CZ20032503A3 - Inhibitory GlyT - 1 - Google Patents

Inhibitory GlyT - 1 Download PDF

Info

Publication number
CZ20032503A3
CZ20032503A3 CZ20032503A CZ20032503A CZ20032503A3 CZ 20032503 A3 CZ20032503 A3 CZ 20032503A3 CZ 20032503 A CZ20032503 A CZ 20032503A CZ 20032503 A CZ20032503 A CZ 20032503A CZ 20032503 A3 CZ20032503 A3 CZ 20032503A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
phenyl
compound
thienyl
sarcosine
prop
Prior art date
Application number
CZ20032503A
Other languages
English (en)
Inventor
Ian Egle
William Delaney
Zhaoqing Wang
Richard Shumacher
Allen T. Hopper
Ashok Tehim
Shawn Maddaford
Original Assignee
Allelix Neuroscience, Inc.
Nps Allelix Corp.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23026417&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ20032503(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Allelix Neuroscience, Inc., Nps Allelix Corp. filed Critical Allelix Neuroscience, Inc.
Publication of CZ20032503A3 publication Critical patent/CZ20032503A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Předkládaný vynález se týká třídy substituovaných aminů, farmaceutických přípravků obsahujících tyto sloučeniny a způsobů léčby neurologických a neuropsychiatrických onemocnění za použití takových sloučenin.
Dosavadní stav techniky
Synaptický přenos je komplexní formou intercelulární komunikace, na které se podílí komplikovaná sestava specializovaných struktur na pre- a post-synaptických zakončeních a sousedních gliálních buňkách (Kanner and Schuldiner, CRC Critical Reviews in Biochemistry, 22, 1987:1032). Transportéry zachycují neurotransmitery ze synapse, čímž regulují koncentrace neurotransmiterů v synapsi, stejně jako jejich přetrvávání v synapsi, což dohromady ovlivňuje intenzitu synaptického přenosu. Dále tím, že brání šíření neurotransmiterů do sousedních synapsi, udržují transportéry spolehlivost synaptického přenosu. Konečně tím, že zachycují uvolněný neurotransmiter do presynaptického zakončení, umožňují transportéry opětovné využití neurotransmi teru.
Transport neurotransmiterů je závislý na transmembránovém rozdílu v koncentraci sodíku a napětí. Za podmínek aktivace neuronu, například během záchvatu, mohou transportéry účinkovat opačně, tj. mohou uvolňovat neurotransmiter nonexocytotickým způsobem nezávislým na vápníku (Attwell et al., Neuron, 11, 1993:401-407). Farmakologická modulace neurotransmiterů transportéry tak umožňuje modifikaci synaptické aktivity, což je použitelné v léčbě neurologických a psychiatrických poruch.
Aminokyselina glycin je hlavním neurotransmiterem v nervovém systému savců, a má jak inhibiční, tak excitační funkci v synapsích. Termínem nervový systém je míněn jak centrální, tak periferní nervový systém. Tyto odlišné funkce glycinu jsou zprostředkovány dvěma různými typy receptorů, které jsou každý asociovaný s jinou třídou glycinových transportérů. Inhibiční účinky glycinu jsou zprostředkované glycinovými receptory, které jsou sensitivní na konvulzivní alkaloid strychnin, a proto jsou označovány jako strychninsensitivní receptory. Tyto receptory obsahují vnitřní chloridový kanál, který se otevírá po vazbě glycinu na receptor; zvýšením propustnosti pro chlor se zvýší práh pro akční potenciál. Strychnin-sensitivní glycinové receptory se nacházejí především v míše a mozkovém kmenu a farmakologické přípravky, které zvyšují aktivaci takových receptorů tak zvyšuji inhibiční neurotransmisi v těchto regionech.
Glycin také účinkuje v excitačním přenosu tím, že moduluje působení glutamátu, hlavního excitačního neurotransmiteru v centrálním nervovém systému (Johnson and Ascher, Nátuře, 325,1987:529-531; Fletcher et al., Glycine Transmission, Otterson and' Storm-Mathisen, ed., 1990:193-219). Konkrétně, předpokládá se, že glycin je obligátním ko-agonistou na třídě glutamátových receptorů označovaných jako N-methyl-Daspartátové (NMDA) receptory. Aktivace NMDA receptorů zvyšuje vedení sodíku a vápníku, což depolarizuje neuron a zvyšuje pravděpodobnost vzniku akčního potenciálu.
NMDA receptory v hippokampu v mozku mají významnou úlohu v modelu plasticity synapsí označovaném jako dlouhodobá potencializace (LTP), která je součástí některých typů učení a paměti (Hebb, D.O (1949) The Organization of Behavior, Wiley, NY; Bliss a Collingridge (1993) Nátuře 361: 31-39; Morris et al. (1986) Nátuře 319: 774-776). Zvýšená exprese vybraných podjednotek NMDA receptoru u transgenních myší vede ke zvýšeným proudům indukovaným NMDA-receptory, vyšší LTP a lepší výkonnosti v některých testech učení a paměti (Tang et al. (1999) Nátuře 401:63).
Naopak, snížená exprese vybraných podjednotek NMDA receptorů u transgenních myší produkuje chování podobné jako v modelech farmakologicky indukované schizofrenie, včetně zesílené lokomoce, zesílení stereotypního chování a deficitu sociálních/sexuálních interakcí (Mohn et al. (1999) Cell 98:427-436). Toto aberantní chování může být zlepšeno za použití antipsychotik haloperidolu a clozapinu.
NMDA receptory jsou přítomny v celém mozku a četné jsou zejména v mozkové kůře a v hippokampu.
Molekulární klonování odhalilo existenci dvou tříd glycinových transportérů v savčím mozku, které se označují jako GlyT-1 a GlyT-2. GlyT-1 se vyskytuje v celém mozku a míše a předpokládá se, že jeho přítomnost odpovídá glutamatergní dráze a NMDA receptorům (Smith, et al., Neuron, 8, 1992:927935). Molekulové klonování dále ukázalo existenci čtyř variant GlyT-1, označovaných jako GlyT-la, GlyT-lb, GlyT-lc a GlyT-ld. Dvě z těchto variant (la a lb) se nacházejí u hlodavců, a každá z nich má jedinečnou distribuci v mozku a v periferních tkáních (Borowsky et al., Neuron, 10, 1993:851-863; Adams et al., J. Neuroscience, 15, 1995:2524-2532). Třetí varianta, lc, byla detekována pouze v lidských tkáních (Kim, et al., Molecular Pharmacology, 45, 1994:608-617). Čtvrtá varianta byla detekována v lidských tkáních (viz US patent č.
6,008,015). Tyto varianty vznikají v důsledku odlišného sestřihu a využití exonů a liší se ve svých N-koncových regionech. GlyT-2 se vyskytuje především v mozkovém kmeni a míše, a jeho distribuce přesně odpovídá výskytu strychninsensitivních glycinových receptorů (Liu et al., J. Biological Chemistry, 268, 1993:22802-22808; Jurský a Nelson, J. Neurochemistry, 64, 1995:1026-1033). Jinou odlišnou vlastností transportu glycinu zprostředkovaného GlyT-2 je to, že není inhibován sarkosinem, jak je tomu v případě glycinového transportu zprostředkovaného GlyT-1. Tato data jsou v souladu s představou, že regulováním synaptických koncétrací glycinu GlyT-1 a GlyT-2 selektivně ovlivňují aktivitu NMDA receptorů a strychnin-sensitivních glycinových receptorů, v příslušném pořadí.
Proto se předpokládá, že sloučeniny, které inhibují nebo aktivují glycinové transportéry, budou ovlivňovat funkce receptoru tím, že budou modifikovat koncentrace glycinu v synapsích a tím že budou terapeuticky použitelné při různých onemocněních.
Například, sloučeniny, které inhibují GlyT-1 zprostředkovaný transport glycinu, mohou zvyšovat koncentrace glycinu na NMDA receptorech, které jsou umístěny - kromě dalších míst - v předním mozku. Toto zvýšení koncentrací by mohlo zvýšit aktivitu NMDA receptorů, což by snad mohlo zmírnit příznaky schizofrenie a zlepšit kognitivní funkce. Alternativně, sloučeniny, které přímo interagují s glycinreceptorovou složkou NMDA receptoru mohou mít stejné nebo podobné účinky jako zvýšení nebo snížení dostupnosti extracelulárního glycinu způsobené inhibici nebo zesílením GlyT-1 aktivity, v příslušném pořadí. Viz například PitkSnen et al., Eur. J. Pharmacol., 253, 125-129 (1994); Thiels et al., Neuroscience, 46, 501 -509 (1992); a Kretschmer a Schmidt, J. Neurosci., 16, 1561-1569 (1996).
Bylo zjištěno, že mnoho sloučenin, které jsou účinné ve vazbě a inhibici GlyT-1 transportéru, má také toxické účinky, jsou-li podány in vivo. Ačkoliv jsou takové sloučeniny užitečným nástrojem pro studování funkce transportérů, limituje toxicita jejich použití jako farmaceutických prostředků.
Proto je žádoucí poskytnout sloučeniny, které ovlivňují transport glycinu. Také je žádoucí poskytnout sloučeniny, které ovlivňují transport glycinu, ale které jsou dostatečně netoxické pro to, aby mohly být použity ve farmaceutických prostředcích.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká sloučenin, o kterých bylo zjištěno, že jsou účinné v inhibici GlyT-1 transportu a které jsou dostatečně netoxické pro to, aby mohly být použity v medicíně. Přesněji, sloučeniny podle předkládaného vynálezu vykazují neočekávaný profil toxicity ve srovnání s ostatními známými GlyT-1 inhibitory. V jednom aspektu předkládaný vynález poskytuje sloučeniny vzorce I:
Vzorec I
• · kde
Ari je thiofenová skupina, kterou může být 2 nebo 3 thiofen a která je volitelně substituovaná až jedním substituentem vybraným ze skupiny zahrnující methyl nebo ethyl; a
Ar2 je vybraný ze skupiny zahrnující thiofen, furan a substituovaný fenyl, kde substituent na fenylové skupině je vybrán ze skupiny zahrnující Ci_6 alkyl, halogen, Ci_6 halogenalkyl, Ci_6 alkoxy, Ci-6 halogenalkoxy, kyan, a a jejich soli, solváty a hydráty.
V dalším aspektu předkládaný vynález poskytuje sloučeninu: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3yl)sarkosin.
Bylo zjištěno, že sloučeniny vzorce I a sloučenina (Z)-N(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin inhibují glycinový transport zprostředkovaný GlyT-1, nebo jsou prekursory (například prodrogy) takových sloučenin. Inhibitory GlyT-1 transportu jsou použitelné při léčbě schizofrenie, stejně jako jiných onemocnění CNS, jako jsou kognitivní dysfunkce, demence (včetně demence při Alzheimerově nemoci), poruch pozornosti, deprese, celkových vývojových poruch, jako je autismus, Rettova nemoc, dětská desintegrativní porucha, Aspergerova nemoc a celkové jinak nespecifikované vývojové poruchy (například atypický autismus).
V dalším aspektu vynález poskytuje prostředek obsahující sloučeninu vzorce I nebo sloučeninu (Z)-N-(l-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin a nosič.
V dalším aspektu vynález poskytuje farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu vzorce I a farmaceuticky přijatelný ·· ····
• · • · · • · ·· nosič. V dalším aspektu vynález poskytuje farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu vzorce 1 v množství účinném pro inhibici transportu glycinu a farmaceuticky přijatelný nosič.
V dalším aspektu vynález poskytuje farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu (Z)-N-(l-(4-(3-thienyl)fenyl)-l-(2methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin a farmaceuticky přijatelný nosič. V ještě dalším aspektu vynález poskytuje farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin v množství účinném pro inhibici transportu glycinu a farmaceuticky přijatelný nosič.
V jiném aspektu vynález poskytuje prostředky obsahující sloučeniny vzorce 1 nebo sloučeninu (Z)-N-(1-(4-(3thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin v množství vhodném pro farmaceutické použití pro léčbu onemocnění, u kterých je indikován inhibitor transportu glycinu. Výhodné jsou prostředky obsahující sloučeniny použitelné při léčbě onemocnění, u kterých je vhodná GlyT-1zprostředkovaná inhibice transportu glycinu, jako je například schizofrenie nebo kognitivní dysfunkce.
Sloučeniny vzorce I nebo sloučenina (Z)-N-(1-(4-(3thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin mohou být použity pro léčbu pacientů s onemocněním, u kterých je indikována inhibice transportu glycinu, která byla uvedena výše. Výhodnou indikací je schizofrenie. Sloučeniny mohou být použity také pro výrobu léku pro léčbu pacientů s onemocněním, u kterého je indikována inhibice transportu glycinu.
Definice
... *··* ··· ··· ··
Termín „alkyl označuje uhlovodíkové radikály s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6 atomů uhlíku a zahrnuje methyl, ethyl a podobně.
Termín Ci-6 označuje alkylový radikál obsahující 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6 atomů uhlíku.
Termín „alkoxy označuje alkylové skupiny zakončené oxy radikály s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující 1, 2,
3, 4, 5 nebo 6 atomů uhlíku a zahrnuje methoxy, ethoxy, terc.butoxy skupiny a podobně.
Termín „halogen označuje fluor, chlor, brom a podobně.
Termín „halogenalkyl označuje alkylovou skupinu substituovanou jedním nebo více atomy halogenu, jako je -CF3.
Obdobně, termín „halogenalkoxy označuje alkoxy skupinu substituovanou jedním nebo více atomy halogenu, jako je —OCF3.
Výhodná provedení
Mezi výhodná provedení předkládaného vynálezu patří sloučeniny vzorce I, kde Arx je vybrán ze skupiny zahrnující volitelně substituovaný 2-thiofen nebo 3-thiofen. Ve výhodném provedení předkládaného vynálezu je Arx 2-thiofen. Ve výhodném provedení předkládaného vynálezu je Arx 2-(3-alkylthiofen), výhodně 2-(3-methylthiofen). V jiném výhodném provedení je Arx
3-thiofen. V dalším výhodném provedení je Arx 3-(4alkylthiofen), výhodně 3-(4-methylthiofen).
Ve výhodných provedeních vynálezu je Ar2 vybrán ze skupiny zahrnující substituovaný fenyl, thiofen a furan. Ve ·· ···· • · • · ·
0 výhodnějším provedení vynálezu je Ar2 substituovaný fenyl, ve kterém jsou substituenty v 3 nebo 4 pozici, a kde jsou substituenty vybrány z: Ci-6 alkyl; halogen; Cx-6 halogenalkyl; Ci-6 alkoxy; Ci-6 halogenalkoxy; a kyano. V jiném výhodném provedení je fenylový substituent v 3 nebo 4 pozici vybrán ze skupiny zahrnující CF3, Me, iPr, MeO, CN a CF3O. Ve výhodném provedení je Ar2 3-methoxyfenyl. V jiném výhodném provedení je Ar2 3-methylfenyl. V ještě jiném výhodném provedení je Ar2 3trifluormethoxyfenyl. V ještě jiném provedení je Ar2 3trifluormethylfenyl. V ještě dalším výhodném provedení je Ar2
4-isopropylfenyl, a v ještě dalším výhodném provedení je Ar2 3kyanfenyl.
Ve výhodném provedení je Ar2 thiofen. Ve výhodném provedení vynálezu je Ar2 2-thiofen.
V ještě dalším výhodném provedení je Ar2 2-furan.
Mezi výhodná provedení vynálezu patří:
(Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(i));
(Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(ii));
(Z)-N-(1-(4-(2-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(iii));
(Z)-N-( 1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(iv));
(Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(v));
(Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(vi));
(Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, (sloučenina G(vii));
·· »»·· • · · • · · · ·· ·· (Z)-N-(1-(4-(3-kyanfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(viii));
(Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, (sloučenina G(ix));
(Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-(4-methylthienyl)prop-l-en3-yl)sarkosin, (sloučenina G(x));
(Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethyl)fenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, (sloučenina G(xi));
(Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, (sloučenina G(xii));
(Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(2-(3-methylthienyl))propl-en-3-yl)sarkosin, (sloučenina G(xiii)).
Nejvýhodnějším provedením předkládaného vynálezu je (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)4(3-thienyl)-l-en-3-yl)sarkosin, (sloučenina G(iv)).
Jiným výhodným provedením předkládaného vynálezu je sloučenina (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl-1-(2-methylfenyl)propl-en-3-yl)sarkosin (sloučenina G(xiv)).
V jiném provedení předkládaného vynálezu je sloučenina vzorce I poskytnuta ve značené formě, například v radioaktivně značené formě (například označené tím, že sloučenina obsahuje ve své struktuře 3H nebo 14C nebo konjugací s 125I) . Ve výhodném aspektu předkládaného vynálezu mohou být takové sloučeniny, které se přednostně váží na GlyT-1, použity pro identifikaci ligandů GlyT-1 receptorů, za použití technik známých v oboru.
Toto může být provedeno inkubováním receptorů nebo tkáně za přítomnosti potenciálního ligandů a potom inkubováním vzniklého přípravku s ekvimolárním množstvím radioaktivně značené sloučeniny podle předkládaného vynálezu. Ligandy GlyT1 receptorů se takto určí jako ty sloučeniny, které významně ····
I 4 ·· • » ·
0*
9 ·
9 9 9
99 obsazují GlyT-1 místo a brání vazbě radioaktivně značené sloučeniny podle předkládaného vynálezu. Alternativně mohou být potenciální ligandy GlyT-1 receptorů identifikovány nejprve inkubací radioaktivně značené formy sloučeniny podle předkládaného vynálezu a potom inkubací vzniklého přípravku za přítomnosti potenciálního ligandu. Silnější ligandy GlyT-1 receptorů budou, v ekvimolárních koncentracích, vytěsňovat radioaktivně značenou sloučeninu podle předkládaného vynálezu z vazby.
Adiční soli sloučenin vzorce I s bázemi jsou nejlépe připraveny z farmaceuticky přijatelných kyselin. Vynález také zahrnuje adiční soli s kyselinami, solváty a hydráty sloučenin podle předkládaného vynálezu.
Konverze dané sloučeniny na požadovanou sůl se provede za použití standardních technik, dobře známých odborníkům v oboru.
Schéma 1
(a) : propargylalkohol, Pd(PPh3)4, Cul, Et3N, t.m., přes noc;
(b) : Red-Al, THF, 0 °C, 1 hodina, potom EtOAc, I2,-78 °C do t.m., přes noc; (c) : NBS, PPh3, CH2Cl2z-40 °C, 1 hodina;
(d) : t-butylsarkosin, K2CO3, KI, MeCN, t.m., přes noc; (e) :
ArxB(OH)2, Pd(PPh3)4, 2M Na2CO3, DME, 90 °C, 4,5 hodin; (f): Ar2B(OH)2, Pd(PPh3)4, 2M Na2CO3, DME, Δ, 3 hodiny; (g) : kyselina mravenčí, 40 °C, přes noc.
Sloučeniny vzorce 1 mohou být snadno připraveny způsobem uvedeným ve schématu 1. Meziprodukt B se připraví palladiem katalyzovanou reakcí 4-bromjodbenzenu s propargylalkoholem. Sloučenina B se přemění na jodid C reakcí s natrium-bis(2methoxyethoxy) a lumirhimhy obědem (Red-Al) a potom s jodem.
Dvoustupňový proces skládající se z konverze alkoholu na bromid, po které následuje nahrazení sarkosinem, vede ke vzniku meziproduktu D. Meziprodukt B je zejména užitečným meziproduktem, protože umožňuje přípravu mnoha derivátů, ve kterých může být arylová skupina orientována s kompletní stereochemickou kontrolou. Například společný meziprodukt D reaguje s různými boronátovými kyselinami za zisku sloučeniny vzorce E.
Produkty vzorce E jsou také výhodnými chemickými meziprodukty. Tyto sloučeniny umožňují přípravu různých sloučenin s 4'-arylovými skupinami (Ar 2 skupiny). Produkty E reagují s různými boronovými kyselinami za zisku různých sloučenin vzorce F, ze kterých mohou být za použití kyseliny mravenčí odstraněny v posledním stupni chránící skupiny za zisku konečných sloučenin typu G.
Za.použití zde popsaných reakcí mohou být připraveny následující sloučeniny podle předkládaného vynálezu:
G(v)
G(vi) • ·
Gfix)
G(viii)
G(xi)
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být podány orálně, sublinguálně, rektálně, nasálně, vaginálně, lokálně (včetně použití náplastí nebo jiných prostředků pro transdermální podání), pulmonálně v aerosolu, nebo parenterálně, včetně intramuskulárního, podkožního, intraperitoneálního, intraarteriálního, intravenosního nebo intrathekálního podání. Podání může být provedeno za použití pumpy pro periodické nebo kontinuální podání. Sloučeniny podle
předkládaného vynálezu mohou být podány samostatně nebo s farmaceuticky přijatelnými nosiči nebo přísadami, v souladu se standardní farmaceutickou praxí. Pro orální podání mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu použity ve formě tablet, kapslí, pastilek, žvýkacích gum, pilulek, prášků, sirupů, elixírů, vodných roztoků, suspenzí a podobně.
V případě tablet patří mezi použitelné nosiče laktosa, natrium-citrát a soli kyseliny fosforečné. V tabletách se obvykle použijí různá činidla podporující rozpadavost, jako je magnesium-stearát a talek. Pro orální podání ve formě kapslí jsou použitelnými ředidly laktosa a polyethylenglykoly s vysokou molekulovou hmotností. Pokud je to vhodné mohou být přidány sladidla a/nebo chuťová korigens. Pro parenterální podání se obvykle připraví sterilní roztoky sloučenin podle předkládaného vynálezu a pH těchto roztoků se upraví na vhodnou hodnotu a pufruje se. Pro intravenosní podání musí být kontrolována celková koncentrace solutů, aby byl přípravek isotonický. Pro oční podání mohou být masti nebo kapky podány za použití běžných prostředků, jako jsou oční aplikátory nebo kapátka. Takové prostředky mohou obsahovat mukomimetika, jako je kyselina hyaluronová, chondroitin-sulfát, hydroxypropylmethylcelulosa nebo polyvinylalkohol, konzervační činidla, jako je kyselina sorbová, EDTA nebo benzylchromiumchlorid, a obvyklá množství ředidel a/nebo nosičů. Pro plicní podání jsou ředidla a/nebo nosiče vybrány tak, aby umožňovaly tvorbu aerosolu.
Čípkové formy sloučenin podle předkládaného vynálezu jsou použitelné pro vaginální, urethrální a rektální podání. Takové čípky jsou obvykle tvořeny ze směsi substancí, které jsou solidní při teplotě místnosti, ale které tají při tělesné teplotě. Mezi substance používané pro výrobu takových forem patří kakaový olej, glycerinovaná želatina, hydrogenované • · • · · · rostlinné oleje, směsi polyethylenglykolů různé molekulové hmotnosti a estery polyethylenglykolů a mastných kyselin. Viz
Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th Ed., Mack
Publishing, Easton, PA, 1980, str. 1530-1533, kde je uveden další popis šípkových dávkových forem. Analogické gely nebo krémy mohou být použity pro vaginální, urethrální a rektální podání.
Odborníkům v oboru bude známo mnoho vehikul pro podání, včetně například přípravků se zpomaleným uvolňováním, liposomálních přípravků a polymerových matric.
Příklady farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinami pro použití v předkládaném vynálezu jsou soli odvozené od anorganických kyselin, jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, fosforečná, metafosforečná, dusičná a sírová, a od organických kyselin, jako je kyselina vinná, octová, citrónová, jablečná, mléčná, fumarová, benzoová, glykolová, glukonová, jantarová, p-toluensulfonová a arylsulfonové kyseliny. Příklady farmaceuticky přijatelných adičních solí s bázemi pro použití v předkládaném vynálezu jsou soli odvozené od netoxických kovů, jako je sodík nebo draslík, amoniové soli a organoaminové soli, jako jsou triethylaminové soli. Odborníkům v oboru bude známo mnoho takových solí.
Lékař nebo jiný odborník zdravotní péče může určit vhodnou dávku a terapeutický režim podle tělesné hmotnosti jedince, jeho věku a zdravotního stavu. Dávka bude obvykle určena tak, aby se dosáhlo a udržovalo sérových koncentrací sloučeniny podle vynálezu mezi přibližně 0,01 pg/cm3 a přibližně 1000 pg/cm3, výhodně mezi přibližně 0,1 pg/cm3 a přibližně 100 pg/cm3. Pro parenterální podání je -výhodnou dávkou dávka od
přibližně 0,001 mg/kg do přibližně 10 mg/kg (alternativně od přibližně 0,01 mg/kg do přibližně 10 mg/kg), výhodněji od přibližně 0,01 mg/kg do přibližně 1 mg/kg (od přibližně 0,1 mg/kg do přibližně 1 mg/kg). Pro orální podání je výhodnou dávkou dávka od přibližně 0,001 mg/kg do přibližně 10 mg/kg (od přibližně 0,1 mg/kg do přibližně 10 mg/kg), výhodněji od přibližně 0,01 mg/kg do přibližně 1 mg/kg (od přibližně 0,1 mg/kg do přibližně 1 mg/kg). Pro podání ve formě čípků je výhodnou dávkou dávka od přibližně 0,1 mg/kg do přibližně 10 mg/kg, výhodněji od přibližně 0,1 mg/kg do přibližně 1 mg/kg.
Pro použití v testování na aktivitu v inhibicí transportu glycinu byly eukaryotické buňky, výhodně QT-6 odvozené od křepelčích fibroblastů, transfektovány tak, aby exprimovaly jednu ze čtyř známých variant lidského GlyT-1, konkrétně GlyTla, GlyT-lb, GlyT-lc, nebo GlyT-ld, nebo lidský GlyT-2. Sekvence těchto Glyt-1 transportérů jsou popsány v Kim et al., Molec. Pharm. 45: 608-617, 1994, s výjimkou sekvencí kódujících N-konec GlyT-la, která je pouze odvozena z příslušné krysí sekvence. Tato sekvence kódující N-koncový protein byla nyní potvrzena jako sekvence souhlasící se sekvencí navrženou Kimem a kol. Sekvence GlyTld je popsána v U.S. patentu č. 6,008,015, který je zde uveden ve své úplnosti jako odkaz. Sekvence GlyT-2 je popsána v U.S. Patentu č. 5,919,653, který je zde uveden ve své úplnosti jako odkaz.
Mezi vhodné expresní vektory patří pRc/CMV (Invitrogen), Zap Express Vector (Stratagene Cloning Systems, La Jolla, CA; dále Stratagene), pBk/CMV nebo pBk-RSV vektory (Stratagene), Bluescript II SK +/- fagemidové vektory (Stratagene),
LacSwitch (Stratagene), pMAM a pMAM neo (Clontech), a další. Vhodný expresní vektor je schopný provést expresi obsažené GlyT DNA ve vhodné hostitelské buňce, výhodně v non-savčí hostitelské buče, která může být eukaryotická, mykotická nebo • · prokaryotická. Mezi takové výhodné hostitelské buňky patří buňky z obojživelníků, ptáků, hub, hmyzu a plazů.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1: 1-(4-bromfenyl)prop-l-yn-3-ol (Meziprodukt B): Do roztoku 4-bromjodobenzenu (10,0 g, 35,3 mmol) v triethylaminu (EtaN, 100 ml) se přidá propargylalkohol (2,7 ml, 2,57 g, 45,9 mmol), Cul (0,81 g, 4,24 mmol) a Pd(PPh))4 (1,63 g, 1,41 mmol). Směs se mísí přes noc a potom se reakční směs zahustí. Chromatografií na koloně (20-35% EtOAc/hexany) se získá l—(4— bromfenyl)-1-propyw -3-ol B (6,58 g, 88%) ve formě žluté/oranžové pevné látky. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) 1,77 (t,
1H), 4,48 (d, 2H), 7,29 (d, 2H), 7,45 (d, 2H).
Příklad2: (Z)-1-(4-bromfenyl)-l-jodprop-l-en'-3-ol (Meziprodukt C):
Roztok 1-(4-bromfenyl)-l-propyn-3-olu B (6,58 g, 31,2 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (THF, 66 ml) se ochladí v ledové lázni. Po kapkách se během 15 minut přidá 65% (hmot./hmot.) roztok Red-Al v toluenu (PhMe, 18,7 ml, 19,4 g, 62,4 mmol). Po 1 hodině se přidá ethylacetát (EtOAc, 3,0 ml, 2,75 g, 31,2 mmol). Reakční směs se ochladí v lázni suchý led/aceton. Po kapkách se přidá roztok I2 (12,7 g, 49,9 mmol) v bezvodém THF (66 ml). Reakční směs se nechá přes noc pomalu zahřát na teplotu místnosti. Reakce se utlumí nasyceným roztokem Na2SO3 a směs se přefiltruje přes Celit. Filtrační koláč se důkladně promyje EtOAc. Filtrát se promyje vodou a solankou, suší se (MgSO4), přefiltruje se a zahustí se. Chromatografií na koloně (20% EtOAc/hexany) se získá (Z)-1-(4-bromfenyl)-l-jodpropen-3ol C (8,82 g, 83%) ve formě žluté pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDCla) 1,82 (t, 1H), 4,37 (kolabované dd, 2H), 6,25 (t, 1H),
7,34 (d, 2H), 7,44 (d, 2H).
Příklad 3: (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-l-jodprop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt D):
Roztok (Z)-1-(4-bromfenyl)-l-jodpropen-3-olu C (8,81 g,
26,0 mmol) v CH2C12 (220 ml) se ochladí v lázni suchý led/acetonitril, v atmosféře dusíku. Přidá se PPh3 (10,9 g,
41,6 mmol) a N-bromsukcinimid (NBS, 7,40 g, 41,6 mmol). Po 1 hodině se reakce utlumí nasyceným roztokem NaHCO3. Směs se promyje nasyceným roztokem NaHCO3 a solankou, suší se (Na2SO4), přefiltruje se a zahustí se. Zbytek se ihned odebere do bezvodého acetonitrilu (MeCN, 104 ml). Přidá se terc.butylsarkosin-hydrochlorid (5,20 g, 28,6 mmol), K2C03 (35,9 g, 260 mmol) a KI (21,6 g, 130 mmol). Směs se mísí přes noc, potom se přefiltruje a filtrační koláč se promyje EtOAc. Filtrát se rozdělí mezi EtOAc a vodu. Organická fáze se promyje solankou, suší se (MgSO4), přefiltruje se a zahustí se. Chromatografií na koloně (20% EtOAc/hexany) se získá (Z)-N-(l(4-bromfenyl)-l-jodprop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester D (9,63 g, 80% ve dvou stupních) ve formě světle hnědého oleje.
1H NMR (300 MHz, CDC13) 1,48 (s, 9H) , 2,46 (s, 3H) , 3,23 (s, 2H), 3,43 (d, 2H), 6,12 (t, 1H), 7,34 (d, 2H) , 7,43 (d, 2H).
Příklad 4-1: (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt E(i)):
Do roztoku (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-l-jodprop-l-en-3yl)sarkosinu, terč.butylesteru D (29,86 g, 64,06 mmol) v dimethoxyethanu (300 ml) se přidá kyselina 3-thiofenboronová (9,02 g, 70,47 mmol), Pd(PPh3)4 (3,70 g, 3,20 mmol), a 2M Na2CO3 (300 ml) . Reakční směs se zahřeje na 90 °C za důkladného mechanického míšení po dobu 4,5 hodin. Směs se ochladí a rozdělí se mezi EtOAc a vodu. Organická fáze se promyje solankou, suší se (MgSO4), přefiltruje se a zahustí se.
Chromatografií na koloně (2-5% aceton/hexany) se získá (Z)-N(1-(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester E(i) (27,06 g, 78%) ve formě žlutého oleje. ’Ή
NMR (300 MHz, CDC13) 1,43 (s, 9H) , 2,36 (s, 3H) , 3,14 (s, 2H) ,
3,28(4 2H), 6,16 (7, 1H) , 6,86 (d, 1H) , 7,12-7,14 (m, 3H) ,
7,32 (kolabované dd, 1H), 7,41 (d, 2H).
4-2: (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt E(ii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester E(ii) připraví ze (Z)-N-(1-(4bromfenyl)-l-jodprop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru D a kyseliny 2-thiofenboronové, za zisku 243 mg (52%) žlutého oleje. 1H NMR (300 MHz, CDC13) 1,43 (s, 9H) , 2,39 (s, 3H), 3,16 (S, 2H), 3,38 (d, 2H), 6,16 (s, 1H) , 6,90 (d, 1H) , 7,04 (kolabované dd, 1H), 7,19 (d, 2H), 7,35 (d, 1H), 7,42 (d, 2H).
4-3: (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-(4-methylthienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt E(iii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-(4-methylthienyl)propl-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester E(iii) připraví z (Z)-N(1-(4-bromfenyl)-1-jódprop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru D a kyseliny 3-methyl-4-thiofenboronové, za zisku 574 mg (61%) žlutého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) 1,42 (s, 9H), 1,85 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 3,10-3,12 (m, 4H), 6,35 (t, 1H), 6,99 (d, 1H), 7,03 (d, 1H), 7,10 (d, 2H), 7,38 (d,
2H) .
4-4: (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-(3-methylthienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt E(iv)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-(3-methylthienyl)prop·· ···· • · · • · • 11 l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester E(iv) připraví z (Z)-N-(l(4-bromfenyl)-1-jodprop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru D a kyseliny 3-methyl-2-thiofenboronové, za zisku 436 mg (47%) žlutého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) 1,43 (s, 9H), 1,97 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 3,12 (s, 2H), 3,16 (d, 2H), 6,43 (t, 1H),
6,90 (d, 1H), 7,14 (d, 2H) , 7,26 (d, 1H) , 7,40 (d, 2H) .
4-5: (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt E(v)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en3-yl)sarkosin, terč.butylester E(v) připraví z (Z)-N-(1-(4bromfenyl)-l-jodprop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru D a kyseliny 2-toluylboronové, za zisku 379 mg (66%) žlutého oleje.
Příklad 5-1: (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt F(i)): Do roztoku (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru E(i) (21,14 g, 50,05 mmol) v dimethoxyethanu (210 ml) se přidá kyselina 4isopropylbenzenboronová (16,41 g, 100,1 mmol), Pd(PPh3)4 (2,89 g, 2,50 mmol) a 2M Na2CO3 (210 ml) . Důkladně míšená směs se zahřívá při teplotě zpětného toku po dobu 2 hodin. Směs se ochladí a rozdělí se mezi EtOAc a vodu. Organická fáze se promyje solankou, suší se (MgSO4), přefiltruje se a zahustí se. Chromatografií na koloně (2-5% aceton/hexany) následovanou druhou chromatografií (2-20% EtOAc/hexany) se získá (Z)-N-(l(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester F(i) (18,65 g, 81%) ve formě žlutého oleje. lH NMR (300 MHz, CDC13) 1,29 (d, 6H), 1,44 (s, 9H), 2,39 (s, 3H), 2,95 (hept, 1H), 3,16 (s, 2H) , 3,30 (d,
2H) , 6,26 (t, 1H), 6,93 (d, 1H) , 7,18 (d, 1H) , 7,26-7,35 (m,
5H), 7,50-7,54 (m, 4H).
·· ···© • · φ · • · • φ
5-2: (Z)-Ν-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-1-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt F(ii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosin, terč.butylester F(ii) připraví z (Z)-N-(l(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru E(i) a kyseliny 3-thiofenboronové, za zisku 1,00 g (50%) žlutého oleje.
5-3: (Z) -N-(1-(4-(2-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt F(iii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(2-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosin, terč.butylester F(iii) připraví z (Z)-N-(l(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru E(i) a kyseliny 2-thiofenboronové, za zisku 300 mg (64%) žlutého oleje.
5-4: (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-1-en-3yl)sarkosin, terč.butylester (meziprodukt F(iv)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosin, terč.butylester F(iv) připraví z (Z)-N-(l(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru F(iv) a kyseliny 2-furanboronové, za zisku 216
mg (82%) žlutého oleje. ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) 1,44 (s, 9H) ,
2,38 (s, 3H), 3,16 (s, 2H) , 3,30 (d, 2H), 6,23 (t, 1H) , 6,48
(d, 1H) , 6,64 (d, 1H), 6,90 (d, 1H), 7,16 (d, 1H), 7,26 -7,35
(m, 3H) , 7,46 (s, 1H), 7,58 (d, 2H) .
5-5: (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-len-3-yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt F(v)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester F(v) připraví z (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3·· ···* yl)sarkosinu, terc.butylesteru E(i) a kyseliny 3methoxyfenylboronové, za zisku 241 mg (99%) žlutého oleje.
NMR (300 MHz, CDC13) 1,44 (: 3, 9H) , 2,39 (s, 3H), 3,17 (s, 2H) ,
3, 30 (d, 2H) , 3,86 (s, 3H), 6,26 (t, IH), 6,88-6,93 (m, 2H),
7,12 (s, IH) , 7,18-7,19 (m, 2H) , 7,33-7,38 (m, 4H), 7,52 (d,
2H) .
5-6: (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en3-yl)sarkosin, terc.butylester (meziprodukt F(vi)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terc.butylester F(vi) připraví z (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosinu, terc.butylesteru E(I) a kyseliny 3methylfenylboronové, za zisku 150 mg (64%) světle žlutého oleje. ’Ή NMR (300 MHz, CDC13) 1,45 (s, 9H), 2,40 (s, 3H) , 2,42 (s, 3H), 3,17 (s, 2H), 3,32 (d, 2H), 6,26 (t, IH), 6,94 (d,
IH), 7,15-7,19 (m, 3H), 7,30-7,41 (m, 5H), 7,52 (d, 2H) .
5-7: (Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terc.butylester (Meziprodukt F(vii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terc.butylester F(vii) připraví z (Z)-N-(1-(4bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru E(i) a kyseliny 3-(trifluormethoxy)fenylboronové, za zisku 127 mg (51 %) žlutého oleje.
5-8: (Z)-N-(1-(4-(3-kyanfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terc.butylester (Meziprodukt F(viii)): Podobným způsobem se(Z)-N-(1-(4-(3-kyanfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)propl-en-3-yl)sarkosin, terc.butylester F(viii) připraví z (Z)-N(1-(4-bromfenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu,
ΦΦ ···· • Φ Φ Φ · • Φ · Φ • Φ Φ Φ Φ
Φ Φ Φ Φ Φ
ΦΦΦ ΦΦ ·· terc.butylesteru Ε(i) a kyseliny 3-kyanfenylboronové, za zisku mg (77%) žlutého oleje.
5-9: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, terc.butylester (Meziprodukt F(ix)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosin, terc.butylester F(ix) připraví z (Z)-N-(l(4-bromfenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru E(ii) a kyseliny 3-thiofenboronové, za zisku 152 mg (76%) žlutého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) 1,44 (s,
9H), 2,40 (s, 3H), 3,18 (s, 2H), 3,41 (d, 2H), 6,24 (t, 1H),
6,94 (d, 1H), 7,06 (dd, 1H) , 7,35-7,39 (m, 4H) , 7,46 (d, 1H) ,
7,54 (d, 2H) .
5-10: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-(4-methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, terc.butylester (Meziprodukt F(x)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1(3-(4-methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, terc.butylester F(x) připraví z (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(3-(4-methylthienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru E(iii) a kyseliny 3-thiofenboronové, za zisku 222 mg (64%) žlutého oleje.
5-11: (Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethyl)fenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, terc.butylester (Meziprodukt F(xi)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3(trifluormethyl)fenyl)fenyl)-1-(3-(4-methylthienyl))prop-l-en3-yl)sarkosin, terc.butylester F(xi) připraví z (Z)-N-(1-(4bromfenyl)-1-(3-(4-methylthienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru E(iii) a kyseliny 3-(trifluormethyl)fenylboronové, za zisku 260 mg (54%) světle žlutého oleje.
5-12: (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt F(xii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-(4-methylthienyl))prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester F(xii) připraví z (Z)-N-(1-(4bromfenyl)-1-(3-(4-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru E(iii) a kyseliny 3-methoxyfenylboronové, za zisku 193 mg (69%) žlutého oleje.
5-13: (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(2-(3methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester (meziprodukt F(xiii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3methylfenyl)fenyl)-1-(2-(3-methylthienyl))prop-l-en-3yl)sarkosin, terč.butylester F(xiii) připraví z (Z)-N-(1-(4bromfenyl)-1-(2-(3-methylthienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru E(iv) a kyseliny 3-methylfenylboronové, za zisku 176 mg (73%) žlutého oleje. ’Ή NMR (300 MHz, CDC13) 1,44 (s, 9H), 2,02 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 3,14 (s, 2H), 3,19 (d, 2H), 6,50 (t, 1H), 6,92 (d, 1H), 7,16 (d, 1H),
7,26-7,39 (m, 6H), 7,50 (d, 2H).
5-14: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-1en-3-yl)sarkosin, terč.butylester (Meziprodukt F(xiv)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester F(xiv) připraví z (Z)-N-(1-(4-bromfenyl)-1-(2-methylfenyl)propl-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru E(v) a kyseliny 3thiofenboronové, za zisku 62 mg (48%) žlutého oleje.
Příklad 6-1: (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(i)): (Z)-N-(1-(4-(4isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, terč.butylester F(i) (18,62 g, 40,3 mmol) se rozpustí v 96%
4« ···· « ·
6,58 (d, 1H), 6,80 (d, 1H), 7,10 (s, 1H), 7,25 (d, 2H), 7,31 (kolabované dd, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,52 (d, 2H).
• ·» · · • ·« · · · • · ·
444 ·· • « I · · « • 4 ··
6-5: (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosin (G(v)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin G(v) připraví z (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru F(v), za zisku 156 mg (74%) bílé pěny. XH NMR (300 MHz, methanol-d4) 2,76 (s, 3H) ,
3,56 (s, 2H), 3,82 (s, 3H) , 3,91 (d, 2H) , 6,36 (t, 1H) , 6,826,88 (m, 2H), 7,06-7,11 (m, 3H), 7,26-7,32 (m, 4H), 7,46 (d,
2H) .
6-6: (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en3-yl)sarkosin (G(vi)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3methylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin G(vi) připraví z (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru F(vi), za zisku 127 mg (100%) bezbarvého oleje. XH NMR (300 MHz, methanol-d4) 2,38 (s, 3H) , 2,76 (s, 3H), 3,56 (s, 2H) , 3,90 (d, 2H) , 6,36 (t, 1H), 6,83 (d, 1H), 7,10-7,15 (m, 2H), 7,24-7,33 (m, 6H) , 7,46 (d, 2H).
6-7: (Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(vii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin G(vii) připraví z (Z)-N-(1-(4(3-(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl}sarkosinu, terc.butylesteru F(vii), za zisku 80 mg (78%) bílého prášku.
• · · · · ·
• · 3 · ·
6-8: (Z)-N-(1-(4-(3-kyanfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin (G(viii)). Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3kyanfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(viii)) připraví z (Z)-N-(1-(4-(3-kyanfenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru F(viii), za zisku 48 mg (64%) bílého prášku.
6-9: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin (G(ix)): Podobným způsobem se (Z)-N-(1-(4-(3thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(ix)) připraví z (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-1en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru F(ix), za zisku 108 mg (59%) bílého prášku. XH NMR (300 MHz, CDC13) 2,73 (s, 3H) , 3,44 (s, 2H), 3,88 (d, 2H), 6,14 (t, 1H) , 6,90 (d, 1H), 7,04 (dd, 1H), 7,26-7,34 (m, 4H) , 7,38-7,41 (m, 2H), 7,48 (d, 2H).
6-10: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(x)): Podobným způsobem se (Z)-N-(l-(4-(3-thienyl)fenyl)-l-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(x)) připraví z (Z)N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-(4-methylthienyl))prop-l-en-3yl)sarkosinu, terč.butylesteru F(x), za zisku 157 mg (82%) bílého prášku.
6-11: (Z)-N-(1-(4-(3-trifluormethyl)fenyl)fenyl-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(xi)): Podobným způsobem se (Z)-N-(l-(4-(3-trifluormethyl)fenyl)fenyl-l-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(xi)) připraví z (Z) — N-(1-(4-(3-(trifluorunethyl)fenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terč.butylesteru F(xi), za zisku 99 mg (73%) bílého prášku.
6-12: (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(xii)): Podobným, způsobem se (Z)-N-(l-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-l-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin G(xii) připraví z (Z)N- (1- (4- (3-methoxyfenyl) fenyl) -1- (3- (4-methylthienyl) )prop-len-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru F(xii), za zisku 152 mg (69%) bílého prášku.
6-13: (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(2-(3methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin (G(xiii)): Podobným způsobem se (Z)-N-(l-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-l-(2-(3methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin G(xiii) připraví z (Z)N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(2-(3-methylthienyl))prop-len-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru F(xiii), za zisku 129 mg
(99%) bílého prášku. 1H NMR (300 MHz, methanol-d4) 1,97 (s,
3H) , 2,38 (s, 3H) , 2,80 (s, 3H) , 3,58 (s, 2H) , 3, 81 (d, 2H) ,
6, 65 (t, 1H), 6,90 (d, 1H), 7,15 (kolabované dd, 1H), 7 ,26-
7,38 (m, 6H), 7,48 (d, 2H).
6-14: (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-1en-3-yl)sarkosin (G(xiv)): Podobným způsobem se (Z)-N-(l-(4(3-thienyl)fenyl)-1-(2-methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin G(xiv) připraví z (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu, terc.butylesteru F(xiv), za zisku 37 mg (61%) bílého prášku.
Příklad 7: Test na transport prostřednictvím GlyT-1
Tento příklad ilustruje způsob pro měření vychytávání glycinu transfektovanými kultivovanými buňkami.
Buňky stabilně transfektované GlyT-lC (viz Kim, et al., Molecular Pharmacology, 45, 1994:608-617) se dvakrát promyly
HEPES pufrovaným salinickým roztokem (HBS). Buňky se potom inkubovaly po dobu 10 minut při 37 °C (a) bez potenciálního kompetitoru, (b) s 10 mM neradioaktivního glycinu nebo (c) s koncentrací potenciálního léku. Různé koncentrace testovaných léků se použily pro generování dat pro výpočet koncentrací vedoucích k 50% efektu (například IC50, což je koncentrace léku inhibující vychytávání glycinu o 50%). Potom se přidal roztok obsahující [3H]glycin v konečné koncentraci 50 nM (17,5 Ci/mmol). Buňky se potom inkubovaly za mírného třepání po dobu dalších 30 minut při 37 °C a potom se reakční směs aspirovala a promyla se třikrát ledově chladným PBS. Buňky se potom lyžovaly se scintilačním činidlem a směs se uvedla do rovnováhy. Radioaktivita buněk se stanovila za použití scintilační kamery. Potom se srovnávala data pro buňky kontaktované nebo nekontaktované s testovaným činidlem, v závislosti na typu provedeného testu.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu byly aktivní jako GlyT-1 inhibitory.
Příklad 8: Test vazby na vazebné místo pro glycin asociované s NMDA receptory
Tento příklad ilustruje způsob použitý pro měření interakce sloučenin s glycinovým místem na NMDA receptoru. V tomto testu se známá sloučenina vážící se na glycinové místo NMDA (tritiovaný-MDL 105519, od Amersham), použila pro vazbu na tkáň krysího hippokampu. Potom se přidala testovaná sloučenina a nechala se vytěsnit navázaný ligand. Testovaná sloučenina vytěsnila ligand a to vedlo ke snížení radioaktivity, které mohlo být kvantifikováno. Sloučeniny se obvykle testovaly ve dvou koncentracích, a pokud byla pozorována inhibice, tak se
9 · I • a et sloučeniny testovaly znovu v několika koncentracích, za zisku křivky dávka-reakce, ze které může být stanovena ICso·
Testované sloučeniny se připravily pro test naředěním v 50 mM Tris-acetátovém pufru. Podíly z krysí hippokampové membrány použité v testu se promyly dvakrát chladným 10 mM Trisacetátovým pufrem a ultracentrifugovaly se při 20000 rpm po dobu 15 minut, s rehomogenizací mezi výplachy. Výsledné pelety se potom resuspendovaly v 50 mM Tris-acetátovém pufru za zisku membrán v koncentraci vhodné pro test. Nespecifická vazba se definovala za přítomnosti 1 mM glycinu. Celková vazba se určila při použití pouze Tris-acetátového pufru.
Reakční směs se připravila kombinováním 75 gg přípravku homogenizovaných hippokampálních membrán s [3H]-MDL 105519 za zisku konečné koncentrace 5 nM a glycinu nebo testované sloučeniny jako roztoku v Tris-acetátovém pufru. Reakční směs se za třepání inkubovala při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Plotny se potom zpracovaly na GFC filtrech za použití 48w Brandell Harvestor. GFC filtry se předem zpracovaly alespoň po dobu 30 minut roztokem 0,5% BSA v destilované vodě pro redukci nespecifické vazby známého ligandu na filtr.
Jamky plotny se promyly 4-5 objemy chladného 50 mM Trisacetátového pufru. Filtry se potom přenesly do scintilačních zkumavek a do každé zkumavky se přidaly 2 ml scintilační kapaliny. Zkumavky se nechaly ustát přes noc a potom se odečítaly v Beckman β-čítači. Data se analyzovala za použití Prism softwaru.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu nevykazovaly žádnou významnou vazbu na vazebné místo pro glycin asociované s NMDA receptorem.
Příklad 9: Test vazby na glycinový receptor
Tento příklad ilustruje test použitý pro měření zkřížené reaktivity sloučenin v glycinovým receptorem. V tomto testu se známá sloučenina vážící se na glycinový receptor, [3H]strychnin, použila pro vazbu na tkáň krysí míchy. Potom se přidala testovaná sloučenina a nechala se vytěsnit navázaný ligand. Testovaná sloučenina vytěsnila ligand a to vedlo ke snížení radioaktivity, které mohlo být kvantifikováno. Sloučeniny se obvykle testovaly ve dvou koncentracích, a pokud byla pozorována inhibice, tak se sloučeniny testovaly znovu v několika koncentracích, za zisku křivky dávka-reakce, ze které může být stanovena IC50.
Testované sloučeniny se připravily pro test naředěním ve fosforečnanu draselném. Podíly krysích míšních membrán použitých v tomto testu se promyly dvěma podíly chladného fosfátového pufru a potom se provedlo odstředění při 4 °C,
14000 rpm, mezi výplachy. Výsledné pelety se resuspendovaly v objemu fosfátového pufru za zisku koncentrací vhodných pro test. Nespecifická a celková vazba se určily za použití 10 mM konečné koncentrace glycinu a pouze fosfátového pufru, v příslušném pořadí.
Reakční směs se připravila smísením 150 gg krysích míšních membrán s [3H] strychninem v konečné koncentraci 7 nM a glycinu nebo testované sloučeniny. Reakční směs se inkubovala po dobu 2 hodin za třepání na ledu. Plotny se potom zpracovaly na GFC filtrech za použití 48w Brandell Harvestor. GFC filtry se předem zpracovaly alespoň po dobu 30 minut roztokem 0,5% BSA v destilované vodě pro redukci nespecifické vazby známého ligandu na filtr. Jamky plotny se promyly 4-5 objemy chladného fosfátového pufru. Filtry se potom přenesly do scintilačních
• · A ·
A · « ·
A · · ·
A ··· ·« zkumavek a do každé zkumavky se přidaly 2 ml scintilační kapaliny. Zkumavky se nechaly ustát přes noc a potom se odečítaly v Beckman β-čítači. Data se analyzovala za použití
Prism softwaru.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu nevykazovaly žádnou významnou vazbu na glycinový receptor.
Příklad 10: Test pro měření toxicity u myší
Tento příklad popisuje test toxicity 5-denního chronického orálního podávání inhibitorů GlyT-1. Sloučeniny se podávaly orálně (PO) samcům CD-I myší po dobu 5 dnů, v dávce 40 mg/kg/den. Denně se prováděl záznam chování (klinických příznaků) a tělesné hmotnosti, pro všechny testované sloučeniny.
Samci CD-I myší se zakoupily od Charles River Labs (Kingston, NY). Zvířata měla při přijetí hmotnost 20-25 g. Zvířata se nechala aklimatizovat v boxu s kontrolovanou teplotou/vlhkostí (72 0 ± 5 0 F/50% ±5%), s obvyklým 12hodinovým cyklem světlo/tma (světlo od 07,00 hod.) po dobu 5 dnů před testem. Všechna zvířata se nechala během aklimatizace a testu jíst (Purina Labdiet Rodent krmivo # 5001) a pít (Elizabethtown Water Company) ad libitum. Den před testem se zvířata náhodně rozdělila do skupin. Všechna zvířata vybraná pro test měla hmotnost alespoň 20 gramů a zdála se být v dobrém stavu. Každé zvíře se vážilo denně po dobu 5 dnů. Zvířata se nechala na stejném místě po dobu 3 dnů po ukončení chronické aplikace léku.
V den zahájení testu se připraví čerstvý zásobní roztok každé testované sloučeniny. Podíly se naředily na koncentraci ··· · * potřebnou pro denní aplikaci. Zásobní roztoky se uchovávaly v lednici, pokud se nepoužívaly. Každá sloučenina se rozpustila v malém množství destilované vody. Jeden ekvivalent hydroxidu sodného (2 N) se mohl přidal pro usnadnění rozpuštění každé testované sloučeniny. Potom se přidalo vehikulum v množství dostatečném pro dosažení konečného objemu. Konečné objemy se upravily tak, aby odpovídaly procentu volné baze. Vehikulem použitým v pokusu byl hydroxypropyl-P-cyklodextrin (HPCD) Acros, šarže 011849601, rozpuštěný v destilované vodě v koncentraci 10% hmot./objem. pH se upravilo za použití hydroxidu sodného (2N) na hodnotu testované sloučeniny (obvykle mezi 8 a 10).
Všechny připravené testované sloučeniny byly buď v čirém roztoku nebo v mírně zakalené suspenzi. Suspenze se mísily bezprostředně před použitím. Všem zvířatům se podávaly buď testované sloučeniny, nebo vehikula per os (po) pomocí jehel typu 21, v objemu 10,0 ml/kg. Denně zjištěné tělesné hmotnosti se použily pro stanovení jednotlivých dávek. Všechny testované sloučeniny se odvážily na Denver Instruments analytických váhách (model # A-250). Zvířata se vážila na stolních váhách s dolním závěsem Ohaus, model # LS2000.
Zvířata se hodnotila na zřetelné změny chování (klinické příznaky) bezprostředně po podání testovaných sloučenin a potom znovu ve 4 a 24 hodině. U zvířat se hodnotilo 27 jednotlivých klinických příznaků:
Aktivita: Pozoruje se, zda je zvíře abnormálně hyper- nebo hypo-aktivní.
Ataxie: vratká chůze, neschopnost koordinovat vůlí ovládané svalové pohyby.
Katalepsie: Stav charakterizovaný bezvládností končetin, které mohou být umístěny do různých poloh, ve kterých setrvají delší dobu, chybění reakce na podněty, viditelný puls a respirace a bledá pokožka.
Chromaturia: červené zabarvení moči.
Chromodacryorrhea: červenavý výtok z očí.
Stav stolice: měkká a vodnatá, tuhá a malá.
Konvulze: klonické - generalizovaný intermitentní tonus a relaxace kosterního svalstva.
Tonické - generalizovaný konstantní svalový tonus, často doprovázený natažením předních a/nebo zadních končetin. Cyanosa: modravé zbarvení externích tkání (uši, tlapky, ocas) Smrt: jasně se určí, zda spontánní, nebo utracením
Enoftalmie abnormální retrakce bulbů do orbity
Epistaxe: červenavý výtok z nozder
Exoftalmie: abnormální protruze bulbů
Ochablost: kosterní svalstvo bez tonu
Skrčená poloha: zvíře se krčí na podlaze
Hypersensitivita na dotyk: zvíře piští nebo nadměrně reaguje na dotyk
Lakrimace (obě oči): sekrece a vyšší objem slz
Laterální ležení: zvíře je spontánně na zádech
Ztráta vzpřimování: zvíře zůstává na zádech, je-li položeno do této polohy
Miosa: nadměrná kontrakce očních panenek
Mydriasa: nadměrná dilatace očních panenek
Ptoza víček: pokles víček na obou očích
Piloerekce: zježení srsti na hřbetu a krku
Respirační fenomény: vlhké (slizniční): bublavé zvuky při dýchání
Suché: vrzoty a pískoty během respirace Respirace(||): neobvyklé zvýšení nebo snížení respirační aktivity
·· ··
Rigidita: chabá: končetiny zůstávají v poloze, do které jsou umístěny.
spastická: svalová ztuhlost, končetinami se obtížně hýbe
Salivace (zvýšená): zvýšená tvorba a sekrece slin
Sedace: zvíře reaguje pomalu na dotek a manipulaci
Stereotypie: konstantní opakování některých bezúčelných pohybů Tremor: jemný - konstantní rychlé vibrace těla a/nebo končetin
Hrubý - rychlé vibrace těla a/nebo končetin, které se zvyšují nebo snižují v čase.
Jakékoliv zvíře, u kterého byla pozorována (1) ztráta tělesné hmotnosti, tak že její hodnota poklesla pod 75% průměrné hodnoty pro kontrolní skupinu pro 2 následující dny, nebo (2) nástup moribundního stavu, při kterém zvíře nepřijímalo normálně potravu ani tekutiny, bylo utraceno před ukončením pokusu.
Data pro toxicitu získaná v testu, jak je popsán výše, jsou uvedena v tabulkách 1 až 14 pro sloučeniny Gi až Gxiv, včetně. Pozorování zvířat se provedlo bezprostředně po podání a potom znovu po 4 hodinách a po 24 hodinách. Pozorování se zaznamenávala za použití hodnot podle následující škály.
normální vzhled 7 epistaxe 14 ptosa víček 21 rigidita aktivita (ΤΦ) 8 cyanosa 15 ztráta vzpřimování 22 ataxie sedace/letargie 9 ochablost 16 chromáturie piloerekce stereotypie měkká stolice respirace 17 salivace skrčení 18 lakrimace tremor konvulze 25 katalepsie enoftalmie 19 miosa 26 laterální ležení chromodacryorrhea 13 exoftalmus 20 mydriasa 27 smrt
Tabulka 1: Sloučenina G(iii)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 14 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 14,10 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
Tabulka 2: Sloučenina G(viii)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
Tabulka 3: Sloučenina G(xiv)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
Tabulka 4: Sloučenina G(ix)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
Tabulka 5: Sloučenina G(ii)
·· ···e ·· 4 · 9 ♦ 4 9 · · · 9 * • 9 9 9 9 • 999 99 49
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 1 0 1,22,26, 15 1,H
2 40 0 0 0 1,22,24+,26,15,14 1,22,15,14
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
H - narážení hlavou + vyprovokováno dotykem
Tabulka 6: Sloučenina G(x)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 —
2 40 0 0 0 0 —
3 40 0 0 0 0 —
Tabulka 7: Sloučenina G(xii)
1000 ► 0 0 < 00 00
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 —
2 40 0 0 0 0 —
3 40 0 0 0 0 —
Tabulka 8: Sloučenina G(xi)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 —
2 40 0 0 0 0 —
3 40 0 0 0 0 —
A A
Tabulka 9: Sloučenina G(xiii)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 —
2 40 0 0 0 0 —
3 40 0 0 0 0 —
Tabulka 10: Sloučenina G(i)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
·· ····
Tabulka 11: Sloučenina G(v) • 9 * • · 9 9 · ·· 9 • · · 9 • · · ·· ··· · • · · • 9 · ♦ · · 9 • · 9 9
99
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
Tabulka 12: Sloučenina G(vi)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 Ί 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
·· ····
Tabulka 13: Sloučenina G(vii)
9 9 9 • · · ·
9 9 9 9
9 9 9 9
999 99 99
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
Tabulka 14: Sloučenina G(iv)
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 14 0 14 0 14
2 40 1,22,14,10,2 1,22,15,10 0 1,22,14,H,10,2 0
3 40 0 0 14 0 0
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 : 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
H - narážení hlavou
999 9 9 • 9 9999 ·· · 9 9 • 9 9 9 « 9 9 9 9 • 9 9 9 9
999 99 99
Podle srovnání jsou sloučeniny vzorce 1 méně toxické než ostatní GlyTl inhibitory stejné účinnosti. Například sloučeniny Η, I, J a K uvedené dále vykazují vyšší toxicitu než sloučeniny podle předkládaného vynálezu, jak je patrné z tabulek 15, 16, 17 a 18.
Tabulka 15: Sloučenina H*
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 1,22,8,14,10, 2 1,2
2 40 0 1,22,10,2 1,26,15, 3 ,10,2 0 1,2
3 40 1,3,14,2 1,22,14,2 1,22,9,10 ,2 1,9,26,15,14, 10,2 1,2
* v tomto pokusu bylo chování hodnoceno pouze jednou denně ·· ···· • ·
I « ·· • * • · * ► ··
Tabulka 16: Sloučenina I
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
16 40 4-1,26, 4-10 4-1,22,26, 4-10 4-1,22, 4-io 4-1,22,26, 4-10,1 4-1,22, 4-io
17 40 4-1,22, 4-10 4-1,22, 4-10 4-1,26, 4-io 4-1,26,15, 4-10 4-1,26, 4-io
18 40 4-1,22,26, 4-10 4-1,22, 4-io 4-1,22,26, 4-io 4-1,22, 4-10 4-1,22, 4-io
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
16 40 0 0 0 0 —
17 40 0 0 0 0 —
18 40 0 0 0 0 —
I - těžké svědění
Tabulka 17: Sloučenina J
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 0 0 0 0
2 40 0 0 0 0 0
3 40 0 0 0 0 0
·· »··· ♦
• »
··
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 0 1,2 1,9,18,26,15,14,10,2* — —
2 40 0 0 1,6,9,18,26,15,14,10,2* — —
3 40 0 2 1,9,18,26,15,14,10,2,23* — —
Tabulka 18: Sloučenina K
4 hodiny
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 1 —
2 40 0 —
3 40 0 1,22,24,15,2
24 hodin
Den
Zvíře č. Dávka mg/kg 1 2 3 4 5
1 40 1,22,18,26,15,14,10,23 ,27*
2 40 1,26,15,14,10,27* —
3 40 1,26 1,22,24,15,14,10,23 ,27*
* zvířata byla utracena v důsledku moribundního stavu

Claims (60)

  1. ·· ···» » · ·
    I 4 4 fV AjOCů-3sd5
    Vzorec 1 kde:
    Arx je thiofenová skupina, kterou může být 2 nebo 3 thiofen a která je volitelně substituovaná až jedním substituentem vybraným ze skupiny zahrnující methyl nebo ethyl; a
    Ar2 je vybraný ze skupiny zahrnující thiofen, furan a substituovaný fenyl, kde substituent na fenylové skupině je vybrán ze skupiny zahrnující Ci_6 alkyl, halogen, Cx-6 halogenalkyl, Ci-6 alkoxy, Ci_6 halogenalkoxy, kyano, a a její soli, solváty a hydráty.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde Arx je 2-thiofen.
  3. 3. Sloučenina podle nároku 1, kde Arx je 2-(3-methylthiofen).
  4. 4. Sloučenina podle nároku 1 kde Arx qč- 3-thiof en.
  5. 5. Sloučenina podle nároku 1, kde Arx je 3-(4-methylthiofen).
  6. 6. Sloučenina podle nároku 1, kde Ar2 je substituovaný fenyl, kde substituent je vybrán ze skupiny zahrnující CF3, Me, iPr,
    MeO, CN a CF3O.
  7. 7. Sloučenina podle nároku 1, kde Ar2 je furan.
    • ·« 0 0 0 • 00 • 00 • • 00 • 00 • 0 0 0 ···· 0 • 0 0 0 • • 0 0 0 0 ·· 00 000 000 ·· 00
  8. 8. Sloučenina podle nároku 1, kde Ar2 je thiofen.
  9. 9. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny zahrnující:
    (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(2-thienyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethoxy)fenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-kyanfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(3-(4-methylthienyl)prop-l-en3-yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-(trifluormethyl)fenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin;
    (Z)-N-(1-(4-(3-methoxyfenyl)fenyl)-1-(3-(4methylthienyl))prop-l-en-3-yl)sarkosin; a (Z)-N-(1-(4-(3-methylfenyl)fenyl)-1-(2-(3-methylthienyl))propl-en-3-yl)sarkosin.
  10. 10. Sloučenina (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin.
  11. 11. Sloučenina podle nároku 9, (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin.
  12. 12. sloučenina podle nároku 9, (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin.
  13. 13. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1 a nosič.
  14. 14. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 10 a nosič.
  15. 15. Prostředek vyznačuj ící sloučeninu podle nároku 11 a nosič.
  16. 16. Prostředek vyznačující se sloučeninu podle nároku 12 a nosič.
    tím, že obsahuje tím, že obsahuje
  17. 17. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.
  18. 18. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 10 a farmaceuticky přijatelný nosič.
  19. 19. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 11 a farmaceuticky přijatelný nosič.
  20. 20. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 12 a farmaceuticky přijatelný nosič.
  21. 21. Způsob léčení pacientů s onemocněním, u kterého je indikován inhibitor transportu glycinu, vyznačuj ící se t í m, že zahrnuje krok podání farmaceutického prostředku podle nároku 17 pacientovi.
  22. 22. Způsob léčení pacientů s onemocněním, u kterého je indikován inhibitor transportu glycinu, vyznačuj ící se t í m, že zahrnuje krok podání farmaceutického prostředku podle nároku 18 pacientovi.
  23. 23. Způsob léčení pacientů s onemocněním, u kterého je indikován inhibitor transportu glycinu, vyznačuj ící se t í m, že zahrnuje krok podání farmaceutického prostředku podle nároku 19 pacientovi.
  24. 24. Způsob léčení pacientů s onemocněním, u kterého je indikován inhibitor transportu glycinu, vyznačuj ící se t i m, že zahrnuje krok podání farmaceutického prostředku podle nároku 20 pacientovi.
  25. 25. Způsob podle nároku 21vyznačující se tím, že onemocněním je schizofrenie.
  26. 26. Způsob podle nároku 22vyznačující se tím, že onemocněním je schizofrenie.
  27. 27. Způsob podle nároku 23 vyznačující se tím, že onemocněním je schizofrenie.
  28. 28. Způsob podle nároku 24 vyznačující se tím, že onemocněním je schizofrenie.
  29. 29. Způsob podle nároku 21vyznačující se tím, že onemocněním je kognitivní dysfunkce.
  30. 30. Způsob podle nároku 22 vyznačující se tím, že onemocněním je kognitivní dysfunkce.
  31. 31. Způsob podle nároku 23 vyznačující se tím, že onemocněním je kognitivní dysfunkce.
  32. 32. Způsob podle nároku 24 vyznačující se tím, že onemocněním je kognitivní dysfunkce.
  33. 33. Způsob podle nároku 21 vyznačující se tím, že onemocněním je Alzheimerova nemoc.
  34. 34. Způsob podle nároku 22 vyznačující se tím, že onemocněním je Alzheimerova nemoc.
  35. 35. Způsob podle nároku 23 vyznačující se tím, že onemocněním je Alzheimerova nemoc.
  36. 36. Způsob podle nároku 24 vyznačuj ící že onemocněním je Alzheimerova nemoc.
    se tím,
  37. 37. Použití sloučeniny vzorce 1 kde ··· ·· ··· ··· ·· ··
    Ari je thienyl volitelně substituovaný až jedním methylem nebo ethylem, a
    Ar2 je vybrán ze skupiny zahrnující thienyl, furyl a substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty jsou vybrány ze skupiny zahrnující Ci_6 alkyl, halogen, Ci-6 halogenalkyl, Ci_6 alkoxy, Ci_6 halogenalkoxy a kyan, pro léčbu pacientů s onemocněním, při kterém je indikován inhibitor transportu glycinu.
  38. 38. Použití sloučeniny vzorce 1 podle nároku 37, kde onemocnění je vybráno ze skupiny zahrnující schizofrenii, kognitivní dysfunkce, demence (včetně Alzheimerovij nemoci), poruchy pozornosti, deprese, autismus, Rettovu nemoc, dětskou desintegrativní poruchu, Aspergerovu nemoc a atypický autismus.
  39. 39. Použití sloučeniny vzorce 1 podle nároku 38, kde onemocněním je schizofrenie.
  40. 40. Použití sloučeniny vzorce 1 podle nároku 38, kde sloučeninou je (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)propl-en-3-yl)sarkosin.
  41. 41. Použití sloučeniny vzorce 1 podle nároku 39, kde sloučeninou je (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin.
  42. 42. Použití sloučeniny (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin pro léčbu pacientů s onemocněním, při kterém je indikován inhibitor transportu glycinu.
  43. 43. Použití sloučeniny vzorce 1 kde
    Ari je thienyl volitelně substituovaný až jedním methylem nebo ethylem, a
    Ar2 je vybrán ze skupiny zahrnující thienyl, furyl a substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty jsou vybrány ze skupiny zahrnující Ci-6 alkyl, halogen, Ci-6 halogenalkyl, Ci-e alkoxy, Ci_6 halogenalkoxy a kyan, pro výrobu léku pro léčbu pacientů s onemocněním, při kterém je indikován inhibitor transportu glycinu.
  44. 44. Použití sloučeniny vzorce 1 podle nároku 43, kde onemocnění je vybráno ze skupiny zahrnující schizofrenii, kognitivní dysfunkce, demence (včetně Alzheimerovif nemoci), poruchy pozornosti, deprese, autismus, Rettovu nemoc, dětskou desintegrativní poruchu, Aspergerovu nemoc a atypický autismus.
  45. 45. Použití sloučeniny vzorce 1 podle nároku 44, kde onemocněním je schizofrenie.
  46. 46. Použití sloučeniny podle nároku 45, kde sloučeninou je (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin.
  47. 47. Použití sloučeniny podle nároku 45, kde sloučeninou je (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin.
  48. 48. Použití sloučeniny podle nároku 43, kde sloučeninou je (Z)-N-(1-(4-(2-furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin.
  49. 49. Použití sloučeniny podle nároku 43, kde sloučeninou je (Z)-N-(1-(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin.
  50. 50. Použití sloučeniny (Z)-N-(1-(4-(3-thienyl)fenyl)-1-(2methylfenyl)prop-l-en-3-yl)sarkosinu pro výrobu léku pro léčbu pacientů s onemocněním, při kterém je indikován inhibitor transportu glycinu.
  51. 51. Způsob pro přípravu jodidu C;
    vyznačující se tím, že zahrnuje:
    a) redukci meziproduktu B pomocí natrium-bis (2-methoxyethoxy) aluminiumhydridu (Red-Al) ; a
    b) reakci získaného meziproduktu s jódem za zisku jodidu C.
  52. 52. Způsob přípravy meziproduktu D;
    Br (D), ►· ···· • ·
    a) redukci meziproduktu B pomocí natrium-bis(2-methoxyethoxy)aluminbmhydridu (Red-Al) a reakci získaného meziproduktys jódem za zisku jodidu C;
    OH (c);
    b) konverzi alkoholové skupiny jodidu C na bromid; a
    c) nahrazení bromidu terc.butylesterem sarkosinu za zisku meziproduktu D.
  53. 53. Způsob podle nároku 52 vyznačující se tím, že stupeň konverze (b) zahrnuje reakci s N-bromsukcinimidem a trifenylfosfinem.
  54. 54. Způsob přípravy meziproduktu E;
    N CO2tBu
    Br (E);
    kde Ari je thienyl volitelně substituovaný až jedním methylem nebo ethylem, vyznačující se tím, že zahrnuje:
    a) redukci meziproduktu Β __ '0H
    Br- - (B) pomocí natrium-bis(2-methoxyethoxy)aluminbmhydridu (Red-Al) a reakci získaného meziproduktu s jódem za zisku jodidu C;
    SOH (C);
    b) konverzi alkoholové skupiny jodidu C na bromid; a
    c) nahrazení bromidu terc.butylesterem sarkosinu za zisku meziproduktu D;
    (D);
    d) kondenzaci meziproduktu D s kyselinou boronovou vzorce AriB(OH)2, kde Ari je stejný, jak je popsáno výše, za přítomnosti palladiového (0) katalyzátoru, za zisku meziproduktu vzorce E.
  55. 55. Způsob podle nároku 54 vyznačující se tím, že stupeň konverze (b) zahrnuje reakci s N-bromsukcinimidem a trifenylfosfinem.
  56. 56. Způsob přípravy meziproduktu G;
    CO2H kde (®)»
    Ari je thienyl volitelně substituovaný až jedním methylem nebo ethylem; a
    Ar2 je vybrán ze skupiny zahrnující thienyl, furyl a substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty jsou vybrány ze skupiny zahrnující Ci_6alkyl, halogen, Ci_6halogenalkyl, Ci6alkoxy, Ci-6halogenalkoxy a kyan;
    vyznačující se tím, že zahrnuje:
    a) redukci meziproduktu B pomocí natrium-bis(2-methoxyethoxy)alumirfumhydridu (Red-Al) • 9 • · ··
    Μ 999« • · 1 • 99 a reakci získaného meziproduktys jódem za zisku jodidu C;
    b) konverzi alkoholové skupiny jodidu C na bromid; a
    c) nahrazení bromidu terc.butylesterem sarkosinu za zisku meziproduktu D ’ CCWBu (D);
    d) kondenzaci meziproduktu D s kyselinou boronovou vzorce AriB(OH)2, kde Ar! je stejný, jak je popsáno výše, za přítomnosti palladiového (0) katalyzátoru, za zisku meziproduktu vzorce E (E);
    e) kondenzaci meziproduktu E s kyselinou arylboronovou vzorce Ar2B(OH)2, kde Ar2 je stejný, jak je popsáno výše, za přítomnosti palladiového (0) katalyzátoru, za zisku meziproduktu vzorce F (F);
    f) hydrolyzování esterové skupiny meziproduktu F za zisku sloučeniny vzorce G.
    56 vyznačující se tím, zahrnuje reakci s kyselinou mravenčí.
  57. 57. Způsob podle nároku 56 vyznačující se tím, že stupeň konverze (b) zahrnuje reakci s N-bromsukcinimidem a trifenylfosfinem.
  58. 58. Způsob podle nároku že stupeň hydrolýzy (f)
  59. 59. Sloučenin vzorce 1
    Vzorec 1 kde:
    Ari je thiofenová skupina, kterou může být 2 nebo 3 thiofen a která je volitelně substituovaná až jedním substituentem vybraným ze skupiny zahrnující methyl nebo ethyl; a
    Ar2 je vybraný ze skupiny zahrnující thiofen, furan a substituovaný fenyl, kde substituent na fenylové skupině je vybrán ze skupiny zahrnující Ci-6 alkyl, halogen, Ci-6 halogenalkyl, Ci-6 alkoxy, Ci-β halogenalkoxy, kyan, kde uvedená sloučenina je připravená způsobem podle nároku 56.
  60. 60. Sloučenina vybraná ze skupiny zahrnující: (Z)—N—(l—(4—(2— furyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3-yl)sarkosin, a (Z)-N-(l(4-(4-isopropylfenyl)fenyl)-1-(3-thienyl)prop-l-en-3yl)sarkosin, kde uvedená sloučenina je připravená způsobem podle nároku 56.
CZ20032503A 2001-02-16 2002-02-15 Inhibitory GlyT - 1 CZ20032503A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26924101P 2001-02-16 2001-02-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20032503A3 true CZ20032503A3 (cs) 2004-02-18

Family

ID=23026417

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20032503A CZ20032503A3 (cs) 2001-02-16 2002-02-15 Inhibitory GlyT - 1

Country Status (30)

Country Link
US (1) US6667336B2 (cs)
EP (1) EP1368336B9 (cs)
JP (2) JP2004523548A (cs)
KR (1) KR100900020B1 (cs)
CN (1) CN1219776C (cs)
AT (1) ATE327986T1 (cs)
AU (1) AU2002235682C1 (cs)
BG (1) BG108164A (cs)
BR (1) BR0207307A (cs)
CA (1) CA2438367A1 (cs)
CY (1) CY1105529T1 (cs)
CZ (1) CZ20032503A3 (cs)
DE (1) DE60211866T2 (cs)
DK (1) DK1368336T3 (cs)
EA (1) EA006636B1 (cs)
EE (1) EE05329B1 (cs)
ES (1) ES2266446T3 (cs)
HR (1) HRP20030696A2 (cs)
HU (1) HUP0303185A3 (cs)
IL (1) IL157194A (cs)
MX (1) MXPA03007309A (cs)
NO (1) NO329038B1 (cs)
NZ (1) NZ527695A (cs)
PL (1) PL365024A1 (cs)
PT (1) PT1368336E (cs)
SI (1) SI1368336T1 (cs)
SK (1) SK287304B6 (cs)
UA (1) UA75114C2 (cs)
WO (1) WO2002066456A2 (cs)
ZA (1) ZA200307201B (cs)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6191165B1 (en) * 1996-05-31 2001-02-20 Allelix Neuroscience Inc. Pharmaceutical for treatment of neurological and neuropsychiatric disorders
WO2006066121A2 (en) * 2004-12-16 2006-06-22 Janssen Pharmaceutica N.V. Combination of a glycine transporter (glyt1) inhibitor and an antipsychotic for the treatment of symptoms of schizophrenia as well as its preparation and use thereof
WO2008040669A2 (en) * 2006-10-02 2008-04-10 Janssen Pharmaceutica N.V. Novel intermediates for the preparation of a glyt1 inhibitor
WO2008065500A2 (en) * 2006-11-30 2008-06-05 Pfizer Products Inc. Heteroaryl amides as type i glycine transport inhibitors
CN103374057B (zh) * 2012-04-16 2015-08-19 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 一种对甘氨酸转运子具有抑制活性的化合物

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3050800C2 (cs) 1979-03-22 1989-06-22 Continental Pharma Inc., Bruessel/Bruxelles, Be
BE885303A (fr) 1980-09-19 1981-03-19 Continental Pharma Glycinamides
US4383999A (en) 1981-05-26 1983-05-17 Smithkline Beckman Corporation Inhibition of GABA uptake by N-substituted azaheterocyclic carboxylic acids and their esters
AU552050B2 (en) 1981-05-26 1986-05-22 Smithkline Beckman Corporation N-substituted azeheterocyclic carboxylic acids and their esters
US4514414A (en) 1982-10-25 1985-04-30 Smithkline Beckman Corporation N-Substituted pyrrolidineacetic acids and their esters
DK288385D0 (da) 1985-06-26 1985-06-26 Novo Industri As Aminosyrederivater
FI864246A7 (fi) 1985-11-08 1987-05-09 Warner Lambert Co N-substituerade 3-piperidin- eller 3-pyridinkarboxylsyror samt deras derivat.
US4772615A (en) 1985-11-08 1988-09-20 Warner-Lambert Company Various N-substituted 3-piperidine carboxylic acids or N-substituted 3-pyridinecarboxylic acids and derivatives thereof
PT84064B (pt) 1986-01-07 1989-07-31 Novo Industri As Processo para a preparacao de novos derivados de aminoacidos e de composicoes farmaceuticas que os contem
JPH02129158A (ja) 1988-11-07 1990-05-17 Nippon Steel Corp 光学活性なグリシン誘導体及びその製造方法
IE913279A1 (en) * 1990-09-26 1992-04-08 Astra Ab (2-Thienyl)alkylamine Derivatives Having Neuroprotective¹Properties
ES2036926B1 (es) 1991-08-08 1994-01-16 Uriach & Cia Sa J "procedimiento para la obtencion de derivados de la (2-alquil-3-piridil)metilpiperazina".
DK0871440T3 (da) 1995-12-07 2006-07-10 Daniel C Javitt Behandling af negative og kognitive symptomer på skizofreni med glycinoptagelsesantagonister
US6191165B1 (en) 1996-05-31 2001-02-20 Allelix Neuroscience Inc. Pharmaceutical for treatment of neurological and neuropsychiatric disorders
PT1014966E (pt) * 1996-05-31 2006-12-29 Allelix Neuroscience Inc Composição farmacêutica para o tratamento de disturbios neurológicos e neuropsiquiátricos.
WO1998003473A1 (en) * 1996-07-22 1998-01-29 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
HRP20000460A2 (en) * 1998-01-09 2001-06-30 Pfizer Matrix metalloprotease inhibitors
US6103743A (en) * 1999-08-06 2000-08-15 Allelix Neuroscience, Inc. Unsaturated amino acid derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
WO2002066456A2 (en) 2002-08-29
EA006636B1 (ru) 2006-02-24
CN1491221A (zh) 2004-04-21
US6667336B2 (en) 2003-12-23
HK1061025A1 (en) 2004-09-03
CN1219776C (zh) 2005-09-21
EE200300394A (et) 2003-12-15
ZA200307201B (en) 2004-07-28
JP2010059182A (ja) 2010-03-18
SK11442003A3 (sk) 2004-03-02
KR100900020B1 (ko) 2009-06-01
ES2266446T3 (es) 2007-03-01
EP1368336B1 (en) 2006-05-31
NO20033634L (no) 2003-10-08
IL157194A (en) 2006-12-31
BG108164A (en) 2004-07-30
US20030176489A1 (en) 2003-09-18
NO20033634D0 (no) 2003-08-15
CY1105529T1 (el) 2010-07-28
NZ527695A (en) 2005-05-27
EP1368336A2 (en) 2003-12-10
SI1368336T1 (sl) 2006-10-31
NO329038B1 (no) 2010-08-02
MXPA03007309A (es) 2004-06-30
SK287304B6 (sk) 2010-06-07
DK1368336T3 (da) 2006-10-02
PL365024A1 (en) 2004-12-27
ATE327986T1 (de) 2006-06-15
DE60211866T2 (de) 2007-06-14
PT1368336E (pt) 2006-10-31
KR20040028719A (ko) 2004-04-03
DE60211866D1 (de) 2006-07-06
UA75114C2 (en) 2006-03-15
EA200300900A1 (ru) 2004-02-26
EP1368336B9 (en) 2007-02-14
BR0207307A (pt) 2004-08-17
EE05329B1 (et) 2010-08-16
CA2438367A1 (en) 2002-08-29
AU2002235682B2 (en) 2007-04-26
AU2002235682C1 (en) 2008-12-11
JP2004523548A (ja) 2004-08-05
WO2002066456A3 (en) 2002-10-17
HRP20030696A2 (en) 2005-04-30
HUP0303185A2 (hu) 2003-12-29
HUP0303185A3 (en) 2008-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2332470T3 (es) Derivados de tiofeno sustituidos como antagonistas del receptor de glucagon, preparacion y usos terapeuticos.
US6525085B2 (en) Diaryl-enynes
EP1296950A2 (en) Aminopiperidines for use as glyt-1 inhibitors
JP2010059182A (ja) ＧｌｙＴ−１阻害剤
AU2002235682A1 (en) Thiophene substituted amine derivatives as GLYT-1 inhibitors
HK1061025B (en) Thiophene substituted amine derivatives as glyt-1 inhibitors
AU780922C (en) Diaryl-enynes