CZ2002366A3

CZ2002366A3 - Dietetický doplněk zvyąující energetický metabolismus svalů obsahující alkanoylkarnitin a ribosu

Info

Publication number: CZ2002366A3
Application number: CZ2002366A
Authority: CZ
Inventors: Pietro Pola
Original assignee: Sigma-Tau Healthscience S. P. A.
Priority date: 2000-06-14
Filing date: 2001-06-01
Publication date: 2002-07-17
Also published as: DE60103055D1; EP1292312A1; DK1292312T3; MXPA02001550A; IT1317043B1; US20100189704A1; SK287308B6; NO20020731L; TR200401096T4; WO2001095915A1; IL148038A0; US20030108537A1; EP1292312B1; HU228642B1; ITRM20000323A1; PL199641B1; ATE265216T1; HUP0202496A3; US8747906B2; AU782367B2

Description

Oblast techniky

Vynález se týká dietetického doplňku zvyšujícího energetický metabolismus svalů na bázi alkanoylkarnitinů a ribosy.

Předložený vynález se týká zdravé výživy a dietetického doplňku obsahujícího jako charakteristické složky alkanoyl-L-karnitin vybíraný ze skupiny sestávající z isovaleryl-L-karnitinu a propionyl-L-karnitinu nebo jejich farmakologický přijatelných solí nebo jejich směsí a monosacharid pentosy, zvláště ribosy nebo jejích fosforylovaných analogů.

Dosavadní stav techniky

Isovaleryl-L-karnitin - přirozená složka zásoby karnitinů -specificky působí na lysosomální úrovni a na cytosolický oběh vápníku. Je tudíž schopen zasahovat do takových proteolytických procesů, které nastávají během intenzivního a prodlužovaného náporu a chránit takové orgány jako jsou játra proti působení toxických látek.

Propionyl-L-karnitin vykazuje intenzivní antioxidační účinek a je zvláště účinný při zvýšeném periferním oběhu a zvyšujících se požadavcích na kardiální funkci.

Svalová karnitintransferáza má navíc větší affinitu k propinyl-L-karnitinu než k Lkarnitinu a má tedy následně vyšší stupeň specificity k srdečnímu svalu a kosternímu svalstvu. Propionyl-L-karnitintransferáza navíc přenáší propionylovou skupinu a zvyšuje příjem této složky svalovými buňkami, což může být v energetickém ohledu zvláště důležité tím, že tento propionát může být využit mitochondriemi jako anapleurotický substrát a v nepřítomnosti kyslíku zajišťovat energii.

- 2 Rovněž velmi dobře jsou známy metabolické účinky ribosy. Ribosa je monosacharid pentosa, která je pro tělo důležitá při syntéze nukleotidů a dalších metabolických produktů. Je vytvářena konverzí glukosy přes fostáty pentosy. V přítomnosti ribokinásy se ribosa fosforyluje na riboso-5-fosfát, který může být vytvořením 5-fosforibosyl-1-pyrofosfátu (PRPP) využit k syntéze nukleotidů nutných k tvorbě ATP. PRPP je vedle zasahování do tvorby ATP důležitý také při syntéze takových nukleotidů jako je adenin a hypoxanthin a ribonukleotidů a deoxyribonukleotidů.

Podstata vynálezu

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že přípravek obsahující kombinaci takových látek jako jsou tyto charakteristické složky:

(a) alkanoyl-L-karnitin vybíraný ze skupiny sestávající z isovaleryl-L-karnitinu, propionyl-L-karnitinu nebo jejich farmakologicky přijatelných solí nebo jejich směsí; a (b) ribosa nebo její fosforylované deriváty, vytváří účinnou zdravou výživu či dietetický doplněk k prevenci stavů myokardiálních dysfunkcí či dysfunkcí kosterního svalstva spojených se stavy anoxie nebo nedostatečného přísunu energie, které nastávají při koronárních nebo pointarktových příhodách nebo během prodlužované tělesné činnosti a svalové námaze z důvodu silného a neočekávaného synergického působení vyvolaného těmito složkami.

Bylo zjištěno, že výše zmiňovaný přípravek je extrémně účinný k vyvolání silné stimulace energetického metabolismu svalů a může tak být výhodně využit k prevenci myokardiální nedostatečnosti a poinfarktových stavů, rovněž tak jako při prodlužované svalové zátěži během tělesného a sportovního vypětí díky neočekávanému synergickému účinku vyvolaného jeho složkami.

• · · ·

- 3 Dietetický doplněk podle předloženého vynálezu může navíc obsahovat (c) „karnitin“ vybíraný ze skupiny sestávající z L-karnitinu, acetyl-L-karnitinu, butyryl-L-karnitinu a valeryl-L-karnitinu nebo jejich farmakologicky přijatelných solí nebo jejich směsí.

Hmotnostní poměr výše zmiňovaných složek (a): (b) : (c) se pohybuje od 1 : 1 : 1 do 1 : 10 : 2.

Výše uvedený překvapující synergický účinek dosahovaný kombinací „karnitinů“ (termín společně označující jak L-karnitin, tak alkanoyl-L-karnitiny), zvláště isovaleryl-L-karnitinu a/nebo propionyl-L-karnitinu a ribosy, byl prokázán několika farmakologickými zkouškami (některé z nich jsou popsány dále) vybranými tak, aby měly pro účely praktického využití tohoto přípravku v preventivní, nutriční a dietetické oblasti silnou předpovídací schopnost.

Tento neočekávaný synergický účinek na zvýšení energetické schopnosti vyvolané kombinací podle předloženého vynálezu jak na kardiální, tak svalové úrovni, umožňuje zvláště jeho využívání k prevenci jak při myokardiální nedostatečnosti, tak při svalovém vyčerpání, které nastává v případech myokardiální ischemie nebo v průběhu intenzivní svalové námahy při prodlužované tělesné zátěži či sportovní činnosti.

Stanovení koncentrace ATP v srdci vystavenému anoxii

Technika upravená pro tuto zkoušku využívala papilární sval králíka promývaný a vystavený anoxii, která jak známo vede k vyčerpání jeho energetických rezerv ATP. Účelem této zkoušky bylo pozorovat, zda isovaleryl-L-karnitin, propionyl-Lkarnitin, kombinace karnitinů, nebo ribosa či kombinace těchto látek použité preventivně působí či nepůsobí na schopnost chránit srdeční sval proti ztrátě ATP vyvolané anoxií.

V této zkoušce byl použit soubor novozélandských králíků rozdělených do různých skupin, kterým byl denně po dobu tří po sobě jdoucích dnů intravenozně injikován samotný isovaleryl-L-karnitin (100 mg.kg'¹), samotný propionyl-L-karnitin (100 mg.kg'¹), nebo kombinace karnitinů obsahující propionyl-L-karnitin (25 mg.kg'¹), acetyl-L-karnitin (25 mg.kg'¹), L-karnitin (25 mg.kg¹) a isovaleryl-L-karnitin (25 mg.kg'¹), nebo samotná ribosa (100 mg.kg'¹) nebo ribosa kombinovaná s výše uvedenými „karnitiny“.

Na konci třetího dne zkoušky byla všechna zvířata utracena a jejich srdce vyjmuta. 2 vyjmutých srdcí byly izolovány řezy papilárního svalu o rozměrech 1 mm v průměru a o tloušťce 4 až 5 mm. Izolované papilární svaly byly promývány v termostatované lázni 100 % nasyceným roztokem O₂.

Anoxického stavu bylo dosaženo zavedením 100 % N₂ do lázně namísto O₂. Ke stanovení koncentrace ATP v papilárním svalu byla upravena metoda popsaná Strehlerem (Strehler, B. L., Methods in Enzymology, 111, Acad. Press., 879, 1957).

Analýza byla prováděna na vzorcích tkáně udržovaných v podmínkách promývání kyslíkem po dobu 90 minut a po následující době anoxie stejné doby trvání.

Výsledky této zkoušky uvedené v tabulce 1 ukazuji, že propionyl-L-karnitin, isovaleryl-L-karnitin, kombinace karnitinů a ribosa jednotlivě jsou schopny částečně chránit ATP přítomný v papilárním svalu proti anoxii, avšak pouze kombinace propionyl-L-karnitinu nebo isovaleryl-L-karnitinu s ribosou nebo kombinace karnitinové kombinace s ribosou zcela chrání proti anoxií vyvolané snížením koncentrace ATP, čímž se prokazuje silný synergický účinek vyvolaný složkami kombinace.

- 5 Tabulka 1

Stanovení koncentrace ATP v papilárním svalu srdce vystaveného hypoxii koncentrace ATP (mol.g'¹ tkáně) ·· ·

látka	před hypoxii	po hypoxii
kontrolní	1,60±0,55	0,41±0,055
isovaleryl-L-karnitin	1,50±0,60	0,55±0,65
propionyl-L-karnitin	1,64±0,79	0,60±0,040
kombinace karnitinů	1,55±0,50	0,62±0,060
ribosa	1,62±0,39	0,55±0,075
isovaleryl-L-karnitin + ribosa	1,50±0,25	1,15±0,055
propionyl-L-karnitin + ribosa	1,61±0,45	1,25±0,35
kombinace karnitinů + ribosa	1,65±0,60	1,16±0,30

Zkouška pokusné myokardiální anoxie

Kvyhodnocení ochranných účinků isovaleryl-L-karnitinu, propionyl-L-karnitinu, kombinace karnitinů, ribosy a různých kombinací stejných látek proti ventrikulárním arytmiím vyvolaným podvázáním levé koronární cévy u krys byla použita technika popsaná Selychem (Selych, et al., Angiology, 11, 398, 1960) a upravená Clarkem (Clark, C., J. Pharmacol. Methods, 3, 357, 1980).

Koronární okluze a výsledná myokardiální anoxie vedly po 5 až 8 minutách k vyvolání arytmií. V těchto zkouškách byly po dobu 30 minut po podvázání počítány ventrikulární ektopické kontrakce jak u kontrolních krys, tak u krys, kterým byl do levé srdeční komory 15 minut před podvázáním pomalu injikován roztok obsahující samotný isovaleryl-L-karnitin (100 mg.kg'¹), propionyl-L-karnitin (100 mg.kg'¹) nebo samotnou kombinaci karnitinů sestávající z propionyl-Lkarnitinu (25 mg.kg'¹), acetyl-L-karnitinu (25 mg.kg'¹) a isovaleryl-L-karnitinu (25 mg.kg'¹) nebo samotnou ribosu (100 mg.kg'¹) nebo kombinaci ribosy s isovalerylL-karnitinem nebo propionyl-L-karnitinem nebo kombinaci ribosy s karnitinovou kombinací ve výše uvedených dávkách.

·· · ·

- 6 Výsledky této zkoušky (tabulka 2) ukazují, že zatímco samotný isovaleryl-Lkarnitin nebo samotný propionyl-L-karnitin nebo samotná kombinace karnitinů nebo samotná ribosa vyvolaly pouze malé omezení počtu ektopických kontrakcí v porovnání kontrolní řadou, byly tyto kontrakce omezeny téměř do té míry, že téměř zcela vymizely, pokud byla ribosa injikována v kombinaci s isovaleryl-Lkarnitinem nebo propionyl-L-karnitinem nebo s kombinací karnitinů, a tak se prokázal silný a neočekávaný synergický účinek vyvolaný kombinací podle předloženého vynálezu.

Tabulka 2

Zkouška arytmií vyvolaných myokardiální anoxií

látka	počátek arytmií po (min.)	počet ektopických kontrakcí během 30
kontrolní	5-7	minut po podvázání 989±96
isovaleryl-L-karnitin	5-7	860±75
propionyl-L-karnitin	5-8	830±86
kombinace karnitinů	5-8	810±99
ribosa	5-7	855±110
isovaleryl-L-karnitin + ribosa	6-7	270±95
propionyl-L-karnitin + ribosa	6-8	230±112
kombinace karnitinů + ribosa	6-8	207±93

Některé příklady přípravků podle předloženého vynálezu, nikterak však tento vynález neomezující, jsou zde dále uvedeny:

Pastilky, tobolky, tablety

1)	propionyl-L-karnitin ribosa	500 mg 500 mg
2)	isovaleryl-L-karnitin	500 mg
	ribosa	500 mg
3)	propionyl-L-karnitin	125 mg

- 7 acetyl-L-karnitin 125 mg

L-karnitin 125 mg isovaleryl-L-karnitin 125 mg ribosa 500 mg

Granuláty nebo fióly

4) propionyl-L-karnitin 1 g ribosa 1 g

5) isovaleryl-L-karnitin 1 g ribosa 1 g

6) propionyl-L-karnitin 1 g ribosa 2,5 g

7) propionyl-L-karnitin 250 mg acetyl-L-karnitin 250 mg isovaleryl-L-karnitin 250 mg

L-karnitin 250 mg ribosa 2,5 g

8) propionyl-L-karnitin 250 mg acetyl-L-karnitin 250 mg isovaleryl-L-karnitin 250 mg

L-karnitin 250 mg ribosa 2 g kyselina ribonukleová 100 mg kyselina desoxyribonukleová 100 mg

9) propionyl-L-karnitin 250 mg acetyl-L-karnitin 250 mg isovaleryl-L-karnitin 250 mg

L-karnitin 250 mg ribosa 2 g

L-glutamin 100 mg

L-alanin 100 mg

L-arginin 100 mg

L-glycin 100 mg

L-histidin 100 mg

L-isoleucin 100 mg

L-fenylalanin 50 mg

L-threonin 50 mg

L-serin 100 mg

	- 8 -	* ·· ·· · ·· · ·· ··· · ! · • · · · · ··· · · • · · · · ······· · ··· ·· · * * .* ····· ·· · »· ··
propionyl-L-karnítin		250 mg
acetyl-L-karnitin		250 mg
isovaleryl-L-karnitin		250 mg
L-karnitin		250 mg
ribosa		1 g
dextrosa		0,5 g
fruktosa		0,5 g
maltosa		0,5 g
propionyl-L-karnitin		250 mg
acetyl-L-karnitin		250 mg
isovaleryl-L-karnitin		250 mg
L-karnitin		250 mg
ribosa		1 g
gluko-1,6-d ifosfát		200 mg
frukto-1,6-difosfát		200 mg
galakto-1,6-difosfát		200 mg
glycero-3-fosfát		200 mg
fosfenylpyruvát		100 mg
thiaminpyrofosfát		5 mg
pyridoxal-5-fosfát		5 mg
stearan hořečnatý		2 mg
propionyl-L-karnitin		250 mg
acetyl-L-karnitin		250 mg
isovaleryl-L-karnitin		250 mg
L-karnitin		250 mg
ribosa		1 g
vitamin A		1250 m.j.
vitamin B-i		0,5 mg

• · • · · • · · · ·

vitamin B₆	30 mg
vitamin C	50 mg
vitamin E	5 mg
nikotinamid	25 mg
vitamin B-i₂	100 μg
vitamin D	100 m.j
kyselina pantothenová	30 mg
glycinát hořečnatý	5 mg
Mangan	1 mg
L-selenmethionin	50 pg
molybden	10 pg
zinek	1 mg

Farmakologicky přijatelnou solí různých karnitinů zmiňovaných v předloženém vynálezu jsou navíc vedle vnitřních komplexních solí míněny sole těchto látek s kyselinou, která nedává vznik nežádoucím toxickým nebo vedlejším účinkům. Tyto kyseliny jsou velmi dobře známy farmakologům a odborníkům ve farmaceutické technologii.

Příklady takových solí, avšak nejen výhradně těchto jsou: chlorid, bromid, jodid, aspartát, kyselý aspartát, citran, kyselý citran, vínan, fosforečnan, kyselý fosforečnan, fumarát, kyselý fumarát, glycerofosfát, glukofosfát, mléčnan, maleinát, kyselý maleinát, mukát, orotát, šťavelan, kyselý šťavelan, síran, kyselý síran, trichloracetát, trifluoracetát a methansulfonát.

Mezi těmito solemi se dává zvláště přednost kyselému fumarátu isovaleryl-Lkarnitinu (US patent 5,227,518).

Seznam farmakologicky přijatelných solí schválených FDA je uveden v Int. J. of Pharm., 33, 201 - 217, 1986. Tato publikace je do této specifikace zahrnuta jako odkaz.

Doplněk podle vynálezu může dále obsahovat vitaminy, koenzymy, minerální látky, aminokyseliny a antioxidanty. Tento doplněk může být vyráběn ve formě tablet, pastilek, tobolek, pilulek, granutátů, sirupů, fiól nebo kapek.

φφ φφ φ

Claims

Patentové nároky

1. Výživa nebo dietetický doplněk vyznačující se tím, že obsahuje tyto charakteristické složky:

(a) aikanoyl-L-karnitin vybíraný ze skupiny sestávající z isovaleryl-L-karnitinu, propionyl-L-karnitinu nebo jejich farmakologicky přijatelných solí nebo jejich směsí; a (b) ribosu nebo její fosforylované deriváty.

2. Doplněk podle nároku 1 vyznačující setím, že dále obsahuje:

(c) „karnitin“ vybíraný ze skupiny sestávající z L-karnitinu, acetyl-L-karnitinu, butyryl-L-karnitinu a valeryl-L-karnitinu nebo jejich farmakologicky přijatelných solí nebo jejich směsí.

3. Doplněk podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že obsahuje dále vitaminy, cukry, koenzymy, minerální látky, aminokyseliny, peptidy a antioxidanty.

• 4 • 4

4. Doplněk podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že farmakologicky přijatelná sůl se vybírá ze skupiny obsahující: chlorid, bromid, jodid, aspartát, kyselý aspartát, citran, kyselý citran, vínan, fosforečnan, kyselý fosforečnan, fumarát, kyselý fumarát, glycerofosfát, glukofosfát, mléčnan, maleinát, kyselý maleinát, mukát, orotát, šťavelan, kyselý šťavelan, síran, kyselý síran, trichloracetát, trifluoracetát a methansulfonát.

5. Použití doplňku podle kteréhokoliv z předcházejících nároků k prevenci myokardiální nedostatečnosti, poinfarktových příhodách, psychomotorických změnách a ke zvládání stavů při zvýšených nárocích na spotřebu svalové energie.

6. Výživa nebo dietetický doplněk vyznačující se tím, že je v tuhé, polotuhé nebo kapalné formě.

7. Výživa nebo dietetický doplněk podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že je ve formě tablet, tobolek, pastilek, pilulek, granulí, krémů, sirupů nebo kapek.

8. Doplněk podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že hmotnostní poměr složek (a): (b): (c) se pohybuje v mezích od 1 : 1 : 1 do 1 : 10 : 2.

v jednotkové dávkové formě

125 mg 125 mg 125 mg 125 mg 500 mg

9. Doplněk podle nároku 8 vyznačující se tím, že obsahuje:

propionyl-L-karnitin acetyl-L-karnitin

L-karnitin isovaleryl-L-karnitin

Ribosu

10. Doplněk podle nároku 8 vyznačující se tím, že v jednotkové dávkové formě obsahuje:

propionyl-L-karnitin 250 mg acetyl-L-karnitin 250 mg isovaleryl-L-karnitin 250 mg

L-karnitin 250 mg ribosu 2 g kyselinu ribonukleovou 100 mg kyselinu desoxyribonukleovou 100 mg

11. Doplněk podle nároku 8 vyznačující se tím, že v jednotkové dávkové formě obsahuje:

propionyl-L-karnitin 250 mg acetyl-L-karnitin 250 mg isovaleryl-L-karnitin 250 mg L-karnitin 250 mg ribosu 2g L-glutamin 100 mg L-alanin 100 mg L-arginin 100 mg L-glycin 100 mg L-histidin 100 mg L-isoleucin 100 mg L-fenylalanin 50 mg L-threonin 50 mg L-serin 100 mg

12. Doplněk podle nároku 8 vyznačující se tím, že v jednotkové dávkové formě obsahuje:

propionyl-L-karnitin 250 mg acetyl-L-karnitin 250 mg isovaleryl-L-karnitin 250 mg L-karnitin 250 mg ribosu 1 g gluko-1,6-difosfát 200 mg frukto-1,6-difosfát 200 mg galakto-1,6-difosfát 200 mg glycero-3-fosfát 200 mg fosfenylpyruvát 100 mg thiaminpyrofosfát 5 mg pyridoxal-5-fosfát 5 mg stearan hořečnatý 2 mg

- 12 • 9 • 99 • 9 9 · 9

13. Doplněk podle nároku 8 vyznačující se tím, že v jednotkové dávkové formě obsahuje:

L-karnitin 250 mg ribosu 1 g vitamin A 1250 m.j.

vitamin B₁ 0,5 mg vitamin B₆ 30 mg vitamin C 50 mg vitamin E 5 mg nikotinamid 25 mg vitamin B₁₂ 100 ug vitamin D 100 m.j.

kyselinu pantothenovou 30 mg glycinát hořečnatý 5 _mg mangan 1 mg

L-selenmethionin 50 molybden Wpg zinek i _mg ··* • 9 · 9 • 9 99·

- 13 *4 4« • · · • 4 · · 4 • 4 · · 4 • •44 • 4 44

- 14 14.Způsob prevence a/nebo léčby stavů myokardiálních dysfunkcí čí dysfunkcí kosterního svalstva vyvolaných stavy anoxie nebo nedostatečného přísunu energie, které nastávají při koronárních nebo poinfarktových příhodách nebo během prodlužované tělesné činnosti a svalovém vyčerpání jedinců, kteří tuto potřebu mají, spočívající v podávání kombinovaného přípravku obsahujícího tyto složky:

(a) alkanoyl-L-karnitin vybíraný ze skupiny sestávající z isovaleryl-L-karnitinu, propionyl-L-karnitinu nebo jejich farmakoíogicky přijatelných solí nebo jejich směsí; a (b) ribosu nebo její fosforylované deriváty.