CZ149898A3

CZ149898A3 - Použití epinastinu pro výrobu farmaceutického prostředku

Info

Publication number: CZ149898A3
Application number: CZ981498A
Authority: CZ
Inventors: Birgit Jung; Christopher John Montague Meade; Michel Pairet
Original assignee: Boehringer Ingelheim Kg
Priority date: 1995-11-14
Filing date: 1996-11-13
Publication date: 1998-10-14
Also published as: BR9611502A; MX9803206A; HU225759B1; JP2000500446A; DE19542281A1; AR004321A1; IL123601A0; CO4770978A1; AU7623096A; ZA969520B; TR199800853T2; HUP9903489A3; RO118373B1; NZ322467A; SK61398A3; NO982172D0; EP0861081B1; EE9800158A; KR19990067527A; JP4264850B2

Description

Použití epinastinu pro výrobu farmaceutického prostředku

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nového použití epinastinu pro léčbu a pro profylaxi bolesti, zejména chronické nebo zánětem vyvolané bolesti, a konkrétně migrény.

Dosavadní stav techniky

Epinastin (3-amino-9,13b-dihydro-lH-dibenz(c, f) -imidazo (5,1-a)azepin hydrochlorid) byl prvně popsán Fůgnerem et al., (Arzneimittelforschung 38 (1988): 1446 - 1453). Aktivní sloučenina může být použita ve formě racemické směsi nebo ve formě čistých enantiomerů nebo jako směs různých poměrů obou enantiomerů. Terapeuticky je epinastin používán jako hydrochlorid. Vynález zde popsaný, nicméně, není omezen na hydrochlorid, ale týká se jakékoliv adiční sole s farmakologicky přijatelnou kyselinou stejně jako volné baze.

Použití epinastinu a jeho solí pro léčbu asthmatu je známé. Evropský patent EP-B-0 035 749 popisuje, že tato substance je také vhodná pro terapii alergických onemocnění jako je alergická rhinitida, alergická konjunktivitida a alergická bronchitida.

Bolesti hlavy jsou často se vyskytujícím příznakem. Ve většině případů je bolest hlavy krátkodobá a může být snadno kontrolována slabými analgetiky jako je aspirin, paracetamol nebo ibuprofen. Taková bolest je nepříjemná, ale nevede k žádnému významnému narušení zdraví. Oproti tomu, chronická opakující se bolest hlavy jako je migréna může vést k tak závažným poruchám, že je nutná konzultace lékaře. Tyto vážné typy bolestí hlavy často nemohou • · • · · ·· · 4 4 4 4 ··· ·· ·44

444444 4 4 4 44444

O 4 · 444444

4444 4 4444444 být uspokojivě léčeny slabými analgetiky.

Na druhou stranu, neexistuje všeobecně přijímaný systém klasifikace bolestí hlavy; chronická opakující se bolest ve smyslu tohoto vynálezu označuje především migrénu a Bing-Hortonův syndrom. Migréna sama o sobě má několik podtypů (viz J. Olesen and R.B. Lipton, Neurology 44 (1994) str. 6-10 pro klasifikaci). Ačkoliv migréna a tensní bolest hlavy jsou dvě různé formy, klasifikují je někteří vědci jako kontinuální formy, s migrénou na jedné straně a tensní bolestí hlavy na druhé straně spektra (K.L. Kumar and T.G. Cooney: Headaches v Medical Clinics of North America svazek 79 č. 2 (1995) , str. 261 - 286) . Proto se zdá rozumné předpokládat, že mnoho pacientů s tensní bolestí hlavy bude také odpovídat na terapii pro migrénu. Několik jiných onemocnění, která jsou spojena s chronickou bolestí, jako je neuralgie, bolesti svalů a zánětlivá bolest (například po spálení na slunci nebo při osteoartritidě nebo po zranění při sportu) má společné rysy s chronickou opakující se bolestí (A. Dray, L. Urban and A. Dickenson, Trends in Pharmacoological Sciences 15 (1994): 190 - 197) .

Současná terapie migrény zahrnuje použití námelových alkaloidů jako je ergotamin a 5HT_io antagonistů jako je sumatriptan. Ačkoliv mnoho pacientů má užitek z těchto léků, v žádném případě na tuto léčbu nereagují všichni pacienti. Také mají mnoho nežádoucích účinků jako jsou závratě a nevolnost. Léky pro profylaktickou léčbu migrény zahrnují methysergid a pizotifen, beta-blokátory jako je propanolol, a blokátory vápníkového kanálu jako je flunarizin. Chronické podávání těchto léčiv může mít nežádoucí účinky, které poškodí kvalitu života nemocného a léky obvykle pouze redukují frekvenci ataků migrény, ale nezabrání jim

999· · •9 •· • 9

9 «

···· (viz H.C. Diener, Eur. Neurol. 34 (Suppl. 2) (1994): 18 - 25).

Zůstává proto dále potřeba léku pro léčbu migrény, který je nejen účinný, ale také bez významných nežádoucích účinků. Existuje zde také potřeba léku s vysokým stupněm bezpečnosti pro určitou skupinu pacientů jako jsou děti a pacienti s redukovanými jaterními nebo ledvinými funkcemi, nebo s kardiovaskulárními onemocněními.

Podstata vynálezu

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že epinastin výborně splňuje tyto požadavky. Toto je ukázáno následujícími výsledky výzkumů.

U laboratorních zvířat je možné indukovat zánět v důra mater elektrickou stimulací ganglia trigeminu, což způsobuje uvolnění neuropeptidů jako je substance P ze zakončení sensitivních nervů. Extravasace plasmy může být sledována markéry jako je Evansova modř. Tento zvířecí model je často používán pro testování léků použitelných u migrény. Překvapivě, epinastin ukázal výjimečně dobrou aktivitu v tomto modelu. Pro chronickou zánětlivou bolest je široce používaným modelem ten, který je prvně popsán Randallem a Selittem (L.O. Randall and J.J. Selitto, Arch. Int.

Pharmacodyn. 111 (1957) : 409 - 419). Zánět je indukován na tlapce krysy injekcí kvasinkových buněk a měří se zánětem indukovaná hyperalgesie. Epinastin také ukázal překvapivě dobrou aktivitu v tomto modelu.

Epinastin je známý jako antihistaminikum. Interakce mezi ligandem (např. lékem) a receptorem mohou být kvantifikovány pomocí afinitní konstanty (K_±). Čím menší hodnota afinitní ·· ···· konstanty, tím silnější vazba mezi lékem a receptorem. Zejména je věnována pozornost těm sloučeninám, jejichž hodnota K_± je menší nebo je stejného řádu jako očekávaná hodnota léku v cílových tkáních (nebo plasmě). 5HT₇ receptor je speciálním podtypem receptoru pro 5-hydroxytryptamin (pro klasifikaci viz Trends in Pharmacological Sciences 1994 Receptor and Ion Channel Nomenclature Supplement). Překvapivě, byla zjištěna dobrá vazba epinastinu na 5ΗΤ_ύ receptor. K_± hodnoty pro epinastin a pro dvě srovnávaná antihistaminika jsou uvedena v tabulce 1.

Zde popsaný vynález bude nyní ilustrován odkazem na příklady. Z tohoto popisu budou odborníků v oboru zřejmé jiné možnosti provedení vynálezu. Je zde výslovně uvedeno, že příklady jsou míněny pouze jako ilustrace a ne jako omezení předkládaného vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Studie vazby epinastinu na 5ΗΤ_ύ receptor

Vazba 2,0 nM (³H) LSD na krysí 5HT_v receptor exprivovaný na CHO buňkách byla měřena po dobu 60 minut při 37 °C v 50 mM Tris-HCl pufru, pH 7,4, obsahujícím 10 mM MgCl₂ a 0,5 mM EDTA. Reakce byla ukončena rychlou vakuovou filtrací na fitlrech ze skelných vláken předem ošetřených 0,1% polyethyleniminem. Studie vazby byly provedeny dvojnásobně za absence léku a za přítomnosti 6 až 8 koncentrací epinastinu mezi 3 nM a 10 μΜ. Byla měřena radioaktivita zachycená na filtrech za přítomnosti každé koncentrace léku a byla srovnávána s kontrolními hodnotami pro určení interakce léku s klonovaným 5HT₇ receptorovým místem. Nespecifická vazba byla určena za přítomnosti • · · ·

5-karboxamidotryptaminu (5-CT). IC_so pro nahrazení radioznačeného ligandu byla určena grafickou extrapolací a K_± hodnoty byly počítány po korekci pro posun obsazování radioligandu podle rovnice, kterou popsal Cheng and Prusoff (viz Biochem. Pharmacol. 22 (1973) : 3099 - 3108). Provedeny byly tři pokusy. V každém pokusu bylo zjištěno, že epinastin se váže na 5HT₇ receptor překvapivě dobře. Průměrná zjištěná hodnota K_± pro epinastin byla 33 nM, průměrná (+) enantiomeru byla 28 nM a (-) enantiomeru 189 nM. Jednotlivé hodnoty pro K_± epinastinu a jeho enantiomeru, které byly zjištěny v těchto třech pokusech, jsou uvedeny v tabulce 1, spolu s hodnotami Κ_χ pro dvě srovnávací antihistaminika.

• · · · · · • ·

Tabulka 1:

Vazba epinastinu (racematu a enantiomerů) a dvou srovnávacích antihistaminik (ketotifen a mepyramin) na 5HT_v receptor

Sloučenina	Úplný chemický název	Měřené hodnoty K_±, nM
Epinastin	3-amino-9,13b-dihydro-lHdibenz(c,f)-imidazo (1, 5-a)azepin hydrochlorid (racemat)	27, 41, 30
Epinastin (+) enantiomer	(+)3-amino-9,13b-dihydro-lHdibenz(c,f)-imidazo (1, 5-a)azepin hydrochlorid	45, 18, 22
Epinastin (-) enantiomer	(-)3-amino-9,13b-dihydro-lHdibenz(c,f)-imidazo (1, 5-a)azepin hydrochlorid	155, 204, 207
Ketotifen		406, 572, 331
Mepyramin		2660, 747, 1330

Studie účinku epinastinu na extravasaci plasmy v důra mater krys indukované elektrickou stimulací ganglia trigeminu

Samci Wistar krys o hmotnosti 175 - 190 g byly anestezováni ·· ···· • · · · · · ···· • ······ · 9 · 99 9 9 nembutalem 50 mg/kg i.p. a byla kanylována véna jugularis pro injekci léčiva. Zvířata byla umístěna do stereotaktického rámu. Symetrické vrty byly provedeny 3,0 mm laterálně a 3,2 mm posteriorně od bregma a elektrody byly umístěny 9,5 mm od důra mater. Testovaná sloučenina epinastin nebo kontrolní roztok byly injikovány intravenosně 10 minut před elektrickou stimulací pravého ganglia trigeminu (5 minut; 2,0 mA, 5 Hz, trvání 5 ms) a Evansova modř (30 mg/kg i.v.) byla podána 5 minut před elektrickou stimulací jako markér extravasace plasmatických proteinů. 15 minut po konci periody stimulace byla zvířatům podána perfuse 50 ml fyziologického roztoku přes levou srdeční síň pro odstranění intravaskulární Evansovi modři. Důra mater byla odebrána, usušena a zvážena. Tkáňová Evansova modř byla extrahována v 0,3 ml formamidu při 50 °C po dobu 24 hodin. Koncentrace barviva byla měřena spektrofotometrem při vlnové délce 620 nm, byla interpolována na standardní křivku a byla vyjádřena jako obsah Evansovi modři v ng na mg hmotnosti tkáně.

Výpočet dat:

Extravasace byla vyjádřena jako kvocient vypočítaný dělením obsahu Evansovi modři stimulované strany obsahem Evansovi modři v nestimulované straně. Výsledky jsou vyjádřeny jako průměr. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

·♦ 9999

Tabulka 2

Účinek epinastinu ve zvířecím modelu migrény

Kontrolní skupina byla ošetřena 0,9% roztokem chloridu sodného: 1 ml/kg i.v.

Zvíře č.	Tělesná hmotnost	Důra mater stimul. strany	Důra mater nestim. str. hmot. obsah EB/hmot.	Kvocient stimul/ nestim. str.
hmot. (mg)	. obsah EB/hmot.
EB (gg/ml)	(gg/ml)	(mg)	EB
(gg/ml)	(gg/ml)
1	180 g	4,24	0,85	0,060	5,58	0,73	0,039	1,54
2	185 g	5,34	0,76	0,043	5,13	0,60	0,035	1,23
3	185 g	5,06	0,47	0,028	4,60	0,38	0,025	1,12
4	190 g	6,05	1,33	0,066	6,23	1,03	0,050	1,32
5	185 g	4,22	0,72	0,051	5,77	0,67	0,035	1,46
6	185 g	4,81	0,57	0,036	5,03	0,54	0,032	1,13
7	185 g	7,62	1,35	0,053	6,53	1,22	0,056	0,95

EB = Evansova modř průměr = 1,25

Skupina ošetřená epinastinem 10 ^g/kg i.v. ředěným v 0.9% roztoku chloridu sodného: 1 ml/kg

Zvíře Tělesná Důra mater stimul. Důra mater Kvocient

č. hmotnost strany nestim. str. stimul/

		hmot	. obsah EB/hmot.	hmot.	obsah EB/hmot.	nestim.
			EB			EB		str.
		(mg)	(gg/ml)	(gg/ml)	(mg)	^g/ml)	(/zg/ml)
1	175 g	6,63	1,20	0,054	6,01	1,28	0,064	0,84
2	175 g	4,96	0,74	0,046	4,78	0,80	0,050	0,92
3	170 g	4,63	0,53	0,034	7,68	1,01	0,039	0,87
4	165 g	6,52	0,54	0,025	6,29	0,53	0,025	1,00
5	190 g	7,97	1,23	0,046	9,32	1,39	0,045	1,02
6	190 g	6,24	0,70	0,034	6,52	0,83	0,038	0,89
7	190 g	6,87	0,60	0,026	7,29	0,48	0,020	1,30
EB	= Evansova	modř					průměr =	0,98

Tabulka 2 ukazuje, že ve zvířecím modelu pro migrénu léčba epinastinem signifikantně redukuje extravasaci Evansovi modři indukovanou elektrickou stimulací ganglia trigeminu.

Studie účinku epinastinu na kvasinkami indukovanou hyperalgesii v tlapce krys

Metoda podle Randalla a Selitta byla modifikována použitím stupnice analgesie podle Basile of Milan.

*4 · • 44

44444 ίο.:.. :

····

Skupina 10 vyhladovělých rys kmene Chbb:TH0M (hmotnost 110 140 g, 5 samců a 5 samic) dostala orálně 1% Natrosol 250 HX, 1 ml/100 g tělesné hmotnosti, obsahující 0, 0,3, 1,0, 3,0 nebo 10 mg/kg epinastinu (racemické směsi). 0 1 hodinu později byla zvířatům injikována subplantárně suspense kvasinkových buněk v objemu 0,1 ml do pravé zadní tlapky. 3 hodiny po injekci kvasinkové suspenze byl určen práh bolesti zvyšováním tlaku na zánětem postiženou tlapku dokud se neobjevily známky bolesti. Z prahu bolesti měřeného po různých dávkách epinastinu byla použita lineární regresní analýza pro určení ED_so. Jak ukazuje tabulka 3, epinastin zvyšoval práh bolesti v tomto modelu. Dávka epinastinu nutná pro zvýšení prahu bolesti o 50% byla vypočítána jako 1,1 mg/kg.

Tabulka 3

Účinek epinastinu na práh bolesti v zánětem postižené tlapce u krys

Substance	Dávka mg/kg p.o.	Počet krys	Průměrná hodnota prahu bolesti g/zadní tlapku	Standardní odchylka	% zvýšení
kontrola	0,0	10	150,4	30,4
epinastin	0,3	10	164,8	41,8	9,6
epinastin	1,0	10	235,2	51,5	56,4
epinastin	3,0	10	259,4	60,7	72,5
epinastin	10,0	10	272,8	60,9	81,4

·· ····

Tabulka 4

Test analgetické aktivity podle Randall Selitto

Zvíře: Samec/samice krysy Hmotnost: 110 - 140 g Krmení: vyhladověné Podání: 1,0 ml/100 g p.o.

Přísada: 1% Natrosol

Hodnota v 90. minutě

Substance	Dávka mg/kg	N	Průměrná hodnota	Aktivitě v %	i SD	VK v %
kontrola	0/0	10	150		46,188	30,792
epinastin/ibuprofen	0/3,0	10	153	2,00	20,028	13,090
epinastin/ibuprofen	0/10,0	10	202,00	34,67	29,740	14,723
epinas t in/ibuprofen	0,3/0	10	216,00	44,00	44,020	20,380
epinastin/ibuprofen	0,3/3,0	10	252,00	68,00	57,116	22,665
epinastin/ibuprofen	0,3/10,0	10	277,00	84,67	81,792	29,528
epinastin/ibuprofen	1,0/0	10	232,00	54,67	57,889	24,952
epinastin/ibuprofen	1,0/3,0	10	295,00	96,67	70,593	23,930
epinastin/ibuprofen	1,0/10,0	10	369,00	146,00	107,233	29,060

Epinastin nebo jeho enantiomery mohou být podány pro léčbu bolesti jako roztok pro injekce vhodným způsobem, jako je intravenosní, intramuskulárnínebo subkutání podání, jako tablety, jako čípky, jako aerosol pro inhalační podání do plic nebo jako nasální spray.

·· « •9 9 • ·9 • ····9

12.:.. :

9999

·· ·· • 9 9 99 • ♦ 999 • 9 999 ·· • 9 99 • 9·99

Při podání tablet nebo čípků bude jedna dávka pro dospělé činit asi 5 až 200 mg, s preferovanou dávkou mezi 10 a 50 mg. Pro inhalaci jsou podány jednotlivé dávky mezi 0,05 až 20 mg, preferovaně mezi 0,2 a 5 mg. Pro parenterální injekce bude jednotlivá dávka v rozmezí 0,1 až 50 mg s preferovanou dávkou mezi 0,5 a 20 mg. Uvedené dávky mohou být, pokud to je nutné, podány několikrát za den.

Zeména preferovanou a výhodnou se zdá být kombinace epinastinu s jinými terapeutickými činidly, například s aspirinem, paracetamolem, nesteroidními antiflogistiky (NSAID) jako je ibuprofen, meloxicam, indometacin nebo naproxen; 5ΗΤ_χο agonisty jako je sumatriptan, MK-462, naratriptan nebo 311C; CP-122, 288; UK 116,044; antagonisty dopaminového D₂ receptorů jako je metoklopramid; námelovými alkaloidy jako je ergotamin, dihydroergotamin nebo metergolin; klonidinem; methisergidem; dotarizinem; lisuridem; pizotifenem; kyselinou valproovou; amitriptilinem; beta blokátory jako je propranolol nebo metoprolol; antagonisty vápníkového kanálu jako je flunarizin nebo lomerizin, nebo s antagonisty neurokininů. Takové kombinace, byď v jedné dávkové formě, nebo v separátních formách umožňujících sekvenční podání nebo v podstatě simultání podání, jsou dalším rysem předkládaného vynálezu.

Následují příklady farmaceutických kompozic obsahujících aktivní látku.

Tablety:

Epinastin 20 mg

Stearan horečnatý 1 mg

44· •· 4 • · ·

44444

13····

4444 «4 44 • · 4 4 4 44 • · · · 4·· • · ♦ · 4444·

4 4 4 44 ·· « 4444

Kukuřičný škrob 62 mg

Laktosa 83 mg

Polyvinylpyrolidon 1,6 mg

Injekční roztoky:

Epinastin 0,3 g

Chlorid sodný 0,9 g

Voda pro inekce do 100 ml.

Roztok může být sterilizován za použití standartních metod.

Roztok pro nasální nebo pro inhalační podání:

Epinastin 0,3 g

Chlorid sodný 0,9 g

Benzalkoniumchlorid 0,01 mg

Přečištěná voda do 100 ml.

Roztok popsaný výše je vhodný pro nasální podání jako spray, nebo v kombinaci s prostředkem, který je schopen produkovat aerosol s částicemi určité velikosti s preferovanou velikostí mezi 2 až 6 μπι, pro podání do plic.

Kapsle pro inhalaci:

Epinastin je aplikován v mikronisované formě (velikost částic mezi 2 a 6 μπι) obvykle spolu s mikroni z ováným nosičem jako je laktosa a je naplněn do kapslí z tuhé želatiny. Pro inhalaci může být aplikován obvyklý prostředek pro podání prášku do plic. Každá kapsle obsahuje mezi 0,2 a 20 mg epinastinu a 0 až 40 mg laktosy.

Inhalační aerosol:

Epinastin 1 díl

Sojový lecitin 0,2 dílu

Hnací směs plynů do 100 dílů

Směs je preferovaně naplněna do aerosolové nádoby s odměřovací chlopní, kdy je jeden vstřik měřen tak, že je podána dávka 0,5 mg. Pro jiné dávky v naznačeném rozmezí dávek je použit vhodný přípravek s použitím většího nebo menšího množství aktivní látky.

Krém

Kompozice g/100 g krému

Epinastin2,0

Koncentrovaná kyselina chlorovodíková0,011

Pyrosiřičitan sodný0,050

Směs stejných dílů cetyl alkoholu a stearyl alkoholu20,0

Vaselina alba5,0

Syntetický bergamotový olej0,075

Destilovaná voda do100,0

Claims

1. Použití epinastinu ve formě enantiomeru, směsi enantiomerů, nebo jako racematu pro léčbu bolesti.

2. Použití epinastinu podle nároku 1, pro léčbu migrény, Bing-Hortonova syndromu, tensní bolesti hlavy, bolesti svalů, zánětlivé bolesti nebo neuralgií.

3. Použití epinastinu jako racematu nebo ve formě enantiomeru, bud' jako volné baze nebo jako adiční sole s farmaceuticky přijatelnou kyselinou, pro produkci léčiva pro terapeutickou léčbu bolesti.

4. Použití epinastinu podle nároku 3 pro produkci léčiva pro terapeutickou léčbu migrény, Bing-Hortonova syndromu, tensní bolesti hlavy, bolesti svalů, zánětlivé bolesti nebo neuralgií.

5. Použití epinastinu podle jakéhokoliv z nároků 1 až 4 v kombinaci s dalšími analgetiky.

6. Použití epinastinu podle nároku 5, kde dalším použitým analgetikem je NSAID, 5HT_XE>-agonista, antagonista dopaminového D₂receptorů, námelový alkaloid, beta-blokátor, blokátor vápníkového kanálu nebo antagonista neurokininu.

7. Použití podle nároku 6, kde NSAID je ibuprofen, meloxicam, indometacin nebo naproxen.

8. Použití podle nároku 6, kde 5ΗΤ_χο agonista je sumatriptan, MK-462, naratriptan nebo 311C.

9. Použití podle nároku 6, receptoru je metoklopramid.

kde antagonista dopaminového D₂ kde

10. Použití podle nároku 6, dihydroergotamin nebo metergolin.

námelový alkaloid je ergotamin,

11. Použití podle nároku 6, kde beta-blokátor je propranolol nebo metoprolol.

12. Použití podle nároku 6, kde blokátorem vápníkového kanálu je flunarizin nebo lomerizin.

13. Použití podle nároku 6, kde bolest zmírňující léčivo je kombinováno s aspirinem, paracetamolem, klonidinem, methysergidem, dotarizinem, lisuridem, pizotifenem, kyselinou valproovou, amitryptilinem, CP-122,288 nebo UK 116,044.