CZ280747B6

CZ280747B6 - Derivát fenylethanolaminu, způsob jeho výroby, farmaceutický prostředek s jeho obsahem a použití této sloučeniny

Info

Publication number: CZ280747B6
Application number: CS901518A
Authority: CZ
Inventors: Otto Agne Torsten Olsson; Peter Juhan Pedaja; Leif Ake Svenssonn; Carl Bertil Waldeck; Kjell Ingvar Leopold Wetterlin
Original assignee: Aktiebolaget Draco
Priority date: 1989-03-28
Filing date: 1990-03-28
Publication date: 1996-04-17
Also published as: EG18954A; HRP920765A2; NO900982L; JPH02286650A; IS1581B; LV10708B; EP0390762B1; LTIP1719A; HU901854D0; DE69006071D1; NZ232765A; AR247197A1; EP0390762A1; CN1045968A; LV10708A; SE8901060D0; LT3979B; ZA901716B; DK0390762T3; IE901104L

Abstract

Popisují se nové bronchospasmolyticky účinné deriváty fenylethanolaminu obecného vzorce X, ve kterém R.sub.1.n. a R.sub.2.n. jsou stejné nebo rozdílné a znamenají vždy atom vodíku nebo methoxyskupinu nebo R.sub.1.n. a R.sub.2.n. tvoří dohromady řetězec vzorce -O-CH.sub.2.n.-O- nebo -O-CF.sub.2.n.-O-, R.sub.3.n. znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu, R.sub.5.n. znamená atom vodíku a R.sub.6.n. značí atom vodíku nebo methoxyskupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné soli, způsob jejich výroby, který spočívá v reakci 4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxidu s příslušně substituovaným aminem, v hydrogenaci vzniklého meziproduktu a v následující reakci s příslušným, aldehydem a v další hydrogenaci a farmaceutické prostředky s prodlouženým bronchospasmolytickým účinkem.ŕ

Description

Derivát fenylethanolaminu, způsob prostředek s jeho obsahem a použití jeho výroby, farmaceutický této sloučeniny

Oblast techniky

Tento vynález se týká nových derivátů fenylethanolaminu, které mají terapeutický účinek, způsobu jejich výroby, farmaceutických prostředků, které je obsahují a použití těchto sloučenin v medicíně. Tento vynález se zvláště týká derivátů fenylethanolaminu, které mají bronchospasmolytický účinek a jsou účinné při ošetřování reversibilních obstrukčních indispozicí plic různého původu, zejména astmatických stavů. Tyto deriváty fenylethanolaminu, které mají charakteristickou stereochemickou konfiguraci, vykazují prodloužené trvání terapeutického účinku po inhalaci a snižují stupeň vedlejších účinků, zejména snižují stimulační účinek na srdce.

Dosavadní stav techniky

Bronchodilatační léky obvykle používané k inhalační terapii (například fenoterol, salbutamol, terbutalin a bitolterol) obvykle mají trvání účinku, který vydrží pouze 4 až 6 hodin, a proto neposkytují během noci adekvátní ochranu, pokud se berou v době, kdy jde pacient spát. Bitolterol popsal I. Kass a T. S. Mingo v Chest 78., 283 /1980/, v článku, který je pojmenován A new longacting bronchodilator with reduced chronotopic effects.

US patent č. 4 072 760 popisuje sloučeniny, které jsou blízce příbuzné struktury sloučeninám podle tohoto vynálezu. Reprezentativní sloučeninou popsanou v tomto patentu je hydrochlorid racemického 3-(4-hydroxybenzylamino)-4-hydroxy-a-(terč.butylaminomethyl)benzylalkoholu. Tyto známé sloučeniny však mají pouze krátkodobé působení.

Je žádoucí nalézt bronchodilatační prostředky, které mají prodloužené trvání účinku, ve srovnání s látkami, které jsou dostupné na trhu, protože prodloužené trvání účinku umožní poskytnout astmatickým pacientům přiměřenou ochranu také během noci a v časných ranních hodinách, kdy je astma obvykle nejhorší.

Pokusy směřující k získání bronchospasmolytický účinných sloučenin s dlouhou dobou účinku jsou v literatuře uvedeny a například jde o formoterol a salmeterol. Problémem však je najít bronchospasmolytický účinné sloučeniny, které mají klinicky použitelné trvání účinku alespoň 12 hodin po inhalaci aerosolu mikronizované substance. Je také žádoucí, aby se tyto sloučeniny pevně vázaly k plicní tkáni a tak se pouze malá část účinných sloučenin dostávala do obecného oběhu. Touto cestou se sníží na minimum riziko vyvolání systémových vedlejších účinků, jako jsou palpitace a tremor.

Dosažení významných úspěchů v překonání dosavadních problémů umožňují sloučeniny podle tohoto vynálezu, jak dokládají výsledky jejich bronchospasmolytického účinku po intratracheálním podání, v porovnání s účinkem hydrochloridu racemického 3-(4-hydroxybenzylamino)-4-hydroxy-a-(terč.butylaminomethyl)benzylalkohoxu, který je znám z US patentu č. 4 072 760 a s terbutalinem, jako

-1CZ 280747 B6 běžným bronchodilatačním lékem. Metodika stanovení účinku a dosažené výsledky jsou obsaženy v experimentální části (viz tabulka 6) popisu tohoto vynálezu.

Podstata vynálezu

Bylo nalezeno, že nové deriváty fenylethanolaminu obecného vzorce X

ve kterém ^R1 ^{a R}2 3^sou stejné nebo rozdílné a znamenají vždy atom vodíku nebo methoxyskupinu nebo a R₂ tvoří dohromady řetězec vzorce -O-CH₂-O- nebo -O-CF₂-O-,

Rg znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Rg znamená atom vodíku a

R₆ značí atom vodíku nebo methoxyskupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné soli jsou vysoce účinné sloučeniny, které mají dlouhé trvání bronchospasmolytického účinku, zejména když se zavádějí lokálně do plic, například po inhalaci prostředků s obsahem těchto sloučenin, které jsou ve formě aerosolu nebo mlhy.

Farmaceuticky přijatelnými solemi podle tohoto vynálezu jsou zejména adiční soli s kyselinami. Tyto soli se běžně mohou připravovat tím, že se uvede do styku sloučenina, která je schopná tvořit takové soli, s vhodnou fyziologicky přijatelnou organickou nebo anorganickou kyselinou. Příkladem vhodných organických kyselin jsou kyselina octová, kyselina fumarová, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina maleinová, kyselina jantarová a kyselina benzoová. Příkladem vhodných anorganických kyselin jsou kyseliny chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová a kyselina fosforečná.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu projevují také nižší stupeň nežádoucích kardiovaskulárních vedlejších účinků. Jak farmakologický účinek, tak trvání účinku nových sloučenin je vysoce závislé na stereochemické konfiguraci benzylového stereogenního atomu uhlíku ve fenylethanolaminovém řetězci a na stereogenním atomu

-2CZ 280747 B6 uhlíku ve fenylethanolaminovém řetězci a na stereogenním atomu uhlíku v substituentu na atomu dusíku. Tak optimálního farmakologického účinku se dosahuje pouze s R-konfigurací v benzylové poloze a trvání je optimální s S-konfigurací skupiny, která tvoří substituent na atomu dusíku.

Výhodné sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny, ve kterých

Rf a R₂ tvoří řetězec vzorce -O-CH₂-O- nebo -O-CF₂-O-,

R₃ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

R₅ znamená atom vodíku a

Rg znamená methoxyskupinu.

Zvláště výhodnými sloučeninami podle tohoto vynálezu jsou racemický (R,S + S,R-isomery) a racemický (R,R + S,S-isomery) 1-[(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl]-2-[/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanol.

Mimořádně výhodný je podle tohoto vynálezu isomer l-(R)-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[/1-(S)-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]-ethanol.

Sloučeniny obecného vzorce X se vyrábějí reakcí 4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxidu obecného vzorce V

se sloučeninou obecného vzorce VI

( 71 ) r

BAD on^,rV^MA'

kde R-l , R₂ a R₃ ma j í význam uvedený shora a R₄ znamená atom vodíku nebo skupinu vzorce

kde R-l , R₂, R₃ a R₄ maj í význam uvedený shora, potom se sloučenina obecného vzorce VII hydrogenuje a poskytne přímo nebo přes sloučeninu obecného vzorce VIII

-4BAD ORIGINÁL $

kde R_lr R₂ a R₃ mají shora uvedený význam, potom se sloučenina obecného vzorce IX nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce

kde Rg má shora vymezený význam, a vodíkem v přítomnosti oxidu platičitého nebo palladia na uhlí, za vzniku sloučeniny obecného vzorce X, kde R₅ znamená atom vodíku a R₃, R₂, R₃ a R_g mají shora uvedený význam, bud jako čistého isomeru, nebo směsi různých množství možných stereoisomerů, jak je popsáno dále.

Obecná metoda výroby se dá vyjádřit takto:

Γ bad originál

-5CZ 280747 B6

BAD ORIGINÁL Ά

-6CZ 280747 B6

kde Rj, R₂, R₃, R₄ a R_g mají shora uvedený význam a

R₅ znamená atom vodíku.

Metoda A

Tato metoda se používá pro výrobu čistých stereoisomerů a epimerů lišících se pouze konfigurací v benzylové poloze. V dále uvedeném schématu R₃, R₂ a R_g mají shora uvedený význam.

r

BAD ORIGINÁL v

-7CZ 280747 B6

-8---------->

^H2

Metoda B

Tato metoda se používá pro výrobu racemátů a jejich směsí. V dále uvedeném schématu R₃, R₂, R3 a Rg mají shora uvedený význam.

racemát (pro R₃ = H)

Výroba výchozích sloučenin Aminy obecného vzorce VI Metoda C

Výroba čistých enantiomerů

Vhodně substituované l-fenyl-2-propanony se nechají reagovat s R- nebo S-methylbenzylaminem a potom se vzniklý imin redukuje Raneyovým niklem za vzniku čistého R,R- nebo S,S-aminu. V dále uvedeném schématu R-l a R₂ mají shora uvedený význam.

R- nebo S-isomer

-10r bad originál $

Výroba racemických aminů obecného vzorce VI

Vhodně substituované benzaldehydy se nechají reagovat s nitroalkanem a potom se redukují na požadovaný amin. V dále uvedeném schématu R^, R₂ a R₃ mají shora uvedený význam.

Racemický 4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxid se připravuje metodou, kterou popsal Kaiseo a kol. v J. Med. Chem. 12/ ⁴⁹ (1974).

Příklady

Příklad 1 (způsob výroby podle metoda A)

Způsob výroby l-(R)-[(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl]-2-[/1-(S)-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino Jethanolu obecného vzorce X.

-12BAD ORIGINÁL d

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-(N-methylbenzyl-l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylamino]ethanolu obecného vzorce VII (R,S,S- a S,S,S-isomery).

23,9 g (88 mmol) 4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxidu obecného vzorce V a 24,9 g (88 mmol) (S,S)-N-l-fenyethyl-l-(l,3-benzodioxol-5-yl)-2-propanaminu obecného vzorce VI se míchá pod dusíkovou atmosférou za teploty 150 °C po dobu 15 hodin. Surový produkt se rozpustí v ethylacetátu, přidá se koncentrovaná kyselina chlorovodíková a rozpouštědlo se odpaří. Dostane se surový hydrochlorid, který tvoří pevná látka. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá 17,3 g S,S,S-isomeru a R,S,S-isomerem, které jsou v poměru 85:15. Odpařením matečných louhů se dostane 29 g surových R,S,S- a S,S,S-isomerů, které jsou v poměru 70:30. Velmi rychlou chromatografií odpařených matečných louhů za použití systému petrolether - ethylacetát v poměru 2,5:1 a oxidu křemičitého (siliky), se dostane 21,3 g směsi isomerů v poměru 70:30. Čisté R,S,Sa S,S,S-isomery se opakovaně podrobí velmi rychlé chromatografii nebo chromatografují za použití acetonitrilu a oxidu křemičitého.

NMR (R,S,S,-isomer, CDC1₃):

7,85 (d, IH), 7,54-6,33 (m, 15H), 5,87 (m, 2H), 5,23 (s, 2H), 4,58 (dd, IH), 4,08 (q, IH), 3,06-2,54 (m, 4H), 2,09 (dd, IH),

1,50 (d, 3H), 0,96 (d, IH).

(S , S,S-isomer):

7,79 (d, IH), 7,47-6,28 (m, 15H), 5,89 (dd, 2H), 5,23 (s,

2H), 4,40 (dd, IH), 4,08 (q, IH), 3,18, (m, IH), 2,84-2,39 (m,

4H), 1,44 (d, 3H), 1,01 (d, 3H) .

R,R,R- a S,R,R-isomery se vyrábějí obdobným způsobem.

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-aminofenyl)-2-(N-methylbenzyl/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)]ethylaminoethanolu obecného vzorce VIII (R,S,S- a S,S,S-isomerů)

10,8 g (20 mmol) odpovídající nitrosloučeniny, která obsahuje R,S,S- a S,S,S-isomery v poměru 70:30, se rozpustí ve 250 ml methanolu. Potom se přidá 23 g (100 mmol) dihydrátu chloridu cínatého a roztok se zahřeje na teplotu 60 °C. Během 50 minut se po částech přidá 400 mg tetrahydroboritanu sodného. Po dodatečném čtyřicetiminutovém míchání za teploty 60 °C se roztok odpaří na objem 150 ml a potom přidá 350 ml 0,5-normálního vodného roztoku hydroxidu sodného a potom 200 ml diethyletheru. Extrakcí vodné fáze větším množstvím diethyletheru, vysušením a odpařením se dostane 7,9 g olejovitého produktu. Chromatografií na oxidu křemičitém při eluování acetonitrilem se dostane 4,5 g čistého R,S,S-isomeru a 1,5 g S,S,S-isomeru.

NMR (R,S,S-isomer, CDC1₃):

7,46-6,33 (m, IH), 4,08 (q, IH),	16H) ,	5,87	(d, 2H),	5,09	(s, 2H), 4,54 3H), 0,97 (d,	(dd,
3,05-2	,02 (m	, 5H), 1,	50 (d,	3H) .
(S,S,S-isomer)
7,43-6,25 (m,	16H) ,	5,85	(d, 2H),	5,05	(s, 2H), 4,38	(dd,

IH), 4,08 (q, IH), 3,11 (m, IH), 2,81-2,36 (m, 4H), 1,41 (d,

3H), 0,95 (d, 3H).

-13CZ 280747 B6

Monohydrochlorid R,S,S-isomeru se vyrobí reakcí 0,58 ml acetylchloridu se 180 ml methanolu, potom se přidá 4,5 g báze a potom odpaří. Po promytí diethyletherem se jako sůl dostane 4,3 g monohydrochloridu. S,R,R- a R,R,R-isomery se připravují analogicky.

Způsob výroby (R)-l-(3-amino-4-hydroxyfenyl)-2-[(S)-l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylamino]ethanolu obecného vzorce IX

4,3 g (8 mmol) dříve uvedené sloučeniny (R,S,S-isomeru) ve formě svého hydrochloridu, se rozpustí v 75 ml methanolu, přidá se 0,3 g 10% palladia na uhlí a směs se hydrogenuje po dobu 5 hodin za tlaku 274,8 kPa. Methanolový roztok se přefiltruje a použije v následujícím stupni. S,S,S-, S,R,R- a R,R,R-isomery sloučeniny obecného vzorce IX se vyrábějí obdobným způsobem.

Způsob výroby l-(R)-[4-hydroxy-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl]-2-[/1(S)-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu obecného vzorce X.

ml (16 mmol) p-anisaldehydu se přidá k methanolovému roztoku R,S,S-isomeru sloučeniny obecného vzorce IX, získané jak je popsáno shora. Vše se vaří pod zpětným chladičem po dobu 30 minut, potom se přidá 30 mg oxidu platičitého a směs se hydrogenuje po dobu 90 minut za tlaku 345,5 kPa. Výtěžek surového produktu o čistotě 90 % činí 2,3 g. Chromatografie báze na oxidu křemičitém při eluování trichlormethanem a potom přídavek směsi kyseliny sírové s ethanolem poskytne 1,2 g čisté sloučeniny obecného vzorce IV ve formě svého sulfátu.

NMR (R,S-isomer, DMSO):

7,3-6,40 (m, 10H), 5,99 (s, 2H), 4,52 (d, 1H), 4,23 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,08 (široký singlet, 1H), 2,89-2,44 (m a DMSO), 0,99 (d, 3H).

Podobně se vyrobí S,S- a S,R-, jakož i R,R-isomery sloučeniny obecného vzorce X.

NMR (S,S-isomer):

7,31-6,42 (m, 10H), 5,98 (s, 2H), 4,53 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,1 (m, 1H), 2,90-2,45 (m a DMSO), 1,02 (d, 3H).

Příklad 2 (způsob výroby podle metody B)

Způsob výroby racemátů (R,S + S,R-isomerů) l-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu.

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-[/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu obecného vzorce VII (různé směsi R,R-R,S-, S,S- a S,R-isomerů).

1,4 g (5 mmol) (R/S)-4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxidu a 1,1 g (6 mmol) (R/S)-1-(3,4-methylendioxyfenyl)-2-aminopropanu obecného vzorce VI se refluxuje v 10 ml methanolu po dobu 20 hodin. Po odpaření methanolu se směs surových isomerů rozpustí v diethylethe

-14CZ 280747 B6 ru a R,S- a S,R- isomery krystalují. Tím se dostane 0,4 g racemátu. (R,R- a S,S- isomery se tak odstraní.)

NMR (CDC1₃):

7,8 (d, 1H), 7,5-6,5 (m, 10H), 5,9 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 4,6 (dd, 1H), 3,0-2,5 (m, 5H), 1,2 (d, 3H).

Racemát se hydrogenuje v ethanolu na palladiu na uhlí. Dostane se odpovídající aminofenol obecného vzorce IX, který se potom nechá reagovat s p-anisaldehydem, jak již bylo popsáno a poskytne racemickou sloučeninu (R,S- + S,R-isomery) shora popsané sloučeniny obecného vzorce X. R,R- + S,S-isomerní směs se vyrobí z dříve odstraněné isomerní směsi sloučeniny obecného vzorce VII.

Obecný způsob výroby sloučenin obecného vzorce X

Hydrochlorid odpovídající nitrosloučeniny obecného vzorce VII se rozpustí v ethanolu. Potom se přidá 10% palladium na uhlí a hydrogenace se provádí za teploty místnosti po dobu 4 až 20 hodin za tlaku 343,5 kPa. Katalyzátor se odfiltruje a potom přidá benzaldehyd nebo p-methoxybenzaldehyd. Vše se vaří pod zpětným chladičem po dobu jedné hodiny, přidá se oxid platičitý a hydrogenace se provádí za tlaku 100 kPa po dobu 5 až 24 hodin nebo za tlaku 343,5 kPa po dobu 45 minut. Surový hydrochlorid se promyje etherem, báze se vyjme ethylacetátem a čistí chromatografií na sloupci oxidu křemičitého za použití směsi chloroformu a methanolu v poměru 10:2, jako eluentu. Čistá báze se potom převede na hydrochlorid nebo sulfát.

Příklad 3

Způsob výroby 1-(4-hydroxy)-3-benzylaminofenyl-2-[1-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylamino]ethanolu (X) (R,S+S,R+R,R+S,S směs).

Vychází se z 2,4 g nitrosloučeniny obecného vzorce VII, 0,7 g palladia na uhlí, 1,1 g benzaldehydu a 40 mg oxidu platičitého. Získá se 1,2 g hydrochloridu.

NMR (DMSO-D₆, jako rozpouštědlo a referenční sloučenina): d;

7,4-6,4 (m, 11H), 6,01 (s, 2H), 5,90 (d, 1H), 5,35 (široký singlet, 1H), 4,72 (m 1H), 4,35 (s, 2H), 3,37 (s, 3H), 3,1-2,9 (m, 4H), 1,10 (d, 3H).

Příklad 4

Způsob výroby l-(4-hydroxy-3-p-methoxybenzylaminofenyl)-2-[1-methy1-2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylamino]ethanolu (X) (R,S+S,S směs).

Vychází se z 5,2 g nitrosloučeniny obecného vzorce VII, 0,5 g palladia na uhlí, 3,0 g p-methoxybenzaldehydu a 50 mg oxidu platičitého. Získá se 1,0 g produktu, který je ve formě hydrochloridu.

-15CZ 280747 B6

NMR (jako uvedeno shora): d;

7,28 (d, 2H), 7,0-6,5 (m, 8H), 4,6 (m, 1H), 4,22 (2H), 3,74 (9H), 3,7-2,8 (m), 1,2 (d, 3H).

Příklad 5

Způsob výroby l-(4-hydroxy-3-p-methoxybenzylaminofenyl)-2-[1,l-dimethyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylamino]ethanolu (X) (R/S racemát).

Vychází se z 5,0 g nitrosloučeniny obecného vzorce VII, 0,3 g palladia na uhlí, 4,9 ml p-methoxybenzaldehydu a 30 mg oxidu platičitého. Získá se 3,1 g produktu ve formě hydrochloridu.

NMR (j ako uvedeno shora): d;

7,3 (d, 2H), 6,9-6,4 (m, 8H), 6,0 (s, 2H), 5,93 (m, 1H),

5,24 (široký singlet, 1H), 4,73 (široký dublet, 1H), 4,25 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,37 (s, 2H), 2,89 (široký multiplet a s, 5H), 1,19 (s, 3H).

Příklad 6

Způsob výroby l-(4-hydroxy-3-p-methoxybenzylaminofenyl)-2-[l-methyl-2-(p-methoxyfenyl)ethylamino]ethanolu (X) (R,S + S,S směs).

Vychází se z 7,7 g nitrosloučeniny obecného vzorce VII, 0,3 g palladia na uhlí, 6,5 g p-methoxybenzaldehydu a 30 mg oxidu platičitého. Ve formě sulfátu se dostane 0,6 g produktu.

NMR (jako uvedeno shora) d;

7,28 (d, 2H), 7,14-6,36 (m, 11H), 5,12 (široký singlet, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,22 (s, 2H), 3,72 (2d, 6H), 3,4-2,5 (mvč. DMSO), 1,0 (d, 3H).

Příklad 7

Způsob výroby l-(4-hydroxy-3-p-methoxybenzylaminofenyl)-2-[l-methyl-2-fenylethylamino]ethanolu (X).

Vychází se 2,5 g nitrosloučeniny obecného vzorce VII, 260 mg produktu ve formě sulfátu se dostane.

NMR (j ako uvedeno): d;

7,4-6,4 (m, 12H), 5,15 (s, 1H), 4,59 (široký singlet, 1H),

4,22 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,2-2,5, (m, vč. DMSO), 1,0 (dd, 3H).

-16CZ 280747 B6

Tabulka 1

Shrnutí sloučenin obecného vzorce X podle vynálezu

Sloučenina Vyrobeno z mezipodle pří- produktu vzorce

kladu č.		^R1	^R2	^R3	^R5	^R6	Stereochemie
1	VIII	-och₂o-		H	B	ocb₃	R,S
1	VIII	-och₂o-		H	B	ocb₃	R,R
1	VIII	-och₂o-		B	B	ocb₃	S,R
1	VIII	-och₂o-		H	B	ocb₃	S,S
2	VIII	-och₂o-		H	B	ocb₃	R, S+S, R (racemát)
2	VII	-och₂o-		H	B	ocb₃	R, R+S, S (racemát)
3	VII	-och₂o-		H	B	B	R, S+S, R+R, R+S, S směs
4	VII	-och₃	-och₃	H	B	ocb₃	R, S+S, S směs
5	VII	-och₂o-		cb₃	B	ocb₃	R/S (racemát)
6	VII	-och₃	-B	B	B	ocb₃	R, S+S, S směs
7	VII	B	H	B	B	ocb₃	R, S+S, S směs

-17CZ 280747 B6

Tabulka 2

Výchozí sloučeniny obecného vzorce VI

Sloučenina č. Metoda Rj přípravy

R2 R3 R4 Stereoisomer(y)

SI	C	-o-ch₂-o-	H	CH(CH₃)Ph	s,s
S2	c	-o-ch₂-o-		B	CH(CH₃)Ph	R,R
S3	c	och₃	H	H	CH(CH₃)Ph	S,S
S4	D	-o-ch₂-o-		H	B	R/S
S5	D	-o-ch₂-o-		ch₃	B	-
S6	D	och₃	OCH3	H	B	R/S
S7	D	H	H	H	H	R/S
S8	C	B	H	H	CH(CH₃)Ph	S,S

Vysvětlivka: Ph znamená fenyl

Dále se uvádějí určité příklady výroby sloučenin obsažených v tabulce 2.

Sloučenina S8

Způsob výroby N-l-(S)-fenethyl-l-fenyl-2-(S)-propanaminu

13,4 g (0,1 mol) fenylacetonu a 10,9 g (S)-fenethylaminu se vaří pod zpětným chladičem v 200 ml benzenu po dobu 3 hodin v Dean-Starkově aparátu. Po odpaření rozpouštědla se odparek rozpustí v ethanolu, přidá se Raneyův nikl a provádí hydrogenace přes noc za tlaku 343,5 kPa. Produkt se čistí rekrystalizací hydrochloridu z acetonu nebo ethanolu. Výtěžek činí 8,1 g (jako báze ) .

NMR (CDC1₃, TMS jako referenční sloučenina): d;

' 7,33-7,06 (m, 10H), 3,92 (1, 1H), 2,87 (dd, 1H), 2,75 (sextet, 1H), 2,48 (dd, 1H), 1,29 (d, 3H), 0,90 (d, 3H).

Sloučenina S3

Způsob výroby N-l-(S)-fenethyl-l-(4-methoxyfenyl)-2-(S)-propanaminu

-18CZ 280747 B6

Výrobní postup je stejný, jako je uvedeno výše. Z 16,4 g ketonu a 10,9 g (S)-l-fenethylaminu se získá 12,5 g produktu, po chromatografii na sloupci oxidu křemičitého, za použití směsi trichlormethanu a methanolu v poměru 10:2.

Sloučenina S1

Způsob výroby N-l-(S)-fenethyl-l-(l,3-benzodioxol-4-yl)-2-(S)-propanaminu

Tato sloučenina a odpovídající R,R-isomer se vyrábějí analogicky z (1,3-methylenoxy)fenylacetonu.

Sloučenina S5

Způsob výroby l-(3,4-methylendioxyfenyl)-2-methyl-2-(R/S)-aminopropanu

K 2,4 mol čerstvě připraveného methoxidu sodného v 360 ml methanolu se za teploty 15 ’C přidá roztok 360 g (2,4 mol) piperonalu v 684 g (7,7 mol) 2-nitropropanu. Vše se míchá za teploty místnosti přes noc a potom se přidá 480 ml 5-normální kyseliny sírové. Reakční směs se potom vylije na vodu. Organická fáze se zpracuje se siřičitanem sodným a rekrystaluje ze směsi toluenu a hexanu. Výtěžek je 247 g.

K roztoku 247 g získané sloučeniny v benzenu se přidá 141 g thionylchloridu ve 250 ml benzenu. Vše se vaří pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin, rozpouštědlo a přebytek thionylchloridu se odpaří. Dostane se olejovitý odparek, který se rekrystaluje z isopropylalkoholu. Výtěžek je 140 g.

g (0,1 mol) této sloučeniny se rozpustí ve 200 ml dioxanu, přidá 0,3 g palladia na síranu barnatém a potom se provádí hydrogenace za tlaku 100 kPa při teplotě místnosti. Filtrací a odpařením se dostane olejovitý zbytek, který se rozpustí ve 150 ml ethanolu. Potom se přidá 1 g 10% palladia na uhlí a hydrogenuje se za tlaku 343,5 kPa přes noc. Potom se provede filtrace a odpaření na produkt. Rekrystalizací se dostane 11,5 g produktu.

NMR (hydrochlorid v CDC1₃, TMS jako referenční sloučenina): d;

8,45 (-NH₃), 6,8-6,6 (aromat.), 5,9 (OCH₂O), 2,9 (-CH,-),

1,4 (~CH₃).

Sloučenina S6

Způsob výroby 1-(3,4-dimethoxyfenyl)-2-(R/S)-aminopropanu g (0,12 mol) 3,4-dimethoxybenzaldehydu se rozpustí ve 100 ml nitromethanu a potom se přidají 3 ml butylaminu. Po dvouhodinovém varu pod zpětným chladičem za použití Dean-Starkova aparátu se provede odpaření. Dostane se hnědý olej, který se rekrystaluje z isopropylalkoholu. Dostane se 16,6 g.

-19CZ 280747 B6

16,4 g (0,07 mol) nitrostyrenu se přikape k 8 g lithiumaluminiumhydridu v 1 litru suchého etheru. V míchání se pokračuje přes noc. Po zpracování se dostane nažloutlý olej. Sulfát se připraví z roztoku směsi etheru a ethanolu. Výtěžek je 10,4 g (sulfátu) .

Sloučenina S4

Způsob výroby l-(3,4-methylendioxyfenyl)-2-(R/S)-aminopropanu

Sloučenina se vyrobí, jak popsal T Wo Beng a kol. v J. Med. Chem. 13, 26 (1970).

Sloučenina S7

Podobným způsobem se vyrobí l-fenyl-2-(R/S)-aminopropan.

Tabulka 3

Meziprodukty obecného vzorce VII

Vil )

Sloučenina č.	Metoda přípravy	*1	*2	^R3	r₄	Stereoisomer(y)
11	A	-ocb₂o-		B	CH(CH₃)Ph	R,S,S
12	A	-och₂o-		B	CH(CH₃)Ph	S,S,S
13	A	-och₂o-		H	CH(CB₃)Ph	R,R,R
14	A	-ocb₂o-		B	CB(CB₃)Ph	S,R,R
15	A	och₃	B	H	CB(CB₃)Ph	R,S,S + S,S,S směs
16	A	H	B	B	CB(CB₃)Ph	R,S,S + S,S,S směs
17	B	-ocb₂o-		B	B	R,S + S,R racemát
18	B	-och₂o-		B	B	R,R + S,S racemát
19	B	ocb₃	ocb₃	H	B	R,S + S,R + R,R + S,S směs
110	B	-ocb₂o-		ch₃	B	R/S racemát

-20CZ 280747 B6

Dále se uvádějí určité příklady výroby sloučenin obsažených v tabulce 3.

Obecný způsob výroby sloučenin obecného vzorce VII, kde R₄znamená atom vodíku.

4-Benzyloxy-3-nitrostyrenoxid se vaří pod zpětným chladičem s vhodným aminem v methanolu přes noc nebo déle. Produkty se čistí chromatografíčky na sloupci oxidu křemičitého za použití chloroformu jako eluentu.

Způsob výroby l-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-[l-methyl-(3,4-methylendioxyfenylJethylamino]ethanolu (R,S + S,R racemát a R,R + S,S racemát)

Způsob je popsán v příkladě 2 uvedeném shora.

Sloučenina 19

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-[l-methyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylamino]ethanolu (R,R-, R,S-, S,S- a S,R-isomerní směs)

Vychází se z 4,3 g aminu a 5,4 g epoxidu. Ve formě oleje se dostane 5,2 g produktu.

Obecný způsob výroby sloučeniny obecného vzorce VII, kde R₄znamená skupinu vzorce CH(CH₃)Ph.

Amin obecného vzorce VI se zahřívá pod proudem suchého dusíku při teplotě 150 °C s 4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxidem přes noc. Surový produkt se vyčistí chromatografií na sloupci oxidu křemičitého za použití chloroformu jako elučniho činidla.

Sloučenina 15

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-[N-methylbenzyl-N-(1-methoxyfenyl)-2-propylamino]ethanolu (R,S,S + S,S,S-isomerní směsi)

Vychází se z 5,1 g aminu obecného vzorce VI a 5,4 g epoxidu. Získá se 7,7 g oleje.

NMR: (CDC1₃, TMS jako referenční sloučenina): d;

7,86-6,71 (m, 12H), 5,25 (s, 1H), 5,23 (s, 1H), 4,58 (m,

1/2H), 4,37 (m, 1/2H), 4,10 (m, 2H), 3,77, (s, 1,5H), 3,75 (s,

1,5H), 3,78 (m, 1/2H), 3,25-2,40 (m), 2,15 (m), 1,6 (dd, 3H),

1,0 (dd, 3H).

Sloučenina 16

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-(N-methylbenzyl-N-1-fenyl-2-propylamino)ethanolu

-21CZ 280747 B6

Vychází se z 4,8 g aminu obecného vzorce VI a 5,4 g epoxidu. Získá se 2,5 g olejovitého produktu.

Sloučenina 110

Způsob výroby 1-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-[1,1-dimethyl-l-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylamino]ethanolu (racemát)

Vychází se z 4,8 g aminu obecného vzorce VI a 5,4 g epoxidu. Získá se 7,4 g produktu.

NMR: (CDC1₃, TMS jako referenční sloučenina): d;

7,85 (d, 1H), 7,52-6,52 (m, H), 5,91 (s, 2H), 5,22 (s, 2H), 4,56 (dd, 1H), 2,91 (dd, 1H), 2,58, (s, 2H), 2,56 (m, 1H), 1,04 (2s, 6H).

Sloučeniny II, 12, 13 a 14

Způsob výroby l-(4-benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-[l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylamino]ethanolu

Výroba z R,R,R-, R,S,S-, S,S,S- a S,R,R-isomerů je popsána shora pod příkladem 1.

Také výroba sloučenin v dále uvedené tabulce 4 je popsána shora pod příkladem 1.

Tabulka 4

Meziprodukty obecného vzorce VIII

Slouč. č. R^

Stereochemie

^r3 ^r4

Ml	-och₂o-	H	CH(CH₃)Ph	R,R,R
M2	-och₂o-	H	CH(CH₃)Ph	S,R,R
M3	-och₂o-	H	CH(CH₃)Ph	R,S,S
M4	-och₂o-	H	CH(CH₃)Ph	S,S,S

Vysvětlivka: Ph znamená fenyl

-22CZ 280747 B6

Způsobem podle vynálezu lze vyrobit také tyto sloučeniny:

l-/(3,4-Difluormethylendioxy)fenyl/propylketon vzorce 1'

(!') g (0,13 mol) 3,4-difluormethylendioxybenzaldehydu se rozpustí ve 120 ml nitroethanu. K roztoku se přidá 1,3 ml n-butylaminu a vzniklá směs se vaří pod zpětným chladičem s Dean-Starkovým nástavcem po dobu 2 hodin. Destilací za teploty 130 až 137 °C na tlaku 200 Pa a rekrystalizaci získané látky z petroletheru se dostane 10,4 g vyrobeného nitrostyrenu vzorce IB

Směs vyrobené sloučeniny vzorce IB s 8 g železných tělísek, 1 g chloridu železitého a 50 ml vody se zahřeje na teplotu 65 °C a potom přidá 12 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Směs se zahřívá na teplotu 90 ’C po dobu 6 hodin. Reakčni směs se extrahuje etherem a dostane se 7,2 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která je tvořena olejem.

NMR spektrum (CDC1₃/TMS): d = 7,05-6,85 (2 d, ls, 3H), 3,70 (s, 2H), 2,18 (s, 3H) ppm.

N-l (S ) -Fenethyl-1-/ ( 3,4-dif luormethylendioxy) f enyl/-2- (.S) -propanamin vzorce II

7,0 g (0,03 mol) ketonu svrchu uvedeného vzorce 1' a 3,7 g (0,03 mol) (S)-1-fenethylaminu se vaří pod zpětným chladičem s Dean-Stárkovým nástavcem po dobu 3,5 hodiny. Reakčni směs se odpaří na olejovitý produkt, který se rozpustí v ethanolu a hydrogenuje na Raneyově niklu za tlaku 343,5 kPa po dobu 1 Vzniklá směs se extrahuje směsí etheru a vody a potom chromáto

-23CZ 280747 B6 grafuje na silikagelu při eluování směsí chloroformu a ethanolu v poměru 10:1. Dostane se tak 4,1 g sloučeniny pojmenované v nadpise. Přidáním kyseliny sírové se dostane krystalický sulfát.

NMR spektrum (sulfát, DMSO/DMSO při 2,52): d = 7,5-6,9 (m, 8H), 4,15 (m, H), 2,75 (m, 1H), 3,0 a 2,5 (m, 2H), 1,35 (d, 3H) a 0,92 (d, 3H) ppm.

1-(l-Benzyloxy-3-nitrofenyl)-2-/l-methyl-2-/(3,4-difluormethylendioxyfenylJethylamino/ethanol (R,S a S,S isomer) vzorce III

4,1 g (0,013 mol) aminu a 3,5 g (0,013 mol) (R/S)-3-nitro-4-benzyloxystyrenoxidu se zahřívá na teplotu 155 °C po dobu 20 hodin. Potom se k reakční směsi přidá ethylacetát a kyselina chlorovodíková. Ze směsi vykrystaluje S,S,S-isomer sloučeniny. Chromatograf ováním matečných louhů na silikagelu se dojde k hlavnímu R,S,S-isomeru.

NMR (R,S,S-isomer, CDC1₃/TMS): d = 7,8 (d, 1H), 7,55-6,3 (m, 15H), 5,25 (S, 2H), 4,62 (dd, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,2-2,4 (m,

4H), 2,15 (dd, 1H), 1,5 (d, 3H), 0,95 (d, 3H) ppm.

NMR (S,S,S isomer): d = 7,8 (d, 1H), 7,55-6,30, (m, 15H) ,

5,2 (s, 2H), 4,55 (dd, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,2-2,4 (m, 5H), 1,4 (d, 3H), 1,05 (d, 3H) ppm.

-24CZ 280747 B6 l-(4-Hydroxy-3-p-methoxybenzylaminofenyl)-2-/l-methyl-2-(3,4-di-

(IV)

o

^CH3

2,0 g R,S,S-isomeru (III) se rozpustí ve 100 ml ethanolu a potom se přidá ethanolická kyselina chlorovodíková. Do reakční směsi se vnese 0,4mg 10% palladia na uhlí a provádí se hydrogenace za tlaku 343,5 kPa po dobu 24 hodin. Směs se filtruje a k filtrátu přidá 20 mg oxidu platičitého a 2,5 ml anisaldehydu. Potom se provede další hydrogenace za tlaku 343,5 kPa, probíhající po dobu 2 hodin. Reakční směs se odpaří a odparek chromatografuje na silikagelu při eluování směsi chloroformu a ethanolu v poměru 10:1. Získá se 1,7 g vyráběné sloučeniny, která po přidání kyseliny sírové v ethanolu poskytne 0,8 g soli (R,S-isomer).

Podobným způsobem se vyrobí S,S-isomer.

NMR (R,S-isomer v DMSO/DMSO při 2,52): d = 7,35-6,4 (m, 11H), 4,52 (m, 1H), 4,2 (S, 2H), 3,7 (s, 3H), 3,2-2,5 (m), 1,0 (d, 3H) ppm.

(S,S-isomer): d = 7,3-6,4 (m, 11H), 4,57 (m, 1H), 4,2 (s,

3H), 3,7 (s, 3H), 3,2-2,5 (m), 1,0 (s, 3H) ppm.

Dále uvedené příklady ilustrují, jak se sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou zapracovat do farmaceutických prostředků:

Příklad PÍ Aerosol pro inhalaci sloučenina podle příkladu 1 nebo 2 trioleát sorbitanu

Friger^Rll/12/114 do

0,75 g

0,20 g

100,0 g

-25CZ 280747 B6

Příklad P2 Tablety

Každá tableta obsahuje:

sloučenina podle příkladu 1	6,0 mg
kukuřičný škrob	78,0 mg
laktóza	125,0 mg
povidon	7,0 mg
mikrokrystalická celulóza	13,0 mg
sterarát hořečnatý	1,6 mg

Příklad P3 Čípky

Každý čípek obsahuje:

sloučenina podle příkladu 1 askorbyl-palmitát čípkový základ (Imhasen H) do

6,0 mg

1,0 mg 2 000,0 mg

Příklad P4 Sirup

Sloučenina podle příkladu 1 kapalná glukóza sacharóza kyselina askorbová pyrosiřičitan sodný edetát dvojsodný pomerančová esence ověřené barvivo čištěná voda do

0,060 g

30,0 g

50,0 g

0,1 g

0,01 g

0,025 g

0,015 g

100,0 ml

Příklad P5 Inhalační roztok sloučenina podle příkladu 1 pyrosiřičitan sodný edetát dvojsodný chlorid sodný čištěná voda do

0,75 g

0,10 g

0,85 g 100,0 ml

Příklad P6 Roztok pro rektální podání (Lahvičky pro rektální použití) sloučenina podle příkladu 1 pyrosiřičitan sodný edenát dvojsodný sterilizovaná voda do

6,0 mg

1,5 mg

0,3 mg

3,0 ml

Příklad P7 Sublinguální tablety

sloučenina podle příkladu 1	3,0	mg
laktóza	83,0	mg
sacharóza	87,0	mg
akacie	10,0	mg
mastek	5,0	mg
stearát hořečnatý	1,0	mg

-26CZ 280747 B6

Příklad P8 Kapky

sloučenina podle příkladu 1	0,60 g
kyselina askorbová	1,00 g
pyrosiřičitan sodný	0,10 g
edetát dvojsodný	0,10 g
kapalná glukóza	50,00 g
absolutní alkohol	10,00 g
čištěná voda do	100,0 ml

Příklad P9

Sloučenina podle příkladu 1 se stereochemií R,S se mikronizuje na velikost částic, která je vhodná pro inhalační terapii.

* * * * R

Latka se naplní do inhalátoru prasku Turbuhaler .

Obvyklá denní dávka účinné látky se mění v širokém rozmezí a bude záviset na různých okolnostech, jako například individuálních požadavcích každého pacienta, cestě podání a chorobě. Uvedeno obecně, perorální a parenterální dávky budou v rozmezí od 0,5 do 15 mg účinné látky za den. Účinná látka může být také zpracována do farmaceutických prostředků, které obsahují kombinaci účinné sloučeniny s Ipratropium bromidem nebo Budesonidem.

Farmakologické hodnocení

1. Trvání bronchodilatačního účinku studovaného na morčatech

A. Metoda

Ke studiu se použijí morčata. Sloučeniny podle příkladů 1 a 2, salmeterol a terbutalin se podávají inhalací nebo instalují tracheálně a potom se zvířata testují v histaminové mlze během rozdílných časových intervalů.

a. Inhalace

Morčata se umístí do krabic z plastické hmoty a testované sloučeniny se nepřetržitě zavádějí průtokem mlhovým rozprašovačem během 15 minut.

b. Tracheální instalace

Zvířata se slabě anestetizují inhalací Efranu. Testované sloučeniny se nakapají za použití tenké kanyly do tracheální bifurkace. Kontrolním zvířatům se zavede fyziologický roztok chloridu sodného.

c. Vyvolání procedury

Po podáních jednou ze shora uvedených cest, se zvířata umístí do průsvitných klecí z plastické hmoty a zavede se jim histamin ve formě aerosolu. Mlha se vytváří v rozprašovači z roztoku obsahujícího 0,5 až 1,0 χ 10^-3 mol histaminu na litr ve 3% glycerolu. Tato koncentrace vytváří definované dyspnotické dýchání, které se vyvine u kontrolních zvířat během 2 až 3 minut. Tato fá

-27CZ 280747 B6 ze se obvykle indikuje pozorováním, někdy také pomocí slepého pokusu nebo se zaznamenává za použití páskového průtahoměru (srov. O. A. T. Olsson v Acta Allergologica 26., 438 /1971/). Zvyšující se množství spasmolyticky účinné látky zvyšuje potom prodloužení schopnosti zvířat odolat histaminovému spasmu v závislosti na dávce. Jakmile se dostaví dyspnotické dýchání, morčata se odstraní z histaminového prostředí. Stejná zvířata se mají vystavit histaminu nejen po 30 minutách, ale také za 3, 6 a 9 hodin po podání léčivé látky.

Při některých z pokusů se zvířata vystaví působení methacholinu, místo působení histaminu, aby se vyloučila možnost antihistaminového účinku testovaných léčivých látek.

B. Výsledky β-receptorové agonisty salmeterol a terbutalin se používají při inhalační terapii a v této studii jsou proto zvoleny jako referenční sloučeniny. Studie hodnotí nové β-agonisty podle tohoto vynálezu s ohledem na trvání účinku své bronchodilatační aktivity.

Obecné počáteční schopnosti nových sloučenin podle příkladu 1 a 2 jsou přibližně stejné, jako pro terbutalin, ale zhruba desetkrát menší než pro salmeterol. Trvání účinku, vypočítané z rovnocenných úrovní, jsou však prodloužené pro nové sloučeniny podle vynálezu a pro salmeterol, ve srovnání s terbutalinem. Při srovnání se salmeterolem, trvání účinků nových sloučenin se zdá také o něco delší.

Sloučeninami uvedenými v tabulce 5 jsou 1-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethylaminojethanol, buď ve formě racemické směsi, nebo jako jeden ze svých isomerů.

Tabulka 5

Sloučeniny podávané intratacheálně, mol/kg

Schopnost látek vytvářet prodlení (min) v začátku dyspnotického dýchání v histaminovém prostředí po podání za

0,5 h 6h (R,S+S,R): lxlO^-8 (R,S+S,S): lxlO^-8 (R,R+S,R): lxlO^-7(R,R): 5xl0^-8 (R,S): 5xl0^-9 — 7 terbutalin 1x10 (srovnávací látka) fyziologický roztok chloridu sodného (kontrolní stanovení)

-28CZ 280747 B6

Nakapané množství vytváří přibližně rovnocennou ochranu (6 až 7 minut) proti dráždění vyvolanému histaminem 30 minut po podání testované sloučeniny. Stupeň ochrany 6 hodin po zavedení testované sloučeniny ukazuje na trvání bronchospasmolytického účinku.

II. Studie bronchospasmolytického účinku a účinku stimulujícího srdeční činnost u anestetizovaných morčat.

Pomocí této studie se srovnávají β-receptorové agonisty podle tohoto vynálezu se salmeterolem a terbutalinem z hlediska schopnosti inhibovat respirační spasma u narkotizovaných morčat po intravenózní injekci nebo inhalaci. Kromě toho se hodnotí vliv testovaných sloučenin na srdeční rychlost.

Metody

a. Intravenózní podání

Při studii se použijí morčata obého pohlaví. Anestezié zvířat se provede intravenozně pentobarbitalem. Potom se kanyluje průdušnice a ta se zvířatům uměle okysličuje konstantním respiračním objemem. Pomocí tlakového převaděče se měří intratracheální tlak (ITP). Vzrůst intratracheálního tlaku nad základní úroveň tlaku, ukazující na respirační spasmu, se vyvolá infuzí histaminu do jugulární žily během 20 sekund každých 7 minut a v množství, které způsobí pík ITP v rozmezí 4 až 6 kPa. Stopa kardiovaskulárních účinků z použitých léčivých látek se zaznamená společně s krevním tlakem z karotidní arterie pomocí tlakového převaděče. Tepová vlna, udávající změnu rychlosti, uvádí do Chodu tachograf, který zaznamenává srdeční frekvenci.

Testované sloučeniny se zavádějí v injekci 3 minuty před infuzí histaminu a procentuální pokles intratracheálního tlaku se bere jako měřítko bronchospasmolytického účinku. Vliv na rychlost srdce se ohodnotí po kumulativních injekcích. Nová injekce se zavede, když předcházející injekcí se dosáhne konstantního stavu rychlosti.

b. Inhalační podávání

Testované sloučeniny se rozprašuji a vytvořená mlha se zvířatům zavádí respirátorem a průdušnicovou kanylou. Pro každou koncentraci testovaných sloučenin trvá inhalace 15 minut. Bronchodilatační účinek na rychlost srdce se vypočítá jako procentuální snížení ITP. Účinek na rychlost srdce se stanoví po kumulativním zvýšení koncentrace rozprášeného roztoku. Účinek se měří v ustáleném stavu a použijí se tři rozdílné koncentrace.

B. Výsledky

a. Respirační účinky

Tři použité β-respirační agonisty, sloučeniny podle příkladu 2, salmeterol a terbutalin vždy vykazují inhibici bronchospasmu vyvolaného histaminem v závislosti na dávce, po injekci, stejně jako po inhalaci. Salmeterol je účinnější a jeho síla je alespoň desetkrát vyšší než u dalších dvou léčivých látek, pokud se podá

-29CZ 280747 B6

5x10 ¹⁰ mol/kg salmeterolu, 5xl0^-9 mol/kg sloučeniny podle příkladu 2 nebo lxlO^-8 mol/kg terbutalinu způsobují asi 50% snížení intratacheálního tlaku.

b. Účinek na rychlost srdce

Účinek na rychlost srdce je závislý na dávce a zdá se, že především závisí na přímé aktivitě testovaných sloučenin, spíše než aby šlo o výsledek změny krevního tlaku. Je možné doložit, že dávka ovlivňuje rychlost srdce nejen po intravenozní injekci, ale také po inhalaci. Pokud se salmeterol nebo terbutalin zavedou ve formě injekce, zvýší se rychlost srdce více než po sloučenině podle tohoto vynálezu. Dávka lxlO^-7 mol/kg salmeterolu a terbutalinu zvyšuje rychlost srdce o 30 stahů za minutu. Dosažení stejného zvýšení rychlosti srdce se sloučeninou podle tohoto vynálezu vyžaduje alespoň desetkrát větší dávku. Inhalací 5xl0^-4 mol salmeterolu na litr zvyšuje rychlost srdce o 15 stahů za minutu. Stejné zvýšení rychlosti srdce se dosáhne s 5xl0^-3 mol sloučeniny podle tohoto vynálezu na litr, přičemž účinek terbutalinu je mezi těmito hodnotami.

Příbuznost mezi účinkem na respirační systém a na srdce je stejná pro sloučeninu vyrobenou podle příkladu 2 a salmeterol, pokud se léčivé látky zavedou injekčně. Avšak tento vztah se nezdá stejný po inhalaci. V tomto případě sloučenina vyrobená podle příkladu 2 má snížený účinek na rychlost srdce, ve srovnání se salmeterolem.

Trvání bronchospasmolytického účinku (vyjádřené jako procentuální hodnota z maximálního účinku) po intratacheálním podání testovaných sloučenin u bdělých morčat podrážděných vdechovaným

histaminem je shrnuto v tabulce 6.
Tabulka 6
Testovaná	Množství podá-	Doba po podání (h)
sloučenina	vané sloučeniny	0,5 3 6

A	lxl0^-6mol/kg	46	90	75
B	lxl0^-8mol/kg	100	63	17
C	lxl0^-8mol/kg	71	75	33
D	lxl0^-7mol/kg	68	47	13

Vysvětlivky:

A - hydrochlorid racemického 1-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenylethyl)amino/ethanolu vzorce

-30CZ 280747 B6

(sloučenina A)

B = hydrochlorid racemického 3-(4-hydroxybenzylamino)-4-hydroxy—a—(terč.butylaminomethyl)benzylalkoholu vzorce

(sloučenina B) (podle nároku 10 z US patentu č. 4 072 760),

C = hydrochlorid racemického l-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)-fenyl-2-/l-methyl-2-(3,4-dimethoxyfenylethyl)amino/ethanolu vzorce

-31CZ 280747 B6

D = terbutalinsulfát vzorce

HO

OH i

GHCH₂NHC(CH₃)₃ (sloučenina D = terbutalin).

Stanovení toxicity

Ke stanovení toxických účinků se použilo reprezentativní sloučeniny podle tohoto vynálezu, a to hydrochloridu l-(R)-/4-hydroxy-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl/-2-/(1-(S)-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl)amino/ethanolu.

Při stanovení akutního toxického účinku na kryse se došlo k těmto výsledkům:

Perorální podání: odhadnutá hodnota LD₅₀: 4 000 μιηοΐ/kg, intravenózní podání: odhadnutá hodnota LD₅₀: větší než 100 μιηοΐ/kg.

Závěr

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou tedy účinné během delšího časového období než například terbutalin. Kromě toho tyto sloučeniny mají menší účinek než salmeterol.

Trvání účinku sloučenin A a C je signifikantně delší než jak je tomu u sloučenin B a D.

-32CZ 280747 B6

Sloučeniny podle vynálezu projevují příznivě nízký toxický účinek.

Nej lepší dosud známá forma provedení tohoto vynálezu je založena na použití sloučeniny 1-(R)-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[/1-methyl-l-(S)-3,4-(methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY znamenaj i nebo řetězec vzorce nebo rozdílné a nebo methoxyskupinu tvoří dohromady jsou stejné (X) vždy atom vodíku

-O-CH₂~O- nebo -o-cf₂-o-,

R₃ znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

R₅ znamená atom vodíku a

R_g značí atom vodíku nebo methoxyskupinu, a jeho farmaceuticky přijatelné soli.
2. Derivát fenylethanolaminu podle nároku 1, který je ve formě čistého optického isomeru.
3. Derivát fenylethanolaminu podle nároku 1, kde R^ a R₂ představují dohromady řetězec -O-CH₂~O-, R₃ znamená atom vodíku, R₅znamená atom vodíku a R_g značí methoxyskupinu.
4. Derivát fenylethanolaminu podle nároku 1, který je směsí R,S- a S,S-isomerů 1-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

-33CZ 280747 B6
5. Derivát fenylethanolaminu podle nároku 1, který je racemátem R,S- a S,R-isomerů l-(4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[/l-methyl-2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
6. Derivát fenylethanolaminu podle nároku 1, který je isomerem 1-

- (R) - (4-hydroxy)-3-(p-methoxybenzylamino)fenyl-2-[/l-methyl-2-(S)-(3,4-methylendioxyfenyl)ethyl/amino]ethanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli.
7. Derivát fenylethanolaminu podle nároku 6, který je ve formě hydrochloridu.
8. Způsob výroby derivátu fenylethanolaminu obecného vzorce X podle nároku 1, vyznačující 4-benzyloxy-3-nitrostyrenoxid vzorce V se t i m, ze se (V) nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce VI

CH-j

NH

V

R₄ (VI) ve kterém

R-^, R₂ a R₃ maj i význam uvedený v nároku 1 a

R₄ znamená atom vodíku nebo skupinu vzorce za vzniku sloučeniny obecného vzorce VII

-34CZ 280747 B6

R (VII) ve kterém

Rj, R₂, R₃ a R₄ mají shora uvedený význam, potom se sloučenina obecného vzorce VII hydrogenuje a potom se vzniklý meziprodukt nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce

CHO ve kterém

R₆ má význam uvedený shora, a po další hydrogenaci poskytne derivát fenylethanolaminu obecného vzorce X, jako čistý isomer, racemát nebo směs isomeru.
9. Farmaceutický prostředek k ošetřování bronchospasmolytických chorob, vyznačující se tím, že obsahuje derivát fenylethanolaminu podle nároku 1 společně s farmaceuticky přijatelným nosičem.
10. Použití derivátu fenylethanolaminu podle nároku 1 pro výrobu farmaceutického prostředku s prodlouženým bronchospasmolytickým účinkem.