CZ279877B6 - Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 - Google Patents
Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 Download PDFInfo
- Publication number
- CZ279877B6 CZ279877B6 CS912396A CS239691A CZ279877B6 CZ 279877 B6 CZ279877 B6 CZ 279877B6 CS 912396 A CS912396 A CS 912396A CS 239691 A CS239691 A CS 239691A CZ 279877 B6 CZ279877 B6 CZ 279877B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- alkaloids
- ergot
- ccm
- sclerotia
- tul
- Prior art date
Links
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 title claims abstract description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title description 4
- HEFIYUQVAZFDEE-UHFFFAOYSA-N ergocristinine Natural products N12C(=O)C(C(C)C)(NC(=O)C3C=C4C=5C=CC=C6NC=C(C=56)CC4N(C)C3)OC2(O)C2CCCN2C(=O)C1CC1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 claims abstract description 19
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 claims abstract description 19
- HEFIYUQVAZFDEE-MKTPKCENSA-N ergocristine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@@H]1C=C2C=3C=CC=C4NC=C(C=34)C[C@H]2N(C)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-MKTPKCENSA-N 0.000 claims description 18
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 5
- 229960003133 ergot alkaloid Drugs 0.000 abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 9
- ZAGRKAFMISFKIO-UHFFFAOYSA-N Isolysergic acid Natural products C1=CC(C2=CC(CN(C2C2)C)C(O)=O)=C3C2=CNC3=C1 ZAGRKAFMISFKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- ZAGRKAFMISFKIO-QMTHXVAHSA-N lysergic acid Chemical compound C1=CC(C2=C[C@H](CN([C@@H]2C2)C)C(O)=O)=C3C2=CNC3=C1 ZAGRKAFMISFKIO-QMTHXVAHSA-N 0.000 abstract description 7
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 abstract description 4
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- OWEUDBYTKOYTAD-MKTPKCENSA-N ergocristine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@@H]1C=C2C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C[C@H]2N(C)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 OWEUDBYTKOYTAD-MKTPKCENSA-N 0.000 abstract 3
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 abstract 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- WVVSZNPYNCNODU-CJBNDPTMSA-N Ergometrine Natural products C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@@H](CO)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 WVVSZNPYNCNODU-CJBNDPTMSA-N 0.000 description 2
- WVVSZNPYNCNODU-XTQGRXLLSA-N Lysergic acid propanolamide Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@H](CO)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 WVVSZNPYNCNODU-XTQGRXLLSA-N 0.000 description 2
- 241001558929 Sclerotium <basidiomycota> Species 0.000 description 2
- YDOTUXAWKBPQJW-UHFFFAOYSA-N alpha-Ergocryptinine Natural products C1=CC(C=2C(N(C)CC(C=2)C(=O)NC2(C(=O)N3C(C(N4CCCC4C3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 YDOTUXAWKBPQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950001817 alpha-ergocryptine Drugs 0.000 description 2
- YDOTUXAWKBPQJW-NSLWYYNWSA-N alpha-ergocryptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 YDOTUXAWKBPQJW-NSLWYYNWSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- UJYGDMFEEDNVBF-UHFFFAOYSA-N ergocornin Chemical compound C1=CC(C=2C(N(C)CC(C=2)C(=O)NC2(C(=O)N3C(C(N4CCCC4C3(O)O2)=O)C(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 UJYGDMFEEDNVBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001405 ergometrine Drugs 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- XLMJRFCCCWFQRE-SJRQCXNHSA-N ecboline Chemical compound C([C@H]1[C@]2(O)O3)CCN1C(=O)CN2C(=O)[C@]3(C(C)C)NC(=O)[C@@H](CN(C)[C@@H]1C2)C=C1C1=C3C2=CNC3=CC=C1 XLMJRFCCCWFQRE-SJRQCXNHSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 238000012794 pre-harvesting Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000010408 sweeping Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Učelem vynálezu je zabezpečení výchozí suroviny pro výrobu námelového alkoloidu ergokristinu a následně kyseliny lysergové a polosyntetických alkaloidů a výroba lékových forem těchto alkaloidů. Surovinou pro tyto výroby jsou námelová sklerocia. Uvedeného účelu se dosáhne vypěstováním sklerocií nového průmyslového kmene Claviceps purpurea (Fr.)Tul. CCM 8058 parazitní kultivací na žitě a použitím těchto sklerocií k výrobě substancí ergokristinu, kyseliny lysergové a polosyntetických námelových alkaloidů. Sklerocia obsahují minimálně 0,73 % námelových alkaloidů, z nichž je minimálně 80,4 % tvořeno ergokristinem.
ŕ
Description
Vynález se týká průmyslového kmene mikroorganismu určeného k produkci námelového alkaloidu ergokristinu a dalších alkaloidů za podmínek parazitní kultivace na žité pro potřeby farmaceutického průmyslu.
Dosavadní stav techniky
Ergokristin je námelový alkaloid chemického vzorce:
CH3 ch3
Izolovali jej a jeho strukturu popsali poprvé Stolí A. a Burckhadt E. (Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 250, 1, 1937). Ergokristin je významnou léčivou substancí. V humánní medicíně je používán bud’ samostatně, nebo v lékových formách ve směsích s jinými námelovým alkaloidy, ergokryptiny a ergokorninem. Lze jej využít i jako zdroj kyseliny lysergové pro následnou výrobu polosyntetických derivátů námelových alkaloidů, využitelných v humánní i veterinární medicíně. Pro výrobu ergokristinu se používají průmyslové kmeny mikroorganismu Claviceps purpurea. Ergokristin lze získávat saprofytní kultivací za podmínek submersní fermentace (Mantle P. G. in Smith J. E., Berry D. R., The Filamentous Fungi, Vol. 1, Arnold, London, 1974; Floss H. G., Annu, Proč. Phytochem. Soc. Eur., 17, 249, 1980; Kobel H., Sanglier J. J. in FEMS Symposium No. 5, 233 1978; Spalla C., Annu, Proč. Phytochem. Soc. Eur., 17, 271, 1980; Udvardy Nagy E., Process Biochem. 15, 5, 1980; BRD pat. 1, 806.984; CH pat. 523.964, přihláška patentu 23. 12. 82-DD-246422 22.08. 84)) nebo parazitní kultivací na žité, které je hostitelskou rostlinou (Kobel H., Sanglier J.-J. in Rehm H.-J., Reed G., Biotechnology, Vol. 4, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, 1986; Young J. CH., J. Environ, Sci. Health,
P.B., 1, 83, 1981; Vasarbely G., Udvardy E, Agrartud. Kozí. 39, 1/2, 324, 1980; Shaw B. J., Mantle P. G., Trans, Brit, mycol. Soc. 75, 77, 1980; Clark B.J. in Parnham M.J., Bruinvels J., Discoveries in Pharmacology, Vol.2, Elsevier Sci, Publ., Amsterdam, 1984; BRD pat. 3,006.989; belg. pat. 881.864; přihlášky patentu 30. 07. 82-HÚ-002447 (28. 06. 84), 30. 07. 82-HÚ-002446 (28. 06. 84)).
-1CZ 279877 B6
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 uložený v Československé sbírce mikroorganismů Masarykovy university, Joštova 10, 662 43 Brno, vytvářející v polní kultuře na žité sklerocia s obsahem sumy alkaloidů minimálně 0,7 % vztaženo na sušinu biomasy a s obsahem ergokristinu minimálně 80,4 % sumy alkaloidů. Tento nový kmen umožňuje zefektivnit extrakční a izolační postupy při výrobě ergokristinu, kyseliny lysergové a polosyntetických derivátů námelových alkaloidů podstatným zvýšením výtěžnosti těchto postupů. Zvýšená výtěžnost je dána velmi vysokým obsahem ergokristinu ve sklerociích nového kmene ve srovnání s ostatními dosud užívanými typy sklerocií. Obsah alkaloidů ve sklerociích nového kmene CCM 8058 dosahuje 0,73 % až 2,66 % sušiny biomasy, přičemž obsah ergokristinu je 0,58 % až 2,14 % sušiny biomasy. Další výhodou nového kmene je schopnost dosahovat velmi vysokých hektarových výnosů, srovnatelných s jinými vysokoprodukčními kmeny Claviceps purpurea (například CCM 8057, CCM F-755, CCM F-743). Polní kultivace nového kmene s vysokým obsahem alkaloidů při vysokých hektarových výnosech sklerocií vede k úspoře zemědělské půdy potřebné k vyprodukování stejného množství alkaloidů v porovnání s kultivací kmene CCM F-722 (čs. autorské osvědčení č. 222 145) nebo s využitím stimulace produkce podle CS 277 588. Výhodou je i odlišné zbarvení sklerocií nového kmene oproti sklerociím ostatních průmyslových kmenů C. purpurea, které usnadňuje identifikaci drogy nového kmene při veškeré manipulaci.
Popis vlastností nového kmene:
Při saprofytní kultivaci na sladinovém médiu ztuženém agarem tvoří houba kolonie z typického sfaceliového vzdušného mycelia. Mycelium je bílé, větvené, postranní hyfy jsou ukončeny konidiogenními buňkami. Konidie mají průměrné rozměry 9x5 μπι.
Při parazitní kultivaci na žité tvoří houba zpočátku světlá, béžová, později šedohnědá sklerocia o váze v rozmezí 0,010 až 0,120 g (průměr 0,062 g). Sklerocia obsahují námelové alkaloidy v množství 0,73 až 2,66 % sušiny biomasy při průměrném obsahu 1,26 %. Minimálně 80,4 %, průměrně 82,8 % sumy alkaloidů je tvořeno ergokristinem. Zbytek je tvořen doprovodnými alkaloidy α-ergokryptinem, ergometrinem a klavinovými alkaloidy.
Nový průmyslový kmen CCM 8058 byl vyšlechtěn z původního produkčního kmene CCM F-722. Sklerocíum tohoto kmene s obsahem 1,05 % alkaloidů bylo převedeno do saprofytní kultury a vytvořené konidie byly ozařovány UV zářením o výkonu /51 m s po dobu 220 s, kdy přežívalo 0,25 % konidií. Po ozařování byla suspense konidií monosporicky rozizolována. Celý postup UV mutageneze byl opakován 3x. Potom byly kultury z jednotlivých monokonidiových zolátů naočkovány na žito. Byl proveden screening podle obsahu egokristinu ve sklerociích. K dalšímu šlechtění bylo vybráno sklerocium světle hnědé barvy, které obsahovalo 1,03 % alkaloidů, ergokristinu 0,98 %. Toto sklerocium bylo převedeno do daprofytní kultury a opět podrobeno UV mutagenezi za stejných podmínek. Monokonidiové izoláty byly testovány na žité. Ze získaných sklerocií bylo vybráno světle hnědé sklerocium s nejvyšší sumou alka
-2CZ 279877 B6 loidů, tj. 1,3 %, které bylo převedeno do saprofytní kultury a suspenze konidií byla podrobena postupu UV mutageneze za shora uvedených podmínek. Monokonidiové izoláty byly naočkovány na žito. Získaná sklerocia byla analyzována a k dalšímu testování vybrána ta světle hnědá sklerocia, která vykazovala zvýšení obsahu ergokristinu oproti původnímu izolátu. Tato sklerocia byla převedena do saprofytní kultury, vyočkována na žito a hodnocena podle výšky obsahu ergokristinu s přihlédnutím k zastoupení doprovodných alkaloidů a podle infekceschopnosti (výše hektarových výnosů) na žité. Takto vybraný optimální izolát byl deponován v Čs. sbírce mikroorganismů pod číslem CCM 8058. Stabilita vlastností nového kmene byla potvrzena opakovanou kultivací na žitě ve 3 vegetačních obdobích na 6 lokalitách.
Použití vynálezu je dále popsáno v příkladu provedení, aniž by se tímto příkladem jakkoli omezoval způsob kultivace, použití a vlastnosti nového kmene.
Příklad provedení vynálezu
Z potřebného množství trvanlivé suché námeloviny kmene CCM 8058 vyrobené podle CS patentu 276530 se připraví vhodná suspenze konidií. Touto suspenzí konidií se pomocí očkovacího stroje naočkují klasy žita ve fázi metání tak, že se na plochu 1 ha použije 1,6.1011 klíčených konidií. Po 35 denním růstu na žitě se provede předsběr a po dalších 20 dnech sběr narostlých sklerocií námele. Z 1 ha bylo získáno 710 kg suchých sklerocií námele obsahujících v průměru 1,26 % sumy alkaloidů, ze které bylo 82,8 % tvořeno ergokristinem, zbytek tvořil ergometrin, α-ergokryptin a klavinové alkaloidy.
Získaná droga byla vyextrahována, ergokristin vyizolován a zčásti použit pro výrobu lékových forem ergokristinu a ergotoxinu, zčásti pro výrobu kyseliny lysergové a polosyntetických derivátů námelových alkaloidů. Vyextrahované doprovodné alkaloidy byly použity pro výrobu kyseliny lysergové a polosyntetických derivátů.
Průmyslová využitelnost
Vynález je využitelný ve farmaceutickém průmyslu jako kvalitativně nový zdroj námelových alkaloidů pro výrobu substancí a lékových forem ergokristinu, kyseliny lysergové a polosyntetických derivátů námelových alkaloidů, využívaných v humánní a veterinární medicíně.
Claims (1)
- Průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058, který v polní kultuře na žitě vytváří sklerocia s obsahem sumy alkaloidů minimálně 0,73 % vztaženo na sušinu biomasy a s obsahem ergokristinu minimálně 80,4 % sumy alkaloidů.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS912396A CZ279877B6 (cs) | 1991-08-01 | 1991-08-01 | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS912396A CZ279877B6 (cs) | 1991-08-01 | 1991-08-01 | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ239691A3 CZ239691A3 (en) | 1993-02-17 |
| CZ279877B6 true CZ279877B6 (cs) | 1995-07-12 |
Family
ID=5360992
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS912396A CZ279877B6 (cs) | 1991-08-01 | 1991-08-01 | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ279877B6 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ304709B6 (cs) * | 2013-07-25 | 2014-09-03 | Teva Czech Industries S.R.O. | Izolovaný kmen houby Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8404 |
-
1991
- 1991-08-01 CZ CS912396A patent/CZ279877B6/cs not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ304709B6 (cs) * | 2013-07-25 | 2014-09-03 | Teva Czech Industries S.R.O. | Izolovaný kmen houby Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8404 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ239691A3 (en) | 1993-02-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230210064A1 (en) | Organic planting method of gastrodia elata | |
| KR102140050B1 (ko) | 갈란타민 생산을 위한 석산 부정근의 생산방법 | |
| CN113684138B (zh) | 一种赫氏灵芝新菌株及其人工栽培方法 | |
| CN112931058A (zh) | 一种莫干山野生红托竹荪菌种的分离和纯化方法 | |
| CN1614003A (zh) | 蝉拟青霉新菌株的人工培养及其镇痛化合物的提取与利用 | |
| CZ279877B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 | |
| CN101238208A (zh) | 真菌麦角菌（Fr.)Tul.的工业生产菌株 | |
| KR100723068B1 (ko) | 인삼 사포닌 성분이 함유된 팽이 버섯의 재배방법 | |
| CZ2019790A3 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM8865 | |
| CN104877914A (zh) | 一种高产猴头菌诱变菌株h07及制备方法 | |
| CN1827633A (zh) | 从蝉拟青霉培养物中提取n6－（2－羟乙基）腺苷的方法 | |
| CZ279533B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul. | |
| CZ287130B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul. | |
| CS276359B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL.CCM 8057 | |
| CN1212387C (zh) | 从虫草体分离培养的细棒束孢sx－1及其培养方法和用途 | |
| CZ283773B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul. | |
| CS276627B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 | |
| CS239883B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismů druhu Claviceps purpurea (Fr) TUL. CCM F-745 | |
| CS225272B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721 | |
| WO2024127299A1 (en) | Production of a psychoactive alkaloid and compositions, and production of a fruiting body organism | |
| CN115316196B (zh) | 野生刺槐范氏孔菌的诱变、栽培方法、刺槐范氏孔菌及应用 | |
| RU2718254C1 (ru) | Способ культивирования каллусной культуры полыни обыкновенной (Artemisia vulgaris L.) | |
| Malinka | Saprophytic cultivation of Claviceps | |
| CZ2023105A3 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM9309 | |
| CS242138B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Pr.) TUL. CCM P-755 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20110801 |