CZ20023459A3

CZ20023459A3 - Antihypertensní činidla a jejich použití

Info

Publication number: CZ20023459A3
Application number: CZ20023459A
Authority: CZ
Inventors: Bruce Jeffrey Auerbach; Karen Diane Hitchcock; Michael John Ryan
Original assignee: Warner-Lambert Company
Priority date: 2000-04-26
Filing date: 2001-03-22
Publication date: 2003-05-14
Also published as: HUP0300403A2; AR031104A1; SK15132002A3; AU2001247658A1; EA200200953A1; WO2001080847A3; OA12252A; IS6570A; HRP20020936A2; ATE283691T1; EP1280522B1; PL357906A1; NZ521713A; CA2405559A1; BR0110234A; CN1426299A; ES2231470T3; BG107264A; NO20025135D0; MA26894A1

Description

Antihypertensní činidla a jejich použiti

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká kombinace antihypertensniho činidla, o kterém je známo, že způsobuje pokles krevního tlaku, a karboxyalkyletheru, sloučeniny, která způsobuje vzestup koncentrace lipoproteinu s vysokou hustotou (HDL). Kombinace je použitelná pro léčbu cévních onemocnění a pro prevenci městnavého srdečního selhávání. Karboxyalkylethery mohou být také použity samostatně pro léčbu hypertenze.

Dosavadní stav techniky

Několik klinických studií ukázalo, že snížení koncentrací některých forem cholesterolu savců je účinným způsobem pro léčbu a prevenci srdečních infarktů, náhlé smrti a anginy pectoris, jak u jedinců se zvýšenými koncentracemi cholesterolu v krvi, tak u jedinců s normálními koncentracemi cholesterolu v krvi. Snížení lipoproteinu s nízkou hustotou (LDL), špatné formy cholesterolu, je nyní jedním z primárních cílů lékařů léčících pacienty s rizikem vzniku nebo s již rozvinutým kardiovaskulárním onemocněním, jako je ischemická choroba srdeční, aterosklerosa, infarkt . myokardu, mrtvice, mozkový infarkt a restenosa po balónkové angioplastice. Mnoho lékařů nyní využívá činidla snižující hladinu cholesterolu čistě jako profylaktickou léčbu u zdravých jedinců, jejichž koncentrace cholesterolu jsou normální, čímž se snaží předcházet kardiovaskulárním onemocněním.

Nejvíce používanými činidly snižujícími koncentraci cholesterolu jsou statiny, což jsou sloučeniny, které inhibují enzym 3-hydroxy-3-methylglutaryl-koenzym A (HMG• 0 ···· • 0 ·· · · · · 0 · ·· · • ··· 0···

000 0000

0000000 0* 0000 * · · ·

CoA) reduktasu, enzyme odpovědný za katalýzu konverse HMGCoA na mevalonát, což je časný a rychlost limitující krok v biosyntéze cholesterolu. Atorvastatin a simvastatin jsou nejpoužívanějšími statiny.

U savců se vyskytuje několik forem cirkulujícího cholesterolu, některé formy jsou považovány za špatný cholesterol, zatímco jiné formy jsou považovány za dobrý cholesterol a jsou zásadní pro udržení dobrého zdravotního stavu. Dobrou formou cholesterolu je HDL. Špatným cholesterolem je LDL. Jinou formou LDL cholesterolu, primární špatné formy, je modifikovaná forma LDL označovaná jako lipoprotein(a), neboli Lp(a). Nyní se předpokládá, že vysoké koncentrace Lp(a) jsou škodlivé a mhou vést ke vzniku kardiovaskulárních onemocnění a jsou jedním z hlavních rizikových faktorů úmrtí v důsledku kardiovaskulárních onemocnění. Bylo prokázáno, že karboxyalkylethery zvyšují HDL a snižují LDL a Lp(a). Typické karboxyalkylethery jsou uvedeny v U.S. Patentu 5,648,387, který je zde uveden jako odkaz.

Jiným významným faktorem pro vznik kardiovaskulárního onemocnění a náhlé smrti je hypertense a angína pectoris. Hypertense znamená zvýšený krevní tlak. Je známo mnoho antihypertensních činidel a tato činidla jsou běžně používána pro snížení krevního tlaku. Mezi taková činidla patří blokátory vápníkového kanálu, ACE inhibitory, A-II antagonisté, diuretika, blokátory beta-adrenergního receptoru, vasodilatátory a blokátory a-adrenergního receptoru. Tato činidla jsou také běžně používána pro léčbu anginy pectoris, což je silná bolest na hrudi, často vyzařující z prekordia do levého ramene a levé paže. Angína pectoris je často způsobena srdeční ischemií a obvykle je způsobena ischemickou chorobou srdeční.

• · · • ·

Protože onemocnění cév, jako je ischemická choroba srdeční, mrtvice a onemocnění periferních cév, zůstávají vedoucí příčinou úmrtí a pracovní neschopnosti ve světě, existujepotřeba nových léčebných postupů, stejně jako léků, které by bránily vzniku těchto onemocnění

Nyní jsme objevily, že léčba a prevence cévních onemocnění může být provedena s překvapivými výsledky pomocí podání kombinace antihypertensního činidla s karboxyalkyletherem. Karboxyalkylethery mohou být také použity samostatně jako antihypertensní činidla a při léčbě mrtvice.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje farmaceutický prostředek obsahující účinné množství antihypertensního činidla a účinné množství karboxyalkyletheru. Přesněji se vynález týká kombinace antihypertensního činidla s karboxyalkyletherem vzorce I ^Y\ ^Y2 )^<^CH2)n-O-(CH₂)_m-/ ² , ^R1 *2 ^R3 R₄ kde n a m jsou nezávisle celá čísla od 2 do 9;

Ri, Rž, R3 a R4 jsou nezávisle Ci-Cg alkyl, Ci-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, a Ri a R2 společně s uhlíkem, na který jsou navázány, a R3 a R3, společně s uhlíkem, na který jsou navázány, mohou tvořit karbocyklický kruh mající od 3 do 6 atomů uhlíků;

4 4 4

Yi a Y2 jsou nezávisle COOH, CHO, tetrazol a COOR5, kde Rs je C1-C6 alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl;

kde alkylové, alkenylové a alkynylové skupiny mohou být substituované jednou nebo dvěmi skupinami vybranými ze skupiny zahrnující: halogen, hydroxy, C1-C6 alkoxy a fenyl;

nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí.

Výhodné sloučeniny použitelné v předkládaném vynálezu mají výše uvedený vzorec, kde n a m jsou stejné celé číslo, a kde Ri, R2, R3 a R$ jsou každý alkyl.

Dalšími výhodnými sloučeninami jsou ty, kde Yia Y2 jsou nezávisle COOH nebo COOR5, kde R5 je alkyl.

Nejvýhodnější sloučeniny jsou sloučeniny vzorce II <CH₂)_n-₀-(CH₂)_m kde man jsou každý celé číslo vybrané z 2, 3, 4 nebo 5, ideálně 4 nebo 5.

Zejména výhodná sloučenina má vzorec III

Kombinace podle předkládaného vynálezu mohou také využívat farmaceuticky přijatelných solí kyselin vzorce I. Monovápenatá sůl sloučeniny vzorce III je známá jako CI-1027 • · · · · · • · · * · · · ·· · · · · ♦ · ·· · • · · · · · · ♦ • · · · · · · · · · • · · · 9 9 9 9 9

9 99 99 99 9 999 99 99 a je v současnosti hodnocena v klinických studiích pro léčbu dyslipidemie.

Karboxyalkylethery vzorců I, II, a III jsou použitelné v monoterapii hypertense. Způsob léčby hypertense u savce zahrnující podání karboxyalkyletheru je tak dalším provedením předkládaného vynálezu.

Karboxyalkylethery mohou být kombinovány v kombinované terapii s dalšími antihypertensními činidly. Jakékoliv antihypertensní činidlo může být použito v kombinacích podle předkládaného vynálezu. Ve výhodném provedení je antihypertensním činidlem inhibitor angiotensinkonvertujícího enzymu (ACE inhibitor) nebo blokátor vápníkového kanálu.

ACE inhibitory, které mohou být použity v prostředcích podle předkládaného vynálezu, jsou dobře známé v oboru a jsou rutině používány pro klinickou léčbu hypertense. Například, captopril a jeho analogy jsou popsány v US Patentech 5,238,924 a 4,258,027. Enalapril, enalaprilat a blízce příbuzné analogy jsou popsány v US Patentech 4,374,829, 4,472,380, a 4,264,611. Moexipril, quinapril, quinaprilat a příbuzné analogy jsou popsány v US Patentech 4,743,450 a 4,344,949. Ramipril a jeho analogy jsou popsány v US Patentech 4,587,258 a 5,061,722. Všechny uvedené patenty jsou zde uvedeny jako odkazy z hlediska typických ACE inhibitorů, které mohou být použity v kombinaci s karboxyalkyletherem podle předkládaného vynálezu. Mezi další ACE inhibitory, které mohou být také použity, patří fosinopril, fasidotril, glycopril, idrapril, imidapril, mixanpril, perindopril, spirapril, spiraprilat, temocapril, trandolapril, zofenopril, zofenoprilat, utilapril a sampatrilat.

• 4 4 4 4 4· • 44 4 4 4 4

Jinou třídou antihypertensních činidel, které mohou být použity v kombinacích podle předkládaného vynálezu, jsou blokátory vápníkového kanálu. Je známo mnoho blokátorů vápníkového kanálu a mnohé z nich jsou běžně používány klinicky. Mezi typické blokátory vápníkového kanálu patří amlodipin (US 5,155,120), micardipin (US 3,985,758), nifedipin (US 3, 485, 847), isradipin (US 4,466, 972), felodipin (US 4,264,611), a další popsané v WO 99/11260, Všechny citace patentů a publikací jsou zde uvedeny jako odkazy.

Další třídou antihypertensních činidel jsou antagonisté angiotensin-II receptoru (A-II antagonisté), a typickými příklady jsou cardesartan (US 5,196,444), eprosartan (US 5,185,351), losartan a valsartan (viz US 5,399,578).

Dalšími antihypertensními činidly použitelnými v kombinacích podle předkládaného vynálezu jsou blokátory beta-adrenergního receptoru (β-blokátory), jako je acebutolol, alprenolol, amosulalol, arotinolol, befunolol, bevantolol, amosulalol, labetolol, buprandolol, celiprolol, cloranolol, dilevalol, epanolol, nadoxolol, perbutolol a podobně.

Obdobně, a-adrenergní činidla (α-blokátory), jsou dobře známá antihypertensní činidla a mohou být použita v předkládaném vynálezu. Mezi typické α-blokátory patří arotinolol, fenspirid, indoramin, tolazolin, trimazosin a yohimbin. Všechny tyto α-blokátory jsou dobře známými a běžně používanými antihypertensními činidly.

Další třídou antihypertensních činidel jsou vasodilatátory, jako je bencyklan, citicolin, fasudil, • · · ·

fenprodil, lomerizin, nafronyl, nimodipin, tinofedrin a vinpocetin. Všechna vasodilatační antihypertensní činidla mohou být použita v předkládaném vynálezu.

Diuretika jsou také běžně používána jako antihypertensní činidla. Mezi ně patří činidla jako je chlorothiazid, hydrochlorthiazid, polythiazid, ambusid, butazolamid, chloraminofenamid, clofenamid a clopamid.

Pro provádění způsobu podle předkládaného vynálezu je nutné pouze kombinovat antihypertensní činidlo s karboxyalkyletherem; nebo jinak použít antihypertensní činidlo v kombinaci s karboxyalkyletherem v léčbě kardiovaskulárních onemocnění, jako je atherosklerosa, hypertense, a pro prevenci nebo oddálení nástupu kardiovaskulárních příhod, jako je infarkt myokardu.

Vynález také poskytuje způsob pro léčbu hypertense zahrnující podání antihypertensního množství sloučeniny vzorce I pacientovi, který potřebuje takovou léčbu. Výhodný způsob zahrnuje podání sloučeniny vzorce II nebo III, nejvýhodněji podání CI-1027. Vynález také poskytuje způsob pro prevenci mrtvic u savců zahrnující podání účinného množství sloučeniny vzorce I, výhodně sloučeniny vzorce II nebo III, a nej výhodněji CI-1027.

Podrobný popis vynálezu

Objevili jsme, že kombinováním antihypertensního činidla jako je quinapril nebo amlodipin s karboxyalkyletherem, jako je CI-1027, se získá překvapivě účinný prostředek pro léčbu a prevenci cévních onemocnění u savců. Jak bylo uvedeno výše, termín karboxyalkylethery, jak je zde použít, označuje sloučeniny, jako jsou sloučeniny popsané v US • · · ·

Λ · · * 9 · · · • · · · · * · » « · · · · · · • · · · · · ·

Patentu 5,648,387, který je zde uveden jako odkaz.

Sloučeniny mohou být ve formě volných kyselin, soli nebo tetrazolylových nebo aldehydových analogů. Tyto sloučeniny mohou být sami použity pro léčbu hypertense způsobem podle předkládaného vynálezu. Mohou být také použity v kombinaci s jinými antihypertensnimi činidly.

Další aktivní složkou kombinace podle předkládaného vynálezu je antihypertensní činidlo. Může být použito jakékoliv antihypertensní činidlo. Jediné, co je nutné, je to, aby bylo takové činidlo účinné ve snižování krevního tlaku u savce.

Prostředky podle předkládaného vynálezu budou obsahovat antihypertensní činidlo a karboxyalkylether v v hmotnostním poměru od přibližně 0,01:1 do přibližně 1000:1, a obvykle od přibližně 1:1 do přibližně 0,5:1, a ideálně od přibližně 1:1 do přibližně 0,03:1. Typický prostředek, například, bude obsahovat 20 mg quinapril-hydrochloridu a přibližně 600 mg CI-1027. Je nutné, aby množství každé složky bylo účinné v inhibici či reversi zhoršení kardiovaskulárních funkcí, jako je dilatace komor, hypertense a srdeční selhání.

Je známo, že některá z výše uvedených antihypertensních činidel, například CI-1027, quinapril a amlodipin, obsahují ve své chemické struktuře volnou karboxylovou skupinu nebo volnou aminovou skupinu. Dále, některá antihypertensní činidla spadající do rozsahu předkládaného vynálezu, obsahují aktivní skupiny, které existují v rovnováze s různými formami. Proto vynález zahrnuje farmaceuticky přijatelné soli těchto karboxylových nebo aminových skupin. Výraz farmaceuticky přijatelné soli zahrnuje jak farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, tak a farmaceuticky přijatelné kationtové soli. Výraz • · · · · «»·· ·«· ···· ·· ···· »· ·· farmaceuticky přijatelné kationtové soli označuje soli, jako jsou například soli alkalických kovů, (např., sodíku a draslíku), soli kovů alkalických zemin (např. vápníku a hořčíku), soli hliníku, ammoniové soli a soli s organickými aminy, jako je benzathin (N,N'-dibenzylethylendiamin), cholin, diethanolamin, ethylenediamin, meglumin (Nmethylglukamin), benethamin (N-benzylfenethylamin), diethylamin, piperazin, tromethamin (2-amino-2hydroxymethyl-1,3-propandiol) a prokain. Výraz farmaceuticky přijatelná adiční sůl s kyselinou označuje například soli jako je hydrochlorid, hydrobromid, síran, hydrogensíran, fosforečnan, hydrogenfosforečnan, dihydrogenfosforečnan, acetát, jantaran, citrát, methanesulfonát (mesylát), benzensulfonát (besylát) a ptoluensulfonát (tosylát).

Farmaceuticky přijatelné kationtové soli sloučenin obsahující volné karboxylové skupiny mohou být snadno připraveny reakcí sloučeniny ve formě volné kyseliny s vhodnou baží, obvykle v dávce jeden ekvivalent, v korozpouštědle. Typickými bázemi jsou hydroxid sodný, methoxid sodný, ethoxid sodný, hydrid sodný, methoxid draselný, hydroxid hořečnatý, hydroxid vápenatý, benzathin, cholin, diethanolamin, piperazin a tromethamin. Sůl se izoluje zahuštěním do sucha nebo přidáním non-rozpouštědla. V mnoha případech se soli izolují smísením roztoku kyseliny s roztokem odlišné soli kationtu (ethylhexanoatu sodného nebo draselného, magnesium-oleátu), za použití rozpouštědla (např. ethylacetátu), ze kterého se požadovaná kationtová sůl vysráží nebo se jinak izoluje zahuštěním a/nebo přidání non-rozpouštědla.

Farmaceuticky přijatelné adiční soli sloučenin obsahujících volné aminové skupiny s kyselinami mohou být • ·

snadno připraveny reakcí aminu ve formě volné baze s vhodnou kyselinou. Když se jedná o sůl monobazické kyseliny (např. hydrochlorid, hydrobromid, p-toluensulfonát, benzensulfonát, acetát), hydrogenovanou formu dibazické kyseliny (např. hydrogensíran, jantaran), nebo dihydrogenovou formu tribazické (např. dihydrogenfosforečnan, citrát), tak se použije alespoň jeden molární ekvivalent, lépe molární nadbytek, kyseliny. Nicméně, když je takovou solí síran, hemisukcinát, hydrogenfosforečnan nebo fosforečnan, tak se obvykle použiji přesné chemické ekvivalenty kyseliny. Volné baze a kyseliny se obvykle kombinují v korozpouštědle, ze kterého se vysráží požadovaná sůl, nebo může být tato sůl izolována zahuštěním a/nebo přidáním non-rozpouštědla.

Dále, karboxyalkylethery a jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami mohou existovat jako hydráty nebo solváty. Dále, antihypertensní sloučeniny podle předkládaného vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelné soli mohou také existovat jako hydráty nebo solváty. Uvedené hydráty a solváty spadají do rozsahu předkládaného vynálezu.

Farmaceutické kombinace a způsoby podle předkládaného vynálezu jsou upraveny pro terapeutické použití v prevenci a léčbě atherosklerosy, angíny pectoris a stavů charakterizovaných přítomností hypertense a hyperlipidemie u savce, zejména u člověka. Dále, protože tato onemocnění s stavy úzce souvisejí s vývojem onemocnění srdce, jsou tyto kombinace a způsoby, v důsledku antiatherosklerotického, antianginálního, antihypertensního a antihyperlipidemického účinku, vhodná pro léčbu jedinců s rizikem vývoje postižení srdce nebo s již rozvinutým postižením.

Termíny jedinec, pacient, a savec jsou zaměnitelné

9 99 9

99 • 9 9 9

9 9

9999 a označuji živočichy jako jsou lidé, psi, kočky, koně, skot a ovce.

Použitelnost prostředků podle předkládaného vynálezu jako činidel pro léčbu aterosklerosy a kardiovaskulárních onemocnění u savců (např. lidí) je demonstrována aktivitou sloučeniny podle předkládaného vynálezu v běžných testech a v klinických protokolech popsaných dále.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Antihypertensní účinky karboxyalkyletherové sloučeniny vzorce III (Cl-1027), samostatně a v kombinaci s antihypertensním činidlem jako je quinapril (CI-906), se hodnotily na krysách podle následujícího protokolu.

Samcům spontánně hypertensních krys (SHR, 15-20 týdnů, , Charles River Laboratories, Wilmington, Massachusetts) se zavedly trvalé aortální katetry a radiotransmitery (Data Sciences International, Saint Paul, Minnesota).

Radiotransmitery umožňovaly kontinuální měření krevního tlaku v aortě. Z křivky krevního tlaku v aortě Ponemah (Gould Instruments mc, Valley View, Ohio) počítač vypočetl průměrný arteriální krevní tlak (MABP) a hodnotu srdečního tepu po jednominutových průměrech. Data pro jednu minutu se sumarizovala v 15-minutových intervalech za použití Excel (Microsoft Corporation, Redmond, Washington) tabulek.

Zvířata se krmila vodou a potravou podle potřeby. Pro rekonvalescenci po chirurgickém zákroku se zvířatům nepodávaly dávky po dobu minimálně 7 dnů. Krevní tlak v den 0 před podáním dávky se získal zprůměrováním osmi 15 minutových MABP měření provedených 2 hodiny před podáním

9999

9· 9*

9 9··· · · ·

9 * 9 9 ·· • 9·· 999· · • 9·· 9 9 9 9 dávky. Pro získání píku odpovědi na léčbu (dny 0, 12, 16, 19 a 22) se 15-ntinutová MABP měření v intervalu mezi 2 a 4 hodinami po podání dávky zprůměrovala.

Testované sloučeniny se podávaly ve vehikulu složeném z 96% vody, 3% karbomethocelulosy (Sigma Chemical, Saint Louis, Missouri) a 1% Tween 88 (polyoxyethylensorbitanmonooleát, Sigma Chemical). Cl-1027 a quinapril v monoterapii se podávaly v 8:30 ráno denně orálně ve vodě v objemu 2 ml/kg. Kombinace CI-1027 a quinaprilu se podávala ve vodě v objemu 2 ml/kg. Návrh experimentu je uveden v následující tabulce 1.

Pokus se provedl během 22 dnů na 4 skupinách zvířat. Skupina 1 sloužila jako kontrola a podávalo se jí 2 ml/kg/den vehikula po dobu 22 následujících dnů. Skupině II, použité pro určení antihypertensní odpovědi na monoterapii quinaprilem, se podávalo vehikulum po dobu prvních 12 až 13 následujících dnů. Potom se v den 13 až 14 přidal quinapril v dávce 0,3 mg/kg/den po dobu 3 až 4 následujících dnů; poté se dávka zvýšila na 1 mg/kg/den na další 3 dny, a poslední 3 dny se podávala dávka 3 mg/kg/den. Pro určení odpovědi na monoterapii CI-1027 se skupinám III a IV aplikovala 12-denní léčba CI-1027 v monoterapii v dávkách 30 a 100 mg/kg/den, v příslušném pořadí. Pro stanovení antihypertensní odpovědi na kombinovanou terapii se quinapril přidal k léčbě CI-1027 (dny 13-14) za použití protokolu použitého pro skupinu II (quinapril v monoterapii).

• ·· ·

Tabulka 1. Vzhled pokusu « e

Skupina

Dny

	0-12	13-16	17-19	20-22
I	Vehikulum ml/ kg	Vehikulum ml/kg	Vehikulum ml/kg	Vehikulum ml/kg
II	Vehikulum ml/kg	Quinapril 0,3 mg/kg/den	Quinapril I mg/kg/den	Quinapril 3 mg/kg/den
ΙΠ	CI-1027 30 mg/kg/den	CI-1027+ Quinapril 0,3 mg/kg/den	CI-1027+ Quinapril 1 mg/kg/den	CI-1027+ Quinapril 3 mg/kg/den
IV	CI-1027 100 mg/kg/den	0-1027+ Quinapril 0,3 mg/kg/den	Cl-1027+ Quinapril I mg/kg/den	CI-1027+ Quinapril 3 mg/kg/den

Pro 4 léčené skupiny byly základní hodnoty MABP před podáním dávky v rozmezí 141 a 149 mm Hg. Během 22-denního pokusu byly hodnoty MABP v rozmezí 140 mm Hg až 145 mm Hg ve skupině I (kontrola), což naznačuje, že vehikulum samotné nemá vliv na krevní tlak. 22-denní monoterapie CI-1027 v dávce 30 mg/kg/den (Skupina III) signifikantně (Den 0 vs Den 12, p <0,05) redukovala pík MABP na 131. MABP u krys léčených 100 mg/kg/den (Skupina IV) byl stejný jako při dávce 30 mg/kg/den. Tak vykazoval CI-1027 v monoterapii střední antihypertensní aktivitu.

Quinapril v monoterapii byl podáván skupině III za použití stoupající dávky 3 dnů při 0,3, 1 a 3 mg/kg/den. Za *· ·«··

použití stoupající dávky snížila 9-denní monoterapie quinaprilem MABP na 117 mm Hg (Den 22). Quinapril v dávce 3 mg/kg/den vedl k antihypertensní odpovědi, která byla téměř maximální, protože bylo dosaženo hodnoty pouze o 5 mm Hg vyšší než pro dávku 0,3 mg/kg/den.

Výsledky ze skupin III a IV ukazují, že vícedenní léčba guinaprilem, je-li přidána k probíhající léčbě CI-1027, značně potencuje antihypertensní odpověď. Hodnoty MABP u krys léčených kombinací byly mnohem nižší než ve skupině s monoterapií quinaprilem. Krysy léčené po dobu 3 dnů kombinací quinaprilu v dávce 1 mg/kg/den a CI-1027 v dávce 30 a 100 mg/kg/den měly hodnoty MABP (Den 9) 104 a 111 mmHg, v příslušném pořadí. Rozdíl v MABP dosáhl statistické významnosti pro kombinaci s CI-1027 v dávce 30 mg/kg/den. Po 3-denní léčbě nejvyšší dávkou quinaprilu (3 mg/kg/den) vedla kombinace quinaprilu s CI-1027 k dosažení hodnot MABP, které byly nižší než 100 mm Hg (p <0,05' versus quinapril v monoterapii). Data z uvedeného pokusu jsou uvedena v atbulce 2.

999 9999 «4 ·· ·*·· • 9 · · 9 9 9

CM

CM g•it o- ε

-H

CM

- Tabulka 2: Efekt CI-1027 v monoterapii, quinaprilu v monoterapii a kombinace CI-1027 a quinaprilu na MABP u SHR |

£ — Ό η M

MS 8·^ +1 — .£ m <s

CM

O

Ttí Z O , ** <3^! 3 X) X> l>O

ÍÚ

P •H .

cu

I .-3 Ό *

H w ⁶⁰ •H o- ε cm rí

Ji

Q v

>

g

2<.í>

£ O o + <*>

+1

Cb

CM

CM β

.-= 8 ,

2 3»*

X > +1 ' - Oc o g ₊ - O O m

S _ B ?e w ~Sb * -HiíS 22 £J O S O g g q

CM

í<D

ΜΊ •H •H

1^» CM	Sb	w ΓΛ	r* CM
O »	I	-H	CM g
ΰ	2		5

O m

8:

g

7$ o £

O r>

+Ϊ

Q

O

w m	Έ		1
+1		Ή	$	-H
Ό T	$	oo sr	T3 <L>	o

>H

Pí >H

Pí

CL <

'o !|

8'_g ^{1 K}<0 o -.-i II £U

CQ <

Σ’

P i áj <u <3 -a >5

MD

a.

m <

a ’δ

S>

CúQ £

o o

a .

n§ £» 7a> S

S?

Já

HO <» -H a s Ί □ Λ >J-I

2ž ctí •I

K

P £ ω P tj XL)

II

Z

AO ω -fc! >H .23 ctí «· »««· • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 » · «·» · · · ·

999 9999 99 9999 99 99

Příklad 2

Obecný postup uvedený v příkladu 1 se provedl pro hodnocení antihypertensní účinnosti karboxyalkyletheru CI1027 samotného a v kombinaci s blokátorem vápníkového kanálu amlodipinem.

Samcům SHR (15-20 týdnů, Charles River-Laboratories) se zavedly trvalé aortální katetry a radiotransmitery pro kontinuální měření arteriálního krevního tlaku a srdečního pulsu. Zvířatům se podávala voda a potrava podél potřeby. Po chirurgickém zásahu proběhla u všech krys minimálně 7-denní rekonvalescence.

Pokus se provedl během 22 dnů na třech skupinách SHR. Skupina I sloužila jako kontrola a podávaly se jí 2 ml/kg/den vehikula (stejně jako v příkladu 1) po dobu 22 následujících dnů. Skupina II se použila pro určení antihypertensní odpovědi na amlodipin v monoterapii a podávalo se jí vehikulum po dobu prvních 13 následujících dnů. V den 14 se přidal amlodipin v dávce 0,3 mg/kg/den na dobu 3 následujících dnů. Dávka se potom zvýšila na 1 mg/kg/den po dobu dalších 3 dnů, a poslední 3 dny se podávala dávka 3 mg/kg/den. Pro stanovení odpovědi na CI1027 v monoterapii se skupině III aplikovala 13-denní léčba CI-1027 v monoterapii v dávce 30 mg/kg/den. Antihypertensní odpověď na kombinovanou terapii se určila přidáním amlodipinu k probíhající léčbě CI-1027 v den 14. Návrh pokusu je uveden v tabulce 3.

r a ··♦*· ♦· ♦· ·* • » » « · • · · >

A A A 9 » A · ·

4«· A· AAAA

A A

A A A A • A «

A· ··

Tabulka	2. Vzhled pokusu
Skupina	Dny
	0-13	14-16	17-19	20-22
I	Vehikulum ml/kg	Vehikulum ml/kg	Vehikulum ml/kg	Vehikulum ml/kg
II	Vehikulum ml/kg	Amlodipin 0,3 mg/kg/den	Amlodipin I mg/kg/den	Amlodipin 3 mg/kg/den
m	CI-1027 30 mg/kg/den	CI-1027+ Amlodipin 0,3 mg/kg/den	CI-1027+ Amlodipin 1 mg/kg/den	CI-1027+ Amlodipin 3 mg/kg/den

Léky se suspendovaly nebo rozpustily ve vehikulu, které obsahovalo 96% vody, 3% karboxymethocelulosy a 1% tween 88. Sloučeniny se podávaly denně v 9:00 orálně v nápoji v objemu 2 ml/kg. Kombinace CI-1027 a amlodipin se podávala v jednom nápoji v objemu 2 ml/kg. Výsledky pokusu jsou uvedeny v tabulce 4. Ve třech léčených skupinách byla základní hodnota MABP před podáním dávky v rozmezí 131 a 134 mm Hg. Během 22 dnů zůstával pík MABP konstantní (136-141 mm Hg) ve skupině I (kontrolní krysy léčené vehikulem). První polovina pokusu prokázala, že CI-1027 v monoterapii snižuje krevní tlak u SHR. V den 13 byla MABP 120 mm Hg u CI-1027-léčených SHR, zatímco ve skupinách léčených vehikulem byly hodnoty MABP 138 a 144 mm Hg.

Práh antihypertensní dávky pro amlodipin v monoterapii (skupina II) byl 1 mg/kg/den, a 3 mg/kg/den snížily MABP na • ·· ·· ·« »« ··»· ···· · »·· ·· · • ·*· ···» • ···· · · » · · • · ··· «»·· ·«····· ·· ·»·♦ *« ··

114 rom Hg. Přidání amlodipinu k probíhající léčbě CI-1027 (skupina III) vedlo k antihypertensní odpovědi, která byla vyšší než odpověď získaná pro každé činidlo samostatně. Například, SHR léčené po dobu 3 dnů kombinací amlodipinu v dávce 3 mg/kg/den a CI-1027 v dávce 30 mg/kg/den (den 22) měly MABP pouze 96 mm Hg, ve srovnání s 114 mm Hg pro amlodipin v monoterapii. Tyto výsledky ukazují, že kombinace amlodipinu s CI-1027 umožňuje velmi účinnou kontrolu krevního tlaku u savců s hypertensí.

C FW

Taí) -H

3*3

U3

O.' '« tí CrS r- o S T3 <n t3 o-t*.

Σ ! eb JO U ab E £ £ < rr, o m

Tabulka 4. Efekt CI-1027 v monoterapii, amlodipinu v monoterapii a kombinace CI-1027 aamlodipinu naMABPuSHR o*

I á

<U

CX a - «ž •5· eí> +| •σ m o ε g < .cl , C «t - ·* tg υ ε ε < _ © ~ rn

gi-S.

a. ob m

©

tí <2

Jm ”S» ⁸⁰3 >-H T ob o π ε 22 r* fM

O

	eí	v%	<*>
4> c	+1	•H	H
0	<N	Xfr
Ž	m	C*>	m
		—·	w

J cx. λ ca >Q 2· ό Σ

o.

3 >o 2

O

LŠS >o 5:

SI “Z !··» il r-”·

Příklad. 3: Vliv sloučeniny vzorce III a antihypertensniho činidla, samostatně a v kombinaci, na atherosklerosy a kardiovaskulárních onemocnění

Tento pokus je prospektivní randomizovaný pokus hodnotící vliv kombinace sloučeniny vzorce III (sloučeniny III) nebo její farmaceuticky přijatelné soli a antihypertensniho činidla, jako je amlodipin, na progresi/regresi ischemické choroby srdeční a atherosklerosy karotid a na riziko vzniku srdečního selhání. Tento pokus je použit pro ukázání toho, že kombinace sloučeniny of vzorec III nebo farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a antihypertensniho činidla, jako je amlodipin-besylát, je účinná ve zpomalení nebo zastavení progrese nebo v dosažení regrese existující ischemické choroby srdeční (CAD), jak je dokázáno změnami v koronární angiografii nebo ultrazvukovém vyšetření karotid, u jedinců s existujícím onemocněním.

Tato studie je angiografickou dokumentací ischemické choroby srdeční a byla provedena jako dvojitě zaslepený, placebem kontrolovaný pokus na minimálně přibližně 500 jedincích a výhodně na přibližně 780 až přibližně 1200 jedincích. Zejména výhodné je zařazení přibližně 1200 jedinců do této studie. Jedinci byly zařazeni do studie, pokud splňovaly vstupní kriteria, jak jsou uvedena dále.

Vstupní kriteria: Jedinci zařazení do studie musí splňovat určitá vstupní kriteria. Jedincem musí být dospělý muž nebo žena, věku 18 až 80 let, u kterého je klinicky indikována koronární angiografie. Jedinci musí mít angiografickou přítomnost signifikantní fokální léze, jako je 30% až 50% léze při hodnocení kvantitativní koronární angiografii (QCA) v minimálně jednom segmentu (bez PTCA, bez by-passu nebo non-MI céva), která je hodnocena jako

nepravděpodobná z hlediska nutnosti intervence v průběhu následujících 3 let. Je nutné, aby spolu analyzované segmenty vzájemně neinterferovaly. Protože perkutánní transluminální kardiální angioplastika (PICA) interferuje se segmenty insercí balónkového katetru, jsou pro analýzu vyžadovány non-PTCA segmenty. Je také nutné, aby v analyzovaných segmentech nebyly tromby, jak je tomu při infarktu myokardu (MI). Proto se vyžadují non-MI cévy. Segmenty, které byly analyzovány, zahrnují: levý hlavní, střední, proximální a disální levý přední sestupný, první a druhou diagonální větev, proximální a distální levý cirkumflexní, první nebo největší marginální, proximální, střední a distální koronární arterie. Jedinci musí mít ejekční frakci vyšší než 30%, stanovenou katetrizací nebo radionuklidovou ventrikulografií nebo ECHO-kardiograficky v době zařazovacího angiogramu nebo během předešlých 3 měsíců před angiogramem, s podmínkou, že během této doby se nevyskytly trombotické události nebo postupy jako je PTCA.

Z důvodů počtu pacientů a fyzických omezení jakéhokoliv jednoho centra byla studie provedena jako studie multicentrická. Při zařazení do studie se jedincům provede v uvedených centrech kvantitativní koronární angiografie, stejně jako ultrasonografie karotid v B-modu a hodnocení komplience karotid. Takto se určí výchozí hodnoty pro každého jedince. Po zařazení do testu jsou jedinci randomizováni pro aplikaci sloučeniny vzorce III (600 mg) a placeba nebo antihypertensního činidla (dávka je závislá na použitém činidlu; nicméně, obvykle se nejprve použije dávka 40 mg) a placeba nebo sloučeniny III (600 mg) a antihypertensního činidla (40 mg). Odborníkům v oboru bude jasné, že v předkládaném vynálezu může být použita volná baze nebo sůl sloučeniny III nebo volná baze nebo sůl antihypertensního činidla. Výpočet dávky těchto jiných forem

antihypertensního činidla a sloučeniny III se snadno provede pomocí výpočtu poměru molekulových hmotností použitých druhů. Dávka sloučeniny III může být různá, podle potřeby. Obecně s ezačne na dávce 600 mg a tato dávka se titruje až na 200 mg a určuje jí ošetřující lékař. Dávka antihypertensního činidla se obdobně titruje z 40 mg na nižší dávku a určuje jí ošetřující lékař. Jedinci se sledují po dobu 1 až 3 let, obecně po dobu 3 let. Ultrasonografie karotid v B-modu pro hodnocení komplience a atherosklerosy karotid se provádějí během studie v pravidelných intervalech.

Obecně jsou vhodné intervaly 6 měsíců. Obvykle je toto hodnocení prováděno ultrasonografií v B-modu. Nicméně, odborník v oboru může využít i jiných metod pro toto hodnocení. Koronární angiografie se provádí na konci 1-3letého sledování. Základní a poléčebné angiogramy a ultrasonogramy karotid v B-modu se hodnotí na výskyt nových lézí nebo na progresi existujících atherosklerotických lézí. Arteriální komplience se hodnotí na rozdíly mezí základní hodnotou a hodnotami získanými během 6-měsíčních period.

Primárním objektem studie je dokázat to, že kombinace karboxyalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelný adiční soli s kyselinou a antihypertensního činidla redukuje progresi atherosklerotických lézí, jak jsou měřeny kvantitativní koronární angiografií (QCA) u jedinců s ischemickou chorobou srdeční. QCA měří průsvit lumen hodnocenách arteríí.

Primárním konečným cílem studie je změna průměrného průměru segmentu koronárního arteriálního řečiště. Proto se průměr arteriálního segmentu měří v různých částech segmentu. Potom se určí průměrný průměr segmentu. Po určení průměrného průměru segmentu pro více segmentů, určí se průměrný průměr všech segmentů pro získání průměrného průměru segmentu. Průměrný průměr segmentu u jedinců užívajících antihypertensní činidlo a sloučeninu III nebo její farmaceuticky přijatelnou adiční sůl s kyselinou se bude snižovat pomaleji, nebo se snižování zcela zastaví, nebo bude pozorováno zvětšení průměru segmentů. Tyto výsledky představují zpomalení progrese atherosklerosy, žádnou změnu v progresi atherosklerosy a regresi atherosklerosy, v příslušném pořadí.

Sekundárním objektem studie je to, že kombinace karboxyalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelný adiční soli s kyselinou a antihypertensního činidla redukuje rychlost progrese atherosklerosy karotidách měřená podle sklonu křivky maximální tloušťky karotidy mezi intimou medií (průměr z 12 separátních segmentů) v závislosti na čase, více než sloučenina III nebo její farmaceuticky přijatelná adiční sůl s kyselinou nebo antihypertensní činidlo samostatně. Tloušťka intima-media u jedinců užívajících antihypertensní činidlo a sloučeninu III nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl se zvyšuje pomaleji, zvyšování se zastaví nebo se tato tloušťka sníží. Tyto výsledky představují zpomalení progrese atherosklerosy, zastavení progrese atherosklerosy a regresi atherosklerosy, v příslušném pořadí. Dále mohou být tyto výsledky použity pro usnadnění stanovení dávky.

Použitelnost sloučenin podle předkládaného vynálezu jako činidel v léčbě angíny pectoris u savců (např. lidí) je demonstrována aktivitou sloučenin podle předkládaného vynálezu v běžných testech a klinických protokolech popsaných dále.

• · · · · · ♦ · ··

Příklad 4: Vliv sloučeniny vzorce III a antihypertensního činidla, samostatně nebo v kombinaci, na léčbu angíny pectoris

Tato studie je dvojitě zaslepená, randomizovaná studie s paralelními rameny ukazující účinnost sloučeniny III nebo a její farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a antihypertensního činidla podávaných v kombinaci při léčbě symptomatické angíny pectoris.

Vstupní kriteria: Jedinci jsou muži nebo ženy ve věku mezi 18 a 80 lety s anamnesou typických bolestí na hrudi spojených s jedním z následujících objektivních příznaků srdeční ischemie: (1) elevací segmentu ve stresovém testu o přibližně jeden mm nebo více na ECG; (2) pozitivním stresovým testem na rotopedu; (3) novou anormalitou pohyblivosti stěny na ultrazvuku; nebo (4) koronární angiografií s významnou stenosou. Obecně je považována za významnou stenosa přibližně 30% až 50%.

Každý jedinec je hodnocen po dobu přibližně 10 až 32 týdnů. Alespoň 10 je nutných pro dokončení studie. V tomto pokusu je použito dostatečného počtu jedinců pro zajištění toho, aby bylo přibližně 200-800 jedinců, lépe přibližně 400 jedinců, hodnoceno při ukončení studie. Jedinci se vyšetřují na splnění vstupních kriterií, jak jsou uvedena dále, během 4-týdenní vstupní fáze. Po splnění vstupních kriterií se jedincům vysadí stávající antianginosní medikace a stabilizují se na dlouhodobě působících nitrátech, jako je nitroglycerin, isosorbid-5-mononitrát nebo isosorbiddinitrát. Termím vymytí, jak je zde použit, označuje vysazení současné antianginosní medikace tak, že v tyto vysazené léky jsou v podstatě zcela eliminovány z těla jedince. Promývací období trvá obvykle 8 týdnů a během tohoto období jsou jedinci převedeni na stabilní dávky uvedených nitrátů. U jedinců majících jeden nebo dva ataky angíny za týden při stabilních dávkách dlouhodobě působících nitrátů se obvykle přeskočí vymývací fáze. Poté, co se jedinci stabilizují na nitrátech, vstoupí do randomizační fáze za podmínky, že mají jeden nebo dva ataky angíny za týden. V randomizační fázi se jedinci náhodně rozdělí do čtyřech ramen studie uvedené dále. Po dokončení vymývací fáze se u jedinců splňujících vstupní kriteria provede 24hodinový ambulantní elektrokardiogram (EKG), jako je Holterovo vyšetření, zátěžový test, například na rotopedu, a hodnocení perfuse myokardu za použití pozitronové emisní tomografie (PET) pro určení základních hodnot pro každého jedince. Při zátěžovém testu může být rychlost rotopedu a gradient rotopedu řízen technikem. Rychlost rotopedu a gradient rotopedu se obvykle během testu zvyšuje. Intervaly mezi každým zvýšením rychlosti a gradientu se obvykle určí za použití modifikovaného Bruče protokolu.

Po dokončení základního vyšetření zahájí jedinci léčbu podle jednoho z následujících čtyř ramen studie: (1) placebo; (2) antihypertensní činidlo (přibližně 2,5 mg až přibližně 50 mg); (3) sloučenina III (přibližně 150 mg až přibližně 900 mg); nebo (4) kombinace výše uvedených dávek sloučeniny III a antihypertensního činidla. Jedinci se potom sledují po dobu 2 až 24 týdnů. Odborníkům v oboru bude jasné, že v předkládaném vynálezu může být použita volná baze nebo jiná sůl sloučeniny III nebo volná baze nebo jiná sůl antihypertensního činidla. Výpočet dávky pro tyto jiné formy antihypertensního činidla a sloučeniny III se provede podle výpočtu poměru molekulových hmotností daných sloučenin.

Po ukončení sledování se u jedinců provedou následující

vyšetření: (1) 24-hodinové EKG sledování, jako je Holterovo vyšetření; (2) zátěžový test (například na rotopedu za použití modifikovaného Bruče Protokolu); a (3) hodnocení perfuse myokardu za použití PET vyšetření. Pacienti si vedou diář bolestivých ischemických příhod a spotřeby nitroglycerinu. Je žádoucí mít přesný záznam o počtu atak angíny pectoris u pacientů během testu. Jelikož pacienti obvykle berou nitroglycerin při bolesti při anginosním záchvatu, je spotřeba nitroglycerinu dostatečně přesným záznamem vypovídajícím o počtu anginosních atak.

Pro demonstrování účinnosti a dávkování kombinací léků podle předkládaného vynálezu hodnotí osoba provádějící test jedince za použití popsaných testů. Úspěšná léčba znamená menší počet ischemických příhod detekovaných na EKG, umožní jedinci delší zátěž nebo větší zátěž na rotopedu nebo při cvičení, nebo povede k lepší perfusi nebo méně defektům perfuse na PET vyšetření.

Použitelnost sloučenin podle předkládaného vynálezu jako léčiv pro léčbu hypertense a hyperlipidemie u savců (například lidí) s kombinací hypertense a hyperlipidemie je demonstrována aktivitou sloučenin podle předkládaného vynálezu v běžných testech a klinickém protokolu popsaném dále.

Příklad 5: Vliv karboxyalkyletheru a antihypertensního činidla, samostatně nebo v kombinaci, na léčbu jedinců s hypertensí a hyperlipidemií

Tato studie je dvojitě zaslepená, randomizovaná studie s paralelními rameny ukazující účinnost karboxyalkyletheru nebo a jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a antihypertensního činidla podávaných v kombinaci při léčbě ···· • · • · · · 4 9 9 9 · · · · ···· ♦

9 4 4 9 4 9 4 9

949 44·· ·· ··♦♦ ·· *· hypertense a hyperlipidemie u jedinců, kteří mají mírnou, střední nebo těžkou hypertensi a hyperlipidemii.

Každý jedinec je sledován po dobu 10 až 20 týdnů, výhodně po dobu 14 týdnů. V tomto pokusu je použito dostatečného počtu jedinců pro zajištění toho, aby bylo přibližně 400-800 jedinců hodnoceno při ukončení studie.

Vstupní kriteria: Jedinci jsou dospělí muži nebo ženy věku až 80 let mající jak hyperlipidemii, tak hypertensi.

Přítomnost hyperlipidemie je prokázána hodnocením koncentrace LDL cholesterolu u jedince ve vztahu k některým rizikovým faktorům. Pokud nemá jedinec ischemickou chorobu srdeční (ICHS) a má méně než dva pozitivní rizikové faktory, tak je považován za jedince majícího hyperlipidemii, který vyžaduje terapii tehdy, když je LDL > 190 mg/dl. Pokud nemá jedinec ischemickou chorobu srdeční (ICHS) a má dva nebo více pozitivních rizikových faktorů, tak je považován za jedince majícího hyperlipidemii, který vyžaduje terapii tehdy, když je LDL ^160 mg/dl. Pokud jedinec má ischemickou chorobu srdeční (ICHS), tak je považován za jedince majícího hyperlipidemii, když je LDL > 130 mg/dl.

Mezi pozitivní rizikové faktory patří: (1) muži nad 45 let věku, (2) ženy nad 55 let věku neužívající hormonální substituční terapii (HRT), (3) rodinná anamnesa kardiovaskulárních onemocnění v časném věku, (4) kouření, (5) diabetes, (6) HDL méně než 45 mg/dl, a (7) hypertense.

HDL > 60 mg/dl je považován za negativní rizikový faktor a rusí jeden z výše uvedených pozitivních rizikových faktorů.

Přítomnost hypertense je prokázána klidovým diastolickým krevním tlakem (TK) >90 mm Hg nebo klidovým systolickým TK >140 mm Hg. Všechny krevní tlaky jsou určeny jako průměr ze • ·« 99 99 999999 • · « 9 9 9 9 9 · · 9 • · · · 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 9 9 « 9 «9 9*9 9999

999 9999 99 >999 99 99 tří měření provedených s odstupem 5 minut.

Jedinci se vyšetřují na vstupní kriteria uvedená výše. Po splnění všech vstupních kriterií se jedincům vysadí současná antihypertensní a antihyperlipidemická medikace a ponechají se na NCEP ΑΤΡ II Step I dietě. NCEP ΑΤΡ II (léčba dospělých, 2. revize) Step I dieta má množství nasycených a nenasycených tuků, které by mělo být konzumováno jako součást celkového kalorického příjmu. Termín vymytí, jak je zde použit, označuje vysazení současné antihypertensní a antihyperlipidemické medikace tak, že v tyto vysazené léky jsou v podstatě zcela eliminovány z těla jedince. Nově diagnostikovaní jedinci jsou bez léčby do zahájení testu.

Tito jedinci mají též NCEP Step 1 dietu. Po 4-týdenním období vymývání a stabilizace na dietě se u jedinců provedou následující základní vyšetření: (1) krevní tlak a (2) vyšetření lipidů na lačno. Vyšetření lipidů na lačno určuje základní hodnoty lipidů u jedince na lačno. Obvykle tito jedinci lační po dobu 12 hodin a potom se provede stanovení lipidového profilu.

Po provedení základního vyšetření začnou jedinci jednu z následujících terapií: (1) fixní dávka sloučeniny III, obvykle přibližně 150 až 900 mg; (2) fixní dávka antihypertensního činidla, obvykle přibližně 2,5 mg až přibližně 50 mg; nebo (3) kombinace výše uvedených dávek sloučeniny III a antihypertensního činidla dohromady.

Odborníkům v oboru bude jasné, že v předkládaném vynálezu může být použita volná baze nebo jiná sůl sloučeniny III nebo volná baze nebo jiná sůl antihypertensního činidla.

Výpočet dávky pro tyto jiné formy antihypertensního činidla a sloučeniny III se provede podle výpočtu poměru molekulových hmotností daných sloučenin. Jedinci zůstávají na těchto dávkách minimálně po dobu 6 týdnů a obvykle ne • · • · · · • · · 9 9 · · ♦ · · · · · · 9 · • 9 9 9 9 9 9 ·

99 99 999 9 9 9 9 9 déle než 8 týdnů. Jedinci se pozvou do testovacího centra na konci 6 až 8 týdne a zopakují se základní vyšetření. Krevní tlak jedince na konci období se srovnává s krevním tlakem jedince při zařazení do testu. Měření lipidů zahrnuje měření celkového cholesterolu, LDL-cholesterolu, HDL-cholesterolu, triglyceridů, apoB, lipoproteinu s velmi nízkou densitou (VLDL) a dalších složek lipidového profilu jedince. Zlepšení hodnot získaných po léčbě ve srovnání s hodnotami před léčbou ukazuje na užitečnost kombinace léků.

Použitelnost sloučenin podle předkládaného vynálezu jako léčiv v léčbě kardiovaskulárních onemocnění u savců (například u lidí) s rizikem srdečních příhod je demonstrována aktivitou sloučenin podle předkládaného vynálezu v běžných testech a klinickém protokolu popsaném dále.

Příklad 6: Vliv karboxyalkyletheru a antihypertensního činidla, samostatně nebo v kombinaci, na jedince rizikové z hlediska kardiovaskulárních příhod

Tato studie je dvojitě zaslepená, randomizovaná studie s paralelními rameny ukazující účinnost karboxyalkyletheru nebo a jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a antihypertensního činidla podávaných v kombinaci v redukci vypočítaného rizika kardiovaskulárních příhod u jedinců s vysokým rizikem kardiovaskulárních příhod. Toto riziko je vypočteno podle Framinghamské rovnice pro výpočet rizika. Jedinci jsou považováni za rizikové z hlediska kardiovaskulárních příhod, pokud je hodnota rizika vypočtená podle Framinghamské rovnice pro výpočet rizika o více než jednu standardní odchylku vyšší než je průměrná hodnota. Studie je použita pro hodnocení účinnosti fixní kombinace karboxylalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelné

9·· •« 9 · 9 9«· * · · • · · · « · · ♦

9999 999« ·

999 9 · · ·

999 99«· ·· ···· ·· ·· adiční soli s kyselinou a antihypertensního činidla v kontrole rizika kardiovaskulárních příhod tím, že je kontrolována jako hypertense, tak hyperlipidemie u pacientů, kteří mají jak střední hypertensi, tak hyperlipidemii.

Vstupní kriteria: Jedinci zařazení do studie jsou dospělí muži nebo ženy věku mezi 18 a 80 lety s základním 5-letým rizikem, kde toto riziko je vyšší než je medián pro pohlaví a věk jedince, jak je definováno Framingham Heart Study, což je probíhající prospektivní studie na zdravých mužích a ženách ukazující, že určité rizikové faktory mohou být použity pro predikci vzniku ischemické choroby srdeční. Věk, pohlaví, systolický a diastolický krevní tlak, kouření, přítomnost či nepřítomnost intolerance karbohydrátů, přítomnost či nepřítomnost hypertrofie levé komory, sérový cholesterol a HDL vyšší o více než jednu standardní odchylku od normy pro Framingham populaci se hodnotí pro určení toho, zda u pacienta existuje riziko kardiovaskulární příhody.

Hodnoty pro rizikové faktory jsou vloženy do Framinghamské rovnice pro výpočet rizika a vypočte se, zda je jedinec rizikový z hlediska budoucích kardiovaskulárních příhod.

Jedinci se vyšetří na splnění vstupních kriterií uvedených výše. Po splnění všech vstupních kriterií se pacientům vysadí současná antihypertensní a antihyperlipidemická medikace a jakákoliv další medikace, která by mohla ovlivňovat výsledky studie. Pacienti se potom ponechají na NCEP ΑΤΡ II Step I dietě. Nově diagnostikovaní jedinci jsou bez léčby do zahájení testu. Tito jedinci mají ····

9 9 9 9 9 9 9 9 · ·

999 9999

9999 9999 9 #99 9999 • 99 9999 ·· 9999 99 99 též NCEP Step 1 dietu. Po 4-týdenním období vymývání a stabilizace na dietě se u jedinců provedou následující základní vyšetření: (1) krevní tlak; (2) lačnění; (3) vyšetření lipidů; (4) test glukosové tolerance; (5) EKG; (6) ultrazvuk srdce. Tyto testy se provedou za použití standardních postupů dobře známých odborníkům v oboru. EKG a ultrazvuk srdce se použijí pro měření přítomnosti či nepřítomnosti hypertrofie levé komorý.

Po provedení základních vyšetření začnou pacienti užívat jednu z následujících medikací: (1) fixní dávku sloučeniny III (přibližně 150-900 mg); fixní dávku quinaprilu (přibližně 2,5 mg až přibližně 50 mg); nebo (3) kombinaci výše uvedených dávek sloučeniny III a quinaprilu. Pacienti se nechají užívat tyto dávky a pozvou se za 6 až 8 týdnů k opakování základních vyšetření. V této době se do Framinghamské rovnice pro výpočet rizika vloží nové hodnoty.

Výpočtem se určí, zda má jedinec nižší, vyšší nebo stejné riziko kardiovaskulární příhody.

Výše uvedené testy prokázaly účinnost sloučeniny III nebo její farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a quinaprilu nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí v léčbě angíny pectoris, aterosklerosy, hypertense s hyperlipidemií, rizika kardiovaskulárních příhod, a také ukázaly, jak mohou být aktivity sloučenin podle předkládaného vynálezu srovnávány mezi sebou a s aktivitami jiných známých sloučenin. Výsledky těchto srovnání jsou užitečné pro určování dávek u savců, včetně lidí, při léčbě takových onemocnění.

Následující dávky a další dávky uvedené v této přihlášce a v připojených patentových nárocích jsou dávky pro průměrného člověka hmotnosti přibližně 65 kg až přibližně 70

• 44	• 9	• 4	44 4994
44 9 4	•	9 4 4	4 4 4
• ·	•	• «	• · · 4
	• ·		44 ··

kg. Podávané dávky jsou dávky účinné v redukci krevního tlaku u savců, což je označováno jako antihypertensní efekt. Odborník v oboru snadno určí dávky pro jedince s hmotností jinou než je 65 až 70 kg, podle anamnesy jedince z hlediska onemocnění, např. diabetů. Všechny uvedené dávky jsou dávky za den.

Obecně je podle předkládaného vynálezu karboxyalkylether podán v dávce přibližně 150 mg až přibližně 1000 mg. Výhodně je sloučenina III podána v dávce přibližně 600 mg.

Odborníkům v oboru bude jasné, že v předkládaném vynálezu může být použita volná baze nebo sůl sloučeniny III. Výpočet dávky těchto jiných forem antihypertensního činidla a sloučeniny III se snadno provede pomocí výpočtu poměru molekulových hmotností použitých druhů.

Podle předkládaného vynálezu jsou výše uvedená antihypertensní činidla podávána v následujících dávkách:

Quinapril v dávce od přibližně 1,0 mg do přibližně 80 mg a výhodně přibližně 10 mg až přibližně 40 mg;

Amlodipin-besylát v dávce od přibližně 2,5 mg do přibližně 40 mg a výhodně od přibližně 2,5 mg do přibližně 10 mg;

Enalapril-maleát v dávce od přibližně 2,0 mg do přibližně 50 mg a výhodně od přibližně 2,5 mg do přibližně 20 mg;

Eprosartan-mesylát v dávce od přibližně 100 mg do přibližně 800 mg a výhodně od přibližně 200 mg do přibližně

400 mg;

Acebutolol-hydrochlorid v dávce od přibližně 100 mg do

• ·· 9 9 · 9 ·	• 9	99 9 9 9	9 9	99	9 9	9999 9 9
9 9	• •
• ·	9	9	9	•		•	9 9
9 9 9999	99		9999		99		9·

přibližně 800 mg a výhodně od přibližně 200 mg do přibližně 4 0 0 mg; a

Hydrochlorothiazid v dávce od přibližně 2,5 mg do přibližně 160 mg a výhodně od přibližně 10 mg do přibližně 80 mg.

Odborníkům v oboru bude jasné, že v předkládaném vynálezu může být použita volná kyselina nebo sůl antihypertensního činidla. Výpočet dávky těchto forem antihypertensního činidla se snadno provede pomocí výpočtu poměru molekulových hmotností použitých druhů.

Sloučeniny púdle předkládaného vynálezu jsou obecně podány ve formě farmaceutického prostředku obsahujícího alespoň jednu sloučeninu podlé předkládaného vynálezu společně s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem. Tak mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu podávány buď samostatně nebo současně v běžné orální, parenterální nebo transdermální dávkové formě.

Pro orální podání může být farmaceutický prostředek ve formě roztoků, suspenzí, tablet, pilulek, kapslí a prášků a podobně. Tablety obsahující různé přísady, jako je citrát sodný, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, se použijí s různými činidly podporujícími rozpadavost, jako je škrob, výhodně bramborový nebo tapiokový škrob, a některé komplexní silikáty, společně s pojivý, jako je polyvinylpyrrolidon, sacharosa, želatina a arabská klovatina. D81e, kluzná činidla, jako je magnesium-stearát, lauryl síran sodný a talek, jsou často velmi vhodná pro tabletování. Pevné kompozice podobného typu se také často používají jako plniva v kapslích z tuhé a měkké želatiny; výhodnými materiály pro tento účel jsou laktosa nebo mléčný cukr stejně jako • · polyethylenglykoly s vysokou molekulovou hmotností. Když je pro orální podání žádoucí vodná suspenze nebo elixír, tak mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu kombinovány s různými sladidly, chuťovými korigens, barvivý, emulgačními. činidly a/nebo suspendačními činidly, stejně jako s ředidly jako je voda, ethanol, propylenglykol, glycerin, a různé jejich kombinace.

Kombinace podle předkládaného vynálezu mohou být také podávány jako prostředky s řízeným uvolňováním, jako jsou prostředky s pomalým uvolňováním nebo prostředky s rychlým uvolňováním. Takové prostředky s řízeným uvolňováním obsahující kombinaci podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny za použití způsobů dobře známých odborníkům v oboru. Způsob podání bude určen odborníkem v oboru po zhodnocení stavu a požadavků jedince. Obecně výhodným prostředkem obsahujícím quinapril je Accupril® (quinapril, Warner Lambert Company), který je popsán v US Patentu 4,743,450, zde uvedeném jako odkaz. Výhodným blokátorem vápníkového kanálu je amlodipin, výhodně Norvasc® (Pfizer, lne.).

Pro parenterální podání mohou být použity roztoky v sezamovém nebo podzemnicovém oleji nebo ve vodném propylenglykolu, stejně jako sterilní vodné roztoky příslušných solí rozpustných ev vodě. Takové vodné roztoky mohou být vhodným způsobem pufrovány, pokud je to nutné, a mohou být upraveny na izotonicitu salinickým roztokem nebo glukosou. Tyto vodné roztoky jsou zejména vhodné pro intravenosní, intramuskulární, podkožní a intraperitoneální injekce. Pro tento účel mohou být použita sterilní vodná media, která mohou být získána standardními technikami dobře známými odborníkům v oboru.

• · • · · ·

Způsoby přípravy různých farmaceutických prostředků s určitým množstvím aktivních činidel jsou známé, nebo budou jasné z této přihlášky. Viz například Remington' s

Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pennsylvania, 15. vydání (1975).

Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat 0,1% až 95% sloučeniny podle předkládaného vynálezu; výhodně 1% až 70%. V jakémkoliv případě bude prostředek obsahovat sloučeniny podle předkládaného vynálezu v množství účinném pro léčbu onemocnění nebo stavů u pacientů.

Protože se vynález týká léčby onemocnění kombinací aktivních činidel, která mohou být podána samostatně, zahrnuje též kombinování samostatných farmaceutických prostředků ve formě kitu. Kit obsahuje dva samostatné farmaceutické prostředky: karboxyalkylether nebo jeho farmaceuticky přijatelnou adiční sůl s kyselinou a antihypertensní činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl. Kit obsahuje zásobník pro samostatné prostředky, jako je dělená lahvička nebo dělený pytlík; nicméně, samostatné prostředky mohou být také obsaženy v jediném, neděleném zásobníku. Obvykle kit obsahuje návod pro podání jednotlivých složek za dosažení synergního účinku. Forma kitu je zejména výhodná tehdy, když jsou samostatné složky podány v různých dávkových formách (například orální a parenterální), v různých intervalech nebo při titraci jednotlivých složek ošetřujícím lékařem.

Je třeba si uvědomit, že předkládaný vynález není omezen na konkrétní popsaná provedení, ale že existují modifikace, které spadají do rozsahu předkládaného vynálezu.

Claims

1. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje

a. množství karboxyalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou;

b. množství antihypertensního činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli; a

c. farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

2. Farmaceutický prostředek podle nároku 1 vyznačující se tím, že uvedené antihypertensní činidlo je vybráno ze skupiny zahrnující blokátory vápníkového kanálu, ACE inhibitory, a-blokátory, β-blokátory a diuretika.

3. Farmaceutický prostředek podle nároku 2 vyznačující se tím, že uvedeným antihypertensnim činidlem je amlodipin nebo quinapril, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

4. Farmaceutický prostředek podle nároku 3 vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu, vzorce I kde • · • · ··· · n a m jsou nezávisle celá čísla od 2 do 9;

Ri, R2, R3, a R₄ jsou nezávisle Ci-Cě alkyl, C1-C6 alkenyl, C2C6 alkynyl, a Ri a R2 spolu s uhlíkem, na který jsou navázány, a R3 a R₄ spolu s uhlíkem, na který jsou navázány, mohou tvořit karbocyklický kruh obsahující od 3 do 6 atomů.

5. Farmaceutický prostředek podle nároku 4 vyznačující se tím, že obsahuje quinapril hydrochlorid a monovápenatou sůl kyseliny 6,6'-oxybis(2,2dimethylhexanové).

6. První farmaceutický prostředek určený pro použití s druhým farmaceutickým prostředkem pro dosažení antihypertensního a/nebo kardiovaskulárního účinku u savců trpících hypertensí nebo rizikových z hlediska kardiovaskulárních onemocnění, kde tyto účinky jsou větší než je součet antihypertensních účinků dosažených při podání uvedeného prvního a druhého farmaceutického prostředku samostatně, a kde druhý farmaceutický prostředek obsahuje množství karboxyalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo, uvedený první farmaceutický prostředek obsahuje množství antihypertensního činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

7. Prostředek podle nároku 6vyznačující se tím, že uvedeným antihypertensním činidlem je amlodipin nebo quinapril.

8. Prostředek podle nároku 7vyznačující se tím, že uvedený druhý farmaceutický prostředek obsahuje monovápenatou sůl kyseliny 6,6'-oxybis(2,2dimethylhexanové).

• 9 ··

9. První farmaceutický prostředek určený pro použití s druhým farmaceutickým prostředkem pro dosažení antihypertensního účinku u savců trpících hypertensí, kde tyto účinky jsou větší než je součet antihypertensních účinků dosažených při podání uvedeného prvního a druhého farmaceutického prostředku samostatně, a kde druhý farmaceutický prostředek obsahuje množství antihypertensního činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a uvedený první farmaceutický prostředek obsahuje množství sloučeniny vzorce II kde n a m jsou každý celé číslo vybrané z 2, 3, 4 nebo 5, nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

10. Prostředek podle nároku 9vyznačující se tím, že uvedeným antihypertensním činidlem je amlodipine nebo quinapril.

11. Prostředek podle nároku 10 vyznačuj ící se tím, že obsahuje monovápenatou sůl kyseliny 6,6'oxybis(2,2-dimethylhexanové).

12. První farmaceutický prostředek určený pro použití s druhým farmaceutickým prostředkem pro léčbu rizika kardiovaskulárních příhod u jedinců se zvýšeným rizikem kardiovaskulárních příhod, kde účinek léčby je vyšší než je součet účinků dosažených při podání uvedeného prvního a • 9 • 4 · 4 · druhého farmaceutického prostředku samostatně, a kde druhý farmaceutický prostředek obsahuje množství antihypertensního činidla nebo farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo, uvedený první farmaceutický prostředek obsahuje množství karboxyalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

13. Prostředek podle nároku 12 vyznačující se tím, že uvedeným antihypertensním činidlerm je amlodipin nebo quinapril.

14. Prostředek podle nároku 13 vyznačující se tím, že obsahuje vápenatou sůl kyseliny 6,6'-oxybis(2,2dimethylhexanové).

15. Kit pro dosažení terapeutického účinku u savce vyznačující se tím, že obsahuje:

a. množství karboxyalkyletheru nebo jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo v první dávkové formě;

b. množství antihypertensního činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo v druhé dávkové formě; a

c. zásobník pro uvedenou první a druhou dávkovou formu.

16. Kit podle nároku 15 vyznačuj ící se tím, že uvedeným antihypertensním činidlem je amlodipin nebo quinapril.

17. Kit podle nároku 16 vyznačující se že obsahuje karboxyalkylether vzorce I.

tím • · ·· ··· · • * · φ φ · ♦ · · φ φ · · ·

40 .........

18. Kit podle nároku 17 vyznačuj ící se tím, že využívá monovápenatou sůl kyseliny 6,6'-oxybis(2,2dimethylhexanové).

19. Kit podle nároku 15 vyznačující se tím, že uvedeným terapeutickým efektem je léčba hypertense.

20. Kit podle nároku 15 vyznačující se tím, že uvedeným terapeutickým efektem je léčba angíny pectoris.

21. Kit podle nároku 15 vyznačující se tím, že uvedeným terapeutickým eefktem je léčba rizika kardiovaskulárních příhod.

22. Kit podle nároku 15 vyznačující se tím, že uvedeným terapeutickým efektem je léčba aterosklerosy.

23. Kit podle nároku 22 vyznačující se tím, že uvedená léčba aterosklerosy zpomaluje progresi atherosklerotických plaků.

24. Kit podle nároku 23 vyznačující se tím, že uvedená progrese aterosklerotických plaků je zpomalena v koronárních arteriích.

25. Kit podle nároku 23vyznačující se tím, že uvedená progrese aterosklerotických plaků je zpomalena v karotických arteriích.

26. Kit podle nároku 23 vyznačující se tím, že uvedená progrese aterosklerotických plaků je zpomalena v periferních arteriích.

27. Kit podle nároku 2vyznačující se tím, že

9 9

9 9 9 9 uvedená léčba aterosklerosy způsobuje regresi atherosklerotických plaků.

28. Kit podle nároku 27 vyznačující se tím, že k uvedené regresi aterosklerotických plaků dochází v koronárních arteriích.

29. Způsob pro léčbu cévních onemocnění u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podání účinného množství prostředku podle nároku 1 savci, který potřebuje takovou léčbu.

30. Způsob pro léčbu hypertense u savce, který potřebuje léčbu, vyznačující se tím, že zahrnuje podání antihypertensního účinného množství sloučeniny vzorce I kde n a m jsou nezávisle celá čísla od 2 do 9;

Ri, R2r R3, a R4 jsou nezávisle C1-C6 alkyl, C1-C6 alkenyl, C2C6 alkynyl, a Ri a R2 dohromady s atomem uhlíku, na který jsou navázány, a R3 a R4 dohromady s atomem uhlíku, na který jsou navázány, mohou tvořit karbocyklický kruh obsahující 3 až 6 uhlíků;

Yi a Y2 jsou nezávisle COOH, CHO, tetrazol nebo COORs, kde Rs je Ci-Ce alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl; a kde alkylová, alkenylová a alkynylová skupina může být substituovaná jednou nebo dvěma skupinami vybranými ze skupiny zahrnující: halogen, hydroxy, Ci-Ce alkoxy a fenyl;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli.

• ·♦

99 9 9 • · * · · • 9 • 99 9999

99 99 • · · · • · ·

9 9 9

99 9999 ♦* ····

31. Způsob pro léčbu hypertense u savců potřebujících léčbu vyznačující se tím, že zahrnuje podání antihypertensního účinného množství sloučeniny vzorce II

II nebo její nezávisle farmaceuticky přijatelné soli, kde n a m jsou celá čísla od 2 do 9.

32. Způsob pro léčbu hypertense u savců potřebujících léčbu vyznačující se tím, že zahrnuje podání antihypertensního účinného množství sloučeniny vzorce III

III nebo její farmaceuticky přijatelné soli

33. Způsob pro léčbu hypertense u savců potřebujících léčbu vyznačující se tím, že zahrnuje podání antihypertensního účinného množství monovápenaté soli kyseliny 6,6'-oxybis(2,2-dimethylhexanové).

34. Způsob pro prevenci iktů u savce vyznačuj ící se t i m, že zahrnuje podání účinného množství monovápenaté soli kyseliny 6,6'-oxybis(2,2-