CZ2003388A3 - Substituované imidazoly jako TAFIa inhibitory - Google Patents

Description

Oblast techniky

Předložený vynález popisuje skupinu substituovaných imidazolů, jako TAFIa inhibitorů, použitelných při léčení chorob.

Dosavadní stav techniky

Trombinem aktivovatelný inhibitor fibrinolýzy, TAFI, je 60 kDa glykoprotein nalezený v lidské plasmě.Je známý rovněž jako prokarboxypeptidáza B, karboxypeptidáza Β, plasma karboxypeptidáza B, karboxypeptidáza U a karboxypeptidáza R. Inhibitor hraje vnitřní roli při procesu koagulace krve, během kterého je transformován na aktivovanou formu, TAFIa, načež působí na fibrinovou mat-rící,—která—obsahujervw.í±egdcí se krevní sraženinu, pro prevenci jejího rozpuštění. Nerovnováha v procesu koagulace krve se považuje za původ širokého a různorodého počtu chorobných stavů, které jsou spojeny nežádoucí tvorbou fibrinu. Rozsah tvorby fibrínu dán citlivou rovnováhou mezi dvěma biochemickými kaskádami v lidském těle; kaskádami koagulace a fibrinolýzy. Tyto kaskády jsou nedílnou částí podpory homeostází.

K podpoře homeostází v krvi, mají savci rozvinutý mechanismus pro opravu těla v případě vaskulárního poškození. Poškozená krevní céva se zúží pro omezení průtoku krve do oblasti. Krevní destičky se shlukují, aby se snížila ztráta krve z oblasti a následuje fibrinogen, který polymerizuje a tvoří fibrinový koláč. Tento koláč uzavře oblast vaskulárního poškození, čímž předchází ztrátě krve. Když je krevní céva opravena, koláč se rozpustí. Koagulační kaskáda je odpovědná za tvorbu koláče, zatímco fibrinolyzní kaskáda je odpovědná za jeho rozpuštění.

Studie ukázaly, že tyto dva procesy jsou vnitřně spojeny přes generování a- trombinu, a-Trombin je finální produkt koagulační kaskády a je odpovědný za konverzi rozpustného plasmového fibrinogenu na nerozpustnou fibrinovou matrici. Polymerizovaný fibrin vytváří hemostatické uzávěry, které zabraňují ztrátě krve z místa vaskulárního poškození a poskytují provizorní matrici, která zlepšuje následný opravný proces. Kromě vyvolání koagulace, α-trombin rovněž redukuje rychlost, kterou se krevní sraženiny rozpadnou působením serinového proteázového plasminu. Anti-fibrinolytická aktivita α-trombinu je výsledkem jeho aktivace TAFI. TAFI cirkuluje v normální plasmě v koncentraci asi 75 nM -v—iTaa-kti-vn-í—ťfo-rmě-í—T-nombln—kon-V-ertu±e_inaktivni zymogen na aktivní TAFI (TAFIa); reakcí, která je zvýšena asi 1250 krát trombomodulinem. TAFIa, když je aktivován váže oba C-konce argininových a lysinových zbytků z rozvíjejícího se fibrinového koláče. Odstranění dibazických aminokyselin z povrchu fibrinové matrice snižuje rozklad sraženiny inhibici vazby klíčových mediátorů fibrinolýzy: tkáňový plasminogenový aktivátor.(tPA) a jeho substrát, plasminogen, který je prekurzorem plasminu. Oba, tPA a plasminogen, obsahují strukturální motiv zvaný kringle doména, který se váže pevně k C-konci lysinových zbytků. Odstranění těchto vazebných míst předchází tvorbě ternárního komplexu mezí tPA, plasminogenem a fibrinem, což

inhibuje konverzi plasminogenu na plasmin,tedy zabraňuje rychlé degradaci sraženin.

Může se zdát, že jestliže rovnováha mezi koagulací a fibrinolýzou je ve prospěch koagulace, pak zde bude přítomno větší množství fibrinu než normálně. To je pravděpodobnější, když subjekt bude splňovat jednu nebo více podmínek, kterými je tvorba trombů podmíněna. Při použití TAFIa inhibitoru, TAFIa nebude schopen působit na rozvoj fibrinových sraženin jak je popsáno výše, inhibovat fibrinolýzu sraženin. Proto,TAFIa inhibuji nebo by měly sloužit ke zvýšení fibrinolyzní kaskády.

Použití TAFI inhibitorů k léčení určitých stavů je známo ze stavu techniky.Zatímco použití TAFIa inhibitorů k léčení těchto stavů je neznámé, určité slabé, nespecifické TAFIa inhibitory byly již identifikovány.

USA 5 993 815 popisuje použití peptidu, který se váže na TAFI zvmoqen a inhibuje aktivaci TAFI zymogenu, pro__ léčení takových poruch, kde C-koncový lysin nebo arginin je odštěpen z neporušeného peptidu. Vhodné poruchy zahrnují artritidu, sepsi, trombózu, mrtvici, trombózu hlubokých žil a infarkty myokardu. Používaný peptid je protilátka nebo funkčně aktivní fragment. Peptid by měl být používán v množství podporujícím fibrinolýzu in vivo.

McKay et al, Biochemistry, 17, 401 (1978), popisuje testování množství sloučenin, jako kompetitivních inhibitorů bovinní karboxypeptidázy B pankreatického původu. Inhibice byla měřena inhibiční účinností při ochraně aktivního centra tyrosinu a glutamové kyseliny bovinní karboxypeptidázy B z ireverzibilní alkylace • · • · bromacetyl-D-argininem nebo bromacetamidobutylguanidinem.

Předpokládá se, že takové inhibitory mohou působit jako bradykininové potenciátory.

Bovinní enzymy pankreatického původu jsou velmi rozdílné oproti enzymům nalezeným v lidské plasmě, takže nemohlo být očekáváno, že jedny, budou inhibovat druhé. Kromě toho, tyto inhibitory jsou zaměřeny na velmi rozdílnou činnost Proto výše uvedený odkaz neobsahuje poučení o TAFIa inhibitorech nebo jejich funkci.

Redlitz et al, J. Clin. Invest., 96, 2534 (1995), uvádí zapojení plasmové karboxypeptidázy B (pCPB, nebo TAFI) při tvorbě sraženin. Rozložení krevních sraženin byl sledováno při absenci a v přítomnosti pCPB, přičemž bylo zjištěno, že přítomnost pCPB zpomaluje rozklad sraženiny. Pro potvrzení, že pCPB bylo odpovědné, byly provedeny dvě kontrolní reakce: (1) kde experiment rozložení sraženiny byl opakován v přítomnosti pCPB a karboxypeptidázového

-i-nh-i-b-i-toru-.-^P-Clv—a_(.2Jkde rozložení bylo provedeno v_ přítomnosti plasmy, ze které byl PCPB odstraněn. V obou případech rozkladná reakce pokračovala nepotlačená.

Boffa et al, J. Biol. Chem., 273, 2127 (1998), srovnává plasmu a rekombinantní TAFI a TAFIa s ohledem na glykosylaci, aktivaci, tepelnou stabilitu a enzymatické vlastnosti. Byly stanoveny inhibiční konstanty pro tři konkurenční inhibitory: .ε-aminokapronová kyselina (ε-ACA), 2-guanidinoethylmerkaptosukcinová kyselina (GEMSA) a bramborový karboxypeptidázový inhibitor (PCI).

Existuje velké množství karboxypeptidáz charakterizovaných štěpením C-konce ainokyseliny z peptidů

• ·

Mohou být rozděleny na kyselé neutrální nebo bázické, v závislosti na typu aminokyseliny, kterou štěpí. Bázické karboxypeptidázy štěpí arginin, lysin a histidin. TAFIa je specifickou podmnožinou bázických karboxypeptidáz.

V termínech předloženého vynálezu, inhibitory uvedené výše v Redlitz, et al. and Boffa, et al., jsou velmi slabé nespecifické nebo jinak nevhodné, aby byly považovány za vyhovující TAFIa inhibitory pro terapeutické použití. Dále, zatímco úloha TAFIa při rozkladu sraženiny je vysvětlena, není zde žádný náznak, že TAFIa inhibitory mohou být použity pro léčení chorob.

PCT přihláška WO00/66550 diskutuje rozsáhlou třídu sloučenin užitečných jako inhibitory karboxypeptidázy U. Předpokládá se, že inhibitory karboxypeptidázy U napomáhají fibrinolýze a proto tyto sloučeniny jsou užitečné při léčení trombotických stavů. Ačkoliv jsou uvedeny podrobnosti vhodných zkoušek, nejsou uvedena žádná data podporující toto tvrzení

PCT přihláška WOOO/66152 poskytuje přípravky obsahující karboxypeptidázový U inhibitor a trombinový inhibitor. Vhodné karboxypeptidázové U inhibitory jsou ty, které jsou uvedeny ve WO00/66550. Uvádí se, že přípravky jsou užitečné primárně při léčbě trombotických stavů.

Podstata vynálezu

Předložený vynález poskytuje třídu TAFIa inhibitorů. Při použití TAFIa inhibitory vykazují velmi značné výhody oproti TAFI inhibitorům. TAFI inhibitor se aktivuje na TAFIa reakcí s trombinem. TAFI inhibitor musí zamezovat • · · · • ·

těmto dvěma objemným peptidům, které jsou společně přítomny, reagovat na.vhodné pozici. Až dosud byly popsány pouze rozsáhlé peptidy, které jsou na překážku této reakci (USA-5993815). Nyní však bylo objeveno, že aktivní pozice na TAFIa, odpovědná za reakci s vyvíjejícím se koláčem, je malá, takže může být blokována malou molekulou, která má molekulovou hmotnost nižší než 1000, výhodně nižší než 500 Je velkou výhodou mít sloučeninu s nízkou molekulovou hmotností, jako „aktivní léčivo. To je spojeno s orální biodostupnost! a pacienti obvykle preferují orální přípravky. Dále je zde schopnost peptidových terapeuťik vyvolávat imunitní odpověď.To je neočekávané ve spojení s malou molekulou. Malé molekuly jsou také obecně stabilnější v plasmě a vykazují tedy delší trvání účinku. To je nepravděpodobné v případě velkých molekul, zejména peptidů. Z těchto důvodů je TAFIa inhibitor výhodný. Vynález poskytuje účinnou třídu TAFIa ihíbitorů

Předložený vynález poskytuje výhodně skupinu TAFIa -řnh-i-b-i-fee^ů-r—sloučenin, obecného vzorce I,___

0)

X je N nebo CH; n je 0 až 3 R¹ j e:

··· · ··

a) Ci_6 alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem,

b) Ci-6 alkenyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem,

c) Ci_6 alkynyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem

d) heterocyklyl,

e) aromatický heterocyklyl,

f) aryl,

g) vodík, kde každá ze skupin (a), (b), (c) a (d) je případně substituována skupinou vybranou ze souboru který tvoří C3-7 cykloalkyl, aryl, aromatický heterocyklyl, heterocyklyl, 0R^u, NR^X1R¹², S(O)PR^U, OCÍOJR¹¹, CO2R¹¹, CONR¹¹R¹², SO2NR¹¹R¹², halogen nebo NHSO₂Rⁿ, kde R1 může být připojeno v kterékoliv poloze imidazolového kruhu.

R² a R³ je každý nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří vodík, Ci_6 alkyl případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹ nebo halogen, nebo —R² a R³ mohou společně tvořit řetězec, kterým je C₂-C6 alkylen,

R⁴ je vodík, C1-6 alkyl, případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří C3-7 cykloalkyl, aryl, OR¹¹, halogen a R¹¹, nebo

R⁴ a R¹⁰ mohou být spojeny a tvořit Ci_4 alkylen, případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří, OR¹¹, halogen a R¹¹,

R⁵ a R⁶ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který tvoří: vodík, aryl, Ci-₆ alkyl, kde uvedený alkyl je případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru který tvoří • · ····

C3-7 cykloalkyl, aromatický heterocyklyl, heterocyklyl, aryl, OR¹¹, R¹¹ nebo halogen nebo

R¹⁰ a jeden z R⁵ nebo R⁶ mohou společně tvořit řetězec, kterým je C1-3 alkylen, případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, halogen, R¹¹ a aryl, nebo R⁵ a R⁶ může společně tvořit C2-6 alkylenový řetězec,

R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří: vodík, C1-6 alkyl, případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru který tvoří OR¹¹, halogen, aryl a R¹¹ nebo R⁷ a R⁸ společně tvoří řetězec, kterým je C₂-6 alkylen,

R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří: vodík, C (NR¹¹) NR¹¹R¹², Ci_₆ alkyl, kde alkyl je případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, halogen, aryl a R¹¹ nebo

R⁹ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C₂_₆ alkylen,

R¹¹ a R¹² jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a Ci-6 alkyl_neb.o_.když_.tvoří akupinu NR^UR¹², pak R¹¹ a R¹² mohou společně tvořit řetězec, kterým je C2-6 alkylen, p je 0, 1 nebo 2 kde:

aryl je definován jako 6- až 14-členný aromatický karbocyklyl, případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří R¹¹, halogen, OR¹¹, NR¹¹R¹², NR^CC^R¹², CO2Rⁿ, NR^uSO2R¹², CN, halogenalkyl, O (halogenalkyl) , S(O)PR^U , OC(O)R^U, SO2NR^1xR¹², C(O)NR^uR¹², aromatický heterocyklyl je definován jako 5- až 7- členný kruh, obsahující 1 až 3 heteroatomy vybrané nezávisle z O, ·· ····

N a S, který může být případně substituován skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, NRⁿR¹², CO2R¹¹, NRⁿCO2R¹², R¹¹, halogen, CN, halogenalkyl, 0 (halogenalkyl) , S(O)pRⁿ, OC(O)R^U, NR^uSO2R¹², SO2NR¹¹R¹², C(O)NRⁿR¹², heterocyklyl je definován jako 3- až 8 - členný kruh obsahující 1-3 heteroatomy nezávisle vybrané z 0, S a N, nasycený nebo částečně nasycený, který může být případně substituován skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, NRⁿR¹², C02R¹¹, NR^X1CO₂R¹², R¹¹, halogen, CN, halogenalkyl, 0 (halogenalkyl) , SÍOJpR¹¹, OC(O)R^U, NR^USO2R¹² SO2NR^UR¹², C(O)NR^uR¹².

Sloučeniny obecného vzorce I zahrnují zwitteriony farmaceuticky vhodné soli, proléčiva, solváty a jejich polymorfy.

Halogen zahrnuje fluor, chlor, brom a jód.

Aťbkyi— zahiřnuj-e—p-ř-ím-ý—nebo—rozvAtvený řetězec.___

6- až 14-členný aromatický karbocyklyl zahrnuje fenyl, naftyl, indenyl, anthryl, a fenanthryl.

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin obecného vzorce I mohou být snadno připraveny smísením roztoku sloučeniny obecného vzorce I a požadované kyseliny nebo báze, jak je potřeba. Soli mohou být sraženy z roztoku a získány filtrací nebo odpařením rozpouštědla.

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin obecného vzorce I zahrnují adiční soli s kyselinami nebo bázemi.

• · • ····

Vhodné adiční soli s kyselinami jsou tvořeny z kyselin, které tvoří netoxické soli a příklady jsou hydrogenchlorid, hydrogenbromid, hydrogenjodid, síran, hydrogensíran, dusičnan, fosforečnan, hydrogenfosforečnan, octan, maleát, fumarát, laktát, tartrát, citrát, glukonát, sukcinát, sacharát , benzoát, methansulfonát, ethansulfonát, benzensulfonát, p-toluensulfonát, pamoát.

Vhodné bázické soli jsou získávány z bází, které tvoří netoxické soli, například soli sodíku, draslíku, hliníku, vápníku, hořčíku, zinku a diethanolaminu.

Přehled vhodných solí je uveden v Berge et al, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1.

Předložený vynález zahrnuje sloučeniny obecného vzorce I a jejich polymorfy.

__Do rozsahu sloučenin podle vynálezu jsou zahrnuta rovněž jejich proléčiva: farmaceuticky přijatelné deriváty sloučenin obecného vzorce I, ve kterých funkční skupiny, definované výše, jsou derivatizovány a poskytují proléčiva, která mohou být konvertována in vivo na rodičovské sloučeniny. Tato proléčiva jsou diskutována v Drugs of Today, 1983, 19, 499-538 a Annual Reports in Medicinal Chemistry, 1975, Vol. 10,Ch 31, 306-326. Vhodná proléčiva zahrnují sloučeniny obecného vzorce II a III

kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, X a Z jsou, jak je popsáno výše, R⁹, a R¹⁰ jsou popsány výše nebo jedna nebo obě skupiny mohou být vhodnými chránícími skupinami dusíku a R¹³ je vhodná chránící skupina kyslíku. Vhodné chránící skupiny zahrnují karbamáty, zejména skupiny BOC a benzyl. Vhodné chránící skupiny kyslíku jsou odborníkům v oboru známé a zahrnují skupiny allyl, aryl a alkyl., kde uvedený alkyl je případně substituován arylem nebo C3-₇ cykloalkylém nebo specifičtěji takovými skupinami, jako benzyl, pilža^rdyTdxynretKyi—fPOMj—a Ci-_S alkyl. Zde je uveden odkaz na „Protéctive Groups in Organic Synthesis, druhé vydání, T. W. Greene and P'. G. M. Wutz, Wiley-Interscience (1991) .

Výhodné sloučeniny obecného vzorce I zahrnují ty, které mají následující stereochemii.

Tyto sloučeniny obecného vzorce IA jsou zejména preferovány.

Separace diastereomerů nebo cis a trans isomerů může být provedena konvenčními technikami, například frakční krystalizaci, chromatograficky, nebo H.P.L.C. stereomerní směsi sloučeniny obecného vzorce IA nebo IB nebo jejích vhodných solí nebo derivátů. Jednotlivé enantiomery sloučenin vzorců IA a IB je možno rovněž připravit z odpovídajících opticky čistých meziproduktů nebo rozdělením, například H.P.L.C., odpovídajícího racemátu s použitím vhodného chirálního nosiče nebo frakční krystalizaci diastereomerní soli, vytvořené reakcí odpovídajícího racemátu s vhodnou opticky aktivní kyselinou nebo bází. Zde je uveden odkaz na „Enantiomers, Racemates and resolutions J. Jacques and Collet, Vydáno Wiley, NY, 1981; a „Handbook of Chiral Chemicals chapter 8, Eds D. Ager and Dekker, ISBN:0-6247-1058-4.

___Výhodné sloučeniny obecného vzorce I zahrnují ty, ve kterých imidazol je substituován v některé poloze R¹ a v poloze C2 nebo C4 fragmentem aminokyseliny.

Zejména výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ je vázáno na NI imidazolové skupiny a tvoří (1,4-)-disubstituovaný imidazol a sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R¹ je připojeno na C4 imidazolu a tvoří (2,4)-disubstituovaný imidazol.

Výhodně R¹ je aryl, C3-7 cykloalkyl, Ci_6 alkenyl nebo C1-6 alkyl, kde skupiny alkyl nebo alkenyl jsou případně substituovány jednou nebo více skupinami vybranými ze souboru, který tvoří C3-7 cykloalkyl, heterocyklyl, aromatický heterocyklyl, OR¹¹, CO2R¹¹ , NR¹¹SO2R¹², NR“R¹², <·« ♦··*

C(O)NR¹¹R¹², SO2NR^1:LR¹², halogen, OC(O)R¹¹, aryl nebo S(O)PR^U, kde

P = 0-2.

Ještě výhodnější R¹ je aryl, Ci-6 alkenyl nebo

Ci_6 alkyl, kde alkyl je případně substituovaný jednou nebo více skupinami vybranými ze souboru, který tvoří CO2R¹¹,

OR¹¹, aryl, C₃_₇ cykloalkyl, NHSO2R¹¹, halogen, aromatický heterocyklyl.

Ještě výhodnější R¹ je CF3 nebo Ci-6 alkyl, kde alkyl je případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří C3-7 cykloalkyl, aromatický heterocyklyl, OR¹¹, CO2Rⁿ, NR¹¹SO₂R nebo aryl.

Ještě výhodnější R¹ je C1-6 alkyl případně substituovaný C₃_4 cykloalkylem nebo arylem.

Nej výhodně j ší R¹ je C1-3 alkyl,

R² a R³ jsou výhodně nezávislevybrány^že~skupxny7 kterou tvoří vodík a Ci_₆ alkyl.

Ještě výhodnější R² a R³ je vodík.

R⁴ je výhodně nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-6 alkyl, kde alkyl je případně substituován fenylem nebo R⁴ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C2-3 alkylen.

Ještě výhodnější R⁴ je nezávisle vybrán z vodíku a C1-3 alkylu; nebo R⁴ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C2-3 alkylen.

<·· ··»»

Ještě výhodněji R⁴ je nezávisle vybrán z vodíku; nebo R⁴ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C2-3 alkylen.

Nej výhodněji R⁴ je vodík.

R⁵ a R⁶ jsou výhodně nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a Ci_₆ alkyl, kde alkyl je případně substituován fenylem; nebo R⁵ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C1-3 alkylen.

Ještě výhodněji R⁵ a R⁶ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-3 alkyl, kde alkyl je případně substituován fenylem; nebo R⁵ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C2 alkylen.

Ještě výhodněji R⁵ a R⁶ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-3 alkyl.

Nejvýhodněji R⁵ a R⁶ jsou vodík.

.Výhodně R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a Ci_6 alkyl, kde alkyl je případně substituován fenylem.

Výhodněji R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-6 alkyl.

Ještě výhodněji R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-3 alkyl.

Ještě výhodněji R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a CH₃.

·« ···· • · · ·· • · ···· ·· • · « ·

Nejvýhodněji R⁷ a R⁸ jsou vodík.

Výhodně R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík, C(NH)NH2 a Ci-6 alkyl; nebo R⁴ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C2-3 alkylen.

Výhodněji R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-3 alkyl; nebo R⁴ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C2-3 alkylen.

Ještě výhodněji R⁹ a R^l0Jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-3 alkyl.

Nej výhodně ji R⁹ a R¹⁰ jsou vodík.

Výhodně Rⁿ a R¹² jsou nezávisle vybrány že skupiny, kterou tvoří vodík a Ci_3 alkyl.

Výhodněji R¹¹ a R¹² jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a—CH3---—____ . ______

X je výhodně CH.

n je výhodně 0 nebo 1.

n je nejvýhodněji 0.

Aryl je výhodně fenyl případně substituovaný 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který tvoří R¹¹, halogen,

OR¹¹, NR^R¹², CO2R^1:l, NHSO2Rⁿ, CN, halogenalkyl. Nejvýhodnější aryl je fenyl.

« ·

Výhodný aromatický heterocyklyl je definován jako 5až 6- členný kruh obsahující 1 až 3 heteroatomy vybrané nezávisle z O, N a S, který může být případně substituován 1-3 skupinami vybranými ze souboru, který tvoří OR¹¹,

NR^i:lR¹², CO2R¹¹, NR^uCO₂R¹², R¹¹, halogen, CN, halogenalkyl,

0(halogenalkyl) , S(O)_pRⁿ, OC(O)R^U, NR¹¹SO2R¹², SO2NR¹¹R¹² nebo C (O)NR¹¹R¹².

Výhodnější aromatický heterocyklyl je definován jako 5- až 6- členný kruh, obsahující 1 až 2 heteroatomy vybrané nezávisle z 0, N a S, který může být případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který tvoří OR¹¹, NR^UR¹², C02R¹¹, NR¹¹CO₂R¹², R¹¹, halogen, CN, halogenalkyl, (halogenalkyl) , S (0) pR¹¹, . OC (0) R¹¹, NR¹¹SO₂R¹², SOzNR^R¹²,

C (O)NR^UR¹².

Nejvýhodnějši aromatický heterocyklyl je definován jako 5až 6- členný kruh obsahující 1 až 2 heteroatomy vybrané nezávisle z 0, N a S.

Výhodný heterocyklyl je definován jako 3- až 8 členný kruh obsahující 1-2 heteroatomy nezávisle vybrané z 0, S a N, nasycený nebo částečně nasycený, který může být případně substituován 1-3 skupinami vybranými ze souboru, který tvoří :0R^u, NRⁿR¹², CO2Rⁿ, NRⁿCOR¹², R¹¹, halogen, CN, halogenalkyl, 0 (halogenalkyl), S(O)pRⁿ, 0C(0)R^u, NR¹¹SO2R¹², SO2NR^uR¹² , C(O)NR^UR¹².

Výhodnější heterocyklyl je definován jako 5- až 6 - členný kruh obsahující 1-2 heteroatomy nezávisle vybrané z 0, S a N, nasycený nebo částečně nasycený, který může být případně substituován 1-3 skupinami vybranými ze souboru, který tvoří :0R^u, NR¹¹R¹², C02R¹¹, NR^UCOR¹², R¹¹, halogen, CN, • · halogenalkyl, 0 (halogenalkyl) , S(O)_PR^U, OC(O)R¹¹, NR¹¹SO₂R¹², SO2NR^uR¹² , C (0) NR^UR¹² .

Nejvýhodnější heterocyklyl je definován jako 5- až 6 členný kruh obsahující 1-2 heteroatomy nezávisle vybrané z 0, S a N, nasycený nebo částečně nasycený.

Výhodné sloučeniny podle předloženého vynálezu zahrnují:

(+)-5-Amino-2-[(l-n-propyl-lfí-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina (Příklad 2);

( + ) - (2S) -5-Amino-2- [ (l-n-butyl-líí-imidazol-4-1)methyl]pentanová kyselina (Příklad 5);

( + ) - (2S) -5-Amino-2- [ (l-n-propyl-líZ-imidazol-4-1)methyl]pentanová kyselina (Příklad 7);

( + ) - (2S) -5-Amino-2- (lH-imidazol-4-ylmethyl) pentanová kyselina___________ (Příklad 9) ;

(2S) -2- [ (2-Aminoethyl) amino] -3- (l-n-propyl-líí-imidazol-4yl)propanová kyselina (Příklad25);

(2S)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(l-n-butyl-ltf-imidazol-4yl)propanová kyselina (Příklad 26);

(2S)-2-isobutyl-lH-imidazol-4-yl)propanová kyselina (Příklad 29); a (2S) -2- [ (2-Aminoethyl) amino] -3- (l-n-isopentyl-líí-ímidazol4-yl)propanová kyselina (Příklad 30).

Zejména výhodná je (+)-(2S)-5-Amino-2-[(1-n-propyl-lH-imidazol-4-1)methyl]pentanová kyselina (Příklad 7)

Předložený vynález rovněž zahrnuje sloučeniny vzorců XXIII a XXIV

kde R¹, R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a R¹⁰ jsou, jak je definováno výše, R⁴ je vodík, n je 0, X je CH a R⁹ je, jak je definováno výše nebo představuje vhodnou dusík chránící skupinu Vhodné ^usTk~^ErůiTí7d£^klíplLny^zahrnuj í kařbamáty, zejména—BOC-abenzyl. Tyto sloučeniny jsou zejména použitelné jako meziprodukty při výrobě sloučeniny obecného vzorce I.

Předložený vynález dále poskytuje způsob výroby sloučenin podle vynálezu, který je popsán níže a v části obsahující Příklady a Přípravy. Odborníkovi v oboru je zřejmé, že sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny i jinými způsoby, než jsou zde popsány, adaptací způsobů, které jsou zde popsány a/nebo adaptací množství metod známých ze stavu techniky. Je jasné, že syntetické transformační metody, specificky zde zmíněné, mohou být prováděny mnoha různými postupy s ohledem na to, aby požadované látky byly účinně vyrobeny. Zkušený chemik

použije své zkušenosti pro stanovení nejúčinnějšího pořadí reakcí pro syntézu dané cílové látky.

Zkušenému odborníkovi v oboru je zřejmé, že senzitivní funkční skupiny může být potřebné chránit a chránící skupiny odstranit v průběhu syntézy sloučeniny podle vynálezu. To může být provedeno konvenčními technikami, například, jak je popsáno v „Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley and Sons lne. 1991.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být připraveny reakcí sloučeniny obecného vzorce II,

(li) kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a X jsou, jak je definováno výše, R⁹ a R¹⁰ jsou, jak je definováno výše nebo představují vhodnou dusík chránící skupinu a R¹³ je vhodná kyslík chránící skupina, s vhodným reakčním činidlem pro odstranění uvedené kyslík chránící skupiny.

Vhodné kyslík chránící skupiny zahrnují skupiny allyl, alkyl, kde alkyl je případně substituován arylem.

Vhodná reakční činidla a podmínky pro odstranění uvedené chránící skupiny jsou známé zkušenému odborníkovi v oboru a mohou zahrnovat hydrolýzu a hydrogenací.

Když R⁹ a/nebo R¹⁰ je dusík chránící skupina, může být nezbytné odstranit uvedenou skupinu po reakci sloučeniny obecného vzorce II s vhodným reakčním činidlem odstraňujícím chránící skupinu na kyslíku. Vhodné dusík chránící skupiny jsou odborníkovi v oboru dobře známé , stejně jako vhodné podmínky pro jejich odstranění.

Sloučeniny obecného vzorce II kde R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁶,

R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹³ a X jsou definovány výše a R² je vodík, může být připravena ze sloučenin vzorců V a VI v souladu s následujícím schématem

(a)

Sloučeniny obecného vzorce IV mohou být připraveny způsobem podle kroku (a), Wadsworth-Emmonsovou reakcí mezi sloučeninami obecného vzorce V a VI. Reakce může být prováděna za standardních podmínek, jak jsou popsány v Org. Synth. Coli. Vol., 1988, 6, 358 a 1993, 8, 265. Vhodné podmínky zahrnují vytvoření fosfonátového aniontu s vhodnou bází, jako je NaH při 0 °C, a potom reakci s 1 ekv. vhodného aldehydu při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Vhodným rozpouštědlem může být tetrahydrofuran.

Sloučeniny obecného vzorce II mohou být připraveny způsobem podle kroku (b) hydrogenací. Hydrogenace může být provedena způsobem, jako je katalytická hydrogenace, například 10% Pd/C při 4 atmosférách, v alkoholickém rozpouštědle (methanol nebo ethanol) při teplotě v rozmezí od teploty místnosti do 60 °C, po dobu mezi 4 a 72 hodinami; nebo redukcí aktivovanou hydridem kovu, například 30 ekv. NaBH₄, 1,5 až 2,5 ekv. CuCl, v methanolu při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Způsob může být rovněž řízen cestou asymetrické hydrogenace alkenové vazby—Takové metody jsou dobře známé zkušeným odborníkům v oboru a jsou diskutovány v „Asymmetric Synthetic methodology kapitola 9, Eds D. Ager and M. East, CRC Press, 1996, ISBN...0-84938492-9.

Sloučeniny obecného vzorce V jsou komerčně dostupné nebo mohou být připraveny způsoby, které jsou odborníkům v oboru známé. Zde se odkazuje na přípravy zde uvedené a na G. Shapiro et al, Heterocycles, 1995, 41, 215; L. A. Reiter, j. Org. Chem., 1987, 52, 2714; Β. H. lipshutz et al, Tetrahedron Lett. 1986, 27, 4095; F. Aldebbagh et al, tetrahedron Lett., 1997, 38 7937; a S. M. abdelaal, j. Het. Chem. 1995, 32, 903.

• · · »· ··

Sloučeniny obecného vzorce VI kde R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸,

R⁹, R¹⁰ a R¹³ jsou, jak je popsáno výše a X je CH, mohou být připraveny podle následujícího schématu

R10 .R^s

-R⁷

'2'n ^XR^S

Y

R⁵ (Vlil) (c)

R⁹

Sloučeniny obecného vzorce VI mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce VII a VIII, kde Y je halogen, za podmínek způsobu v kroku (c) , alkylační reakce. Reakce může být prováděna za standardních podmínek, typicky se na

ekv. sloučeniny obecného vzorce VII působí 1,1 ekv. NaH a potom reakcí se sloučeninou obecného vzorce VIII,

18-crown-6 (katalyzátor) při teplotě refluxu po dobu 18 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce VI kde R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹,

R¹⁰ a R¹³ jsou, jak je popsáno výše R⁴ je vhodná dusík chránící skupina a X je N, mohou být připraveny podle schématu uvedeného výše.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být rovněž připraveny ze sloučeniny obecného vzorce III za podmínek laktamové hydrolyzační reakce. Vhodné podmínky zahrnují způsob podle kroku (d) , hydrolýzu laktamu. Hydrolýza může být řízena za standardních podmínek, typicky v bazickém prostředí, například ve vodném LiOH v tetrahydrofuranu při teplotě místnosti po dobu 4-18 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce III kde R¹ , R³, R⁴, R⁵, R⁶, r!,__r1,„r1,_RÍž,_X a Z jsou,_jak je popsáno výše a R² je vodík, mohou být připraveny následujícím způsobem • ·· ·

(a) ♦

Φ)

Sloučeniny obecného vzorce IX mohou být připraveny reakcí sloučeniny obecného vzorce V a X za podmínek shodných, jako v kroku (a) popsaném výše. Sloučeniny obecného vzorce III mohou být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce IX za podmínek způsobu v kroku (b) popsaném výše.

····

Sloučeniny obecného vzorce X, kde R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹,R¹⁰ a R¹³ jsou, jak je popsáno výše, s podmínkou že R⁹ a R¹⁰ nejsou spojeny a X je CH, je možno připravit ze sloučeniny obecného vzorce XI, kde Y je halogen, podle následujícího reakčního schématu.

(XI)

Sloučeniny obecného vzorce X mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XI za podmínek shodných, jako v kroku (c) popsaných výše.

Sloučeniny obecného vzorce II kde R¹ ,R², R³, R⁴, R⁵,

R⁷, R⁸, R¹⁰ a R¹³ jsou, jak je popsáno výše, R⁹ je popsáno výše nebo představuje vhodnou dusík chránící skupinu, X je N a R⁶ je vodík mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XII a XIII, podle následujícího reakčního schématu.

(e) (k)

Sloučeniny vzorce II, je možno připravit reakcí sloučenin vzorce XII a XIII, za podmínek kroku (e) způsobu, redukčně alkylační reakce, za standardních podmínek známých odborníkovi v oboru. Vhodné podmínky zahrnují reakci sloučeniny X11.a .X111 v přítomnosti sodium acetátu a kyanoborohydridu sodného.

Sloučeniny obecného vzorce II, kde R⁹ je H je možno připravit reakcí sloučenin obecného vzorce II, kde R je vhodná dusík chránící skupina- postupem podle volitelného kroku (k) , odstraněním dusík chránící skupiny; podmínky vhodné pro odstranění dusík chránících skupin P¹ jsou popsány v „Protective Groups in Organic Synthesis, Druhé vydání, T. W. Greene and P. G. M. Wutz, Wiley-Interscience (1991). Vhodné podmínky zahrnují: Odstranění BOC: 6N vodnou kyselinou chlorovodíkovou při teplotě místnosti až teplotě refluxu, po dobu v rozmezí 1 až 3 hodin;

Odstranění benzylu: redukcí kovem v rozpouštědle, například Na, kapalný NH₃, -78 °C.

Sloučeniny obecného vzorce XIII jsou komerčně dostupné nebo mokou být připraveny metodami, které jsou odborníkům v oboru dobře známé.

Sloučeniny obecného vzorce XII výše jsou komerčně dostupné. Alternativně, když R¹, R³, R⁴ a R^1J jsou popsány výše, a R² je vodík, mohou být připraveny způsobem popsaným v Helv. Chim. Acta., 1994, 77, 1395 nebo jak je popsáno níže.

(b)

(Xlla) (Xii)

4’4 ····

9.

Sloučeniny obecného vzorce XII mohou být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce V a XIV za podmínek podle způsobu v kroku (a), popsaných výše.Sloučeniny obecného vzorce Xlla mohou být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce XIII za podmínek podle způsobu v kroku (b), popsaných výše. Jestliže je požadována sloučenina obecného vzorce XII, kde R⁴ není vodík, potom sloučeniny obecného vzorce XII mohou být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce Xlla za podmínek podle způsobu v kroku (e), popsaných výše.

Sloučeniny obecného vzorce Xlla, kde R¹, R² a R³ jsou, jak je popsáno výše, s podmínkou, že R² a R³ nejsou spojeny a R¹³ je methyl, mohou být rovněž asymetricky připraveny ze sloučenin obecného vzorce XVI, kde Y je halogen, podle následujícího reakčního schématu.

(XVII) (0

(XV) (Xlla)

Sloučeniny obecného vzorce XV mohou být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce XVII a XVI za podmínek podle kroku (f), asymetrická alkylační reakce podle Schollkopfa, zahrnující reakci halogenidu s vhodným deprotonovaným Scholkopfovým chirálním činidlem (Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1981, 20, 798). Vhodnými podmínkami je působení Scholkppfova pomocného činidla v tetrahdrofuranu při -78 °C s BuLi, následované přidáním sloučeniny obecného vzorce XVI po 24 hodinách při teplotě místnosti. Sloučenina obecného vzorce Xlla může být připravena reakcí sloučenin obecného vzorce XV za podmínek podle způsobu v kroku (g), hydrolyzační reakcí, popsanou v Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1981, 20, 798. Vhodné podmínky jsou 5 ekv. 0,25N vodné kyseliny chlorovodíkové při teplotě místnosti po dobu 2 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce XII mohou být získány odborníkům v oboru dobře známou ze stavu techniky nebo jak je doloženo v příkladech. Je třeba poznamenat, že sloučeniny obecného vzorce—XH—a- meziprodukty—kde—R— není H-mohou ^být_____________ připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce XII a meziproduktů, ve kterých R¹ je H, s vhodným reakčním činidlem obsahujícím R¹, kde R¹ je jak je popsáno výše.

Sloučeniny obecného vzorce II kde R¹ , R² , R³, R⁴, R⁵, R⁶,

R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰ a R¹³ jsou, jak je popsáno výše a X je dusík mohou být rovněž připraveny ze sloučenin obecného vzorce XIX a XVIII, kde Y je halogen způsobem podle následujícího reakčního schématu.

R9 ·· ···*

Sloučeniny obecného vzorce II je možno připravit reakcí sloučenin vzorců XVIII a XIX za podmínek podle způsobu v kroku (h) alkylační reakcí, reakcí přebytku aminu s halogenidem. Vhodné podmínky představují 6 ekv. sloučeniny obecného vzorce XIX a 1 ekv. sloučeniny obecného vzorce XVIII v acetonitrilu při teplotě místnosti po dobu 2 hodin a potom 18 hodin při teplotě refluxu.

Sloučeniny obecného vzorce XIX mohou být připraveny množstvím způsobů známých odborníkům a rovněž jsou komerčně dostupné.

Sloučeniny obecného vzorce XX, kde R¹, Ř², R³ a R¹³ jsou popsány výše, s podmínkou, že R² a R³ nejsou spojeny,

mohou být připraveny způsobem popsaným následujícím reakčním schématem.

Sloučeniny obecného vzorce XX je možno připravit reakcí sloučenin obecného vzorce Xlla za podmínek způsobu podle kroku (i) diazotační/halogenační reakcí, zahrnující konverzi aminové skupiny na diazoskupinu, následovanou reakcí s odpovídajícím halogenidem, typicky in sítu. Vhodné podmínky představují 1 ekv. aminu s 3,3 ekv. NaNC>2 v koncentrované chlorovodíkové kyseliny: vodě (30:50) při teplotě -5 °C, a potom 17 hodin při teplotě místnosti.

Sloučeniny obecného vzorce IA a IB, kde R¹ , R³, R⁵,

R⁶, R⁷, a R⁸ jsou, jak je popsáno výše, R², R⁴ a R¹⁰ jsou vodík, R⁹ je popsáno výše nebo vhodná dusík chránící skupina, n je 0 a X je CH mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XXIII, oba E a Z isomery podle následujícího schématu.

···· · · · · · · ·· ·· .......... ·*

Sloučeniny obecného vzorce XXII mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XXIII za podmínek podle kroku (b), jak je popsáno výše. Vhodné dusík chránící skupiny zahrnují karbamáty, zejména skupiny BOC a benzyl. Způsob podle kroku (b) může být rovněž proveden asymetricky, s použitím technik, které jsou odborníkům v oboru známé.

Sloučeniny obecného vzorce XXI mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XXII za podmínek podle kroku (d) způsobu, hydrolýzou laktamu, která může být provedeny za kyselých nebo podmínek, podle potřeby.

Sloučeniny obecného vzorce IA a IB je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXI za podmínek podle kroku (j) způsobu, rozdělením enantiomerů, následovaným volitelným krokem (k), odstraněním dusík chránící skupiny, jestliže je R⁹ ochranná skupina dusíku.

V kroku (j) způsobu, jednotlivé enantiomery sloučenin vzorců IA nebo IB je možno připravit rozdělením, například s použitím H.P.L.C., odpovídajícího racemátu s použitím vhodného chirálního nosiče, nebo frakční krystalizací diastereomerních solí vytvořených reakcí odpovídajících racemátů s vhodnou kyselinou nebo bází, podle potřeby. Odkazem je zde uvedeno „enantiomers, racemate and Resolutions J. Jacques and Collet, vydáno Wiley, NY, 1981; a „Handbook of Chiral Chemicals kapitola 8, Eds D.Ager a M. Dekker, ISBN:0-8247-1058-4.

Sloučeniny obecného vzorce IA nebo IB, kde R⁹ je H mohou být získány ze sloučenin vzorců IA a IB, kde R⁹ je vhodná ochranná skupina na dusíku volitelným krokem (k) způsobu, odstraněním ochranné skupiny; vhodné podmínky pro • fc ···· • · · • · · ·· • · · • · · · • fc ·· « ···· •fc ···· < · · • · · • · · • · · · • fcfc · ·· ·· odstranění ochranné skupiny R⁹ jsou popsány v „Protective Groups in Organic Synthesis, druhé vydání, T. W. Green and P. G. M. Wutz, Wiley-Interscience(1981). Vhodné podmínky zahrnují:

Odstranění BOC: 6N vodná kyselina chlorovodíková při teplotě místnosti až teplotě refluxu, po dobu mezi 1 a 3 hodinami;

Odstranění benzylu: Redukcí kovem v rozpouštědle, například Na vodný NH3, -78 °C.

Sloučeniny vzorců IA a IB, kde R¹ , R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a X jsou, jak je popsáno výše, R², R⁴ a R¹⁰ jsou vodík, R⁹ je, jak je uvedeno výše nebo vhodná dusík chránící skupina, mohou být rovněž připraveny asymetricky ze sloučenin obecného vzorce XXIII. kde XXIII jsou oba E a Z isomery, způsobem podle schématu uvedeného níže.

• · · ·

Sloučeniny obecného vzorce XXIV mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XXIII za podmínek podle kroku (d) způsobu, jak je popsáno výše.

Sloučeniny obecného vzorce IA a IB je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXIV za podmínek podle kroku (b) způsobu, hydrogenací, (j) rozdělením enantiomerů a volitelně, (k), odstraněním ochranné skupiny na dusíku. Kroky způsobu (b), (j) a (k) jsou popsány výše.

V alternativním provedení vynálezu mohou být sloučeniny obecného vzorce IA, kde R¹ , R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a R¹⁰ jsou, jak je popsáno výše, R² a R⁴ jsou vodík a R⁹ je popsáno výše nebo vhodná dusík chránící skupina, připraveny asymetricky ze sloučenin obecného vzorce XXIV, kde Sloučeniny XXIV jsou oba, E a Z isomery, způsobem podle reakčního schématu uvedeného níže.

(XXIV)

Sloučeniny obecného vzorce IA nebo IB mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce XXIV za podmínek podle kroku (1) způsobu, asymetrickou hydrogenací, (j) rozdělením enantiomerů a volitelně (k), odstraněním ochranné skupiny na dusíku, jestliže R⁹ je ochranná skupina na dusíku. Krok (j) je volitelný a závisí na stupni enantiomerní selektivity získané v kroku (i). Kroky (j) a (k) způsobu jsou popsány výše a jsou dále doloženy v příkladech.

····

Metody používané pro provedení kroku (1) způsobu jsou odborníkům v oboru známé a jsou diskutovány vAsymetrie Synthetic Methodology, kapitola 9, Eds D. Ager and East, CRC Press, 996, ISBN: 0-8493-8492-9 a rovněž jsou doloženy příklady provedení.

Sloučeniny obecného vzorce XXIII, kde R¹ , R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a X jsou, jak je popsáno výše a R⁹ je, jak je popsáno výše nebo může představovat vhodnou dusík chránící skupinu, je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce V a XXVI podle reakčního schématu uvedeného níže.

(XXVI) (m)

• ·

Sloučeniny obecného vzorce XXV je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce V a XXVI za podmínek podle kroku (m) způsobu,' reakcí typu Aldol. Vhodné podmínky pro takovou reakci jsou odborníkům v oboru dobře známé. Odkazem je zde uvedena „Advanced Organic Chemistry”, (čtvrté vydání),

Jerry March, John Wiley and Sons lne.

Sloučeniny vzorce XXIII je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXV, za podmínek podle kroku (n) způsobu, eliminační reakcí.Na sloučeninu obecného vzorce XXV se působí tak, aby hydroxyskupina byla odstraněna přímo při dehydratační reakci nebo může být odstraněna, tak že se nejprve transformuje na snadno odstupující skupinu, jako je tosylátová nebo mesylátová skupina.

Sloučeniny obecného vzorce XXII, kde R¹ ,R², R³,R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a X jsou, jak je popsáno výše a R⁹ je, jak je popsáno výše nebo může představovat vhodnou dusík chránící skupinu a n je 0, je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXX a XXVI podle schématu uvedeného níže.

.)

O (XXX)

(XXVI) (m)

(XXXI)

R(XXII)

Sloučeniny obecného vzorce XXXI je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXVI a obecného vzorce XXX, kde R³ je, jak je popsáno výše a P² představuje vhodnou dusík chránící skupinu, za podmínek kroku (m) způsobu, jak je popsáno výše.

Sloučeniny obecného vzorce XXXII je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXXI, za podmínek podle kroku (n) způsobu, jak je popsáno výše.

Sloučeniny obecného vzorce XXIIa, kde R², R³,R⁴, R⁵,

R⁶, R⁷, R⁸ a X jsou, jak je popsáno výše a R⁹ je popsáno výše nebo může představovat vhodnou dusík chránící skupinu, n je 0 a R¹ je vodík,, je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXXII za podmínek podle kroku (b), a následně podle kroku (k) způsobu, oba jak jsou popsány výše.

Sloučeniny obecného vzorce XXII, kde R¹ není vodík, je možno získat ze sloučenin obecného vzorce XXIIa za podmínek podle kroku (r) způsobu, kopulační reakcí. Vhodné podmínky představují ty, které jsou popsány v v kroku (h) nebo (p) způsobu, alkylační nebo arylační reakcí, které jsou dobře známé odborníkům v oboru.

Vhodné alkylační podmínky mohou zahrnovat:

ekv. báze (například CS2CO3) a 1,25 ekv. alkylačního činidla, (například R¹Br) , v DMF při 70 ’C po dobu 3 hodin. Vhodné arylační podmínky mohou zahrnovat:

ekv. R¹-B(OH)₂/ 1/5 ekv. octanu měďnatého jako katalyzátoru, 2 ekv. pyridinu v DCM, po dobu 2 dnů, pod proudem stlačeného vzduchu. (P.Y.S. Lam et al., Tetrahedron Lett. 39; 2941; 1998)

Sloučeniny, obecného vzorce I, k*<3e Ή¹, R^c*,* *A⁸*, R*’ FT*,

R⁷, R⁸, R⁹ a R¹⁰ jsou, jak je popsáno výše, R⁴ je vodík a X je dusík, s podmínkou, že jeden z R⁹ a R¹⁰ není vodík a R¹ je připojeno k dusíkovému atomu imidazolu, je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXIX podle reakčního schématu uvedeného níže.

\k A >-0R¹³

R2 R3 o (XXVIII) (P)

• · • · (q)

Rs

I ^^NR⁸

-R⁷

Ri

Sloučeniny obecného vzorce XXVIII je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXIX, kde R⁴ je vodík a jeden ze R⁹ a R¹⁰ není vodík, způsobem podle kroku (o) způsobu, karbonylační reakcí. Reakci je možno provést za standardních podmínek, jak jsou 'popsány v Tetrahedron 1996, 52, 5363. Vhodné podmínky zahrnují reakci 1 ekv. sloučeniny XXIX s 1 ekv. karbonyldiimidazolu v W,N-dimethylformamidu při teplotě 60 °C po dobu 17 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce XXVII je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXVIII způsobem podle kroku (p), alkylační reakcí. Tato reakce může být provedena za standardních podmínek, například reakcí sloučeniny XXVIII s alkylačním činidlem, jako je alkylhalogenid, případně v přítomnosti katalyzátoru, ve vhodném rozpouštědle. Vhodné podmínky zahrnují reakci 1 ekv. sloučeniny obecného vzorce XXVIII s 2 ekv. R¹-C1 v acetonitrilu pod refluxem po dobu 18 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce XXVII za podmínek podle kroku (q) způsobu, hydrolyzační reakcí. Výchozí látky reagují s vodnou kyselinou, výhodně s kyselinou chlorovodíkovou nebo sírovou.

Sloučeniny obecného vzorce XXIX je možno připravit způsoby popsanými v tomto dokumentu, kde R¹ je namísto vodíku.

Všechny výše uvedené reakce á přípravy nových výchozích látek používaných v předchozích metodách jsou konvenční a vhodná reakční činidla a podmínky reakcí pro jejich provedení nebo přípravu, stejně jako postupy izolace požadovaných produktů, budou odborníkům v oboru dobře známé s odkazy na obdobné případy v literatuře a Příklady a Přípravy zde uvedené.

Předložený vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceticky přijatelné soli , solváty a proléčiva pro použití jako léčiva.

Předložený vynález dále poskytuje použití TAFIa inhibitorů pro výrobu léčiv pro léčení nebo prevenci stavů vybraných z trombózy, atherosklerózy, srůstů, jizev, nádorů, fibrotických stavů, zánětlivých chorob a těch stavů, které jsou které jsou pozitivně ovlivňovány udržováním nebo zvýšením hladiny bradykininu v těle.

Dále poskytuje předložený vynález způsob léčení a prevence trombózy, atherosklerózy, srůstů, jizev, nádorů, fibrotických stavů, zánětlivých chorob a těch stavů, které jsou které jsou pozitivně ovlivňovány udržováním nebo zvýšením hladiny bradykininu v těle, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství TAFIa inhibitorů a jejich farmaceuticky přijatelných solí, solvátu a proléčiv pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Výhodně TAFIa inhibitor představuje sloučenina obecného vzorce I, jak je zde popsána. Podle toho předložený vynález poskytuje způsob léčení a prevence trombózy, atherosklerózy, srůstů, jizev, nádorů, fibrotických stavů, zánětlivých chorob a těch stavů, které jsou které jsou pozitivně ovlivňovány udržováním nebo zvýšením hladiny bradykininu v těle, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství TAFIa inhibitorů a jejich farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Trombotické stavy patří mezí nejčastější příčiny úmrtí v rozvinutém světě. Existuje velké množství antitromotických léčiv vhodných pro léčení těchto stavů. Mnoho těchto léčiv působí pomocí redukce tvorby trombů. Všechna tato léčiva jsou spojena s různým stupněm nepříznivých účinků na krvácivost. To znamená, že pacient léčený tímto způsobem, vyžaduje pravidelné sledování, aby se předešlo nepříznivým událostem s krvácením.

Existuje potřeba antitrombotik, která jsou účinná, ale nezpůsobují krvácivost. To se však může zdát nemožné, s ohledem na zásadní rozpor mezi požadavkem zastavení tvorby sraženin pro prevenci trombotické choroby a umožněním tvorby sraženiny pro prevenci krvácivosti pacienta.

4 4 4

4 4444

4444

Překvapivé může být tento problém řešen sloučeninami podle předloženého vynálezu, které jsou třídou TAFIa inhibitorů. Většina konvenčních terapií působí inhibici koagulace nebo aktivaci krevních destiček. TAFIa inhibitory působí zvýšenou fibrinolýzou, a tedy zvýšením rychlosti rozpouštění sraženin. To má účinek posunutí rovnováhy mezi koagulací a fibrinolýzou, ve prospěch fibrinolýzy. Většina klinicky významných trombů je subakutních, jestliže se tvoří pomalu během doby. Efekt posunutí rovnováhy ve prospěch fibrinolýzy spočívá v tom, že většina sraženin se rozpustí dřív, než se stanou klinicky významnými.

V případě cévního poškození, se.rovnováha vrátí zpět ve prospěch koagulace. První odpověď těla vasokonstrikcí a shlukováním krevních destiček zůstává při použití TAFIa inhibitorů neporušena. Tělo potom rychle aktivuje koagulační kaskády. Účinkem toho je, že se dočasně posune rovnováha příznivě ke koagulaci a dovoluje tvoření hemostatických uzávěrů použitím fibrinu. Když je vaskulární poškození uzavřeno tělo se vrátí k rovnováze, která byla před poškozením.

Předložený vynález rovněž poskytuje použití TAFIa inhibitorů při přípravě léčiv pro léčení nebo prevenci trombózy, zejména infarktu myokardu, trombózy hlubokých žil, mrtvice, začínající mrtvice, periferního vaskulárního onemocnění, angíny a dalších forem akutních koronárních syndromů, roztroušené intravaskulární koagulace, sepse, pulmonální embolie, sekundárních embolických příhod při srdeční arytmii a k prevenci kardiovaskulárních příhod následujících po chirurgickém zákroku. Výhodně, uvedený TAFIa inhibitor by měl mít Ki menší než 20 μΜ, při použití testu uvedeného níže. Výhodně TAFIa inhibitor by měl mít

selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1,výhodně >1000:1, při použití testu uvedeného níže. Výhodně uvedené TAFIa inhibitory jsou nepeptidické.

Výhodně TAFIa inhibitor je sloučenina obecného vzorce I, jak je zde popsána. Proto předložený vynález poskytuje použití sloučeniny obecného vzorce I při přípravě léčiva pro léčení trombotických stavů vybraných z infarktu myokardu, trombózy hlubokých žil, mrtvice, začínající mrtvice,mozkové mrtvice, mozkové trombózy ,mozkové embólie, periferního vaskulárního onemocnění, angíny a dalších forem akutních koronárních syndromů, roztroušené intravaskulární koagulace, sepse, pulmonální embolie, sekundárních embolických příhod při srdeční arytmii a k prevenci kardiovaskulárních příhod následujících po chirurgické revaskularizaci nebo intervenci.

Vynález rovněž poskytuje způsob léčení nebo prevence trombózy, zejména infarktu myokardu, trombózy hlubokých žil, mrtvice, začínající mrtvice, mozkové mrtvice, mozkové trombózy, mozkové embólie, periferního vaskulárního onemocnění, angíny a dalších forem akutních koronárních syndromů, roztroušené intravaskulární koagulace, sepse, pulmonální embolie, sekundárních embolických příhod při srdeční arytmii a k prevenci kardiovaskulárních příhod následovaných chirurgickým zákrokem, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I a jejích farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Subjekty s trombotickými stavy, které jsou vhodné pro léčení podle předloženého vynálezu zahrnují ty, které mají stavy spojené s hyperkoagulabilitou. Ty zahrnují (ale

nejsou jimi limitovány): mutaci faktoru V, nedostatek antitrombinu III, nedostatek proteinu C a proteinu S, červenou polycytémii, heparinový kofaktor 11 a subjekty vykazující hyperhomocysteinemii nebo homocysteinurii.

Předložený vynález rovněž zahrnuje jako trombotickou indikaci zlepšení funkce orgánu po transplantaci, snížením srážlivosti krve a tedy udržováním funkce.

Kardiovaskulární příhody následující po chirurgickém zákroku zahrnují stavy, jako jsou restenóza nebo reokluze následující zákrok, jako je perkutánní transluminální koronární angioplastika, transplantace, zavedení stentu, koronární bypass nebo jiná forma chirurgické revaskularizace nebo chirurgického zákroku.

V předloženém vynálezu roztroušená intravaskulární koagulace zahrnuje všechny stavy způsobené intravaskulární aktivací koagulačního procesu. Ten může nastat akutně při uvolnění prokoagulačních látek (například porodní komplikace, uštknutí, úraz, zhoubný nádor) , abnormálním kontaktem krve (například, infekce, zánět, mimotělní oběh, transplantace) nebo při vývoji prokoagulantů. v krvi (reakce na transfuzi, leukemie) nebo chronicky (například, toxémie, maligní hypertenze a těžká cirhosa jater).

Trombóza hlubokých žil také zahrnuje to, co je známo jako „syndrom ekonomické třídy, kde sraženina se tvoří v subjektech nucených snášet přecpané podmínky po časovou periodu, jako je například sezení na sedadlech v přecpané ekonomické třídě letadla.

·· ···· ·· ·· ····

• · · ·«

Předložený vynález rovněž poskytuje použití TAFIa inhibitorů a/nebo TAFI inhibitorů jako povlaku na intravaskulárních zařízeních, jako jsou permanentní katetry pro dialýzu, náhrada srdečních chlopní nebo arteriálních stentů a jako povlak na zařízení pro mimotělní oběh krve jako srdce, plíce a zařízení pro ledvinovou dialýzu, pro prevenci trombózy, zejména infarktu myokardu, trombózy hlubokých žil, mrtvice, začínající mrtvíce, mozkového infarktu, mozkové trombózy, mozkové embolie, periferního vaskulárního onemocnění, angíny a dalších forem akutních koronárních syndromů, roztroušené intravaskulární koagulace, sepse, pulmonální embolie, sekundární embolické příhody při srdeční arytmii a prevenci kardiovaskulárních příhod, jako je restenóza následující po chirurgickém zákroku, jako je perkutánní transluminální koronární angioplastika, transplantace, zavedení stentu, koronární bypass nebo jiné formy chirurgické revaskularizace nebo zákroku. Zejména výhodným provedením jsou sloučeniny obecného vzorce I, podle předloženého vynálezu.

Předložený vynález tedy poskytuje použití TAFIa inhibitorů a/nebo TAFI inhibitorů jako povlaku na intravaskulárních zařízeních.

Dále poskytuje použití sloučenin podle předloženého vynálezu jako povlaků na intravaskulárních zařízeních.

Vynález zahrnuje intravaskulární zařízení, jejichž intravaskulární část má povlak z TAFIa inhibitoru a/nebo a TAFI inhibitoru nebo zařízení pro mimotělní oběh krve, jako je srdce, plíce a přístroje pro ledvinovou dialýzu, kde část, která přichází do kontaktu s krví subjektu je

	··	9999	• ··		99	9999
•	•	9	99 9 9	9	9	9
•	*	9	• 9	9	9	9
•	9 99	9 · ··	9 9 999 99··	9	9 99	9 9 99

povlečena TAFIa inhibitorem a/nebo TAFI inhibitorem.

Zejména výhodným provedením je takové, kdy intravaskulární zařízení nebo zařízení pro mimotělní oběh krve je povlečeno sloučeninou obecného vzorce I, podle předloženého vynálezu. Výhodně, TAFIa inhibitor má Ki menší než 20 .μΜ, při použití testu popsaného níže a má selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1, výhodně >1000:1, při použití testu popsaného níže. Výhodně jsou TAFIa inhibitory nepeptidické.

Předložený vynález tedy poskytuje intravaskulární zařízení s povlakem TAFIa inhibitoru. Dále předložený vynález poskytuje intravaskulární zařízení s povlakem sloučeniny podle předloženého vynálezu.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly testovány v modelu koronární arteriální reperfuze s použitím metody shodné s těmi, které byly popsány v W. E. Rotě et al, J. Cardiovasc. Pharmacol., 1994, 23, 203, a byly shledány účinnými.

TAFIa inhibitory jsou také užitečné při léčení aterosklerózy. Ateroskleróza je obecně stav subjektu trpícího periferním vaskulárním onemocněním, inzulínovou resistencí a skupinou stavů obecně nazývaných „Syndrom X.. Syndrom X je termín často používaný pro zařazení množství vzájemně spojených nemocí. První stadium syndromu X sestává z inzulínové rezistence, abnormální hladiny cholesterolu a triglyceridů, obezity a hypertenze. Kterákoliv z těchto podmínek může být použita pro diagnózu startu Syndromu X. Onemocnění se potom může vyvíjet s jednou podmínkou vedoucí k k rozvoji druhé ve skupině. Například inzulínová rezistence je spojena s vysokou hladinou lipidů, hypertenzí • · íí a obezitou. Onemocnění se potom stupňuje, s rozvojem každé další podmínky se zvyšuje riziko rozvoje vážnějších onemocnění. To se může stupňovat k rozvoji diabetů, ledvinového nebo srdečního onemocnění. Tato onemocnění mohou vést k mrtvici, infarktu myokardu a selhání orgánů

Při konvenční léčbě srdeční ischémie při klinicky stabilním koronárním arteriálním onemocnění je převážně navrženo, aby byla snížena srdeční práce a zvýšen průtok krve. Takové kroky zřetelně redukují srdeční ischémii a tedy zvyšují kvalitu života. Avšak tato strategie má malý vliv na patogenezi koronární aterosklerózy, která je chronickým procesem kontinuální přeměny vaskulárního systému, v odezvě na různý stupeň vaskulárního poškození.

Úloha tvorby trombů v patofyziologii stabilní angíny pectoris byla v nedávné době zvýrazněna několika nezávislými skupinami. Tvorba neokluzivních trombů neomezuje jen průtok krve, ale při nekompletním rozpuštění mohou být vázány ke stěně artérie, jako ztuhlý plakový materiál zvyšující aterosklerotický proces. Dlohoudobé podávání TAFIa inhibitoru předchází, vytvoření trombů a tedy poskytuje bezpečnou a účinnou léčbu, která zmírňuje symptomy angíny pectoris. Nejsou-li tromby přítomny, nemohou být inkorporovány stěnou artérie a tedy TAFIa inhibitor snižuje progresi onemocnění.

Předložený vynález rovněž poskytuje použití sloučenin podle předloženého vynálezu při přípravě léčiva pro léčení nebo prevenci aterosklerózy.

Předložený vynález poskytuje také způsob léčení nebo prevence aterosklerózy, který zahrnuje podávání ·· ····

terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I a jeho farmaceuticky přijatelné soli, solvátu nebo proléčiva pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Dále vynález poskytuje použití TAFIa inhibitoru pro přípravu léčiva pro léčení nebo prevenci aterosklerózy. Výhodně, TAFIa inhibitor má Ki menší než 20 .μΜ, při použití testu popsaného níže a má selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1, výhodně >1000:1, při použití testu popsaného níže. Výhodně, TAFIa inhibitory jsou nepeptidické.

Ateroskleróza zahrnuje primární a sekundární onemocnění koronární artérie, při kterých ateroskleróza omezuje přívod krve do.srdce. Primární prevence onemocnění koronární artérie znamená prevenci náporu ischemických komplikací, jako je infarkt myokardu u pacientů, kteří nemají anamnézu onemocnění koronární artérie, ale kteří mají jeden nebo více rizikových faktorů. Sekundární prevence onemocnění koronární artérie znamená prevenci ischemických komplikací pacientů, kteří mají zjištěno onemocnění koronární artérie, jako jsou pacienti kteří již dříve prodělali infarkt myokardu.

TAFIa inhibitory jsou rovněž účinné při inhibici . dozrávání a růstu tumoru. Metastáze je komplexní a multifaktoriální proces, který není dosud ještě zcela známý. Proto, bez vazby nějakou teorií, má se za to, že hemostatický systém je zapojen v několika hladinách patologie nádoru, včetně neovaskularizace, ubývání buněk primárního tumoru, invaze přívodu krve, adheze na cévní stěny a růst v metastatické poloze. Jeví se, že účinnost TAFIa inhibitorů pramení ze schopnosti redukovat fibrinový povlak kolem pevných tumorů a tak inhibovat proces uvedený výše.

Předložený vynález také poskytuje použití sloučenin podle předloženého vynálezu při přípravě léčiva pro léčení nebo prevenci nádoru.

Předložený vynález rovněž poskytuje způsob léčení nebo prevence nádoru, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle předloženého vynálezu pacientovi, který takovou léčbu potřebuje

Dále předložený vynález poskytuje použití TAFIa inhibitoru při přípravě léčiva pro léčení nebo prevenci nádoru. Výhodně, TAFIa inhibitor má Ki menší než 20 .μΜ, při použití testů popsaných níže a má selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1, výhodně >1000:1, při použití testu popsaného níže. Výhodně, TAFIa inhibitory jsou nepeptidické.

TAFIa inhibitory jsou také účinné při prevenci tvorby srůstů v těle. Většina chirurgických postupů fyzikálních traumat rezultuje v krvácení do dutiny mezi tkáněmi. Krev, která se shromažďuje na těchto místech se sráží za vytváření fibrinem bohatých trombů. Tyto tromby přemosťují mezery mezi sousedními tkáněmi a působí jako ohniska pro akumulaci zánětlivých buněk a fibroblastů. Napadáním fibroblastů oslabuje kolagenem bohatou extracelulární matrici, která zesiluje adhezi tkání tvorbou pevné vazby, která potom může omezovat pohyb. Srůsty mohou být charakterizovány podle svého umístění a mohou být následkem operací, například břišních, ortopedických, neurologických, kardiovaskulárních a očních. Tyto nežádoucí srůsty tkání po • « operacích nebo traumatech jsou hlavním problémem, který může vést k různým následkům, například trvalým bolestem, bodavým bolestem, lokálním zánětům, omezením mobility, bolesti, intestinální obstrukci a někdy v nejhorším případě k smrti. V případě gynekologické· operace, může vést k infertilitě. Dále jsou sraženiny tvořící fibrinem bohaté tromby zúčastněny na kožních jizvách a restenóze.

Bez vazby na nějakou teorii, má se za to, že tvorba srůstů může být zvýšena z důvodu nedostatků ve fibrinolýze způsobujících zvýšení a udržování vytvořených sraženin. Léčba TAFIa inhibitorem před a/nebo po chirurgickém zákroku může zvýšit fibrinolýzu fibrinem bohatých trombů a proto inhibují tvorbu trombů, jejich růst a stabilizaci a tedy inhibují tvorbu srůstů. TAFIa inhibitor podávaný buď systemicky nebo lokálně například topikální aplikací, může být považován za prospěšný v oblasti chirurgických postupů. Dále, podávání TAFIa inhibitoru může být vhodné pro léčení srůstů pocházejících z jiných forem nechirurgických fyzikálních traumat, která způsobila vnitřní krvácení. Příklady takových traumat mohou zahrnovat sportovní úrazy, nebo jakékoliv jiné, rezultující v tržná zranění, pořezání, pohmoždění nebo induaraci těla.

Předložený vynález rovněž poskytuje použití sloučenin podle vynálezu při přípravě léčiva pro léčení nebo prevenci srůstů nebo kožních jizev.

Vynález rovněž poskytuje způsob léčení nebo prevence srůstů, kožních jizev, které zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle předloženého vynálezu pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

• · · · · ·

Dále předložený vynález poskytuje použití TAFIa inhibitoru při přípravě léčiva pro léčení nebo prevenci srůstů a kožních jizev. Výhodně, TAFIa inhibitor má Ki menší než 20 .μΜ, při použití testů popsaných níže a má selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1, výhodně >1000:1, při použití testu popsaného níže. Výhodně, TAFIa inhibitory jsou nepeptidické.

TAFIa se váže k bradykininu a snižuje jej(Tan et al. Biochemistry 1995, 34, 581 1). Je známo mnoho stavů, při kterých je prospěšné udržování nebo zvyšování hladiny bradykininu. Proto, předložený vynález poskytuje použití sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčivpři přípravě léčiv pro léčení nebo prevenci stavů, při kterých je prospěšné udržování nebo zvyšování hladiny bradykininu.

Předložený vynález rovněž - poskytuje prevenci nebo léčení stavů, při kterých je prospěšné udržování nebo zvyšování hladiny bradykininu, které zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle předloženého vynálezu pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Stavy známé tím, že je při nich prospěšné udržování nebo Zvyšování hladiny bradykininu zahrnují onemocnění jako je hypertenze, angína, selhání srdce, pulmonální hypertenze, selhání ledvin a selhání orgánů.

TAFIa inhibitory jsou účinné při léčení takových stavů, při kterých je fibróza přispívajícím faktorem. Proto předložený vynález poskytuje také použití TAFIa inhibitorů při přípravě léčiva pro léčení nebo prevenci fibrotických •56 ·* onemocnění. Výhodně, TAFIa inhibitor má Ki menší než 20 .μΜ, při použití testu popsaného níže a má selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1, výhodně >1000:1, při použití testu popsaného níže. Výhodně, TAFIa inhibitory jsou nepeptidické. Zejména výhodné jsou sloučeniny vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli, solváty a proléčiva.

Vhodné fibrotické stavy zahrnují cystickou fibrózu, pulmonální fibrotické onemocnění, například chronickou obstrukční pulmonální chorobu (COPD), syndrom respirační tísně dospělých (ARDS), fibromuskulární dysplasie, fibrotické -onemocnění plic a usazeniny fibrinu v oku při oční operaci.

Proto,předložený vynález poskytuje použití sloučeniny obecného vzorce I, jak je zde popsána při přípravě léčiva pro léčení fibrotických stavů vybraných z cystické fibrózy, pulmonálního fibrotického onemocnění, chronického pulmonálního obstrukčního onemocnění (COPD), syndromu respirační tísně dospělých (ARDS), fibromuskulární dysplasie, fibrotického plicního onemocnění a usazeniny fibrinu v oku během očí operace.

Předložený vynález rovněž poskytuje způsob léčení nebo prevence fibrotických stavů vybraných z cystické fibrózy, pulmonálního fibrotického onemocnění, chronického pulmonálního obstrukčního onemocnění (COPD), syndromu respirační tísně dospělých (ARDS), fibromuskulární dysplasie, fibrotického plicního onemocnění a usazeniny fibrinu v oku během očí operace, které zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I

• · a jejích farmaceuticky přijatelných solí, solvátu a proléčiv pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Výhodně, TAFIa inhibitor má Ki menší než 20 .μΜ, při použití testu popsaného níže a má selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N >50:1, výhodně >1000:1, při použití testu popsaného níže. Výhodně, TAFIa inhibitory jsou nepeptidické. Zejména výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli, solváty a proléčiva.

Zejména, vynález může být použit pro léčení nebo prevenci zánětlivých onemocnění, jako je astma, artitida, endometrióza, zánětlivého onemocnění střev, psoriázy a topické dermatitidy nebo neurodegenerativnich chorob jako je Alzheimerova a Parkinsonova nemoc.

Proto vynález poskytuje, použití sloučeniny obecného vzorce I a jejích farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv při přípravě léčiv pro léčení zánětlivých onemocnění vybraných ze souboru, který tvoří astma, artitida, endometrióza, zánětlivé onemocnění střev, psoriáza a topická dermatitida a neurodegenerativní choroby, Alzheimerova a Parkinsonova nemoc.

Předložený vynález rovněž poskytuje způsob léčení nebo prevence zánětlivých onemocnění vybraných ze souboru, který tvoří.astma, artitida, endometrióza, zánětlivé onemocnění střev, psoriáza a topická dermatitida a neurodegenerativní choroby, Alzheimerova a Parkinsonova nemoc, které zahrnuje podávání farmaceuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I a jejích farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

• ·

Všechny odkazy na léčení, které jsou zde uvedeny zahrnují kurativní, paliativní a profylaktickou léčbu

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly testovány s použitím následujících zkoušek. Pro stanovení stupně TAFIa inhibice byly sloučeniny inkubovány s aktivovaným TAFI, a velikost inhibice byla vyjádřena hodnotou Ki. Tato zkouška je založena na testu uvedeném v Boffa et al, J.

Biol. Chem., 1998, 273, 2127.

Test...TAFIa inhibice

i)aktivace TAFI

Lidský TAFI (rekombinantni nebo purifikovaný) byl aktivován inkubací 20 μΐ zásobního roztoku (360 gg/ml) s 10 μΐ lidského trombinu (10 NIH jednotek/ml), 10 μΐ králičího trombomodulinu (30 μς/ιηΐ) , 6 μΐ chloridu vápenatého (50 mM) v 50 μΣ 20 mM HEPES (N-[2-hydroxyethyl]piperazin-N-[2-ethanesulfonová kyselina]) pufru, obsahujícím 150 mM chloridu sodného a 0,01% TWEEN 80 (polyoxyethylen-sorbitan monooleát) pH 7,6 po dobu 20 minut při 22 C. °Na konci inkubační periody, byl. trombin neutralizován přídavkem 10 μΣ PPACK (D-Phe-Pro-Arg chloromethylketon)(100 nM). Roztok TAFIa byl uložen na led po dobu 5 minut a nakonec zředěn 175 μΐ pufru HEPES.

ii) Stanovení Ki (TAFIa)

Výpočet Ki

Byla připravena řada různě naředěných roztoků testované sloučeniny ve vodě. K 20 μΐ každého naředěného

roztoku bylo přidáno 150 μΐ pufru HEPES a 10 μΐ TAFIa, který byl předem inkubován po dobu 15 minut při 24 C. Potom bylo ke každému naředěnému roztoku přidáno 20 μΐ furylakryloyl-alanyllysinu (FAAL) při standardní koncentraci. Substrát byl potom měřen odečítáním absorbance reakční směsi při 330 nm každých 15 sekund po dobu 30 minut. Reakce probíhala při 24 °C. a vzorky byly míchány 3 sekundy před každým odečítáním absorbance.

Potom byl zakreslen graf % inhibice proti koncentraci testované sloučeniny; ze kterého byla potom vypočtena hodnota IC50. Hodnota Ki může být vypočtena s použitím Cheng-Prusoffovy rovnice.

Pro kontrolu přesnosti výsledků v každém případě byly použity dvě kontroly, pozitivní a negativní. Pro první kontrolu, byla zkouška prováděna, jak je uvedeno výše, ale s 20 μΐ vody před tím, než byla prováděna s naředěnými roztoky testovaných sloučenin. Tato zkouška ukázala minimální inhibici. Pro druhou kontrolu byla zkouška provedena, jak je uvedeno výše, ale s účinným množstvím nespecifického karboxypeptidázového inhibitoru před tím, než byla provedena s naředěnými roztoky testovaných sloučenin. Tato zkouška ukázala maximální inhibici.

Když tyto dvě kontroly nedemonstrovaly příslušně minimální a maximální inhibici, potom výsledky nebyly brány v úvahu a zkouška testované sloučeniny byla provedena znovu.

Při použití zkoušky popsané výše bylo zjištěno, že sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou účinnými a selektivními inhibitory TAFIa. Všechny sloučeniny měly ·· ···· ♦ ♦ ·

hodnotu Ki menší než 20 μΜ. Specifická hodnota Ki některých sloučenin je uvedena níže:

(±) -6-Amino-2- [ (l-n-propyl-l/í-imidazol-4-yl)methyl]hexanová kyselina (Příklad 3)

Ki=310 nM ( + ) - (2S) -5-Amino-2- [ (l-n-propyl-l/ř-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina (Příklad 7)

Ki=13 nM (2S)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(lH-imidazol-4-yl)propanová kyselina (Příklad )

Ki=344 nM (2S) -2- [ (2-Aminoethyl)amino]-3-[1-(1, 3-thiazol-5-ylmethyl)-ltf-imidazol-4-yl]propanová kyselina (Příklad 45) Ki=197 nM

Rovněž byla stanovena selektivita sloučenin podle předloženého vynálezu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N. Ta byla dána výpočtem Ki sloučenin podle předloženého vynálezu pro karboxypeptidázu N, potom porovnána s Ki pro TAFIa. Ki byla vypočtena s použitím metody pro výpočet Ki TAFIa, ale s nahrazením 10 μΐ lidské karboxypeptidázy N 10 μΐ TAFIa.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu vykazují silnou selektivitu pro TAFIa ke karboxypeptidáze N zpravidla >50:1.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou TAFIa inhibitory, jejichž užitečnost je založena na prevenci reakce mezi rostoucím trombem a TAFIa.

-<-v.

·

Bylo zjištěno, že sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou rovněž schopné vazby k TAFI molekule, v místě účastnícím se při reakci mezi TAFIa a rostoucím koláčem. Použití TAFIa inhibitorů jak jsou popsány výše ve významu rozsahu a užitečnosti, zahrnuje takové TAFIa inhibitory, které se vážou k TAFI.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být rovněž podávány společně s dalšími antitrombotiky, zahrnujícími látky proti krevním destičkám, antikoagulanty a profibrinolytika.

Vhodná antitrombotika zahrnují: aspirin, Plavix™ tiklopidin, warfarin (coumarin™), nefrakcionovaný heparin, hirudin (Lepirudin™) , streptokinázu, urokinázu, rekombinantní tkáňový aktivátor plasminogenu (tPA), dipyridamol, Reopro™ , Aggrastat™, a Integrilin™. Sloučeniny vzorce I mohou být rovněž podávány společně s antihypertenzivy a s léčivy pro léčení dyslipidémie, jako jsou statiny, například Lipitor™.

Dalšími vhodnými třídami léků pro společné podávání jsou inhibitory faktoru X a antiárytmika, jako je amiodaron nebo digoxin.

Předložený vynález poskytuje použití TAFIa inhibitoru při přípravě léčiva v kombinaci s antithrombotikem pro léčení trombózy.

Předložený vynález poskytuje použití sloučeniny obecného vzorce I, jak je definována výše, při přípravě léčiva v kombinaci s antithrombotikem pro léčení trombózy.

Ve výhodném provedení antitrombotikem je profibrinolytikum.

V ještě výhodnějším provedení anitrombotikem je rekombinantní tkáňový aktivátor plasminogenu (tPA).

Předložený vynález poskytuje způsob léčení nebo prevence trombózy, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného TAFIa inhibitoru v kombinaci s antifibrinolytikem pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Předložený vynález rovněž poskytuje způsob léčení nebo prevence trombózy, který zahrnuje podávání farmaceuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I a jejích farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv v kombinaci profibrinolytikem pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

Ve výhodném provedení vynálezu antitrombotikem je profibrinolytikům.

V ještě výhodnějším provedení antitrombotikem je rekombinantní tkáňový faktor plasminogenu (tPA).

Předložený vynález poskytuje bit zahrnující:

a) kompozici zahrnující sloučeninu podle předloženého vynálezu a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič;

b) kompozici zahrnující antitrombotikum a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič;

c) kontejner ·· ···*

Složky kitu mohou být podávány odděleně, současně nebo následně.

Schopnost TAFIa inhibitoru použitého ve spojení s antitrombotikem rozkládat tromby byla zkoumána s použitím chirurgických postupů shodných s těmi, které byly popsány v J. Cardiovasc. Pharmacol., Feb; 23, 1994(2)194-202 a 203211.

Studie byla provedena se 4 skupinami (8. psů/skupina) :

(i) předběžné podávání aspirinu/prostředek infuze;

(ii) bez předběžné léčby/prostředek infuze;

(iii) bez předběžné.léčby/TAFIa inhibitor; a (iv) předběžné podávání aspirinu/TAFIa inhibitor.

Metoda

Aspirin byl předběžně podáván v dávce 325 mg denně po 3 dny. TAFIa inhibitor (sloučenina z Příkladu 7) byl podáván jako základní dávka následovaná kontinuální infuzí s cílem dosažení stabilního stavu koncentrace ve volné plasmě 4000 nM (220 krát IC₅₀ pro TAFIa, in vitro. Třicet minut po podání prostředku nebo infusi sloučeniny byl zaveden stejnosměrný elektrický proud do lumen levého ohybu (LCX) koronární artérie za účelem poškození endotelu a stimulace tvorby trombů. Tromby se nechaly dozrávat 1 hodinu před pokusem o rozložení trombu a vyvolání reperfuze cévy pomocí a ·· ·» * .

·····,· .· · · · · .

·· * · · · · · ··· Σ · · · · í ·· ·'· . · ···· • ♦ · '· .J. .«·· »· ·· sn * t-PA. Celkový počet 4 bolus injekcí t-PA (každá 0,45 mg/kg i.v.) byly aplikovány sekvenčně v 15 minutových intervalech. Průtok krve koronární artérií byl potom sledován.po další dvě hodiny pro stanovení průchodnosti cévy. Byla měřena doba okluze cévy a reperfuze a byla měřena kvalita a kvantita krevního průtoku byla analyzována po cévní reperfuzi. Dále byl stanoven účinek léčby na chirurgické krvácení, doba aktivované srážlivosti, kožní krvácení a agregace krevních destiček.

Výsledky

Data jsou popsána na Obr. 1. Z obr. 1, je možno vidět:

1) TPA samotný je účinnější než kombinace tPA a aspirinu.

2) Kombinace TAFIa inhibitoru a tPA je daleko účinnější než tPA samotný

3) Zlepšení koronárního průtoku způsobené TAFIa inhibitorem bylo udržováno po celou reperfuzní periodu (165 minut) s významně vyšším průtokem v porovnání s odpovídajícími kontrolami. Je třeba si povšimnout, že TAFIa inhibitor významně zvýšil podíl zvířat, u kterých průtok byl > 75 % základní linie na konci protokolu. Na konci experimentu tomu odpovídaly pouze 2/8 psů ve skupině předem neléčených/nosič a 1/8 psů ve skupině psů, kterým byl předem podáván aspirin/nosič. V protikladu, poškozené cévy byly průchodné u 8/8 psů ve skupině psů, kterým byl podán TAFIa inhibitor.

«· ···· ·· ····

δ5

4) Žádný vliv jakéhokoliv léčení nebyl zjištěn na dobu chirurgického krvácení, kožního krvácení, aktivovanou srážlivost nebo ADP indukované agregace krevních destiček před nebo po podání t-PA. Kombinace (iv) zde není uvažována.

Předložený vynález rovněž poskytuje kompozici zahrnující sloučeninu obecného vzorce I a její farmaceuticky přijatelný excipient, ředidlo nebo nosič.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány samotné, ale obecně budou podávány ve směsi s vhodným farmaceutickým excipientem, ředidlem nebo nosičem vybraným s ohledem na zamýšlený způsob podávání a standardní farmaceutickou praxi.

Například, sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány orálně, bukálně nebo sublinguálně ve formě tablet, kapslí, ovulí, tinktur, roztoků nebo suspenzí,které mohou obsahovat ochucovadla, barviva, pro aplikaci s okamžitým, zpožděným, prodlouženým, impulzním nebo řízeným uvolňováním.

Tablety mohou obsahovat excipienty, jako je mikrokrystalická celulóza, laktóza, citrát sodný, uhličitan vápenatý, dvojsytný fosforečnan vápenatý a glycin, bobtnadla jako je škrob (výhodně kukuřičný, bramborový nebo tapiokový škrob) , natrium glykolát škrob., natrium kroskarmelóza a některé silikátové komplexy a granulační pojivá, jako polyvinylpyrolidon, hydroxypropylmethylcelulóza (HPMC), hydroxypropylcelulóza (HPC), sacharóza, želatina a arabská guma. Mimo to mohou ·« ···· • · • · • · • · δ’6 • ···· ·· ···· » · * » · · · φφ ·· zahrnovat, lubrikační činidla jako je magnesium stearát, kyselina stearová, glyceryl behenát a talek.

Pevné kompozice stejného typu mohou být použity také jako náplň v želatinových tobolkách. Výhodné excipienty v tomto ohledu zahrnují laktózu, škrob, celulózu, mléčný cukr nebo vysokomolekulámí polyethylenglykoly. Pro vodné suspenze a/nebo tinktury, mohou být sloučeniny obecného vzorce I kombinovány s různými sladidly nebo ochucovadly, barvidly nebo barviva, s emulgačními a/nebo suspendačními činidly a s ředidly, jako je voda, ethanol, propylen glykol a glycerin, a jejich kombinace.

Sloučeniny obecného vzorce I, mohou být rovněž podávány jako kapalinou nebo suspenzí plněné měkké nebo tvrdé želatinové tobolky. Takové tobolky jsou obecně vyrobeny z želatiny, glycerinu, vody a sorbitolu. Tvrdé tobolky se odlišují od měkkých tobolek menším obsahem vody a tedy tomu odpovídajícím tvrdším obalem. Kromě toho vhodné excipienty pro použití v takových tobolkách zahrnují propylenglykol, ethanol, vody, glycerol a poživatelné oleje.

Sloučeniny vzorce I mohou být rovněž podávány parenterálně, například intravenozně, intraarteriálně, intraperitoneálně, intratekálně, intraventrikulárně, intrauretrálně, intrasternálně, intrakraniálně, intramuskulárně nebo subkutánně, nebo mohou být podávány infuzními technikami. Pro podávání, jako je parenterální podávání, jsou nejlépe používány ve formě sterilního vodného roztoku, který může obsahovat další látky, například, dostatek solí nebo glukózy pro vytvoření isotonického roztoku s krví. Vodné roztoky mohou být • · upraveny tlumiči (výhodně na pH od 3 do 9) , je-li to nezbytné. Příprava vhodných parenterálních přípravků za sterilních podmínek se provádí propracovanými standardními farmaceutickými technikami, které jsou odborníkovi v oboru dobře známé.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány intranasálě nebo inhalací a jsou obvykle dodávány ve formě inhalátoru se suchým práškem nebo aerosolový sprej složený z kontejneru pod tlakem, pumpy, spreje, atomizéru nebo nebulizéru, s a nebo bez použití vhodné pohonné látky, například dichlordifluormethan, trichlorfluoromethan, dichlortetrafluorethan a hydrofluoroalkan jako je 1,1,1,2-tetrafluorethan (HFA 134 A™) nebo 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropan (HFA 227 EA™) , oxid uhličitý nebo další vhodné plyny. V případě aerosolu pod tlakem, dávkovači jednotka může být předurčena poskytnutím ventilu pro podání odměřeného množství. Kontejner pod tlakem, pumpa, sprej, atomizér nebo nebulizér mohou obsahovat roztok nebo suspenzi aktivní sloučeniny, např. při použití směsi ethanolu a pohonné látky jako rozpouštědla, která může dále obsahovat lubrikant, např. sorbitantrioleát. Tobolky a kartridže (vyrobené, například z želatiny) pro použití v inhalátorech nebo insuflátorech nebo může být vytvořena, tak, že obsahují práškovou směs, která zahrnuje sloučeninu vzorce I vhodný práškový základ jako je laktóza nebo škrob.

Alternativně, sloučeniny vzorce I mohou být podávány ve formě a čípku nebo pesaru, nebo mohou být aplikovány topikálně ve formě gelu, hydrogelu, lotionu, roztoku, krémů, masti nebo zásypu. Sloučeniny vzorce I mohou být rovněž podávány dermálně nebo transdermálně, například

s použitím náplasti. Mohou být rovněž podávány pulmonální nebo rektální cestou.

Sloučeniny vzorce I mohou být rovněž podávány oční cestou. Pro oční použití, sloučeniny mohou být ve formě mikronizovaných suspenzí v isotoniku, upravené pH, sterilní solný roztok, nebo výhodně, jako roztok v isotoniku, pH upravené, sterilní solný roztok, případně v kombinaci s konzervačním prostředkem, jako je benzylalkoniumchlorid. Alternativně, mohou být ve formě masti jako vazelína.

Pro topikální aplikaci, sloučeniny vzorce I mohou být ve formě vhodně vhodné masti obsahující aktivní sloučeninu nebo rozpuštěné například ve směsi s jednou nebo více následujícími látkami: minerální olej, kapalná vazelína, bílá vazelína, propylen glykol, polyoxyethylen polyoxypropylen, emulgující vosk a voda. Alternativně sloučeniny vzorce I, mohou být ve formě vhodného lotionu nebo krému, suspendované nebo rozpuštěné například ve směsi s jednou nebo více následujícími látkami: minerální olej, sorbitan monostearát, polyethylenglykol, kapalný parafín, polysorbát 60, cetylester vosk, cetearyl alkohol, 2oktyLdodekanol, benzyl alkohol a voda.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být rovněž užívány v kombinaci s cyklodextrinem. Cyclodextriny jsou známé tím, že tvoří inkluzní a neinkluzní komplexy s molekulami léku. Přípravek ve formě léčivá látka-cyklodextrin může mít řízenou rozpustnost, rozpouštěcí rychlost, biodostupnost a/nebo stabilitu molekuly léčiva. Komplexy léčivá látkacyklodextrin jsou obecně použitelné pro většinu dávkovačích forem a způsobů podávání. Jako alternativa ke komplexaci s léčivou látkou může být cyklodextrin použit jako pomocné

aditivum, například, nosič, ředidlo nebo rozpouštědlo. Nejobvykleji jsou používány alfa-, beta- a gamacyklodextriny a vhodné příklady jsou popsány v PCT přihláškách WO-A-91/11172, WO-A-94/02518 a WO-A-98/55148.

Předložený vynález je dále ilustrován, ale nikoliv limitován následujícími příklady

Teploty tání byly stanoveny na přístroji Gallenkamp pro měření teploty tání s použitím skleněných kapilárních trubic a jsou nekorigované. Pokud není uvedeno jinak, všechny reakce byly provedeny pod dusíkovou atmosférou, s použitím komerčně dostupných bezvodých rozpouštědel.

„0,88 Amoniak odkazuje na komerčně dostupný vodný roztok amoniaku o specifické hmotnosti asi 0,88 . Chromatografie na nízké vrstvě byla prováděna na skleněných deskách předem potažených silikagelem Merck (60 F254) , a silikagelová kolonová chromatografie byla provedena s použitím 40-63 μπι silikagelu (Merck silikagel 60). Iontoměničová chromatografie byla prováděna s použitím specifikované iontoměničové pryskyřice, která byla předem promyta deionizovanou vodou. Protonová NMR spektra byla měřena na spektrometru Varian lnová 300, Varian lnová 400 nebo Varian Mercury 400 ve specifikovaném rozpouštědle. V NMR spektrech, pouze zaměnitelné protony, které se projevují zřetelně z píků rozpouštědla jsou zaznamenávány.

Nízkorozlišovací hmotová spektra byla zaznamenávána bud’ na přístroji Fisons Trio 1000, s použitím termosprejové pozitivní ionizace nebo na přístroji Finnigan Navigátor, s použitím elektrosprejové pozitivní nebo negativní ionizace. Vysokorozlišovací hmotová spektra byla • · · ·

zaznamenávána na přístroji Bruker Apex II FT-MS s použitím elektrosprejové pozitivní ionizace. Spalovací analýzy byly provedeny přístrojem Exeter Analytical UK. Ltd., (Jxbridge, Middlesex. Optická rotace byla stanovena při 25 °C, s použitím Perkin Elmer 341 polarimetru s použitím specifikovaných rozpouštědel a koncentrací. Příklady sloučenin označených jako (+) nebo (-) optických isomerů jsou založeny na znaménku optické rotace, stanovené v deionizované vodě.

Zkratky a definice atm Biotage

BOC br c

cat d

dd

TM

Arbocel™ Filtrační činidlo,od J. Rettenmaier & Sohne,

Germany

Amberlyst® 15 Iontoměničová pryskyřice, od Aldrich Chemical Company

Tlak v atmosférách (1 atm = 760 Torr) Chromatografie s použitím Flash 75 silikagelové náplně, od Biotage, UK terč.-Butyloxykarbonylová skoupina široký

Koncentrace použitá pro měření optické rotace v g na 100 ml (1 mg/ml je c 0,10)

Katalytický

Dublet

Dvojitý dublet

Degussa® 101 10% (hmotn.) palladium na aktivním uhlíku,

Degussa Company typ E101 od Aldrich Chemical Company

DOWEX® Iontoměničová pryskyřice od Aldrich Chemical

Company ee Enantiomeriní přebytek

HRMS	Vysokorozlišovací hmotová spektroskopie (elektrosprejový ionizační pozitivní sken)
Hyflo™	Hyflo super cel®, od Aldrich Chemical Company
liq	liquid
LRMS	Nízkorozlišovací Hmotová spektroskopie (elektrosprejový nebo termosprejový ionizační pozitivní sken)
LRMS(ES)	Nízkorozlišovací Hmotová spektroskopie (elektrosprejový ionizační negativní sken)
m	Multiplet
m/z	Pík v Hmotovém spektru
MCI™gel	Vysoce porézní polymer, CHP20P 75-150 jun, od Mitsubishi Chemical Corporation
<3	Quartet - · ·
Rf	Retenční faktor při TLC
s	Singlet
Sep-Pak®	Reverzní fáze C18 silikagel náplň, Waters Corporation
t	Triplet
TLC	Cromatografie na tenké vrstvě
δ	Chemický posun

Příklady provedení

Přiklad 1 (±)-5-Amino-2-(1 #-imidazol-4-ylmethyl)pentanová kyselina

Směs esteru z Přípravy 1 (150 mg, 0.25 mmol) v dioxanu (2 ml) a vodný roztok hydroxidu sodného (2 ml, 2N) byl míchán při teplotě místnosti po dobu 1,5 hodiny.Byla opatrně přidána vodná kyselina chlorovodíková (6 ml, 6N) a reakční směs byla zahřívána k refluxu po dobu 24 hodin. Chlazená směs byla čištěna iontovýměnnou kolonovou chromatograií (DOWEX.®. 50WX8-200), s použitím elučního gradientu deionizované voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3). Produkt byl triturován s methanolem za vzniku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 28 mg, 57% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 1,44-1,75 (m, 4H) , 2,48 (m, 1H) , 2,62 (dd, 1H), 2,90 (m, 3H), 6,81 (s, 1H) , 7,55 (s, 1H) . HRMS: m/z 198,1242 (MH⁺) , vypočtená 198,1237.

Příklad 2 ( + ) -5-Amino-2- [ (l-n-propyl-lřf-imidazol-4-yl-methyl]pentanová kyselina • · • ··«·

Směs esteru z Přípravy 2 (85 mg, 0,17 mmol) v dioxanu (1 ml) a vodného hydroxidu draselného (1 ml, 2N) byla míchána při teplotě místnosti po dobu 72 hodin. TLC analýza ukázala zbytek výchozí látky, proto byla reakční směs zahřívána na 70 °C. po dobu 3 hodin. Vodná kyselina chlorovodíková (2 ml, 6N) byla přidána k chlazenému roztoku a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. TLC analýza ukázala zbývající výchozí látku , proto byla reakční směs míchána při 70 °C po dobu dalších 2 hodin. Chlazená směs byla extrahována hexanem a zbývající vodný roztok byl přečištěn iontoměničovou kolonovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak(100:0 až 97:3). Produkt byl rozpuštěn v minimálním objemu deionizované vody a sušen chlazením, za vzniku titulní sloučeniny ve formě pryskyřice, 18 mg, 43% výtěžek.

^XH-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,92 (t, 3H) , 1,45-1,70 (m, 4H) , 1,79 (m, 2H), 2,43-2,60 (m, 2H), 2,76-2,95 (m, 3H), 3,90 (t, 2H), 6,86 (s, 1H), 7,45 (S,1H).

HRMS: m/z 240,1713 (MH⁺) , vypočtená 240, 1706.

Příklad 3 ( + )-6-Amino-2-[(l-n-propyl-lH-imidazol-4-yl) -methyl]hexanová kyselina

Směs chráněného aminu z Přípravy 3 (17 mg, 0,05 mmol) ve vodné kyselině chlorovodíkové (2 ml, 6N) byl míchán při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Roztok byl čištěn přímo iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200), elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3), za vzniku titulní sloučeniny, 7 mg, 55% výtěžek.

^-NMR (CD3OD, 300 MHz) δ: 0,88 (t, 3H), 1,42 (m, 3H) , 1,62 (m, 3H), 1,78 (m, 2H), 2,54 (m, 2H), 2,89 (m, 3H) , 3,90 (t, 2H), 6,85 (s, 1 Η), 7,46 (s, IH).

HRMS: m/z 254.1870 (MH⁺) , vypočtená 254,1863.

Příklad 4 (-) -(2R)-5-Amino-2-[(l-n-butyl-lff-imidazol-4yl)methyl]pentanová kyselina

O

OH

Směs esteru z Přípravy 6 (185 mg, 0.35 mmol) v dioxanu (6 ml) a vodného hydroxidu sodného (6 ml, 2N) byla míchána při 50 °C. po dobu 3 hodin. Vodná kyselina chlorovodíková (12 ml, 6N) byla opatrně přidána a reakční směs byla míchána při 70 °C po dobu dalších 18 hodin. Chlazená směs byla proprána etherem a vodný roztok byl přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) eluci gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak(100:0 až 95:5). Produkt byl převeden na azeotropickou směs s étherem a vysušen ve vakuu za vzniku titulní sloučeniny ve formě špinavě bílé sloučeniny, 45 mg, 51% výtěžek.

¹H~NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,97 (t, 3H) , 1,33 (m, 2H) ,. 1,48-1,79 (m, 6H) , 2,45-2,61 (m, 2H), 2,79-2,95 (m, 3H) , 3,95 (t, 2H), 6,88 (s, 1H), 7,45 (s,lH).

HRMS: m/z 254,1873 (MH⁺) , vypočtená 254,1863.

Příklad 5 (i)-(2S)-5-Amino-2-[(l-n-butyl-lH-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina

Titulní sloučenina byla získána v 35% výtěžku z esteru z Přípravy 7, následným postupem shodným s postupem popsaným v Příkladu 4.

·· ···· ^XH-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,97 (t, 3H), 1,33 (m, 2H), 1,48-1,79 (τη, 6H) , 2,45-2,61 (m, 2H) , 2,79-2,95 (m, 3H) , 3,95 (t, 2H), 6,88 (s, 1H), 7,45 (s, 1H).

HRMS :m/z 254,1874 (M.⁺), vypočtená 254,1863.

[oí]d=+3,7 (c 0.14, deionizovaná voda) [oí]_d=—5,2 (c 0,15, methanol)

Příklad 6 (-)-(2R)-5-Amino-2-[(l-n-propyl-lfí-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina

Roztok chráněného aminu z Přípravy 9 (1,01 g, 2,97 mmol) ve vodné kyselině chlorovodíkové (15 ml, 6N) byl míchán při teplotě místnosti pó dobu 18 hodin. Roztok byl přečištěn přímo iontoměničióvou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200), elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3), za vzniku titulní sloučeniny, 680 mg, 94% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 0,84 (t, 3H) , 1,48 (m, 1H) , 1,55-1,68 (m, 3H), 1,76 (m, 2H), 2,42-2,57 (m, 2H), 2,86 (m, 3H), 3,83 (t, 2H), 6,82 (s, 1H) , 7,42 (s, 1H).

HRMS: m/z 262,1533 (MNa.⁺), vypočtená 262,1526.

Anal.nalezeno C, 58,04; H, 8,93; N, 16, 92. C12H21N3O2. . 0, 5 H₂O požadováno C, 58,04; H, 8,93; N, 16,92 %.

·· ···· • · · ·· ···· [oí]_d=—2,53 (c 0,Ί5, deionizovaná voda)

Příklad 7 (i) -(2S)-5-Amino-2-[(l-n-propyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina

Hydroxid lithný monohydrát (1,1 g, 28 mmol) a voda (28 ml) byly přidány k roztoku laktamu z Přípravy 11 (3 g, 9,33 mmol) v tetrahydrofuranu (45 ml), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl neutralizován s použitím vodné kyseliny chlorovodíkové (6N) , Pak byla přidána další kyselina (15 ml, 6N), a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Směs byla čištěna přímo iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200), eluci gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak(100:0 až 97:3), za vzniku titulní sloučeniny ve formě pevné látky, 2,1 g, 94% výtěžek. Ta se dobře rozmělní s acetonem, supernatant se odstraní a zbylá pevná látka se suší ve vakuu, za vzniku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky.

^-NMR (D₂O, 400 MHz) δ: 0,60 (t, ’3H) , 1,30 (m, 2H) , 1,40 (m, 2H), 1,55 (m, 2H), 2,26-2,40 (m, 2H), 2,57 (dd,IH), 2,76 (m, 2H), 3,68 (t, 2H) , 6,66 (s,lH), 7,36 (s,lH).

HRMS: m/z 240, 1699 (MH⁺) , vypočtená 240, 1706.

Anal. nalezeno: C, 58,90; H, 8,90; N, 17,17. Ci₂H₂iN₃02.3H₂O požadováno C, 58.88; H, 8.92; N, 16.99%.

[oí]_d=+2,80 (c 0,14, deionizovaná voda) [oí]_d=-4,9 (c 0,16, methanol) [oí]_d==5.0 (c 0,10, ethanol)

Alternativní způsob pro Příklad 7

Směs chinidinové soli z Přípravy 110 (19 g, 28,6 mmol) ve vodě (95 ml) byla upravena na pH 10 s použitím 5N roztoku hydroxidu sodného a směs se extrahovala dichloromethanem (1 krát 40 ml, 2krát 20 ml). Zbývající vodná suspenze byla okyselena 5N kyselinou chlorovodíkovou na pH 0.5, a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl přečištěn Dowex® HCR-S iontoměničovou kolonovou chromatografií (40 g) s použitím elučního gradientu voda :0,88 amoniak (100:0 až 97:3). Výsledná pěna byla smísena s acetonem (20 ml), pevná látka byla filtrována a sušena ve vakuu při 40 °C. k zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 4.6 g, 68% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 0,87 (t, 3H) , 1,50 (m, 1H) , 1,58-1,72 (m, 3H), 1,78 (m, 2H), 2,44-2,59 (m, 2H), 2,90 (m, 3H) , 3,88 (t, 2H) , 6,84 (s, 1H) , 7,46 (s,lH).

HRMS: m/z 240 (MH⁺)

HRMS: m/z 240,1705 (MH⁺) , vypočtená 240,1706.

Anal. nalezeno: C, 49,10; H, 9,34; N, 14,31. C₁₂H₂1N₃O₂.H₂O požadováno C, 49,13; H, 9,28; N, 14,32 % fcfc fcfcfcfc ·· fcfcfcfc fc fc · • fcfc · • fc fcfc • fcfc

Příklad 8 (-) -(2R)-5-Amino-2-(lH-imidazol-4-ylmethyl)pentanová kyselina

Směs chráněného aminu z Přípravyl2 (85 mg, 0.14 mmol) ve vodném hydroxidu sodném(l ml, 2N) a dioxanu (1 ml) byl míchán při teplotě místnosti po dobu 3 dnů. TLC analýza ukázala zbývající výchozí látku, proto byl ještě dodatečně přidán vodný hydroxid sodný (1 ml, 2N), a reakční směs byla míchána při 50 °C. po dobu 18 hodin. Směs byla ochlazena a proprána s vodnou kyselinou chlorovodíkovou(5 ml, 6N) . Roztok byl potom míchán při 80 °C. po dobu 18 hodin, ochlazena na teplotu místnosti, byl přidán hexan a směs byla míchána hodinu. Vrstvy byly odděleny, a vodná fáze byla přečištěna přímo iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200), elucí gradientem roztoku deionizovaná voda:

0,88 amoniak(100:0 až 97:3), za vzniku titulní sloučeniny, 20 mg, 73% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 1,40-1,68 (m, 4H) , 2,45 (m, ÍH) , 2,62 (dd, 1H), 2,78 (m, 2H), 2,90 (m, ÍH), 6,78 (s, ÍH), 7,50 (s, ÍH).

HRMS: m/z 198,1243 (MH⁺) , vypočtená 198,1237.

[oí]d=-6.0 (c 0.1 mg/ml, deionizovaná voda) ·· ···· ·· ·· »··· » · · 4 ·· ··

Příklad 9 (ί)-(2S)-5-Amino-2-(lH-imidazol-4-ylmethyl)pentanová kyselina

Titulní sloučenina byla získána v 96% výtěžku z chráněného aminu z Přípravy 13, a následným postupem popsaným v Příkladu 8.

1H-NMR (CD3OD, 300 MHz)	δ: 1	., 45 (m, 1 Η) , 1,59 (m, 3H) ,
2, 47	(m, 1H), 2,62	(dd,	1H) ,	2,78 (m,	2H), 2,90	(dd, 1H),
6, 80	(s,lH), 7,50	(s,lH	) ·
HRMS:	m/z 220,1064	(MNa	• +),	vypočtená	220,1056.

Příklad 10 (±)-5-Amino-2-[(4-n-propyl-lff-imidazol-2-yl)methyl]pentanová kyselina

Směs chráněného aminu z Přípravy 14 (108 mg, 0.23 mmol) ve vodné kyselině chlorovodíkové (1,5 ml, 6N) byla míchána při refluxu po dobu 1,5 hodiny. Chlazený roztok byl přečištěn přímo iontoměničovou chromatografií(DOWEX® 50WX8-200), elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak(100:0 až 96:4), za vzniku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 30 mg, 55% výtěžek.

^XH-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 0,95 (t, 3H) , 1,45 (m, 1H) , 1,62 (m, 5H), 2,48 (t, 2H),*2,58 (m,1H), 2,76 (dd,1H), 2,86 (m,

2H), 2,98 (dd,1H), 6,60 (s, 1H).

HRMS: m/z 240, 1718 (MH⁺) , vypočtená 240, 1707.

Anal. nalezeno: C, 54,04; H, 8,97; N, 15,68. C12H21N3O21.5H₂O požadováno C, 54,12; H, 9,08; N, 15,78 %.

Příklad 11 (2S)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(lH-imidazol-4-yl)propanová kyselina

O

Trifluoroctová kyselina (17 ml) byla přidána po kapkách k k míchanému roztoku produktu z Přípravy 16 (2,58 g, 8,2 mmol) v methanol: voda (27 ml:14 ml). Reakční směs byla mírně exotermická s vývojem plynného oxidu uhličitého, směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 4 hodin a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku za vzniku bezbarvého oleje, který byl sušen za vakua přes noc. Výsledný olej byl vodným roztokem hydroxidu sodného (IN) upraven až na pH=8. Další množství vodného roztoku hydroxidu sodného (IN, 30 ml) bylo přidáno a roztok byl míchán při teplotě místnosti podobu 72 hodin. Roztok byl koncentrován za sníženého tlaku na 10 ml a přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3). Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku zisku žlutého oleje, který byl zředěn deionizovanou vodou (15 ml) a sušen mražením přes noc do vzniku pěny. Ta byla rozpuštěna v deionizované vodě:methanolu (95:5) a dále čištěna s použitím MCITM gelové (55 g) chromatografie, elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: methanol (95:5) k zisku titulní sloučeniny, 1,13 g, 69% výtěžek.

^XH-NMR (D₂O, 300 MHz) δ: 2,61-2,87 (m, 4H), 2,92 (m, 2H) , 3,25 (t, IH), 6,81 (s, IH), 7,59 (s, IH) .

LRMS: m/z 199,2 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 43, 36; H, 7,51; N, 25,12. CgHi₄N₄O₂ .1,3H₂O požadováno C, 43,35; H, 7,54; N, 25,28%.

[oí] _d=+1,.74 (c 0,12, deionizovaná voda)

Příklad 12 (2R) -2- [ (2-Aminoethyl) amino] -3- (l//-imidazol-4-yl) propanová kyselina

O

• · • ····

Titulní sloučenina byla připravena z produktu z Přípravy 7, postupem popsaným pro Příklad 11.

^-NMR (D₂0, 300 MHz) δ: 2, 57-2,82 (m, 4H) , 2,89 (m, 2H) , 3,22 (t, 1H), 6,77 (s, 1H), 7,55 (s, 1H) .

[oí]_d=-1.0 (c 0,10, deionizované voda)

Příklad 13 (í)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(lH-imidazol-2-yl)propanová kyselina

Trifluoroctové kyselina (0,5 ml) byla přidána po kapkách k míchanému roztoku produktu z Přípravy 18 (105 mg, 0,34 mmol) v methanolu:voda (2 ml: 1 ml) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku a ke zbytku byl přidán t vodný roztok hydroxidu sodného (IN) tak, aby roztok dosáhl pH=7. Další množství vodného roztoku hydroxidu sodného (IN, 5 ml) bylo přidáno a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 72 hodin. Reakční roztok byl potom podroben iontoměničové chromatografii (DOWEX® 50WX8-200) elucí deionizovanou vodou: 0,88 amoniak (97:3). Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku za vzniku bílého pevného zbytku.Ten byl rozpuštěn v deionizované vodě:methanolu (95:5) a byl dále čištěn s

použitím MCITM gelové chromatografie, elucí deionizovaná voda .-methanol (95:5) za zisku titulní sloučeniny, 4 mg, 6% výtěžek.

^XH-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 2,74-2,98 (m, 4H) , 3,13 (m, ÍH) ,

3,35 (m, 2H), 6,95 (s, 2H).

Příklad 14 (2S) -2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(lH-imidazol-2-yl)propanová kyselina

Produkt z Přípravy 19 (200 mg, 0.45 mmol) smísen s vodnou kyselinou chlorovodíkovou (6N, 4 ml) a zahříván k refluxu po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn iontoměničovou chromatografii (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem deionizovaná voda: 0,88 amoniak(100:0 až 97:3). Izolovaný materiál byl potom mrazením sušen za zisku titulní sloučeniny ve formě pěny, 62 mg, 69% výtěžek.

^XH-NMR (CD3OD, 300 MHz) δ: 2,71-2,98 (m, 4H) , 3,13 (m, ÍH), 3,34 (m, 2H), 6,92 (s, 2H) .

HRMS: m/z 199, 1184 (MH⁺) , vypočtená 199, 1190.

« ·

Příklad 15 (2S)-2-{[(lR nebo S)-1-(Aminomethyl)propyl]amino}-3-(Iff-imidazol-4-yl- )propanová kyselina

Trifluoroctová kyselina byla přidána po kapkách k míchanému roztoku produktu z Přípravy 21 (91 mg, 0,26 mmol) v dichloromethanu (1 ml) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin pod dusíkovou atmosférou. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl převeden na azeotrop s toluenem. Materiál, který vznikl byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydroxidu sodného (5 ml, 2N) a míchán při teplotě místnosti po dobu 72 hodin. Roztok byl potom přečištěn iontoměničovou chromatografii (DOWEX® 50WX8-200), elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak(100:0 Až 95:5), za zisku titulní sloučeniny, 37.3 mg, 62% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 0,81 (t, 3H) , 1,37 (m, IH) , 1,50 (m, 1H)„ 2,62 (m, IH) , 2,67 (m, IH) , 2,78 (m, IH) , 2,90 (dd, IH), 2,98 (dd, IH), 3,33 (dd, IH), 6,87 (s, IH), 7,57 (s, IH) .

HRMS : m/z 227,1511 (MH⁺) , vypočtená' 227,1503.

Příklad 16 (2S)-2-{[(lS nebo R)-1-(Aminomethyl)propyl]amino}-3-(1H-imidazol-4-yl-)propanová kyselina «· ····

• · · *

Trifluoroctová kyselina byla přidána po kapkách k míchanému roztoku produktu z Přípravy 22 (167 mg, 0,49 mmol) v dichloromethanu (1 ml) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin pod dusíkovou atmosférou. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku a ze zbytku byl vytvořen azeotrop s toluenem. Vzniklý materiál byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydroxidu sodného (5 ml, 2N) a míchán při teplotě místnosti po dobu. Roztok byl potom přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny, 38,7 mg, 35% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 0,73 (t, 3H) , 1,35 (m, 2H) , 2,43 (m, IH), 2,53 (t, IH), 2,70 (m, IH), 2,95 (dd, IH) , 3,10 (dd, IH), 3,40 (dd, IH), 6,90 (s, IH), 7,60 (s, IH).

HRMS: m/z 227, 1500 (MH⁺) , vypočtená 227,1502.

Příklad 17 (2S)-2-{[(1RS)-1-(Aminomethyl)-2-methylpropyl]amino}-3-(lff-imidazol-4-yl)propanová kyselina

Trifluoroctové kyselina(2 ml) byla přidána k míchanému roztoku z Přípravy 23 (100 mg, 0,8 mmol) v dichloromethanu(1 ml) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku a ze zbytku byl vytvořen azeotrop s toluenem. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydroxidu sodného (2M, 2 ml) a míchán při teplotě místnosti po dobu 72 hodin. Roztok byl potom přečištěn iontoměničovou chromatografii (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3). Izolovaný materiál (35 mg) byl dále přečištěn chromatografii na reverzní fázi se silikagelem (C18 Sep-Pak®), elucí deionizovanou vodou, a potom sušen mrazením za zisku titulní sloučeniny (směs diastereomerů), 20 mg, 30% výtěžek.

¹H-NMR (CD3OD, 300 MHz), směs diastereoisomerů, δ: 0,67-0,90 (4x d, H), 2,40-3,40 (m, 7H), 6,85-6,95 (2x s, 1H), 7,72-7,62 (2 x s, 1H).

HRMS: m/z 241,1661 (MH⁺) , vypočtená 241, 1659.

• · • · • · ·

TLC: methanol: ethylacetát: 0,88 amoniak:kyselina octová (60:12:4:4:8) Rf=0,52 a 0,44.

Příklad 18 (2S)-2-{[(1RS)-2-Amino-l-benzylethyl]amino}-3-(lff-imidažol-4-yl)propanová kyselina

o

Trifluoroctová kyselina (2 ml) byla přidána k míchanému roztoku z Přípravy 24 (100 mg, 0,25 mmol) v dichloromethanu (1 ml) a míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku a zbytek vytvořil azeotrop toluenem. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydroxidu sodného (2N, 2 ml) a míchán při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Roztok byl potom přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3) a izolovaný materiál byl sušen mrazením za zisku titulní sloučeniny, 41 mg, 58% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 2,48-2,72 (m, 2H) , 2,77-3,10 (m, 3H), 3,25-3,47 (2x m, 1H), 3,31 (d, 2H), 6,80 (2x s, 1H), 6,91 (d, 1H), 7,10-7,30 (m, 4H), 7,55-7,63 (2x s, 1H).

HRMS: m/z 289, 1662 (MH⁺) , vypočtená 289, 1659.

/ (2S)-3-(lfl-Imidazol-4-yl )-2-[(3RS)-pyrrolidinylamino)]propanová kyselina

Příklad 19

Vodný roztok hydroxidu sodného (1,7 ml, 5N) byl přidán po kapkách k míchanému roztoku produktu z Přípravy 20 (200 mg 0,8 mmol) v deionizované vodě (20 ml) a roztok byl míchán při teplotě místnosti přes noc. Roztok byl potom přečištěn iontoměničovou chromatografíi (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny ve formě růžové pěny, 90 mg, 50% výtěžek.

¹H-NMR (D2O, 300 MHz), směs diastereomerů, δ: 1,67 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 2,70 (m, 2H), 2,90 (m, 1H) , 3, 05-3,38 (m,

5H) , 6,69 (s, 1Ή) , 7,59 (s, 1H) .

LRMS: m/z 225.3 (MH⁺) [a]_D=+l,57 (c 0,076, deionizovaná voda)

Příklad 20 (2S)-2-{[(IR,2S)-2-Amino-l-methylpropyl]amino}-3-(Iff-imidazol-4-yl)propanová kyselina • · · ·

Vodný roztok hydroxidu sodného (2 ml, 2N) byl přidán k míchanému roztoku z Přípravy 26 (260 mg, 7,64 mmol) v dioxanu (2 ml) a směs byla míchána po dobu 2,5 hodin při teplotě místnosti. Vodná kyselina chlorovodíková(50 % obj. 4ml) byla přidána ke směsi, která potom byla míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Roztok byl potom přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3) za zisku pevné bílé látky, která byla rozpuštěna v deionizované vodě a dále čištěna chromatografií na reverzní fázi se silikagelem (C18 SepPak®), elucí deionizovanou vodou, za zisku titulní sloučeniny, 15 mg, 9% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,93 (d, 3H) , 1,17 (d, 3H) , 2,62-2,80 (m, 2H), 3,08 (m, 1H), 3,20 (m, 1H) , 3,37 (m,

1H) , 6, 92 (s, 1H) , 7, 61 (s, 1H) ..

HRMS: m/z 227,1506 (MH⁺) , vypočtená 227,1502.

Příklad 21 (2S)-2-[(2-Aminoethyl)(methyl)amino]-3-(lH-lmidazol-4-yl)propanová kyselina • ·

Trifluoroctové kyselina (10 ml) byla přidána k míchanému roztoku z Přípravy 27 (900 mg, 2,8 mmol) v methanolu:deionizované vodě (10 ml: 8 ml) a směs byla míchána po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku za zisku světle hnědého oleje který byl rozpuštěn v přebytku vodného roztoku hydroxidu sodného (IN) a míchán po dobu 17 hodin. Roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a přečištěn iontoměničovou chromatografii (DOWEX® 50WX8-200) elucí ^gradientem roztoku deionizované voda: 0,88 amoniak (100:0 až 96:4) za zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pěny 381 mg, 60% výtěžek.

¹H-NMR (D_ZO, 300 MHz) δ: 2,25 (s, 3H) , 2,50 (m, 1Ή) , 2,603,37 (m, 6H), 6,78 (s, 1H), 7,58 (s, 1H).

Příklad 22 (2S)-3-(lfl-Imidazol-4-yl)-2-(1-piperazinyl)propanová kyselina

HN

O ·· ····

Vodný roztok hydroxidu sodného (5N, 170 μΐ) byl přidán k míchanému roztoku z Přípravy 28 (50 mg, 0,012 mmol) ve vodě (několik kapek) a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl podroben iontoměničové chromatografií (DOWEX® 50WX8-200), elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 až 95:5), a rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl suspendován v diethyletheru a potom znovu odpařen za zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 17 mg, 73% výtěžek.

¹H-NMR (D₂O, 300 MHz) δ: 2,62-2,98 (m, 6H) , 3, 05-3, 30 (m,

5H), 6,80 (s, IH), 7,60 (s, IH).

HRMS : m/z 225,1338 (MH⁺) , vypočtená 225, 1346.

[a]_D=+14,84 (c 0,062, deionizovaná voda)

TLC: methanol:ethylacetát 0,88 amoniak:kyselina octová:voda (60:12:4:4:8) Rf=0,20.

Příklad 23 (2S) -2- (1, 4-Diazepan-l-yl) -3- (17/-imidazol-4-yl) propanová kyselina

NH

HN

Homopiperazin (1,86 g, 18,6 mmol) byl přidán k míchanému roztoku z Přípravy 61 (350 mg, 1,86 mmol) v acetonitrilu (40 ml) a roztok byl míchán po dobu 2 hodin při teplotě místnosti, potom byl zahříván k refluxu po dobu 18 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v dichloromethanu a proprán vodou (3 x 20 ml). Organická fáze byla koncentrována za sníženého tlaku a výsledný olej byl rozpuštěn v deionizované vodě a přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí gradientem roztoku deionizovaná voda: 0,88 amoniak (100:0 ,až 95:5) za zisku titulní sloučeniny ve formě béžové pevné látky, 300 mg, 68% výtěžek.

¹H-NMR (D₂O, 300 MHz) δ: 1,83 (m, 2H) , 2,70-3,23 (m, 10H) , 3,40 (t, 1H), 6,80 (s, 1H), 7,60 (s, 1H).

LRMS: m/z 239,2 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 50,79; H, 7,85; N, 21,31.

C11H18N4O2.1,25H₂O požadováno C, 50, 66; H, 7,92; N, 21,48%. [a]_D=+2,47 (c 0,24, deionizovaná voda)

Příklad 24 (25) -2- [(2-Aminoethyl)amino]-3-(l-ethyl-lH-imidazol-4-yl)propanová kyselina

O ·'· ···· ti ·♦ · • · ·

Koncentrovaná kyselina chlorovodíková (5 ml) byla přidána k míchanému roztoku z Přípravy 30 (118 mg, 0,32 mmol) ve vodě (5 ml) a směs byla zahřívána k refluxu po dobu 17 hodin. Směs byla ponechána k ochlazení na teplotu místnosti a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn iontoměničovou chromatografií (DOWEX® 50WX8-200) elucí deionizovanou vodou: 0,88 amoniaku (97:3). Izolovaný materiál byl sušen mrazením za zisku titulní sloučeniny, 34 mg, 47% výtěžek.

^XH-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 1,40 (t, 3H) , 2,75-3, 02 (m, 6H), 3,33 (m, 1H), 3,98 (q, 2H), 6,95 (s, 1H), 7,53 (s, 1H).

HRMS : m/z 227,1492 (MH⁺) , vypočtená 227,1503.

	• fc	• fcfcfc	• fcfc	• fc		<· fcfcfc
•	'fc	•	• · · fc	•	•	«
•	•	fc	• · l·	•	•	•
fc	• • fc	fc · • ·	• · • fcfc ’· · · ·	• • fc	•	fc · • ·

l/Ί σ\

φφ φφφ· • · · φ · ·	φ '·· φ φ φ φ φ φ	Φ· φ φ φ φ	φφφφ φ φ
φ φ φ ·	φ φ	φ φ	φ φ
φφ ··	.φφφ ·»··	;φ·	φφ

99 ·'· 9 99 9

9 9 9 9 9

9 9 9 9

OO

• · · · «

	•			3	Φ
				>	P
	s			O	C
	X>			£	Φ
	T		Ή	N	•H Ό
	-φ >		O 3	ε o	<0 P
	o fe		1—1 0)	4-> o	σ>
	Ή			Cb	£
	Ό				-H
	O		^*1	fO	O
	>		c		>U
	O P		o I—i	K	0 P
	O P	s	o λ:	o LQ	Φ
	x:	VD	•5»		CO
	υ	—	H	LT)
				o	Φ
	5ί	-Φ	X5		i—1
	C	>	P	o	Φ
	•H	o	fO
	i—1	fe	O	o	K
	Φ	Ή	P	lO
	ω	Ό	Φ		m
		O	Ol	>N	—
	fe	>	>1	fO
		O	X		Φ
	-Φ	o		O	o	o
	c	o	1—1		£	lO
	(0	1—1	P	rH	. -to
	>	X	CO	. — c	m
	o	υ	P	O P N	o
	P		Φ	·. oi 0
	P	5l	Ol	O	Ol	o
	C	c	>.	O '	Ξ)
	ω	P	X	i-i Ό >	o
	o	P		— to	LO
	a	Φ	£	p 0
	o	CO	X	p fe o	>N
	fe	5-1		•H *r	4 -Φ	Π3
		fe	m	ρ ρ to
	o			p x O,	O
	P	-Φ	£	Ή	O
	co	c	Ή	o ř	> Ol	rH
	Ή	to	P	o
	£	>	Ή	P <	3 a	o
		o	>N	Φ fe -t-1
	Φ	o	O	υ co	o
	P	P	O	to TI	o
	Ή	c	Ol	.. — (0	r“t
	>N	Φ		m	•m
	3	u	co	O P
	O	c		-P P	»—1
	Oj	0	o	Ρ Ρ O	o
		fe	>φ	φ φ ’Φ	c
	-—.		P	CO P -O	Φ
	s	o	>co	>1 CP ‘to	x:
	šT	P	P	fe O 'fj	p
	—	co	>o	_p >O	φ
		P	Φ	-φφΦ	£
	-Φ	£	>P	> £ >O
	>		o.	O o Λ	Φ
	O	to		P P	c
	ρ	P	Φ	o x	r φ	p
	Ή	P	i—1	O O -)	i—1
	co	>N	-co	P	-φ	Φ
		0	Ό	o -Φ Ό	CO
	Φ	o		O >	>1
	C	Ol	1—i	P O	fe
	Ή	.—.	>1	P >O >i
	i—I	2	X3	•H *r	4 X»	-Φ
	ω	OJ		5-1 C		>
	CO		P	ρ >φ P	0
	5ί		fe	.. F	: fe	p
	fe	'í0	o	Φ O 0	O
		>	Ό	Ό Ρ Ό	o
	'fO	0	O	o c	: o	P
	c	P	P	> o n	o
	Φ	Ή	Ol	. ·<-	i Ol	σ
	>	co		s		r—4
	O		'>1	φ Φ '>!
	P	(0	o	P c	: c	•f“Í
	P	0	fO	C Φ t°	U
	c	Ή	>	Φ p >	-P
• ·	Φ	i—1	o	ρ n O
	o	Φ	1-1	Ό o	1	fÚ
fe	c	(0	o	Φ TJ O	Ό
e	o	>1	N	p r	) N	o
-fO	fe	fe	HI	Co Oi M	>
N
o	•				•
Oj	1—1	CM			sr

102

Příklad 41 (25)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-[1-(karboxymethyl)-1H-imidazol-4-yl]propanová kyselina

Produkt'z Přípravy 47 (145 mg, 0.296 mmol) byl rozpuštěn v koncentrované kyselině sírové (4 ml) a roztok byl zahříván k refluxu po dobu 18 hodin. Chlazené směs byla přečištěna přímo iontoměničovou chromatografii (DOWEX© 50WX8-200), elucí 0,88 amoniak: voda (3:97). Výsledný olej byl rozmíchán s-methanolem, za vzniku pevné látky, která byla mrazením vysušena za zisku titulní slučeniny ve formě bílé pěny, 61 mg, 77% výtěžek.

^TH-NMR (DO, 400 MHz) δ: 2,80 (m, 2H) , 2,88 (m, 2H) , 2,98 (m, 2H) , 3,40 (m, 1H) , 4,52 (s, 2H) , 6,92 (s, 1H) , 7,81 (s, 1H) .

HRMS: m/z 257,1255 (MH^T) , vypočtená 257, 1245.

Anal.nalezeno: C, 42, 66; H, 6,63; N, 20,29. C10H16N4O4.1,3H₂O požadováno C, 42,95; H, 6,70; N, 20,03%.

Příklad 42 (25)-3-[(l-n-propyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]-2-piperidinon

103

Sloučenina z Přípravy 11 (500 mg, 1,6 mmol) v dichloromethanu (15 ml) byla proprána v trifluoroctové kyselině (3 ml) a výsledný roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Reakční směs byla potom koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl neutralizován nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vzniklá směs byla pak koncentrována do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím elučního gradientu dichloromethan:methanol :0,88

amoniak (99,8:	:0:0,2	až	94,
sloučeniny ve	formě	oleje
1H-NMR (CDCI3,	400 MHz)	δ:
1,90 (m, IH),	2, 60	(m,	IH)
3, 21 (m, - 2H) ,	3,77	(t,	2H)
7, 31 (s, IH) .
LRMS: m/z 222	(MH+)

Anal. nalezeno: C, 61,44; H, 8,85; N, 17,86.

C12H19N30.0,75H₂O požadováno C, 61,38; H, 8,80; N, 17,89 %. [a] d=-51.6 (c 0, 095, methanol)

Příklad 43 (2S)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(l-methyl-lff-imidazol-4-yl)propanová kyselina h₃c-

o

104

2M roztok hydroxidu sodného(0,61 ml, 1,22 mmol) byl přidán k roztoku chráněné amino kyseliny z Přípravy 90 (200 mg, 0,61 mmol) v dioxanu (2 ml), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Koncentrovaná kyselina chlorovodíková (2 ml) byla opatrně přidávána, a roztok byl míchán po dobu dalších 24 hodin, potom byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve vodě, a přečištěn kolonovou chromatografií na Amberlyst® 15 ionontoměničové pryskyřici, elucí 5% vodným roztokem amoniaku. Produkt byl získán po vysušení mrazením jako pryskyřice 80 mg, 55% výtěžek ¹H-NMR (D₂O , 400 MHz) δ: 2,61-2,79 (m, 4H) , 2,90 (m, 2H) ,

3,22 (m, 1H), 3,54 (s, 3H), 6,79 (s, 1H) , 7,42 (s, 1H).
LRMS (ES') : m/z 211	(M-H)'
[a]D=-5.83 (c 0,12,	methanol)
Anal. nalezeno: C,	45, 63; H, 7,68; N, 23,15. C9Hi6N4O2 .1,5

H₂O požadováno C, 45,35; H, 7,99; N, 23,50%.

Příklady 44 až 47

byly připraveny z příslušných chráněných aminokyselin (Přípravy 91-94),stejným postupem, jak je popsán v Příkladu

43.

• ·

106

<ο

Ό

O >

fO

4->

-H >N

O a

fO

5>i

X) o i—I Ό Ή c

Ή >o

Ή C >O O ι—1 <u o

(O

Produkt byl přečištěn DOWEX ® 50WX8-200 iontoměničová pryskyřice, s použitím vody:0,88 amoniak (95:5) jako elučního činidla.

rd CN • · · • ···· • ·

107

Příklad 48 (2S)-2-[(2-Aminoethyl)amino]-3-(l-benzyl-lfl-imidazol-4-yl)propanová kyselina

O

Roztok sloučeniny z_Přípravy_. 95 (288 mg, 0.57 mmol) v 4M kyselině sírové (10 ml), byl zahříván na 115 °C po dobu 36 hodin. Chlazený roztok byl neutralizován s použitím 1M roztoku hydroxidu sodného, potom byl podroben Amberlyst® 15 iontoměničové chromatografií, s 5% vodným amoniakem jako elučním činidlem. Produkt byl získán jako pryskyřice po vysušení vymrazením, 70 mg, 39% výtěžek.

¹H-NMR (D₂O, 400 MHz) δ: 2,40 (m, IH), 2,48 (m, IH), 2,58 (m, 4H), 3,14 (t, IH), 5,00 (s, 2H), 6,77 (s, IH), 7,14 (d, 2H), 7,22 (m, 3H), 7,50 (s, IH) .

LRMS: m/z 289 (MH⁺) [a]_D=+l,00 (c 0,14, methanol)

Anal. Nalezeno: C, 56,96; H, 7,17; N, 17,63.

Ci₅H₂0N₄O₂.1,5H₂O požadováno C, 57,13; H, 7,35; N, 17,77 %.

Příklad 49 (í)-5-Amino-2-[(l-isopentyl-lH-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina

108

Roztok hydroxidu sodného (192 mg, 4.80 mmol) ve vodě (6 ml) byl přidán k roztoku sloučeniny z Přípravy 105 (420 mg,

1,20 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml), a reakční směs byla silně míchána po dobu 72 hodin. Opatrně byla přidána koncentrovaná kyselina chlorovodíková (6 ml), a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin, potom byla koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve vodě (50 ml), a roztok byl přečištěn kolonovou chromatografii na Amberlyst® 15 iontoměničová pryskyřici, s použitím elučního gradientu voda:0,88 amoniak (100:0 až 98:2) za zisku titulní sloučeniny, 120 mg, 35% výtěžek.

^XH-NMR (D₂O, 400 MHz) δ: 0,72 (d, 6H), 1,23-1,40 (m, 3H),

1,46 (m, 4H), 2,30-2,43 (m, 2H) , 2,59 (dd, ÍH) , 2,79 (m,

2H), 3,80 (t, 2H), 6,76 (s, 1H), 7,42 (s, ÍH) .

LRMS (ES'): m/z 266 (M-H)'

Anal. nalezeno: C, 58,60; H, 9,62; N, 14,56. Ci₄H₂5N₃O₂.1, 0 H₂O požadováno C, 58,92;.H, 9,54; N, 14,72 %.

Příklad 50 (±)—2—[(1-Isopentyl-1H-imidazol-4-yl)methyl]-5-(methylamino)pentanová kyselina • · · ·

Roztok sloučeniny z Přípravy 106 (170 mg, 0,65 mmol) v dioxanu (1 ml) a koncentrovaná kyselina chlorovodíková (2.ml) byl zahříván k refluxu po dobu 18 hodin. Chlazená směs byla koncentrována za sníženého tlaku při teplotě místnosti, a zbytek byl rozpuštěn ve vodě (50 ml). Roztok byl přečištěn kolonovou chromatografií na Amberlyst® 15 iontoměničová pryskyřice s použitím elučního gradientu voda:0,88 amoniak (100:0 až 98:2). Mrazením byl vysušen za zisku titulní sloučeniny jako hnědé pevné látky, 120 mg, 66% výtěžek.

^-NMR (D2O, 400 MHz) δ:	0,75 (d,	6H) ,	1,25-1,42 (m,	3H) ,
1,50 (m, 4H), 2,34-2,44	(m, 2H),	2,55	(s, 3H), 2,62	(dd,
1H), 2,86 (m, 2H), 3,82	(t, 2H),	6,7 8	(s, 1H), 7,43	(s,

1H) .

LRMS:. m/z 282.2 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 58,56; H, 9,73; N, 13,61. C15H27N3O2.1,45 H2O požadováno C, 58,59; H, 9,80; N, 13,66 %.

Příklad 51 (±) -5-Amino-2-[ (l-fenyl-l-H-imidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina

Roztok hydroxidu lithného (2 ml, 1M, 2 mmol) byl přidán k roztoku sloučeniny z Přípravy 108 (240 mg, 0.68 mmol) v tetrahydrofuranu (2 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 5 hodin. Koncentrovaná kyselina chlorovodíková (2 ml) byla opatrně přidána, a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl odpařen za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn ve vodě, a roztok byl přečištěn kolonovou chromatografií na Amberlyst® 15 iontoměničové pryskyřici s použitím elučního gradientu voda:0,88 amoniak (100:0 až 95:5) za zisku titulní sloučeniny jako bílé pěny, 88 mg, 45% výtěžek.

^-NMR (D₂O, 400 MHz) δ: 1,43 (m, 2H) , 1,54 (m, 2H) , 2,422,59 (m, 2H), 2,74 (dd, 1H), 2,83 (m, 2H), 7,18 (s, 1H),

7,32 (m, 1H), 7,40 (m, 4H), 7,88 (s, 1H).

LRMS: m/z 296 (MNa⁺)

Anal. nalezeno: C, 62,21; H, 7,01; N, 14,55. C15H19N3O2.1, 0 H₂O požadováno C, 61,84; ₍H, 7,27; N, 14,42 %.

·♦·· (±)-Ethyl-2-[(1-{[2-(trimethylšilyl)ethoxy]methyl

-imidazol-4-yl)methyl]-5-(tritylamino)pentanoát

111

Příprava 1

Směs alkenů z Přípravy 49 (460 mg, 0,77 mmol) a 10% palladium na dřevěném uhlí (100 mg) v ethanolu (25 ml) byla hydrogenována při 1,5 atm a teplotě místnosti po dobu 72 hodin. Reakční směs byla filtrována přes Arbocel™, který byl promyt ethanolem (200 ml), a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbylý olej byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu se směsí ethylacetát:pentan (50:50) jako elučním činidlem, za vzniku titulní sloučeniny, 150 mg, 33% výtěžek. . ^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: -0,02 (s, 9H) , 0,95 (t, 2H) ,

1,18 (t, 3H), 1,46 (m, 2H), 1,45-1,70 (m, 2H), 2,09 (m,

2H), 2,64-2,79 (m, 2H), 2,90 (dd, 1H), 3,42 (t, 2H), 4,09 (q, 2H), 5,18 (s, 2H) , 6,75 (s, 1H), 7,17 (m, 3H) , 7,22 (m, 7H), 7,42 (d, 6H).

·· ····

Příprava 2 (±) -Ethyl 2- [ (l-n-propyl-lff-imiciazol-4-yl)methyl] -5-tritylamino)pentanoát

Borohydrid sodný (7,2 g, 190 mmol) byl přidán po dávkách během 2 hodin k roztoku alkanů z Přípravy 50 (3,2 g, 6,3 mmol) a chloridu měďného (928 mg, 9,5 mmol) v methanolu (120 ml), přičemž reakční teplota byla udržována asi na 45 °C a reakční směs byla míchána při této teplotě po dobu 2 hodin, (dvě přídavné dávky chloridu měďného (310 mg, 3,1 mmol) byly přidány asi po 40 a 80 minutách. Reakční směs byla filtrována přes Arbocel™ a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen acetátem a vodou, vrstvy byly odděleny, a vodná fáze byla extrahována ethylacetátem (2 krát.). Spojeně organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) a potom byly koncentrovány za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím elučního gradientu ethylacetát:pentan (50:50 až 100:0) za vzniku titulní sloučeniny, 2 g, 62% výtěžek.

** í? ' ,

300 MHz) δ: 0,88 (t, 3H), 1,19 (t, 3H), 1,55 (m, 2H), 2,08 (m, 2H), 2,62-2,80 (m, 2H),

3,79 (t, 2H), 4,07 (q, 2H), 6,60 (s, 1H),

7,24 (m, 7H), 7,43 (d, 6H).

(MH⁺)

113 ’Ή-ΝΜΡ (CDCI3, (m, 4H), 1,76 2,86 (dd, 1H),

7,18 (m, 3H) , LRMS: m/z 510

Příprava 3 (í)-6-[(terč.-Butoxykarbonyl)amino]-2-[(1-n-propyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]hexanová kyselina

tetrahydrofuranu (2 ml) a ethanolu (50 μΐ) byl přidán k chlazenému (-78 °C.) roztoku sodíku (20 mg, 0,87 mmol) v 0,88 amoniaku (3 ml) a roztok byl míchán po dobu 15 minut, až do zmizení modrého zbarvení. Reakční směs se nechala ohřát na teplotu místnosti, amoniak byl odpařen a potom byl zbývající roztok koncentrován za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn iontoměničovou chromatografii na DOWEX® (50WX8-200) pryskyřici, elucí gradientem roztoku voda: 0,88 amoniak (100:0 až 97:3), za vzniku titulní sloučeniny, 17 mg, 69% výtěžek.

¹H-NMR (CD3OD, 300 MHz) δ: 0,90 (t, 3H) , 1,42 (m, 13H) ,

1,61 (m, 2H), 1,80 (m, 2H), 2,57-2,68 (m, 2H), 2,80-2,95 (m, 2H), 3,00 (m, 1H), 3,95 (t, 2H), 6,98 (s, 1H), 7,76 (s, 1H) .

LRMS: m/z 354.3 (MH⁺)

Příprava 4

Sodium 6-[benzyl(terč.-butoxykarbonyl)amino]-2- [(1-n-propyl-lH-imidazol-4-yl)methyl]hexanoát

Vodný roztok hydroxidu sodného (2 ml, 2N) byl přidán k roztoku esteru z Přípravy 5 (50 mg, 0,106 mmol) v dioxanu (2 ml), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu elucí pomocí směsi dichloromethan:methanol: 0,88 amoniak (90:10:1), za vzniku titulní sloučeniny, 32 mg,

65% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,88 (t, 3Ή) , 1,15-1,57 (m,

15H), 1,80 (m, 2H), 2,60 (m, 2H), 2,82 (m, 1H) , 3,17 (m,

2H), 3,94	(t,	2H), 4,42	(s, 2H), 6,96 (s, 1H), 7,22 (m,
3H), 7,32	(m,	2H), 7,78	(br s, 1H).
LRMS: m/z	444	.7 (MH+)

•ti titi·· • ti ···?

• ti · » titi

115

Příprava 5 (±)-Ethyl 6-[benzyl(terč.-butoxykarbonyl)amino]-2-[(1-n-propyl-ΙΗ-imidazol-4-yl)methyl]hexanoát

Směs alkenů z Přípravy 51 (620 mg, 1,32 mmol) a 10% palladia na dřevěném uhlí (70 mg) v methanolu (50 ml) byla hydrogenována při 1 atm a teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Reakční směs byla zfiltrována přes Arbocel™, a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku, za vzniku titulní sloučeniny v kvantitativním výtěžku ve formě čiré pryskyřice, která byla použita bez dalšího čištění.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,90 (t, 3H) , 1,18 (t, 3H) , 1,24 (m, 2H), 1,38-1,66 (m, 13H), 1,78 (m, 2H), 2,61-2,80 (m, 2H), 2,86 (dd, 1H), 3,04-3,22 (m, 2H), 3,80 (t, 2H), 4,06 (q, 2H), 4,40 (brs, 2H), 6,61 (s, 1H), 7,18-7,37 (m, 6H). LRMS: m/z 472.4 (MH⁺)

9

116

Příprava 6

Ethyl-(2R)-2-[(l-n-butyl-lff-imidazol-4-yl)methyl] -5-tritylamino)pentanoát

a Příprava 7

Ethyl-(2S)-2-[(l-n-butyl-l#-imidazol-4-yl)methyl]-5-(tritylamino)pentanoát

····

117

Racemická sloučenina z Přípravy 8 byla rozštěpena HPLC s použitím Chiralcel® OD 250 kolona (20 mm) a se směsí hexan:ethanol:diethylamin (85:15:0.45) jako elučním činidlem, rychlostí 10 ml/minutu, za zisku titulní sloučeniny z Přípravy 6, 98,3% ee, retenční čas: 13,36 minut.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,92 (t, 3H) , 1,20 (t, 3H), 1,28 (m, 2H), 1,45-1,78 (m, 6H), 2,10 (m, 2H), 2,62-2,79 (m,

2Ή), 2,88 (dd, 1H), 3,81 (t, 2H), 4,08 (q, 2H) , 6,60 (s,

1H) , 7,18 (m, 3H), 7,24 (m, 7H), 7,43 (d, 6H). a titulní sloučeniny z Přípravy 7, 94,2% ee, retenční čas: 14,91 minut.

¹H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0,92 (t, 3H), 1,20 (t, 3H), 1,28 (m, 2H), 1,45-1,78 (m, 6H), 2,10 (m, 2H), 2,62-2,79 (m,

2H), 2,88 (dd, 1H) , 3,81 (t, 2H) , 4,08 (q, 2H), 6,60 (s,

1H) , 7,18 (m, 3H), 7,24 (m, 7H), 7,43 (d, 6H) .

Příprava 8 (±)-Ethyl 2-[(l-n-butyl-lff-imidazol-4-yl)methyl] -5-(tritylamino)pentanoát

O.

• · · ·

Borohydrid sodný (871 mg, 23 mmol) byl přidán po dávkách během hodiny k roztoku alkenu z Přípravy 52 (400 mg, 0,76 mmol) a chloridu měďného (112 mg, 1,15 mmol) v methanolu (15 ml). TLC analýza ukázala zbývající výchozí materiál, proto byl přidán chlorid měďný (75 mg, 0.76 mmol) a borohydrid sodný (290 mg, 7,7 mmol), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu dalších 2 hodin. Reakční směs byla zfiltrována přes Arbocel™, filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek byl rozdělen ethylacetátem a solankou. Vrstvy byly odděleny, vodná fáze byla extrahována ethylacetátem (2 krát) a spojené organické extrakty byly sušeny (Na₂SO₄) a potom koncentrovány za sníženého tlaku, za vzniku titulní sloučeniny, 185 mg,

47% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 0,92 (t, 3H) , 1,19 (t, 3H), 1,27 (m, 2H), 1,48-1,77 (m, 6H), 2,10 (m, 2H), 2,62-2,79 (m,

2H), 2,88 (dd, IH), 3,82 (t, 2H), 4,08 (q, 2H), 6,60 (s,

IH) , 7,17 (m, 3H), 7,24 (m, 7H), 7,43 (d, 6H) .

Příprava 9

Lithium (2R)-5-[(terč.-butoxykarbonyl)amino] -2-[(1-n-přopyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]pentanoát

Voda (2 ml) a hydroxid lithný monohydrát (81 mg, 1,93 mmol) byly přidány k roztoku laktamu z Přípravy 10 (207 mg, 0,64 mmol) v tetrahydrofuranu (3,5 ml) a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 23 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi dichloromethan:methanol: 0,88 amoniak (90:10:0 až 90:10:1) jako elučního činidla, za vzniku titulní sloučeniny,

200 mg, 92% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,90 (t, 3H) , 1,42 (s, 9H) , 1,45-1,62 (m, 4H), 1,80 (m, 2H), 2,57-2,70 (m, 2H) , 2,85 (m, 1 Η), 3,02 (m, 2H), 3,95 (t, 2H), 6,97 (s, 1H), 7,76 (s, 1H) .

LRMS (ES^-): m/z 338 (M-H) • · · ·

120

Příprava 10 (-)-terč.-Butyl-(3E)-2-oxo-3-[(l-n-propyl-lH-imidazol-4-yl)methyl]-1-piperidinkarboxylát (10)

a Příprava 11 (±)-terč.-Butyl (35) -2-oxo-3-[(l-n-propyl-lfí-imidazol-4-yl)methyl]-1-piperidinekarboxylát

Směs alkenů z Přípravy 53 (6,6 g, 20,6 mmol) a palladiová čerň (700 mg) v ethanolu (120 ml) byla hydrogenována při 4 atm a 60 °C. po dobu 18 hodin. Chlazená směs byla zfiltrována přes Arbocel.TM., který byl promyt ethylacetátem a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Surový produkt byl. přečištěn kolonovou

121 chromatografíi, elucí směsí dichloromethan: methanol (97:3), za zisku racemátu titulní sloučeniny, jako žlutého oleje, 4,3 g, 65% výtěžek.

Tato racemická sloučenina byla rozdělena HPLC s použitím Chiralcel® OG 250 kolony (20 mm), a směsí - hexan:isopropanol (70:30) jako elučního činidla při rychlosti 10 ml/minutu, za vzniku titulní sloučeniny z Přípravy 10, 1,56 g,

99,5 % ee.

Retenční čas: 10,10 minut.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,92 (t, 3H) , 1,54 (s, 9H) , 1,63 (m, 2H), 1,80 (m, 3H), 2,00 (m, 1H), 2,65-2,88 (m, 2H),

3,18 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,70-3,90 (m, 3H), 6,72 (s,

1H), 7,38 (s, 1H).

LRMS: m/z 322,5 (MH⁺) [oí]_d=-34,34 (c 0,12, dichloromethan) a titulní sloučeniny z Přípravy 11, 1,56 g, 98,9 % ee, Retenční čas: 15,23 minut, ^XH-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0,92 (t, 3H) , 1,54 (s, 9H) , 1,80 (m, 4H), 2,00 (m, 2H), 2, 63-2,85 (m, 2H) , 3,19 (m, 1H) ,

3,58 (m, 1H), 3, 90-3, 98 (m, 3H), 6,72 (s, 1H) , 7,37 (s,

1H) . .

LRMS: m/z 322, 3 (MH⁺) [a] _d=+27.7 (c 0,22, dichloromethan)

122

Příprava 12

Ethyl (2R) -2-,[ (1— { [2- (trimethylsilyl) ethoxy] methyl }-!#-imidazol-4-yl)methyl]-5-(tritylamino)pentanoát

a Příprava 13

Ethyl (2S)-2-[(l-{[2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-1H-imidazol-4-yl)methyl]-5-(tritylamino)pentanoát

123

Sloučenina z Přípravy 1 byla rozdělena HPLC s použitím Chiralcel® OD 250 kolony (20 mm), a směsi hexan:isopropanol:diethylamin (90:10:0.5) jako elučního činidla při rychlosti lOml/minutu, za zisku titulní sloučeniny z Přípravy 12, ve 25% výtěžku, 99.4% ee,

Retenční čas: 16,90 minut.

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: -0,02 (s, 9H) , 0,95 (t, 2H) ,

1,20 (t, 3H), 1,44-1,66 (m, 4H), 2,09 (m, 2H), 2,64-2,80 .(m, 2H), 2,90 (dd, IH) , 3,42 (t, 2H) , 4,09 (q, 2H) , 5,18 (s, 2H), 6,75 (s, IH), 7,17 (m, 3H), 7,22 (m, 7H) , 7,42 (d, 6H) .

LRMS: m/z 598.7 (MH⁺) a titulní sloučeniny z Přípravy 13, v 36% výtěžku,

96,5% ee,

Retenční čas: 22,27 minut.

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: -0,02 (s, 9H) , 0,95 (t, 2H) ,

1,20 (t, 3H) , 1, 44-1,66 (m, 4H) , 2,09 (m, 2H) , 2,64-2,80 (m, 2H) , 2,90 (dd, IH) , 3,42 (t, 2H) , 4,09 (q, 2H) , 5,18 (s, 2H), 6,75 (s, IH), 7,17 (m, 3H), 7,22 (m, 7H) , 7,42 (d, 6H) .

Příprava 14

Lithium 5-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-2-[(4-propyl-l-([2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lff-imidazol-2-yl)methyl]pentanoát

124

Hydroxid lithný, monohydrát (42 mg, 0,99 mmol) byl přidán k roztoku laktamu z Přípravy 15 (150 mg, 0,33 mmol) v tetrahydrofuran u(l ml) a vody (1,5 ml), a reakční směs byla míchána po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn byl kolonovou chromatografií na silikagelu elucí směsí dichloromethan: methanol (90:10) jako elučním činidlem, za vzniku titulní sloučeniny, 108 mg, 70% výtěžek.

¹H-NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ: 0,00 (s, 9H) , 0,96 (m, 5H) , 1,42 (s, 9H), 1,54 (m, 3H), 1,63 (m, 3H), 2,58 (t, 2H), 2,80 (m

1H), 2,88-2, 98 (m, 1H) , 3,02 (m, 2H) , 3,16 (dd, 1H) , 3,60 (t, 2H), 5,34 (d, 1H), 5,50 (d, 1H), 7,07 (s, 1H).

LRMS: m/z 470, 3 (MH⁺) ··

125

Příprava 15 terč.-Butyl 2-oxo-3-[(4-n-propyl-l-([2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-1J7-imidazol-2-yl) methyl] -1-piperidinekarboxylát

Titulní sloučenina byla získána v 75% výtěžku z alkenu z Přípravy 54, stejným způsobem, jako je popsán v Přípravě 10/11.

1H-NMR (CD	C13,	300	MHz) .	5: -0,02	(s, 9H) ,	0,82-	•0,98 (m,
5H), 1,50	(s,	9H),	1, 60	(m, 3H),	1,81 (m,	2H) ,	2,05 (m,
IH), 2,46	(t,	2H) ,	2,74	(dd, IH)	, 3,03 (m	, IH)	, 3,35 (dd
IH), 3,46	(t,	2H) ,	3,58	(m, IH),	3, 82 (m,	IH) ,	5,15 (d,
IH), 5,30	(d,	IH) ,	6, 59	(s, IH).

: m/z 452,4 (MH⁺)

LRMS

126

Příprava 16

Methyl(25)-2-({2-[(terč, -butoxykarbonyl)amino]ethyl}amino)-3-(lH-imidazol-4-yl) propanoát

L-Histidinmethylester (7,93 g, 32,8 mmol) a sodium acetát (10,75 g, 131 mmol) byl přidán k míchanému roztoku terč.-butyl-N-(2-oxoethyl)karbamátu (5,22 g, 32,8 mmol) v methanolu (100 ml). Molekulární síta 4 A a kyanoborohydrid sodný (4,12 g, 65,6 mmol) byly přidány a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Vodná kyselina chlorovodíková (2N, 4 ml) byla přidána a směs byla poté upravena nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného na pH=10. Směs byla zfiltrována, aby se získal pevný podíl, který byl proprán methanolem. Methanol byl odstraněn odpařením za sníženého tlaku a zbývající vodný roztok byl extrahován ethylacetátem (2 krát 300 ml).

Spojené organické extrakty byly potom vysušeny (MgSO₄) , zfiltrovány, a koncentrovány za sníženého tlaku. Výsledný ·· ···· · ·· ·· ···· ·· · ·····* · • * · · ···· • · · · · ♦··· ♦ ···· ·· ···· ·· ·· ··· ···· ·· ··

127 zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií, eluci gradientem roztoku dichloromethan: methanol (96:4 až 92:8), za zisku titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje 8,07 g, 79% výtěžek.

^-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 1,2 (s, 9H) , 2,65 (m, IH) , 2,90 (m, 2H), 3,07 (m, IH), 3,19 (m, IH), 3,30 (m, IH) , 3,58 (m, IH) , 3,73 (s, 3H), 5,22 (br s, IH), 6,97 (s, IH) , 7,02 (br s, 2H), 7,91 (s, IH).

LRMS: m/z 313,1 (MH⁺)

Příprava 17

Methyl (2R) -2 - ({2 - [(terč.-butoxykarbonyl)amino]ethyl lamino)-3—lH-imidazol-4-yl)propanoát

Titulní sloučenina byla připravena z D-histidinmethylesteru v souladu s postupem podle Přípravy 16.

¹H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1,41 (s, 9H) , 2,57 (m, IH) , 2,80 (m, 2H), 3,00 (m, IH), 3,14 (m, IH), 3,23 (m, IH) , 3,50 (m, IH), 3,68 (s, 3H), 6,77 (s, IH), 7,50 (s, IH).

LRMS: m/z 313 (MH⁺)

128

Příprava 18 (i) -Methy 1-2^- ({2 — [ (terč, -but oxy karbonyl) amino] ethyl} amino) 3-(lfí-imidazol-2-yl)propanoát

Roztok aminu z Přípravy 55 (183 mg, 10,8 mmol) byl rozpuštěn v methanolu (7 ml) a byl přidán terč.-butyl-N-(2oxoethyl)karbamát (172 mg,10,8 mmol). Sodium acetát (354 mg, 43,2 mmol), 4 A molekulární síta a potom kyanoborohydrid sodný (135 mg, 21,6 mmol) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Dále byla přidána vodná kyselina chlorovodíková (2N, 1 ml) a reakční směs byla důkladně promíchána, potom byla upravena nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného na pH=10. Výsledná směs byla potom zfiltrována pro odstranění pevného podílu a filtrát byl extrahován ethylacetátem (2 krát). Spojené organickéextrakty byly sušeny (MgSO₄), filtrovány, a potom byly.koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu elucí gradientem rozpouštědla methanol:dichloromethan (1:99 až 5:95) za vzniku titulní sloučeniny, 105 mg, 31% výtěžek.

129 ¹H-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 1.,2 (s, 9H) , 2,58 (m, 1H) , 2,74 ‘ (m, 1H) , 3,11 (m, 4H), 3,67 (m, 1H), 3,70 (s, 3H) , 7,10 (s

2H) .

Příprava 19

Methyl-(25)-2-({2—[(terč.-butoxykarbonyl)amino]ethyl}amino)-3-(1-([2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lfí-imidazol

2-yl)propanoát

Roztok aminu z Přípravy 56 (120 mg, 0,40 mmol) byl rozpuštěn v methanolu (3,5 ml) a byl přidán N-(2-oxoethyl)karbamát (51 mg, 0,33 mmol). Dále byly přidány sodium acetát (131 mg, 1.60 mmol), molekulární síta 4 Á potom sodium kyanoborohydrid (50 mg, 0.80 mmol) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Poté byla přidána vodná kyselina chlorovodíková(IN, 1 ml) , reakční směs byla důkladně promíchána a upravena nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného na pH=10. Výsledná směs

130 byla extrahována ethylacetátem (2 krát ) a spojené organické extrakty byly sušeny (MgSO₄), filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu elucí směsí ethylacetát:methanol: 0,88 amoniak (55:5:0,5) za vzniku titulní sloučeniny, 30 mg, 21% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: -0,02 (s, 9H) , 0,90 (t, 2H) , 1,29 (s, 9H), 2,63 (m, 1H), 2,84 (m, 1H), 3,02 (dd, 1H), 3,13 (dd, 1H), 3,19 (m, 1H), 3,48 (t, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,84 (m, 1H), 5,21 (dd, 2H), 5,77 (brs, 1H) , 6,90 (s, 1H) , 6,97 (s, 1H).

LRMS: m/z 443,3 (MH⁺)

Příprava 20

Methyl-(25)-3-(lfí-imidazol-5-yl)-2-[(3RS)-pyrrolidinylamino]propanoát

'3

O

Roztok produktu z Přípravy 25 (0,4 g,. 1,22 mmol) v kyselině octové byl hydrogenován palladiovým katalyzátorem (10% na

4* 4444 • 4

4 4 • 4444

4

131 uhlíku, 50 mg) při 50 °C. a 3,5 atm po dobu 72 hodin.

Roztok byl filtrován přes Arbocel™/Hyflo™ a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v dichloromethanu a extrahován nasyceným vodným roztokem bydrogenuhličitanu sodného (3 krát 20 ml). Vodná fáze byla koncentrována za sníženého tlaku a výsledná bílá pevná látka byla triturována s horkým ethylacetátem (2 krát 50 ml) a potom s horkým methanolem (2 krát 50 ml) . Methanolové extrakty byly spojeny a odpařeny za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichloromethan:methanol : 0,88 amoniak (80:20:2) a přečištěny kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí směsí dichloromethan:methanol: 0,88 amoniak (80:20:5), za zisku titulní sloučeniny jako oranžového oleje, 200 mg, 70% výtěžek.

¹H-NMR (300 MHz, D₂0) , směs diastereomerů, δ: 1,70 (m, IH) ,

2,02 (m, IH), 2,93 (m, 3H), 3,10-3,47 (m, 4H), 3,58 (2 x s, 2 χ 11/2H), 3,61 (m, IH), 6,98 (2 x s, 2 χ 1/2H), 8.00 (2 x s, 2 χ 1/2H).

HRMS: m/z 239, 1514 (MH⁺) , vypočtená 239,1503.

Přípravy 21 a 22

Methyl (2S)-2-[((IR nebo 5)-l-{((terč.-butoxykarbonyl)amino]methyl}propyl)amino]-3-(lH-imidazol-4-yl)propanoát a

Methyl (2S)-2-[((lS nebo R)-l-{[(terč.-butoxykarbonyl)amino]methyl}propyl)amino]-3-(lff-imidazol-4-yl)propanoát

132

L-Histidinmethylesterdihydrochlorid (945 mg, 3,9 mmol) a sodium acetát (1,28 g, 15,6 mmol) byly přidány k míchanému roztoku produktu z Přípravy 77 (730 mg, 3.9 mmol) v methanolu (50 ml). Byla přidána molekulární síta 4 Á a kyanoborohydrid sodný (491 mg, 7,8 mmol) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Směs byla filtrována a filtrát byl koncentrován na 10 ml za sníženého tlaku. Byla přidána vodná kyselina chlorovodíková (2N, 2 ml) po dobu dvou minut. Byl přidán nasycený vodný roztok uhličitanu sodného a směs byla extrahována ethylacetát (3 krát 150 ml). Spojené organické extrakty byly sušeny (Na2SO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (Biotage™ kolona), eluci gradientem rozpouštědla dichloromethan:methanol (95:5 až 90:10), za zisku titulní sloučeniny z Přípravy 21, 178 mg, 13% výtěžek:

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 0,90 (t, 3H) , 1,40 (m, 2H) , 1,43 (s,.9H), 2,30 (br m, 1H), 2,82 (dd, 1H), 2,97 (dd, 1H),

3,02 (m, 1H), 3,20 (br m, 1H) , 3,65 (m, 1H) , 3,72 (s, 3H), 5,21 (brs, 1H), 6,80 (s, 1H), 7,57 (s, 1H).

133

LRMS: m/z 341,2 (MH⁺)

TLC: dichloromethan:methanol (90:10) Rf=0,48.

a z Přípravy 22, 271 mg, 20% výtěžek:

^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 0,82 (t, 3H) , 1,23-1,42 (m, 2H), 1, 45 (s, 9H), 2,50 (br m, 1H), 2,80 (dd, 1H) , 3,00 (dd, 1H), 3,03-3,18 (m, 2H), 3,60 (m, 1H) , 3,73 (s, 3H) , 5,30 (br s 1H), 6,82 (s, 1H), 7,53 (s, 1H)

LRMS: m/z 341,3 (MH⁺)

TLC: dichloromethan:methanol (90:10) Rf=0,41.

• ·

134

Přípravy23-26

Sloučeniny v následující tabulce mají obecný vzorec

byly připraveny stejným způsobem, jak je popsáno v Přípravě s použitím L-histidinmethylesterudihydrochloridu a vhodného aldehydu/ketonu jako výchozích látek (produkty z Příprav .78-80 nebo z komerčně dostupného l-benzyl-3-pyrrolidinonu).

• ·

»· ····

Příprava 27

Methyl (2S) -2- [ {2- [ (terč.-butoxykarbony1) amino]ethyl}(methyl)amino]-3-(l#-imidazol-4-yl)propanoát

137

Roztok methyl-(2S)-3-(4-imidazolidinyl)-2-(methylamino)propanoátu (1 g, 4,55 mmol), terč.-butyl N-(2-oxoethyl)karbamátů (833 mg, 5,23 mmol), sodium acetátu (1,494 g, 18,22 mmol) a kyanoborohydridu sodného (572 mg, 9,10 mmol) v methanolu (30 ml) byl,míchán při 0 °C, pod dusíkovou atmosférou. Směs se nechala ohřát na teplou místnosti, pak byla přidána vodná kyselina chlorovodíková (5 ml, IN) a potom nasycený vodný roztok uhličitanu sodného. Roztok byl zfiltrován a vodná fáze byla extrahována ethylacetátem. Spojené organické extrakty byly proprány solankou, vysušeny (MgSO₄) , filtrovány a potom koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu, elucí směsí dichloromethan-.methanol (100:5), za zisku titulní sloučeniny, 900 mg, 61% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 1,43 (s, 9H) , 2,32 (s, 3H) , 2,60 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 3,02 (m, 1H), 3,19 (m, 2H), 3,60 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 5,30 (br m, 1H), 6,80 (s, 1H), 7,55 (s, 1H).

• · · · · ···· ·· ··

138

LRMS: m/z 327,1 (MH⁺)

Příprava 28

Methyl-(25) -3- (l#-imidazol-4-yl)-2-(1-piperazinyl)propanoát

Produkt z Přípravy 29 (200 mg, 0,315 mmol) byl přidán k suspenzi 4-hydroxybenzové kyseliny (0,22 g, 1,5 mmol) v roztoku bromovodíku (45% v kyselině octové, 5 ml) při 0,°, C, a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 72 hodin. Byla přidána deionizovaná voda (20 ml), takže vznikla suspenze, která byla extrahována ethylacetátem (3 krát 20 ml). Zbývající vodný roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Výsledná oranžová pěna se nechala krystalizovat ze směsi methanol:ethylacetát za zisku trihydrobromidové soli titulní sloučeniny jako bezbarvé pevné látky, 82 mg, 54% výtěžek.

M.p. 211-213 °C ¹H-NMR (D₂O, 300 MHz) δ: 2,80 (m, 2H) , 2, 97 (m, 2H) , 3,15 (m, 6H), 3,65 (s, 3H), 3,73 (t, 1H), 7,23 (s, 1H) , 8,53 (s, 1H),

LRMS: m/z 239, 2 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 27,37; H, 4,45; N, 11, 36, CnH₁₈N4O₂ . 3 HBr požadováno C, 27,47; H, 4,40; N, 11,65 %.

139 [a] _D=-32, 92 (c 0,11, methanol)

Příprava 29

Methyl-(2S) -2 - { 4 - [(4-methylfenyl)sulfonyl]-1-piperazinyl}-3-(l-trityl-lH-imidazol-4-yl)propanoát

Suspenze methyl-(2S)-2-amino-3-(l-trityl-lH-imidazol-4yl)propanoátu (1 g, 2,4 mmol) v diisopropylethylaminu (5 ml), byla míchána při teplotě místnosti po dobu 20 minut. Byl přidán N,N-Bis(2-chlorethyl)-4-methylbenzenesulfonamid (720 mg, 2,4 mmol) směs byla míchána při refluxu po dobu 3 hodin. Směs se nechala ochladit a byla zředěna acetonitrilem. Výsledný roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek byl suspendován ve vodném roztoku uhličitanu sodného a extrahován dichloromethanem (3 krát 20 ml). Spojené organické extrakty byly proprány solankou (3 krát 20 ml), vysušeny (Na₂SO₄) , filtrovány a potom byly koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na • «·

140 silikagelu, elucí gradientem rozpouštědla díchloromethan: methanol (99:1). Izolovaný materiál byl rozpuštěn v etheru a výsledný roztok byl koncentrován za sníženého tlaku za zisku titulní sloučeniny jako bezbarvé pěny, 300 mg,

19% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 2,42 (s, 3H) , 2,63 (m, 2H) , 2,72 (m, 2H), 2,78 (dd, 1H) , 2,97 (m, 5H) , 3,57 (s, 3H) , 3,60 (m, 1H), 6,50 (s, 1H), 7,07 (m, 6H) , 7,50 (m, 12H), 7,62 (2 x s, 2H).

LRMS: m/z 635, 3 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 69,51; H, 6,06; N, 8,69,

C37H38N4O4S . 0,25H₂O požadováno C, 69,51; H, 6,07; N, 8,59%.

[a]_D=-3,73 (c 0,10, díchloromethan)

Příprava 30 (75) -6-{2-[(terč.-Butoxykarbonyl)amino]ethyl}-2-ethyl-7- (methoxykarbonyl)-5-oxo-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-c]pyrimidin-2-iumjodid

i. & , • · • · · · · φ φφφφ «· ·· «ΦΦΦΦΦ· ·· ··

141

Ethyljodid (99 μΐ, 1,243 mmol) byl přidán k míchanému roztoku z Přípravy 48 (200 mg, 0,592 mmol) v acetonitrilu (5 ml) a směs byla zahřívána k refluxu po dobu 17 hodin pod dusíkovou atmosférou. Směs se nechala^:ochladit na teplotu místnosti a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu elucí dichloromethanem: methanolem (90:10) za zisku titulní sloučeniny jako bílé pěny, 118 mg, 40% výtěžek.

XH-NMR (D2O, 300 MHz) δ: 1,27 (s,	9H)	, 1,42 (t,	3H)	, 3,22
3, 47	(m, 4H), 3,58 (m, 1H), 3,65	(s,	3H), 3,95	(m,	1H) ,
4,20	(q, 2H), 4,75 (m, 1H), 7,40	(s,	1H) .

LRMS: 366, 9 (M⁺)

TLC: dichloromethan:methanol: 0,88 amoniak (90:10:1) Rf=0,26.

Přípravy 31 - 46 '

Sloučeniny v následující tabulce mající obecný vzorec:

[I, Br, Cl, 4-ethylsulfonát]

142 byly připraveny stejným způsobem, jako v Přípravě 30 s použitím produktu z Přípravy 48 a příslušného alkylačního činidla.

ο

Csl

ΓΩ

Csl

χ

Csl

Κ

X

Ο

χ

X

X

χ

„_s

X

C4

χ-χ

χ-χ.

χ_χ

W

Ε

1-1

X

X

X

rH

X

X

rH

X

rH

γ~Η

ΓΩ

ΓΩ

γΗ

Csl

**

χ

X

ο

00

·*—*

χ

X

X

X

«*“«·

kD

kD

X γω

£

£

W

X ΓΩ

X Csl

W

£

+

Ή ΓΩ

ε_

X ΓΩ

X

+ 2

X

ο

ο

ο

Γ*

Γ-

2

X

ΚΩ

x

X

—'

4-4

*ΧΓ

<74

ΓΩ

4-J

X

kD

Γ'

4->

Γ-

^_χ

χχ,

X.

X

X

ε

X

X

X

X

X

ςΤ

fi3

ΓΩ

ΓΩ

Γ-

''-τ

ΓΩ

ΓΩ

t-4

ι—Η

Csl

X

4-J

LT)

1

(Μ

χ

C4

ΟΊ

<ϋ

Γ-

ο

X

CO

ο

χ

X

ΚΩ

Γ~-

X

X

x

Ο

Ό

X

<\ι

,^χ.

X

00

,—.

ΟΊ

X

Ε

4-)

ο

X

X

Ο

X

X

X

ΓΩ

Ο

X

—

'fO

η

ΓΩ

t—1

γΗ

<—1

Csl

ΟΊ

• ·

λ:

• ·

* ·

Ν

• ·

σ

Csl

ω

υ

κΩ

X.

χ

ΚΩ

χ

Κ

X

νΟ

X

LO

rH

2

•Η

W

ε

^~χ

ε

4-4

ε

W

X

X

X

4-1

X

'—

X

•—

—'

ΓΩ

Α

>.

Ν

Csl

Ν

ΟΊ

• ·

Ν

1—1

X

σ

ΚΩ

X

00

Γ~

ω

X

Csl

X

X

X

ιυ

2

X

υ?

kD

2

X

ΚΩ

t—1

2

2

Csl

χ-χ

χ-χ

χ-χ

C

σ

X

X

η

X

X

X

X

X

X

X

ο

-—

η

Ο

ΓΩ

Ο

γΗ

γΗ

ο

ο

ο

*šT

LO

X

ΓΩ

ο

X

X

X

ΓΩ

X

X

χ

χ

Γ-

^-χ

χ-χ

ΓΩ

Χ_Χ

χ-χ

χ-χ

χ-χ

ε

ε

W

χ

χ

X

X

X

X

X

X

X

X

X

**—·

Ο <Ν Q

ι—1

γ-4

Csl

ο (Ν Q

γΗ

šT

?—1

γΗ

ο Csl α

<r

ο

ο

ΓΩ

χ

χ

X

X

X

X

X

X

ΟΊ

ΓΩ

ζ~χ

ε.

4-1

ζ—χ

ε

ε

<Λ

ε

X

X

X

C6

X

χ—

'—

X

X

'—'

X

ΓΩ

ΓΩ

ί-~

S

ΟΊ

s

ΓΜ

2

1

ο

Γ-

JS

Γ-

r-

ο

ίζ I

ΓΩ

Γ-

X

X

1

χ

ΚΩ

ο

J

X

'

ΟΊ

?—ι

γ~4

χ—χ

χ-χ

ώ

W

χ

X

X

σ

X

X

X

X

χ

X

X

X

«—

η

•Η

ΓΩ

ΓΩ

Γ

«-1

Γ-4

ΓΩ

ΓΩ

γ~4

ΓΊ

Tt

• · ·· fcfc··

Tt

·· • · · · » ·

O			O		Lf)
CN	*»		CO		CD		»k
*»	ω	Ό	K.		*“
00	.		Γ		CN	X	X
						co	ϊ-1
	o	cn
	CD	Csl			—		v
rn	kk		X		X	CO	ε
CT)	CO	Lf)	r-1		ΟΛ
								+
*k	*k	K.			*·	TT	r-	2
w			ε		W	CD	r-
	X	X				K
	r~H	co				co	tt	r-
CN			00		o			*k
CN	*»	»k	CT)	2	co	K		o
**	ε	ε	*»			<—k		CD
r-1			Lf)		rH	X	X	TT
			1	CN		r-	CN
•	(—	o		k^	• ·			N
K)	lf)	r-	CO	cn	K0	•k	*.	\
	«k.	K.	»k	Γ-		ε	X	ε
	co	Tr	Lf)	00			—'
N					N
X	tt	K	K	N	X	CD	CN	ω
2		.	X-X		2	Lf)	CO	2
	K.	X	X	ε		s.	•k	X
O	ΓΟ	r*H	t—1		O	co	Tt	X
’ o				e	o	1
O~)	•k			ω	co	TT	*k	»k
		ε	Ό	2		CN	X->
*»	X		'—	X	»k	*k	X.	X
o CM Q	TT	CO	Lf)	X	- o CM Q	co	t—1
	»k	00	00	*k		S.	K	*k
	ε	*»	*k	.k		.	ε	co
X		co	Lf)	X	tá	X
2				<—l	2	co
Z	co	s.	*·		Z		co	CN
	co	s		•k	I	K	σι	TT
i		X	X	ω	3^	co	«.	>k
cd	CO	co	t—1		«—		co	Γ-

CD cn

CN

Γ

Ό •H

			ε
		rH	fO
		>1	3
		X	O
Ό		X	M-t
Ή		ω	1—1
ε		ε	3	•
o	>—k	o	CO	>
n	•	í-l	CD	X
X)	>	X5	C	0)
i—1	X	1	tO
>1	0)	CN	X	lf)
l—f		—	X
Γ—1	lf)	1	CD	i—1
<	*·—'	z	ε	*—

lf)

CD «sr co >1 >

CO

S-l a

Ή >n a

N

4-)

X

Ό

O

X

148

Příprava 47 (75) -6- {2 - [(terč.-butoxykarbonyl)amino]ethyl}-7-(methoxykarbonyl)-2-[2-(methylamino)-2-oxoethyl]-5-oxo5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-c]pyrimidin-2-iumbromid

Směs produktu z Přípravy 48 (300 mg, 0,89 mmol) a 2-brom-N-methylacetamidu (Heterocycles 1995, 41, 2427) (270 mg,

1,78 mmol) v acetonitrilu (7 ml) byla Zahřívána na 80 °C, po dobu 72 hodin. Chlazená reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl přečistém kolonovou chromatografií na silikageu s použitím elučního gradientu dichloromethan:methanol (95:5 až 90:10). Produkt byl triturován s etherem za zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 380 mg, 87% výtěžek.

¹H-NMR (D₂O, 300 MHz) δ: 1,30 (s, 9H) , 2,71 (s, 3H) , 3,233,47 (m, 5H), 3,60 (m, IH) , 3,68 (s, 3H) , 3,97 (m, IH) , .4,77 (m, IH), 5,00 (br s, 2H) , 7,38 (s, IH) .

LRMS: m/z 410,4 (M⁺)

Příprava 48

Methyl-(75)-6-{2-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]ethyl}-5-oxo5,6,7,8-t-etrahydroimidazo[1,5-c]pyrimidin-7-karboxylát

Karbonyldiimidazol (156 mg, 0,959 mmol) byl přidán k míchanému roztoku z Přípravy 16 (300 mg, 0,959 mmol) v N,N-dimethylformamidu (5 ml) a směs byla zahřívána na 60-70 °C, po dobu 17 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn v nasyceném roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahován dichloromethanem. Spojené organické extrakty byly sušeny (MgSO₄), filtrovány a potom byly koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií, elucí dichloromethanem:methanolem (95:5), za zisku titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje, 210 mg, 67% výtěžek,

1H-NMR (D2O, 300 MHz	) δ: 1,40 (s,	9H)	, 3,20-3,60 (m, 5H),
3,70 (s, 3H), 4,08	(m, 1H), 4,33	(m,	1H), 4,82 (br m, 1H),
6,80 (s, 1H), 8,13	(s, 1H)
LRMS: m/z 339 (MH+)
[a]D=+39,2 (c 0,12,	dichloromethan)

TLC: ethylacetát .-methanol (95:5) Rf=0,79

Příprava 49

Ethyl-(2E a 2Z)-3-(1-([2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-1H-imidazol-4-yl)-2-[3-(tritylamino)propyl]-2-propenoát

Geometrické isomery titulní sloučeniny byly získány v 32% a 38% výtěžku v uvedeném pořadí, ze sloučeniny z Přípravy 60, a aldehydu z Přípravy 68, stejným způsobem, jako je popsán v Přípravě 52.

Isomer 1,

1H-NMR (CDC13, 300 MHz)	δ: -	0,02	(s, 9H), 0,90	(t, 2H),
1,28 (t, 3H), 1,78 (m,	2H) ,	2,18	(t, 2H), 2,40	(brs, 1H)
2,97 (t, 2H), 3,44 (t,	2H) ,	4,19	(q, 2H), 5,20	(s, 2H),
7,15-7,32 (m, 12H), 7,	43 (d	, 6H)	•
LRMS: m/z 596, 5 (MH+)
a isomer 2,
1H-NMR (CDCI3, 300 MHz)	δ: -	0,01	(S, 9H), 0,90	(t, 2H),
1,28 (t, 3H), 1,72- (m,	2H) ,	2,19	(t, 2H), 2,46	(t, 2H),
3,47 (t, 2H), 4,22 (q,	2H) ,	5,22	(S, 2H), 6,70	(S, 1H),
7,18 (m, 3H), 7,24 (m,	6H) ,	7,45	(d, 6Ή),7,55	(S, 1H),

7,79 (s, 1H).

LRMS: .m/z 596, 3 (MH⁺)

Příprava 50

Ethyl-(2E a 2Z)-3-(l-n-propyl-lH-imidazol-4-ýl)-2-[3-(tritylamino)propyl]-2-propenoát ·· ···· · ** • · · ·· · · • · · · ·

151

Roztok sloučeniny z Přípravy 60 (5,9 g, 11,3 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml) byl přidán k ledem chlazenému roztoku hybridu sodného (457 mg, 60% disperze v minerálním oleji, 11,3 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml), a směs byla míchána po dobu 45 minut, potom přidán roztok aldehydu z Přípravy 66 (1,56 g, 11,3 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml). Reakční směs se potom nechala ohřát na teplotu místnosti a byla míchána po dobu 18 hodin. Směs byla zředěna vodným roztokem chloridu amonného. Vrstvy byly odděleny a vodná fáze byla ethylacetátem (3 krát ). Spojené organické extrakty byly vysušeny (MgSO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii, elucí gradientem rozpouštědla ethylacetát: pentan (40:60 až 60:40), za zisku dvou geometrických isomerů titulní sloučeniny, 1,87 g, 33% výtěžek (isomer 1):

XH-NMR	(CDC13,	300	MHz)	δ: 0,92 (t, 3H), 1,27	(t, 3H), 1,78
(m,	4H)	, 2,18	(t,	2H) ,	2,52 (brs, ÍH) , 2,96 (	t,	2H), 3,82
(t,	2H)	, 4,18	(qř	2H) ,	7,10-7,28 (m, 12H), 7,	42	(d, 6H) .

LRMS: m/z 508,2 (MH⁺) a 2,40 g, 42% výtěžek (isomer 2):

^XH-NMR (CDC1₃,. 300 MHz) δ: 0,95 (t, 3H) , 1,27 (t, 3H) , 1,72

152

(m, 2H), 1	,82	(m, 2H), 2,18	(t, 2H), 2,45	(t, 2H), 3,86 (t,
2H), 4,22	(q,	2H), 6,75 (s,	1H) , .7,18 (m,	3H), 7,28 (m,
7H), 7,44	(d,	6H), 7,76 (s,	1H)
LRMS: m/z	508,	4 (MH+)

Příprava 51

Ethyl-(2E a 2Z) -2-{4-[benzyl(terč.-butoxykarbonyl)amino]butyl}-3- (l-n-propyl-lff-imidazol-4-yl) -2-propenoát

Geometrické isomery titulní sloučeniny byly získány v 24% a 21% výtěžku v uvedeném pořadí ze sloučeniny z Přípravy 59, a aldehydu z Přípravy 66, stejným postupem, jako je popsán v Přípravě 52.

Isomer 1, ^XH-NMR (CDCI3, .300 MHz) δ: 0,96 (t, 3H) , 1,27 (t, 3H)., 1,37-1,58 (m, 13H), 1,80 (m, 2H), 2,80 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 3,88 (t, 2H), 4,20 (q, 2H), 4,40 (s, 2H), 7,04 (s,

1H), 7,22 (m,.5H), 7,42 (s, 1H), 7,52 (s, 1H) .

LRMS: m/z 470, 3 (MH⁺)

Isómer 2, ^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,94 (t, 3H), 1,28 (t,

3H), 1,38-1,58 (m, 13H), l,80(m, 2H),.2,38 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 3,85 (t, 2H), 4,22 (q, 2H), 4,40 (br s, 2H) , 6,70 (s, IH), 7,23 (m, 5H) , 7,40 (s, 1Ή) , 7,75 (s, IH).

LRMS: m/z 470,3 (MH⁺)

Příprava 52

Ethyl-(2E a 2Z)-3-(l-n-butyl-lff-imidazol-4-yl)-2-[3-(tritylamino)propyl]-2-propenoát

Roztok sloučeniny z Přípravy 60 (1 g, 2,6 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml byl přidán k ledem chlazenému roztoku hydridu sodného (106 mg, 60% disperze v minerálním oleji, 2,6 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml), a roztok byl míchán po dobu 45 minut. Potom byl přidán aldehyd z Přípravy 67 (400 mg, 2,6 mmol) tetrahydrofuranu (10 ml), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Reakce byla uhašena přídavkem vodného roztoku chloridu amonného a směs extrahována ethylacetátem (2 krát). Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v toluenu, adsorbován na silikagelu a • ·

154 přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu, elucí gradientem rozpouštědla ethylacetát: pentan (20:80 až 40:60),za zisku dvou geometrických isomerů titulní sloučeniny, 390 mg, 29% výtěžek.

Isomer 1

^-nmr’ (CDCI3,	300	MHz)	δ: 0,94 (t, 3H), 1,28	(m,	, 5H), 1,76
(m, 4H), 2,18	(t,	2H) ,	2,55 (brs, IH), 2,97(	t,	2H), 3,84
(t, 2H), '4,17	(9/	2H) ,	7,09-7,30 (m, 12H), 7,	42	(d, 6H) .
LRMS: m/z 522	(MH+	)

a 400 mg, 30% výtěžek (isomer 2):

¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0, 94 (t, 3H) , 1,30 (m, 5H) , 1,76 (m, 4H), 2,19 (t, 2H), 2,45 (t, 2H), 3,92 (t, 2H), 4,22 (q, 2H), 6,76 (s, IH), 7,18 (m, 3H), 7,24 (m, 7H) , 7,46 (d,

6H), 7,7 5 (s, IH).

LRMS: m/z 523,1 (M+2H)⁺

Příprava 53 terč.-Butyl-(3E)-2-oxo-3-[(l-n-propyl-lH-imidazol-4yl)methylene]-1-piperidinekarboxylát

• 4

155

Roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu (43,5 ml, ÍM, 43,5 mmol) byl přidán po kapkách k chlazenému (-78,°, C,) roztoku terč.-butyl 2-oxo-l-piperidinkarboxylátu (J, Org, Chem,, 1983, 48,2424) (8,7 g, 43,5 mmol) v tetrahydrofuranu (120 ml) a když byla adice dokončena roztok se nechal ohřát na 0 °C, a byl míchán po dobu hodiny. Roztok byl znovu ochlazen na -78 °C a byl přidán roztok aldehydu z Přípravy 66 (4 g, 28,9 mmol) v tetrahydrofuranu (40 ml), a pak se nechala reakční směs zahřát na teplotu místnosti. Reakční směs byla míchána po dobu 18 hodina potom rozdělena vodou a ethylacetátem. Fáze byly odděleny a organická fáze byla vysušena (MgSO₄), filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií, eluci dichloromethanem: methanolem (95:5), za vzniku titulní sloučeniny ve formě jediného geometrického isomeru, 4 g, 43% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,89 (t, 3H) , 1,50 (s, 9.H) , 1,78 (m, 2H) , 1,86 (m, 2H), 3,00 (m, 2H) , 3,70·(t,.2H), 3,85 (t, 2H), 7,07 (s, IH), 7,46 (s, IH) , 7,62 (s, IH) .

LRMS: m/z 320,3 (MH⁺)

Alternativní způsob syntézy titulní sloučeniny v Přípravě .

Sloučenina z Přípravy 99 (76,5 g, 227 mmol) byla rozpuštěn v dichloromethanu (300 ml), roztok byl ochlazen na 0 °C a byl přidán triethylamin (57 g, 560 mmol). Dále byl pomalu přidáván methansulfónylchlorid (23,7 g, 207 mmol) v dichloromethanu (15 ml) k míchané směsi po dobu 0,5 hodiny přičemž teplota, byla udržována mezi 0-5 °C. Reakční směs se

156

potom nechala: ohřát na teplotu místnosti a byla míchána po dobu 3 hodin. Reakční směs potom byla nalita do vody (315 ml) a organická fáze byla oddělena. Vodná fáze byla potom extrahována dichloromethanem (1 krát 50 ml) a spojené organické extrakty byly proprány vodou (1 krát 100 ml), vysušeny a koncentrovány za sníženého tlaku, za zisku titulní sloučeniny jako pevné látky, 58,0 g, 88% výtěžek.

Příprava 54 terč.-Butyl (3E nebo 3Z)-2-oxo-3-[(4-n-propyl-l-{[2-(trimethylšilyl)ethoxy]methyl}-lH-imidazol-2-)methylen]-1-piperidinkarboxylát nebo terč.-Butyl (3Ě nebo 3Z)-2-oxo-3-[(5-n-propyl-l-{[2-(trimethylšilyl)ethoxy]methyl}-lff-imidazol-2-yl)methylen]-1-piperidinkarboxylát

Titulní sloučenina byla získána jako jeden stereoisomer v 10% výtěžku z aldehydů z Přípravy 69 a 70, a terč.-butyl 2-oxo-l-piperidinekarboxylátu (J, Org, Chem, 1983, 48, 2424), stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 53, s

157 výjimkou toho, že jako eluční činidlo v koloně byl použit

hexan:ether (50:50).
1H-NMR (CDCI3, 300 MHz)	δ: -0,03	(s, 9H), 0,88	(t, 2H),
0,98 (t, 3H), 1,56 (s,	9H), 1,66	(m, 2H), 1,92	(m, 2H) ,
2,58 (t, 2H), 3,22 (m,	2H), 3,48	(t, 2H), 3,77	(m, 2H),
5, 30 (s, 2H), 6,80 (s,	1H), 7,73	(s, 1H) .
LRMS: m/z 450,6 (MH+)

Příprava 55

Methyl-(2R5)-2-amino-3-(lff-imidazol-2-yl)propanoát

Směs alkenu z Přípravy 57 (366 mg, 12 mmol) a 10% palladia na dřevěném uhlí (50 mg) v methanolu (8 ml) byla hydrogenována při 3,5 atm a 50 °C po dobu 18 hodin. Ochlazená směs byla zfiltrována přes Arbocel™, propláchnutý methanolem, a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku za zisku titulní sloučeniny, 200 mg, 98% výtěžek. ·..·.

^XH-ŇMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 3,65 (d, 2H) , 3,80 (s, 3H) , 4,60 (t, 1H), 7,55 (s, 2H).

LRMS: m/z 170,3 (MH⁺)

158

Příprava 56

Methyl (2S)-2-amino-3-(1-{[2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-ltf-imidázol-2-yl)propanoát

Produkt z Přípravy 58 (950 mg, 2,40 mmol) smísen s vodnou kyselinou chlorovodíkovou (48 ml, 0,25N HCI, 12,0 mmol) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Reakční směs byla upravena přídavkem 0,88 amoniaku na pH=9 a extrahována ethylacetátem (2 krát). Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na2SO₄) , zfiltrovány, a potom koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu elucí ethylacetát:methanolem: 0,88 amoniakem (95:5:0,5) za vzniku titulní sloučeniny, 600 mg, 83% výtěžek ¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: -0,03 (s, 9H) , 0,90 (t, 2H),

3,00 (dd, 1H), 3,20 (dd, 1H), 3,48 (t, 2H), 3,71 (s, 3H), 4,05 (m, 1H) , 5,23 (dd, 2H), 6,92 (s, 1H) , 6,97 (s, 1H)

LRMS: m/z 300,2 (MH⁺)

Příprava 57

Methyl (22)-2-{[(benzyloxy)karbonyl]amino}-3-(lH-imidazol2-yl)-2-propenoát • ·

159

Směs methyl-2-{[(benzyloxy)karbonyl]amino}-3- (dimethoxyf osf oryl) pr.opanoátu (1 g, 30 mmol) v tetrahydrofuranu (7ml) byla míchána při -40 °C, a byl přidán tetramethylguanidin (380 mg, 33 mmol). Reakční směs byla míchána při -40 °C, po dobu 20 minut a potom byl přidán imidazol-2-karboxaldehyd (317 mg, 33 mmol). Reakční směs se nechala ohřát na teplotu místnosti a byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 h. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a proprán vodou a potom solankou. Organická fáze pak byla vysušena (MgSO₄) , zfiltrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii, elucí gradientem rozpouštědla ethylacetát: pentan (30:70 až 80:20), za vzniku titulní sloučeniny, 366 mg, 40% výtěžek ¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 3, 77 (s, 3H) , 5,17 (s, 2H) , 6,44 (s, 1H) , 7,10 (brs, 2H) , .7,35 . (m, 5H) , 10,2 (brs, 1H)

LRMS: m/z 301,9 (MH⁺)

160

Příprava 58 (2R, 5R)-2-Isopropyl-3,6-dimethoxy-5-[(1-{ [2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lH-imidazol-2-yl)methyl]-2,5-dihydropyrazin

Roztok (2R) -2-isopropyl-3., 6-dimethoxy-2,5-dihydropyraziňu (111 mg, 0,60 mmol) v tetrahydrofuranu (2,5 ml) byl ochlazen na -78 °C a smísen s n-butyllithiem (0,388 ml,

1, 6M v hexanech, 0,62 mmol). Reakční směs byla míchána při -78 °C, po dobu 45 minut a byl přidán organický roztok z Přípravy 73. Reakční směs se potom nechala ohřát na teplotu místnosti a byla míchána po dalších 18 hodin. Reakce potom byla uhašena přídavkem methanolu a potom bylo rozpouštědlo odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl zředěn vodou a ethylacetátem. Vrstvy byly odděleny a vodná fáze byla extrahována dalším:ethylacetátem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly potom vysušeny (Na₂SO₄), zfiltrovány a potom byly koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí gradientu rozpouštědla ethylacetát: hexan (50:50 až 100:0), za vzniku titulní sloučeniny, 40 mg, 17% výtěžek ·· ^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: -0,03 (s, 9H), 0,65 (d, 3H) ,

0,84	(t,	2H), 1,00 (d, 3H), 2,16 (m, 1H), 3,03	(dd,	1H) ,
3, 39	(dd,	1Ή), 3,44 (t, 2H), 3, 58 (s, 3H) , 3,71	(s,	3H) ,
3,77	(m,	1H), 4,39 (m, 1H), 5,29 (dd, 2H), 6,90	(S,	1H) ,

6,95 (s, 1H) .

LRMS: m/z 394,8 (MH⁺)

Příprava 59 ‘

Ethyl-(2R5)-6-[benzyl(terč.-butoxykarbonyl)amino]-2-(diethoxyfosforyl)hexanoát

Triethyl fosfonoacetát (2,6 ml, 12,9 mmol) byl přidán k roztoku hydridu sodného (576 mg, 14,2 mmol) v tetrahydrofuranu (75 ml) a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Roztok jodidu z Přípravy 64 (5,0 g, 12,9 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml), a 18-crown-6 (1,4,7,10,13,16-hexaoxacyklooktadekan) (40 mg) byl přidán, a reakční směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 18 hodin. Vodný roztok chloridu amonného byl přidán k ochlazené reakční směsi a směs byla extrahována ethylacetátem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly vysušeny. (MgSO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku za vzniku žlutého oleje. Surový produkt byl přečištěn ·· ···· • · · ·

162 *· *· kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí gradientem rozpouštědla ethylacetát: pentan (40:60 až 100:0), za vzniku titulní sloučeniny, 2,69 g, 49% výtěžek.

¹H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1,21-1,37 (m, 9H) , 1,38-1,58 (m, 13H), 1,80 (m, IH), 1,96 (m, IH), 2,80-2,98 (m, IH), 3,053,25 (m, 2H), 4,16-4,24 (m, 6H), 4,40 (s,2H), 7,18-7,37 (m, 5H)

Příprava 60

Ethyl-(2RS)-2-(diethoxyfosforyl)-5-(tritylamino)pentanoát

Titulní sloučenina byla připravena v 34% výtěžku z bromidu z Přípravy 62, stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě»

59.

hí-NMR (CDCI3,	400 MHz)	δ: 1	,28	(m, 11H), 1,84-2,02	(m,
2H) , 2,15	(t,	2H), 2,93	(m,	IH)	, 4,17 (m, 6H), 7,18	(m,
3H), 7,24	(m,	6H), 7,44	(d,	6H)
LRMS: m/z	524,	4 (MH+)

Příprava 61

·· ·*··

163

Methyl (2R)-2-chlor-3-(lff-imidazol-4-yl)propanoát

Chladný roztok dusitanu sodného (2,63 g, 38 mmol) ve vodě (5 ml) byl přidán po kapkách k míchané suspenzi D-histidinu (2 g, 11,5 mmol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (30 ml) při -5 °C, Směs byla míchána při 0 °C, po dobu 1 hodiny a potom při teplotě místnosti po dobu 17 hodin. Směs byla ochlazena a potom upravena vodným roztokem hydroxidu amonného (2N) na pH= 4-5. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku za zisku (2R)—2 — chlor-3-(lH-imidazol-4-yl)propanové kyseliny.

¹H-NMR (D₂O, 300 MHz) δ: 3,25 (m, 2H) , 4,45 (t, 1H), 7,12 (s, 1H) , 8,15 (s, 1H)

LRMS: m/z 175,0 (MH⁺) [aj d=+13, 51 (c 0,093, methanol)

Míchaná suspenze (2R)-2-chlor-3-(lH-imidazol-4-yl)propanové kyseliny v methanolu (60 ml) byla probublávána chlorovodíkem při 0 °C po dobu 20 minut a suspenze byla míchána při teplotě místnosti 17 hodin. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno odpařením za sníženého tlaku a ochlazený zbytek byl suspendován v chladném.nasyceném vodném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a extrahován dichloromethanem (4 krát 20 ml). Spojené organické extrakty • ·

164

·· byly vysušeny (Na2SO₄) , zfiltrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v diethyletheru a výsledný roztok byl koncentrován za sníženého tlaku za zisku titulní sloučeniny jako žlutého oleje, 350 mg, 14% výtěžek ¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz).δ: 3,20 (dd, 1H), 3,37 (dd, 1H), 3,75 (s, 3H), 4,59 (m, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,57 (s, 1H). LRMS: m/z 189,0 (MH⁺) [a]_D=+2,13 (c 0,16, methanol)

Příprava 62 ' . .

N-(3-bromopropyl)-N-tritylamin

Br

Trifenylfosfin (121 g, 0,46 mol) byl přidán po dávkách k ledem chlazenému roztoku alkoholu z Přípravy 63 (139 g,

0,44 mol) a bromid uhličitý (153 g, 0,46 mol) v dichloromethanu (1360 ml) a když bylo přidávání dokončeno, reakční směs byla míchána při teplotě místnosti podobu 48 hodin. Reakční směs byla zředěna vodou, vrstvy byly odděleny, a vodná fáze byla extrahována dichloromethanem (2 krát ) .. Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na. silikagelu, elucí gradientem rozpouštědla hexan:ethylacetát

165 (99:1 až 95:5), za zisku titulní sloučeniny, 81,5 g, 49% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 2,02 (m, 2H) , 2,28 (m, 2H) , 3,58 (t, 2H), 7,19 (m, 3H), 7,27 (m, 6H), 7,46 (d, 6H)

Příprava 63

3-Hydroxyl-N-trityl-l-propanamin

Směs 3-amino-l-propanolu (51 ml, 0,66 mol), chlortrifenylmethanu (184 g, 0,66 mol) a triethylaminu (92 ml, 0,66 mol) v dichloromethanu (1000 ml) byla míchána při teplotě místnosti po dobu 1.8 hodin. Reakční směs byla zředěna vodou a vrstvy byly odděleny. Vodná fáze byla extrahována dalším dichloromethanem (2 krát ) a spojené organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO4) , zfiltrovány koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl dobře triturován v diisopropyletheru, a výsledná pevná látka byl zfiltrována a vysušena. Potom byla tato látka triturována methanolu, suspenze byla zfiltrována, a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku, za vzniku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 139,1 g, 66% výtěžek • ·

166 ^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 1,70 (m, 2H) , 2,38 (t, 2H) , 3,86 (t, 2H), 7,19 (m, 3H) , 7,25 (m, 6H) ,· 7,42 (d, 6H) .

LRMS: m/z 318,4 (MH⁺)

Příprava 64 terč.-Butyl-benzyl (4-jodobutyl)karbamát

Směs chloridu z Přípravy 65 (9,3 g, 31,3 mmol) a jodidu sodného (14,9 g, 100 mmol) v acetonu (200 ml) byla zahřívána pod refluxem po dobu 18 hodin. Ochlazená reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl rozdělen mezi vodu a ether. Vrstvy byly odděleny a vodná fáze byla extrahována s etherem. Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na2SO₄), filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku, za zisku titulní sloučeniny jako žlutého oleje, 10,5 g, 87% výtěžek ^XH-NMR (CDCli, 300 MHz) δ: 1,40-1,65 (m, 11H) , 1,79 (m,

2H), 3,19 (m, 4H), 4,42 (s, 2H), 7,20-7,38 (m, 5H)

LRMS: m/z 390 (MH⁺) • · · · · • · ·· ·

167

Příprava 65 terč.-Butyl-benzyl (4-chlorbutyl)karbamát

Terč.-butyl henzylkarbamát (J, Org, Chem, 1993, 58, 56) (9,1 g, 44 mmol) byl přidán k roztoku hydridu sodného (2,14 g, 53 mmol) v tetrahydrofuranu’ (160 ml), a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 20 minut. l-Brom-4-chlořbutan (5,07 ml, 44 mmol) byl potom přidán a reakční směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 18 hodin.Ochlazená reakční směs byla uhašena přídavkem vodného roztoku chloridu amonného, a směs byla extrahována ethylacetátem (2 krát ), Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) , filtrovány, a koncentrovány za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí acetátem:pentanem (95:5), za zisku titulní sloučeniny jako čirého oleje, 6,1 g, 47% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 1,45 (s, 9H) , 1,58-1, 80 (m, 4H) , 3,14-3,30 (m, 2H), 3,52 (t,2H), 4,42 (s, 2H), 7,25 (m, 5H) LRMS: m/z 298, 0 (MH⁺)

168

Příprava 66 _____: _ l-Prbpyl-lfí-imidazol-4-karboxaldehyd

O.

CH₃

Imidazol-4-karboxaldehyd (30 g, 0,31 mol) byl přidán po dávkách k roztoku hydridu sodného(13,9 g, 60% disperze v minerálním oleji, 0,348 mol) v tetrahydrofuranu (450 ml), a roztok byl míchán po dobu 45 minut. Potom byl po dávkách přidán n-Propylbromid (31,2ml, 0,344mol) a následně 18-crown-6 (150 mg), a reakční směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 18 hodin, byl přidán k ochlazené reakční směsi a směs byla extrahována ethylacetátem (2 krát ) á dichloromethanem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly vysušeny (MgSO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého ' tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí ethylacetátem: pentanem (40:60), za vzniku titulní sloučeniny,. 20,2 g, 47% výtěžek.

¹H-NMR (DMSO-d,sub,6, 400 MHz) δ: 0,80 (t, 3H), 1,76 (m,

2H), 3,98 (t, 2H), 7,84 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 9,70 (s, 1H) LRMS: m/z 277,3 (2M+H)⁺

169

Příprava 67 l-n-Butyl-lH-imidazol-4-karboxaldehyd

Imidazol-4-karboxaldehyd (10 g, 104 mmol) byl přidán po dávkách k roztoku hydridu sodného(4,56 g, 60% disperze v minerálním oleji, 114 mmol) v tetrahydrofuranu (150 ml), a roztok byl míchán po dobu 30 minut. Pak byl po dávkách přidán n-butylbromid (15,7 g, 114 mmol), a následně Í8-cro,wn-6 (50 mg), a reakční směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 18 hodin. Vodný roztok chloridu amonného byl přidán k chlazené reakční směsi a směs byla extrahována ethylacetátem (2 krát ) a dichloromethanem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly potom vysušeny (MgSO₄), filtrovány, a koncentrovány za snízeného tlaku.Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií, elucí gradientem rozpouštědla pentan:ethylacetát (50:50 až 25:75), za vzniku titulní sloučeniny, 4,45 g, 28% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,97. (t, 3H), 1,37 (m, 2H) , 1,80 (m, 2H), 4,00 (t, 2H) , 7,55 (s, 1H), 7,62 (s, 1H) , 9,88 (s, 1H)

LRMS: m/z 153,3 (MH⁺)

Příprava 68

1-{ [2-(Trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lH-imidazol-4-karboxaldehyd

h₃c ch₃

Imidazol-4-karboxaldehyd (1 g, 10,4 mmol) byl přidán po dávkách k roztoku hydridu sodného.(463 mg, 60% disperze v minerálním oleji, 11,4 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml) , a roztok byl míchán po dobu 30 minut při teplotě místnosti. Byl přidán 2-(trimethylsilyl)ethoxymethylchlorid (2,03 ml, 11,4 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin, Reakce byla uhašena adicí vodného roztoku chloridu amonného, a směs extrahována ethylacetátem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) , zfiltrovány, a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, eluci směsí · methanol:ethylacetát (3:97), za vzniku titulní sloučeniny, 1,8 g, 77% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: -0,02 (s, 9H) , 0,92 (t, 2H) ,

3,52 (t, 2H), 5,33 (s, 2H), 7,68 (s, IH), 7,72 (s, IH),

9,92 (s, IH).

• · · · · fl • « • ·

171

Přípravy 69 a 70

4- Propyl-l-{[2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lff-imidazol-2-karboxaldehyd a

5- Propyl-l-{ [2- (trimethylsilyl)ethoxy3methyl}-l//-imidazol-2-karboxaldehyd

n-Butyl lithium (11,9 ml, 1,6M v hexanech, 19,14 mmol) byl přidán po kapkách k chlazenému (-40 °C, ) roztoku imidazolu z Příprav 71 a 72 (4,6 g, 19,14 mmol) v tetrahydrofuranu (75 ml) a, když bylo přidávání dokončeno, výsledný červený roztok byl míchán 20 minut. N,N-Dímethylformamid (1,36 ml, 19,14 mmol) byl přidán po kapkách během 15 minut, a reakční směs se nechala ohřát na teplotu místnosti a potom byl, míchán 18. hodin. Reakce byla uhašena přidáním vodného chloridu amonného, reakční směs byla extrahována etherem a spojené ořganické extrakty byly koncentrovány za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí směsí • · · · · ·

172 • · ·· hexan zethylacetát (75:25), za vzniku titulních sloučenin z_

Příprav 69 a 70 v daném pořadí v 3:1 regioisomerní směsi,

3,4 g, 66% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: -0,02 (s, 9H), 0,84-1,02 (m,

3H) , 1,74 (m, 4H), 2,61 (m, 2H), 3,57 (m, 2H), 5,75 (s,

1,5H), 5,80 (s, 0,5H), 6,98 (s, 0,25H), 7,10 (s, 0,75H),

9,75 (s, 0,25H), 9,77 (s, 0,75H)

LRMS: m/z 269, 0 (MH⁺)

Přípravy 71 a 72

4-n-Propyl-l-{[2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lff-imidazol a .... - ......

5-n-Propyl-l-{[2- (trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-Iff-imidazol

Roztok imidazolu z Přípravy 76 (4,9 g, 44,6 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) byl přidán po kapkách k roztoku hydridu sodného (1,96 g, 60% disperze v minerálním oleji,

49,1 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) a když bylo přidávání dokončeno, byl roztok míchán po dobu jedné hodiny. Roztok byl ochlazen na 0 °C, a

2-(trimethylsilyl) ethoxymethylchl.orid (8,28 ml, 46,8 mmol) byl přidán po kapkách v průběhu 20 minut. Reakční směs byla • ·

173 ··· ·· ....... ·* *’ míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin, potom byla koncentrována za sníženého tlaku, Zbytek byl rozdělen mezi ether a vodu, vrstvy byly odděleny, a vodná fáze byla extrahována etherem. Spojené organické extrakty byly proprány solankou, vysušeny (MgSO₄), zfiltrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbylý hnědý olej byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu, elucí směsí dichloromethan: methanol (95:5), za zisku titulních sloučenin Příprav 71 a 72 v regioisomerní směsi 3:1, 7 g, 65% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0,0 (s, 9H) , 0,90 (m, 3H) , 1,65 (m, 4H), 2,58 (m, 2H), 3/45 (m, 2H)., 5,20 (s, 2H), 6,74 (s, 0,75H), 6,80 (s, 0,25H), 7,28 (s, IH)

LRMS: m/z 241,1 (MH⁺) .

Příprava 73

2-(Chlormethyl)-1-{[2-(trimethylsilyl)ethoxy]methyl} -1#-imidazol

K roztoku alkoholu (150 mg, 0,66 mmol) z Přípravy 74 v dichloromethanu (3,7ml) byl přidán triethylamin (0,138 ml, 0,99mmol). Potom byl přidán methanesulfonylchlorid (0,061 ml, 1,79 mmol) a reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny. Reakční směs potom byla zředěna vodou a extrahována

174

dichlormethanem (2 krát ) . Spojené organické exťraktvjby_ly__ vysušeny (Ná₂SO₄) a zfiltrovány. Malý podíl výsledného roztoku byl koncentrován za sníženého tlaku za vzniku vzorku titulní sloučeniny pro charakterizaci. Zbývající organický roztok byl koncentrován na malý objem (0,5 ml) a zředěn tetrahydrofuranem (5 ml). Tento organický roztok byl použit přímo v Přípravě 58.

^-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 0,00 (s, 9H) , 0,94 (t, 2H) , 3,52 (t, 2H) , 4,72 (s, 2H), 5,37 (s, 2H) , 7,01 (s, 2H) .

LRMS: m/z 247 (MH⁺)

Příprava 74 (1—{[2-(Trimethylsilyl)ethoxy]methyl}-lff-imidazol-2-yl)methanol

Roztok aldehydu (2,3 g, 10,2 mmol) z Přípravy 75 v •methanolu (30 ml) byl ochlazen na -20 °C. Borohydrid sodný (462 mg, 12,2 mmol) byl přidán po dávkách k míchanému roztoku a reakční směs se nechala ohřát.na teplotu místnosti během 1 hodiny. Reakce byla uhašena přídavkem vodného roztoku chloridu amonného a výsledná směs byla extrahována dichloromethanem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) , zfiltrovány a » ·

175

koncentrovány za sníženého tlaku za vzniku jtitulní___________ sloučeniny jako béžové pevné látky, 2,15 g, 93% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 4Q0 MHz) δ: -0,03 (s, 9H) , 0,90 (t, 2H),

3,52 (t, 2H), 4,71 (s, 2H) , 5,35 (s,2H), 6,94 (s, 1H), 6, 97 (s, 1H) .

Příprava 75

1-{ [2— (Trimethylšilyl) ethoxy]methyl}-lff-imidazol-2-

Hydrid sodný (463 mg, 60% disperze v minerálním oleji, 11,4 mmol) byl proprán hexanem pod atmosférou suchého dusíku.

Byl přidán N,N-dimethylformamid (15 ml), výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti a pak byl přidán imidazol-2karboxaldehyd (1 g, 10,4 mmol) po dávkách. Reakční směs potom byla míchána po dobu 1,5 hodiny, byl přidán 2-(trimethylšilyl)ethoxymethylchlorid (2,03 ml, 11,4 mmol) a výsledná směs byla potom míchána při teplotě místnosti podobu 18 hodin. Reakce byla uhašena přídavkem vodného roztoku chloridu amonného a výsledná směs potom byla extrahována ethylacetátem (2 krát ). Spojené organické extrakty byly vysušeny. (Na₂SO₄), filtrovány, koncentrovány za sníženého tlaku a. potom převedeny na azeotrop xylenem za vzniku titulní sloučeniny, 2,3 g, 98% výtěžek

176

^Ú-NMR^rCDClT, 400 MHz) δ: -0,03 (s, 9Ή) , 0,90 (t, 2H) , 3,55 (t, 2H), 5,77 (s, 2H), 7,32 (s, 1H) , 7,35 (s, 1H) , 9,84 (s, 1H) .

Příprava 76

4-Propyl-lff-imidazol

Směs 2-bromopentanalu (15 g, 91 mmol) (Bull, Chim, Soc, Fr, 1973, 1465) a formamidu (32 ml, 806 mmol) byla zahřívána na 180 °C, po dobu 8 hodin, potom se nechala ochladit.

Přebytek formamidu byl odstraněn vakuovou destilací, a zbytek rozdělen vodným, roztokem hydrogenuhličitanu sodného a ethylacetátem. Vrstvy byly odděleny a organická fáze byla koncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí gradientem rozpouštědla dichloromethan: methanol (93:7 až 90:10), za vzniku titulní sloučeniny, 9 g, 90% výtěžek ¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 0, 98 (t, 3H) , 1,67 (m,^; 2H) , 2,60 (t, 2H), 6,79 (s, 1H) , 7,25 (s, 1H) , 7,58 (s, 1H).

LRMS: m/z 221 (2M+H)⁺ ·· ····

177

Příprava 77 terč.-Butyl-N- (2-oxobutyl)karbamát

Ethylmagneziumbromid (1M roztok v tetrahydrofuranu, 13,7 ml, 13,7 mmol)) byl přidán k míchanému roztoku terč.-butyl-2- [methoxy (methyl) amino] -2-oxoethylkarbamátu (Synth, Commun, 1988, 18, 2273) (1 g, 4,58 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml) při 0 °C, potom míchán při 0 °C, po dobu 15 minut. Roztok se nechal ohřát na teplotu místnosti a byl míchán po dobu 45 minut. Byl přidán ethylacetát (5 ml) a následně nasycený roztok chloridu amonného. Vodná fáze byla extrahována ethylacetátem. Spojené organické extrakty byly proprány nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze potom byla vysušena (Na^SOJ, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu, elucí gradientem rozpouštědla hexan;ethylacetát (85:15 až 70:30), za zisku titulní sloučeniny jako bezbarvého«oleje, 730 mg, 84% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 1,10 (t, 3H) , 1,43 (s, 9H) , 2,45 (q, 2H), 4,01 (m, 2H), 5,22 (brs, 1H),

LRMS: m/z 187,9 (MH+) , 204,9 (MNH₄ ⁺)

TLC: hexan:ethylacetát (70:30) Rf=0,41

178

Přípravy 78 a 79

Sloučeniny v následující tabulce Příprav obecného vzorce:

O byly připraveny stejným způsobem, jako v Přípravě 77 š použitím terč.-butyl-2-[methoxy(methyl)amino]-2-oxoethylkarbamátu (Synth, Commun, 1988, 18, 2273 a vhodné Grignardovy výchozí látky

179

—
Τ3	Τ3
	LO		CN
	Ο		00
	•κ		V
			CN
	*»		-
	X		X
	CN		σν
	S.	X	κ
	ω	ιτ>	ω	X
		*»		Ρ
	CN	£	η	*»
	Γ-		’ζΓ	W
	X		κ
	m	ο	Ρ	β
				Λ
		Γ-
Ρ	X	1	X	tn
oj Ό		17	kO	OJ κ
’ 'φ			*.	tn
«	Γ	Ό
υ				*»
•Η	Ρ		ιη	X
Ρ		X	Ρ	CN
	κ.		χ.
Ρ	Ρ		Ρ -
Π3 β	kO	Ζ3	• I κ>	Ό
				Γ-~
	<—.	tr>		ο
	Ν	Ρ	Ν	X.
	X		X
	2	LO	2	X»
	ο		Ο
	ο		ο	X
	η	X	η	Ρ
		<Ν
	η		η
	ι—1		—i
	ο		U
	Q		Q
	Ο		Ο
	—*		'—'
	X		X
	2		2
	2		2
	X		X
	«—4		«Ή
Výtěžek (%)	CO LO	58
			rt
			χ·
			ο
	/—Α	>	-5
		/	/
03
>
(C
β		00
α		Γ-		Γ'
Ή
>β

180 ·· ···· • ·· *

'Příprava 80 terč.-Butyl (1S)-1-methyl-2-oxopropylkarbamát

Methylmagnesiumbromid (3,0 M roztok v diethyletheru, 4,3 ml, 12,9 mmol) by přidán k míchanému roztoku terč.-butyl-(1S)-2-[methoxy(methyl)amino]-l-methyl-2-oxoethylkarbamátu (Tetrahedron: Asymmetry 1996, 7, 985) (1 g, 4,3 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (20 ml) při -60 °C, pod dusíkovou atmosférou. Směs se nechala ohřát na 0 °C, a potom na teplotu místnosti a byla míchána při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Byl přidán nasycený vodný roztok chloridu amonného a vodná fáze byla extrahována diethyletherem (2 krát 76 ml). Spojené organické extrakty byly proprány nasyceným vodným roztokem chloridu amonného a solankou. Organická fáze byla potom vysušena (MgSO₄) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii, elucí gradientem rozpouštědla dichloromethan:methanol (99:1 až 98:2), za zisku titulní sloučeniny jako bezbarvé pevné látky, 412 mg, 51% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 300 MHz) δ: 1,35 (d, 3H) , 1,45 (s, 9H) , 2,20 (s, 3H), 4,30 (m, 1H) , 5,22 (br s, 1H).

·· ···· ·· ··«·

181

Příprava 81 (±)-2-Methoxy-l-methylethyl-4-methylbenzenesulfonát h₃c

CH,

Roztok l-methoxy-2-propanolu v dichloromethanu (2,3 g, 25,5 mmol) (25 ml) a pyridinu (5 ml) byl ochlazen na teplotu mezi -5 a 0 °C. 4-Methylbenzenesulfonylchlorid (5,35 g,

28,1 mmol) byl přidán po kapkách a směs byla míchána při 0 °C, 15 minut. Směs byla potom míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Potom byl přidán led a směs byla míchána 1 hodinu. Organická fáze byla oddělena, proprána 10% vodnou kyselinou sírovou (4 krát ) a vodou (1 krát ), a potom vysušena (MgSO₄) a zfiltrována. Filtrát byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu elucí dichloromethanem. Získaný roztok byl vysušen (MgSO₄) , filtrován a koncentrován za sníženého tlaku, za zisku titulní sloučeniny, jako bezbarvého oleje, 4,3 g, 69% výtěžek.

^XH-NMR (CDCl₃y 400 MHz) δ: 1,27 (d, 3H) , 2,43 (s, 3H), 3,23 (s, 3H), 3,37 (m, 2H), 4,70 (m, IH), 7,32 (d, 2H), 7,80 (d, 2H)

LRMS: m/z 262,0 (MNH₄ ⁺) ·« ·· Φ9ΦΦ

182 ·« φφφφ

Příprava 82

Methyl (25) -2- [ (terč, -butoxykarbonyl) amino] -3- [1- (4,-4, 4-trifluorbutyl)-lff-imidazol-4-yl]propanoát

Cesiumkarbonát (1,95 g, 6 mmol) a l-brom-4,4, 4-trifluorobutan (954 mg, 5 mmol) byl přidán k roztoku methyl- (2S) -2- [ (terč. -butoxykarbonyl) amino] -3- (lH-imidazol-4-yl)propanoátu (1,08 g, 4 mmol) v N,N-dimethylformamídu (5 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě 70 °C, po dobu 3 hodin. Chlazená směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek rozdělen ethylacetátem (150 ml) a vodou (50 ml). Vrstvy byly odděleny, organická fáze vysušena (MgSO₄) , filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím elučního gradientu cyklohexan:ethylacetát (100:0 až 0:100) za zisku titulní sloučeniny ve formě oleje, 840 mg, 55% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1,41 (s, 9H) , 2,01 (m, 4H) , 3,01 (m, 2H), 3,68 (s, 3H) , 3,98 (t, 2H) , 4,57 (m, IH) , 5,84 (m, IH), 6,66 (s, IH), 7,38 (s,.IH).

LRMS: m/z 380,3 (MH⁺) [a]_D=-0, 81 . (c 0,148-, methanol)

• · • · ·· ···& • · · • · ·

183 • ····

Příprava 83

Methyl-(25)-2-[( terč.-butoxykarbonyl)amino]-3-[1-(1,3-thiazol-5-ylmethyl)-ÍH-imidazol-4-yl]propanoát

-CH₃ ch₃ o

Titulní sloučenina byla získána jako olej v 20% výtěžku, z methyl (2S)-2-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-3-(lH-imidazol4-yl)propanoátu a 5-(chloromethyl)-1,3-thiazoluhydrochloridu (EP 373891), stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 82, s výjimkou toho, že jako eluční činidlo na koloně byl použit methanol:ethylacetát (10:90).

^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1,41 (s, 9H) , 3,03 (m, 2H) , 3,65 (s, 3H), 4,55 (m, ÍH), 5,22 (s, 2H), 5,86 (m, ÍH), 6,78 (s, ÍH), 7,01 (s, ÍH), 7,50 (s, 1H) , 8,80 (s, ÍH)

LRMS: m/z 367,1 (MH⁺)

Příprava 84

Methyl (2S)-2-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-3-(1-(2-(2-pyridinyl)ethyl]-lff-imidazol-4-yl}propanoát

184

Titulní sloučenina byla získána v 16% výtěžku, z methyl-(2S)-2-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-3-(lH-imidazol-4-yl)propanoátu a 2-(2-bromoethyl)pyridine hydrobromidu (J, Het,'Chem, 1973, 10, 39) stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 82, s výjimkou toho, že jako eluční činidlo na koloně byl použit methanol:ethylacetát.

*H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1,41 (s, 9H), 2,95 (m, IH), 3,03

(m,	IH), 3,18	(t, 2Hj, 3,65	(s, 3H), 4,32	(t,	2H), 4,50 (m,
IH) ,	5,80 (m,	IH) , 6,58 (s,	IH), 6,95 (d,	IH)	, 7,15 (m,
IH) ,	7,20 (s,	IH), 7,58 (m,	IH), 8,58 (d,	IH)
ERMS	: m/z 375,	2 (MH+)

Příprava 85

Methyl-(2S)-2-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-3-(1-fenyl-lffimidazol-4-yl)propanoát

O • · · · • ·

185

Fenylboronová kyselina (2,44 g, 20 mmol), octan měďný (2,72 g, 15mmol), molekulární síto 4 A (3 g) a pyridin (1,62 ml, 20 mmol) byly přidány k roztoku methyl-(2S)-2-[(terč.-but oxy karbonyl) amino] - 3- (lH-imidazol-4-yl) propanoát (2,69 g, 10 mmol) v dichloromethanu (60 ml), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti při současném probublávání stlačeným vzduchem, 2 dny, pak byl přidán roztok ethylenediamintetraoctové kyseliny (5 g, 17 mmol) v nasyceném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (200 ml) a směs byla míchána při teplotě místnosti 20 minut. Fáze byly odděleny, vodná fáze byla extrahována dichloromethanem (2 krát Ί00 ml), a spojené organické extrakty byly vysušeny (MgSO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Zbytek byl převeden na azeotrop s toluenem (300 ml) a potom přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím elučního gradientu pentan:ethylacetát (100:0 až 40:60), za zisku titulní sloučeniny jako žluté pryskyřice, 1,87 g, 52% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1,42 (s, 9H), 3,05-3,19 (m, 2H),

3,72 (s, 3H), 4,60 (m, 1H), 5,84 (m, 1H), 7,04 (s, 1H) ,

7,36 (m, 3H), 7,46 (m, 2H), 7,78 (s, 1H)

LRMS: m/z 346, 1 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 60, 59; H, 6,56; N, 11,57, Ci8H2₃N₃O₄ ..

0,75 H₂O požadováno C, 60,24; H, 6,88; N, 11,71 %. [a]_D=+10,64 (c 0,126, methanol)

Příprava 86

Methyl-(25)-2-amino-3-[1-(4,4,4-trifluorbutyl)-IH-imidazol4-yl]propanoátdihydrochlorid

186 • ·

4M kyselina chlorovodíková v dioxanu (5 ml) byla přidána k chráněnému aminu z Přípravy 82 (830 mg, 2,19 mmol), v ledem chlazené baňce. Roztok se nechal ohřát na teplotu místnosti a byl míchán po dobu 3 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku, zbytek byl převeden na azeotrop s ethylacetátem (3 krát 100 ml), potom vysušen ve vakuu, za zisku titulní sloučeniny jako bílé pěny v kvantitativním výtěžku ^-NMR (D₂O, 400 MHz) δ: 2,00-2,19 (m, 4H) , 3,28 (m, 2H) , 3,70 (s, 3H), 4,17 (t, 2H), 4,37 (t, 1H), 7,40 (s, 1H) ,

8„ 62 (s, 1H)

LRMS: m/z 280, 1 (MH⁺) [oí]_d=+14,60 (c 0,1, methanol)

Příprava 87

Methyl-(2S)-2-amino-3-[l-fenyl-lH-imidazol-4-yl]propanoátdihydrochlorid

Titulní sloučenina byla získána v 90% výtěžku jako žlutá pevná látka, po trituraci z diethyletheru, z chráněného aminu z Přípravy 85, stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 86.

^H-NMR (D₂O, 400 MHz)' δ: 3,40 (m, 2Ή), 3,77 (s, 3H), 4,42 (t, 1H), 7,50 (m, 5H), 7,77 (s, 1H), 9,00 (s, 1H).

LRMS: m/z 246 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 47,86; H, 5,51; N, 12,61, Ci3Hi7N₃O₂Cl₂ . 1,0 H₂O požadováno C, 47,72; H, 5,54; N, 12,84 % [oí]d=+12,55 (c 0,11, methanol)

Příprava 88

Methyl-(25)-2-amino-3-[1-(1,3-thiazol-5-ylmethyl)-lfí-imidazpl-4-yl]-propanoátdihydrochlorid

188

4M kyselina chlorovodíková v dioxanu (6 ml) byla přidána k chráněnému aminu z Přípravy 83 (1,3 g, 3,5 mmol) v ledem chlazené baňce. Potom byla přidána voda (5ml)a následně koncentrovaná kyselina chlorovodíková a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a převedena na azeotrop s ethanolem za zisku titulní sloučeniny, 1,2 g, 100% výtěžek

XH-NMR (CD3OD,	400 MHz) δ: 3,30-3,46	(m,	2H), 3,81	(s, 3H),
4,43'(m, 1H),	5, 62	(s,	2H) , 7,63 (s,	1H)	, 7,95 (s,	1H),
9,10 (s, 1.H),	9, 18	(s,	1H) .

LRMS: m/z 267,0 (MH⁺) [a]_D=+14,60 (c 0,1, methanol)

Příprava 89

Methyl-(25)-2-amino-3-{1-[2-(2-pyridinyl)ethyl]-1Himidazol-4-yl}propanoátdihydrochlorid

O • · · · · • ·

189

Titulní sloučenina byla získána jako pryskyřice v 95% výtěžku, z chráněného aminu z Přípravy 84, postupem popsaným v Přípravě 88 ^XH-NMR (D₂0, 400 MHz) δ: 3,30 (m, 2H) , 3,58 (m, 4H) , 3,70 (s, 3H), 4,36 (m, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,78 (d, 1H) , 7,85 (dd, 1H), 8,41 (dd, 1H), 8,61 (m, 2H).

LRMS: m/z 275, 1 (MH⁺)

Příprava 90

Methyl (2S)-2-({2-[(terč.-butoxykarbonyl) -amino]ethyl}amino)-3-(l-methyl-lH-imidazol-4-yl)propanoát

Methyl (25) -2-amino-3- (l-methyl-l.ří-imidazol-4-yl)propanoátdihydrochlorid (1,06 g, 4 mmol), octan sodný (1,3 g, 16 mmol) a molekulární síta 4 Á (500 mg) byly přidány k roztoku terč.-butyl-N-(2-oxoethyl)karbamátu (637 mg, 4 mmol) v methanolu (10 ml) a roztok byl míchán po dobu 10 minut. Potom byl přidán kyanoborohydrid sodný (1,3 g, 16 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 72 hodin. Pak byla přidána 2M kyselina chlorovodíková (2 ml) a voda (50 ml) a roztok byl poté bazifikován s použitím nasyceného hydrogenuhličitanu sodného. Směs byla extrahována ethylacetátem (5 krát 100 ml), Spojené organické extrakty byly vysušeny (MgSO₄), filtrovány a • · · · • · koncentrovány za sníženého tlaku. Surový produkt byl prečisťěn^-kolonovou chromatografií s použitím elučního gradientu ethylacetát:methanol:diethylamin (100:0:0 až

96:2:2) za zisku titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje,

220 mg, 17% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1,41 (s, 9H) , 2,62 (m, 1H) , 2,77-2, 86 (m, 2H), 2,98 (dd, 1H), 3,18 (m, 2H) , 3,60 (m, 4H), 3,70 (s, 3H), 5,38 (m, 1H), 6,63 (s, 1H), 7,34 (s,

1H) .

LRMS: m/z 327,2 (MH⁺) [a]_D ^-l,48 (c 0,108, methanol)

190

Příprava 91

Methyl (2S)-2-({2-[(terč.-butoxykarbonyl)-amino] ethyl}amino)-3-[1-(4,-4,4-trifluorobutyl)-lH-imidazol-4-yl]propanoát

Molekulární síta 4 Á, (500 mg) a terč.-butyl-N-(2-oxoethyl)karbamát (350 mg, 2,2 mmol) byly přidány k roztoku aminu z Přípravy 86 (780 mg, 2,2 mmol) v methanolu

191 (5 ml), a směs byla míchána po dobu 20 minut. Potom byl přidán kyanoborohydrid sodný (276 mg, 4,4 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Byla přidána 2M kyselina chlorovodíková (5 ml), směs potom byla neutralizována s použitím roztoku hydrgenuhličitanu sodného a filtrovány přes Arbocel®. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek rozdělen ethylacetátem (100 ml) a vodou (20 ml). Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla vysušena (MgSO₄), filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu s použitím elučního gradientu ethylacetát:methanol (100:0 až 90:10) za zisku titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje, 300 mg, 32% výtěžek.

XH-NMR (CDC13, 400	MHz)	δ: 1
(m, IH), 2,78-2,92	(m,	2H) ,
3,60 (t, IH) , 3,68	(s,	3H) ,
6,70 (s, IH), 7,38	(s,	IH)

LRMS: m/z 423,2 (MH⁺) [oí]_d=+2,0 (c 0,1, methanol;

• · • ·

192

Přípravy 92 až 94 *

Následující sloučeniny obecného vzorce:

byly připraveny z příslušných aminů (Přípravy 87-89) a terč.-butyl-N-(2-oxoethyl)karbamát, stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 91.

cn σ\

e

Ή

4-) •Η >Ν

Ο α, «

ι—I <υ cn Π3 Λ4 Ή ι—I •Η ω (0 c

Ή •Η

4-1 ίθ

Í4

CP

Ο

4-) ίθ ε

ο >4 χ:

υ ο

>

ο c

ο

Ι~I ο

C «υ

4-1 >ω •Η >υ ο

>ί4

ÍX (U ι—1 '(0 Ό >,

Ό

4- > .V 3 Ό Ο

5- I di

I ethylacetátu:methanolu:diethylaminu (90:5:5) jako elučního Činidla

2-Produkt byl přídavně přečištěn kolonovou chromatografii na reverzní fázi polystyrén-gel s použitím vody:methanolu (100:0 až 0:100) jako elučního činidla.

·· ····

194

Příprava 95 (75)-2-Benzyl-6-(2-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]ethyl}-7-(methoxykbonyl)-5-oxo-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5—c]pyrimidin-2-iumbromid

Benzylbromid (119 μΐ, 1 mmol) byl přidán k roztoku sloučeniny z Přípravy 48 (270 mg, 0,8 mmol) v acetonitrilu (5 ml) a směs byla zahřívána na 60 °C po dobu 18 hodin. Ochlazená směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu s použitím elučního gradientu dichloromethan:methanol (100:0 až 90:10) za zisku titulní sloučeniny, 299 mg, 59% výtěžek.

¹H-NMR (DMSOd,sub,6, 400 MHz) δ: 1,28 (s, 9H) , 3,18 (m,

3H), 3,42 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 3,95 (m, 1H) , 4,85 (m,

1H), 5,42 (dd, 2H), 6,94 (m, 1H), 7,38-7,48 (m, 5H), 7,64 (s, 1H), 10,08 (s, 1H).

LRMS : m/z 430 (M+) [a]_D=+42,09 (c 0,096, methanol)

195 •ti ···· • tititi

Příprava 96 l-Isopentyl-lff-imidazol-4-karboxaldehyd

Směs hydridu sodného(20 g, 60% disperze v minerálním oleji, 0,5 mol) v tetrahydrofuranu (300 ml) byla ochlazena na 0 °C a 2-imidazolkarboxaldehyd (45 g, 0,47 mol) byl přidán po dávkách během 30 minut. Když bylo přidávání dokončeno, reakční směs byla míchána při 0 °C, po dobu 30 minut, potom se nechala zahřát na teplotu místnosti. Byl přidán.1-brom-3-methylbutan (60,8 ml, 0,5 mol) a 18-crown-6 (140 mg) a reakční směs byla zahřívána k refluxu po dobu 18 hodin. Ochlazená reakční směs byla uhašena přídavkem vody (400 ml) , a výsledná směs byla extrahována dichloromethanem (800 ml celkem). Spojené organické extrakty byly vysušeny (MgSOU a odpařeny za sníženého tlaku. Zbylý oranžový olej byl přečištěn kolonovou chromatografíi s použitím elučního gradientu ethylacetát:pentan:methanol (40:60:0 až 100:0:0 až 98:0:2) za zisku titulní sloučeniny, 19,6 g.

K dalšímu přečištění znečištěných frakcí byla využita kolona se silikagelem Biotage®, a jako eluční činilo byl použit ethyl acetát:cyklohexan (40:60), čímž bylo získáno dalších 11,4 g titulní sloučeniny. Kombinace dvou získaných dávek poskytla 31 g titulní sloučeniny, 41% výtěžek »· ·«·· ·· ···· • · ·

196 ^-NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0,90 (d, 6H) , 1,52 (m, 1H) , 1,63 (dt, 2H), 3,97 (t, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 9,80 (s, 1H) .

LRMS: m/z 189 (MNa,⁺)

Anal. nalezeno: C, 63,73; H, 8,43; N, 16,36, CgHi4N₂O;0,2 H₂O požadováno C, 63,65;, 8,55; N, 16,50 %

Příprava 97 terč.-Butyl-3-[hydroxy(l-isopentyl-lH-imidazol-4-yl)methyl]-2-oxo-1-piperidinkarboxylát

Lithium diisopropylamid (6,5 ml, 2M v heptanu/tetrahydrofuranu/ethylbenzenu, 13 mmol)byl přidán po kapkách během 5 minut k chlazenému (-78,°, C, ) roztoku terč.-butyl 2-oxo-l-piperidinekarboxylátu (J, Org, Chem,, 1983, 48, 2424; J, Chem, Soc,, I, 1989, 721) (2,6 g, 13 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml), za současného udržování teploty pod -70 °C. Když byla adice dokončena, byl roztok míchán po dobu 30 minut, potom se nechal ohřát na -10 °C a byl míchán po dalších 30 minut, potom byl znovu ochlazen na -78 °C. Pak byl přidán roztok aldehydu z Přípravy 96 (1,66 g, 10 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml)byl přidán po kapkách při teplotě udržované pod -70 °C, a když bylo přidávání ·· ·«·· • ·

197 dokončeno, reakční směs byla míchána 30 minut. Nasycený roztok chloridu amonného (30 ml) přidán ke směsT, která'~se~“ potom nechala ohřát na teplotu místnosti a potom byla rozdělena vodou a ethylacetátem. Vrstvy byly odděleny, vodná fáze byla extrahována ethylacetátem, a spojené organické extrakty byly vysušeny (MgSO₄) , filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Výsledný žlutý olej byl přečištěn kolonovou chromatografií s použitím elučního gradientu ethylacetát:diethylamin:methanol (100:0:0 až 88:6:6) za zisku titulní sloučeniny, 1,1 g, 30% výtěžek.

¹H-NMR (CDCI3, 400 MHz) (směs diastereomerů) δ: 0,90 (d,

6H), 1,46-1,64 (m, 13H), 1,76 (m, 3H), 2,98 (m, IH), 3,52 (m, IH), 3,74 (m, IH), 3,84 (t, 2H), 4,08, 4,90 (2 krát m, IH), 4,58, 5,34 (2 krát m, IH), 6,85 (2 x s, IH), 7,35 (2 x s, IH).

LRMS: m/z 388 (MNa,⁺)

Příprava 98

3-[Hydroxy(l-isopentyl-lH-imidazol-4-yl)methyl]-l-methyl-2-piperidinon

198 ·..··..· .............

Titulní sloučenina byla získána v 67% výtěžku z aldehydu z Přípravy 96 a l-methyl-2-piperidínbnu7 postupem, jako byl popsán v Přípravě 97 ^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) (směs diastereomerů) δ: 0,88 (2 krát d, 6H), 1,35-1,82 (m, 7H), 2,67, 2,81 (m, 1H), 2,88, 2,94 (2 x s, 3H), 3,18, 3,22 (m, 2H), 3,84- (t, 2H) , 4,78 (m, 1H), 5,04 (m, 1H), 6,83 (2 x s, 1H) , 7,32 (2 x s, 1H). LRMS: m/z 302 (MNa⁺)

Příprava 99 terč.-Butyl-3-[hydroxy(l-propyl-lfl-imidazol-4-yl)methyl]-2-oxo-1-piperidinekarboxylát

Lithium bis(trimethylsilyl)amid (244 ml, 1M v tetrahydrofuranu, 244 mmol) byl přidán po kapkách během hodiny k ochlazenému (-75,°, C,) roztoku terč.-butyl-2-oxo-l-piperidinekarboxylátu (J, Org, Chem, 1983, 48, 2424; J, Chem, Soc, I, 1989, 721) (48,7 g, 244 mmol) v tetrahydrofuranu (200 ml) pod dusíkem, při teplotě udržované pod -70 °C. Směs byla zahřáta na 0 °C, míchána 90 minut, potom byla znovu ochlazena na -75 °C, byl přidán roztok imidazolu z Přípravy 66 (26,0 g, 188 mmol) v • Φ ·«·*

199 ·· ···· • · · • Φ • · · φ φ • · · · φφφφ · « · · · · • ···« ·· »« tetrahydrofuranu (86 ml) po kapkách během 30 minut a když bylo přidávání dokončeno, byla reakční směs míchána 2 hodiny při -75 °C. Směs byla nalita do 15% vodnému.roztoku kyseliny citrónové (650 ml), a extrahována ethylacetátem (3 krát 250 ml) .. Vodný roztok byl upraven na pH 8 s použitím 10% hydroxidu sodného, a extrahován dichloromethanem (3 krát 250 ml). Tyto organické extrakty byly vysušeny a byly koncentrovány za sníženého tlaku za vzniku titulní sloučeniny jako žluté pevné látky, 54,1 g.

Výše uvedené ethylacetátové extrakty byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku a zbytek byl znovu suspendován v 10% vodném roztoku kyseliny citrónové (100 ml).Ty byly extrahovány ethylacetátem (3 krát 50 ml) a bylo upraveno na pH 8 s použitím 10% roztoku hydroxidu Sodného. Vodný roztok byl extrahován dichloromethanem (3 krát 50 ml) a organické byly vysušeny odpařením za sníženého tlaku za vzniku dalšího množství produktu, jako světle žluté pevné látky, 22,4 g. Celkový výtěžek titulní sloučeniny 76,5 g, 93% výtěžek

XH-NMR (CDC13,	300	MHz)	(směs diastereomerů) δ: 0,88 (t,
3H), 1,52 (s,	9H),	1,78	(m, 6H), 3,00 (m, IH) , 3,58 (m,
2H), 3,74 (m,	IH) ,	3, 82	(t, 2H), 5,38 (d, IH), 6,87 (s,
IH), 7,38 (s,	IH)

Příprava 100 terc.-Butyl 3-[hydroxy(l-trityl-lH-imidázol-4-yl)methyl]-2-oxo-l-piperidinekarboxylát

Lithium diisopropylamid (8 ml, 1,5M v cyklohexanu, 12 mmol) byl přidán po kapkách během 5 minut k ochlazenému (—78 °C) roztoku terč.-butyl 2-oxo-l-piperidinekarboxylátu (J, Org, Chem, 1983, 48, 2424; J, Chem, Soc, I, 1989, 721) (1,99 g, mmol) v tetrahydrofuranu (40 ml), při teplotě udržované pod -70 °C. Když bylo přidávání dokončeno, byl roztok míchána po dobu 20 minut, pomalu byl přidán roztok 1-trityl-imidazol-4-karboxaldehydu (J, Med, Chem, 1977, 20, 721) (4,06 g, 12 mmol) v tetrahydrofuranu (60 ml) a když bylo přidávání dokončeno, reakční směs byla míchána při -78 °C, po dobu 2 hodin. Byl přidán nasycený vodný roztok chloridu amonného (50 ml), směs se nechala ohřát na teplotu místnosti a potom byla rozdělena vodou (50 ml) a ethylacetátem (300 ml). Fáze byly odděleny, organická vrstva byla vysušena (MgSO₄) , zfiltrována a koncentrována za sníženého tlaku, za vzniku titulní sloučeniny, 5,3 g,

99% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) (směs diastereomerů) δ: 1,50. (2 krát s, 9H), 1,60-1,81 (m, 4H), 3,00 (m, 1H), 3,58 (m,

1H), 3,74 (m, 1H), 4,10, 4,90 (2 x m, 1H) , 4,62, 5,40 (2 x m, 1H) , 6,80 (2 krát s, 1H) , 7,14 (m, 6H) , 7,25-7, 40 (m, 10H) .

LRMS: m/z 538 (MH⁺)

201

Příprava 101 terč. -Butyl (3E) -3- [ (l-isopentyl-lH-imidazčl-4-yl)methylen]-2-oxo-l-piperidinkarboxylát

Triethylamin (1,25 ml, 9,0 mmol) a methansulfonyl chlorid (256 μΐ, 3,3 mmol) byl přidán k roztoku sloučeniny z Přípravy 97 (1,1 g, 3,0 mmol) v dichloromethanu (15 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl nalit do vody (200 ml), a extrahován ethylacetátem (300 ml). Organický extrakt byl vysušen (MgSO₄), zfiltrován koncentrován za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu, s použitím elučního gradientu pentan:ethylacetát (25:75 až 0:100) za zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 430 mg, 41% výtěžek.

¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 0,92 (d, 6H) , 1,52 (s, 9H) , 1,56 (m, IH), 1,64 (m, 2H), 1,88 (m, 2H), 3,03 (t, 2H) , 3,73 (dd, 2H), 3,92 (t, 2H) , 7,05 (s, IH) , 7,45 (s, IH) , 7,62 (s, IH).

LRMS : m/z 348,1 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 65, 47; H, 8,49; N, 12,05, C19H29N3O3 požadováno C, 65,68; H, 8,41; N, 12,09 % ·· ··· ·

202

Příprava 102 (3E) -3 - [(l-Isopentyl-lff-imidazol-4-yl)methylen]-l-methyl-2-piperidinon a

(3Z)-3-[(l-Isopentyl-l#-imidazol-4-yl)methylen]-l-methyl-2-piperidinon

titulní sloučenina byla získána jako žlutá pevná látka v 46% výtěžku, ze sloučenin z Přípravy 98, stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 101, s výjimkou toho, že jako eluční činidlo byl použit ethyl acetát:diethylamin:methanol (100:0:0 až 96:2:2).

^-NMR (CDC13,	400 MHz)	δ (směs isomerů): 0,94 (d, 6H) ,
1,58 (m, 1H) ,	1,70 (m,	2H), 1,92 (m, 2H), 3,03 (s, 3H),
3,12 (m, 2H),	3,40 (t,	2H), 3,97 (t, 2H), 7,02 (s, 1H),
7,48 (s, 1H),	7,58 (s,	1H) .
LRMS: m/z262	(MH+)

Příprava 103 • · • · ·

203 terč.-Butyl (3E)-2-oxo-3-[(l-trityl-lH-imidazol-4-yl)methylen]-1-piperidinkarboxylát a

terč.-Butyl (3Z)-2-oxo-3-[(l-trityl-lff-imidazol-4-yl)methylen]-1-piperidinkarboxylát

Triethylamin (2,78 ml, 20,0 mmol) a methansulfonyl chlorid (773 μΐ, 10,0 mmol) byl přidán k ledem chlazenému roztoku sloučeniny z Přípravy 100 (5,3 g, 10,0 mmol) v dichloromethanu (50 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin a další 4 hodiny pod refluxem. Ochlazený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím elučního gradientu toluen:ethylacetát (100:0 až 20:80) za zisku titulní sloučeniny, 2,6 g, 50% výtěžek ¹H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ (směs isomeru): 1,54 (2 krát s, 9H), 1,85 (m, 2H) , 3,00 (t, 2H) , 3,68 (t, 2H) , 6,99 (s,

IH), 7,10 (m, 6H), 7,30 (m, 9H), 7,44 (s, IH) , 7,58 (s, IH) LRMS: m/z 520,1 (MH⁺)

Anal. nalezeno: C, 76, 40; H, 6,51; N, 7,85, C33H33N3O3 požadováno C, 76,28; H, 6,40; N, 8,09 %

• ····

204

Příprava 104 (2E) -2- { 3- [(terč.-Butoxykarbonyl)amino]propyl}-3-(1-propyllH-imidazol-4-yl)-2-propenovž kyselina ch₃

Roztok hydroxidu sodného (171,3 g, 4,28M) ve vodě (4,55 1) byl přidán k roztoku sloučeniny z Přípravy 53 (455 g, 1,42M) v tetrahydrofuranu (2,275 L), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Šměs byla koncentrována za sníženého tlaku k odstranění tetrahydrofuranu a zbývající vodný roztok byl upraven na pH = .5 s použitím ledové kyseliny octové. Výsledný precipitát se nechal krystalizovat v ledové lázni po dobu 1 hodiny, potom byl filtrován, proprán vodou a vysušen za vakua. Tato pevná látka byla rekrystalizována z isopropanolu a vody za zisku titulní sloučeniny ve formě · bílé pevné látky, 304 g, 63% výtěžek.

XH-NMR (DMSOd,sub,6, 400	MHz) δ: 0,81	(t,	3H), 1,38	(s,
9H), 1,56 (m, 2H), 1,74	(m, 2H), 2,75	(t,	2H), 2,93	(m,
2H), 3,95 (t, 2H), 6,97	(bs, 1H.) , 7,37	(s	, 1H), 7,52	(s,
1H), 7,76 (s, 1H), 12,02	(bs, 1H)

Příprava 105 (i)-teřc.-Butyl-3-[(l-isopentyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]-2-oxo-l-piperidinkarboxylátu

Alken z Přípravy 101 (430 mg, 1,25 mmol) a 10% palladium na dřevěném uhlí (Degussa® 101) (100 mg) v ethanolu (10 ml) byl hydrogenován při 60 psi a teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Směs byla filtrována přes Arbocel®, promytý ethanolem. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku, za vzniku titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje, 420 mg,

97% výtěžek

XH-NM	R (CDC13,	400	MHz)	δ: 0,89 (d, 6H), 1,50 (m, 10	Η) ,
1, 62	(m, 4H),	1,78	(m,	1H) , 1, 98 (m, 1H) , 2, 63 (dd,	1H) ,
2,77	(m, 1H),	3, 15	(dd,	1H), 3,54 (m, 1H), 3,70 (m,	1H) ,
3,81	(t, 2H),	6, 68	(s,	1H), 7,30 (s, 1H)
LRMS:	m/z 350	(MH+)

Příprava 106 (±)-3-[(l-Isopentyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]-1-methyl-2-piperidinon

Titulní sloučenina byla získána jako bezbarvý olej v 24% výtěžku, z alkenů z Přípravy 102, stejným způsobem, jako byl popsán v Přípravě 105, s výjimkou toho, že produkt byl přídavně přečištěn kolonovou chromatografií na silikagelu s použitím elučního gradientu ethylacetát:diethylamine:methanol (100:0:0 až 90:5:5).

^TH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 0,94 (d, 6H) , 1,55 (m, 1H) , 1,62 (m, 3H), 1,75 (m, 2H), 1,86 (m, 1H), 2,60 (m, 1H), 2,73 (dd, 1H), 2,94 (s, 3H), 3,22 (m, 3H),'3,85 (t, 2H) , 6,69 (s, 1H), 7,35 (s, 1H).

LRMS: m/z 264 (MH⁺)

Příprava 107 (±) -terč.-Butyl 3-(lff-imidazol-4-ylmethyl)-2-oxo-l-piperidinkarboxylát

N

O

207 • · · · ·

Směs alkenů z Přípravy 103 (2,4 g, 4,6 mmol) a 10% palladium na dřeveném uhlí (Degussa® 101) (200 mg) v ethanolu (400 ml) byla hydrogenována při 50 °C, a 60 psi po dobu 18 hodin, TLC analýza ukázala zbývající výchozí látky,proto bylo přidáno 10% palladium na dřevěném uhlí (Degussa® 101 ) (100 mg), a směs byla hydrogenována po dalších 72 hodin. Směs byla filtrována přes Arbocel®, a filtrát byl koncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu s použitím elučního gradientu dichloromethan:ethylacetát:methanol (100:0:0 až 0:100:0 až 0:90:10) za zisku titulní sloučeniny jako pevné látky, 1,2 g, 93% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1, 46-1, 62 (m, 10H) , 1,81 (m,

2H), 1,98 (m, ÍH), 2,66 (m, ÍH), 2,95 (m, 2H) , 3,55 (m,

ÍH), 3,78 (m, ÍH), 6,80 (s, ÍH), 7,24 (s, ÍH) , 7,50 (s, ÍH) LRMS: m/z 280 (MH⁺)

Příprava 108 (±)-terč.-Butyl-2-oxo-3-[(l-fenyl-lff-imidazol-4-yl)methyl]1-piperidinkarboxylát

N

N

• ·

208

Fenylboronová kyselina (366 mg, 3 mmol),molekulární síto 4 Ά (1 g), octan měďný (408 mg, 2,25 mmol) a pyridin (243 μΐ, 3 mmol) byl přidán k roztoku imidazolu z Přípravy 107 (419 mg, 1,5 mmol) v dichloromethanu (10 ml), a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 4 hodin v přítomnosti pomalého proudu stlačeného vzduchu. Proud vzduchu byl potom zastaven, a reakční směs byla míchána po dalších 18 hodin při teplotě místnosti, byl přidán roztok ethylenediamintetraoctové kyseliny (2 g) ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu sodného (10 ml), směs byla míchána po dobu 10 minut, potom zředěna dichloromethanem (100 ml). Vrstvy byly odděleny, organická fáze byla vysušena (MgSOJ a koncentrována, za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn kolonovou chromatografii na silikagelu s použitím elučního gradientu ethylacetát:pentan (50:50 až 80:20) za zisku titulní sloučeniny jako pryskyřice, 253 mg, 47% výtěžek.

^XH-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 1,52 (s, 9H) , 1,81 (m, 2H), 2,05 (m, 1H), 2,78-2,90 (m, 2H), 3,22 (dd, 1H) , 3,58 (m, 1H),

3.77 (m, 2H), 7,11 (s, 1H), 7,36 (m, 3H), 7,42 (m, 2H) ,

7.77 (s, 1H)

LRMS: m/z 356,1 (MH⁺)

Příprava 109 (í)-5-[(terč.-Butoxykarbonyl)amino]-2-[(1-propyl-lH-imidazol-4-yl-)methyl]pentanová kyselina • ’·

209

A směs sloučeniny z Přípravy 104 (302 g, 0,895M) a 5% palladium na dřevěném uhlí (30 g) v ethanolu (3,0 L) byla hydrogenována při 60 psi a 60 °C po dobu 18 hodin.

Ochlazená reakční směs byla zfiltrována přes Arbocel® a filtrát byl odpařen za sníženého tlaku za vzniku bezbarvého oleje. Ten byl krystalizován z ethylacetátu a pentanu, za zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 291,7 g, 96% výtěžek.

¹H-NMR (CPC1₃, 300 MHz) δ: 0,90 (t, 3H) , 1,42 (m, 10 Η) ,

1,58 (m,2H), 1, 66-1,86 (m, 3H), 2,70 (m, IH) , 2,83 (d, 2H), 3,10 (m,2H), 3,84 (t, 2H), 4,63 (bs, IH), 6,68 (s, IH), ,49 (s, IH)

Příprava 110 (2S) -5-[(terč.-Butoxykarbonyl)amino]-2-[(1-propyl-lfíimidazol-4-yl)methyl]pentanová kyselina a chinidin

210 • ····

Směs kyseliny z Přípravy 104 (20 g, 59 mmol), chinidin (19,23 g, 59 mmol) a methanol (160 ml) v tlakové nádobě byla propláchnuta dusíkem a potom vodíkem při tlaku 3 psi, Nádoba byla zahřívána na 60 °C, roztok [(R)-iPrFerroLANE Rh(COD)]BF₄ (Chirotech Technology Limited) (9,8 mg, 0,012 mmol) v dezoxidovaném methanolu (1 ml) byl přidán, a reakční směs byla hydrogenována při 145 psi po dobu 40 hodin. Ochlazený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a surový produkt byl rozpuštěn v ethylacetátu, a zahříván na 60 °C. Při ochlazení na teplotu místnosti a míchání, byl o pozorováno srážení a pevná látka byla odfiltrována a vysušena ve vakuu za zisku titulní.sloučeniny, 29,8 g, 76% výtěžek (94% ee stanovený CE) .

Alternativní metoda syntézy titulní sloučeniny z Přípravy

110

Směs kyseliny z Přípravy 109 (50 g, 147 mmol) a chinidin (47,8 g, 147 mmol) v ethylacetátu (1,75 L) byla zahříván na 50 °C, v parní lázni, až do získání roztoku. Roztok byl zahřát na 60 °C, zahřívání bylo ukončeno a roztok se nechal ochladit, potom byl míchán teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Výsledná sraženina byla odfiltrována, proprána ethylacetátem a vysušena 80 °C, ve vakuu za zisku titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky, 45,1 g, 46% výtěžek ¹H-NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 0,83 (t, 3H), 1,10-1,20 (m, 1H) , 1,40 (s, 9H)> 1,45-1,62 (m, 5H), 1,65-1,80 (m, 4H), 1,88 (m, 1H), 2,37 (m, ÍH), 2,50-2, 64 (m, 3H) , 2,84 (m, 1H),

3,00-3,14 (m, 3H), 2,21 (m, ÍH), 3,39 (m, ÍH), 3,80 (m,

2H) , 3,96 (m, 4H), 5,17-5,25 (m, 2H), 5,91 (m, ÍH) , 6,07·· ···

6,18 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,43 (dd, 1H),

7,57 (s, 1H) , 7,7 6 (d, 1H) , '7,98 (d, 1H) , 8, 72 (d, 1H) ~

LRMS: m/z 340 (MH⁺) , 325 (chinidinH⁺)

Anal. nalezeno: C, 65,82; H, 8,17; N, 10,32, C37H53N5O6 . 0,5 H2O požadováno 66,05; H, 8,09; N, 10,41 % [a] _D=+121,36 (c 0,15, methanol)

Claims (59)

1. Ρ A Τ Έ Ν Τ Ό V É Ν Á.R' ΟΚΪ

   Λ 001 -7 Μ

   1. Sloučenina obecného vzorce I, (Ο kde

   X je N nebo CH;

   n j ě 0 a ž 3 ; R¹ !^e a) C1-6 alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem, b) C1-6 alkenyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem, c) C1-6 alkynyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem d) heterocyklyl, e) aromatický heterocyklyl, f) aryl,

   g) vodík, kde každá ze skupin (a), (b), (c) a (d) je případně substituována skupinou vybranou ze souboru, který tvoří C3-7 cykloalkyl, aryl, aromatický heterocyklyl, heterocyklyl, OR¹¹, NRⁿR¹², S(O)PR^U, OC(O)Rⁿ, CO2R¹¹, CONR¹¹R¹², SO2NR¹¹R¹², halogen nebo NHSO2R¹¹,

   213 kde R¹ může být připoj eňo v kterékoliv poloze imidazolového kruhu

   R² a R³ je každý nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří vodík, Ci-5 alkyl případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹ nebo halogen, nebo

   R² a R³ mohou společně tvořit řetězec, kterým je

   C2-C6 alkylen,

   R⁴ je vodík, C1-6 alkyl, případně substituovaný skupinou Vybranou ze souboru, který tvoří C3..7 cykloalkyl, aryl, OR¹¹, halogen a R¹¹, nebo

   R⁴ a R¹⁰ mohou být spojeny a tvořit C1-4 alkylen, případné substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří, OR¹¹, halogen a R^u,

   R⁵ a R⁶ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který tvoří: vodík, aryl, Ci_₆ alkyl, kde uvedený alkyl je případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru který tvoří C3-7 cykloalkyl, aromatický heterocyklyl, heterocyklyl, aryl, OR¹¹, R¹¹ nebo halogen nebo

   R¹⁰ a jeden z R⁵ nebo R⁶ mohou.společně tvořit řetězec, kterým je C1-3 alkylen, případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, halogen, R¹¹ a aryl, nebo R⁵ a R⁶ může společně tvořit C₂-6 alkylenový řetězec

   R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří: vodík, C1-6 alkyl případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru který tvoří OR¹¹, halogen, aryl a R¹¹ nebo R⁷ a R⁸ společně tvoří řetězec, kterým je C2-6 alkylen,

   R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří:

   ·· ···· ·· ····

   214 vodík, C(NR^XX)NR^XXR^X2, Cx-₆ alkyl, kde alkyl je případně substituován skupinou vybranou ze souboru který tvoří OR¹¹, halogen, aryl a R¹¹ nebo

   R⁹ a R¹⁰ společně tvoří řetězec, kterým je C₂-6 alkylen,

   R¹¹ a R¹² jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a Ci-6 alkyl, nebo mohou tvořit skupinu NR^XXR¹², R^xx a R¹² mohou společně tvořit řetězec, kterým je C₂-6 alkylen, p je 0, 1 nebo 2, kde aryl je definován jako 6- až 14-členný aromatický karbocyklyl případně substituovaný skupinou vybranou ze souboru, který tvoří R¹¹, halogen, OR¹¹, NR^X1R¹², NR^XXCO2R¹², CO2R^XX, NR¹¹SO₂R¹², CN, halogenalkyl, O (halogenalkyl) ,

   S(O)_PR^XX , OC(O)Řⁿ, SO₂NR^XXR¹², C(O)NR^XXR¹², aromatický heterocyklyl je definován 5- až 7- členný kruh obsahující 1 až 3 heteroatomy vybrané nezávisle z O, Na S, který může být případně substituován skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, NR^XXR¹², CO2R^XX, NR¹¹CO2R¹², R¹¹, halogen, CN, halogenalkyl,.O(halogenalkyl), S(O)PR^X1, OC(O)R^XX, NR^XXSO2R¹², SO₂NR^xxR¹² nebo C(O)NR^XXR¹².

   Heterocyklyl je definován jako 3- až 8 - členný kruh obsahující 1-3 heteroatomy nezávisle vybrané z O, S a N, nasycený nebo částečně nasycený, který může být případně substituován skupinou vybranou ze souboru, který tvoří OR¹¹, NR^XXR¹², CO2R^XX, NR^xxCO2R¹², R^xx, halogen, CN, halogenalkyl, O (halogenalkyl) , S(O)_PR^XX, OC(O)R^XX, NR^XXSO2R^X2, SO2NR^XXR¹² nebo C(O)NR^XXR¹² , • ····

   215 nebo jejich farmaceuticky vhodné soli, solváty nebo proléčiva.
2. 2. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, která má stereochemii sloučeniny obecného vzorce IA nebo IB
3. 3. Sloučenina obecného vzorce IA podle nároku 2.
4. 4. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde imidazol je 1,4 disubstiťuovaný, kde R¹ skupina je vázána na NI.
5. 5. Sloučenina.obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1-3, kde imidazol je 1,4 disubstituovaný, kde R¹ skupina je vázána na C4.
6. 6. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, kde R¹ je aryl, Ci_₆ alkenyl nebo a Ci_₆ alkyl, kde alkyl je substituovaný jednou nebo více skupinami vybranými ze souboru, který tvoří CO2R¹¹, OR¹¹,

   216 aryl, C3-7 cykloalkyl, NHSO2R¹¹, halogen a aromatický-----------------heterocyklyl.
7. 7. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, kde R¹ je C1-3 alkyl.
8. 8. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, kde R² a R³ jsou vodík.
9. 9. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8, kde R⁴ je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří vodík a C1-3 alkyl nebo kde R⁴ a R¹⁰ tvoří společně řetězec, kterým je C₂-3 alkylen.
10. 10. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, kde R⁴ je vodík.
11. 11. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 10 , R⁵ a R⁶ jsou výhodně nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a Ci_₆ alkyl, kde alkyl je případně substituovaný fenylem, nebo R⁵ společně s R¹⁰ tvoří řetězec, kterým je C1-3 alkylen.
12. 12. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 11 R⁵ a R⁶ jsou vodík.
13. 13. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12, kde R⁷ a R⁸ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C!_₆ alkyl.
14. 14. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13, kde R⁷ a R⁸ jsou vodík • · · ·

    217
15. 15. Sloučenina obecného vzorce í, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, kde R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a C3.-3 alkyl; nebo kde R¹⁰ a R⁴ společně tvoří řetězec, kterým je C₂-3 alkylen.
16. 16. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 15, kde R⁹ a R¹⁰ jsou vodík.
17. 17. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 16, kde R¹¹ a R¹² jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a Ci_₆ alkyl.
18. 18. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 17, kde, kde R¹¹ a R¹² jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří vodík a CH3
19. 19. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, kde,X je CH.
20. 20. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1-19, kde, n je 0.
21. 21. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1-20, kde, aryl je fenyl.
22. 22. Sloučenina obecného vzorce I, podle kteréhokoliv z nároků 1-21, kde, aromatický heterocyklyl je 5- až 6členný kruh, obsahující 1 až 2 heteroatomy nezávisle vybrané ze skupiny, kterou tvoří O, S a N.
23. 23. Sloučeniny obecného vzorce II a III ·· ···· ·· ··

    218

    R⁹

    I R⁸ / r«< γ-—R⁷ kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ a X mají význam podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22, R⁹ a R¹⁰ mají význam podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22 a dále jedna nebo obě tyto skupiny mohou být vhodné ochranné skupiny dusíku a R¹³ může být vhodná ochranná skupina kyslíku.
24. 24. Sloučeniny obecného vzorce XXIII a XXIV kde R¹, R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R¹⁰ a Z mají význam podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22, R⁴ je vodík , X je CH a R⁹ má význam podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22 nebo představují vhodnou chránící skupina dusíku.
25. 25. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce IA nebo IB podle kteréhokoliv z nároků 2 až 22, vyznačující s tím, že zahrnuje kroky • · · · • · • · · ·

    219

    a) hydrolýzu sloučeniny obecného vzorce XXIII (XXIII) kde R¹, R³, R⁵, R⁶, R⁷ a R⁸ jsou jak je popsáno v kterémkoliv z nároků 1 až 22, R⁴ je vodík, n je 0, X je CH a R⁹ je jak je popsáno v kterémkoliv z nároků 1 až 22 nebo představuje vhodnou chránicí skupinu na dusíku;

    pro získání sloučeniny obecného vzorce XXIV (XXIV) kde R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, η, X a R⁹ jsou jak je uvedeno výše a R¹⁰ je vodík;

    b) hydrogenaci sloučeniny obecného vzorce XXIV takto získané; potom • · · ·

    220

    c) opětovné rozpuštění enanťi.omerní směsi pro získání sloučenin obecného vzorce IA a IB;potom

    d) případné odstranění dusík chránících skupin, pokud je R⁹ ochranná skupina na dusíku; potom

    e) případnou konverzi sloučenin obecného vzorce IA a IB na jejich farmaceuticky vhodné soli.
26. 26. Způsob podle nároku 25, vyznačující se tím, že hydrogenaci je asymetrická hydrogenace.
27. 27. Kompozice, vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, solvát nebo proléčivo, podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22 a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič.
28. 28. Sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo proléčivo podle kteréhokoliv z nároků 1 až22 pro použití jako léčivo.
29. 29. Použití TAFIa inhibitoru pro přípravu léčiva pro léčení nebo prevenci stavů vybraných z trombózy, atherosklerózy, srůstů, kožních jizev, karcinomu, fibrotických stavů, zánětlivých choroba těch stavů, které jsou které jsou pozitivně ovlivňovány udržováním nebo zvýšením hladiny bradykininu v těle.
30. 30. Použití podle nároku 29, kde TAFIa inhibitorem je sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl, solvát nebo proléčivo podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22.
31. 31. Použití podle nároku 29 nebo 30 kde stavem je trombotický stav, vybraný z infarktu myokardu, trombózy

    221 hlubokých žil, mrtvice, začínající mrtvice, mozkového infarktu, mozkové trombózy, mozkové embolie, periferní vaskulární choroby, angíny nebo jiné formy akutních koronárních syndromů, roztroušená intravaskulární koagulace, sepse, plicní embolie, embolické příhody sekundární při srdeční arytmii a prevence kardiovaskulárních příhod následujících chirurgickou revaskularizaci nebo intervenci.
32. 32. Použití podle kteréhokoliv z nároků 29 a 30, kde stavem je ateroskleróza.
33. 33. Použití podle kteréhokoliv z nároků 29 a 30, kde stavem jsou srůsty nebo kožní jizva.
34. 34 Použití podle kteréhokoliv z nároků 29 a 30, kde stavem je nádor.
35. 35. Použití podle kteréhokoliv z nároků 29 a 30, kde stavem je fibrotický stav, vybraný ze skupiny, kterou tvoří cystická fibróza, pulmonální fibrotické choroby, chronické obstrukční pulmonální onemocnění (COPD), syndrom respirační tísně dospělých (ARDS), fibromuskulární dysplasie, fibrotické plicní onemocnění, fibrinové usazeniny v oku při oční operaci a artritida.
36. 36. Použití podle kteréhokoliv z nároků 29 a 30, kde stavem je zánětlivé onemocnění vybrané ze skupiny, kterou tvoří astma, endometrióza, zánětlivé střevní onemocnění, psoriáza a atopická dermatitida a neurodegenerativní choroby, Alzheimerova a Parkisonova.

    222
37. 37. Použití podle kteréhokoliv z nároků 29 a 30, kde stavem je takový stav, který je pozitivně ovlivněn udržováním nebo zvýšením hladin bradykininu v těle, vybraný z skupiny, kterou tvoří hypertenze, angína , selhání srdce, pulmonální hypertenze, selhání ledvin a selhání orgánů.
38. 38. Použití TAFIa inhibitoru pro přípravu léčiva v kombinaci s antitrombotikem pro léčení trombózy.
39. 39. Použití podle nároku 38, kde TAFIa inhibitorem je sloučenina obecného vzorce I, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, solvát nebo proléčivo podle kteréhokoliv z nároků 1-22.
40. 40. Použití podle kteréhokoliv z nároků 38 a 39, kde antitrombotikem je profibrinolitikum.
41. 41. Použití podle kteréhokoliv z nároků 38, 39 a 40, kde antitrombotikem je rekombinantni tkáňový aktivátor plasminogénu (tPA).
42. 42. Způsob léčení nebo prevence trombózy, aterosklerózy srůstů, kožních jizev, nádoru, fibrotických stavů, zánětlivých onemocnění a takových stavů, které jsou pozitivně ovlivňovány udržováním nebo zvýšením hladin bradykininu v těle, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství TAFIa inhibitoru a jeho farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.
43. 43. Způsob léčení nebo prevence trombózy, aterosklerózy srůstů, kožních jizev, nádoru, fibrotických stavů,

    223 zánětlivých onemocnění a takových stavů, které jsou pozitivně ovlivňovány udržováním nebo zvýšením hladin bradykininu v těle, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I a jejích farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a proléčiv podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22 pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.
44. 44. Způsob léčení podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem je trombotický stav, vybraný z infarktu myokardu, trombózy hlubokých žil, mrtvice, začínající mrtvice, mozkového infarktu, mozkové trombózy, mozkové embolie, periferní vaskulární choroby a nebo jiné formy akutních koronárních syndromů, roztroušené intravaskulární koagulace, sepse, plicní embolie, embolické příhody sekundární při srdeční arytmii a prevence kardiovaskulárních příhod následujících chirurgickou revaskularizaci nebo intervenci.
45. 45. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem jsou srůsty nebo kožní zjizvení.
46. 46. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem je ateroskleróza.
47. 47. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem je nádor.
48. 48. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem je fibrotický stav, vybraný z cystické fibrózy, pulmonální fibrotické choroby, chronického obstrukčního pulmonálního onemocnění (COPD), syndromu respirační tísně dospělých (ARDS), fibromuskulární

    224 dysplasie, fibrotického plicního onemocnění, fibrinových usazenin v oku při oční operaci a artritidy.
49. 49. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem je zánětlivé onemocnění vybrané ze skupiny, kterou tvoří astma, endometrióza, zánětlivé střevní onemocnění, psoriáza a atopická dermatitida a neurodegenerativní choroby, Alzheimerova a Parkisonova.
50. 50. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 42 a 43, vyznačující se tím, že stavem je takový stav, který je pozitivně ovlivněn udržováním nebo zvýšením hladin bradykininu v těle, vybraný .z. hypertenze, angíny, selhání srdce, pulmonální hypertenze, selhání ledvin a selhání orgánů.
51. 51. Způsob léčení nebo prevence trombózy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství TAFIa inhibitoru v kombinaci s antitrombotikem pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.
52. 52. Způsob podle nároku I, vyznačující se tím, že TAFIa inhibitorem je sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky-přijatelné soli, solváty nebo proléčiva podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22.
53. 53. Způsob podle nároku 51 a 52, vyznačující se tím, že antitrombotikem je profibrinolitikum.
54. 54. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 51, 52 a 53, vyznačující se tím, že antitrombotikem je rekombinantni tkáňový aktivátor plasminogenu (tPA).

    • ·

    225
55. 55. Použití TAFIa inhibitorů a/nebo TAFI inhibitorů jako______ povlaku na intravaskulárních zařízeních.
56. 56. Použití podle nároku 55, kde.TAFIa inhibitorem je sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22.
57. 57. Intravaskulární zařízení s povlakem TAFIa inhibitoru.
58. 58. Intravaskulární zařízení podle nároku 57, vyznačující se tím, že TAFIa inhibitorem je sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 22.
59. 59. Kit, vyznačující se tím, že zahrnuje:

    a) kompozici zahrnující sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, solvát nebo proléčivo podle kteréhokoliv z nároků 1-22 a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič;

    b) kompozici zahrnující antitrombotikum a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič;

    c) kontejner.