CZ2006606A3 - Zpusob prípravy rozpustné formulace ve vode nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidu, rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostredek obsahující tuto rozpustnou formulaci - Google Patents
Zpusob prípravy rozpustné formulace ve vode nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidu, rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostredek obsahující tuto rozpustnou formulaci Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2006606A3 CZ2006606A3 CZ20060606A CZ2006606A CZ2006606A3 CZ 2006606 A3 CZ2006606 A3 CZ 2006606A3 CZ 20060606 A CZ20060606 A CZ 20060606A CZ 2006606 A CZ2006606 A CZ 2006606A CZ 2006606 A3 CZ2006606 A3 CZ 2006606A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- group
- terpenoid
- substituents
- general formula
- sup
- Prior art date
Links
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 title claims abstract description 77
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 49
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 42
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims abstract description 39
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 37
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims abstract description 28
- -1 rhamnosyl Chemical group 0.000 claims abstract description 25
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 24
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 14
- 125000002519 galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims abstract description 9
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims abstract description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 8
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims abstract description 8
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000000089 arabinosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 claims abstract description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 25
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 18
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical class C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 125000004450 alkenylene group Chemical group 0.000 claims description 11
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 claims description 11
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 11
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 9
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 8
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000000732 arylene group Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical class OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 5
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical class OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HJJPJSXJAXAIPN-UHFFFAOYSA-N arecoline Chemical class COC(=O)C1=CCCN(C)C1 HJJPJSXJAXAIPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 4
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical class OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 claims description 4
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N glutaric acid Chemical compound OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 5
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims 2
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 claims 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 93
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 43
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 27
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 24
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 24
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 14
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 12
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 12
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 12
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- FVWJYYTZTCVBKE-ROUWMTJPSA-N betulin Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(CO)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C FVWJYYTZTCVBKE-ROUWMTJPSA-N 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- JYDNKGUBLIKNAM-UHFFFAOYSA-N Oxyallobutulin Natural products C1CC(=O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(CO)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C JYDNKGUBLIKNAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- MVIRREHRVZLANQ-UHFFFAOYSA-N betulin Natural products CC(=O)OC1CCC2(C)C(CCC3(C)C2CC=C4C5C(CCC5(CO)CCC34C)C(=C)C)C1(C)C MVIRREHRVZLANQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N betulinic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N 0.000 description 8
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 8
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 8
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 8
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 6
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 3-Epi-Betulin-Saeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-20(29)-Lupen-3,27-oic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C(O)=O)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 5
- DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N Betulinic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1C[C@H]([C@H]2CC[C@]3(C)[C@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N 0.000 description 5
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N dihydrobetulinic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(C)C)C5C4CCC3C21C PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000005594 diketone group Chemical group 0.000 description 5
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 5
- MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N nepehinol Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 5
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ADUKOIDWZQRBNQ-LYOFKBFXSA-N benzyl (1r,3as,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13ar,13br)-9-hydroxy-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-1-prop-1-en-2-yl-1,2,3,4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a,13b-hexadecahydrocyclopenta[a]chrysene-3a-carboxylate Chemical compound O=C([C@]12CC[C@H]([C@@H]1[C@@H]1[C@@]([C@@]3(CC[C@H]4C(C)(C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC1)C)(C)CC2)C(=C)C)OCC1=CC=CC=C1 ADUKOIDWZQRBNQ-LYOFKBFXSA-N 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 4
- WLWNRAWQDZRXMB-YLFCFFPRSA-N (2r,3r,4r,5s)-n,3,4,5-tetrahydroxy-1-(4-phenoxyphenyl)sulfonylpiperidine-2-carboxamide Chemical compound ONC(=O)[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)CN1S(=O)(=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 WLWNRAWQDZRXMB-YLFCFFPRSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003842 bromide salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- XBZYWSMVVKYHQN-MYPRUECHSA-N (4as,6as,6br,8ar,9r,10s,12ar,12br,14bs)-10-hydroxy-2,2,6a,6b,9,12a-hexamethyl-9-[(sulfooxy)methyl]-1,2,3,4,4a,5,6,6a,6b,7,8,8a,9,10,11,12,12a,12b,13,14b-icosahydropicene-4a-carboxylic acid Chemical compound C1C[C@H](O)[C@@](C)(COS(O)(=O)=O)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C XBZYWSMVVKYHQN-MYPRUECHSA-N 0.000 description 2
- PAAZPARNPHGIKF-UHFFFAOYSA-N 1,2-dibromoethane Chemical compound BrCCBr PAAZPARNPHGIKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTKMFQOHBDVEBC-UHFFFAOYSA-N 3-bromo-3-buten-1-ol Chemical compound OCCC(Br)=C RTKMFQOHBDVEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VWXGRWMELBPMCU-UHFFFAOYSA-N 5-chloro-1-[3-(dimethylamino)propyl]-3-phenylbenzimidazol-2-one Chemical compound O=C1N(CCCN(C)C)C2=CC=C(Cl)C=C2N1C1=CC=CC=C1 VWXGRWMELBPMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- LGRFSURHDFAFJT-UHFFFAOYSA-N Phthalic anhydride Natural products C1=CC=C2C(=O)OC(=O)C2=C1 LGRFSURHDFAFJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JHVLLYQQQYIWKX-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-bromoacetate Chemical compound BrCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 JHVLLYQQQYIWKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000188 beta-D-glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 2
- JHIWVOJDXOSYLW-UHFFFAOYSA-N butyl 2,2-difluorocyclopropane-1-carboxylate Chemical compound CCCCOC(=O)C1CC1(F)F JHIWVOJDXOSYLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- UVJHQYIOXKWHFD-UHFFFAOYSA-N cyclohexa-1,4-diene Chemical compound C1C=CCC=C1 UVJHQYIOXKWHFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- OXWLZVSYHCZISK-BWXYOZBYSA-N ethyl (1r,3as,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13ar,13br)-9-hydroxy-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-1-prop-1-en-2-yl-1,2,3,4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a,13b-hexadecahydrocyclopenta[a]chrysene-3a-carboxylate Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CC[C@]1(C)[C@@H]2CC[C@@H]2[C@H]3[C@H](C(C)=C)CC[C@]3(C(=O)OCC)CC[C@]21C OXWLZVSYHCZISK-BWXYOZBYSA-N 0.000 description 2
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 229940075610 mercuric cyanide Drugs 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- ZXSQEZNORDWBGZ-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydropyrrolo[2,3-b]pyridin-2-one Chemical compound C1=CN=C2NC(=O)CC2=C1 ZXSQEZNORDWBGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OIDIRWZVUWCCCO-UHFFFAOYSA-N 1-ethylpyridin-1-ium Chemical compound CC[N+]1=CC=CC=C1 OIDIRWZVUWCCCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VIAWXLFFSHQNAO-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]butan-1-ol Chemical compound CCC(CO)N(CCO)CCO VIAWXLFFSHQNAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZZMTSNZRBFGGU-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-7-fluoroquinazolin-4-amine Chemical compound FC1=CC=C2C(N)=NC(Cl)=NC2=C1 FZZMTSNZRBFGGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- HEAGFHFUNLORMM-UHFFFAOYSA-N OCC(O)=O.c1cnccn1 Chemical compound OCC(O)=O.c1cnccn1 HEAGFHFUNLORMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N Propyl gallate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLPWGHLVUPBSLP-IJLUTSLNSA-N [(2r,3r,4r)-3,4-diacetyloxy-3,4-dihydro-2h-pyran-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@H]1OC=C[C@@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O LLPWGHLVUPBSLP-IJLUTSLNSA-N 0.000 description 1
- LLPWGHLVUPBSLP-UTUOFQBUSA-N [(2r,3s,4r)-3,4-diacetyloxy-3,4-dihydro-2h-pyran-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@H]1OC=C[C@@H](OC(C)=O)[C@@H]1OC(C)=O LLPWGHLVUPBSLP-UTUOFQBUSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000003550 alpha-D-galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 150000001414 amino alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N benzyl bromide Chemical compound BrCC1=CC=CC=C1 AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 125000005997 bromomethyl group Chemical group 0.000 description 1
- CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N butane-1,1-diol Chemical compound CCCC(O)O CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000006203 morpholinoethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])([H])N1C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 150000002966 pentacyclic triterpenoids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- BBFCIBZLAVOLCF-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;bromide Chemical compound Br.C1=CC=NC=C1 BBFCIBZLAVOLCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 229910001958 silver carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- LKZMBDSASOBTPN-UHFFFAOYSA-L silver carbonate Substances [Ag].[O-]C([O-])=O LKZMBDSASOBTPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 150000003521 tetracyclic triterpenoids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J71/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
- C07J71/0036—Nitrogen-containing hetero ring
- C07J71/0042—Nitrogen only
- C07J71/0047—Nitrogen only at position 2(3)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
- A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
- C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Je popsán zpusob prípravy rozpustné formulace ve vode nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidu, pri nemž se ve vode nerozpustný pentacyklický nebo tetracyklický terpenoid mající volnou karboxylovou, hydroxylovou nebo amino funkcní skupinu derivatizuje na této funkcní skupine substituentem vybraným ze skupiny zahrnující substituenty obecného vzorce X.sup.a.n. vázané na hydroxyskupinu terpenoidu, kde X.sup.a.n. reprezentuje -OC-R-COOH, substituenty obecného vzorce X.sup.a.n. vázané na aminoskupinu terpenoidu, kde X.sup.a.n. je -OC-R-COOH, kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce X.sup.b.n. vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde X.sup.b.n. reprezentuje -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.N.sup.+.n.R.sub.4.n.Y.sup.-.n., kvartérníamoniové substituenty obecného vzorce X.sup.c.n. vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde X.sup.c.n. reprezentuje -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.R.sup.+.n.Y.sup.-.n., substituenty obecného vzorce X.sup.d.n. vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde X.sup.d.n. reprezentuje -R-COOH, glykosylové substituenty X.sup.e.n. vázané .alfa. nebo .beta. glykosidickou vazbou na hydroxyskupinu terpenoidu, kde X.sup.e.n. je vybrán ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, arabinosyl, rhamnosyl, laktosyl, cellobiosyl, maltosyl a jejich 2-deoxyanaloga, a následne se pripravený derivát rozpustí v roztoku obsahujícím vodu, cyklodextrin a poprípade farmaceuticky prijatelné pomocné látky za tvorby inkluzního komplexu s cyklodextrinem. Dále je popsána rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu, obsahující inkluzní komplex derivatizovaného pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a cyklodextrinu a popr
Description
Způsob přípravy rozpustné formulace ve vodě nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidů, rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostředek obsahující tuto rozpustnou formulaci
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu přípravy rozpustné formulace ve vodě nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidů, rozpustné formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutického prostředku obsahujícího tuto rozpustnou formulaci.
Dosavadní stav techniky
Pentacyklické a tetracyklické terpenoidy představují skupinu přírodních látek - isoprenoidů s Širokou paletou biologických aktivit (Dzubak, P.; Hajduch, M.; Vydra, D,; Hustova, A., Kvasnica, M.; Biedermann, D.; Markova, L.; Urban, M.; Šarek, J. Nat. Prod. Rep. 2006, 23, 394-411), díky kterým se stávají středem zájmu farmaceutického průmyslu. Avšak ani modifikované ani semisyntetické deriváty těchto přírodních látek většinou nemají optimální farmakologické vlastnosti. Mezi jejich nevýhody patří zejména nízká rozpustnost v médiích založených na vodné bázi a dále nevýhodné farmakokinetické ukazatele jako např. nízká biologická dostupnost, krátký poločas vylučováni a nedostatečná stabilita, které jsou naprosto nevhodné pro provádění in vivo testů na zvířatech, jakož i následné využití pro léčbu pacientů.
r
Pentacyklické a tetracyklické terpenoidy jsou jako sloučeniny s lipofilním rigidním skeletem, tvořeným 25 - 30 atomy uhlíku, ve vodě téměř nerozpustné, a to i když nesou polární funkční skupiny jako -OH, -COOH, =0, -NH2 a další. Pro rozpouštění pro farmaceutické účely není možné využít rozpouštědel běžně používaných v chemické praxi, jako je chloroform, aceton, ethylacetát apod., z důvodu jejich ínkompatibility s živými organismy, Z literatury je však známo, že pentacyklické triterpenoidní kyseliny vytvářejí v přítomnosti alkalických uhličitanů nebo hydrogenuhličitanů s cyklodextriny inkluzní sloučeniny, které jsou za přídavku vhodných aditiv rozpustné v médiích založených na vodné bázi (WO 92/09553). Je popsáno, že nejlepší rozpustnosti triterpenoidních kyselin lze dosáhnout použitím vyšších cyklodextrinů, jmenovitě β a y, a jako aditiv je využíváno nižších alkoholů (methanol) nebo glykolů (propylenglykol, butandiol) (Uekama K., Hirayama F., Irie T.: Chem. Rev. 1998, 98, 2045-2076, Hedges A. R.: Chem. Rev, 1998, 98, 2035-2044). V používaných vehikulech dosahují triterpenoidní kyseliny ··· rozpustnosti mezi 10 - 50 rag/ml (WO 92/09553). Inkluzní sloučeniny lze izolovat z jejich roztoků pomocí lyofilizace jako pevné látky ve formě prášků. Avšak takto lze rozpustit v médiích založených na vodné bázi pouze nativní triterpenoidní karboxylové kyseliny s volnou karboxylovou funkcí, nikoli jejich funkční deriváty nebo takové terpenoidy, které karboxylovou funkci nemají. Navíc ve farmaceutické praxi se často biologicky aktivní volné triterpenoidní kyseliny, které mají řadu nevýhodných farmakologických vlastností, např. obtížnou purífikovatelnost a nestabilitu, převádějí na deriváty, které přinášejí často pomalejší metabolizaci (zvýšení poločasu rozpadu), zvýšení stability nebo působí jako prodrug. Jedním typem takových derivátů jsou různé biologicky štěpitelné estery, jako např. morfolinoethylestery, acetoxymethylestery, heptylestery a další. (Gewehr M., Kunz H.: Synthesis 1997,1499; Urban M., Šarek J., Tislerova L, Dzubak P., Hajduch M.: Bioorg. Med. Chem. 2005,13, 5527)
Deriváty karboxylových kyselin jsou však obecně ještě méně kompatibilní s vodnými vehikuly než jsou volné kyseliny. Pro využití derivátů karboxylových kyselin ve farmaceutické praxi je tedy nezbytné nalézt formulaci, která umožní jejich použití s vehikuly na vodné bázi.
Z výše uvedených důvodů je zřejmé, že pro další vývoj je nutné připravit takové deriváty nerozpustných biologicky aktivních pentacyklických a tetracyklických terpenoidů, které jsou rozpustné v médiích založených na vodné bázi, jsou biodostupné (nejlépe orálně dostupné), mají vhodný poločas vylučování a jsou stabilní neboli mají optimální farmakokinetické parametry.
Podstata vynáLezu:
Předmětem vynálezu je způsob přípravy rozpustné formulace ve vodě nerozpustných biologicky aktivních pentacyklických a tetracyklických terpenoidů, jehož podstata spočívá v tom, že se ve vodě nerozpustný terpenoid mající volnou karboxylovou, hydroxylovou nebo amino funkční skupinu derívatizuje na této funkční skupině substituentem vybraným ze skupiny zahrnující
a) substituenty obecného vzorce Xa vázané na hydroxyskupinu terpenoidů, kde Xa je -OCR-COOH, kde R je lineární čí větvený C| až Cs alkylen, lineární či větvený C| až Cg alkenylen, C& arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo amínoskupinou:
zbytek ý derivatizaee terpenoidů Z / ΌΗ zbytek / terpenoidů Z / OX3 * · i ♦' **···!
• · · » · · * · * • · · ♦ · * ·· *· **'
b) substituenty obecného vzorce Xa vázané na aminoskupinu terpenoidu, kde Xa je -OC-RCOOH, kde R je lineární či větvený C| až Cg alky len, lineární či větvený C| až Cg alkenylen, arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxyíem nebo aminoskupinou:
zbytek / derivatizace zbytek / terpenoidu ~ “ terpenoidu č / NH2 / NHXa
c) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xb vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xb je -(CřEJubfRjY’ vázané na karboxylovou skupinu terpenoidu, kde n je
2-8, R je lineární nebo větvený C] až Cg alkyl, případně substituovaný -OH, -NH2 nebo halogenem, a Y' je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát:
zbytek terpenoidu derivatizace co2h zbytek terpenoidu Xco2xb
d) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xc vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xc je -(CH2)nR+Y vázané na karboxylovou skupinu terpenoidu, kde nje 2-8, R+je protonovaný dusíkatý heterocyklus obsahující 1-2 atomy N a 4-9 atomů C a obsahuje alespoň jeden aromatický cyklus a Y' je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát:
zbytek terpenoidu derivatizace zbytek terpenoidu 'CO2H
CO2XC
e) substituenty obecného vzorce Xd vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xd reprezentuje -R-COOH, kde R je lineární či větvený C| až C4 alkylen, lineární či větvený Ci až C4 alkenylen, (X arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxyíem nebo aminoskupinou:
zbytek terpenoidu
ZXCO2H derivatizace zbytek terpenoidu Xco2xc ·
• 4 ···· 9' • · * · * • · »·· · · • · * ♦ • * ·« * «·· • * · • · ·
f) glykosylové substituenty Xe vázané a nebo β glykosidickou vazbou na hydroxyskupinu terpenoidu, kde Xe je vybrán ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyí, arabinosyl, rhamnosyl, laktosyl, cellobiosyl, maltosyl a jejich 2-deoxyanaloga:
zbytek terpenoidu derivatizace zbytek terpenoidu 'OH
OXe a následně se připravený derivát rozpustí v roztoku obsahujícím vodu, cyklodextrin a popřípadě farmaceuticky přijatelné pomocné látky za tvorby inkluzního komplexu s cyklodextrinem.
Ve výhodném provedeni vynálezu jsou substituenty obecného vzorce X“ vybrány ze skupiny zahrnující sukcinát, ftalát nebo glutarát.
Ve výhodném provedení vynálezu jsou substituenty obecného vzorce Xb cholinové estery, kde n=2, R=CH3.
Ve výhodném provedení vynálezu jsou substituenty obecného vzorce Xť pyridiniové soli, kde n=2, R+=PyH+, Y'=Br'.
Ve výhodném provedení vynálezu jsou substituenty obecného vzorce Xd glykoláty, kde R=CH2.
Ve výhodném provedení vynálezu jsou substituenty obecného vzorce Xe vybrány ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyí, laktosyl a jejich 2-deoxyanaloga.
Ve výhodném provedení vynálezu je cyklodextrin vybrán ze skupiny zahrnující nativní nebo substituované β-cyklodextriny a y-cyklodextriny.
Pomocnými látkami mohou být biokompatibilni organická rozpouštědla, např. ethanol nebo propylenglykol, a látky usnadňující tvorbu inkluzních komplexů, jako např. alkalické uhličitany nebo hydrogenuhličitany.
Předmětem vynálezu je dále rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu, obsahující mkluzní komplex pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu majícího • ·*·Ι · karboxylovou, hydroxylovou nebo aminovou skupinu derivatizo vanou substituentem vybraným ] ze skupiny zahrnující: a
a) substituenty obecného vzorce Xa vázané na hydroxyskupinu terpenoidu, kde Xa je -OC- i
R-COOH, kde R je lineární či větvený C| až Cs alkylen, lineární či větvený C| až Cs al- J kenylen, C6 arylen nesubstituovaný Či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo ami- 1 noskupinou, 1
b) substituenty obecného vzorce Xa vázané na aminoskupinu terpenoidu, kde Xa je -OC-RCOOH, kde R je lineární či větvený C| až Cg alkylen, lineární či větvený C| až Cs alkenylen, Cé arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo aminoskupinou,
c) kvartémí amoniové substituenty obecného vzorce Xb vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xb je -(CH2)nN+R3Y vázané na karboxylovou skupinu terpenoidu, kde nje 2-8, R je lineární nebo větvený Ci až Cg alkyl, případně substituovaný -OH, -NH2 nebo halogenem, a Y‘je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát,
d) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xc vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xc je -(CfyjnR+Y' vázané na karboxylovou skupinu terpenoidu, kde nje 2-8,
R+je protonovaný dusíkatý heterocyklus obsahující 1-2 atomy N a 4-9 atomů C a obsahuje alespoň jeden aromatický cyklus a Y'je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát,
e) substituenty obecného vzorce X vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde X reprezentuje -R-COOH, kde R je lineární či větvený Ci až C4 alkylen, lineární či větvený Cj až C4 alkenylen, C(1 arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo aminoskupinou,
f) glykosylové substituenty Xe vázané a nebo β glykosidickou vazbou na hydroxyskupinu terpenoidu, kde Xe je vybrán ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, arabinosyl, rhamnosyl, laktosyl, cellobíosyl, maltosyl a jejich 2-deoxyanaloga, s cyklodextrinem a popřípadě vodu a farmaceuticky přijatelné pomocné látky.
Ve výhodném provedení vynálezu jsou substituenty obecného vzorce Xa vybrány ze skupiny zahrnující sukcinát, ftalát nebo glutarát.
Ve výhodném provedení jsou substituenty obecného vzorce Xb cholinové estery, kde n=2,
R=CH3.
• 4 · • · · I • 4 · ·1 *• · •
•9 >««« • ·' * «- t • · · ♦ · «4·4 · _ ...... 6
Ve výhodném provedení jsou substituenty obecného vzorce Xc pyridiniové soli, kde n=2, R+=PyH+, Y=Bí.
Ve výhodném provedení jsou substituenty obecného vzorce Xd glykoláty, kde R=CH2.
Ve výhodném provedení jsou substituenty obecného vzorce Xc vybrány ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, laktosyl a jejich 2-deoxyanaloga.
Ve výhodném provedení je cyklodextrin vybrán ze skupiny zahrnující nativní nebo substituované β-cyklodextriny a γ-cyklodextriny.
Pomocnými látkami mohou být biokompatibilní organická rozpouštědla, např. ethanol nebo propylenglykol, a látky usnadňující tvorbu inkluzních komplexů, jako např. alkalické uhličitany nebo hydrogenuhličitany.
Předmětem vynálezu je také farmaceutický prostředek, obsahující rozpustnou formulaci podle předloženého vynálezu a farmaceuticky přijatelné rozpouštědlo.
Ve výhodném provedení podle vynálezu je farmaceuticky přijatelným rozpouštědlem voda,.
Přehled obrázků
Obr. 1 znázorňuje farmakokinetický profil hemisukcinátu 2b podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším. Obr. 2 ukazuje farmakokinetický profil aldehydu 3 podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším.
Obr. 3 ukazuje farmakokinetický profil hemisukcinátu 3b podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším.
Obr. 4 znázorňuje farmakokinetický profil hemisukcinátu 5a podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším. Obr. 5 ukazuje farmakokinetický profil diketon-dihemisukcinátu 5e podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším.
t * » *· · ·,···· · »* * ·»·'··' ·· · « · · ····.· <··· · ·· ·· ·· ··'
Obr. 6 znázorňuje farmakokinetický profil pyrazinu 6a podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším.
Obr. 7 ukazuje farmakokinetický profil hemisukcinátu 8a podávaného ve formě vodného roztoku inkluzního komplexu s 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrinem při orálním podání myším.
Obr. 8 ukazuje farmakokinetické profily látek 5c, 5d, 6, 7, 8 podávané jako suspenze s karboxymethylcelulózou (CMC) orálně myším.
Příklady provedení vynálezu
Způsob přípravy rozpustných formulací ve vodě nerozpustných pentacyklických a tetraeyklických terpenoidů se skládá ze dvou stupňů: a) derivatizace nerozpustné výchozí látky, b) příprava vodného roztoku inkluzního komplexu derivátu s cykiodextrinem.
Všechny v příkladech popisované sloučeniny a jejich zjišťované vlastnosti jsou shrnuty v Tabulce 1 a znázorněné ve vzorcích 1 až 8.
Jednotlivé obecné postupy derivatizace nerozpustných pentacyklických a tetracyklických triterpenoidů jsou označeny H-l, H-l*, H-2, H-3, H-4, K-l, K-2 a jsou zde ukázány na konkrétních příkladech. Obecné postupy přípravy inkluzního komplexu, při níž dojde k rozpuštění látky, jsou označeny A a B.
a) Derivatizace nerozpustné látky Příklad 1
Příprava betulin-dihemisukcinátu (la) (postup H-l)
Do roztoku betulinu (1) (500 mg; 1,13 mmol) v pyridinu (20 ml) byl přidán sukcinanhydrid (1,2 g; 12,0 mmol) a ;Υ A-dimethylarninopyridin, dále jen DMAP (1,2 g; 10,0 mmol) a reakční směs byla refluxována za míchání 12 h. Průběh reakce byl sledován pomocí tenkovrstvé chromatografie, dále jen TLC (hexan/ethylacetát 1:1). Poté byla reakční směs ochlazena, zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikrát vytřepány s 5% PICÍ, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu gradientovou elucí z 20% ethylacetátu v hexanu do 100% ethylacetátu. Chromatograficky jednotný dihemisukcinát la byl lyofilizován z terc.butylalkoholu. Získaný hemisukcinát la (387 mg; 67 %) měl t.t. 107 °C, [a]D = 10° (c = 0,44), l3C NMR spektrum: 14,8, 16,0, 16,1, 16,5, 18,1, 19,1, 20,8, 23,6, 25,2, 27,0, 27,9, 29,0, 29,0, 29,1, 29,3, • φ * φ φ · φφφφ φ » »1 « φ * φφφ φ' · φφφ · φ φ φ • · · φφφ' φφ φ* ·Φ ··
29,5, 29,6, 34,1, 34,4, 37,0, 37,6, 37,8, 38,4, 40,9, 42,7, 46,4, 47,7, 48,8, 50,3, 55,4, 63,2, 81,5,
109,9,150,1, 171,8,172,4,177,8, 177,8.
Příklad 2
Příprava hemisukcinátu 5a (postup H-l)
Do roztoku hydroxydiketonu 5 (500 mg; 1,0 mmol) ve směsi pyridinu (15 ml) a tetrahydrofuranu, dále jen THF (5 ml) byl přidán sukcinanhydrid (900 mg; 9,0 mmol) a DMAP (982 mg; 8,0 mmol) a reakční směs byla refluxována za míchání 12 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (hexan/ethylacetát 1:1). Poté byla reakční směs ochlazena a zpracována analogickým způsobem jako při přípravě sloučeniny la. Chromatograficky jednotný hemisukcinát 5a byl krystalizován ze směsi acetonitril/voda. Získaný hemisukcinát 5a (383 mg; 64 %) měl t.t. 154 - 157 °C, [a]D = -99° (c = 0,24). I3C NMR spektrum: 16,1, 16,5, 16,7, 16,8,
18,0, 19,7, 19,8, 21,0, 23,5, 25,9, 27,4, 27,8, 27,9, 28,4, 28,9, 29,2, 34,5, 37,1, 37,8, 38,5, 41,5, 45,5,46,1,50,8, 50,8,53,4,55,4,81,2,150,6,168,1,171,0,171,9,177,6,189,2,194,3.
Příklad 3
Příprava hemisukcinátu 8a (postup H-l)
Do roztoku aminoalkoholu 8 (500 mg; 1,1 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) byl přidán sukcinanhydrid (900 mg; 9,0 mmol) a reakční směs byla refluxována za míchání 5 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (hexan/ethylacetát 1:1). Poté byla reakční směs ochlazena a zpracována analogickým způsobem jako při přípravě sloučeniny la. Chromatograficky jednotný hemisukcinát 8a byl krystalizován ze směsi acetonitril/voda. Získaný hemisukcinát 8a (406 mg; 67 %) měl t.t. 283 - 284 °C, [a]D = +65° (c = 0,34).
Příklad 4
Příprava hemisukcinátu volné kyseliny 2e (postup H-l*)
Ke směsi kyseliny betulinové (2) (500 mg; 1,1 mmol) a uhličitanu draselného (276 mg;
2,0 mmol) v Λ/A-dimethylformamidu, dále jen. DMF (20 ml) byl přidán benzylbromid (178 μΐ;
1,5 mmol) a reakční směs byla míchána za laboratorní teploty 24 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/diethylether 10:1). Poté byla reakční směs zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikrát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem horečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu, mobilní fází byl toluen. Získaný surový benzylbetulinát (517 mg; 86 %) byl použit bez čištěni do dalšího kroku.
•«·· ·
4 · • 4 *
444 • 4 « 4 « 4
4 4 · • 4 44
Do roztoku benzylbetulinátu (500 mg; 0,9 mmol) v pyridinu (20 ml) byl přidán sukcinanhydrid (900 mg; 9,0 mmol) a DMAP (982 mg; 8,0 mmol) a reakční směs byla refluxována za míchání 15 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (hexan/ethyíacetát 1:1). Poté byla reakční směs ochlazena, zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikrát vy třepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem horečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu gradientovou elucí z 10% ethylacetátu v hexanu do 50% ethylacetátu. Chromatograficky jednotný hemisukcinát benzylbetulinátu byl použit bez čištění do dalšího kroku.
Do roztoku hemisukcinátu benzylbetulinátu (389 mg; 0,6 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu (10 ml) a methanolu (5 ml) bylo přidáno palladium na uhlí (50 mg; 10%) a 1,4-cyklohexadien (568 μΐ; 6 mmol) a reakční směs byla míchána za laboratorní teploty 22 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (hexan/ethylacetát 1:1). Poté byla reakční směs zfiltrována přes křemelinu a eluát odpařen na rotační vakuové odparce. Krystalizací odparku z benzenu byl získán hemisukcinát 2e (366 mg; 91 %) o t.t. 265 °C, [α]„ = 15° (c - 0,37). I3C
NMR spektrum: 14,6, 16,2, 16,2, 16,6, 18,2,19,3, 20,9, 23,6, 25,4, 28,0, 29,2, 29,4, 29,7, 30,5,
32,1, 34,1, 37,1, 37,1, 37,9, 38,2, 38,4, 40,7, 42,4, 46,9, 49,2, 50,2, 55,3, 56,5, 81,5, 109,7,
150,3,171,7, 178,3,182,7.
Příklad 5
Příprava hemiftalátu 2c (postup H-2)
Do roztoku ethylbetulinátu 2a (500 mg; 1,0 mmol) v pyridinu (20 ml) byl přidán ftalanhydrid (1,48 g; 10,0 mmol) a DMAP (366 mg; 3,0 mmol) a reakční směs byla refluxována za míchání 28 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (hexan/ethylacetát 1:1). Poté byla reakční směs ochlazena a zpracována a produkt čištěn analogickým způsobem jako při přípravě sloučeniny la. Chromatograficky jednotný hemiftalát 2c byl lyofilizován z terc.butylalkoholu. Získaný hemiftalát 2c (335 mg; 53 %) měl t.t. 131 °C, [a]D = 26° (c = 0,45).
Příklad 6
Příprava betulin-dihemiftalátu (lb) (postup H-2)
Do roztoku betulinu (1) (500 mg; 1,13 mmol) v pyridinu (20 ml) byl přidán ftalanhydrid (1,33 g; 9,0 mmol) a DMAP (366 mg; 3,0 mmol) a reakční směs byla refluxována za míchání 37 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (hexan/ethylacetát 1:1). Poté byla reakční směs ochlazena a zpracována a produkt čištěn analogickým způsobem jako při přípravě sloučeniny « · ·, • «
4J *4 4Í4 4' 4 • 4 4 · • 4 4 · • 4 44«I « · «
4«
4.. ' « 444
4; 4 4. 4
4' 4' 4 ♦♦ la. Chromatograficky jednotný dihemiftalát lb byl lyofilizován z terc.butylalkoholu. Získaný dihemiftalát lb (633 mg; 76 %) měl t.t. 178 - 180 °C, [a]D = 28° (c = 0,55),
Příklad 7
Příprava glukosidu 4i (postup H-3)
i) Do roztoku ethylesteru 4g (1,00 g; 2,07 mmol) v bezvodém acetonitrilu (25 ml) byl přidán 2,3,4,6-tetraacetyl-a-D-glukopyranosylbromid (1,7 g; 4,1 mmol) a kyanid rtuťnatý (782 mg; 3,1 mmol) a směs byla poté refluxována pod zpětným chladičem s vyloučením vzdušné vlhkosti. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/ether 6:1). Poté byla ochlazená reakční směs probublána vlhkým sulfanem, zfiltrována na křemelině, filtrát byla zředěn desetinásobkem vody a extrahován do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikrát vytřepány vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografíí na silikagelu, mobilní fází byl toluen s gradientem diethyletheru. Získaný acetylovaný glukosid 4h (550 mg; 33 %) o t.t. 110 °C, [a]D = -33° (c = 0,32). IR spektrum: 1246 (C-O); 1609 (C=C); 1697,1754 (C=O). 'HNMR spektrum: 0,73 s, 3H; 0,87 s, 3H; 0,90 s, 3H; 0,92 s, 3H; 1,02 s, 3H; 1,20 s, 3H; 1,22 s, 3H; (7xCH3); 1,26 t, 3H (J= 7,4; -CH2-CH3); 2,01 s,' 3H; 2,03 s, 3H; 2,04 s, 3H; 2,09 s, 3H (4*CH3COO); 2,46 d, 1H (>18,6; H-22b), 2,46 m, 1H (Σ>12,0; Η-16β); 2,68 dd, 1H (J,=12,7, >=3.2; Η-13β); 3,08 m, 1H, (Σ>16,4; H-3a); 3,20 septet, 1H (>7,1; H-20); 3,69 m, 1H (>20,0; H-5'); 4,10-4,28 m, 4H (O-CH2, H-6'a,b); 4,54 d, 1H (>8,1; H-l'); 5,01-5,09 m, 2H (H-4', H-2'); 5,18-5,24 m, 1H (Σ>24; H-3')· MS ESI m/z (%): [Pro C46HŮ4O|3, M+ 828], 829 ([M+H] 10); (851 ([M+Na]+, 40). Elementární analýza pro C^H^Ou: vypočteno C
66,64 %, H 8,27 %; nalezeno C 61,97 %, H 8,12 %.
ii) Získaný acetylovaný glukosid 4h (330 mg; 0,39 mmol) byl smíchán s bezvodým methanolem (10 ml) a do směsi byl přidán kovový sodík (5 mg). Průběh reakce byl sledován reverzní TLC (voda/THF 1:1). Reakční směs byla poté okyselena kyselinou octovou na pH 6 a odpařena na rotační vakuové odparce. K odparku byla přidána voda a vzniklá suspenze byla odsáta a promyta vodou. Sraženina byla vysušena v exsikátoru nad oxidem fosforečným. Získaný volný glukosid 4i (180 mg; 0,28 mmol), 68 %) měl t.t. 196,0 °C, [a]o = -46° (c = 0,29). IR spektrum: 1609 (C=C); 1697,1724 (C=O); 3411 (O-H). 'H NMR spektrum: 0,82 s, 3H; 0,89 s, 3H; 0,93 s, 3H; 1,02 s, 3H; 1,03 s, 3H; 1,20 s, 3H; 1,21 s, 3H (7*CH3); 1,25 t, 3H (>7,2; CH2-CH3); 2,14 d, 1H (>18,5; H-22b); 2,45 d, 1H (>18,8; H-22a); 2,42-2,52 m, 1H (Σ>40; Η-16β); 2,68 dd, 1H (1,=12,8, J2=2,ó; H-l3β); 3,13-3,50 m, 6H (H-3ct, H-20, H-5’, H-3’, H-4', H-2'); 3,75-3,87 m, 2H (H-6'a,b); 4,10-4,24 m, 2H (O-CH2); 3,79 d, 1H (>7,6; H-l'). MS ESI ť »
.....-............. .. 11 ...... ......................
m/z (%): [Pro C38H60O9, M+ 660], 683 ([M+Na]+, 60). Elementární analýza pro C38H60O9: vypočteno C 66,06 %, H 9,15 %; nalezeno C 66,39 %, H 8,98 %.
Příklad 8
Příprava bisglukosidu 7e, 7f (postup H-3)
i) Do suspenze diolu 7a (2,00 g; 3,92 mmol) v bezvodém acetonitrilu (25 ml) byl přidán 2,3,4,6-tetraacetyl-a-D-glukopyranosyIbromid (6,4 g; 15,7 mmol) a kyanid rtuťnatý (3,0 g; 11,8 mmol) a směs byla poté refluxována pod zpětným chladičem s vyloučením vzdušné vlhkosti. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/ether 6:1). Poté byla ochlazená reakční směs probublána vlhkým sulfanem, zfiltrována na křemelině, filtrát byla zředěn desetinásobkem vody a extrahován do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikrát vytřepány vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu, mobilní fází byl toluen s gradientem diethyletheru. Získaný acetyiovaný bisglukosid 7d (2,50 g; 54 %) měl t.t. 102,7 QC, [ajo = +14° (c = 0,28). IR spektrum: 1234 (C-O); 1603 (C=C); 1755 (C=O). lH NMR spektrum: 0,73 s, 3H; 0,87 s, 3H; 0,89 s, 3H; 0,90 s, 3H; 1,09 s, 3H (5* CH3); 1,99 s, 3H; 2,01 s, 3H; 2,02 s, 3H; 2,02 s, 3H; 2,03 s, 3H; 2,03 s, 3H; 2,04 s, 3H; 2,08 s, 3H (8*CH3COO); 2,38 dt, 1H (J,=14,0, 'J2=4,9; H-lóa); 3,58 dd, 1H (J,=l 1,8, J2=3,5; Η-13β); 3,07 dd, 1H (J,=l 1,6, J2=4,9; H-3a); 3,51 m, 1H (EJ=16,8; H-5’); 3,67 m, 1H (ΣΙ=17,7; H-5'); 3,99 d, ÍH (J=l 1,0; H-28a); 4,11 m, 2H (H-6'a,b); 4,20 d, 1H (J=l0,7; H-28b); 4,25 m, 2H (H-6 a,b); 4,53 d, 1H (>7,9; H-l'); 4,63 d, 1H (J=8,2; H-l'); 4,89 dd, 1H (J,=9,5, J2=7,9; H-3'); 5,03 m, 1H (EJ=24,0; H-31); 5,07-5,16 m, 3H (2x H-2'); 5,17-5,23 m, 2H (2* H-4'); 5,19 bs, 2H (Bn); 7,37 m, 5H (Ph). MS ESI m/z (%): [Pro C60H82O23, M+ 1170], 1193 ([M+Na]+, 60). Elementární analýza pro C00H82O23: vypočteno C 61,53 %, H 7,06 %; nalezeno C 63,86 %, H 7,52 %.
ii) Získaný acetyiovaný bisglukosid 7d (2,30 g; 1,97 mmol) byl smíchán s bezvodým methanoíem (250 ml) a do směsi byl přidán kovový sodík (10 mg). Průběh reakce byl sledován reverzní TLC (voda/THF 1:1). Reakční směs byla poté okyselena kyselinou octovou na pH 6 a odpařena na rotační vakuové odparce. K odparku byla přidána voda a vzniklá suspenze byla odsáta a promyta vodou. Sraženina byla vysušena v exsikátoru nad oxidem fosforečným. Získaný volný bisglukosid 7e (1,36 g; 54 %) měl t.t. 186 °C, [a]o = +5° (c = 0,33 ). IR spektrum (měřeno technikou ATR); 1034, 1076 (C-O); 1708, 1726 (C=O); 3403 (O-H). 'H NMR spektrum: 0,84 s, 3H; 0,89 s, 3H; 0,93 s, 3H; 1,02 s, 3H; 1,12 s, 3H (5xCH3);2,39 dt, 1H (J|-13,0, J2=3,7; H-16a); 2,71 d, 1H (J=9,0; Η-13β); 3,17m, 1H (H-3a); 3,24-3,34 m, 4H (2*H-5\ 2*H2'); 3,36-3,48 m, 4H (H-3', H-4'); 3,68-3,80 m, 2H (H-6'a,b); 3,84 m, 2H (H-6'a,b); 3,94 d, 1H
I
..................12 ............
(>9,8, H-28a); 4,30 d, 1H (>10,0; H-28b); 4,33 d, 1H (>7,6; H-l ');4,34 d, 1H (>7,6; H-l') 5,20 bs, 2H (Bn); 7,35 m, 5H (Σ>3,2; Ph). I3C NMR spektrum je uvedeno v tabulce 3. MS ESI m/z (%): [Pro C44H06O15, M+ 834], 858 ([M+Na]+, 40), Elementární analýza pro (ΣμΗ^Οι,: vypočteno C 63,29 %, H 7,97 %; nalezeno C 63,44 %, H 7,52 %.
íi) Bisglukosid 7e (1,10 g; 1,32 mmol) byl rozpuštěn ve směsi THF (10 ml) a methanolu (10 ml) a benzylová skupina odchráněna v autoklávu za přítomnosti Pd/C (100 mg; 10%) pod přetlakem vodíku (0,6 MPa) za stálého míchání. Průběh reakce byl kontrolován reverzní TLC (voda/THF 1:1). Po 24 h byl autokláv otevřen a reakční směs zfiltrována přes sloupec křemeliny. Eluát byl odpařen na rotační vakuové odparce a odparek překrystalizován z methanolu. Získaná bisglukosidická kyselina 7f (785 mg; 42 %) měla t.t. 194 °C, [a]o = +19 (c = 0,31). ÍR spektrum (měřeno technikou ATR): 1033, 1079 (C-O); 1693, 1707 (C=O); 3386 (O-H). 'H NMR spektrum: 0,85 s, 3H; 0,93 s, 3H; 0,96 s, 3H; 1,05 s, 3H; 1,18 s, 3H (5xCH3); 2,32-2,45 m, 1H (H-16a); 2,87 dd, 1H (J,=l 1,2, >=2,8; H-l3β); 3,11-3,15 m (Σ>17,2; H-3a); 3,15-3,22 m, 4H; 3,24-3,30 m, 4H; 3,65 d, 2H (>4,7; 2*H-6’a); 3,68 d, 2H (>4,9; 2*H-6'b); 3,85 d, 1H (> 12,4; H-28a); 4,29 d, 2H (> 8,1; H-l'); 4,31 d, 1H (>13,7; H-28b); 4,32 d, 1H (>7,7; H1'). MS ESI m/z (%): [Pro C^HeoOis, M+ 734], 767 ([M+Na]+, 40). Elementární analýza pro C37H60015: vypočteno C 59,66 %, H 8,12 %; nalezeno C 59,93 %, Η 8,01 %.
Příklad 9
Příprava 2-deoxygalaktosidu 4k (postup H-4)
i) Do roztoku triterpenického hydroxyderivátu 4g (500 mg; 1,0 mmol) v suchém acetonitrilu (30 ml) byl přidán tri-O-acetylgalaktal (1,2 mmol), molekulové síto 4A (500 mg), bromid lithný (730 mg) a vysušený katex v H+ cyklu (900 mg). Reakční směs byla míchána při laboratorní teplotě 12 hodin. Průběh reakce byl kontrolován tenkovrstvou chromatografií s mobilní fází hexamethylacetát 2:1. Reakční směs pak byla zfiltrována přes vrstvu křemeliny a sloupec byl promyt ethylačetátem. Reakční směs byla zředěna vodou (50 ml), extrahována ethyl-acetátem (2x 20 ml) a organická fáze odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl rozpuštěn v chloroformu (5 ml) a roztok byl prolit přes krátký sloupec silikagelu (eluce ethylacetátem). Eluát byl odpařen na rotační vakuové odparce. Surový produkt byl poté separován sloupcovou chromatografií na silikagelu, eluce toluenem. Produkt byl poté lyofilizován z 2-methylpropan-2-olu, byl získán bílý lyofilizát 4j (360 mg; 47 %) s teplotou tání 100,8 °C, [o|D = +38,9° (c = 0,52).
ii) 2-deoxygalaktosid 4j (200 mg; 0,26 mmol) byl rozpuštěn suchém methanolu (300 ml) a do roztoku bylo přidáno katalytické množství sodíku (5 mg). Průběh reakce byl sledován * T — W . - - ---« * » · » ·»· i · · · * . * · t · · · · · »*·* · »· ·» ·· ·· 13 tenkovrstvou chromatografií na reverzní fázi (mobilní fáze voda/tetrahydrofuran 1:1). Reakční směs byla zneutralizována kyselinou octovou a odpařena na rotační vakuové odparce.
K. odparku byla přidána voda (300 ml) a vyloučená sraženina produktu odfiltrována. Filtrační koláč byl promýván vodou. Byl získán bílý krystalický 2-deoxyglukosid 4k (161 mg; 97 %) s teplotou tání 158,0 °C a [a]n = +17,2° (c = 0,51).
Příklad 10
Příprava 2-deoxyglukosidu 4m (postup H-4)
i) Do roztoku tríterpenického hydroxyderivátu 4d (500 mg; 1,0 mmol) v suchém acetonítrilu (30 ml) byl přidán tri-O-acetylglukal (1,2 mmol), molekulové síto 4A (500 mg), bromid lithný (730 mg) a vysušený katex v H+ cyklu (900 mg). Reakční směs byla míchána při laboratorní teplotě 12 hodin. Průběh reakce byl kontrolován tenkovrstvou chromatografií s mobilní fází hexamethylacetát 2:1. Reakční směs pak byla zfiltrována přes vrstvu křemeliny a sloupec byl promyt ethylacetátem. Reakční směs byla zředěna vodou (50 ml), extrahována ethylacetátem (2x 20 ml) a organická fáze odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl rozpuštěn v chloroformu (5 ml) a roztok byl prolit přes krátký sloupec sílíkagelu (eluce ethylacetátem). Eluát byl odpařen na rotační vakuové odparce. Surový produkt byl poté separován sloupcovou chromatografií na sílíkagelu, eluce toluenem. Produkt byl poté lyofilizován z 2-methylpropan2-olu, byl získán bílý lyofilizát 41 (245 mg; 34 %), teplota tání 204,1 °C, [ajD = +24,2 (c 0,43).
ii) 2-deoxyglukosid 41 (60 mg; 0,08 mmol) byl rozpuštěn suchém methanolu (100 ml) a do roztoku bylo přidáno katalytické množství sodíku (5 mg). Průběh reakce byl sledován tenkovrstvou chromatografií na reverzní fázi (mobilní fáze voda:tetrahydrofuran 1:1). Reakční směs byla zneutralizována kyselinou octovou a odpařena na rotační vakuové odparce. K odparku byla přidána voda (100 ml) a vyloučená sraženina produktu odfiltrována. Filtrační koláč byl promýván vodou. Byl získán bílý krystalický 2-deoxyglukosid 4m (39 mg; 74 %) s teplotou tání 208,0 °C, [a]D = +14,0 (c = 0,40), l3C NMR spektrum: 15,7, 16,1, 16,5, 16,6,
18,0, 19,7, 19,8, 21,0, 21,6, 24,9, 27,5, 28,3, 28,9, 33,5, 34,7, 37,0, 37,6, 38,2, 38,3, 41,1, 45,1,
45,2, 47,4, 50,9, 52,4, 53,0, 55,4, 62,7, 68,6, 71,2, 72,1, 81,4, 93,1, 174,9, 145,5, 172,7, 208,0.
MS m/z (%): (Pro CjjFDA, M+ 630], 653 ([M+Na]+, 30), 631 ((M+H]+, 30). Pro CjrHjA (630,9) vypočteno: C 70,44 %, H 9,27 %. Nalezeno: C 70,58 %, H 9,13 %.
Příklad 11
Příprava glykolátu 4a (postup K-l) *··· · • · · » ’ ” » » · ·»« < · * · * . i · ·»·· .· ·· ·· ··
........ 14
i) Ke směsi 21-oxokyseliny 4 (500 mg; 0,98 mmol) a uhličitanu draselného (276 mg; 2,0 mmol) v dichlormethanu (10 ml) a acetonitrilu (5 ml) byl přidán benzylbromacetát (240 μΐ;
1,5 mmol) a reakční směs byla míchána za laboratorní teploty 24 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/diethylether 6:1). Poté byla reakční směs zředěna desetinásobkem vody a extrahována do dichlormethanu. Spojené organické podíly byly jednou vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce, Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu, mobilní fází byl toluen. Získaný surový benzylglykolát 21-oxokyseliny (509 mg; 79 %) byl použil do dalšího kroku.
ii) Do roztoku benzyl-glykolátu 21-oxokyseliny (350 mg; 0,5 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu (20 ml) a methanolu (10 ml) bylo přidáno palladium na uhlí (75 mg; 10%) a 1,4-cyklohexadien (473 μΐ; 5 mmol) a reakční směs byla míchána za laboratorní teploty 20 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/diethylether 4:1). Poté byla reakční směs zfiítrována přes křemelinu a eluát odpařen na rotační vakuové odparce. Krystalizací odparku ze směsi aceton/voda byl získán glykolát 21-oxokyseliny 4a (272 mg; 90 %) o t.t. 267 - 269 °C, [<x]D = -33° (c = 0,39), l3CNMR spektrum: 15,9, 16,5, 16,6, 16,8, 18,1, 20,0, 20,1, 21,2, 21,3,
27,7, 29,0, 23,6, 25,1, 27,9,33,5, 34,9, 37,1, 37,7, 38,5, 41,4, 45,3, 45,3, 47,3, 51,1, 53,1, 55,4,
60,4, 80,8,146,0, 171,2, 171,7, 172,4,173,7,208,0. MS,m/z (%): [Pro C34H5o07, M+ 570], 570 (M+, 18), 527 (5), 510 (22), 495 (6), 467 (23), 375 (4), 359 (3), 320 (16), 307 (98), 229 (10), 203 (31), 189 (52). Pro C34H50O7 (570.4) vypočteno: 71,55 % C, 8,83 % H; nalezeno; 71,52 % C, 8,85 % H.
Příklad 12
Příprava glykolátu 7d (postup K-l)
i) Ke směsi pentanorkyseíiny 7 (600 mg; 1,2 mmol), uhličitanu stříbrného (440 mg; 1,6 mmol) ve směsi chloroformu (10 ml) a acetonitrilu (7 ml) byl přidán benzylbromacetát (260 μΐ;
1,6 mmol) a reakční směs byla míchána 28 h za laboratorní teploty. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/diethylether 6:1). Poté byla reakční směs zfiítrována přes křemelinu a filtrát zpracován a produkt čištěn analogickým způsobem jako při přípravě benzylglykolátu 21oxokyseliny. Získány surový benzylglykolát pentanorkyseíiny (358 mg; 46 %) o t.t. 156-157 °C (methanol), [a]o = +57° (c = 0,31) byl použit do dalšího kroku.
ii) Do roztoku benzylglykolátu pentanorkyseíiny (300 mg; 0,5 mmol) ve směsi tetrahydrofuranu (10 ml) a methanolu (3 ml) bylo přidáno palladium na uhlí (75 mg; 10%) a reakční směs byla hydrogenována vodíkem v autoklávu za míchání za teploty místností 5 h. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (chloroform). Poté byla reakční směs zfiítrována přes • · • * · ··· · « · · ·· *· • · · « 9 9 · «· ♦· křemelinu a eluát odpařen na rotační vakuové odparce. Krystalizací odparku ze směsi aceton/voda byl získán glykolát 7d (215 mg; 83 %) o t.t. 230 - 230 °C, [a]D = 66° (c = 0,23). I3C NMR spektrum: 16,0, 16,2, 16,5, 16,7, 18,1, 19,7, 20,7, 21,3, 21,8, 23,6, 26,5, 27,1, 27,9, 34,0, 37,1, 37,8, 38,5, 41,0, 46,7, 50,5, 50,4, 55,4, 61,0, 63,2, 80,6, 170,2, 170,7, 171,0, 171,2,
210,5. MS, m/z (%): [Pro C^Og, M+ 562], 562 (M+, 1), 516 (36), 502 (38), 487 (18), 459 (19), 415 (10), 339 (8), 313 (54), 223 (11), 204 (15), 189 (70). Pro C3,H49O9(562,3) vypočteno: 66,17 % C, 8,24 % H; nalezeno: 66,24 % C, 8,31 % H.
Příklad 13
Příprava kvarterní amoniové soli 2f (postup K-2)
i) Do suspenze kyseliny betulinové 2 (1,37 g; 3 mmol) ve směsi dichlormethanu (15 ml) a acetonitrilu (1 ml) byl přidán uhličitan draselný (0,42 g; 3 mmol) a 1,2-dibromethan (550 ul;
4,5 mmol) a reakční směs byla míchána za teploty místnosti. Průběh reakce byl sledován pomocí TLC (toluen/ether 6:1). Poté co byla veškerá výchozí látka spotřebována, byla filtrací odstraněna použitá báze, směs byla zředěna desetinásobkem vody a extrahována, do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu (gradient ethylacetátu v hexanu). Získaný 2'bromethylbetulinát (480 mg; 28 %) měl t.t. 184 °C, [a]D = +7° (c = 0,24).
ii) 2'-bromethylbetulinát (200 mg; 0,35 mmol) byl rozpuštěn v DMF (5 ml). K roztoku byl přidán trimethy lamin (0,5 ml; 5,67 mmol), reakční nádoba byla uzavřena a ponechána 1 h při 60 °C. Po ochlazení byla reakční směs zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikrát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu (gradient methanolu v chloroformu). Získaná kvarterní amoniová sůl 2f (163 mg; 75 %) měla t.t. 155 - 156 °C, [a]D - +22° (c = 0,40). I3C NMR spektrum: 15,1, 16,1, 16,6, 16,7, 19,3, 19,5, 21,9, 26,6, 27,9, 28,6,30,8,31,3,
32,7,35,4, 37,5, 38,2, 39,3, 39,8, 39,9, 41,8, 43,4, 50,5, 51,8, 54,4, 56,6, 57,7, 58,4, 59,5, 65,9,
78,7, 79,1, 79,4, 79,5, 110,5, 128,1, 137,3, 151,2, 176,1 jslementámí jmalýza^.pro CjíHeoBrNOj: vypočteno C 67,50 % , H 9,71 %; nalezeno C 67,46 %, H 9,68 %.
Příklad 14
Příprava kvarterní amoniové soli 2g (postup K-2) ··» · * *
2'-bromethylbetulínát z příkladu 12 (285 mg; 0,46 mmol) byl rozpuštěn v DMF (5 ml), k roztoku byl přidán pyridin (1 ml; 9,49 mmol), reakční nádoba byla uzavřena a ponechána 4 dny při 60 °C. Po ochlazení byla reakční směs zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly tříkát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu (gradient methanolu v chloroformu). Získaná kvartemí amoniová sůl 2g (527 mg; 86 %) měla t.t. 186 - 187 °C, [a]D = +45° (c = 0,39). I3C
í.
NMR spektrum: 15,0, 16,1, 16,7, 16,7,19,4, 19,4, 21,9, 26,6, 28,0, 28,6, 30,8, 31,4, 32,7, 35,5,
37,5, 38,2, 39,5, 39,9, 40,0, 41,8, 43,4, 50,6, 51,8, 56,7, 57,9, 61,5, 63,6, 79,5, 79,5, 110,5,
129,7, 146,6, 347,7, 151,4, 176,3. Elementární analýza pro C37Hí6BrNO3: vypočteno C 69,14 %, H 8,78 %; nalezeno C 69,18 %, H 8,76 %.
Příklad 15
Příprava kvarterní amoniové soli 4o (postup K-2)
i) Do suspenze kyseliny 4 (5,0 g; 10 mmol) ve směsi dichlormethanu (150 ml) a acetonitrilu (5 ml) byl přidán uhličitan draselný (2 g; 1.4,2 mmol) a 1,2-dibromethan (1,65 ml; 13,5 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti. Průběh reakce byl sledován pomocí 'TLC (toluen/ether 6:1). Poté co byla veškerá výchozí látka spotřebována, byla filtrací odstraněna použitá báze, směs byla zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly tříkát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu (gradient ethylacetátu v hexanu). Získaný 2'bromethylester kyseliny 4 (2,3 mg; 37 %) měl t.t. 210 °C, [a]D = 23° (c = 0,35).
ii) Získaný 2'-bromethylester kyseliny 4 (285 mg; 0,46 mmol) byl rozpuštěn v DMF (5 ml). K roztoku byl přidán triethylamin (0,5 ml; 3,39 mmol), reakční nádoba byla uzavřena a ponechána 4 dny při 60 °C. Po ochlazení byla reakční směs zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu (gradient methanolu v chloroformu). Získaný kvarterní amoniový ester 4o (68 mg; 19 %) měl t.t. 183 °C, [a]D = +15° (c = 0,31). ,3C NMR spektrum: 16,4, 16,8, 17,2, 17,2, 18,7, 20,1, 21,4, 218, 24,2, 257, 28,3,
29,6, 29,8, 33,9, 35,5, 37,8, 38,4, 42,0, 45,9, 51,7, 53,9, 56,1, 65,3, 78,0, 78,3, 78,6, 81,9, 146,5, 172,5, 174,6, 209,1. Elementární analýza pro C^HňeBrNOs: vypočteno C 66,65 % , H 9,23 %; nalezeno C 66,66 %, H 9,26 %.
• 9 • · »94· 9 • 4 4 · •4 · ·44 «9 ·
9« *4 • 9 9 9« • 4 ·· ·
9 9 9
9* ·
Příklad 16
Příprava kvarterní amoniové solí 4p (postup K-2)
2'-bromethyIester kyseliny 4 získaný v příkladu 14 (285 mg; 0,46 mmol) byl rozpuštěn v DMF (5 ml). K roztoku byl přidán triethanolamin (500 mg; 4,7 mmol), reakční nádoba byla uzavřena a ponechána 10 dní při 60 °C. Po ochlazení byla reakční směs zředěna desetinásobkem vody a extrahována do ethylacetátu. Spojené organické podíly byly třikát vytřepány s 5% HC1, třikrát vodou, vysušeny síranem horečnatým a rozpouštědla byla odpařena na rotační vakuové odparce. Odparek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu (gradient methanolu v chloroformu). Získaný kvarterní amoniový ester 4p (134 mg; 41 %) měl t.t. 162 - 163 °C, [oc]D = +28° (c = 0,13). I3C NMR spektrum 16,5, 17,0, 17,3, 17,4, 19,2, 20,3,
20,6, 21,1, 22,4, 2,6, 26,4, 28,4, 28,8,3,2, 34,5, 36,0, 38,3, 38,9, 39,6, 42,6, 46,0, 46,5, 46,8,
52,3, 54,3,,54,5, 56,7, 57,9, 60,8, 64,6, 79,5, 146,8, 172,8, 14,4, 15,5, 209,7. Elementární analýza pro CíoHÉeBrNOs: vypočteno C 62,49 % , H 8,65 %; nalezeno C 62,52 %, H 8,62 %.
b) Příprava inkluzní sloučeniny
Postup A: Ve směsi vody (26,0 ml), roztoku hydrogenuhličitanu sodného (5,0 ml; nasycený roztok) a ethanolu (7,0 ml; 99%) se za intenzivního míchání při teplotě 50 °C rozpustí 2hydroxypropyl-y-cyklodextrin (10,0 g). Do vzniklého bezbarvého, viskózního roztoku se poté přidá najednou rozpustný derivát triterpenu (1,50 g) a opět se intenzivně míchá při teplotě 50 °C, K úplnému rozpuštění je většinou potřeba 20 až 40 min. Po úplném rozpuštění triterpenoidu se vzniklý čirý roztok ochladí na laboratorní teplotu, zfiltruje filtrem pro injekční stříkačku (hydrofilní, velikost pórů 0,22 pm), aby byl sterilní a umístí do chladničky. Získaný roztok lze bez znatelného rozkladu přechovávat v mrazničce při - 20 °C až do dalšího použití.
Postup B: Ve směsi vody (14,0 ml) a propylenglykolu (6,0 ml) se za intenzivního míchání při teplotě 50 °C rozpustí 2-hydroxypropyl-y-cyklodextrin (7,00 g). Do vzniklého bezbarvého, viskózního roztoku se poté přidá najednou rozpustný derivát triterpenu (1,00 g) a opět se intenzívně míchá při teplotě 50 °C. K úplnému rozpuštění je většinou potřeba 20 až 40 min. Po úplném rozpuštění triterpenoidu se vzniklý Čirý roztok ochladí na laboratorní teplotu, zfiltruje filtrem pro injekční stříkačku (hydrofilní, velikost pórů 0,22 pm), aby byl sterilní a umístí do chladničky. Získaný roztok lze bez znatelného rozkladu přechovávat v mrazničce při - 20 °C po dobu několika měsíců.
• ··· ····
............ . . 18.. . ...........................
Stanovení biodostupnosti a farmakokinetického profilu při orálním podání sloučenin pokusným myším
Rozpustné cyklodextrinové formulace terpenoidních sloučenin, připravené podle výše uvedených postupů A nebo B, byly neředěné podány outbredním myším CD-I intragastricky (200 μΐ v jediné dávce) jako vodné roztoky injekční stříkačkou s žaludeční sondou. Nerozpustné sloučeniny byly podávány taktéž intragastricky (200 μΐ v jediné dávce), ale jako vodné suspenze v 0.5-1% karboxymethyícelulose. V časových intervalech 2, 4, 6, 8, 12 a 24 h byla myším odebrána krev, která byla centrifugována a získaná plasma následně analyzována technikou HPLC-ESI MS.
Analytické stanovení koncentrace rozpuštěného tritcrpenoidu v aplikační formě a vzorcích plazmy
Ke stanovení koncentrace rozpuštěných triterpenoidů byla použita technika HPLC-ESI MS. Vzorky byly měřeny v jedné analytické šarži s kalibračními roztoky a slepým vzorkem. Vzorek pro měření byl připraven z 50 μΐ vodného roztoku obsahujícího inkluzní sloučeninu naředěním methanolem na 10 ml. Následně se 10 μ] roztoku vzorku po prvním ředění dále zředí na 1 ml mobilní fází. Slepý vzorek byl získán z 50 μΐ připraveného vodného roztoku 2hydroxypropyl-y-cyklodextrinu naředěním methanolem na 10 ml. Následně se 10 μΐ roztoku slepého vzorku po prvním ředění dále zředí na 1 ml methanolem. Zásobní roztoky standardů (koncentrace 0,2 mg/ml) byly připraveny navážením 2,00 mg analytu do 10 ml odměrné baňky a rozpuštěním v methanolu. Naředěním zásobního roztoku mobilní fází byly poté připraveny kalibrační vzorky (0,4 pg/rnl resp. 4 pg/ml).
Analýza byla prováděna na koloně ODS Hypersil 125 x 2,1 mm, 5um, SN 0745415X, Thermo EC, předkolona ODS 4,0 x 3,0 mm, Phenomenex, mobilní fáze A -100 mmol/L roztok mravenčanu amonného ve vodě, pH se upraví na 5 kyselinou mravenčí, B - 100 mmol/L roztok mravenčanu amonného v methanolu, teplota kolony: 25 °C, lineární gradientová nebo isokratická eluce, velikost nástřiku 30 μΐ. Koncentrace byla stanovena srovnáním se standardem a přepočtena na původní roztok obsahující inkluzní sloučeninu.
Farmakokinetícké profily vybraných derivátů pří jejich orálním podání myším (látky 2b, 3,3b, 5a, 5f, 6a, 8a byly podány jako cyklodextrinové formulace, sloučeniny 5c, 5d, 6, 7, 8 jako suspenze s karboxymethylcelulosou) jsou znázorněny na obr. 1 až 8. Výsledky prokazují orální • ♦ · ♦ ··· 19 · 1 dostupnost rozpustných cyklodextrinových formulací terpenoidu, nikoliv však nerozpustných | suspenzí. |
Tabulka 1: Příklady rozpustnosti biologicky aktivních triterpenů (n=koncentrace nižší než de- í tekční limit, tzn. 1 ng/ml; měsíce znamená dva a více měsíců) J h
•i
| Výchozí sloučenina ---- Rozpustný derivát | Derivatizačm postup | Rozpouštím postup | Konce traCe rozp.látky | Stabilita roztoku při -20°C |
| mg/ml | dny | |||
| Betulin | - | B | n | |
| Betulin 1/betulin-dihemisukcinát la | H-l | A | 54 | měsíce |
| Betulin 1/ betulín-dihemiílalát lb | H-2 | A | 39 | mísíce |
| Betulin 1/betulín-diglukosid lc | H-3 | B | 55 | mísíce |
| Ethy l-betulinát 2a | - | B | n | - |
| Ethy l-betulinát 2a/ hemisukcinát 2b | H-l | A | 45 | mísíce |
| Ethy l-betulinát 2a/ hemiftalát 2c | H-2 | A | 41 | měsíce |
| Ethyl-betulinát 2a/ glukosid 2d Kyselina betulinová 2 | H-3 | B | 43 | měsíce |
| A | 38 | měsíce | ||
| kyselina betulinová 2 / hemisukcinát 2e | H-l* | A | 51 | měsíce |
| kyselina betulinová 2 / ethyltrimethylamoium bromid-betulinát 2f | K-2 | B | 55 | měsíce |
| kyselina betulinová 2! ethylpyridinium bromid-betulinát 2g | K-2 | B | 31 | měsíce |
| Aldehyd 3 | - | A | 35 | mísíce |
| Elhy l-ester 3a | - | B | n | - |
| Ethy l-ester 3a 3 / hemisukcinát 3b | H-l | A | 55 | mísíce |
| Ethyl-ester 3a / hemiftalát 3b | H-2 | A | 40 | měsíce |
| 21-oxokysclina 4 | - | A | 48 | misie |
| 21-oxokyselina 4 / glykolát 4a | K-l | A | 59 | měsíc |
| 21 -oxokyselina 4/cthyltrimethylamoium bromidová sůl 4b | K-2 | B | 47 | měsíce |
| 21 -oxokyselina 4/ethy 1 pyridíníum bromidová súí 4c | K-2 | B | 33 | mísíce |
| 21-oxokyselina 4/ethy] triethylamoium bromidová sůl 4o | K-2 | B | 37 | měsíce |
| 21-oxokyselina 4/ethyltricthanolamoÍum bromidová sůl 4p | K-2 | B | 41 | měsíce |
| Ethyl-ester 4d | - | B | n | - |
| Ethyl-ester 4g/ hemisukcinát 4e | H-i | A | 53 | měsíce |
| Ethyl-ester 4g/ hemiftalát 41’ | H-2 | A | 28 | mísíce |
| ethyl-ester 4g / glukosid 4i | H-3 | B | 56 | mísíce |
| ethyl-ester 4g / 2-dcoxygal aktosid 4j | H-4 | B | 60 | měsíce |
| methyl-ester 4d / 2-deoxy glukosid 41 | H-4 | B | 61 | měsíce |
| Diketon 5 | - | B | n | |
| diketon 5 / diketon-hemisukcinát 5a | H-l | A | 50 | měsíc |
| diketon 5 / glukosid 5b | H-3 | B | 51 | měsíce |
| diketon 5 / diketon-dihemis.ukcinát 5e | H-l | A | 69 | mísíce |
| Pyrazin 6 | - | A | 1,2 | měsíce |
| pyrazin 6 / pyrazin-glykolát 6a | K-l | A | 56 | měsíce |
| pyrazin 6 / ethyItrinicthylethylamonium bromidová sůl 6b | K-2 | B | 49 | měsíce |
| Pentanorkyselina 7 | A | 68 | týden | |
| pentanorkyse! ina 7 / dihemísukcinát 7c | H-l* | A | 73 | měsíc |
| pentanorkyselina 7/diglukosid 7f | H-3 | A/B | nm | měsíce |
| pentanorkyselina 7 / glykolát 7d | K-l | A | 75 | měsíc |
| aminoalkohol 81 hemisukcinát 8a | H-l | A | 37 | měsíce |
• · · · • « ·«* · • · · · »· ··
2C, R1 = CO(C6H4)CO2H,R2 = CH2CH3 2d, R1 = 1 β-D-glukosyl, R2 = CH2CH3 2e, R1 = CO(CH2)2CO2H, R2 = H 2f,.R1 = H, R2 = (CH2)2N*(CH3)3Br,
2g, R1 = H, R2 = (CH2)2N*C5H5Br
3, R1=R2=H
3a, R1 = H, R2 = CH2CH3
3b, R' = CO(CH2)2C02H, R£ = CH2CH3
3c, R1 = CO(C6H4)CO2H, r2 = ch2ch3
5. ft1 - H. RJ . COjCHj
53. R' . OCÍCH,|:CO,H. R! = COjCHj 5b. R1 = 1 (i-o-jlukosyl. R: s CO,CH3 5c R' PH = COjCHj 5d. R' = H, fi: = CHjOH
5«, R1 = CO(CH,),eOiH. R' =CHiOCO(CH,hCO,H
4, R1 = Ác. R2 » H
4a, R'=Ac, R2 = CH2CO2H
4b,R'=Ac. R2 = (CHj)2N*(CHj)jBr'
4c, R' = Ac. R2 = (CH2)2N'C5H5Br
4d.fi' = H,R2 = CH3
49, R' = C0(CH2);CO2H, r2 » ch2ch3
4f, R1 = CO(CáH,)CO2H, R2 = CH2CH3
4g, R1 = H, R2 = CH2CH3
4h, R1 = 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-1 β-0-glukúsyl,. R2 “ CH2CH3 4i, R' - Ιβ-D-glukóSyl, R2 - CH2CH3
4j, R1 = 3.4.6-tri-0-acetyl-2-deoxy-1 α-D-galaktosyl,. R2 = CH2CH3
4k, R1 = 2-dĚúity-1 α-D-galaktosyI, R2 = CH2CH3
4I, R1 = 3.4,6-lri-O-acetyl-2-deoxy-1a-D-glukosyl, R2 - CH3
4m, R’ = 2-decxy-la-D-glukosyl, R2 - CHj
4o, R1 = Ac, R2 = (CHihNUCHjCHjbBr
4p, R1 = Ac, R2 = (CHj)2N‘(CH2CH2OH)j3r
6, R = H
6a, R = CH2CO2H
6b. R = (CH2)2Nto6H5Br·
7, R1 = Ac, R2 = H
7a, R1 = H, R2 = CH2C6H5
7b, R1 - CO(CH2)2CO2H. R2 - CH2C6H5
7c, R1 = CO(CHjhCÓ2H, R2 = H
7d, Ř' = 2,3,4,6-letra-Q-acílyl-1 β-D-glukosyl, R2 - CH2C5H5 7e, R' - 1p-0-glukosyl, R2 = CHjCjHs 7f, R1 = 1p-D-glukosyl, R2 = H
8, R1 = R2 = H
8a. R1 = CO(CH2)2CO2H, R2 = H
Claims (22)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob přípravy rozpustné formulace ve vodě nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidů, vyznačený tím, že se ve vodě nerozpustný pentacyklický nebo tetracyklický terpenoid mající volnou karboxylovou, hydroxylovou nebo amino funkční skupinu derivatizuje na této funkční skupině substituentem vybraným ze skupiny zahrnujícía) substituenty obecného vzorce Xa vázané na hydroxyskupinu terpenoidů, kde Xa reprezentuje -OC-R-COOH, kde R je lineární či větvený C| až Cg alkylen, lineární či větvený C, až C8 alkenylen, Cgarylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo aminoskupinou:zbytek / derívatizace zbytek / terpenoidů ' terpenoidů / / 'OH /XOXab) substituenty obecného vzorce Xa vázané na aminoskupinu terpenoidů, kde Xd je -OC-RCOOH, kde R je lineární či větvený Cj až Cg alkylen, lineární či větvený Ci až Cg alkenylen, Cé ary len nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo aminoskupinou:zbytek / derívatizace terpenoidů / / NH2 zbytek / terpenoidů / NHXac) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xb vázané na karboxyskupinu terpe: noidu, kde Xb reprezentuje -(CffifiN+RjY', kde n je 2-8, R je lineární nebo větvený C] až Cg alkyl, případně substituovaný -OH, -NH2 nebo halogenem, a Y' je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát:zbytek / derívatizace zbytek terpenoidů ” terpenoidů > / CO2Hd) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xc vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xť reprezentuje -(CHifiR+Y’, kde n je 2-8, R+je protonovaný dusíkatý heterocyklus obsahující 1-2 atomy N a 4-9 atomů C a obsahuje alespoň jeden aromatický cyklus a Y'je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát:zbytek terpenoidů derívatizace zbytek terpenoidůCO,HCO2XC ··· * • · ···· · .22e) substituenty obecného vzorce Xd vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xd reprezentuje -R-COOH, kde R je lineární či větvený C| až C4 alkylen, lineární či větvený C] až C4 alkenylen, Ce arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo aminoskupinou:zbytek terpenoidu derivatizace zbytek terpenoiduCO2H ,CO2Xdf) glykosylové substituenty Xe vázané a nebo β glykosidickou vazbou na hydroxyskupinu terpenoidu, kde Xc je vybrán ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, arabinosyl, rhamnosyl, laktosyl, cellobiosyl, maltosyl a jejich 2-deoxyanaloga:zbytek terpenoidu derivatizaceΌΗ zbytek terpenoidu Xoxe a následné se připravený derivát rozpustí v roztoku obsahujícím vodu, cyklodextrin a popřípadě farmaceuticky přijatelné pomocné látky za tvorby inkluzního komplexu s cyklodextrinem.
- 2, Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že substituenty obecného vzorce Xa jsou vybrány ze skupiny zahrnující sukcinát, ftalát nebo glutarát.
- 3. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že substituenty obecného vzorce Xb jsou cholinové estery, kde n-2, R=CH3.
- 4. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že substituenty obecného vzorce Xc jsou pyridiniové soli, kde n=2, X+=PyH+, Y'=Br‘.
- 5. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že substituenty obecného vzorce Xd jsou glykoláty, kde R=CH2.
- 6. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že substituenty obecného vzorce Xe jsou vybrány ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, laktosyl a jejich 2-deoxyanaloga.
- 7. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, vyznačený tím, že je cyklodextrin vybrán ze skupiny zahrnující nativní nebo substituované β-cyklodextriny a γ-cyklodextriny.*· »· . ............ . . 23 ....................
- 8. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačený tím, že pomocnými látkami jsou bíokompatibilní organická rozpouštědla a/nebo látky usnadňující tvorbu inkluzních komplexů.
- 9. Způsob podle nároku 8, vyznačený tím, že biokompatibilními organickými rozpouštědly jsou ethanol nebo propylenglykol.
- 10. Způsob podle nároku 8, vyznačený tím, že látkami usnadňujícími tvorbu inkluzních komplexů jsou alkalické uhličitany nebo hydrogenuhličitany.
- 11. Rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu, vyznačená tím, že obsahuje inkluzní komplex pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu majícího karboxylovou, hydroxylovou nebo aminovou skupinu derivatizovanou substituentem vybraným ze skupiny zahrnující:a) substituenty obecného vzorce Xa vázané na hydroxyskupinu terpenoidu, kde Xa je -OCR-COOH, kde R je lineární či větvený C| až Cg alkylen, lineární či větvený Ci až Cg alkenylen, Có arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxyíem nebo aminoskupinou,b) substituenty obecného vzorce Xa vázané na aminoskupinu terpenoidu, kde Xa je -OC-RCOOH, kde R je lineární či větvený C| až Cg alkylen, lineární či větvený C| až Cg alkenylen, Cú arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxyíem nebo aminoskupinou,c) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xb vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xb je -(CíEjnN+RjY' vázané na karboxylovou skupinu terpenoidu, kde n je 2-8, R je lineární nebo větvený Ci až Cg alkyl, případně substituovaný -OH, -NH2 nebo halogenem, a Y’ je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát,d) kvartérní amoniové substituenty obecného vzorce Xc vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde Xc je -(ClUjníČY’ vázané na karboxylovou skupinu terpenoidu, kde nje 2-8, R+je protonovaný dusíkatý heterocyklus obsahující 1-2 atomy N a 4-9 atomů C a obsahuje alespoň jeden aromatický cyklus a Y’ je anion vybraný ze skupiny zahrnující halogenid, sulfát, hydrogensulfát a triflát, ···*' 44 · 4 « ·4« ·· »*..................... 24......................e) substituenty obecného vzorce Xd vázané na karboxyskupinu terpenoidu, kde X1' reprezentuje -R-COOH, kde R je lineární či větvený C, až C4 aikylen, lineární Či větvený C| až C4 alkenylen, arylen nesubstituovaný či substituovaný halogenem, hydroxylem nebo aminoskupinou,f) glykosylové substituenty Xe vázané o. nebo β glykosidickou vazbou na hydroxyskupinu terpenoidu, kde Xe je vybrán ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, arabinosyl, rhamnosyl, laktosyl, cellobiosyl, maltosyl a jejich 2-deoxyanaloga, s cyklodextrinem a popřípadě vodu a farmaceuticky přijatelné pomocné látky.
- 12. Rozpustná formulace podle nároku 11, vyznačená tím, že substituenty obecného vzorce X11 jsou vybrány ze skupiny zahrnující sukcinát, ftalát nebo glutarát.
- 13. Rozpustná formulace podle nároku 11, vyznačená tím, že substituenty obecného vzorce Xb jsou cholinové estery, kde n=2, R=CH3.
- 14. Rozpustná formulace podle nároku 11, vyznačená tím, že substituenty obecného vzorce Xc jsou pyridiniové soli, kde n=2, R+=PyH+, Y*=Br‘.‘
- 15. Rozpustná formulace podle nároku 11, vyznačená tím, že substituenty obecného vzorce Xd jsou glykoláty kde R=CH2.
- 16. Rozpustná formulace podle nároku 11, vyznačená tím, že substituenty obecného vzorce Xe jsou vybrány ze skupiny zahrnující glukosyl, galaktosyl, laktosyl a jejich 2-deoxyanaloga.
- 17. Rozpustná formulace podle kteréhokoliv z nároků 11 až 16, vyznačená tím, že cyklodextrin je vybrán ze skupiny zahrnující nativní nebo substituované β-cyklodextriny a γ-cyklodextriny.
- 18. Rozpustná formulace podle kteréhokoliv z nároků 11 až 17, vyznačená tím, že pomocnými látkami jsou biokompatibilní organická rozpouštědla, a látky usnadňující tvorbu inkluzních komplexů.
- 19. Rozpustná formulace podle nároku 18, vyznačená tím, že biokompatibilními organickými rozpouštědly jsou ethanol nebo propylenglykol.ι · · i » · ♦ 1 · ··...... 25 .
- 20. Rozpustná formulace podle nároku 18, vyznačená tím, že látkami usnadňujícími tvorbu inkluzních komplexů jsou alkalické uhličitany nebo hydrogenuhličitany.
- 21. Farmaceutický prostředek, vyznačený tím, že obsahuje rozpustnou formulaci podle kteréhokoliv z nároků 11 až 20 a farmaceuticky přijatelné rozpouštědlo.
- 22. Farmaceutický prostředek, vyznačený tím, že farmaceuticky přijatelným rozpouštědlem je voda.
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20060606A CZ300722B6 (cs) | 2006-09-27 | 2006-09-27 | Zpusob prípravy inkluzního komplexu pentacyklických a tetracyklických terpenoidu a farmaceutického prostredku obsahujícího tento inkluzní komplex, inkluzní komplex pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostredek obsahující |
| PCT/CZ2007/000088 WO2008037226A2 (en) | 2006-09-27 | 2007-09-25 | Method of preparation of a soluble formulation of water-insoluble pentacyclic and tetracyclic terpenoids, a soluble formulation of a pentacyclic or tetracyclic terpenoid and a pharmaceutical composition containing this soluble formulation |
| CA2666437A CA2666437C (en) | 2006-09-27 | 2007-09-25 | Method of preparation of a soluble formulation of water-insoluble pentacyclic and tetracyclic terpenoids, a soluble formulation of a pentacyclic or tetracyclic terpenoid and a pharmaceutical composition containing this soluble formulation |
| JP2009529508A JP2010504921A (ja) | 2006-09-27 | 2007-09-25 | 水不溶性の五環性テルペノイドおよび四環性テルペノイドの可溶性処方物の調製方法、五環性テルペノイドまたは四環性テルペノイドの可溶性処方物、およびこの可溶性処方物を含んだ薬学的組成物 |
| EP07801129.3A EP2068882B1 (en) | 2006-09-27 | 2007-09-25 | Method of preparation of a soluble formulation of water-insoluble pentacyclic and tetracyclic terpenoids, a soluble formulation of a pentacyclic or tetracyclic terpenoid and a pharmaceutical composition containing this soluble formulation |
| CA2762911A CA2762911C (en) | 2006-09-27 | 2007-09-25 | Method of preparation of a soluble formulation of water-insoluble pentacyclic and tetracyclic terpenoids, a soluble formulation of a pentacyclic or tetracyclic terpenoid and a pharmaceutical composition containing this soluble formulation |
| US12/443,304 US8653056B2 (en) | 2006-09-27 | 2007-09-25 | Method of preparation of a soluble formulation of water-insoluble pentacyclic and tetracyclic terpenoids, a soluble formulation of a pentacyclic or tetracyclic terpenoid and a pharmaceutical composition containing this soluble formulation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20060606A CZ300722B6 (cs) | 2006-09-27 | 2006-09-27 | Zpusob prípravy inkluzního komplexu pentacyklických a tetracyklických terpenoidu a farmaceutického prostredku obsahujícího tento inkluzní komplex, inkluzní komplex pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostredek obsahující |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2006606A3 true CZ2006606A3 (cs) | 2008-10-22 |
| CZ300722B6 CZ300722B6 (cs) | 2009-07-22 |
Family
ID=39081570
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20060606A CZ300722B6 (cs) | 2006-09-27 | 2006-09-27 | Zpusob prípravy inkluzního komplexu pentacyklických a tetracyklických terpenoidu a farmaceutického prostredku obsahujícího tento inkluzní komplex, inkluzní komplex pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostredek obsahující |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8653056B2 (cs) |
| EP (1) | EP2068882B1 (cs) |
| JP (1) | JP2010504921A (cs) |
| CA (2) | CA2666437C (cs) |
| CZ (1) | CZ300722B6 (cs) |
| WO (1) | WO2008037226A2 (cs) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ301158B6 (cs) * | 2008-09-01 | 2009-11-18 | Univerzita Karlova v Praze, Prírodovedecká fakulta | Deriváty triterpenoidu pro lécbu nádorových onemocnení a farmaceutická kompozice je obsahující |
| CZ301318B6 (cs) * | 2008-11-13 | 2010-01-13 | Univerzita Palackého v Olomouci | 2-Deoxyglykosidy triterpenoidu, zpusob jejich prípravy a jejich použití jako lécivo |
| JP6372025B2 (ja) * | 2014-05-13 | 2018-08-15 | 日本製粉株式会社 | トリテルペン類を含有する咀嚼組成物 |
| JP2019052105A (ja) * | 2017-09-14 | 2019-04-04 | 国立大学法人静岡大学 | オレアノール酸誘導体 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2659466A1 (de) * | 1976-12-30 | 1979-02-15 | Roecar Holdings Nv | Steroline und deren verwendung |
| JPH07583B2 (ja) * | 1990-11-21 | 1995-01-11 | 北海道糖業株式会社 | 水溶性五環性トリテルペン包接化合物及びその製造方法並びにそれを利用した食品、飲料、口腔用組成物 |
| JPH04316597A (ja) * | 1991-04-12 | 1992-11-06 | Kyokuto Internatl Corp | トリテルペンアルコールのフェルラ酸エステル−分岐シクロデキストリン複合体 |
| JP4105258B2 (ja) * | 1997-08-19 | 2008-06-25 | 大塚製薬株式会社 | コレスタノール化合物及びこれを含有する医薬 |
| US6403816B1 (en) * | 1997-09-30 | 2002-06-11 | Dabur Research Foundation | Betulinic acid derivatives having antiangiogenic activity, processes for producing such derivatives and their use for treating tumor associated angiogenesis |
| JP3282583B2 (ja) * | 1998-05-08 | 2002-05-13 | 株式会社微生物化学研究所 | アジュバント組成物およびそれを用いたワクチン並びに新規サポニン |
| JP2002536382A (ja) * | 1998-11-18 | 2002-10-29 | ダーバー リサーチ ファンデイション | 新規ベツリン酸誘導体、この誘導体の製造法、ならびにその癌増殖阻害物質としての使用 |
| JP4351314B2 (ja) * | 1998-12-24 | 2009-10-28 | 大塚製薬株式会社 | コレスタノール化合物及びこれを含有する医薬 |
| GB2362648A (en) * | 2000-05-23 | 2001-11-28 | Univerzita Palackeho V Olomouc | Triterpenoid derivatives |
| AU2001284934A1 (en) * | 2000-08-15 | 2002-02-25 | Brigham Young University | Steroid derived antibiotics |
| DE10146500A1 (de) * | 2001-09-21 | 2003-04-17 | Beiersdorf Ag | Kosmetische und/oder dermatologische Wirkstoffkombination |
| GB0128071D0 (en) * | 2001-11-22 | 2002-01-16 | Cyclacel Ltd | Medicament |
| DK1594885T3 (da) * | 2003-02-11 | 2009-04-20 | Novelix Pharmaceuticals Inc | Lægemiddel til vækstinhibering af tumorer |
| JP2007529544A (ja) * | 2004-03-17 | 2007-10-25 | パナコス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド | ３−ｏ−（３’，３’−ジメチルスクシニル）ベツリン酸の製薬的な塩 |
| TW200628161A (en) * | 2004-11-12 | 2006-08-16 | Panacos Pharmaceuticals Inc | Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof |
| TWI373473B (en) * | 2005-09-02 | 2012-10-01 | Otsuka Pharma Co Ltd | Anticancer agent |
-
2006
- 2006-09-27 CZ CZ20060606A patent/CZ300722B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-09-25 CA CA2666437A patent/CA2666437C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-09-25 JP JP2009529508A patent/JP2010504921A/ja active Pending
- 2007-09-25 WO PCT/CZ2007/000088 patent/WO2008037226A2/en active Application Filing
- 2007-09-25 US US12/443,304 patent/US8653056B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-09-25 EP EP07801129.3A patent/EP2068882B1/en not_active Not-in-force
- 2007-09-25 CA CA2762911A patent/CA2762911C/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ300722B6 (cs) | 2009-07-22 |
| US8653056B2 (en) | 2014-02-18 |
| CA2762911A1 (en) | 2008-04-03 |
| WO2008037226A3 (en) | 2008-07-31 |
| WO2008037226A2 (en) | 2008-04-03 |
| JP2010504921A (ja) | 2010-02-18 |
| US20090325919A1 (en) | 2009-12-31 |
| EP2068882A2 (en) | 2009-06-17 |
| EP2068882B1 (en) | 2017-08-23 |
| CA2666437C (en) | 2012-04-24 |
| CA2666437A1 (en) | 2008-04-03 |
| CA2762911C (en) | 2013-11-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2563638C2 (ru) | Способ получения производных морфолинилантрациклина | |
| DE68906942T3 (de) | Pharmazeutische Zusammensetzungen für die parenterale Anwendung. | |
| CA2871025C (en) | Enzymatic process for obtaining 17 alpha-monoesters of cortexolone and/or its 9,11-dehydroderivatives | |
| US11939353B2 (en) | Fluorinated and alkylated bile acids | |
| DE3873870T2 (de) | Androstan-17-carbonsaeureester, verfahren zu ihrer herstellung und arzneimittel, die sie enthalten. | |
| EP0273388A2 (en) | Sialic acid derivatives having active carbonyl group | |
| US8299125B2 (en) | Water-soluble triterpenephenol compounds having antitumor activity and the preparation thereof | |
| CZ2006606A3 (cs) | Zpusob prípravy rozpustné formulace ve vode nerozpustných pentacyklických a tetracyklických terpenoidu, rozpustná formulace pentacyklického nebo tetracyklického terpenoidu a farmaceutický prostredek obsahující tuto rozpustnou formulaci | |
| US20070021380A1 (en) | Novel drug delivery compositions | |
| EP1001799A1 (de) | Pharmazeutische zusammensetzung enthaltend peptichemio | |
| JPS63502180A (ja) | アミノグリコシド ステロイド、それらの製造方法、それらの使用法及びそれらを含有する治療用組成物 | |
| FR2746103A1 (fr) | Thioureido-cyclodextrines, utilisables en particulier pour solubiliser des agents antitumoraux et antiparasitaires et leurs procedes de preparation | |
| DE112021004932T5 (de) | Verfahren zur herstellung von 21-(acetyloxy)-17-(1-oxopropoxy)-pregn-4-en-3,20-dion | |
| KR20070053739A (ko) | 방사성 동위원소로 표지된 당-금속 착화합물의 합성 | |
| FR2860234A1 (fr) | Nouveaux derives 666 du thioxylose | |
| JPH04103586A (ja) | イベルメクチン誘導体化合物及びその調製方法 | |
| US20220177511A1 (en) | Series of halogenated tetracyclic triterpene derivatives and their preparation and application | |
| US10815265B2 (en) | Process for preparation of regadenoson and polymorphs thereof | |
| US12030840B2 (en) | Elafibranor salts | |
| Leppänen et al. | Synthesis and in-vitro/in-vivo evaluation of orally administered entacapone prodrugs | |
| CN107304201A (zh) | 一种氘代激酶选择性抑制剂 | |
| EP4011899A1 (en) | Deoxycholic acid compounds, pharmaceutical compositions and uses thereof | |
| BE1000952A3 (fr) | Nouveaux antagonistes de l'aldosterone. | |
| WO2000046234A1 (fr) | Derives de 11.beta.[p-(n-dimethylamino)-phenyl]-estra-4,9-dien-3-on, avec une substitution spiro-lactol en position 17 comme agents antiprogestomimetiques | |
| JPS6132319B2 (cs) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20170927 |