 10%paladia na uhlí jako katalyzátoru. Na konci této doby byl katalyzátor odstraněn filtrací a tetrahydrofuran byl oddestilován za sníženého tlaku. Vodná vrstva byla promyta diethyletherem a koncentrována odpařením za sníženého tlaku a pak byla podrobena chromatografii na sloupci (Dowex 1-4X, 50 až 100 mesh, Cl FORM, Dow Chemical) za použití vody jako eluentu. Frakce obsahující titulní sloučeninu byly spojeny a koncentrovány na 1,5 ml odpařením za sníženého tlaku.

Koncentrovaný vodný roztok byl vložen na sloupec (Cosmosil 75 Cig-prep., Nacalai) a eluován vodou. Frakce obsahující titulní sloučeninu byly spojeny, koncentrovány odpařením za sníženého tlaku a lyofilizovány, čímž bylo získáno 85 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého prášku.

UV-spektrum (H₂O), Xmax nm: 296,7.

IR-spektrum (KBr), o_max cm¹:

3394,1758, 1655,1586, 1460,1373.

1,18-1,23 (3H, m), 1,27-1,30 (3H, multiplet), 1,95-2,11 (1H, multiplet), 2,40-2,80 (2H, multiplet), 2,95-3,20 (1H, multiplet), 3,30- 3,40 (1H, multiplet), 3,40- 3,54 (2H, multiplet), 3,70-3,85 (2H, multiplet), 3,85-4,05 (3H, multiplet), 4,05-4,15 (3H, multiplet), 4,15-4,30 (2H, multiplet), 4,70-4,85 (2H, multiplet), 5,45-5,60 (1H, multiplet), 8,84 a 8,87 (dohromady 1H, dva singlety).

Příklad 40 (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/3-(4-methyl-l-l,2,4-triazolio)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

-91 CZ 290002 B6

40(1) 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/3-(l- l,2,4-triazolyl)-l-azetidinylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pynOlidin-4ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát

886 mg 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyll-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, bylo rozpuštěno v 10 ml suchého acetonitrilu. 0,26 ml diizopropylethylaminu a 873 mg (2S,4S)-4-merkapto-2-/3(1-1,2,4-triazolyl)-l -azetidinylkarbonyl/-1 -(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 29, rozpouštěného v 5 ml acetonitrilu bylo po kapkách současně přidáno k výslednému roztoku za chlazení ledem. Směs byla míchána 3 hodiny při stejné teplotě. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku, zbytek byl zředěn ethylacetátem. Výsledná směs byla promyta vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Vodná vrstva byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl čištěn chromatografíí na sloupci silikagelu, za použití gradientově eluční metody se směsí ethylacetátu a methanolu v rozmezí objemových poměrů 6 : 1 až 4 : 1 jako eluentu, čímž bylo získáno 661 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

3402,1709, 1665, 1608, 854, 738.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid) ppm:

1,10- 1,30 (6H, multiplet), 1,75- 1,90 (1H, multiplet), 2,70-2,85 (1H, multiplet), 3,55-3,65 (1H, multiplet), 3,20 - 5,10 (12H, multiplet), 5,15-5,55 (5H, multiplet), 7,55 -7,80 (4H, multiplet), 7,95-8,10 (1H, multiplet), 8,20 - 8,30 (4H, multiplet), 8,55-8,75 (1H, multiplet).

40(2) (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/3-(4-methyl-l-l,2,4triazolio)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4—ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

660 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/3-(l- l,2,4-triazolyl)-l-azetidinylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4—ylthio/—!— karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je pospáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno v 7 ml suchého acetonitrilu a 154 mg methyltrifluormethansulfonátu bylo přidáno k výslednému roztoku za chlazení ledem. Směs byla 30 minut míchána při stejné teplotě. Na konci této doby byl získán práškový produkt odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku, odparek byl rozpuštěn ve směsi 1 ml tetrahydrofuranu a 14 ml vody. Směs byla hydrogenována při teplotě místnosti jednu hodinu za přítomnosti 1,6 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru pod vodíkovou atmosférou. Katalyzátor byl odstraněn filtrací a tetrahydrofuran byl odstraněn destilací za sníženého tlaku, pak byla vodná vrstva promyta diethyletherem. Vodná vrstva pak byla zkoncentrována odpařením za sníženého tlaku a podrobena chromatografíí na sloupci [Dowex 1-X4,0,295 - 0,147 mm (50 až 100 mesh), Cl FORM, Dow Chemical] za použití vody jako eluentu. Frakce obsahující titulní sloučeninu byly spojeny a koncentrovány odpařením za sníženého tlaku.

-92CZ 290002 B6

Vodný roztok byl aplikován na sloupec (Cosmosil 75 Cig-prep., Nacalai) a eluován vodou. Frakce obsahující titulní sloučeninu byly spojeny, zkoncentrovány odpařením za sníženého tlaku a lyofílizovány, čímž vzniklo 139 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr), u_raax cm“¹:

3390, 1759, 1664, 1586, 1455, 1369.

1,2, (3H, dublet, J = 5,99 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,29 Hz), 1,80 - 2,20 (2H, multiplet), 2,90 3,10 (1H, multiplet), 3,30-3,40 (1H, multiplet), 3,40- 3,50 (1H, multiplet), 3,75-3,80 (1H, multiplet), 4,20- 4,30 (2H, multiplet), 3,90-5,20 (8H, multiplet), 5,45 -5,65 (1H, multiplet), 5,70 - 5,80 (1H, multiplet), 8,96 a 8,97 (dohromady 1H, dva singlety).

Příklad 41 (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-(3-trimethylamonioazetidin-lylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

41(1) 4-nitrobenzyl (1 R,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin—4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyll-karbapen-2-em-3-karboxylát

Roztok 0,98 g (2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4—merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 30, rozpuštěného ve 20 ml suchého acetonitrilu a 0,418 ml diizopropylethylaminu bylo současně po kapkách přidáno za chlazení ledem k roztoku 1,43 g 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, ve 25 ml suchého acetonitrilu. Směs byla 2 hodiny míchána při stejné teplotě, pak byla ponechána v lednici přes noc. Reakční směs pak byla koncentrována odpařením za sníženého tlaku a výsledný odparek byl zředěn ethylacetátem, výsledná směs byla promyta vodou a pak vodným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátová vrstva byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a pak koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl čištěn chromatografíí na sloupci silikagelu a frakce získané elucí 75 : 25 objemové směsi ethylacetátu a methanolu byly spojeny a koncentrovány odpařením za sníženého tlaku, čímž se získalo 1,16 g titulní sloučeniny ve formě prášku.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1774,1712, 1663, 1607, 1522, 1456,1404,1346.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3 + D₂O) ppm:

1,26 (3H, dublet, J = 7,11 Hz), 1,36 (3H, dublet, J = 6,13 Hz), 2,00 - 2,18 (1H, multiplet), 2,10, 2,14, 2,25 a 2,28 (dohromady 6H, čtyři singlety), 2,51 -2,73 (1H, multiplet), 2,86- 4,56 (13H, multiplet), 5,08- 5,54 (4H, multiplet), 7,50 (2H, dublet, J = 8,57 Hz), 7,65 (2H, dublet, J = 8,57 Hz), 8,23 (4H, dublet, J = 8,57 Hz).

-93CZ 290002 B6

41(2) (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-(3-trimethylammonioazetidin-l-ylkarbonyl/-pyrrolidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

1,00 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno ve 12 ml suchého acetonitrilu a 243 mg methyltrifluormethansulfonátu bylo přidáno k výslednému roztoku za chlazení ledem, pak byla směs míchána jednu hodinu při stejné teplotě. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku a výsledný práškovitý produkt byl rozpuštěn ve směsi 20 ml tetrahydrofuranu a 20 ml vody. Směs byla hydrogenována při teplotě místnosti 2 hodiny v přítomnosti 1,00 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru a pod atmosférou vodíku. Katalyzátor byl pak odstraněn filtrací, filtrát byl promyt diethyletherem. Výsledná vodná fáze byla koncentrována odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl podroben chromatografii na sloupci [Dowex 1-X4, 0,295-0,147 mm (50 až lOOmesh), CF model, Dow Chemical] za použití vody jako eluentu. Frakce obsahující titulní sloučeninu byla koncentrována odpařením za sníženého tlaku a podrobena chromatografii na sloupci v reverzní fázi (Cosmosil 75Cig-prep., Nacalai Tesque) a eluována vodou. Frakce obsahující titulní sloučeninu, byly koncentrovány odpařením za sníženého tlaku a lyofilizovány, čímž vzniklo 265 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 296.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1758,1665,1594,1482,1373,1285,1255,1145.

1,21 (3H, dublet, J = 7,17 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,29 Hz), 1,98 - 2,09 (1H, multiplet), 2,93 3,05 (1H, multiplet), 3,21 a 3,22 (dohromady 9H, dva singlety), 3,32 - 3,50 (3H, multiplet), 3,78 (1H, dublet dubletů, J= 12,26 a 6,60 Hz), 4,01-4,12 (1H, multiplet), 4,20-4,29 (2H, multiplet), 4,43 - 4,85 (6H, multiplet).

Příklad 42

Kyselina (1R,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidm-lylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylavá

42( 1) 4-nitrobenzyl (1 R,5 S,6S)-6-/( 1 R)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/3-( 1-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl1 -karbapen-2-em-3-karboxy lát

Roztok 3,10 g (2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl)-4-merkapto-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 31, rozpuštěný ve 25 ml suchého acetonitrilu a 1,25 ml diizopropylethylaminu bylo přidáno současně po kapkách za chlazení ledem k roztoku 4,27 g 4—nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připravenému jako je popsáno v přípravě 32, v 55 ml suchého acetonitrilu. Výsledná směs byla ponechána při stejné teplotě

-94CZ 290002 B6 hodinu a pak v lednici přes noc. Na konci této doby byla reakční směs zkoncentrována odpařením za sníženého tlaku a výsledný odparek byl zředěn ethylacetátem. Směs takto získaná byla promyta vodou a pak vodným roztokem chloridu sodného. Výsledný roztok ethylacetátu byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a pak koncentrován odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl podroben chromatografii na sloupci silikagelu a frakce získané eluci s 7: 7:6 objemovou směsí methylenchloridu, ethylacetátu a methanolu byly spojeny a koncentrovány odpařením za sníženého tlaku, čímž bylo získáno 2,94 g titulní sloučeniny ve formě prášku.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1772,1708,1667,1607,1522,1449,1403,1346,1209.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃ + D₂O) ppm:

1,27 (3H, dublet, J= 7,19 Hz), 1,36 (3H, dublet, J= 6,14 Hz), 2,15- 5,55 (19H, multiplet), 7,10-8,28 (11H, multiplet).

42(2) Kyselina (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-(3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxylát

0,25 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno ve stupni 1) výše, bylo rozpuštěno ve směsi 7,5 ml tetrahydrofuranu a 7,5 ml vody a k výsledné směsi bylo přidáno 0,25 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru a pak byla směs hydrogenována 1,5 hodiny při teplotě místnosti pod atmosférou vodíku. Na konci této doby byl katalyzátor odstraněn filtrací a filtrát byl promyt diethyletherem. Výsledná vodná vrstva byla pak koncentrována odpařením za sníženého tlaku a odparek byl podroben chromatografií v reverzní fázi na sloupci (Cosmosil 75 C₁₈-prep., 30 g, Nacalai Tesque). Z frakcí získaných eluci 7% (obj.) vodným acetonitrilem, byla frakce obsahující titulní sloučeninu koncentrována odpařením za sníženého tlaku a lyofilizována, čímž bylo získáno 70 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 297.

IR-spektrum (H₂O), u_max cm^-1:

1757, 1660,1598, 1466, 1383, 1285, 1255, 1181, 1149.

1,22 (3H, dublet, J = 7,12 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,27 Hz), 1,90 - 2,02 (1H, multiplet), 2,84 2,95 (1H, multiplet), 3,29 -3,50 (3H, multiplet), 3,56-3,65 (1H, multiplet), 3,91- 4,03 (1H, multiplet), 4,20- 4,43 (4H, multiplet), 4,50- 5,45 (4H, multiplet), 7,22 a 7,23 (dohromady 1H, dva singlety), 7,54 (1H, singlet), 8,12 (1H, singlet).

Příklad 43 (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-2-/(2S,4S)-2-/3-(3-methyl-l-imidazolio)azetidin-l-ylkarbonyl/pynOlidin-4-ylthio/-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

-95CZ 290002 B6

1,72 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(-4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 42(1), bylo rozpuštěno v 18 ml suchého acetonitrilu a 0,28 mg methyltrifluormethansulfonátu bylo přidáno k výslednému roztoku za chlazení ledem. Směs byla pak 1 hodinu míchána při stejné teplotě. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku a práškovitý produkt, takto získaný byl rozpuštěn ve směsi 30 ml tetrahydrofuranu a 30 ml vody. Směs byla pak hydrogenována při teplotě místnosti 2 hodin za přítomnosti 2,10 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru pod vodíkovou atmosférou. Reakční směs byla pak zpracována, čištěna a lyofilizována stejným způsobem jako je popsáno v příkladu 40(2), čímž se získalo 383 mg titulní sloučeniny ve formě bezvodého prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 296.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1759,1664, 1597, 1561, 1466, 1373,1284, 1184, 1147.

1,21 (3H, dublet, J = 7,21 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,38 Hz), 2,00 - 2,14 (1H, multiplet), 2,93 3,05 (1H, multiplet), 3,30 - 3,51 (3H, multiplet), 3,73 - 3,82 (1H, multiplet), 3,92 (3H, singlet), 4,01 - 4,10 (1H, multiplet), 4,20 - 4,30 (2H, multiplet), 4,38 - 4,47 (1H, multiplet), 4,55 - 4,96 (4H, multiplet), 5,45 -5,55 (1H, multiplet), 7,55 (1H, singlet), 7,80 (1H, singlet), 9,00-9,02 (1H, dva singlety).

Příklad 44 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-(2-fluorethyl)-l-imidazolio/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidm-3ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxyláthydrochlorid

0,87 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-2-/(2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 42(1), bylo rozpuštěno v 10 ml suchého acetonitrilu a 0,63 ml l-brom-2-fluorethanu, 0,84 g jodidu sodného a 80 ml uhličitanu sodného bylo přidáno k výsledné směsi a pak byla směs zahřáta k varu pod zpětným chladičem na 14 hodin. Na konci této doby byly nerozpuštěné části odfiltrovány a filtrát byl koncentrován odpařením za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl opakovaně promyt dekantací postupně s methylenchloridem a diethyletherem. Pak je sušen odpařením za sníženého tlaku, čímž bylo získáno 0,494 g prášku. Všechna tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 12,5 ml tetrahydrofuranu a 12,5 ml vody. 0,48 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru bylo pak přidáno k roztoku, a směs byla 1 hodinu hydrogenována při teplotě místnosti. Na konci této doby byla reakční směs zpracována, čištěna a lyofilizována stejným způsobem jako je popsáno v příkladu 40(2), čímž bylo získáno 42 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého prášku.

-96CZ 290002 B6

UV-spektrum (H₂O), nm: 297.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1759,1664, 1597, 1563,1467,1374, 1284,1222, 1183.

1,21 (3H, dublet, J = 6,97 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,28 Hz), 2,02 - 2,14 (1H, multiplet), 2,93 3,07 (1H, multiplet), 3,31-3,51 (3H, multiplet), 3,74 -3,83 (1H, multiplet), 4,02-4,10 (1H, multiplet), 4,20-4,30 (2H, multiplet), 4,41-4,49 (1H, multiplet), 4,54- 4,98 (9H, multiplet), 5,48 - 5,59 (1H, multiplet), 7,68 (1H, singlet), 7,88 (1H, singlet), 9,15 a 9,17 (1H, dva singlety).

Příklad 45

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4y Ithio/—6—/(1 R)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

0,75 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 41(1), bylo rozpuštěno ve směsi 21 ml tetrahydrofuranu a 14 ml vody, a 0,75 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru bylo přidáno k výsledné směsi, pak byla směs hydrogenována 1,5 hodiny při teplotě místnosti pod atmosférou vodíku. Na konci této doby byl katalyzátor odstraněn filtrací a filtrát byl promyt diethyletherem. Výsledný vodný roztok byl koncentrován odpařením za sníženého tlaku a odparek byl podroben chromatografií v reverzní fázi na sloupci (Cosmosil 75Cig-prep., 25 g, Nacalai Tesque). Z frakcí získaných elucí 7% (obj). vodným acetonitrilem, byla frakce obsahující titulní sloučeninu koncentrována odpařením za sníženého tlaku a lyofilizována, čímž se získalo 171 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm'¹: 299.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1757,1653,1599,1462,1385,1284, 1259,1150.

NMR-spektrum: (270 MHz, D₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylpropionát sodný) ppm:

1,22 (3H, dublet, J = 7,22 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,40 Hz), 1,83 - 1,92 (1H, multiplet), 2,41 (3H, singlet), 2,45 (3H, singlet), 2,78 - 2,89 (1H, multiplet), 3,26 (1H, dublet dubletu, J = 12,14 a 4,90 Hz), 3,34- 3,73 (4H, multiplet), 3,89-4,06 (2H, multiplet), 4,19-4,33 (5H, multiplet), 4,43-4,54 (1H, multiplet).

-97CZ 290002 B6

Příklad 46 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-/N-(karbamoylmethyl)-N,N-dimethylammonio/azetidin-lylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3karboxyláthydrochlorid

0,60 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidm-l-ylkarbonyl)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyV-l-methyl-l-karbapen2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 41(1), bylo rozpuštěno v 8 ml suchého acetonitrilu a 0,74 g 2-jodacetamidu bylo přidáno k výsledné směsi, po čemž byla směs 2 hodiny míchána při 70 °C. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku a výsledný zbytek byl opakovaně promyt dekantací, postupně smethylenchloridem a diethyletherem a pak sušen odpařením za sníženého tlaku, čímž se získalo 0,90 g prášku. Všechna tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 24 ml tetrahydrofuranu a 16 ml vody. 0,95 g 10%paladia na uhlíku jako katalyzátoru, bylo pak přidáno k roztoku, pak byla směs hydrogenována 1,5 hodiny při teplotě místnosti pod atmosférou vodíku. Reakční směs byla zpracována, čištěna a lyofilizována stejným způsobem jako je popsáno v příkladu 40(2), čímž se získalo 156 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého prášku.

UV-spektrum (H₂O), λ^ν nm: 297.

IR-spektrum (KBr), o_max cm^-1:

1767, 1701, 1607, 1521,1445,1404,1346,1170.

1,21 (3H, dublet, J = 7,18 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 6,37 Hz), 1,98 - 2,10 (1H, multiplet), 2,93 3,04 (1H, multiplet), 3,38 a 3,40 (dohromady 6H, dva singlety), 3,30- 3,50 (3H, multiplet), 3,74 - 3,80 (1H, multiplet), 4,01 - 4,10 (1H, multiplet), 4,15 - 4,30 (4H, multiplet), 4,43 - 4,88 (5H, multiplet), 4,94 - 5,03 (1H, multiplet).

Příklad 47 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-/(2-fluorethyl)dimethylammonio/azetidin-l-yIkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

-98CZ 290002 B6

715 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/( 1 R)-l -hydroxyethyl/-l-methyl-l karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 41(1), bylo rozpuštěno v 7 ml suchého acetonitrilu a 1,22 g l-brom-2-fluorethanu, 721 mg jodidu sodného a 67 mg uhličitanu sodného bylo přidáno k výsledné směsi, po čemž byla směs zahřívána k varu pod zpětným chladičem 23 hodin. Na konci této doby byly nerozpuštěné části odfiltrovány, filtrát byl koncentrován evaporací za sníženého tlaku. Výsledný odparek byl opakovaně promyt dekantací postupně s methylenchloridem a diethyletherem a směs byla sušena odpařením za sníženého tlaku, čímž se získalo 400 mg prášku. Všechna tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 8 ml tetrahydrofuranu a 8 ml vody. 0,40 g 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru bylo přidáno k roztoku, pak byla směs hydrogenována při teplotě místnosti 1,5 hodiny ve vodíkové atmosféře. Reakční směs byla zpracována, čištěna a lyofilizována stejným způsobem jako je popsáno v příkladu 40(2), čímž se získá 39 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 296.

IR-spektrum (KBr), Umax cm^-1:

1759,1668, 1598,1476, 1374,1285, 1226,1180.

1,21 (3H, dublet, J = 7,18 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,26 Hz), 1,98 - 2,10 (1H, multiplet), 2,93 3,04 (1H, multiplet), 3,27 a 3,29 (dohromady 6H, dva singlety), 3,33-3,51 (3H, multiplet), 3,75-3,92 (3H, multiplet), 4,02-4,11 (1H, multiplet), 4,20-4,28 (2H, multiplet), 4,434,85 (6H, multiplet), 4,90 - 5,06 (2H, multiplet).

Příklad 48 (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-/(2-hydroxyethyl)dimethylammonio/azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylát hydrochlorid

0,65 g 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 41(1), bylo rozpuštěno v 7 ml suchého acetonitrilu a 1,05 g 2-jodethanolu bylo přidáno k výslednému roztoku. Směs byla pak zahřívána 5 hodin k varu pod zpětným chladičem. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku a zbytek byl opakovaně promyt dekantací postupně s methylenchloridem a diethyletherem. Směs byla pak sušena odpařením za sníženého tlaku, čímž se získalo 0,84 g prášku. Všechna tato sloučenina byla rozpuštěna ve směsi 21 ml tetrahydrofuranu a 14 ml vody. 0,90 g 10% paladia na uhlíku jako katalyzátoru bylo pak přidáno k roztoku, pak byla směs hydrogenována při teplotě místnosti 1,5 hodiny ve vodíkové atmosféře. Reakční směs byla zpracována, čištěna a lyofilizována stejným způsobem jako je popsáno v příkladu 40(2), čímž se získalo 55 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

-99CZ 290002 B6

UV-spektrum (H₂O), nm: 297.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1758, 1665, 1595, 1477, 1374, 1261,1227, 1149.

1,21 (3H, dublet, J = 7,20 Hz), 1,28 (3H, dublet, J = 6,36 Hz), 1,98 - 2,10 (1H, multiplet), 2,93 -

3,04 (1H, multiplet), 3,25 a 3,26 (dohromady 6H, dva singlety), 3,31 - 3,60 (5H, multiplet), 3,77 (1H, dublet dubletů, J= 12,23 a 6,63 Hz), 4,00-4,10 (3H, multiplet), 4,21-4,29 (2H, multiplet), 4,42 - 4,86 (6H, multiplet).

Příklad 49

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-615 /(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

3630 mg 4-nitrobenzyl (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin20 l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v příkladu 33(1), bylo rozpuštěno ve 190 ml 3 : 2 objemové směsi tetrahydrofuranu a vody a 5500 mg 10% paladia na uhlí jako katalyzátoru, bylo přidáno k výslednému roztoku. Směs byla hydrogenována při 30 °C 1,5 hodiny ve vodíkové atmosféře. Na konci této doby byl katalyzátor odstraněn filtrací, filtrát byl promyt diethyletherem a výsledný vodný roztok byl koncentrován na 10 ml odpařením za sníženého tlaku. Výsledný roztok byl podroben chromatografii v reverzní fázi na sloupci silikagelu (Cosmosil 75Cir-prep, 250 ml, Nacalai Tesque), eluován směsí acetonitrilu a vody v poměru v tomto pořadí 0 : 100, 2 : 98, 4 : 96, 6 : 94 objemového množství. Frakce obsahující titulní sloučeninu byly spojeny, koncentrovány odpařením za sníženého tlaku a lyofilizovány, 30 čímž se získalo 901 mg titulní sloučeniny ve formě prášku.

UV-spektrum (H₂O), nm: 298,5.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1755, 1642, 1594, 1464, 1387.

1,22 (3H, dublet, J = 7,2 Hz), 1,29 (3H, dublet, J = 5,3 Hz), 1,75 - 1,85 (1H, multiplet), 2,70 2,83 (1H, multiplet), 3,14-3,21 (1H, multiplet), 3,35-3,47 (3H, multiplet), 3,82 -3,92 (1H, multiplet), 3,96-4,03 (1H, multiplet), 4,05-4,18 (2H, multiplet), 4,19-4,28 (3H, multiplet), 4,34 - 4,43 (1H, multiplet), 4,56 - 4,65 (1H, multiplet).

Příklad 50

Hydrochlorid (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-acetimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin4-ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylové kyseliny

-100CZ 290002 B6

0,40 g (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(3-azetimidoylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)pyrrolidin-4ylthio/-6-/(lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-karboxylová kyselina, připravená jak je popsáno v příkladu 34, byla rozpuštěna ve 20 ml studené vody. 0,88 ml IN vodné kyseliny chlorovodíkové bylo přidáno k výslednému roztoku a směs byla lyofílizována, čímž se získalo 400 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého prášku.

UV-spektrum (H2O), nm: 296.

IR-spektrum (KBr), o_max cm^-1:

1760, 1664, 1630, 1585,1463, 1378, 1286, 1148.

NMR-spektrum (270 MHz, D₂O, vnitřní standard: tetradeuterovaný trimethylsilylprapionát sodný) ppm:

1,01 (3H, dublet, J= 7,17 Hz), 1,09 (3H, dublet, J = 6,37 Hz), 1,76-1,86 (1H, multiplet), 2,07 (3H, singlet), 2,70-2,82 (1H, multiplet), 3,10 -3,30 (3H, multiplet), 3,55 (1H, dublet dubletu, J = 12,9 a 6,54 Hz), 3,78 - 3,96 (2H, multiplet), 4,00 - 4,17 (3H, multiplet), 4,26-4,67 (4H, multiplet).

Příklad 51

Kyselina (lR,5S,6S)-2-/(2S,4S)-2-(azetidin-3-ylkarbamoyl)pyrrolidin-4-ylthio/-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová

Následující postup je stejný, jako je popsáno v příkladu 33(1), následuje postup stejný jako v příkladu 49, aleje použito 0,80 g 4-nitrobenzyl (1R,5S,6S)-2-(difenylfosforyloxy )-6-/( 1R)l-hydroxyethyl/-l-methyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 32, a 0,95 g (2S,4S)-4-merkapto-2-/l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidin-3ylaminokarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, připraveného jak je popsáno v přípravě 33, čímž bylo získáno 86 mg titulní sloučeniny.

UV-spektrum (H₂O), nm: 301.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1754,1590,1450,1389,1287,1264.

-101CZ 290002 B6

1,22 (3H, dublet, J = 7,25 Hz), 1,30 (3H, dublet, J = 6,36 Hz), 1,83 - 1,93 (1H, multiplet), 2,72 2,82 (1H, multiplet), 2,88 (1H, dublet dubletů, J = 11,64 a 5,19 Hz), 3,34 - 3,48 (3H, multiplet), 3,65-3,82 (4H, multiplet), 4,04 (1H, triplet, J= 11,67 Hz), 4,19- 4,29 (2H, multiplet), 4,34 (1H, dublet dubletů, J = 9,02 a 5,98 Hz), 4,40 - 4,48 (1H, multiplet).

Příprava 1 (2S,4S)-4-merkapto-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/-l-(4— nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidintrifluormethansulfonát (a) l-amidino-4—terc.butoxykarbonylpiperazinhemisulfát

V 60 ml roztoku vody a tetrahydrofuranu v objemovém poměru 1 : 1 bylo rozpuštěno 2,50 g 1amidinpiperazinhemisulfátu a do výsledného roztoku bylo přidáno 3,40 g roztoku diterc.butyldikarbonátu v 10 ml tetrahydrofuranu. Směs byla 2,5 hodiny míchána při teplotě místnosti. Destilací za sníženého tlaku byl oddělen tetrahydrofuran, nerozpustný podíl byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Po extrakci ethanolem (dvakrát, vždy množstvím 50 ml ethanolu) a methanolem (dvakrát, vždy s množstvím 50 ml methanolu) byl extrakt odpařován za vzniku 2,48 g krystalů výsledné sloučeniny o teplotě tání 278 °C (za rozkladu).

1,47 (9H, singlet), 3,49 - 3,64 (8H, multiplet).

IR-spektrum (KBr), Omax cm^-1:

1696,1656,1616,1416,1169, 1121.

(b) 4-terc.butoxykarbonyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin

V 90 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v objemovém poměru 1 : 1 bylo rozpuštěno 2,22 g 1amidin-4-terc.butoxykarbonylpiperazinhemisulfátu, jehož příprava je popsána v předchozí přípravě la). Do vzniklé směsi bylo za stálého míchání a chlazení přidáno 16 ml 1N vodného roztoku hydroxidu sodného a roztok 1,89 g 4-nitrobenzyloxykarbonylchloridu v 16 ml tetrahydrofuranu. Vzniklá směs byla za stálého chlazení míchána 30 minut a následkem destilace za sníženého tlaku bylo odstraněno organické rozpouštědlo. Vzniklý vodný roztok byl extrahován ethylacetátem. Po promytí extraktu vodným roztokem chloridu sodného byl extrakt sušen nad bezvodým sulfátem sodným. Směs byla odpařována za sníženého tlaku. Vzniklý odparek byl po adsorpci na sloupec silikagelu čištěn chromatografií při eluci roztokem ethylacetátu a hexanu v objemovém poměru 4:1. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly odpařovány za sníženého tlaku. Vzniklo 2,32 g amorfního prášku výsledné sloučeniny.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃), ppm:

1,47 (9H, singlet), 3,45 - 3,61 (8H, multiplet), 5,21 (2H, singlet), 6,90 - 7,20 (2H, široký), 7,56 (2H, dublet, J = 8,6 Hz), 8,20 (2H, dublet, J = 8,6 Hz).

IR-spektrum (KBr), cm'¹:

1698,1652,1601,1547, 1523, 1279.

l(c) l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin

V 10 ml trifluoroctové kyseliny bylo rozpuštěno 750 mg 4-terc.butoxykarbonyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)piperazinu, jehož příprava je popsána v předchozí přípravě lb).

-102CZ 290002 B6

Vzniklá směs byla nejprve 30 minut míchána při teplotě místnosti. Po zahuštění směsi odpařováním za sníženého tlaku byl odparek rozpuštěn ve směsi ethylacetátu a vody. Do vzniklého roztoku byl přidán vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného za vzniku alkalického pH směsi. Vrstva ethylacetátu byla oddělena a podíl vody byl extrahován ethylacetátem. Vrstva ethylacetátu a ethylacetátové promývací kapaliny byly sloučeny a odpařovány za sníženého tlaku za vzniku 530 mg prášku výsledné sloučeniny.

3,27 (4H, triplet, J = 5,3 Hz), 3,80 (4H, triplet, J = 5,3 Hz), 5,25 (2H, singlet), 7,61 (2H, dublet, J = 8,6 Hz), 8,27 (2H, dublet, J = 8,6 Hz).

l(d) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)piperazinl-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

V 7,4 ml suchého acetonitrilu bylo rozpuštěno 740 mg (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4nitrobenzyloxy)pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a do vzniklého roztoku bylo přidáno 33Q mg Ν,Ν'-karbonyldiimidazol. Po 30 minutách míchání směsi za teploty místnosti byl do směsi přidán roztok 525 mg l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)piperazinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě lc), rozpuštěného v 10 ml acetonitrilu. Vzniklá směs se nechala přes noc stát při teplotě místnosti. Následně byla reakční směs ředěna ethylacetátem, promyta vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a vodným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým sulfátem sodným a odpařována za sníženého tlaku. Po adsorpci na sloupec silikagelu byl odparek čištěn chromatografíí při eluci nejprve roztokem ethylacetátu a pak směsí ethylacetátu a acetonitrilu v objemovém poměru 4:1. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly odpařovány za sníženého tlaku. Vzniklo 890 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1709,1652,1608,1520,1439,1346.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃ + D₂O) ppm:

1,72-1,89 (IH, multiplet), 2,39-2,52 (IH, multiplet), 3,03-3,18 (IH, multiplet), 3,30-4,10 (15H, multiplet), 4,51 (4,62 (IH, multiplet), 4,98-5,32 (4H, multiplet), 6,85 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,23 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,40 - 7,58 (4H, multiplet), 8,15 - 8,25 (4H, multiplet).

l(e) (2S,4S)-4-merkapto-2-/4-(4—nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidmtrifluormethansulfonát

Ve směsi 4,4 ml trifluoroctové kyseliny a 0,88 ml anisolu bylo rozpuštěno 880 mg (2S,4S)-4-(4methoxybenzylthio)-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidmu, jehož syntéza je popsána v přípravě ld). Do vzniklého roztoku bylo za stálého chlazení a míchání po kapkách přidáno 160 mikrolitrů trifluormethansulfonové kyseliny. Vzniklá směs byla tři hodiny míchána a pak odpařována za sníženého tlaku. Odparek byl třikrát promyt diethyletherem. Prášek, který vznikl, byl sušen za vzniku 918 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), cm’¹:

1761, 1671,1618, 1523,1443, 1348, 1285, 1246, 1225, 1169.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂0,270 MHz) ppm:

1,60 - 1,76 (IH, multiplet) 2,65 - 2,82 (IH, multiplet), 3,05 - 3,80 (10H, multiplet), 3,94 a 4,05 (dohromady IH, dvojitý dublet dubletu, J = 9,8 a 6,8 Hz), 4,74 a 4,83 (dohromady IH, dva triplety, J = 7,8 Hz), 5,05 - 5,25 (2H, multiplet), 5,40 (2H, singlet), 7,53 a 7,63 (dohromady 2H, dva dublety, J = 8,8 Hz), 7,72 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 8,21 a 8,23 (dohromady 2H, dva dublety), J = 8,8 Hz), 8,28 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

-103CZ 290002 B6

Příprava 2 (2S,4S)-4—merkapto-l-methyl-2-/4—(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

2(a) l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)piperazin-bis(trifluoracetát)

Ve 12 ml trifluoroctové kyseliny bylo rozpuštěno 750 mg 4-terc.butoxy karbony 1-1-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)piperazinu, jehož syntéza je popsána v přípravě lb), a vzniklý roztok byl za teploty místnosti míchán 30 minut. Po odpařování za sníženého tlaku byl do odparku přidán diethylether za vzniku prášku, který byl třikrát promyt diethyletherem a pak sušen do vzniku 1010 mg bezvodého prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1771,1698,1665,1623,1518,1353,1221,1197.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O, 270 MHz) ppm:

3,21 (4H, triplet, J = 5,4 Hz), 3,73 (4H, triplet, J = 5,4 Hz), 5,31 (2H, triplet), 7,68 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 8,26 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

2(b) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Ve 20 ml suchého acetonitrilu bylo rozpuštěno 480 mg (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-lmethylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny. Po přidání 325 mg Ν,Ν'-karbonyldiimidazolu do této suspenze byla směs 1 hodinu míchána při teplotě 40 °C. Reakční směs byla následně zchlazena v lázni vody a ledu a do směsi bylo přidáno 980 mg l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-bis-(trifluoracetátu), jehož syntéza je popsána v přípravě 2a), a 320 mikrolitrů diizopropylethylaminu. Vzniklá reakční směs byla přes noc míchána při teplotě místnosti. Po zředění směsi ethylacetátem a promytí vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, čtyřikrát vodou a vodným roztokem chloridu sodného byl ethylacetátová roztok sušen nad bezvodým sulfátem sodným a odpařován za sníženého tlaku. Po adsorpci na sloupec silikagelu byl odparek čištěn chromatografií při eluci směsí ethylacetátu a methanolem v objemovém poměru 4:1. Frakce obsahující žádanou sloučeninu byly odpařovány za sníženého tlaku za vzniku 860 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), cm¹:

1648,1609,1542, 1513, 1440,1346,1303, 1273,1239.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3 + D₂O) ppm:

1,78 (1H, dvojitý dublet dubletů, J = 13,7, 9,3 a 5,4 Hz), 2,33 (3H, singlet), 2,48- 2,60 (2H, multiplet), 3,03 -3,24 (3H, multiplet), 3,70 (2H, singlet), 3,80 (3H, singlet), 3,45-4,15 (8H, multiplet), 5,21 (2H, singlet), 6,84 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,20 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 7,56 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 8,20 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

2(c) (2S,4S)~4-merkapto-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-lylkarbonyl/pyrrolidin

Ve směsi 7,25 ml trifluoroctové kyseliny a 1,45 ml anisolu bylo rozpuštěno 1450 mg (2S,4S)-4(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)piperazm-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 2b). Do vzniklého roztoku bylo za stálého míchání a chlazení přidáno po kapkách 562 mikrolitrů trifluormethansulfonové kyseliny a směs byla 60 minut míchána při dodržení stejných fyzikálních podmínek. Následně byla směs míchána při teplotě místnosti 30 minut, a pak odpařována za sníženého tlaku. Odparek byl třikrát promyt diethyletherem za vzniku prášku, z kterého po sušení vzniklo 1940 mg bis(trifluormethansulfonátu) výsledné sloučeniny v podobě prášku.

-104CZ 290002 B6

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O, 270 MHz) ppm:

1,81 (1H, dvojitý dublet dubletů, J=13,2, 9,3 a 8,8 Hz), 2,82 (3 H, singlet), 2,98 (1H, dublet tripletů, J= 13,2a 7,8 Hz), 3,28-3,81 (11H, multiplet), 4,63 (1H, triplet, J= 8,8 Hz), 5,40 (2H, singlet), 7,72 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 8,28 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

Celkové množství soli bylo rozpuštěno ve vodném ethylacetátu a do vzniklého roztoku byl přidán vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného za vzniku alkalického pH směsi. Vrstva ethylacetátu byla oddělena, promyta vodným roztokem chloridu sodného, sušena nad bezvodým sulfátem sodným a odpařována za sníženého tlaku. Vzniklo 1,21 g amorfního prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1648, 1605,1544, 1520, 1440,1346,1304, 1273,1232.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3 + D₂O) ppm:

1,91 (1H, dvojitý dublet dubletů, J= 13,7, 8,3 a 4,9 Hz), 2,36 (3H, singlet), 2,65-2,80 (2H, multiplet), 3,08 (1H, dublet dubletů, J = 10,2 a 2,9 Hz), 3,24 (1H, triplet, J = 8,3 Hz), 3,32 3,44 (1H, multiplet), 3,46 -4,00 (8H, multiplet), 5,21 (2H, singlet), 7,56 (2H, dublet, J = 8,8 Hz), 8,19 (2H, dublet, J = 8,8 Hz).

Příprava 3 až 21

Sloučeniny byly připraveny podle stejných postupů uvedených v přípravách 1 a 2.

Příprava 3 (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)homopiperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

IR-spektrum (KBr), cm^-1:

1708,1651,1605,1551,1520,1441,1346,1284.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3 + D₂O) ppm:

1,75- 1,98 (3H, multiplet), 2,00-2,20 (1H, multiplet), 2,66-2,82 (1H, multiplet), 3,13-3,96 (8H, multiplet), 4,06-4,15 (2H, multiplet), 4,61 (1H, triplet, J= 8,0 Hz), 5,10 - 5,25 (4H, multiplet), 7,42 - 7,58 (4H, multiplet), 8,16 - 8,23 (4H, multiplet).

Příprava 4 (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)homopiperazin-lylkarbonyl/pyrrolidin

IR-spektrum (KBr), cm“¹:

1641, 1607, 1552,1486,1444, 1347,1285.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3 + D₂O) ppm:

1,81 - 2,01 (3H, multiplet), 2,63 - 2,75 (1H, multiplet), 2,80 - 2,88 (1H, multiplet), 3,07 - 3,15 (1H, multiplet), 3,23-3,93 (1 OH, multiplet), 5,21 (2H, singlet), 7,54-7,57 (2H, multiplet), 8,17 - 8,22 (2H, multiplet).

-105CZ 290002 B6

Příprava 5 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/4-(4--nitrobenzyloxykarbonylguanidin)piperidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 6 (25.45) -4-nierkapto-l-methyl-2-/4-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)piperidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 7 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)pyrrolidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 8 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-2-/(3S)-3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)pyrrolidin-lylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 9 (2S,4S}-4-merkapto-l-(4-4iitrobenzyloxykarbonyl)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 10 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-l-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 11 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/2-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)ethylkarbamoyl/pyrrolidin

Příprava 12 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-2-/2-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)ethylkarbamoyl/pyrrolidin

Příprava 13 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/4-(methyl-4-nitrobenzyloxykarbonylamidino)piperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

-106CZ 290002 B6

Příprava 14 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-2-/4-(methyl-4-nitrobenzyloxykarbonylamidm)piperazin-lylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 15 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3R)-3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)pyrrolidin)-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 16 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-2-/(3R)-3-(4-nitrobenzyloxykarbonylguanidin)pyrrolidin-lylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 17 (25.45) -4-merkapto~l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)-3-methylpiperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 18 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-2-/(3R)-4-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)-3-methyIpiperazin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Příprava 19 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/l-(4-nitroben2yloxykarbonyIaniidm)piperidin-4-ylkarbamoyl/pyrrolidin

Příprava 20 (25.45) -4-merkapto-l-/l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidmo)pyrrolidin-3-ylkarbamoyl/pyrrolidin

Příprava 21 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/l-(4-nitrobenzyloxykarbonylamidin)azetidin-3-ylkarbamoyl/pyrrolidin

Příprava 22 (2S,4S)-4-merkapto-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidm

22(a) (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

-107CZ 290002 B6

Ve 20 ml suchého acetonitrilu bylo rozpuštěno 2,05 g (2S,4S)-4—(4—methoxybenzylthio)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové kyseliny a do vzniklého roztoku bylo přidáno 0,78 g Ν,Ν'-karbonyldiimidazolu. Po jedné hodině míchání při 40 °C bylo do roztoku po kapkách během chlazení přidáno 1,00 g 3-aminoazetidmdihydrochloridu a 2,40 ml diizopropylethylaminu v 10 ml methanolu. Směs byla při stejné teplotě míchána jednu hodinu. Reakční směs byla filtrována, odpařována za sníženého tlaku, odparek byl ředěn ethylacetátem, promyt vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Sušením nad bezvodým sulfátem hořečnatým byla oddělena vrstva ethylacetátu s následným odpařováním za sníženého tlaku. Odparek byl adsorpcí na sloupec 100 g silikagelu (Silikagel 60 9385, Měrek) čištěn chromatografii při eluci roztokem ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 65 : 35. Vzniklo 2,56 g amorfního prášku.

IR-spektrum (KBr), u_max cm¹:

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3) ppm:

1,88 - 2,04 (1H, multiplet), 2,38 - 3,20 (4H, multiplet), 3,25 - 3,34 (1H, multiplet), 3,67 - 4,62 (6H, multiplet), 3,72 (2H, singlet), 3,78 a 3,79 (dohromady 2H, dva singlety), 5,09- 5,37 (2H, multiplet), 6,84 (2H, dublet, J = 8,78 Hz), 7,22 (2H, dublet, J = 8,78 Hz), 7,45 (2H, dublet, J = 8,76 Hz), 8,21 (2H, dublet, J = 8,78 Hz).

22(b) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidm-lylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrroIidin

Ve 20 ml methylenchloridu bylo rozpuštěno 0,81 g (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, jehož příprava je popsána v předchozí přípravě 22a) a do vzniklého roztoku bylo dodáno během chlazení 0,32 g diizopropylethylaminu a 0,4 g p-nitrobenzylchloroformiátu. Směs byla nejprve 40 minut míchána za stálého chlazení a pak ředěna ethylacetátem, promyta vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Sušením nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařováním za sníženého tlaku byla ze směsi oddělena vrstva ethylacetátu. Odparek byl adsorpcí na sloupec 40 g silikagelu (silikagel 60 9385, Měrek) čištěn chromatografii při eluci směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 99 : 1. Vzniklo 0,64 g výsledné sloučeniny v podobě amorfního prášku.

IR-spektrum (CHCI3), u_max cm'¹:

1725,1662,1608,1521,1440,1347, 1250.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3) ppm:

1,94 - 2,04 (1H, multiplet), 2,31-2,48 (1H, multiplet), 3,04 - 3,12 (1H, multiplet), 3,26-3,34 (1H, multiplet), 3,72 (2H, singlet), 3,79 (3H, singlet), 3,81 - 3,99 (1H, multiplet), 4,08-4,87 (6H, multiplet), 5,09-5,72 (5H, multiplet), 6,82- 6,87 (2H, multiplet), 7,23 (2H, dublet, J = 8,30 Hz), 7,45 a 7,50 (dohromady 4H, dva dublety, J = 8,79 Hz), 8,22 a 8,23 (dohromady 4H, dva dublety, J = 8,79 Hz).

22(c) (2S,4S)-4-merkapto-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

Do 0,94 ml anisolu bylo přidáno 0,59 g (2S,4S)-4-(methoxybenzylthio)-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 22b), a do vzniklé suspenze bylo během chlazení po kapkách přidáno 3,32 ml trifluoroctové kyseliny a 0,15 ml trifluormethansulfonové kyseliny. Během chlazení byla vzniklá směs jednu hodinu míchána a následně byl přidán 1,2dichlorethan. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku byl zbytek promyt opakovanou dekantací při použití hexanu a pak diethyletheru. Po zředění ethylacetátem a alkalizace přidáním vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného byl podíl ethylacetátu oddělen

-108CZ 290002 B6

a promyt vodou a vodným roztokem chloridu sodného, sušen nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařen za sníženého tlaku. Vzniklo 0,44 g amorfního prášku výsledné sloučeniny. IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1709, 1656,1521, 1440,1405,1347, 1257.

NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz) ppm:

1,62 - 1,85 (1H, multiplet), 2,56 - 2,69 (1H, multiplet), 3,05 - 3,25 (2H, multiplet), 3,70 - 4,55 (8H, multiplet), 5,08 - 5,28 (4H, multiplet), 7,55- 7,65 (4H, multiplet), 8,11 - 8,25 (5H, multiplet).

Příprava 23 (2S,4S)-4-merkapto-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylacetimidoylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/-1 -(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

23(a) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylacetimidoylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

V 15 ml ethylacetátu bylo rozpuštěno 0,78 g (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4-(4methoxybenzylthio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyiTolidinu, jehož syntéza byla popsána v přípravě 22a), a během chlazení bylo do vzniklého roztoku přidáno 0,78 ml 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v ethylacetátu. Do reakční směsi byl potom přidán diethylether a vzniklý prášek byl filtrován a sušen za vzniku 0,79 g (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-

0,78 g této sloučeniny bylo uvedeno do suspenze ve 20 ml suchého acetonitrilu a do vzniklé suspenze bylo přidáno 0,51 g N-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)acetamidinu. Vzniklá směs byla nejprve 80 minut míchána při teplotě 50 °C a pak odpařována za sníženého tlaku. Odparek byl zředěn ethylacetátem, promyt vodou a vodným roztokem chloridu sodného, sušen nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařován za sníženého tlaku. Adsorpcí na sloupci 150 ml silikagelu (silikagel 60 9385, Měrek) byl odparek čištěn chromatografíí při eluci směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 95 : 5. Vzniklo 0,99 g amorfního prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1707, 1667, 1608, 1551, 1520,1442, 1346, 1238.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,29 - 2,59 (7H, multiplet), 3,05 - 3,14 (1H, multiplet), 3,26 - 3,34 (1H, multiplet), 3,67 - 4,86 (6H, multiplet), 3,73 (2H, singlet), 3,79 (3H, singlet), 5,09-5,33 (4H, multiplet), 6,85 (2H, dublet, J= 8,79 Hz), 7,23 (2H, dublet, J= 8,79 Hz), 7,44- 7,65 (4H, multiplet), 8,19- 8,25 (4H, multiplet).

(b) (2 S,4S)-4-merkapto-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylacetimidoylamino)azetidinl-ylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

V 1,49 ml anisolu bylo rozpuštěno 0,99 g (2S,4S)-4-(4—methoxybenzylthio)-2-/3-(N-4nitrobenzyloxykarbonylacetamidoylamino)azetidin-1 -ylkarbonyl/- l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí části 23a), a do vzniklého roztoku bylo po kapkách přidáno 10 ml trifluoroctové kyseliny a 0,24 ml trifluormethansulfonové kyseliny. Vzniklá reakční směs byla nejprve během chlazení míchána po dobu 40 minut a pak při teplotě místnosti dalších 50 minut. Do reakční směsi byl přidán 1,2-dichlorethan a směs byla odpařována za sníženého tlaku. Reakční směs byla promyta opakovanou dekantací při použití hexanu a pak diethyletheru a směs pak byla ředěna ethylacetátem a alkalizována přidáním vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po oddělení podílu ethylacetátu promytím vodou a

-109CZ 290002 B6 vodným roztokem chloridu sodného, sušením na bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařováním za sníženého tlaku vzniklo 0,82 g amorfního prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_max cm*¹:

1706,1664, 1607,1551,1521, 1442, 1346,1228.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,73 - 2,65 (4H, multiplet), 2,23 (3H, singlet), 3,23-3,54 (2H, multiplet), 3,78- 4,94 (7H, multiplet), 5,11- 5,37 (4H, multiplet), 7,48 - 7,59 (4H, multiplet), 8,22 a 8,23 (dohromady 4H, dva dublety, J = 8,79 Hz).

Příprava 24 (25.45) -4-merkapto-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylformimidoylamino)azetidin-lylkarbonyl/-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

K syntéze byl použit (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyI)-4-(4-methoxybenzylthio)-l(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pynOlidinhydrochlorid a N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)formamidin jako výchozí sloučeniny, které byly zpracovány podle postupu přípravy 23 za vzniku výsledné sloučeniny.

Příprava 25 (25.45) -4-merkapto-l-methyl-2-/3-(4—nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

25(1) (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methylpyrrolidin

Ve 20 ml suchého acetonitrilu bylo uvedeno do suspenze 1,62 g (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-pyrrolidmkarboxylové kyseliny a do suspenze bylo přidáno 1,02 g N,N'karbonyldiimidazolu. Vzniklá reakční směs byla při teplotě 40 °C míchána po dobu 45 minut. Během chlazení bylo následně po kapkách přidáno 1,00 g 3-aminoazetidindichloridu a 2,40 ml diizopropylethylaminu v 10 ml methanolu. Vzniklá směs byla za stálého chlazení míchána 90 minut. Reakční směs byla odpařována za sníženého tlaku a vzniklý odparek byl čištěn chromatografií na sloupci v reversní fázi při eluci vodným roztokem acetonitrilu o objemové koncentraci 30 % za vzniku 1,21 g bezbarvého oleje výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (CDC1₃), u_mi<> cm*¹: 1618,1510,1465,1246,1176.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,77-2,00 (3H, multiplet), 2,30 (3H, singlet), 2,45 -2,56 (2H, multiplet), 2,88- 2,95 (1H, multiplet), 3,00 - 3,16 (2H, multiplet), 3,70 (2H, multiplet - je uvedena středová hodnota), 3,80 (3H, multiplet-je uvedena středová hodnota), 3,65- 4,06 (3H, multiplet), 4,23-4,33 (1H, multiplet), 4,50- 4,68 (1H, multiplet), 6,81- 6,87 (2H, multiplet), 7,18 - 7,24 (2H, multiplet).

25(b) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/pynOlidin

V 18 ml methylenchloridu bylo rozpuštěno 0,60 g (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl/4-(4-methoxybenzylthio)-l-methylpyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí části 25a), a během chlazení bylo do vzniklého roztoku přidáno 0,38 ml diizopropylethylaminu a 0,46 g p

-110CZ 290002 B6 nitrobenzylchloroformiátu. Po 30 minutách míchání směsi během chlazení byla reakční směs ředěna ethylacetátem a promyta vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Podíl ethylacetátu byl oddělen sušením nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařována za sníženého tlaku. Odparek byl po adsorpci na sloupci silikagelu (silikagel 60 1385, Měrek, 40 g), čištěn chromatografií při eluci směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 95 : 5. Vzniklo 0,85 g amorfního prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_max cm’¹:

1725,1637, 1610,1512, 1463, 1346, 1251.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,77- 1,95 (1H, multiplet), 2,32 a 2,36 (dohromady 3H, dva singlety), 2,49-2,66 (2H, multiplet), 2,98-3,14 (3H, multiplet), 3,69 (2H, singlet), 3,80 (3H, singlet), 3,73 -3,94 (1H, multiplet), 4,11 - 4,83 (4H, multiplet), 5,20 (2H, multiplet - je uvedena středová hodnota), 5,40- 5,51 (1H, multiplet), 6,81 - 6,87 (2H, multiplet), 7,18- 7,22 (2H, multiplet), 7,51 (2H, dublet, J = 8,79 Hz), 8,22 (2H, dublet, J = 8,79 Hz).

25(c) (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-azetidin-lylkarbonyl/pyrrolidin

V 1,53 ml anisolu bylo rozpuštěno 0,73 g (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-/3-(4nitrobenzyloxykarbonylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v přípravě 25b), a do vzniklého roztoku bylo během chlazení po kapkách přidáno 7,25 ml trifluoroctové kyseliny a 0,25 ml trifluormethansulfonové kyseliny. Směs byla nejprve 10 minut míchána během chlazení, a pak byl přidán 1,2-dichlorethan. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Odparek byl promyt opakovanou dekantací při použití hexanu a pak diethyletheru. Po ředění ethylacetátem a alkalizaci přidáním vodného roztoku uhličitanu sodného byl podíl ethylacetátu odstraněn promytím a vodným roztokem chloridu sodného, sušen nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařen za sníženého tlaku. Vzniklo 420 mg amorfního prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (kapalný film), cm'¹:

1721, 1638, 1609,1522,1460, 1347, 1258.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1O₃) ppm:

1,85 -2,12 (2H, multiplet), 2,35 a 2,37 (dohromady 3H, dva singlety), 2,63-2,82 (2H, multiplet), 3,00 - 3,10 (2H, multiplet), 3,30 (1H, široký singlet), 3,86 - 3,96 (1H, multiplet), 4,08- 4,79 (4H, multiplet), 5,21 (2H, singlet), 5,40- 5,62 (1H, multiplet), 7,51 (2H, dublet, J = 8,79 Hz), 8,22 (2H, dublet, J = 8,79 Hz).

Příprava 26 (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylacetimidoylamino)azetidin1 -ylkarbony 1/pyrrolidin

26(a) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylacetimidoylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

Do 15 ml ethylacetátu a 5 ml methylenchloridu bylo přidáno 540 mg (2S,4S)-2-(3aminoazetidin-l-ylkarbonyl/-4-(4—methoxybenzylthio)-l-methylpyrrolidin, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 25a), a do vzniklého roztoku bylo během chlazení přidáno 1,61 ml 4N roztoku hydrogenchloridu v ethylacetátu. Směs byla 30 minut míchána za stálého chlazení, a pak ředěna diethyletherem. Filtrací vznikl prášek, z kterého po sušení vzniklo 650 mg hydrochloridu.

-111CZ 290002 B6

Do 10 ml suchého acetonitrilu bylo přidáno 650 mg tohoto hydrochloridu, 415 mg N-(4nitrobenzyloxykarbonyl)acetamidinu a 277 mikrolitrů diizopropylethylaminu. Suspenze byla jednu hodinu míchána při teplotě 55 °C. Po následné filtraci byl filtrát odpařován za sníženého tlaku a odparek byl po adsorpci na sloupec silikagelu čištěn chromatografií při eluci směsí methylenchloridu, ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 45 :45 : 5. Vzniklo 622 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), cm'¹:

1682, 1638, 1609, 1553, 1512, 1454, 1346, 1225, 1190, 1080.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃ + D₂O) ppm:

1,60-2,38 (7H, multiplet), 2,43 -2,68 (2H, multiplet), 2,83-3,20 (3H, multiplet), 3,69 (2H, singlet), 3,79 (3H, singlet), 3,84 - 5,02 (5H, multiplet), 5,22 (2H, singlet), 6,84 (2H, dublet, J= 8,79 Hz), 7,20 (2H, dublet, J= 8,79 Hz), 7,51 - 7,62 (2H, multiplet), 8,15- 8,28 (2H, multiplet).

26(b) (2S,4S)-4-merkapto-l-methyl-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylacetamidioylamino)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidin

V 1,19 ml anisolu bylo rozpuštěno 610 mg (2S,4S)~4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-/3(N-4—nitrobenzyloxykarbonylacetimidoylamino)azetidinu a během chlazení bylo do vzniklého roztoku přidáno 4,23 ml trifluoroctové kyseliny a 193 mikrolitrů trifluormethansulfonové kyseliny. Směs byla během chlazení míchána jednu hodinu a při teplotě místnosti další jednu hodinu. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku, zbytek byl promyt hexanem a diethyletherem a sušen odpařováním za sníženého tlaku. Po přidání ethylacetátu a alkalizace přidáním nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného byl podíl ethylacetátu oddělen promytím vodným roztokem chloridu sodného a sušen nad bezvodým sulfátem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařováním za sníženého tlaku. Vzniklo 448 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (kapalný film), u_max cm¹:

1642,1608,1554, 1522, 1465,1347, 1237, 1193.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃ + D₂O) ppm:

1,81 - 1,98 (1H, multiplet), 2,07 - 3,50 (11H, multiplet), 3,83 - 5,02 (5H, multiplet), 5,22 a 5,28 (dohromady 2H, dva singlety), 7,50 - 7,62 (2H, multiplet), 8,15 - 8,28 (2H, multiplet).

Příprava 27 (25.45) -4—merkapto-l-methyl-2-/3-(N-4-nitrobenzyloxykarbonylformimidoylamino)azetidin1 -ylkarbonyl/pyrrolidin

K syntéze byly použity (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4-(4-methoxybenzylthio)1-methylpyrrolidinhydrochlorid a N-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)formamidin jako výchozí sloučeniny, které byly zpracovány podle postupu přípravy 26 za vzniku výsledné sloučeniny.

Příprava 28 (25.45) -4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-3-(l-l,2,4-triazoIyl)-l-pyrrolidinylkarbonyl/pyrrolidin

28(1) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/(3S)-3-(l-l,2,4—triazolylj-l-pyrrolidinylkarbonyl)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

-112CZ 290002 B6

V 8 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 768 mg (2S,4S)-4-(4-methyloxybenzylthio)1—(4—nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové kyseliny a vzniklý roztok byl zchlazen na teplotu 0 °C. Po přidání 191 mg triethylaminu a 218 mg pivaloylchloridu byla směs míchána při teplotě 0 °C 5 minut. Následně bylo do směsi dodáno 228 mg (3S)—3—(1-1,2,4triazolyl)pyrrolidintrifluoracetátu, 440 mg diizopropylethylaminu a 7 ml suchého acetonitrilu a směs byla postupně zahřívána, a pak míchána při teplotě 0 °C 15 minut. Po 2 hodinách míchání při teplotě místnosti bylo rozpouštědlo odstraněno odpařováním za sníženého tlaku, odparek byl zředěn ethylacetátem, promyt vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým a destilací za sníženého tlaku byl zbytek po adsorpci na sloupec silikagelu čištěn chromatografíí při eluci směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 7: 1. Vzniklo 803 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), v_max cm^-1:

1709, 1656, 1512, 1346, 857, 738.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid) ppm:

1,40 - 1,70 (1H, multiplet), 2,20-2,80 (2H, multiplet), 2,95 — 3,15 (1H, multiplet), 3,15 -3,95 (11H, multiplet), 4,35-4,65 (1H, multiplet), 5,00-5,30 (4H, multiplet), 6,80-6,95 (2H, multiplet), 7,20-7,35 (2H, multiplet), 7,40- 7,70 (2H, multiplet), 8,00 (1H, multiplet-je uvedena středová hodnota), 8,13 - 8,26 (2H, multiplet), 8,49 - 8,61 (1H, multiplet).

28(b) (2S,4S)-4—merkapto-l-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/(3S)-3-(l-l,2,4—triazolyl)-lpyrrolidinylkarbonyl/pyrrolidin

V 1,5 ml anisolu bylo suspendováno 873 mg (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/(3S)-3-(l1,2,4-triazolyl)-l-pyrrolidinylkarbonyl)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 28a), a během chlazení bylo do vzniklé suspenze přidáno 7,5 ml trifluoroctové kyseliny a 0,24 ml trifluormethansulfonové kyseliny. Směs byla 1,5 hodiny míchána při teplotě místnosti. Odpařením za sníženého tlaku bylo odstraněno rozpouštědlo, promytím odpařen v hexanu byl odstraněn anisol a přidáním diethylethanu vznikla pevná sloučenina, která se pak mele, po opakované dekantaci se získá práškový produkt. Do tohoto prášku bylo přidáno 40 ml ethylacetátu a vodného roztoku uhličitanu sodného, a pak byla organická součást oddělena, sušena nad bezvodým sulfátem hořečnatým, filtrována a odpařována za sníženého tlaku. Vzniklo 713 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr) u_max cm’¹:

1706, 1652, 1522,1346, 857, 739.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid) ppm.

1,15 - 1,25 (1H, multiplet), 1,50-1,80 (1H, multiplet), 2,20-2,60 (2H, multiplet), 2,60-2,90 (1H, multiplet), 3,10-4,10 (8H, multiplet), 4,40- 4,65 (1H, multiplet), 5,00-5,30 (2H, multiplet), 7,45- 7,70 (2H, multiplet), 8,00- 8,02 (1H, multiplet), 8,10- 8,30 (2H, multiplet), 8,50 - 8,62 (1H, multiplet).

Příprava 29 (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/3-(l-l,2,4-triazolyl)-l-azetidinylkarbonyl/pyrrolidin

29(a) (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/3-( 1-1,2,4-triazolyl-l-azetidinylkarbonyl)-l(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

V 11 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 1,13 g (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l(4—nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové kyseliny a vzniklý roztok byl zchlazen na

-113CZ 290002 B6 teplotu 0 °C. Po přidání 280 mg triethylaminu a následně 320 mg pivaloylchloridu byla směs při teplotě 0 °C míchána 5 minut. Pak bylo do roztoku přidáno 1,36 g 3-(1-1,2,4-triazolyl)azetidinhydrochloridu, jehož syntéza s použitím 1,2,4-triazolu je popsána v přípravě 31a) a 31b), 956 mg diisopropylethylaminu a 6 ml suchého acetonitrilu. Vzniklá směs byla nejprve 30 minut míchána při teplotě 0 °C, a pak 30 minut při teplotě místnosti. Reakční směs byla zfiltrována, odpařována za sníženého tlaku, odparek byl rozpuštěn v ethylacetátu a zředěný roztok byl promyt vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým a destilaci za sníženého tlaku byl zbytek po adsorbci na sloupec silikagelu čištěn chromatografií při eluci směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 10:1. Vzniklo 870 mg prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_ma< cm’¹:

1708,1665, 1512,1346, 854, 738.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid) ppm:

1,60 - 1,80 (1H, multiplet), 2,50 - 2,70 (1H, multiplet), 3,00 - 3,15 (1H, multiplet), 3,15 - 3,26 (1H, multiplet), 3,65- 3,90 (6H, multiplet), 4,05- 4,80 (4H, multiplet), 5,10- 5,50 (4H, multiplet), 6,88 (2H, dublet, J = 8,50 Hz), 7,27 (2H, dublet, J = 8,36 Hz), 7,59 - 7,62 (2H, multiplet), 7,90- 8,10 (1H, multiplet), 8,21-8,28 (2H, multiplet), 8,57- 8,66 (1H, multiplet).

29(b) (2S,4S)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)-2-/3-(l-l,2,4-triazolyl)-lazetidinylkarbonyl/pyrrolidin

Do 1,7 ml anisolu bylo přidáno 858 mg (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-2-/3-(l-l,2,4triazolyl)-l-azetidinylkarbonyl)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 29a), a během chlazení bylo do vzniklé suspenze přidáno 8,4 ml trifluoroctové kyseliny a 0,27 ml trifluormethansulfonové kyseliny a směs byla 30 minut míchána při teplotě 0 °C a pak 30 minut při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařováním za sníženého tlaku, odparek byl promyt hexanem a pak diethyletherem. Po přidání 100 ml ethylacetátu a 30 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného byl odstraněn organický podíl, který byl sušen nad bezvodým sulfátem hořečnatým. Po filtraci a odpařování za sníženého tlaku vzniklo 873 mg bílého prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

1706,1663, 1522,1347, 854, 739.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O) ppm:

1,70 - 1,85 (1H, multiplet), 2,60-2,75 (1H, multiplet), 3,05 - 3,25 (1H, multiplet), 3,25 - 3,40 (1H, multiplet), 3,65 - 4,90 (7H, multiplet), 5,10 - 5,50 (4H, multiplet), 7,55 - 7,70 (2H, multiplet), 7,95 - 8,15 (1H, multiplet), 8,20 - 8,30 (2H, multiplet), 8,55 - 8,70 (1H, multiplet).

Příprava 30 (2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

0(a) (2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin- l-ylkarbonyl)-4-(4-methoxybenzylthio)-1 -(4— nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

Do 1,75 mg (2S,4S)-2-(3-aminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4-(4-methoxybenzylthio)-1-(4—nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, jehož příprava je popsána v přípravě 22a), bylo přidáno 644 mg kyseliny mravenčí a 750 mg vodného roztoku formaldehydu s koncentrací 35 % objemových a výsledná směs byla 5 hodin míchána při teplotě 50 °C. Směs byla zředěna ethylacetátem, ředěný roztok byl promyt vodným roztokem uhličitanu sodného, vodou a vodným roztokem chloridu

-114CZ 290002 B6 sodného. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým bylo rozpouštědlo odstraněno destilací za sníženého tlaku a zbytek po adsorpci na sloupec silikagelu byl čištěn chromatografií při eluci směsi methylenchloridu, ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 45 : 45 : 10. Vzniklo

1.45 g výsledné sloučeniny v podobě bezbarvého prášku.

IR-spektrum (KBr), t>_max cm“¹:

1710,1664, 1609,1513,1442,1403,1345,1248, 1172.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,86-2,05 (1H, multiplet), 2,11, 2,13 a 2,27 (dohromady 6H, tři singlety), 2,34-2,52 (1H, multiplet), 2,83 - 3,36 (3H, multiplet), 3,73 (2H, singlet), 3,79 a 3,80 (dohromady 3H, dva singlety), 3,68 - 4,51 (6H, multiplet), 5,05 - 5,36 (2H, multiplet), 6,85 (2H, dublet, J = 8,52 Hz), 7,23 (2H, dublet, J = 8,52 Hz), 7,46 a 7,50 (dohromady 2H, dva dublety, J = 8,57 Hz), 8,23 (2H, dublet, J = 8,57 Hz).

30(b) (2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)-4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

Ve 3,02 ml anisolu bylo rozpuštěno 1,47 g (2S,4S)-2-(3-dimethylaminoazetidin-l-ylkarbonyl)4-(4-methyloxybenzy!thio)-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 30a), a do vzniklého roztoku bylo přidáno 10,71 ml trifluoroctové kyseliny a 0,488 ml trifluormethansulfonové kyseliny. Reakční směs byla jednu hodinu míchána při téže teplotě. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku a zbytek byl promyt opakovanou dekantací při použití hexanu a diethyletheru. Po přidání ethylacetátu do směsi a alkalizaci směsi přidáním nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného byl podíl ethylacetátu odstraněn promytím vodným roztokem chloridu sodného a sušením nad bezvodým sulfátem hořečnatým. Po destilaci za sníženého tlaku, při které bylo odstraněno rozpouštědlo vzniklo 1,01 g prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_max cm“¹:

1710,1645, 1607, 1517,1459, 1432, 1403,1343, 1169.

NMR-spektrum (270 MHz, CDCI3) ppm:

1,87 - 2,05 (2H, multiplet), 2,11, 2,13 a 2,25 (6H, tři singlety), 2,58 - 2,73 (1H, multiplet), 2,82 -

3.46 (3H, multiplet), 3,75 - 4,54 (6H, multiplet), 5,05 - 5,37 (2H, multiplet). 7,50 (2H, dublet, J = 8,57 Hz), 8,22 (2H, dublet, J = 8,57 Hz).

Příprava 31 (2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/-4—merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin (a) 1 -benzhydry 1-3-( 1 -imidazolyl)azetidin

Roztok 3,20 g imidazolu ve 25 ml dimethylformamidu byl během chlazení přidán do 2,10 g suspenze hydridu sodného (disperze v minerálním oleji s koncentrací 55 % objemových) ve 25 ml dimethylformamidu. Směs byla při teplotě místnosti míchána jednu hodinu. Po přidání roztoku 5,00 g l-benzylhydryl-3-methansulfonyloxyazetidinu v 50 ml dimethylformamidu byla směs míchána 17 hodin při teplotě 70 °C. Pak byla směs zředěna ethylacetátem, promyta vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Vrstva ethylacetátu byla oddělena sušením nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařováním za sníženého tlaku. Po adsorpci na sloupec silikagelu byl odparek čištěn chromatografií při eluci směsí acetátu a methanolu v poměru objemů 95 : 5. Vzniklo 2,88 g prášku výsledné sloučeniny.

-115CZ 290002 B6

IR-spektrum (KBr), u_max cm *:

1490, 1452, 1311, 1236, 1074, 905, 755, 707.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

3,23-3,35 (2H, multiplet), 3,60-3,69 (2H, multiplet), 4,43 (1H, singlet), 4,67-4,79 (1H, multiplet), 7,08 - 7,69 (13H, multiplet).

(b) 3-( 1 -imidazolyl)azetidinhydrochlorid

Ve 30 ml methanolu bylo rozpuštěno 3,20 g l-benzylhydryl-3-(l-imidazolyl)azetidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 31a) a do vzniklého roztoku bylo přidáno 8,90 ml roztoku chlorovodíku v methanolu s koncentrací lOg/lOOml. Do směsi bylo přidáno 1,60 g 20% paladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru a směs byla při teplotě 50 °C hydrogenována po dobu 40 minut v atmosféře vodíku. Katalyzátor byl odstraněn filtrací a odpařováním za sníženého tlaku. Vzniklo 2,03 mg prášku jako výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), o_inax cm'¹:

1581, 1554,1509,1435,1303, 1092, 839, 637, 623.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid) ppm:

4,27- 4,35 (2H, multiplet), 4,39 - 4,46 (2H, multiplet), 5,40-5,50 (1H, multiplet), 7,48 (1H, singlet), 8,03 (1H, singlet), 8,85 (1H, singlet).

(c) (2S,4S)-2-/3-( l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

Ve 40 ml suchého acetonitrilu bylo rozpuštěno 3,80 g (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-(4nitrobenzyloxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylové kyseliny a do vzniklého roztoku bylo přidáno 1,65 g Ν,Ν'-karbonyldiimidazolu. Reakční směs byla jednu hodinu míchána při teplotě 40 °C. Po přidání roztoku obsahujícího 2,00 g 3-(l-imidazolyl)azetidindihydrochloridu, jehož příprava je popsána v předchozí části 3 lb), a 2,90 g diizopropylethylaminu rozpuštěných ve 30 ml suchého acetonitrilu a 5 ml methanolu při teplotě místnosti do reakční směsi, byla reakční směs při stejné teplotě míchána jednu hodinu. Po odpaření za sníženého tlaku a zředění ethylacetátem byl zředěný roztok promyt vodou a vodným roztokem chloridu sodného. Sušením nad bezvodým sulfátem hořečnatým a odpařováním za sníženého tlaku byl oddělen ethylacetát. Adsorpcí na sloupec silikagelu byl odparek byl odparek čištěn chromatografií při eluci směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 85 : 15. Vznikly 4,00 g prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), On,_ax cm'¹:

1706,1667,1609,1512,1442,1403,1346,1245.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

2,95-3,38 (4H, multiplet), 3,75 (2H, singlet), 3,79 (3H, singlet), 4,12 - 5,45 (9H, multiplet), 6,84-8,29 (11H, multiplet).

l(d) (2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/—4-merkapto-l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

V 7,88 ml anisolu byly rozpuštěny 4,00 g (2S,4S)-2-/3-(l-imidazolyl)azetidin-l-ylkarbonyl/pyrrolidinu, jehož syntéza je popsána v předchozí přípravě 31c), a v lázni vody a ledu bylo do vzniklého roztoku přidáno 27,9 ml trifluoroctové kyseliny a 1,27 ml trifluormethansulfonové kyseliny. Vzniklá reakční směs byla jednu hodinu míchána za stálého chlazení a pak bylo rozpouštědlo odstraněno destilací, zbytek byl promyt hexanem a diethyletherem, sušen odpařením za vzniku trifluormethansulfonátu výsledné sloučeniny v podobě prášku. Po přidání ethylacetátu a alkalizaci nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného byl ethylacetátový extrakt promyt vodným roztokem chloridu sodného a sušen nad bezvodým sulfátem hořečnatým

-116CZ 290002 B6 a po odpařování za sníženého tlaku, při kterém bylo odstraněno rozpouštědlo, vzniklo 3,10 g prášku výsledné sloučeniny.

IR-spektrum (KBr), u_max cm^-1:

2606,1746, 1722, 1623, 1569,1468,1419, 1378, 1344, 1250.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃ + D₂O) ppm:

2,01 - 3,50 (4H, multiplet), 4,00 - 5,35 (9H, multiplet), 7,10 - 8,30 (7H, multiplet).

Příprava 32

4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-2-(difenylfosforyloxy)-6-/( lR)-l-hydroxyethyl/-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylát

V 72 ml suchého acetonitrilu bylo rozpuštěno 3,63 g 4-nitrobenzyl (lR,5R,6S)-6-/(lR)-lhydroxyethyl/-l-methyl-2-oxo-l-karbapenam-3-karboxylátu a do vzniklého roztoku bylo v lázni vody a ledu po kapkách přidáno 2,28 ml chloridu kyseliny difenylfosforečné a 1,92 ml diizopropylethylaminu za stálého míchání. V těchto podmínkách byla vzniklá reakční směs míchána další jednu hodinu a po odpařování za sníženého tlaku byl odparek rozpuštěn 20 v ethylacetátu a dvakrát promyt vodou a pak vodným roztokem chloridu sodného. Po odpařování za sníženého tlaku byl odparek rozpuštěn v 10 ml ethylacetátu a vzniklý roztok se nechal stát za vzniku krystalů. Směs byla zředěna 500 ml diizopropyletheru a vzniklé krystaly byly odděleny filtrací za vzniku 5,34 g bezbarvých jehličkovitých krystalků o teplotě tání 123 až 125 °C.

NMR-spektrum (270 MHz, CDC1₃) ppm:

1,22 (3H, dublet, J = 7,2 Hz), 1,33 (3H, dublet, J = 6,6 Hz), 3,32 (1H, dublet dubletů, J = 6,6 a 2,6 Hz), 3,42 - 3,56 (1H, multiplet), 4,20 - 4,21 (2H, multiplet), 5,22 (1H, dublet, J = 13,8 Hz), 5,35 (1H, dublet, J= 13,8 Hz), 7,13- 7,40 (1 OH, multiplet), 7,55 (1H, dublet, J= 8,6 Hz), 8,13 (2H, dublet, J = 8,6 Hz).

Příprava 33 (2S,4S)-4-merkapto-2-/l-(4-nitrobenzyloxykarbonyl)azetidin-3-ylaminokarbonyl/-l-(4— nitrobenzyloxykarbonyl)pyrrolidin

Sloučenina byla vyrobena podle postupu uvedeného v přípravě 22.

IR-spektrum (kapalný film), cm^-1:

1709,1662,1609, 1523, 1435, 1406, 1348, 1287.

NMR-spektrum (270 MHz, hexadeuterovaný dimethylsulfoxid + D₂O) ppm:

1,86 - 2,04 (1H, multiplet), 2,65 - 2,80 (1H, multiplet), 2,98 - 3,61 (5H, multiplet), 3,87 - 4,53 (4H, multiplet), 5,08- 5,27 (4H, multiplet), 7,51 - 7,67 (4H, multiplet), 8,14- 8,26 (4H, multiplet).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Antimikrobiální karbapenemové deriváty obecného vzorce I kde

R¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

R² znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku,

R³ znamená atom vodíku nebo negativní náboj,

Q znamená skupinu vzorce Q-VII nebo Q-VDI:

ve kterých

20 21 22

R , R a R jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, nebo

R²⁰ a R²¹ nebo R²⁰ a R²² spolu znamená skupinu vzorce (CH₂)_s-(W)_w—(CH₂)t- kde s je 0, 1, 2 nebo 3, t je 0, 1, 2 nebo 3, W znamená atom kyslíku nebo síry a w' je 0 nebo 1,

R²³ a R²⁴ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, n³ je 1,2 nebo 3,

R²⁵ znamená atom vodíku,

R²⁶ znamená atom vodíku, n⁴ je 0,1 nebo 2, p² jeO a jejich farmaceuticky přijatelné soli a estery.

-118CZ 290002 B6
2. Antimikrobiální karbapenemové deriváty podle nároku 1 obecného vzorce I, kde

R¹ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A

R znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 3 atomů uhlíku,

R³ znamená atom vodíku nebo negativní ion, a

Q znamená skupinu vzorce Q-VII nebo Q-VIII, definované v nároku 1, ve kterých

R²⁰, R²¹ a R²² jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 3 atomů uhlíku, nebo

R²⁰ a R²¹ nebo R²⁰ a R²² spolu znamená skupinu vzorce -(CH₂)_s-(W)_w—(CH₂)_t-, kde s je 1 nebo 2, t je 1 nebo 2, W znamená atom kyslíku nebo síry a w' je 0 nebo 1, za předpokladu, že (s + w' +1) je 2, 3 nebo 4,

R²³ a R²⁴ jsou stejné nebo různé a každý znamená atom vodíku nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu mající od 1 do 3 atomů uhlíku, n³ je 1, 2 nebo 3,

R²⁵ znamená atom vodíku,

R²⁶ znamená atom vodíku, n⁴ je 0, 1 nebo 2,

P² je 0.
3. Antimikrobiální karbapenemové deriváty podle nároku 1 obecného vzorce I, kde Q znamená skupinu vzorce Q-VII.
4. Antimikrobiální karbapenemové deriváty podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R¹znamená methylovou skupinu.
5. Antimikrobiální karbapenemové deriváty podle nároku 1 obecného vzorce I, kde Q znamená skupinu vzorce Q-VII a R¹ znamená methylovou skupinu.
6. Antimikrobiální karbapenemové deriváty padle nároku 1 obecného vzorce I, kde Q znamená skupinu vzorce Q-VII a R¹ znamená methylovou skupinu.
7. Antimikrobiální karbapenemový derivát podle nároku 1, kterým je kyselina 2-[2-(4— amidinopiperazin-l-ylkarbonyl)-pynOlidin-4-ylthio]-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylová a její farmaceuticky přijatelné soli.
8. Antimikrobiální karbapenemový derivát podle nároku 1, kterým je kyselina 2-(2-(4amidinopiperazin-1 -ylkarbonyl)-1 -methylpyrrolidin-4-ylthio]-6-( 1 -hydroxyethyl)- 1-methyll-karbapen-2-em-3-karboxylová a její farmaceuticky přijatelné soli.
9. Antimikrobiální karbapenemový derivát podle nároku 1, kterým je kyselina 2-[2-(4amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)-pynOlidin-4-ylthio]-6-(l-hydroxyethyl)-l-methyl-lkarbapen-2-em-3-karboxylová a její farmaceuticky přijatelné soli.

-119CZ 290002 B6
10. Antimikrobiální karbapenemový derivát podle nároku 1, kterým je kyselina 2—[2—(4— amidinohomopiperazin-l-ylkarbonyl)-l-methylpynOlidin-4-ylthio]-6-(l-hydroxyethyl)-lmethyl-l-karbapen-2-em-3-karboxylová a její farmaceuticky přijatelné soli.
11. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo pomocnou látku ve směsi s účinným množstvím antibiotika, ve kterém antibiotikem je nejméně jeden derivát vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester podle nároků 1 až 10.
12. Použití derivátu vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli nebo esteru podle nároků 1 až 10, pro výrobu léků k léčení nebo prevenci mikrobiálních infekcí.
13. Způsob výroby antimikrobiálních karbapenemových derivátů obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů podle nároků lažlO, vyznačující se tím, že se uvede do reakce karbapenemová sloučenina obecného vzorce Π ve kterém R* má význam definovaný v nároku 1,

R^l znamená sulfonyloxy- nebo fosforyloxy- skupinu nebo skupinu vzorce -S(O)R^L1, R^L1znamená C1-C6 alkylovou skupinu, s přímým nebo rozvětveným řetězcem, C1-C6 halogenalkylovou skupinu, v níž je alkylová skupina ve svrchu uvedeném významu substituována atomem halogenu ze skupiny atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, C1-C6 alkanoylamino C1-C6 alkyl, s alkylovou i alkanoylovou částí s přímým nebo rozvětveným řetězcem C2-C6 alkenoylamino C1-C6 alkyl, aryl ze skupiny fenyl a naftyl, popřípadě substituovaný 1 až 3 substituenty, které mohou být stejné nebo různé a volí se ze skupiny atom fluoru, chloru, bromu, methyl, ethyl, propyl, izopropyl, methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, izopropoxyskupina, methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl, terc.butoxykarbonyl, nitroskupina, karbamoyl, monoalkylkarbamoyl s alkylovou částí ze skupiny methyl, ethyl a propyl, dialkylkarbamoyl s alkylovými částmi ze skupiny methyl, ethyl a propyl, hydroxyskupina a kyanoskupina, nebo aromatickou heterocyklickou skupinu ze skupiny pyridyl a pyrimidyl, popřípadě substituované 1 až 3 substituenty, které mohou být stejné nebo různé a volí se ze skupiny atom fluoru, chloru nebo bromu, methyl, ethyl, propyl a izopropyl a _R3p znamená karboxy-ochrannou skupinu, s pyrrolidinovým derivátem obecného vzorce ΠΙ

-120CZ 290002 B6 kde

R^2p znamená jakoukoli skupinu nebo atomy, reprezentované R² z nároku 1 nebo jakoukoli takovou skupinu nebo atom, které byly chráněny, a

Q^p znamená jakékoli skupiny nebo atomy ve významu Q z nároku 1, které byly chráněny, nebo jakoukoli takovou skupinu, ve které kvartémí atom dusíku je nahrazen odpovídajícím terciálním atomem dusíku, a kde skupina QP obsahuje kvartémí atom dusíku, pak sloučenina je doprovázena aniontem pro vyrovnání náboje, a je-li to třeba odstraní se jakékoliv ochranné skupiny, a popřípadě se vytvoří soli nebo estery produktu.