CZ194794A3 - Phosphonooxymethyl ethers of taxan derivatives - Google Patents

Phosphonooxymethyl ethers of taxan derivatives Download PDF

Info

Publication number
CZ194794A3
CZ194794A3 CZ941947A CZ194794A CZ194794A3 CZ 194794 A3 CZ194794 A3 CZ 194794A3 CZ 941947 A CZ941947 A CZ 941947A CZ 194794 A CZ194794 A CZ 194794A CZ 194794 A3 CZ194794 A3 CZ 194794A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
compound
hydroxy
mmol
hydrogen
formula
Prior art date
Application number
CZ941947A
Other languages
English (en)
Inventor
Jerzy Golik
John F Kadow
Murray A Kaplan
Wen-Sen Li
Robert K Perrone
John K Thottathil
Dolatrai Vyas
Mark D Wittman
Henry Wong
John J Wright
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of CZ194794A3 publication Critical patent/CZ194794A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D305/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D305/14—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6551—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a four-membered ring
    • C07F9/65512—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a four-membered ring condensed with carbocyclic rings or carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65586—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system at least one of the hetero rings does not contain nitrogen as ring hetero atom
    • H—ELECTRICITY
    • H01—ELECTRIC ELEMENTS
    • H01L—SEMICONDUCTOR DEVICES NOT COVERED BY CLASS H10
    • H01L21/00—Processes or apparatus adapted for the manufacture or treatment of semiconductor or solid state devices or of parts thereof
    • H01L21/02—Manufacture or treatment of semiconductor devices or of parts thereof
    • H01L21/04—Manufacture or treatment of semiconductor devices or of parts thereof the devices having potential barriers, e.g. a PN junction, depletion layer or carrier concentration layer
    • H01L21/48—Manufacture or treatment of parts, e.g. containers, prior to assembly of the devices, using processes not provided for in a single one of the subgroups H01L21/06 - H01L21/326
    • H01L21/4814—Conductive parts
    • H01L21/4821—Flat leads, e.g. lead frames with or without insulating supports
    • H01L21/4839—Assembly of a flat lead with an insulating support, e.g. for TAB
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microelectronics & Electronic Packaging (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Computer Hardware Design (AREA)
  • Power Engineering (AREA)
  • Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Oblast techniky - - .__
Předložený vynález se týká protinádorové účinných sloučenin. Konkrétněji se vynález týká nových taxanovýcft derivátů, farmaceutických prostředků, které je obsahují a jejich použití jako protinádořových činidel.
Dosavadní stav techniky
TaxolR (paclitaxel) je přírodní produkt extrahovaný z kůry stromů tisu pacifického Taxus brevifolia. 3ylo zjištěno, že má vynikající protinádorov^Ou aktivitu v in vivo zvířecích modelech) a nedávné studie vyhodnotily jeho unikátní způsob působení, který zahrnuje abnormální polymerací tubulinuf a rozrušení mitosis;·. V posledních letech byl používám pro léčbu rakoviny vaječníků a byly provedeny studie? s rakovinami prsui, střev a plic se slibnými výsledky. r^yto výsledky klinických studií paclitaxelu? jsou shrnuty v práci Rowinsky-ho a Donehowera, The Clinical Pharmacology and Use of1 Antimicrotubule in Cancer Chemotherapeutics”, Pharmac.Ther., 52:35-θ4, 1991.
poslední době byla zjištěna u semis.yntetického anap logu paclitaxelu nazvaného Taxotere , ďobrá protinádorové aktivita na zvířecích modelech. Taxotere také v současnosti. prochází klinickými pokusy v Evropě a ve Spojených státech). Struktury paclitaxelu a Taxotere^ jsou uvedeny dále.. Číslování se provádí podle konvenčního způsobu, číslování. . ” - .
Taxol^: R=Ph, R*= ac^tyl
R *
Taxotere : R = terc.butoxy, R = vodík
Jednou z nevýhod’ paclitaxelu je, že je velmi omezován svojí rozpustností ve voďě a je třeba jej formulovat v nevodných farmaceutických vehikulecfc. Jedním z obvykle používaných nosičů je ^remophore EL, který může sám o sobě vyvolávat nežádoucí vedlejší účinky u lidí. Proto mnoho výzkumných^týmů připravilo ve vodě rozpustné deriváty paclitaxelu·, které jsou; popsány v následujících odkazech:
a) ^augwitz a kol., US patent č. 4942184,
b) Kongston a kol., US patent č. 5059699,
c) Stella a kol., US patent č- 4960790,
d) evropská patentová přihláška 0558959 A1, publikovaná
8. září 1993,
e) Vyas a kol., Sioorganic? and Medicinal Chemistry Letters, 1993, 3:1357-1360 a &
f) ^icolaou a kol., Nátuře, 1993, 364:464-466.
-3-.......
Λ .
Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou fosfonooxymethylesthery taxanových derivátů a jejich farmaceuticky přijatelné soli. Rozpustnost solí ve vodě usnadňuje přípravu farmaceutických přípravků.
Podstata vynálezu
Předložený vynález-: se týká taxanových derivátů___________________________ obecného vzorce A
OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2
(A) kde T~j'e taxáhová |faxdň-ov4| skupina/ nesoucí na C1 3 uhlíku substituovanou 3-amino-2-hydroxypropanoyloxyskupinu; n je 1, 2 nebo 3; m je 0 nebo celé číslo oď 1 do & včetně; nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí. ‘
Jiný aspekt předloženého vynálezu poskytuje taxanové deriváty, mající vzorec B (B)
Τ’- CCH2(OCH2)mSCH3
J n kde Τ'* je T, ve kterém byly nereagující hydroxyskupiny blokovány, man jsou. definovány pod vzorcem A.
Ještě další aspekt předloženého vynálezu poskytuje meziprodukty, majíc.í vzorec C:
(C)
-4kde T'z, man jsou definovány pod vzorcem A a R* je fosfono-chránící skupina.
Další aspekt předloženého vynálezu poskytuje sloučeniny vzorce D
13-OH-txn— OCH2(OCH2)mSCH3
Jn (D) kde man mají výše definovaný význam a txn; je taxanová’ skupina, nebo jejich Cl 3 kovové alkoxidy.
Jiný aspekt předloženého vynálezu poskytuje způsob inhibice nádorm v savzčím hostiteli, který zahrnuje podání protinádorově účinného množství sloučeniny vzorce A uvedenému savčímu hostiteli.
Další aspekt, předloženého vynálezu poskytuje způsob: inhibice nádoru v savčím hostiteli, který zahrnuje podání protinádorově účinného množství sloučeniny vzorce B* z* uvedenému savčímu hostiteli:
.í
Η u * kde R je hydroxy^, -OC(O)RX nebo -OC(0)ORX, RJb je vodík, hydroxy, -OC(O)ORX, C^alkyloxy nebo -OC(O)RX;
jeden z R^b nebo R^b je vodík a^druhý je hydroxy nebo
C, gnlkanoyloxy, nebo- R^b a R?b společně tvoří oxoskupinu,
R a R^ jsou nezávisle Cy^galk.yl, C2_6alkenyl, C2i6alkinyl‘, nebo -Z-R^, Z je přímá vazba, C^^alkyl „nebo C^^alkenyl:, R j e? aryl, substituovaný aryl, C^_gcykloalkyl nebo heteroaryl, p je 0 nebo 1 , Rx je C^alkyl, popřípadě substituovaný jedním až šesti stejnými nebo- rozdílnými halogenovými atomy, C^cykloalkyl, C^alkenyl nebo hydroxy, nebo Rx je radikál obecného vzorce i
kde D je vazba nebo C^&alkyl a Ra, Rb a Rc jsou; nezávisle vodík:, amino, _galkylamina, di-C^ _galkylamino, halogen, C^^alkyl nebo. C^galkoxy.
Další aspekt předloženého vynálezu poskytuje farma·» ceutický přípravek, který obsahuje protinádorově účinné množství' sloučeniny vzorce 3* nebo A a farmaceuticky přijatelný nosič.
V přihlášce, pokuď není přímo uvedena^ jinak nebo· to z kontextu nevyplývá, jsou použity následující definice. Alkyl”' znamená přímý nebo: rozvětvený nasycený uhlíkový řetězec, mající jeden až šeši atomů uhlíku, jehož pžíkladyzahrnují methyl, ethyl, n-prop.yl, isopropyl, n-butyl, sek. butyl, isobutyl, terc.butyl, n-pentyl, sek.pentyl, isopentyl a n- hexyl. Alkenyl” znamená přímý nebo rozvětvený uhlíkový řetězec, mající alespoň jednu dvojnou vazbu uhlík-uhlík a mající·od dvou do šesti atomů uhlíků, příklady zahrnují ethenyl, propenyl, isopropenyl, butenyl, isobutenyl, pentenyl a hexenyl. Alkinyl znamená přímý nebo rozvětvený uhlíkatý· řetězec, mající alespoň jednu trojnou vazbu uhlík-uhlík a od dvou do šesti atomů uhlíku, příklady zahrnují ethinyl, propinyl, butinyl a hexinyl.
Aryl znamená' aromatický uhlovodík, mající od šesti do deseti atomů uhlíku, příklady zahrnují fenyl a naftyl. “Substituovaný aryl“ znamená' aryl substituovaný alespoň jednou skupinou vybranou: 22 C^^alkanoyloxy, hydroxy, halogenu, Cj-galkylu, trifluormethylui, C^galkoxy, arylu , C2_galkenylui, nitro, amino a amido- “Halogen“ znamená chlor, fluor, brom a jod...
“Fosfono-“ znamená skupinu; -P(0) (OH^ a fosfonooxy,»methoxy“ nebo fosfonooxymethylether“.znamená generíoky skupinu -OCH^ (OCHg^OPÍO) (0H)2· ’*?Methylthia>) thiokanbon.yl znamená skupinu -CÍSjSCHj. Methylthiomethyl“ (také zkrácen jako: MTM) genericky označuje skupinu -C^SCH^.
“Taxanová skupina' (zkracována také jako txn) označuje: skupiny, obsahující dvacet uhlíku; taxanového jádra představovaného; strukturním vzorcem· uvedeným dále s absolutní konfigurací.
O /'LJ
Cl·
CH3
H
-7-.
Λ :
Výše použitý systém číslování je systém používaný v konvenční.' taxanové nomenklatuře: a je použit v celém ř j popisu. Například označení C1 se týká uhlíkového atomu označeného: jako 1 , C5-C2O oxetan označuje oxetanový krufri tvořený' uhlíkovými atomy označenými jako 4,5 a 20 s atomem kyslíku a C9 oxy označuje atom kyslíku- připojený * ' k uhlíkovému atomu označenému jako 9”, uvedený' kyslíkový atom může být oxoskupina, j - nebo /^-hydroxy nebo - nebo /^-acyloxy.
Substituovaný 3-amino-2-hydroxypropanoyloxy ozna- :
označuje zbytek představovaný vzorcem/
(X je nevodíková skupina a X* je vodík nebo nevodíková skupina). Stereochemie tohoto zbytku je stejná jako u paclitaxelového postranního řetězce. Aato skupina je současně označována v popise jako C13 vedlejší řetězec.
Taxanovýř derivát: (zkráceno' jŤako T) označuje^ sloučeninu, mající Cl 3 vedlejší řetězec.
Heteroaryl^ označuje pěti- nebo _§esti-členný aromatický kruh, obsahující alespoň jeden a až: čtyři neuhlíkové atomy vybrané z kyslíku, síry a dusíku. Příklady heteroarylu zahrnují thienyl, fur.yl, pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, oxadiazol.yl, tetrazolyl, thiatriaW -ΆΛ i j/' '1
-8zolyl, oxatriazolyl, p.yridyl, pyrimidyl, p.yrazinyl, pyrii dazinyl, triazin.yl, tetrazinyl a podobné kruhy.
Fosfono-chránící skupiny” znamená skupiny, které mohou být použity ke blokování nebo chránění' fosfono-funkční * skupiny, výhodně jsou takovými chránícími skupinami ty, které mohou být odstraněny metodami, které nebudou ovlivnovať. zbytek molekuly. Vhodné fosfonooxy-chránící skupiny jsou dobře známé odborníkům v oboru a zahrnují například benzylovou a allylovou skupinu. , í
Hydroxy-chránící skupiny zahrnují, ale nejsou tak omezeny, ethery jako je methyl, terc.butyl, benzyl, p-methoxybenzyl, p-nitrobenzyl, allyl, tri tyl, methox.ymethyl, methoxyethoxymethyl, ethoxyethyl, tetrahydropyranyl, tetrah.ydrothiopyranyl a trialkylsilylethery jako je tri methylsilylether, triethylsilylether a terč.butyldimethylsilylether; estery jako je benzoyl, acetyl, fenylacetyl, formy!, mono-, di- a trihalogenacetyl jako je chloracetyl, dichloracetyl, trichloracetyl, trifluoracetyl a karbonáty jako je methyl-, ethyl, 2,2,2-trichlorethyl, allyl, benzyl a p-nitrobenzyl.
Lalší příklady hydroxy a fosfono-chránících skupin mohou být nalezeny ve standardních pracech jako je Greene a Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2.vyd.,
1991, John Wiley and Sons, and McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, 1975, Plenům Press. Metody zavádění a odstraňování chránících skupin je v těchto knihách možno rovněž nalézt.
Farmaceuticky přijatelná sůl” označuje kovovou nebo aminovou sůl kyselé fosfonoskupiny, ve které se kationt významně nepodílí na toxicitě nebo biologické' aktivitě sloučeniny. Soli vhodných kovů zahrnují soli lithné, sodné,
-9draselné, vápenaté, barnaté, hořečnaté, zinečnaté a hlinité. Výhodné soli kovů jsou; soli sodné a draselné. Vhodné aminové soli jsou například amoniové, tromethaminová (TRIS), triethylaminová, prokainová, benzathinová, dibenzylaminová, chlorprokainová, cholinová, diethanolaminová, triethanolaminóvá, eth.ylendiaminová, glukaminová, N-methylglukaminová, lysinová, argininová, ethanolaminová, z mnoha možných. Výhodnými aminovými solemi jsou sole lysinové, argininové,, triethanolaminové a Ň-methylglukaminové soli. Nejpreferovanějšími solemi jsou N-methylglukaminové nebo triethanolaminové soli,.
* I rý
Zde použitý výraz -0CH2(OCH2)^OP(O)(OH)2 je zamýšlen pro označení jak volné kyseliny tak jejich farmaceuticky přijatéFných soíT, po4~z 7kontextu není”zřejmé7~žý“” se jedná o volnou kyselinu.
Jeden aspekt předloženého vynálezu poskytuje taxanové deriváty vzorce A
OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2 (A) kde T je taxanová skupina, nesoucí na Cl 3 atomu substituovanou 3-amino-2-hydroxypropanoyloxyskupinu, n je 1,2 nebo 3, tn je 0 nebo celé číslo od 1 do 6 včetně, nebo· jejich farmaceuticky přijatelnou sůl.
Další aspekt předloženého vynálezu poskytuje taxanové ňerlváty /majícf “vzore3“““ “““““—— — -
-10Τ'
OCH2(OCH2)mSCH3 které jsouc vhodné při přípravě taxanových derivátů vzor>ce A.
V jednom provedení obsahuje taxanová skupina alesv pon následující funkce: C1-hydroxy, C2-benzoyloxy, C4-acetyloxy, C5-C20oxetan, C9-oxy a Cl 1-Cl2-dvojnou vazbu.
Ve výhodném provedení’ je taxanová skupina odvozena od zbytku, majícího vzorec
kde R^e je vodík a R^e je vodík, hydroxy, -OC(O)RX< nebo -OC(O)ORX, R3e je vodík, hydroxy, -OC(O)RX, -OC(O)ORX nebo C^galkyloxy; jederr Z R^e nebo R^e je vodík a druhý je .·. hydroxy nebo -OC(O)RX, nebo R^e a R^e společně tvoří oxoskupinu Rx je definován dále.
V dalším provedení je Cl 3 postranní řetězec odvozen od zbytku, majícího vzorec
-11R4(O)dCONH o
Φ'
FT
O' ,α
Or1® kde R1e je vodík nebo -CÍOJR*, -C(O)ORX, R^ a R^ jsou nezávisle na sobě C^galkyl, C2_galkenyl, C2_^alkinyl nebo -Z-R^, Z je přímá vazba, _galkyl nebo C^^galkenyl.r R^ -j'e-aryl,- substituovaný-aTyl, -Gj_gcykloalk.yi^nebo--------heteroaryl, a Rx' je C^^alkyl popřípadě substituovaný jedním až šesti, stejnými nebo· rozdílnými atomy halogenu, Cj^gcykloalkyl, C2_^alkenyl nebo hydroxy, nebo Rx' je radikál vzorce.
kde D je vazba nebo C^^alkyl a Ra, Rb a R° jsou nezávisle na sobě vodík, amino, ^aikylamino, di-C1_galkylamino, halogen, C^galkyl nebo C^galkoxy, p je 0 nebo 1.
Ve výhodném provedeni je R^ C^_<alkyl a p je 1, nebo je R^ -Z-R& a p je 0. Výhodněji je R^(O)p, terc.butoxy, fenyl, isopropyloxy, n-propyloxy nebo n-butoxy^ . , . ... . .. ... .......
V dalším provedení, které je preferováno, je R C^-galkenyl. nebo -Z-R^ a Z a R^ mají dříve definovaný význam. Výhodněji je R^ fenyl, 2-furyl, 2-thienyl, isobutenyl, 2-propenyl, nebo C^_^c.ykloalkyl.
-12V dalším provedení mohou být sloučeniny vzorce Λ specifičtěji představovány vzorcem I ,*
kde R1 je hydroxy, -OCH2nebe -OC(O)ORX\ R2 je vodík a R2 je vodík, hydroxy,
-oce2(och2)mop(o)Coh)2,
-OC(O)R* nebo -OC(O)ORX, RGP(O) (OR).
vodík, hydroxy, _galkyloxy, -OC(O)RX, -OCR2(OCH^) nebo; -OCCOJOR*', jeden z R^' nebo R7 je vodík a druhý je hydroxy, Cj_galkanoyloxy nebo. -0CH2(CH2)m0P(0) (OR)2 nebo: R& a R7 spolu tvoří oxoskupinu·, s tou podmínkou, že alespoň jeden z R1 , R‘ 3' R6j nebo R7 je -OCff2(OCH2)mOP(O)(OH)2,
5: X' £ £
R , Fr , R , m; a p mají dříve definovaný význam nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
—.v
Ve sloučeninách vzorce I, příklady 11 zahrnují methyl, hydroxymethyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, chlormethyl, 2,2,2-trichlorethyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklOhexyl, ethenyl, 2-propenyl, fenyl, benzyl, bromfenyl, 4-aminofenyl, 4-methylaminofenyl, 44 5 methylfenyl, 4-methoxyfenyl, a podobně- Příklady R a R zahrnují 2-propenyl, isobutenyl, 3-furanyl (3-furyl),
3- thienyl, fenyl, naftyl, 4-hydroxyfenyl, 4-methoxyfenyl,
4- fluorfenyl, 4-trifluormethylfenyl, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl- isobutyl, terc.butyl, ethenyl, 2-propenyl, benzyl, fenethyl, fenylethenyl, 3,4-dimethoxyfenyl,
2-furanyl(2-furyl), 2-thienyl, 2-(2-furanyl)ethenyl, 2methylpropyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklo-
-13* hexyl, c.yklohexylmethyl, cyklohexyleth.yl a podobně.
V jednom provedení předložený vynález poskytuje preferovanou skupinu sloučenin vzorce i, kde R^ je Cg^alkenyl nebo -Z-R& a Z a R& mají dříve definovaný význam·.
Preferovahěji je fenyl, 3-furyl, 3-thienyl, 2-prope- * nyl, isobutenyl, 2-furyl, 2-thienyl nebo C^_gcykloalkyl.
V dalším preferovaném provedení je R^ ve sloučeninách; obecného vzorce I C\|_^alkyi a v tomto případě je p 1 , nebo je R^ -Z-R^ a Z a R^ mají dříve/ definovaný význam, a v tomto případě je p =0. Výhodněji R^(0)p- je terč·. butoxy,fenyr,isopropyloxy,n-propyloxy,n(-butoxy7 ) t
V dalšími preferovaném provedení poskytuje předložený vynález sloučeniny^ obecného· vzorce I, kde R^ je1
-OCH^ÍOCH^Jjjj.OPíO) (OíT^. Ve výhodnějším provedení je R^ hydroxy, -OCíMOCHg) OP(O) (OHL·, -OC(O)ORV * * * * X nebe -OC(O)RX X z a R je výhodně C^_^alkyl. V jiném výhodnějším provedení A je R^ hydroxy nebo·'acetoxa.
V dalším výhodném provedeni poskytuje předložený v.ynález sloučeninu vzorce I, ve které R je
-OCH2(OCR2)m,OP(O)(OH)2, R1 je hydroxy, -OC(O)RX- nebe
-OC(O)ORX a.$ je vodík, hydroxy, acetoxy, -OCH2(OCH2)^OP(O)(OH>2 >
nebCD -OCÍOJOR* a Rx> má dříve definovaný význam. Ve výh oděnějším provedení je R^ hydroxy nebe -OC(O)ORX a Rx je východně G\|_^alkyl a R^; je hydroxy nebo acetoxy.
-14V dalším výhodném provedení poskytuje předložený vy·.« nález sloučeninu; vzorce I, kde R, je: -OCH,, (OCH2 j^OP/O) (OH)2>
R1 je hydroxy nebe -OC'(O)ORX', R2 je vodík a R 2 je vodík:, hydroxy nebo -OC(O)ORX· a Rx mé dříve definovaný význam·.. Ve výhodnějším provedení je· R1 hydroxy nebo -OC(O)ORX . a?Rx je výhodně C^^alkyl- V dalším výhodnějším provedení je R2 hydroxyV jiném: preferovaném provedení je nt 0, 1 nebo' 2,- je-li fosfbnooxymethoxyskupina přítomna na C7. taxanové skupiny.
'ÁΪ
Preferované; farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny vzorce A jsnu soli alkalických kovů, zahrnující soli lithné\ sodné a draselné'; a aminové soli, zahrnující soli triethylaminové, triethanolaminové, ethanolaminová, argininové, lysinové a N-methylglukaminové- Mezi preferovanější soli patří soli sodné, triethanolaminové a N-methylglukaminové.
Nejpreferovanější provedení taxanových derivátů vzorce? A zahrnují následující sloučeniny : (1 ) 7-O-fosfanooxymeth.ylpaclitaxel, (2) 2*-0—(ethyloxykarbonyl)-7-Q— fosfonooxymethylpaclitaxel, (3)2 *-O-f osfonooxymethylpaclitaxel, (4) 2*,7-bis-O-(fosfonooxymethyl)paclitaxel, (5) 3*N-debenzoyl-3 *-desfenyl-3 *-N-(terč.butyloxykarbonyl)-3 *(2-furyl)-2 *-O-ethyloxykarbonyl-7-O-fosfonooxymethylpacli* taxel, (6) 3*-N-debenzoyl-3z-desfenyl-3z-N-(terc.butyloxykarbonyl)-3z-(2-thienyl)-2*-0-ethyloxykarbonyl-7-0f osf onooxymethylpaclitaxelL, (7) 10-desacetyl-3*-N-desbenžoyl-3 *-N-(terč.butyloxykarbonyl)-10-0-(fosfonooxymethyl)paclitaxelj (8) 2z-O-fosfonooxymethoxymethylpaclitaxel, (9) 2*-0-n-propylkarbonyl-7-0-fosfonooxymethylpaclitaxel, (10) 2’’-O-methylkarbonyl-7-O-f osf onooxymethylpaclitaxel, (11) 2z-O-methoxykarbonyI-7-O-fosfonoOxymethylpaclitaxel, (12) 2*-O-fosfonooxymethoxymethyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel, a jejich odpovídající farmaceuticky přijatelné soli, zejména soli sodné, draselné, argininové, ly-
i
-15f, sinové, N-methylglukaminov-é, ethanolaminové , triethylaminové a třiethanolaminové.
Sloučeniny vzorce A mohou být připraveny z taxanových derivátů jako výchozích látek vzorce T-/OH/ kde T a n mají dříve definovaný význam. Identita T-/OH/ není n zvláště omezena, pokud je přítomna alespoň jedna reaktivní hydroxyskupina buž v .taxanová skupině nebo Cl 3 postran-_. .. ..... ý ním řetězci pro umožnění tvorby fosfonooxymethyletherového spojení. Reaktivní skupina může být přímo připojena k .. ·
C13 propanoyloxy-řetězc-i (např» 2 *hydrojcyskupina paclitaxelu) nebo? ke kostře taxanového jádra (např» 7-hydroxyskupina paclitaxelu?), nebo. může být přítomna na substituentu _ ___ Cl 3 postranního řetězce nebo na substituentu- taxanového_,_________ ;
jádra. .Reakční sekvence uvedená' ve schématu I může být použita pro přípravu sloučenin vzorce A
Schéma I
Τ'— [OHln --► Τ'—[OCH2(OCH2)mSCH3]n (Aa) (B)
Γ—[OCH2(OCH2)mOP(O)(ORy)2]n (C)
V V' (A)
Ve schématu I je T* taxanový derivát, ve kterém.’ byly nereagující hydroxyskupiny blokovány, je fosfono-chráníoí skupina a n a m. mají dříve definovaný význam» Vhodně chráněný T*, mající jednu nebo více reaktivních hydroxyskupin
(By
-164 se nejprve- převede na odpovídající' methylthiomethylether* vzorce B. Paclitaxel byl použit jako příklad' a T* může být samotný paclitaxel (pro provedení 2 ', 7-bismethylthIo>methylacej, 7-O-trÍethylsilylpaclitaxel, 7-O-benzyloxykarbonylpaclitaxel, nebo 2z-O-ethoxykarbonylpaclitaxel.
* Sloučenina vzorce B, kde m je 0, může být připravena zpracováním Τ'-/ΟΗ/Πι s dimethylsulfoxidem/acetanhydridem, 5 nebo s dimethylsulfidem a organickým peroxidem. Tyto reakce jsou plně diskutovány v následující sekci.
i1
MTM ether, mající jednu<vloženou methylenoxy-jednotku (tj. sloučeniny vzorce B, kde m=l) mohou být připraveny několika možnými způsoby. V jednom: sloučenina vzorce 3, kde m· = 0 reaguje s N-joďsukcinimidem (NIS) a methylthiomethanolem pro prodloužení řetězce o jednu methylenoxyjednotku.
Τ'—[OCHjSCHJh + n CH3SCHj—OH NIS - z Τ'—[OC^OCHjSCHg],,
Analogická reakce alkoholu s methylthiomethyloxysku>pinou za přítomnosti NIS byla popsána Veenemanem a kol., v Tetrahedrom, 1991, v47, str, 1547-1562, a relevantní části této práce jsou zde zahrnuty jako reference. Výhodně se jako katalyzátor použije triflát stříbrný. Sloučenina methylthiomethanolu: a její příprava je uvedena v Syn.
Comm..y 1986, 16 (11): 1607-1610.
V alternativní metodě, T-alkoxiď (Ad) připravený zpracováním sloučeniny vzorce Aa s bází jako je n-butyllithium, lithiumdiisopropylamid nebo lithiumhexamethyldisilaziď, reaguj© s chlormethylmethylthiomethyletherem za vzniku sloučeniny vzorce B, kde m=1.
V
-17Τ'—-[O]n + η CH3SCH2— OCHjCI -— Γ—{OC^OC^SCH^ (Ad) (Αθ) >tJ ,
Sloučenina Ae se připraví reakcí methylthiomethoxidu (získaného: z methylthiomethanolu zpracováním s bází jako je n-butyllithiunri, lithiumdiisopropylamiď nebo lithiumhexamethyldisilylazičř) s chlorjodmethanem. Sloučenina Ae může být také připravena zpracováním 1,1*-dichlordimethyl- etheru (ΟΐΟΗ^θθ^θ^se s^ec^^ome^r^c‘kým mn0^ství® nebo: menším (např- asi 0,8 ekvivalentu) jodidu sodného· a pak s thiomethoxidem sodným.. 1 ,1 *-Dichlordimethylether je' uveden v Ind.J.Chem., 1989, 29S, str. 4*54-456.
Ý další metodě se sloučenina vzorce Aa nechá reagovaťΎ~(MTM/etherem,~CHJSCOCH^SCá ' NISzaTvzniku? slT5u-~~ čeniny vzorce B, kde m=1.
T1—[OH]n + n CH3SCH2OCH2SCH3 —-► Τ'—[OCH2OCH2SCH3]n
Biss(MTM)ether se připraví reakcí 1,1*-dichlordimethylethervu s jodidem sodným a pak s thimethoxidem sodným·.
Postup popsaný výše za použití methylthiomethanolu a NIS může být aplikován na jakékoliv činidlo, majíc.-í MTM skupinu pro· prodloužení řetězce o jednu methylenoxy-jednotku. -v například může sloučenina vzorce 3, kde m=1, reagovat s_ methylthiomethanolem a NIS za poskytnutí sloučeniny vzorce B, kde m= 2. Postup může být opakována za poskytnutí sloučeniny B, kde m je 3,4,5 nebo 6.
Ve druhém stupni ve schématu; I se methylthiomethylether převede na odpovídající' chráněný fosfonooxymethylether. Toto se próveďe zpracováním MTM etheru a NIS a chráněným fosfátem; HOP(O) (OR^. Ve třetíqi stupni se fosfono-chránící skupina a hydroxy-chránící skupina(y) odstraní za poskytnutí sloučeniny vzorce A. wapříklaď je
O®
-18vhodnou fosfono-chránící skupinou benzyl, který může být odstraněni katalytickou hydrogenolýzou; hydroxy-chránící skupiny jako je trialkylsilyl mohou být odstraněny fluoridovým iontem, trichlorethoxykarbonyl může být odstraněn zinkem.. Odstranění chránících skupin jsou uváděna v učebnicích jako je Green a Wuts;, -Protective Groups in Organic;· Synthesis;, John Wiley and Sons, 1991 a McOmie, Protec ti ve3 in Organic? Chemistry, Plenům Press, 1973· ^ba stupně jsou; diskutovány detailně v dále' uvedené části popiásu.
i
Variace reakční sekvence uvedené ve schématu I je poskytnuta ve schématu II.
Schéma II
Τ’—[OH]n + n CH3SCH2(OCH2)mOP(O)(ORy)2 (M (Ca) ’ř (C)
Ve schématu II reaguje sloučenina vzorce da se sloučeninou vzorce Ca a NIS za vzniku sloučeniny vzorce C, která pok odblokováním poskytne sloučeninu vzorce A. -Slou· čeniny vzorce Ca, kde m je 0 mohou být připraveny nejprve zpracováním methylthiomethanolu sj bází jako je Na, Li nebo K-hexamethyldisIlazicD za vzniku methylthiomethoxidix. ***ethoxid3, se pak necháreagovat s chráněným chlorfosfótem jako je dibenzylchlorfosfát za poskytnutí požadované sloučeniny. Sloučeniny vzorce? Ca, kde m je 1 mohou být: připraveny zpracováním CH^SCI^OCHgCI s? dichráněnotr fosfátovou solí, např'.. sodnými, draselnými, tetra(n-butyl)amoniovými solemi dibenzylfosfátu; nebn může CH^SCH^OCH^CI být nejprve převeden na odpovídající jodsloučeninu za použití jodidu; před reakcí s fosfátovou solí. Alternativně mohou
-19sloučeniny vzorce Ca, kde m je 1 být připraveny zpracováním1 ClC^OC^Cl a jodidem sodným·, a pak se thiomethoxidem sodným za vzniku CH^SCH^OCH^SCH^, tato sloučenina se pak zpracuje s NIS a dichráněným fosfátem jako je dibenzylfosfát za vzniku požadovaného produktu. Jakékoliv cřívee zmíněné; činidlo.', mající MŤM skupinu může být použito pro; prodloužení o jednu methylenoxyjednotku reakcí uvedeného činidla s methylthiomethanolem: a NIS.
V jiném způsobu přípravy sloučeniny vzorce A reaguje
T-alkoxidl (Ad) s jodfosfátem jak je uvedeno ve schématu III.
í
Schéma III-------τ1—[o-]n + iCH2(0CH2)m0P(0)(0Ry)2------------------------(Ad) (C)
Ve schématu III se získá jodfosfátová sloučenina reakcí ClCHů(0Cffo) Cl s dichráněnoú fosfátovou solí za 2 d m vzniku ClCHgXOCHg)a0P(0)(OR^, která se pak zpracuje s: jodidem sodným za vzniku požadovaného produktu.
Ještě další metoda vhodná pro přípravu následujících sloučenin vzorce A, ve kterých, alespoň jedna z fosfonooxymethoxyskupin je připojena k taxanové skupině, j-e? znázorněna ve schématu IV.
Schéma IV
+ 13-OH— txn — [OCH2(OCH2)mSCH3]n (D)
-—- (Ba)
-20Ve schématu IV mají man dříve definovaný význam·,
X je nevodíková skupina, P je hydroxy-chránící skupina, txn je taxanová skupina. Sloučeniny vzorce D jsou taxany, mající 13. -hydroxy-skupinu a jeden nebo více methylthiomethyletherů připojených přímá nebo nepřímo k taxanovému jádru; zahrnuty jsou také C13 kovové alkoxidy vzorce D. Příkladem sloučeniny vzorce D je 7-O-methylthiomethylbaccatin? III:
Kopulace taxanu D s azetidinonem· je analogická postu^pu uvedenému ve schématu? IV, infra; tak lze postup' popsaný zde pro přípravu? sloučeniny vzorce Id také aplikovat pro přípravu? sloučeniny vzorce Sa /tj. sloučeniny vzorce 3, ve kterém alespořá jedna z MTM skupin je připojena přímo· nebo nepřímo? k taxanová skupině/, jestliže se použije sloučenina vzorce D místo sloučeniny vzorce II ve schématu; VI. ^axan D se výhodně nejprve převede na Cl 3 kovový alkoxid’ jako je alkoxidl sodný, draselný nebo lithný, preferován jé alkoxid lithný. Azetidinon slouží jako prekurzor Cl 3 postranního řetězce. Po kopulační reakci s taxanem se odstraní hydroxy-chránící skupina P a je-li to žádoucí, může být volná hydroxyskupina na postranním řetězci převedena na MTM ether nebo derivatizovány na ester nebo karbonát jakje zde popsáno.
-21Azetidinon může být připraven déle popsanými metodami, které jsou také metodami obecně v oboru známými. Sloučeniny vzorce D mohou být připraveny obecným postu*-pem popsaným výše pro· přípravu sloučenin vzorce B za použití' vhodně chráněného taxanu;. Nicméně obvykleji mohou být získány ze sloučeniny vzorce Ba štěpením 13-postranního řetězce za použití borohydridu jako je borohydriď sodný nebo tetrabutylamoniový;. například 7-O-MTM pacliťaxelu; se zpracuje s tetrabutylamoniumborohydridem za vzniku 7-O-MTM baccatinu III.
J.
Obecný postup ve schématu. I pro přípravu sloučeniny vzorce A je podrobněji uvedera ve schématu V, které ilus- ’ ' truje přípravu sloučeniny vzorce I*(tj. sloučeniny vzorce I, kde m je O). Použitý pos tupí v této sekvenci syntézy/ je obecně aplikovatelný na jiné taxanové ddrivátiy nespecificky zahrnuté ve vzorci I. Dále může být postup ze schématu V modifikován v/ souladu- se skutečnostmi zde popsanými odborníky v oboru pro získání taxanových derivátů vzorce A, ve kterých m je 1,2 nebo 3.
Ve schématu V jakož i v celém popise výraz hydroxyehránící skupina? může zahrnovat vhodné karbonáty (např·. -OC(O)ORX\ ve kterých Rx neobsahuje hydroxy);a tedy, jestliže se použije karbonát jako hydroxy-chránící skupina, je nutné její v pozdějším stupni- odstranit pro získání volné hydroxyskupiny, jinak zůstává karbonátová skupina částí konečného produktu.
.j- _ ____ __ __ _ 1 íí . ____ ____ _ _ . — _ —_-___ _ “^ě^schematú^V^j^ R hydroxy/chráněnáhydroxy,
-OcíOrX nebo -OG(OjORx', R2 je vodík a R2a je vodík, hydroxy, chráněný hydroxy, -OC(O)RX nebo; -00(0)01^, R*^a je: vodík, hydroxy, chráněný hydroxy, C. _galkyloxy/, -OC(O)R nebo -OC(O)ORX, jeden z R6a nebo R/a je vodík a druhý je hydroxy, chráněný hydroxy nebo G^_galkanoyloxy, nebo R6a a R7a spolu tvoří oxoskupinu, s tou podmínkou, že
-22alespoň jedem z Rla, R2a nebo: R3a, Rba nebo R7a je hydroxy. R1 b je hydroxy. chráněný hydroxy, -OCHŮSCH.,, -OC(O)RX‘ vz 9 ?h u nebo -OC(O)OR , R je vodík a R je vodík, hydroxy, chráněný hydroxy, -OCH^SCHp -OC(O)RX nebo -OC(O)ORX:, R3b je vodík, hydroxy, chráněný hydroxy, _galk.yloxy, -OC(O)RX,
-OCH^SCH^ nebo: -OC(O)ORX, jeden z R6b nebo R7b je vodík a druhý je hydroxy, chráněný hydroxy, _galkanoyloxy neber -OCHgSCffj, nebo Rbb a R7b spolu tvoří' oxoskupinu, s tou podmínkou, že alespoň- jeden z Rlb, R2b, R3b, R b nebo R7b je -OCHgSCH^. R10 je hydroxy, chráněný hydroxy, -OCIT2OP(O)(ORy)2, -OC(O)RX nebo -OC(O)Qpx, R2 je vodík, a Rc je vodík, hydroxy, chráněný hydroxy, -OCH2OP(O)(ORy)2, -OG(O)RX nebo -OC(O)ORX, R3c je vodík, hydroxy, chráněný hydroxy, _6alk,yloxy, -OC(O)RX, -CH20P(0) (0Rv)2 nebo
-OG(O)ORX, jedem z R^e nebo R7c je vodík a druhý je hydroxy, chráněný hydroxy, C. ,-alkanoyloxy nebo -0CHo OP (O ).(01^ )o> s tou podmínkou, že alespoň jedei) z Rlc, R^ , R c, R c nebo R7č je -OCff2OP(O)(01^)2·zR] je hydroxy, -OCH2OP(O)(0H)2, -OC(O)RX nebo- .OC(O)ORX, R2 ” je vodík a R2” je: vodí 1$, hydroxy, -OCH^OPCO) (0R)2, -OC(O)R* nebo -OC(O)ORX;, R3 je vodík, hydroxy, C? _6alkyloxy, -OC(O)RX, -OCHgOPÍO)(0R)2 nebo -0G(0)0Rx\ jedem z Rb nebo R7 je vodík a druhý je? hydroxyi, C1 _galkanoyloxy nebo z-OCff2OP(O) (01J)2, s tozu podmínkou, že alespoň: jeden z R1 , R2 , R3, R& nebo R7 je -0CH20P(0) (OIT)2. R^, r5, R* a p- mají dříve definovaný význam a je fosfono-chránící skupina.
V prvním stupni se volná hydroxyskupina sloučeniny vzorce la převede raa odpovídající methylthiomethylethero— vou skupinu (-OCH^SCH^). Tato konverze může být provedena jedním ze dvou postupů (1a-dimethylsulfidová metoda) a (1b - dimethylsulfidová metoda). Dimethylsulfidová metoda pro převedení alkoholů na methylthiomethylethery je popsána v práci ^edina a kol., Tet.Lett., 1988, str. 3773-3776, jejíž relevantní části jsou zde zahrnuty jako odkazy.Dimethyl-
'$£<’·· * i tí,
-23Schéma V
(la) SMe2/(PhCOO)2 , or (lb) Ac2O/DMSO
(lb)
(3) odstranění fosfono-chránící skupiny a je-li přítomna hydroxy-chrá ní^í skupiny
-24sulfoxidová metoda je dobře známou reakcí, obvykle nazývanou Pummererova reakce.
J-e třeba uvést, že se reaktivita hydroxyskupiny liší v závislosti, na jejím umístění ve výchozím taxanovém derivátu; vzorce la. I když je obecně 2'-hydroxyskupina reaktivnější v acylačních reakcích než 7-hydroxy skupina, která je naopak reaktivnější než 1O-hydroxyskupina, bylo zjištěna že je překvapivě v ďimethylsulfiďové metodě 7-hydroxyskupina snadněji převeditelná na methylthiometh.ylesther než 2'-hydroxyskupina. Terciární hydroxyskupina při C-1 je obvykle nejméně reaktivní. Rozdíl v reaktivitě hydroxy,skupin může být využit při řízení' místa a stupně methylthiomethylace.·
Se sloučeninou vzorce la, kde R a R jsou oba hydroxy, je hlavním methylthiomethylačním produktem· od'povídající' 7-O-methylthiomethylether v dimethylsulfidové metodě, ^a účelem získání sloučeniny vzorce lb, kde R1 je meth.ylthiomethoxy, bez také převedení' 7-hydroxyskupiny, je-li přítomna, je 7-hydroxyskupina blokována obvyklou hydroxy-chránící skupinou jako- je triethylsilyl nebo benzyloxykarbonyl. Podobně 1O-methylthiomethylether může být také získán be2- převedení 7- a/nebo 2'-hydroxyskupin, jsou-li přítomny, jestliže tyto posledně uvedené jsou blokovány stejnými nebo rozdílnými hydroxychránícími skupinami. I když je 7-hydroxy považována za preferenční methylthiomethylační místo v dimethylsulfidové metodě, je ještě výhodně 'chránrť'2:*-hydrbxýskupi’nu=, je-li 7-monomethylthíomethylether požadovaným produktem.
Navíc mohou být., reakční podmínky upraveny pro úspěšnou tvorbu? bis- nebo tris-methylthiomethyletherových taxanových derivátů. Například v případě paclitaxelu zvýše-’ ním reakční doby nebo použitím· většího přebytku? methylthiomethylačních činidel může být dosaženo vyššího poměru 2*,7-bis(methylthiomethyl)ether-paclitaxelu! ve směsi produktu.
-s<- Ά co
St
Pokud se znovu bude jednat o schéma V, v postupu 1a se sloučenina vzorce Ia zpracuje s dimethylsulf idem- -# a organickým peroxidem· jako je benzoylperoxid. Reakce se:
provádí v inertním organickém rozpouštědle jako je acetonitril, methylenchlorid a podobně ;...p.ři,^teplotě /vedoucí ke:
tvorbě produktu, typicky se reakce provádí v teplotním rozmezí od asi -40 °C do asi teploty místnosti. Dimethylsulf id* a benzoylperoxlď se použijí v př e byt ku vzhledem k_____ __ taxanového výchozímu derivátu; vzorce Ia a dimeth.ylsulfoxid se použije v přebytku; vzhledem: k benzoylperoxidu.
i
Relativní množství použitých výchozích materiálů budou záviset na stupni methylthiomethylace, které má být d o saženo:* Jestl i že bude jedna volná hydroxy skup ina taxa- ___ nového výchozího materiálu; vzorce Ia převedena na methylthiomethylether:, může být dimethylsulf id a benzoylperoxid použity až V 10násobném přebytku vzhledem k taxanovému derivátu vzorce Ia a výhodně se dimethylsulfiď použije v> asi dvou až třojnásobném přebytku vzhledem: k benzoylpero- >
xidu'» V případě, kdy má výchozí materiál vzorce Ia jak 2*- tak 7-hydroxyskupiny, množství 2 *,7-bis (meth.ylthiomethyl )etheru, který se získá se zvyšuje s relativními množstvími dimethylsulf idu> a benzoylperoxidu.. Jestliže je 2*,7-bis(methylthiomethyl)ether požadovaným produktem, je: dimethylsulfid výhodně použit v asi 15 až asi 20násobném přebytku k výchozímu taxanovému derivátu; a benzoylperoxid se použije v asi 5 až asilOnásobném přebytku vzhledem k výchozímu taxanovému derivátu.
Alternativně může být sloučenina vzorce Ib připravena reakcí sloučeniny vzorce Ia s dimethylsulfoxidem a acetanhydridenr: (postup 1b). Tento postup je vhodný pro derivatizaci ne-2 '-hydroxyskupiny na její methylthiomethylether. V postupu; 1b’ se sloučenina vzorce Ia rozpustí v dimethylsulfoxidu a k roztoku se přidá acetanhydrid. Reakce se obvykle provádí při teplotě místnosti a po 18 až 24 hodin za vzniku monomethylthiomethyletheru.
-25Ver druhém stupni reakční sekvence se methylthiomethylether převede na odpovídající chráněný' fosfonooxymethylether. ^ethylthiomethyl ke chránění f osf onoox.ymethylkonverze může být proveden podle obecné metody popsané v práci Veenemana a kol., Tetrahedron, 1991, V47, str.
1547 až 1562, jejíž relevantní části jsou zde zahrnuty jako odkazy- ^ak sloučenina vzorce lb s alespoň jednou methylthiome th.yletherovoii skupinou se zpracuje s N-jodsukcinimidem a chráněnou fosforečnou kyselinou jako je dibenzylfosfát. -Reakce se provádí v inertním organickém rozpouštědle jako je tetrahydrof uran: ne,^cr halogenovaný uhlovodík jako je 1,2-dichlorethan; nebo methylenchlorid a popřípadě za přítomnosti deh.ydratačního činidla jako jsou molekulová síta. Pro urychlení reakce může být také přidán katalyzátor jako je trifluormethansulfonát stříbrný'. Reakce se provádí v teplotním rozmezí od asi 0 °C asi do teploty místnosti, výhodně při teplotě místnosti. N-Jodsukcinimidl a chráněná kyselina fosforečná se použijí v asi stejném molárním ekvivalentu jako. methylthiomethylether vzorce lb, ale- výhodně se použijí ve slabém přebytku, například asi 1,3 až asi 1,5 ekvivalentů vzhledem ke sloučenině vzorce lb.
Ve třetím stupni reakční sekvence se odstraní fosfono-chránící skupina a hydroxy-chránící skupina, jsou-li přítomny- Deblokování se provádí konvenčními metodami v oboru dobře známými, jako je kysele nebo alkalicky katalyzovaná hydrolýza,. hydrogenolýza, redukce a podobně- Například’ může být katalytické hydrogenolýza použitá pro odstranění benzylfosfono-chránící skupiny jakož i benzyloxykarbonylhydroxy-chránící skupiny. Metody odstranění mohou být nalezeny ve standardních pracech jako je' Greene a Wutz, nebo McOmie·, supra. Je nutno uvést, že jestliže sloučenina vzorce la obsahuje hydroxyskupiny v radikálu R , jsou uvedené hydroxyskupiny výhodně chráněny vhodnými hydroxy-chránícími skupinami až do jejich odstranění v tomto:
-26posledním stupni.
Jak bylo uvedeno může být postup uvedený ve schématu V modifikováni v souladu s poznatky zde uvedeným odborníky v oboru pro získání taxanových ddrivúttů vzorce A, ve kterých m je 1,'2 nebo 3· Jako příklady, schémata“Va a Vb specificky ilustrují, jak může odborník v oborui modifikovat zde uvedené poznatky pro dosažení určitých sloučenin vzorce A,~kde alespoň jedním substituentem^j‘e- —---------------00^2(OCH2)20P(0)(ΟΗ)2· Podobně mohou být snadno získány jiné sloučeniny vzorce A, ve kterých je mi 3· í
TtTV,1
Scherna Va
-271) Nal
---CH3Sx/O<^>O^x,SCH3
2) NaSCH3
cHaS^^o^xx^scHs / NIS
CF3SO3Ag(kat. )
(PhCH2O)2P(O)(OH)
NIS h2
-28Schéma Vb
(PhCH2O)2P(O)(OH)
NIS
-29Sole sloučenin vzorce I s bázemi mohou být vytvořeny konvenčními technikami, zahrnujícími kontakt sloučeniny vzorce I ve formě volné kyseliny s kovovou bází nebo; s aminem·. Vhodné· kovové báze zahrnují hydroxidy, uhličitany a hydrogenuhličitany sodíku, draslíku, lithia, vápníku, barya, hořčíku, zinku a hliníku a vhodné aminy zahrnují triethylamin, amoniak, lysin, arginin, N-methylglukamin, ethanolamin, prokain, benzathin, dibenzylamin, tromethamin (TRIS), chlorprokain, cholin, diethanolamin, triethanoljamin a podobně. Sole,, bází mohou být dále čištěny chromatografií s následující lyofilizací nebo krystalizací.
Výchozí taxanové deriváty
Výše popsané procesy mohou být aplikovány na jakékoliv taxanové deriváty vzorce T-/OH/n za vzniku sloučenin vzorce A. Mnoh© příkladů T-/OH/ je uváděno v literatuře a některé z nich jsou uvedeny dále. (a)paclitaxel, (b) Taxotere1*, (c) 1O-desacetylpaclitaxel, (d) taxanové· deriváty popsané v PCT přihlášce 93/06079 (publikované 1. dubna 1993), mající vzorec
-30kde R1 je -ORg, “SR7 nebo: -NRgR^, R2 je vodík, alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl nebo: heteroaryl, Rj a R^ jsou nezávisle vodík, alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, heteroaryl, nebo acyl s tou podmínkou, že Ry a R^ nejsou oba acyl,
R5 je -COR1 θ, .-COORjQ,_-QPSRlQ-CONRgR,θ,..-SP2?4 r nebo -POR^R^, Rg je vodík, alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, heteroaryl, hydroxy-chránící skupina nebo funkční skupina, která zvyšuje rozpustnost taxanových derivátů ve vodě, Ry je alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, heteroaryl, nebo sulfhydryl-chrénící skupina, Rg je vodík, alkyl, alkenyl, alkinyl, heteroaryl, Rg je ami^o-chránící skupina, R1θ je alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, heteroaryl,
R1je alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, heteroaryl, -OR^q, _____nebo -NRqR^^, R12 a R^jsou nezávisle alkyl, alkenyl, alkinyl., aryl,. heteroaryl, -OR10, nebo -NRgR^, R^ je vodík, alkyl, alkenyl', alkinyl, aryl, heteroaryl, Ř1 g a.
R.| g jsou nezávisle vodík, hydroxy, nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy, aryloylox.y nebo R^ a R^g tvoři' spolu oxo, R1γ a R1g jsou nezávisle vodík, hydroxy, nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy, aryloyloxy? nebo Rj γ a Ι^θ spolu tvoří oxo, R^ g a R2q jsou nezávisle vodík nebo: hydroxy nebo nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy nebo aryloyloxy, R21 a R22 jsou nezávisle vodík neber nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy nebo aryloyloxy nebo R2^ a R22 spolu tvoří oxo, R2<^ je vodík nebo hydroxy nebo nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy nebo aryloyloxy, nebo R^ a spolu tvoří oxo neba> methylen, nebo R^ a R^ spolu s uhlíkem, ke kterému jsou připojeny tvoří oxiranový kruh nebo R22 a R23 spolu a uhlíkovým atomem, ke kterému jsou’připojeny tvoří oxetanový kruh. R2^ je vodík, hydroxy nebo nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy nebo aryloyloxy nebo R2g je vodík, hydroxy nebo nižší alkanoyloxy, alkenoyloxy, alkinoyloxy nebo aryloyloxy nebo R26 a R25 společně tvoři oxo a RgY je vodík, hydroxy nebo nižší alkoxy,
-31alkanoyloxy, alkenoylox.y, alkinoyloxy nebo aryloyloxy;
(e) taxanové deriváty popsané v US patentu 5227400, 3 *desfenyl-3(2-furyl)- nebo 3*-(2-thienyl)deriváty paclitaxelu·', Taxotere ; (f) taxanové deriváty popsané v EP 534709 publikované 31.března 1993 (paclitaxelové deriváty, ve kterých fenylové skupiny postranních řetězců jsou nezávisle nahrazeny naftylem, styrylem nebo substituovaným fenylem). Via také PCT 92/09589 publikovaná
11.června 1992; (g) taxanové deriváty popsané v EP 534707 publikované 31.března 1993 (paclitaxelové deriváty, ve kterých: 3*-N-benzoylová skupiqa je nahrazena ethoxykarbonylem nebo methoxykarbonylec); (h) PCT přihlášce 93/06Ό93 publikované 1.»dubna 1993 (10-desacetoxy-deriváty paclitaxelu a Taxotere^); (i) EP 524093 publikovaná 20.ledna 1993 (10-, 7- nebo 7,1O-bis-O-(N-substituované karbamoyltaxanové deriváty); (j) 9-^-hydroxyanalog' paclitaxelu je popsán v práci Kleina Synthesis of 9-Dihydrotaxol: A New 3ioactive Taxane, Tetrahedron Letters, 1993., 34(13): 2047-2050; (k) 1 4-»5»-hydroxy-analog1: paclitaxelu a ^axotere^ připravený ze 14p>-hydroxy10-deacetylbacCatinu III jsou popsány na 205th ACS National Meeting in· Colorada, 1993. (Med.Chem.Division, Abstract č. 28), a (1) jiné taxany jako'jsou C7-fluontaxany a různé Cl0-substituované taxany, jak jsou popsány v evropské patentové přihlášce 577082A1, publikované' 5rledna 1994, která je zde celá zahrnuty jako reference.
Volná hydroxyskupina nebo skupiny taxanových derivátů mohou být převedeny konvenčními metodami na odpovídající ester nebo karbonát; například5 ve sloučeninách vzorce la jeden z R1a, R2a nebo R^a je -OC(O)RX' nebo -OC(O)ORX a má dříve definovaný význam. Taxanové deriváty tak mohou reagovat se sloučeninou vzorce L-C(O)OR (L je odštěpitelná skupina) jako je chlorformiát za přítomnosti. báze jako je terciární amin za vzniku odpovídali ‘
I t v
jícíhoc karbonátu; například paclitaxel reaguje s ethylchlorformiátem za přítomnosti diisopropylethylaminu:za vzniku 2*-O-ethyloxykarbonylpaclitaxelu. T-OH může také reagovat s karboxylovou kyselinou I^COgH- neba> jejím acylačním ekvivalentem (např. anhydridem, aktivním esterem. . nebo acylhalogenidem) za poskytnutí odpovídajícího esteru. Jestliže Rx v L-C(O^iORx nebo RXCO2H· nebo jejich acylační ekvivalent, obsahuje hydroxyskupiny, výhodně se tyto chrání' vhodnými hydroxyl chránícími skupinami.
Dále mohou taxanové deriváty T-/Oíj[/n být připraveny acylaci taxanové skupiny, mající Cl3-hydroxyskupinu se vhod ně substituovanou! 3-aa*ino-2-hydroxypropanovou kyselinou, jejím acylačním.ekvivalentem nebo jejím^prekurZorem._Vhod-„ né prekurzory substituované 3-amino-2-hydroxypropanové kyselina jsou například azetidinony vzorce III. Tat0 acylace je uvedena na příkladu: kopulace hydroxy-chráněného baceatinu: III nebo hydroxy-chráněného 1O-deacetylbaccatinu III a íenylisoserinových derivátů za vzniku paclitaxelových derivátů jak: jsou popsány např. v Denisových a kol.
US patentech 4924011 a 4924012 a kopulace chráněného baccatinu III a ázetidinonu za vzniku paclitaxelu a jeho derivátů jak je popsánu v EP publikované-' přihlášce'400971 publikované 5.prosince 1990 (nyní US patent 5175315) a US patentu 5229526.
Postup popsaný v EP 400971 (Holtonův postup) zahrnuje reakci 1-benzoyl-3-(1-ethoxy)ethoxy-4-fenyl-2-azetidinonu se 7-O-triethylsilylbaccatinem III za přítomnosti Ν,Ν-dimethylaminopyridinu a pyridinu při 25 °C po 12 hodin, paclitaxel se získá po odstranění různých hydroxy-chrá nících skupin.. Zlepšení Holtonova procesu je uváděno Ojima-ou a kol., v New and Efficient Approaches to the misynthesis of Taxol and its C—13 Side Chain Analogs by Means of fy -Lactam.· Synthon method Tetrahedrom, 1992,
-3348(34):6985-7012. Ojima-ův proces zahrnuje nejprve generování sodné soli 7-triethylsilylbaccatinu III s hydridem sodným, tato sůl se pak nechá reagovat s chirálním
1-benzoyl-3-(1-ethyloxy)ethoxy-4-fenyl-2-azetidinonem za poskytnutí paclitaxelu po odstranění hydroxy-chránících skupin. V US 5229526 Holton popisuje kopulaci kovového alkoxidu baccatinu III nebo: jeho derivátu se 2-azetidinonem za poskytnutí taxanů s Cl 3 postranním řetězcem. Tento proces je označován za vysoce diastereoselektivní} proto mohou být použity směsi prekurzoru 2-azetidinonu s postranním řetězcem. V poslední době Ojima a^kol. uvádějí v A Highly Efficient Routě to Taxotere by /3-Lactam Synthon Method, Tetrahedron Letters, 1993., 34(26):4149-4152, kopulaci kovových alkoxidů 7,1O-bis-O-(trichlorethoxykarbonyl)-1O-deacetylbaccatinu lil s; chirálním 1-(terc. butoxykarbonyl)-4-fenyl-3-(chráněný hydroxy)-2-azetidinoO nem za vzniku Taxotere po deprotekci. Relevantní části všech výše citovaných referencí jsou zde zahrnuty jako reference.
Saccatin/azetidinonproces vedoucí k přípravě sloučenin vzorce la je ilustrován ve schématu VI. Opět mohou jiné taxanové deriváty nespecificky zahrnuté ve vzorci la být také připraveny tímto postupem za použití vhodných výchozích materiálů.
-34Schéma VI
(Ia) p * PH
Ve schématu VI, R je vodík a R^a je vodík, chráněný hydroxy,· -OC(O)RX nebo -OC(O)ORX, R3d je vodík, -OC(O)RX, C. x-alkyloxy, chráněný hydroxy nebo -OC(O)ORX; jeden z R 58 nebo R7d je vodík a druhý je hydroxy, chráněný hydroxy nebo _^alkanoyloxy, nebo R^d a R?d spolu tvoří oxoskupinuj P je: hydroxy-chránící skupina, M je vodík nebo kotr> skupiny IA, jako je lithium, sodík nebo draslík a 4 5 x p, R , R a R mají výše definovaný význam. Reakce může být provedena-podie-postupu popsaného'V“EPj 400971 ;“kde‘ “ ’ baccatin III derivát vzorce II, kde M je vodík, reaguje s azetidinonem vzorce III za přítomnosti organické báze jako je Ν,Ν-dimethylaminopyridin. Výhodně však se darivát baccatinu III nejprve převede na 13-alkoxid zpracováním nejprve? se silnou bází jako jsou hydridy, alkylamidy a bis(tri-35alkylsilyl)amidy kovů skupiny IA jak jsou popsány v US patentu; 5229526» a výše uvedených odkazech na práce Ojimy. Výhodněji! je 13-alkoxidem lihný alkoxid. Tvorba lithné soli může být dosažena reakcí sloučeniny vzorce II, kde M je vodík se silnou bází kovu jako je lithiuadiisopropylamid, _galk.yllithiuo, lithium-bis”trimethylsilyl)amid, fenyllithium, hydrid lithný nebo podobná báze. Jestliže sloučenina vzorce II obsahuje hydroxyskupiny v radikálu R , jsou uvedené hydroxyskupiny výhodně chráněny vhodnými hydroxyl chránícími skupinami.
i
Kopulační reakce mezi taxanem vzorce II a azetidinonem vzorce III se provádí v inertním; organickém rozpouštědle jako je tetrahydrofuran při snížené teplotě v rozmezí od asi 0 °C do asi -78 °C. Azetidinony vzorce III mohou být použity jako racemická směs pro kopulaci s taxanovými kovovými alkoxidy vzorce II, ve kterých M je kov; skupiny IA; v takovém případě se azetidinanový reaktant výhodně použije? v alespoň 2 ekvivalentech vzhledem k taxanovému reaktantu a výhodněji v množství od asi 3 do asi 6 ekvivalentů. Chirální azetidinony mohou být také použity a v takovém případě by měl být dostačující jeden ekvivalent azetidinonu vztaženo k taxanu, ale výhodně se azetidinon použije? ve slabém přebytku, například až do
1,5 ekvivalentů.
Hydroxyl chránící skupiny mohou být stejné nebo mohou být zvoleny tak, že umožní selektivní odstranění jedné nebo více chránících skupin; bez podstatného ovlivnění ostatních; například ve sloučenině vzorce Id mohou R2d a PO být obě triethylsilyloxy a R^d může být benzyloxykarbonyl; katalytická hydrogenolýza za přítomnosti palladia na uhlí odstraní benzyloxykarbonylovou chránící skupinu bez odstranění triethylsilylskupiny. Hydroxyl chránící skupiny sloučeniny vzorce Id mohou být selektivně odstraněny za poskytnutí sloučeniny vzorce la.
-36Sloučeniny vzorce II jsou buč známé z literatury, např. baccatin III, 1O-deacetylbaccatin III a jejich hydroxyl chráněné deriváty, nebo mohou být připraveny ze známých sloučenin konvenčními metodami, např. převedením hydroxyskupiny na karbonát, ^alší sloučeniny vzorce II mohou být připraveny postupy popsanými'zde dále v; sekci nazvané příprava výchozích látek”.
Slďučěnihý vzorce“ III mohou být připraveny ze sloučeniny vzorce lila podle obecné metody popsané v EP 400971
i.
a Ojima-ou a kol., Tetrahedron, 48:6965-7012, 1992.
r5 POZ, vr5
Z báze --—>. —NH R^(O)pCO-L o^V 0
(lila) (III)
Sloučenina vzorce lila se nejprve zpracuje s bází jako je n-butyllithium nebo triethylamin·, a potom se sloučeninou vzorce R^ÍOJ^CO-L, kde 1> je odštěpítelná skupina za poskytnutí sloučeniny vzorce III.
Sloučeniny vzorce lila mohou být připraveny podle obecné metody popsané v EP 400971 přes meziprodukt, sloučeninu 3-racetoxa-4-substituovaný-2-azetidinon Illb, nebo metodou popsanou v US 5229526 přes meziprodukt, 3-triethylsilyloxy-4-substituovaný-2-azetidinon. Ve zlepšeném postupu může být sloučenina Illb získána kondenzací acet-37oxyacetylchloridu s bis-iminem s následující hydrogenolýzou nebo kyselým štěpením pro odstranění N-iminové skupiny. Tento postup je uveden v následujícím schématu, ve kterém je R^ popřípadě substituovaný aryl nebo heteroarylová skupina jako je furyl nebo thienyl. Tento proces je popsán v související přihlášce U.S.S.N. 08/165610 podané 13«prosince 1993, která je zde zahrnuta jako reference.
CH3C(O)OCH2C{O>a báze
CH3C(O)O i 05·
o CH-N=CHFá
R5' kat· bo kys.štěpení
CH3C(O)O os —NH
Produkty Illb získané z těchto cykloadičních reakcí jsou obvykle racemická směs dvou cis-azetidinonů. ^acemická směs může být rozštěpena konvenčními metodami jako je konverze na diastereomery, rozdílná absorpce na koloně plněné chirálními adsorbenty nebo enzymaticky. Například ‘může býť“racemická' směs sloučenin vzorce lllb uvedena do kontaktu s enzymem, který katalyzuje hydrolýzu esteru, například esterásou nebo lipásou, pro selektivní štěpení 3-acylskupiny jednoho enantiomeru bez ovlivnění druhého. (Viz např» Srieva a kol., J.Org.Chem., 1993,
-« » \ M / -i * V
3858:1068-10757 také související přihláška U.S.S.N. 092170 podaná 14.července 1993, evropská patentová přihláška č. 552041, publikovaná 21.července 1993). Alternativně může být racemická směs nejprve podrobena bází katalyzované hydrolýze pro odstranění' 3-acylskupiny a pro generování racemické směsi odpovídajícího 3-hydroxy-/,3-laktamu; racemická směs 3-hydroxy-ý7>-laktamu se pak uvede do kontaktu s enzymem schopným katalyzování acylace hydroxy-_ skupiny pro selektivní acylování hydroxyskupiny jednoho enentiomeru bez ovlivnění druhého?. ^eb.o může být racemická směs 3-hydroxy- ý^-laktamu acylována chirální karboxylovou kyselinou a výsledné diastereomerní směs může být dozdělena za použitímetod známých v oboru a chirální pomocný prostředek být odstraněn za poskytnuti požadovaného_ enentiomeru.
Ojima a kol., v J.Org.Chem., 5641681-1683, 1991; Tet.Lett., 33:5737-5740, 1992 a Tetrahedrom, 48:6985-7012, 1992 uvádějí syntézu mnoha chirálních azetidinonů vzorce? lila a/nebo? Odpovídajících N- (p-methoxyfenyl)derivátů, kde P je triisopropylsilyl jako hydroxy! chránící skupina a je 4-methoxyfenyl, 3,4-dimethyloxyfenyl, fenyl, 4fluorfenyl, 4-trifluormethylfenyl, 2-furyl, 2-fenylethe— nyl, 2-(2-furyl)ethenyl, 2-methylpropyl, cyklohexylmethyl, isopropyl, fenylethyl, 2-cyklohexylethyl nebo n-propyl.
Další odkazy na přípravu?, azetidinonů vzorce lila a/nebo III mohou být nalezeny v evropských patentových přihláškách 0534709 A1, 053470S A1 a 0534707 A1 , které byly všechny tři publikovány 31.března 1993» v PCT přihlášce WO 93/06079 publikované? ÍVdubnan993, v Bioorganic anď Medicinal Chemistry Letters, 3, δ. 11, str. 2475-2478 (1993); také v Bioorganic; and Medicinal Chemistry Letters, 3, δ;. 11, str. 2479-2482 (1993); v J.Org.Chem., 58, sťr. 1068-1075; v Tetrahedron Letters, 31, δ- 44, str. 6429-6432 (1990);
V Bioorganic; anď Medicinal Chemistry Letters, 3, δ- 11,
-39str. 2467-2470 (1993)> evropské přihlášce 552041 publikované 21.července 1993 a v naší související US patentové přihlášce č. 092170, podané 14.července 1993. Relevantní části všech uvedených odkazů jsou zde uváděny jako odkazy. Jiné azetidinony, spadající do definice vzorce III, ale specificky v těchto odkazech nepopsané, nohou být připraveny odborníky v oboru podle metod v oboru obecně znáných.
Biologická hodnocení i
Sloučeniny vzorce B podle předloženého vynálezu; jsou vhodnými meziprodukty pro nová protinádorová činidla vzorce A. Navíc jsou některé' sloučeniny z rozsahu vzorce A, jmenovitě sloučeniny vzorce B*, protinádorovými Činidly*
Dále uváděná Biologická sekce ,1 dokládá protinédorovou aktivitu’, sloučenin vzorce A^ Naopak Biologická sekce II dále dokládá protinádorovoui aktivitu sloučenin vzorce B*»
Biologická sekce I
Hodnoty cytotoxicity in vitro
Sloučeniny vzorce A vykazují in vitro cytotoxickou aktivitu vůči buňkám karcinomu lidského kolonu HCT-116 a HCT-11 6/VM4S. HCT-116/VM46 buňky jsou buňky, které byly předem selektovány na teniposidovou rezistenci a představují fenctyp smulti-drug rezistencí, zahrnující rezistenci k paclitaxelu. Cytotoxicita byla hodnoceny v HCT-116 buňkách karcinomu lidského .kolonu; pomocí XTT (2,3-bis(2-methoxy4-nitro-5-sulfertyr)-5-/(fenylamino)karbonyl/2H-tetrazolÍumhydroxid) zkoušky jak je popsána v D.A. Scudiero· a kol.,
...... -40Evaluation of soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lineš”, Cancer Res. 48:4827-4833» 1988. Šunky byly umístěny na plotnu v množství 4000 buněk/jamku na 96jamkovéi mikrotitrační plotny a o 24 hodin později byla přidána léčiva a provedeno postupné ředění. Buňky byly inkubovány při 37 °C 72 hodin; a v této době bylo přidáno tetrazoliové barviv®, XTT. Enzym dehydrogenasa v živých buňkách redukuje? XTT na formu, která absorbuje? světlo při 450 nm.*, což lze kvantifikovat spektrofotometricky. Větší absorbance znamená vyšší počet ži, fl vých buněk. Výsledky jsou vyjádřeny jako ΙΟ^θ, což jest koncentrace léčivar potřebná^prO^inhibici^buněčné—proii^— feraceítj., absorbance při 450 nm) na 50 % této hodnoty únFoše~třěhýchkontrolních-buněk.’ ΙΟ^θ hodnoty pro reprezentativní sloučeniny hodnocené v této zkoušce jsou uvedeny V’ tabulce I.
Tabulka I
In vitro hodnoty cýtotoxicity· vůči buňkám karcinomu lidského kolonu
IC5o (/uM)
Sloučenina1 příklad' 1 příklad 3: příklad 4 TaxotereR
HCT-116 0,0158 0,312 0,045? 0,004 0T004—
HCT-116/VM46 1 ,24 6,25 6,3,
0,213 —0-44-— — ·
Příklady 1 a 4 jako volná kyselina, příklad 3 jako sodná sůl.
-41Sloučenina 7-O-methylthiomethylpaclitaxel (příklad 1 (a) byla také testována v cytotoxické zkoušce a vykazuje ΐσ5θ 0,003 /uM vůči HCT-116 a 0,025 /uM vůči HCT-116/VM46-.) In vivo protinádorová aktivita
3alb/c x DBAg F^ (CDFj) hybridní myši byly implantovány subkutánně (sc) 0,1 ni 256 (hmotn./obj.) M109 ρΐίαního karcinomu (jak je popsáno v práci W.Rose Evaluatiort od Madison· 109 Lung Carcinoma ps a Model for Screening líntitumor Drugs,* Cancer Treatment Repqrts , 65, č;. 3-4, stxr. 299-312 (1981)- Testované sloučeniny a referenční léčivo, paclitaxel, byly podány intravenozně skupinám myší. Každá skupina dostala sloučeninu v různé' hladině dávky, a pro sloučeninu byly hodnoceny tři nebo čtyři různé dávkové hladiny. Myši byly denně sledovány pro hodnocení přežití, buď do jejich uhynutí nebo dosažení asi 75.dne po implantaci nádoru·, podle toho, čeho bylo dosaženo nejdřív. Jedna skupina myší v pokusu zůstala neošetřena a slouží jako kontrola. Nádory byly také měřeny jednou nebo dvakrát týdně a velikost v mm byla použita pro hodnocení hmotnosti nádoru podle publikovaného postupu (ibid).
Průměrné doby přežití u myší ošetřených (T) byly porovnávány seprůměrnou dobou přežití paralelních kontrolních (C) myší. Poměr dvou hodnot pro každou s .upínu myší ošetřenou! sloučeninou byl násoben! 100 a vyjádřen jako procenta (tj. % T/C) v tabulce II pro reprezentativní sloučeniny. Dále je v tabulce II také uveden rozdíl mezi. průměrnou dobou? pro ošetřené skupiny a pro kontrolní skupinu pro růst nádoru na 1 mm, vyjádřený jako T-C hodnoty ve dnech. Větší T-C hodnota, znamená větší zpomalení v růstu primárního nádoru. Sloučeniny vykazující % T/C > 125% a /nebo- T-C >4,0 dny· jsou považovány za aktivní v M109 SC modelu.
ίΚ'3·ΐ
-42Tabulka II
Sloučenina maximální účinek % T/C T-C.(dny) opt.dávka mg/kg/inj')
přiklaď 1ď 131 14,0 45a
paclitaxel 134 14 48/24a,c
přiklaď 3^ 160 18r8 24b
paclitaxel 151 15 - 18b
aSloučenina byla podávána i.v. jednou denně, ve dnech 4, 5>, 63, 7 a 8 po implantaci nádoru. *
-------^Sloučenina byla podávána i.v. jednou denně 5., 6., 7., 8.— a 9. den po implantaci nádoru.
cVyšší dávka dosáhne maximálního prodloužení života, nižší dávka je spojena s; maximálním snížením růstu nádoru dS.odná sůl-»
Sloučenina z příkladu 3 (jako triethanolaminová sůl) byla dále hodnocena na modelech implantátů myších a lidských nádorů (M109, A2780/cDDP — karcinom lidského ovaria rezistentní k cisplatině a HCT-116 - karcinom lidského kolonu) vůči paclitaxelu jako pozitivní kontrole. A2780/cDDP model je popsán v práci Rose a Saslera, In Vfvu, 1990, 4:391-396» HCT-116 model je popsáín v práci Rose a 3asler, In Vivo, 1989, 3:249-254· M109 byl pasážován sc dvakrát týdně na Balh/C myši a implantován se do· _ . CDF1 my š i . pr o. hodnocení. pro.tinádorové úč innos ti. A2.780/cDDP a HCT-116> rostly v athymické. myši po obě pasážování (každé dva až tři týdny) a terapeutických pokusech. Sloučenina z příkladu 3 byla podávána iv ve vodě nebo orálně ve vodě s několika kapkami Tweenu 80, zatímco paclitaxel byl bu3 suspendován ve vodě plus Tweenu 80, nebo rozpuštěn v cremophoru/ethanolu (50 %/50 %) a zředěn salinickým roz\ \I< Λ
-43tokem. Režim ošetření pro ser M109 nádorové testy byl jednou denně po 5 po sobě jdoucích dnů, začátek 4.den po implantaci nádoru. U’ testů implantátů lidských nádorů, byly sloučeniny podávány jednou denně vždy další den pří pěti podáních, začínajících při ustavení nádoru na hodnotu mezi 50 až 100 mg.
V jednom M109 pokusu byla sloučenina z přikladu 3 podávána iv a bylo dosaženo) max. %T/C 155 (T-C 19 dnů) při 36 mg/kg/inj. (srov. paclitaxel max. %T/C 132 (T-C 13 dnů) při 36 nebo 18 mg/kg/inj.). Ve stejném pokusu' ti dosáhla sloučenina z příkladu 3 podávaná orálně max.
%T/C 1581 (T-C 22,8 dnů) v dávce 160 mg/kg/pod. zatímco paclitaxel a Tween 80 nevykazoval aktivitu. V jiném M109 pokusu iv podaná sloučenina z příkladu 3 produkuje max. %T/C 170 (T-C 17 dnů) při. 48 mg/kg/inj. (srov. paclitaxel max. &T/C 16? (T-C 14 dnů) při 48 nebo 36 mg/kg/inj.).
Ve stejném pokusu orální podání sloučeniny z příkladu 3. produkuje max. %T/C 172 (T-C 17 dnů) v dávce 200 mg/kg/adm. zatímco paclitaxel rozpuštěný v cremophoru/ethanolu/salinickém roztoku nevykazuje aktivitu při 60 mg/kg/inj. V tomto pokusu paclitaxel rozpuštěný v cremophoru/ethanolu/sa linickém roztoku nemohl být podán v dávce vyšší než 60 mg/kg/inj. díky obtížím s rozpustností a toxicitou.
V A2780/cDDP' pokusu iv.podané sloučeniny z příkladu 3 vykazují max. T-C hodnotu 29,8 dnů při 36 mg/kg/inj’. ) (srov.paclitaxel max. T-C 26,3, dnů při 36 mg/kg/inj.). Orálně podané sloučenina z příkladu3 produkuje max.T-C 20 dnů v dávce 160 mg/kg/adm. V HCT-116 pokuse iv. ošetření 24 nebo 36 mg/kg/inj. paclitaxelu produkuje 6 uzdravených ze 7 nebo 6 uzdravených z 8'ošetřených myší a 160 nebo 240 mg/kg/poď. orálně sloučeniny z příkladu 3 6 uzdravených z 8 ošetřených myší. Uzdravený znamená tumoru prostý 80.den po implantaci tumoru.
-44Triethanolaminová sůl sloučeniny z příkladu 1 byla také shledána jako mající orální aktivitu; v M109 a HCT-116 modelech.
V oboru je dobře známo, že bude docházet k určitým, obvykle slabým variacím v prótinádorové aktivitě v závislosti na použité konkrétní soli.
----______ --------Farmaceucky při jateIná sůl f o sf on ooxy me thýl e the ri5 —-------------taxanových derivátů vzorce A vykazuje zlepšenou rozpustnost ve vodě vůči paclitaxelu a tak se dosahuje vhodnějších farmaceutických: přípravků. Bez jakékoliv vazby na
---------------teorii se očekává, že fosfonooxymethylethery podle před-------------loženého vynálezu jsou prekurzory léčiv paclitaxelu a
- ——jeho- derivátů? ~Fosfonooxymethylskupina ~se štěpí po kon-----—-----------taktu s fosfatásou in vivo a následně se uvolňuje rodičovská sloučenina.
Biologická sekce II
Myší M109 model
Balb/c x D3A/2 F^ hybridní myši byly implantovány intraperitoneálně, jak popsal Wiliam Rose v Evaluation of •Madison 109 Lung Jarcinoma as a Model for Screening Antitumor Drugs, Cancer Treatment Reports, 65, č. 3-4 (1981), 0,5 ml 2% (hmotn./obj.) kaše M109 plicního karcinomu.
_ _ Myši _byly-_ošetřeny-sloučenlnou,^která ^byla studována,- ^ _ _ _ _ tak, že dostaly intraperitoneální injekce různých dávek buď ve dnech 1,5' a 9 ρο implantaci nádoru nebo ve dnech a 8 po implantaci. Eenng bylo sledováno přežití myší přibližně do asi 75· až 80.dne po implantaci nádoru. Jedna skupina myší v pokuse zůstala neošetřena a slouží jako kontrolní skupina.
-45Průměrné doby přežití myší ošezřených sloučeninou (T) byly srovnány s průměrnou dobou přežití' kontrolních (C) myší- Poměr těchto dvou hodnot pro každou skupinu myší ošetřenou sloučeninou byly násobeny 100 a vajádřeny jako procenta (tj. % T/C) v tabulce III pro reprezentativní sloučeniny vzorce 3*.
Tabulka III
Příklad T/C (mg/kg/in j.
podání ve dnech) (b) 143 (12; d. 5+9) t
192 (8; d. 5+9)
Jak je uvedeno výše, sloučeniny vzorce A a 3* podle vynálezu jsou účinnými nádory inhibujícími činidly a jsou proto vhodné v lidské a/nebo veterinární medicině. Další aspekt předloženého vynálezu zahrnuje metodu inhibice lidských a/nebo jiných savčích nádorů, kterjř zahrnuje podání protinádorově účinného množství· sloučeniny vzorce A nebo B* hostiteli, který je nositelem nádoru'.
Sloučeniny vzorců A a 3* podle předloženého vynálezu mohou být použity způsobem podobným jako paclitaxel; proto bude pro onkologa snadnď- vyhodnotit, bez potřeby experimentů, jaký bude vhodný protokol léčení' při podání sloučeniny podle předloženého vynálezu. Dávka, způsob a schéma podání u sloučenin podle tohoto vynálezu nejsou nijak zvlášt omezeny a budou se měnit podle jednotlivé použité sloučeniny. Sloučenina podle předloženéhovynálezu může být podána jakýmkoliv vhodným způsobem podání, výhodně parenterálně; dávka může například Činit od asi 1 do asi 100 mg/kg tělesné hmotnosti nebo asi 20 až asi 500 mg/m . Sloučeniny vzorce A a B*mohou také být podávány orálně.
Orální dávka může být v rozmezí od asi 5 do asi 500 mg/kg tělesné hmotnosti. Použitá aktuální dávka se bude měnit podle jednotlivé formulované sloučeniny, způsobu podání
-46a konkrétného místa, hostitele a typu léčeného nádoru. Při stanoven# dávky je třeba vzít v úvahu mnoho faktorů, které modifikují působení léčiva jako je? vět, hmotnost, pohlavíř, strava a fyzický stav pacienta.
Předložený vynález také poskytuje farmaceutické přípravky (formulace)J obsahující protinádorově účinné množství sloučeniny vzorce A nebo Bz v kombinaci s jed
ním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči, přísadami, ředidly nebo pomocnými látkami. Příklady formulace paclitaxelu nebo jeho derivátů mohou b^t nalezeny v, napřiklad, US patentech č. 4960790 a 4814470 a tyto příklady
je možno použít pro formulaci sloučenin podle tohoto vynálezu. Například! sloučeniny podle předloženého vynálezu;
mohou být formulovány ve formě tablet, pilulek, práškových směsí, kapslí, injekcí, roztoků, čípků, emulzí, disperzí, potravinového premixu a v jiných vhodných formách. Mohou být také vyrobeny ve formě sterilních pevných přípravků, například! sušených vymrazením a je-li to; žádoucí, mohou být kombinovány s jinými farmaceuticky přijatelnými přísadami. Takové pevné přípravky mohou být rekonstituovány sterilní vodou, fyziologickým solným roztokem nebo směsí vody a organického rozpouštědla jako je propylenglykol, ethanol a podobně nebo některým jiným sterilním injekčním mediem bezprostředně před použitím pro? parenterální podání.
Typickými farmaceuticky přijatelnými nosiči jsou, například·, manitol, močovina, dextrany, laktoza, bramborový á kukuřičný škrob, stearát hořečnatý,.talek, rostlinné oleje, polyalkylenglykoly, ethylceluloza, polyCvinylpyrrolidon), uhličitan vápenatý', ethyloleát, isopropylmyristát, benzylbehzoát, uhličitan sodný, želatina, uhličitan draselný, kyselina křemičitá. Farmaceutický přípravek může také obsahovat netoxické pomocné substance *
-47jako jsou emulgační, chránící, smáčecí činidla a podobně jako například sorbitan monolaurát, triethanolamin oleát r polyoxyethylenmonostearát, glyceryltripalmitát, dioktylsulfosukcinát sodný a podobně.
V následujících příkladech jsou všechny stupně uváděny u teploty ve stupních Celsia (C), pokud není uvedeno jinak-. Charakteristiky spektra nukleární magnatické rezonance (NMR) se týkají chemických posunů (<£ ) vyjádřený v parts per million (ppm) proti tetramethylsilanu (TMS) jako referenčnímu standardu. Relativní plocha uváděná u různých posunů ve spektrálních datech protonové NMR odpovídá počtu: vodíkových atomů jednotlivého funkčního typu v molekule. Charakter posunů jaká multiplicity je uváděn jako široký singleť (broad singlet bs), široký dublet (broad doublet bd), široký triplet (bt), široký kvartet (bq), singlet (s), multiplet (m), dublet, (d), kvartet (q), triplet (t), dublet dubletů (dd), dublet tripletů (dt) a dublet kvartetů (dq). Použitá rozpouštědla pro snímání NMR spektra jsou aceton-d^ (deuterovaný aceton), LMSO-dg (perdeuterodimethylsulfoxid), (deuterovaná voda), CDCl-j (deuterochloroform) a jiná běžná deuterovaná rozpouštědla. Popis infračerveného spektra (IR) zahrnuje pouze hodnoty absorpčních délek (cm“1), majících identifikační hodnotu pro funkční skupinú.
Celite je registrovaná ochranná známka Johns-Manville Products Corporation·! pro diatomickou hlinku.
Používané zkratky jsou zkratky široce: v oboru používané. Ngkterými z nich jsou: MS (hmotová spektrometrie),
HRMS (vysoce citlivá hmotová spektrometrie), Ac (acetyl), pH (fenyl), obj./obj. (objem/objem:), FA3 (bombardování rychlými atomy), ΝΟΒΑ (m-nitrobenzylalkohol), min (minuta(y)), λ i Γί ,,ν
-48h (hodina(y)), NIS (N-jodsukcinimid), BOC (terč.butoxykarbonyl), CBZ nebo Cbz (benzyloxykarbonyl)( Bn (benzyl), 3z (benzoyl), TES (triethylsilyl), DMSO (dimethylsuůfoxid), THF (tetrahydrofuran), HMDS (hexamethyldisilazan).
Příklady provedeni vynálezu
Příprava výchozích látek
Dále jsou uvedeny přípravy některých specifických výchozích látek vhodných pro přípravu ploučenin vzorce A.
Příprava”1 —
1O-Desacetoxypaclitaxel
a) 2',7-2-bis(2,2,2-Trichlorethoxykarbonyl)-1O-deacetyl1 O-Deacetyl-paclitaxel (140 mg, 0*173 mmol) v suchém dichlormethanu (3,5 ml) se zpracuje při 0 °C s pyridinem (0,028 ml, 0,346 mmol) a trichlorethylchlorformiátem (0,0724 ml, 0,260 mmol). Po 1 h při této teplotě se odstraní studená lázeň a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc.
1 5
-49Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se chromatografuje na silikagelu (30-50 % ethylacetát v hexanu) a získá se titulní sloučenina jako pěna (92,3 mg, 46 %)* Další elucí se získá nezreagovaný výchozí materiál (35 mg, 25 %) a 2 *, 1 O-Obis(2,2,2-trichlorethoxykarbonyl)-10-deacetylpacli taxel v 16% výtěžku.
b) 2 7-2-bis (2,2,2-Trichiorethoxykarbonyl )-1 0-desacetoxy-11,12-dihydropaclitaxel-10,12(l8)dien
I.
Produkt získaný ve stupni (a) (92,3. mg, 0,079 mmol) v suchém dichlormethanu (2 ml) se zpracuje při teplotě místnosti s 1,1,2-trifluor-2-chlortriethylaminem (0,0384 ml, 0,238 mmol). Roztok se míchá přes noc. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií (25 % ethylacetátu v hexanu) a získá se titulní sloučenina jako bílý prášek (42,8 mg, 47,3 %).
c) 10-Desacetoxy-11,12-dihydropaclitaxel-10,12(18)dien
Produkt ze stupně b) (39 cg, 0,034 mmol) se rozpustí v methanolu (0,5 ml) a kyselině octové (0,5 ml) a zpracuje se s kyselinou promytýc zinkovým prachem (66,4 mg, 1,020 mmol). Kaše se zahřeje na 40 °C na 1 h, filteuje a filtrát se odpaří'. Chromatografií zbytku 60 % ethylacetátu/hexanu se získá titulní sloučenina jako pěna (22 mg,
%). .
c) 1O-Desacetoxypaclitaxel
Produkt ze stupně c) (22 mg, 0,028 mmol) v ethylacetátu (0,7 ml) se hydrogenuje'při atmosférickém tlaku za přítomnosti palladia na uhlí (10%, 14,7 mg, 0,014 mmol Pd). Po 5,5 h při teplotě místnosti, filtraci (promytí ethylacetátem), odpaření a chromatografií (60 % ethylace-
<- < > ^,Ι'ΙΙΛ,’ G*
-50tátu v hexanu) se získá titulní produkt (15,0 mg, 68%) jako bílé pěna.
Příprava 2
7-Deoxy-7 -fluorpaclltaxel
a) 2 ‘*-<0-3enzyloxykarbonyl-7-deoxy-7c'(-fluorpaclitaxel
Diethylaminosiřičitý trifluorid (DAST, 18,7 /ul,
0,141 mmol) se rozpustí v suchém dichlormethanu (0,5 ml) a tento roztok se ochladí na 0 °C. Přidá se roztok 2'-O-(benzyloxykarbonyl)paclitaxelu (71 mg, 0,072 mmol) v dichlormethanu (1 ml) a výsledný roztok se udržuje na 0 °C po 30 min a při teplotě místnosti 4 hodiny. Potom se k reakční směsi přidá voda (0,15 ml) za účelem přerušení reakce a výsledné směs se zahustí na zbytek.- Zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu (eluce 40 % ethylacetátu v hexanu) a získá se 61 mg (výtěžek: 85,7%)
1:1 směsli Jtitulní sloučeniny a 2 *-&-be n zyloxykar bony1-8- . ...,„_ -desmethyl-7,8-cyklopropapaclitaxeIu:.
b) 7-DeOxy-7<Á-fluorpaclitaxel
Směs produktu- získaná ve stupni a) (89 mg) se rozpustí v ethylacetátu (3 ml) a směs se míchá při tlaku vodíku
-51mírně vyšším než je tlak atmosférický za přítomnosti palladia na uhlí (10% Pd, 29 mg, 0,027 mmol). Po 12 h se rozpouštědlo odstraní a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu (eluce 40 % ethylacetátu· v hexanu) a získá se 67,7 mg titulní sloučeniny spolu s 8-desmethyl7,8-cycklopropapaclitaxelem.
Dále se použije HPLC metoda pro rozdělení 7-deoxy7<Á -fluorpaclitaxelu a 8-desmethyl-7,8-cyklopropapaclitaxelu.
1,
Zařízení:
čerpadlo : PE Seriés 4 kolona: Shandon Hypercarb (grafitizovaný uhlík), 7/um,
100 x 4,6- mm, č.59864750 (informace o preparativní velikosti kolon mohou být získány o<ff Keystone Scienti-fie, Bellefonte, PA) injektor: PE ISS-100 detektor: HP-1040M
Podmínky:
mobilní fáze: 85J.1 5 methylenchlorid:hexan
Separace. neprobíhá při 80:19:1 meth.ylenchloridkhexan:isopropylalkohol průtoková rychlost: í,5 ml/min detektor: 254 nm ředění: vzorky rozpuštěny v methylenchloridu?
Příprava 3
7-Dpoxy-7^ -fluorobaccatin III 'í •52-
Do suché banky se pod inertní atmosférou vloží
-0-(benzyloxykarbon.yi)paclitaxel (4 g, 4 mmol) a suchý__ toluen (80 ml). Výsledná kaše se míchá při teplotě místnosti^ zatímco,se po kapkách.přidává-suchý tetrahydrofuran----------— (16 ml) až do vzniku bezbarvého roztoku. Výše uvedený roztok se ochladí na -78 °C na lázni suchý led/acetorr a potom se zpracuje s diethylaminosiřihšitým trifluorideav (LAST, 1,2 ml, 2,5 ekv.). Reakční směs se míchá' 16 h a přitom se postupně ohřeje na teplotu okolf. Výsledná suspenze se filtruje a filtrát (zředěný ethylacetátem (30 ml)) se promyje nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným a pak solankou. Organická frakce se suší (MgSO^) a zahuštěním se získá surový produkt jako bílá pěna. Surový materiál se částečně čistí sloupcovou chromatografii na silikagelu· (eluce 10 % CH^CN v; CH^Clg) a získá se 1,45 g směsi 2*-0-(benzyloxykarbonyl)-7-deoxy-7cý-fluoropaclitaxelu a 2*-O-(benzyloxykarbonyl)-8-desmethyl-7,8-cyklopropapaclitaxelu (82:18 směs podle 1ff-NMR).
Výše uvedená směs (1,45 g) se vyjme do- ethylacetátu (60 ml) a zpracuje se s palladiem na uhlí (300 mg). Po 4 h třepání pod tlakem. 350 kPa vodíku, reakce se odplyní a filtruje se přes krátký sloupeček silikagelu a zahustí se. Takto se získá požadovaná směs produktu, 7-deoxy-Tx.fluoropaclitaxelu a 8-desmethyl-7,8-c.yklopropapaclitaxelu ve formě bílé pěny (1,24 g, výtěžek- 99 %, 90:10 směs
-53podle 1 Η-NMR'). Tato směs se vyjme do suchého methylenchloridu (30 ml) a zpracuje se s tetrabut.ylamoniumborohydridem (745 mg, 2,9 mmol, 2 ekv.) a míchá se pak'6 h. Reakce se pak přeruší kyselinou octovou (1 ml), zředí se dalším methylenchlorideul·. (30 ml) a promyje se nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická frakce se suší (MgSO^) a zahustí. Surová,směs substituovaného taxanového jádra se částečně čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluce 10% CH^CN v CHgC^) se získá 90:10 směs (stanoveno podle ^Η,-NMR) 7-deoxy-7<X. i.
fluorobaccatinu III a 8-desmethyl-7,8-cyklopropabaccatinu III (510 mg, 60 %) jako bílá pěna. Výsledná pěna se krystaluje z horkého isopropanolu a získá se 7-deox,y-?\fluorobaccatinu III (jako malých bílých jehliček (výtěžek 410 mg), t.t. 234 až 236 °C (rozklad).
Příprava 4 ,
0-Desacetoxy-7-deoxy-7c<-fluoropaclitaxel
a) 2*-O-Qenzyloxykarbonyl-10-desacetoxypaclitaxel
10-DesacetoxypaclitaxeI (27 mg, θ>θ34 mmol) v dichlormethanu (1 ml) se zpracuje s benzylchlorf ormiátem(0,0146 ml, 0,102 mmol) a pak s diisopropylethylaminem (0,0177 ml, 0,102 mmol). Reakční směs se míchá při 0 C 45
min a při teplotě místnosti 12 h. Odpařením rozpouštědla a chromatografií na silikagelu (eluce 40 % ethylacetátu v hexanu) se získá 25,5 mg (výtěžek 81 %) titulní sloučeniny jako pěny.
b) 1O-Desacetoxy-T-deoxy-TiK -fluoropaclitaxel _____ Produkt získaný ve stupni (a) (25,9 mg> θ»θ28 mmol)__ v dichlormethanu (Ο,θ ml) při 0 ®'C se zpracuje s DAST (0,0071 ml, 0,055 mmol). Po 45 min při 0 °C se reakce nechá probíhat 5 h při teplotě místnosti. Odpařením rozpouštědla a chromatografií se získá 2'-O-benzyloxykarbonyl-7-deoxyΤ’ -fluoropaclitaxel jako surová pěna. Tato sloučenina se rozpustí v ethylacetátu (1 ml) a míchá se pod tlakem _ vodíku mírně zvýšeným nad jednu atmosféru za přítomnosti palladia na uhlí (10 %, 8,9 mg) po 12 h při teplotě místnosti. Katalyzátor se odstraní filtrací a chromatografií produktu na silikagelu se získá 10 mg (výtěžek: 40 % ve dvou stupních) titulního produktu jako pěny.
Příprava 5
10-Deacetyl-7-deoxy-7 -fluoropaclitaxel
Roztok 2 , 10-O-bis(2,2,2-trichlorethoxykarbonyl)-10-55deacetylpaclitaxelu (120 mg, 0,103 mmol) v dichlormethanu (2 ml) se ochladí na 0 °C a zpracuje se s DAST (0,0266 ml, 0,207 mmol).. Roztok se míchá při 0 °C 30 min a při t.m. 4 h. Reakce se přeruší přídavkem vody (0,05 ml). Reakční směs se zahustí a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu (eluce 30 % ethylacetátu v hexanu) a získá se 81 mg (výt.: 68%) 2',1O-O-bis(2,2,2-trichlorethoxykarbonyl)7-deoxy-7o( -fluoropaclitaxelu jako pěny. Tato sloučenina (63 mg, 0,054 mmol) se rozpustí v methanolu (0,5 ml) a kyselině octové (0,5 ml) a zpracuje se se zinkovým prachem (104 mg, 1,62 mmol) po 90 min při 45 σ0. Reakční směs se filtruje a filtrát se zahustí. Sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluce 40 % hexanu a 60 % ethylacetátui) zbytku se získá 38 mg (výtěžek: 86 %) titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
Příprava &
7-Deoxybaccatin III
a) 7-O-/(Methylthio)thiokarbonyl/baccatin III
Baccatin III (750 mg, 1,278 mmol) se rozpustí v suchém tetrahydrofuranu (20 ml) a imidazolu (8,7 mg, 0,128 mmol) se přidá najednou. Hydrid sodný (50% v minerálním oleji,
®g, 1,597 mmol) se přidá při teplotě místnosti. Po té, co se přestane vyvíjet plyn (10 min) se najednou přidá si- * rouhlík (4,6 ml). Po 3. h při teplotě místnosti se žlutý roztok zpracuje s methyljodidem (0,23θ al, 3,835 mmol) a míchá se přes.noc. Vyjme se do ethylacetátu a vody a získá se titulní sloučenina jako surový olej. s
Alternativní postup: _____ *
Baccatin III (394 mg, 0,672 mmol) se rozpustí v tetrahydrofuranu (5 ml) a sirouhlíku (1^ ml). K tomuto roztoku se přidá hydrid sočný (40,3 mg, 60 %, 1,009 mmol).
Také se přidá katalytické množství imidazolu.Reakční směs se míchá při teplotě jnístnosti 1 ,5 h a potom se přidá methyljodid (122,8 /Ul, 2,016 mmol). Po 40 min se odstraní ve vakuu rozpouštědlo a zbytek se chromatografuje na silikagelu (eluce 20 % - 50 % - 60 % ethylacetátu v hexanech) se získá titulní produkt (260 mg, výtěžek: 57,2 %) spolu se 7-epi baccatinem (98,5- mg, 25 %). . * .
b) 7-O-/(Methylthio)thiokarbonyl/-13-O-triethylsilylbaccatin III
Produkt ze stupně a) jako surový olej se rozpustí v suchém dimethylformamidu' (5 ml) a zpracuje se s imidazolem (870 mg, 12,78 mmol) a triethylsilylchloridem (2,10 ml, 12,78 mmol) při teplotě místnosti. 15 h. Po přídavku vody se provede extrakce do ethylacetátu. Organická vrstva se promyje intenzivně vodou a potom se suší. Rychlou chromatografií na silikagelu (eluce 20 % ethýlacěťátu“vhe- xanech) se získá titulní sloučenina jako sklovitá pevná látka (výtěžek: 209 mg, 20% výtěžek ve dvou stupních).
-57Alternativní postup:
Produkt ze stupně a) (193,4 mg, 0,286 mmol) se rozpustí v suchém dimethylformamidu (2,86 ml). K tomuto roztoku se přidá imidazol (77,9 mg, 1,14 mmol) a potom triethylsilylchlorid (192 /ul, 1,14 mmol). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Po 12 h se reakční směs zředí ethylacetátem (150 ml). Organická vrstva se promyje vodou ( 3 x 10 ml) a solankou (1 x 10 ml), suší a zahustí se ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu (eluce 20 % ethylacetátu v hexanech) a získá se titulní produkt (163 mg, výtěžek: 72,0 %).
c<) 7-^gOxy-13-O-triethylsilylbaccatin III
Produkt ze stupně b) (182 mg, 0,230 mmol) v suchém benzenu (5 ml) se zahřívá na 80 °C za přítomnosti tributy1cínhydridu (0,3Í0 ml,' 1,150 mmol) a 2,2'-azobisisobutyronitril (AIBIT, 10 mg). Po 3 h se roztok nechá vychladnout a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu.. Chromatografií zbytku na silikagelu (eluce 20 % ethylacétátu v hexanu)
- se získá titulní sloučenina jako olej'.
ď) 7-Dgoxybaccatin III
Produkt ze stupně c) se rozpustí v tetrahydrofuranu ' (5 ml) a zpracuje se s,tetrabutylamoniumfluoridem (1M y * tetrahydrofuranu, 0,50 ml, 0,50 mmol) po 2 h při teplotě místnosti. Zředěním ethylacetátem a promyťím vodou a solankou s následující chromatografií na silikagelu (eluce 1:1 ethylacetátem/hexanem) se získá titulní sloučenina jako bílá sklovitá pevná látka (63 mg, výtěžek: 58 % ve dvou stupních·).
-58Příprava 7
1O-Desacetoxybaccatin III
a) 1O-Deacetyl-10-0-(fentafluorfenoxy)thiokarbony1-7-0triethylsi-lylbaccatinIII----------------......— ------.----.
7-0-Triethylsily1-1O-deacetylbaccatin III ,(viz Greene a kol., J.Am.Chem.Soc., 110, str. 5917, 1988)(319 mg,
0,485 mmol) se rozpustí v suchém tetrahydrofuranu (5 ml), ochladí se na -40 °C a zpracuje se s n-butyllithiem, 0,384 ml, 0,606 mmol). Po 40 min při této teplotě se stříkačkou přidá pentafluorfenylchlorthionoformiát (0,086 ml, 0,536· mmol). •Reakční směs se míchá při -20 °C po 90 min, přeruší se nasyceným roztokem chloridu amonného a extrahuje se ethylacetátem. Ethylacetátová vrstva se suší a zahustí. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu (eluce 40 % ethylacetátu v hexanu) a získá se titulní sloučenina jako pěna (320 mg, výtěžek: 74 %)·
b) . 10—Dg sace.t oxy- 7-0-1r i e thy 1 s i ly 1 ba c c a t i n III ________________
Produkt ze stupně a) (119 mg, 0,135 mmol) se rozoustí v suchém toluenu (3 ml) a zpracuje se s AISN (2 mg). Roztok se odplyní suchým dusíkem·, a potom se přidá tributylcínhydrid (0,055 ml, 0,202 mmol). Potom se roztok zahřeje na 9° °C na 1 h. Rozpouštědlo se pak odpaří a silikagelovou chroma
-59tografií zbytku (eluce 40 % ethylacetátu v hexanu) se získá titulní sloučenina (87 eg, výtěžek 99 %) jako bezbarvé pěny.
c) 1O-Desacetoxybaccatin III
Produkt zě stupně b) (120 mg, 0,187 mmol) se rozpustí v acetonitrilu (3,5 ml) a roztok se ochladí na -10 °C. Přidá se koncentrovaná HC1 (36%, 0,060 ml) a roztok se míchá po 30 min. Směs se zředí ethylacetátem (75 ml) a promyje se nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným ΐι a solankou, potom se suší a zahustí. Zbytek se čistí rychlou chromatografií na silikagelu; (eluce 70 % ethylacetátu v hexanu) a získá se 10-deacetyloxybaccatin III jako pšna (75 mg, výtěžek: 76 %).
Příprava 8
10-Desacetoxy-7-deoxybaccatin III
PhC(O)O
a) 7-0-/(Methylthio)thiokarbonyl/-10-desacetoaybáccátih III
1O-Desacetoxybaccatira III (75 mg, 0,142 mmol) se rozpustí v suchém tetrahydrofuranu (2 ml) a sirouhlíku (0,5· ml). Potom se přidá hydrid sodný (60% v minerálním oleji, 8,5 mg, 0,213 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti 2 h.
-60Pridá se jodmethan (0,026 al, 0,426 mmol) a reakce probíhá přes noc. Rozpouštědlo se pak odstraní a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu (eluce 50-70 % ethylacetátu v hexanu) a získá se titulní sloučenina jako pěna (46,4 mg, výtěžek: 53 .
b) 1 0-Desacetoxy,-7-deoxy-baccatin III
Produkt ze stupně a) (36 mg, 0,058 mmol) se refluxuje v benzenu (1 ml) za přítomnosti ΑΙΞΝ,. (2 mg) a tributylcínhydridu (0,079 ml, 0,290 mmol) pod atmosférou argonu po 3 h. Zahuštěním reakční směsi a rychlou chromatografií na silikagelu zbytku (eluce 40 % ethylacetátu v hexanech) s následující HPLC (vysokotlaková kapalinová chromatografie)dělením od jiných složek se získá titulní sloučenina jako pěna (16,8 mg, výtěžek: 56 %)·
Alternativní postup:
K roztoku 7-0-/(methylthio)karbonothioyl/-13-Ó-triethylsil.ylbaccatinu III (produkt z přípravy I, stupen b),
416,3 mg, 0,527 mmol) v suchém toluenu· (10,5- ml) se přidá katalytické množství AI3N a výsledný roztok se odplyní suchýn dusíkem po 5 min. Potom se přidá tributylcínhydrid (708,7 /ul, 2,63 mmol) a reakční směs se zahřeje na 100 °C na 2 hodiny a pak se přidá další podíl tributylcínhydridu (425,3 /Ul, 1,581 mmol). Reakční směs se zahřívá po 5,5 h na 100 °C a potom se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Chromatografií na silikagelu- (eluce 20 % ethylacetátu v hexanech se získá 7-deoxy-10-desacetoxy-13-O—(triethylsilyl)baccatin III (320 mg, výtěžek: 97 %)·
K roztoku produktu z výše uvedeného stupně (160 mg, 0,255 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (2 ml) při teplotě místnosti se přidá tetrabutylamoniumfluorid (766·/ul, 1 M,
.-62-..
Příprava 10 (+)-cis-3-Acetyloxy-4-fenylazetidin-2-on
CH3C(O)Oy Ph
-NH
a) Do 1litrové tříhrdlé banky s kulatým dnem, opatřené' teploměrem, magnetickým míchadlem a kapací nálevkou se vloží hydrobenzamid (30,00 g, 100,5 mmolb a ethylacetát
----(4 50-ml·)-.—^a—mí chání—a—poď^argonemuse, reakžni směs ochla-_ dí na 5 °O a přidá se triethylamin (16,8 ml, 121 mmol)· ~ Potom še~při'kape”během' 90“min - roztok- acetoxyacet.ylchlo---------------ridu (12,4 ml, llďmmol) v ethylacetátu (300 ml). Po 16 h při tát© teplotě se reakční směs nechá ohřát na 20 °C (1,5 h) a přenese se do dělící nálevky. Organická vrstva se postupně promyje vodným chlrodem amonným (nas.) (150 ml, 100 ml), vodným hydrogenuhličitanem sodným (nasycený) (120 ml) a solankou (120 ml). Za účelem charakterizace může být titulní sloučenina izolována v tomto stupni sušením organické fáze nad síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla ve vakuu. Získá se (+)-cis-3-acetyloxy-1/(fenyl) (benzylideraimino)methyl/-4-fenylazetidin-2-on ve kvantitativním surovém výtěžku jako červené sklo.
b) Roztok sloučeniny získané v části a) v ethylacetátu (500 ml) se pečlivě přenese, pod proudem argonu, do 2,0 litv
- -rováParrovy^banky,^obsahující __10% .palladium na aktivním: __ uhlí (6,00 g). Tato směs se zpracuje s vodíkem (0,4 MPa) po 20 h^Potom se katalyzátor odstraní' filtrací přes sloupeček Celitu. Filtrační koláč se rozmíchá v ethylacetátu (200 ml), míchá se (10 min) a filtruje. Filtrační koláč se promyje ethylacetátem (100 ml) a filtráty se spojí.
Organická vrstva se promyje 10% HC1 (300 ml) a obě vrstvy li
-63se filtrují přes sintrovanou skleněnou nálevku’ pro odstranění bílé sraženiny (dibenzylamin.HCl), která se promyje ethylacetátem (100 ml). Fáze se oddělí a organická vrstva se promyje dalším podílem 10% HCl (200 ml). Spojené 10% HCl promývací podíly se znovu extrahují ethylacetátem (200 ml) a spojené organické vrstvy se promyjí vodným hydrogenuhliěitanem sodným (nasyceným)(300 ml) a solankou (250 ml). Organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým, filtruje a zahuštěním ve vakuu se získá konečný objem 75 ml. Tato směs se ochladí na 4 a vysrážený produkt se izoluje filtrací'. Filtrační koláč se promyje hexanem (200 <1 ml a získá se 16,12 g (78,1 % celkový výtěžek hydrobenzamidu) titulní sloučenina jako bílých jehliček. t.t.= 150 až 151 °C.
Příprava 11 (+)-cis-3-Triethylsilyloxy-4-(2-furyl)-N-terc.butoxykarbony lazetidin-2 -on
a) Provede se postup popsaný v přípravě 10, část a) a tím rozdílem, že se použije? hydrofuramid /tj. 2-furyl-CH-(N=ÓH-2-furyl)^/ místo hydrobenzamidu a reakce se provede s 18,6 mmol (vs 100 mmol). Takto hydrofuramid (5,00 g, 18,6 mmol), triethylamin (3,11 ml, 22,3 mmol) a acetoxychlorid (2,30 ml, 21,4 mmol) se získá 6,192 g (výtěžek: 90,4 %) (+)-cis-3-acetyloxy-1-/(2-furyl) (2-f ur.ylmethylenimino )methyl/-4-(2-furyl)azetidin-2-onu jako světle žlutého sirupu.
-64b) Postupuje se podle Přípravy 10, část b) s tím rozdílem, že se produkt izoluje preparativní TLC a reakce se provede v měřítku 2,? mmol vzhledem; k původnímu množství hydrofuramidu. Získaný surový produkt v části a) výše se znovu rozpustí v ethylacetátu-(50*ml) a přidá se k 10% palladiu na aktivním uhlí' (150 mg). Čištěním surové pevné látky preparativní TLC (2 mm silikagel, eluce 1:1 _ethylacetátem/hexanem)se získá 386 mg (65,-%-korigo-——— váného celkového výtěžku z hydrofuramidu) (+.)-cis-3-(acetyloxy)-4-(2-furyl)azetidin-2-onu'jako žluté pevné látky. Tento se rekrystaluje z ethylac&tátu/hexanu. t.t. 118 až 119 °C.
________—c )_Sloučenina -získaná-v Části -b) - výše- (3,78 gi -1 9,4 mmol) - - v 60 ml methanolu se míchá s K^COj (20 mg, 0,14 mmol) 90 min a roztok se neutralizuje Dowexem 50W-X8 a filtruje. Filtrát se zahustí a zbytek se rozpustí v 80 ml bezvodého THF a míchá se při 0 °'C s imidazolem (1 ,44 g, 21 ,2 mmol) a TESC1 (3,4 ml, 20,2 mmol) po 30 minut'. Roztok se zředí ethylacetátem; a promyje se solankou, suší nad síranem horečnatýgu a zahustí se. Zbytek se chromatografuje přes silikagel (eluce 3:1 hexan/ethylacetát) a získá se 4,47 g (výtěžek: 86%) (+)-cis-3-triethylsilyloxy-4-(2-furyl)azetidin-2-on jako bezbarvý olej'.
d) Produkt z části c) (2,05 g, 7,7 mmol) ve 30 ml dichlormethanu se míchá při 0 °C s diisopropylethylaminem (1,5 ml, 8,6 mmol) a di-terc.butyl-dikarbonátem (2,0 g, 9,2 ____ mmol) navíc: ke katalytickému množství_dime.thylaminopyrídi- —.
nu (DMAP). Roztok se zředí dichlormethanem a promyje se solankou, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí'. Zbytek se chromatografuje přes silikagel (eluce 8:1 hexanem/ethylacetátem) a získá se 2,0 (výtěžek 70 %) titulní sloučeniny jako voskovité pevné látky.
-65Racemická směs získaná v částí b) může být použita jako substrát pro enzymatickou hydrolýzu? využívající lipásu jako je PS-30 Pseudomonas sp. (Amano International Co.) a získá se (3R,4R)-3-hydroxy-4-(2-furyl)-azetidi2-on. Metoda enzymatické' resoluce'·, využívající lipasu PD-30 a jiné enzymy je popsána v naší související přihlášce U.S.S.N. 092170, podané 14.července 1993, která je zde celá zahrnuta jak® odkaz.
Postupuje se podle postupů v částech c) a d) za použití (3R,4R)-3”hydroxy-4-(2-furyl)-azetidin-2-onu? za vzniku (3R,4R)-N-(terč.butoxykarbonyl)-3-triethylsilyloxy4-(2-furyl)azetidin-2-onu.
Příprava 12 (+)-cis-3-^riethylsilyloxy-4-(2-thienyl)-N-terc.butoxykarbonylazetidin-2-on
λ—NBoc O
a) Postup popsaný v Přípravě 10, stupen a) se opakuje s tím rozdílem, že se použije hydrothienamid /tj. 2thien.yl-CH-(N=crr-2~thienyl)2/ míst® hydrobenzamidu. Hydrothienamid (30 g, 94,Λmmol), thiethylamin (15,θ4 ml, 114 mmol) a acetoxyacetylchlorid (11,6 ml, 108 mmol) poskytne (+)-cis-3-acetyloxy-í-/(2-thienyl)(2-trienylmethylenimino)methyl/-4-(2-thienyl)azetidin-2-on jako viskózní olej.
-66b) 70% vodný roztok kyseliny octové (0,35 ml ledové kyseliny octové a 0,15 ml vody) se přidá najednou k míchanému roztoku produktu získaného v části a) (.431 g, 1,03 mmol) v dichlormethanu (2,93. ml) při 25 °C. Reakční směs se přivede k refluxu? a míchá se 2,5 h. Reakce se zředí 50 ml dichlormethanu a potom se promyje? dvěma 75ml podíly nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a potom jednou 50 ml podílem nasycené solanky. Organický extrakt se 2^5^ ve vajj.uu na hng(3ý olej, rozpustí' v minimálním množství dichlormethanu a potom se umísti na silikagelovou kolonu o rozměrech 4‘ na 0,5“. ^Eluce se provádí za použití gradientu? 10 až 60% EtOAc v hexanu a získají
---se méně-pOlární~vedlejší produkty a potom (^)^císL3acet.yloxy-4-(2-thienyl)azetidin-2-©n (0,154 g, výtěžek:
- 75 %) jako bílá pevná látka.
c) Roztok produktu získaného v části b) (2,5 g, 11,8 mmol) se rozpustí v methanolu (10 ml) a zpracuje se s nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným (10 ml) a výsledná kaše se míchá při teplotě okolí 3 hodiny. Reakční směs se pak zředí' ethylacetátem (20 ml) a promyje se vodou (15 ml). Vodné frakce se opět extrahují několikrát ethylacetátem a spojené organické frakce se suší (síran hořečnatý) a zahustí. Získá se žlutá pevná látka (výtěžek:
1,7 g). Surový materiál se rozpustí v suchém tetrahydrofuranu (20 ml) a roztok se ochladí na 5 °C na lázni led/voda. Potom se přidá imidazol (752 mg, 1,1 ekv.). Po 5 minutách míchání se přikape triethylchlorsilan (1,85 ml, 1,1 ekv.). Výsledná suspenze se pomalu 3 hodiny míchá _ -přx—téže““teplotě? potom šé“pevně látky“odstraní filťřalííT^ Organická frakce se promyje vodou (2 x 20 ml), potom se suší (síran hořečnatý) a zahustí. Surový produkt se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluce hexany/ethylacetátem 7:3) a získá se (+)-cis-3-triethyIsilyloxy-4(2-thienyl )-azetidin-2-on jako bezbarvá pevná látka (1,5 g, výtěžek: 45 %), t.t. 70 až 71 C. ,.
-67Alternativní postupί
Produkt získaný v části b) (2,0 g, 9,37 mmol) ve 40 ml methanolu se míchá s uhličitanem draselným (60 mg, 0,43 mmol) 30 min a roztok se neutralizuje Dowexem 50W-X8 a filtruje. Filtrát se zahustí a zbytek se rozpustí v 50 ml bezvodého THF a míchá se při 0 °C s imidazolem (0,85 g, 11,3 mmol) a TESC1 (1,9 ml, 12,5 mmol) 30 min. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se solankou, suší se vs* nad síranem hořečnátým a zahustí. Zbytek se chromatografuje na silikagelu (eluce 3?1.hexan/etfyylacetát) a získá se 2,13- g (výtěžek 86 %) titulního produktu jako bezbarvého oleje.
Λ.
d) Roztok produktu získaného v části c) (425,7 mg, 1,48 mmol) se rozpustí v dichlormethanu (10 ml) a ochladí se na 5 °C na lázni led/voda. Reakce se pak zpracuje s katalytickým množstvím DMAP a pak s diisopropylethylaminem (TESC1, 0,25; ml, 1,0 ekv.) a potom s di-terč.butyl-dikarbonátem (388,4 mg, 1,2 ekv.)- Po 2 h míchání při téže teplotě se reakce přeruší nasyceným vodným hydrogenuhličitanem; sodným (5 ml) a organická fáze se promyje vodou (5 ml), potom se suší (síran hořečnatý), nechá se projít přes krátký sloupeček silikagelu a zahuštěním se získá požadovaný produkt jako bezbarvý olej (525,3 mg, výtěžek: 93 %)·
Příprava 13 (3R,4R)-3-Triethylsilyloxy-4-(2-furyl)-N-n-butyloxykarbonylazetidin-2-on
o
-68(3R,4R)-3-Triethylsilyloxy-4-(2-furyl)azetidin-2-on (0,58 g, 2,17 mmol) ve 30 ml dichlormethanu se míchá s diisopropylethylaminem (0,4 ml, 2,30 mmol) a butylchlorforraiótem· (0,3 ml, 2,36 mmol) navíc.' ke katalytickému množství DMAP'. Roztok se míchá 1 h a zředí se dichlormethanem a prómyjé se solankou, suší nad síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek se chromatografuje přes silikagel (eluce 3:1 hexan/ethylacetát) a získá se 523 mg produktu (výtěžekr65 IR(K8r)1820, 1734, —1318, 1018, 734 cm'1; 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) 0 7.38 (m, 1H) , 6.35 (m, 2H) , 5.09 (ABq, J=15.?,5, 5.6 Hz, 2H) ,
4.14 (m, 2H), 1.56 (m, 2H) , 1.28 (s, 2H), 0.87 (t,
J=8v7-ΗΖΤ-3Ή)V~0782—(t7~J=7T97~ 9Ή) , 0.50—(m7“5H) ; nCNMR (CDClj, 75.5 Hz) δ 165.4, 149.1, 147.6, 142.9, _ _
T10.5? ÍÓ¥.97’?T.7, “66.6? 55~9? 30Ϊ5,’ΐδ.Έ? 1376, 6.3,
4,2-ř DCIMS M+íl vypočt. pro ^g^gNO^Si:368, nalezeno 368.
Příprava 14 (3R,4R)-3r-Triethylsilyloxy-4-(2-furyl)-N-isopropyloxykarbonylazetidin-2-on
(3R,4R)-3-Trieťhylsilyloxy-4-(2-furyl)azetidin-2-on (0,51 g, 1,91 mmol) ve 25 mí dichlormethanu se míchá s diisopropylethylaminem (0,78 ml, 4,4 mmol) a iso-propylchlorformiátenv (4,0 ml, 1,0 M v toluenu, 4,0 mml) navíc ke katalytickému množství DMAP. Roztok se míchá 1 h a zředí se dichlormethanem a promyje se solankou, suší se nad síranem horečnatým a zahustí. Zbytek se chromatografuje přes silikagel (eluce 5:1 hexan/ethylacetát) a získá se
-69649 mg titulní sloučeniny (výtěžek 96 %);
..... IR(KBr) 1822, 1812, 1716, 1374,
1314, 1186, 1018, 1004, 746 cm’1 ; ^-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7.39 (m, 1H), 6.35 (m, 2H), 5.08 (ABq, J=15.6,
5.6 Hz, 2H), 4.96 (d, J=10.0 Hz, 1H), 1.25 (d, J=6.3 Hz, 3H), 1.17 (d, J=6.3 Hz, 3H) ) , 0.83 (t, J=7.8, 9H), 0.50 (m, 6H); 13C-NMR (CDC13, 75.5 Hz) δ 165.5, 148.6,
147.8, 142.9, 110.5, 109.9, 77.6, 71.1, 55.9, 21.7,
21.6, 6.3, 4.4; DCIMS M+H vyp-.pro.·:. CnH28NO5Si: 354, nalezeno 354.
• í,
Příprava 15 (+)-cis-3-Triethylsilyloxy-4-isobutenyl-N-terc.butoxykarbonylazetidin-2-on
a) N-4-Methoxy-N- (3-methyl-2-butenyl) benzenamin
Roztok p-anisidinu (5,7 g, 46,3. mmol) se rozpustí v diethyletheru (100 ml) a zpracuje se s katalytickým množstvím kyseliny p-toluensulfonové (10 mg)- K tomuto roztoku se přidá 3-methyl-2-butenal (2,67 ml, 50,9 mmol) najednou a reakce se míchá při teplotě okolí 16 h. Rozpouštědlo se pak odpaří na rotační odparce při 0,5 torr a získá se požadovaný imin (8,7 g, 100 %) jako hnědý olej;
88βΒβ
-701H NMR 300 MHz, CDCl-j): š 8,38 (d, 1H, J=9,5
Hz), 7.11 (dd, 2H, J= 2.2, 6.7 Hz), 6.88 (dd, 2H, J=
2.2, 6.7 Hz), 6.22-6.18 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.01 (S, 3H), 1.95 (s, 3H) .
b) (+)-cis-N-(4-Methoxyfenyl)-3-acetyloxy-4-isobutenyl-
Roztok acetoxyacetylchloridu? (b,9 g, 50,5' mmol) se rozpustí v ethylacetátu (100 ml) a ochladí se na -30 °C pod inertní atmosférou. K tomuto roztoku se přidá triethylamin (7,0 ml, 50,5 mmol) během 5 minut. Výsledné bílá kaše se pak zpracuje s roztokem ethylacetétavým N-4-methoxy-N-(3-methyl-2-butenyl)benzenaminu (8,7 g, 40 ml) po kapkách během 20 min. Výsledná zelenohnědá kaše se pak postupně nechá ohřát, na teplotu okolí během 4 h.. 4-aše se pak filtruje přes sloupeček celitu a filtrát se promyje vodou a pak solankou. Organická frakce se suší (síran hořečnatý) a zahustí na hnědý olej. Surový produkt se pečlivě čistí silikagelovou chromatografií (eluce hexany/ethylacetátem 8:2) a získá se oranžový olej, který stáním tuhne. Tento se rekrystaluje z dichlormethariu/hexanů a získá se požadovaný produkt; jako světle žlutá pevné látka (4,4 g, 32 %); NMR (300 MHz, CDClj) : δ 7.32 (d, 2H, J= 9.1Hz), 6.86 (d,
2H, J= 9.1 Hz), 5.59 (dd, 1H, J= 3.0, 7.8 Hz), 5.145.10 (m, 1H), 4.96 (dd, 1H, J= 4.8, 9.3 Hz), 3.77 (s,
3H), 2.11 (s, 3H,), 1.81 (s, 3H), 1.78 (s, 3H).
- Λ v \
-71c) (+)-cis-3-Acetyloxy-4-isobutenylazetidin-2-on
AcO,
Z“N
Ό H
Roztok (+)-cis-N-(4-methoxyfenyl)-3-acetyloxy-4isobutenylazetidin-2-on (4,θ8 g, 16,2 mmol) se rozpustí v acetonitrilu /50 ml) a ochladí na 0 až 5 °C na ledové lázni. Přidá se studený roztok dusičnanu ceritoamonného (26,6 g, 48,6. mmol, 50 ml) najednou. Tnpavě červené reakční směs se míchá 10 min a během této doby se barva postupně mění na světle oranžovou. Studený roztok se převede do dělící nálevky, zředí se vodou a extrahuje ethylacetátem. Organická frakce se několikrát promyje 10% vodným siřičitanem sodným, potom nasyceným vodným hydrogenuhličitanenr. Organická frakce se suší (síran hořečnatý) a zahuštěním se získá požadovaný produkt (2,71 g, 91 %) jako oranžová pevná látka, která se v dalším stupni použije přímo, 1H NMR (300 MHz,
CDC13) : fi 6.11 (bs, 1H), 5.73 (dd, 1H, J= 2.2, 4.7 Hz), 5.12-5.08 (m, 1H), 4.63 (dd, 1H,’4.7, 9.1 Hz),
2.09 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.67 (s, 3H).
d) (+)-cis-3-^TÍethylsilyloxy-4-isobutenylazetidin-2-on
1. t ys
-72(+)-cis-3-Acetyloxy-4-isobutenylazetidin-2-on (1,47 g, 8,0 mmol) se rozpustí v methanolu (15 ml) a míchá se s uhličitanem draselným (110,5 mg, 0,8 mmol) po 3 h při teplotě místnosti. Roztok se pak neutralizuje Dowexem 50W-X8 pryskyřicí a pak se filtruje. Filtrát se zahustí a surová pevná látka se rozpusti v THF (25 ml) a ochladí se na 5 °C na ledové lázni. Přidá se imidazol (544,0 mg, 8,0 mmol) a po rozpuštění se po kapkách stříkačkou
--př^á^ťriďthyrsT^lalťrffríd“(1f34mly~8,Qrmmol·) ^Výsledná““ kaše se nechá ohřát na teplotu místnosti, a míchá se přes noc. Roztok se zfiltruje a filtrát se promyje vodou, í
potom solankou. Organická frakce se suší (síran hořeč---natý) a zahustí .—SuFová—pevná—látka—se—čistí—GhFomato-grafií na silikagelu (eluce hexany/ethylacetátem 3:1) a získá' se~požadovaný-produkt '(612“mgy 30 %)' jako ' světle žlutá pevná látka; iH (3Oo MHz, CDC13) : δ 5.87 (bs,
1H), 5.31-5.26 (m,' !H), 4.90 (dd, 1H, J= 2.2, 4.7 Hz),
4.42 (dd, 1H, J= 4.7, 9.3 Hz), 1.74 (s, 3H), 1.28 (s,
3H), 0.98-0.91 (m, 9H), 0.71-0.55 (m, 6H) .
e ) (+)-cis-3-Triethylsilyloxy-4-is obutenyl-N-terč.butoxykar bonylazetidin-2-on
-73(+)-cis-3“Triethylsilyloxy-4-isobutenylazetidin2-on /1,01 g, 3,95 mmol) se rozpustí w dichlormethanu) (20 ml) a zpracuje se s diisopropylethylaminem (0,68 mlř
3,95 mmol) a katalytickým množstvím dimethylaminopyrldilnu. K tomuto; roztoku se přidá di-terc..butyldikarbonát (1,02 g, 4,68' mmol) a roztok se míchá 24 h při teplotě okolí. Roztok se pak zředí dalším dichlormethanem a promyje se vodou a potom solankou- Organická frakce se suší (síran hořečnatý?) a zahustí, úbytek se čistí chromatografií na silikagelu) (eluce hexany/ethylacetátem 8:2) a získá se požadovaný produkt (1 ,26 g, ^0 %) jako bezbarvý oleji; ]HNMR (300 MHz, CDCl^): #5,241 (d, 1H, J= 9.6 Hz), 4.86 (d, 1H, J= 5.7 Hz), 4.72 (dd,
1H, J= 6.0, 9.9Hz), 1.78 (d, 3H, J= 1,1 Hz), 1.75 (d,.
3H, J= 1.1 Hz), 1.47 (s, 9H), 0.96-0.91 (m, 9H) , 0.640.55 (m, 6H).
Postup popsaný výše v Přípravách 9, 1l(ď), I2(d),
13, 14a 15(e) může být upraven pro přípravu jiných N-substituovaných azetidinonů vhodných pro přípravu sloučenin podle vynálezu.
Příklady takových azetidinonů jsou uvedeny v následující tabulce? P dále je chránící skupina hydroxyskupiny jako je triethylsilyl, triisopropylsilyl a ethoxyethyl.
+ R4(O)pC(O)-L τ-7*Z5
(O)pR4
L R4(0)p Rs
Cl Ph 4-CH3O-Ph- 3,^diCH3O-Ph- Ph-
- 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyl- 2-thienyl- PhCH=CH- 2-furanyl-CH=CH- • (CH3)2CHCH2. CeH„-CH2- (CH3)2CH- PhCH2CH2- CeHn-Cb^CHj- CH3CH2CH2- 4-CI-Ph 2- F-Ph 3- F-Ph 4-CH3-Ph (CH3)2C=CH
’ < a ·* ť »<, W'
L n4(0)p Rs
ci 4-CH30-Ph- 3,4-diCH3O-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyl- PhCH=CH- (CH3)2CHCH2- C6Hn-CH2, PhCH2CH2-
(CH3)3COCO2- (CH3)3CO- 4-CH3O-Ph4-F-Ph4-CF3-Pht PhCH=CH- (CH3)2CH- PhCH2CH2- CeH„-CH2CH2- ch3ch2ch2-
Cl ch3- 4-CH3O-Ph- Ph- 4-F-Ph- 2-furanyl· 2-furanyl-CH=CH- PhCH2CH2- CgH^-CHjCH^ CH3CH2CH2-
Příprava 16. 10-deoxytaxotere
-7610—Desacetoxy—7—O—triethylsilylbaccatin III (100 mg, 0,156 mmol) se umístí do nádoby pod argonem a rozpustí se v suchém tetrahydroduranu (1,5 ml). Po ochlazení na -40 °C se přikape Uf-butyllithium (1,45 M v hexanech·, 0,119 ml'., 0,170 mmol) a potom (3R,4S)-1-terc.butoxykarbo^ nyl-4-fenyl-3-trIethylsilyloxy-2-azetidínon (94,2 mg,
0,25 mmol) v tetrahydrof uranu1. (0,5 ml) během 2 min- Směs se ihned ohřeje na 0 a míchá ser 45 minut před přeruše—rtínr reakce nasycéňým vodnýmΓ chloridemůamonným (3 ml)..
Síněs se extrahuje ethylacetátem, suší a zahustí. Cferomatografií na silikagelu se získá (eluce 30% ethylacetátu; v hexanu) 10-deoxy-2*,7-bís-O-(triethylsilyl)taxotere —jako pěna (125 mg, výtěžek 76 %). Tato sloučenina (100 mg, 0,098 mmol) se ihned rozpustí v acetonitrilu (2 ml) při; ^5 °C a zpracuje ”aé~s' kyselinou chlorovodíkovou? (0,037 ml, 36 %, 12M)- Směs se míchá 2 h při -5 °'C·, potom se rozruší vodným hydrogenuhličitanem, extrahuje se ethylacetátem a suší- Odpařením rozpouštědla a chromatografií na silikagelu^ (eluce 75% ethylacetátu v hexanu) se získá titulní sloučenina jak© pěna (80,5 g, výtěžek 80 %)Obecný postup popsaný v přípravě 16 může být upraven na přípravu jiných sloučenin vzorce la tak, že se vychází ze vhodná baccatin III složky a azetidinonové složkyPříklady jiných sloučenin vzorce la jsou uvedeny v následující tabulce- I když dále uvedené sloučeniny jsou uváděny s volnými hydroxyskupinami, mohou být vzhledem k výběru různých hydroxy-chránících skupin, jakékoliv? ze chránících skupin vz poloze 2*-, 7- nebo 10, selektivně od··s traněny bez -ovlivnění jiných^přítomných chráníčích skupin.
R2' R2a R$a R4(O)P R|
Η OH AcO Ph 4-CH3O-Ph- 3,4-diCH3O-Ph- Ph- 4-F-Ph- 4-CFa-Ph- 2-furanyl- 2-thienyl- PhCH=CH- 2-furanyl-CH=CH- (CH3)2CHCH2- CeH„-CH2- (CH3)2CH- PhCH2CH2- CeH,,-CH2CH2- CH3CH2CH2- 4-CI-Ph 2- F-Ph 3- F-Ph 4-CH3-Ph _
R2' R2a R38 R4(0)p Rs ...... - -- -.5
H OH OH (CH3)3CO 4-CH3O-Ph- Ph 4-F-Ph- - - 4-CF3-Ph- -· · - - 2-furanyl2-thienylPhCH=CH-
c6h„-ch2- (CH3)2CH- 1 PhCH2CH2- h
OH H Ph * 4-CH3O-Ph-
3,4-diCH3O-Ph- 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyl- 2-thienyl- PhCH=CH- 2-furanyl-CH=CH- (CH3)2CHCH2- c6h„-ch2- (CH3)2CH- PhCH2CH2- C6Hn-CH2CH2- CH3CH2CH2-
r2‘ R2a R3a R4(0)p Rs
H H (CH3)3CO 4-CH3O-Ph- 3,4-diCH3O-Ph' Ph- 4-F-Ph4-CF3-Ph2-furanyl2-thienylPhCH=CH2-furanyl-CH=CH(CH3)2CHCH2í CgH^-CHg (CH3)2CH- PhCH2CH2- ΟβΗ„-ΟΗ2ΟΗ2- CH3CH2CH2-
H OH AcO 2-naftiyl 4-OH-Ph 4-CH3O-Ph 4-F-Ph (CH3)3CO- ch3- (CH3)2CH- ch2=chch2- 4-CI-Ph Ph
F H AcO (CH3)3CO- Ph
F H OH ' Ph Ph
Ry r2“ R3* R4(O)P Rs »
- - - - H H AcO Ph 4-CH3O-Ph- 3,4-diCH3O-Ph- Ph- 4-F-Ph- 4-CF3-Ph- 2-furanyl- •
2-thienyl- PhCH=CH- 2-furanyl-CH=CH- (CH3),CHCH2- CeH,f-CH2- %
------- — ·—--- —----- --------------------—~ (CH3)2CH- PhCH2CH2- ČeH„-CH2CH2 ch3ch2ch2- ---.——-----—--í
Příprava 17
Bis(methylthiomethyl)ether
CH3SCH2OCH2SCH3
Jodid sodný (8,23 g, 55,23 mmol) se přidá k roztoku
1,1 -dichlordimethyletheru (3,θ g, 26,3. mmol) v acetonu (100 ml) při Q °C. a směs se míchá při této teplotě 20 min. Potom se přidá thiomethoxiď sodný (1,84 g, 5,23 mmol) ve • · -čtyřech =podί 1 ech aa výslednýroztok se míchá dalš-í“1 h. Heterogenní roztok se potom zfiltruje přes sloupeček celitu a filtrát se zahustí ve vakuu.. Zbylý olej se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu· sodného, vodná vrstva se odstraní a dále se extrahuje
.....- —--------'..r?-·-·...:—-81ethylacetátem. Spojené organické extrakty se pak zpracují s 1:1 (obj.:obj.) směsí nasyceného vodného hydrogenuhličitanu a 5% roztokem (vodným) thiosíranu sodhého. Organické podíly se pak promyjí solankou, suší se nad síranem sodným a zahuštěním ve vakuu se získá olej. Tento olej: se čistí rychlou chromatografié (30:1 ,„ hexany:ethylacetát) a získá se 1,9 g^ žlutého oleje, který se pak destiluje za použití' destilačního zařízení s kuličkou (120-130 °C, 20 mmHp.) a získá se 1,5 g (45 %) titulní sloučeniny jako bezbarvého oleje:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 4.73 (4H, s), 2.15 (6H, s) .
Příprava 18
Diibenz.y lme thyl thiome thylf osf át
CH3SCH2OP(O)(OBu)2
K roztoku bis(methylthiomethyl)etheru (30 mg, 2,34 mmol) a molekulových sít (300 mg) v THF (100 mol) při teplotě místnosti se přidá dibenzylfosfát (2,74 g, 9,85 mmol) a potom N-jodsukcinimiď1 (608 mg, 2,71 mmol) a roztok se 4 hodiny míchá- Reakční směs se pak zředí ethylacetátem a filtruje se přes sloupeček celitu. Filtrát se zpracuje s 1:1 (obj.:obj.) roztoku nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a 5% vodným thiosulfátem sodným- •‘bezbarvý organický extrakt se promyje solankou, suší se nad síranem sodným a zahuštěním ve vakuu se získá '600 mg (69 %) titulní sloučeniny:
XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.35 (10H, s) , 5.29 (2H, d,
J=12,2 Hz), 5.08 (4H, dd, J=8.0, 1.0 Hz), 4.68 (2H, s), 2.10 (3H, s).
-82Příklady
Následující příklady jsou míněny jako ilustrace syntézy reprezentativních sloučenin podle předloženého vynálezu a nejsou zamýšleny k žádnému omezení rozsahu předloženého vynálezu jakýmkoliv způsobem.' Aaždý odborník v oboru bude schopen, bez nutnosti experimentování„ provést syntézu sloučenin v rozsahu tohoto vynálezu, aniž by týt b”býlýžl3ěšpěcificky_ popsány. ~
Příklad 1
7-0-Fosfonomethylpaclitaxel a jeho mon^sodná sůl
Jenzoylperoxid (0,98 g, 4 mmol) se přidá'; k intenzivně míchané směsi paclitaxelu (0,85 g, 1 mmol) a dimethylsulfoxidu (0,72 ml, 8 mmol) v suchém acetonitrilu (10 ml) při 0 °C. V míchání se pokračuje 2,5 hodiny při 0 °C. Postup reakce se sleduje TLC na silikagelu v toluenu- ^acetonu (2:1, obj./obj.) jako rozpouštědlovém systémui (Rff tax>... ,0,3Sprod Ξ-θ,§4) a. když jepozorovéna tvorba pohyblivějších produktů, reakce se přeruší odpařením rozpouštědel. za použití zařízení Rotavapor při 30 °C. TLC analýza reakční směsi, indikuje přítomnost určitých množství nezreagovaného paclitaxelu a 2*,7-O-bis(methylthiomethyl) paclitaxelu. Oddělení titulní sloučeniny od reakční směsi bylo dosaženo rychlou chromatografií na silikagelu 60 40 až 63 /ua£) EM Science (100 ml), průměr kolony: 1 in, za
b) Příprava 7-0-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxelu
Roztok N-jodsukcinimidu (45 mg, ty,2 mM) adibenzylfosfátu (55 mg, 0,2 mM) v suchém-tetrahydrofuranu (4 ml) se přidá ke směsi. 7-O-methylthiomethylpaclitaxelu. (119 mg, θ,13 mM) a práškovaného molekulového síta 4& (asi 120 mg) v suchém 1,2-dichlorethanu (5 ml). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 16 h. Postup reakce se sleduje pomocí TLC v toluen^acetonu (2:1, obj./otojj.) systému (R^ pro<j·. s 0,48). Molekulová síta se odstraní filtrací přes Celite 545 a filtrát se extrahuje methylenchloridem (100 ml). Organická vrstva se promyje 1% roztokem thiosíranu sodného (asi 100 ml) a 0,5M hydrogenuhličftaném sodným (100 ml) a solankou. Extrakt filtruje přes Whatman Phase Separaťor a rozpouštědla se odpaří.. Čištěním přes sloupex silikagelu 60 rychlou chromatograf ií v methylenchloridu'íethylacetátu (2:1, obj./obj.) a získá se 7-O-dibenzylfosf oncroxymethylpaclitaxelu (41,5 g)·
c) Příprava 7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu a jeho monosodné soli .........~ — ··.·····.
-857-fi-Dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxel (41,5 mg) se rozpustí v ethylacetátu (5 ml) a přidá se 10% palladium na uhlí (20 mg). Hydrogenace se provádí při 275 kPa při teplotě místnosti po 1 h. Postup reakce se sleduje pomo; cí TLO-ve chloroformujmethanoluívodě (120:45:8, obj./obj.). Čištěním preparativní TLC (20 x 20 χ θ,05 cm· silikagelová destička v analytickém systému) a získá se 7-0-fosfono_ ___Qxymethylpaclitaxel- (-26-mg,— 75% výtěžek). Protože rozklaď 7-O-dibenzylfosfonooxymeth.ylpaclitaxelu je pozorován během čištění na silikagelu, modifikuje se hydrogenačnl proces^ Surový extrakt 7-O-dibenzvlfosfonooxymethylpaclitaxelu) se hydrogenuje bez jakéhokoliv/ _____čiš.tění.—Hydrogenace-sur ového extraktu~7-O-dibénzylfosfonooxymethylpaclitaxelu se provede př! 400 KPa po 24 h.
7-O-Fosfonooxymethylpaclitaxe! (70 mg) se rozpustí' v 5 ml aceton - voda(1:1) roztoku a zředí se vodou na 50 ml. Přidá se suchý hydrogenuhličitan sodný (18 mg, 1,2 ekv.). Aceton se odpaří při teplotě místnosti za použití Rotavaporu a zbylý vodný roztok se lyofilizuje. Surový 7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel - monosodná sůl se čistí sloupcovou chromátografií s reverzní fází 018' v systému vodajacetohitril (70:30, obj./obj.). Eluét se sleduje pomocí analytické HPLO (15 cm, Jonesova C18 kolona, 1 ml/min, 1= 230/270 nm) v acetonitrilu :0,05 M pufru octanu amonného (45:55» obj./obj.), pH=7j Rt = 2,09 min. -Frakce, obsahující požadovaný produkt se spojí, acetonitril se odpaří a_ zbývá jící. vodný roztok, se-lyof !l!zu-je=“a’ získá se ““ monosodná sůl 7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu! (112 mg).
-86MS (ŘAB) : [M+H]*, m/z 986; [M+Na]*, m/z 1008
UV (MeOH): Imax = 230 nm, E(l%/lcm) = 248
IR (KBr): 3430, 3066, 2948, 1724, 1652, 1602,1580, 1518, 1486, 1452, 1372, 1316, 1246, 1178, 1154, 1108, 1070, 1000, 982, 946, 856, 802, 776, 710, 628, 538
- cm'1.
ΧΗ-ΝΜΚ (aceton -d6/D2O) δ: 8.05 (2H, d), 7.92 (2H, d) ,
7.65 (1H, dd), 7.58 - 7.35 (9H, m, overlap), 7.23 (1H, dd), 6.38 (1H, s), 6.08 (1H, t), 5.65 (1H, d), 5.60 (1H, d), 5.10 (1H, br.s), 4.99 (1H, d), 4.97 (1H, br.s), 4.80 (1H, d), 4.28 (1H, dd), 4.11 (2H, s), 3.79 (1H, d), 2.94 (1H, m), 2.35 (3H, s), 2.35 - 2.10 (1H, m) , 2.13 (3H,s), 1.95 (3H, s), 1.84 (1H, m), 1.67 (3H, s) , 1.13 (6H, s, overlap).
\ Příklad 2
Alternativní metoda pro přípravu 7-0-fosfonooxymethylpaclitaxelir
a) Příprava 2 *-O- (benzy lox.ykar bony 1 )paclitaxelu
-87K míchanému roztoku paclitaxelu (150 mg, Oj 76 mmol) a Ν,Ν-diisopropylethylaminu (93 /ul, 0,534 mmol, 3 ekv.) v bezvodém methylenchloridu? (4 ml) při teplotě místnosti se přidá benz.ylchlorformiát (75 /Ul, 0,525 mmol, 3 ekv.). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 3 h, zahustí na 2 ml a čistí se sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití 1:1 ethylacetátu/hexanů jako elučního činidla a získá se titulní-sloučeninar jako~bílý prášek (150 mg, výtěžek 86 %), t.t. 140 až 150 °C (rozklad).
b) Příprava 2'-O-(benzyloxykarbonyl)-7jr-0-methylthiomethylpacli taxelu __________________,_____
K ochlazenému (suchý led - CCl^, -30 °0 teplota lázně) roztoku 2*-O-(benzyloxykarbonyl)paclitaxelu (4,935 g, 5,0 mmol) v suchém acetonitrilu (80 ml) se přidá postupně dimethylsulfiď (3,6 ml, 40 mmol) a benzoylperoxid (4,9 g, 20,247'mmol). Po 10 minutách při -30 &C se chladící lázeň odstraní a reakční směs se intenzivně míchá 2 h při teplotě místnosti. Heakční směs se pak zředí ethylacetátem na o b j em ~ 200 = ml a- p r omy je -se vodo u‘”araro rankouT Organická“ “ vrstva se suší (síran hořečnatý) a rozpouštědlo se pak odpaří a získá se zbytek, který se udržuje pod valuem 18 h; pro odstranění' jakéhokoliv dimethylsulfoxidu, který je přítomen jako reakční vedlejší produkt. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití neprve ethylacetátuíhexanu (1:2) jako elučního činidla pro odstranění méně polárních nečistot, a potom ethylacetétem:hexanem (1:1) pro získání očekávané titulní sloučeniny jako
-882 pěny. Tato se trituruje se suchým etherem· a získá se titulní sloučenina jako chmýřovitá pevná látka (5,0 g, 95 %). t.t. 120 až 122 °0.
MS (FAB): [MHJ+, m/z 1048; [M+Na]+, m/z 1070; [M+K]*, m/z 108
IR (KBr): 3440, 3066, 1750, 1722, 1664, 1602, 1583,
1538 cm1.
Ϊ,
NMR (CDClj) δ: 1.177 (3H,s) 1.236 (3H, s) 1.745 (3H, s)
2.023 (3H, s) 2.121 (3H s) 2.162 (3H, s) 2.436 (3H, s)
3.887 (H, d) 4.134 (H, d) 4.197 (H, d) 4.295 (H, m)
4.964 (H, d) 5.161 (2H, d) 5.450 (H, d) 5.703 (H, d)
5.981 (H, dd) 6.257 (H, t) 6.541 (H, s) 6.920 (H, d,
NH) 7.322-8.22 (15H, m) .
Titulní sloučenina se také připraví následující alternativní metodou:
K roztoku 2*-O-(benzyloxykarbonyl)paclitaxelu (2,0 g, 2,0263 mmol) v suchém dimethylsulfoxidu (10 ml) se po kapkách přidá acetanhydriď (10 ml)- Výsledná směs se míchá při teplotě místnosti 18 hodin pod dusíkem, zředí se ethylacetátem· (100 ml) a promyje se pečlivě studeným 6% roztokem hydrogenuhličitanu sodného; (6 x 30 ml), studenou vodou (6 x 30 ml) a solankou. Organická vrstva se suší (MgSÓ^) a odpařením rozpouštědla se získá zbytek. Tento se čistí na sloupci silikagelu a eluuje se methylenchloridem, methylenchloridem- 5% acetonitrilem, a methylenchloridem- 10 % acetonitrilu.. Získá se předpokládaná titulní sloučenina (1,86 g, 87,7%). Tato sloučenina je identická se sloučeninou získanou via dříve popsanou dimethylsulf id/benzoyiperoxid metodou.
-89c) Příprava 2 *-0- (benzyloxykarbonyl )-7-O-dibenzylfosfono— oxymethylpaclitaxelu
í
-----------------------K roztoku 2*-O-(benzyloxykarbonyl)-7-O-methylthiomethylpaclitaxelu (5,0 g·, 5,53.96· mmol) v suchém 1,2-di'...... chlorethanu (Γ20 mí) se přidá aktívotané: práškované 4&
molekulové síto· (5,θ g)- & této směsi, se přikape při teplotě místnosti roztok směsi N-jodsukcinimido (1,61 g, 7,1632 mmol) a dibenzylfosfátu (1,97 g, 7,1632 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (90 ml) Po intenzivním míchání' při teplotě místnosti! po 30 min se reakční směs zfiltruje přes Celite a filtrát se odpaří dosucha a získá se červený zbytek. Zbytek se vyjme do ethylacetátu (100 ml), promyje se studeným 6% roztokem hydrogensiřičitanu sodného (2 x 50 ml), studeným 6% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 50 ml) a solankou (1 x 50 ml).. Organická vrstva se suší (®íran hořečnatý) a odpařením rozpouštědla se získá pevná hmota, která se trituruje se suchým etherem1 a filtrací se získá titulní sloučenina jako slonovinově zbarvená pevná látka (5,9 g, 97 %), t.t. 124 až
N·
-90MS (FAB) : [MH]*, m/z 1278; [M+Na]*, m/z 1301; [M+K]*, m/z 1316
IR (KBr): 3430, 3066, 3032, 1750, 1726, 1664, 1582, 1532 cm'1
NMR (CDC13) β: 1.160 (3H, s) 1.703 (3H, s) 1.985 (3H, s) 2.164 (3H, s) 2.420 (3H, s) 3.854 (H, d) 4.151 (H,
d) 4.216 (H, m) 4.298 (H, d) 4.873 (H, d) 5.043 (6H, m) 5.140 (2H, d) 5.417 (H, d) 5.670 (H, d) 5.971 (H, dd) 6.241 (H, t) 6.317 (H, s) 6.912 (Η,^ά, NH) 7.2808.115 (25H, m).
“d) Příprava 7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
K roztoku 2'-0-(benzyloxykarbonyl)-7-2-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxelu (6,<> g, 4,7095 mmol) v ethylacetátu; (120 ml) se přidá 10% Pd/C (6,0 g) a směs se hydrogenuje při 400 kPa 24 h. Reakční směs se filtruje přes Celíte a rozpouštědlo se odpaří a získá se 4,07 g surového zbytku. Tento se čistí na krátkém sloupci silikagelu. postupnou elucí chloroformem: 10 %, 20 % a 40 % methanolu a získá se titulní sloučenina jako bílá pevná látka (3,2 g,
%), t.t. 155 až 158 °C.
Tento produkt má stejný Rf(TLC) a stejný retenční čas (HPLC^ jako autentický vzorek.
MS (FAB): [MH]*, m/z 964; [M+Na]*, m/z 986; [M+K]*, m/z 1002; [M+K*+Na*-H]*, m/z 1024; [M+2K-H]*, m/z 1040
-91UV (MeOH): Imax = 230 nm, E(l%/lcm) = 252.5
IR (KBr): 3432, 3066, 2992, 1722, 1648, 1602, 1580,
1522, 1488, 1452, 1372, 1316, 1246, 1178, 1154,, 1110,
1070, 1000, 980, 946, 854, 802, 776, 710, 628, 538
Cm*1. „ i. :
XNMR (aceton -d«/D2O), fi: 1.08 (3H, s) , 1.10 ( 3H, s) , <
1.63 (3H, s), 1.88 (3H, s), 1.96 (H, m), 2.13 (3H, s), ’
2.32 (3H, s), 2.89 (H, m), 3.76 (H, d), 4.19 (H, m) ,
4.89 (H, dd), 5.09 (H, dd) , 5.55 - 5.60' (2H, překývají- * ;
oí se d 6.04 (H, t), 6.32 (H,1s), 720 (Η, í
t) , 7.34 - 7.67 (Γ0Η, překrývá jí cí ©e n) » 7.87 (2Ή, dd) ,
8.02 (2H, dd) . _________ _______í
Příklad 3 *—O— (Ethoxykarbonyl )-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel
$ »4·
K roztoku paclitaxelu (4,35 g, 5,1 mmol) v suchém === methylenchioriďvc (51“ ml·) “se “přidá^NyN^diisopropylethyl-“’““ 3 amin (2,67'ml, 15,3 mnrol) a potom ethylčhlorformiát (1,46 ml, 15,3. mmol). Reakční směs se míchá při 0 °C 2 h a potom při teplotě místnosti další 1 h. Reakční směs se zře- 3 dí ethylacetátem (400 ml), organické fáze se promyje na-r syceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 30 ml)
-92a solankou (30 ml). Výsledná organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a získá se surová titulní sloučenina (93 %), která se použije v dalším stupni bez dalšího čištění.
MS (FAB/NOBA, Nal, ΚΙ) : [M + H] + , m/z 926; [M + Na] + , m/z 948? [M + K]\ m/z 964
HRMS' (FAB/NOBA, Csl/Gly vnitřní standardů: /M+H/+ m/z 926,3588 pozorováno, ^50^55^0^, vypočtená hodnota: 926,3599 (odchylka A =1,2 ppm). t 1HNMR (CDClj): δ 1.13 (3H, s) , 1.23 (3H, s) , 1.30 (3H, t), 1.67 (3H, s), 1.92 (3H, s), 2.21 (3H, s), 2.37 (H,
d), 2.45 (3H, s), 2.54 (H, m), 3.80 (H, d), 4.15 4.32 (4H, m přesahující 4.43 (H, dd), 4.96 (H, d) ,
5.42 (H, d), 5.68 (H, d) , 5.98 (H, dd), 6.28 (2H, m přesahující), 7.00 (H, d), 7.34 - 7.59 (11H, m Přesa“
h.n^-n. 7.74 (2H, d), 8.12 (2H, d) .
Alternativní postup:
Paclitaxel (5,40 g, 6,324 mmol) v suchém dichlormethanu (63 ml) se ochladí na 0 °C a zpracuje se'Si^5^fe N,N-.diisopropylethylaminem! (3,30 ml, 3 ekv.) a potom s čistými ethylchlorformiátem (1,81 ml, 3 ekv.) po kapkách během 5 minut. Reakce se sleduje pomocí TLC (50 % ethyl-93acetátu v hexanu). Po 2 h při 0 °B a 16 h při teplotě místnosti je reakce úplná a žlutooranžový roztok se zředí ethylacetátem (300ml) a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným (3 x 75 ml) a solankou (75 ml). Sušením (síran hořečnatý) a odpařením se získá surovátitulní sloučenina, která se čistí srážením: jjřidá se dichlormethan (asi 100 ml) a potom se směs ochladí a do bodu zákalu se přidává hexan (asi 60 ml). Po chlazení iedem po^několikhodini sě^pevná látka oddělí filtrací. Výtěžek 5,17 e (88 %).
Alternativní postup: t
V plamenem sušené, jednohrdlé 31 bance se rozpustí __ —_—---paclitaxel(99;0 g~n 579^mbl)~v 1,350 ml suchého methylenchloridu pod atmosférou argonu. Roztok se ochladí na -10 °^. Pomalu se přidá Ν,Ν-diisopropylethylamin (52,4 g, 405,^ mmol) (doba přidávání asi 3 min) a potom Cl^OgEt (31,45 g, 289,8 mmol, doba přidávání asi 15 min). Výsledná směs se míchá přes noc (16 h) při asi -4 °C. Reakce je? podle TLC' nekompletní. Přidá se další podíl Ν,Ν-diisopropylethylaminu (2,62 g, 20,28 mmol) a potom ClCO2Et (2,20 g, 20,28 mmol) a v míchání se pokračuje 3 h při M’OC. Podle TLC nejsou přítomny žádné' výchozí látky. Studená směs se zředí ethylacetátem (1,5 1) a přenese se do dělící nálevky. Potom se promyje? 5% hydrogensíranem draselným (2 x 500 ml), vodou (1 x 500 ml), 5% KHSO^ (1x500 ml), vodou (1 x 500 ml), nasyceným hydrogenuhličitanem sodným (2 x 500 ml) a solankou (2 x 500 ml), suší se (síran hořečnatý) _______a rozpouštědla se odstraní—ve vakuu a ~ získá' se '147~g~š~uróvého produktu. Zbytek se rozpustí v horkém methylenchloridu (800 ml, teplota lázně 42 °C) a za míchání se prikapou hexany (530 ml) při udržování uvedené teploty. Krystalizující směs se ponechá stát. 3 h při teplotě místnosti a potom ve studené místnosti (0 C) pres noc. Špinavě bílé krystaly se oddělí filtrací a promyjí se hexany/CH2C12
-941:1 (obj./obj.)(2 x 200 ml). Po sušení na sacím filtru po 1 h se suší ve vakuu (asi 1,0 mm Hg) přes noc a získá se 95,7 g (89% výtěžek) titulní sloučeniny (index homogenity podle HPLC = 98,5 %).
b) Příprava 2*-O-(ethoxykarbonyl)-7-0-methylthiornéthy1paclitaxelu
K roztoku 2*-0-(ethoxykarbonyl)paclitaxelu (4,3θ g,
4,7 mmol) v suchém dimethylsulfoxidu (12,5 ml) se přidá acetanhydrid (12,5 ml). Reakční směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti a potom se zředí ethylacetátem (500 ml), promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 40 ml) a vodou (2 x 40 ml). Výsledná organická vrstva se suší nad síranem horečnatým a rozpouštědla se odpaří ve vakuu dosucha. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu (40 % ethylacetátu v hexanech) a získá se požadovaná titulní sloučenina (4,39 g, 94 %).
MS (FAB / ΝΟΒΑ, Nal, ΚΙ) : [M + H]*, m/z 986; [M + Na]*, „ m/z 1008; [Μ + K]*, m/z 1024 · -· · —· — -- - —HRMS (FAB/N03A, Csl/Gly vnitřní standard): /M+H/+ m/z 986,3646 (vypočtená hodnota 986,3633, odchylka -^=1,3 ppm)
1HNMR (CDC13) δ: 1.18 (3H, s), 1.20 (3H, s), 1.30 (3H,
s), 1.75 (3H, s), 1.84 (H, m), 2.09 (3H, s), 2.11 (3H,
s), 2.16 (3H, s), 2.24 (H, d), 2.37 (H, d), 2.45 (3H,
s), 2.80 (H, m), 3.68 (H, d) , 4.08 - 4.33 (5Ή, m, pře-
krývající ~ 4.65 ?2H, s), 4.96 (H, d)', 5.43 (H, d)7“
5.69 (H, d) , 5.98- (Η, -dd), 6.26 (Η, t),_..6.55 (Η, s),
7.00 (Η, d) , Ί .32 -7.61 (11Η, mpřekrývající ,7.73 _
Alternativní postup:
> ί
2*-£-(Ethoxykarbonyl)paclitaxel (2,260 g, 2,4406;
—- -———— mmo 1) serozpustí v bezvodém di methyl s mlf oxid u (6 - ml) -,--a najednou se přidá acetanhydriď (6 ml) při teplotě místnosti. Reakce se sleduje pomocí HPLC (C18 analytická kolona, 60 % acetonitril - 40 % 10 mM pufr fosforečnanu amonného, pH 6)- Po 30 h se roztok zředí ethylacetátem (250 ml) a promyje se nasyceným vodným hvdrogenuhličitanem sodným (3krát), potom vodou a solankou. Po sušení nadsíranem hořečnatým a filtraci, se surový produkt chromatografuje na silikagelu (40 % ethylacetátu v hexanu) a získá se titulní sloučenina jako bílá pěna (2,030 g, 91 %), která má podle HPLC čistotu 90 %. Část se dále čistí' na ω druhém sloupci ”5 % acetonitril v dichlormethanu) a získá se materiál/ který je podle HPLC asi 97 % čistoty).
i )
2*-O—(Ethoxykarbonyl)paclitaxel (4,170 g, 4,503, _______________________mmol) se rozpusti_v bezvodém acetonitrilu (68 ml)_ při -40 °C _________ a přidá se dimethylsulfid (3,2 ml, 44,10 mmol) a potom benzoylperoxid (4,400 g, 18,24 mmol). Směs se umístí na ledovou lázeň a míchá se při 0 QC a průběh reakce se sleduje pomocí TLC (40 % ethylacetátu v hexanu). Po 3 h není detegován žádný výchozí materiál a roztok se zpracuje přídavkem ethylacetátu (250 ml) a nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Organická fáze trio*
-96se dále promyje hydrogenuhličitanem, vodou a solankou, potom se suší nad síranem· hořečnátým a filtruje. Zbytek se čistí rychlou chromatografií na silikagelu (4 % acetonitrilu v dichlormethanu) a získá se titulní sloučenina jako bílá pěna (2,571 g, 58% výtěžek). Čistota tohoto vzorku byla hodnocena pomocí HPLC jako 97 %.· NMR spektrum bylo shodné s výše uvedeným.
Alternativní postup pro přípravu 2z-0-(ethoxykarbonyl)7-0-methy1thiomethylpaclitaxelu i
2z-0-(Ethoxykarbonyl)paclitaxel (49,3 g, 53,2 mmol) se umístí do plamenem sušené jednohrdlé banky (1 1) a < rozpustí se v suchém acetonitrilu (500 ml) při teplotě 's místnosti. Rychle se stříkačkou přidá methylsulfid (39,1 ml, 0,532 mol). Míchané reakční směs se ochladí na -16 °C na lázni led/sůl a ke směsi se najednou přidá pevný benzoylperoxid (51,6 g, 0,213 mol). (Plné čtyři ekvivalenty jsou vyžadovány pro to, aby reakce byla kompletní). V míchání se pokračuje 30 minut, a během této doby teplota stoupne na asi -10 °C. Peakční medium se během této doby udržuje heterogenní (benzoylperoxid není úplmě rozpuštěn). Chladící lázěn se změní na led/voda, teplota stoupne na 0 °C a zbylý benzoylperoxid1 se během asi 5 min rozpustí' po ohřátí* Reakce je hodnocena pomocí TLC po míchání při 0 °C po dalších 2,5 hodiny. Objem roztoku se sníží na asi 200 ml odstraněním rozpouštědla na rotační odparce a potom se tento přenese do dělící nálevky, kde se promyje h ěptan e m; (5x500 ml). Ac e tón i t r iTó v á v r s t v a ‘ se' zředí = ethylacetátem (1,5 1) a promyje se 3:1 směsí NaHCO^/5% KgCO^ (obj./obj.)(2 x 500 ml), nas.hydrogenuhličitanem sodným (2 x 500 ml), polonasyceným. solným roztokem (1 x 500 ml) a solankou (1 x 500 ml), suší se (síran hořečnatý) a odstraněním rozpouštědel ve vakuu se získá 67,0 g surového produktu. Tento se rozpustí v acetonu (200 ml), ohřeje se na 40 °C na vodní lázni a za míchání se přikapávají
-97hexany až do pozorování zákalu (400 ml). Krystalizující směs se nechá stát 3 h při teplotě místnosti a potom se přenese do studené místnosti (0 °C), kde se udržuje přes noc (16 h). Vytvoří se hustý koléě. Pevná, látka se oddělí filtrací a promyje se -hexany/acetonem 3 :-1 (obj ./obj) (2 x 50 ml). Výsledné bílé krystaly se suší na sacím filtru po. 1 h a potom ve vakuu (asi 0,5 mm· Hg) přes noc a získáse-47,5—g- (9výtěžek) titulní sloučeniny (in-——dex homogenity podle HPLC = 94,8 %).
Příprava 2*-O-(ethoxykarbonyl)-7-O-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxelu _________ _____ _____________
Roztok N-jodsukcinimidu /1,953 g, 8,65 mmol) a dibenzylfosfátu (2,41 g, 8,65 mmol) v tetrahydrofuranu se přidá ke směsi. 2 -0-(ethoxykarbonyl)-7-0-methylthiomethylpaclitaxelu (5,677 g, 5,76 mmol) a 48. molekulového síta (5, f g.) v methylenchloridu (100 ml) při teplotě místnosti_ Reakční směs se míchá 40 min při teplotě mísjtnosti. _Po této době je reakce podle TLC kompletní. Reakční směs se filtruje přes Celíte a filtrát se zahustí ve vakuu a získá se nahnědlý zbytek, který se zředí ethylacetátem (800 ml), organická fáze se promyje 1% siřičitanem sodným (2 x 80 ml), potom se promyje 5% solankou (2 x 50 ml). Organická fáze se zahustí ve vakuu a suší. Chromatografií výsledného zbyteku (50-60 % ethylacetátu v hexanech) se získá požadovaná titulní sloučenina (6,23 g> θ9 %)·
MS (FAB/NOBA, Nal, ΚΙ) : [M + Na]\ m/z 1238; [Μ + K]*, m/z 1254
HRMS (FAB/NOBA, Csl/Gly vnitřní standard [M + Na)* m/z 1216.4291 (C65H71NO20P vypočteno 1216.4307;
odchylka Δ = 1.3 ppm)
1HNMR (CD CÍ3), 8: 1.18 (3H, s), 1.21 <3H, s) , 1.30 (3H,
t), 1.67 (6H, s), 1.80 (H, s), 1.93 (H, m), 1.99 (3H,
d) , 2.18 (3H, s), 2.23 (H, m), 2.38 (H, m). 2.45 (3H,
s), 2.80 (H, m), 3.86 (H, d), 4.14 - • 4.32 ( 5H, m*
přesahující), 4.88 (H, d) , 5.00 - 5.07 ?'4Η, m přesahující), . 5.42 (H, d), 5.68 (H, d), 5.96 (H, dd),
6.26 (H, t), 6.33 (H, s) , 6.95 (H, d), 7.30 - 7.61 (UH, m přesahující, 7.75 (2H, dd), 8.12 (2H, dd).
Alternativní postup:
K roztoku 2*-O-(ethoxykarbonyl)-7-O-methylthiomethylpaclitaxelu (350 mg, 0,355 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (8 ml) se přidá roztok N-jodsukcinimidu (120 mg, 0,532 mmol) a dibenzylfosfátu( 148 mg, 0,532 mmol) v tetrahydrofuranu (5 ml). Reakce se sleduje pomocí HPLC (C18 kolona, 70 % acetonitrilu, 30 % 10 mM fosfátu amonného, pH 6). Po 2 h je detegovéno méně než 5 % výchozího, materiálu a reakce se zpracuje. Roztok se zředí ethylacetátem“/ 75 ml) a promyje se 1% roztokem hydrogensiřičitanu sodného (2 x 50 ml) a solankou (50 ml). Po rychlém sušení nad síranem hořečnatým a filtraci se rozpouštědlo odpaří. Rychlé chromatografie na silikagelu poskytne (45 % ethylacetát/hexan) titulní sloučeninu jako bílou pěnu (281 mg, 65 %). HPLC analýza indikuje čistotu asi 95 %·
-99Alternativní postup:
Rozdrcená 4'. A molekulová síta se umístí do plamenem v
sušené jednohrdlé.banky (1 1), která se pak napojí na j vakuový rozvod (asi 0,5 mm Hg). Síta sě' zahřejí pomocí ‘ ý;
ohřívací pistole po asi 10 min a přitom se ručně třepou.
v
Po ochlazení pod vakuem se do banky zavádí argon: a; při^-g-^-g-^Oi^^h-éxyie-grbbhyrT-V-íř^iiíe-thyi-tliio-nrethylpffC-ttta*--'---------xel (37,5 g, 38,03, mmol) a potom dibenzylfosfát (14,8 g,
53,24 mmol) a THF (400 ml). Heterogenní směs se intenziv- ? L ně míchá 15 min při teplotě místnosti magnetickým míchad- - v
-------------lem- Ve zvláštní' plamenem sušené bance se rozpustí N-jod-__________g sukcinimid (10,7 g, 47,54 mmol) v THF (50 ml) pod argonem.
.(ggj^em. přípravy NIS roztoku,přenosu-kapaliny -a - --- - - ------í během průběhu reakce byly nádoby pokryty hliníkovou folií pro ochranu proti světlu). Potom se pomalu přidá v
(10 min) k reakční směsi pomocí stříkačky- Banka, obsahujícíATJIS se promyje 5 ml THF a převede se do reakční K směsi, které se pak míchá 2 h při teplotě místnosti. TLC analýza vykazuje nepřítomnost výchozího materiálu. Tmavě červeně zabarvený roztok se filtruje přes sloupeček Celitu přímo do intenzivně míchané dvojfázové směsi, obsahující ethylacetát (500 mlú, 10% vodný thiosíran sodný (300 ml) a nasycený hydrogenuhličitan sodný (200 ml). Červená barva zmizí za několik sekund a získá se bezbarvý roztok.
Celitový sloupeček se promyje EtOAc (asi 100 ml) a obě ,s kapalné vrstvy se přenesou do dělící nálevky. Organické vrstva se zředí lil EtOAc, vrstvy se oddělí a organická —Vrstva“se“promy je“směsí ‘nasyceného NaHCOj= a^5%^K2C0^_(3 :J obj./obj«i 2 x 500 ml), potom nasř NaHCO^ (2 x 500 ml), polonas.ycenou solankou (1 x 500 ml) a solankou (1 x 500 ml). Extrakt se suší bezvodým síranem hořečnatým a filtruje. Zpracuje se s 5,θ g neutrálního Norit-u (aktivní uhlí) za míchání při teplotě místnosti po 15 min. Opět se filtruje přes sloupeček Celíte** a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a získá se 52 g surového produktu. Tento se rozpustí v toluenu/methylenchloridu
-100(280 ml/25 ml) a přikapou se hexany (20 ml). Po stání po 3 h při teplotě místnosti se krystalizující směs ponechá přes noc při 0 °C^ Na stěnách banky se objeví světle žlutá pevná látka. Po dekantaci matečného louhu se zbytek trituruje s toluenem (50 ml), filtruje, promyje se toluenem a suší na sacím filtru po 30 min. Potom se přenese do dessikátoru s Drieritem^ a dále se suší ve vakuu (asi 0,5 mm· Ησ) čtyři hodiny a získá se 24,4 g (53% výtěžek) titulní sloučeniny (index homogenity podle HPLC=
95,9 %)« Matečný louh se odpaří dosucha, trituruje se s toluenem (100 ml), filtruje, promyje se toluenem a suší • t se na sacím filtru 30 min. Po sušení v desikátoru jak .je. popsáno výše se získá 12,5 g (27% výtěžek) stejného produktu (index homogenity podle HPLC = 97,1 %).
d) Příprava 2*-O-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu, jeho monosodné, monodraselné, triethylaminové, argininové, lysinové, ethanolaminové, N-methylglukaminové a triethanolaminové soli.
K roztoku 2*-O(ethoxykarbonyl)-7-P-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxelu (1,23 g, 1,01 mmol) v suchém ethylacetátu (40 ml) se přidá 10 % Pd na uhlí (428 mg, 10%, 0,404 mmol). Reakční směs se podrobí hydrogenaci (400 kPa) za trvalého třepání po 24 h. Pevné látky se odfiltrují
-101přes-Celíte a potom se Celíte několikrát promyje ethylacetátem. Filtrát se zahustí a získá se forma volné kyseliny titulní sloučeniny (1,01 g, θθ% čistota podle HPLC). Nečistoty se odstraní v dalším stupni preparativní C-18
- sloupcovou chromatograf ií.- =..
MS (FAB/NOBA, Nal, ΚΙ) : [M + Na]+, m/z 1058; [M + K]+, m/z 1074; [M + 2Na - H]+, m/z 1080; [M + Na + K - H]+, m/z 1096; [Μ + 2K - H] + , m/z 1112 f
HR-MS (FAB/NOBA, Csl/Gly, vnitřní standard: [M +
Nal*. m/z 1058.3163 (C^H^NO^PNa vypočtená hodnota?__________
1058.3188; odchylka: Δ = 2.3 ppm)
Έ NMR (aceton -d6/D2O) δ: 1.13 (3H, s) , 1.21 (3H, s),
1.66 (3H, s), 1.87 (H, m), 1.93 (3H, s), 2.14 (3H, s) ,
2.18 (H, m), 2.44 (3H, s), 2.95 (H, m), 3.81 (H, d) ,
4.12 (2H, s), 4.15 - 4.27 (3H, m překrývá jící), . 4.92 - 4.99 (2H, br.m překrývající), 5.15 (H, br.s), 5.48 (H, d) , 5.61 (H, d) , 5.84 (H, dd) , 6.07 (H, t) , 6.36 (H, s), 7.25 (H, t), 7.28-7.69 (10H, m překrývájící),7.89 (2H, dd), 8.08 (2H, dd), 8.86 (H, »=. AI terna tivní .-postup ————, _
2-0-(Ethoxykarbonyl)-7-0-(dibenzylfosfonooxymethyl )paclitaxel (490 mg, 0,402 mmol) v ethylacetátu (20 ml) se hydrogenuje v Parrově třepačce při 400 KPa za přítomnost# palladia na uhlí (10 % hmotn./hmotn., 150 mg). Sledování se provádí pomocí HPLC. Když není detegován žádný výchozí materiál ani meziprodukt (převážně monobenzylfosfát) f· — 102— (26 h), suspenze se zfiltruje přes Celite a odpaří se dosucha. HPLC analýza vykazuje čistotu 88 až 92 %.
Alternativní postup:
Triethylaminová sůl 2'-O-(ethoxykarbonyl)-7-O-f osf onooxymethylpáclitaxelu“ popsaná níže (5,4 g, 4,75 mmol) se rozdělí intenzivně mezii EtOAc (100 ml) a 5% hydrogensíran sodný (45 ml) za míchání při 0 °C po 30 min. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje pomocí EtOAc (20 ml). Spojené EtOAc vrstvy se promyjí polo-solankou (25 ml), solankou
J (25 ml x 2), suší se nad síranem sodným a filtrací se získá roztok kyseliny (asi 4,75 mmol) v EtOAc (asi 150 ml). Tento EtOAc roztok se pak zahustí dosucha na rotační odparce a získá se 3,75 g titulní sloučeniny jako volné kyseliny v 95% výtěžku. HPLC analýza vykazuje index homogenity 96,1 %.
Monosodná sůl se připraví následovně1
Vzorel? 2 *-O-(ethoxykarbonyl)-7-0-fosfonooxymethylpaclitaxelu (1,6 g, 1,55 mmol) se rozpustí v acetonitrilu (30 ml )sonif ikací. ϊ-ento roztok se zřédí vodou (30 ml) a 1 , 1M roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2,11 ml, 2,32 mmol) se přidá, alternativním... třepánía a sonifikací se získá roztok (5-20 min). Malé množství' mléčného roztoku se aplikuje na C-18 kolonu, promyje se dvěma objemy kolony vodou, potom se eluuje monosodná sůl 25% acetonitrilem/vodou. Vhodné frakce se spojí, acetonitril se odpaří a vodná fáze se lyofilizuje, získá se. monosodná sůl titulní sloučeniny (850 mg, asi 50 %), mající HPLC čistotu 97 %.
-103HR - MS (FAB/NOBA, Csl/Gly vnitřní standard· [M + Na]*, m/z 1080.2968 (C51H„NO20PNa2 vypočtená hodnota: 1080.3007; odchylka d = 3.6 ppm)
Elementární analýza: - vypočteno 56,72 % C,5,23 % H, 1 ,30 % N‘, 2,12 % Na nalezeno 51,65 í C, 5,06 % H, 1,20 % N, 2,74 % Na.
IR (KBr): 3430, 3066, 2988, 1746, 1722, 1660, 1602, 1582, 1526, 1488, 1452, 1374, 1246, 13?78, 1150, 1108,
1070, 1052, 1026, 1002, 966, 912, 834, 792, 776, 710, _628,._538-cnCi..............................................
Ή-NMR (DMSO-ds, D2O, aceton -de) δ: 1.10 (6H, s), 1.23
(3H, t) , 1.64 (3H, s), 1.70 (H, m), 1.90 (3H,s) , 1.99
(H, m), 2.14 (3H, s), 2.37 (3H, s), 2.98 (H, m), 3.74
(H, d), 4.07 (2H, s), 4.13 - 4.26' (3H, m, překrývající),4.80 (H, br.dd), 4.97 (H, d), 5.09 (H, br.t), 5.44 (H, d), 5.55 (H, d), 5.99 (H, t), 6.34 (H, s), 7.22 (H,t), 7.43 - 7.69 (10H, nepřekrývající),
7.92 (2H, dd), 8.06 (2H, dd).
Sodné sůl může být také připravena následovně:
Surový 2'-O-(ethoxykarbonyl)-7-0-fosfonooxymethyl- -pac 1 itaxe 1 “(8 9 %70 ' mgj 0,060' mmo 1) ’ v ' E t O Ac' “(2Ί5Τ) se“ zpracuje s roztokem ethylhexanoátu sodného (87,5· mM v EtOAc, 1,0 ml, 0,0875 mmol) při teplotě místnosti za míchání. Po míchání při teplotě místnosti po 1 h se při dá hexan (1,2 ml) do bodu zákalu. Po uchovávání při -20
-104se jemný amorfní prášek odfiltruje (obtížně, velmi pomalu) přes jemný papírový filtr a získá se 45 mg (70 %) sodné soli. Tato má čistotu 95,2 % podle HPLC a obsahuje malé množství ethylhexanové kyselinyÍNMR).
Triethanolaminová sůl se připraví následovně:
*-O-(Ethoxykarbonyl)-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel, surový z hydrogenace (89% podle HPLC) (0,69 g, 0,593 mnrol po korekci na nečistoty) se rozpustí' v ethylacetátu (10 ml) a pomalu se míchá za přikapávé^ní roztoku triethanolaminu (0,11 M v Et^Ac, použito: 5,1 ml, 0,95 ekv.).
Získaný mléčný roztok se nechá stát při 0 °C po 2 h, potom se zfiltruje přes filtrační papír, promyje se studeným: EtOAc. Výt§žek: 499 mg (90 %) amorfního, jemného, neelektrostatického prášku, který se přes noc suší ve vakuu. HPLC' ukazuje 96,6% čistotu (C—18, 45% 5 mM + 10 mM fosforečnanu: amonného pH 6, 55 % acetonitrilu).
NMR spektrum (DgO/aceton/DMSO) ukazuje stopy ethylacetátu a žádné jiné nečistoty. Podle analýzy se jedné o 2 - 3 x< hydrát.
Triethanolaminová sůl získaná z dalšího pokusu byla d'le čištěna následujícím postupem. Triethanolaminová sůl (přibl. 2 g) se rozpustí v asi 30 % acetonitrilu/vodě. Tento roztok se eluuje slabým tlakem dusíku kolonou C18 (Bakerbond) gradientem 20 % až 40 % acetonitrilu ve vodě. Frakce, obsahující požadovaný produkt, triethylaminovou sůl, se oddělí. Acetonitril se odstraní na rotační odparce za sníženého tlaku. Vodný roztok se zmrazí a lyofilizuje se přes noc. Získá se 1,4 g triethanolaminové soli s čistotou 97,5%.
Triethanolaminová sůl může být také připravena následovně :
Triethylaminová sůl 2 *-O- (ethoxykarbonyl )-7-0-f‘osf o
-105nooxymethylpaclitaxelu (3,0 g, 2,64 mmol) se rozdělí mezi EtOAc (60 ml) a 5% NaHSO^ (30 ml) za intenzivního míchání při 0 °C po 15 minut. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje se pomocí EtOAc (10 ml). Spojené EtOAc vrstvy se promyjí solankou (15 mí), suší se nad síranem sodným, a filtrací se získá roztok kyseliny (asi 2,64 mmol) v
EtOAc (asi 70 ml). K tomuto EtOAc roztoku při teplotě místnosti se přidá pokapkách za intenzivního míchání
NCÚH^CHgOH)^ (0,35 ml, 2,64 mntol) během 5 minut. Výsledná suspenze se míchá další 1 h a potom se. filtruje, promyje ' se EtOAc (15 ml x 2), suší se ve vakut^, a získá se 2,8 g; triethanolaminové soli v 89% výtěžku. HPLC analýza vykázuje index homogenity 98,7 %, t.t. >157 °0 za rozkladu.
Elementární analýza pro C56H73N2°23P‘2’0 H2O.0,j, EtOAc vypočteno 55,60 % C, 6,48 % H, 2,27 % N, KF(H2O),2,92 nalezeno 55,94 % C, 6,59 % H, 2,43 % N, KF (H2O),3,50·
Triethylaminová sůl se připraví následovně:
K roztoku 2*-O-(ethoxykarbonyl)-7-Q-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxelu (10 g, 8,23 mmol) v EtOAc (350 ml| se při teplotě místnosti přidá 10 % Pd na uhlí (2 g, 20% nanesení). Výsledná suspenze se odplyní evakuováním vzduchu a potom se ppropláchne argonem- Tento proces se opakuje ještě dvakrát. Argon se pak nahradí vodíkem a následuje v
tentýž odplynovací proces. Výsledná suspenze se míchá pod tlakem vodíku z balónku (14-21 kPa) po 16 h při teplotě místnosti za intenzivního míchání. Vodík se evakuuje a v nahradí se argonem a třikrát se provede odplynovací postup. Výsledná suspenze se zfiltruje přes sloupeček Celitu. K tomuto homogennímu filtrátu se pomalu přidá Et^N (8,23 mmol, 1,14 ml) během 5 minut za intenzivníhoimícháni.
Výsledná jemná bílá suspenze se míchá dalších 30 min.
ěSSSHSSSshssss
-106Odfiltruje se přes fritovou nálevku. Filtrační koláč se suší ve vakuu (1 mm Hp.) 16 h a získá se 8,22 titulní triethylaminové soli v 88% výtěžku, HPLC analýza vykazuje index homogenity 97,4 %, t. t.> 1 78 °C s rozkladem.
Elementární analýza pro Cg^Hy^N2O2QP.4,5 H^O:
vypočteno 56,19 % C, 6,79 % ff, 2,30 % Ν', KF (ffgO), 6,65 nalezeno 56,33 % C, 6,87% H, 2,32% N, KF (HgO), 7,96.
Alternativnií postup pro přípravu triethylaminové soli:
í *-O-(Ethoxykarbonyl)-7-Q-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxel (5,6? g, 4,66 mmol) se přidá do 250 ml banky a rozpustí se v ethylacetátu (150 ml). Baňka s.e opatří trojcestným kohoutem s připojením k zásobníku vakua a spov jením k vedení argonu. Za použití kohoutu’ se banka částečně evakuuje? a potom se profoukne argonem. Tento proces se opakuje ještě dvakrátt. Do 3anky se vloží palladium na aktivním uhlí (10% Pd) (0,85 g). Argonový rozvod' připojený k trojcestnému kohoutu se nahradí balónkem naplv něným vodíke.. Za použití kohoutu se banka částečně evakuuje a potom se profoukne vodíkem. Tento proces se dále ještě čtyřikrát opakuje. Výsledná směs se míchá při teplotě místnosti pod vodíkem z balónku přes noc. TLC analýza 1 7 h po počátku vystavení vodíku vykazuje nepřítomnost výchozího materiálu, ^alonek s vodíkem připojený ketrojcestnému kohoutu se nahradí vedením argonu. Za použití kohoutu se baňka částečně evakuuje a potom se propláchne argonem. Tento, proces se ještě dvakrát opakuje, ^bsahy banky se filtrují za vakua přes sloupeček Celitu. Celite se propláchne ethylacetátem (2 x 10 ml). K míchanému filtrátu se přidá NEt^ (0,650 ml, 4,66 mmol). Výsledná suspenze se míchá při teplotě místnosti po 2 hodiny a
-107objem se pak sníží' na asi 150 ml· odpařením na rotační odparce. Pevná látka se odfiltruje, promyje se ethylacetátem (2 x 10 ml) a sušením za vakua se získá 4,76 g (90% výtěžek) titulní triethylaminové soli ve formě bílého prášku (index homogenity produktu bylstahován 96,6 % pomocí HPLC analýzy).
».
“ -Alternativní;-postup pro příprávurtriethylaminové—soli: —
2*-O=(Ethoxykarbonyl)-7-0-dibenzylfosfonooxymethyl- λ paclitaxel (5,17 g, 4,25 mmol) se prid# do 250ml baňky a v
-------------rozpus tí—se—v- ethylacetátu—(1450—ml )-—3anka-se—opatří------trojcestným kohoutem s jedním přípojem k zásobníku vakua
-a~ jedni m~pří po jem~k vedení* argonu; Za· použití kohout use—~~— v
banka částečně evakuuje a potom se propláchne argonem. Tento proces se ještě dvakrát opakuje. Do banky se vloží palladium na aktivním uhlí (10% Pd) (0,86 g). Vedení argonu se odpDjííod'· trojcestného kohoutu a nahradí se balónkem
V ·*' naplněným vodíkem, ^a použití kohoutu se banka částečně evakuuje a potom se propláchne vodíkem. Tento proces se ještě pětkrát opakuje. Výsledná směs se míchá při teplotě místnosti pod atmosférou vodíku z balónku přes noc. TLC analýza 16 h po počátku vystavení vodíku vykazuje nepřítomnost výchozího materiálu. Vodíkový balon . . v :
připojený ke trojcestnému kohoutu se nahradí vedením arv gonu. Za použití kohoutu se banka částečně evakuuje a pro9 pláchne se argonem. Tento proces se ještě dvakrát opakuje.
Obsahy baňky se vakuově zfiltrují přes sloupeček Celitu.
— — - elite -s e -p ro my j e? -ethylacet á t e m -t 4- x --1 0 - ml). „ Kmíchanému----------filtrátu se, přidá NEty (0,590 ml, 4,25 mmol). Výsledná suspenze se míchá při teplotě místnosti jednu hodinu a objem se pak redukuje na asi 140 ml na rotační odparce.
' pevná látka se odfiltruje, promyje se ethylacetátem (10 ml) a suší se za vakua a získá se 4,46 g- (92% výtěžek) titulní triethylaminové soli jako bílého prášku (index homogenity podle HPLC anal.yzy je 96,7 %)·
-108Lysinová sůl se připraví následovně:
*-O- (Ethoxykarbonyl )-7-Q-dibenzylf osf onooxymethylpaclitaxel (15,C g, 12,34 mmol) se po.částech přidá k suspenzi 10% palladia na uhlí (20% nanesení, 3 g) v EtOH (600 ml, 200 proéf :) při 0 °C. Výsledná suspenze se od- plyní ekakuováním vzduchu a propláchnutím argonem. Tento proces se ještě dvakrát opakuje. Argon se pak nahradí vodíkem a za intenzivního míchání se provede stejný odplynovací postup. Výsledná směs se míchá při 0 °C 2 hodiny. Chladící lázeň se odstraní a tfeakční roztok se míchá při teplotě okolí další 4-1/2 h. Reakční směs se odplyní' ekakuováním vodíku a probubléním argonem třikrát. Filtruje se pod argonem přes sloupeček Celitu. K výslednému filtrátu se pomalu přidá roztok lysinu (1,63 g, 0,94 ekv.) v 1:1 směsi H20:Et0H (200 proof)(20 ml) během 5 minut za intenzivního míchání. K výsledné bílé suspenzi se přidá destilovaná voda (110 ml) a míchá se 30 minut. Ohřeje se na asi 55 °C. Výsledný homogenní roztok se udržuje na olejové lázni na 50 °C a pomalu se nechá zchladnout na teplotu místnosti na 16 h a na 4 °C po 3 h.
Filtruje se a suší sáním 16 h a získá se 1 1,8 (asi 80% výtěžek) lysinové soli s indexem homogenity 99,0 % podle HPLC, t.t. y 170 °0 za rozkladu.
Elementární analýza pro; 0 H2O vypočteno 51,62% C, 6,69% H, 3,17% N, KF(H2O), 10,87 nalezeno 51,76 % C, 6,57% H, 3,48% Ν', KF (H20_), Í1_,42.·
Ethanolaminová sůl se připraví následovně:
Triethylaminová sůl 2*-O-(ethoxykarbonyl)-7~P-fosfonooxymethylpaclitaxelu (3,0g, 2,64 mmol) se rozdělí mezi EtOAc (60 ml) a 5% hydrogensíran sodný (30 ml) za intenzivního míchání při 0 °C po 15 minut. Vodná vrstva se
-109oddělí a extrahuje se EtOAc (15 ml). Spojené EtOAc vrstvy se promyjí solankou; (15 ml), suší se nad síranem sodným, a filtrací se získá roztok volné kyseliny tasi 2,64 mmol) v EtOAc (asi 70 ml). K tomuto EtOAc roztoku se při teplotě místnosti za intenzivního míchání přikape roztok HgNCHgCHgOH (0,15 ml, 2,64 mmol) v EtOAc (5 ml) během 5 minut. Výsledná suspenze se míchá další 1 h a potom se filtruje, promyje se EtOAc (Í5 ml x 2)~a sušením ve vakuu se získá 2,6 g titulní ethanolaminové soli v 89% výtěžku. HPLC analýza vykazuje index homogenity„97,8 %, t.t.>130 °C za rozkladu. m
Elementární analýza pro Ρ·2,5 H^O vypočteno 55,73 % C, 6,18 % H, 2,45% Ν’, KF (í^O), 3,94 nalezeno 55,76 % O, 6,39 % H, 2,45% Ν', KF (HgO), 6,Oo.
Argininová sůl se připraví následovně:
*-O-(Ethoxykarbonyl)-7-0-dÍbenzylfosfonooxymethylpaclitaxeli (30,0 g, 24,69 mmol) se po částech přidá k suspenzi 10% palladia na uhlí (20% nanesení', 6 g) v EtOíT (900 ml, 200 proof) při 0 °C. Výsledná suspenze se odplyní evakuováním vzduchu a propláchnutím argonem. Tento postup se ještě dvakrát opakuje. Argon se pak nahradí vodíkem a výše uvedený odplynovací postup se provede za intenzivního míchání. Výsledhá směs se 2 hodiny míchá
Λ V při 0 C. Chladící lázeň se odstranil a reakční roztok se míchá při teplotě okolí' dalších 24 h. Reakční směs se odplyní evakuací vodíku a propláchne sb třikrát’ argonem w
vždy s opakováním výše uvedeného odplynovaóího postupu. OčRfiltruje se pod argonem přes sloupeček Ceiitu. Filtrát se rozdělí na dva stejné podíly a ke každému z nich se přidá EtOH (190 ml, 200 proof). K jednomu podílu (asi 630 ml) se pomalu přidá roztok argininu (2,6 g, 0,94 ekv.) ve směsi 2:1 vodaíethanol (200 proof)(20 ml) během 5 minut za intenzivního míchání'. K výsledné bílé suspenzi se přidá destilovaná voda (100 ml) a míchá se 30 minut a pak
-IlOse ohřeje na asi 60 °'C. Odfiltruje se za horka a filtrát se udržuje na olejové lázni při 50 °C a potom se nechá vychladnout na teplotu místnosti a udržuje se při této teplotě 2 h a při 4 °C po 2 h. Odfiltruje se a promyje se studenpu 3% vodou v EtOH (100 ml) a suší se sáním po 1 6 h a získá se 12,95 g (asi 86 % výtěžek) titulní argininové soli s indexem homogenity 96,7 %.
Tento materiál (12,95 g) se rozpustí ve směsi 15 % vody v EtOH (asi 700 ml) při 55 °θ. Roztok se nechá zchladnout a zdržuje se při 30 °0 po 3-J/2 hodiny, teplotě místnosti 16 h a při 4 °C po 3 &. Výsledné krystaly se odfiltrují', promyjí se studenou 2% vodou v EtOH (50 ml x 2), suší se sáním po 4 h a potom se suší ve vakuu (1 mm·. H^) po 16 h a získá se 10,2 g (asi 80% výtěžek) titulní argininové soli (index homogenity 98,5%), t.t.
> 176 °C za rozkladu.
Elementární analýza pro 057^2^5022^6,4 HgO vypočteno 51,65 % C, 6,45 % H, 5,28 % N , KF (H2O), 8,7 nalezeno; 51,86 % C, 6,65 % H, 5,53 % N, KF (HgO), 8,72.
N-Methylglukaminová sůl se připraví následovně!
*-O-(Ethoxykarbonyl)-7-O-dibenzylfosfonooxymethylpaclitaxel (3θ,θ g, 24,69 mmol) se po částech přidá kr. suspenzi 10% palladia na uhlí (20% nanesení, 6 g) v EtOH (900 ml, 200 proof) při 0 °C. Výsledná suspenze se odplyní evakuováním vzduchu a propláchnutím argonem. Tento proces se ještě dvakrát opakuje. Argon se pak nahradí vodíkem a výše uvedený odplynovací proces se opakuje za intenzivního míchání'. Výsledná směs se míchá při 0 °C 2 h. Chladící lázeň se odstraní a reakční roztok se míchá při teplotě okolí dalších 24 h. Heakční směs se odplyní evakuová-
-1119
I f;
i ;· v’;
níin vodíku: a propláchne se argonem a uvedený odplynovací proces se opakuje třikrát.Filtruje se pod argonem přes Celite. Filtrát se rozdělí na dva stejné podíly a ke každému podílu se přidá EtOH (190 ml, 200 proof). K jednomu „podílu^, (asi .630 ml) se. pomalu přidá' roztok K-methylglukaminu (2,24 g, 0,94 ekv.) ve směsi 1:1 voda:EtOH (200 proof)(20 ml) během 5minut za intenzivního míchání. K výsledné bílé suspenzi se přidá deštil ováné vod a (1. C0__. . .____ ml) a suspenze se míchá 30 minut a potom se ohřeje na asi 49 °C. Čirý homogenní roztok se udržuje na olejové lázni na 50 °C, nechá se vychladnout na teplotu místnosti. a na této teplotě se udržuje 2 Ha při 4 °C 1-1/2 hodiny. Odfiltruje se a promyje se 3 % vody v EtOH (100 ml), suší se sáním při teplotě mlstnosti„po J.6. h^a^ziská___ se 9,65 g (asi 64 % výtěžek) titulní N-methylglukaminové soli s indexem homogenity 96,4 %.
Tento materiál (9,65 g) se rozpustí ve směsi 15 % vody v EtOH (asi 450 ml) při 52 °C. Potom se roztok nechá ochladnout na 28 ®C na 3-1/2 hodiny, udržuje se na teplotě místnosti 16 h a na 4 °C; 3 h. Výsledné krystaly se odfiltrují, promyjí studenou 2% vodou v EtOH (50 ml x
2), suší se sáním 4 h a potom se suší ve vakuu (1 mm Hg) po 16 h a získá se 7,5 g (asi 80% výtěžek) titulní N-methylglukaminové soli (index homogenity podle HPLC 98,6 %), t.t. >154 za rozkladu.
Elementární analýza pro σ58ίΤ75Ν2°25Ρ·5»° R2° vypočteno, 52,72X^0,.j6,48^%^H,. 2,J2JL.N,^KF.UH2Ol,«6r8.2— nalezeno 53,09 % C, 6,50 % H, 2,08 % N, KF (HgO), 7,12.
Příklad 4
2'—O—(Fosfonooxymethyl)paclitaxel
a) Příprava 2*-Q-(methylthiomethyl)-7-0-(triethylsilyl )paclitaxelu.
-ř—i
-1 12-
PhC(O)O
K ochlazenému (0 až -5 °C) roztoku 7-0-(triethylsilyl)paclitaxelu (2,46 g, 2,5439 mmol) v suchém acetonitrilu (100 ml) se přidá dimethylsulfid (1,348 g, 1,59 ml, 21,6976 mmol) a potom benzoylperoxid' (2,628 g, 10,848 mmol). Heterogenní směs se míchá při 0 °C 1 ha udržuje na 5 °C po 18 h. Získá se žlutý roztok. Tento se odpaří' dosucha a Čistí se sloupcovou chromatografií na silikagelu (eluce ethylacetátem:hexanem 1:4, 1:3 a 1:2) a získá se titulní sloučenina (1,0 g, 38 %). Tato se jako taková použije v dalším stupni.
MS: /M+H/+, 1028; /M+NaZ, 1050; /M+K/+, 1066
b) Příprava 2*-2-(methylthiomethy1)paclitaxelu
-113K ochlazenému (-15 °Ο roztoku produktu ze stupně a) (1,0 g, 0,9737 mmol) v suchém acetonitrilu (30 ml) se přikape U,5N HC1 (3 ml). Výsledný roztok se míchá při -15 1 h a přh 5 ttC 18 h. Zředí se ethylacetátem (20 ml) a promyje se studeným 6%> roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Suší se (síran hořečnatý) a odpaří se dosucha. Čistí se na silikagelové destičce (methylenchlořid: 1% acetonitril.) a získá se čistá titulní sloučenina (280 mg-, 31,4%).
IR(KBr): 3446, 3064, 2940, 1726, 1666,/1582,
1516,1486.
NMR (CDClj): δ 1.118 (s, 3H), 1.229 (s, 3H), 1.662 (s, 3H), 1.689 (s, 3H) , 1.871 (s, 3H), 2.209 (s, 3H) , 2.450 (s, 3H) , 3.800 (d, Η), 4.119 (d, Η), 4.305 (d,
Η) , 4.413 (m, Η) , 4.563 (d, Η) , 4.703 (d, Η) , 4.940 (d. Η), 4.958 (dd, Η) , 5.667 (d, Η), 5.822 (dd, Η) , 6.263 (m, 2H), 7.019 (d, NH) , 7.293-8.127 (m, 15H) .
MS: [M+H]*, 914; [M+Na]*, 936; [M+K]*, 952
HRMS: MH*: 914.3394 (vypočtena’ = 914.3422)
c) Příprava 2 *-O—(dibenz.ylf osfonooxymethyl )paclitaxelu
-114K míchanému roztoku produktu ze stupně b) (0,89 g, 0,9748 mmol) v suchém 1,2-dichlorethanu (12 ml ) se přidají práškovaná 4? molekulová síta (1,0 g) a pak se přikape roztok směsi N-jodsukcinimidu (0,33 g, 1,4622 mmol) a dibenzylfosfátu (0,41 g, 1,4622 mmol) v suchém tetrahydrofurarru' (8 ml). Výsledná směs se míchá při teplotě místnosti 1 h, potom se odfiltruje přes Celite. Filtrát se odpaří dosucha a červený zbytek se vyjme do ethylacetátu (50 ml) a promyje se studeným 6% NaHSO^, studeným 6% NaHCO^ a solankou. Suší se (MgSO^) a odpařením se získá pěna.. Tato se čistí na silikagelpvé destičce: (methylenchlorid:20 % acetonitril) a získá se čistý produkt (0,77 g, 69 %)
IR(KBr): 3854, 3744, 3362, 3066, 1960, 1722, 1602,
1580.
NMR (CDC13) : δ 1.075 (s, 3H) , 1.167 (s, 3H), 1.651 (s,
3H), 1.799 (s, 3H) , 2.209 (s, 3H), 2.296 (s, 3H) ,
2.464 (m, Η), 3.686 (d, Η), 4.121 (d, Η), 4.240 (d,
Η), 4.293 (m, Η) , 4.808-4.957, (m, 6H), 5.006 (m, Η) ,
5.565-5.649 (m, 2H) , 6.034 (t, Η), 6.194 (3, Η),
7.100-8.132, (m, 26H).
MS: [M+H]+, 1144; [M+Na] + , 1166; [M+K]*, 1182
d) Příprava 2 -O-(fosfonoPxymethyl)paclitaxelu
-115Směs produktu ze stupně c) (0,9 g, 0,7874 mmol) a 10% Pd/C (1,0 g) v ethylacetátu (20 ml) se hydrogenuje při 400 kPa 24 h. Reakční směs se zfiltruje přes Celite a filtrát se odpaří dosucha. Zbytek se čistí na destičce silikagelu (methylenchlorid:40 % methanol) a získá se titulní produkt (0,254 g, 33,4 %), t.t. 202-205 °C (rozkl.).
IR (KBr) : 3438, 3066, 2942, 1722, 1652, 1602 cm*1.
NMR (aceton -de/D2O) : δ 1.081 (s, 6H), 1.571 (s, 3H) , 1.847 (s, 3H), 2.115 (s, 3H), 2.357 (s, ^H) , 3.707 (d, H), 4.08~(m, 2ΗΪ7ΊΓ275 (m, H) ,~4.941-5.085 (m, 4H), _____ .5.231_(t5_._430_H) , 5.544 (d, H) , 5.970 (t,
H), 6.376 (s, H) , 6.961-8.017 (m, 16H).
MS: [M+Na] + , 986; [M+K]\ 1002; [M+2Na-Hp, 1008;
[M+Na+K-H]+, 1024; [M+2K-H]*, 1040
HRMS: MNa+, 986.2955 Vypočteno = 986.2976)
Příklad 5;
2*,7-O-bis(fosfonooxymethyl)paclitaxel - sodná sůl
a) Příprava 2*,7-O-bis(methylthiomethyl)paclitaxelu
WW.Of
-116Pevný benzoylperoxid (1 ,995 g, 8 mmol) se přidá k míchanému roztoku paclitaxelu (0,853 g, 1 mmol) a dimethylsulfidu (1,465 g:, 20 mmol) a acetonitrilu (20 ml) při 0 θ’ο. Reakční směs se intenzivně míchá při 0 °C 3 hodiny. Postup reakce se sleduje pomocí TLC v hexanu:ethylacetátu (151, obá./obá.), Rf paolitaxel= 0,24, Rf produktu= 0,60.. Když zmizí výchozí materiál (asi po 3 h) reakce se přeruší odpařením rozpouštědel dosucha při 25 QC za použití zásobníku vakua. Suchý zbytek se oddělí za použita silikagelové kolony (EM Science,...40 -63 /um), 100 ml suchého silikagelu, velikost kolony,(ř 0 = 3/4 in., rozpouštědlový systém : hexan:ethylacetát (3:2, obj./obj.), objem každé frakce asi 25 ml. Titulní sloučenina (0,515 g, 53% výtěžek) be získá z frakcí 15 až 19.
MS (FAB/matrix N0BA,NaI ΚΙ) : [M + H]\ m/z 974; [M +
Na] + , m/z 996; [M + K] + , m/z 1012
UV (MeOH) : Xmax = 204 nm, E(l%/lcm) = 243.45; Imax =
228 nm, E(l%/lcm) =313.99
IR (KBr): 3440, 3064, 2926, 1724, 1668, 1602, 1582,
1514, 1484, 1452, 1372, 1314, 1266, 1242, 1178, 1142,
1068, 1026, 990, 916, 886, 848, 800, 774, 710, 646,
606, 570, 540, 480 cm-1.
Ή-NMR (CDC13) δ: 1.17 (3H, s) , 1.20 (3H, s) , 1.68 (3H, s), 1.74 (3H, s) , 1.84 (H, dd), 2.04 (3H, d),
2.09 (3H, s), 2.15 (3H, s) oyerlaps with (H,m) ,,2.37 (H, dd), 2.51 (3H, s), 2.79 (H, ddd) , 3.78 (H, d) ,
4.18 (H, d), 4.28 (H, m), 4.31 (H, d), 4.53 - 4.74 (4H,dva přesahující AB m) , 4.93 (H,d), 4.95 (H, d) ,
5.68 (H, d), 5.82 (H, dd) , 6.24 (H, dd), 6.54 (H, s),
7.05 (H, d) , 7.28 - 7.59 (10H, přesahující m, , 7.57 (H, m), 7.76 (2H, d), 8.09 (2H, d) .
IMISÍ··»·
-117b) Příprava 2*,7-0-bis(dibenzylfosfonooxymethyl)paclitaxelu
___Roztok N-jodsukcinimidu (135 mg, u,5 mmol) a dibenzylf osfátu (167 mg, 0,5· mmol) v suchém-tetrahydrofuranu (8ml) se přidá ke směsi 27-0-bis(methylthiomethyl)paclitaxelu (198 mg, Q,2 mmol) a 5 8 molekulových sít (asi 200 mg) v methylenchloridu (12 ml) při teplotě místnosti. Reakční směs se míchá 1,5 hodiny, potom se přes celit odfiltrují molekulová síta, promyjí se methylenchloridem (10 ml) a rozpouštědla se odpaří dosucha při teplotě místnosti za použití zásobníku vakua. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu (100 ml) a promyje se v dělící nálevce 1% thiosíranem sodným (50 ml), 0,5M hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) a dvakrát vodou (2 x 50 ml). Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, odpaří se dosucha a znovu se rozpustí v ethylacetátu (1 ml). Produkt se vysráží 50 ml ethyletheruíhexanu (1:1) a promyje se dvakrát stejným rozpóuštědlovým systémem (2 x 50 ml). Surový produkt (218 mgPse získá v 74% výtěžku'. -Čištění—tohoto ““ produktu se provede jeho vložením: v methylenovém roztoku (3 ml) na silikagel (0= 3/4 in.x L=1 in.) a elucí produktu 50 ml methylenchloridu:ethylacetátu (3:1)· Titulní sloučenina (172,7 mg, se získá v 59,3% výtěžku.
-118MS (FAB,matrice NOBA/Nal, ΚΙ) : [M +Na]\ m/z 1456; s [M + K] + , m/z 1472
UV (MeCN): Xmax = 194 nm, E(l%/lcm) = 1078.36; Xmax = 228 nm, E(l%/lcm) = 311.95
IR (KBr): 3430, 3066, 3032, 2958, 1744, 1726, 1664, 1602, 1582, 1532, 1488, 1456, 1372, 1270, 1244, 1158, .1108, 1068, 1016, 1000, 952, 886, 800, 776, 738, 698, 604, 498 cm’1.
'H-NMR (CDC13) fi: 1.12 (3H, s) , 1.14 (3H, s) , 1.56 (H, m), 1.67 (3H, s) , 1.84 (3H,< d) , 1.90 (H, rti) , 2.17 (3H, s), 2.29 (3H, s), 2.73 (H, m) , 3.73 (H, d) , 4.08 (H,
d), 4.15 (H, m), 4.20 (H, d), 4.77 (H, m), 4.79 (H,
d)·, , 4.91 -5.04 (10H překrývá jí cí1?) · 5.25 (H, dd) , §; 5.38 (H, dd) , 5.54 - 5.64 (2H,překrývající m) , 5.99 ř (H, br. dd), 6.25 (H, s), 7.11 - 7.14 (2H, m) , 7.24 7.64 (28H,pfekrývající m) , 7.94 (2H, dd) , 8.04 (2H, dd), 8.30 (H, d).
c) Příprava 27-0-bis(fosfonooxymethyl)paclitaxelsodné soli
Ph (HO) 2O1
Ph(
O
OCH OPO(OH) , ř O * •2Na
-119Vzorelt 2 ,7-£)-bis(dibenzylfosfonooxymethyl)paclitaxelu (112 mg, 0,078 mmol) se rozpustí v ethylacetátu (7 ml) a hydrogenuje se nad 10% palladiem na aktivním uhlí (50 mg) při teplotě místnosti (400 kPa) po 2 h. Katalyzátor se odstraní-přes Celíte. Celíte se promyje ethylacetátem ' (10 ml). Filtrát se zpracuje s pevným hydrogenuhličítanem sodným (20 mg, 3 ekv.) a potom se rozpouštědlo od---—s tr anií- do s acha i Suchý z by tek se znovu roz pus t í v 5 ml ~ vody: acetonu (4:1 , obj./obj.) a čistí se C-18 chromatografií s reverzní fází (55-105/U C-18, .Waters, 50 ml * suché C-18,^=3/4 in. ve vodě:acetonu (^: 1 , obj./obj.).
____________Eluant se sleduje___na analytické HPLC Jones C-18 koloně(15’ cm, 1 ml/min, X =230 nm) v acetonitrilu_fosfátovém
---- - --- pufru pH--6- (50/50>- obj .Obj . ) -s přídavkem- Q1 2 kokteilu1 iontových párů (Regis); Rt = 4,1 min. Frakce, obsahující titulní produkt se spojí, aceton se odpaří připojením k zásobníku vakua při 20 °C a roztok se lyofilizuje.
Získá se titulní proffukt (44,2 mg) v 58,8% výtěžku.
MS {FAB«matriceNOBA/Nal, ΚΙ) : [Μ + H]*, m/z 1118; [M +
Na] + , m/z 1140
UV (MeCN): Xmax = 192 nm, E(l%/lcm) = 129.73; Xmax =
230 nm, E(l%/lcm) = 26.43
IR (KBr): 3430, 3066, 2956, 1724, 1658, 1604, 1582, 1520, 1486, 1452, 1374, 1316, 1256, 1152, 1110, 1070, 1026, 966, 914, 802, 772, 710, 538 cm'1.
XH-NMR (aceton -de/D2O) 6: 0.97 (3H, s) , 1.02 (3H, s) ,
1.47 (H, m), 1.54 (3H, s), 1.70 (H, m), 1.75 (3H, s),
1.85 (H, m), 2.11 (3Ή, s), 2.30 (3H, s) , 2.88 (H, m),
3.64 (H, d), 4.03 (H, m), 4.06 (H, d) , 4.16 (H, d),
4.74 (H, m), 4.86 (H, m), 5.11 (H, br. t) , 5.22 (H,
d), 5 .42 (H, d), 5.90 (H, br. t) , 6.21 (H, s), 7.06
(H, br.t) , 7.32 - 7.69 (10H, překrývajícím) , 7.80 (2H,
d), 7 .93 (2H, d).
TOBřtW.·?
— 120—
Príklaď 6·
7-0-Methylthiomethylbaccatin III (7-MTM baccatin III)
K roztoku 2z-0-ethyloxykarbonyl-7-0-methylthiometh.ylpaclitaxelu (sloučenina z příkladu 3b), 27 g, 27,4 mmol) ve 100 ml THF a 500 ml methanolu se přidá čerstvě mletý K2C0^ (2,7 g, 19 mmol). Roztok se míchá 30 minut a neutralizuje se pomocí IR-120 (H+) pryskyřice, filtruje a zahustí. Surový filtrát se pak rozpustí ve 200 ml dichlor^ methanu a míchá se 24 hodin s tetrabutylamoniumborohydridem (10 g). Roztok se zředí dichlormethanem a promyje se vodou, nasyceným hydrogenuhličitanem: a solankou. Organická frakce se pak suší nad MgSO^ a zahustí se. Zbytek se chromatografuje přes silikagelu (1:1 hexan/ethylacetát) a získá se 9,4 g titulní sloučeniny (53 %) s teplotou tání 269 °C.
FAEMS (ΝΟΒΑ) M+H vypočt- pro ^33^43^0^: 647, nelezeno 647.
IR(KBr) 3474, 1746, 1724, 1712, 1270, 1240, 1070 cm'1 rH NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.08 (d, J=7.1 Hz, 2H) , 7.58 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.45 (t, J=7.8 Hz, 2H),t6.55 (s,
1H) , 4.94 (d, J=8.1 Hz, 1H) , 4.83 (bq, J=5.1 Hz, 1H),
-1 214.66 (ABq, J=14.7,12.3 Hz, 2H), 4.30 (m, 2H), 4.13 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.91 (d, J=6.6 Hz, 1H), 2.79 (m, 1H),
2.27 (s, 3H), 2.25 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.16 (s,
3H), 2.10 (s, 4H), 1.81 (m, 1H), 1.72 (s, 3H), 1.61 (m, 2H) , 1.16 (s, 3H) , 1.03'' (s,: 3H) .
13C NMR (CDClj, 75.5 Hz) δ 202.3, 170.8, 169.3, 167.0, Τ44727“13ζΓΧ 132.1, 130 TTr 129~4rfl Ϊ2Ζ; 6, 83.9, 80.9r Ί8.Ί, 75.7, 74.5, 73.9, 67.9, 57.6, 47.6, 42.7, 38.3,
26.7, 22.6, 21.0, 20.1, 15.2, 15.0, 10.8.
Triethanolaminová sůl 3*-N-debenzoyl-3*-desfenyl-3'-N(terč. but.yloxykarbonyl )-3 *- (2-furyl)-2 *-0-ethyloxykarbonyl-7-Č-fosfonooxymethylpaclitaxelu
a) Příprava 3*-N-debenzoyl-3*-desfeny1-3Z-N-(terč.butyloxykarbonyl )-3 *- (2-furyl )-7-2-niethylthiomethylpaclitaxelu
K roztoku HMDS (0,40 ml, 1,90 mmol) v 15 ml THF se přidá roztok n-BuLi (0,75 ml, 2,5 M v hexanech, 1,88 mmol) a míchá se 5 min při -55 °C« K tomuto roztoku se
-122přidá 7-MTM baccatin III (sloučenina z příkladu 6, 1,03 g,
1,59 mmol) v 10 ml THF a míchá se 10 minut před přídavkem 10 ml roztoku (3R,4R)-1-(terc.butyloxykarbonyl)-4-(2furyl)-3-(triethylsilyloxy)-2-azetidinonu (883 mg, 2,40 mmol). Chladící lázeň se odstraní a nahradí se 0 °'C teplou lázni' a reakční směs se míchá po 30 minut. Roztok se zředí' ethylacetátem a promyje se nasyceným NH^CL roztokem, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek se chromatografuje na silikagelu (2,5:1 hexan/ethylacetát) a získá se 1,5 g kopulačního produktu 3*-N-debenzoyl3 *-desfenyl-3 *-N- (terč. butyloxykarbony 1/)-3(2-f uryl )7-0.-methylthiomethyl-2 '-O-triethylsilylpaclitaxelu (93%) * FASMS (N03A) M+Na vypočt. pro C^H^NSSiC^ g : 1036, nalezeno 1036.
IR(film) 3446 (s) , 1720, 1368, 1242/ 1166, 1144, 1124,
1066 cm'1
Cí
Ή NMR (CDClj, 300 MHz) Ď 8.07 (d, J=7.2 Hz, 2H) , 7.56 (m, 1H), 7.46 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.36 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.33 (m, 1H), 6.20 (m, 2H), 5.67 (d, J=6.9
Hz, 1H) , 5.29 (bs, 2H) , 4.94 (d,, J=7.8 Hz, 1H) , 4.75 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.28 (m, 2H),‘4.16 (d, J=8.1
Hz, 1H), 3.89 (d, J=6.9 Hz, 1H), 2.80 (m, 1H) , 2.46 (s, 3H), 2.37 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.16 (s, 3H) ,
2.10 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.84 (m, 1H) , 1.74 (s,
3H), 1.65 (m, 1H), 1.33 (s, 9H) , 1.20 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 0.81 (t, J=7.8 Hz, 9H), 0.47 (m, 6H) .
13C NMR (CDClj, 75.5 Hz) δ 202.0, 171.2, 170.3, 169.3,
167.1, 155.3, 152.0, 141.9, 141.0, 133.6, 132.9,
130.2, 129.2, 128.7, 110.7, 107.3, 84.0, 81.1, 80.2,
78.7, 76.1, 75.7, 74.7, 74.1, 72.4, 71.1, 57.4, 52.8,
47.1, 43.3, 35.2, 33.0, 28.1, 26.3, 22.9, 21.2, 21.0, 15.0, 14.5, 10.9, 6.5, 4.3.
l
-123K roztoku 2ζ-triethylsilyletheru získaného výše (330 mg, 0,32 mmol) v 7 ml THF se přidá tetrabutylamoniumfluoriď (0,35 ml, 1,0 M v ZHF, 0,35 mmol) a míchá se 10 minv Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se solankou, suší se nad- síranem hořečnatým a zbytek-se -chromátografuje na silikagelu (2:1 hexan/ethylacetét) a získá se 301 mg titulní sloučeniny (95 %)·
FAEMS (ΝΟΒΑ) M+H vypočt. pro. C^H^gNO^gS: 900, nalezeno: 900.
_ IR (fi lm) 3442, 1720,1242, 106 6, 102 6 cm’1------------------— XH NMR--(CDC13, -300 MHz) 6 8:07 -(d7’J=7:3 Hž, ' 2H)7'7.57' (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.45 (t, J=7.8 Hz, 2H), 7.38 (s,
1H) , 6.53 (s, 1H) , 6.34 (d, J=3.2 Hz, 1H) , 6.29 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.17 (t, J=8.1 Hz, 1H) , 5.65 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.29 (m, 2H), 4.92 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.64 (d, J=4.6 Hz, 2H), 4.29 (m, 2H), 4.14 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.86 (d, J=6.8 Hz, 1H), 3.37(d, J =
5.8 Hz, 1H), 2.77 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.32 (m, 2H) ,
2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.77 (m,
3H), 1.73 (s, 3H), 1.33 (s, 9H), 1.17 (s, 3H), 1.12 (s, 3H).
13C NMR (CDC13, 75.5 Hz) δ 202.0, 172.6, 170.3, 169.2,
167.0 , -1-55.2, 151 .3, 142 .4, 140.4, 133.7, 133 .2,
130.2, ,129.1,_ .128. .7, 110 ,7,.107.4 ,„.83.9, 81.2 ,80.5,
78.6, 76.5, 76 .1, 75.4, 74.6, 74.0, 72.5, 71. 8, 57.4,
51.7, 47.2, 43 .2, 35.2, 32.8, 28.1, 26.4, 22. 6, 20.9,
15.2, 14.6, 10 .9, 8.3.
-124b) Příprava 3*-N-debenzoyl-3*-desfenyl-3*-N-(terč.butyloxykarbonyl )-3 *- (2-furyl)-2 *-O-ethyloxykarbonyl-7-Omethylthiomethylpaclitaxelu
K roztoku produktu ze stupně a) (864 mg, 0/96 mmol) v 50 ml dichlormethanu při 0 °C se přidá diisopropylethylamin (2,0 ml, 11,5 mmol) a ethylchlorformiát (0,50 ml, 5,25 mmol) a míchá se 4 hodiny, roztok se zředí dichlormethanem' a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem a suší se nad síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek se chromatografuje na silikagelu (1:1 hexan/ethylacet^t) a získá se 884 mg 2 '-ethylkarbonátové titulní sloučeniny (9?%)·
FABMS (ΝΟΒΑ) M+H vypočt. pro ^8¾1^ 8S 972,3688, nalezeno 972,3654·
IR(fiím) 1752, 1720, 1370, 1244, 1196, 1176, 1Ó64 cm-1 JH NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.09 (d, J=7.8 Hz, 2H) , 7.57
(t.. J=7.5 Hz, 1H) , 7.46 (t, J=7.8 Hz, 2H), Ί. 38. (s,
1H) , 6.55 (s, 1H), 6.35 (m, 1H), 6.27 (m, 1H) , 6.22
(t, J=7.8 Hz, 1H), 5.67 (d, J=7.2 Hz, 1H), 5. 51 (d,
J=9. 9 Hz, 1H) , , 5.34 (d, J=2, .4 Hz, 1H), 5.2 5 ( d, J=10.2
Hz, 1H), 4.95 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H) , 4.30
(m, 2H), 4.22 (m, 2H), 3.88 (d, J=7.2 Hz, 1H) , 2.81
(m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.36 - 2.21 (m, 2H) , 2 .16 (s,
3H), 2.11 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.83 (m, 1H) , 1.74
(s, 3H), 1.67 (s, 1H), 1.59 (s, 1H), 1.34 (s, 9H) ,
1.29 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.18 (s, 3H).
-12513C NMR (CDC13, 75.5, Hz) δ 202.1, 169.9, 169.1, 167.6,
167.0, 154.0, 150.1, 142.6, 141.0, 133.6, 132.9,
130.2, 129.2, 128.7, 110.7, 107.5, 83.9, 81.1, 80.7,
78.7, 76.0, 75 .7, 75.1, 74.7, 74.2, 71.8, 65.1, 57.4,
49.7, 47.1, 43 .2, 35.0, 33.0, 28.1, 26.'3, 22.6, 21.1,
20.9,15.1,,14 .5, 14.1,,10.9.- ............7. : -
c) Příprava 3'-N-debenzoyl-3*-deš'fenyl-3*-N-(terč.butyl ———- oxykarbonyl-)-3-*—(-2-furyl )-2 *-2-ethyloxykarbonyl-'7-0dibenzylfosfonoOxymethylpaclitaxelu
K roztoku produktu ze stupně b) (230 mg, 0,236 mmol) v 10 ml bezvodého THF se přidá 300 mg 4A sít, dibenzylfosfát (270 mg, 0,98 mmol) a rekrystalovaný NIS (62 mg,
0,28 mmol). K tomuto roztoku se přidá trifluormethansulfonát stříbrný' (45 mg, 0,17 mmol) a roztok se míchá 3 hodiny. Roztok se zfiltruje přes Celite a zředí se ethylacetátem a promyje se 10% NaS20g, nasyceným hydrogenuhličitanemi a solankou, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí, ^bytek se chromatografuje na silikagelu (15% acetonitril/c&Ioroform) a získá se 219 mg dibenzylfosfátu titulní sloučeniny (77%).
FABMS (ΝΟΒΑ) M+Na vypočt. pro 1224, nalezeno 1224.
-126IR(film) 3422 (br), 1750, 1722, 1370, 1244, 1160,
1036, 1016, 1000, 976, 944 cm’1
Ή NMR (CDClj, 300 MHz) δ 8.08 (d, J=6.9 Hz, 2H), 7.58 <t, J=7.2 Hz, 1H), 7.46 (t, J=7.8 Hz, 2H) , 7.39 (s,
1H), 7.31 (m, 10), 6.35 (m, 2H), 6.28 (s, 1H) , 6.21 (t, J=7.8 Hz, 1H), 5.64 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.50 (d,
J=10.5 Hz, 1H), 5.39 (d, J=6.6 Hz, 1H) , 5.32 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.25 (d, J=9.9 Hz, 1H), 5.01 (dd, J=8.1, 6.3 Hz, 5H), 4.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.29-4.09 (m, 4H) ,
3.85 (d, J=6.9 Hz, 1H), 2.77 (m, 1H), 2.40 (s, 3H),
2.30 (m, 2H), 2.16 (s, 3H) , 1.99 (s, 3H), 1.94 (m,
1H), 1.70 (s, 3H), 1.67 (s, 1H), 1.54 {fe, 1H) , 1.34 (s, 9H) , 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H) , 1.20 (s, 3H) , 1.17 (S, 3H).
13C NMR (CDClj, 75.5 Hz) δ 201.8, 169.9, 169.2, 167.7, 167.0, 155.1, 154.0, 150.0, 142.74, 141.1, 133.7,
132.9, 130.2, 129.1, 128.7, 128.5, 128.4, 128.0,
110.7, 107.6, 93.8, 84.1, 81.6, 80.8, 80.7, 78.8,
76.3, 75.1, 74.6, 71.8, 69.3, 69.2, 65.1, 57.0, 49.7,
46.7, 43.2, 35.0, 28.1, 26.4, 22.6, 21.2, 20.8, 14.6,
14.1, 10.5.
d) Příprava triethanolaminové soli 3'-N-debenzoyl-3'-desfenyl-3 *-N-(terč.butyloxykarbonyl)-3 *- (2-f uryl )-2 *-£’ e thy 1 oxyka r b ony 1- 7- 0-f os f on o oxy me thyIp a c 1 i t ax el u = = =- _
K xroztoku produktu ze stupně c) (311 mg, 0,259 mmol) ___________ve _25— ml_ ethylace±átu_se—přidá 60— mg ^d na uhlí (10%)_a_ roztok se míchá pod atmosférou vodíku 3.0 minut. Kataly—------zátor—se-odstranf-f i-ltracf—přes—Gel-i-te~a~f±itrát-se-za-— hustí ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve 3 ml ethylacetátu· a přidá se triethanolamin (2,3 ml, 0,1 M v ethylacetátu, 0,23 mmol). Roztok se zahustí a zbytek se chromatografuje přes Clff (40 % acetonitril/voda) a lyofilizuje se. Získá se 205 mg fosfátu triethanolaminové soli (67 %).
FAEMS (N03A) M+Na vypočte pro Ο47Η'6θΗΡΟ22Νβ 1044, nalezeno 1044.
IR(film) 3432 (br), 1752, 1722, 1372, 1246, 1158,
1108, 1096, 1070, 1002 cm'1 ΣΗ NMR (d6 acetone/D2O, 300 MHz) δ 8.09 (d, J=7.2 Hz,
2H), 7.62 (m, 2H) , 7.52 (t, J=7.5 Hz, 2H), 6.48 (d,
J=3.3 Hz, 1H) , 6.4 2 (m, 2H), 6.16 (t, J=8.7 Hz, 1H),
5.65- (dr i J=6.9 -Hz,· “lH)-,~=5.46 (d, - J=3 .6- Hz ,=1H)- ,=5.3 0 - -
(d, J=3.6 Hz, 1H) , 5.17 (bs, 1H) , 5.01 (bd,. J=9.0 Hz,
1H), 4.19 (bs, 1H) , 4.18 (m, 5H) , 3.95 (m, 4H), 3.87
(d, J=6.9 Hz, 1H) , 3.68 (s. 10H), 3.50 (bt, J=4.8 Hz,
4H), 2.95 (m, 1H) , 2.44 (s, 3H) , 2.41 (m, 2H), 2.16
(s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (m, 1 Η) , 1.68 (s, 3H),
1.34 (s, 9H) , 1.24 (t, J=6.9 Hz, 3H) , 1.17 (s, 6H).
-1 28Příklad 8:
Triethanolatainová sůl 3*-N-debenzoy1-3'-desfenyl-3'-N-(terč butyloxykarbonyI)-3 (2-thienyl)-2'-Q-ethyloxykarbonyl-7O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
a) Příprava 3'-N-debenzoyl-3'-desfenyl-3*-N-(terč.butyloxykarbonyl )-3'-(2-thienyl)-7-Q.-methylthiomethylpaclitaxelu
K roztoku (0,5 ml, 2,4 mmol) v 18 ml THF přli
-55 °C se přidá Bulá. (0,85 ml, 2,5 M v hexanech, 2,1 mmol). Po 10 minutách se přikape 7-MTM baccatin Til (1,15 g, 1,78 mmol) v 18 ml THP a míchá se za chladu 10 minut. Přidá se (+ )cis-1 - (terc.butyloxykarbonyl )-4- (2-thienyD3-(triethylsilyloxy)-2-azetidinon (2,80 g, 7,3 mmol) v 18 ml THF a studená lázeň se pomalu nechá ohřát na 0 QC během 30 minut. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se nasyceným roztokem chloridu amonného, suší se nad . síranem hořečnatým ja zahustí. Zbytek se “chromatografuje přes silikagel (5:1 hexan/ethylacetát) a získá sezz1,87 g získaného laktamu (3:1 hexan/ethylacetát) , který poskytne
1,44 g kopulačního produktu 3'-N-debenzoyl-3'-desfenyl3'-N-(terč.butyloxykarbonyl)-3 '-(2-thienyl)-7-£-methylthiomethyl-2*-O-triethylsilylpaclitaxelu (78%).
FASMS (NOSA) M+Na vypočt. pro 1H?1NO]5S2SiNa 1052, nalezeno: 1052.
-129IR(film) 3442 (br), 1720, 1490, 1368, 1270, 1242,
1162, 1110, 1064, 1024, 984, 754 cm'1
NMR (CDClj, 300 MHz) 6 8.09 (d, J=7.2 Hz, 2H) , 7.57 (t, J=7.6 Hz, IH), 7.47 (t, J=7.8 Hz, 2H) , 7.22 (m,
IH),6.95 (m, 2H), 6.55 (s, IH), 6.21 (t, J=9.3 Hz,
IH) , 5.68 (d, J=6.9 Hz, IH), 5.49 (bd, IH), 5.39 (bd,
J=9.6 Hz, IH), 4.94 (d, J=7.8 Hz, IH), 4.65 (s, 2H),
4.57 (s, IH) , 4.28 (m, 2H) , 4.17 (d, J = 8.4 Hz, IH) ,
3.88 (d, J=6.9 Hz, IH), 2.80 (m, IH) , 2.46 (s, 3H),
2.37 (m, IH), 2.20 (m, IH), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s,
3H) , 2.03 (s, 3H), 1.84 (m, IH), 1.74 (s, 3H), 1.68 (s, IH), 1.62 (s, IH), 1.31 (s, 9H), 1.20 (s, 6H) , 0.84 (t, J=7.8 Hz, 9H), 0.50 (m, 6H). _
13C NMR (CDClj, 75
169.3 , 167.0, 155
130.2 , -129 '. 2, 128
78.8, 77.4, 76 .0,
53.8, 47.0, 43 .3,
20.9, 14.9, 14 • 4,
Hz) Ď 201.9, 171.1, 170.7, 170.1, 1, 142.8, 140.9, 133.6, 132.9,
7, 126.9, 124.6, 83.9, 81.2, 80.1,
75.7, 75.2, 74.8, 74.1, 71.3, 57.4,
35.3, 33.3, 28.1, 26.3, 23.0, 21.3,
10.9, 6.6, 4.5.
•-4>
K roztoku 2 -triethylsilyletheru získaného výše (1,41 g, 1,37 mmol) ve 14 ml THF se přidá tetrabutylamoniumfluorid (1,4 ml, 1,0 v THF, 1,40 mmol). Roztok se míchá 30 minut, zředí se ethylacetátem a promyje se solankou, suší sd nad síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek „ se chromatografuje na .silikagelu (1:1 hexan/ethylacetát) ___________ a získá se 1,16 g titulní sloučeniny (92 %)..
FA3MS (N03A) M+Na vypočt, pro C^H^NOj 5S2Na 938 nalezeno 938.
-130IR(film) 3440 (br), 1720, 1368, 1242, 1168, 1106,
1066, 710 cm*1
Ή NMR (CDC13, 300MHz) δ 8.08 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.59 (m, 1H), 7.47 (t, J=7.8 Hz, 2H), 7.24 (m, 1H), 7.07 (m, 1H) , 6.99 (m, 1H) , 6.53 (s, 1H) , 6.18 (t,. J=8.1
Hz, 1H) , 5.66 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.49 (d, J=9.6 Hz,
1H), 5.32 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.92 (d, J=7.8 Hz, 1H),
4.63 (m, 3H), 4.28 (m, 2H) , 4.15 (d, J = 8.4 Hz, 1H),
3.86 (d, J=6.9 Hz, 1H) , 3.47 (d, J=5.4 Hz, 1H) , 2.78 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.34 (, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.74 (s, 3H) ,
1.72 (s, 1H), 1.61 (s, 1H), 1.33 (s, 9H), 1.21 (s,
3H), 1.18 (s, 3H) .
13C NMR (CDClj, 75.5 Hz) δ 201.9,172.3, 170.3, 169.2,
167.0, 154.0, 141.5, 140.2, 133.7, 133.3, 130.2 /
129.1, 128.7, 127.0, 125.4, 125.4, 83.9, 81.3, 80.4,
78.6, 76.1, 75.4, 74 .5, 74.0, 73.4, 72.5, 57.5, 52.8,
47.2, 43.2, 35.3, 32 14.7, 10.8. .9, 28.2, 26.4, 22.6, 20.9, 15.1,
b) Příprava 3*-N-debenzoy1-3'-desfenyl-3'-N-(terč.butyloxykarbonyl)-3 *-(2-thienyl)-2 '-O-ethyloxykarbonyl7-O-methylthiomethylpaclitaxelu
-131K roztoku produktu ze stupně a) (621 mg, 0,677 mmol) ve 35 ml dichlormethanu při 0 °C se přidá diisopropylethylamin (1,20 ml, 6,89 mmol) a ethylchlorformiát (0,35· ml, 3,7 ml) a míchá se 1 hodinu. Studená lázeň se oď~ , .straní. a roztok^se-míchá 2 h a zředivšedichlormethanem/ ' a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem a suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se. Zbytek se chromátogra-----Xnáe.._na_ s_ilikagel.u_- Cl 11 hexan/ethylacetát) a získá se--------“
528 mg titulní sloučeniny (79 %).
FAaas (ΝΌΒΑ) M+Na vypoč.t. pro ^Na 1010
------------------------------------------nalezeno 1010.------------------------------------------------IR(film) 3510, 3440, 1752, 1720, 1370, 1244, 1198,
1170, 1026, 988, 756 cm'1 ΤΗ NMR (CDClj, 300 MHz) δ 8.09 (d, J=7.2 Hz, 2H) , 7.58 (m, 1H), 7.48 (t, J=7.8 Hz, 2H), 7.26 (m, 1H), 6.99 (,
2H) , 6.55 (s, 1H), 6.23 (t, J=9.0 Hz, 1H) , 5.68 (d,
J=6.9 Hz, 2H) , 5.33 (d, J=9.9 Hz, 1H),.5.25 (d, J=2.4 Hz, 1H), 4.94 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.334.08 (m, 5H), 3.88 (d, J=6.9 Hz, 1H), 2.80 (m, 1H),
2.40 (s, 3H), 2.40 - 2.20 (m, 2H) , 2.16 (s, 3H), 2.11 (s, 3H) , 2.07 (s, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.74 (s, 3H) ,
1.69 (s, 1H), 1.60 (s, 1H), 1.33 (s, 9H), 1.31 (t,
J=7.2 Hz, 9H), 1.20 (s, 3H) , 1.19 (s, 3H).
- - - - ——13C- NMR“(CDC1t,-75.5“Hz) -δ- 202 .-07 169v7Y 169-.-1-, - 167-.5 ,- — -—
167.1, 154.0, 140. .9, 133 .6, 132.9, 130.2, 129.2,
128.7, 127.2, 125. .4, 125 .3, 83.9, 81.2, 80 .6, 78.8,
76.9, 76.0, 75.7, 74.7, 74.2, 72.8, 72.0, 65.2, 57.4,
50.9, 47.1, 43.3, 35.1, 33.0, 28.1, 26.4, 22.7, 21.2,
20.9, 15.1, 14.5, 14.1, 10.9.
-132c) Příprava 3 z-N-debenzoyl-3'-desf en,yl-3 .*-N- (terc.butyl oxykarbony 1 )-3 *- (2-thienyI.)-2 '-2-ethyloxykarbonyl7-O-d ibenzylf osf onooxymethylpacli taxelu
K roztoku produktu ze stupně b) (516 mg, 0,522 mm-ol) v 15 ml bezvodého THF se přidá 530 mg 4A síť, dibenzylfosfát (576 mg, 2,09 mmol) a rekrystalovaný NIS (136 mg, 0,604 mmol). K tomuto^ roztoku se přidá trifluormethansulfonát stříbrný (50 mg, 0,194 mmol) a roztok se míchá 1 hodinu. Roztok se filtruje přes Celite a zředí se ethylacetátem a promyje se 10% NaSgOg, nasyceným hydrogenuhličitanem: a solankou, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek se chromatografuje na silikagelu (15· % acetonitril/chloroform) a získá se 535 mg titulní sloučeniny (84 %).
FA3MS (N03A) M+Na vypočt. pro C6lH?2NO21 PSNa 1240 nalezeno 1240.
IR(film) 3424 (br), 1750, 1722, 1370, 1244, 1016, .........,
1000, 944 cm'1 XH NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.08 (d, J=7.0 Hz, 2H) , 7.58 (m, 1H), 7.47 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.28 (m, 11H), 6.99 (m, 2H) , 6.33 (s, 1H), 6.22 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 5.66
-133-
(m, 2H), 5.39 (t, J=6.6 Hz, 1H), 5.34 (d, J=12 Hz,
1H) , 5.22 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.01 (dd, J=8.1, 6.0 Hz,
5H) , 4.86 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.29-4.08 (m, 5H), 3.85
(d, J=6.6 Hz, 1H), 2.76 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.35-
2.18 (m, 2H), 2.16 (S, 3H), 1.97 (s, 4H), 1.69 (s,
4H) , 1.33 (s, 9H), 1.30 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.20 (s,
3H) , 1.17 (s, 3H) .
13C NMR (CDC13, 75.5 Hz) δ 197.4, 165.4, 164.9, 163.3,
162.7, 150.6, 149.7, 136.7, 136.0, 129.4, 128.6,
125.9, 124.7, 124.3, 124.2, 124.1, 123.,6, 122.9,
------121.1, 121.0, 89.4, 79.8, 77.3, 76.5, 76.3, 74.4,
72.0, 70.7, 70.3, 67.7, 64.9, 64.9, 60.9, 52.7, 46.5, 4273; 3 0777 23 78~22707 18737“17'. 0 , 16.4 ,” 1Ό737
9.8, 6.2.
d) Příprava triethanolaminové soli 3'-N-debenzoyl-3*desfenyl-3 (terč.butyloxykarbonyl)-3(2-thienyl )2 *-O-ethyloxykarbonyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
AcO /?. θθΗ2ΟΡ(Ο)(ΟΗ)2
HO Ξ OAc OBz
K roztoku produktu ze stupně c) (512 mg, 0,42 mmol) iEiCSÍ2íEflBSHBSss2HEíM2=xE2is2rsz!2i2S!ssE2sss3ffi2Bffií νκ»«;
-134ve 30 ml ethylacetátu se přidá 53 mg Pd na uhlí (10%) a roztok se míchá pod atmosférou vodíku 3 hodiny. Katalyzátor se odstraní filtrací přes Celite a filtrát se zahustí ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve 2 ml ethylacetátu a přidá se triethanolamin (4,6 ml, O,1M v ethylacetátu, 0„40 mmol). Roztok se zahustí a zbytek se chromatografuje přes C1θ (40 % acetonitrilu/voda) a lyofilizací se získá 280 mg fosfátu triethanolaminové soli (56 %). HPLC analýza vykazuje čistotu soli 96 %..
FAEMS (ΝΟΘΑ) M+Na vypočt. pro C^^NO^PS 1060, nalezeno 1060.
IR(KBr) 3422 (br), 1750, 1720, 1372, 1246, 1162, 1096, 1068, 1000 cm'1 XH NMR (d6 acetone/D2O, 300 MHz) δ 8.06 (d, J=7.2 Hz,
2H), 7.63 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.52 (t, J=7.8 Hz, 2H),
7.38 (d, J=4.2 Hz, 1H), 7.16 (d, J=3.5 Hz, 1H), 7.01 (dd, J=5.1, 3.6 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H) , 6.11 (t, J=8.7 Hz, 1H), 5.61 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 5.26 (d, J=4.5 Hz, 1H), 5.14 (t, J=6.6 Hz, 1H), 5.00 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 4.86 (dd, J=12.0, 6.3 Hz, 1H), 4.17 (m,, 5H), 4.00 (s, 7H), 3.92 (t, J=4.8 Hz, 6H), 3.84 (d, J=6.9 Hz, 1H), 3.48 (t, J=5.4 Hz, 6H), 2.94 (m, 1H),
2.42 (s, 3H), 2.36 (m, 1H), 2.27 (m, 1H), 2.15 (s,
3H) , 1.95 (s, 4H), 1.66 (s, 3H),1.30 (s, 9H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.14 (s, 6H).
-139Příklad 9
O-Desacetyl-3 *-N-desbenzo,yl-3 *-M- (terč. butyloxykarbonyl) 1 0-0- (f osf onooxymethyl )paclitaxel - · = „ , . - - a) Příprava 10-desacetyl-10-0-benzýloxykarbony1-7-0— t r i e t hy 1 s i ly1 ba cca..tinu 1IX - —----—;—=—,-----—
Do suché banky pod atmosférou argonu, obsahující 7-0-triethylsilyí-1 O-desacetyl-baccatira III (2,093· g, 3,177 mmol) se přidé suchý THF (30 ml) a ochladí se na -70 °C. Po kapkách se přidé po kapkách 1,6 M n-butyllithium (2,38 ml, 3,81 mmol). Po 15 minutách míchání se přikape benzylchlorformiát (0,91 ml, 6,39 mmol). Výsledná směs se 3 hodiny míchá za postupného ohřívání na teplotu okolí. Reakce se přeruší 25 ml nas. NH^Cl, promyje se solankou a suší se síranem hořečnatým. Rychlou chromatografií (silikagel, 30-49 % ethylacetát/hexany) se získá 2,24 g (89 %) titulní sloučeniny jako bílé pěny.
JH NMR (300MHz, CDClj δ 8.10 (d, J=8.0, 2Hj; 7.63-7^58 (m, 1H) 7.47 (t, J=8.0, 2HÍ; 7.41-7.26 (’m, 5H) ; 6.29 (s, 1H); 5.61 (d, J=7.0, 1H); 5.20 (q, J=12.2, 2H) ;
4.96 (d, J=9.0, 1H); 4.87-4.84 (m, 1H) ; 4.48 (dd,
J=6.7, J=10.4, 1H); 4.30 (d, J=8.5, 1H); 4.14 (d,
J=8.5, 1H); 3.84 (d, J=7.0, 1H); 2.58-2.48 (m, 1H) ;
2.29 (m, 4H); 2.20 (s, 3H); 2.03 (d, J=5.0, 1H); 1.92-1361.83 (m, ΙΗ); 1.68 (s, 3H); 1.17 (s, 3H); 1.04 (s, 3H); 0.91 (t, J=7.5, 9H); 0.57 (q, J=7.4, 6H).
b) Příprava 1 0-desacetyl-10-0-benzyloxykarbon.yl-3 -Ndebenzoyl-3*-N-(terč.butyloxykarbonyl)-2 *,7-bis-Qtriethylsilylpaclitaxelu
Do suché banky, obsahující produkt ze stupně a) z
(3,50 g, 4,42 mmol) se přidá malé množství toluenu a roztok se pak zahustí' za vakua. Tato banka se umístí pod argonovou atmosférou a přidá se 100 ml suchého THF. ^nka se ochladí na -70 °C a po kapkách se přidá 1 ,0M lithiumhexamethyldisilazid (6,19 ml, 6;, 19 mmol). Po 20 min míchání se přikape roztok (3R,4S)-1-(terč.butyloxykarbonyl)-4fenyl-3-triethylsilyloxy-2-azetidinonu (2,58 g, 7,07 mmol) v 10 ml suchého THF. Reakční směs se míchá 3,5 h, postupně se ohřívá na teplotu místnosti. Potom se rozruší 70 ml nas. chloridu amonného, promyje se solankou a suší se síranem hořečnatým. Rychlá chromatografie (silikagel, 5-15% ethylacetát/hexany) poskytne 5,12 g (99 %) titulní sloučeniny jako bílé pěny.
-1 37XH NMR (300MHz, CDCL3) δ 8.11 (d, J=8.0, 2H) ; 7.60-7.58 (m, 1H); 7.48 (t, J=8.0, 2H); 7.24 -7.26 (m, 10H); 6.32-6.26 (m, 2H); 5.69 (d, J=7.0, 1H) ; 5.47 (bd, J=9.7, 1H); 5.31-5.10 (m, 3H); 4.94 (d,. J=8.5, 1H);
4.56 {s,1H); 4.46 (dd, J=6.9, J=10.6, 1H); 4.31 ~~(d, J=8.3, 1H); 4.17 (d,_ J=8,3 , 1H) ; 3.81 (d, J=7.0, 1H) ;
2.53 (s, 3H); 2.48-2.33 (m, 1H); 2.22-2.17 (m, 1H); 2Tó9ns73HyriŤT5-Í7Wl i.70 (s73h)71l765 (S, 1H); 1.52 (s, 1H); 1.30 (s, 9H); 1.26-1.19 (m,
6H); 0.94-0.87 (m. 9H); 0.80-0.75 (m, 9H); 0.61-0.53 (m, 6H); 0.48-0.30 (m, 6H). ,
c) Příprava 1O-desacetyl-3*-N-debenzoyl-3*-N-(terč.butyloxykarbonyl)-7-O-triethylsilylpaclitaxelu
Produkt ze stupně b) (5,12 g, 4,40 mmol) se rozpustí ve 100 ml ethylacetátu, převede se do Parrovy nádoby a“umí s t í po'ď *at mo sfě ru“a řgon u ; Přidá’še 1 0% ’pa il a ď i’úm na uhlí (2,4 gj a reakční směs se umístí' do Parrova hydrogenačního zařízení (385 kPa) na 8 h. Reakční směs se zfiltruje přes sloupeček Celitu a zahustí. Rychlou chromatografií (silikagel, 15-20 % ethylacetát/hexan) se získá 3,24 g (79 %) titulní sloučeniny jako bílé pěny. Hydrolýζβ’Α triethylsilylskupiny produktu ze stupně b) vede ke
-138stopových zbytkům kyseliny v Parrově zařízení.
XH NMR (300MHz, CDC13) δ 8.10 (d,J=8.0, 2H) ; 7.63-7.58 (m, 1H); 7.49 (d, J-8.0, 2H); 7.39-7.26 (m. 5H); 6.276.17(m, 1H); 5.64 (d, J=7.2); 5.42(d, J=9.4, 1H) ; 5.28-5.25 (nt, 1H); 5.12 (s? 1H) ; 4.92 (d, J=8.6, 1H) ; 4.62 (bs, 1H) ; 4.38-4.28 (m, 3H); 4.17 (d, J=8.5, 1H) ; 3.85 (d, J=6.7, 1H); 3.36 <d, J=5.3, 1H); 2.49-2.40 (m, 1H); 2.36 (s, 3H);
2.25 (bd, J=8.7, 2H); 1.99-1.91 (m, 1H); 1.85 (s, 3H);
1.74 (s, 3H); 1.69 (s, 1H) , 1.67 (s, 1H) ,· 1.35 (s,
9H); 1.22 (s, 3H)1.11 (s, 3H) ; 0.93 (t, J=7.5 9H) ; 0.61-0.49 (m. 6H).
ď) Příprava 1O-desacetyl-2*-0-benzyloxykarbonyl-3*-Ndebenzo,yl-3 '-N- (terč. butyloxykarbonyl )-7-<2-triethyΙέ ilylpacli taxe lus
Do baňky, obsahující produkt ze stupně c) (3,24 g,
3,51 mmol) se přidá 30 mí suchého dichlormethanu. Banka θ' se umístí pod argon a ochladí sena 0 C. K reakční směsi se přidá Ν,Ν-diisopropylethylamin (1,22 ml, 7,02 mmol) a potom benzylchlorformiát (1,00 ml, 7,02 mmol) po v
kapkách. Po 15 minutách se odstraní chladísí lázeň a reakce se míchá' při teplotě okolí 7 hodin* Směs se roz-
í
-139ruší 30 ml nas. chloridu amonného, promyje se solankou a suší se síranem hořečnatým. Rychlá chromatografie (silikagel, 7-20 % ethylacetát/hexan) poskytne 3,24 g (89 %) titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
1H NMR (300MHz, CDClj) δ 8.10 (d, J=8.-0, 2H); 7.62-7.57 (m, 1H) ; 7.48 (t, J=8.0, 2H); 7,40-7.26 (m, 10H) ; _________
6.33-6.27 (m, 1H); 5.66 (d, J=7.0, 1H); 5.49-5.42 (m,
2H); 5.31 (s, 1H); 5.22-5.13 (m , 3H); 4.93 (d, J-9.4,
1H); 4.38 (dd, J=6.5, J=10.7, 1H); 4.34-4.28 (m, 2H) ;
4.18 (d J-8.3, 1H); 3.90 (d, J=6.7, 1H);( 2.52-2.30 (m,
4H) ; 2.24-2.20 (m? ŽLH)T 1.97^1787^, 3H) ; 1.74 (s,
3H); 1.59 (s,3H); 1.32 (s, 9H); 1.26, (s, 3H); 1.11 ___ (s, 3H); 0.96-0.88 (m, 9H); 0.61-0.48 (m, 6H) .
e) Příprava 10-desacetyl-2 -O—benzyloxykarbonyl—3*-N— debenzoyl-3 -N- (terč. butyloxykarbonyl )-1 0-£- (dibenz.ylfosfonooxymethyl)-7-Qtriethylsilylpaclitaxelu
Produkt ze stupně d) se rozpustí ve 13,5- ml (54 %) DMSO, 8,75 ml (35%) acetanhydridu a 2,75 ml (11%) ledové' kyseliny octové a umístí se pod atmosféru argonu. Reakčrrí směs se 56 hodin míchá a potom se zředí ethylacetátem na objem 60 ml. Roztok se promyje nas.hydrogenuhličitanem
-140do neutrální reakce podle? pH papírku a potom se promyje solankou. Organická frakce se suší síranem hořečnatým a zahustí se. Rychlou chromatografií s 15 až 20 % EtOAc/hexanem se získá 3,12 g surové bílé pěny s obsahem požadovaného thiomethylacetalového produktu (tj. 10-desacetyl-2 z-Obenzyloxykarbon.yl-3 *-N-debenzoyl-3 *-·N- (terč. butyloxykarbonyl )-1 0-0- (methylthiomethyl )-7-£-triethylsilylpaclitaxelu 70 % podle NMR.
Výše uvedená surová směs (3,12 g) se pak rozpustí v 1,2-dichlorethanu (61 ml) a umístí se pod argon. Přidají se 4& práškovaná molekulové síta (3,12 g) a výsledná heterogenní směs se intenzivně míchá. Přidá se roztok irekrystalovaného N-jodsukcinimidu (0,830 g, 3,69 mmol) a kanylou se přidá dibenzylfosfát (1,027 g, 3,69 mmol) v suchém THF (46 ml). Výsledná směs se míchá 5 hodin, filtruje se přes sloupeček Jelitu a zředí se na objem 250 ml ethylacetátem. Promyje se Í2 x 125’ ml) studeného 2% NaHSOp studeným 6% NaHCO^ (2 x 125 ml) a solankou. Organická fáze se suší síranem hořečnatým a zahustí se. Rychlou chromatografií (silikagel, 25 - 35 % ethylacetát/hexan) se získá 1,52 g (40 %) titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
2H NMR (CDC13, 300 MHz) fi 8.08 (d, J=7.0, 2H) ; 7.597.55 (m, 1H); 7.46 (t, J=7.2ř 2H); 7.38-7.25 (m, 20H);
6.30 (t, J=8.5, 1H); 5.65 (d, J-6.8, 1H) ; 5.49-5.39 (m, 4H) ; 5.32 (s, 1H); 5.18-4.19 (m, 4H) ; 4.93 (d,
J=9.2, 1H); 4.44 (dd, J=6.6, J=10.2, 1H) ; 4.31 (d,
J=8.4, 1H); 4.16 (d, J=8.5, 1H); 3.80 (d, J=6.9, 1H); 2.69-2.39, (m, 4H), 2.33-2.23 (m, 3H); 2.03 (s, 3H);
1.90 (t, J=12.6, 1H); 1.68-1.63 (m, 6H); 1.28 (s, 9H); 1.16-1.10 (m, 6H); 0.93 (t, J=7.4, 9H) ; 0.55 (q,
J=7.8, 6H).
-141nC NMR (CDC13, 75.5 MHz) δ 204.1, 169.7, 167.9, 167.1,
151.1, 140.7, 135.7, 133.6, 130.2, 129.2, 128.9,
128.8, 128. 7, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.0, 127.8, 126.4, 90.4, 84.2, 81.1, 80.4, 79.3,
78.8, 74.9, 72.8, 72.0,- 70.5, 69.2, 69.1, 69.0, 58.1,
46.8, 43.2, 37.1, 35.0, 28.1, 26.5, 22.8, 21.0, 14.1,
10.0,6.9, 5.5. ' ’ ™ 7
M. s. (FAB) m/z+; 1345
f) Příprava 10-desacetyl-2*-O-benzyloxykarbonyl-3 debenzoyl-3 (terč.butyloxykarbonyl)-10-0-(dibenzylf osf onooxymeth.yl )paclitaxelu /
Roztok produktu ze stupně e) (50,8 mg, 0,038 mmol) v suchém THF (2,5 ml) se pod argonem ochladí na -40 °C.
K tomuto roztoku se přidá tetrabutylamoniumfluorid (0,057 ml, 0,0577 mmol) v THF (1,0 M) po kapkách. Reakční směs se míchá 1,5· h za postupného ohřátí na -20 °C. Směs se rozruší 15 mí nas. chloridu amonného a zředí se 3Č) ml EtOAc. Organická fáze se promyje 2 x 15 ml hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Suší se síranem horečnatým a zahustí sefc Preparativní chromatografie na tenké vrstvě (silikagel, 50 % ethylacetát/hexan) poskytne 36 mg (77 %) titulní sloučeniny ve formě bílého prášku.
-142XH NMR (CDClj, 300 MHz) fi 8.10 (d, J=8.5, 2H); 7.607.55 (xn, 1H) ; 7.49-7.44 (m, 2H) ; 7.36-7.18 (xn, 20H) ; 6.27-6.22 (xn, 1H) ; 5.78 (s, 1H) ; 5.67 (d, J=7.0, 1H) ; 5.44-5.34 (m, 3H) ; 5.27 (d, J=2.2, 1H); 5.24-5.05 (m, 4H) ; 5.01-4.91 (m, 4H); 4.39-4.28 (m, 2H); 4.17 (d,
J=8.2, 1H); 3.87 (d, J=7.0, 1H); 2.58-2.51 (m, 1H) ;
2.41 (s, 3H); 2.40-2.18 (m, 2H), 2.00-1.87 (m, 5H) ;
1.73-1.69 (xn, 4H) ; 1.30 (s, 9H); 1.22-1.15 (xn, 6H) .
MS (FA3) m/z+: 1231
g) Příprava triethanolaminové soli 10-desacetyl-3*-Ν'des benzo.yl-3 *-N- (terč.butylkarbonyl)-1 0-O-(fosfonooxymethyl)paclitaxelu
500ml Parrova nádoba se naplní 1O-desacetyl-2*-Obenz.yloxykarbonyl-3 *-debenzoyl-3 *-N- (terč ►but.yloxykarbonyl )1 0-0-(dibenzylfosfonooxymethyl)paclitaxelu (264,9 mg, v
0,215 mmt>l) a ethylacetát (20 ml). Banka se pak propláchne argonem a přidá se 10 % Pd/C; (318 mg-). Výsledná směs se umístí do Parrova aparátu s atmosférou 385 kPa vodíku. Reakcese sleduje pomocí HPLC (70:30 CH^CN/QB pufr pfT6’,0, 1,00 ml/min, Zorbax C-18 kolona, 25,0 cm,O\=230 nm) až není výchozí materiál evidován (12,5 h). Směs se zfiltruje přes sloupeček Celitu, který se promyje ethylacetétem a malým množstvím dichlormethanu. Výsledný filtrát se zahustí a zbytek se vyjme do dichlormethanu (5 ml).. Přídavek dalšího hexanu vyvolá tvorbu bílé sraženiny, ze které se izoluje 140,3 mg volné kyseliny (80% čistota podle
—143“
HPLC), jako bílé pevné látka. Tento materiál se nechá přímo reagovat v dalším stupni.
v
Do banky, obsahující volnou kyselinu (140 mg, 0,153 ' mmol) se přidá dichlormethan (10 ml). Výsledný roztok se pak zpracuje s 0,100 M roztokem triethanolaminu v ethylacetátu (1,16 ml, 0,116 mmol), což vyvolá turbiditu roztOkuvTPřidáse příbližně 2 ml hexanu a směs se umístí přes noc při -20 °C. Výsledná sraženina se odfiltruje přes 4,0 až 5,5 /Um skleněnou nálevku s fritou. Pevná látka se odstraní a umístí se do vakua na 4 h a získá se 69,9 mg —(42—%)—titulní—triethanolaminovésoli“ veformě šedého prášku, který je podle HPLC analýzy čistoty 95 až 96 %.
~(T-=--2-0 5si„7 70 :30CHJCH/Q8”pufi^pfir670 “Ϊ, 0Ó^mÍ/min7™ ' Zorbax C-18 25,0 cm,Ά =230 nm).
XH-NMR (d6-aceton//D20, 300 MHz): δ 8.03 (d, J=7.4,
2H); 7.65 (t, J=7.3, 1H); 7.54 (t, J=7.6, 2H); 7.427.33 (m, 5H); 7.21 (t, J=7.0, 1H); 6.09 (t, J=9.0,
1H); 5.81 (s, 1H); 5.59 (d, J=7.0, 1H); 5.12 (bs, 2H) ;
4.93 (d, J=8.4, 2H), 4.56 (d, J=4.9, 1H); 4.31-4.26 (m, 1H); 4.11 (s, 2H); 3.41-3.37 (m, 6H); 2.42-2.32 (m, 5H); 2.15 (bs, 1H) ; 1.97 (s, 3H) ; 1.77-1.64 (m,
2H); 1.58 (s, 3H); 1.13 (s, 9H); 1.15-1.07 (m, 6H) .
nC NMR (d6-aceton , D2O, 75.6 MHz): δ 171.6, 166.9,
156.6, 141.8, 135.1, 134.2, 131.0, 130.7,129.4, 129.3,
128.4, 128.1, 88.3, 85.4, 81.9, 79.7, 78.6, 78.1,
7678, 76.0,74. 8, 71.9, 71.2, 47.4,44.0, 37.1,36.3,
28.5, 27.0, 23.1, 22.0, 14.7, 10.4.
HRMS': MNa+, 940,3142 (vypočteno pro: C^H^NC^gPNa=940,31 33)
-144Příklad 10 *-^-Fosfonooxymethoxymethylpaclitaxel
K roztoku 7-O-triethylsilylpaclitaxelu (7υ,θ mg, 72,2 mmol), bis(methylthiomethylíetheru (90 mg, 72,2 mmol),molekulových sít (70 mg) a N-jodsukcinimidu (160 mg, 72,2 mmol) v THF (2,0 ml) při teplotě místnosti se přidá triflát stříbrný (5,0 mg, 19,5 mmol) a výsledný roztok se i
míchá 2 h. Reakční směs se pak zředí ethylacetátem a filtruje se přes sloupeček celitu. Filtrát se promyje nasyceným roztokem (vodným) hydrogenuhličitanu sodného, potom 1:1 (obj.jobj.) směsi nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a 5% vodným: roztokem thiosíranu sodného a nakonec solankou. Organické podíly se pak suší nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej' še čistí rychlou chromatografií (3:1, hexany:ethylacetát) a získá se 22,0 mg (29 %)~ titulní sloučeniny jako ·* bílé - · pevné látky.
ΐ'··'
-145ΧΗ NMR (300MHz, CDC13) δ 8.12-7.20 (15Η, m), 7.04 (ΙΗ, d, J=8.9 Hz), 6.41 (ΙΗ, s) , 6.25 (1H, m), 5.81 (1H, dd, J=8.9, 2.4Hz), 5.68 (1H, d, J=7.0 Hz), 4.93 (1H, d, 8.0 Hz), 4.79 (2H, m), 4.71 (1H, d, 2.4 Hz), 4.45 (1H, dd, J=10.5, 6.6 Hz), 4.30 (1H, d, J=8.3 Hz), 4.28 (ÍH, d, J=11.7 Hz)_, 4.17 (1H, d, J=8.3 Hz) , 4.04 (1H, d, J-11.7Hz), 3.80 (1H, d, J=6.9 Hz), 2.48-1.13 (25H, m, incl. singlets at 2.51, 2.13, 2.05, 2.01, 1.69,
1.19, 1.16), 0.98-0.85 (9H, m), 0.65-0.50 (6H, m) .
LV.
:·
b)
Příprava 2 *-O—(dibenzylfosfonooxympthoxymethyl>-7triethylsilylpaclitaxelu______________________
K roztoku produktu získaného ve stupni a) (15 mg,
0,0141 mmol) a molekulových síť (15 mg) v THF (0,9- ml) se při teplotě místnosti’ přidá dibenzylfosfát (20,0 mg,
-i_________________- ...0,089. mmo 1)_, a.p o t om _ N-j od s uk c in imid __(4,2 . mg ,^0 ,87- mmol)-____ a roztok se 1 h míchá- TLC analýza reakční směsi po této době indikuje pouze přítomnost výchozího materiálu. Ve třech částech se přidá triflát stříbrný (5,0 mg, 0,019 mmol) během 2 h á reakce se míchá další 1 h. Reakční směs se pak zředí ethylacetátem a výsledný roztok se filtruje? přes sloupeček celitu. Filtrát se zpracuje s 1:1 (obj.:obj.)
V
-146roztokem nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a 5% vodným roztokem thiosíranu sodného. Organický extrakt se pak promyje solankou, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej se čistí rychlou chromatografií (1:1, hexany^ethylacetát) a získá se 5,0 mg (33%) titulní sloučeniny:
!H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.08-7.16 (25H, m), 7.18 (1H, d, J=8.8 Hz), 6.41 (1H, s), 6.21(1H, m), 5.82 (1H, dd, J=9.0, 3.1Hz), 5.66 (1H, d, 7.0Hz), 5.01-4.65 (10H, m) , 4.56 (1H, dd, J=14.7, 5.6 Hz), 4.43(1H, dd,
J=10.4, 6.7 Hz), 4.29 (1H, d, J=8.3 Hz), 4.16 (1H, d, J=8.3 Hz), 3.78 (1H, d, ,J=7.0 Hz), 2.60-1.13 (22H, m, incl. singlets at 2.49, 2.15, 1.93, 1.66, 1.15, 1.13,
3H each), 0.95-0.84 (9H, m) , 0.63-0.45 (6H,m).
c) Příprava 2*-0-fosfonooxymethoxymethylpaclitaxelu
Produkt ze stupně b) se zpracuje s tetrabutylamoniumfluoridem podle postupu z příkladu 9f) pro odstranění 7-O-triethylsilylové chránící skupiny. Takto získaná sloučenina se podrobí katalytické hydrogenaci podle postupu popsaného v předcházejících příkladech a získá se titulní sloučenina. - ·
-147Příklad 11 *-O-Fosfonooxymethoxymethylpaclitaxel (alternativní postup)
a) Příprava 2*-O-triethylsilylpaclitaxelu
K roztoku paclitaxelu (20,9 g, 0,0234 mol) a imidazolu (3,59 g, 0,052 mol) ve 150 ml DMF (dimethylformamid) při 0 °C se přidá triethylsilylchloridl (6,0 ml, 0,053 mol) ve 2,.0ml množstvích- během 20 minut. Reakční směs se pak míchá při 0 °C 1 h. Směs se pak zředí ethylacetátem a nasyceným vodným chloridem amonným.. Organická vrstva se odstraní:, promyje se solankou, suší se nad síranem sodným a zahuštěním ve vakuu se získá žlutý olej. Čištěním surového produktu rychlou chromatografií (hexany·*ethylacetát: 1:3 potom 1:1) se získá 21,07 g (9θ% výtěžek) požadované titulní sloučeniny jako bezbarvé bílé pevné látky.
^..„„.JH^NMR^dOO^MHz^, CDCŮyl=6-8 ,15 (2H, - m), -7,70 - t2H7 -m) T- ---- - 7.65-7.30 (11H, m) 7.15 (1H, d, J = 8.9 Hz), 6.30 (1H, s), 6.25 (1H, m) , 6.70-6.10 (2H, m)·, 4.94* (1H, d, J =
7.9 Hz), 4.67 (1H, d, 2.0 Hz), 4.40 (1H, m), 4.29 (1H, d, J = 8.4 Hz), 4.18 (1H, d, J = 8.4 Hz), 3.81 (1H, d,
J = 7.1 Hz), 2.65-1.10 (22H, včetně singletů při
2.55, 2.20, 1.88, 1.69, 1.22, 1.13, 3H každý).
CT!3a.-w3)»m.iwiCTBm
Ο?Ώ5ί5ϊ*3ΚΤΧ·:«Λ rrt rvri-t *
-148—
b) Příprava 2 *-O-triethylsilyl-7-£2-benzylox,ykarbonylpaclitaxelu
3utyllithium (1,6 M v hexanech, 12,9 ml, 8,06 mnrol) se přikape během 10 min k roztoku 2 '-O-triethylsilyipaclitaxelu (22,3 g, 24,1 mmol) v THF (250 ml) ochlazenému na -50 °C. Výsledné roztoky se uchovávají 20 min a teplota se udržuje mezi -50 °C a -35 °C. Reakční směs se pak ochladí na -50 °C a přikape se benzylchlorformiét (5,08 ml, 29,8 mmol) během 5 min. Reakční směs se udržuje při -40 °C po 30 min, potem se ustálí na 0 °C po přibližně 30 min. Směs se pak zředí ethylacetátem a nasyceným vodným chloridem amonným a výsledná organická vrstva se promyje? solankou, šáší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. 1 Η-NMR analýza surové reakční směsi vykazuje přítomnost požadovaného 2'-O-triethylsilyl-7-O-benzyloxykarbonylpaclitaxelu jakož i 2 '-O-triethylsilyl-T^epihydroxypaclitaxelu (poměr 3:1)· Tento produkt se použije? jako směs v dalším stupni bez čištění a následně se oddělí isomery. Analytický vzorek hlavního produktu 2*-O-triethylsilyl-7-O-benzyloxykarbonylpaelitaxelu byl čištěn rachlou chromatografií; ^H-NMR (3.00 MHz, CDClj) $8,12 (2H,
-149-
m), 7.72 (1H, m), 7.65-7.27 (1H, d, J = 8.8 Hz), 6.41
(1H, m), 6.20 (1H, m), 5.72-5.65 (2H, m) , 5.52 (1H, - í
m) , 5.24 (1H, d, J = 12.3 Hz), 5.16 (1H, d, J = 12.3 c
Hz) t 4.95 (1H, d, J = 8.7 Hz), 4.69 (1H, s), 4.35 (1H, h
d, J = 8. 3 Hz) , 4.25 JIH, d, J= 8.3 Hz), 3.94 . (lH,„„d, ....... -..z, . . £
J = 6.8 Hz), 2.70-1.12 (22H,zahrnující singlety při 2.54,-2.14, 2.01, 1.80, 1.20, 1.15, 3H každý, 0.810.73 (9H, m), 0.55-0.31 (6H, m) .
Kyselina chlorovodíková (1,0 ml, 6,0 mmol) se přidá k roztoku produktu ze stupně b) (24,0 g, 22,6 mmol) v acetonitrilu (250 ml) ochlazenému na 0 Q'C. Po 10 min TLC analýza (hexany: ethylacetát 1:1) indikuje, že reakce je úplné. íXe akční směs se zředí nasyceným vodným hydrohenuhličitanem sodným a pak ethylacetátem a organická vrstva se odstraní, promyje se solankou, suší za použití síranu *· sodného a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej se čistí za použití rychlé chromatografie (hexany:ethylacetát 1:3, potom 1:1) a získá se 11,4 g (48 % během 2 stupňů) titulní sloučeniny a 4,θ g (20 %) 7-epihydroxypaclitaxelu·.
-150Ή-NMR (300 MHz, CDC13) 6 8.09 (2H, m), 7.71 (2H, m) ,
7.65-7.27 (16H, m) , 7.10 (1H, d, 8.9 Hz), 6.39 (1H,
S), 6.16 (1H, m), 5.81 (1H, d, J = 8.9, 2.4 Hz), 5.65 (1 H, d, J = 6.9 Hz), 5.49 (1H, dd, J = 10.6, 7.2 Hz),
5.20 (1H, d, J = 11.9 Hz), 5.12 (1H, d, J = 11.9),
4.91 (1H, d, J = 8.4 Hz), 4.78 (1H, m) , 4.30 (1H, d, J = 8.4 Hz), 4.15 (1H, d, J = 8.4 Hz), 3.91 (1H, d, J =
6.8 HzJ, 3.69. (1H, d, J = 4.9 Hz), 2.65-1.10 (22H,zahrnu jící singl e ty při 2.39, 2.18, 1.81, 1.75, 1.21,
1.15, 3H každý).
d) Příprava 2*-£-(methylthiomethoxymeťhyl)-7-O-benzyloxykarbon.ylpaclitaxelu
MsS
Triflát stříbrný (3OO mg, 1,17 mmol) se přidá k roztoku 7-O-benzyloxykarbonylpaclitaxelu (5,53 g, 5,71 mmol), 1,1-dithiomethyldimethyletheru (7,8 g, 57,1 mmol), N-jodsukcinimidu (6,35 g, 28,3 mmol) a sušíse v s ušárně v sušárně sušených, práškovaných molekulových sít (5r0
g) v THF (110 ml) při teplotě místnosti. TLC analýza (hexany ^ethylacetát 1:1) reakční směsi po 20 min indikuje konverzi z přibližně 40 % výchozího materiálu na vyšší produkt. Potom se přidá triflátsstříbrný (150 mg, 0,585 mmol) a reakce se sleduje pomocí TLC, která po 30 min in-
-151dikuje, že reakce je přibližně z 65 % kompletní. Směs se zředí ethylacetátem (100 ml), filtruje se za použití sloupečku celitu a filtrát se nalije do dělící nálevky, obsahující 200 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 50 ml 5% vodného roztoku thiosířanu sodného. Organická vrstva se odstraní', promyje se solankou, suší se nad síranem sodným a zahusti se ve vakuu.
V· >,
Ví i;
? 7 ''i'
Zbylý olej se čistí rychlou chromatografii (hexany:
ethylacetát, gradient elucí 4:1 až 3:2) a získá se 3,0 g (54 % výtěžek) titulního produktu jako světle žluté pevné látky. ·« ^-NMR (300 MHz, CDCL3) δ 8.10 (2H, m) , 7.74 (2H, m),
7766-772 5~(18H?-~rn)7~7705~(lH7~d“J~=—8t9-Hz)“6t4O-(1H, S), 6.26 (1H, m) , 5.77 (1H, dd, J = 8.8, 2.5 Hz), 5.71 (1H, d, J = 6.9 Hz), 5.51 (1H, dd, J = 10.6, 7.1 Hz), 5.21 (1H, d, J = 11.9 Hz), 5.14 (1 H, d, J = 11.9 Hz), 4.92 (1H, m), 4.79 (2H, m), 4.68 (1H, d, J=2.5
Hz), 4.31 (1H, d, J = 11.8 Hz), 4.30 (1H, d, J = 8.5
Hz), 4.16 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.10 (1H, d, J = 11.8
Hz), 3.93 (1H, d, J = 6.9 Hz), 2.65-1.10 (25H zahrnující singlety při 2.50, 2.15, 2.05, 1.74, 1.72,
1.20, 1.15, 3H každý).
e) Příprava 2/-0-(dibenzylfosfonooxymethoxymethyl)-7-0benzyloxykarbonylpaclitaxelu
-152OAc η
OCBZ
Ph' >
HO
O
OAc
O
BzO o > ii z (BnO)jPO
K roztoku 2*-0-(methylthiomethoxymethyl)-7-0-benzyloxykarbonylpaclitaxelu (1,06 g, 1,07 mmol) a v sušárně sušených, práškovaných molekulových sít (1,0 g) v THF (20 ml) při teplotě místnosti se přidá dibenzylfosfát (1,49 g,
5,30 mmol) a bezprostředně potom N-jodsukcinimid (2,65 g,
1,18 mmol). TLC: analýza (hexany :eth,ylacetát 1:1) reakční směsi po 2,5 h indikuje, že reakce je z asi 60 % kompletní. Potom se přidá N-jodsukcinimiď (175 mg, 0,78 mmol) a reakce se míchá dalších 30 min, potom je podle TLC reakce kompletní. Reakční směs se pak zředí ethylacetátem (50 ml) a filtruje se za použití sloupečku celitu. Filtrát se nalije do.'dělící nálevky, obsahující 100 ml nasyceného, vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 20 ml 5% vodného roztoku thiosíranu. Organická vrstva se odstraní, promyje se solankou, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej se čistí za použití rychlé chromatografie (hexany/ethylacetát, gradientová eluce 3:1 až 1:1) a získá se 750 mg (62% výtěžek) požadované titulní sloučeniny jako bílé pevné látky.
-153XH-NMR (360 MHz, CDC13) 8 8.10 (2H, m), 7.79 (2H, m) ,
7.65-7.24 (26H, m), 7.10 (lH,m), 6.41 (1H, s) , 6.20 (lH,m), 5.79 (1H, dd, J = 8.8, 3.6 Hz), 5.65 (1H, d, J = 7.0 Hz), 5.52 (lH,m), 5.20 (1H, d, J = 11.8 Hz),
5.11 (1H, d, J = 11.8 Hz), 5.04-4.85 (6H, m), 4.754.60 (4H, m), 4.30 (1H, d, 8.4”Hz), 4.15 '(1H, d,J =
8.4 Hz), 3.92 (1H, d, J = 7.0 Hz) 2.65-1.10 (22 H zahrnující’ singlety při 2.48, 2.19, 1.95, 1.80, 1.20, l^tO^nmkHŽdýT*^“---. —-—-—--—--f) Příprava 2*-0-fosfonooxymethoxymethýlpaclitaxelu triethanolamino.vé soli .Palladiu, na.uhlí (10%) se přidá k roztoku 2*-O(dibenzylf osf onooxymethoxymeth.yl )-7-O-benzyloxykarbon.ylpaclitaxelu (500 mg, 0,382 mmol) v ethylacetátu (40 ml) umístěnému v Parrově nádobě* Nádoba se upevní do Parrovy aparatury a reakční směs se hydrogenuje pod vodíkem za tlaku 350 kPa. -Reakční směs se třepe 6,5 h, potom se filtruje za použití sintrované skleněné nálevky. K tomuto filtrátu se přidá triethanolamin (0,lN'v ethylacetátu, 4,0 ml) a výsledný roztok se zahustí ve vakuu. Surová pevná látka se suspenduje v přibližně 5,0 ml ethylacetátu a rozpouštědlo se slije. Tento proces se třikrát opakuje a výsledná triethanolaminová sůl (300 g) se získá o čistotě 87 % stanoveno pomocí HPLC analýzy. Další Čištění této sloučeniny pomocí C18' chromatografie (voda: acetonitril, 3:1) poskytne požadovanou titulní sloučeninu (120_mg, ’34 %) čistoty 95 % podle HPLC.
BKuawea
-154'H-NMR (300MHz, CD3COCD3, D2O) δ 9.05 (1H, d, J = 8.7 Hz), 8.15-7.12 (21H, m) , 6.40 (lH,m), 6.05 (1H, m), 5.69-5.55 (2H, m), 5.01-4.85 (6H, m), 4.35 (1H, m),
4.14 (2H, m), 3.96-3,85 (6H, m, , 3.25 (1H, d, J = 7.1 Hz), 3.30-3.15 (6H, xn) 2.50-1.04 (22H,zahrnující. sinlety při . 2.49, 2.15, 2.05, 1.81, 1.60, 3H každý).
Přiklaď 12
3'-N-Debenzoyl-3 *-N-(isopropyloxykarbonyl)-7-Omethylthiomethylpaclitaxel
K roztoku 7-O-methylthiomethylbaccatinu III (408 mg, 0,630 mmol) v 10 ml THF při -60 °C se přidá n3uLi (0,30 ml, 2,5' M, 0,75 mmol) a míchá se 10 min. (3R,4S)3-Trieth.ylsilyloxy-4-fenyl-N-isopropyloxykarbonylazetidin-2-on (320 mg, 0,88 mmol) v 6 ml THF se přikape a potom se reakce udržuje na 0 Qc 30 min. Roztok se rozruší“ nasyceným NH^Cl a extrahuje se ethylacetátem, třepe s Bu^NF (1,0 ml, 13,0 M, 1,0 mmol) a pak sě.promyje solankou, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se. Zbytek se chromatografuje přes silikagel (1,5:1 hexan/ethylacetát) a získá se 545 mg produktu, který se krystaluje z acetonu/hexanu a získá se 476 mg titulního proďUktu· jako bílé pevné látky
υ
7/¾
V
-155(84%); IR(KBr) 3460, 1720, 1266, 1244, 1230 cm*1; ΉNMR (CDClj, 300 MHz) δ 8.07 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.59 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.47 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.32 (m, 5H) ,
6.51 Js, lHb 6.18 (tΛ J=8 .Ί t. Hz, 1H) , . 5.65 (d, J=6.6 Hz, 1H), 5.50 (d, J=9.3 Hz, 1H), 5.28 (d J=8.4 Hz,
1H), 4.91 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.64 (bs, 3H), 4.26 (m, 2H), 4.15 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.83 (d,
J=6.9 Hz, 1H), 3.44 (d, J=5.1 Hz, 1H), 2.78 (m, 1H), '
2.34 (s, 3H), 2.25 (d, J=9.0 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H),
2.14 (s, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.83 (m,
1H), 1.73 (s, 3H), 1.15 (m, 12H); 13 C NMR (ČDClj, 75.5 Hz) δ 201.8, 170.4, 169.2, 167.0, 156.3, 140.1, 138.3,
133.7, 133.3, 130.2, 129.1, 128.8, 128.6, 128.1,
126.8, 83.8, 81.4, 78.7, 76.0, 75.5, 74.5, 74.0, 73.6,
72.2, 68.9, 57.5, 56.4, 47.1, 43.2, 35.3, 32.9, 26.6, .6, 22.0, 21.9, 20.9, 15.1, 14.6, .υ .
FABMS
918.
N03A) M+Na vypočt. pro C^H^NSO^ 918, nalezen;
Elementární analýza pro °46H57NSO,5: vypočteno 61,66 % C, 6,41 % H, 1»56 % Ν' .
nalezeno 61,63 % C, 6,36 % Ή, 1,68 % N.
Příklad 13
... 3.*-N-De benzoyl-3 *-N- (n=buty lox.y kar bony 1 )-_7-0-me.thyl thi £>· methylpaclitaxel ·
-1 56-
K roztoku 7-O-methylthiomethylbaccatinu III (425 mg, 0,66 mmol) v 10 ml THF při -60 °0 se přidá nSuLi (0,30 ml, 2,5 M, 0,75’ mmml) a míchá se 10 min. (3R,4S)-3-Triethylsilyloxy-4-fenyl-N- (n-butyloxykarbonyl)azetidin-2-on '(350 mg, 0,93 mmol) v 6 ml THF se přikape a potom se reakce udržuje na 0 QC po 30 min. Roztok se rozruší nasyceným NH^Cl a extrahuje se ethylacetátem, třepe s Bu^NF (1,0 ml, 1,0 M, 1,0 mmol) a potom se promyje solankou, suší nad MgSO^ a zahustí se. Zbytek se chromatografuje pres silikagel (1,5:1 hexan/ethylacetát) a získá se 581 mg titulního produktu, který se krystaluje z toluenu/hexanu a získá se 464 mg bílá pevná látky (77’ %)i IR (KBr) 3444,
1722, 1372, 1242, 1108, 1066, 1026, 988 cm*1; XH-NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 8.08 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.59 (t,
J=7.5 Hz, 1H), 7.47 (t, J=7.2 Hz, 2H), 7.39 - 7.11 (m,
5H), 6.51 (S, 1H), 6.20 (t, J=8.7 Hz, 1H), 5.65 (d,
J=6.9 Hz, 1H), 5.56 (d, J=9.3 Hz, 1H), 5.29 (d J=8.4
,ι'Τ’
-157Ηζ, ΙΗ), 4.91 (d, J= 8.1 Hz, 1H) , 4.65 (bs, 3H), 4.27 (m, 2H) , 4.15 (d, J= J3.4jíz, 1H), 3.91 (m, 2H), 2.84 (d, J=6.9 Hz, 1H), 3.45 (d, J=4.8 Hz, 1H), 2.78 (m, lH),-2.33 (s, 6H), 2.25 (d, J=8.7 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.96 (s, 3H) , 1.83 (m, 1H), 1.74 (s, 3H), 1.62 (s, 1H), 1.48 (m, 2H) , 1.19 (m, 5H),
0.83 (t, J=7.2 Hz,-3H); 13C NMR (CDC13, 75.5 Hz) δ
201.9, 172.3, 170.5, 169.2, 167.0, 156.3, 140.1,
138.4, 133.8, 133.4, 130.2, 129.2, 129.0'i 128.9,
128.7, 128.2, 126.8,125.3, 83.9, 81.4, 78.8, 77.3, 76.0, 75.6, 74.6, 74.1, 73.7, 72.2, 65.4, 57.5, 56.5,
47.2, 43.2,, 35.4, 26.6, 22.6, ,21.5, 21.0, 18.9, 15.1,
14.7, 13.7, 10.9.
FARMS: (N03A) M+H vypočt. pro Ο^γΗ^θΝβΟ^ : 910, nalezeno 910.
Elementární' analýza pro C^^H^^NSO1 :
vypočteno 62,03 % C, 6,53 % H, 1,54 % N nalezeno 62,162% C, 6,45% Η, 1,5?'% N.
Příklad 14
3De ben z oy 1 e r c* bu t oxyka r bony 1“) =7-O-me thy 11 h ± omethylpaclitaxel
a) Příprava 3*-N-debenzoyl-3*-N-(terc.butoxykarbonyl)-2O-triethylsilyl-7-0-methylthiomethylpaclitaxelu
-153-
K roztoku HMDS (0,275 ml, 1,30 mmol) v 8 ml THF se přidá roztok n-BuLi (0,48 ml, 2,5 M v hexanech, 1,20 mmol) a míchá se 5 minut při -55 °C. K tomuto roztoku se přidá 7-O-methylthiometh.ylbaccatin! III (639 mg, 0,99 mmol) ví8ml THF a míchá se 10 minut před přídavkem: 8 ml roztoku (3R,4S)-3-triethylsilyloxy-4-feny1-N-(terč.butoxykarbonyl)azetiďin-2-onu (575 mg, 1,52 mmol). Chladící lázeň se? odstraní a nahradí se lázní o teplotě 0 °C a reakční směs se míchá 30 minut. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se nasyceným roztokem chloridu amonného?, suší se naď síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek se chromatografuje přes silikagel (3:1 hexan/ethylacetát) a získá se 1,0 g titulního produktu (98%); 1HN® <CDC1„ 300 MHz) » 8.09 (d. J=6.9 Hz, 2H) , 7.57 (m, , 7.46 (t, J=7.8 Hz, 2H). 7.35 (m, 2H), 7.26 (m, ' '55 (S' 1H)' 6·25 (t' J=9-6 Hz, 1H), 5.68 (d,
^)7-5727--(^1^) ,
4.95 (d, J=7.8 Hz, 1H) , 4.65 (s,2H), 4.53 (s, 1H), • 9 (m, 2H), 4.17 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.89 (d, J=6 9
Hz. 1H). 2.81 (m, 1H), 2.51 (s, 3H) , 2.37 (dd, J=15.3,
-1599.6 Hz, ΙΗ) , 2.17 (s, 3Η) , 2.10 (s, 3Η), 2.03 (s, 3Η) ,
1.85 (m, ΙΗ), 1.74 (s, 3H), 1.63 (d, J=14.lHz, 1H),
1.29 (s, 9H) , 1.21 (s, 6H), 0.76 (t, J=7.8 Hz, 9H) ,
0.36 (m, 6H); nC-NMR (CDC13, 75.5 Hz) δ 202.0, 171.6,
170.1, 169.3, 167.1, 155.2, 141.0, 139.0, 133.6,
132.8, 130.2, 129.2, 128.7, 128.5,. 127.7, 126.4, 83.9,. .
81.2, 79.9, 78.9, 76.0, 75.7, 75.2, 74.8, 74.2, 71.3,
57.3, 56.7, 47.0, 43.3, 35.3, 33.0, 28.2, 26.4, 23.0,
-21.5,-21,0,-15.0,--14.4, 10.9,6.5, _4_,3; IR(flim) 3448_______________ (s), 1720, 1242, 1120, 1056 cm*1.
—FAEMS (N03A) M+H vypočfc.prro C^H^NSSiC^ 1024,4549 nalezeno: 1024,4583b) Příprava 3 '-N-debenzoyl-3 *-N- (terč-buitoxykarbonyl )7-O-rnethyíthiomethylpacli taxelu
—-K-roz-t;o-ku“ 3“- N.-debenzoyď-3/—N- Cterc - but oxy kar bonyl , ==T
2-O-triethylsilyl-7-O-methylthiomethylpaclitaxelu (269 mg, ?
0,26 mmol) v 6 ml THF se přidá tetrabutylamoniumfluorid ji (0,3 ml,, 1,0M v THF, 0,3 mmol) a míchá se 10 minut. Roztok « se zřed£ ethylacetátem,. promyje se solankou, suší nad — 1 60— síranemt hořečnatým! a zahustí. Zbytek se chromatografuje přes silikagel(1 :1 hexan/ethylacetát) a získá se 240 mg titulního produktu (95 %), IR (film) 3440, 1720,1370,1242,1170,
1108, 1066, 756 cm’1; XH-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.06 (d,
J=7.2 Hz, 2H), 7.57 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.46 (t, J=7.8
Hz, 2H), 7.35 (m, 5H) , 6.52 (s, 1H), 6.16 (t, J=8.7
Ηζ,ΐΗ), 5.64 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.43 (bd, J=9.3 Hz,
1H) , 5.24 (bd, J-8.1 Hz, 1H) , 4.91 (d, J=8.1 Hz, 1H) ,
4.63 (m, 3H), 4.26 (m, 2H) , 4.14 (d, J=8.4 Hz, 1H),
3.83 (d, J=6.9 Hz, 1H), 3.46 (d, J=5.4 Hz, 1H), 2.77 (m, lH) , 2.34 (s, 3H), 2.27 (d, J = 8.,7 Hz, 2H) ,‘ 2.16 (s, 3H), 2.09 (S, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.79 (m, 2H),
1.72 (s, 3H), 1.32 (s, 9H), 1.19 (s, 3H) , 1.18 (s,
3H) } 13C-NMR (CDC13, 75.5 Hz) δ 202.0, 172.7, 170.3,
169.2, 167.0, 155.3, 140.3, 138.4, 133.7, 133.2,
130.2, 129.1, 128.8, 128.7, 128.0, 126.7, 83.9, 81.3,
80.2, 78.6, 76.5, 76.1, 75.4, 74.6, 74.0, 73.6, 72.3,
57.4, 56.1, 47.1, 43.2, 35.3, 32.8, 28.2, 26.5, 22.6,
21.0, 15.1, 14.6, 10.9.
FA3ÍS (ΝΟΒΑ) M+H vypočt . pro C47%0 N01 5 s 910,3684
nalezeno 910,-3706.
Příklad 15 *-N-Debenzoyl-3 *-N- (terc.butoxykarbonyl )-2 '-Q-ethyloxykarbonyl-7-Q-methylthiomethylpaclitaxel ”” “ =
-161-
K roztoku 3Z“N-debenzoyl-3*-N-(terc.butoxykarbonyl)
--------7-O-methylthiomethylpaclitaxelu (428 mg, 0,47 mmol) v___ ml dichlormethanu se přidá diisopropylethylamin (0,85
4(8 mmar)~a“DM'AP (20 mg) a' ochladí *se na Ό - °'C. Potom se přidá ethylchlorformiát (0,25 ml, 2,6 mmol) a míchá se 1 h. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se hydrogenuhličitanem a solankou, suší se (síran hořečnatý) a zahustí. Takto získaný zbytek se chromatografuje přes silikagel (1:1 hexan/ethylacetát a získá se 428 mg titul ního ethylkarbonátu (92 %), IR (film)3448 (w), 1 750, 1720, 1370, 1244, 1064, cm-1; lH-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.09 (d, J=7.2 Hz, 2H) ,
7.59 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.48 (t, J=7.8 Hz, 2H), 7.39
(m, 2H), 7.31 (m, 3H), 6.55 (s, 1H), 6.25 (t, J=9.0
Hz, lH), 5.68 (d, J=7.2 Hz, 1H), 5.40 (bm, 2H), 5.25
(s, 1H), 4.95 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.65 (s , 2H), 4.29
(m, 2H), 4.15 (m, 3H), 3.88 (d, J=6.9 Hz, 1H), 2.81
(m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.32 (m, 1H), 2.21 (m, 1H) ,
2.16 (š, - 3H)7“2Tllr-tsr‘3H)p ’ -2 .-08 (s, 3H) , - 1.84 (m,
1H) , 1.74 (s, 3H), 1.62 (s, 1H), 1.32 (s, 9H), 1.28 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.20 (s, 6H) ; nC-NMR (CDC13, 75.5
-162Ηζ) δ 202.0, 169.7, 169.1, 168.1, 167.0, 155.1, 154.1, 141.0, 137.2, 133.6, 132.9. 130.2., 129.2, 128.9,
128.7, 128.2, 126.4, 83.9, 81.2, 80.4, 78.9, 76.5,
76.0, 75.8, 74.8, 74.2, 72.0, 65.1, 57.4, 47.1, 43.3,
35.1, 33.0, 28.1, 26.4, 22.7, 21.3, 20.9. 15.0, 14.5,
14.1, 10.9..
FAEMS (ΝΟΒΑ) M+ff vypočt. pro C5QH'g^NSO1 γ 982,3895, nalezeno: 982,3874.
Příklad 16 ♦··
-N~Debenzoyl-3 *-N- (terč.butoxykarbony1)-7-0-methylthiomethyl-1 0-deacetyl-10-hydroxymethylkarbon.yl(paclitaxel)
a) Příprava 7-O-triethylsilyl-10-deacetyl-10-benzyloxymethylkarbonyl-baceatinu lil
K roztoku 7-\O-triethylsilyl-10-deacetylbaccatinu III (3,85- g, 5,θ5 mmol) ve 40 ml THF při -60 °C se přidá n-3u-L*ii (2,6. ml, 2,5M v hexanech, 6,5 mmol) a míchá se 5 minut před přídavkem benzyloxyacetylchloridu (1,0 ml, 6,5 mmol). Po 30 minutách míchání při· -60 QC a pak ohřátí na teplotu okolí' se roztok zředí ethylacetátem a promyje7-
-163se hydrogenuhličitanem. Roztok se suší nas síranem horečnatým a zahustí a zbytek se chromatografuje přes silikagel (2:1 potom 1:1 hexan/ethylacetát) a získá se 4,36 g produktu; (92%); IR (film) 3478 (br), 1724,
1270, 1244, 1136, 1110, 1070 cm'1; ^H-NMR (CDC13, 300
MHz) 6 8.08 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.60-7.23 (m, 8H), 6.54 (s, 1H) , 5.60~(í~J«6'· FHzT ΪΗ)C 4.94 (d, J=7.8 Hz, - _ — 1H), 4.79 (bq, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.49 (dd, J=10.5,
6.6 Hz, 1«), 4.26 (m, 2H), 4.12 (m, 1H), 3.85 (d,
J=6.9 Hz, 1H), 2.52 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.23 (m,
2.10 “(^τ-1Ή)~1^86—(m,--lH) ,—1.66----(s, 3H), 1.14 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.91 (t, J=7.5
Hz, 9H) , 0.56 (m, 6H) . ~ “ ~ ~~
Elementární' analýza pro X^H^gSiO^ vypočteno 65,49 % G, 7,24 & H nalezeno 65,33 % C-, 7,27 % H
FABMS- (ΝΟΒΑ) M+H vypočt. pro C^H^SiC^ g 807, nalezeno 807·
b) 3*-N-Debenzoyl-3*-N- (terč.butoxykarbonyl)-1 0-deacet.yl10-benzyloxymethylkarbonyl(paclitaxel)
o
-164K roztoku 7-O-triethylsilyl-lO-deac?etyl-lO-benzyloxymethylkarbonyl-baccatinu III (1,21 g, 1,66 mmol) v 50 ml THF při -60 °C se přidá n-3uLi (0,7 ml, 2,5M v hexanech,
1,75 mmol) a míchá se 5 minut před přídavkem (3R,4S)-y3triethylsilyIoxy-4-fenyf-N- (terc-butoxykarbonyl)azetidin2-onu (1,2 g^, 3,2 mmol). Po 5 min míchání při -60 °C a pak 30 min při 0 °C< se roztok zředí ethylacetátem a pro. myje se nasyceným chloridem amonným. Roztok se suší nad « síranem hořečnatým a zahustí se na zbytek, který se chromatograf uje? přes silikagel (3:1 potom 1:1 hexan/ethylace·* tát) a získá se 980 mg produktu (53 %)., Tento produkt se rozpustí v 6 ml acetonitrilu a ochladí se na 0 °C a míchá se s 0,60 ml 6N HCI 19 h. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem sodným1, suší se nad síranem hořečnatým a chromatografií přes silikagel (1:1 hexan/ethylacetát) se získá 570 mg produktu (35 %); IR (film)
3448 (br), 1716, 1496, 1368, 1316, 1270, 1246, 1176,
1108, 1070, 1026 cm-1; Ή-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.08 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.59 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.47 (t,
J=7.8 Hz, 2H) , 7.36 (m, 10H) , 6.38 (s, 1H) , 6.20 (t,
J=9.0 Hz, 1H), 5.65 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.39 (bd, J=9.3 Hz, 1H) , 4.93 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.60 (bs, 1H) , 4.39 (m, 1H) , 4.28 (m, 3H) , 4.15 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.78 (d, J=6.9 Hz, 1H), 3.40 (bs, 1H), 2.54 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (m, 2H) , • 1.84 (s, 4H), 1.72 (m, 1H) , 1.67 (s, 3H), 1.31 (s,
9H) , 1.23 (m, 1H), 1.21 (s, 3H) , 1.10 (s, 3H)^_
Elementární analýza pro θ52'^6ΐΝθΐ6 vypočteno 65,33 % C, 6,43 % Ή, 1,46% N nalezeno 64,97 % <%, 6,44 % H, 1,43 % Ν’.
r vrt í ip
— 165—
FAEMS' (ΝΟΒΑ) M+Na vypočt. pro 2¾iN01 6Na ^78, nalezeno 978.
c) Příprava 3 *-N-debenzoyl-3/-N-(terc.butoxykarbonyl)-.2-2benzyloxykarbonyl-7-O-methylthiomethyl-10-deacetylΐO-benzyloxymethylkarbonyl(paclitaxelu)
K roztoku 3'-N-debenzo.yl-3 *-N-(terč. butox.ykarbonyl)10-deacetyl-1O-benzyloxymethylkarbonyl(paclitaxelu) (570 mgr, θ,59 mmol) v 10 ml CHgC^ P^i θ °C se přidá diisopropylethylamin (0,15 ml, 0,86 mmol) a CbzCl (0,10 ml, 0,70 mmol). Roztok se míchá 1 h za pomalého ohřívání na teplotu okolí. Roztok se promyje hydrogenuhličitanem a suší se nad síranem hořečnatým a zahustí. Zbytek v 10 ml acetonitrilu se při 0 °C míchá s benzoylperoxidem (780 mg, 3»22 mmol) a dimethylsulfidem (0,50 ml, 6,8 mmol) za pomalého ohřívání na teplotu okolí během 75 min. Roztok se zředí ethylacetátem a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem, suší se nad síranem hořečnatým a promyje se nasyceným hydrogenuhličitanem, suší nad síranem hořečňatý£n a chromatografií přes silikagel (2:1 hexan/ethylacetát) se získá 412 mg titulního produktu (65 %);
-166IR(film) 3438, 1754, 1722, 1368, 1272, 1244, 1176, 1110, 1066, 1028 cm-1; ^H-NMR (CDC13, 300 MHz) fi 8.11 (d, J=7.2 Hz, 2.H) , 7.61 (t, J=7.2 Hz, 1H) , 7.49 (t, J=7.8 Hz, 2H)
J=8.7 Hz, 1H)
5.29 (s, 1H),
J=8 Hz, 1H),
-2H),-3.90 (d,
1H), 2.44 (s, (s, 3H), 2.12 1.33 (s, 9H), δ 201.6, 169.
141.6, 137.1,
128.9, 128.8,
128.0, 126.4, '75.8, 74.7, 74.3, 73.4, 72.0, 70.6, 67.1, 57.4, 54.1,
47.1, 43.2, 35.2, 32.9, 28.1, 26.4, 22.7, 21.3, 15.2,
14.6, 10.9.
, 7.35 (m, 15H), 6.67 (s, 1H), 6.26 (t, , 5.69 (d, J=6.6 Hz, 1H), 5.41 (bm, 2H), 5.14 (ABg, J=12, 5.7 Hz, 2H), 4.98 (d, 4.72 (m, 4H), 4.32 (m, 3H), 4.19 (m, J=6.0 Hz, 1H), 2.85 (m, 1H), , 2.45 (m, 3H), 2.34 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.87 (m, 1H), 1.77 (s, 3H), 1.19 (s, 6H) ; 13C NMR (CDC13, 75.5 MHz)
7, 168.7, 168.0, 167.0, 155.1, 154.1, 134.4, 133.7, 132.5, 130.2, 129.2, 128.7, 128.5, 128.4, 128.2, 128.0,
83.9, 81.2, 80.4, 78.8, 77.2, 76.2,
FA3MS (N03A) ^+Na vypočt zeno 1172.
pro °62H71N0,8SNa ”72· naletí) Příprava 3'-N-debenZoyl-3'-N-(terc .bUtoXykarbonyl)7-O-methylthiomethyl-l 0-deaoety 1-10-h.ydroxymethylkarbonyl(paclitaxelu)·
-167K roztoku 3*-N-debenzo,yl-3*-N-<terc.butoxykarbonyl)2-0-benzyloxymethylkarbony1-7-O-methylthiomethy1-10deacetyl-1O-benzyloxykarbonyl(paclitaxelu) (377 mg, 0,35 mmol) ve 30 ml ethanolu se přidá celkem 450 mg 10% palladia na uhlí jako katalyzátoruamícháse pod atmosférou vodíku 120 h. Katalyzátor se odfiltruje přes celíte a roztok se zahustí. Zbytek se chromatografuje přes sili;kagár (2CT%~ CH^CN/79^% GH^ei^/l ^b^eOR) a získá-se-----------—
190 mg titulního produktu’ (65 %); IR film) 3444 (br),
1724, 1368, 1246, 1174, 1096, 1070, 1026, 988 cm'1;
XH NMR (CDClj, 300 MHz) δ 8.07 (d, J=7.2 Hz, 2H) , 7.59 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.47 (t, 0^7?8“Hz,—2Η)Τ_77Ϊ5'“(πη
5ΗΪ.-6.65 (s, 1H) , 6.17 (t, J=8.7 Hz, 1H) , 5.65 (d,
J=6.6 Hz, 1H), 5.39 (bd, J=9.6 Hz, 1H) , 5.26 (bd, 1HÍ,
4.93 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.67 (m, 3H), 4.28 (m, 5H),
3.83 (d, J=6.0 Hz, 1H), 3.44 (d, J=5.1 Hz, 1H), 2.77 (m, 1H), , 2.50 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.29 (d, J=8.4 Hz, 2H), 2.13 (bs, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.82 (m, 2H),
1.74 (s, 3H) , 1.33 (s, 9H) , 1.18 (s, 3H) , 1.16 (s,
3H) ; 13C NMR (CDC13, 75.5 MHz) δ 201.5, 171.7, 170.3,
167.0, 155.4, 141.3, 133.7, 132.7, 130.2, 129.0,
128.8, 128.7, 128.1, 126.8, 83.8, 81.3, 80.2, 78.6,
75.0, 74.4, 74.0, 73.6, 72.3, 60.6, 57.4, 56.2, 47.2,
43.2, 35.3, 32.6, 28.2, 26.5, 22.6, 21.0, 15.5, 14.7,
10.8.
\
FAcMS (ΝΟΒΑ) M+Nq vypočt. pro- C^R^NOj gSNa 948', nalelezeno 948- --- - -.
Příklad 17 '-Debenzoyl-3Z-N-(terč.butoxykarbony1)-7-0-methylthiomethyl- 3*-desfenyl-3 '-isobutenylpaclitaxel
— 168—
K roztoku 7-O-methylthiomethylbaccatinu III (1,5 g,
2,3; mmol) ve 30 ml THF se přidá' n-BuLi (1,Q ml, 2,5 M v hexanech, 2,5 mmol) při -60 Q'C a míchá se 10 minut. Potom se přikape roztok (+)-cis-3-triethylsilyloxy-4-isobutenyl-N-terc.butoxykarbonylazetidin-2-onu (3,3 g, 9,3 mmol) v 10 ml THF. Roztok se pak míchá při 0 °C 30 min a přeruší se reakce nas. roztokem chloridu amonného, a extrahuje se ethylacetátem.. Roztok se suší nad síranem hořečnatým a zahustí se a zbytek se chromatografuje přes silikagel (3:1 hexan/ethylacetát).. Produkt se rozpustí' ve 100 ml THF a třepe se s Bu^NF (2,3 ml, l,0Mv THF, 2,3; mmol), zředí se ethylacetátem· a promyje se solankou. Roztok se suší nad síranem hořečnatým a zahustí a zbytek se chromatografuje přés silikagel (1,5:1 hexan/ethylacetát) a získá se 1 ,6 g titulního produktu (78 %); IR (film) 3452 (br), 1724, .......
1370, 1242’, 1096, 1066 cm1; Ή-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.07 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.59 (t, J=7.5 Hz, 1H) , 7.45 (t, J=7.8 Hz, 2H), 6.54 (s, 1H) , 6.11 (t, J=9.3 Hz,
1H) , 5.66 (d, J=6.0 Hz, 1H) , 5.29 (d, J=6.0 Hz, 1H),
4.94 (d, J=8.1 Hz, 1H) , 4.75 (m, 2H), 4.64 (ABq, J=
12.0, 2.7 Hz, 2H) , 4.29 (m, 2H) , 4.20 (m, 2H), 3.86
V
-169(d, J= 6.0 Hz, 1H), 3.37 (bd, 1H) , 2.79 (m, 1H), 2.35 (s, 6H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H) , 2.04 (s, 3H),
1.82 (m, 1H), 1.74 (s, 9H), 1.34 (s, 9H), 1.23 (s,
3H), 1.20 (s, 3H); 13C NMR (CDCl3, 75.5 Hz) δ 202,
170.2, 169.2, 166.9, 155.4, 140.6, 138.0, 133.7,
133.1, 130.1, 129.2, 128.6, 120.6, 83.8, 81.2, 79.9,
78.7, 77.2, 76.1, 75.5, 74.6, 74.0, 73.7, 72.2, 57.4,
51.5, 47.1, 43.2, 35.4, 32.9, 28.2, 26.4, 25.8, 22.4, 21.0, 18.6, 15.1, 14.8, 10.9.
FA3MS- (N03A) M+H1 vypočt.pro C^H^NSO^ 888, nalezeno ~~ 888.
Příklad 18
7-Ο-Methylthiomethyl-3 *-desfenyl-3*-isobutenylpaclitaxeI
Titulní sloučenina se připraví jako v příkladu 17 ze 7-O-methylthiomethylbaccatinu III a (+)-cis-3-triethylsilyloxy-4-isobuten.yl-N-benzoylazetidin-2-onu.
Příklad 19
3*-Desfenyl-3*-(2-furyl)-2 *-£-ethyloxykarbonyl-7-Omethyl thiomethylpacli taxel
Titulní sloučenina může být připravena ze (3R»4R)-1benzoyl-4-(2-furyl)-3-triethylsilyloxy-2-azetidinonu a 7-O-methylthiomethylbaccatinu III podle postupů popsaných v příkladu 7a) a 7b).
Příklad 20 z-0-n-Propylkarbonyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel
-170a) Příprava 2 '-O-n-propylkarbonylpaclitaxelu
K. roztoku paclitaxelu (15,0 g·, 17,5 mmol) a diisopropylethylaminu (18,3 ml, 105 mmol) v; ďichlormethanui (175 ml), ochlazenému na 0 °C se přidá butyrylchloria (5,49 ml, 52,4 mmol) po kapkách během 2 min. Reakční. směs se pak ohřeje na teplotu místnosti a míchá se 16 h. Reakční směs se pak rozdělí mezi. ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu amonného. Organická fáze se pak promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného· a potom solankou, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu, ^b.ylý olej se čistí za použití rychlé chromatografie (eluce hexanyethylacetátem) a získá se titulní ester (15,9 g, 98% výtěžek) jako bílá pevná látka; 1HNMR (CDClj, 300MHz) δ 8.13-8.05 (2H, m) , 7.75-7.65 (2H, m), 7.62-7.30 (11H, m) , 6.88 (1H, d, J = 9.0Hz), 6.26 (1H, s) , 6.23 (1H, dd, J = 8.4 Hz), 5.92 (1H, dd, J =
9.3, 6.0 Hz), 5.65 (1H, d, J = 7.1 Hz), 5.48 (1H, d, J = 3.2 Hz), 4.94 (1H, d, J = 7.9 Hz), 4.21 (1H, dd, J =
10.4, 6.5 Hz), 4.28 (1H, d, J = 8.4 Hz), 4.17 (1H, d,
J = 8.4 Hz), 3.78 (1H, d, J = 7.0 Hz), 2.64-1.02 (26H, m' zahrnující singlety př?’43' 2*19' 1-65, 1.65,
1.20, 1.10, 3H každý),0.87 (3H, dd, J = 8.2 Hz).
-171b) Příprava 2 <,-O-n-propylkarbonyl-7-2-methylthiomethyl- / paclitaxelu |
peroxid! (15,1 g, 62,3 mmol) a reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti během 1 h. V této době ukazuje TLC (eluce hexany:ethylacetát 1:1), že reakce je kompletní. Reakční směs se pak zředí' ethylacetát a výsledný organický roztok se promyjje třikrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu: a pak solankou. Organická fáze se pak suší nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej se čistí rychlou chromatografií' (eluce hexany:ethyláce— tát) a získá se titulní sloučenina (14,4 g, 93 %) jako bílá pevná látka; 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.21-8.19 (2H, m) , 7.72-7.70 (2H, m), 7.62-7.26 (11H, m) , 6.92 (3H, s), 6.20 (1H, dd, J = 8.4 Hz), 5.92 (1H, dd, J =9.0, 3.1 Hz), 5.66 (1H, dr“J“ = 6t9“Hz)t“5t53ťJlH?”dr*<J“=“3T2“Hž )T~4T92~ (ΙΗ'Γd7“= J = 8.2 Hz), 4.68-4.59 (2H, m), 4.32-4.26 (2H, m) ,
4.15 (1H, d, J = 8.3 Hz), 3.86 (1H, d, J = 6.8 Hz),
2.77 (1H, m), 2.50-1.05 (25H, m), 0.87 (3H, dd, J =
7.3 Hz).
·. I :jl
I vi
-172c) Příprava 2 z-0-n-propylkarbon.yl-7-0- (dibenzylfosfono— ox.ymethyl )paclitaxelu
N-Jodsukcinimiď: (4,9 g, 21,8 mmol) se najednou přidá k roztoku 2*-0-n-propylkarbonyl-7-P-methylthiomethylpacli taxeltx (10,7 g·, 11,0 mmol), dibenzylf osfátu (15,3- g, 55,θ mmol) a 5 g v sušárně sušených 3 Ángstrom sít v THF (200 ml) při teplotě místnosti a výsledná směs se míchá 1 h.. V tomto čase TLC analýza (eluce hexany·ethylacetátem 1:1) indikuje, že reakce je kompletní. Reakční směs se pak zředí na dvojnásobek původního objemui ethylacetátem1- a filtruje se přes lože celitu. Filtrát se pak nalije do nasyceného^ roztoku hydrogenuhličitanu sodného, obsahujíoíhol % thiosíranu sodného (hmotn.). Organická vrstva se pak promyje čtyřikrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a pak solankou. Vodná vrstva se pak znovu extrahuje ethylacetátem a spojené organické podíly se suší nad síranem sodným a zahustí --»·· se ve vakuu. Zbylý olej se čistí rychlou chromatografií (hexany:ethylacetát) a získá se titulní dibenzylfos— fát (9,9 g, 76% výtěžek) jako bílá pevná látka,·
r: z ™ ς ;
-173XH-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.10-8.08 (2H, m) , 7.74-7.71 (2H, m) , 7.61-7.25 (21H, m), 6.94 (1H, d, J = 9.0 Hz), *
6.31 (ΙΗ, ε), 6.20 (1H, dd, J = 8.7 Hz), 5.91 (1H, dd,
J = 9.0, 3.1 Hz), 5.64 (1H, d, J = 6.9 Hz), 5.49 (1H, d, J = 3.0 Hz), 5.39 JIH, dd, J = 6.6 Hz), 5.05-4^98 . í (5H, m), 4.86'(1H, d,'j = 8.4 Hz), 4.26-4.12 (3H, m) , J
3.84 (lH, d, J = 6.8 Hz), 2,82-2.71 (1H, m) , 2.52-1.05 (26 H, m, zahrnuje singlety pro 2.43, 2.18, 1.97, “?
1.69, 1.22, 1.20, 3Ή každý P · 90-0.85 (3H, dd, J = 7.3 ’ :
Hz) .
d) Příprava 2*-O-n-propylkarbonyl-7-O-fosfonooxymethyl--paclitaxelu-------
Do dusíkem propláchnuté Parrovy hydrogenační nádoby se přidá 2,5- g 10% palladia na uhlí a potom čistý ethylacetát (150 ml) a roztok 2*-O-n-propylkarbony1-7-0-(dibenzylf osf onooxymethyl )paclitaxelu (4,9 g, 4,14 mmol) v ethylacetátu (40 ml)» Reakční nádoba se pak upevní do Parrova h.ydrogenátoru, umístí pod vakuum, potom se natla-- - - k u j e “ v od íkemna-3 5 0 ’ kPa. Heterogenní' smě s š é pa k' třepe-’ 5 ~ ha potom TLC analýza indikuje (eluce hexan.y_ethylacetát) spotřebu výchozího materiálu. Reakční směs se pak umístí pod vakuum a následně se profoukne dusíkem. Směs se pak filtruje za použití sintrované skleněné nálevky a filtrát se zahustí ve vakuu a poskytne titulní sloučeninu (3,7 g, 91% výtěžek), která podle 1H-NMR analýza je čistá.
-1 74e) Příprava 2 '-O-n-propylkarbonyl-7-O-f osfonooxymethylpaclitaxel-triethanolaminové soli
K roztoku 2 *-0-n-propylkarbon.yl-7-0-f osf onooxymethylpaclitaxelu (1,1 g, 1,09 mmol) v dichlormethanu (50 ml) se přidá 0,1M'roztok triethanolaminu (10,9 ml, 1,09 ml) v ethylacetátu a výsledná směs se míchá 5 min při teplotě místnosti. Reakční směs se pak zahustí ve vakuu a výsledná bílá pevná látka se čistí nejprve rozpuštěním surového materiálu v minimálním množství methylenchlorid-ethylacetátové směsi. K tomuto roztoku se pak přidají hexany a požadovaná aminová sůl se vysráží jako bílá pevná látka. Směs se pak dekantuje a získá se amin jako bílá pevná látka, která mě podle HPLC čistotu vyšší než 95 H-NMR (aceton-dg, Ι^θ» 500
MHz) δ 8.09-8.07 (2H, m), 7.86-7.84 (2H), 7.69-7.24 (TÍH, m), 7.24 (1H, dd, J = 7.5 Hz), 6.36 (1H, s) ,
6.05 (1H, dd, J = 8.4 Hz), 5.85 (1H, d, J = 6.7 Hz),
5.61 (1H, d, J = 7.0 Hz), 5.49 (1H, d, J = 6.9 Hz), 5.15-5.13 (1H, m), 4.98 (1H, d, J = 8.2 Hz), 4.87 (1H, dd, J = 12.1 Hz, 6.4 Hz), 4.12 (bs, 2H), 3.89-3.80 (7H, m), 3.36-3.30 (6H, m) , 2.95-2.93 (1H, m), 2.421.50 (25H, m,zahrnující singlety při2.42, 2.22, 1.93,
1.66, 3H každý), 1.13 (bs, 6H) , 0.86-0.81 (2H, dd, J =
7.4 Hz).
Příklad 21 *-OMethylkarbonyl-7-0-fosfonooxymethylpaclitaxel
a) Příprava 2 '-O-acetylpaclitaxelu
K roztoku paclitaxelu (8,0 g, 9,37 mmol) a diisopropylethylaminu (4,89 ml, 28,1 mmol) v dichlormethanu (140 ml) ochlazenému na 0 °C se přidá acetylchloridl (1,0 ml, 14,1 mmol) po kapkách během 2 min. Reakční směs se ________ pak ohřej e_:na-_ teplo to. mí s.tnos t i. a _míchá.se. J0_h._Reakčn£'___ směs se pak rozdělí mezi ethylacetát a nasycený roztok vodného chloridu amonného.. Organická fáze se potom promyje nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a potom solankou, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu.
Zbylý oleji se čistí rychlou chromatografií' (eluce hexany ^ethylacetátem) a získá se 2'-P-acetylpaelitaxel (7,7 g, 92 %) jako bílá pevná látka; 1H-NMR (CDClj, 300MHz) fi 8.10-8.08 (2H, m) , 7.92-7.90 (1H, m) ,
7.89-7.70 (2H, m), 7.60-7.29 (11H, m), 6.94 (1H, d, J = 9.2 Hz), 6.26 (1H, s), 6.23 (1H, dd, J = 9.5 Hz),
5.93 (1H, dd, J = 9.2, 3.1 Hz), 5.65 (1H, d, J = 7.0 Hz), 5.48 (1H, d, J = 3.2 Hz), 4.94 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.42 (1H, dd, J = 10.8 Hz, 6.6 Hz), 4.28 (1H, d,
J = 8.4 Hz), 4.16 (1H, d, J = 8.4 Hz), 3.78 (1H, d, J
—._„.:=^6^9-Η.ζΚ~·2·».60-1...·0·2—G25H-,~m-rzahrnuje^singletyL pri_____„ „ 2.42, 2.19, 2.12, 1.90, 1.65, 1.25, 1.11, 3H každý).
sř
-176b) Příprava 2*-0-acetyl-7-0-methylthiomethylpaclitaxelu
PhCONH o
Ph
CH3COO
AcO o
HO Y AcO
O
OCOPh
JSCH3
K roztoku 2 *-O-acet,ylúaclitaxelu (7,7 g, 8,60 mmol) a dimethylsulfidu (5,1 ml, 68,8 mmol) v acetonitrilu (200 1 ml) ochlazenému na -40 °C se přidá benzoylperoxiď (8,3 g, 34,4 mmol) a reakční směs se během 1 h ohřeje na teplotu místnosti!. V této době TLC (eluce hexany:ethylacetátem 1:1) indikuje, že reakce je kompletní. Reakční směs se pak zředí ethylacetátem· a výsledný organický roztok se promyje třikrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se suší' nad síranem· sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej. se čistí rychlou chromatografií (hexany^ethylacetát) a získá se titulní' methylthimethylether (7,39 g, 9o %) jako bílé pevná látka. Ή-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8.10-8.08 (2H, m) , 7.77-7.73 (2H, m), 7.65-7.26 (11H, m) , 6.53 (3H, 2), 6.20 (1H, dd, J = 8.3 Hz), 5.92 (1H, dd, J = 12.2, 3.1 Hz), 5.67 (1H, d, J = 7.0 Hz), 5.51 (1H, d, J = 3.2 Hz), 4.94 , (1H, d, J = 8.2 Hz), 4.69-4.60 (3H, m), 4.33-4.28 (2H,
m), 4.27 (1H, d, J = 8.4 Hz), 3.86 (1H, d, J = 6.9
Hz), 2.84-2.74 (1H, m) , 2.50-1.1 (28H, m,zahrnuje.....&inglety při! 2.41, 2.15, 2.13, 2.11, 2.06, 1.73, 1.18,
1.15, 3H každý).
-1 77c) Příprava 2*-£-acetyl-7-0-(dibenzylfosfonooxymethyl)paclitaxelu
—---------ÍT-Jodsukcinimid (1,75 g, θ,θ5 mmol) se přidá najed-— nou k roztoku 2*-,O-acetyl-7-0-methylthiomethylpaclita—* θΐΰ—(57Q~gr~5 '23^mor)”diběnžyrf osf iζϊϋΓλ 773~gT~2 6,1 ~ mmol). a 5 g v sušárně sušených 3 Angstrom síť v THF (104 ml) při teplotě místnosti, a výsledná směs se míchá 1,5 h. V této době je podle TLC analýzy (eluce hexany:ethylacetát 1:1) reakce kompletní. Reakční směs se pak zředí' na dvojnásobek objemu ethylacetátem a filtruje se přes celitové lože. Filtrát se pak nalije do nasyceného: roztoku hydrogenuhličitanu sodného:, obsahujícího- 1 % hmotn. thiosíranu sodného. Organická vrstva se pak promyje čtyřikrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom solankou.. Vodná vrstva se pak znovu extrahuje ethylacetátem: a spojené organické podíly se suší nad: síranem sodným a zahustí se ve vakuu* Zbylý olej se čistí rychlou chromatografií (eluce hexany:ethylacetát) a získá se titulní dibenzylfosfát (4,9 g, 80 %) jako = — bflá^pevná—látka-ř——“ “ —
b) Příprava 2*-O-acetyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
-17θAcO π
HO Y AcÓ
O
OCOPh
Ρ°Η2θΡ(Ο)(ΟΗ)2
Do dusíkem propláchnuté Parrovy hydrogenační nádoby se přidá 700 mg 10% palladia na uhlí a potom čistý ethylacetát (130 ml) a roztok 2z-O-acetyl-7-0-(dibenzylfosfonooxymethyl)paclitaxelu (1,0 g, 0,84 mmol) v ethylacetátu (40 ml). Reakční nádoba se pak upevní do Parrova hydrogenátoru, umístí pod vakuum, potom se natlakuje vodíkem na 350 kPa4. Reakční směs se pak třepe 6 h a potom je podle TLC analýzy (eluce hexany'-ethylacetátem) výchozí materiál spotřebován. Reakční směs se pak umístí pod vakuum a následně se propláchne dusíkem- Heterogenní roztok se pak filtruje za použití sintrované skleněné nálevky a filtrát se zahustí' ve vakuu a získá se bílá pevná látka (848 mg), která podle Η1-NMR analýzy vykazuje obsah směsi požadované titulní sloučeniny (50 %) a 2z-0-acetylpaclitaxelu.
e) Příprava 2*-0-acetyl-7-£-fosfonooxymethylpaclitaxelutriethanolaminové soli
K roztoku 2*-0-acetyl-7-0-fosfonooxymethylpaclitaxelu (424 mg, 0,42 mmol) a výše uvedeného vedlejšího produktu 2*-O-acetylpaclitaxelu v dichlormethanu (15 ml) se přidá 0,1M roztok triethanolaminu (3,f ml, 3,8 mmol) v ethylacetátu a výsledná směs se míchá 10 min při teplotě místnosti. Reakční směs se pak zahustí ve vakuu a
3/ <
-1 79a výsledná bílá pevná látka se čistí pomocí C18 chromatografie (voda: acetonitril 2,3:1) a získá se požadovaná aminová sůl (310 mg, 72 %), která má podle HPLC čistotu větší než 96 %; 1H-NMR (aceton-d6, D2O, 300 MHz)á • - - 8. 08-8.05 (2H, m) ,- 7. 86-7.83 (2H, m) , 7.69-7.24 (11H, m), 7.23 (1H, dd, J = 7.4 Hz), 6^35 (1H, s), 6.02 (1H, dd. J = 8.3 Hz), 5.79 (1H, d, J = 6.9 Hz), 5.59 (1H, ——-d.,_J_=_7-*L-HzJ ,5.45 (1H, d, J = 6.9 Hz) , 5.12 {1H, —-—dd, J = 6.4 Hz), 4.95 (1H, d, J = 8.4 Hz), 4.86 (1H, dd, J = 11.5, 6.5 Hz), 4.24-4.18 (1H, m), 4.12 (2H, bs), 3.92-3.89 (6H, m), 3.80-3.77 (1H, m), 3.46-3.43 ___________(6H, m) , 3.00-2.89__(1H,_m) ,_2_._3_9^l1_._6_5___(21H_zahrnující_sin-_ glety při ·- 2.39, 2.14, 2.12, 1.92, 1.65, 1.11 3H
-——----------------každý!-.1-1— (-6H,— bs)-.----—-------------------— —-----Příklad 22
2'-O-Methoxykarbonyl-7-O-fosfonaoxymethylpaclitaxel
a) Příprava 2*-0-methoxykarbonylpaclitaxelu
-180<
K roztoku paclitaxelus (8,0 g, 9,6ο mmol) a diisopropyle thylaminus (5,0 ml, 28,8 mmol) v dichlormethanu; (96 ml) ochlazenému na 0 °C se přidá chlormethylkarbonát po kapkách) (1,11 ml, 14,4 mmol) během 2 minutí- Reakční směs se pak ohřeje na teplotu místnosti a míchá se 20 hodin. ixeakční směs se pak rozdělí mezi ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu amonného. Organická- fáze se pak promyj-ě nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom solankou, suší se nad síranem- sodným a zahustí se ve vakuu, ^b.ylý olej se čistí' rychlou chromatografií (hexany: ethylacetát) a získá se titulní sloučenina (7,8 g, 91,3 %) jako bílá pevná látka; hl-NMR (CDCl^, 300 MHz) δ 8.12-8.09 (2H, m) , 7.72-7.70 (2H, m) , 7.62-7.30 (11H, m), 6.96 (1H, d, J = 9.3 Hz), 629-6.23 (3H, m),
5.95 (1H, dd, J = 9.3, 2.5 Hz), 5.66 (1H, d, J =7.1 Hz), 5.38 (1H, d, J = 2.6 Hz), 4.94 (1H, d, J 7.8 Hz), 4.41 (1H, dd, J = 10.8, 6.6 Hz), 4.28 (1H, d, J =
8.4 Hz), 4.17 (1H, d, J = 8.4 Hz), 3.79-3.78 (3H, m), 2.60-1.04 (22H, m^ahrnuje singlety při 2.43, 2.19,
1.90, 1.65, 1.22, 1.10, 3H každý).
b) Příprava 2 z-O-methoxykarbonyl-7-2-meth.ylthiomethylpaelitaxelu
-181K roztoku 2z-0-methoxykarbonylpaclitaxelu (7,4 g,
8,10 mmol) a dimethylsulfidu (4,8 ml, 64,8 mmol) v acetonitrilu (162 ml) ochlazenému na -40 °C se přidá benzoylperoxid (7,48 g, 32,4 mmol) a reakční směs se během 1 h .ohřeje na teplotu místnosti. Vtéto době^indikuje TLCUi— ----analýza (eluce hexany^ethylacetát 1:1), že reakce je kompletní. Reakční' směs se pak zředí ethylacetátem a výs_____ledný' organický roz tok se třikrát promy je» nasyceným roz-___ takém hydrogenuhličitanu sodného a pak solankou. Organická fáze se potom suší nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu1. Zbylý olej' se čistí rychlou chromatografií' (eluce hexany : ethylacetátem) a získá se titulní sloučenina (7,4 g, 95 %) jako bílá pevná látka; 1H-NMR _____(CDClr,—.300_MHz )„δ_8.· 25.-8.. 23 _(2H, m) , 7.87-7.77 (2H,_________________
m) , 7.60-7.30 (11H, m), 6.93 (IH, d, J = 9.2 Hz), 6.53 (IH, s), 6.25 (IH, dd, J = 8.2 Hz), 5.95 (IH, dd, J =
11.7, 2.4 Hz), 5.68 (IH, d, J = 6.9 Hz), 5.40 (IH, d,
J = 2.6 Hz), 4.95 (IH, d, J - 8.1 Hz), 4.69-4.60 (2H, m), 4.31-4.26 (2H, m), 4.16 (IH, d, J = 8.4 Hz), 3.86 (IH, J - 6.9 Hz) , 3.79 (3H, s), 2.84-2.74 (IH, m) ,
2.43-1.10 (25H,zahrnující sibglety u 2.44, 2.15,
2.10, 2.08, 1.73, 1.19, 1.16 3H).
c) Příprava 2*-0-methoxykarbonyl-7-0-(dibenzylfosfonooxymethyl)paclitaxelu
-182-
N-Jodsukcinimid (1,74 g, 7,77 mmol) se přidá' najednou k roztoku 2'-O-methoxykarbonylpaclitaxelu (5,04 g,
5,18 mmol), dih‘· -.fosfátu (7,2 g, 25,8 mmol) a 5 g v sušárně suše'· 3 Angstrom sít v THF (100 ml) při teplotě místnosti a výhledná směs se míchá 1,5 hodiny. V této době TLC analýza (eluce hexany £ ethylacetátem 1:1) indikuji, že reakce je kompletní. Reakční' směs se pak zředí' na dvojnásobek objemu ethylacetátem a filtruje se přes lože celitu. Filtrát se pak nalije do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, obsahujícího 1 % thiosíranu sodného: hmotn.. Organická vrstva se pak promyje čtyřikrát, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom solankou. Vodná vrstva se opět extrahuje ethylacetátem a spojené organické podíly se suší nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej' se čistí rychlou chromatografií (eluce hexany:ethylacetát) a získá se titulní sloučenina (5,1 g, 96 *») jako bílá pevná látka; 1H-NMR (CDCl^, 300 MHz) 8,12 - 8,08 (2H. rn), 7.73-7.70 (2H, m) , 7.62-7.27 (21H, m), 7.00 (1H, a, J = 9.2 Hz), 6.31 (1H, s), 6.24-6.21 JIH, m) , 5.965.92 (1H, m), 5.66-5.64 (1H, m), 5.40-5.36 (2H, m) , 5.05-4.93 (5H, m) , 4.87-4.84 {1H, m), 4.29-4.05 (3H, m), 3.85-3.83 (1H, m), 3.77 (3H, s), 2.81-2.71 (1H, m), 2.62-1.05 (22H, m,zahrnující singlety u 2.43,
2.19, 2.01, 1.73, 1.22, 1.15, 3H každý).
-1 83d) Příprava 2 '-Omethoxykarbonyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
Do dusíkem profouknuté Parrovy hydrogenační nádody se—přidá—Vj-y-g—l 0% palladia na uhlíánpotňm-čistýTethyLacetát (140 ml) a roztok2*-0-methoxykarbonyl-7-0(dibenl:ýlTQsfb*hnbxýměThyr)paclitaxeTu (3,4 g, 3,32 mmol) v ethylacetátu (40 ml). Reakční nádoba se pak upevní do Parrova hydrogenátoru, umísti pod vakuum, potom se natlakuje vodíkem na 350 kPa. Výsledná směs se pak třepe
8,5 h a po této době TLC: analýza indikuje (eluce hexany íethylacetátem) spotřebu výchozího materiálu. Reakční směs se pak umístí pod vakuum a následně propláchne dusíkem. Heterogenní roztok se pak filtruje za použití' nálevky ze sintrovaného skla a filtrát se zahustí ve vakuu. ZÍskás? bílá pevná látka (2,9 g, jejíž 1H-NMR analýza ukazuje směs požadovaného titulního produktu (67 ^) a 2*-O-methoxykarbonylpaclitaxelu (33 %)►
e) Příprava triethanolaminové soli 2*-O-methoxykarbonyl7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
K roztoku 2*-0-methoxykarbonyl-7-O-fosfonooxy-ethyLpaclitaxelu (1,91 g, 1,87 mmol) a výše uvedeného vedlejšího produktu 2/-O-methóxykarbonylpaclitaxelu v dichlormethanu (11 ml) se přidá 0,1M roztok triethanolaminu (18,9 ml, 1,89 mmol) v ethylacetátu a výsledná směs se míchá 5 min při teplotě místnosti. Reakční směs se pak zahustí
I?’ ·< v - · ~ ''•V
-184ve vakuu a výsledná bílá pevná látka se čistí Cl8 chromatografií (eluce voda :acetonitril 2,3:1) a získá se po
l.yofilizaci triethanolaminová sůl, která podle HPLC má čistotu větší než 97%; 1H-NMR (aceton-dg, D2O, 300 MHz;) £ 8.08-8.06 (2H, m) , 7.88-7.55 (2H, m), 7.69-7.24 (11H, m), 7.24 (1H, dd, J = 7.3 Hz), 6.36 (1H, m), 6.05 (1H, dd, J = 8.8 Hz), 5.82 (1H, d, J = 6.8 Hz), 5.60 (1H, d, J = 7.1 Hz), 5.46 (1H, d, J = 6.9 Hz), 5.13 (1H, dd, J = 6.5 Hz), 5.98 (1H, d, J = 8.1 Hz), 4.87 (1H, dd, J = 11.8 Hz, 6.3 Hz), 4.21 (1H, dd, J = 10.3, 6.9 Hz), 4.13 (bs, 6H), 3.92-3.89 (6H, m), 3.81 (1H, d, J = 7.02) , 3.76 (3H, s) , 3.4-6-3.42 (6H, m) , 3.01-2.90 (1H, m), 2.42 (3H, s), 2.20-1.80 (lOHzahrnující.singlety při - 2.20, 1.93), 1.66 (3H, s), 1.12 (6H, bs).
Přiklaď 23
Příprava 2 -O-fosfonooxymethoxymethyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
a) Příprava 2 -O-methylthiomethoxymethylpaclitaxelu
Palladium na uhlí (10%) (3; g) se přidá k roztoku 2 *-O-methylthiome thoxymethy 1-7-Q-benzyloxy kar bony lpacl itaxelu (1,2 g, 1,11 mmol) v ethylacetátu (100 ml) a ethanolu (70 ml) umístěnému v Parrově nádobě. Nádoba se upevní do Parrova zařízení a reakční směs se podrobí'
-185rý;
ví?
tlaku vodíku 350 kPa. ikeakční směs se pak třepe 2U,5 h, | potom se zfiltruje? za použití skleněné nálevky ze sintro- | 'ί£·1 váného skla. Filtrát se zahustí ve vakuu a zbylý olej se I čistí rychlou chromatografií (eluce hexany: ethylacetát) 4 a získá se požadovaný produkt (0,98 g, 93 %) jako pevná látkaj 1K-NMR (CDC1‘3, 300 ' '''
MHz), δ 8.12-8.10 (2H, m), 7.76-7.73 (2H, m),7.61-7.27 '1 (11H, m), 7.03 (1H, d, J = 8.9 Hz), 6.40-6.27 (1H, m) , ||
6.25 (1H, sTT5~80 71H?^ďď? J ^179 ? 2 74' Hz )T“5766 (1H, d, J = 7.1 Hz), 4.98-4.94 (1H, m) , 4.86-4.79 (2H, |
m), 4.75-4.68 (1H, m), 4.43-4.39 (1H, m), 4.31-4.26 (2H, m), 4.05 (1H, d, J = 11.7 Hz), 3.78 (1H, d, J = |
7.1 Hz ) , 2.60-1.06 (25H, m, zahrnující singlety pri---j|
2.45, 2.21, 2.02, 1.85, 1.66, 1.22, 1.11, 3H každý. I
b) Příprava 2 '-Q-methylthiomethoxymethyl-7-Q.-methylthiomethylpaclitaxelu
K roztoku 2'-0-methylthiomethoxymethylpaclitaxelu (0,98 g, 1,03 mmol) a dimethylsulfidu (0,6ml, 8,11 mmol) v acetonitrilu (20 ml), ochlazenému na -40 °C se přidá benzoylperoxiď (1,0 g, 4,13- mmol) a reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti během JO min. Po této době TLC analýza indikuje (eluce hexany^ethylacetátem 1:1), že reakce je kompletní. Reakční směs se pak zředí ethyl
-186acetátem· a výsledný organický roztok se třikrát promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a pak solankou. Organická fáze se potom suší nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbylý olej se čistí rychlou chromatografií (eluce hexany :ethylacetát) a získá se titulní produkt (0,945 g, 91 %) jako bílá pevná látka;
1Η-NMR (CDClj, 300 MHz) 8,13-8,11 (2H, m) , 7.79-7.77 (2H, m), 7.61-7.29 (11H, m), 6.54 (1H, s), 6.30-6.26 (1H, m), 5.83-5.80 (1H, m), 5.715.69 (1H, m), 5.01-4.66 (6H, m), 4.34-4.04 (5H, m),
3.88 (1H, d, J =6.6 Hz), 2.90-2.80 (1H, m), 2.55-1.05 (27H, m, zahrnující singlety př&751, 2.18, 2.11, 1.80,
1.21, 1.20, 3H každý).
\
c) Příprava 2 *-O-dibenzylfosf onooxymethoxymethyl-7-Q— (dibenzyifosfonoox.ymethyl )paclitaxelu
N-Jodsukcinimiď (0,61 5 gr, 2,74 mmol) se najednou prid&fk roztoku 2'-0-methylthiomethoxymethyl-7-O-methylthiomethylpaclitaxelu (0,92 g, 0,916 mmol), dibenz.ylf osfátu
-187(2,03 g, 7,30 mmol) a 1 g v sušárně sušených 3 Angstrom sít v THF (18 ml) při teplotě místnosti a výsledná směs se 30 min míchá. Po této době TLC analýza (eluce hexany: ethylacetát. 1:2) indikuje, že reakce je kompletní. Reakční směs se potom zředí na dvojnásobek objemu ethylacetátem a filtruje se přes celite. Filtrát se pak nalije do nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného', obsahujícího 1 % hmotn. thiosíránu sodného. Organická vrstva se potom čtařikrát promyje nasyceným vodným roztokem hvdrogenuhličitanu sodného a potom solankou. Vodná vrstva se znovu extrahuje ethylacetátem a spojené organické podíly se suší nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu* •^bylý-oLej“se^čLstí_ rychlcíu“chrbmatográfií“(eruce”hexa^ n,y:ethylacetát) a získá se titulní produkt (0,768 g,
58%) jako bílá.zpěvná látka; 1H-NMR (CDClj, 300 MHz) δ 8.10-8.05 (2H, m), 7.80-7.74 (2H, m) , 7.65-7.27 (11H, m), 6.30 (1H, s), 6.25-6.18 (1H, m), 5.82 (1H, dd, J = 9.1, 3.4 Hz),' 5.63 (1H, dd, J =
6.9 Hz), 5.38 (1H, dd, J = 6.6 Hz), 5.10-4.60 (15H, m), 4.30-4.10 (3H, m) , 3.80 (1H, d, J = 6.8 Hz), 2.852.65 (1H, m) , 2.50-1.60 (22H, m,zahrnující singlety při
2.47, 2.16, 1.91, 1.72, 1.88, 1.15, 3H každý).
d) Příprava 2 *-0-fosfonooxymethoxymeth.yl-7-0-fosfonooxymethylpaclitaxelu
-188AcO p OCHO2P(O)(OH)2
Ph‘
.O
HO
OCOPh
PhCONH O (HOJgPÍOJOCHzOCI^O
Do dusíkem propláchnuté Parrovy hydrogenační nádoby se vloží 1,3 g 10% palladia na uhlí a potom čistý ethylacetát (110 ml) a roztok 2*-O-dibenzylfosfonooxymethoxymethyl-7-Q,- (dibenzylfosfonooxymethyl/paclitaxelu (0,721 g, 0,498 mmol) v ethylacetátu (40 ml).. Reakční nádoba se potom upevní do Parirova hydrogenátoru, umístí pod vakuum a p pak se natlakuje atmosférou vodíku na 350 kPa. Heterogenní směs se pak třepe 16 hodin a potom TLQ analýza indikuje? spotřebu výchozího materiálu·. Reakční směs se pak umístí pod vakuum a následně se propláchne dusíkem. Směs se pak filtruje za použití nálevky ze sintrovaného; skla a filtrát se zahustí ve vakuu a získá se titulní produkt (0,413 g), který má podle HPLC analýzy čistotu 60 %.
e) Příprava bis-triethanolaminové soli 2*-0-fosfonooxyme thoxymethy1-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxelu
K roztoku surového 2*-0-fosfonooxymethoxymethy1-7-0fosfonooxymethylpaclitaxelu (413 mg) v dichlormethanu (10 ml) se přidá 0,1M roztok triethanolaminu (7,6 ml, 0,076 mmol) v ethylacetátu a výsledná směs se míchá 5 min při teplotě místnosti. Reakční směs se pak zahustí ve vakuu a výsledná bílá pevná látka se čistí C18 chromatografií (eluce vodaíacetonitril 9:1 až 5,6:1). Frakce eluátu, obsahující požadovanou sůl v čistotě vyšší než 96 % podle HPCL se spojí a acetonitril se odstraní na rotační odparce. Výsledný vodný roztok aminové soli se Ibfili-
-189zuj® a získá se požadovaná sůl (0,210 g, 30 % během 2 stupňů) jako bílá pevná látá.
^ÍT-NMR (aceton-dg, D2O, 300 MHž)ž 7,97 7.94 (2H, m) , 7.79-7.76 (2H, m) , 7.67-7.33 (11H, m) , 7.12-7.07 (1H, m), 6.26 (1H, s) , 5.89 (1H, dd, J = 8.6 Hz), 5.48 (1H, d, J = 7.9 Hz), 5.00-4.79 (8H, m), 4.70 (1H, d, J = 8.1 Hz), 4.15-4.03 (3H, m), 3.74-3.66 (7H, m), 3.14 —2.86( 8H, m) , 2.3 3 -1.0 0-(-2 OH, m, zahrnuj í c í s i nglety při 2.33, 2.10, 1.88, 1.56, 1.02, 1.00, 3H každý).
Další' příklady
Obecné postupy popsané v předcházejících příkladech a popisech se použijí pro přípravu následujících slou čenin v rozsahu vzorce A.
-190III
αί 1 r θ' >- > I c'— 5) 2® >· >. C* n.ccOm>c X £ c ® 4·_γ><5φ~·2£φ g φ q. • v v X © E 2 υ Τι -i Φ- 'f.ó-eMWOw^Q. . w”cm
R™ Ph
Η : W:··· Μ cd AcO I
nll X* . CM X o o £L O CM X o o 1
•••w ···« (4 X
oá X o
-191- •I í ť ...... Λ ť
---' --- £ 1 x 1 1 i i 1 ε §· 4eMOCM8g,C3n^ O ř£S-®eES55 7®£ο.·ε;ο.22® 4-£S-2žoaa£ _L ~ O Q. o o *7 CM J2 » 8 >x CM C9 CO CM — q jc Q. í ( • .;.· * •i * . < Λ K: i ‘í i
H JC ~ ~ - PÍ ''“xť ' — Q. a O o o
»·? ’= M ' M ΐ
Mí o o X
γϊΜ·^:. Q pá < υ < o r i 1 Cl·· Á * -' j
-
M -y- P4 O CM X o o 's-k* CL O CM X o o 1 1 o o X τ 8 ° xN ' o «·> X o
PÍ X ,. X X
CM X o • o . n . . - §
o PÍ o. O CM X o o 1 8 (M X o f) X o o 0. o CM X o o -i
·:· -ř í nnil
192
oi Ph Ph x: CL x: CL Ph 4-CH,0-Ph
Rw • o o o « X o x: CL JZ OL •C Q. x: CL 1 o o A A . x. o
R111 X . o O υ < o o < CM X o o CL O CM X o o _CM X o o CL o CM X o o 1 X
A •'Ή ··. PÍ CM X o o Q. O CM X o o 1 • o o o x ° X o <0 X o CM X o o CL o CM X o o 1 X O X X
A A PÍ X X X X X X
A·:'· oi “ o o * o o to X o __ CM____, X o o CL O CM X o o t • ° ř? Š. *22 δ o OoS2oóS.°°ó<’S’o χ §g o § 8 §%55g° £§· ° o x~ J χ” i“ 2 o x~ x“ 2 o 2 r § 5lissxa%ž 2 §s ° S g g 8 ° 5 5 i- S X O X o CM X o o Dl O CM X o o 1
oí >» c
Φ
JO
O
V) >.
C
Φ
CL
Cl
CM >*
Cl
O
k.
Q.
>>
O
>* >> >>
c c Q. 3
CO Φ O X>
l. 2 £ k_ CL O
1 O υ
co n co &
-193Q.
O
u.
Q.
O >» c φ 3 JQ O * CM
C CL í
° CL O
>» >X >» >S
c c o. □ cl
2 Φ o Λ 2
3 XT CL 2 CL
*T* O O O
ώ CO <0 & 0
δ ¢4 ó
Q.<v±*<·>
o
O
O
O o
X υ
a
M
Pí
Pí
X o
o □Γ o
CM
X o
o
X o
o dT o
<M
X o
o
Pí
Dí
-a~ o
o o
«·>
X o
i
194
| s. lil 21 2 5Po3£G--2Q- m®PCc9-392 ο. λ. ® ® 2·° 2 52θ3Ζο.£ο. So.-oVVOOO S . £ g. co co « ω
fe ó o CJ *n X o ó Q c> «*9 X o
rHI o υ < O υ <
A A PÍ cm X o o ΗΓ o CM X o o 1 CM X o o CL o CM X o o 1
A ·.. A ·« PÍ X X
R1 • _ — _ „.. o o o o CM X o «·> X o t o o o CM CM X o <*> X o
196
OÍ isobutenyl >> c o Q. 2 Ol « OJ cyclopropyl 3-furanyl >> c Φ £ * co isopropyl cyclobutyl isopropyl isobutenyl 2-propenyl cyclopropyl 3-furanyl 3-thlenyl isopropyl cyclobutyl Isopropyl
-RIV 1 o o rt rt X o 1 ' o o rt rt X o
R111 AcO AcO
(M
X o X o
0' o
· w-; Pí CL o Q_ opi
X o o 1 X o o 1
••,W>'·?·· «·' X X
• .-W; .·· Pí 1 o o o rt X o • o o Cí X o rt X o
? ya? P5, ;, \
> ) s
-198-
199 ;ál
Ν
mOpCCCX^Q. gS-fc.2®2-®2 KRoS-CCL-So. OQ-OT^OPO § o!j g.cow« g> W ©®2£cq.3Qm o. © Φ o ja o 22O3SQ.5Q. ‘oa.oV-rooo
e« 1 o .__________._...... o rt X o • o___________________________ ... o ... ...--------------- ----------- Λ rt X o
M M M Pí n
o < o <
.· w w PÍ (M X o o ST o <M X o o • W X o o CL O CM X •o o •
w P4 X X
R1 1 o o « o
o - - - o «Μ X o X o II <M X o o o o CM X o x: 0.
200
¢4 2-furanyl 3-furanyl isobutenyl 2-propenyl cyclopropyl cyclobutyl >% c Φ £ » CO >> c Φ xz 1 CM isopropyl 2-furanyl 3-furanyl Isobutenyl 2-propenyl cyclopropyl cyclobutyl c φ CO >S c Φ £ CM . isopropyl
< ο 1 o
X ο xr ori
a« i' ΟΝ X ο X o Ol X o,
X ο X o
Μ Μ Η Ρ4 AcO AcO ift
οι Ol
X ο X o
U ό o.
Μ PS Σ ο 0. o
X ο ο I -OCH.
Η Η X X X
«·» X ο
Μ : οί X ο CW Ο ο ο • OH
-201 PS >. >> c c 2 2 α □ » « CM CO >» C 8£ o ® 2 2 c 8φ — o. o. -o ® 2 £ E 2 I 5 ř a • o o. o £* *r o W » ώ δ' « — >>
c >»Χ>Ζ*ί=5··έ*>·>»
SS8®®22C8·
22®-gg-o.-9®2 aa^lgo-g^g.
ŇctcmS^-^^cÓ®
PS >» jo >»o.
o
o.
o ω
X o
>. ’
Q.
o.
o
Pi
CL o
<
U
PS
X o
o □Γ o
cm
X o
o
X o
O
CL
O
CM
X o
o
PS
PS
X
O“
CM
X υ
CM
O o
o
202
ní 2-luranyl 3-furanyl 3-thienyl Isopropyl cyclopropyl isobutenyl >X C Φ CM 2-propenyl >x C (0 u. D • CM 3-furanyl 3-thlenyl Isopropyl cyclopropyl Isobutenyl >* c Φ Έ » CM 2-propenyl
R17 1 o o rt *» I o 1 o o o <*> X o
H M Pí « X υ <M O o o « Φ 2 O
w _CM
X o X o
M o o
:«·. PÍ d. O Q. O
X o o « -OCH.
: M :···· W PÍ X X
- -- o X 0 i =>
M : PÍ X o X 0 CM O 0 o
2uu-
pí M* ’*V. *_ cccg-ogc® 22®2α.·§®®· □ 3 £ e- o _Q £ 2 ’ *T i · o o o · cx cj η n “ g> w c^j 2-furanyl 2-furanyl 2-furanyl 2-furanyl
R17 1 o o o rt x o 1 o X >* Λ χ O o _ T >» έ o §- CM k. x 8o ° X o 1 o. CM X X o δ _ -r* £ o § CM l— x 8- X o « o CM X X O o cm T J= X £ Dl O CM t— χ a- (1 o o « X O O x Γ\ X O o - -r* >» £ o 8- CM k. x 8· o ° ® X o
R111 x: X O O O I « X o CM O o o • n X ϋ tv o o o 1 Φ 2 O Φ 2 O
Rir CM X o o čl o CM X o o 1 CM X o o oT o CM X ϋ o • CM X o o CL O CM X o o « CM X o o CL O CM X o o _CM X o o CL O CM X o o 1
M pá X X X X X
PÍ X o rt X o CM X o CM O O O • X o rt X ϋ CM X o CM O ϋ o 1 X o
< .ί
-π 7 .-w ~
•208·
Pd 2-furanyl isobutenyl isobutenyl >» c Φ s X> O JO 2-furanyl 2-furanyll 2-furanyl 2-propenyl 2-propenyl 2-propenyl
RXV 1 o <M • X 1 O o O O >. x* χί θ- Λ o O O -r- — ty o O- x O o w u„ X O ó o n *« x- o ó o Γ) n X o 1 o υ o o x- Q JZ 0. JZ Q. .c 0. 1 o o <·> o X o 1 o o rt o X o 1 o o <·> n X o
M K M Pd .c Q_ O o o 1 « X o CM O o o • Φ 2 O x; CL O a o 1 o X o CM O o o 1 Φ 2 O x: CL O O o 1 «·> X o CM O o o 1 Φ 2 O x: CL O O O 1
R11 CM X o o CL O CM X o o CM X o o I CM X o o CL CD x o o CM X o o 1 CM X o o cl o CM X o o CM X o o 1 _CM X o o ST o CM X o O CM X o o CM X o o CL O CM X o o CM X o o 1 CM X o o CL O CM X o o CM X o o 1 CM X o o CL O CM X o o CM X o o 1 CM X o o CL O CM X o o CM X o o * CM X o o OL O CM X o o CM X o o CM X o o CL O CM X o o CM X o o 1
km:<·· Pd X X X X X X X X X X
cd X o « X o CM X o CM O o o n X υ CM X o ÍM O o o 1 o X o CM X a CM O υ o 1 X o X o X o Λ X o CM X o CM O o o 1 ei X o CM X o CM O o o 1 <·> X o CM X o CM O o o
í-ryupr , v jy r-w
209
Ďí >* >. >* c* C ÉX c c c C φ φ g 2 ® 2 ® 9- Ol ο £ Ρ £ λ 2 ο • » ι » ο Ο. Ο CXJ «Μ w ω ů g. 2-furanyl 2-furanyl ι 2-furanyl 2-furanyl Ph •'lijí
δ pí ( ο Λ~ η X ο t ο x Ο ο ο ;Χ* >> Ο: Ζ X 2 7? χ α. X °ο « θ X Ο Α χ Ο ο -ϋ„ Ο. £ ο ο J2 ΓΊ Ο ο ^5 f D- Λ ®- Ο ο . >> Λ χ Ο ο -ϋ„Έ~·£ 0. ο ο ° .2 α.
*W*- Pí ο Ο Λ X ο «Μ φ _c 0. řv Ο
ο < ο < Ο ο ο « 2 Ο ο ο I Ο <
£ * /
Μ ··': Μ. Pí X ο X ο X ο X ο X ο οι . X ο ο CL Ο οι X ο ο οι. X ο ο 1
.· ·:Μ<···. Μ Pí X X X X X X
Μ PÍ «Μ X ο ο (Μ X ο Ο - , ΟΙ X ο ο οι X ο ο οι X ο ο . η X -ϋ- οι X υ οι ο ο ο •
CL Ο ΟΙ X ο ο ΟΙ X ο ο 1 α. Ο ΟΙ X ο ο ΟΙ X ο ο * αΓ Ο CÍ X ο ο ΟΙ X ϋ ο 1 ωΓ ο η X ο ο <Μ X ο ο 1 CL Ο ΟΙ X ο ο Ν X ο ο 1
1
cd 2-furanyl CL Ph Ph Ph Ph Ph >» >» >* >* isobutenyl cyclopropyl 2-propenyl
C. 2 Ζ3 • 04 C. 2 3 ώ C φ £ CM C φ χζ ώ
S I ο ϋ «η ( ο ο « I ο ϋ <·> I ο ϋ η I ο ϋ η I ο ϋ «0 I ο ο ο
cd η X ο Λ X ο X ο X ο X ο X ο η X ο
(Μ <Μ _<Μ
X ο X ο X ο
-C ο ο ο
Η Η ·:·«.<· 0. Ο ο ο 1 X ο X ο X ο ο. Ο ΟΙ X ο ο_ CL Ο οι X ο ρ Ο. Ο οι X ο °Γ,
X™ ο ο 1 X* ο ο χ ο ο 1
«Μ ^οι
X ο X ο
ό' ο
Η • »μ: ·. X X ο CL Ο οι X ο ορι 0- Ο ΟΙ X ο Ρ,. X ο X ο X
X ο ο 1 X ο ο 1
·:··Μ :· Μ cd IX X X X X X LL
CM ΟΙ
X Ρ. X ‘Ρ.’ — - ... , . , - == -
Ηί . & Ο 0. Ο ΟΙ X ϋ ο ΟΙ X ϋ ο 1 Ο CL Ο (Μ X ϋ ο ΟΙ X ϋ ο X ο X υ ΟΙ X ο <Μ Ο ϋ ο « X ο X ο οι X ο οι ο ϋ ο X ο
212
¢4 —“ “· — *i^L >\ £ £ c c § ο fe CjBg®O~£ cL ιι ι » Ο η Q. Ν Ο Ν Ο 5 > ,·, — Ο CM Ph 2-furanyl Ph 2-furanyl Ph Ph 2-furanyl Ph 2-furanyl
δ PÍ « ο . ~ Ο η X ο χ: Ω. 6 □ CQ JC Q. ό 3 ω ** Ο 3 CQ ♦«»
- - - -
Μ Μ Η Pd CM X ο ο ϋ
ο CM X ϋ ο CM X ο ο « < ο ο < Ο ο < Ο ο < Ο υ < O
R11 'χ X CM X ο ο CL Ο <Μ X ο ο CM X ϋ ο CM X ο ο 5Γ ο CM X ϋ ο CM X ο ο CM ~ * § -2. $ ο ° ~ τ η Ο Ο X Ο i ~ Ο —Τ' 0- υ χ ο χ τ' Ο ο ο ο X Ο -r Ο · £ ? Ο 1 X Ο CM X o o oí O CM X o o 1
Η Μ Pí LL X X X X X
R1 Ο “Γ -- CM X ο CM X ο ο/^ οΓ ο CM X ο ο «Μ X ο ο I CM X ο η. CM X ο ο CM X o -O- CL O CM CM X o o CM X o o 1
ο CM X ϋ CM Ο ο ο 1 Γ ο 0. Ο CM X ο ο «Μ X ο ο I □Γ Ο cm CM X ϋ ο CM X ϋ ο 1 α. Ο CM CM X ο Ο CM X ο ο 1
—-;l
213
PS jz cl 2-furanyl x: CL 2-furanyl .c CL x: CL 2-furanyl .c CL 2-furanyl sz CL 2-furanyl JZ CL 2-furanyl JZ Q. 2-furanyl
% BuO BuO x: CL BuO Ph BuO BuO Ph BuO BuO Ph BuO BuO JZ CL
**
Η o O O υ υ o O υ υ O O
< < < < < < < < < <£
PÍ o o o O o O o O o o o
fy CM CM
OJ X Ol OJ X X X
X o X X o o o
o o O X o X o o 6 o 6 )(o) o o
CL CL CL CL
Μ . . w· PS CL O OJ X O OJ OJ X -OH -OH 0P(O 0P(O CL O Ol X CL O CM X O CM CM X O CM CM X O o CM X
o o Ol OJ o o o o o
o Ol o X o X o o Ol o CM o o o
X o Ol X o o X o X o OJ X . CM X CM X
o 1 o o » o 1 o * o o 1 o o « o o 1
Μ··· '.· Μ :·.· ps X X X X X X X X X X X
CM CM OJ CM
X X X X X X X X X X X
o ____ O- A -O -O- o o o =,_. -O. ..o o o
o o o o o o o o o o o
CL CL CL CL CL CL CL CL CL CL CL
o O o O O O O o O o o
«·> n m
ρ4 Ol Ol OJ CM CM CM
X X X X X I I X X x X
o o o O O o o O o o O
o o o o o o o O o o o
OJ CM CM OJ
X X X X X X X X X X X
o o o o o o o O o o o
o 1 o 1 o o 1 o • o • o 1 o o o « o 1
214
oí Ph 2-furanyl
δ ck O - ' 3 ffl *«*
Μ A pí o
< o
CM X o o 'm*' 0. O «·? CM X υ o CM X o o 1
A .· Α:<·. Pí X
.··«···.· PÍ CM X o o CL * o <·> CM X o o CM X o o 4
-215-

Claims (26)

1. Sloučenina obecného vzorce A lÍ roCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2 n (A) kde
T je taxanová skupina, nesoucí na Cl3, atomu uhlíku substituovanou? 3-amino~2-hydroxypropanoyloxyskupinu, m je 0 nebo celé Sísla> od 1 do 6 včetně, n je 1,2 nebo 3;
nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2- Sloučenina podle nároku 1 , kde uvedená taxanové skupina je dále charakterizována jako mající alespoň C11-C12 dvojnou vazbu, C1 hydroxy, C2 benzoyloxy, C4 acetyloxy, C9 oxy a C5-C20 oxetan.
3i. Sloučenina podle nároku 1 , kde uvedená taxanová skupina je odvozena od zbytku, majícího vzorec.* kde je vodík, a R^e je vodík, hydroxy, -OC(O)RX nebo -OC(O)ORX, R^e je vodík, hydroxy, -OC(O)RX, -OCÍOŮOR* nebo Gj_galky 1 oxy; jedeno z R^*3 nebo R?e je vodík a druhý je hydroxy nebo -C/OOR^, nebo R^e a R?e spolu tvoří ?
oxoskupinu, Rx je C^galkyl popřípadě substituovaný jedním až šesti stejnými nebo roždí Jinými atomy halogenu, Cj_gCykloalkyl,^C2_galkenyl nebo hydroxy, nebo: Rx je _ radikáib vzorce kde D je vazba nebo C^galkyl a Ra, -visle-vodík, amino, C^galkylamino, halogerri, C^galkyl nebo C^galkoxy.
R*3 a Rc jsou ne zádi -C£ galky1ami n o ř
4. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená substituovaná 3-amino-2-hydroxypropanoyloxyskupina je odvozena od zbytku, majícího; vzorec kde
R1 e je vodíknebo -G(O)RX, -C(O)ORX,
4 5 .
R a. R_ jsou nezávlsle_G^__^alkyl, -gg^.ga.lke.nyli.JSA^^aljv-,^^^___ kinyl nebo: -Z-R^,
Z- je přímá vazba, C^galkyl nebo C2_galkenyl, r6 je aryll·, substituovaný aryl, C^_gcykloalkyl neba heteroaryl, p je 0 neba 1 a
-217V
R má dříve definovaný význam.
5;* Sloučenina podle nároku 1, kde? uvedená taxanové skupina je dále charakterizována jako obsahující alespoň C11-C12 dvojnou vazbu, C1 hydroxy, C2 benzyloxy, 04 acetyloxy, C9 oxy a C5-C20 oxetani a uvedená substituovaná 3-amino-2-hydroxypcopanoyloxyskupiha je odvozena od zbytku, majícího vzorec
R4(O)pCOyH O
OR
1Θ kde R^e, R^, B?’ a p mají dříve uvedený význam.
6. Sloučenina podle nároku 1, mající vzorec kde J
R1 je hydroxy, -OCHUOGIL·) OP(O) (OHL·, -OC(O)RXr nebo -OC(O)ORS
R? je vodík, a R?=je vodík, hydroxy, -OCH^(pCH^^OP(O)(OH^, -OC(O)RX nebo- -OC(O)ORx j
-218χΐ·!
R^ je vodík, hydroxy, C^alkyloxy, -OC(O)R*,
-OCHL (OCTL, ) OP(O) (OH)9 nebo -OG(O)ORX, í2 2 β c jeden z R nebo R' je vodík, a druhý je hydroxy, C^galkanoyloxy nebo -OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2 nebo R^ a R7 spolu tvoří oxoskupinu, s tou podmínkou, že alespoň jeden
R2,.
R“ m je 0,1 nebo 2,
R6 nebo R7 je -OCH9 (OCH^OPCO) (OH),
R5,
R* a p mají dříve definovaný význam nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
7. Sloučenina podle nároku 6, kde R^ je vodík a R2 je -OCHgOPÍO)(Off)2, nebo její farmaceuticky přijatelná—sůH.-----
8. Sloučenina podle nároku 7, kde R1 je hydroxy, -OCÍOJR* nebo -OCÍOJOR* a Rx má dříve definovaný význam.
9. Sloučenina podle nároku 8, kde Rx je C^galkyl.
10. Sloučenina podle nároku 8, kde R·* je vodík, hydroxy nebo acetaxy.
11. Sloučenina podle nároku 8, kde R^(O)p je fenyl nebo terc.butoxy.
12. Sloučenina podle nároku 8, kde R je fenyl, 2furyl nebo 2-thienyl.
13. Sloučenina podle nároku 1, kterou je
2 *-O-(e thoxykar bonyr)-7-^·(f osf onooxymethyl) paclitaxel”, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
14. Sodná sůl sloučeniny podle nároku 13· zj
-219-
J
1 5. Triethanolaminová sůl sloučeniny podle nároku 13.
16. Triethylaminová sůl sloučeniny podle nároku 13:.
17. Argininová sůl sloučeniny podle nároku 13.
18. Lysinová sůl sloučeniny podle nároku 13·
19· Ethanolaminová sůl sloučeniny podle nároku 13..
20. N-Methylglukaminová sůl sloučeniny podle nároku 13:.
21. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 7-0-(fosfonooxymethyl)paclitaxel, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
22- Sodná sůl sloučeniny podle nároku 21.
2J. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 3*-Ndebenzoyl-3 *-desfenyl-3 '-N-(terc.butyloxykarbonyI )-3(2f uryl )-2 *-O-ethyloxykarbonyl-7-O-f osfonooxymethylpaclitaxel nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
24. Triethanolaminová sůl sloučeniny podle nároku 23.
25. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 3 *-N-debenzoyl-3 '-desfenyl-3 *-N- (terč. butyloxykarbonyl )-3 *(2-thienyl )-2 *-O-e thyl oxykarbonyl-7-O-f osf onooxymethylpaclitaxel nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
26. Triethanolaminová sůl sloučeniny podle nároku 25.
-22027. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 2'-0methoxykarbonyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel.
28. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 2*-O-methyl karbonyl-7-O-fosfonooxymethylpaclitaxel.
29. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 2*-0-npropylkarbonyÍ-7-p-fosfonooxymethylpaclitaxel.
30. Sloučenina podle nároku 6, kde R^ znamená -OCHgOPCO)(0Η>2 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2 * 2
31. Sloučenina podle nároku 30» kde R oe vodík, R je vodík, hydroxy nebo -OC(Ó)ÓRX a Rx má význam definovaný v nároku 6:·
32. Sloučenina podle nároku 31 » kde R^ je vodík, hydroxy nebo acetoxy.
33· Sloučenina podle nároku 31» kde R^(O)p je fenyl nebo terc.butoxy»
34. Sloučenina podle nároku 31 » kde R je fenyl.
35. Sloučenina podle nároku 1,. kterou je
2*-O-(fosfonooxymethyl)paclitaxel nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
1 2
36. - Sloučenina 'podle-nároku 6, kde~R ~ a R “jsou ““ ~ oba -0CH20P(0)(OH)2 nebo. jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
37. Sloučenina podle nároku 1, kterou je
2*, 7-0-bis(fosfonooxymethyl)paclitaxel nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
22138«
Sodná sůl sloučeniny podle nároku 37«
39« Sloučenina podle nároku 6, kde R* je
-OCHgOCH^OPÍO)(OH)2 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
40. Sloučenina podle?nároku 1, kterou je 2*-Of osf ono oxyme thoxyme thy1-7-Q-fosfonooxyme thy lpacli tax el.
41. Sloučenina podle nároku 1, kterou je 2*-Ofosfonooxymethoxymethylpaclitaxel nebo jeho farmaceuticky přijatelné sú/...
Tríethanolaminová sůl sloučeniny podle nároku
43· Sloučenina podle nároku 6, kde R^ je
-OCIT2OP(0)(OH)2 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl44. Sloučenina podle nároku 1, kterou je
1 0-desacetyl-3 *-N-desbenzoyl-3 z-N-(terc-.butyloxykarbonyl)· lO-O-ífosfbnooxymethyDpaclitaxel, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
!
45Tríethanolaminová sůl sloučeniny podle nároku 44.
Sloučenina podle nároku 6, kde R1 je
46—
-OCEgGCH^OCffgOPÍO) (OH)2
47. ” Šioučenina podle nároku 46, kterou je 2 -0/(fosfonooxymethoxy)methoxymethyl/paclitaxel.
48. Sloučenina podle nároku 46, kterou je 2*-O/(fosfonooxymethoxy)methoxy/methyl-7-Q^fosfonooxymethylpaclitaxel.
-22249· Sloučenina vzorce
13—OH-txn—
OCH2(OCH2)mSCH3 ]„ kde txn je-taxanové skupina, man mají dříve definovaný význam, neb® její C.1 3. kovový alkoxid.
50· Sloučenina podle néroku 49, kde uvedená taxanové skupina je odvozena od zbytku, majícího vzorec kde R2e, R2e , R3e, R6e a β7β mají dříve definovaný význam.
51. Sloučenina podle nároku 49, mající vzorec
-223nebo její Cl 3 kovový alkoxid.
52. Sloučenina, mající vzorec
OCH2(OCH2)mSCH3 kde T* je T, ve kterém jsou nereagující hydroxyskupiny blokovány, m a re mají' výše definovaný význam.
53· Sloučenina podle nároku 52, mající vzorec:
kde R1b j -OC(O)RX hydroxy, -OG(O)OR* e hydroxy, chráněný hydroxy, -OCHpSCHj, nebo -OC(O)ORX, R2 je vodík, a R? -je vodík chráněná hydroxy, -OCHASCHU, -OC(O)RX nebo?
3 b j , R je vodík, hydroxy, chráněná hydroxy,
C1_6alkyloxy, -OCXOR3', -OC^SCITj nebo -OC(O)ORX, jeden z R^b nebo R7b je vodík a druhý je hydroxy, chráněná hydroxy, _galkanoyloxy nebo -OCHgSCR^ nebo R^b a R7b SpOiu tvoří oxoskupinu s tou podmínkou, že alespoň jedere z R1b,. R2b, R3b, Ř6b nebo R7b je- -0CEoSCH,. 4 5 x 4 5 p,;R , R a R mají dříve definovaný význam.
54. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 7-fírmethylthiomethylpaclitaxel.
-22455· Sloučenina podle nároku 53, kterou je 2*-O(benzyloxykarbonyl)-7-O-methylthiomethylpaclitaxel.
56. Sloučenina podle nároku 53, kterou je
2.'-O-(ethoxykarbonyl)-7-Q-methylthiomethylpaclitaxel.
57. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 2'-Clíme thy Ithio methyl )-7-2.- (triethylsilyl)paclitaxel.
58*. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 2*-O(methylthiomethyl)paclitaxel. & :
59.-Sloučenina podle nároku 53, kterou je 2 \ 7-O~-í bis(methylthiomethyl)paclitaxel.
60- Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-N-debenzoyl-3 *-desfenyl-3*-N-(terč.butyloxykarbonyl )-3 *(2-furyl)-7-O-methylthiomethylpaclitaxel.
61. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-Ndebenzoyl-3 *-desfenyl-3 *-Ň-(terč.butyloxykarbonyl)-3 *tjj I (2-furyl )-2 *-Q-ethyloxykarbonyl-7-0-methylthiomethylpaclitaxel.
62. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-Ndebenzoyl-3 -desfenyl-3 -N-(terč.butyloxykarbonyl)-3 (2-thienyl)-7-O-methylthiomethylpaclitaxel. z
63· Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-N— debenzoyl-3 '-desf enyl-3 *-N-(terč .butyloxykarbonyl)-3“—==-=--=== = =(2-thienyl )-2 *-0-ethyloxykarbonyl-7-0.-methylthiomethylpaclitaxel.
64. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-Ndebenzoyl-3 *-N-(isopropyloxykarbonyl)-7-O-methylthiomethylpaclitaxel.
-22565. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-N-debenzoyl-3 *-N- (n-butyloxykarbonyl )-7-0-methvlthiomethylpaclitaxel.
66. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-N-debenzoyl-3 *-N- (terč. butoxykarbonyl )-2-Q.-trie thylsilyl7-fi-methylthiomethylpaclitaxel.
67► Sloučenina podle nároku 53., kterou je 3''-lide benzoyl-3 '-N- (terč. butoxykarbonyl)-7-2.-methylthiomethylpaclitaxel.
68. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3 *-Ndebenzoyl-3 *-N- (terč.butoxykarbonyl)-7-O-methylthiomethyl-1 0-deacetyl-1O-hydroxymethylkarbonyl(úaclitaxel).
69. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-Ndebenzoyl-3 *-w-(terč.butoxykarbonyl)-7-O-methylthiomethyl3 *-desfenyl-3 '-isobutenylpaclitaxel.
70. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-N-debenzoyl-3 *-N-(terč.butoxykarbonyl)-2'-O-ethyloxykarbonyl7-O-methylthiomethylpaclitaxel.
71. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 7-0methylthiomethyl-3 *-desfen.yl-3 '-isobutenylpaclitaxel.·
72. Sloučenina podle nároku 53, kterou je 3*-desfenyl-3 *- (2-furyl )-2 *-0-ethyloxykarbonyl-7-0-methylthio- - = methylpaclitaxel.
73. Sloučenina podle nároku 52, mající vzorec ch3sch2och2ó
-S AeO ÓCOPh kde r2j R^b, R·^, R^, R^, R^b Q p ma-j.£ dříve definovaný význam.
74* Sloučenina podle nároku 73, kterou je 2*-O(methylthiomethoxymethyl)-7-p-triethylsilylpacíitaxel.
75. Sloučenina podle nároku 73, kterou je 2*~O(methylthiomethoxymethyl)-7-0-benzyloxykarbonylpaclitaxel
76,
Sloučeniny vzorce
T·
OCH2(OCH2)mOP(O)(ORy) kde T*, man mají výše definovaný význam a je fosfono chránís£ skupina.
27.
Sloučenina podle nároku 76, mající vzorec
-2 2 γ-
1 c v kde R je hydroxy, chráněný hydroxy, -OCH^OPÍO)(0CH2Ry^2’ -OC(O)RX nebo -OC(O)ORX, R2 je vodík, R2c je vodík, hydroxy, chráněná hydroxy, -OCHgOPíO)(ΟΟΗ2Ι^)2, -OC(O)ORX nebo -OC(O)RX, R^c je vodík,, hydroxy, _galkyloxy, chráněné hydroxy, -OC(O)RX, -OCH2OP(O)(ΟΟΗ2Κ^)2 nebo -ÓC(O)OR*, jeden z R6? nebo R7c je vodík a druhý je hydroxy, chráněné hydroxy, galkanoyloxy nebo
-OCH^OP(O)(OR^)2 nebo R^c a R7c spolu tvoří oxoskupinu, s tou podmínkou, že alespoň jeden z R1c, R2c, R^c, R^c nebo R7c je -OCH^OPÍO) (OCH2Ř^)2, ρ-, R4, R5, Rx y Sy mají dříve definovaný význam·»
78. Sloučenina podle nároku 76, mající vzorec
-228- kde R2, R2c, R3c, definovaný význam.
n7c
RZ'C, R^ a p mají dříve
79· Farmaceutický .přípravek, vyznačující se t í m, že obsahuje protinádorově účinné množství sloučeniny podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný /nosič.· sloučeniny vzorce B*
Žp ůs ob inhi bi ce růstu tumorŮTu^savčího”host it e v?; ičující se tím, že zahrnuj© podán tui libujícího) množství sloučeniny podle nárokyr 1 uv< i savci.
♦. k . í >
-. * -v—-.-.-------·---'--·-inhibice růstu tumorůu savčfno hostitele, víujé-podání orální tumor inhi čího množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému i i \/savčího hostitele, že zahrnuje podání
CZ941947A 1993-08-17 1994-08-11 Phosphonooxymethyl ethers of taxan derivatives CZ194794A3 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US10801593A 1993-08-17 1993-08-17
US15484093A 1993-11-24 1993-11-24
US24511994A 1994-05-17 1994-05-17

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ194794A3 true CZ194794A3 (en) 1995-08-16

Family

ID=27380403

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ941947A CZ194794A3 (en) 1993-08-17 1994-08-11 Phosphonooxymethyl ethers of taxan derivatives

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0639577B1 (cs)
JP (1) JP3062986B2 (cs)
KR (1) KR100249306B1 (cs)
CN (2) CN1051315C (cs)
AT (1) ATE217629T1 (cs)
AU (2) AU694941B2 (cs)
CA (1) CA2129288C (cs)
CY (1) CY2295B1 (cs)
CZ (1) CZ194794A3 (cs)
DE (1) DE69430611T2 (cs)
DK (1) DK0639577T3 (cs)
ES (1) ES2176212T3 (cs)
FI (1) FI113271B (cs)
HU (1) HUT67742A (cs)
IL (2) IL110660A0 (cs)
NO (1) NO309093B1 (cs)
NZ (1) NZ264240A (cs)
PL (1) PL179636B1 (cs)
PT (1) PT639577E (cs)
RU (1) RU2128661C1 (cs)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6515009B1 (en) 1991-09-27 2003-02-04 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US5811447A (en) 1993-01-28 1998-09-22 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
FR2698871B1 (fr) 1992-12-09 1995-02-24 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveau taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
CA2111527C (en) * 1992-12-24 2000-07-18 Jerzy Golik Phosphonooxymethyl ethers of taxane derivatives
US5981568A (en) 1993-01-28 1999-11-09 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US6491938B2 (en) 1993-05-13 2002-12-10 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
FR2732340B1 (fr) * 1995-03-27 1997-04-30 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux taxoides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US6593482B2 (en) 1993-02-01 2003-07-15 Aventis Pharma S.A. Methods for preparing new taxoids and pharmaceutical compositions containing them
US6040466A (en) * 1996-03-25 2000-03-21 Rhone Poulenc Rorer Sa Taxoids, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US6232477B1 (en) 1996-03-25 2001-05-15 Aventis Pharma S.A. Methods of preparing new taxoids and pharmaceutical compositions containing them
US5677470A (en) * 1994-06-28 1997-10-14 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Baccatin derivatives and processes for preparing the same
AU4133096A (en) * 1994-10-28 1996-05-23 Research Foundation Of The State University Of New York, The Taxoid derivatives, their preparation and their use as antitumor agents
US6500858B2 (en) 1994-10-28 2002-12-31 The Research Foundation Of The State University Of New York Taxoid anti-tumor agents and pharmaceutical compositions thereof
US6458976B1 (en) 1994-10-28 2002-10-01 The Research Foundation Of State University Of New York Taxoid anti-tumor agents, pharmaceutical compositions, and treatment methods
CA2162759A1 (en) * 1994-11-17 1996-05-18 Kenji Tsujihara Baccatin derivatives and processes for preparing the same
US6372780B2 (en) 1995-03-27 2002-04-16 Aventis Pharma S.A. Methods of treating cell lines expressing multidrug resistance P-glycoprotein
US5847170A (en) * 1995-03-27 1998-12-08 Rhone-Poulenc Rorer, S.A. Taxoids, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
MA23823A1 (fr) * 1995-03-27 1996-10-01 Aventis Pharma Sa Nouveaux taxoides, leur preparation et les compositions qui les contiennent
TW354293B (en) * 1995-06-06 1999-03-11 Bristol Myers Squibb Co Prodrugs of paclitaxel derivatives
US6245805B1 (en) * 1995-10-26 2001-06-12 Baker Norton Pharmaceuticals, Inc. Method, compositions and kits for increasing the oral bioavailability of pharmaceutical agents
WO1997027855A1 (en) * 1996-01-31 1997-08-07 Bristol-Myers Squibb Company A method of making pharmaceutically active taxanes orally bioavailable
EP0975340B2 (en) 1997-03-31 2009-10-28 Boston Scientific Limited Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US6156789A (en) * 1998-03-17 2000-12-05 Rhone-Poulenc Rorer S.A. Method for treating abnormal cell proliferation in the brain
US6204257B1 (en) * 1998-08-07 2001-03-20 Universtiy Of Kansas Water soluble prodrugs of hindered alcohols
EP1020188A1 (en) * 1999-01-13 2000-07-19 Aventis Pharma S.A. New use of taxoid derivatives
US6362172B2 (en) * 2000-01-20 2002-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Water soluble prodrugs of azole compounds
US6649632B2 (en) 2000-02-02 2003-11-18 Fsu Research Foundation, Inc. C10 ester substituted taxanes
MXPA01009906A (es) 2000-02-02 2003-07-28 Univ Florida State Res Found Taxanos sustituidos con carbonato en c7 como agentes.
GEP20043239B (en) 2000-02-02 2004-05-25 Florida State Univ Research Foundation Us C10 Carbonate Substituted Taxanes as Antitumor Agents
AU7007001A (en) 2000-06-22 2002-01-02 Nitromed Inc Nitrosated and nitrosylated taxanes, compositions and methods of use
US6448401B1 (en) 2000-11-20 2002-09-10 Bristol-Myers Squibb Company Process for water soluble azole compounds
AU2003234689A1 (en) 2002-04-05 2003-10-27 Natural Pharmaceuticals, Inc. Selective acylation of secondary hydroxyl groups
US7390898B2 (en) 2002-08-02 2008-06-24 Immunogen Inc. Cytotoxic agents containing novel potent taxanes and their therapeutic use
MXPA05001390A (es) 2002-08-02 2005-07-29 Immunogen Inc Agentes citotoxicos que contienen taxanos potentes novedosos y su uso terapeutico.
US8703982B2 (en) 2003-03-17 2014-04-22 Phyton Holdings Llc Purification of taxanes
HN2005000054A (es) 2004-02-13 2009-02-18 Florida State University Foundation Inc Taxanos sustituidos con esteres de ciclopentilo en c10
US8242166B2 (en) 2008-03-31 2012-08-14 Florida State University Research Foundation, Inc. C(10) ethyl ester and C(10) cyclopropyl ester substituted taxanes
JP5931736B2 (ja) 2009-11-13 2016-06-08 ウー３・フアルマ・ゲー・エム・ベー・ハーＵ３ Ｐｈａｒｍａ Ｈｅｒ−３関連疾患を治療または予防するための物質および方法
US20120156130A1 (en) 2010-08-06 2012-06-21 Thore Hettmann Use of her3 binding agents in prostate treatment
MX348971B (es) 2011-08-25 2017-07-05 Bonac Corp Compuesto de glicósido, método para producir tioéter, éter, método para producir éter, método para producir un compuesto de glicósido, método para producir ácido nucleico.
CN104650012A (zh) * 2013-11-22 2015-05-27 天士力控股集团有限公司 一种紫杉烷类化合物
EP3301103A4 (en) * 2015-04-02 2019-01-23 Bonac Corporation METHOD FOR PRODUCING GLYCOSIDE COMPOUNDS
CN110862410A (zh) * 2018-08-27 2020-03-06 深圳福山生物科技有限公司 三氟甲基硒化合物及其用途
WO2020249688A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Nouryon Chemicals International B.V. Process for the production of diacyl peroxides
JP7355858B2 (ja) * 2019-06-12 2023-10-03 ヌーリオン ケミカルズ インターナショナル ベスローテン フェノーツハップ 水性側流からカルボン酸を単離するための方法
ES2963382T3 (es) 2019-06-12 2024-03-26 Nouryon Chemicals Int Bv Proceso para la producción de peróxidos de diacilo

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2678930B1 (fr) * 1991-07-10 1995-01-13 Rhone Poulenc Rorer Sa Procede de preparation de derives de la baccatine iii et de la desacetyl-10 baccatine iii.
FR2679230B1 (fr) * 1991-07-16 1993-11-19 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux derives d'analogues du taxol, leur preparation et les compositions qui les contiennent.
US5229526A (en) * 1991-09-23 1993-07-20 Florida State University Metal alkoxides
US5272171A (en) * 1992-02-13 1993-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Phosphonooxy and carbonate derivatives of taxol
CA2111527C (en) * 1992-12-24 2000-07-18 Jerzy Golik Phosphonooxymethyl ethers of taxane derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
HU9402342D0 (en) 1994-10-28
CY2295B1 (en) 2003-07-04
DK0639577T3 (da) 2002-08-19
JPH07149779A (ja) 1995-06-13
AU694941B2 (en) 1998-08-06
EP0639577B1 (en) 2002-05-15
DE69430611D1 (de) 2002-06-20
PL179636B1 (pl) 2000-10-31
CN1237580A (zh) 1999-12-08
NZ264240A (en) 1997-10-24
EP0639577A1 (en) 1995-02-22
PL304649A1 (en) 1995-02-20
CA2129288C (en) 2000-05-16
ATE217629T1 (de) 2002-06-15
RU94029662A (ru) 1996-07-10
HUT67742A (en) 1995-04-28
DE69430611T2 (de) 2002-12-19
FI943749A0 (fi) 1994-08-15
AU706511B2 (en) 1999-06-17
JP3062986B2 (ja) 2000-07-12
IL110660A0 (en) 1994-11-11
KR100249306B1 (ko) 2000-04-01
KR950005834A (ko) 1995-03-20
FI113271B (fi) 2004-03-31
CN1111637A (zh) 1995-11-15
FI943749A (fi) 1995-02-18
CN1051315C (zh) 2000-04-12
ES2176212T3 (es) 2002-12-01
RU2128661C1 (ru) 1999-04-10
CA2129288A1 (en) 1995-02-18
NO943002D0 (no) 1994-08-15
NO943002L (no) 1995-02-20
AU7026794A (en) 1995-03-02
PT639577E (pt) 2002-10-31
NO309093B1 (no) 2000-12-11
AU9135698A (en) 1999-01-14
IL128425A0 (en) 2000-01-31
CN1100771C (zh) 2003-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ194794A3 (en) Phosphonooxymethyl ethers of taxan derivatives
US6455575B2 (en) Phosphonooxymethyl ethers of taxane derivatives
EP0604910B1 (en) Phosphonooxymethyl ethers of taxane derivatives
EP0590267B1 (en) Deoxy taxols
EP0600517B1 (en) 6,7-Modified paclitaxels
US5478854A (en) Deoxy taxols
EP0694539B1 (en) 7-O-Ethers of taxane derivatives
CZ20022956A3 (cs) Derivát taxanu, jeho použití jako protinádorového činidla a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje
AU3477797A (en) 7-deoxy-6-substituted paclitaxels
RU2136673C1 (ru) Фосфонооксиметиловые эфиры таксановых производных, промежуточные соединения, противоопухолевая фармацевтическая композиция, способ ингибирования роста опухоли у млекопитающих
KR100292331B1 (ko) 플루오로탁솔

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic