KR20020027639A

KR20020027639A - 아자시클로알카논 세린 프로테아제 억제제

Info

Publication number: KR20020027639A
Application number: KR1020027003241A
Authority: KR
Inventors: 밀러스코트씨; 마루간산체즈주안조제; 하슬로우크리스틴디; 할조나단피
Original assignee: 3-디멘져널 파마슈티칼즈 인코오포레이티드
Priority date: 1999-09-13
Filing date: 2000-09-13
Publication date: 2002-04-13
Also published as: IL148358A0; DE60006407T2; NO20021224D0; ES2209987T3; ATE253558T1; JP2003509409A; NZ517603A; US20030109517A1; NO322753B1; EP1212300A1; CN1373755A; NO20021224L; PL354265A1; EP1212300B1; US6962942B2; HK1050005A1; DE60006407D1; DK1212300T3; BR0013926A; PT1212300E

Abstract

본 발명은 동맥 및 정맥의 혈전 폐색 장애, 염증, 암, 및 신경변성 질환의 치료에 유용한 비펩티드 인자 Xa 억제제를 지시한다. 인자 Xa 억제제는 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 그것의 염으로; 여기서 Q는 페닐, 벤질, 피리딜, 티에닐, 인돌릴, 퀴놀리닐, 벤조티에닐, 비페닐릴, 또는 이미다졸릴이고: 이러한 기는 할로, 트리플루오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬, 메틸렌디옥시, 카르복사미도, 아세트아미도, 또는 아미디노에서 독립적으로 선택된 1이상의 임의의 치환체를 포함할 수 있으며; X는 메틸렌, 카르보닐, 또는 설포닐이고; Z는 메틸렌, 에틸렌 또는 프로필렌이고; M은 메틸렌 또는 에틸렌이고; 그리고 R¹, R²및 R³는 각각 수소 또는 C_1-3알킬이다.

Description

아자시클로알카논 세린 프로테아제 억제제{AZACYCLOALKANONE SERINE PROTEASE INHIBITORS}

프로테아제는 단백질을 단일의 특정 펩티드 결합에서 절단하는 효소이다. 프로테아제는 4개의 특정 분류, 즉 세린, 티올 또는 시스테이닐, 산 또는 아스파틸, 및 메탈로 프로테아제(Cuyperset al.,J.Biol. Chem. 257:7086(1982))로 분류될 수 있다. 프로테아제는 다양한 생물학적 활성, 예를 들어, 소화, 혈병의 생성 및 소멸, 재생 및 외래 세포들과 기관들에 대한 면역반응에 필수적이다. 비정상적인 단백질가수분해는 사람 및 다른 포유동물의 많은 질병 상태와 관련되어 있다. 사람의 중성백혈구 프로테아제, 엘라스틴 가수분해효소 및 카텝신 G는 조직 파괴로 나타나는 질병 상태에 기여하는 것과 관련되어 있다. 이러한 질병 상태는 기종, 류머티스성 관절염, 각막궤양 및 사구체 신장염를 포함한다(Barret, in Enzyme Inhibitors as Drugs, Sandler, ed., University Park Press, Baltimore,(1980)). 플라스민, C-1 에스테르 가수분해효소, C-3 전환효소, 우로키나아제, 플라스미노겐활성제, 아크로신, 및 칼리크레인과 같은 기타의 프로테아제들은 포유동물의 정상적인 생물학적 기능에서 중요한 역할을 한다. 많은 경우에서, 1종 이상의 단백질 가수분해효소의 기능을 혼란시키는 것은 포유동물을 치료하는 과정에서 유익하다.

세린 프로테아제는 엘라스틴 가수분해효소(인간의 백혈구), 카텝신 G, 플라스민, C-1 에스테라아제, C-3 전환효소, 우로키나아제, 플라스미노겐 활성제, 아크로신, 키모트립신, 트립신, 트롬빈, 인자 Xa 및 칼리크레인과 같은 효소를 포함한다.

인간의 백혈구 엘라스틴 가수분해효소는 염증 부위에서 다형핵 백혈구에 의해 분비되고, 따라서 많은 질병 상태의 원인으로 기여한다. 카텝신 G는 또 다른 인간의 중성백혈구 세린 프로테아제이다. 이러한 효소 활성을 억제하는 능력을 갖는 화합물은 응혈, 류머티스성 관절염 및 기타 염증성 질환의 치료 및 기종의 치료에 유용한 항염증 효과를 갖는 것으로 기대된다. 키모트립신과 트립신은 소화효소이다. 이러한 효소들의 억제제는 췌장염 치료에 유용하다. 우로키나아제 및 플라스미노겐 활성제의 억제제는 과도한 세포 성장 질병 상태, 예를 들어 양성 전립선 비대, 전립선 암종 및 건선을 치료하는데 유용하다.

세린 프로테아제 트롬빈은 지혈 및 혈전증에서 핵심적인 역할을 하며, 다인성 단백질로서 혈소판, 내피세포, 평활근 세포, 백혈구, 심장 및 뉴런에서 많은 효과를 야기한다. 내부 경로(접촉 활성) 또는 외부 경로(혈장의 비내피세포 표면에 노출, 혈관벽에의 손상 및 조직 인자의 방출에 의해 활성화)를 통한 응고 캐스케이드의 활성화는 트롬빈을 생성하는 일련의 생화학적 사건을 야기한다. 트롬빈은 궁극적으로 지혈 플러그(혈병 형성)를 야기하는 피브리노겐을 절단하고, 세포 표면 트롬빈 수용체(Coughlin, Seminars in Hematology 31(4):270-277(1994))의 특정 단백질분해 절단를 통해 혈소판을 강하게 활성화시키고, 피드백 메카니즘을 통해 자체의 생산을 자가증대한다. 이렇게, 트롬빈 기능의 억제제는 심혈관 및 비심혈관 질환의 기주에서 잠재적 치료성을 갖는다.

인자 Xa는 응고 경로에서 또 다른 세린 프로테아제이다. 인자 Xa는 인지질막상에서 인자 Va 및 칼슘과 함께 프로트롬비나제 복합체를 형성한다. 이어서 이러한 프로트롬비나제 복합체는 프로트롬빈을 트롬빈으로 전환시킨다(Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436(1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5(Suppl 1):S47-S58(1994)). 인자 Xa의 억제제는 직접적으로 트롬빈을 억제하는 약물에 대해 이점을 제공하는 것으로 생각되며, 이는 직접적인 트롬빈 억제제가 여전히 유의성 있는 새로운 트롬빈의 생성을 허용하기 때문이다(Lefkovits and Topol, Circulation 90(3):1522-1536(1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5(Suppl 1):S47-S58(1994)).

다양한 부류의 구조를 가진 직접적인 트롬빈 억제제는 최근에 확인되었다(Tapparelli et al., Trends in Pharmacological Sciences 14:366-376(1993); Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436(1994); Lefkovits and Topol, Circulation 90(3):1522-1536(1994)). 트롬빈의 활성 자리를 억제함으로써 작용하는 대표적인 화합물로는 α-클로로케톤 D-페닐알라닐-L-프롤릴-L-아르기닐 클로로메틸케톤(PPACK), 보로아르기닌 DUP714,펩티드 아르기날 GYK114766, 원형 펩티드 시클로테오나미드 A 및 B, 벤자미딘 NAPAP, 및 아릴설포닐아르기닌 아르가트로반 등이 있다. 추가적으로 트롬빈 억제 펩티드 히루딘 및 히룰로그는 트롬빈의 활성있는 외부(exosite) 도메인을 통과한다. 펩티드 히루겐 및 단일 가닥 DNA 압타머(aptamer)는 외부부위 점유를 통해 트롬빈을 억제한다. 이러한 종류들의 항트롬빈 약물은 여전히 다음의 가능성 중 하나 이상을 가지고 있다: (1)이러한 약물의 펩티드 또는 올리고뉴클레오티드 성질 또는 약물들의 높은 분자량 또는 전하를 띠는 성질에 기인한 낮은 경구 생체 이용률; (2)과다 출혈 합병증; (3)다른 세린 프로테아제에 대해 트롬빈에 대한 낮은 선택성(다른 세린 프로테아제는 동물 모델에서 심각하고 때로는 치명적인 저혈압 및 호흡기능 저하를 야기할 수 있다); (4)간 독성; (5)비용 효율성.

트롬빈 기능 억제를 위한 또 다른 접근 방법은 인자 Xa를 억제하는 것이다. 인자 Xa는 인지질막성에서 인자 Va 및 칼슘과 함께 프로트롬비나제 복합체를 형성한다. 이러한 프로트롬비나제 복합체는 프로트롬빈을 트롬빈으로 전환시킨다(Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436(1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5(Suppl 1):S47-S58(1994)). 인자 Xa 억제제는 직접적으로 트롬빈을 억제하는 약물에 대해 이점을 제공하는 것으로 생각되며, 이는 직접적인 트롬빈 억제제가 여전히 유의성 있는 새로운 트롬빈의 생성을 허용하기 때문이다(Lefkovits and Topol, Circulation90(3):1522-1536(1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5(Suppl 1): S47-S58(1994)). 실제로, 이미 형성되어 혈병이 풍부한 트롬빈의 재노출보다는 새로운 트롬빈의 계속적인 생성이 재폐색 현상에 부분적으로 원인이 되는 것으로 생각되는데, 이는 트롬빈 생성 표지가 심근경색의 혈전용해 치료 동안 및 그 후에 증가하는 것으로 밝혀졌기 때문이다. 이제 혈전용해와 관련된 증가된 트롬빈 활성은 적어도 트롬빈 새로운 생성에 부분적으로 기인하는 것으로 믿어진다.

특정한 단백질 인자 Xa 억제제, 예를 들어 거머리에서 유래한 119-아미노산 단백질 안티스타신 및 연진드기에서 유래한 단백질 TAP(진드기 항응고 펩티드)는 혈전용해에 부가물로서 제공되었을 때 혈병 용해를 촉진하고 재폐색을 방지한다(Mellott et al., Circulation Research 70:1152-1160(1992); Sitko et al., Circulation 85:805-815(1992)). 1995년 1월 31일에 발행된 미국 특허 번호 5,385,885는 TAP 및 안티스타신 모두의 평활근 세포 증식 억제 활성을 개시한다. 게다가, TAP 및 안티스타신이 실험적으로 재발협착증을 감소시키는 것이 보여졌다. 이러한 결과는 인자 Xa가 재발협착증 과정에서 혈전 형성 효과를 통해 또는 그것의 잠재적인 분열촉진을 통해 역할을 하는 것을 제시한다(Ragosta et al., Circulation 89:1262-1271(1994)). 펩티드 에코틴(ecotin)은 선택적이고 전환 가능하며 단단히 결합되어 있는 인자 Xa의 또 다른 억제제로 강한 항응고 활성(Seymouret al., Biochemistry 33:3949-3959(1994); 1994년 9월 14일 발행된 PCT 출원 공보 WO 94/20535)을 나타낸다. 참진드기, 공주진드기, 및 구충은 혈액을 먹이로 하는 동물로부터 분리된 다른 대표적인 펩티드 인자 Xa 억제제이다(Markwardt, Thrombosis and Hemostasis 72:477-479(1994)).

비펩티드 디아미디노 유도체, 예를 들어 (+)-(2S)-2-[4-[[(3S)-1-아세트이미도일-3-피롤리디닐]옥시]페닐]-3-[7-아미디노-2-나프틸]프로파논산 히드로클로라이드 펜타하이드레이트(DX-9065a)는 항응고 활성을 나타낸다(Tidwellet al., Thrombosis Research 19:339-349(1980); Yamazakiet al., Thrombosis and Hemostasis 72:393-395(1994); Haraet al., Thrombosis and Hemostasis 71;314-319(1994); Nagaharaet al., Journal of Medicinal Chemistry 37:1200-1207(1994)). 또한 페닐알라닌 및 시클로헵타논의 합성 아미디노 유도체는 강한 인자 Xa 억제를 보여주었다(Sturzebecheret al., Thrombosis Research 54;245-252(1989)).

강하고 선택적인, 그리고 현재 이용가능한 프로테아제 억제제보다 더 큰 생체이용률과 더 적은 부작용을 갖는 프로테아제 억제제인 비펩티드 화합물에 대한 필요성은 계속하여 존재한다. 따라서, 강한 억제 능력과 낮은 표유류 독성으로 특징지워지는 새로운 종류의 강한 프로테아제 억제제는 많은 포유동물의 단백질 가수분해 질환 상태 치료를 포함하여 다양한 상태에 대해 잠재적으로 가치있는 치료약물이다.

본 발명은 단백질 가수 분해 효소 억제제, 특히 인자 Xa의 억제를 통한 트롬빈 생산의 새로운 종류의 억제제로 작용하는 신규한 화합물, 그것들의 약학적으로 허용가능한 염, 및 그것들의 약학적으로 허용가능한 조성물에 관한 것이다.

발명의 개요

본 발명은 하기 화학식 Ⅰ의 신규한 화합물에 관한 것이다.

또한 화학식 Ⅰ 화합물의 제조 방법도 제공된다.

본 발명의 신규한 화합물은 프로테아제, 특히 트립신-유사 세린 프로테아제, 예를 들어, 키모트립신, 트립신, 트롬빈, 플라스민 및 인자 Xa의 강한 억제제이다.특정 화합물은 인자 Xa의 선택적인 억제를 통해 간접적인 항혈전 활성을 나타내거나, 또는 항혈전 활성을 갖는 화합물을 형성하는데 유용한 매개물이다. 또한 화학식 Ⅰ 화합물의 유효량을 투여함으로서 포유동물에서의 비정상적인 단백질 가수분해를 억제하거나 치료하는 방법 및 포유동물에서의 혈전증, 허혈, 졸증, 재발협착증 또는 염증을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명은 혈전증, 허혈, 졸증, 재발협착증 또는 염증을 치료하기 위해 약학적으로 허용가능한 담체에 본 발명의 화합물을 함유하는 조성물을 포함한다. 이러한 조성물은 임의적으로 항응고약제, 항혈소판제 및 혈전용해제를 포함한다. 조성물은 원하는 억제효과를 얻기 위해서 혈액, 혈액 제재, 또는 포유동물의 기관에 첨가될 수 있다.

발명의 상세한 설명

본 발명의 첫번째 측면은 하기 화학식 Ⅰ의 신규 화합물 또는 그것의 약학적으로 허용가능한 염이고;

여기서 Q는 C_6-14아릴, C_6-14아르(C_1-4)알킬, C_6-14아르(C_2-4)알케닐, 피리딜, 티에닐, 인돌릴, 퀴놀리닐, 벤조티에닐, 또는 이미다졸릴이고; 이들 중에서는 할로, 트리플로오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬,메틸렌디옥시, 카르복시아미노, C_1-4알콕시카르보닐아미노, C_6-10아릴옥시카르보닐아미노, C_7-11아랄콕시카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디- (C_1-4)알킬아미노카르보닐, 아세트아미도, 아미디노, 피리딜, 나프틸, 피리미디닐, 알케닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노, 또는 그것들의 조합으로부터 독립적으로 선택된 1이상의 임의의 치환체를 포함할 수 있으며;

X는 메틸렌, 카르보닐, 또는 설포닐이고;

R¹은 수소 또는 C_1-3알킬이고;

n은 1, 2 또는 3이고;

m은 1-4, 바람직하게는 1 또는 2이고;

R²는 수소 또는 C_1-3알킬이고;

R³는 수소 또는 C_1-3알킬이고; 그리고

R⁴, R⁵및 R⁶는 독립적으로 수소, 히드록시, C_1-6알킬, C_1-6알콕시, 시아노 또는 -CO₂R^w이고, 여기서 R^w는 각각의 경우에서 바람직하게는 C_1-4알킬, C_4-7시클로알킬,벤질 중의 하나이거나, R^w는 하기 구조식 중의 하나이고,

여기서 R^d, R^e및 R^g는 각각 수소, R^f는 메틸이고, R^h는 벤질 또는 tert-부틸이다.

Q의 선호되는 밸류는 페닐, 비페닐, 또는 나프틸과 같은 아릴; 또는 벤질, 페네틸 또는 나프틸메틸과 같은 아랄킬; 또는 티에닐을 포함한다. 이러한 기는 상기 정의된 것처럼 임의로 치환될 수 있다.

적당한 밸류는 나프트-1-일, 나프트-2-일, 5-디메틸아미노나프트1일, 6-클로로나프트2일, 6-브로모나프트-2-일, 벤질, 2-니트로벤질, 페닐, 2-메틸페닐, 3-메틸페닐, 4-(n-프로필)페닐, 4-(t-부틸)페닐, 4-(t-아밀)페닐, 4- 메톡시페닐, 4-이오도페닐, 4-플로오로페닐, 4-클로로페닐, 3,4-디클로로페닐, 4-니트로페닐, 4-메틸페닐, 4-에틸페닐, 4-에테닐페닐, 3,4-디메톡시페닐, 및 2-페닐에테닐을 포함한다.

추가적인 적당한 밸류는 4-(2-메틸페닐)페닐, 4-(2-메톡시페닐)페닐, 4-(3-클로로페닐)페닐, 4-(3-플루오로페닐)페닐, 4-(3-메톡시페닐)페닐, 4-(4-플루오로페닐)페닐, 4-(4-메틸페닐)페닐, 4-(4-메톡시페닐)페닐, 4-(2,4-디플루오로페닐)페닐, 4-(3,4-디클로로페닐)페닐, 4-(3,4-디메톡시페닐)페닐, 4-나프트-2-일페닐, 4-피리드-4-일페닐, 4-피리드-2-일페닐, 비페닐{(4-페닐)페닐}, 4-(4-클로로페닐)페닐, 4-피리미딘-5-일페닐, 및 5-(피리드-5-일)티엔-2-일을 포함한다.

n의 선호되는 값은 1 및 2이다.

X의 선호되는 값은 SO₂또는 C(O)이고, SO₂가 가장 선호된다.

m의 선호되는 값은 1 또는 2를 포함하고, 1이 가장 선호된다.

R¹, R²및 R³에 대한 적당한 밸류는 수소, 메틸, 에틸, n-프로필 및 이소프로필을 포함한다. 가장 바람직하게는 각각의 R¹, R²및 R³가 수소이다.

R⁴, R⁵및 R⁶의 적당한 밸류는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, n-부틸, 하이드록시, 메톡시, 에톡시, 시아노, -CO₂CH₃, -CO₂CH₂CH₃및 -CO₂CH₂CH₂CH₃를 포함한다. 가장 선호되는 구체예에서, R⁴, R⁵및 R⁶는 각각 수소이다.

본 발명의 선호되는 하위 종류의 화합물은 화학식 Ⅰ 중에서 다음과 같은 것들이다.

Q는 페닐, 비페닐릴, 나프틸 벤질, 페네틸, 나프틸메틸, 또는 티에닐이고, 더욱 바람직하게는 페닐 또는 비페닐이고, 이러한 기는 할로, 트리플루오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬, 메틸렌디옥시, 카르복시아미노, C_1-4알콕시카르보닐아미노, C_6-10아릴옥시카르보닐아미노, C_7-11아랄콕시카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디- (C_1-4)알킬아미노카르보닐, 아세트아미도, 아미디노, 피리딜, 나프틸, 피리미디닐, 알케닐, 모노- 또는 디- (C_1-4)알킬아미노로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3의 임의의 치환체에 의해 임의로 치환될 수 있으며;

X는 카르보닐 또는 설포닐이고, 설포닐이 더 바람직하며;

n은 1 또는 2이고;

m은 1 또는 2이고, 1이 더 바람직하며;

R¹, R²및 R³는 수소이고; 그리고,

R⁴, R⁵및 R⁶는 독립적으로 수소, 히드록시, C_1-6알킬, C_1-6알콕시, 시아노 또는 -CO₂R^w이고, 여기서 R^w는 각각의 경우에서 C_1-4알킬, C_4-7시클로알킬, 벤질 중의 하나인 것이 바람직하거나 R^w가 하기 화학식 중에 하나이고,

여기서 R^d, R^e및 R^g는 각각 수소이고, R^f는 메틸이고, R^h는 벤질 또는 tert-부틸이다.

발명의 범위 내에 있는 화합물은 실시예에서 설명된다.

또한 본 발명은 광학적 이성체 뿐만 아니라 입체이성질체, 예를 들어 본 발명에서 선택된 일련의 화합물에서 구조적 비대칭의 결과로 일어나는 개개의 거울상이성질체 뿐만 아니라 거울상이성질체의 혼합물 및 부분입체의 포함도 고려하는 것으로 이해된다.

화학식 Ⅰ의 화합물은 또한 용매화, 특히 수화될 수 있다. 수화는 화합물 또는 그 화합물을 포함하는 조성물을 제조하는 동안 일어날 수 있고, 또는 화합물의 흡습성에 기인하여 제조 후에도 일어날 수 있다.

화학식 Ⅰ의 범위내에 있는 특정 화합물은 전구약물로 언급되는 유도체이다. "전구약물"이라는 표현은 직접 작용하는 공지 약물의 유도체를 말하고, 이 유도체는 약물과 비교하여 볼 때 전달성 및 치료적 가치를 향상시키고, 효소적 또는 화학적 과정에 의하여 활성 약물로 전환된다. 유용한 전구약물는 R⁴, R⁵및/또는 R⁶가 -CO₂R^w이고, R^w는 상기에서 정의되었다.

임의의 조성물 또는 화학식 Ⅰ에서 임의의 변수가 한 번 이상 발생했을 때, 각각의 경우에 그것의 정의는 각각의 다른 경우에서 그것의 정의와 독립적이다. 또한, 치환체 및/또는 변수의 조합은 그러한 조합의 결과로 안정한 화합물이 될 때에만 허용가능하다.

단독으로 또는 다른 기의 일부로 본 명세서에 기재된 "알킬"이라는 용어는, 쇄의 길이가 제한되지 않는다면, 10이하 탄소의 직선형 및 분지형쇄 라디칼을 말하고, 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, t-부틸, 이소부틸, 펜틸, 헥실, 이소헥실, 헵틸, 4,4-디메틸펜닐, 옥틸, 2,2,4-트리메틸펜틸, 노닐, 또는 데실이 있다.

"알케닐"이라는 용어는, 쇄의 길이가 제한되지 않는다면, 2-10 탄소원자의직선형 및 분지형쇄 라디칼의 의미로 본 명세서에서 사용되었고, 예로는 에테닐, 1-프로페닐, 2-프로페닐, 2-메틸-1-프로페닐, 1-부테닐, 2-부테닐, 및 기타 이와 유사한 것이 있으며, 예는 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는 알케닐쇄는 2 내지 8 탄소 원자 길이이고, 가장 바람직하게는 2 내지 4 탄소 원자 길이이다.

"알키닐"이라는 용어는, 쇄의 길이가 제한되지 않는다면, 2-10 탄소 원자의 직선형 또는 분지형쇄를 기본으로 하는 의미로 본 명세서에서 사용되었고, 여기에는 쇄에서 2개의 탄소원자 사이에 1이상의 삼중 결합이 있으며, 예로는 아세틸렌, 1-프로필렌, 2-프로필렌 및 기타 이와 유사한 것을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 알키닐쇄는 2 내지 8 탄소 원자 길이인 것이 바람직하며, 2 내지 4 탄소 원자 길이가 가장 바람직하다.

알케닐 또는 알키닐 부분이 치환기로 있는 본 명세서의 모든 예에서, 불포화 결합, 즉, 비닐렌 또는 아세틸렌 결합은 질소, 산소 또는 황의 부분에 직접 결합되지 않는 것이 바람직하다.

"알콕시"라는 용어는 산소 원자와 결합한 임의의 상기 알킬기을 말한다.

본 명세서에서 독자적으로 또는 다른 기의 일부로 기재된 "아릴"이라는 용어는 고리 부분에서 6 내지 12 탄소, 바람직하게는 6내지 10탄소를 포함하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족기을 말하고, 예로는 페닐, 비페닐, 나프틸 또는 테트라히드로나프틸이 있다.

본 명세서에서 독자적으로 또는 다른 기의 일부로 기재된 "아랄킬" 또는 "아릴알킬"이라는 용어는 C_1-6알킬기를 말하며 이는 아릴 치환체, 예를 들면, 벤질, 페닐에틸 또는 2-나프틸메틸을 가지는 것으로 상기에서 논의된 것이다.

본 명세서에 기재된 "헤테로아릴"이라는 용어는 5 내지 14의 고리 원자; 고리 배열로 공유된 6, 10 또는 14π원자를 가지고; 그리고 탄소 원자 및 1, 2 또는 3 산소, 질소 또는 황 이종원자를 포함하는 기를 말한다(여기서 헤테로아릴기의 예로는 티에닐, 벤조[b]티에닐, 나프토[2,3-b]티에닐, 티안트레닐, 푸릴, 피라닐, 이소벤조푸라닐, 벤족사졸릴, 크로메닐, 크산테닐, 페녹사티이닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 인돌리지닐, 이소인돌릴, 3H-인돌릴, 인돌릴, 인다졸릴, 푸리닐, 4H-퀴놀리지닐, 이소퀴놀릴, 퀴놀릴, 프탈라지닐, 나프티리디닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 프테리디닐, 4αH-카바졸릴, 카바졸릴, β-카볼리닐, 페난트리디닐, 아크리디닐, 페리미디닐, 페난트롤리닐, 페나지닐, 이소티아졸릴, 페노티아지닐, 이속사졸릴, 푸라자닐 및 페녹사지닐기가 있다).

본 명세서에서 독자적으로 또는 다른 기의 일부로 기재된 "시클로알킬"이라는 용어는 3 내지 9 탄소 원자를 포함하는 시킬로알킬기를 말한다. 전형적인 예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸 및 시클로노닐이 있다.

본 명세서에 독자적으로 또는 다른 기의 일부로 기재된 "할로겐" 또는 "할로"라는 용어는 염소, 브롬, 플루오르 또는 요오드를 말하며, 염소가 선호된다.

본 명세서에서 독자적으로 또는 다른 기의 일부로 기재된 "모노알킬아민"이라는 용어는 1 내지 6 탄소 원자를 갖는 하나의 알킬기로 치환된 아미노기를 말한다.

본 명세서에서 독자적으로 또는 다른 기 일부로 기재된 "디알킬아민"이라는 용어는 각각 1 내지 6 탄소 원자를 갖는 2개의 알킬기로 치환된 아미노기를 말한다.

본 명세서에 기재된 "히드록시알킬"은 1이상의 히드록실기에 의해 치환된 상기 중 임의의 알킬기를 말한다.

본 명세서에 기재된 "카르복시알킬"이라는 용어는 1이상의 카르복실산에 의해 치환된 상기 중 임의의 알킬기를 말한다.

"이종원자"라는 용어는 본 명세서에서 산소 원자("O"), 황 원자("S") 또는 질소 원자("N")를 의미한다. 이종원자가 질소일 때, NR^aR^b부분을 형성하게 될 것이고, 여기서 R^a및 R^b는 서로 독립적으로 수소 또는 C₁내지 C₈알킬이거나, 그것들이 결합된 질소와 함께 포화된 또는 불포화된 5-, 6-, 또는 7- 원 고리를 형성한다.

본 명세서에 사용된 "t-Am"라는 약자는 구조식 CH₃CH₂(CH₃)₂C-을 갖는 활성있는 아밀 부분을 말한다.

화학식 Ⅰ의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염(수용성 또는 지용성, 또는 분산 가능한 제품의 형태로)은 통상적인 비독성 염 또는 예를 들어, 무기 또는 유기 산 또는 염기로부터 형성된 4원소 암모니아 염을 포함한다. 그러한 산 부가 염의 예는 아세트산염, 아디프산염, 알긴산염, 아스파트산염, 벤조산염, 벤젠설폰산염, 비설폰산염, 부틸산염, 시트르산염, 캄포르산염, 캄포설폰산염, 시클로펜탄프로피온산염, 디글루콘산염, 도데실설페이트, 에탄설폰산염, 퓨마르산염, 글루코헵타노산염, 글리세로인산염, 헤미설페이트, 헵타노산염, 헥산염, 염화수소, 브롬화수소, 요오드화수소, 2-히드록시에탄설폰산염, 락테이트, 말리에이트, 메탄설폰산염, 2-나프탈렌설폰산염, 니코틴산염, 질산염, 옥살산염, 파모산염, 펙틴산염, 퍼설페이트, 3-페닐프로피온산염, 피크르산염, 피발산염, 프로피온산염, 숙신산염, 황산염, 타르타르산염, 티오시안산염, 토실산염 및 언데카논산염을 포함한다. 염기 염은 암모늄 염, 나트륨 및 칼륨 염과 같은 알칼리 금속 염, 칼슘 및 마그네슘 염과 같은 알칼리 토금속 염, 디시클로헥실아민염과 같은 유기 염기를 갖는 염, N-메틸-D-글루카민, 및 아르기닌, 리신 기타 아미노산을 갖는 염을 포함한다. 또한, 염기성 질소-포함 기는 더 낮은 알킬 할로겐 화합물, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸 클로라이드, 브로마이드 및 아이오다이드; 디알킬 설페이트, 예를 들어 디메닐, 디에틸, 디부틸; 그리고 디아밀 설페이트, 장쇄 할라이드, 예를 들어 데실, 하우릴, 미리스틸 및 스테릴 클로라이드, 브로마이드 및 아이오다이드, 아랄킬 할라이드 예를 들어, 벤질 및 페테틸 브로마이드 등으로 4차염화될 수 있다. 산 부가 염을 형성하는데 선호되는 산은 HCl, 아세트산, 트리플루오로아세트산 및 퓨마르산을 포함한다.

본 발명의 두번째 측면은 혈전증, 허혈, 졸증, 재발협착증 또는 염증을 치료하는 방법으로 이는 상기 치료를 위해 화학식 Ⅰ 화합물의 치료적으로 또는 예방적으로 유효량을 포유동물에게 투여하는 것을 포함한다.

본 발명의 화합물은 금속, 산, 티올 및 세린 프로테아제에 대한 신규한 종류의 강한 억제제를 나타낸다. 본 발명 범위내의 화합물에 의해 억제되는 세린 프로테아제의 경우에는 중성백혈구 엘라스틴 가수분해효소, 기종의 병인와 관계된 단백질 가수분해효소; 키모트립신 및 트립신, 소화효소; 췌장 엘라스틴 가스분해효소, 및 카텝신 G, 백혈구와 관련된 키모트립신-유사 프로테아제; 트롬빈 및 인자 Xa, 혈액 응고 경로에서의 단백질 가수분해효소를 포함한다. 테르몰리신, 금속 프로테아제 및 펩신, 산 프로테아제의 억제에도 또한 본 발명의 화합물 사용이 고려되고 있다. 본 발명의 화합물은 트립신-유사 프로테아제를 억제하도록 하는 것이 바람직하다.

본 발명의 화합물은 트롬빈 및/또는 플라스민과 비교하여 선택적으로 인자 Xa를 억제하는 능력에 의해 구별된다. 인자 Xa 억제제로서, 본 발명의 화합물은 트롬빈 생산을 억제한다. 그래서, 그 화합물은 트롬빈의 생산 또는 작용과 연관된 비정상적인 정맥 또는 동백 혈전증의 특징을 갖는 상태의 치료 또는 예방에 유용하다. 이러한 상태의 예로는 심한 정맥 혈전증; 패혈성 쇼크, 바이러스 감염 및 암에 의해 발생하는 파종성 혈관내 응고병증; 심근경색증; 졸증; 관상동맥바이패스; 요관절 교체; 및 혈전용해 치료 또는 경피 경관 관상동맥 성형술(PCTA)의 결과로 발생하는 혈전의 형성이 있으며, 이러한 예에 한정되지는 않는다. 본 발명의 화합물은 또한 체외 혈액순환에서 항응고약제로 사용될 수 있다. 평활근 세포, 내피세포및 중성백혈구와 같은 다수의 세포종류에서, 인자 Xa와 트롬빈 둘다의 효과에 의해, 본 발명의 화합물은 성체의 호흡곤란 증후군; 염증반응, 예를 들어, 부종; 재관류 손상; 죽상경화증; 및 손상 후의 재발협착증, 예를 들어, 풍선 혈관확장, 아테렉토미(atherectomy), 및 동맥 스텐트 플레이스먼트(arterial stent placement) 의 치료 또는 예방에서 부가적인 용도를 찾았다.

본 발명의 화합물은 알츠하이머 질환 및 파킨슨 질환과 같은 신경변성 질환 뿐만 아니라 종양 형성 및 전이를 치료하는데 유용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 조직 플라스미노겐 활성제, 스트렙토키나아제 및 우로키나아제와 같은 혈전용해제와 조합하여 사용될 수 있다. 게다가, 본 발명의 화합물은 다른 항혈전 또는 항응고 약물, 예를 들어, 피브리노겐 길항제 및 트롬복센 수용체 길항제와 조합하여 사용될 수 있으며, 이 예들에 한정되지 않는다.

트롬빈 억제능력에 의해 구별되는 본 발명의 화합물은 많은 치료적 목적으로 사용될 수 있다. 트롬빈 억제제로서, 본 발명의 화합물은 트롬빈 생산을 억제한다. 그래서, 이러한 화합물은 트롬빈의 생산 또는 작용에 연관된 비정상적인 정맥 또는 동백 혈전증으로 특징지워지는 상태의 치료 또는 예방을 위해 유용하다. 이러한 상태의 예로는 심한 정맥 혈전증; 패혈성 쇼크, 바이러스 감염 및 암에 의해 발생하는 파종성 혈관내 응고병증; 심근경색증; 졸증; 관상동맥바이패스; 눈에서의 피브린 형성; 요관절 교체; 및 혈전용해 치료 또는 관상 동맥 성형술(PCTA)의 결과로 인한 혈전 형성이 있으며, 예는 이에 한정되지 않는다. 다른 용도로는 도관과 같은 혈액 수집, 혈액 순환, 및 혈액 저장에 사용되는 장치, 혈액 투석기, 혈액 수집주사기 및 튜브, 및 혈족계의 제작에 사용되는 물질에 함몰되어 있거나 물리적으로 연결되어 있는 항응고약제와 같이 상술한 트롬빈 억제제로의 용도가 있다. 본 발명의 화합물은 또한 체외 혈액 순환에서 항응고약제로 사용될 수 있다.

평활근 세포, 내피 세포 및 중성백혈구와 같은 다양한 세포 종류에서 트롬빈의 효과에 의해, 본 발명의 화합물은 성체 호흡곤란 증후군; 염증반응; 상처 치료; 재관류 손상; 죽상 경화증; 및 손상 후의 재발 협착증, 풍선 혈관확장, 아테렉토미, 및 동맥 스텐트 플레이스먼트의 치료 또는 예방에서 추가적인 용도를 발견하였다.

본 발명의 화합물은 알츠하이머 질환 및 파킨슨 질환과 같은 신경변성 질환 뿐만 아니라 종양 및 전이를 치료하는데 유용할 수 있다.

인자 Xa 억제제로 사용할 때, 본 발명의 화합물은 체중 Kg당 약 0.1 내지 약 500mg/kg의 투약범위 내, 바람직하게는 0.1 내지 10mg/kg사이의 유효량을 매일 1회 내지 2-4회 분할 처방으로 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 본 발명의 화합물로 유익한 효과를 받을 수 있는 임의의 동물에게 투여될 수 있다. 그러한 동물 중에 중요한 예는, 비록 본 발명이 그에 한정되는 것은 아니지만, 인간이다.

본 발명의 약학적 조성물은 그것들의 의도된 목적을 성취시키는 임의의 방법으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 투약은 비경구, 피하, 정맥, 근육내, 복강내, 경피, 협측, 또는 안구 경로에 의해서 될 수 있다. 이에 대신하여 또는 함께, 투여는 경구로 이루어질 수도 있다. 투여량은 수용체의 나이, 건강, 및 체중, 동시 치료가있는 경우의 동시 치료의 종류, 치료의 빈도, 및 바라는 효과의 성질에 의존할 것이다.

약학적으로 활성이 있는 화합물에 더하여, 새로운 약학적 제제는 부형제 및 보조제을 포함하는 약학적으로 허용가능한 적당한 담체를 함유할 수 있는데, 이는 활성있는 화합물을 약학적으로 사용될 수 있는 제제로 가공하는 것을 용이하게 한다.

본 발명의 약학적 제제는 공지의 방법으로 조제될 수 있는데, 예를 들어, 일반적인 혼합, 입화, 당의정 제조, 용해, 또는 동결건조 처리의 방법에 의한 것이 있다. 이렇게, 경구 투여를 위한 약학적 제제는 활성있는 화합물을 고체 첨가제와 혼합하고, 고형 첨가제는 원하거나 필요하다면 정제 또는 당의정을 얻기 위해 적당한 보조제를 첨가한 후 임의로 그 혼합물을 갈고 과립의 혼합물을 처리함으로써 얻어질 수 있다.

특별히 적당한 부형제는 녹말풀(재료의 예로는 옥수수 녹말, 밀 녹말, 쌀 녹말, 감자 녹말, 젤라틴, 트라거캔스고무, 메틸 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸세룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈)과 같은 바인더 뿐만 아니라 충전제, 예를 들어, 당류, 예로서 락토스 또는 슈크로스, 만니톨 또는 소리비톨, 셀룰로스 제제 및/또는 인산칼슘, 예를 들어, 인산 트리칼슘 또는 수소인산칼슘이다. 원한다면, 붕해제를 첨가시킬 수 있는데, 예를 들면, 상술한 녹말과 카르복시메틸-녹말, 교차 결합된 폴리비닐 피롤리돈, 아가, 또는 알긴산 또는 그것들의 염, 예를 들면, 알긴산 나트륨이 있다. 보조제는 특히 순환조절 약제 및 윤활제, 예를 들면, 규소, 활석, 스테아르산 또는 그것들의 염, 예를 들면, 마그네슘 스테아르산염 또는 칼슘 스테아르산염, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜이다. 원한다면, 당의정은 적당한 코팅과 함께 제공되고, 이는 위액에 대해 저항성이 있다. 이러한 목적을 위해, 농축된 당류 용액이 사용될 수 있고, 이는 임의로 아라비아 고무, 활석, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜, 및/또는 티타늄 이산화물. 락카 용액 및 적당한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 포함한다. 위액에 저항성이 있는 코팅을 생산하기 위해서, 적당한 셀룰로오스 제조물 용액, 예를 들면, 아세틸셀룰로우스 프탈레이트 또는 히드록시프로필메틸-셀룰로스 프탈레이트가 사용된다. 염료 재료 또는 색소는 정제 또는 당 코팅에 추가 될 수 있는데, 이는 예를 들어 활성 화합물의 조합을 동정 또는 특징화하기 위한 것이다.

경구로 사용될 수 있는 다른 약학적 제제는 젤라틴 및 가소제, 예를 들어 글리세롤이나 소르비톨로 만들어진 부드럽고, 봉해진 캡슐 뿐만 아니라 젤라틴으로 만들어진 푸쉬핏(pushfit) 캡슐을 포함한다. 푸쉬핏 캡슐은 락토스와 같은 충전제, 녹말과 같은 바인더, 및/또는 활석이나 마그네슘 스테아르산염과 같은 윤활제 및 임의의 안정제와 혼합될 수 있는 과립형태로 활성있는 화합물을 함유할 수 있다. 부드러운 캡슐에서, 활성 화합물은 바람직하게도 지방유나 유동 파라핀과 같은 적당한 액체에서 용해되거나 부유한다. 여기에 안정제가 첨가될 수 있다.

비경구 투여를 위한 적당한 제형은 수용성 형태, 예를 들면, 수용성 염, 알칼리 용액 및 시클로덱스트린 봉입 복합체인 활성 화합물의 수성 용액을 포함한다. 특별히 선호되는 알칼리 염은 제조된 암모늄염, 예를 들면 Tris, 클로린 히드록시드, Bis-Tris 프로판, N-메틸글루카민, 또는 아르기닌이다. 1이상 변형된 또는 비변형된 시클로덱스트린은 본 발명의 화합물의 수 용해도를 유지하고 증가시키기 위해 사용된다. 이러한 목적을 위해 유용한 시클로덱스트린은 미국 특허 번호 4,727,064, 4,764,604, 및 5,024,998에 개시되어 있다.

게다가, 적절한 지성 주사 부유물과 같이 활성 화합물의 부유물이 투여될 수 있다. 적당한 친유성 용매 또는 매개물은 지방유, 예를 들면 참깨유, 또는 합성 지방산 에스테르, 예를 들면 에틸 올레산염 또는 트리글리세리드 또는 폴리에틸렌 글리콜-400(본 화합물은 PEG-400에서 용해된다)을 포함한다. 수성 주사 부유물은 부유의 점성을 증가시키는 물질, 예를 들면 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 소르비톨, 및/또는 덱스트란을 함유할 수 있다. 임의로, 상기 부유물는 또한 안정제를 함유할 수 있다.

본 발명은 또한 하기 화학식 Ⅱ의 화합물을 결합시키거나 농축시키는 것을 포함하는 화학식 Ⅰ의 화합물 또는 그것의 염을 제조하는 방법에 관한 것으로서,

여기서 R⁴, R⁵, 및 R⁶는 본 명세서에 정의된 것이거나 하기 화학식 Ⅲ의 화합물로 임의로 보호된 것이고, m은 본 명세서에서 정의된 것이며,

R⁵¹은 H 또는 Q-X-, 여기서 Q, X, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, 및 R⁶는 본 명세서에서 정의되었다. 일반적으로, R⁴, R⁵, 및 R⁶기는 수소 또는 아미노 보호기일 수 있다.

본 발명의 하기 반응식에 따라서 합성될 수 있다.

하기 방법에서 사용되는 시약 및 초기 물질은 올드리치, 어드벤스트 켐 테크, 바켐, 시그마, 플루카 등의 화학물질 제조사로부터 구입할 수 있다. 이러한 화합물의 합성 도중, 작용기는 교차 반응을 방해하는 블라킹 그룹(blocking group)에 의해 보호될 수 있다. 적절한 블라킹 그룹 및 그것의 용도의 예는 Greene,T.W. and Wuts,P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd, John Wiley & Sons, New York, NY(1991)에 개시되어 있다. 블라킹 그룹은 또한 보호기로써 본 명세서에 기재되어있다.

반응식 1은 화학식 Ⅱ의 아미노알콕시구아니딘 출발 물질을 제조하기 위한 합성 단계를 설명한다. 본 반응식에서 변수 "m"은 1 내지 8, 바람직하게는 1 또는 2의 값을 가진다. 이 반응식에서 합성 단계는 1999년 6월 3일 발행된 PCT 출원공보 WO99/26926에서 더 상세히 설명되며 실시예 1 및 실시예 2에서 예시된다.

1-위치에 카르복시케틸기를 가지며 및 3-위치에 적당한 보호기 P^b를 갖는 아미노기를 갖는 γ- 및 δ-락탐 출발 물질Ⅲ의 제법은 이미 문헌 [Freidinger et al.,J.Org.Chem.47:104-109(1982)]에 개시되었다. 유사한 7-원 고리 락탐도 또한 개시되었다(Semple,J.E.et.al.,J.Med.Chem.39:4531-4536(1996)). 대체방안으로, δ-락탐은 아미드 결합시약, 예를 들어 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 히드로클로라이드를 사용하여 α-아미노기상에 적당한 보호기를 가진 오르니틴의 고리화에 의해 합성될 수 있다. 그리고 카르복시메틸기는 테트라히드리푸란 또는 N,N-디메틸포름아미드와 같은 용매에서 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드와 같은 염기를 사용하여 α-브롬아세트산 에스테르로 알킬화함으로써 만들어질 수 있으며, 이어서 수성 메탄올성 수산화물로 설폰화된다. 유사한 γ-락탐은 또한 α-아미노 및 α-카르복시기상에 적당한 보호기를 갖는 글루탐산의 γ-카르복실기에서 변형된 커티어스 타입 재배열(Curtius-type rearrangement)에 의해 합성될 수 있으며, 이는 Scholtz and Bartlett에 의해 문헌[Synthesis:542-544(1989)]에 기재된 것과 유사하다. 이어서, 자발적인 고리화는 생성된 γ-아미노 보호기의 제거 및 자유 염기로의 전환(필요한 경우)에 의해 일어난다. 카르복시메틸 측쇄의 도입은 상술한 것과 같이 수행될 수 있다.

반응식 2는 화학식 Ⅱ 및 Ⅲ의 출발 물질의 결합에 의해 개시되는 본 발명 화합물의 합성에서 결합 단계를 도시하고 있다. 출발 물질은 표준 결합 시약, 예를 들어 N,N'-디시클로헥실카보디이미드 및 기타 잘 알려진 시약을 사용하여 결합될 수 있으며, 이는 문헌 [The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Gras, E. et al., eds., Academic Press, New York, NY(1979-1987), Volumes 1 내지 8]에 개시되어 있다. 이후, 보호기 P^b는 문헌 [Greene, T.W. 및 Wuts, P.G.M., ProtectiveGroups in Organic Synthesis, 2nd, John Wiley & Sons, New York, NY(1991)]에서 개시된 조건을 이용하여 제거될 수 있다. 결과물인 아민은 메틸렌 클로라이드와 같은 불활성 용매, 바람직하게는 피리딘, 트리에틸아민 기타 유기 염기의 존재하에서, 설포닐 클로라이드와 함께 아실화될 수 있다. 보호기 R⁵및 R⁶의 제거는 문헌 [Greene, T.W. 및 Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd, John Wiley & Sons, New York, NY(1991)]에 개시된 방법으로 수행되며, 이에 의해 최종 화합물이 제공된다.

다음의 실시예들은 본 발명의 방법 및 조성물을 설명하고 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 본 기술분야의 당업자에게 일반적으로 일어나고 자명한 다양한 조건 및 변수의 다른 적절한 변형 및 개조는 본 발명의 사상 및 범위 내이다.

실시예 1

2-{(3S)-3-[(2-나프틸설포닐)아미노]-2-옥소피페리딜}-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

1. N-((3S)-2-Oxo(3-피페리딜))(페닐메톡시)카르복아미드

1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 염화수소(7.2g, 37.6mmol)은 아세토니트릴(200mL) 중의 1-히드록시벤조트리아졸(5.1g, 37.6mmol), N^α-벤질옥시카르보닐-L-오르니틴(10g, 37.6mmol), 및 4-메틸모르폴린(4.1mL, 37.6mmol) 용액에 일부분으로 첨가되었다. 밤새 저은 후에 녹지 않는 흰 고체는 여과하여 버렸다. 여과액은 진공에서 농축시켰고 잔류물은 메틸렌 클로라이드에 용해시키고 묽은 수성 HCl 및 묽은 수성 NaHCO₃로 순차적으로 씻어냈다. 분리된 유기층은 건조시키고(MgSO₄), 여과한 후, 진공에서 농축시켜 흰 고체(7.0g, 75%)를 얻었다.¹H-NMR(300MHz, CDCl₃)δ7.34(m, 5H), 6.20(bs, 1H), 5.76(bs, 1H), 5.11(s, 2H), 4.10(m, 1H), 3.32(m, 1H), 2.50(m, 1H), 1.92(m, 2H), 1.61(m, 1H).

2. 2-{(3S)-2-옥소-3-[(페닐메톡시)카르보닐아미노]피페리딜}아세트산

리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(20.8mL, 테트라히드로푸란 중의 1.0M)를 테트라히드로푸란(20mL) 중 선행된 실험의 산물(4.7g, 18.9mmol)의 빙냉 용액으로 적가하였다. 완전한 첨가 후에, 에틸 브로모아세테이트(15.8g, 94.5mmol)을 그 혼합물에 떨어뜨렸다. 30분간 저은 후, 에틸렌디아민(10mL)을 첨가시키고 30분간 계속해서 더 저었다. 그 혼합물을 진공에서 농축시키고, 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드에 녹이고 묽은 수성 HCl으로 씻어냈다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 산물을 메탄올(25mL)에 용해시키고 1.0M NaOH(50mL)을 첨가하였다. 30분간 저은 후에, 메탄올을 진공에서 증발시키고 결과물인 염기성 수용액을 메틸렌 클로라이드(3×100mL)로 추출하였다. 그 후에 액체층을 1.0N HCl을 가지고 산성화시켜 pH1을 만들고, 메틸렌 클로라이드를 가지고 추출하였다. 유기 추출물을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과하고, 진공에서 농축하여 표제 화합물(5.7g, 98%)을 얻었다. 더 이상의 정제는 불필요하였다.

3. tert-부틸-3-{[2-(2-{(3S)-2-옥소-3-[(페닐메톡시)카르보닐아미노]피페리딜}아세틸아미노)에톡시]-아미노}}-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트

벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트(5.25g, 12mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(40mL) 중의 선행 실험의 산물(3.0, 9.9mmol), tert-부틸3-[(2-아미노에톡시)아미노]-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트(3.5g, 9.9mmol), 및N,N-디이소프로필에틸아민(3.45mL, 19.8mmol) 용액에 일부분으로 첨가시켰다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 메틸렌 클로라이드로 희석시키고 묽은 수성 HCl 및 묽은 수성 NaHCO₃으로 순차적으로 씻어냈다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켜서 다음 단계에서 재료로 사용될 비순수 물질(7.0g)로서의 표제 화합물을 얻었다.

4. tert-부틸-3-({2-[2-((3S)-3-아미노-2-옥소피페리딜)아세틸아미노]에톡시}아미노)-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트

선행 실험의 비정제 산물(7.0g) 및 메탄올(100mL) 중의 탄소(800mg)상의 10% 팔라듐 용액을 수소 1기압하에서 2시간 동안 저었다. 그 혼합물을 규조토를 통해 여과하였고 그 여과액을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 메틸렌 클로라이드와 묽은 HCl용액 사이에서 분류시켰다. 액체상은 메틸렌 클로라이드로 두 번 더 추출하였고 이러한 추출물은 버렸다. 액체층을 1M NaOH으로 염기화하였고 메틸렌 클로라이드를 가지고 추출하였다. 분리된 유기 추출물을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켜 더 이상의 정제가 필요없는 표제 화합물(2.0g, 3단계 및 4단계 동안 40%)을 얻었다.

5. 2-{(3S)-3-[(2-나프틸설포닐)아미노]-2-옥소피페리딜}-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

2-나프탈렌설포닐 클로라이드(48mg, 0.21mmol)를 메틸렌 클로라이드(3mL) 중의 선행 실험의 산물(100mg, 0.21mmol) 및 폴리스티렌(250mg,2mmol 디메틸아미노피리딘/g 수지)상의 디메틸아미노피리딘 용액에 일부분으로 첨가시켰다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 아세토니트릴(3mL)을 가지고 희석시키고, 아미노메틸 수지(250mg,1.1mmol/g 수지)를 첨가시켰다. 30분간 저은 후에, 수지를 여과하여 제거하고 여과물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 메틸렌 클로라이드(2mL) 및 트리플루오로아세트산(2mL)에 용해시키고, 30분간 저었다. 그 후에 혼합물을 진공에서 농축시키고 10g 규소 SPE 칼럼에서 암모니아로 포화된 10% 메탄올/메틸렌 클로라이드를 이용하여 색층분석하였다. 원하는 분류물을 농축한 후에, 그 산물을 퓨마르산 1당량을 포함하는 메탄올에서 젓고, 진공에서 농축시켜 흰 고체인 표제 화합물(32mg, 26%)을 얻었다. MS:m/z=463(M+1).

tert-부틸 3-[(2-아미노에톡시)아미노]-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르복실아미노]프로프-2-에노에이트를 다음과 같이 제조하였다.

a. N-(2-히드록시에틸)(페닐메톡시)카르복아미드

벤질 크로로포르메이트(63mL, 443mmol)를 테트라히드로푸란(300mL) 중의 에탄올아민(60g, 984mmol) 용액에 떨어뜨리는 방식으로 첨가하였다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 진공에서 농축시키고, 메틸렌 클로라이드와 묽은 수성 HCl 사이에서 분류하였다. 분리된 유기층을 묽은 수성 NaHCO₃으로 씻어내고, 건조시키고(MgSO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켜서 다음 단계에서 더 이상의 정제없이 사용되는 표제의 화합물(36g)을 얻었다.

b. N-[2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일옥시)에틸](페닐메톡시)카르복사미드

디에틸 아조디카르복실레이트(5.2g, 30mmol)를 테트라히드로푸란(100mL) 중의 선행 실험의 산물(5.9g, 30mmol), N-히드록시프탈이미드(4.9g, 30mmol), 및 트리페닐포스핀(7.9g, 30mmol) 용액에 첨가시켰다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 에틸 아세테이트(200mL)로 희석시키고, NaHCO₃(2×100mL) 포화수용액 및 염수(100mL)로 씻었다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드 중에 0-4% 에틸 아세테이트를 가지는 그레디언트 일루션(gradient elution)을 이용하여 색층분석(SiO₂)하여 흰 고체인 표제 화합물(9.3g, 91%)을 얻었다.¹H-NMR(300MHz, CDCl₃)δ7.84(m, 2H), 7.78(m, 2H),7.37(m, 5H), 5.97(bs, 1H), 5.14(s, 2H), 4.27(t, J=4.9Hz, 2H), 3.51(q, J=5.2Hz, 2H).

c. N-[2-(아미노옥시)에틸](페닐메톡시)카르복사미드

메틸아민(H₂O중의 40중량% 용액, 2mL, 25mmol)을 에탄올(20mL) 및 테트라히드로푸란(20mL) 중의 선행 실험의 산물(1.36g, 4.0mmol) 용액에 첨가시켰다. 1시간동안 저은 후에, 그 혼합물을 진공에서 농축시키고, 그 결과물인 잔류물을 헥산 중에 75-100% 에틸 아세테이트를 가지는 그레디언트 일루션을 사용하여 색층분석하여 흰 고체인 표제 화합물(800mg, 95%)을 얻었다.¹H-NMR(300MHz, CDCl₃)δ7.36(m, 5H), 5.47(bs, 2H), 5.21(bs, 1H), 5.10(s, 2H), 3.72(t, J=5.0Hz, 2H), 3.44(q, J=5.0Hz, 2H).

d. tert-부틸-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]-3-({2-[(페닐메톡시)카르보닐아미노]에톡시}아미노)프로프-2-에노에이트

N,N-디메틸포름아미드(20mL) 중의 선행 실험의 산물(780mg, 3.7mmol) 및 [N,N'-디(tert-부톡시카르보닐)]아미디노피라졸(1.25g, 4.0mmol) 용액을 밤새 저었다. 그 혼합물을 높은 진공하에서 농축시키고, 그 결과 잔류물을 메틸렌 클로라이드 중에 0-5% 에틸 아세테이트를 가지는 그레디언트 일루션을 사용하여 색층분석(SiO₂)하여 무색 기름인 표제 화합물(1.55g, 93%)을 얻었다.¹H-NMR(300MHz, CDCl₃)δ9.08(s, 1H), 7.67(s, 1H), 7.33(m, 5H), 6.21(bs, 1H), 5.21(bs, 1H), 5.11(s, 2H), 4.12(t, J=4.8Hz, 2H), 3.54(q, J=4.9Hz, 2H), 1.49(s, 9H), 1.46(s, 9H).

e. tert-부틸-3-[(2-아미노에톡시)아미노]-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트

선행 실험의 산물(730mg, 1.5mmol) 및 에탄올(20mL) 및 테트라히드로푸란(20mL) 중의 탄소(70mg)상의 10% 팔라듐 용액을 수소 1기압하에서 30분간 저었다. 그 혼합물을 규조토를 통해 여과시켰고, 그 여과물을 진공에서 농축시켰다. 그 잔류물을 10g 규소 SPE 칼럼상에서 암모니아로 포화된 5% 메탄올/메틸렌 클로라이드를 사용하여 색층분석하여 무색의 기름인 표제 화합물(290mg, 61%)을 얻었다.¹H-NMR(300MHz, CDCl₃)δ9.08(bs, 1H), 4.08(t, J=5.2Hz, 2H), 2.99(q, J=5.1Hz, 2H), 1.50(s, 9H), 1.48(s, 9H).

하기 표 1에 기재된 화합물들은 실시예 1과 같은 방법으로 합성되었다. 이러한 화합물들은 모두 퓨마레이트로서 합성되었다.

[표 1]

실시예 28

2-[(3S)-3-({[4-(4-클로로페닐)페닐]설포닐}아미노)-2-옥소피페리딜]-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

1. tert-부틸-3-({2-[2-((3S)-3-{[(4-이오도페닐)설포닐]아미노}-2-옥소피페리딜)아세틸아미노]에톡시}아미노)-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르복실아미노]프로프-2-에노에이트

핍실 클로라이드(1.77g, 5.8mmol)을 메틸렌 클로라이드(20mL) 중의 실시예1.4의 산물(2.50g, 5.3mmol) 및 트리에틸아민(0.89mL, 6.4mmol) 용액에 첨가하였다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 아세토니트릴(20mL)로 희석시키고 아미노메틸 수지(1g,1.1mmol/g 수지)를 첨가하였다. 수지를 여과시키고 그 여과물을 진공에서 농축하여 다음 단계에서 정제없이 사용할 수 있는 표제 화합물(2.48g, 87%)을 얻었다.

2. 2-[(3S)-3-({[4-(4-클로로페닐)페닐]설포닐}아미노)-2-옥소피페리딜]-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

선행 실험의 산물(100mg, 0.14mmol)을 톨루엔(1mL)에 용해시키고 4-클로로페닐보론산(31mg, 0.2mmol) 및 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(Ⅱ)(10mg)을 함유하는 바이알에 첨가하였다. 그 혼합물을 에탄올(0.25mL) 및 나트륨 비카르보네이트 포화용액(0.25mL)을 가지고 희석시키고, 마개를 막고, 색깔이 검은 색으로 변할 때까지(약 30분) 80℃에서 샌드 베스(sand bath)에서 가열하였다. 그 혼합물을 직접적으로 10g 규소 SPE 칼럼에 적용하고 출제로 에틸 아세테이트를 사용하여 색층분석하였다. 원하는 분류물을 진공에서 농축하고 그 잔류물을 트리플루오로아세트산/메틸렌 클로라이드(1:1, 4mL)에서 용해시켰다. 30분동안 저은 후, 그 혼합물을 진공에서 농축하고 그 잔류물을 10g 규소 SPE 칼럼에서 암모니아로 포화된 10% 메탄올/메틸렌 클로라이드를 이용하여 색층분석하였다. 원하는 분류층을 농축하고 퓨마르산의 1당량을 포함하는 메탄올에서 용해시켜 퓨마레이트 염인 표제 화합물(15mg, 17%)을 얻었다. MS:m/z=523(M+1).

실시예 29

2-((3S)-2-옥소-3-{[(4-피리미딘-5-일페닐)설포닐]아미노}피페리딜)-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

실시예 29.1의 산물(100mg, 0.14mmol), 염화 리튬(25mg, 0.60mmol), 요오드화 구리(Ⅰ)(3mg), 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(Ⅱ)(7mg), 및 5-트리부틸스탄닐피리미딘을 바이알에서 혼합하고, 톨루엔(1mL)에 녹이고/부유시키고, 마개를 덮고, 색깔이 검은 색으로 바뀔 때까지(약 30분) 80℃에서 샌드 베스에서 가열했다. 그 혼합물을 직접적으로 10g 규소 SPE 칼럼에 적용하고 출제로 에틸 아세테이트를 사용하여 색층분석하였다. 원하는 분류층을 진공에서 농축하고 그 잔류물을 트리플루오로아세트산/메틸렌 클로라이드(1:1, 4mL)에서 용해시켰다. 30분간 저은 후에, 그 혼합물을 진공에서 농축시키고 잔류물을 10g 규소 SPE 칼럼에서 암모니아로 포화된 10% 메탄올/메틸렌 클로라이드를 사용하여 색층분석하였다. 원하는 분류층을 농축하고 퓨마르산의 1당량을 함유하는 메탄올에서 용해시켜 퓨마르산염인 표제 화합물(13mg, 15%)을 얻었다. MS:m/z=491(M+1)

하기 표 2에 기재된 화합물은, 실시예 44가 실시예 29와 같은 방법으로 합성된 것을 제외하고는, 실시예 28과 같은 방법으로 합성되었다. 이러한 화합물은 모두 퓨마레이트로 합성되었다.

[표 2]

실시예 45

2-((3S)-3-{[(6-브로모(2-나프틸))설포닐]아미노}-2-옥소피롤리디닐)-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

1. N-((3S)-2-옥소피롤리딘-3-일)(페닐메톡시)카르복사미드

디페닐포스포릴 아지드(11.1mL, 51.3mmol)을 tert-부탄올 중의 N-벤질옥시카르보닐-L-글루탐산 α-메틸 에스테르(13.8g, 46.7mmol) 및 트리에틸아민(7.2mL,51.3mmol) 용액에 떨어뜨렸다. 95℃에서 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 진공에서 농축시키고, 메틸렌 클로라이드에서 용해시키고, 묽은 수성 HCl 및 묽은 수성 NaHCO₃으로 순차적으로 씻었다. 분리된 유기층을 건조하고(MgSO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 디에틸 에테르의 첨가는 침전물 형성을 야기하고, 이를 여과하여 흰 고체인 페닐메틸 (6S)-6-(메톡시카르보닐)-2-옥소-1,3-디아자페르히드로인카르복실레이트 (4.0g, 29%)를 얻었다.¹H-NMR(300MHz, DMSO-d₆)δ7.37(m, 6H), 5.18(s, 2H), 4.83(t, J=5.2Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.10(m, 1H), 2.95(m, 1H), 2.16(m, 1H), 2.03(m, 1H). 여과물을 진공에서 농축시키고, 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드(50mL)에서 용해시킨 후 트리플루오로아세트산(50mL)을 첨가했다. 30분간 저은 후에, 그 혼합물을 진공에서 농축시키고 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드와 묽은 수산화나트륨 용액사이에서 분류한다. 분리된 유기층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시킨다. 디에틸 에테르의 첨가는 침전물의 형성을 야기하고 이를 여과시켜 흰 고체인 표제 화합물(3.0g, 28%)을 얻었다.¹H-NMR(300MHz, DMSO-d₆)δ7.78(bs, 1H), 7.51(d, J=8.8Hz, 1H), 7.36(m, 5H), 5.03(s, 2H), 4.09(m, 1H), 3.14(m, 2H), 2.26(m, 1H), 1.85(m, 1H).

2. 2-{(3S)-2-옥소-3-[(페닐메톡시)카르보닐아미노]피롤리디닐}아세트산

리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(13mL, 테트라히드로푸란 중의 1.0M)를 테트라히드로푸란(60mL) 중 선행 실험의 산물의 빙냉 용액에 적가하였다. 첨가가 끝난 후, 에틸 브로모아세테이트(2.6mL, 23.7mmol)를 그 혼합물에 떨어뜨렸다. 30분간 저은 후에, 에틸렌디아민(1.2mL)을 첨가시키고 젓기를 30분간 더 계속한다. 그 혼합물을 진공에서 농축시키고, 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드에서 용해시키고, 묽은 수성 HCl 및 묽은 수성 NaHCO₃로 순차적으로 씻었다. 분리된 유기층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 산물(3.5g)을 메탄올(60mL)에 용해시키고 1.0M NaOH(40mL)을 첨가하였다. 밤새 저은 후에, 메탄올을 진공에서 증발시키고 그 결과물인 염기성 용액을 메틸렌 클로라이드(제거됨)로 두 번 추출하였다. 액체층을 1.0N HCl로 산성화 하여 pH를 1-2로 하고 메틸렌 클로라이드로 추출하였다. 액체층을 염화나트륨(고체)으로 포화시키고, 에틸 아세테이트로 더 추출하였다. 혼합된 유기 추출물을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 디에틸 에테르의 첨가로 침전물에 형성하고 이를 여과하여 흰 고체인 표제 화합물(3.0g, 86%)얻었다. 더 이상의 정제는 필요없다.

3. tert-부틸-3-{[2-(2-{(3S)-2-옥소-3-[(페닐메톡시)카르보닐아미노]피롤리디닐}아세틸아미노)에톡시]아미노}-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트

벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메닐아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트(4.8g, 10.8mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(80mL) 중의 선행 실험의 산물(2.9g, 9.8mmol), tert-부틸3-[(2-아미노에톡시)아미노]-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트(3.4g, 10.8mmol), 및 N,N-디이소프로필에틸아민 용액에 일부분으로 첨가시켰다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 진공에서 농축시키고, 메틸렌 클로라이드로 희석시키고, 묽은 수성 HCl 및 묽은 수성 NaHCO₃으로 순차적으로 씻었다. 분리된 유기층을 건조시키고(MgSO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켜서 다음 단계에서 정제없이 사용하는 비정제 산물(7.5g)으로서 표제 화합물을 얻었다.

4. tert-부틸 3-({2-[2-((3S)-3-아미노-2-옥소피롤리디닐)아세틸아미노]에톡시}아미노)-2-아자-3-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로프-2-에노에이트

선행 실험의 산물(7.5g 미정제재료) 및 에탄올(100mL)과 클로로포름(7mL) 중의 탄소(750mg)상의 10% 팔라듐을 수소 1기압하에서 밤새 저었다. 그 혼합물을 규조토를 통해 여과시키고, 그 여과물을 진공에서 농축하였다. 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드 및 0.1N HCl 사이에서 분류하였다. 수성층을 메틸렌 클로라이드로 두번 추출하고 이러한 추출물을 버렸다. 수성층을 1.0M NaOH로 염기성화시켜 pH를 10-11로 만들고, 메틸렌 클로라이드로 추출하였다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na₂SO₄), 여과시키고, 진공에서 농축시켜 무색 기름으로서의 표제 화합물(1.0g, 단계3 및 4에서 22%)을 얻었다. 더 이상의 정제는 필요없다.

5. 2-((3S)-3-{[(6-브로모(2-나프틸)설포닐]아미노}-2-옥소피롤리디닐)-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드

6-브로모-2-나프탈렌설포닐 클로라이드(73mg, 0.24mmol)을 메틸렌 클로라이드(3mL) 중의 선행 실험의 산물(100mg, 0.21mmol) 및 폴리스티렌(220mg,2mmol 디메틸아미노피리딘/g 수지)상의 디메틸아미노피리딘 용액에 일부분으로 첨가시켰다. 밤새 저은 후에, 그 혼합물을 아세토니트릴(3mL)로 희석시키고 아미노메틸 수지(250mg,1.1mmol/g 수지)를 첨가시켰다. 30분동안 저은 후에, 그 수지를 여과하여 제거하고 그 여과물을 진공에서 농축하였다. 그 잔류물을 메틸렌 클로라이드(2mL) 및 트리플루오로아세트산에서 용해시키고, 30분간 저었다. 그 혼합물을 진공에서 농축시키고 10g 규소 SPE 칼럼 상에서 암모니아로 포화된 10% 메탄올/메틸렌 클로라이드를 사용하여 색층분석하였다. 원하는 분류층을 농축한 후에, 그 산물을 퓨마르산 1당량을 포함하는 메탄올에서 저었고, 진공에서 농축하여 흰 고체인 표제 화합물(64mg, 42%)을 얻었다. MS:m/z=527/529(M+1).

하기 표 3에 기재된 화합물은, 실시예 45.4로부터의 화합물이 출발 물질로 사용된 것을 제외하고는, 실시예 28과 같은 방법으로 합성되었다. 이러한 화합물은 모두 퓨마레이트로서 합성되었다.

[표 3]

실시예 51

정제 조제

다음 각각의 활성 화합물 25.0, 50.0, 및 100.0mg을 포함하는 정제를 하기에 예시된 바와 같이 제조한다;

a. 2-{(3S)-3-[(2-나프틸설포닐)아미노]-2-옥소피페리딜}-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드; 및

b. 2-((3S)-3-{[(6-브로모(2-나프틸))설포닐]아미노}-2-옥소피롤리디닐)-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드.

활성 화합물 25-100MG를 포함하는 투약을 위한 정제

	양-mg
활성 화합물	25.0	50.0	100.0
미정질 셀룰로오스	37.25	100.0	200.0
변형된 식품 옥수수 녹말	37.25	4.25	8.5
마그네슘 스테아레이트	0.50	0.75	1.5

모든 활성 화합물, 셀룰로스, 및 옥수수 녹말의 일부분을 섞고 10% 옥수수 녹말풀로 입화하였다. 그 결과물인 입제를 체로 치고, 건조시키고 나머지 옥수수 녹말 및 마그네슘 스테아르산염과 함께 섞는다. 그 결과물인 입제를 정제당 활성 성분 각각을 25.0, 50.0, 및 100.0mg 함유하도록 하여 정제로 압축한다.

실시예 52

정맥주사 용액 조제

상기 지시된 활성 화합물의 정맥내 투약 형태가 하기와 같이 조제되었다.

활성 화합물	0.5-10.0mg
시트르산 나트륨	5-50mg
시트르산	1-15mg
염화 나트륨	1-8mg
주사용 증류수(USP)	1ml까지의 충분한 양

상기 분량을 이용할 때, 활성 화합물 2-{(3S)-3-[(2-나프틸설포닐)아미노]-2-옥소피페리딜}-N-[2-(아미디노아미노옥시)에틸]아세트아미드를 미리 준비된 주사용 증류수(USP, United States PHarmacopeial Convention, Inc., Rockville,Maryland(1994)에 발행된 United States Pharmacopeia/National Formulary 1636쪽을 보시오)중의 상온에서 염화나트륨 용액, 시트르산 및 시트르산나트륨 용액에서 상온에서 용해시켰다.

실시예 53

정제된 효소의 생체 밖 억제

시약: 모든 완충 염을 시그마 케미칼 캄파니(미주리주, 세인트 루이스)에서 얻었으며, 이용될 수 있는 가장 높은 순도였다. 효소 기질, N-벤조일-Phe-Val-Arg-p-니트로아닐리드(시그마 B7632), N-벤조일-Ile-Glu-Gly-Arg-p-니트로아닐리드 염산(시그마 B2291), N-p-Tosyl-Gly-Pro-Lys-p-니트로아닐리드(시그마 T6140), N-숙시닐-Ala-Ala-Pro-Phe-p-니트로아닐리드(시그마 S7388) 및 N-CBZ-Val-Gly-Arg-p-니트로아닐리드(시그마 C7271)는 시그마에서 얻었다. N-숙시닐-Ala-Ala-Pro-Arg-p-니트로아닐리드(바켐 L-1720) 및 N-숙시닐-Ala-Ala-Pro-Val-p-니트로아닐리드(바켐 L-1770)은 바켐(펜실베니아 킹 오브 러시아)에서 얻었다.

인간의 α-트롬빈, 및 인간의 인자 Xa는 Enzyme Research Laboratories(인디아나, 사우스벤드)에서 얻었다. 소의 α-키모트립신(시그마 C4129), 소의 트립신(시그마 T8642) 및 인간의 신장 세포 우로카나아제(시그마 U5004)는 시그마에서 얻었다. 인간의 백혈구 엘라스틴 가수분해효소는 Elastin Products(미주리주, 퍼시픽)에서 얻었다.

K _i 결정: 모든 시험은 펩티드 p-니트로아닐리드 기질의 효소 촉매 가수분해를억제하는 실험 화합물의 능력에 기초한다. 일반적인 K_i결정에서, 기질은 DMSO에서 준비되고, 50mM HEPES, 200mM NaCl, pH 7.5로 구성된 시험 완충액으로 희석된다. 각 기질의 최종 농도는 하기되어 있다. 일반적으로 기질 농도는 실험적으로 결정된 K_m값보다 낮다. 실험 화합물은 DMSO에서 1.0mg/ml로 준비된다. 희석은 200 농도 범위내에서 준비되어 8 최종 농도를 산출한다. 효소 용액은 실험 완충액내에서 하기된 농도로 준비된다.

일반적인 K_i결정에서, 96 웰 접시 중 각각의 웰에 280mL의 기질 용액, 10mL 실험 화합물 용액을 피펫으로 옮기고, 그 접시를 Molecular Device plate reader에서 37℃로 열적으로 평형화시킨다. 반응은 효소의 10mL 부분표본의 첨가에 의해 시작되고 405nm에서 흡광도 증가가 15분간 기록된다. 전체 기질 가수분해의 10% 이하에 해당하는 기록이 계산에 사용되었다. 실험 화합물을 포함하지 않는 시료에 대한 속도 비율(시간의 함수로서 흡광도의 변화 비율)을 실험 화합물을 포함하는 시료의 속도로 나누고, 실험 화합물 농도의 함수로서 플로팅한다. 기록은 선형회귀에 맞으며, 직선 기울기의 값을 계산하였다. 반비례의 기울기는 실험적으로 결정된 K_i값이다.

트롬빈: 트롬빈 활성은 기질 N-숙시닐-Ala-Ala-Pro-Arg-p-니트로아닐리드를 가수분해시키는 능력으로 평가되었다. 기질 용액은 실험 완충액에서 32mM(32mM<<Km=180mM)의 농도에서 준비되었다. 최종 DMSO농도는 4.3%였다. 정제된 인간의 α-트롬빈은 실험 완충액으로 희석되어 15nM의 농도가 되었다. 최종 시료농도는 [트롬빈]=0.5nM, [기질 N-숙시닐-Ala-Ala-Pro-Arg-p-니트로아닐리드]=32mM이었다.

인자 X[FXa]: FXa 활성은 기질 N-벤조일-Ile-Glu-Gly-Arg-p-니트로아닐리드 염산의 가수분해효소 능력으로 평가된다. 기질 용액은 실험 완충액에서 51mM(51<<K_m=1.3mM) 농도로 준비되었다. 최종 DMSO 농도는 4.3%였다. 정제된 활성화된 인간의 인자 X를 실험 완충액으로 희석시켜 300nM의 농도가 되었다. 최종 시료 농도는 [FXa]=10nM, [N-벤조일-Ile-Glu-Gly-Arg-p-니트로아닐리드 염산]=51mM 이었다.

일반적으로, 본 발명의 화합물은 트롬빈 및/또는 인자 Xa에 대하여 통계적으로 유의성 있는 활성을 나타냈다. 이러한 효소 하나 또는 모두에 대해 각각의 예시된 화합물의 측정된 K_i값은 10μM이하이다. 예를 들면, 실시예 2에 기재된 화합물은 트롬빈에 대하여는 0.70μM의 K_i값을 갖고 인자 Xa에 대하여는 10μM의 농도에서 활성이 없는 것으로 밝혀졌다. 실시예 11의 화합물은 트롬빈에 대하여 1.2μM의 K_i값을 갖고 인자 Xa에 대하여는 2.1μM의 K_i값를 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 42의 화합물은 트롬빈에 대하여는 6.4μM의 K_i값을 갖고 인자 Xa에 대하여는 0.36μM의 K_i값을 갖는 것으로 밝혀졌다.

이제 본 발명에 대한 충분한 설명으로, 발명의 범위나 그것의 임의의 구체예에 영향을 미치지 않는다면, 조건, 공식, 및 다른 인자의 포괄적이고 동등한 범위내에서 동일한 것이 수행될 수 있음은 당업자가 잘 알고 있을 것이다. 본 명세서에 인용된 모든 특허 및 공보는 그 자체로 본 명세서에 참고로 포함된다.

Claims

하기 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물 또는 이것의 약학적으로 허용가능한 염으로서;

[화학식 Ⅰ]

Q는 C_6-14아릴, C_6-14아르(C_1-4)알킬, C_6-14아르(C_2-4)알케닐, 피리딜, 티에닐, 인돌릴, 퀴놀리닐, 벤조티에닐, 또는 이미다졸릴이고, 상기 기는 할로, 트리플루오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬, 메틸렌디옥시, 카르복시아미노, C_1-4알콕시카르보닐아미노, C_6-10아릴옥시카르보닐아미노, C_7-11아랄콕시카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노카르보닐, 아세트아미도, 아미디노, 피리딜, 나프틸, 피리미디닐, 알케닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노, 또는 이들의 조합으로부터 독립적으로 선택된 1 이상의 임의의 치환체를 포함할 수 있으며;

X는 메틸렌, 카르보닐, 또는 설포닐이고;

R¹은 수소 또는 C_1-3알킬이고;

n은 1, 2 또는 3이고;

m은 1-4, 바람직하게는 1 또는 2이고;

R²는 수소 또는 C_1-3알킬이고;

R³은 수소 또는 C_1-3알킬이고; 그리고

R⁴, R⁵및 R⁶는 각각 수소, 히드록시, C_1-6알킬, C_1-6알콕시, 시아노 또는 -CO₂R^w이고, 여기서 각각의 경우에 R^w는 C_1-4알킬, C_4-7시클로알킬, 벤질 중 하나인 것이 바람직하거나, 또는 R^w는 하기 구조식 중의 하나이고,

여기서 R^d, R^e및 R^g는 각기 수소이고, R^f는 메틸이고, R^h는 벤질 또는 tert-부틸인 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물 또는 이것의 약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서, Q는 아릴, 아랄킬 또는 티에닐이고, 상기 기는 할로, 트리플루오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬, 메틸렌디옥시, 카르복시아미노, C_1-4알콕시카르보닐아미노, C_6-10아릴옥시카르보닐아미노, C_7-11아랄콕시카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노카르보닐, 아세트아미도, 아미디노, 피리딜, 나프틸, 피리미디닐, 알케닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1 이상의 임의의 치환체를 포함할 수 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
제2항에 있어서, Q는 페닐 또는 비페닐이고, 상기 기는 할로, 트리플루오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬, 메틸렌디옥시, 카르복시아미노, C_1-4알콕시카르보닐아미노, C_6-10아릴옥시카르보닐아미노, C_7-11아랄콕시카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노카르보닐, 아세트아미도, 아미디노, 피리딜, 나프틸, 피리미디닐, 알케닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노, 및 그것들의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1 이상의 임의의 치환체를 포함할 수 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
제2항에 있어서, Q는 나프트-1-일, 나프트-2-일, 5-디메틸아미노나프트-1-일, 6-클로로나프트-2-일, 6-브로모나프트-2-일, 벤질, 2-니트로벤질, 페닐, 2-메닐페닐, 3-메틸페닐, 4-(n-프로필)페닐, 4-(t-부틸)페닐, 4-(t-아밀)페닐, 4-메톡시페닐, 4-이오도페닐, 4-플루오로페닐, 4-클로로페닐, 3,4-디클로로페닐, 4-니트로페닐, 4-메틸페닐, 4-에틸페닐, 4-에테닐페닐, 3,4-디메톡시페닐, 또는 2-페닐에테닐인 것을 특징으로 하는 화합물.
제2항에 있어서, Q는 4-(2-메틸페닐)페닐, 4-(2-메톡시페닐)페닐, 4-(3-클로로페닐)페닐, 4-(3-플루오로페닐)페닐, 4-(3-메톡시페닐)페닐, 4-(4-플루오로페닐)페닐, 4-(4-메틸페닐)페닐, 4-(4-메톡시페닐)페닐, 4-(2,4-디플루오로페닐)페닐, 4-(3,4-디클로로페닐)페닐, 4-(3,4-디메톡시페닐)페닐, 4-나프트-2-일페닐, 4-피리드-4-일페닐, 4-피리드-2-일페닐, 비페닐, 4-(4-클로로페닐)페닐, 4-피리미딘-5-일페닐, 또는 5-(피리드-5-일)티엔-2-일인 것을 특징으로 하는 화합물.
제4항에 있어서, n은 1 또는 2인 것을 특징으로 하는 화합물.
제5항에 있어서, X는 SO₂인 것을 특징으로 하는 화합물.
제4항에 있어서, m이 1 또는 2인 것을 특징으로 하는 화합물.
제4항에 있어서, m이 1인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R¹, R², 및 R³는 각각 수소, 메틸, 에틸, n-프로필 및 이소프로필로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R¹, R², 및 R³는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R⁴, R⁵, 및 R⁶는 각각 수소, 메틸, 에틸, 프로필, n-부틸, 히드록시, 메톡시, 에톡시, 시아노, -CO₂CH₃, -CO₂CH₂CH₃및 -CO₂CH₂CH₂CH₃로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R⁴, R⁵, 및 R⁶는 각각 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, Q는 페닐, 비페닐, 나프틸 벤질, 페네틸, 나프틸메틸, 또는 티에닐, 더 바람직하게는 페닐 또는 비페닐이고, 상기 기는 할로, 트리플루오로메틸, 히드록시, 아미노, 니트로, 시아노, C_1-3알콕시, C_1-3알킬, 메틸렌디옥시, 카르복시아미노, C_1-4알콕시카르보닐아미노, C_6-10아릴옥시카르보닐아미노, C_7-11아랄콕시카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노카르보닐, 아세트아미도, 아미디노, 피리딜, 나프틸, 피리미디닐, 알케닐, 모노- 또는 디-(C_1-4)알킬아미노로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 임의 치환체에 의해 임의로 치환되고;

X는 카르보닐 또는 설포닐, 더 바람직하게는 설포닐이고;

n은 1 또는 2이고;

m은 1 또는 2이고, 더 바람직하게는 1이고;

R¹, R²및 R³는 수소이고; 그리고

R⁴, R⁵및 R⁶는 각각 수소, 히드록시, C_1-6알킬, C_1-6알콕시, 시아노 또는 -CO₂R^w이고, 여기서 각각의 경우에 R^w는 C_1-4알킬, C_4-7시클로알킬, 벤질 중 하나인 것이 바람직하거나, 또는 R^w는 하기 구조식 중의 하나이고

여기서 R^d, R^e및 R^g는 각기 수소이고, R^f는 메틸이고, R^h는 벤질 또는 tert-부틸인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물.
인자 Xa을 제1항의 화합물과 접촉시키는 것을 포함하는 인자 Xa를 억제하는 방법.
인자 Xa 매개 상태의 치료를 필요로 하는 포유동물에게 제1항 화합물의 치료적 또는 예방적으로 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 인자 Xa 매개 상태를 치료하는 방법.
혈전증, 허혈, 졸증, 재발협착증 또는 염증의 치료를 필요로 하는 포유동물에게 제1항 화합물의 치료적 또는 예방적으로 유효한 양을 투여하는 것을 포함하는, 혈전증, 허혈, 졸증, 재발협착증 또는 염증을 치료하는 방법.
화학식 Ⅱ의 화합물 또는 이것의 염을 화학식Ⅲ의 화합물과 결합 또는 압축시키는 것을 포함하는 제1항 화합물의 제조 방법.

[화학식 Ⅱ]

(여기서, R⁴, R⁵및 R⁶는 본 명세서에서 정의된 바와 같거나 임의로 보호되고, m은 본 명세서에서 정의된 바와 같음.)

[화학식 Ⅲ]

(여기서, R⁵¹은 H 또는 Q-X-이고, Q, X, R¹, R², R³, R⁴, R⁵및 R⁶는 제1항에 정의된 바와 같음.)