CZ20003460A3

CZ20003460A3 - Derivát kyseliny barbiturové a přípravek pro prevenci a léčení onemocnění kostí a chrupavek jej obsahující

Info

Publication number: CZ20003460A3
Application number: CZ20003460A
Authority: CZ
Inventors: Kunikazu Sakai; Yusuke Satoh
Original assignee: Hoechst Marion Roussel
Priority date: 1998-03-27
Filing date: 1999-03-23
Publication date: 2001-08-15
Also published as: PL343433A1; IL138433A0; EP1064269A1; US6498164B1; NO20004798D0; TR200002785T2; WO1999050252A3; CA2324584A1; HUP0101505A2; ZA200004473B; SK14032000A3; NZ506616A; CN1295565A; AU759249B2; HUP0101505A3; WO1999050252A2; JPH11279157A; AU3726099A; NO20004798L; YU57800A

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nového derivátu kyseliny barbiturové a jeho použiti ve způsobu prevence a léčení maligní hyperkalcémie, osteolytických nemocí jako je Pagetova nemoc kostí a osteoporóza, onemocnění spojených s denaturací a nekrózou chrupavky, jako je osteoartritida, nekróza hlavy femuru a kloubní revmatismus vyskytující se v kolenním, ramenním a kyčelním kloubu.

Dosavadní stav techniky

Společnost v Japonsku postupně stárne, proto se onemocnění spojené s resorpcí kosti, jako je osteoporóza, stávají velkým sociálním problémem. Onemocnění spojená s resorpcí kosti jsou kostní nemoci způsobené abnormálně zvýšenou resorpcí kostí, příkladem je maligní hyperkalcémie vyvolaná lokální resorpcí kostí u myelomu a lymfomu, Pagetovy nemoci kostí, a osteoporóza způsobená mnoha faktory, například stárnutím a menopauzou. I když se v současnosti v léčbě používají ženské hormony, kalcitonin, aktivovaný vitamín D3, parathormon, bifosfonáty a ipriflavon apod., mají tyto přípravky určité nedostatky, takže zůstávají pouze symptomatickou terapií.

Na druhé straně, osteoartritida, nekróza hlavy femuru a kloubní revmatismus jsou nemoci, u kterých se objevuje poškození chrupavky a kosti vyvolané denaturací a nekrózou kloubní chrupavky a kosti pod chrupavkou, které je způsobené různými faktory, jako jsou mechanický stres, stárnutí a zánět. Poškození kosti do značné míry snižuje kvalitu

·· ·· ··» ··· . /'·.· ·· života díky deformaci a bolestem v kloubech. V podstatě neexistuje žádný přípravek, který inhibuje nebo účinně napravuje poškození chrupavky u těchto nemocí.

Deriváty kyseliny barbiturové jsou skupinou sloučenin, která je používána jako léčiva, zemědělské chemikálie a pro mnoho dalších účelů, a je známo mnoho derivátů.

Například existuje protinádorový lék (viz WO9116315), fotosenzitivní látky pro elektronické fotografie (viz projednávaná japonská patentové přihláška č. 179361/91 a 111852/91), antihelmintikum (viz EP 192180), insekticidy (EP 455300, DE 3903404 a GB 1339748), herbicidy (US 4797147 a projednávaná japonská patentová přihláška č. 154275/75) a baktericid (EP 517660).

Podstata vynálezu

Původci předkládaného vynálezu nejdříve objasnily strukturu a silné inhibiční působení řady 'sloučenin, kterých se předkládaný vynález týká, na resorpci kosti, které nebylo doposud známo.

Původci předkládaného vynálezu dříve objevili látky, které vykazují silné inhibiční působení na resorpci kosti, mezi deriváty polyhydroxyfenolu (japonská patentová přihláška č. 137991/97). Jako výsledek dalšího výzkumu a analýzy vztahu struktura-aktivita těchto sloučenin, objevili původci vynálezu silnou aktivitu nového derivátu kyseliny barbiturové a nakonec doplnili předkládaný vynález.

Účelem předkládaného vynálezu je tudíž poskytnout nový a použitelný derivát kyseliny barbiturové, jeho sůl a solvát, a způsob prevence a léčby různých nemocí postihujících kosti a chrupavky použitím těchto sloučenin.

• · · · * · ♦ · • φ φ ·

Předmětem vynálezu je derivát kyseliny barbiturové představovaný následujícím obecným vzorcem (I), jeho sůl nebo jeho solvát:

kde každý z R nebo R¹ nezávisle představují vodíkový atom, substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu nebo alkenylovou skupinu s jedním až 15 atomy uhlíku, substituovanou nebo nesubstituovanou arylmetylovou skupinu a substituovanou nebo nesubstituovanou arylovou skupinu, a R²představuje substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu nebo alkenylovou skupinu s 1 až 15 atomy uhlíku, substituovanou nebo nesubstituovanou arylmetylovou skupinu a substituovanou nebo nesubstituovanou arylovou skupinu.

Předkládaný vynález se týká derivátu kyseliny barbiturové s obecným vzorcem (I), jeho soli nebo jeho solvátu, obsahujícího jednu nebo více sloučenin, a léčivého přípravku obsahujícího nosič, který je přijatelný pro výrobu léků, výhodně léčivého přípravku, který je preventivní a terapeutický přípravek pro nemoci postihující kosti a chrupavky.

Dále se předkládaný vynález týká použití derivátu kyseliny barbiturové s obecným vzorcem (I), jeho soli nebo jeho solvátu, obsahujícího jednu nebo více sloučenin pro výrobu léčivého přípravku pro prevenci a terapii nemocí postihující kosti a chrupavky.

Dále se předkládaný vynález týká prevence a terapie nemocí postihujících kosti a chrupavky podáváním účinného množství derivátu kyseliny barbiturové s obecným vzorcem (I), jeho soli nebo jeho solvátu, obsahujícího jednu nebo více • · 99· · • · 9 ·

9 9

9 ·9

9 9 9

99 9

9 9 99

9 99 ·

9 9 9 9

9 9 9 9 ·

9 9 9 9

999 9 · 99 , ' sloučenin pro prevenci a terapii nemocí postihující kosti a chrupavky.

Ve sloučenině s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu alkylové skupiny jsou s rovně probíhajícím řetězcem nebo rozvětvené alkylové skupiny s 1 až 15 atomy uhlíku, výhodně 2 až 10, výhodněji 4 až 10, a alkenylové skupiny jsou s rovně probíhajícím řetězcem nebo rozvětvené nesaturované uhlovodíkové skupiny s 2 až 15 atomy uhlíku, výhodně 3 až 10, výhodněji 4 až 10, výhodně nesaturované uhlovodíkové skupiny jednoho nebo více uhlíku - uhlíkové dvojité vazby.

Ve sloučenině s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu arylové skupiny jsou monocyklické, polycyklické nebo arylové skupiny s kondenzovaným kruhem se 6 až 30 atomy uhlíku, výhodně 6 až 20 atomy uhlíku, výhodněji 6 až 10 atomy uhlíku, arylové skupiny podle předkládaného vynálezu jsou monocyklické, polycyklické nebo heterocyklické aromatické skupiny s kondenzovaným kruhem s alespoň jedním nebo více atomy dusíku, atomy kyslíku nebo atomy síry v aromatickém kruhu, přičemž velikost jednoho kruhu je 5 až 20 členů, výhodně 5 až 10 členů, výhodněji 5 až 7 členů a může být kondenzována s kruhem skládajícím se ze saturovaných nebo nesaturovaných uhlovodíkových skupin.

Ve sloučenině s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu jsou jako příklad arylmetylových skupin uvedeny metylové skupiny vytvořené substitucí uvedených arylových skupin.

V uvedeném obecném vzorci (I) podle předkládaného vynálezu mohou být alkylové skupiny, alkenylové skupiny arylmetylové skupiny nebo arylové skupiny substituovány substituční skupinou, která neinhibuje aktivitu pro léčebné účely podle předkládaného vynálezu.

Sloučenina s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu může být chráněna pomocí ochranné skupiny umožňující *· 9« • · • 9 ·· ·· • · · ·

9 9 9

9 9 9 ·· ·· vytvoření aktivní složky v živém organismu tak, aby se v živém organismu projevila její fyziologická aktivita.

Substituce skupin uvedených alkylových skupin, alkenylových skupin, arylmetylových skupin nebo arylových skupin v uvedeném obecném vzorci (I) podle předkládaného vynálezu může být tvořena substitucí těchto skupin navzájem, když je vzájemná substituce těchto skupin možná. Příkladem jsou arylové skupiny substituované alkylovou skupinou, arylmetylové skupiny substituované alkylovou skupinou, alkylové skupiny substituované arylovou skupinou a alkenylové skupiny substituované arylovou skupinou.

Příklady dalších substitučních skupin jsou hydroxylová skupina, aminoskupina, alkoxyskupina mající uvedené alkylové skupiny, alkythioskupina, mono- nebo dialkylaminoskupina, halogenové atomy jako je chlor, brom a fluor, alkylendioxyskupiny jako metylendioxyskupina a 2,2-dimetylmetylendioxyskupina, kyanoskupina a nitroskupina.

Příklady výhodných substitučních skupin jsou nižší alkylové skupiny, jako je metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, isopropylová skupina, n-butylová skupina, a t-butylová skupina, arylové skupiny jako je fenylová skupina a naftylová skupina, nižší alkoxyskupiny jako je metoxyskupina, etoxyskupina, a n-propoxyskupina, dvojité nižší alkylaminoskupiny jako je dimetylaminoskupina, dietylaminoskupina a dipropylaminoskupina, halogenové atomy jako je jod, brom, chlor a fluor, alkylendioxyskupiny jako je metylendioxyskupina, 2,2-dimetylmetylendioxyskupina, hydroxylová skupina, aminoskupina, kyanoskupina a nitroskupina apod.

Arylové skupiny ve sloučeninách s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu jsou doloženy příkladem fenylové skupiny, naftylové skupiny, antracenylové skupiny, pyridylové skupiny, chinolylové skupiny, thienylové skupiny a pyrrolylové skupiny.

>· ··*· • · · • · * • · · « · · • · * · ·· ·♦

Substituční skupiny substituovaných alkylových skupin nebo substituovaných alkenylových skupin jsou výhodně specifikovány atomovou skupinou vnesenou v náhradu vodíkového atomu při přípravě derivátu substitucí atomu vodíku těchto skupin jinou atomovou skupinou. Substituční skupiny mohou být hydroxylová skupina, alkoxyskupina, jod, brom, chlor a fluor, aminoskupina, kyanoskupina a nitroskupina. Substituční skupiny substituované arylmetylové skupiny jsou výhodně atomové skupiny vnesené v náhradu atomu vodíku, když derivát je připraven substitucí jiné atomové skupiny zbytku, vytvořeného odstraněním jednoho atomu vodíku benzenového kruhu aromatické sloučeniny, za atom vodíku sloučeniny, u které byl atom vodíku substituován metylovou skupinou. Příkladem těchto substitučních skupin je hydroxylová skupina, alkoxyskupina, jod, brom, chlor, fluor, aminoskupina, kyanoskupina a nitroskupina. Substituční skupiny pro substituci arylové skupiny jsou výhodně například ty, ve kterých skupina zbytku připraveného odstraněním jednoho atomu vodíku z benzenového kruhu aromatické sloučeniny byla substituována hydroxylovou skupinou, alkoxyskupinou, jodem, bromem, chlorem, fluorem, aminoskupinou, kyanoskupinou a nítroskupinou atd.

Alkylové skupiny substituované nebo nesubstituované obecného vzorce (I) substitučních skupin R a R¹ derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například metylová skupina, etylová skupina, propylová skupina, butylová skupina, pentylová skupina, hexylová skupina, heptylová skupina, oktylová skupina, nonylová skupina, dekanylová skupina, undekanylová skupina, dodecyiová skupina, tridecylová skupina, tetradecylová skupina nebo pentadecylová skupina, atd., kromě jejich izomerů, ty, které jsou substituované nebo nesubstituované těmito skupinami uvedenými substitučními skupinami jsou výhodné.

XX • •	• •	9999 9 9	• • · 9	9 9 9	99	♦ · • •	• • •
9 • -	• •
•	•	9 9	9	9	•	•	•	X
·*		• 9	99 9	9 99			• X

Alkenylové skupiny substituované nebo nesubstituovaná obecného vzorce (I) substitučních skupin R a R¹ derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například etenylová skupina, propenylová skupina, butenylová skupina, pentenylová skupina, hexenylová skupina, heptenylová skupina, oktenylová skupina, nonenylová skupina, decenylová skupina, undecenylová skupina, dodecenylová skupina, tridecenylová skupina, tetradecenylová skupina nebo pentadecenylová skupina, atd., kromě jejich izomerů, ty, které jsou substituované nebo nesubstituované těmito skupinami uvedenými substitučními skupinami jsou výhodné.

Arylmetylové skupiny substituované nebo nesubstituované obecného vzorce (I) substitučních skupin R a R¹ derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například fenylmetylová skupina, naftylmetylová skupina, antracenylmetylová skupina, pyridylmetylová skupina, chinolylmetyiová skupina, thienylmetylová skupina nebo pyrrolylmetylová skupina, atd., kromě toho ty, které jsou substituované v těchto skupinách uvedenými substitučními skupinami a výhodně například ty, které jsou substituované nebo nesubstituované těchto skupinách uvedenými substitučními skupinami jako hydroxylová. skupina, alkoxyskupina, jod, brom, chlor, fluor, aminoskupina, kyanoskupina, nebo nitroskupina, atd.

Alkylové skupiny substituované nebo nesubstituované obecného vzorce (I) substitučních skupin R² derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například metylová skupina, etylová skupina, propylová skupina, butylová skupina, pentylová skupina, hexylová skupina, heptylová skupina, oktylová skupina, nonylová skupina, dekanylová skupina, undekanylová skupina, dodecylová skupina, tridecylová skupina, tetradecylová skupina nebo pentadecylová skupina, atd., kromě jejich izomerů, ty, které jsou substituované nebo • · ·♦»· • 0 0 • · 49 ·· ·· ·· 0 0 0 0 • 4 9 4 4· • 9 · 4 4 · 0 • 0 0 0 0 4

944 444 44 44 nesubstituované v těchto skupinách uvedenými substitučními skupinami jsou výhodné..

Alkenylové skupiny substituované nebo nesubstituované obecného vzorce (I) substitučních skupin R² derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například etenylová skupina, propenylová skupina, butenylová skupina, pentenylová skupina, hexenylová skupina, heptenylová skupina, oktenylová skupina, nonenylová skupina, decenylová skupina, undecenylová skupina, dodecenylová skupina, tridecenylová skupina, tetradecenylová skupina nebo pentadecenylová skupina, atd., kromě jejich izomerů, ty, které jsou substituované nebo nesubstituované v těchto skupinách uvedenými substitučními skupinami jsou výhodné.

Arylmetylové skupiny substituované nebo nesubstituované obecného vzorce (I) substitučních skupin R² derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například fenylmetylová skupina, skupina, antracenylmetylová skupina, skupina, chinolylmetylová skupina, thienylmetylová skupina nebo pyrrolylmetylová skupina, atd., kromě toho ty, které jsou substituované v těchto skupinách uvedenými substitučními skupinami a výhodně například ty, které jsou substituované nebo nesubstituované v těchto skupinách uvedenými substitučními skupinami jako hydroxylová skupina, alkoxyskupina, jod, brom, chlor, fluor, aminoskupina, kyanoskupina, nebo nitroskupina, atd.

Arylové skupiny substituované nebo nesubstituované obecného vzorce (I) substitučních skupin R² derivátu kyseliny barbiturové jsou výhodně například fenylová skupina, naftylová skupina, antracenylová skupina, pyridylová skupina, chinolylová skupina, thienylová skupina a pyrrolylová skupina, atd., kromě toho jsou výhodné ty, které jsou substituované nebo nesubstituované v těchto skupinách naftylmetylová pyridylmetylová uvedenými substitučními skupinami.

φφφφ φ

φ • · • φ

Φ ΦΦ ΦΦ

ΦΦ ΦΦ Φ Φ Φ Φ

Φ Φ ΦΦΦΦ

Φ φ φ Φ Φ · Φ

Φ Φ Φ ΦΦΦ

ΦΦΦ Φ·Φ . ' Φ * · *

Následují specifické příklady výhodných sloučenin podle sloučeniny s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu:

1.3- dibenzyl-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturová kyselina (sloučenina č. 1)

1.3- dibenzyl-5-(fenylacetyl)barbiturová kyselina (sloučenina č. 2)

1.3- dibenzyl-5-(2-thienylacetyl)barbiturová kyselina (sloučenina č. 3)

1.3- bis(3-metylbutyl)-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturová kyselina (sloučenina č. 4) l-benzyl-3-(3-metylbutyl)-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturová kyselina l-benzyl-3-(3-metylbutyl)-5-(fenylacetyl)barbiturová kyselina l-benzyl-3-(3-metylbutyl)-5-(2-thienylacetyl)barbiturová kyselina

1.3- bis(3-metyl-2-butenyl)-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturová kyselina

1.3- bis(3-metyl-2-butenyl)-5-(fenylacetyl)barbiturová kyselina

1.3- bis(3-metyl-2-butenyl)-5-(2-thienylacetyl)barbiturová kyselina l-benzyl-3-(3-metyl-2-butenyl)-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturová kyselina l-benzyl-3-(3-metyl-2-butenyl)-5-(fenylacetyl)barbiturová kyselina l-benzyl-3-(3-metyl-2-butenyl)-5-(2-thienylacetyl)barbiturová kyselina

1-(3-metyl-2-butenyl)-3-(3-metylbutyl)-5-(3-metyl-l-oxobutyl) barbiturová kyselina

1-(3-metyl-2-butenyl)-3-(3-metylbutyl)-5(fenylacetyl)barbiturová kyselina * · · • · * · ·· • · ♦ · ♦ • · · · • ·· ··

1-(3-metyl-2-butenyl)-3-(3-metylbutyl)-5-(2-thienylacetyl).

barbiturová kyselina

Sloučenina s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu může být syntetizována obvyklými metodami syntézy. Například v reakci popsané následující rovnicí, může být syntézy snadno dosaženo kondenzační reakcí derivátu kyseliny barbiturové znázorněné následujícím vzorcem (II) a acylačním činidlem znázorněným následujícím vzorcem (III) (viz následující rovnice):

O

R.

N

(II) o

x^r² (iii)

Příklady použitých acylačních činidel jsou acylhalidy, anhydridy kyselin nebo karboxylové kyseliny, atd. Odborníkovi je dobře známo, že kondenzační činidla použitá pro tyto reakce jsou vybírána jednotlivě podle použité reakce. Když je acylační činidlo (III) acylhalid nebo anhydrid kyseliny, je jako kondenzační činidlo použita báze bez nukleofilní reakce, výhodně terciární amin. Příkladem jsou aromatické aminy jako pyridin a chinolin, atd., terciární aminy jako trietylamin, diisopropyletylamín, a N-metyl-pyrolidin, atd., a aralkylaminy jako N,N-dimetylanilin atd. V reakci je použito rozpouštědlo, ale jeho použití není omezující, pouze použitelné pro anilin atd. V reakci je použito rozpouštědlo, avšak jeho použití není omezující, ale použitelná jsou rozpouštědla, která jsou inaktivní jak pro acylační činidlo, tak pro terciární amin. V kombinaci s rozpouštědlem jsou někdy použity jako kondenzační činidlo pyridin a trietylamin, atd. (viz J. Org. Chem., 45, 4606, 1980, EP 455300, to *·· » » to fc -to to ·· * ··· ·· ·· to ·· · ·· ·· • to toto • to· · • ·· « • · *· » • ·· · ♦ »· «· n

projednávaná japonská patentová přihláška č. 102358/91 a projednávaná japonská patentová přihláška č. 111852/91).

Když je acylační činidlo (III) volná karboxylová kyselina, je jako kondenzační činidlo použit například oxychlorid fosforečný (viz GB 1339748).

Existuje několik způsobů přípravy derivátu kyseliny barbiturové (II) k acylaci v uvedené reakční rovnici. Tyto metody jsou odborníkem snadno provedeny. Například výroba se může provádět pomocí rovnice předložené níže (viz následující vzorce):

NHR

VíHR¹ (ÍV)

NR u

c

NR¹ (VI)

Příkladem je kondenzace derivátu močoviny (IV) a derivátu kyseliny malonové (V) (Y a Z jsou halogenové atomy jako je chlor nebo brom, atd. nebo hydroxylová skupina, nebo tvoří esterovou skupinu spolu s karbonylovou skupinou) a kondenzace derivátu karbodiimidu (VI) a kyseliny malonové (V) (viz EP 455300).

Derivát močoviny (IV) a derivát karbodiimidu (VI) atd., jsou sloučeniny obecně známé jako materiály a jejich příprava byla detailně popsána v následujících odkazech (Sandler, S.R., Káro, W., kapitola 6/močoviny, kapitola 9/ karbodiimidy, Academie Press, 1986).

«** «*·· • · · · · • · · · • · · · ·· 44 • 9 ·· Ίt ·· ·· · · · » • · · · · · « · · · * 9 • · « · · · ««« 999 44 44

Inhibiční aktivita na resorpci kosti derivátu kyseliny barbiturové připraveného podle výše uvedené metody byla testována pomocí testu tvorby otvorů. Výsledkem bylo, že sloučenina podle předkládaného vynálezu prokazovala vynikající inhibici na resorpci kosti v koncentraci 1 x 10⁵ M.

Tyto sloučeniny mají tedy silnou inhibiční aktivitu na resorpci kosti. Derivát kyseliny barbiturové, jeho sůl nebo jeho solváty, s obecným vzorcem (I) podle předkládaného vynálezu, je použitelný jako účinná složka léčiva pro prevenci a léčebné ošetření onemocnění kosti a chrupavky. Předkládaný vynález poskytuje léčivý přípravek obsahující jednu nebo více sloučenin jako účinnou složku, způsob použití přípravku pro prevenci a léčbu různých nemocí se vztahem k inhibici resorpce kosti a použití těchto sloučenin pro výrobu léčivého přípravku.

Předkládaný vynález se týká léčivého přípravku obsahujícího jednu nebo více sloučenin s obecným vzorcem (I), její soli nebo jejího solvátu, nebo látky takto chráněné (například prekurzor léku, předlék se v živém organismu přemění na aktivní lék), které jsou přijatelné pro výrobu léčiv, jako účinné složky. Léčivý přípravek podle předkládaného vynálezu. se týká léčivého přípravku obsahujícího různé nosiče, které jsou přijatelné pro výrobu léčiv. Léčivý přípravek podle předkládaného vynálezu má aktivitu inhibující resorpci kosti a je použitelný jako preventivní nebo léčivý přípravek u nemocí postihujících kosti a chrupavky.

Nemoci postihující kosti a chrupavky podle předkládaného vynálezu zahrnují nemoci spojené s resorpci kosti jako je maligní hyperkalcémie, Pagetova nemoc kostí a osteoporóza, a onemocnění doprovázená denaturaci a nekrózou chrupavky, jako je osteoartritida, nekróza hlavy femuru a kloubní • 9 • · ·· ·· revmatismus vyskytující se v kolenním, ramenním a kyčelním kloubu.

Dávka účinné složky podle předkládaného vynálezu pro klinické podávání se obecně pohybuje v rozmezí 0,01 g až 2 g denně (přibližně 0,15 mg až 30 mg/kg/den) pro dospělou osobu, dávka sloučeniny podle předkládaného vynálezu je výhodně 0,1 až 2 g denně (přibližně 1,5 mg až 30 mg/kg/den) pro dospělou osobu a výhodněji 0,1 až 1 g denně (přibližně 1,5 mg až 15 mg/kg/den) pro dospělou osobu, což je proměnlivé podle způsobu podávání, stadia nemoci a stavu pacienta.

Možný způsob podávání léčivého přípravku podle předkládaného vynálezu zahrnuje intravenózní, intramuskulární, perorální a rektální podávání, při intravenózním podávání se může použít intravenózní infúze kromě obvyklé intravenózní injekce.

Příkladem způsobu výroby léčivého přípravku obsahující sloučeninu podle předkládaného vynálezu je obvyklý způsob používající konvenční excipient a konvenční aditivum.

Injekční přípravek může být například práškový přípravek pro injekce. V tomto případě je lék připraven přidáním jednoho nebo více příslušných ve vodě rozpustných excipientů, jako je manit, sacharóza, laktóza, maltóza, glukóza, fruktóza atd. do vody, aby se rozpustily a rozdělily do lahviček nebo ampulí, po čemž následuje lyofilizace a hermetické balení konečného přípravku. Jako přípravek pro perorální podávání může být připraven enterosolventní prostředek kromě obvyklé tablety, tobolky, granulátu, jemného granulátu a prášku.

Při výrobě enterosolventního přípravku, mohou být připraveny tableta, granulát nebo jemný granulát přidáním aditiv, např. lubrikantů, jako manit, sacharóza, laktóza, maltóza, škrob, silikagel, fosfát vápenatý, atd., pojiv, jako je karboxymetylcelulóza, metylcelulóza, želatina, arabská guma atd., a rozvolňovadel, jako karboxymetylcelulóza

·.· vápenatá, a pak následuje potažení jedním nebo více enterosolventními činidly, jako je acetoftalát celulózy, ftalát hydroxypropylmetylcelulózy, acetosukcinát hydroxypropylmetylcelulózy, polyvinylalkoholftalát, styren, kopolymer anhydridu kyseliny maleinové, metylakrylát a kopolymer metylakrylátu, a když je to nutné, přidání barviva, jako je oxid titaničitý. Přípravek ve formě tobolek může být vytvořen naplněním enterosolventního granulátu nebo jemného granulátu z něj připraveného do tobolek. Na druhé straně je možné, že tobolka připravená obvyklým způsobem je potažena uvedeným enterosolventním činidlem, aby se přeměnila na enterosolventní a vytvořila se enterosolventní tobolka při použití tobolky připravené použitím uvedeného enterosolventního činidla samotného nebo smíchaného s želatinou.

Co se týče čípku, může být připraven přidáním semisyntetického základního činidla., které je rozpuštěno po přípravě smícháním monoglyceridu mastné kyseliny a díglyceridu mastné kyseliny v různých poměrech s kakaovým máslem nebo tríglyceričem mastné kyseliny, následované mírným hnětením a odlitím do formy čípku.

Předkládaný vynález nyní bude popsán detailně s odkazy na následující referenční příklady, příklady a testovací příklad, které žádným způsobem neomezují rozsah vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Referenční příklad 1

Příprava Ν,N'-dibenzylmočoviny

Za chlazení vzduchem byla směs 5,84 g (9,72 mmol) močoviny a 25,0 g (23,3 mmol, 2,4 ekvivalenty) benzylaminu zahřívána ve 150 - 155 °C po dobu 5 hodin. Během zahřívání • * · ··· • · · • · · bylo pozorováno uvolňování plynného čpavku z bezbarvé tekuté reakční směsi. Při ochlazování se přibližně při teplotě místnosti směs změnila na pevnou látku. Reakční produkt byl purifikován rekrystalizací z etanol-benzenu (směs 1:1) za vzniku 14,0 g N,N'-dibenzylmočoviny ve formě bílých jemných jehliček (výtěžek 59,9 %).

NMR (DMSO-CDCI3) 54,33 (2H, d, J = 5,8 Hz), 6,02 (IH, bt) ,

7,19-7,32 (5H, m).

Referenční příklad 2

Příprava N,N'-bis(3-metylbutyl)močoviny

Pod zpětným chladičem byla směs 0,601 g (10,0 mmol) močoviny a 5,0 ml (přibližně 6 ekvivalentů) 3-metylbutylaminu zahřívána ve 150 °C po dobu 24 hodin, během této doby byly přidány další 2,5 ml 3-metylbutylaminu. Přebytek aminu byl odstraněn za sníženého tlaku a směs byla ponechána vychladnout na teplotu místnosti za vzniku bezbarvé pevné látky. Purifikace rekrystalizací z etyléteru poskytla 1,29 g N,N'-bis(3-metylbutyl)močoviny ve formě bílých plátků (výtěžek 64,5%).

NMR (CDCI3) 50,91 (6H, d, J = 6,9 Hz), 1,38 (2H, q, J = 7,2 Hz), 1,63 (IH, m), 3,15 (2H, t, J = 7,3 Hz).

Referenční příklad 3

Příprava 1,3-dibenzylbarbiturové kyseliny

V dusíkové atmosféře byla zahřívána směs 12,02 g (50,0 mmol) N,N'-dibenzylmočoviny a 5,20 g (50,0 mmol) kyseliny malonové v 50,0 ml (530 mmol, 10,6 ekvivalentů) acetanhydridu v 70 °C - 75 °C po dobu 14 hodin.

Pak byly za sníženého tlaku odstraněny těkavé látky zbytek byl nanesen mezi vrstvy 250 ml 2M hydroxidu sodného a 200 ml éteru. Alkalická vodná vrstva byla oddělena a po promytí éterem byla neutralizována koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou při chlazení v ledové vodní lázni (pH 2 až 3). Neutralizovaný vodný roztok byl extrahován chloroformem, promyt vodou a sušen přes sulfát sodný. Odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku dalo vznik 14,7 g 1,3čibenzylbarbiturové kyseliny ve formě světle žlutého krystalického prášku (výtěžek 95,6 %).

NMR (CDCls) δ3,60 (1H, s), 5,00 (2H, s), 7,22 - 7,45 (5H, m) .

Referenční příklad 4

Příprava 1,3-bis(3-metylbutyl)barbiturové kyseliny

V dusíkové atmosféře byla zahřívána směs 1,28 g (6,39 mmol) Ν,N’-bis (3-metylbuty'l)močoviny a 665 mg (50,0 mmol) kyseliny malonové v .6,4 ml (68 mmol, ekvivalentů) acetanhydridu v 70 °C 75 °C po dobu hodin. Za sníženého tlaku byly odstraněny těkavé látky zbytek byl nanesen mezi vrstvy 50 ml 2M hydroxidu sodného a 60 ml éteru. Alkalická vodná vrstva byla oddělena a po promytí éterem byl vodný roztok neutralizován koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (pH 2 až 3) . Neutralizovaný vodný roztok byl extrahován dichlormetanem, promyt vodou a sušen přes sulfát sodný. Odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku dalo vznik 1,22 g pevné látky oranžové barvy. Hrubý produkt byl purifikován na chromatografické koloně (silikagel, eluce éterem) za vzniku 954 mg 1,3-bis(3-metylbutyl)barbiturové kyseliny ve formě světle žlutých krystalů (výtěžek 95,6 %). NMR (CDCI3) δθ,95 (6H, d, J = 6,6 Hz), 1,48 (2H, q, J = 7,8

Hz), 1,62 (1H, m), 3,65 (1H, s), 3,87 (2H, t, J = 7,8 Hz).

Příklad 1

Syntéza 1,3-dibenzyl-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturové kyseliny (sloučenina č. 1)

V dusíkové atmosféře byl k roztoku 265 mg (0,859 mmol)

1,3-dibenzylbarbiturové kyseliny ve 2 ml suchého dichlormetanu přidán 1,0 ml pyridinu (12 mmol) a roztok byl míchán v 0 °C. K roztoku bylo pomalu během 20 minut přidáno 104 mg (0,858 mmol, 1 ekvivalent) isovalerylchloridu v 1,0 ml dichlormetanu, potom byl roztok míchán 3 hodiny při teplotě místnosti. Bylo přidáno 50 ml dichlormetanu a organická vrstva byla promyta 2M kyselinou chlorovodíkovou a saturovaným solným roztokem a usušena přes sulfát sodný. 351 mg hrubého produktu bylo purifikováno po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku na chromatografické koloně (silikagel, eluce dichlormetanem). Bylo získáno 299 mg 1,3dibenzyl-5-(3-metyl-l-oxobutyl)barbiturové kyseliny nejdříve ve formě bezbarvého viskózního oleje, který se během dvou dnů změnil na bílé plátky (výtěžek 88,7 %).

NMR (CDCls) 51,01 (6H, d, J = 6,6 Hz), 2,2 (1H, m) , 3,04 (2H, d, J = 6,8 Hz), 5,10 (2H, s), 5,11 (2H, s), 7,23 - 7,47 (10H, m).

Příklad 2

Syntéza 1,3-dibenzyl-5-(fenylacetyl)barbiturové kyseliny (sloučenina č. 2)

V dusíkové atmosféře byl k roztoku 192 mg (0, 623 mmol)

1,3-dibenzylbarbiturové kyseliny ve 2 ml suchého dichlormetanu přidán 1,0 ml pyridinu (12 mmol) a roztok byl • · · · · · · • · » ».· · » · · · • · · « · · «· ·· ·»· ··· míchán v O °C. K roztoku bylo pomalu během 20 minut přidáno 96 mg (0,623 mmol, 1 ekvivalent) fenylacetylchloridu v 1,0 ml dichlormetanu, potom byl roztok míchán 3 hodiny při teplotě místnosti. Bylo přidáno 40 ml dichlormetanu a organická vrstva byla promyta 2M kyselinou chlorovodíkovou a saturovaným solným roztokem a usušena přes sulfát sodný. 273 mg hrubého produktu bylo purifikováno po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku na chromatografické koloně (silikagel, eluce dichlormetanem). Bylo získáno 236 mg 1,3dibenzyl-5-(fenylacetyl)barbiturové kyseliny nejdříve ve formě bezbarvého viskózního oleje, který se postupně změnil na bílé plátky (výtěžek 88,7 %).

NMR (CDC1₃) 54,51 (2H, s), 5,09 (2H, s), 5,12 (2H, s), 7,25 7,60 (15H, m).

Příklad 3

Syntéza 1,3-dibenzyl-5-(2-thienylacetyl)barbiturové kyseliny (sloučenina č. 3)

V dusíkové atmosféře byl k roztoku 154 mg (0,500 mmol)

1,3-dibenzylbarbiturové kyseliny ve 2 ml suchého dichlormetanu přidán 1,0 ml pyridinu (12 mmol) a roztok byl míchán v 0 °C. K roztoku bylo pomalu během 20 minut přidáno 80 mg (0,50 mmol, 1 ekvivalent) 2-thienylacetylchloridu v 1,0 ml dichlormetanu, potom byl roztok míchán 3 hodiny při teplotě místnosti. Bylo přidáno 50 ml éteru a organická vrstva byla promyta 2M kyselinou chlorovodíkovou a saturovaným solným roztokem a usušena přes sulfát sodný. 216 mg hrubého produktu bylo purifikováno po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku na chromatografické koloně (silikagel, eluce dichlormetanem). Bylo získáno 153 mg 1,3« · ···· * · ·· · · • · « ·· ·· · ♦ · · • · « φ * · · · · » » 4 · · ·«···· • · · · · · · · · · • » · 9 · · « » · · ·» ·· dibenzyl-5-(2-thienylacetyl)barbiturové kyseliny ve formě žlutého viskózního oleje (výtěžek 56,9 %) .

NMR (CDC1₃) 54,68 (2H, s), 5,09 (2H, s), 5,13 (2H, s) , 6,94 (1H, dd, J = 3,5, 5,3 Hz), 7,03 (1H, dd, J = 1,1, 3,5 Hz),

7,20 (1H, dd, J = 1,1, 5,3 Hz), 7,23 - 7,50 (10H, m) .

Příklad 4

Syntéza 1,3-bis(3-metylbutyl)-5-(3-metyl-l-oxobutyl) barbiturové kyseliny (sloučenina č. 4)

V dusíkové atmosféře byl k roztoku 268 mg (1,00 mmol)

1,3-bis(3-metylbutyl)barbiturové kyseliny ve 3 ml suchého dichlormetanu přidán 0,81 ml pyridinu (0,79 g, 10 mmol, 10 ekvivalentů) a roztok byl míchán v 0 °C. K roztoku bylo pomalu během 20 minut přidáno 121 mg (1,00 mmol, 1 ekvivalent) isovalerylchloridu v 1,5 ml dichlormetanu, potom byl roztok míchán 4 hodiny při teplotě místnosti. Bylo přidáno 40 ml dichlormetanu a organická vrstva byla promyta 2M kyselinou chlorovodíkovou a saturovaným solným roztokem a usušena přes sulfát sodný. 383 mg hrubého produktu bylo purifikováno po odstranění rozpouštědla za sníženého tlaku na chromatografické koloně (silikagel, eluce dichlormetanem). Bylo získáno 278 mg 1,3-bis(3-metylbutyl)-5-(3-metyl-loxobutyl ) barbiturové kyseliny ve formě bílých plátků (výtěžek 79,0%).

NMR (CDCI3) 50,97 (6H, d, J = 6,6 Hz), 1,02 (12H, d, J = 6,6 Hz), 1,52 (2H, m), 1,64 (2H, m) , 2,20 (1H, m), 3,04 (2H, d,

J = 7,1 Hz), 3,91 (4H, m).

• · · ·

Testovací příklad 1

1) Příprava buněk

Myši ICR staré 11 až 12 dnů (Charles River) byly podrobeny eutanázii prostřednictvím éterové anestézie a dezinfikovány okamžitým ponořením do 70% etanolu. Pak byly myším vyňaty femur a holenní kost, nasekány v kultivačním médiu -MEM (Floskupin Labs. Corp.) obsahujícím 5% FBS (Irving Scientific Corp.), 100 U/ml penicilinu a 100 mg/ml streptomycinu. Byl sesbírán supernatant získaný pipetováním, promyt roztokem kultivačního média, suspendován v roztoku obsahujícím 5% FBS a kultivační médium -MEM a byly získány osteocyty zahrnující osteoklasty. Supernatant z roztoku s resuspendovanými osteocyty byl odebrán po 3 minutách stání v klidu a přefiltrován (Cell Strainer, 70 m, Falcon Corp.). Koncentrace buněk ve filtrátu byla upravena na 1 x 10⁷buněk/ml pro použití v testu tvorby otvorů.

2) Zkouška testem tvorby otvorů

Kus slonové kosti byl nařezán na plátky silné 150 pm za použití přesné řezačky s pomalou rychlostí (Buehler Corp.) a proděravěn tak, aby se vytvořily válcovité díry o průměru 6 mm. Kus slonové kosti byl ponořen do 70% etanolu, ošetřen sonikací dvakrát 5 minut a byl třikrát promyt sterilizovaným PBS a dvakrát kultivačním médiem. Pak byl kus slonové kosti položen na jamky 96-jamkové kultivační destičky (Falcon Corp.), do každé jamky bylo přidáno 100 μΐ kultivačního média, které obsahovalo chemickou sloučeninu podle předkládaného vynálezu nastavenou na koncentraci 2 x 10‘⁵M a do každé jamky bylo přidáno 100 μΐ kultivačního média, které obsahovalo 1 x 10⁷ osteocytů/ml předem připravených ·· ·· • « ♦ « « · · · • » 9 9 (konečná koncentrace sloučeniny byla 1 x 10^_5M), a nakonec se uskutečnila kultivace v inkubátoru při teplotě 37 °C a 10% C02 po dobu 3 dnů. Pak byly buňky ze slonové kosti odstraněny roztokem 2M hydroxidu sodného, kost byla omyta vodou a metanolem a resorpční dutiny byly obarveny briliantovou modří Coomasie a jejich počet byl odečítán pod mikroskopem. Stupeň inhibice resorpce kosti byl vypočítáván na základě toho, že v případě, kdy do roztoku nebyla přidána sloučenina podle vynálezu v přítomnosti rPTH (1 x 10’⁸M) se rovnal 0 %, a v případě, že se nevyskytla žádná resorpční dutina, se rovnal stupeň inhibice resorpce kosti 100 %. Ve stejném pokuse bylo dosaženo dobrého výsledku s variacemi počtu resorpčních dutin mezi experimentálními skupinami díky rozdílu mezi podílem různých buněk v roztoku, ve kterém byly suspendovány osteocyty, a také mezi skupinami použitých zvířat.

Tabulka 1 ukazuje výsledky. Jak výsledky jasně dokazují, sloučenina podle předkládaného vynálezu vykazuje zřetelný stupeň inhibice resorpce kosti a je použitelná jako látka, která má inhibiční působení na resorpci kosti.

Tabulka 1

Přidaná Koncentrace Počet Počet resorpčních Stupeň sloučenina sloučeniny resorpčních dutin bez přidání inhibice (M) dutin sloučeniny (%) (průměr ± SD) (průměr ± SD)

1	1	X	10’⁵	1,0	+	0,5	224,0	+	20,0	99,2
2	1	X	10⁵	2,2	±	0, 6	224,0	+	20,0	99, 0
3	1	X	10~⁵	7,0	+	1,7	179,6	+	34,4	96, 7
4	1	X	10'⁵	21,1	+	4,3	224,0	±	20,0	90, 6

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY ·· ·· « · · · • · · * • · · · • · · · • · · · z¢001. Derivát kyseliny barbiturové představovaný následujícím obecným vzorcem (I), jeho sůl nebo jeho solvát:

O O kde každý z R nebo R¹ nezávisle představují vodíkový atom, substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu nebo alkenylovou skupinu s jedním až 15 atomy uhlíku, substituovanou nebo nesubstituovanou arylmetylovou skupinu a nebo substituovanou nebo nesubstituovanou arylovou skupinu, a R² představuje substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu nebo alkenylovou skupinu s 1 až 15 atomy uhlíku, substituovanou nebo nesubstituovanou arylmetylovou skupinu a nebo substituovanou nebo nesubstituovanou arylovou skupinu.
2. Sloučenina, její sůl nebo její solvát podle nároku 1, kde každý z R a R¹ je benzylová skupina.
3. Sloučenina, její sůl nebo její solvát podle nároku 1, kde každý z R a R¹ je 3-metylbutylová skupina.
4. Sloučenina, její sůl nebo její solvát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde R² je 2-metylpropylová skupina.
5. Sloučenina, její sůl nebo její solvát podle nároku 1 nebo 2, kde R² je benzylová skupina.

·· ·· * · « « • * · ’ • · · · • · · <

·» ··
6. Sloučenina, její sůl nebo její solvát podle nároku 1 nebo 2, kde R² je 2-thienylmetylová skupina.
7. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že obsahuje jeden nebo více derivátů kyseliny barbiturové, jeho sůl nebo jeho solvát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, a farmaceuticky přijatelný nosič.
8. Farmaceutický vyznačuj ící pro prevenci nebo a chrupavky.

přípravek podle nároku 7 ;

se tím, že se jedná o přípravek léčení nemoci postihující kosti
9. Použití jednoho nebo více derivátů kyseliny barbiturové, jeho soli nebo jeho solvátu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6 pro výrobu farmaceutického přípravku pro prevenci nebo léčení nemoci postihující kosti a chrupavky.