CS276472B6 - Method of vital viral cultures maintenance - Google Patents

Method of vital viral cultures maintenance Download PDF

Info

Publication number
CS276472B6
CS276472B6 CS89402A CS40289A CS276472B6 CS 276472 B6 CS276472 B6 CS 276472B6 CS 89402 A CS89402 A CS 89402A CS 40289 A CS40289 A CS 40289A CS 276472 B6 CS276472 B6 CS 276472B6
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
trehalose
virus
dried
pct
viral cultures
Prior art date
Application number
CS89402A
Other languages
English (en)
Other versions
CS40289A3 (en
Inventor
Bruce Joseph Roser
Original Assignee
Quadrant Bioresources Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Quadrant Bioresources Ltd filed Critical Quadrant Bioresources Ltd
Publication of CS40289A3 publication Critical patent/CS40289A3/cs
Publication of CS276472B6 publication Critical patent/CS276472B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
    • A61K39/13—Poliovirus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/23—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32651—Methods of production or purification of viral material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2795/00—Bacteriophages
    • C12N2795/00011—Details
    • C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
    • C12N2795/10311—Siphoviridae
    • C12N2795/10351—Methods of production or purification of viral material
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/948—Microorganisms using viruses or cell lines

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu uchovávání živých virových kultur, zvláště pak vysoušení živých virových kultur do stabilní formy, z níž mohou být viry znovu oživeny za zachování své imunologické nebo jiné aktivity.
Živých virových kultur lze využít k mnoha důležitým účelům. Nejdůležitějším využitím neporušených i oslabených virových kultur jsou imunologické vakcíny. Jako dva dobré příklady mohou být uvedeny viry dětské obrny a spalniček. Vakcíny živých virů se ovšem velmi těžko uchovávají. V současné době je nelze vysoušet a znovu oživovat, aniž by ztratily své imunologické účinky. Z těchto důvodů je nelze ani zmrazovat. Virové vakcíny musí být proto uchovávány ve vodném médiu v chladu ve sterilních podmínkách, např. v chladničkách. Jedna z výše zmíněných chorob, spalničky, má velkou epidemiologickou důležitost, zvláště v zemích třetího světa. Každoročně na spalničky umírají pouze v Africe milióny dětí. Z velké části je to proto, že vakcíny potřebné pro prevenci ve většině zemí nemohou být rozšířeny, nebot chybí potřebná infrastruktura nebo prostředky k získání chladniček pró uchovávání vakcín.
Z tohoto důvodu je ve světě naléhavě nutné vyvinout jednoduchý způsob uchovávání živých virových kultur v nezeslabené imunologické formě, které by bylo možno jednoduše □živit vodou těsně před použitím.
Další viry mají značný význam v jiných oblastech. Např. virus EBV - virus Epstein Barr - má značný význam pro přípravu lidských B-buněčných rad, které slouží k získávání monoklonálních protilátek a pro studium lidské molekulární genetiky. Virus EBV musí být v současné době uchováván chlazený ve vodném médiu.
Podobně jsou významné bakteriofágy, jako např. fág lambda, získaný z E. coli, pro manipulaci s DNA a pro získávání genových bank v tzv. genovém inženýrství. Tento virus je také nutno uchovávat ve vodném médiu za chladu.
Je dobře známo, že průběh vysoušení neustálého biologického materiálu jak při teplotě místnosti, tak ve zmrazeném stavu - lyofilizaci - lze zlepšit přídavkem stabilizačního činidla k vysoušenému materiálu, což však nepřispívá k našim znalostem o úspěšné stabilizaci živých virových kultur.
V GB patentové přihlášce 2009198A je popisována stabilizace meningokokálních polysacharidů lyofilizaci, kdy jsou tyto polysacharidy kombinovány s různými cukry včetně sacharózy, rafinózy, glukózy a trehalózy. V tomto případě ovšem není antigenní součástí živý virus. Podobně GB patentová přihláška 21265B8A popisuje stabilizaci faktoru nekrózy nádorů v přítomnosti určitých cukrů a jejich kyselin.
Podle evropské patentové přihlášky 1404Θ9Α1 se stabilizuje antigen viru spalniček ponořením do určitých cukrů. Není zde však zmínka o možnosti stabilizace viru samotného.
Naše vlastní dřívější GB patentová přihláška 2187191A (W 087/00196) popisuje uchovávání různých proteinů a jiných makromolekul za teploty okolí v přítomnosti trehalózy. Je zde zmínka o vakcínách mrtvých virů, ale není zde uvedeno, že by tímto způsobem bylo možno zachovávat imunologické a jiné funkce živých virových kultur.
Bylo nyní zjištěno, že přítomnost trehalózy v médiu obsahujícím virovou kulturu během sušení ve zmrazeném stavu nebo při teplotě místnosti umožňuje uchovávání živých virových kultur a jejich následnou rekonstituci při zachování v podstatě všech jejich imunologických vlastností nebo jiných výhodných vlastností včetně schopnosti růstu.
Cílem vynálezu bylo tedy získání stabilní vysušené formy vakcín, např. viru dětské obrny nebo chřipky.
Tato úloha byla vyřešena a nedostatky dosavadních známých způsobů odstraněny způsobem podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že vodný systém, obsahující virus, se suší v přítomnosti trehalózy ve zmrazeném stavu nebo při teplotě okolí, přičemž vodný systém obsahuje 1 až 20 % hmotnostních trehalózy.
CS 276472 Β 6 2
Vodný systém obsahuje s výhodou 5 až 20 % hmotnostních trehalózy.
Obecně platí, že větší množství přidané trehalózy je výhodnější, ačkoli v praxi prospěšný účinek byl dosažen při 1 až 20 % hmotnostních trehalózy ve vodném systému, zejména při 5 až 10 % hmotnostních.
Množství přidané trehalózy samozřejmě závisí na množství viru v systému, ale udaný přesný poměr trehalózy není kritický.
Systém obsahující viry lze úspěšně lyofilizovat užitím standardních technik. K získání vysušeného materiálu, který může být uchováván při teplotě okolí a následně oživován vodou, je v praxi možno vysoušet vodný systém při teplotě okolí, aniž by došlo ke ztrátě imunologické nebo jiné aktivity. Např. vodný preparát, obsahující bakteriofág lambda GT10 a 10 % hmotnostních trehalózy, byl vysoušen při teplotě místnosti - asi 20 °C - a následně oživován přídavkem vodné suspneze E. coli ve vodném médiu.
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech. Příklady jsou pouze ilustrativního charakteru a nijak neomezují rozsah ani použití vynálezu.
Příklad 1
Zhodnocení vlivu trehalózy na uchovávání viru Epstein Barr při teplotě místnosti ve vysušeném stavu.
Použitý materiál a metody:
1. Získávání viru
Produkční buněčná rada B95,8 (Virus Epstein Barr, Ed. Epstein and Achong, Springer Verlag, Berlin 1979) byl pěstován do slití buněk v DMEM/10 % FCS s přídavkem 30 ng/ml 12-0-tetradekonyl-forbol-13-acetátu (TPA) a kultura byla udržována 10 dní při 33 °C. Supematant byl separován, čištěn filtrací přes filtr o hustotě 0,45 yum a zakoncentrován ultrafiltrací (300 Kdalton nominální přerušení) na čtyřicetinásobek koncentrace původní kultury.
2. Sušení a skladování
K alikvótnímu podílu koncentrované virové kultury byly přidány stejné objemy konzervační látky - 2 %, 20 % nebo 40 % trehalózy (Sigma) ve vodě a polovina každého roztoku byla skladována při 4 °C. Zbývající polovina byla vysoušena ve zmrazeném stavu ve skleněné ampuli a uchovávána při teplotě místnosti. Po jednom týdnu byl materiál vysoušený ve zmrazeném stavu oživován sterilní vodou. Z každého vzorku byly připraveny pomocí DMOM/10 % FCS zředěné vzorky, které vykazovaly zředění odpovídající 1/3 koncentrace původní kultury v supernatantu.
3. Zkoušky na inkorporovaný thymldin při množení buněk
Ke každému výslednému zředění virové kultury byly přidány lidské B-buňky zánětu mandlí na výslednou koncentraci 106/nil a vzorky byly inkubovány po dobu 90 minut a jemně protřepávány, aby se docílilo virové infekce. Buňky pak byly odděleny centrifugací, resuspendovány na koncentraci 5 x 10^/nil a alikvótní podíly o objemu 0,2 ml, tj. 10^ buněk, byly kultivovány plotnově/ve vpichu na ploché tkáňové kultivovací plotně pro 96 vpichů. Byly očkovány vždy 3 vpichý pro každé podmínky. Po 5 dnech inkubace byl do každého vpichu přidán při 37 °C 1 zuCi thymidinu a po 6 hodinách inkubace byly vpichy odseparovány ' 3 a byl určován počet inkorporovaného H thymidinu na počítači Beta.
Výsledky testu:
GS 276472 Β 6
Vzorek Cpm (h O
EBV při 4 °C 64528 - 9702 (100)
EBV sušený ve
zmrazeném stavu 5641 í 560 9
EBV + 1 % trehalózy 11860 Ϊ 1466 18
EBV + 10 % trehalózy 37757 í 5663 58,5
EBV + 20 % trehalózy 41793
Následnou elektronovou mikroskopií negativně barveného preparátu se ukázalo, že v pří tomnosti 10 % trehalózy byla zachována ultrastruktura vysušeného viru EBV, zatímco bez pří temnosti trehalózy byla jeho ultrastruktura zcela rozrušena.
Příklad 2
Bakteriofág E. coli (lambda) GT10
Podstata:
Bakteriofág lambda má schopnost infikovat E. coli a vstupovat do ní buď lytickou nebo lysogenní drahou. Při vstupu lityckou drahou fág proniká do hostitele, popřípadě ho rozklá dá za současného uvolnění fágu. Při vstupu lysogenní drahou dochází místo replikace a lýze bakteriálního hostitele ke vstupu fágové ONA do genomu hostitele a k její replikaci podle něj. Gen, který odpovídá za kontrolovaný vstup do lytické nebo lysogenní dráhy, se označuje jako represorový gen fágu, to jest Cl.
Fág lambda, nesoucí insert, se zaočkuje na agarovou plotnu. Bakteriální kmen vykazuje jasné oblasti - ohraničené skvrny, což jsou místa, kde dochází k lýzi bakteriálních buněk v důsledku replikace fágu a množení buněk.
Pokus 1
Z agarové plotny byla odseparována jedna ohraničená skvrna a byla uchovávána v 1 ml SM pufru, obsahujícího 5,8 gm NaCl, 2 gm MgSO^./HzO, 5 ml 1M Tris/HCl pH 7,5 a 5 ml 2% želatiny v 1 litru při 4 °C.
Z tohoto zásobního roztoku bylo pomocí SM pufru získáno zředění 1 : 1 000. Byly Odebrány alikvótní podíly objemu 1 1 nebo 10 1 a umístěny do polypropylenové Eppendorfovy trubice, obsahující stejný objem 20% trehalózy v destilované vodě. Vzorky byly sušeny při teplotě místnosti. Menší objemy byly sušeny v sušáku s laminárním prouděním přes noc a větší objemy byly sušeny v sušičce připojené na sací vzduchový proud. Vzorky byly ponechány 24 až 40 hodin.ve vysušeném stavu. Při pokusech, sledujících tvorbu ohraničených skvrn, byla ke každému vysušenému vzorku fágu přidána suspenze E. coli - asi 8 x 10 bakterií z filtru NM 514 v 0,01 M MgSO^ a vzorky byly inkubovány 30 minut při 37 °C. Po inkubaci bylo ke každému vzorku bakteriofágu lambda, kultivovanému na již dříve připravených plotnách L-agaru, přidáno při 42 °C 10 ml agaru obsahujícího 1 % bactotryptonu,
0,5 % bakteriálního extraktu z kvasnic, 0,5 % NaCl, 0,25 % MgSO^ a 1 % Bacto-agaru. Vzorky byly umístěny do chladu a pak inkubovány v obrácené poloze při 37 °C po dobu 16 hodin. Poté byl určen počet ohraničených skvrn.
CS 276472 B 6 4
Způsob skladování fágu Zředění zásobního roztoku Počet skvrn/plotna
při 4 °C v SM pufru 1 1 yul zředění : 1 000 47
výsoušení v SM pufru 1 : 1 000 0
vysoušení v 10% trehalóze 1 : 1 000 19 (40% účinnost kontroly tvorby skvrn)
Pokus 2
Dlouhodobé uchovávání
Předchozí experimenty objasnily, jakým způsobem lze vysoušet bakteriofág lambda, nesoucí insert, v trehalóze při zachování jaho funkcí po rehydrataci. Bakteriofágy byly při tomto experimentu po vysušení rehydratovány po dobu 24 až 48 hodin. Ukázalo se, že jsou po rehydrataci schopny adsorpce a penetrace do hostitelské bakterie E. coli a dále schopny replikace, zrání a nakonec rozpouštění hostitele za uvolnění nových bakteriofágů.
V následujících pokusech byla zkoumána schopnost trehalózy uchovávat bakteriofág lambda, tak aby mohl být rehydratován a byl stále funkční i po delší době v nepříznivých podmínkách. Ze zásobního roztoku bakteriofágu lambda bylo odebráno 10 % alikvótního podílu a bylo umístěno do Eppendorfovy trubice, obsahující stejný objem 20 % trehalózy nebo Luria Broth. Použitý zásobní roztok bakteriofágu lambda byl připraven umístěním jedné oddělené skvrny z kultury na agarové plotně do 1 ml SM pufru. Vzorky byly sušeny v sušičce, připojené na sací proud vzduchu po dobu alespoň 16 hodin. Na vrchní část sušičky byly našroubovány Eppendorfovy trubice obsahující vzorky, které byly uchovávány za různých podmínek. Vzorky byly umístěny na polici při normální teplotě místnosti, jejíž hodnota závisela na denní době a ročním období. Vzorky byly uchovávány ve tmě nebo na přímém slunečním světle. Byly umístěny do 4 °C. Po 10 měsících byly rehydratovány ve 100 yul suspenze E. coli - přibližně 8 x 107 v 0,01 M MgSO^ a následně inkubovány za stálého míchání při 37 °C po dobu 30 minut. Po inkubaci byly přidány 4 ml λ top agaru při 42 °C ke každému vzorku. Vzorky byly kultivovány na již dříve připravených agarových plotnách. Plotny byly umístěny do chladu a pak inkubovány při 37 °C po dobu asi 16 hodin. Byl určen počet ohraničených skvrn.
Roztoky, v nichž byl vysoušen fág počet skvrn/plotna
10% glukóza 0
5M·pufr 0
Luria Broth 0
10% trehalóza 118
x 6
Číslo udává hodnotu 12 x 10 skvrn, které jsou jednotkou pro 1 ml zásobního roztoku. Thimidin je srovnáván s 47 x 10^ pfu, hodnotou získanou v pokusu, prováděném před 10 měsíci z téhož zásobního roztoku a s 19 x 10é pfu ve vzorcích, rehydratovaných bezprostředně po vysušení v trehalózovém pufru.
CS 276472 Β 6
Příklad 3
Virus dětské obrny typ 3 /Ul virového zásobního roztoku a 50 yul 20% trehalozy bylo sušeno při 37 °C a uchováváno při téže teplotě 24 hodin nebo 7 dní před rehydratací. Výsledky zkoušky byly porovnávány s viry vysoušenými bez přítomnosti trehalozy a s nevysušenými viry.
Výsledky jsou udávány jako dekadický logaritmus počtu kapek v cytopatickém titru.
Vzorek 24 h 7 dní
s trehalózou 3,4 3,7
bez trehalozy 5,9 6,0
nevysušený 0,5 0,8
Trehalóza vykazovala znatelný ochranný účinek, zvláště při uchovávání pri '37 °C.
Příklad 4
Chřipkový virus kmen X79 (A/Phil/2/82 x PR/8 H3N2) ER 340 yul viru a 50 /Ul 20% trehalozy bylo vysoušeno při teplotě místnosti a uchováváno při téže teplotě 48 hodin. Viry pak byly oživovány Dulbeccovým tkáňovým kultivačním médiem MEM.
Vzorky o objemu 10 yul byly přeneseny do buněk MDCK (FB24) a inkubovány po dobu 24 hodin. Byl vyhodnocován hemaglutínačni titr.
Vzorek titr
s trehalózou 7,0
bez trehalozy 4,5
nevysušený 7,0
Trehalóza při této teplotě vzorek zcela ochránila. Jiný režim sušení a uchovávání virů dětské obrny a chřipky vykazoval bučí žádný nebo jen velmi malý ochranný účinek.
Příklad 5
Imunologické účinky viru střevního kataru norků vysoušeného v přítomnosti trehalozy
Pokusy byly prováděny ve spolupráci s oddělením UNITED VACCINES v HARLAN SPRAGUE DAWLEY INC., Madison Wisconsin 53711 USA.
United Vaccines BIOCOMP-DM je kombinovaná vakcina střevního kataru norků a Clostridium botulinum typu C s Pseudomonas aeruginosa jako bakteriálními toxiny. Jedinou významnou charakteristikou této vakciny je schopnost inaktivovaného viru střevního kataru norků - MEV viru - učinit norka imunním proti imunologickým testům s živými, virulentními viry střevního kataru. Tato součást kombinované vakciny je prodávána jako kapalná suspenze virionů, v nichž jsou další součásti vakciny v lyofilizované formě suspendovány bezprostředně před aplikováním injekce.
CS 276472 Β 6
Kapalný virus MEV byl lyofilizován v přítomnosti i bez přítomnosti 10% trehalózy a zaslán do UNITED VACCINES v Madison Wisconsin, kde byl preparát oživen běžným fyziologickým roztokem, přimíšeným k vysušeným komponentám.. Byla zkoumána schopnost vakcíny chrá nit imunizovaného norka proti nákaze živým virem střevního kataru.
Vzorek žívý/nakažený
s trehalózou 5/5
bez trehalózy 1/5
Schopnost imunizace byla v přítomnosti trehalózy zachována i u tohoto viru, který je velmi citlivý na vysušení.

Claims (2)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Způsob uchovávání živých virových kultur, vyznačující se tím, že vodný systém, obsahující virus, se suší v přítomnosti trehalózy ve zmrazeném stavu nebo při teplotě okolí, přičemž vodný systém obsahuje 1 až 20 % hmotnostních trehalózy.
  2. 2. Způsob podle bodu 1,vyznačující se tím, že vodný systém obsahuje 5 až 20 % hmotnostních trehalózy.
CS89402A 1988-01-21 1989-01-20 Method of vital viral cultures maintenance CS276472B6 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB888801338A GB8801338D0 (en) 1988-01-21 1988-01-21 Preservation of viruses

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS40289A3 CS40289A3 (en) 1992-01-15
CS276472B6 true CS276472B6 (en) 1992-06-17

Family

ID=10630314

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS89402A CS276472B6 (en) 1988-01-21 1989-01-20 Method of vital viral cultures maintenance

Country Status (10)

Country Link
US (1) US5149653A (cs)
EP (1) EP0357709B1 (cs)
JP (1) JPH0671423B2 (cs)
AR (1) AR240255A1 (cs)
CA (1) CA1333562C (cs)
CS (1) CS276472B6 (cs)
DE (1) DE68909542T2 (cs)
ES (1) ES2009704A6 (cs)
GB (1) GB8801338D0 (cs)
WO (1) WO1989006542A1 (cs)

Families Citing this family (104)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5759774A (en) * 1988-05-18 1998-06-02 Cobe Laboratories, Inc. Method of detecting circulating antibody types using dried or lyophilized cells
GB8903593D0 (en) 1989-02-16 1989-04-05 Pafra Ltd Storage of materials
USRE39497E1 (en) 1989-02-16 2007-02-27 Nektar Therapeutics Storage of materials
US6187572B1 (en) 1990-04-16 2001-02-13 Baxter International Inc. Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants
US5418130A (en) * 1990-04-16 1995-05-23 Cryopharm Corporation Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants
US5621094A (en) * 1990-05-14 1997-04-15 Quadrant Holdings Cambridge Limited Method of preserving agarose gel structure during dehydration by adding a non-reducing glycoside of a straight-chain sugar alcohol
US5200399A (en) * 1990-09-14 1993-04-06 Boyce Thompson Institute For Plant Research, Inc. Method of protecting biological materials from destructive reactions in the dry state
AU659645B2 (en) 1991-06-26 1995-05-25 Inhale Therapeutic Systems Storage of materials
GB9125695D0 (en) * 1991-12-03 1992-01-29 Mastavac Limited Medical preparations
US5422254A (en) * 1992-02-14 1995-06-06 Oy Alko Ab Method to increase the trehalose content of organisms by transforming them with the structural genes for the short and long chains of yeast trehalose synthase
US6582728B1 (en) 1992-07-08 2003-06-24 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Spray drying of macromolecules to produce inhaleable dry powders
US6509006B1 (en) 1992-07-08 2003-01-21 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Devices compositions and methods for the pulmonary delivery of aerosolized medicaments
BR9307141A (pt) 1992-09-29 1999-03-30 Inhale Therapeutic Syst Processo para a liberação sistência pulsátil de um fragmento ativo de hormônio de paratiróide (PTH) para um hospedeiro mamífero e para um paciente e composição farmacêutica
US6024090A (en) 1993-01-29 2000-02-15 Aradigm Corporation Method of treating a diabetic patient by aerosolized administration of insulin lispro
DK0686045T3 (da) * 1993-02-23 2001-03-05 Genentech Inc Stabilisering af med organisk opløsningsmiddel behandlede polypeptider med et hjælpestof
ATE264096T1 (de) 1994-03-07 2004-04-15 Nektar Therapeutics Verfahren und mittel zur verabreichung von insulin über die lunge
US5955448A (en) 1994-08-19 1999-09-21 Quadrant Holdings Cambridge Limited Method for stabilization of biological substances during drying and subsequent storage and compositions thereof
ATE235919T1 (de) * 1994-06-02 2003-04-15 Elan Drug Delivery Ltd Methode zum verhindern der aggregation von proteinen/peptiden bei rehydratation oder auftauen
US6586006B2 (en) 1994-08-04 2003-07-01 Elan Drug Delivery Limited Solid delivery systems for controlled release of molecules incorporated therein and methods of making same
US6290991B1 (en) 1994-12-02 2001-09-18 Quandrant Holdings Cambridge Limited Solid dose delivery vehicle and methods of making same
EP0782398A1 (en) 1994-09-22 1997-07-09 Quadrant Holdings Cambridge Limited Compositions for use in rehydration and nutrition during athletic exercise and methods of making same
US5556771A (en) * 1995-02-10 1996-09-17 Gen-Probe Incorporated Stabilized compositions of reverse transcriptase and RNA polymerase for nucleic acid amplification
US6309671B1 (en) 1995-04-14 2001-10-30 Inhale Therapeutic Systems Stable glassy state powder formulations
US6964771B1 (en) * 1995-06-07 2005-11-15 Elan Drug Delivery Limited Method for stably incorporating substances within dry, foamed glass matrices
ATE239451T1 (de) * 1995-06-07 2003-05-15 Elan Drug Delivery Ltd Verfahren zur stabilen einarbeitung von substanzen in trockene geschäumte glasmatrizen und auf diese weise hergestellte zusammensetzungen
US6685940B2 (en) 1995-07-27 2004-02-03 Genentech, Inc. Protein formulation
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US5958455A (en) * 1996-02-09 1999-09-28 Quadrant Holdings Cambridge Ltd Oral solid dosage forms, methods of making same and compositions thereof
US5762961A (en) * 1996-02-09 1998-06-09 Quadrant Holdings Cambridge Ltd. Rapidly soluble oral solid dosage forms, methods of making same, and compositions thereof
US6632648B1 (en) * 1996-05-14 2003-10-14 Elan Drug Delivery Limited Methods of terminal sterilization of fibrinogen
US6509146B1 (en) 1996-05-29 2003-01-21 Universal Preservation Technologies, Inc. Scalable long-term shelf preservation of sensitive biological solutions and suspensions
US5876992A (en) * 1996-07-03 1999-03-02 Molecular Biology Resources, Inc. Method and formulation for stabilization of enzymes
US6468782B1 (en) 1996-12-05 2002-10-22 Quadrant Healthcare (Uk) Limited Methods of preserving prokaryotic cells and compositions obtained thereby
DE69810755T2 (de) 1997-02-07 2003-08-07 Elan Drug Delivery Ltd Verfahren und zusammensetzungen zur herstellung getrockneter, lagerungsstabiler blutplättchen
EP0868916A3 (en) * 1997-03-04 2004-09-15 Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo Reduction inhibitory agent for active-oxygen eliminating activity
IL124275A (en) 1997-05-02 2002-03-10 Bio Merieux Vitek Inc A method to produce sequences of nucleic acids
US6558901B1 (en) 1997-05-02 2003-05-06 Biomerieux Vitek Nucleic acid assays
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6991790B1 (en) 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6565885B1 (en) 1997-09-29 2003-05-20 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Methods of spray drying pharmaceutical compositions
US20060165606A1 (en) 1997-09-29 2006-07-27 Nektar Therapeutics Pulmonary delivery particles comprising water insoluble or crystalline active agents
US7569342B2 (en) 1997-12-10 2009-08-04 Sierra Molecular Corp. Removal of molecular assay interferences
US6214054B1 (en) 1998-09-21 2001-04-10 Edwards Lifesciences Corporation Method for fixation of biological tissues having mitigated propensity for post-implantation calcification and thrombosis and bioprosthetic devices prepared thereby
US6225289B1 (en) 1998-12-10 2001-05-01 Genvec, Inc. Methods and compositions for preserving adenoviral vectors
ATE366797T1 (de) * 1999-05-04 2007-08-15 Anhydro Ltd Verfharen zur konservierung von viren und mycoplasma
GB9914412D0 (en) * 1999-06-22 1999-08-18 Worrall Eric E Method for the preservation of viruses,bacteria and biomolecules
US6770478B2 (en) 2000-02-10 2004-08-03 The Regents Of The University Of California Erythrocytic cells and method for preserving cells
AU2001234978A1 (en) 2000-02-10 2001-08-20 The Regents Of The University Of California Therapeutic platelets and methods
US8404217B2 (en) 2000-05-10 2013-03-26 Novartis Ag Formulation for pulmonary administration of antifungal agents, and associated methods of manufacture and use
MXPA02001323A (es) 2000-05-10 2004-07-16 Alliance Pharma Microgranulos con base fosfolipida para la liberacion de farmaco.
US7871598B1 (en) 2000-05-10 2011-01-18 Novartis Ag Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use
US6653062B1 (en) 2000-07-26 2003-11-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Preservation and storage medium for biological materials
US7101693B2 (en) * 2001-09-07 2006-09-05 Brigham Young University Plasticized hydrophilic glasses for improved stabilization of biological agents
US7368102B2 (en) 2001-12-19 2008-05-06 Nektar Therapeutics Pulmonary delivery of aminoglycosides
US6878168B2 (en) 2002-01-03 2005-04-12 Edwards Lifesciences Corporation Treatment of bioprosthetic tissues to mitigate post implantation calcification
GB0209680D0 (en) * 2002-04-27 2002-06-05 Univ Strathclyde Immobilisation and stabilisation of bacteriophage
US20040057969A1 (en) * 2002-09-20 2004-03-25 Smith Mark L Compositions containing stabilized hepatitis antigen and methods of their use
GB0225520D0 (en) * 2002-11-01 2002-12-11 Glaxosmithkline Biolog Sa Drying process
WO2004039417A2 (en) * 2002-11-01 2004-05-13 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Drying process
US6927062B2 (en) * 2002-11-25 2005-08-09 Agdia, Inc. Controls and standards for assays and method for manufacture thereof
US20050095320A1 (en) * 2003-10-29 2005-05-05 Richard Botteri [An Isotonic Sports Drink for Female Athletes Fortified with Iron, Calcium and Essential Vitamins for Use in Rehydration and Nutrition During Execise and Competition]
US20050100636A1 (en) * 2003-11-10 2005-05-12 Megan Botteri [A Low-Calorie Sports Drink For Physically Active Women That is Fortified with Iron, Calcium and Essential Vitamins for Use in Rehydration and Replacing Electrolytes Lost During Periods of Physical Activity]
RU2418633C2 (ru) 2004-04-08 2011-05-20 Байоматрика, Инк. Объединение процессов хранения образцов и управление образцами в медико-биологических науках
US20060147520A1 (en) * 2004-07-26 2006-07-06 Curtis Ruegg Treatment of pulmonary hypertension by inhaled iloprost with a microparticle formulation
DE102005003457B4 (de) 2004-07-30 2009-12-03 IfP Privates Institut für Produktqualität GmbH Verfahren und Teilesatz zur mikrobiologischen Bestimmung von Vitamen
US8080645B2 (en) 2007-10-01 2011-12-20 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection/transport compositions and methods
US8097419B2 (en) 2006-09-12 2012-01-17 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009
US8652782B2 (en) 2006-09-12 2014-02-18 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids
US9598462B2 (en) 2012-01-26 2017-03-21 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
US9481912B2 (en) 2006-09-12 2016-11-01 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
CN101626682B (zh) 2006-10-27 2014-04-16 爱德华兹生命科学公司 用于外科植入的生物组织
US20090081639A1 (en) * 2007-05-31 2009-03-26 Phil Hill Assay for sensitivity to chemotherapeutic agents
US9101691B2 (en) 2007-06-11 2015-08-11 Edwards Lifesciences Corporation Methods for pre-stressing and capping bioprosthetic tissue
US9683256B2 (en) 2007-10-01 2017-06-20 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system
US11041215B2 (en) 2007-08-24 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences
US8821885B2 (en) 2007-08-27 2014-09-02 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Immunogenic compositions and methods
US10004799B2 (en) 2007-08-27 2018-06-26 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
WO2009046138A1 (en) * 2007-10-01 2009-04-09 Omnilytics, Inc. Methods for drying bacteriophage and bacteriophage-containing compositions, the resulting dry compositions, and methods of use
US11041216B2 (en) 2007-10-01 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples
WO2009085355A2 (en) 2007-10-01 2009-07-09 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection and transport system and methods of use
US8357387B2 (en) 2007-12-21 2013-01-22 Edwards Lifesciences Corporation Capping bioprosthetic tissue to reduce calcification
PL213166B1 (pl) * 2008-10-29 2013-01-31 Inst Immunologii I Terapii Doswiadczalnej Polskiej Akademii Nauk Sposób otrzymywania farmakologicznej stabilnej formy zliofilizowanych aktywnych preparatów oczyszczonych bakteriofagów
US8519125B2 (en) 2009-05-11 2013-08-27 Biomatrica, Inc. Compositions and methods for biological sample storage
JP5548436B2 (ja) * 2009-12-17 2014-07-16 株式会社林原 血液寒天培地及びその保存方法
WO2011119754A2 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Edwards Lifesciences Corporation Methods of conditioning sheet bioprosthetic tissue
FR2960781B1 (fr) 2010-06-07 2013-11-22 Sanofi Pasteur Preparation d'un vaccin oral sec stabilise, compose d'un virus vivant attenue
US8906601B2 (en) 2010-06-17 2014-12-09 Edwardss Lifesciences Corporation Methods for stabilizing a bioprosthetic tissue by chemical modification of antigenic carbohydrates
WO2012018638A2 (en) 2010-07-26 2012-02-09 Biomatrica, Inc. Compositions for stabilizing dna, rna and proteins in blood and other biological samples during shipping and storage at ambient temperatures
US9845489B2 (en) 2010-07-26 2017-12-19 Biomatrica, Inc. Compositions for stabilizing DNA, RNA and proteins in saliva and other biological samples during shipping and storage at ambient temperatures
BR112013005049A2 (pt) 2010-09-02 2016-05-31 Sanofi Pasteur estabilizador para a preparação de uma composição vacina da pólio seca injetável
US9351829B2 (en) 2010-11-17 2016-05-31 Edwards Lifesciences Corporation Double cross-linkage process to enhance post-implantation bioprosthetic tissue durability
CA2836299A1 (en) 2011-04-15 2012-10-18 Genelux Corporation Clonal strains of attenuated vaccinia viruses and methods of use thereof
TWI690322B (zh) 2012-10-02 2020-04-11 法商傳斯堅公司 含病毒的調配物及其使用
WO2014055960A1 (en) 2012-10-05 2014-04-10 Genelux Corporation Energy absorbing-based diagnostic and therapeutic methods employing nucleic acid molecules encoding chromophore-producing enzymes
US10238771B2 (en) 2012-11-08 2019-03-26 Edwards Lifesciences Corporation Methods for treating bioprosthetic tissue using a nucleophile/electrophile in a catalytic system
EP2934572A4 (en) 2012-12-20 2016-11-23 Biomatrica Inc FORMULATIONS AND METHODS FOR STABILIZING PCR REAGENTS
TW201601776A (zh) 2013-10-03 2016-01-16 Nitto Denko Corp 流感疫苗乾燥製劑、及流感疫苗乾燥製劑之製造方法
WO2015103438A2 (en) 2014-01-02 2015-07-09 Genelux Corporation Oncolytic virus adjunct therapy with agents that increase virus infectivity
EP3154338B1 (en) 2014-06-10 2020-01-29 Biomatrica, INC. Stabilization of thrombocytes at ambient temperatures
US20180094280A1 (en) * 2015-03-20 2018-04-05 Bluebird Bio, Inc. Vector formulations
WO2016183292A1 (en) 2015-05-14 2016-11-17 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples
EP4242628A3 (en) 2015-12-08 2023-11-08 Biomatrica, INC. Reduction of erythrocyte sedimentation rate
CA3042689A1 (en) * 2016-11-04 2018-07-12 Baxalta Incorporated Adeno-associated virus formulations
US20240033347A1 (en) 2022-07-08 2024-02-01 Viromissile, Inc. Oncolytic vaccinia viruses and recombinant viruses and methods of use thereof

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4380582A (en) * 1965-07-09 1983-04-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Preparation of dry variola virus
DE1617457A1 (de) * 1966-12-16 1972-04-20 Erba Carlo Spa Verfahren zur Stabilisierung von Zubereitungen interferierender Virusprodukte
JPS6035263A (ja) * 1983-08-05 1985-02-23 Wako Pure Chem Ind Ltd 不溶性担体に固定化された免疫活性物質の安定化法及び該物質を構成単位として含む生理活性物質測定用試薬
GB8500698D0 (en) * 1985-01-11 1985-02-13 Unilever Plc Preparation of reagents
DE229810T1 (de) * 1985-07-09 1987-11-05 Quadrant Bioresources Ltd., Soulbury, Leighton Buzzard, Bedfordshire Beschuetzung von proteinen und aehnlichem.
DE3601922A1 (de) * 1986-01-23 1987-07-30 Behringwerke Ag Stabilisiertes virus-antigen, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung
GB8604983D0 (en) * 1986-02-28 1986-04-09 Biocompatibles Ltd Protein preservation
GB8715238D0 (en) * 1987-06-29 1987-08-05 Quadrant Bioresources Ltd Food process

Also Published As

Publication number Publication date
EP0357709B1 (en) 1993-09-29
CS40289A3 (en) 1992-01-15
ES2009704A6 (es) 1989-10-01
DE68909542D1 (de) 1993-11-04
CA1333562C (en) 1994-12-20
JPH0671423B2 (ja) 1994-09-14
AR240255A1 (es) 1990-03-30
EP0357709A1 (en) 1990-03-14
JPH02503266A (ja) 1990-10-11
US5149653A (en) 1992-09-22
WO1989006542A1 (en) 1989-07-27
GB8801338D0 (en) 1988-02-17
DE68909542T2 (de) 1994-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS276472B6 (en) Method of vital viral cultures maintenance
Glasgow et al. The role of interferon in vaccinia virus infection of mouse embryo tissue culture
US6048537A (en) Method for preparing an influenza virus, antigens obtained and applications thereof
US10632188B2 (en) Compositions containing ambient-temperature stable, inactivated but therapeutically active biopharmaceuticals and methods for formulation thereof
MX2007011032A (es) Estabilizador quimicamente definido.
WO2000023104A1 (fr) Vaccin lyophilise a virus vivant modifie d'hepatite a et son stabilisant
JP2002542815A (ja) ウイルスおよびマイコプラズマの保存方法
CN103656660B (zh) 一种动物活疫苗耐热冻干保护剂、其制备方法及应用
Siegert et al. The pyrogens of myxoviruses I. Induction of hyperthermia and its tolerance
Berge et al. Preservation of enteroviruses by freeze-drying
Shif et al. IN VITRO INTERACTION OF MOUSE HEPATITIS VIRUS AND MACROPHAGES FROM GENETICALLY RESISTANT MICE: II. Biological Characterization of a Variant Virus MHV (C3H) Isolated from Stocks of MHV (PRI)
Suzuki Effect of suspending media on freeze-drying and preservation of vaccinia virus
Hanafusa et al. Transformation phenomena in the pox group viruses. I
Latif et al. Effect of Stabilizers on Infectivity Titer of Freeze Dried Peste Des Petits Ruminants Virus Vaccine.
FI57534B (fi) Foerfarande foer foerbaettrandet av stabiliteten vid rumstemperatur hos ett oralt poliovirusvaccin av typen 1,2 eller 3
Bader et al. A Comparison of Cytopathology Caused by Myxoviruses: I. The Relation of the Infectious Process to Cytopathology
Grossberg et al. Inapparent Viral Infection of Cells In Vitro: II. An Interferon Produced in Chicken Embryonic Cell Cultures Inoculated with Japanese Encephalitis Virus
Smith et al. A cytopathogenic effect of influenza virus (PR-8 strain) for mouse fibroblastic (L) cells in vitro
Golden et al. Enhancement of the infectivity titer of adenovirus type 8
Jung et al. Lyophilization of Human Cytomegaloviruses
WO2023144152A1 (en) Particle comprising a virus
Schaffer et al. Growth of Venezuelan Encephalitis Virus and Disappearance of Coxsackie A, Rous Sarcoma, Herpes Simplex and Vaccinia Viruses Following Inoculation of Aedes Aegypti and Other Mosquitoes
RF Interferon specificity.
Gutekunst Characterization of a bovine viral diarrhea agent.
Beeler Human and Animal Viruses

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic