MXPA02002657A - Inhibidores de azacicloalcanona serina proteasa. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se relaciona con inhibidores no peptidicos de factor Xa los cuales son utiles para el tratamiento de desordenes oclusivos arteriales y venosos tromboticos, inflamacion, cancer y enfermedades neurodegenerativas. -Los inhibidores de factor Xa proporcionan compuestos que tienen formula (I) o sales farmaceuticamente aceptables de las mismas; en donde Q es fenilo, bencilo, piridilo, tienilo, indolilo, quinolinilo, benzotienilo, bifenililo o imidazolilo; cualquiera de los cuales puede incluir uno o mas sustituyentes opcionales que se seleccionan independientemente de halo, trifluorometilo, .hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 atomos de carbono, alquilo de 1 a 3 atomos de carbono, metilendioxi, carboxamido, acetamido o amidino; X es metileno, carbonilo o sulfonilo; Z es metileno, etileno o propileno; M es metileno o etileno; y Rl, R2, y R3 son independientemente hidrogeno o alquilo de 1 a 3 atomos de carbono.

Description

INHIBIDORES DE AZACICLOALCANONA SERINA PROTEASA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con compuestos novedosos que funcionan como inhibidores de enzimas proteolíticas, y particularmente con una clase nueva de inhibidores de producción de trombina vía inhibición del factor Xa, sus sales farmacéuticamente aceptables y las composiciones farmacéuticamente aceptables de las mismas.

TÉCNICA RELACIONADA Las proteasas son enzimas que descomponen proteínas en enlaces peptídicos específicos únicos. Las proteasas se pueden clasificar en cuatro clases genéricas: serina proteasas, tiol o cisteinilproteasas, ácido o aspartilproteasas y metaloproteasas (Cuypers et al., J. Biol. Chem. 257:7068 (1982)). Las proteasas son esenciales para diversas actividades biológicas, tales como digestión, formación y disolución de coágulos sanguíneos, reproducción y reacción inmunitaria a células y organismos extraños. La proteolísis anormal se asocia con muchos estados mórbidos en REF: 136500 el hombre y otros mamíferos. Las proteasas de neutrófilos humanas, elastasa y catepsina G, se han implicado como contribuyentes para estados mórbidos marcados por destrucción de tejido. Estos estados mórbidos incluyen enfisema, artritis reumatoide, úlceras en la córnea y nefritis glomerular (Barret, in Enzyme Inhibitors as Drugs, Sandler, ed. , University Park Press, Baltimore, (1980)). Las proteasas adicionales tales como plasmina, C-1 esterasa, C-3 convertasa, urocinasa, activador de plasminógeno, acrosina y calicreínas juegan papeles claves en las funciones biológicas normales de los mamíferos. En muchos casos, es benéfico interrumpir la función de una o más enzimas proteolíticas en el desarrollo de un tratamiento terapéutico de un mamífero. Las serinas proteasas incluyen enzimas tales como elastasa (leucocítica humana) , catepsina G, plasmina, esterasa C-1, convertasa C-3, urocinasa, activador de plasminógeno, acrosina, quimiotripsina, tripsina, trombina, factor Xa y calicreínas. La elastasa leucocítica humana es liberada por leucocitos polimorfonucleares en sitios de inflamación y por lo tanto es una causa contribuyente de muchos estados mórbidos. La catepsina G es otra serina proteasa neutrofílica humana. Se espera que los compuestos con la capacidad para inhibir la actividad de estas enzimas tengan *. --iitin,. un efecto antiinflamatorio útil en el tratamiento de gota, artritis reumatoide y otras enfermedades inflamatorias y en el tratamiento de enfisema. La quimiotripsina y la tripsina son enzimas digestivas. Los inhibidores de estas enzimas son útiles para tratar pancreatitis. Los inhibidores de urocinasa y activador de plasminógeno son útiles para tratar los estados de enfermedad con crecimiento celular excesivo, tales como hipertrofia prostática benigna, carcinoma prostática y psoriasis. La serina proteasa de trombina ocupa un papel central en la hemostasis y trombosis, y es una proteína multifactorial, induce muchos efectos en las plaquetas, células endoteliales, células de músculo liso, leucocitos, el corazón y neuronas. La activación de la cascada de coagulación a través de la vía intrínseca (activación por contacto) o de la vía extrínseca (activación por exposición de plasma a una superficie no endotelial, daño a las paredes de los vasos o liberación de factor tisular) genera una serie de fenómenos bioquímicos que convergen en trombina. La trombina descompone fibrinógeno lo que finalmente lleva a un tapón hemostático (formación de coágulo) , activa potentemente las plaquetas a través de una descomposición proteolítica única del receptor de trombina de superficie celular (Coughlin, Seminars in Hematology 31 (4) : 270-277 (1994)), y autoamplifica su propia producción a través de un mecanismo de retroalimentación. Por lo tanto, los inhibidores de la función de trombina tienen un potencial terapéutico en un huésped de enfermedades cardiovasculares y no cardiovasculares. El factor Xa es otra serina proteasa en la vía de coagulación. El factor Xa se asocia con el factor Va y calcio en una membrana fosfolipídica por lo que forma un complejo de protrombinasa. Este complejo de protrombinasa después convierte protrombina a trombina (Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436(1993); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5 (Suppl 1) :S47-S58 (1994)) . Se considera que los inhibidores del factor Xa proporcionan ventajas sobre los agentes que inhiben directamente la trombina dado que los inhibidores directos de trombina aún permiten la generación significativa de trombina nueva (Lefkovits and Topol , Circulation 90 (3 ) : 1522 -1536 (1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5 (Suppl DS47-S58 (1994) ) . Recientemente se han identificado inhibidores directos de trombina de diversas clases estructurales (Tapparelli et al., Trends in Pharmacological Sciences 14:336-376 (1993); Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436 (1994); Lefkovits and Topol, Circulation 90 ( 3 ) : 1522 - 1536 (1994)) . Los compuestos representativos que actúan por inhibición del sitio activo de trombina incluyen a-clorocetona D-fenilalanil-L-prolil-L-arginil clorometilcetona (PPACK) , boroarginina DUP714 y el péptido arginal GYK114766, los péptidos cíclicos cicloteonamidas A y B, los benzamidina NAPAP y la arilsulfonilarginina argatroban. Los péptidos inhibidores de trombina hirudina y hirulogos adicionalmente abarcan a través de los dominios activos y de exositio de trombina. El péptido hirguen y aptámeros de ADN de cadena sencilla inhiben la trombina mediante la ocupación del exositio. Estas clases de agentes antitrombóticos aún adolecen de una o más de las siguientes debilidades (1) poca biodisponibilidad oral debido a la naturaleza peptídica u oligonucleotídica de estos agentes, o un peso molecular elevado o una naturaleza cargada de los agentes; (2) complicaciones de hemorragia excesiva; (3) poca selectividad hacia trombina versus otras serinas proteasas (que puede llevar a hipotensión grave y algunas veces mortal así como depresión respiratoria en modelos en animales); (4) hepatotoxicidad; o (5) efectividad en cuanto a costos. Una solución alternativa para inhibir la función de trombina es inhibir el factor Xa. El factor Xa se asocia con el factor Va y calcio en una membrana fosfolipídica por lo que se forma un complejo de protrombinasa. Este complejo de protrombinasa después convierte protrombina a trombina (Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5:411-436 (1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5 (Suppl I) :S47-S58 (1994)) . Se considera que los inhibidores de factor Xa proporcionan ventajas sobre agentes que inhiben directamente trombina dado que los inhibidores directos de trombina aún permiten la generación significativa de trombina nueva (Lefkovits and Topol, Circulation 90 ( 3 ) : 1522 - 1536 (1994); Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis 5 (Suppl I) :S47-S58 (1994)) . En realidad, la generación continua de trombina nueva en vez de la reexposición de la trombina unida a coágulo formada de antemano se considera que es la responsable en parte del fenómeno de reoclusión dado que se ha encontrado que los marcadores de generación de trombina aumentan durante y después del tratamiento trombolítico para infarto al miocardio. Por lo tanto, ahora se considera que la actividad aumentada de trombina asociada con trombólisis se debe por lo menos en parte a la generación de trombina nueva.

Los inhibidores específicos de la proteína factor Xa, tales como la proteína antistasina de 119 aminoácidos, derivada de sanguijuela y la proteína TAP derivada de argásidos TAP (péptido anticoagulante de garrapata) acelera la lisis del coágulo y evita la reoclusión cuando se proporciona como adyuvantes para la trombólisis (Mellott et al., Circulation Research 70:1152-1160 (1992); Sitko et al., Circulation 85:805-815 (1992)) . La patente de E.U.A. número 5,385,885, expedida el 31 de enero de 1995, describe una actividad inhibidora de proliferación de célula de músculo liso tanto de TAP como de antistasina. Adicionalmente, se ha demostrado que TAP y antistasina reduce la restenosis experimental . Estos resultados sugieren que el factor Xa puede jugar un papel en el proceso de restenosis mediante sus efectos sobre la formación de trombos o a través de su potencial mito génico (Ragosta et al., Circulation 89:1262-1271 (1994)) . El péptido eicotina es otro inhibidor que se une fuertemente, reversible y selectivo de factor Xa que muestra una potente actividad anticoagulante (Seymour et al., Biochemistry 33:3949-3959 (1994); solicitud publicada PCT WO 94/20535, publicada el 14 de septiembre de 1994) . Ixodidae, argasina y ancilostomat ina son otros inhibidores representativos del factor Xa peptídicos aislados de animales que se alimentan de sangre (Markwardt, Trombosis and Hemostasis 72:477-479 (1994)) . Los derivados diamidino no peptídicos son tales como el clorhidrato del ácido ( + ) - (2S) -2 - [4 - [ [ (3S) -l-acetimidoil-3-pirrolidinil] oxi] fenil] -3- [7-amidino-2 -naftil] propanoico pentahidratado (DX-9065a), muestran actividad anticoagulante (Tidwell et al., Trombosis Research 19:339-349 (1980); Yamazaki et al., Trombosis and Hemostasis 72:393-395 (1994); Hará et al., Trombosis and Hemostasis 71:314-319 (1994); Nagahara et al., Journal of Medicinal Chemistry 37:1200-1207 (1994)) . Los derivados amidino sintéticos de fenilalanina y cicloheptanona también han demostrado una potente inhibición del factor Xa (Sturzebecher et al., Thrombosis Research 54:245-252 (1989) ) . Continúa existiendo una necesidad por compuestos no peptídicos que sean inhibidores potentes y selectivos de proteasa y los cuales posean mayor biodisponibilidad y algunos efectos colaterales que los inhibidores de proteasa disponibles actualmente. En consecuencia, las nuevas clases de inhibidores de proteasa potentes, caracterizados por una potente capacidad inhibidora y una baja toxicidad en los mamíferos, son agentes terapéuticos potencialmente útiles para diversos estados que incluyen tratamiento de muchos estados de enfermedad proteolítica en mamíferos .

DESCRIPCIÓN BREVE DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige a compuestos novedosos que tienen la fórmula I (véase después) . También se proporcionan procesos para preparar compuestos de fórmula I . Los compuestos novedosos de la presente invención son inhibidores potentes de proteasas, especialmente serinas proteasas similares a tripsina, tales como quimiotripsina , tripsina, trombina, plasmina y factor Xa. Algunos de los compuestos muestran actividad antitrombótica indirecta vía la inhibición selectiva del factor Xa o son intermediarios útiles para formar compuestos que tienen actividad antitrombótica. También se proporcionan métodos para inhibir o tratar la proteólisis aberrante en un mamífero y métodos para tratar trombosis, isquemia, apoplejía, restenosis o inflamación en un mamífero al administrar una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I.

La invención incluye una composición para tratar trombosis, isquemia, apoplejía, restenosis o inflamación, que comprende un compuesto de la invención en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Estas composiciones opcionalmente pueden incluir anticoagulantes, agentes antiplaquetarios y agentes trombolíticos. Las composiciones se pueden agregar a la sangre, productos sanguíneos u órganos de mamífero con el fin de llevar a cabo las inhibiciones deseadas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS Un primer aspecto de la invención son compuestos novedosos de fórmula I : o sales farmacéuticamente aceptables de las mismas; en donde ""a« Q es arilo de 6 a 14 átomos de carbono, ar(de 6 a 14 átomos de carbono) alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, ar(de 6 a 14 átomos de carbono) alquenilo de 2 a 4 átomos de carbono, piridilo, tienilo, indolilo, quinolinilo, benzotienilo o imidazolilo; cualquiera de las cuales puede incluir uno o más sustituyentes opcionales que se seleccionan independientemente de halo, trifluorometilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, metilendioxi, carboxiamino , alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono, ariloxicarbonilamino de 6 a 10 átomos de carbono, aralcoxicarbonilamino de 7 a 11 átomos de carbono, aminocarbonilo, monoalquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono o dialquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, acetamido, amidino, piridilo, naftilo, pirimidinilo, alquenilo, monoalquilamino de 1 a 4 átomos de carbono o dialquilamino de 1 a 4 átomos de carbono o combinaciones de los mismos; X es metileno, carbonilo o sulfonilo; R1 es hidrógeno o alquilo de 1 a 3 átomos de carbono ; n es 1 , 2 ó 3 ; m es 1-4, preferiblemente 1 ó 2 ; R2 es hidrógeno o alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; R3 es hidrógeno o alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; y R4 , R5 y R6 son independientemente hidrógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, ciano o -C02Rw, en donde Rw, en cada caso, preferiblemente es uno de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 4 a 7 átomos de carbono, bencilo, o Rw es uno de en donde Rd, Re y R9 son cada uno hidrógeno, Rf es metilo y Rh es bencilo o terbutilo. Los valores preferidos de Q incluyen arilo tal como fenilo, bifenilo o naftilo; o aralquilo tal como bencilo, fenetilo o naft ilmet ilo ; o tienilo.

Cualquiera de estos grupos opcionalmente puede estar sustituidos como se define en lo anterior. Los valores adecuados incluyen naftil -l-ilo, naf-2-ilo, 5-dimetilaminonaft-l-ilo, 6-cloronaft -2 -ilo, 6 -bromonaft-2 - ilo, bencilo, 2 -nitrobencilo , fenilo, 2 -metilfenilo, 3 -met ilfenilo , 4-(n-propil) fenilo, 4 - (t-butil ) fenilo, 4 - (t-amil ) fenilo, 4-metoxifenilo , 4 -yodofenilo, 4 - fluorofení lo , 4-clorofenilo, 3 , 4 -diclorofenilo , 4 -nitrofenilo, 4-metilfenilo, 4 -etilfenilo, 4 -etenilfenilo , 3,4-dimetoxifenilo y 2 - feniletenilo . Los valores adecuados adicionales incluyen 4- (2 -met ilfenil ) fenilo, 4 - (2 -metoxifenil ) fenilo, 4- (3-clorofenil ) fenilo, 4 -( 3 - fluorofenil ) fenilo , 4-(3-metoxifenil ) fenilo , 4 - (4 - fluorofenil ) fenilo , 4- (4-metilfenil ) fenilo, 4 - (4 -metoxifenil ) fenilo , 4-(2,4-difluorofenil ) fenilo, 4 - (3 , 4 -diclorofenil ) fenilo , 4- (3 , 4 -dimetoxifenil ) fenilo, 4 -naft -2 - ilfenilo , 4-pirid- 4-ilfenilo, 4 -pirid-2 -ilfenilo , bifenilo {(4-fenil ) fenilo} , 4 - (4 -clorofenil ) fenilo , 4 -pirimidin- 5 -ilfenilo y 5 - (pirid- 5-il ) tien-2 - ilo . Los valores preferidos de n son 1 y 2. Los valores preferidos de X son S02 o C(0), de manera más preferible S02.

Los valores preferidos de m incluyen 1 ó 2, de manera más preferible 1. Los valores adecuados para R1, R2 y R3 incluyen hidrógeno, metilo, etilo, n-propilo e isopropilo. De manera más preferible, cada uno de R1, R2 y R3 son hidrógeno. Los valores adecuados de R4 , R5 y R6 incluyen hidrógeno, metilo, etilo, propilo, n-butilo, hidroxi, metoxi, etoxi, ciano, -C02CH3, -C02CH2CH3 y -C02CH2CH2CH3. En las modalidades más preferidas, R4 , R5 y R6 son cada uno hidrógeno. Un subgénero preferido de compuestos de la presente invención son aquellos de fórmula I, en los que : Q es fenilo, bifenililo, naft ilbencilo , fenetilo, naftilmetilo o tienilo, de manera más preferible fenilo o bifenilo, cualquiera de estos grupos está opcionalmente sustituido por uno o tres sustituyentes opcionales que se seleccionan independientemente de halo, trifluorometilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, metilendioxi, carboxiamino, alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono, ariloxicarbonilamino de 6 a 10 átomos de carbono, aralcoxicarbonilamino de 7 a 11 * ^—^^-upm r T36"^ -*—* - fc«»«»ü« -¿ átomos de carbono, aminocarbonilo, monoalquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono o dialquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, acetamido, amidino, piridilo, naftilo, pirimidinilo, alquenilo, monoalquilamino de 1 a 4 átomos de carbono 0 dialquilamino de 1 a 4 átomos de carbono; X es carbonilo o sulfonilo, de manera más preferible sulfonilo; n es 1 ó 2 ; m es 1 ó 2, de manera más preferible 1; R1, R2 y R3 son hidrógeno; y R4 , R5 y R6 son independientemente hidrógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, ciano o -C02R , en donde Rw en cada caso, preferiblemente es uno de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 4 a 7 átomos de carbono, bencilo, o R es uno de u FG o en donde R , Re y R9 son cada uno hidrógeno, R es metilo y Rh es bencilo o terbutilo. Los compuestos dentro del alcance de la invención se describen en los ejemplos. 5 También debe entenderse que la presente invención se considera que incluye estereoisómeros así como isómeros ópticos, por ejemplo mezclas de enantiómeros así como enantiómeros y diastereómeros individuales, los cuales surgen como consecuencia de 10 asimetría estructural en los compuestos seleccionados de la presente serie. Los compuestos de fórmula I también pueden estar solvatados, especialmente hidratados. La hidratación se puede presentar durante la elaboración 15 de los compuestos o composiciones que comprenden los compuestos, o la hidratación se puede presentar con el tiempo debido a la naturaleza higroscópica de los compuestos . Algunos compuestos dentro del alcance de la 20 fórmula I son derivados denominados como profármacos. La expresión "profármaco" indica un derivado de un fármaco conocido de acción directa, cuyo derivado tiene características mejoradas de suministro y valor terapéutico en comparación con el medicamento, y se 25 transforma en el medicamento activo por un proceso - enzimático o químico. Los profármacos útiles son aquellos en donde R , R5 o R6, o cualquiera de ellos, son -C02Rw, en donde Rw es como se define en lo anterior . Cuando cualquier variable se presenta más de una vez en cualquier constituyente o en la fórmula I, su definición, cada vez que se presente, es independiente de su definición en otra vez diferente que se presente. Además, son permisibles combinaciones de sustituyentes o variables, o ambas, solo si tales combinaciones resultan en compuestos estables. El término "alquilo", como se utiliza en la presente, en si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a radicales de cadena lineal y ramificada de hasta 10 carbonos, a menos que la longitud de la cadena este limitada a la misma, tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4-dimet ilpentilo , octilo, 2 , 2 , 4 - trimet ilpent ilo , nonilo o decilo. El término "alquenilo" se utiliza en la presente para significar un radical de cadena lineal o ramificada de 2-10 átomos de carbono, a menos que la longitud de la cadena se limite al mismo, e incluye, pero no se limita a etenilo, l-propenilo, 2-propenilo, .. j..i.aAj.»A-j .t. ¡ta«>«fa.- -" --r**^ **.,... *- -. -,..-.— **, ..-. .. *- -*. . 2 -metil-1-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo y similares. Preferiblemente, la cadena alquenilo es de 2 a 8 átomos de carbono de longitud, de manera más preferible de 2 a 4 átomos de carbono de longitud. El término "alquinilo" se utiliza en la presente para significar un radical de cadena lineal o ramificada de 2-10 átomos de carbono, a menos que la longitud de la cadena este limitada por la presente, en donde existe por lo menos un triple enlace entre dos átomos de carbono en la cadena y que incluye, pero que no se limita a acetileno, 1-propileno, 2-propileno y similares. Preferiblemente, la cadena alquinilo es de 2 a 8 átomos de carbono de longitud, de manera más preferible de 2 a 4 átomos de carbono de longitud. En todos los casos en donde existe una porción alquenilo o alquinilo como un grupo sustituyente, el enlace insaturado, es decir, el enlace vinileno o acetileno preferiblemente está unido de manera no directa a una porción de nitrógeno, oxígeno o azufre. El término "alcoxi" se refiere a cualquiera de los grupos alquilo anteriores unido a un átomo de oxígeno . El término "arilo" como se utiliza en la presente, en si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a grupos aromáticos monocíclicos o bicíclicos que contienen de 6 a 12 carbonos en la porción de anillo, preferiblemente 6-10 carbonos en la porción de anillo, tal como fenilo, bifenilo, naftilo o tetrahidronaftilo. El término "aralquilo" o "arilalquilo", como se utiliza en la presente, por si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a grupos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono como se discuten en lo anterior que tienen un sustituyente arilo, tal como bencilo, feniletilo o 2 -naft ilmetilo . El término "heteroarilo" como se utiliza en la presente, se refiere a grupos que tienen 5 a 14 átomos en el anillo; 6, 10 ó 14 electrones p compartidos en un arreglo cíclico; y que contienen átomos de carbono y 1, 2 ó 3 heteroátomos de oxígeno, nitrógeno o azufre (en donde los ejemplos de grupos heteroarilo son: grupos tienilo, benzo [b] tienilo, nafto [2 , 3 -b] t ienilo , tiantrenilo, furilo, piranilo, isobenzofuranilo, benzoxazolilo, cromenilo, xantenilo, fenoxat iinilo , 2H-pirrolilo , pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, indoli zinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo , isoquinolilo, quinolilo, ftalazinilo, naft iridinilo , quinazolinilo, cinnolinilo, pteridinilo, 4aH-carbazolilo, carbazolilo, ß-carbolínilo, fenantridinilo, acridinilo, perimidinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, isotiazolilo, fenotiazinilo, isoxazolilo, furazanilo y fenoxazinilo) . El término "cicloalquilo" como se utiliza en la presente, en si mismo o como parte de otro grupo se refiere a grupos cicloalquilo que contienen 3 a 9 átomos de carbono. Los ejemplos típicos son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo, ciclooctilo y ciclononilo. El término "halógeno" o "halo" como se utiliza en la presente, en si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a cloro, bromo, flúor o yodo prefiriéndose el cloro. El término "monoalquilamina " como se utiliza en la presente, en si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a un grupo amino el cual está sustituido con un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. El término "dialquilamina" como se utiliza en la presente, en si mismo o como parte de otro grupo, se refiere a un grupo amino el cual está sustituido ? ¿& -S ¿A . t. £l*k fc,^fc_ con dos grupos alquilo, cada uno con 1 a 6 átomos de carbono . El término "hidroxialquilo" como se utiliza en la presente se refiere a cualquiera de los grupos anteriores sustituidos por una o más porciones hidroxilo . El término "carboxialquilo" como se utiliza en la presente, se refiere a cualquiera de los grupos alquilo anteriores sustituidos por una o más porciones de ácido carboxílico. El término "heteroátomo" se utiliza en la presente para significar un átomo de oxígeno ("O"), un átomo de azufre ("S") o un átomo de nitrógeno ("N") . Se reconocerá que cuando el heteroátomo es nitrógeno, puede formar una porción NRaRb, en donde Ra y Rb son, independientemente entre si, hidrógeno o alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o junto con el nitrógeno al cual están unidos, forman un anillo de 5 , 6 ó 7 miembros saturado o insaturado. La abreviatura "t-Am", utilizada en la presente se refiere a una porción amilo activa que tiene la estructura CH3CH2 (CH3 ) 2C- . Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I (en forma de producto solubles o dispersables en agua o aceite) incluyen las sales no *.&^ r* tóxicas convencionales de sales de amonio cuaternarias las cuales se forman, por ejemplo, a partir de ácidos o bases inorgánicas y orgánicas. Los ejemplos de tales sales de adición de ácido incluyen acetato, adipato, 5 alginato, aspartato, benzoato, bencensulfonato, bisulfato, butirato, citrato, camforato, camforsulfonato , ciclopentanopropionato , digluconato, dodeciisulfato, etanosulfonato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, 0 heptanoato, hexanoato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2 -hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, 2 -naftalenosulfonato , nicotinato, nitrato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3- fenilpropionato , picrato, pivalato, propionato, 5 succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, tosilato y undecanoato. Las sales de base incluyen sales de amonio, sales de metal alcalino tales como sales de sodio y potasio, sales de metal alcalinotérreo tal como sales de calcio y magnesio con bases orgánicas 0 tales como sales de diciclohexilamina, N-metil-D- glucamina y sales con aminoácidos tales como arginina, lisina y así sucesivamente. Además, los grupos que contienen nitrógeno básico pueden formar sales cuaternarias con tales agentes como haluros de alquilo 5 inferior tales como cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo; sulfato de dialquilo como sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo y diamilo, haluros de cadena larga tales como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo como bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. Los ácidos preferidos para formar las sales de adición de ácido incluyen HCl, ácido acético, ácido trifluoroacético y ácido fumárico . Un segundo aspecto de la presente invención se relaciona con un método para tratar trombosis, isquemia, apoplejía, restenosis o inflamación, que comprende administrar a un mamífero en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un compuesto de fórmula I . Los compuestos de la presente invención representan una clase novedosa de potentes inhibidores de metalo, ácido, tiol y serinas proteasas. Los ejemplos de las serinas proteasas inhibidas por los compuestos dentro del alcance de la invención incluyen elastasa neutrofílica leucocítica, una enzima proteolítica implicada en la patogénesis de enfisema; quimiotripsina y tripsina, enzimas digestivas; elastasa pancreática y catepsina G, una proteasa *.-í-*t .*¿:~ -4- *- * ^¿ M¡kfc^«aAEfliidL£ similar a quimiotripsina también asociada con leucocitos; trombina y factor Xa, enzimas proteolíticas en la vía de coagulación de la sangre. La inhibición de termolisina, una metaloproteasa, y 5 pepsina, una proteasa acida, también son usos contemplados de compuestos de la presente invención. Los compuestos de la presente invención preferiblemente se utilizan para inhibir proteasas similares a tripsina. 10 Los compuestos de la presente invención se diferencian por su capacidad para inhibir preferencialmente factor Xa en comparación con trombina o plasmima, o con ambos. Como inhibidores de factor Xa, los compuestos de la presente invención 15 inhiben la producción de trombina. Por lo tanto, los compuestos son útiles para el tratamiento o profilaxis de estados caracterizados por trombosis anormal, venosa o arterial, que involucra producción o acción de trombina. Estos estados incluyen, pero no se 20 limitan a: trombosis en venas profundas; coagulopatía intravascular diseminada que se presenta durante choque séptico, infecciones virales y cáncer; infarto al miocardio; apoplejía; derivación de arteria coronaria; sustitución de la cadera; y formación de 25 trombos que resulta de una terapia trombolítica o angioplastia coronaria transluminar percutánea (PCTA, por sus siglas en inglés) . Los compuestos de la presente invención también se pueden utilizar como un anticoagulante en circuitos sanguíneos extracorporeos . En virtud de los efectos tanto del factor Xa como de trombina sobre un huésped de tipos de células, tales como las células de músculo liso, células endoteliales y neutrófilos, los compuestos de la presente invención encuentran uso adicional en el tratamiento o profilaxis del síndrome de malestar respiratorio adulto; respuestas inflamatorias tales como edema; daño por reperfusión; aterosclerosis y restenosis después de daño tal como angioplastia con globo, aterectomía y colocación de endoprotesis arterial. Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para tratar neoplasia y metástasis, así como enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Parkinson. Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en combinación con agentes trombolíticos tales como activador de plasminógeno tisular, estreptocinasa y urocinasa. Adicionalmente, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en combinación con otros medicamentos antitrombóticos o anticoagulantes tales como, pero no a:?„.,t. i-' *.^J*-»*. .¿Ut-.,^-. *.*Aát ,a**? JÜ&?? " ^^*»» limitados a antagonistas de fibrinógeno y antagonistas de receptor de tromboxano. Los compuestos de la presente invención que se diferencian por su capacidad para inhibir trombina se pueden utilizar para muchos propósitos terapéuticos. Como inhibidores de trombina, los compuestos de la presente invención inhiben la producción de trombina. Por lo tanto, estos compuestos son útiles para el tratamiento o profilaxis de estados caracterizados por trombosis anormal, venosa o arterial, que involucra la producción o acción de trombina. Estos estados incluyen, pero no se limitan a trombosis en venas profundas; coagulopatía intravascular diseminada la cual se presenta durante choque séptico, infecciones virales y cáncer; infarto al miocardio; apoplejía; derivación de arteria coronaria; formación de fibrina en el ojo; sustitución de la cadera; y formación de trombo que resulta ya sea en terapia trombolítica o angioplastía coronaria transluminar percutánea (PCTA) . Otros usos incluyen el uso de tales inhibidores de trombina como anticoagulantes ya sea incrustados en, o unidos físicamente materiales utilizados en la elaboración de dispositivos utilizados en la recolección de sangre, circulación de sangre y almacenamiento de sangre, tales como catéteres, máquinas de diálisis sanguínea, jeringas de recolección sanguínea y tubos y tubería para sangre. Los compuestos de la presente invención también se pueden utilizar como un anticoagulante en circuitos sanguíneos extracorpóreos . En virtud de los efectos de la trombina sobre los huéspedes de tipos de células, tales como células de músculo liso, células endoteliales y neutrófilos, los compuestos de la presente invención encuentran uso adicional en el tratamiento o profilaxis del síndrome de malestar respiratorio adulto; respuestas inflamatorias; sanado de heridas; daño por reperfusión; aterosclerosis y restenosis después de un daño tal como angioplastia con globo, aterectomía y colocación de endoprotesis arterial. Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para tratar neoplasia y metástasis así como enfermedades neurodegenerativas, tales como enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Parkinson. Cuando se utilizan como inhibidores de factor Xa, los compuestos de la presente invención se pueden administrar en una cantidad efectiva dentro de un intervalo de dosificación de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 500 mg/kg, de manera preferible entre 0.1 y 10 mg/kg de peso corporal, en un régimen de una sola dosis o de 2-4 dosis diarias divididas. Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden administrar a cualquier animal que puede experimentar los efectos benéficos de los compuestos de la invención. Entre estos los más beneficiados son los humanos, aunque la invención no se pretende que se limite a estos. La composición farmacéutica de la presente invención se puede administrar por cualquier medio que obtenga el propósito que se desea. Por ejemplo, la administración puede ser por vía parenteral, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, transdérmica, bucal u ocular. De manera alternativa o concurrente, la administración puede ser por vía oral. La dosificación administrada dependerá de la edad, salud y peso del receptor, la clase de tratamiento concurrente, si lo hay, la frecuencia de tratamiento y la naturaleza del efecto que se desee . Además de los compuestos farmacológicamente activos, las preparaciones farmacéuticas nuevas pueden contener vehículos farmacéuticamente adecuados que comprendan excipientes y auxiliares que faciliten el procesamiento de los compuestos activos en las preparaciones que se pueden utilizar farmacéuticamente . Las preparaciones farmacéuticas de la presente invención se fabrican de manera tal que son conocidas, en si misma, por ejemplo por medio de mezclado convencional, granulado, elaboración de grageas, disolución o procesos de liofilización. De esta manera, las preparaciones farmacéuticas para uso oral se pueden obtener al combinar los compuestos activos con excipientes sólidos, opcionalmente moler la mezcla resultante y procesar la mezcla de granulos, después de agregar auxiliares adecuados, si se desea o sin son necesarios, para obtener tabletas o núcleos de grageas . Los excipientes adecuados son, en particular, materiales de relleno tales como sacáridos, por ejemplo lactosa o sacarosa, manitol o sorbitol, preparaciones de celulosa o de fosfatos de calcio, o ambas, por ejemplo fosfato tpcálcico o fosfato ácido de calcio, así como aglutinantes tales como pasta de almidón utilizando, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de papa, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio o polivinilpirrolidona o cualquiera de los i i 11 ?? ÍÍÉ- Ü'I i líirtir iifftr i 1 1 1 ftfft^^fff anteriores en cualquier combinación. Si se desea, se pueden agregar agentes desintegrantes tales como los almidones mencionados en lo anterior y también carboximetil -almidón, polivinilpirrolidona reticulada, agar o ácido algínico, o una sal del mismo tal como alginato de sodio. Los auxiliares son, sobre todo, agentes reguladores de flujo y lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico o sales de los mismos, tales como estearato de magnesio o estearato de calcio, o polietilenglicol, o cualquiera de los anteriores. Los núcleos de gragea se proporcionan con recubrimientos adecuados que, si se desea, serán resistentes a jugos gástricos. Para este propósito, se pueden utilizar soluciones concentradas de sacáridos, las cuales opcionalmente pueden contener goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, polietilenglicol o dióxido de titanio, o cualquiera de los anteriores, soluciones de laca y solventes orgánicos adecuados o mezclas de solventes. Para producir recubrimientos resistentes a jugos gástricos, se utilizan soluciones de preparaciones de celulosa adecuadas tales como ftalato de acet ilcelulosa o ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa. Se pueden agregar colorantes o pigmentos a las tabletas o los recubrimientos de grageas, por ejemplo, para ?M?lA. t¡ír*-&í&«*-ií'-& ??-??..-Í. a,JJ¿t^i^J ...^^. BfeA?Í-Al3 Í ¡,^«.^'¿^fe;'^Ai -identificación con el fin de definir combinaciones de dosis de compuesto activo. Otras preparaciones farmacéuticas las cuales se pueden utilizar oralmente incluyen cápsulas de colocación y empuje, elaboradas de gelatina, así como cápsulas selladas suaves elaboradas de gelatina y un plastificante tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de colocar y empujar pueden contener los compuestos activos en forma de granulos que se pueden mezclar con materiales de relleno tales como lactosa, aglutinantes, tales como almidones o lubricantes, o ambos, tales como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente, estabilizantes. En cápsulas suaves, los compuestos activos preferiblemente se disuelven o suspenden en líquidos adecuados tales como aceites grasos o parafina líquida. Además, se pueden agregar estabilizantes . Las formulaciones adecuadas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en forma hidrosoluble, por ejemplo sales hidrosolubles, soluciones alcalinas y complejos de inclusión de ciclodextrina. Las sales alcalinas preferidas especialmente son sales de amonio preparadas, por ejemplo con Tris, hidróxido de colina, bis-tris propano, N-metilglucamina o arginina. Se ifV'fJlffll? ^J*lfH'*-**¿&tf¿«M»*' - pueden utilizar una o más ciclodextrinas modificadas o no modificadas para estabilizar y aumentar la hidrosolubilidad de los compuestos de la presente invención. Las ciclodextrinas útiles para este propósito se describen en las patentes de E.U.A. números 4,727,064, 4,764,604 y 5,024,998. Además, se pueden administrar suspensiones de los compuestos activos como suspensiones para inyección oleosas apropiadas. Los solventes lipofílicos adecuados o vehículos incluyen aceites grasos, por ejemplo, aceite de ajonjolí, o esteres de ácidos grasos sintéticos, por ejemplo oleato de etilo o triglicéridos o polietilenglicol -400 (los compuestos son solubles en PEG-400) . Las suspensiones para inyección acuosa pueden contener sustancias que aumenta la viscosidad de la suspensión, por ejemplo carboximet ílcelulosa de sodio, sorbitol o dextrano, o cualquiera de los anteriores en cualquier combinación. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes. La presente invención también se relaciona con métodos para elaborar compuestos de fórmula I que comprenden : acoplar o condensar un compuesto de fórmula II : en donde R4 , R5 y R6 son como se definen en la presente, u opcionalmente protegidos, y m es como se define en la presente, con un compuesto de fórmula III en donde R51 es H o Q-X-, en donde Q, X, R1, R2, R3 , R , R5 y R6 son como se definen en la presente. En general, los grupos R4 , R5 y R6 pueden ser hidrógeno o un grupo protector de amino. Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar de acuerdo con los siguientes esquemas de reacción. Los reactivos y materiales utilizados en los siguientes métodos están disponibles comercialmente de fc..^,.^^..í^&^^ - proveedores químicos que incluyen Aldrich, Advanced ChemTech, Bachem, Sigma, Fluka y similares. Durante la síntesis de estos compuestos, los grupos funcionales se protegen por grupos bloqueadores para evitar reacción cruzada. Los ejemplos de grupos bloqueadores adecuados y su uso se describen en Greene, T. . y Wutts, P.G.M., Protective Groups in Organic Síntesis, segunda edición, John Wiley & Sons, New York, NY (1991) . Los grupos bloqueadores también se denominan en la presente como grupos protectores. El Esquema de Reacción 1 detalla las etapas de síntesis para elaborar materiales iniciales de a inoalcoxiguanidina de fórmula II. La variable "m" en los esquemas de reacción tiene un valor de 1 a 8, preferiblemente de 1 a 2. Las etapas de síntesis en este esquema de reacción se describen con detalle adicional y se ejemplifican en los ejemplos 1 y 2 de la solicitud PCT publicada WO 99/26926, publicada el 3 de junio de 1999, cedida comúnmente.

Esquema de Reacción 1 Ph3P, DEAD, THF Preparación de materiales iniciales III ?~ lactama y d-lactama que tienen un grupo carboximetilo en la posición 1 y un grupo amino que posee un grupo protector adecuado Pb en la posición 3, se han descrito previamente por Freidinger et al., J. Org. Chem. 47:104-109 (1982). También se ha descrito el anillo lactama de 7 miembros análogo (Semple, J.E. et al., J. Med. Chem. 39:4531-4536 (1996). De manera alternativa, se puede sintetizar la d-lactama por ciclación de ornitina con un grupo protector adecuado en el grupo a-amino, utilizando un reactivo de acoplamiento amida tal como clorhidrato de l-etil-3(3- dimet ilaminopropil ) carbodiimida . El grupo carboximetilo después se puede instalar por alquilación con un éster de ácido a-bromoacético utilizando una base tal como bis (trimetilsilil ) amida de litio en un solvente tal como tetrahidrofurano o N, N-dimetilformamida, seguido por saponificación con hidróxido metanólico acuoso. La ?-lactama análoga también se puede sintetizar por un rearreglo de tipo Curtius modificado en el grupo ?-carboxilo del ácido glutámico que tenga grupos protectores adecuados en el grupo a-amino y a-carboxi, similar a lo descrito por Scholtz and BarTlett, Síntesis : 542 - 544 (1989). El ciclado espontáneo después se lleva a cabo por - - eliminación del grupo protector ?-amino resultante y conversión a la base libre (si es necesario) . La introducción de la cadena lateral carboximetilo después se puede llevar a cabo como se describe previamente .

Esquema de Reacción II React ivo de Castro opcional de Pb 2. eliminación opcional de R5, R6 El esquema de reacción 2 ilustra el acoplamiento de la síntesis de compuesto de la invención, a partir con el acoplamiento de materiales iniciales de las fórmulas II y III. Los materiales iniciales se pueden acoplar utilizando agentes de acoplamiento convencionales tales como N,N'- diciclohexilcarbodiimida y otros agentes bien conocidos descritos en The Peptides: Análisis, Biology, Gras, E. et al., eds., Academic Press, New York, NY (1979-1987), Volúmenes 1 a 8. El grupo protecyor Pb después se puede eliminar utilizando condiciones descritas en Greene, T.W. and Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Síntesis, segunda edición, John Wiley & Sons, New York, NY (1991) . La amina resultante después se puede acilar con un cloruro de sulfonilo en un solvente inerte, tal como cloruro de metileno, preferiblemente en presencia de una base orgánica tal como piridina, trietilamina y similares. La remoción de los grupos protectores R5 y R6 se puede llevar a cabo utilizando los métodos descritos en Greene, T.W. and Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Síntesis, segunda edición, John Wiley & Sons, New York, NY (1991), para proporcionar el compuesto final.

- Los siguientes ejemplos son ilustrativos, aunque no limitantes, del método y composiciones de la presente invención. Otras modificaciones y adaptaciones adecuadas de la variedad de condiciones y parámetros que se encuentran habitualmente y que son obvios para aquellos expertos en la técnica, están dentro del espíritu y alcance de la invención.

Ejemplo 1 (2-{(3S)-3-[ (2-naftilsulfonil) amino] -2 -oxopiperidil} N- [2 -amidinoaminooxi (etil] acetamida ;... *i... , ¿..fu. „_ ÍZnJstilL&? - - N- ( (3S) -2 -oxo (3 -piperidil) ( fenilmetoxi) carboxamida Se agrega clorhidrato de l-(3-dimetilaminopropil ) -3 -etilcarbodiimida (7.2 g, 37.6 mmoles) en una sola porción, a una solución de Na-benciloxicarbonil -L-ornitina (10 g, 37.6 mmoles), 4-metilmorfolina (4.1 ml , 37.6 mmoles) y 1-hidroxibenzotriazol (5.1 g, 37.6 mmoles) en 200 ml de acetonitrilo. Después de agitar durante toda la noche, el sólido blanco no disuelto se separa por filtración y se desecha. El filtrado se concentra in vacuo y el residuo se disuelve en cloruro de metileno y se lava secuencialmente con HCl acuoso diluido y NaHC03 acuoso diluido. La capa orgánica separada se seca con MgS0 , se filtra y se concentra in vacuo para proporcionar un sólido blanco (7.0 g, 75%) . RMN-1!! (300 MHz, CDC13) d 7.34 ( , 5H) , 6.20 (s amplio, 1H) , 5.76 (s amplio, 1H) , 5.11 (s, 2H) , 4.10 (m, 1H) , 3.32 (m, 1H) , 2.50 (m, 1H) , 1.92 (m, 2H) , 1.61 (m, 1H) . •imri»tir —Jtfc"'—*^-2. Ácido 2-{ (3S) -2-OXO-3- [ (fenilmetoxi) carbonil amino] piperidil}acético Se agrega a gotas bis (trimetilsilil ) amida de litio (20.8 ml , 1.0 M en tetrahidrofurano) en una solución enfriada con hielo del producto de la parte experimental precedente (4.7 g, 18.9 mmoles) en 20 ml de tetrahidrofurano. Al completar la adición, se deja gotear en la mezcla bromoacetato de etilo (15.8 g, 94.5 mmoles) . Después de dejar en agitación durante 30 minutos, se agregan 10 ml de etilendiamina y se continúa la agitación durante 30 minutos adicionales. La mezcla se concentra in vacuo y el residuo se disuelve en cloruro de metileno y se lava con HCl acuoso diluido. La capa orgánica separada se seca con Na2S04, se filtra y se concentra in vacuo. El producto crudo se disuelve en 25 ml de metanol, seguido por la adición de 50 ml de NaOH 1.0 M. Después de agitar durante 30 minutos, se evapora metanol in vacuo y la iuff?tMiiMn-Tfrrfliff ifili-Émf Í1 inViiiiiraVif Éltli - - solución acuosa básica resultante se extrae con cloruro de metileno (3 x 100 ml ) . La capa acuosa después se acidifica con HCl 1.0 N a un pH de 1 , y se extrae con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos se secan con Na2S04, se filtran y se concentran in vacuo para proporcionar el compuesto del título (5.7 g, 98%) . No es necesaria purificación adicional . 3. 3-{[2-(2-{(3S) -2 -oxo- 3- [ ( fenilmetoxi) - carbonilamino] piperidil}acetilamino) etoxi] amino} -2-aza-3- [ ( terb toxi) carbonilamino] - prop-2 -enoato de ter-butilo Se agrega hexaflurofosfato de benzotriazol -1-iloxitris (dimetilamino) fosfonio (5.25 g, 12 mmoles) en una sola porción, a una solución de productos de la parte experimental precedente (3.0, 9.9 mmoles), 3- [ (2 -aminoetoxi ) amino] -2-aza-3- [ (ter -butoxi ) carbonil - ^*t.&t*í*l ?!ui?í*^¡^A~.i**^t ..^ i i -,-? r t, • t-tfiiii-f •• amino] prop-2 -enoato de ter-butilo (3.5 g, 9.9 mmoles) y N, N-diisopropiletilamina (3.45 ml , 19.8 mmoles) en 40 ml de N, N-dimetilformamida . Después de agitar durante la noche, la mezcla se diluye con cloruro de metileno y se lava secuencialmente con HCl acuoso diluido y NaHC03 acuoso diluido. La capa orgánica separada se seca con Na2S0 , se filtra y se concentra in vacuo para proporcionar el compuesto del título como 7.0 g de material impuro, el cual se utiliza crudo en la siguiente etapa. 3- ({2- [2- ( (3S) -3-amino-2-oxopiperidil) - acetilamino] etoxi}amino) -2-aza-3- [ (ter- butoxi) carbonilamino] prop-2 -enoato de ter- butilo Una solución de 7.0 g del producto crudo de la parte experimental precedente y 800 mg de paladio 10% en carbón, en 100 ml de metanol, se agitan bajo 1 - - atmósfera de hidrógeno durante 2 horas. La mezcla se filtra a través de tierra de diatomeas y el filtrado se concentra in vacuo. El residuo se divide entre cloruro de metileno y HCl acuoso diluido. La fase acuosa se extrae dos veces más con cloruro de metileno y estos extractos se desechan. La capa acuosa se vuelve básica con NaOH 1 M y se extrae con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos empanados se secan con Na2S04, se filtran y se concentran in vacuo para proporcionar el compuesto del título (2.0 g, 40% para las etapas 3 y 4) para lo cual no es necesaria purificación adicional. 5. 2-{(3S)-3-[ (2-naftilsulfonil) amino] -2- oxopiperidil} -N- [2 - (amidinoaminooxi) etil] acetamida Se agrega cloruro de 2 -naftalensulfonilo (48 mg, 0.21 mmoles) en una sola porción a una solución del producto a partir de la parte experimental precedente (100 mg, 0.21 mmoles) y dimetilaminopiridina sobre poliestireno (250 mg, 2 mmoles de dimetilaminopiridina/g de resina) en 3 ml de cloruro de metileno. Después de agitar durante la noche, la mezcla se diluye con 3 ml de acetonitrilo, seguido por la adición de resina de aminometilo (250 mg, 1.1 mmoles/g de resina) . Después de agitar durante 30 minutos, las resinas se eliminan por filtración y el filtrado se concentra in vacuo. El residuo se disuelve en 2 ml de cloruro de metileno y 2 ml de ácido trifluoroacético, y se agita durante 30 minutos. La mezcla después se concentra in vacuo y se somete a cromatografía en una columna SPE de sílice de 10 g utilizando metanol 10%/cloruro de metileno, saturado con amoníaco. Después de concentrar las fracciones deseadas, el producto se agita en metanol con 1 equivalente de ácido fumárico y se concentra in vacuo para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (32 mg , 26%). EM : m/z = 463 (M+l). Se prepara como sigue 3-[(2- aminoetoxi) amino] -2-aza-3- [ (terbutoxi) carbonilamino] - prop-2 -enoato de ter-butilo: - N- (2 -hidroxietil) ( fenilmetoxi) carboxamida Se agrega a gotas cloroformiato de bencilo (63 ml , 443 mmoles) a una solución de etanolamina (60 g, 984 mmoles) en 300 ml de tetrahidrofurano. Después de agitar durante la noche, la mezcla se concentra in vacuo y se divide entre cloruro de metileno y HCl acuoso diluido. La capa orgánica separada se lava con NaHC03 acuoso diluido. Se seca con MgS04, se filtra y se concentra in vacuo para proporcionar 36 g del compuesto del título el cual se utiliza sin purificación adicional en la siguiente etapa. llÜtitii-iiii 11 -r*-¿ ***~- ~>«*** ?~* *' b. N- [2 - (1, 3 -dioxoisoindolin-2 - iloxi) etil] (fenilmetoxi) carboxamida Se agrega azodicarboxilato de dietilo (5.2 g, 30 mmoles) a una solución del producto de la parte experimental precedente (5.9 g, 30 mmoles), N-hidroxiftalimida (4.9 g, 30 mmoles) y t ifenilfosfina (7.9 g, 30 mmoles) en 100 ml de tetrahidrofurano. Después de agitar durante la noche, la mezcla se diluye con 200 ml de acetato de etilo y se lava con NaHC03 acuoso saturado (2 x 100 ml ) y 100 ml de salmuera. La capa orgánica separada se seca con Na2S0 , se filtra y se concentra in vacuo. El residuo se somete a cromatografía con Si02 utilizando un gradiente de elusión con 0-4% de acetato de etilo en cloruro de metileno para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (9.3 g, 91%) . RMN-1H (300 MHz, CDC13) d 7.84 (m, 2H) , 7.78 (m, 2H), 7.37 (m, 5H) , 5.97 (s amplio, 1H) , 5.14 (s, 2H) , 4.27 (t, J = 4.9 Hz, 2H) , 3.51 (c, J = 5.2 Hz, 2H) . c. N- [2 - (aminooxi) etil] ( fenil etoxi) carboxamida Se agrega metilamina (solución al 40% en peso, en H20, 2 ml , 25 mmoles) a una solución del producto a partir de la parte experimental precedente (1.36 g, 4.0 mmoles) en 20 ml de etanol y 20 ml de tetrahidrofurano. Después de agitar durante 1 hora, la mezcla se concentra in vacuo y el residuo resultante se somete a cromatografía con Si02 utilizando un gradiente de elusión con 75-100% de acetato de etilo en hexanos para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (800 mg, 95%) . RMN-1^ (300 MHz, CDC13) d 7.36 (m, 5H) , 5.47 (s amplio, 2H) , 5.21 (s amplio, 1H) , 5.10 (s, 2H) , 3.72 (t, J = 5.0 Hz, 2H) , 3.44 (c, J = 5.0 Hz, 2H) . d. 2-aza-3-[ (ter-butoxi) carboni amino] -3 - ( {2 - [ (fenilmetoxi) ) carbonilamino] - etoxi }amino) prop-2 -enoato de ter-butilo Una solución del producto de la parte experimental precedente (780 mg , 3.7 mmoles) y [N,N'- di ( ter-butoxicarbonil ) amidinopirazol (1.25 g, 4.0 mmoles) en 20 ml de N, N-dimetilformamida se agita durante la noche. La mezcla se concentra bajo alto vacío y el residuo resultante se somete a cromatografía con Si02 utilizando un gradiente de elusión con 0-5% de acetato de etilo en cloruro de metileno para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (1.55 g, 93%) . RMN-XH (300 MHz, CDC13) d 9.08 (s, 1H) , 7.67 (s, 1H) , 7.33 (m, 5H) , 6.21 (s amplio, 1H) , 5.21 (s amplio, 1H) , 5.11 (s, 2H) , 4.12 (t, J = 4.8 Hz, 2H) , 3.54 (c, J = 4.9 Hz, 2H) , 1.49 (s, 9H) , 1.46 (s, 9H) . e . 3 - [ (2-aminoetoxi) amino] -2-aza-3- [ (ter- butoxi) carbonilamino] prop -2 -enoato de ter-butilo Una solución del producto de la parte experimental precedente (730 mg , 1.5 mmoles) y 70 mg de paladio 10% en carbón, en 20 ml de etanol y 20 ml de tetrahidrofurano se agita a 1 atmósfera de hidrógeno durante 30 min. La mezcla se filtra a través de tierra de diatomeas y el filtrado se concentra in vacuo. El residuo se somete a cromatografía en 10 g de una columna SPE de sílice utilizando metanol 5%/cloruro de metileno saturado con amoniaco para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (290 mg , 61%) . RMN-1H (300 MHz, CDC13) d 9.08 (s amplio, 1H) , 4.08 (t, J = 5.2 Hz, 2H) , 2.99 (c, J = 5.1 Hz, 2H) , 1.50 (s, 9H) , 1.48 (s, 9H) . El compuesto descrito en la tabla 1 a continuación se sintetiza de la misma manera que el ejemplo 1. Estos compuestos se sintetizarán todos como fumaratos . Tabla 1 üt-i.^ ,-^aaifcfc;la^taarite"5***^" - 25 ?LiÁksM^i 25 • itfc.i ¿h£sim¡ á$) Ejemplo 28 2- [ ( 3S ) -3- ( {[4- ( 4 -clorof enil ) fenil ] sul fonil} amino) -2 oxopiperidil ] -N- [2 - ( amidinoaminooxi )etil ] acetamida 1. 3-( {2-[2-( (3S)-3-{[ ( 4 -yodo fenil )- sulfonil ] amino} -2 -oxopiperidil ) acetilamino ] etoxi } amino ) -2 -aza-3 - [ ( ter-butoxi ) carbonil - amino ]prop-2 -enoato de ter-butilo Se agrega cloruro de pipsilo (1.77 g, 5.8 mmoles) a una solución del producto del ejemplo 1.4 (2.50 g, 5.3 mmoles) y trietilamina (0.89 ml , 6.4 mmoles) , en 20 ml de cloruro de metileno. Después de agitar durante la noche, la mezcla se diluye con 20 ml de acetonitrilo, seguido por la adición de resina de aminometilo (1 g, 1.1 mmoles/g de resina) . La resina se elimina por filtración y el filtrado se concentra in vacuo para proporcionar el compuesto del título 2.48 g, 87%) el cual se utiliza sin purificación en la siguiente etapa. 2. 2-[(3S)-3-({[4~(4-clorofenil)fenil]sulfonil}- amino) -2 -oxopiperidil ] -N- [ 2 - ( amidinoaminooxi )etil ] acetamida •rfflUri i ftf - -^4-*- - - El producto de la parte experimental precedente (100 mg, 0.14 mmoles) se disuelve en 1 ml de tolueno y se agrega a un frasco que contiene ácido -clorofenilborónico (31 mg, 0.2 mmoles) y 10 mg de diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) . Esta mezcla después se diluye con 0.25 mm de etanol y 0.25 ml de bicarbonato de sodio acuoso saturado, se tapa y se calienta en un baño de arena a 80°C hasta que el color cambia a negreo (aproximadamente 30 minutos) . La mezcla se aplica directamente a 10 g de una columna SPE de sílice y se somete a cromatografía utilizando acetato de etilo como eluyente. Las fracciones deseadas se concentran in vacuo y el residuo se disuelve en ácido trifluoroacético/cloruro de metileno (1;1, 4 ml ) . Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se concentra in vacuo y el residuo se somete a cromatografía en 10 g de una columna SPE de sílice utilizando metanol 10%/cloruro de metileno saturado - con amoniaco. Las fracciones deseadas se concentran y disuelven en metanol que contiene un equivalente de ácido fumárico para proporcionar el compuesto del título como una sal de fumarato (15 mg, 17%) . EM : m/z = 523 (M+l) .

Ej emplo 29 2 - ( ( 3S ) -2 -oxo -3 - {[ ( 4 -pirimidin - 5 -il f enil ) sul fonil ] -amino}piperidil ) -N- [2 - ( amidinoaminooxi ) etil Jacetamida Se combinan en un frasco el producto del ejemplo 29.1 (100 mg , 0.14 mmoles), cloruro de litio (25 mg, 0.60 mmoles) , 3 mg de yoduro de cobre (I) , 7 mg de diclorobis (trifenilfosfina) paladio ( II ) y 5-tributilestanilpirimidina , se disuelven/suspenden en 1 ml de tolueno, se tapan y se calientan en un baño de arena a 80°C hasta que el color cambia a negro aproximadamente 30 minutos) . La mezcla se aplica directamente a 10 g de una columna SPE de sílice y se somete a cromatografía utilizando acetato de etilo como eluyente. Las fracciones deseadas se concentran in vacuo y el residuo se disuelve en ácido trifluoroacético/cloruro de metileno (1:1, 4 ml ) . Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se concentra in vacuo y el residuo se somete a cromatografía en 10 g de una columna SPE de sílice utilizando metanol 10%/cloruro de metileno saturado con amoníaco. Las fracciones deseadas se concentran y se disuelven en metanol que contiene un equivalente de ácido fumárico para proporcionar el compuesto del título como la sal fumarato (13 mg, 15%) . EM : m/z = 491 (M+l) . Los compuestos descritos en la tabla 2 a continuación se sintetizan de la misma manera que en el ejemplo 28, excepto que para el ejemplo 44 el cual se sintetiza de la misma manera que en el ejemplo 29. Todos estos compuestos se sintetizan como fumaratos. ¡¡¡¡g^g ^.^:A.A1 Í Tabla 2 rfiiifr IÍífí r-jAá"'-^ - rití lli-fcfii i - - 25 Ejemplo 45 2- ( (3S ) -3 -{[ ( 6 -bromo (2 -naf til ) sulfonil] amino} -2- oxopir rol idin) -N- [2 - ( amidinoaminooxi )etil ] acetamida 1. N- ( ( 3S ) -2 -oxopirrolidin-3 -il ) ( f nilmetoxi ) -carboxami da m.ifáS?,-.* . .M.*Aii!***u ¡f?»+ít Se agrega a gotas difenilfosforilazida (11.1 ml, 51.3 mmoles) a una solución de éster a-metílico del ácido N-benciloxicarbonil-L-glutámico (13.8 g, 46.7 mmoles) y trietilamina (7.2 ml, 51.3 mmoles) en ter-butanol. Después de agitar durante la noche a 95°C, la mezcla se concentra in vacuo, se disuelve en cloruro de metileno y se lava secuencialmente con HCl acuoso diluido y con NaHC03. La capa orgánica se separa, se seca con MgS04, se filtra y se concentra in vacuo. La adición de éter dietílico resulta en la formación de un precipitado el cual se separa por filtración para proporcionar (6S) -6- (metoxicarbonil) -2-oxo-1, 3-diazaperhidroinocarboxilato de fenilmetilo como un sólido blanco (4.0 g, 29%). RMN-1!! (300 MHz, DMSO-d6) d 7.37 (m, 6H) , 5.18 (s, 2H) , 4.83 (t, J=5.2 Hz, 1H) , 3.65(s, 3H) , 3.10 (m, 1H) , 2.95 (m, 1H) , 2.16 (m, 1H) , 2.03 (m, 1H) . El filtrado se concentra in vacuo y el residuo se disuelve en 50 ml de cloruro de metileno seguido por la adición de 50 ml de ácido trifluoroacético. Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se concentra in vacuo y el residuo se divide entre cloruro de metileno e hidróxido de sodio acuoso diluido. La capa orgánica separada se seca con MgS04, se filtra y se concentra in vacuo . La adición de éter dietílico resulta en la formación de un precipitado el cual se separa por filtración para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (3.0 g, 28%). RMN^H (300 MHz, DMSO-d6) ÍÜ |y rlUí í jjMÉiir-'--^^^^ d 7.78 (s amplio, 1H) , 7.51 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 7.36 (m, 5H) , 5.03 (s, 2H) , 4.09 (m, 1H) , 3.14 (m, 2H) , 2.26 (m, 1H) , 1.85 (m, 1H) . 2. ácido 2-{(3S) -2-Oxo-3- [ ( fenilmetoxi )carbonilamino pirrolidinil}acético Se agrega a gotas bis (trimetilsilil) amida de litio (13 ml, 1.0 M en tetrahidrofurano) en una solución enfriada con hielo del producto a partir de la parte experimental precedente (2.77 g, 11.8 mmoles) en 60 ml de tetrahidrofurano. Ante la adición completa, se agrega a gotas a la mezcla bromoacetato de etilo (2.6 ml, 23.7 mmoles) . Después de agitar durante 30 minutos, se agregan 1.2 ml de etilendiamina y se continúa agitando durante 30 minutos adicionales. La mezcla se concentra in vacuo, el residuo se disuelve en cloruro de metileno y se lava secuencialmente con HCl acuoso diluido y NaHC03 acuoso diluido. La capa orgánica separada se seca con MgS0, se filtra y se concentra ín vacuo. Se disuelven 3.5 g del producto crudo en 60 ml de metanol seguido por la adición de 40 ml de NaOH 1.0 M. Después de agitar durante la noche, el metanol se evapora in vacuo y la solución acuosa básica resultante se extrae dos veces con cloruro de metileno (se desecha). La capa acuosa después se acidifica con HCl 1.0 N hasta un pH de 1-2 y se extrae con cloruro de metileno. La capa acuosa después se satura con cloruro de sodio (sólido) y se extrae adicionalmente con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secan con Na2S0) , se filtran y se concentran in vacuo . La adición de éter dietílico resulta en la formación de un precipitado el cual se filtra para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (3.0 g, 86%). No es necesaria purificación adicional . 3. 3- {(2- (2- {(3S) -2-oxo-3 - [ ( fenilmetoxi amino- 2 -aza- 3 - [ ( ter-butoxi )carbonilamino]prop- 2 -enoato de ter-butilo Se agrega hexafluorofosfato de benzotriazol-1- iloxitris (dimetilamino) fosfonio (4.8 g, 10.8 mmoles) en una sola porción a una solución del producto de la parte experimental precedente (2.9 g, 9.8 mmoles), 3-[(2- aminoetoxi) amino]-2-aza-3- [ (tert-butoxi) carbonilamino]prop-2- enoato de ter-butilo (3.4 g, 10.8 mmoles) y N,N- diisopropiletilamina (1.9 ml, 10.8 mmoles) en 80 ml de N,N- dimetilformamida. Después de agitar durante la noche, la mezcla se concentra in vacuo, se diluye con cloruro de metileno y se lava secuencialmente con HCl acuoso diluido y NaHC03 acuoso diluido. La capa orgánica separada se seca con MgS04, se filtra y se concentra in vacuo para proporcionar 7.5 g del compuesto del título como un producto crudo el cual se utiliza sin purificación adicional en la siguiente etapa. 4. 3 - ( {2- [2- ( (3S) -3 -amino-2- oxopirrolidinil ) acetilamino]etoxi}amino ) -2-aza-3 - [ (ter- butoxi )carbonilamino]prop-2 -enoato de ter-butilo Una solución del producto de la parte experimental - precedente (7.5 g, crudo) y 750 mg de paladio 10% en carbón, en 100 ml de etanol y 7 ml de cloroformo se agita durante la noche bajo la atmósfera de hidrógeno. La mezcla se filtra a través de tierra de diatomeas y el filtrado se concentra in vacuo. El residuo se divide entre cloruro de metileno y HCl 0.1 N. La capa acuosa se extrae una segunda vez con cloruro de metileno y estos extractos se desechan. La capa acuosa después se vuelve básica con NaOH 1.0 M a un pH de 10-11 y se extrae con cloruro de metileno. La capa orgánica separada se seca con Na2S04, se filtra y se concentra in vacuo para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (1.0 g, 22% para las etapas 3 y 4) . No es necesaria purificación adicional. 5. 2- ( (3 -S) -3 - {[ (6-Bromo(2-naftil )sulfonil]amino}-2-oxopirrolidinil ) -N- [2 - ( amidinoaminooxi )etil]acetamida Se agrega cloruro de 6-bromo-2-naftalenosulfonilo (73 mg, 0.24 mmoles) en una sola porción a una solución del producto de la parte experimental precedente (100 mg, 0.21 mmoles) y dimetilaminopiridina en poliestireno (220 mg, « 2 mmoles de dimetilaminopiridina/g de resina) en 3 ml de cloruro de metileno. Después de agitar durante la noche, la mezcla se diluye con 3 ml de acetonitrilo, seguido por la adición de resina de aminometilo (250 mg, « 1.1 mmoles/g de resina) . Después de agitar durante 30 minutos, las resinas se remueven por filtración y el filtrado se concentra in vacuo . El residuo se disuelve en 2 ml de cloruro de metileno y 1 ml de ácido trifluoroacético, y se agita durante 30 minutos. La mezcla posteriormente se concentra in vacuo y se somete a cromatografía en 10 g de una columna de SPE de sílice utilizando metanol 10%/cloruro de metileno saturado con amoniaco. Después de concentrar las fracciones deseadas, el producto se agita en metanol con 1 equivalente de ácido fumárico y se concentra in vacuo para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (64 mg, 42%) . EM: m/z=527/529(M+l) . Se sintetizan los compuestos descritos en la tabla 3 a continuación, de la misma manera que el ejemplo 28, excepto que se utiliza como material inicial el compuesto del ejemplo 45.4. Estos compuestos se sintetizan, todos, como fumaratos .

Tabla 3 ^« ^ ^*^**- f- * f-^pfltt^^^ ^;*^^ *.

- Ejemplo 51 Preparación de tabletas Se preparan como se ilustra en lo siguiente tabletas que contienen 25.0, 50.0 y 100.0 mg, respectivamente, de los siguientes compuestos activos: a. 2- { (3S) -3- [ (2-naftilsulfonil) amino]-2 -oxopiperidil } -N- [2- (amidinoaminooxi) etiljacetamida; y b. 2- (3S) -3-{ [(6-bromo(2-naftil) ) sulfoniljamino} -2-oxopirrolidinil) -N- [2- (amidinoaminooxi) etiljacetamida.

TABLETAS PARA DOSIS QUE CONTIENEN 25-100 MG DEL COMPUESTO ACTIVO Cantidad-mg Compuesto activo 25.0 50.0 100.00 Celulosa microcristalina 37.25 100.0 200.0 Almidón de maíz alimenticio modificado 37.25 4.25 8.5 Estearato de magnesio 0.50 0.75 1.5 '". ~ ' La totalidad del compuesto activo, la celulosa y una porción del almidón de maíz se mezclan y granulan hasta una pasta de almidón de maíz 10%. La granulación resultante se tamiza, se seca y se combina con el resto del almidón de maíz y el estearato de magnesio. La granulación resultante después se comprime en tabletas que contienen 25.0, 50.0 y 100.0 mg, respectivamente, del ingrediente activo por tableta. 0 Ejemplo 52 Preparación de una solución intravenosa Se prepara como sigue una forma de dosificación intravenosa del compuesto activo indicado en lo anterior: 5 Compuesto activo 0.5-10.0 mg Citrato de sodio 5-50 mg Ácido cítrico 1-15 mg Cloruro de sodio 1-8 mg 0 Agua para inyección (USP) c.s. hasta 1 ml Utilizando las cantidades anteriores, se disuelve el 5 compuesto activo, 2- { (3S) -3- { (2-naftilsulfonil) aminoJ-2- ?-a?íhíi-oxopiperidil} -N- [2- (amidinoaminooxi) etiljacetamida, temperatura ambiente en una solución preparada previamente de cloruro de sodio, ácido cítrico y citrato de sodio en agua para inyección (USP, véase la página 1636 de United States Pharmacopeia/National Formulary para 1995, publicada por United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, Maryland (1994) .

Ejemplo 53 Inhibición in vitro de Enzimas Purificadas Reactivos: Todas las sales de amortiguadores se obtienen de Sigma Chemical Company (St. Louis, MO) , y son de la mayor pureza disponible. Los sustratos de enzima, N-benzoil-Phe-Val-Arg-p-nitroanilida (Sigma B7632) , clorhidrato de N-benzoil-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilida (Sigma B2291) , N-p-Tosyl-Gly-Pro-Lys-p-nitroanilida (Sigma T6140) , N-succinil-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilida (Sigma S7388) y N-CBZ-Val-Gly-Arg-p-nitroanilida (Sigma C7271) se obtienen de Sigma. N-succinil-Ala-Ala-Pro-Arg-p-nitroanilida (BACHEM L-1720) y N-succinil-Ala-Ala-Pro-Val -p-nitroanilida (BACHEM L-1770) se obtienen de BACHEM (King of Prussia, PA) .

Se obtienen trombina a humana y factor humano Xa de Enzime Research Laboratories (South Bend, Indiana) . Se - obtienen quimiotripsina a bovina (Sigma C4129) , tripsina bovina (Sigma T8642) y urocinasa de células de riñon humanas (Sigma U5004) de Sigma. Se obtiene elastasa leucocitaria humana de Elastin Products (Pacific, MO) . Determinaciones de K¿: todos los ensayos se basan en la capacidad del compuesto de prueba para inhibir la hidrólisis catalizada por enzima de un sustrato péptido p-nitroanilida. En una determinación Ki habitual, se prepara el sustrato en DMSO y se diluye en un amortiguador de ensayo que contiene HEPES 50 mM, NaCl 200 mM, pH 7.5. Las concentraciones finales para cada uno de los sustratos se incluyen en lo siguiente. En general, las concentraciones de sustrato son menores que los valores determinados experimentalmente para Km. Los compuestos de prueba se preparan como una solución de 1.0 mg/ml en DMSO. Las dilusiones se preparan en DMSO lo que proporciona 8 concentraciones finales que abarcan un intervalo de concentración de 200 veces. Las soluciones de enzima se preparan a las concentraciones indicadas a continuación en el amortiguador de ensayo. En una determinación típica de Ki, dentro de cada pozo de una placa de 96 pozos se colocan con pipeta 280 ml de solución de sustrato, 10 ml de solución de compuestos de prueba y se permite que la placa se equilibre térmicamente a 37°C en un lector de placas Molecular Devices durante •'J ?' >15 minutos. Las reacciones se inician por la adición de una alícuota de 10 ml de enzima y se registra el incremento de absorbancia a 405 nm durante 15 minutos. En los cálculos se utilizan los datos que corresponden a menos de 10% de 5 hidrólisis de sustrato total. La relación de la velocidad (tasa de cambio en la absorbancia como función del tiempo) para una muestra que no contiene compuesto de prueba se divide entre la velocidad de una muestra que contiene compuesto de prueba y se gráfica como una función de la 0 concentración del compuesto de prueba. Los datos se ajustan a una regresión lineal, y se calcula el valor de la pendiente de la línea. El inverso de la pendiente es el valor Ki determinado experimentalmente . Trombinas : Se determina la actividad de trombina como 5 la capacidad para hidrolizar el sustrato N-succinil-Ala-Ala- Pro-Arg-p-nitroanilida. Se preparan soluciones de sustrato a una concentración de 32 mM (32 mM<<Km = 180 mM) en amortiguador de ensayo. La concentración final de DMSO es de 4.3%. Se diluye trombina a humana purificada en amortiguador 0 de ensayo a una concentración de 15 nM. Las concentraciones de reactivo final fueron: [trombina] = 0.5 nM, [sustrato, N- succinil-Ala-Ala-Pro-Arg-p-nitroanilidaJ = 32 mM. Factor X [FXaJ: Se determina la actividad de FXa como la capacidad de hidrolizar el sustrato clorhidrato de N- benzoil-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilida. Se preparan ; ?yfg -S. ilíiiif l li luliliiiiiHil-iliii íi^-^^^^^-^-^-^^^-^-^^iiiiillifiiiiiilí íÉÉMi? IIII iiTrf tfffl r soluciones de sustrato a una concentración de 51 mM (51- Km = 1.3 mM) en amortiguador de ensayo. La concentración final de DMSO es de 4.3%. Se diluye factor X humano activado y purificado en amortiguador de ensayo a una concentración de 300 nM. Las concentraciones finales de reactivo son: [FXa] = 10 nM, [clorhidrato de N-benzoil-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilidaj = 51 mM. En general, los compuestos de la invención muestran actividad estadísticamente significativa contra trombina o contra factor Xa, o contra ambos. Los valores Kx medidos para cada uno de los compuestos ejemplificados para una o ambas de las enzimas son menores de 10 µM. Por ejemplo, se encontró que el compuesto descrito en el ejemplo 2 tiene una Ki de 0.70 µM contra trombina y no presenta actividad a una concentración de 10 µM contra el factor Xa. Se encontró que el compuesto del ejemplo 11 tiene una Ki de 1.2 µM contra trombina y una K de 2.1 µM contra el factor Xa. Se encontró que el compuesto del ejemplo 42 tiene un Ki de 6.4 µM contra trombina y una K-. de 0.36 µM contra el factor Xa. Habiendo ahora descrito por completo esta invención, se entenderá por aquellos habitualmente expertos en la técnica que la misma se puede llevar a cabo dentro de una amplitud y equivalencia de alcance de condiciones, formulaciones y otros parámetros sin afectar el alcance de la invención o de cualquier modalidad de la misma. Todas las patentes y publicaciones mencionadas en la presente se incorporan por completo como referencia en la presente, en su totalidad. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. ?fj|l ^liÍf|tf^^M^^^^^^i^^M..J..^^-¿^.^^^.iAlAl

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: Un compuesto que tiene la fórmula I : o sales farmacéuticamente aceptables de las mismas; caracterizado porque: Q es arilo de 6 a 14 átomos de carbono, ar (de 6 a 14 átomos de carbono ) alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, ar (de 6 a 14 átomos de carbono ) alquenilo de 2 a 4 átomos de carbono, piridilo, tienilo, mdolilo, quinolinilo, benzotienilo o imidazolilo; cualquiera de las cuales puede incluir uno o más sustituyentes opcionales que se seleccionan independientemente de - halo, trifluorometilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, metilendioxi, carboxiamino, alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono, ariloxicarbonilamino de 6 a 10 átomos de carbono, aralcoxicarbonilamino de 7 a 11 átomos de carbono, aminocarbonilo, monoalquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono o dialquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, acetamido, amidino, piridilo, naftilo, pirimidinilo, alquenilo, monoalquilamino de 1 a 4 átomos de carbono o dialquilamino de 1 a 4 átomos de carbono o combinaciones de los mismos; X es metileno, carbonilo o sulfonilo; R1 es hidrógeno o alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; n es 1 , 2 ó 3 ; m es 1-4, preferiblemente 1 ó 2; R2 es hidrógeno o alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; R3 es hidrógeno o alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; y R4 , R5 y R6 son independientemente hidrógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, ciano o -C02Rw, en donde Rw, en cada caso, preferiblemente es uno de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 4 a 7 átomos de carbono, bencilo, o Rw es uno de en donde R , Re y R9 son cada uno hidrógeno, Rf es metilo y Rh es bencilo o terbutilo. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque Q es arilo, aralquilo o tienilo, cualquiera de los cuales puede incluir uno o más sustituyentes opcionales seleccionados independientemente del grupo que consiste de halo, trifluorometilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, metilendioxi, carboxiamino , alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono, ariloxicarbonilamino de 6 a 10 átomos de carbono, aralcoxicarbonilamino de 7 a 11 átomos de carbono, aminocarbonilo, mono- o di- alquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, - acetamido, amidino, piridilo, naftilo, pirimidinilo, alquenilo, mono o di -alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono y combinaciones de los mismos. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque Q es fenilo o bifenilo, cualquiera de los cuales puede incluir uno o más sustituyentes opcionales seleccionados independientemente del grupo que consiste de halo, trifluorometilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, metilendioxi, carboxiamino, alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono, ariloxicarbonilamino de 6 a 10 átomos de carbono, aralcoxicarbonilamino de 7 a 11 átomos de carbono, aminocarbonilo, mono- o di-alquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, acetamido, amidino, piridilo, naftilo, pirimidinilo, alquenilo, mono o dialquilamino de 1 a 4 átomos de carbono y combinaciones de los mismos . 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque Q es naft-1- ilo, naf-2-ilo, 5-dimetilaminonaft - 1 -ilo , 6-cloronaft- 2-ilo, 6 -bromonaft -2 -ilo, bencilo, 2 -nitrobencilo, fenilo, 2 -metilfenilo, 3 -metilfenilo , 4-(n- propil ) fenilo, 4 - (t -butil ) fenilo, 4 - (t -amil ) fenilo, 4- - mfetoxifenilo, 4 -yodofenilo, 4 -fluorofenilo, 4-clorofenilo, 3 , 4 -diclorofenilo, 4 -nitrofenilo, 4-metilfenilo, 4 -etilfenilo, 4 -etenilfenilo, 3,4-dimetoxifenilo o 2 -feniletenilo . 5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque Q es 4- (2-metilfenil) fenilo, 4 - (2 -metoxifenil ) fenilo, 4-(3-clorofenil) fenilo, 4 - (3 -fluorofenil ) fenilo, 4-(3-metoxifenil) fenilo, 4 - (4 -fluorofenil ) fenilo, 4- (4-metilfenil) fenilo, 4 - (4 -metoxifenil) fenilo, 4- (2,4-difluorofenil ) fenilo, 4- (3 , 4 -diclorofenil ) fenilo, 4-(3 , 4 -dimetoxifenil) fenilo, 4 -naft -2 -ilfenilo, 4-pirid-4-ilfenilo, 4 -pirid-2 -ilfenilo , bifenilo 4- (4-clorofenil ) fenilo, 4 -pirimidin- 5 - ilfenilo o 5-(pirid-5-il) tien-2-ilo. 6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque n es 1 ó 2. 7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque X es S02. 8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque m es 1 ó 2. 9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque m es 1. 10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1, R2 y R3 se í i '"'Seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, metilo, etilo, n-propilo e isopropilo. 11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1, R2 y R3 son hidrógeno . 12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R4, R5 Y Rß se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, n-butilo, hidroxi, metoxi, etoxi, ciano, -C02CH3, -C02CH2CH3 y -C02CH2CH2CH3. 13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R4, R5 y R6 son cada uno hidrógeno. 14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: Q es fenilo, bifenilo, naftilbencilo, fenetilo, naftilmetilo o tienilo, de manera más preferible fenilo o bifenilo, cualquiera de estos grupos está opcionalmente sustituido por uno o tres sustituyentes opcionales que se seleccionan independientemente de halo, trifluorometilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, alcoxi de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, metilendioxi, carboxiamino, alcoxicarbonilamino de 1 a - ^?*»^^ *^* *** . * 4 -átomos de carbono, ariloxicarbonilamino de 6 a 10 átomos de carbono, aralcoxicarbonilamino de 7 a 11 átomos de carbono, aminocarbonilo, monoalquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono o dialquilaminocarbonilo de 1 a 4 átomos de carbono, acetamido, amidino, piridilo, naftilo, pirimidinilo, alquenilo, monoalquilamino de 1 a 4 átomos de carbono 0 dialquilamino de 1 a 4 átomos de carbono; X es carbonilo o sulfonilo, de manera más preferible sulfonilo; n es 1 ó 2 ; m es 1 ó 2 , de manera más preferible 1 ; R1, R2 y R3 son hidrógeno; y R4 , R5 y R6 son independientemente hidrógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, ciano o -C02R , en donde Rw en cada caso, preferiblemente es uno de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 4 a 7 átomos de carbono, bencilo, o Rw es uno de en donde Rd, Re y Rg son cada uno hidrógeno, Rf es metilo y Rh es bencilo o terbutilo. 15. Una composición farmacéutica caracterizado porque un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 ; y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. 16. Un método para inhibir factor Xa, caracterizado porque comprende poner en contacto factor Xa con un compuesto de conformidad con la reivindicación 1. 17. Un método para tratar un trastorno mediado por factor Xa en un mamífero, caracterizado porque comprende administrar al mamífero en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1. 18. Un método para tratar trombosis, isquemia, apoplejía, restenosis o inflamación, caracterizado porque comprende administrar al mamífero en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1. 19. Un método para elaborar un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende : acoplar o condensar un compuesto de fórmula II o una sal del mismo, en donde R4 , R5 y R6 son como se definen en la presente, u opcionalmente protegidos, y m es como se define en la presente, con un compuesto de fórmula III : en donde R51 es H o Q-X-, en donde Q, X, R1 , R2, R3 , R4 , R5 y R6 son como se definen de conformidad con la reivindicación 1. i^^^Éfet^^^^^J^^i^»