CZ256598A3 - Inhibitory serinové proteázy a farmaceutický prostředek - Google Patents
Inhibitory serinové proteázy a farmaceutický prostředek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ256598A3 CZ256598A3 CZ982565A CZ256598A CZ256598A3 CZ 256598 A3 CZ256598 A3 CZ 256598A3 CZ 982565 A CZ982565 A CZ 982565A CZ 256598 A CZ256598 A CZ 256598A CZ 256598 A3 CZ256598 A3 CZ 256598A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- alkyl
- chr
- phe
- amino acid
- cha
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 5
- 239000003001 serine protease inhibitor Substances 0.000 title description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 55
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 5
- -1 phenyloxy Chemical group 0.000 claims description 104
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 56
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 24
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 23
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 17
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 16
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 16
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 13
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 11
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 11
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 10
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical group OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Chemical group OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 7
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- HXEACLLIILLPRG-YFKPBYRVSA-N L-pipecolic acid Chemical group [O-]C(=O)[C@@H]1CCCC[NH2+]1 HXEACLLIILLPRG-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- IADUEWIQBXOCDZ-UHFFFAOYSA-N azetidine-2-carboxylic acid Chemical group OC(=O)C1CCN1 IADUEWIQBXOCDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N l-pipecolic acid Chemical group OC(=O)[C@H]1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 5
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 claims description 5
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N thioproline Chemical group OC(=O)C1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229950001139 timonacic Drugs 0.000 claims description 5
- CQYBNXGHMBNGCG-UHFFFAOYSA-N 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahydro-1h-indol-1-ium-2-carboxylate Chemical group C1CCCC2NC(C(=O)O)CC21 CQYBNXGHMBNGCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydro-1h-pyrrol-1-ium-2-carboxylate Chemical group OC(=O)C1NCC=C1 OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- IMSODMZESSGVBE-UHFFFAOYSA-N 2-Oxazoline Chemical compound C1CN=CO1 IMSODMZESSGVBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Chemical group CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004473 Threonine Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 4
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims description 4
- CBDKQYKMCICBOF-UHFFFAOYSA-N thiazoline Chemical compound C1CN=CS1 CBDKQYKMCICBOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- 150000008575 L-amino acids Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001711 D-phenylalanine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 258
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 138
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 96
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 89
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 89
- 229960004198 guanidine Drugs 0.000 description 84
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 77
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 77
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- 229940093499 ethyl acetate Drugs 0.000 description 46
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 46
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 46
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 45
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 34
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 30
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 30
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 29
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 25
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 25
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 25
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 25
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 20
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 20
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 18
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 18
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 17
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 16
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 13
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid group Chemical group C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 9
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 8
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 8
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 8
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 8
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 5
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- QNNVPHNPWRBCKH-UHFFFAOYSA-N tert-butyl (ne)-n-[amino(methylsulfanyl)methylidene]carbamate Chemical compound CSC(=N)NC(=O)OC(C)(C)C QNNVPHNPWRBCKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YGSRAYJBEREVRB-VIFPVBQESA-N (2s)-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C YGSRAYJBEREVRB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 4
- BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N cyclopentanone Chemical compound O=C1CCCC1 BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 4
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MSZQAQJBXGTSHP-LLVKDONJSA-N (2r)-3-cyclohexyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1CCCCC1 MSZQAQJBXGTSHP-LLVKDONJSA-N 0.000 description 3
- LNOLJFCCYQZFBQ-BUHFOSPRSA-N (ne)-n-[(4-nitrophenyl)-phenylmethylidene]hydroxylamine Chemical compound C=1C=C([N+]([O-])=O)C=CC=1C(=N/O)/C1=CC=CC=C1 LNOLJFCCYQZFBQ-BUHFOSPRSA-N 0.000 description 3
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940122388 Thrombin inhibitor Drugs 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003868 thrombin inhibitor Substances 0.000 description 3
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- BZZXQZOBAUXLHZ-UHFFFAOYSA-N (c-methylsulfanylcarbonimidoyl)azanium;sulfate Chemical compound CSC(N)=N.CSC(N)=N.OS(O)(=O)=O BZZXQZOBAUXLHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VVWUWTAURHNLGY-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-decahydroisoquinolin-2-ium-1-carboxylate Chemical group C1CCCC2C(C(=O)O)NCCC21 VVWUWTAURHNLGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDPROXZBMHOBTQ-SJORKVTESA-N 2-[[(2r)-3-cyclohexyl-1-[(2s)-2-[3-(diaminomethylideneamino)propylcarbamoyl]piperidin-1-yl]-1-oxopropan-2-yl]amino]acetic acid Chemical compound NC(N)=NCCCNC(=O)[C@@H]1CCCCN1C(=O)[C@H](NCC(O)=O)CC1CCCCC1 CDPROXZBMHOBTQ-SJORKVTESA-N 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 2
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 2
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 2
- 101000712605 Theromyzon tessulatum Theromin Proteins 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CBHOOMGKXCMKIR-UHFFFAOYSA-N azane;methanol Chemical compound N.OC CBHOOMGKXCMKIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N benzyl (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)OCC1=CC=CC=C1 MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XGIUDIMNNMKGDE-UHFFFAOYSA-N bis(trimethylsilyl)azanide Chemical compound C[Si](C)(C)[N-][Si](C)(C)C XGIUDIMNNMKGDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 125000000640 cyclooctyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 2
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950003291 inogatran Drugs 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 2
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- LBPAFPLMTXOZGT-NSHDSACASA-N tert-butyl (4s)-5-[methoxy(methyl)amino]-4-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-oxopentanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(=O)N(C)OC)CCC(=O)OC(C)(C)C LBPAFPLMTXOZGT-NSHDSACASA-N 0.000 description 2
- BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-bromoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CBr BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- ZYJPUMXJBDHSIF-LLVKDONJSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZYJPUMXJBDHSIF-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- QNGGSVANUAULGK-DDWIOCJRSA-N (2r)-2-amino-3-cyclohexylpropanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@H](N)CC1CCCCC1 QNGGSVANUAULGK-DDWIOCJRSA-N 0.000 description 1
- ZQEBQGAAWMOMAI-ZETCQYMHSA-N (2s)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZQEBQGAAWMOMAI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- HBPFWIKVDHYDFG-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(cyclooctylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCCCC1 HBPFWIKVDHYDFG-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- SAUDSWFPPKSVMK-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-(n-phenylanilino)propanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1N([C@@H](C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 SAUDSWFPPKSVMK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- RWLSBXBFZHDHHX-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=C21 RWLSBXBFZHDHHX-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ZYJPUMXJBDHSIF-NSHDSACASA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZYJPUMXJBDHSIF-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-cyclohexylacetate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1CCCCC1 WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- NSENYWQRQUNUGD-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-decahydroisoquinolin-2-ium-3-carboxylate Chemical compound C1CCCC2CNC(C(=O)O)CC21 NSENYWQRQUNUGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTPGMNPPMMMOP-UHFFFAOYSA-N 1-azaniumyl-2,3-dihydroindene-1-carboxylate Chemical compound C1=CC=C2C(N)(C(O)=O)CCC2=C1 HTTPGMNPPMMMOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC(O)=O VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDULPPOISZOUTK-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3,4-dihydro-1h-naphthalene-2-carboxylate Chemical compound C1=CC=C2CC(N)(C(O)=O)CCC2=C1 CDULPPOISZOUTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXNZFHIEDZEUQM-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-1,3-thiazole Chemical compound BrC1=NC=CS1 RXNZFHIEDZEUQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- GEVGRLPYQJTKKS-UHFFFAOYSA-N 3-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 GEVGRLPYQJTKKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLYBFBAHAQEEQQ-UHFFFAOYSA-N 4-chlorobenzenesulfonyl chloride Chemical compound ClC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 ZLYBFBAHAQEEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQOAPMZPGOGRNE-UHFFFAOYSA-N 7-methoxynaphthalene-1-sulfonyl chloride Chemical compound C1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C2=CC(OC)=CC=C21 JQOAPMZPGOGRNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDQZEJBSPWDNRJ-YGFGXBMJSA-N C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)N1C([C@@H]2CCCC[C@@H]2CC1)C(=O)O Chemical compound C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)N1C([C@@H]2CCCC[C@@H]2CC1)C(=O)O KDQZEJBSPWDNRJ-YGFGXBMJSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N L-methionine sulfone Chemical compound CS(=O)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- DZLNHFMRPBPULJ-VKHMYHEASA-N L-thioproline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQJQICVXLJTWQD-UHFFFAOYSA-N N-Methylthiourea Chemical compound CNC(N)=S KQJQICVXLJTWQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CBQJSKKFNMDLON-SNVBAGLBSA-N N-acetyl-D-phenylalanine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 CBQJSKKFNMDLON-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102400000827 Saposin-D Human genes 0.000 description 1
- 229940122055 Serine protease inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710102218 Serine protease inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Chemical class 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000003289 ascorbyl group Chemical class [H]O[C@@]([H])(C([H])([H])O*)[C@@]1([H])OC(=O)C(O*)=C1O* 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- CSKNSYBAZOQPLR-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonyl chloride Chemical compound ClS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 CSKNSYBAZOQPLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001559 benzoic acids Chemical class 0.000 description 1
- NEDMOHHWRPHBAL-MERQFXBCSA-N benzyl (2s)-pyrrolidin-1-ium-2-carboxylate;chloride Chemical compound Cl.O=C([C@H]1NCCC1)OCC1=CC=CC=C1 NEDMOHHWRPHBAL-MERQFXBCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003739 carbamimidoyl group Chemical group C(N)(=N)* 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 150000001924 cycloalkanes Chemical class 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- ODCCJTMPMUFERV-UHFFFAOYSA-N ditert-butyl carbonate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(C)(C)C ODCCJTMPMUFERV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- FRYHCSODNHYDPU-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonyl chloride Chemical compound CCS(Cl)(=O)=O FRYHCSODNHYDPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000000350 glycoloyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000043 hydrogen iodide Inorganic materials 0.000 description 1
- COQRGFWWJBEXRC-UHFFFAOYSA-N hydron;methyl 2-aminoacetate;chloride Chemical compound Cl.COC(=O)CN COQRGFWWJBEXRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USZLCYNVCCDPLQ-UHFFFAOYSA-N hydron;n-methoxymethanamine;chloride Chemical compound Cl.CNOC USZLCYNVCCDPLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 125000003392 indanyl group Chemical group C1(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- SRJOCJYGOFTFLH-UHFFFAOYSA-N isonipecotic acid Chemical compound OC(=O)C1CCNCC1 SRJOCJYGOFTFLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- YLESODBCBYZUCT-SBSPUUFOSA-N methyl (2r)-2-amino-3-cyclohexylpropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@H](N)CC1CCCCC1 YLESODBCBYZUCT-SBSPUUFOSA-N 0.000 description 1
- NJPNWMZBNBROPE-ZDUSSCGKSA-N methyl (2s)-2-amino-3-naphthalen-2-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(=O)OC)=CC=C21 NJPNWMZBNBROPE-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- YDCHPLOFQATIDS-UHFFFAOYSA-N methyl 2-bromoacetate Chemical compound COC(=O)CBr YDCHPLOFQATIDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQSSATDQUYCRGS-UHFFFAOYSA-N methyl glycinate Chemical compound COC(=O)CN KQSSATDQUYCRGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N n-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Chemical compound C1=CC2CC1C1C2C(=O)N(O)C1=O ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 125000003544 oxime group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAHKWDDSKCRNFE-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl chloride Chemical compound ClS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 OAHKWDDSKCRNFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004368 propenyl group Chemical group C(=CC)* 0.000 description 1
- 125000002568 propynyl group Chemical group [*]C#CC([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 230000003331 prothrombotic effect Effects 0.000 description 1
- FNNIAKKPBXJGNJ-UHFFFAOYSA-N pyrazolidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1CCCN1 FNNIAKKPBXJGNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 125000005493 quinolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Chemical class 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 235000011044 succinic acid Nutrition 0.000 description 1
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical compound ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- XJJBXZIKXFOMLP-ZETCQYMHSA-N tert-butyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)[C@@H]1CCCN1 XJJBXZIKXFOMLP-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 125000001712 tetrahydronaphthyl group Chemical group C1(CCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004862 thiobutyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003766 thrombin (human) Drugs 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N triethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CC ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N urethane group Chemical group NC(=O)OCC JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
- C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Description
Inhibitory serinové proteázy a farmaceutický prostředek
Oblast techniky
Vynález se týká inhibitoru serinové proteázy s acylguanidinovým postranním řetězcem, farmaceutického prostředku obsahujícího uvedené inhibitory a použití uvedeného inhibitoru pro prevenci a léčení onemocnění spojených s trombinem.
Dosavadní stav techniky
Serinové proteázy jsou enzymy, které mimo jiné mají důležitou úlohu v kaskádě koagulace krve. Mezi tuto skupinu proteáz patří například trombin, trypsin, faktory Vila, IXa, Xa, Xla, XIla a protein C.
Trombin je serinová proteáza, která řídí poslední stupeň v koagulační kaskádě. Primární funkcí trombinu je štěpení fibrinogenu za vytvoření fibrinových monomerů, které vytvoří zesítěním nerozpustný gel. Navíc reguluje trombin svou vlastní produkci aktivací faktorů V a Vlil položených v kaskádě dříve. Má také důležitou úlohu na buněčné úrovni, kde působí na specifické receptory za vzniku agregace destiček, aktivace endotheliálních buněk a proliferace fibroblastů. Trombin má tedy centrální regulační úlohu při hemostáze
2o a vytváření trombu. Protože inhibitory trombinu mohou mít široké terapeutické použití, byl v této oblasti prováděn intenzívní výzkum.
Při vývoji syntetických inhibitorů serinových proteáz a zvláště trombinu stoupal zájem o malé syntetické peptidy, které jsou rozpoznávány proteolytickými enzymy podobným způsobem, jako se tak děje u přirozených substrátů. Výsledkem byla příprava nových peptidům podobných inhibitorů jako jsou inhibitory přechodného stavu trombinu a inhibitor trombinu s nízkou molekulovou hmotností Inogatran (Thromb. Haemostas. 1995, 73: 1325 (Abs. 1633); WO • ·
93/11152 (příklad 67), o kterém bylo zjištěno, že je silným a selektivním inhibitorem trombinu. Příbuzné sloučeniny se popisují ve WO 95/23609; v porovnání s Inogatranem a jeho analogy mají sloučeniny uváděné v této patentové přihlášce v agmatinu podobné skupině aromatickou skupinu.
Hledání účinnějších a selektivnějších inhibitorů serinové proteázy pokračuje dále s cílem získat inhibitory, které mohou být podávány v nízkých dávkách a které mají méně a méně významných vedlejších účinkú.
Podstata vynálezu
Nyní byla nalezena nová třída vysoce účinných inhibitorů serinové proteázy, které jsou zvláště selektivními inhibitory trombinu nebo Xa vzorce I
A-B-X-NZ-CH-Q (i) kde
A znamená H, popřípadě substituovaný D,L α-hydroxyacetyl, R1, R1-O-C(O)-, R1-C(O)-, R1-SO2-, R2OOC-(CHR2)m-SO2-, R2OOC(CHR2)m-, H2NC0-(CHR2)m-, nebo N-ochranná skupina, kde R1 je zvolena ze skupiny (1-12C)alkyi, (2-12C)alkenyl, (2-12C)alkinyl a (32s 8C)cykloalkyl, které mohou být popřípadě substituovány skupinami (38C)cykloalkyl, (1-6C)alkoxy, oxo, OH, COOH, CF3 nebo halogen, a ze skupiny (6-14C)aryl, (7-15C)aralkyl a (8-16)aralkenyl, kde arylové skupiny mohou být popřípadě substituovány skupinami (1 -6C)alkyl, (38C)cykloalkyl, (1-6C)alkoxy„ OH, COOH, CF3 nebo halogen; každá skupina R2 znamená nezávisle atom vodíku nebo má stejný význam jako R1; m znamená 1, 2 nebo 3;
B znamená vazbu, aminokyselinu vzorce -NH5 CH[(CH2)pC(0)0H]-C(0)- nebo její esterový derivát a p je 0, 1,2 nebo
3, -N((1-12C)alkyl)-CH2-CO-, -N((2-12C)alkenyl)-CH2-CO-, -N((212C)alkinyl)-CH2-CO-, -N(benzyl)-CH2-CO-, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo L- nebo D-aminokyseiinu s hydrofobním bázickým nebo neutrálním postranním řetězcem, která může být io popřípadě N-(1-6C)alkylsubstituována; nebo A a B znamenají spolu zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde R3 a R4 jsou nezávisle R1, R1-O-C(O)-, R1-C(O)-, R1-S02-, R2OOC-(CHR2)m-SO2-, R2OOC-(CHR2),„-, H2NCO(CHR2)m-, nebo N-ochrannou skupinu, nebo jedna ze skupin R3 a R4 je spojena se skupinou R5 za vytvoření 5- nebo 6-členného kruhu spolu is s N-C, na kterou jsou navázány, přičemž uvedený kruh může být fúzován s alifatickým nebo aromatickým 6-členným kruhem; a R5 znamená hydrofobní, bázický nebo neutrální postranní řetězec;
X znamená L-aminokyselinu s hydrofobním postranním řetězcem, serin, threonin, cyklickou aminokyselinu popřípadě
2o obsahující další heteroatom zvolený ze skupiny N, O nebo S, a popřípadě substituovaným skupinami (1-6C)alkyl, (1-6C)alkoxy, benzyloxy nebo oxo, nebo X znamená -NR2-CH2-C(O)- nebo fragment
nebo kde n znamená 2, 3, nebo 4, a W znamená CH nebo N;
• ·
Λ 4»··'··
Q znamená H nebo -C(O)Y, kde Y znamená H, -CHF2, -CF3, -CO-NH-(1-6C)alkylen-C6H5, -COOR6 a R6 je H nebo (1-6C)alkyl, -CONR7R8 a R7 a R8 jsou nezávisle H nebo (1 -6C)alkyl nebo R7 a R8 spolu znamenají (3-6C)alkylen, nebo Y znamená heterocykl zvolený ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, 2-benzothiazol, 2-oxazol, 2-oxazolin a 2-benzoxazol, kde uvedené heterocykly mohou být popřípadě substituovány skupinami (1 -6C)alkyl, (1-6C)alkoxy nebo oxo;
Z znamená H nebo (1 -6C)alkyl;
r znamená 0 nebo 1, jestliže Q znamená -C(O)Y nebo r znamená 0, 1, 2, 3 nebo 4, jestliže Q znamená H;
nebo jejich prekurzory nebo farmaceuticky přijatelné soli.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou použitelné pro léčení a prevenci trombinem podmíněných a s trombinem spojených onemocnění. Mezi tato onemocnění patří celá řada trombotických a protrombotických stavů, při kterých je aktivována koagulační kaskáda, které bez omezení zahrnují trombózu hlubokých žil, plicní embólii, tromboflebitidu, uzavření tepen trombózou nebo embólii, znovuuzavření tepen v průběhu nebo po angioplastice nebo trombolýze, restenózu po arteriárním poranění nebo invazívních kardiologických postupech, postoperativní trombózu žil nebo embólii, akutní nebo chronickou aterosklerózu, mrtvici, infarkt myokardu, rakovinu a metastázy a neurodegenerativní onemocnění. Sloučeniny podle vynálezu mohou být také použity jako antikoagulanty při použití mimotělního krevního oběhu, v případě nutnosti při dialýze a chirurgických zákrocích. Sloučeniny podle vynálezu mohou být také použity jako antikoagulanty in vitro.
Výhodné sloučeniny podle vynálezu mají vzorec I, kde X je Laminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem, serin, threonin nebo -NR2-CH2-C(O)-; a Z je H nebo methyl. Další výhodné sloučeniny vzorce I jsou takové, kde A je jak definováno výše; B je vazba, aminokyselina vzorce -NH-CH[(CH2)pC(O)OH]-C(O)- nebo její esterový
-·5*-
derivát a p je O, 1, 2 nebo 3, -N((1-6C)alkyl)-CH2-CO-,
-N((2-6C)alkenyl)-CH2-CO-, -N(benzyl)-CH2-CO-, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem, kde tato aminokyselina muže být popřípadě N5 (1-6C)alkyl substituována; nebo A a B znamenají spolu zbytek R3R4NCHRS-C(O)-; a X je cyklická aminokyselina obsahující popřípadě další heteroatom zvolený ze skupiny N, O nebo S, a popřípadě substituovaná skupinami (1-6C)alkyl, (1-6C)alkoxy, benzyloxy nebo oxo, nebo X znamená -NR2-CH2-C(O)- nebo fragment z (CH2)n\
-NH-CH^^N-CH2-C(0)0 nebo
-NH
N-CH2-C(0)15 a Z je H nebo methyl.
Výhodnější jsou sloučeniny vzorce I, kde A znamená H, 2hydroxy-3-cyklohexylpropionyl-, 9-hydroxyfluoren-9-karboxyl, R1, R1S02-, R2OOC-(CHR2)m-SO2-, R2OOC-(CHR2)m-, H2NCO-(CHR2)m-, nebo N-ochranná skupina, kde R1 je zvolena ze skupin (1 -12C)aikyl, oo (2-12C)alkenyl, (6-14C)aryl, (7-15C)aralkyl a (8-16)aralkenyl; každá skupina R2je nezávisle atom vodíku nebo má stejný význam jako R1; B je vazba, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo Daminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem, kde uvedená aminokyselina může být popřípadě N-(1-6C)alkyl substituovaná; nebo
A a B spolu tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(0)-; Y je -CO-NH(1-6C)alkylen-C6H5, -COOR6, -C0NR7R8, nebo Y je heterocykl zvolený ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, 2-benzothiazol, 2-oxazol, 2-oxazoiin a 2-benzoxazol.
Zvláště výhodné jsou sloučeniny, kde A je R1-SO2-, R200C30 (CHR2)m-; B je vazba, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq • · /8-:
nebo D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem; nebo A a B spolu tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je R2OOC-(CHR2)m- nebo R*-SO2- a další znamená nezávisle (1-12C)alkyl, (2-12C)alkenyl, (2-12C)alkinyl, (3-8C)cykloalkyl, (75 15C)aralkyl, R1-SO2- nebo R2OOC-(CHR2)m-, a R5 je hydrofobní postranní řetězec; Y je -CO-NH-(1-6C)alkylen-C6H5, -COOR® a R6 je H nebo (1-3C)alkyl, -CONR7R8, R7 a R8 znamenají nezávisle H nebo (1-3C)alkyl nebo R7 a R8 spolu tvoří (3-5C)alkylen, nebo Y je heterocykl zvolený ze skupiny 2-thiazol, 2-benzothiazol, 2-oxazol nebo io 2-benzoxazol.
Jestliže A je R2OOC-(CHR2)m-, je s výhodou B D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem; nebo A a B spolu tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je R200C(CHR2)m- a další znamená nezávisle (1 -12C)alkyl, (3-8C)cykloalkyl, ís R1-SO2- nebo R2OOC-(CHR2)m-; a X je 2-azetidinová karboxylová kyselina, prolin, kyselina pipekolová, kyselina 4thiazolidinkarboxylová, 3,4-dehydroprolin, kyselina 2oktahydroindolkarboxylová. Výhodnější jsou sloučeniny, kde A je HOOC-CH2-; B je D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-CI-D-Phe, p20 OMethyl-D-Phe, p-OEthyl-D-Phe, D-NIe, m-CI-D-Phe, 3,4-di-OMe-DPhe, D-Chg; nebo A a B spolu znamenají zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 znamená HOOC-CH2- a další je nezávisle methyl, (1-4C)alkyl-SO2- nebo HOOC-CH2- a R5 je (3-8C)cykloalkyl, (3-8C)cykloalkyl(1-4C)alkyl, fenyl, benzyl, popřípadě substituovaná atomem chloru nebo skupinou (1-4C)alkoxy.
Jestliže A je R1-SO2-, je s výhodou B vazba, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem; nebo A a B znamenají spolu zbytek R3R4NCHR5-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je R1-SO2- a další je nezávisle (1 -12C)alkyl nebo R1-SO2-; X je kyselina 2azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, kyselina 4• · • · • · · · · ·
thiazolidinkarboxylová, 3,4-dehydroprolin, kyselina 2oktahydroindolkarboxylová, nebo fragment z(CH2)n
-NH-CH^^N-CH2-C(O)o nebo
N-CH2-C(O)Výhodnější jsou sloučeniny, kde A je ethyl-SO2- nebo benzylSO2-; B je vazba, D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-CI-D-Phe, p10 OMethyi-D-Phe, p-OEthyl-D-Phe, D-NIe, m-CI-D-Phe, 3,4-di-OMe-DPhe, D-Chg; nebo A a B znamenají spolu zbytek R3R4N-CHRS-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je ethyl-SO2- nebo benzyl-SO2- a další je nezávisle (1 -12C)alkyl nebo R1-SO2- a R5 je (3-8C)cykloalkyl, (3-8C)cykloalkyl(1-4C)alkyl, fenyl, benzyl, difenylmethinyl, kde tyto skupiny jsou popřípadě substituovány atomem chloru nebo skupinou (1-4C)alkoxy.
Nejvýhodnější sloučeniny vzorce I jsou sloučeniny, kde Q znamená H a r je 0, 1 nebo 2.
N-ochranná skupina jak je definována v definici skupiny A je jakákoliv N-ochranná skupina používaná v chemii peptidu. Vhodné Nochranné skupiny je možno nalézt v T.W. Green a P. G. M. Wuts: Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání (Wiley, NY, 1991) a v The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, díl 3. E. Gross a J. Meienhofer, Eds, (Academie Press, New York, 1981 ).
Termín popřípadě substituovaný D,L α-hydroxyacetyl znamená skupinu vzorce HO-CRaRb-C(O)-, kde Ra a Rb jsou nezávisle H, hydrofobní postranní řetězec, nebo Ra a Rb spolu tvoří 5- nebo 6členný kruh, který je popřípadě fúzován s jedním nebo dvěma alifatickými nebo aromatickými 6-člennými kruhy, a kde uvedené 5nebo 6-členné kruhy se skládají z atomů uhlíku a popřípadě jednoho heteroatomů zvoleného ze skupiny N, O a S. Výhodné D,L ahydroxyacetylové skupiny jsou 2-hydroxy-3-cyklohexyl-propionyl- a 9hydroxy-fluoren-9-karboxyl.
Termín (1-12C)alkyl znamená rozvětvenou nebo přímou alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, jako je methyl, ethyl, t-butyl, izopentyl, heptyl, dodecyl, apod. Výhodné alkylové skupiny jsou (1-6C)alkylové skupiny s 1 - 6 atomy uhlíku. Nejvýhodnější v definici R6, R7 a R8 jsou (1-3C)alkylové skupiny s 1 - 3 atomy uhlíku, jako je ío methyl, ethyl, izopropyl. (2-12C)alkenylová skupina je přímá nebo větvená nenasycená uhlovodíková skupina s 2 až 12 atomy uhlíku. Výhodné jsou (2-6C)alkenylové skupiny. Příklady jsou ethenyl, propenyl, allyl, apod.
Termín (1-6C)alkylen znamená větvenou nebo nevětvenou alkylenovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jako je -(CH2)m- a m je od 1 do 6, -CH(CH3)-, -CH(CH3)-(CH2)-, atd. Výhodné alkylenové skupiny v definici skupiny Y jsou ethylen a methylen.
(2-12C)alkinylová skupina je rozvětvená nebo nerozvětvená uhlovodíková skupina obsahující trojnou vazbu, která má 2 až 12
2o atomů uhlíku. Výhodné jsou (2-6C)alkinylové skupiny, jako ethinyl a propinyl.
(6-14C)arylová skupina je atomatická skupina s 6 až 14 atomy uhlíku. Arylová skupina může dále obsahovat jeden nebo více heteroatomů, jako je N, S, nebo O. Příklady arylových skupin jsou fenyl, nafthyl, (izo)chinolyl, indanyl, apod. Nejvýhodnější je fenylová skupina.
Skupiny (7-15C)aralkyl a (8-16C)aralkenyl jsou alkylové a alkenylové skupiny, substituované jednou nebo více arylovými skupinami, kde celkový počet atomů uhlíku je 7 až 15, popřípadě 8
3o až 16.
Termín (1-6C)alkoxy znamená alkoxylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jejíž alkylová skupina má výše definovaný význam.
Termín (3-8C)cykloalkyl znamená cykloalkylovou skupinu s 3 až 8 atomy uhlíku, jako cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl nebo cyklooktyl. Cyklopentyl a cyklohexyl jsou výhodné cykloalkylové skupiny.
Termín halogen znamená fluor, chlor, brom nebo jod.
Termín esterové deriváty znamená jakékoliv vhodné esterové deriváty, s výhodou (1-4C)alkylestery, jako jsou methyl-, ethyl- nebo tio butylestery.
Termíny 1- a 3-Tiq znamenají 1,2,3,4-tetrahydroizochinolin-1nebo -3-karboxylovou kyselinu; 1- a 3-Piq jsou 1- popřípadě 3karboxyperhydroizochinolin; Atc je kyselina 2-aminotetralin-2karboxylová; Aic je kyselina aminoindankarboxylová; Phe je fenylalanin; Cha je cyklohexylalanin; Dpa je difenylalanin; Coa je cyklooktylalanin; Chg je cyklohexylglycin; Nle je norleucin.
Termín hydrofobní postranní řetězec znamená (1 -12C)alkyl, popřípadě substituovaný jednou nebo více (3-8C)cykloalkylovými skupinami nebo (6-14C)arylovými skupinami (které mohou obsahovat
2o heteroatom, např. atom dusíku) jako je cyklohexyl, cyklooktyl, fenyl, pyridinyl, nafthyl, tetrahydronafthyl, apod., kde hydrofobní postranní řetězec může být popřípadě substituován substituenty jako je halogen, trifluormethyl, nižší alkyl (např. methyl nebo ethyl), nižší alkoxy (např. methoxy), fenyloxy, benzyloxy, apod.
Termín substituovaný znamená substituovaný jedním nebo více substituenty.
Aminokyseliny s bázickým postranním řetězcem jsou například bez omezení arginin a lyzin, s výhodou arginin. Termín aminokyseliny s neutrálním postranním řetězcem označuje aminokyseliny jako je methioninsulfon apod.
• · . · · »· · · · · · · • ··· · · · · · ··
•.Λ * * · · · · ··· · · • ifl - . ... ...
• «· i . · ... ·· ·· ··
Cyklické aminové kyseliny jsou například kyselina 2azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, 1-amino-1-karboxy(3-8C)cykloalkan (s výhodou 4C, 5C nebo 6C), kyselina 4piperidinkarboxylová, kyselina 4-thiazolidinkarboxylová, 3,4-dehydro5 prolin, azaprolin, kyselina 2-oktahydroindolkarboxylová apod. Výhodné jsou kyselina 2-azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, kyselina 4-thiazolidinkarboxylová, 3,4-dehydroprolin a kyselina 2-oktahydroindolkarboxylová
Termín prekurzor znamená sloučeninu, ve které je chráněná io amidinová skupina vzorce I, např. skupinou (16C)alkoxykarbonylovou.
Vynález dále zahrnuje způsob výroby sloučeniny vzorce I včetně navázání vhodně chráněných aminokyselin nebo analogů aminokyselin následovaného odstraněním ochranných skupin.
Sloučeniny vzorce I mohou být vyrobeny způsobem běžným pro tyto sloučeniny.
Vhodně Na chráněné (pokud je přítomen reaktivní postranní řetězec, je chráněný také) deriváty aminokyselin nebo peptidy se aktivují a vážou na deriváty aminokyseliny nebo peptidu s vhodně chráněným karboxylem buď v roztoku nebo na pevném nosiči. Chránění α-aminových skupin obvykle probíhá uretanovými funkčními skupinami, jako je v přítomnosti kyselin labilní terc.butyloxykarbonylová skupina (Boc), benzyloxykarbonylová skupina (Z) a substituované analogy v přítomností bází labilní 9-fluorenyl25 methyloxykarbonylové skupiny (Fmoc). Skupina Z může být také odstraněna katalytickou hydrogenací. Další vhodné skupiny chránící aminoskupiny jsou Nps, Bmv, Bpoc, Msc, atd. Dobrý přehled ochranných skupin aminokyselin se uvádí v publikaci The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, díl 3 E. Gross a J. Meienhofer, Eds,
3o (Academie Press, New York, 1981 ). Ochrana karboxylových skupin může probíhat tvorbou esteru např. esterů labilních v přítomností bází • · jako jsou methyl- nebo ethylestery, esterů labilních v přítomnosti kyselin jako terc.-butylestery, nebo hydrogenolyticky labilní estery jako jsou benzylestery. Ochrany funkčních skupin lyzinu vedlejších řetězců je možno dosáhnout použitím výše uvedených skupin.
Aktivace karboxylové skupiny vhodně chráněných aminokyselin nebo peptidů může být provedena azidem, směsným anhydridem, aktivním esterem nebo karbodiimidovou metodou, zvláště s přídavkem katalytických a racemizaci potlačujících sloučenin jako je 1hydroxybenzotriazol, N-hydroxysukcinimid, 3-hydroxy-4-oxo-3,4io dihydrol ,2,3-benzotriazin, N-hydroxy-5-norbornen-2,3-dikarboximid. Viz např. The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology (viz výše) a Pure and Applied Chem. 59(3), 331-344 (1987). Acylguanidinová skupina může být navázána na C-konec vhodně Να-chráněného derivátu aminokyselin nebo peptidů vazebnými metodami jak je popsáno výše.
Vhodnou metodou pro výrobu sloučenin podle vynálezu, kde Q je -C(O)Y, chráněná kyselina glutamová (Glu) se naváže na skupinu Y, odstraní se ochranná skupina a na N-konec se naváže část A-B-Xza vytvoření sloučeniny vzorce A-B-X-Glu-Y. V odděleném postupu se připraví chráněná S-methylizourea, která se převede na chráněný guanidin. Chráněný guanidin se naváže na skupinu A-B-X-Glu-Y a po odstranění ochranné skupiny se získá sloučenina vzorce I.
Sloučeniny podle vynálezu, které mohou být ve formě volné báze, mohou být z reakční směsi izolovány ve formě farmaceuticky přijatelné soli. Farmaceuticky přijatelné soli mohou být také získány působením organické nebo anorganické kyseliny jako je chlorovodík, bromovodík, jodovodík, kyselina sírová, fosforečná, octová, propionová, glykolová, maleinová, malonová, methansulfonová, fumarová, jantarová, vinná, citrónová, benzoová a askorbová na volnou bázi vzorce I.
3o Sloučeniny podle vynálezu mohou mít jeden nebo více chirálních atomu uhlíku a mohou být proto získány ve formě čistého ·· ·· · ·· ·· ··
enantiomeru nebo jako směs enantiomerů nebo jako směs obsahující diastereomery. Způsoby získávání čistých enantiomerů jsou v oboru dobře známé, například krystalizace solí získaných z opticky aktivních kyselin a racemické směsi nebo chromatografie s použitím chirálních kolon. Pro diastereomery je možno použít kolony s přímou nebo reverzní fází.
Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat enterálně nebo parenterálně, u člověka s výhodou v denní dávce 0,001-100 mg na kg tělesné hmotnosti, s výhodou 0,01-10 mg na kg tělesné hmotnosti. Ve io směsi s farmaceuticky vhodnými pomocnými látkami, například jak se popisují ve standardní referenční publikaci Gennaro a další, Remingtonů Pharmaceutical Sciences, (18th ed, Mack Publishing Company, 1990, viz např. část 8: Pharmaceuticat Preparations a Their Manufacture) mohou být sloučeniny lisovány do pevných dávkovačích jednotek, jako jsou pilulky a tablety, nebo mohou být zpracovány do kapslí nebo čípků. Pomocí farmaceuticky vhodných kapalin mohou být sloučeniny použity také ve formě roztoku, suspenze, emulze, např. pro použití jako injekční preparát, nebo jako sprej např. pro použití jako nosní sprej.
2o Pro výrobu dávkovačích jednotek např. tablet se předpokládá použití běžných aditivních látek jako jsou plniva, barviva, polymerní pojivá apod. Obecně je možno použít jakékoliv farmaceutické aditivní látky, která neinterferuje s funkcí aktivních sloučenin.
Vhodné nosiče, se kterými mohou být sloučeniny podávány, zahrnují laktózu, škrob, deriváty celulózy apod. nebo jejich směsi použité ve vhodných množstvích.
Vynález je dále ilustrován následujícími příklady.
• · ·- 33 A
Příklady provedení vynálezu
Termín -Glu(guanidin) znamená
-NH-CH-C(O)Bzl = benzyl; Boc = terc.-butyloxykarbonyl; Cbz = benzyloxykarbonyl; Ac = acetyl; PAc = fenylacetyi; Glu = kyselina glutamová; Cha = cyklohexylalanin; Pro = prolin; Phe = fenylanlanin; 1-Piq = 1-karboxyperhydroizochinolin; Nal = 2-naftylalanin; Asp = kyselina asparagová.
Pokud není uvedeno jinak, retenční časy (Rt(LC)) byly určovány kapalnou chromatografii s reverzní fází na koloně Supeicosii LC-1815 DB (2,1 mm x 25 cm).
PŘÍKLAD 1
HQOC-CH? -D-Cha-fN-ckHopentyQ-Gly-S-Ala-quanidin (a) N-fterc.-butyloxvkarbonvP-S-methylizothiourea
S-methylizothiourea semisulfát (10 g) byla suspendována v dichlormethanu (100 ml). K suspenzi byl za míchání přidán roztok 4N hydroxidu sodného (10 ml). Reakční směs byla vložena do ledové lázně, po kapkách byl přidán di-terc-butyl dikarbonát (15,7 g) v dichlormethanu (100 ml) spolu s 2N roztokem hydroxidu sodného pro udržení pH v okolí 11. Po skončení přidávání byla reakční směs míchána přes noc při pokojové teplotě. Vrstva dichlormethanu byla oddělena, a vodná vrstva byla extrahována dichlormethanem. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou a sušeny nad síranem sodným,
V 00 • 0 0
• 0
00 0 0 0 0
0 00
000 0 0
0 0
0 0« zfiltrovány a odpařeny ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: heptan/ethylacetát = 4/1 obj. %) za získání N-(terc-butyloxykarbonyl)-S-methylizothiourey (9,38 g).
TLC: Rf = 0,75, silikagel, ethylacetát/heptan = 3/1 obj. % (b) N-(benzyloxvkarbonvl)-N'-(terc-butyloxvkarbonvl)-Smethylizothiourea
N-(terc-butyloxykarbonyl)-S-methylizothiourea (2 g) byla rozpuštěna v dichlormethanu (20 ml). K roztoku byl za míchání přidán io roztok 4N hydroxidu sodného (2 ml). Reakční směs byla vložena do ledové lázně; po kapkách byl přidáván N-(benzyloxy-karbonyloxy)sukcinimid (2,62 g) v dichlormethanu (20 ml) spolu s 2N hydroxidem sodným pro udržení pH v okolí 11. Když bylo přidávání ukončeno, reakční směs byla míchána přes noc při pokojové teplotě. Vrstva dichlormethanu byla oddělena a vodná vrstva byla dvakrát promyta dichlormethanem. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou, sušeny nad síranem sodným, zfiltrovány a odpařeny ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: heptan/ethylacetát = 3/2 obj. %) za získání N-(benzyloxykarbonyl)-N'2o (terc-butyloxykarbonyl)-S-methylizothiourey (3,15 g).
TLC: Rf = 0,78, silikagel, ethylacetát/heptan =1/1 obj. % (c) N-(Cbz)-N,-(t-Boc)-guanidin
N-(benzyloxykarbonyl)-N'-(terc-butyloxykarbonyl)-S25 methylizothiourea (3,15 g) byla rozpuštěna v methanolovém roztoku amoniaku (2,4M, 50 ml). Reakční směs byla míchána přes noc při pokojové teplotě. Směs byla odpařena ve vakuu a zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/methanol 95/5 obj. %) za získání N-(Cbz)-N'-(t-Boc)-guanidinu (1,83 g).
TLC: Rf = 0,80, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(d) N-(t-Boc)-guanidinhvdrochlorid % paladium na aktivním uhlí (250 mg) a 3,12 ml 2N roztoku chlorovodíku bylo přidáno k roztoku N-(Cbz)-N'-(t-Boc)-guanidinu (1,8 g) v methanolu (50 ml). Směs byla hydrogenována při atmosférickém tlaku při pokojové teplotě 1 h. Paladiový katalyzátor byl odstraněn filtrací a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku za získání N-(t-Boc)-guanidinhydrochloridu s kvantitativním výtěžkem.
io TLC: Rf = 0,10, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(e) Cbz-3-Ala-(N-t-Boc)-guanidin
Cbz-p-Ala-OH (171 mg) byl rozpuštěn v suchém dimethylformamidu (5 ml). Po přidání triethylaminu (212 μΙ), byla reakční směs umístěna pod dusíkem a ochlazena na -15 °C. Potom byl přidán izobutylchlorformát (99 μΙ) a směs byla ponechána míchat při - 15 °C 15 min. K ochlazené směsi byly přidány N-(t-Boc)guanidinhydrochlorid (150 mg) a triethylamin (106 μΙ). Reakční směs byla míchána 1 h při -15 °C a udržována při pokojové teplotě 45 min.
Triethylaminhydrochlorid byl odfiltrován afiltrát byl odpařen do sucha. Zbytek byl čištěn chromatografii na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/methanol = 95/5 obj. %) za získání Cbz-3-Ala-(N-t-Boc)guanidinu (256 mg).
TLC: Rf = 0,50, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(f) H-B-Ala-(N-t-Boc)-guanidinhydrochlorid % paladium na aktivním uhlí (100 mg) a 300 μΙ 4M roztoku chlorovodíkáu bylo přidáno k roztoku Cbz-p-Ala-(N-t-Boc)-guanidinu (220 mg) v dimethylformamidu (5 ml). Směs byla hydrogenována za • ·
atmosférického tlaku při pokojové teplotě 1 h. Paladiový katalyzátor byl odstraněn filtrací a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku za získání H-3-Ala-(N-t-Boc)-guanidinhydrochloridu s kvantitativním výtěžkem.
TLC: Rf = 0,10, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(g) N-cyklopentyl-Glv-OMe
Cyklopentanon (15,6 g) byl přidán k roztoku H-Gly-OMe.HCI (23,2 g) v 200 ml methanolu. Směs byla míchána 15 min a byl přidán io kyanoborohydrid sodný (7 g). pH bylo nastaveno na 6. Reakční směs byla míchána 16 hod při pokojové teplotě. Pro ukončení reakce byl přidán cyklopentanon (1 g) a míchání pokračovalo.
Reakce byla monitorována na TLC. Když byl spotřebován veškerý výchozí materiál, směs byla okyselena na pH 2 a míchána is 30 min. Rozpouštědlo bylo odstraněno a zbytek byl zředěn vodou. Roztok byl promyt etherem, pH nastaveno na 12 6N roztokem hydroxidu sodného a směs byla extrahována dichlormethanem. Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem chloridu sodného, sušeny na síranu sodném a odpařeny ve vakuu za získání
16 g oleje.
Rf = 0,46 ve směsi ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 63/20/6/11 (obj.) na oxidu křemičitém.
(h) N-(t-butvloxykarbonvlmethvl)-D-Cha-OMe t-butyl-bromacetát (17 g) byl přidán k míchanému roztoku H-DCha-OMe.HCI (26 g) v 300 ml acetonitrilu. pH směsi bylo nastaneno na 8,5 diizopropylethylaminem. Směs byla míchána 16 hod při pokojové teplotě a odpařena ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu a roztok byl promyt vodou, sušen na síranu sodném • · • · • · • ·
a odpařen ve vakuu. Chromatografie na silikagelu ve směsi hexan/ethylacetát 9/1 (obj.) poskytla 20 g N-(tbutyloxykarbonylmethyl)-D-Cha-OMe.
Rf = 0,46 ve směsi ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda
15,75/5/1,5/2,75 (obj.) na oxidu křemičitém.
(i) N-(t-butvloxvkarbonvlmethvl)-N-Boc-D-Cha-OMe pH roztoku N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-D-Cha-OMe (20 g) a di-t-butyldikarbonátu (17 g) bylo nastaveno na 8,5 io diizopropylethylaminem. Směs byla míchána 16 hod při pokojové teplotě. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Ke zbytku byl přidán dichlormethan a voda. Organická vrstva byla oddělena, promyta chladným 1N chlorovodíkem, vodou, 5 % roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Organická vrstva byla sušena na síranu sodném a filtrát byl odpařen na amorfní pevnou látku N-(tbutyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-OMe s výtěžkem 28 g.
Rf = 0,60 ve směsi ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 252/20/6/11 (obj.) na oxidu křemičitém.
(j) N-(t-butvloxvkarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-QH
Roztok N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-OMe (28 g) v 420 ml směsi dioxan:voda 9/1 (obj.) byl smísen s dostatečným množstvím 1N hydroxidu sodného pro udržení pH na hodnotě 13 90 min při pokojové teplotě. Po okyselení byla směs vlita do vody a byla extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta vodou a sušena na síranu sodném. Filtrát byl odpařen za získání 24 g N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-OH.
Rf = 0,23 ve směsi dichlormethan/methanol 9/1 (obj) na silikagelu.
(k) N-(t-butyloxvkarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-(N-cyklopentyl)-GlyQMe
N-cyklopentyl-Gly-OMe (10,2 g) a 2-(1H-benztriazol-1-yl)1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborát (TBTU; 21,2 g) byly přidány k roztoku N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-OH (24 g) v 300 ml Ν,Ν-dimethylformamidu. pH směsi bylo nastaveno na 8,5. Směs byla míchána přes noc při pokojové teplotě a byla zakoncentrována odpařením. Ke zbytku byla přidána voda a ethylacetát. Organická vrstva byla oddělena 1N chlorovodíkem, io vodou, 5 % hydrogenuhiičitanem sodným, byla sušena nad síranem sodným. Filtrát byl odpařen a azbytek byl chromatografován na silikagelu ve směsi hexan/ethylacetát 8/2 (obj.) jako eluentu. Frakce obsahující N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-(N-cyklopentyl)Gly-OMe byly spojeny a odpařeny s výtěžkem 17 g.
Rf = 0,57 ve směsi hexan/ethylacetát 7/3 (obj.) na oxidu křemičitém.
(l) N-(t-butvloxvkarbonvimethvl)-N-Boc-D-Cha-(N-cvklopentyl)-Gly-OH
N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-(N-cyklopentyl)-GlyOMe (17 g) byl saponifikován ve směsi dioxan/voda 1/1 (obj., 150 ml)
2o a zředěného hydroxidu sodného za získání 15 g amorfní pevné látky. Chromatografie na silikagelu ve směsi dichlormethan/methanol 95/5 (obj.) jako eluent poskytla 13 g N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-DCha-(N-cyklopentyl)-GlyOH.
Rf = 0,30 ve směsi dichlormethan/methanol 9/1 (obj.) na oxidu křemičitém.
1$-: :
• · · · · · ·· · · • * • · 4 (m) N-(t-butvloxvkarbonylmethvl)-N-Boc-D-Cha-(N-cvklopentvl)-Glv-BAla-(N-t-Boc)-guanidin
N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-(N-cyklopentyl)-GlyOH (310 mg) byl rozpuštěn v suchém dimethylformamidu (10 ml). Po přídavku triethylaminu (168 μΙ) byla reakční směs umístěna pod dusík a ochlazena na -15 °C. Potom byl přidán izobutylchlorformát (79 μΙ) a směs byla ponechána míchat 15 min při -15 °C. H-3-Ala-(N-t-Boc)guanidinhydrochlorid (154 mg) byl rozpuštěn v suchém dimethylformamidu (5 ml) a po kapkách byl přidáván ke chladnému ío roztoku anhydridu při ddržování pH na 8,5 přídavkem triethylaminu. Reakční směs byla míchána 1 hod při -15 °C a potom 1 hod při 0 °C. Reakční směs byla odpařena dosucha. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a potom promyt vodou, roztokem soli, sušen nad síranem sodným a koncentrován ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografii na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/methanol = 95/5 obj. %) za získání N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-(Ncyklopentyl)-Gly-3-Ala-(N-t-Boc)-guanidinu (268 mg).
TLC: Rf = 0,80, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(n) HOOC-CH?-D-Cha-(N-cvklopentyl)-Glv-6-Ala-guanidin
N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-(N-cyklopentyl)-Gly3-Ala-(N-t-Boc)-guanidin (265 mg) byl smísen s 90 % roztokem kyseliny trifluoroctové/voda (10 ml) a ponechán 2 hod a při pokojové teplotě. Reakční směs byla koncentrována ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn ve vodě a přímo nanesen na preparativní kolonu HLPC Supelcosil LC-18-DB s použitím gradientního systému eluce 20%A/80%B až 20%A/20%B/60%C v průběhu 40 min při průtoku 15 ml/min. (A: 0,5M fosfátový pufr pH=2,1, B: voda, C: acetonitril/voda = 6/4). Výtěžek: 185 mg HOOC-CH2-D-Cha-(N-cyklopentyl)-Gly-p-Ala3o guanidin.
Rf (LC): 32,22 min 20%A/80%B až 20%A/20%B/60%C v průběhu 40 min.
PŘÍKLAD 2
HOQC-CH7-D-Cha-Pro-Glu-(guanidin)-(2-thiazolyl) (a) H-D-Cha-OMe.HCI
Ke chladnému (-20 °C) a suchému methanolu (195 ml) byl po kapkách přidáván thionylchlorid (28 ml). Byl přidán H-D-Cha-OH.HCI (40 g) a reakční směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 5 hod. ío Směs byla koncentrována ve vakuu a odpařena spolu s methanolem (3 x). Zbytek byl krystalizován ze směsi methanol/diethylether za získání H-D-Cha-OMe.HCI jako krystalického prášku (40,9 g).
TLC: Rf = 0,66, silikagel, n-butanol/kyselina octová/voda = 10/1/3 obj. %.
(b) N-(t-butyloxvkarbonvlmethyl)-D-Cha-OMe t-butylbromoacetát (36 g) byl přidán k míchanému roztoku H-DCha-OMe.HCI (40,9 g) v 400 ml acetonitrilu. pH směsi bylo nastaveno na 8,5 diizopropylethylaminem. Směs byla míchána 16 hod při pokojové teplotě a a odpařena ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu a roztok byl promyt vodou, sušen na síranu sodném a odpařen ve vakuu. Chromatografie na silikagelu ve směsi heptan/ethylacetát 9/1 (obj.) poskytla 64 g N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-D-Cha-OMe.
TLC: Rf= 0,25, silikagel, ethylacetát/heptan = 1/1 obj. %.
• a • a aaa a a a a a a (c) N-ft-butyloxykarbonvImethyO-N-Boc-D-Cha-OMe pH roztoku N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-D-Cha-OMe (64 g) a di-t-butyldikarbonátu (40,3 g) bylo nastaveno na 8,5 diizopropylethylaminem. Směs byla míchána 16 hod při pokojové teplotě. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Dichlormethan a voda byly přidány ke zbytku. Organická vrstva byla oddělena, promyta chladným 1N chlorovodíkem, vodou, 5 % roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Organická vrstva byla sušena na síranu sodném a filtrát byl odpařen na amorfní pevnou látku N-(tio butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-OMe s výtěžkem 59,6 g.
TLC: Rf = 0,50, silikagel, ethylacetát/heptan = 1/1 obj. %.
(d) N-(t-butyloxykarbonvlmethvl)-N-Boc-D-Cha-QH
Roztok N-(t-butyloxykarbonylmethyi)-N-Boc-D-Cha-OMe (59,6 g) v 900 ml směsi dioxan/voda = 9/1 (obj.) byl smísen s dostatečným množstvím hydroxidu sodného pro udržení pH na 12 6 hod při pokojové teplotě. Po okyselení byla směs vlita do vody a byla extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta vodou a sušena na síranu sodném. Filtrát byl odpařen za získání 54 g N-(t20 butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-OH.
TLC: Rf = 0,60. silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(e) N-(t-butvloxvkarbonylmethvl)-N-Boc-D-Cha-Pro-QBzl
K chladnému (0 °C) roztoku N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N25 Boc-D-Cha-OH (13,5 g) v Ν,Ν-dimethylformamidu (150 ml) byl postupně přidán 1-hydroxybenztriazol (7,09 g), dicyklohexylkarbodiimid (7,61 g), H-Pro-OBzl.HCI (9,31 g) a triethylamin (6 ml). Směs byla míchána 1 hod při 0 °C a při pokojové teplotě udržována přes noc. Směs byla ochlazena na - 20 °C • ·
a dicyklohexylurea byla odstraněna filtrací. Filtrát byl odpařen dosucha. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a postupně promyt 5 % hydrogenuhličitanem sodným, vodou, 3 % kyselinou citrónovou a roztokem soli, sušen nad síranem sodným a koncentrován ve vakuu.
Zbytek byl chromatografován na silikagelu ve směsi heptan/ethylacetát = 3/1 (obj.) jako eluentu. Frakce obsahující N-(tbutyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OBzl byly spojeny a odpařeny. Výtěžek: 15 g.
TLC: Rf = 0,70, siiikagel, heptan/ethylacetát = 1/1 obj. %.
(f) N-(t-butvloxykarbonylmethvD-N-Boc-D-Cha-Pro-OH % paladium na uhlí (750 mg) bylo přidáno k roztoku N-(tbutyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OBzl (15 g) v methanolu (150 ml). Směs byla hydrogenována za atmosférického tlaku při pokojové teplotě 1 hod. Paladiový katalyzátor byl odstraněn filtrací a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku za získání 11,2 g N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH.
TLC: Rf = 0,65, siiikagel, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda = 213/20/6/11 obj. %.
(g) Boc-Glu-(OtBu)-NMeOMe
K roztoku Boc-Glu(OtBu)-OH (15 g) v dichlormethanu (150 ml) byl přidán N,O-dimethylhydroxylaminhydrochlorid (5,3 g) a [2-(1 Hbenztriazol-1 -yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborát) (15,87 g) a pH bylo nastaveno na pH 8-8,5 přídavkem triethylaminu. Reakční směs byla míchána 16 h při pokojové teplotě. Směs byla postupně promyta chladným 0,3M roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5 % vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Organická vrstva byla sušena nad síranem sodným, zfiltrována a odpařena. Zbytek byl čištěn chromatografii na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/methanol = 98/2 obj. %) za získání BocGlu(OtBu)-NMeOMe (17,5 g).
TLC: Rf= 0,85, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(h) Boc-Glu(OtBu)-(2-thiazolvl)
K chladnému (- 78 °C), míchanému roztoku n-butyllithia (88,9 mmol) v diethyletheru (90,7 ml), byl po kapkách přidán roztok 2bromothiazolu (14,6 g) v diethyletheru (75 ml). Po míchání roztoku při - 78 °C po dobu 30 min byl roztok po kapkách přidáván k roztoku Bocio Glu(OtBu)-NMeOMe (14 g) v suchém tetrahydrofuranu (150 ml). Směs byla míchána při - 78 °C 1 ha potom byla vlita do ledového 5 % roztoku kyseliny citrónové ve vodě. Směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu a vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou, nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, sušeny nad síranem sodným, zfiltrovány a odpařeny. Zbytek byl čištěn chromatografii na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/ethyiacetát = 9/1 obj. %) za získání Boc-Glu(OtBu)-(2-thiazolylu) (6,83 g).
TLC: Rf = 0,92, silikagel, dichlormethan/ethyiacetát = 7/3 obj. %.
(i) H-Glu-(2-thiazolyl).TFA
Boc-Glu(OtBu)-(2-thiazolyl) (450 mg) byl rozpuštěn v 3 ml kyseliny trifluoroctové (TFA), 1 ml dichlormethanu a 150 μΙ anisolu a míchán 1 h při pokojové teplotě. Surový amin byl izolován jako žlutý olej v kvantitativním výtěžku po odstranění rozpouštědla odpařením a použit ihned pro výrobu N-Boc-N-(terc-butyloxykarbonylmethyl)-DCha-Pro-Glu-(2-thiazolylu).
TLC: Rf = 0,10, silikagel, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda = 63/20/6/11 obj. %.
• · • ·
-2Á (i) N-(t-butvloxvkarbonvlmethyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-Glu-(2-thiazolyl)
N-Boc-N-(terc-butyloxykarbonylmethyl)-D-Cha-Pro-OH (590 mg) byl rozpuštěn v suchém dimethylformamidu (15 ml). Po přidání diizopropylethylaminu (416 μΙ) byla reakční směs umístěna pod dusík a chlazena na - 15 °C. Izobutylchlorformát (158 μΙ) byl přidán a směs byla ponechána míchat 15 min při -15 °C. H-Glu-(2-thiazolyl).TFA (300 mg) byla rozpuštěna v suchém dimethylformamidu (10 ml) a po kapkách přidána k roztoku míchaného anhydridu při udržovánípH na io 8,5 přídavkem diizopropylethylaminu. Reakční směs byla míchána 30 min při - 15 °C. Zbytek byl rozpuštěn po odpaření dosucha v ethylacetátu a postupně promyt vodou, 5 % vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, roztokem soli, byl sušen nad síranem sodným a zakoncentrován ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/methanol = 95/5 obj. %) za získání N-Boc-N-(terc-butyloxykarbonylmethyl)-D-ChaPro-Glu-(2-thiazolylu) (171 mg).
TLC: Rf = 0,50, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(k) N-(terc-butvloxvkarbonvl)-S-methvlizothiourea
S-methylizothiourea semisulfát (10 g) byl suspendován v dichlormethanu (100 ml). K suspenzi byl za míchání přidán roztok 4N NaOH (10 ml). Reakční směs byla umístěna do ledové lázně a po kapkách byl přidán roztok di-terc-butyldikarbonátu (15,7 g) v dichlormethanu (100 ml) spolu s 2N roztokem hydroxidu sodného pro udržení pH v okolí 11. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána přes noc při pokojové teplotě. Vrstva dichlormethanu byla oddělena a vodná vrstva byla extrahována dvakrát dichlormethanem. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou a sušeny nad síranem sodným, zfiltrovány a odpařeny ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: heptan/ethylacetát = 4/1 obj. %) za získání 9,38 g.
TLC: Rf = 0,75, silikagel, ethylacetát/heptan = 3/1 obj. % (I) N-(benzvloxvkarbonvD-N,-(terc-butvloxvkarbonvl)-Smethlizothiourea
N-(terc-butyloxykarbonyl)-S-methylizothiourea (2 g) byla rozpuštěna v dichlormethanu (20 ml). K roztoku byl za míchání přidán 4N roztok hydroxidu sodného (2 ml). Reakční směs byla umístěna do io ledové lázně a po kapkách byl přidán roztok N-(benzyloxykarbonyloxy)-sukcinimidu (2,62 g) v dichlormethanu (20 ml) spolu s roztokem 2N hydroxidu sodného pro udržení pH v okolí 11. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána přes noc při pokojové teplotě. Dichlormethanová vrstva byla oddělena a vodná vrstva byla dvakrát promyta dichlormethanem. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou a sušeny nad síranem sodným, zfiltrovány a odpařeny ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: heptan/ethylacetát = 3/2 obj. %) s výtěžkem 3,15 g.
TLC: Rf = 0,78, silikagel, ethylacetát/heptan = 1/1 obj. % (m) N-(Cbz)-N'-(t-Boc)-guanidin
N-(benzyloxykarbonyl)-N'-(terc-butyloxykarbonyl)-Smethylizothiourea (3,15 g) byla rozpuštěna v methanolovém roztoku amoniaku (2,4M, 50 ml). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc. Směs byla odpařena ve vakuu a získaný zbytek bnyl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/methanol = 95/5 obj. %) s výtěžkem 1,83 g.
TLC: Rf = 0,80, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
• · · (n) N-(t-Boc)- guanidinhvdrochlorid
K roztoku N-(Cbz)-N'-(t-Boc)-guanidinu (1,8 g) v methanolu (50 ml) bylo přidáno 10 % paladium na uhlí (250 mg) a 3,12 ml 2N roztoku chlorovodíku. Směs byla hydrogenována za atmosférického tlaku a při pokojové teplotě 1 h. Paladiový katalyzátor byl odstraněn filtrací a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku za získání N-(t-Boc)-guanidin.hydrochloridu v kvantitativním výtěžku. TLC: Rf = 0,10, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
io (o). N-(t-butvloxvkarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-Glu((N-t-Boc)guanidin)-(2-thiazolyl)
K chladnému (0 °C) roztoku N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-NBoc-D-Cha-Pro-Glu-(2-thiazolylu) (170 mg) v dichlormethanu (5 ml) byl postupně přidán dicyklohexylkarbodiimid (123 mg), N-(t-Boc)15 guanidin.HCI (75 mg) a triethylamin (53 pl). Směs byla míchána při 0 °C 1 hod a potom udržována při pokojové teplotě další 1 hod. Směs byla ochlazena na - 20 °C a dicyklohexylurea byla odstraněna filtrací. Filtrát byl odpařen dosucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu ve směsi dichlormethan/methanol = 95/5 (obj. %) jako eluentu. Frakce obsahující N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-BocD-Cha-Pro-Glu((N-t-Boc)-guanidin)-(2-thiazoiyl) byly spojeny a odpařeny. Výtěžek: 173 mg.
TLC: Rf = 0,50, silikagel, dichlormethan/methanol = 9/1 obj. %.
(p) HOOC-CH7-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolvl)
N-(t-butyloxykarbonylmethyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-Glu((N-t-Boc)guanidin)-(2-thiazoiyl) byl smísen se směsí 90 % kyselina trifluoroctová/voda (10 ml) a směs byla udržována 5 h při pokojové teplotě. Reakční směs byla koncentrována ve vakuu a zbytek byl • · rozpuštěn ve vodě a přímo nanesen na preparativní HPLC DeltaPak RP-Cis s použitím systému gradientní eluce 20%A/80%B až 20%A/45%B/35%C v průběhu 40 min při průtoku 50 ml/min (A: 0,5M fosfátový pufr pH 2,1, B: voda, C: acetonitril/voda = 6/4). Výtěžek:
22 mg HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl).
Rt(LC): 35,04 min, A 20%, B 80%, C 0% až A 20%, B 20%, C 60% v průběhu 40 min.
PŘÍKLAD 3 (4aR,8aR)-perhvdrizochinolin-1(R,S)-karbonyl-Pro-Glu(guanidin)-(2thiazolvl) (a) Kyselina 2-Cbz-(4a,8aR)-perhydroizochinolin-1 (R.S)-karboxylová
Kyselina 2-Cbz-(4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1 (R,S)karboxylová byla syntetizována podle popisu v EP 0643073, příklad 1.
TLC: Rf = 0,85, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 63/20/6/11 na oxidu křemičitém.
(b) 2-Cbz-(4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1(R,S)-karbonvl-Pro-Q-tBu)
K chladnému roztoku (0 °C) kyseliny 2-Cbz-(4aR,8aR)20 perhydroizochinolin-1(R,S)-karboxylové (500 mg) v dimethylformamidu (5 ml) byl postupně přidán DCCI (1,3-dicyklohexylkarbodiimid; 342 mg), HOBT (1-hydroxybenztriazolhydrát; 319 mg), H-Pro-OtBu (270 mg) a triethylamin (0,55 ml). Reakční směs byla míchána při 0 °C 1 h a potom udržována při pokojové teplotě přes noc. Reakční směs byla ochlazena na - 20 °C a DCU (1,3-dicyklohexylurea) byla odstraněna filtrací. Filtrán byl koncentrován ve vakuu a zbytek rozpuštěn v ethylacetátu. Roztok byl postupně promyt 5 % vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, 3 % vodným roztokem kyseliny citrónové, vodou a roztokem soli, sušen nad síranem sodným
·· ·· ·· • · · · · · • · · · · · • ·· · · · · · • · · · · ·· ·· ·· a koncentrován ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografií na oxidu křemičitém (eluent: heptan/ethylacetát 4/1 obj. %) za získání 2-Cbz(4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1 (R,S)-karbonyl-Pro-O-tBu) (634 mg).
TLC: Rf = 0,90, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 63/20/6/11 na 5 oxidu křemičitém.
(ď) 2-Cbz-(4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1 (R.S)-karbonyl-Pro-QH
2-Cbz-(4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1(R,S)-karbonyl-Pro-O-tbutylester (600 mg) byl míchán ve směsi dichlormethanu (1 ml), io kyseliny trifluoroctové (3 ml), anisolu (0,15 ml) 1 h při pokojové teplotě. Reakční směs byla koncentrována ve vakuu za nízké teploty a zbytek byl rozpuštěn ve vodě při pH 9,5. Vodná fáze byla promyta diethyletherem, a vodná vrstva byla okyselena 2M kyselinou chlorovodíkovou. Vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem a organická fáze byla promyta roztokem soli, sušena nad síranem sodným a koncentrována ve vakuu za získání 2-Cbz-(4aR,8aR)perhydroizochinolin-1(R,S)-karbonyl-Pro-OH (588 mg).
TLC: Rf = 0,54, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 60/3/1/2 na oxidu křemičitém (d) (4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1 (R,S)-karbonyl-Pro-Glu-(2thiazolyl)
Postupem popsaným v příkladu 2 byla provedena směsná anhydridová vazba mezi 2-Cbz-(4aR,8aR)-perhydroizochinolin-1(R,S)25 karbonyl-Pro-OH a H-Glu-(2-thiazolyl).TFA, guanidizace, odstranění ochranných skupin a purifikace. Výtěžek: 64,7 mg.
Rt (LC): 28,93 min, 20% A, 80% B až 20% A, 20 % B a 60 % C v průběhu 40 min.
-29.
PŘÍKLAD 4
EtSO2-D-Cha-Pro-Glu(quanidin)-(2-thiazolyl) (a) Boc-D-Cha-Pro-OPAc
Boc-D-Cha-Pro-OPAc byl připraven podobným způsobem jako v příkladu 1 s použitím Boc-D-Cha-OH a H-Pro-OPAc.
TLC: Rf = 0,5, dichlormethan/methanol 95/5 na oxidu křemičitém.
(b) EthylSOz-D-Cha-Pro-OPAc
Boc-D-Cha-Pro-OPAc (3,8 g) byl rozpuštěn v 50 % io TFA/dichlormethan (25 ml) a míchán 30 min při pokojové teplotě. Reakční směs byla odpařena ve vakuu. Surový amin byl rozpuštěn v dichlormethanu (50 ml) a byl přidán ethansulfonylchlorid (0,8 ml) při -78 °C. Pro udržení pH 8 byl přidán triethylamin. Směs byla míchána 3 h při 0 °C a potom bylo přidáno 25 ml vody. Po dalším míchání 30 min při pokojové teplotě byla reakční směs koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v diethyletheru a promyt 1N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5 % roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem soli, sušen nad síranem sodným, zfiltrován a odpařen ve vakuu. Rozetřením surového materiálu s methanolem byl získán ethylSO2-D-Cha-Pro-OPAc (3,0 g).
TLC: Rf = 0,6, dichlormethan/methanol 95/5 na oxidu křemičitém.
(c) EthylSQ?-D-Cha-Pro-QH
K roztoku ethylSO2-D-Cha-Pro-OPAc (10 g) v tetrahydrofuranu (250 ml) byl přidán 1M roztok tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (84 ml). Reakční směs byla míchána 30 min při pokojové teplotě a vlita do vody (1 I). Vodný roztok byl extrahován ethylacetátem. Spojené organické vrstvy byly postupně promyty roztokem 1N kyseliny chlorovodíkové a vodou, sušeny nad síranem • ·
a> · sodným a koncentrovány ve vakuu. Zbytek byl čištěn krystalizací ze směsi ethylacetát/diizopropylether za získání ethylSO2-D-Cha-Pro-OH (6.0 g).
TLC: Rf= 0,2, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 163/20/6/11 na oxidu křemičitém.
(d) EthylSO2-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl)
Směsná anhydridová vazba mezi ethylS02-D-Cha-Pro-OH a HGlu-(2-thiazolyl).TFA, guanidace, odstranění ochranných skupin io a čištění bylo prováděno postupem popsaným v příkladu 2. Výtěžek mg.
Rt (LC): 28,33 min, 20 % A, 60% B a 20% C až 20% A a 80% C v průběhu 30 min.
PŘÍKLAD 5
N-Ac-D-Phe-2-Nal-Glu(guanidin)-(2-thiazolv0
N-Ac-D-Phe-2-Nal-OMe byl připraven podobným způsobem jak bylo popsáno v příkladu 2 s použitím N-Ac-D-Phe-OH a H-2-Nal-OMe.
2o (a) N-Ac-D-Phe-2-Nal-OH
Roztok N-Ac-D-Phe-2-Nal-OMe (1,55 g) v 20 ml směsi dioxan/voda = 9/1 (obj.) byl smísen s dostatečným množstvím 6N hydroxidu sodného pro udržení pH na 12 po dobu 1 hod při pokojové teplotě. Po okyselení byla směs vlita do vody a byla extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta vodou a byla sušena na síranu sodném. Filtrát byl odpařen za získání 1,7 g surového N-AcD-Phe-2-Nal-OH.
φ 9 φφ • 9 9 • ΦΦΦ ♦ Φ Φ
·* ®· ·· • · φ Φ · Φ
Φ Φ φ Φ ΦΦ • Φ Φ ΦΦΦ Φ Φ
9 ΦΦΦ • «Φ ΦΦ ΦΦ
TLC: Rf= 0,50, silikagel, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 63/20/6/11 obj. %.
(b) N-Ac-D-Phe-2-Nal-Glu(guanidin)-(2-thiazolvl)
Směsná anhydridová vazba mezi N-Ac-D-Phe-2-Nal-0H a HGlu-(2-thiazolyi).TFA, guanidace a odstranění ochranných skupin a purifikace byly provedeny podle postupů popsaných v příkladu 2. Výtěžek: 218 mg.
Rt (LC): 29,97 min, 20% A, 60% B a 20% C až 20% A a 80% C io v průběhu 30 min.
PŘÍKLAD 6
N-Me-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolvl)
Boc-(N-Me)-D-Cha-Pro-OH byl připraven podobným způsobem is jak bylo popsáno v příkladu 2 s použitím Boc-(N-Me)-D-Cha-OH a HPro-OBzl.
H-(N-Me)-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl)
Směsná anhydridová vazba mezi Boc-(N-Me)-D-Cha-Pro-OH a H-Glu-(2-thiazolyl).TFA, guanidace, odstranění ochranných skupin
2o a purifikace byla provedena postupy popsanými v příkladu 2. Výtěžek: 85 mg.
Rt (LC): 32,27 min, 20% A a 80% B až 20% A, 20%B a 60* C v průběhu 40 min.
PŘÍKLAD 7
N-Ac-D-Phe-Phe-Glu(guanidin)-(2-thiazoivl)
V názvu uvedená sloučenina byla vyrobena analogickým způsobem jak se popisuje v příkladu 5. Výtěžek: 112 mg.
• · fl ·
Rt (LC): 42,97 min, 20% A, 80% B až 20% A, 80%B a 60% C v průběhu 40 min.
PŘÍKLAD 8
N-Me-D-Phe-Pro-Glufguanidin)-(2-thiazolyl)
Boc-(N-Me)-D-Phe-Pro-OMe byl připraven podobným způsobem jak se popisuje v příkladu 2 s použitím Boc-(N-Me)-D-Cha-OH a HPro-OMe.
Boc-(N-Me)-D-Phe-Pro-OH byl připraven podobným způsobem io jak se popisuje v příkladu 5 s použitím Boc-(N-Me)-D-Phe-Pro-OMe.
Rt (LC): 28,0 min, 20% A, 80% B až 20% A, 20%B a 60% C v průběhu 40 min.
H-(N-Me)-D-Phe-Pro-Glu(quanidin)-(2-thiazolyl)
Směsná anhydridová vazba mezi Boc-(N-Me)-D-Phe-Pro-OH a H-Glu-(2-thiazolyl).TFA, guanidace, odstranění ochranných skupin a purifikace byly provedeny postupy uvedenými v příkladu 2. Výtěžek: 79,3 mg.
Rt (LC): 28,28 min, 20% A, 80% B až 20% A, 20%B a 60% C v průběhu
40 min.
PŘÍKLAD 9
BzlSQ2-norLeu(cyklo)-Gly-Glu(quanidin)-(2-thiazolyl) norLeu(cyk!o)-Gly znamená strukturní fragment vzorce
-NH-CH
N-CH2-C(O)-
(a) Boc-norLeu(cyklo)-OH
K míchanému roztoku L-a-amino-s-kaprolaktamu (10 g) ve směsi dioxan/voda (2/1 obj.) (30 ml) byl přidán 1N roztok hydroxidu sodného (7,8 ml) a potom di-t-butylkarbonát (18,8 g). Směs byla míchána 16 h při pokojové teplotě a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a promyt vodou a roztokem soli, sušen nad síranem sodným, zfiltrován a odpařen ve vakuu. Surový materiál byl rozetřen s hexanem, zfiltrován a sušen ve vakuu za získání Bocio norLeu(cyklo)-OH (16 g).
TLC: Rf = 0,85, ethylacetát/heptan 1/1 na oxidu křemičitém.
(b) Boc-norLeu(cyklo)-Gly-OMe
Boc-norLeu(cyklo)-OH (10 g) byl rozpuštěn v dichlormethanu (100 ml). Při -20 °C byl pomalu přidán roztok 1M bis(trimethylsilyl)amidu ve směsi THF/cyklohexan (1/1 obj.) (1 ekv) a směs byla míchána 30 min. Potom byl přidán methylbromacetát (4 ml) a směs byla míchána 2 hod při pokojové teplotě. Potom byl přidán bis(trimethylsilyl)amid ve směsi THF/cyklohexan (1/1 obj.) pro ukončení reakce. Směs byla zředěna dichlormethanem a promyta 0,1N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5 % vodným roztokem hydrogenuhíičitanu sodného a roztokem soli, sušena nad síranem sodným, zfiltrována a odpařena ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografii na oxidu křemičitém (eluent: heptan/ethylacetát 6/4 obj. % za získání Boc-norLeu(cyklo)-Gly-OMe (12 g).
TLC: Rf= 0,55, ethylacetát/heptan 6/4 na oxidu křemičitém.
- 34«· » · · · ·· · · 4 • · • · · · (c) BzlSO?-norLeu(cvklo)-Glv-OMe
Boc-norLeu(cyklo)-Gly-OMe (3 g) byl rozpuštěn v 50 % TFA/dichlormethan (30 ml) a míchán 1 h při pokojové teplotě. Surový amin byl rozpuštěn v dichlormethanu (25 mi) a pomalu byl přidán roztok benzylsulfonylchloridu (2,25 g) v dichlormethanu (10 ml) při 0 °C. Triethylamin byl přidáván v průběhu reakce pro udržení pH na 8. Směs byla míchána 1 hod při pokojové teplotě a potom byla zakoncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a promyt 5 % roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou io a roztokem soli, sušen nad síranem sodným, filtrován a odpařen ve vakuu. Zbytek byl čištěn chromatografíi na oxidu křemičitém (eluent: dichlormethan/ethylacetát 95/5 obj. %) za získání BzlS02norLeu(cykio)-GlyOMe (3,9 g)
TLC: Rf = 0,40, dichlormethan/ethylacetát 9/1 na oxidu křemičitém.
(d) BzlSO?-norLeu(cyklo)-Glv-OH
Roztok BzlSO2-norLeu(cyklo)-Gly-OMe (3,9 g) v 100 ml směsi dioxan/voda 9/1 byl smísen s dostatečným množstvím 1N hydroxidu sodného pro udržení pH na 13 po dobu 2 hod při pokojové teplotě. Po okyselení byla směs vlita do vody a extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta vodou a sušena na síranu sodném. Filtrát byl odpařen a bylo získáno 3,6 g v názvu uvedené sloučeniny.
TLC: Rf = 0,60, ethylacetát/pyridin/kyselina octová/voda 63/20/6/11 na oxidu křemičitém.
(e) BzlSQ?-norLeu(cvklo)-Gly-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl)
Směsná anhydridová vazba mezi BzlSO2-norLeu(cyklo)-Gly-OH a H-Glu-(2-thiazolyl).TFA, guanidace, odstranění ochranných skupin
• ·
a purifikace byly provedeny podle postupů popsaných v příkladu 2. Výtěžek: 34,6 mg.
Rt (LC): 21,42 min, 20% A, 60% B a 20% C až 20% A a 80% C v průběhu 30 min.
PŘÍKLAD 10
Výroba acylguanidinů na Kaiserově oximové pryskyřici
K suspenzi 4,0 g Kaiserovy oximové pryskyřice (NovaBiochem,
1,10 mmol/g) v 80 ml směsi dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.) ío byl přidán Βοο-β-Ala-OH (3,3 g, 17,6 mmol), N-hydroxybenztriazol (3,0 g, 22,0 mmol), a N,N-diizopropylkarbodiimid (3,4 ml, 22,0 mmol). Suspenze byla třepána 16 hod při pokojové teplotě. Pryskyřice byla odfiltrována a promyta směsí dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.), dimethylformamidem, 2-propanolem a dichlormethanem (vždy třikrát). Na nezreagované oximové skupiny byla navázána zakončovací skupina působením 80 ml směsi anhydrid kyseliny octové/diizopropylethylamin/N-methylpyrrolidon (3:1: 12 obj.) po dobu 30 min při pokojové teplotě. Reakční směs byla odstraněna filtrací a pryskyřice byla promyta N-methylpyrrolidonem, směsí 220 propanol/dichlormethan (1:3 obj.) a dichlormethanem (vždy třikrát). Získaná derivatizovaná pryskyřice (4,96 g) byla sušena ve vakuu.
Části po 50 mg této pryskyřice byly převedeny do 24 reaktorů na roboru pro provádění organických syntéz. Pryskyřice byla ponechána nabobtnat promytím směsí dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.) a dichlormethanem (dvakrát).
- 36:-..
i) Odstranění ochranné skupiny Boc
Pryskyřice byla předem smísena s 1 ml 25 % kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu a potom ponechána reagovat za občasného probublávání dusíkem s 2 ml 25 % kyseliny trifluoroctové
30 min. Pryskyřice byla promyta dichlormethanem, 2-propanolem, a dichlormethanem (vždy dvakrát).
ii) Navázání prvního vazebného bloku (A)
Pryskyřice byla ponechána nabobtnat promytím směsí dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.). K pryskyřici byl přidán 1 ml io 0,2 M roztoku stavebního bloku A (Boc-Pro-OH, Boc-(N-methyl)-GlyOH, Boc-Gly-OH nebo Boc-Phe-OH) v dichlormethanu/ (3:2 obj.), 0,5 ml 0,44M TBTU v dimethylformamidu, a 0,5 ml 0,44M diizopropylethylaminu v dichlormethanu. Pryskyřice byla inkubována při pokojové teplotě 60 min s občasným propubláváním dusíkem. Po odstranění rozpouštědla byla pryskyřice promyta směsí dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.), dimethylformamidu, 2propanolu, a dichlormethanu (vždy dvakrát).
ii) Odstranění ochranné skupiny Boc
Skupina Boc z vazebného bloku A byla odstraněna použitím postupu popsaného v i).
iv) Navázání druhého vazebného bloku (B)
Druhý vazebný blok B byl připojen s použitím stejného postupu, jaký byl popsán v iii) s použitím 0,2M roztoků stavebního bloku B (Boc-D-Cha-OH, nebo Boc-D-Phe-OH) ve směsi dichlormethan/dimethylformamid (3/2 obj.).
v) Odstranění ochranné skupiny Boc
Skupina Boc stavebního bloku B byla odstraněna s použitím postupu popsaného v i) kromě kroku předběžného působení kyselinou trifluoroctovou.
· · * · · ···
- ·· ··· ·· ·· ·· vi) Navázání třetího stavebního bloku (C)
Pryskyřice byla promyta směsí dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.) a potom dvakrát 2 ml 0,11M roztoku díizopropylethylaminu ve směsi dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.). K pryskyřici byl přidán 1 mi směsi dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.), 0,5 ml 0,44M roztoku sulfonylchloridů C (fenylsulfonylchlorid, 4chlorfenylsulfonylchlorid, nebo 7-methoxynaftylsulfonylchlorid) ve směsi dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.), a 0,5 ml 0,44M roztoku díizopropylethylaminu v dichlormethanu. Pryskyřice reagovala ío 60 min při pokojové teplotě s občasným probubláváním dusíkem. Po odstranění reakční směsi byla pryskyřice promyta směsí dichlormethan/dimethylformamid (3:2 obj.), dimethylformamidem, 2propanolem, a dichlormethanem (vždy dvakrát).
vii) Odštěpení produktu z pryskyřice is Pryskyřice byla dvakrát promyta dimethylformamidem před přídavkem 1,8 ml 0,2M roztoku guanidin.HCI v dimethylformamidu a 0,2 ml díizopropylethylaminu. Pryskyřice byla inkubována při pokojové teplotě 64 hod s občasným probubláváním dusíkem. Pryskyřice byla odfiltrována a filtrát byl shromážděn ve skleněné
2o zkumavce. Pryskyřice byla dvakrát promyta dimethylformamidem. Spojené filtráty byly odpařeny dosucha.
Charakterizace
Všechny sloučeniny byly charakterizovány kapalinovou chromatografii s reverzní fází na koloně Supelcosii LC-18-DB (4,6 mm x 25 cm) za následujících podmínek: Průtok: 1,0 ml/min; Pufry A: voda, B: acetonitril/voda (9:1 obj.), C: 0,5M fosfátový pufr pH=2,1; Gradient 1: 0 -> 30 min 55%A-25%B-20%C -> 15%A-65%B-20%C. UVdetekce při 210 nm. Retenční časy jsou uvedeny v minutách v tabulce I.
- 3S<
Všechny sloučeniny byly dále analyzovány hmotnostní spektrometrií s elektrorozprašovací ionizací. Tabulka I ukazuje hodnoty M+H detekované v pozitivním modu. U všech sloučenin je zjištěná hmotnost v souladu s očekávanou hodnotou.
- 3S~
• · · · I • · I te · · te
Tabulka I: Charakterizace (retenční časy na HPLC s reverzní fází a vrchol M+H při hmotnostní spektrometrii s elektrickým rozprašováním) acylguanidinú vyrobených na Kaiserově oximové pryskyřici.
| X: | fenyl-SO2- | 4-chlorfenyl- SO2- | 7-methoxynaftyl- SO2- |
| X-D-Cha-Pro-β- Ala-guanidin | r.t = 16,9 min M+H = 521,4 | r.t = 20,1 min M+H = 555,4 | r.t = 22,1 min M+H = 601,4 |
| X-D-Phe-Pro-β- Ala-guanidin | r.t = 13,4 min M+H = 515,4 | r.t = 17,0 min M+H = 549,2 | r.t = 19,3 min M+H = 595,4 |
| X-D-Cha-(N- methyl)-Gly^- Ala-guanidin | r.t = 15,8 min M+H = 495,4 | r.t = 18,9 min M+H = 529,4 | r.t = 20,9 min M+H = 575,4 |
| X-D-Phe-(N- methyl)-Gly·^- Ala-guanidin | r.t = 11,7 min M+H = 489,2 | r.t = 15,5 min M+H = 523,2 | r.t = 17,7 min M+H = 569,4 |
| X-D-Cha-Gly-β- Ala-guanidin | r.t = 14,0 min M+H = 481,2 | r.t = 17,2 min M+H = 515,2 | r.t = 19,4 min M+H = 561,4 |
| X-D-Phe-Gly-β- Ala-guanidin | r.t = 10,1 min M+H = 475,2 | r.t = 14,1 min M+H = 509,2 | r.t = 16,4 min M+H = 555,4 |
| X-D-Cha-Phe-β- Ala-guanidin | r.t = 21,7 min M+H = 571,4 | r.t = 24,2 min M+H = 605,2 | r.t = 26,0 min M+H = 651,4 |
| X-D-Phe-Phe-β- Ala-guanidin | r.t = 17,6 min M+H = 565,4 | r.t = 20,8 min M+H = 599,4 | r.t = 22,6 min M+H = 645,4 |
• fe
40*·
Příklad 11
Způsoby podle předkládaného vynálezu mohou být dále vyrobeny následující sloučeniny:
- HOOC-CH2-D-Cha-(1 -aminocyklohexylkarboxy)-p-Ala-guanidin;
- (HOOC-CH2)2-D-Cha-Pro-p-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-Me-D-Cha-Pro^-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-allyl-D-Cha-Pro-3-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-propargyl-D-Cha-Pro-3-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-benzyl-D-Cha-Pro-p-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-cyklopropyl-D-Cha-Pro-3-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-cyklobutyl-D-Cha-Pro-3-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-cyklopentyl-D-Cha-Pro-3-Ala-guanidin;
- HOOC-CH2-N-cyklohexyl-D-Cha-Pro-p-Ala-guanidin;
- 2-propyl-pentanoyl-Asp(OMe)-Pro-p-Ala-guanidin;
- 2-propyl-pentanoyl-Asp-Pro-3-Ala-guanidin;
- ethylSO2-D-Cha-Pro-p-Ala-guanidin;
- ethylSO2-D-Phe-Pro-3-Ala-guanidin;
- [2-(BzlSO2-NH)-pyridinyl-1-CH2-CQ]-p-Ala-guanidin;
- [3-(BzlSO2-NH)-pyridin-2-on-1-CH2-CO]-p-Ala-guanidin;
- BzlSO2-norLeu(cyklo)-Gly-3-Ala-guanidin;
- N-Me-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
- N-Me-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- N-Me-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
- N-Me-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- N-Me-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- HOOC-CH2-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
- HOOC-CH2-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- HOOC-CH2-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
- HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
-5f1
- ethylSO2-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
- ethylSO2-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- ethylSO2-D-Phe-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- ethylSO2-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
- ethylSO2-D-Cha-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- 1-Piq-Pro-Glu(guanidin)-COOH;
-1 -Piq-Pro-Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- HOOC-CH2-D-Cha-(N-cyklopentyl)-Gly-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- N-Me-D-Phe-(N-cyklopentyl)-Gly-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- 2-propyl-pentanoyl-Asp(OMe)-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- 2-hydroxy-3-cyklohexyl-propionyl-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- 1-Piq-(N-cyklopentyl)-Gly-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- difenylpropionyl-Pro-Glu(guanidin)-(2-thiazolyl);
- sloučeniny, kde zbytek:
15 ycH2)4\
BziSO2-NH-CH^^N-CH2-C(O)o je navázán na -Glu(guanidin)-COOH, -Glu(guanidin)-(220 thiazolyl) nebo -Glu(guanidin)-(2-oxazolyl);
- 9-hydroxy-fluoren-9-karboxyl-Pro-p-Ala-guanidin;
- 9-hydroxy-fluoren-9-karboxyl-(N-cyklopentyl)-Gly-P-Ala-guanidin;
- 9-hydroxy-fluoren-9-karboxyl-azetidin-2-karboxyl-p-Ala-guanidin.
PŘÍKLAD 12 Antitrombinovy test
Trombin (factor lla) je faktor v koagulační kaskádě. Antitrombinový účinek sloučenin podle předkládaného vynálezu byl
určován spektrofotometrickým měřením , rychlostí hydrolýzy chromogenního substrátu s-2238 působením trombinu. Tento test antitrombinového účinku v systému pufru byl použit pro určování hodnoty IC50 testované sloučeniny.
Testovací medium: Tromethamin-NaCI-polyethylenglycol 6000 (TNP) pufr. Referenční sloučenina: 12581 (Kabi) Vehikulum: TNP pufr. Pro zlepšení solubilizace může být použit dimethylsulfoxid, methanol, ethanol, acetonitril nebo terc.-butylalkohol, které nemají škodlivý vliv v koncentracích až do 2,5 % v hotové reakční směsi.
Způsob provedení
Reaqencie*: 1. Tromethamin-NaCI (TN) pufr. Složení pufru: Tromethamin (Tris) 6,057 g (50 mmol), NaCI 5,844 g (100 mmol), voda do 1 I. pH roztoku je nastaveno na 7,4 při 37 °C pomocí HCl (10 mmol). 2. TNP pufr: Polyethylenglykol 6000 se rozpustí v TN pufru pro získání koncentrace 3 g Γ1. 3. Roztok S-2238: Jedna ampule S2238 (25 mg; Kabi Diagnostica, Švédsko) se rozpustí ve 20 ml TN pufru za získání koncentrace 1,25 mg ml·1 (2 mmol Γ1). 4. Roztok trombinu: lidský trombin (16 000 nKat/ampule; Centraal Laboratorium voor Bloedtransfusie, Amsterdam, Holandsko) se rozpustí v TNP pufru za získání zásobního roztoku 835 nKat-ml'1. Bezprostředně před použitím se tento roztok zředí pufrem TNP za získání koncentrace
3,34 nKat-ml'1.
* -Všechny použité látky jsou čistoty pro analýzu
- Pro vodné roztoky se používá ultračistá voda (kvality Milli-Q).
Příprava roztoků testovací a referenční sloučeniny
Testovací a referenční sloučeniny se rozpustí ve vodě Milli-Q za poskytnutí zásobních koncentrací 10'2 mol.l'1. Každá koncentrace se ·· ·
-43.
vehikulem postupně zředí za získání koncentrací 10‘3, 10‘4 a 10‘5 moll'1. Tato ředění včetně zásobního roztoku se používají v testu (finální koncentrace v reakční směsi: 3 Ί0'3; 10'3; 3Ί0'4; 10‘4; 3Ί0'5; 10'5; 3-1 θ'6 a 10'6 mol·!*1).
Postup
Při pokojové teplotě se střídavě pipetuje 0,075 ml a 0,025 ml testované sloučeniny nebo referenční sloučeniny do jamek mikrotitrační destičky a tyto roztoky se zředí 0,115 ml, případně ío 0,0165 ml TNP pufru. Do každé jamky se přidá alikvot 0,030 ml roztoku S-2238 a destička se předehřeje a předinkubuje za třepání v inkubátoru (Amersham) 10 min při 37 °C. Po předinkubaci se nastartuje hydrolýza S-2238 přídavkem 0,030 ml roztoku trombinu do každé jamky. Destička se inkubuje (za třepání 30 s) při 37 °C. Počínaje první minutou inkubace se měří absorbance každého vzorku při 405 nm každé 2 min po dobu 90 min s použitím čtečky mikrotitračních destiček s kinetickým měřením (Twinreader plus, Flow Laboratories).
Všechna data se shromažďují v počítači IBM s použitím programu LOTUS-MEASURE. Pro každou koncentraci sloučeniny
2o (vyjádřenou v mol.l1 reakční směsi) a pro blank se vynese absorbance proti době reakce v minutách.
Vyhodnocení výsledků:
Pro každou konečnou koncentraci se z grafu vypočte maximální absorbance. Hodnota IC50 (finální koncentrace vyjádřená v pmol.l'1, která způsobí 50 % inhibici maximální absorbance blanku) byla vypočtena s použitím transformační analýzy logit podle Hafner a další (Arzneim.-Forsch./Drug Res. 1977; 27(ll): 1871-3).
V následující tabulce jsou uvedeny hodnoty IC5o sloučenin podle vynálezu:
Claims (14)
- PATENTOVÉ NÁROKYSloučenina vzorce IA-B-X-NZ-CH-Q (i) kdeA znamená H, popřípadě substituovaný D,L a-hydroxyacetyl, R1, R1-O-C(O)-, R1-C(O)-, R’-SO2-, R2OOC-(CHR2)m-SO2-, R2OOC-(CHR2)m-, H2NC0-(CHR2)m-, nebo N-ochranná skupina, kde R1 je zvolena ze skupiny (1 -12C)alkyl, (2-12C)alkenyl, (212C)alkinyl a (3-8C)cykloalkyl, které mohou být popřípadě substituovány skupinami (3-8C)cykloaikyi, (1-6C)alkoxy, oxo, OH, COOH, CF3 nebo halogen, a ze skupiny (6-14C)aryl, (7-15C)aralkyl a (8-16)aralkenyl, kde arylové skupiny mohou být popřípadě substituovány skupinami (1-6C)alkyl, (3-8C)cykloalkyl, (1-6C)alkoxy, OH, COOH, CF3 nebo halogen; každá skupina R2 znamená nezávisle atom vodíku nebo má stejný význam jako R1; m znamená 1, 2 nebo 3;B znamená vazbu, aminokyselinu vzorce -NH-CH[(CH2)pC(O)OH]-C(O)- nebo její esterový derivát a p jeO, 1, 2 nebo 3, -N((1-12C)alkyl)-CH2-CO-, -N((212C)alkenyl)-CH2-CO-, -N((2-12C)alkinyi)-CH2-CO-, -N(benzyl)CH2-CO-, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo L- nebo D-aminokyselinu s hydrofobním bázickým nebo neutrálním postranním řetězcem, která může být popřípadě N10 .- 4$.-· (1 -6C)alkylsubstituována; nebo A a B znamenají spolu zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde R3 a R4 jsou nezávisle R1, R1-0-C(0)-, R1-C(O)-, R1-SO2-, R200C-(CHR2)m-S02-, R2OOC-(CHR2)m-, H2NC0-(CHR2)m-, nebo N-ochrannou skupinu, nebo jedna ze skupin R3 a R4 je spojena se skupinou R5 za vytvoření 5- nebo 6-členného kruhu spolu s N-C, na kterou jsou navázány, přičemž uvedený kruh může být fúzován s alifatickým nebo aromatickým 6-členným kruhem; a R5 znamená hydrofobní, bázický nebo neutrální postranní řetězec;X znamená L-aminokyselinu s hydrofobním postranním řetězcem, kterým je (1 -12C)alkyl, popřípadě substituovaný jednou nebo více (3-8C)cykloalkylovými skupinami nebo (6-14C)arylovými skupinami, přičemž tento hydrofobní postranní řetězec může být popřípadě substituován substituenty jako je halogen, trifiuormethyl, nižší alkyl, nižší alkoxy, fenyloxy, benzaloxy apod., nebo je X serin, threonin, cyklická aminokyselina popřípadě obsahující další heteroatom zvolený ze skupiny N, O nebo S, a popřípadě substituovaná skupinami (1-6C)alkyl, (1-6C)alkoxy, benzyloxy nebo oxo, nebo X znamená -NR2-CH2-C(O)- nebo fragmentZ \-NH-CHN-CH,-C(0)-\.N-CH2-C(0}nebo kde n znamená 2, 3, nebo 4, a W znamená CH nebo N;Q znamená H nebo -C(O)Y, kde Y znamená H, -CHF2, -CF3, -CO-NH-(1-6C)alkylen-C6H5, -COOR6 a R6 je H nebo (16C)alkyl, -C0NR7R8 a R7 a R8 jsou nezávisle H nebo (16C)alkyl nebo R7 a R8 spolu znamenají (3-6C)alkylen, nebo Y znamená heterocykl zvolený ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, • * • ·
- 2-benzthiazol, 2-oxazol, 2-oxazolin a 2-benzoxazol, kde uvedené heterocykly mohou být popřípadě substituovány skupinami (1 -6C)alkyl, (1-6C)alkoxy nebo oxo;Z znamená H nebo (1 -6C)alkyl;5 r znamená 0 nebo 1, jestliže Q znamená -C(O)Y nebo r znamená 0, 1, 2, 3 nebo 4, jestliže Q znamená H; nebo její prekurzor nebo farmaceuticky přijatelná sůl.2. Sloučenina podle nároku 1, kde X je L-aminokyselina io s hydrofobním postranním řetězcem, serin, threonin nebo -NR2CH2-C(O)-; a Z znamená atom vodíku nebo methyl.
- 3. Sloučenina podle nároku 1, kdeA je jak definováno výše; B je vazba, aminokyselina vzorce15 -NH-CH[(CH2)pC(O)OH]-C(O)- nebo její esterový derivát a p je0, 1, 2 nebo 3, -N((1-6C)alkyl)-CH2-CO-, -N((2-6C)alkenyl)CH2-CO-, -N(benzyl)-CH2-CO-, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D1-Piq, D-3-Piq nebo D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem, kde tato aminokyselina může být20 popřípadě N-(1-6C)alkylsubstituována; neboA a B znamenají spolu zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-; aX je cyklická aminokyselina obsahující popřípadě další heteroatom zvolený ze skupiny N, O nebo S, a popřípadě substituovaná skupinami (1-6C)alkyl, (1-6C)alkoxy, benzyloxy25 nebo oxo, nebo X znamená -NR2-CH2-C(O)- nebo fragment
- 4.··4.
- 5.5.48·-NH-CHN-CHrC(O)nebo-NHON-CH2-C(O)a Z je H nebo methyl.Sloučenina podle nároku 3, kde A znamená H, 2-hydroxy-3-cyklohexylpropionyl-, 9hydroxyfIuoren-9-karboxyl, R1, R1-SO2-, R2OOC-(CHR2)m-SO2-, R200C-(CHR2)m-, H2NC0-(CHR2)m-, nebo N-ochranná skupina, kde R1 je zvolena ze skupin (1 -12C)alkyl, (2-12C)alkenyl, (614C)aryl, (7-15C)araikyl a (8-16)aralkenyl; každá skupina R2je nezávisle atom vodíku nebo má stejný význam jako R1;B je vazba, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem, kde uvedená aminokyselina může být popřípadě N-(1-
- 6C)alkyl substituovaná; neboA a B spolu tvoří zbytek R3R4N-CHRS-C(O)-;Y je -C0-NH-(1-6C)aikylen-C6H5, -COOR5, -CONR7R3, nebo jeY heterocykl zvolený ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, 2benzthiazol, 2-oxazol, 2-oxazoiin a 2-benzoxazol.Sloučenina podle nároku 4, kde A je R1-S02-, R2OOC(CHR2)m-;B je vazba, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq nebo D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem;nebo A a B spolu tvoří zbytek R3R4N-CHRS-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je R2OOC-(CHR2)m- nebo R1-SO2- a • 9 další znamená nezávisle (1 -12C)alkyl, (2-12C)alkenyl, (212C)alkinyl, (3-8C)cykloalkyl, (7-15C)aralkyl, R1-SO2- neboR200C-(CHR2)m-, a R5 je hydrofobní postranní řetězec;Y je -CO-NH-(1-6C)alkylen-C6H5, -COOR6 a R6 je H nebo (15 3C)alkyl, -CONR7R8, R7 a R8 znamenají nezávisle H nebo (1-3C)alkyl nebo R7 a R8 spolu tvoří (3-5C)alkylen, nebo Y je heterocykl zvolený ze skupiny 2-thiazol, 2-benzthiazol, 2oxazol nebo 2-benzoxazol.io 6. Sloučenina podle nároku 5, kde A je R2OOC-(CHR2)m-,B je D-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem; nebo A a B spolu tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je R2OOC-(CHR2)m- a další znamená15 nezávisle (1 -12C)alkyl, (3-8C)cykloalkyl, R1-SO2- nebo R2OOC(CHR2)m-; aX je kyselina 2-azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, kyselina 4-thiazolidinkarboxylová, 3,4dehydroprolin, kyselina 2-oktahydroindolkarboxylová.
- 7. Sloučenina podle nároku 6, kde A je HOOC-CH2-;» B je D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-CI-D-Phe, p-OMethyl-DPhe, p-OEthyl-D-Phe, D-NIe, m-CI-D-Phe, 3,4-di-OMe-D-Phe,25 D-Chg; neboA a B spolu znamenají zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 znamená HOOC-CH2- a další je nezávisle methyl, (1-4C)alkyl-S02- nebo HOOC-CH2- a R5 je (3-8C)cykloalkyl, (3-8C)cykloalkyl(1-4C)alkyl, fenyl, benzyl, popřípadě substituovanýá atomem chloru nebo skupinou (14C)alkoxy.··
- 8. Sloučenina podle nároku 5, kde A je R1-SO2-,5 B je vazba, D-1-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-1-Piq, D-3-Piq neboD-aminokyselina s hydrofobním postranním řetězcem; neboA a B znamenají spolu zbytek R3R4N-CHRS-C(O)-, kde alespoň jedna ze skupin R3 a R4 je R1-S02- a další je nezávisle (112C)alkyl nebo R1-SO2-;ίο X je kyselina 2-azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, kyselina 4-thiazolidinkarboxylová, 3,4dehydroprolin, kyselina 2-oktahydroindolkarboxylová, nebo fragment r \ •NH-CH^^N-CH2-C(O)θ nebo-NH-< xN-CH2-C(0)0
- 9. Sloučenina podle nároku 8, kde20 A je ethyl-SO2- nebo benzyl-S02-;B je vazba, D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-CI-D-Phe, pOMethyl-D-Phe, p-OEthyl-D-Phe, D-NIe, m-CI-D-Phe, 3,4-diOMe-D-Phe, D-Chg; neboA a B znamenají spolu zbytek R3R4N-CHR5-C(O)-, kde alespoň 25 jedna ze skupin R3 a R4 je ethyl-SO2- nebo benzyl-SO2- a další je nezávisle (1 -12C)alkyl nebo R1-SO2- a Rs je (38C)cykloalkyl, (3-8C)cykloalkyl(1-4C)alkyl, fenyl, benzyl, •-•51** difenylmethinyl, kde tyto skupiny jsou popřípadě substituovány atomem chloru nebo skupinou (1-4C)alkoxy.
- 10. Sloučenina podle některého z nároků 5 až 9, kde Q znamená5 atom vodíku a r je 0, 1 nebo 2.
- 11. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje sloučeninu podle některého z nároků 1 až 10 a farmaceuticky přijatelné pomocné látky.
- 12. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 10 pro použití v lékařství.
- 13. Použití sloučeniny podle některého z nároků 1 až 10 pro
- 15 výrobu farmaceutického prostředku pro léčení nebo prevenci onemocnění spojených s trombinem.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP96200334 | 1996-02-13 | ||
| EP96200421 | 1996-02-19 | ||
| EP96202337 | 1996-08-23 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ256598A3 true CZ256598A3 (cs) | 1999-01-13 |
| CZ291690B6 CZ291690B6 (cs) | 2003-05-14 |
Family
ID=27237508
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19982565A CZ291690B6 (cs) | 1996-02-13 | 1997-02-11 | Inhibitory serinové proteázy a farmaceutický prostředek |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6034067A (cs) |
| EP (1) | EP1007544A1 (cs) |
| JP (1) | JP2000505437A (cs) |
| KR (1) | KR19990082424A (cs) |
| CN (1) | CN1212706A (cs) |
| AU (1) | AU719216B2 (cs) |
| BR (1) | BR9707501A (cs) |
| CA (1) | CA2246256A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ291690B6 (cs) |
| HU (1) | HUP9901187A3 (cs) |
| NO (1) | NO983688L (cs) |
| NZ (1) | NZ331327A (cs) |
| PL (1) | PL328307A1 (cs) |
| RU (1) | RU2191193C2 (cs) |
| TR (1) | TR199801569T2 (cs) |
| TW (1) | TW487708B (cs) |
| WO (1) | WO1997030073A1 (cs) |
Families Citing this family (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE9900043D0 (sv) * | 1999-01-11 | 1999-01-11 | Astra Ab | New use |
| TW523513B (en) * | 1996-03-01 | 2003-03-11 | Akzo Nobel Nv | Serine protease inhibitors |
| US6194435B1 (en) | 1996-10-11 | 2001-02-27 | Cor Therapeutics, Inc. | Lactams as selective factor Xa inhibitors |
| EP0937073A2 (en) * | 1996-10-11 | 1999-08-25 | Cor Therapeutics, Inc. | Selective factor xa inhibitors |
| US6369080B2 (en) | 1996-10-11 | 2002-04-09 | Cor Therapeutics, Inc. | Selective factor Xa inhibitors |
| US6063794A (en) | 1996-10-11 | 2000-05-16 | Cor Therapeutics Inc. | Selective factor Xa inhibitors |
| US6262047B1 (en) | 1996-10-11 | 2001-07-17 | Cor Therapeutics, Inc. | Selective factor Xa inhibitors |
| US6204268B1 (en) | 1997-04-14 | 2001-03-20 | Cor Therapeutics, Inc | Selective factor Xa inhibitors |
| EP0977773A1 (en) | 1997-04-14 | 2000-02-09 | Cor Therapeutics, Inc. | SELECTIVE FACTOR Xa INHIBITORS |
| US6133256A (en) * | 1997-04-14 | 2000-10-17 | Cor Therapeutics Inc | Selective factor Xa inhibitors |
| WO1998046591A1 (en) | 1997-04-14 | 1998-10-22 | Cor Therapeutics, Inc. | SELECTIVE FACTOR Xa INHIBITORS |
| AU7292398A (en) | 1997-05-15 | 1998-12-08 | Eli Lilly And Company | Antithrombotic compound |
| US6333321B1 (en) | 1997-08-11 | 2001-12-25 | Cor Therapeutics, Inc. | Selective factor Xa inhibitors |
| US6218382B1 (en) | 1997-08-11 | 2001-04-17 | Cor Therapeutics, Inc | Selective factor Xa inhibitors |
| US6228854B1 (en) | 1997-08-11 | 2001-05-08 | Cor Therapeutics, Inc. | Selective factor Xa inhibitors |
| US6297233B1 (en) | 1999-02-09 | 2001-10-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Lactam inhibitors of FXa and method |
| US6344450B1 (en) | 1999-02-09 | 2002-02-05 | Bristol-Myers Squibb Company | Lactam compounds and their use as inhibitors of serine proteases and method |
| NZ517603A (en) | 1999-09-13 | 2003-09-26 | Dimensional Pharm Inc | Azacycloalkanone serine protease inhibitors |
| US6511973B2 (en) | 2000-08-02 | 2003-01-28 | Bristol-Myers Squibb Co. | Lactam inhibitors of FXa and method |
| DE60122750T2 (de) | 2000-09-11 | 2006-12-21 | Genentech, Inc., South San Francisco | Amidin-Inhibitoren von Serin-Proteasen |
| JP2004518688A (ja) | 2001-01-30 | 2004-06-24 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | ファクターＸａ阻害剤のスルホンアミドラクタムおよびその方法 |
| EP1569912B1 (en) | 2002-12-03 | 2015-04-29 | Pharmacyclics, Inc. | 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1h-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor viia inhibitors |
| EP1626966A1 (en) | 2003-05-20 | 2006-02-22 | Genentech, Inc. | Benzofuran inhibitors of factor viia |
| EP1628954A2 (en) | 2003-05-20 | 2006-03-01 | Genentech, Inc. | Acylsulfamide inhibitors of factor viia |
| US7405210B2 (en) * | 2003-05-21 | 2008-07-29 | Osi Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolopyridine-2-carboxylic acid amide inhibitors of glycogen phosphorylase |
| ES2353309T3 (es) | 2004-03-08 | 2011-03-01 | Prosidion Ltd. | Hidrazidas del ácido pirrolopiridin-2-carboxílico como inhibidores de glucógeno fosforilasa. |
| DE602005013275D1 (de) | 2004-12-02 | 2009-04-23 | Prosidion Ltd | Pyrrolopyridin-2-karbonsäureamide |
| US11351149B2 (en) | 2020-09-03 | 2022-06-07 | Pfizer Inc. | Nitrile-containing antiviral compounds |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5037808A (en) * | 1988-07-20 | 1991-08-06 | Monsanto Co. | Indolyl platelet-aggregation inhibitors |
| CA2008116C (en) * | 1989-02-23 | 2001-11-20 | Thomas Weller | Glycine derivatives |
| ZW11290A1 (en) * | 1989-07-14 | 1990-10-31 | Smithkline Beecham Corp | Hemoregulatory peptides |
| US5332726A (en) * | 1989-09-29 | 1994-07-26 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Antithrombotic peptides and pseudopeptides |
| DE69431718T2 (de) * | 1993-04-30 | 2003-07-10 | Merck & Co., Inc. | Thrombin-inhibitoren |
| SE9301916D0 (sv) * | 1993-06-03 | 1993-06-03 | Ab Astra | New peptides derivatives |
| ZA951617B (en) * | 1994-03-04 | 1997-02-27 | Lilly Co Eli | Antithrombotic agents. |
| ZA951618B (en) * | 1994-03-04 | 1996-08-27 | Lilly Co Eli | Antithrombotic agents |
| US5561146A (en) * | 1994-06-10 | 1996-10-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors |
| WO1995035311A1 (en) * | 1994-06-17 | 1995-12-28 | Corvas International, Inc. | 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives as enzyme inhibitors |
| DE4421052A1 (de) * | 1994-06-17 | 1995-12-21 | Basf Ag | Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung |
| JPH0820597A (ja) * | 1994-07-07 | 1996-01-23 | Meiji Seika Kaisha Ltd | トロンビン阻害作用を有する複素環カルボニル化合物 |
| PL320965A1 (en) * | 1994-12-22 | 1997-11-24 | Iaf Biochem Int | Bicyclic thrombin inhibitors of low molecular weight |
| IL120310A (en) * | 1996-03-01 | 2002-02-10 | Akzo Nobel Nv | Serine protease inhibitors and pharmaceuticals containing them |
-
1997
- 1997-02-11 CZ CZ19982565A patent/CZ291690B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-02-11 WO PCT/EP1997/000625 patent/WO1997030073A1/en not_active Application Discontinuation
- 1997-02-11 TR TR1998/01569T patent/TR199801569T2/xx unknown
- 1997-02-11 PL PL97328307A patent/PL328307A1/xx unknown
- 1997-02-11 AU AU16025/97A patent/AU719216B2/en not_active Ceased
- 1997-02-11 NZ NZ331327A patent/NZ331327A/xx unknown
- 1997-02-11 HU HU9901187A patent/HUP9901187A3/hu unknown
- 1997-02-11 CA CA002246256A patent/CA2246256A1/en not_active Abandoned
- 1997-02-11 US US09/125,169 patent/US6034067A/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-02-11 KR KR1019980706157A patent/KR19990082424A/ko not_active Ceased
- 1997-02-11 JP JP9528972A patent/JP2000505437A/ja active Pending
- 1997-02-11 CN CN97192762A patent/CN1212706A/zh active Pending
- 1997-02-11 EP EP97902361A patent/EP1007544A1/en not_active Withdrawn
- 1997-02-11 RU RU98117075/04A patent/RU2191193C2/ru active
- 1997-02-11 BR BR9707501A patent/BR9707501A/pt unknown
- 1997-02-21 TW TW086102133A patent/TW487708B/zh active
-
1998
- 1998-08-12 NO NO983688A patent/NO983688L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL328307A1 (en) | 1999-01-18 |
| BR9707501A (pt) | 1999-07-27 |
| US6034067A (en) | 2000-03-07 |
| HUP9901187A3 (en) | 1999-11-29 |
| AU719216B2 (en) | 2000-05-04 |
| JP2000505437A (ja) | 2000-05-09 |
| WO1997030073A1 (en) | 1997-08-21 |
| CA2246256A1 (en) | 1997-08-21 |
| AU1602597A (en) | 1997-09-02 |
| CN1212706A (zh) | 1999-03-31 |
| KR19990082424A (ko) | 1999-11-25 |
| RU2191193C2 (ru) | 2002-10-20 |
| HUP9901187A2 (hu) | 1999-08-30 |
| EP1007544A1 (en) | 2000-06-14 |
| NZ331327A (en) | 2000-01-28 |
| NO983688D0 (no) | 1998-08-12 |
| CZ291690B6 (cs) | 2003-05-14 |
| NO983688L (no) | 1998-10-12 |
| TR199801569T2 (xx) | 1998-10-21 |
| TW487708B (en) | 2002-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ256598A3 (cs) | Inhibitory serinové proteázy a farmaceutický prostředek | |
| EP0820287B1 (en) | Thrombin inhibitors | |
| RU2178419C2 (ru) | Ингибиторы протеазы серина | |
| EP1100814A2 (en) | Inhibitors of urokinase and blood vessel formation | |
| AU715765B2 (en) | Serine protease inhibitors | |
| KR20010012174A (ko) | 세린 프로테아제 억제제 | |
| AU709088B2 (en) | Thrombin inhibitors | |
| EP0956293B1 (en) | Thrombin inhibitors | |
| RU2172321C2 (ru) | Ингибиторы сериновых протеаз | |
| HK1021541B (en) | Serine protease inhibitors | |
| MXPA98007091A (en) | Inhibitors of protease being | |
| MXPA98007090A (en) | Inhibitors of serine prote | |
| CZ2001276A3 (cs) | Inhibitory urokinázy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 19970211 |